PT736012E

PT736012E - Di-hidropiridinas ciclizadas e sua utilizacao para a preparacao de composicoes farmaceuticas

Info

Publication number: PT736012E
Application number: PT95904470T
Authority: PT
Inventors: Otto Roos; Doetrich Arndts; Walter Loesel
Original assignee: Boehringer Ingelheim Pharma
Priority date: 1993-12-21
Filing date: 1994-12-14
Publication date: 2001-03-30
Also published as: WO1995017388A1; CO4340625A1; DE59409595D1; GR3035108T3; TW334425B; PL315052A1; EP0736012A1; US6180645B1; EP0736012B1; YU75394A; AU1314295A; ATE197706T1; SI0736012T1; DK0736012T3; ES2152379T3; AU688833B2; US5607943A; US5925650A; IL112102A0; US6465483B1

Description

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136012. ^^

"DI-HIDROPIRIDINAS CICLIZADAS E SUA UTILIZAÇÃO PARA A PREPARAÇÃO DE COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS "

DESCRIÇÃO A presente invenção refere-se a novos derivados de ácido di-hidropiridino-acético, processos para a sua preparação e medicamentos que contenham estes compostos.

Da patente EP-A 37 934 são conhecidas di-hidro--isoquinolinas. Os compostos ai referidos possuem um efeito cardiotónico, tendo também influência no aumento da contractabiliadde e na pressão arterial. São sugeridos como compostos para melhorar a circulação nos tecidos e na oxigenação desses tecidos. Estas possibilidades de utilização assentam nos efeitos vasculares destes compostos. Na EP-A 251 194 e EP-A 288 048 descreveu-se que as di-hidropiridinas ciclizadas carboxicíclicas e heterociclicas possuem um efeito cardioprotectivo, em particular um efeito de protecção do cérebro, constituindo compostos absolutamente novos como antagonistas do Ca. Na W0 92/11010 é descrita a utilização destes compostos como agentes de protecção do cérebro, no tratamento de processos inflamatórios crónicos e na inibição da hipotensão, em particular na agregação da plaquetas sanguíneas. O objectivo da presente invenção são novos compostos di--hidropiridina ciclizados carbocíclicos e heterocíclicos e a. utilização farmacêutica destes compostos. Os novos compostos possuem muito boas características de utilização terapêutica. Eles são utilizados como agentes cardioprotectivos, agente protectores do cérebro (em especial no tratamento de pacientes que sofreram acidente vascular cerebral ou que 1 t,

estão sob o risco de sofrer um acidente vascular cerebral), como agente de tratamento de processos inflamatórios crónicos (por exemplo bronquite asmática, artrite). Para além disso, estes compostos podem ser utilizados como agentes com efeito antiproliferativo no tratamento de colites ulcerosas e de Morbus Chron.

A presente invenção refere-se a compostos de fórmula geral I

O (I) onde, A significa um grupo benzénico, indolo ou tieno; em que se A é benzénico, m significa 2 ou 3, (de preferência 2) , em que ambos os grupos R1 estão nas posições 6 e 7 e os substituíntes são independentes entre si, e são hidróxilo, (C1-C4) -alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), (Ci-C4)-alquilo, metanosulfonilóxilo ou metanosulfonamido, ou dois grupos substituíntes vizinhos R1 podem significar em conjunto -0-CH2-0- ou -0-CH2-CH2-0-; e quando A significa indolo ou tieno, m significa zero; R1 significa tienilo ou o grupo

onde , R', RG e R‘J são independentes entre si e podem significar metilo, etilo, propilo, fenilo ou benzilo, em que nunca mais

I 1 p L-i ^ que 2 dos substituíntes podem ser simultaneamente fenilo ou benzilo; R3 e R4 são independentes entre si e possuem um dos seguintes significados (a) Hidrogénio, (b) Alquenilos com 3 a 6 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, (c) Alquinilos com 3 a 6 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, (d) Alquilos com 1-12 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, onde o grupo alquilo pode ser substituído com

Hidróxilo, (Ci-C4) -alcóxilo, (Di (Ci-C4) -alquilamino,

Furilo,

Piridilo,

Pirrolidinilo, N-metilpirrolidinilo,

Morfolino,

Indolilo,

Nitrilo,

Tienilo,

Adamantilo,

Ciclo-hexilo,

Fenóxilo,

Naftilóxilo ou fenilo, (onde este fenilo ou o fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, CN, (C3--C4) -alquilo, adamantilo, -S02-NH2, -NHCOCH3, -NHS02CH3 ou CH3S020- ou através da ponte -0-CH2-0-) ; ou através de dois grupos fenilo não substituídos; 3

ou R3 significa hidrogénio e R4 significa ciclo-hexilo, fenilo (onde este fenilo pode. ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, (C1-C4)- -alquilo, adamantilo, -S02-NH2, -NHCOCH3, -NHS02CH3 ou CH3SO2O- ou através da ponte -0-CH2-0-) , piridilo ou N-benzilpiperidilo; ou RJ e R4 em conjunto com um átomo de azoto, estão ligados entre si sendo,

Pirrolidinilo,

Piperidinilo,

Morfolinilo, tiomorfolinilo ou significam piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode eventualmente estar substituído em N- por metilo, fenilo não substituído, mono- ou di(C1-C4)-alcóxifenilo, fenilo cianosubstituído, pirimidinilo, fenilo(Ci--C4) alquilo, (C1-C4) alquilfenilo ou

OCH3 ou seus sais obtidos de ácidos fisiologicamente compatíveis ou por formação de complexos.

Os compostos de fórmula I formam tautómeros de fórmula II.

O 4

ΐ

Os tautómeros são separáveis por métodos conhecidos, por exemplo através de cromatografia em coluna ou por redução selectiva (NaBFL,, em particular redução catalítica) .

Os compostos de fórmula II podem-se encontrar na forma cis e/ou na forma trans:

Se uma estrutura de um composto não for ilustrada, deve ser entendida a descrição da fórmula I, que também engloba a estrutura II.

Nas definições utilizadas no texto os fragmentos e grupos podem ser ambos iguais ou diferentes, isto é, quando um substituínte, daqueles acima referidos, surgir numa determinada molécula mais que uma vez, os significados podem ser livremente escolhidos no âmbito da definição alargada.

Com alquilo, entende-se em especial Ci-C6-alquilo e radicais Ci-C^-alquilo, que por seu lado podem ser substituídos ou constituem radicais alquilo de uma cadeia de um grupo funcional - como alcóxilo ou alquiltio. Os radicais alquilo compreendem grupos metilo, etilo, n-propilo, iso--propilo, n-butilo, sec-butilo, iso-butilo, tert-butilo bem como os diferentes isómeros de radicais pentilo e hexilo, como isopentilo, neopentilo, n-pentilo e o radical hexilo.

As definições acima são válidas também se o radical 3 r Lcí ^—ç. alquilo por seu lado for substituído e/ou for parte integrante de um alcóxi-alquilo, alcóxicarbonilo, alcóxilo, alquiltio, alquilsulfonilo, mono-alquilamino, alquilmetilo, alquiltiometilo, di-alquilamino ou o se radical alquilo estiver ligado como substituínte a um heterocíclo aromático ou a um sistema carbocíclico.

Halogénios são fluor, cloro, bromo e iodo, de preferência fluor, cloro e bromo e em segundo lugar iodo. (C3-C6)-Ciclo-alquilo são ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano e ciclo-hexano. (C5-C6)-Ciclo-alqueno são, por exemplo, ciclopenteno, ciclo-hexeno e ciclo-hexadieno. (C3-C6)-Alquino são os isómeros hexino, pentino, butino e propino, de preferência propargilo. (C3-C6)-Alqueno são os isómeros hexeno, penteno, buteno e propeno, de preferência alilo.

Um aspecto preferencial da presente invenção são os compostos de fórmula geral I onde A significa um grupo benzénico ou tieno; em que se A é benzénico, m significa 2; em que ambos os grupos R2 que estão nas posições 6 e 7 são independentes entre si, podendo significar hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), (Ci-C4) -alquilo, metanosulfonilóxilo ou metanosulfonamido, ou os dois grupos substituíntes vizinhos R2 podem significar em conjunto -0-CH2-0- ou -0-CH2-CH2-0-; e quando A significa tieno, m significa zero; R1 significa tienilo ou o grupo 6 Γ L~l, ^

R —C-R8 ,9 onde , R7, R8 e R9 são independentes entre si e podem significar metilo, etilo, propilo, fenilo ou benzilo, em que nunca mais que 2 dos substituintes podem ser simultaneamente fenilo ou benzilo; R3 e R4 são independentes entre si (a) Hidrogénio, (b) Alquenilos com 3 a 6 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, (c) Alquinilos com 3 a 6 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, (d) Alquilos com 1-12 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, onde o grupo alquilo pode ser substituído com

Hidróxilo, (C1-C4) -alcóxilo, (Di (C1-C4) -alquilamino,

Furilo,

Piridilo,

Pirrolidinilo, N-metilpirrolidinilo,

Morfolino,

Indolilo,

Nitrilo,

Tienilo,

Adamantilo,

Ciclo-hexilo,

Fenóxilo,

Naftilóxilo ou fenilo, (onde este fenilo ou o fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído atrav'es 7 Γ de uma ponte -0-CH2-0-, ou uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, (C1-C4)-alquilo, adamantilo, -S02NH2, -NHCOCH3; ou R3 significa hidrogénio e R4 significa ciclo-hexilo, fenilo, fluorofenilo, piridilo ou N-benzilpiperidilo; ou RJ e R4 em conjunto com um átomo de azoto, estão ligados entre si sendo,

Pirrolidinilo,

Piperidinilo,

Morfolinilo, tiomorfolinilo ou significam piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode eventualmente estar substituído em N- por metilo, fenilo não substituído, mono- ou di(C1-C4)-alcóxifenilo, pirimidinilo, fenilo(C1-C4)alquilo, ou

OCH3

De preferência A significa um sistema de aneis

onde Rz possui os significados acima definidos. 8

V

I—

Um outro aspecto preferido da presente invenção são compostos I, onde A é indolo e os restantes substituintes de acordo com o acima referido, de preferência NR3R4 significa ou morfolinilo ou em NR3R4 R3 é hidrogénio e R4 alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, que pode ser substituído como se refere acima.

Para os compostos de fórmula I, onde A é benzénico, são preferidos aqueles compostos em que m é 2 e ambos os grupos R2 são independentes entre si, e são metóxilo, hidróxilo, benzilóxilo, metilo ou cloro, ou em conjunto formam -0-CH2-0-desde que ambos os R2 se encontrem nas posições 6 e 7, em especial aqueles compostos onde R2 significa metóxilo, hidróxilo, benzilóxilo ou metilo, em especial aqueles compostos em que ambos os R2 sao iguais e significam hidróxilo ou metóxilo.

Para os compostos I, são preferidos aqueles em que R1 significa tert-butilo.

Para os compostos I, são para além disso preferidos aqueles em que NRJR4 possuem um dos seguintes significados a) em NR3R4 , R3 é hidrogénio e R4 é Ci-C-j-alquilo; b) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 um alquinilo ramificado ou não ramificado com 3 a 6 (de preferência 3) átomos de carbono; c) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 um alquilo ramificado ou não ramificado com 1-4 (de preferência de 1 a 3, em especial 2) átomos de carbono, em que o alquilo é substituído por

Metóxilo,

Dimetilamino,

Pirrolidinilo, N-metilo-pirrolidinilo, Morfolino,

Tienilo, 9

Adamantilo,

Piridilo, N-benzilpiperidilo,

Ciclo-hexilo,

Fenóxilo,

Naftilóxilo ou 1 ou 2 grupos fenilo, onde este grupo fenilo (quando existir apenas um grupo fenilo), ou o grupo fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por metóxilo, etóxilo, benzilóxilo, halogénio (em especial Cl, I), CF.-,, N3/ metilo, tert-butilo, -SO2NH2 ou através da ponte -O-CH2-O-; ou R3 significa hidrogénio e R4 ciclo-hexilo, fenilo, fluorofenilo, piridilo ou N-benzilpiperidilo d) em NR3R4, R3 e R4 são independentes entre si e significam metilo, etilo, (CH2)i-4 fenilo (onde o grupo fenilo pode ser substituído como o grupo fenilo descrito em c), de preferência

OCH3 e) R3 e R4 em conjunto com um átomo de azoto, que está ligado aos dois grupos, significam Piperidinilo,

Morfolinilo, tiomorfolinilo, ou

Piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode estar substituído no N- por metilo ou benzilo; 10 em especial aqueles compostos em que NR3R4 possuem um dos seguintes significados a) em NR3R4 , R3 é hidrogénio e R4 é C2-C6-alquilo; b) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 é CH2CCH; c) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 um alquilo ramificado ou não ramificado com 2-4 átomos de carbono, em que o alquilo é substituído por

Metóxilo,

Dimetilamino, N-metilo-pirrolidinilo,

Tienilo,

Adamantilo,

Fenóxilo,

Naftilóxilo ou 1 ou 2 grupos fenilo, onde este grupo fenilo (quando existir apenas um grupo fenilo), ou o grupo fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por metóxilo, etóxilo, N3, metilo, tert--butilo ou -S02NH2; d) em NR3R4, R3 e R4 são independentes entre si e significam metilo, etilo, (CH2)i_4 fenilo (onde o grupo fenilo pode ser substituído por F) ou em especial

e) R3 e R4 em conjunto com um átomo de azoto, que está ligado aos dois grupos, significam

Piperazinilo, substituído no N- por metilo ou benzilo. 11

Especialmente preferidos são os compostos I, onde NR3R4 possuem um dos seguintes significados: a) em NR3R4 , R3 é hidrogénio e R4 significa etilo, tert--butilo ou (CH2)icuí -C(CH3)3; b) NR3R4 é NHCH2CCH; c) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 significa etilo, propilo, ou metilpropilo, que é substituído por fenilo que pode ser substituído uma, duas ou três vezes por metilo ou metóxilo ou uma vez só por tert-butilo; d) em em NRJR4, R3 e R4 são iguais e significam

e) NRJR4, significa / \ —N N—CII2

em especial aqueles compostos, em que R3 significa hidrogénio ou (C:-C4) alquilo-fenilo e R4 (Ci-C4) alquilo-fenilo, em que estes grupos contêm de preferência Ci.-alquilo e o fenilo é monosubstituído através de halogénio (de preferência Cl ou F) , CF3, metóxilo ou etóxilo, sendo estas substituições de preferência na posição 0-.

Os compostos de fórmula I, podem ser preparados de uma forma conhecida, de preferência de acordo com os métodos descritos nas patentes alemãs P 37 18 570.5, EP 358 957, EP 37 934, EP 251 794 e EP 288 048. 12

Na presença de um agente de condensação pode-se ciclizar ao composto correspondente, uma diamida do ácido malónico de fórmula geral IV (R2)

H C—CH2—NHCO—C—CO—NR3R4

H na qual R1, R2, R3, R4 e m são definidos de acordo com o descrito anteriormente e Ar significa fenilo, indolilo ou 2-ou 3-tienilo.

Como agentes de condensação para este processo são adequados ácidos fortes de Lewis, como por exemplo cloreto de fosforóxilo, pentacloreto de fósforo, tricloreto de fósforo, pentóxido de fósforo, tetracloreto de titânio, trifluoreto de boro, tetracloreto de estanho, mas também ácidos inorgânicos como por exemplo, ácido polifosfórico, ácido sulfúrico, ácido fluorosulfónico e ácido fluoridrico ou uma mistura de agentes de condensação como por exemplo uma mistura de cloreto de fosforóxilo e pentacloreto de fósforo, ou uma mistura de pentóxido de fósforo e ácido (C3.-C4)-alquilsulfónico, por exemplo com uma parte de P205 de cerca de 10 percento em peso. A ciclização pode decorrer na presença ou ausência de um solvente. São adequados todos os solventes inertes, desde que possuam poder de solubilidade suficiente para os componentes da reacção, tendo também um elevado ponto de ebulição, por exemplo, benzeno, alquilbenzeno (por exemplo tolueno, xileno), clorobenzeno, clorofórmio, acetonitrilo, decalina. Uma variante preferida do processo consiste em 13

utilizar, como agente de condensação, cloreto de fosforóxilo em mistura com acetonitrilo ou uma mistura de ácido (C1.-C4)--alquilsulfónico/pentóxido de fósforo, sem adição de solvente. A ciclização decorre preferencialmente com cloreto de fosforóxilo/acetonitrilo ou em casos mais difíceis com uma mistura de pentóxido de fósforo e ácido (C1-C4)--alquilsulfónico (de preferência ácido metanosulfónico). A reacção pode ser executada numa larga gama de temperaturas, de preferência sob aquecimento a 50°C até à temperatura de ebulição da mistura reaccional. A reacção, dependendo dos materiais de partida IV, dura entre 2 a 15 horas. O ácido 3-tiofenomalónico necessário para esta preparação está comercialmente disponível. O ácido 2--tiofenomalónico pode ser preparado de acordo com processos conhecidos (por exemplo a partir de ácido 2-tiofeno-acético, através do método de carbonato ou a partir de 2-bromotiofeno e éster dietílico do ácido malónico.

Os compostos de fórmula I são bases e podem ser transformados em aductos fisiologicamente compatíveis (sais) por métodos conhecidos com ácido inorgânicos ou orgânicos, bem como com formadores de sais ou complexos.

Para a formação de sais, são adequados os ácidos como por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido fluorídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico, ácido acético, ácido propiónico, ácido butírico, ácido capróico, ácido valérico, ácido oxálico, ácido malónico, ácido succinico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido 14 r cítrico, ácido málico, ácido benzóico, ácido p--hidróxibenzóico, ácido ftálico, ácido cinâmico, ácido salicílico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico e similares.

Os compostos podem ser administrados de forma oral, parentérica ou tópica. A dose terapêutica desejada, é dependente das indicações e da forma de administração, podendo ser determinada experimentalmente. Formas administração adequadas são, por exemplo, comprimidos, cápsulas, supositórios, soluções, sumos, emulsões, aerosois, ou pós dispersíveis. Os comprimidos podem conter por exemplo uma mistura dos compostos activos, com agentes adjuvantes conhecidos, por exemplo agentes de diluição inertes, como carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, ou lactose, agente de asperção como amido de milho ou ácido algínico, agente de ligação, como amido ou gelatina, lubrificante como estearato de magnésio ou talco, e/ou agentes para se obter o efeito de depósito, como carbóxipolimetileno, carbóximetilcelulose, acetato-ftalato de celulose ou acetato polivinílico. Os comprimidos podem possuir mais que uma camada.

As drageias podem ser preparadas por revestimento de núcleos análogo ao dos comprimidos com agentes utilizados habitualmente nos revestimentos das drageias, por exemplo "Kollidon" ou goma-laca, goma arábica, talco, dióxido de titânio, ou açúcar. Para se obter um efeito de depósito ou para se evitarem incompatibilidades, os núcleos podem também ser constituídos por mais que uma camada. Da mesma forma, os revestimentos das drageias, de forma a ser obtido o efeito de depósito, podem também ser constituídos por mais que uma camada, onde poderão ser utilizados os agentes adjduvantes referidos acima para os comprimidos.

Sumos com os compostos activos de acordo com a 15 Γ

t presente invenção, em particular, combinações de compostos activos, podem conter adicionalmente agentes adoçantes como sacarina, ciclamato, glicerina ou açúcar bem como agentes melhoradores do paladar, por exemplo, agentes aromatizantes, como vanilina, ou extracto de laranja. Os sumos podem conter, para além disso, agentes adjuvantes suspendidos ou agentes de consistência como carboximetilcelulose de sódio, agentes reticulares, por exemplo produtos de condensação de álcoois de ácidos gordos com óxido de etileno, ou agentes de protecção como p-hidróxibenzoato.

As soluções injectáveis são preparadas da forma habitual, por exemplo através da adição de agentes conservantes, como p-hidróxibenzoatos ou estabilizadores, como sais alcalinos do ácido etilenodiaminotetra-acético, sendo depois utilizados para encher recipientes para injecção ou ampolas.

As cápsulas contendo um ou mais compostos activos, em particular, combinação de compostos activos, podem ser preparadas por exemplo, introduzindo em cápsulas de gelatina o composto activo, após mistura com um agente veicular inerte, como lactose ou sorbitol.

Os supositórios adequados são preparados por exemplo através da mistura com os matérias veiculares acima referidos, como matéria gorda neutra ou polietilenoglicol, em particular, os seus derivados.

Os compostos podem ser administrados quer por via enteral bem como por via parentérica. Como dose para administração oral, sugere-se 0,1 a 500 mg de composto activo por dose, para administração intra-venosa de 0,05 a 150 mg por dose. A dose terapêutica desejada é dependente da 16

V indicada e da forma de administração, podendo ser determinada experimentalmente.

Os medicamentos são adequados para administração oral ou parenteral, eventualmente também para administração tópica. Como formas do medicamento, são utilizáveis comprimidos, drageias, ampolas e preparações de sumos. A dose unitária para estas formas de medicamento é de 1,0 e 200 mg, de preferência de 20 a 50 mg por 75 kg de peso de corpo. Dependendo da gravidade do caso, são em geral administráveis diariamente 1 a 3 doses unitárias.

Os seguintes exemplos esclarecem melhor a presente invenção.

Exemplo 1 1. Éster mono-etílico do ácido tert-butilmalónico

Numa mistura de 21,6 g de éster dietílico de ácido tert--butilmalónico, 50 mL de etanol e 50 mL de água, é adicionada sob agitação, gota-a-gota à temperatura ambiente durante 30 minutos, uma solução de 7,6 g KOH (85%) em 50 mL de água. Após 15 horas o etanol é removido sob vácuo. Ao resíduo depois de arrefecido são adicionados 300 mL de CH2C12. Acidificou-se com uma solução de 13,6 g de KHS04 em 100 mL H20 sob arrefecimento de gelo, sendo a fase aquosa extraída várias vezes com CH2CI2. As fases orgânicas reunidas são lavadas com água, secas sobre Na2S04, sendo posteriormente concentradas num banho de água a 30°C sob pressão reduzida. Resultam 15,35 g (=81,7% do valor teórico) de éster mono--etílico (óleo amarelo claro). 17

V

t 2. N- [2- (3,4-Dimetóxifenilo)-etilo]-amida do éster mono- -etílico do ácido tert-butilmalónico Numa solução de 15,35 de éster mono-etílico do ácido tert— -butilmalónico em 2 00 mL de CH2CI2 anidro são adicionados em porções pequenas e agitados 15,88 g de N,N'-carbonildi--imidazolo. Após 30 minutos, são adcionados 14,8 g de 2-(3,4--dimetóxifenilo)-etilamina. Após mais 15 horas o solvente é removido sob vácuo. 0 resíduo é retomado em 200 mL de água, acidificado com 2N de HC1 e extraído com acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com água e depois de seca sobre Na2S04, concentrada. O resíduo é misturado com éter de petróleo (40°-60°C) e recristalisado.

Rendimento: 24,7 g (86,2% do valor teórico); ponto de fusão 68-70°C. 3. Mono-N-[2-(3,4-dimetôxifenilo)-etilo]-amida do ácido tert-butilmalónico 42 g da ésteramida (acima indicada) e 180 mL de IN NaOH são aquecidos a refluxo durante 2 horas. Após arrefecimento e filtração, a solução é extraída com éter e acidificada através da adição de 50 mL de HCl 4N. Durante o repouso verifica-se a formação de cristais. Estes são filtrados e secos a 40-50°C.

Rendimento: 35,4 g (91,3% do valor teórico); ponto de fusão 103-104°C. 4. N-[2-(3,4-dimetóxifenilo)-etilo]-Ν'-(3,3-difenilpropilo)--diamida do ácido tert-butilmalónico

Numa solução de 3,23 de amida do ácido tert-butilmalónico (de acordo com o exemplo 3) em 50 mL de CH2C12 anidro são adicionados 2,1 g de Ν,Ν'-carbonildi-imidazolo. Após 30 minutos, são adcionados 2,11 g de 3,3-difenilpropilamina. Após mais 15 horas em repouso à temperatura ambiente o solvente é removido sob vácuo. O resíduo é retomado em 18 \i

V água, acidificado com 2N de HC1 e extraído com acetato de etilo. A fase orgânica depois de lavada com água é seca sobre Na2SCL, e concentrada sob vácuo. 0 resíduo (4,9 g = 95% do valor teórico) é utilizado na reacção de ciclização sem qualquer outro tipo de purificação. 5 . (R,S)-(3,4-Di-hidro-6,7-dimetóxi-isoquinolino-l-ilo)-2--tert-butilo-N-(3,3-difenilpropilo)-acetamida Uma mistura de 5,15 g de diamida do ácido tert-butilmalónico (de acordo com o Exemplo 4), 1,9 mL de POCI3 e 35 mL de acetonitrilo são aquecidos a refluxo durante 2 horas. Depois do arrefecimento, lança-se sobre água fria, ajusta-se a um pH alcalino por adição de uma solução de soda e extraí-se com acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com água, seca sobre Na2S0/i e concentrada. 0 resíduo é dissolvido em acetona, e com a quantidade calculada de ácido clorídrico em solução etérea, transformado no hidrocloreto, e após lavagem, recristalisado.

Rendimento: 4,54 g (83,6% do valor teórico); ponto de fusão 147-148°C.

Exemplo 2 N- [2- (3,4-Dimetóxifenilo) -etilo] -amida_do_ácido_3- -tienilmalónico

15,1 g (40 Mmole) de N-[2-(3,4-Dimetóxifenilo)-etilo]-amida do éter mono-etílico do ácido 3-tienilmalónico são dissolvidos em 150 mL de metanol e 100 mL de dioxano, sendo adicionados gota-a-gota, sob agitação e em banho de água fria, 42 mL (42 Mmole) de uma solução de IN de NaOH. Agita- 19

se ainda por mais 2 horas à temperatura ambiente, sendo a fase orgânica de seguida destilada a pressão reduzida, e o resíduo submetido a partição entre água e CH2C12. A fase aquosa é acidificada sob arrefecimento e agitação com uma solução a 10% de ácido cítrico, e extraída com CH2C12. Depois de lavagem com água, e solução de NaCl saturada, seca--se sobre MgS04, sendo o solvente removido a pressão reduzida, obtendo-se um resíduo de 12,7 g. Após recristalização em diclorometano/metanol/éter obtém-se 11,7 g (83,7% do valor teórico) do composto em título. N-[2-(3,4-Dimetóxifenilo)-etilo]-N"dibenzilo-di-amida_do ácido 3-tienilmalónico

S-

Numa solução de 3,75' g (11 Mmole) de N- [2-(3,4--dimetóxifenilo)-etilo]-amida do ácido 3-tienilmalónico em 100 mL de tetra-hidrofurano absoluto, são adicionados a 5°C sob agitação 1,78 (11 Mmole) de carbonildi-imidazolo em pequenas porções. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e de seguida adicionam-se 2,17 g (11 Mmole) de dibenzilamina. Após 16 horas de agitação à temperatura ambiente, concentra-se, sendo o resíduo particionado entre acetato de etilo e água. A fase orgânica, é lavada sequencialmente com água, solução de 5% de KHS04, solução saturada de NaHC03 e solução saturada de NaCl, seca sobre MgS04, sendo posteriormente o solvente removido a pressão reduzida. O resíduo é recristalizado numa pequena quantidade de éter. 20

Rendimento: Obtém-se 5,1 g (87,7% do valor teórico) do composto em titulo (R, S)-(3, 4-Di-hidro-6,7-dimetóxi-isoquinolino-l-ilo)-2- (3--tienilo)-N,N-dibenzilacetamida H3C H3c

5,1 g (96 Mmole) de N-[2-(3,4-dimetóxifenilo)-etilo]-N'--dibenzilo-diamida do ácido -3-tienilmalónico em 50 mL de acetonitrilo p.A. (pro análise) são adicionados a 4,41 g (28,8 Mmole) de cloreto de fosforóxilo aquecendo-se à temperatura de refluxo sob atmosfera de N2 durante 1 hora. Após arrefecimento adicionam-se 150 mL de acetato de etilo, neutraliza-se com uma solução de NaHCCh, e lava-se com água e solução saturada de NaCl, seca-se sobre MgSO,j, sendo o solvente removido a pressão reduzida. 0 resíduo é dissolvido em 10 mL de acetona absoluta, adicionam-se 900 mg (10 Mmole) de ácido oxálico, precipitando um sal cristalino após adição de 50 mL de éter di-etílico absoluto.

Rendimento: 4,8 g (83,3% do valor teórico) do composto em título, na forma de oxalato; ponto de fusão 128-130°C.

As tabelas seguintes resumem exemplos de compostos de acordo com a presente invenção. A preparação destes compostos pode ser executada de forma análoga aos processos acima descritos. 21

V

Tabela 1 CH3°W\ CH3°^XjCx ch3 O Ponto de fusão (°C) Forma de sal Estrutura tautomérica x= _yCF3 NH- CH2-CHj—^ \ 76 Fu(l,5) NH-CH?-CH2 -ch3 105 Fu cv..... NH-CH2--CH2—^ y 152 Fu (1,5) NH-CHg-CHg—^ ^ 230 Cl h3c^_ NH-CH2-CH;—ζ y 138 Fu (1,5) NH-Cht—CHj—Q 112 Fu NH-CH;—CHj—^ \-~q O^ NH-CH?-CHÍ—^^-OCHa H3CÒ OCH3 NH -CHg-CHz—^ ^ HaCO 98 Fu(l,5) OCjHf, nh-ch2 ch?—y F nh-ch2-ch2 -ί } 209 Cl 22 \1

Ponto de fusão (°C) Forma de sal Estrutura tautomérica H.C^ nh-ch2-ch3—/ x; h3c^ F NH—CH2-CH2—^ \ 215 Cl N >*0 i NH-CH(CH3)-CH2-CH2—^ ^ N CHj—<^Λ| N|cH2- CH2-CH2-CH2- ^ NH-CH--CH2-CH / ^ . 2 174 Fu NH-CH2-CH 208 Fu NH-CH2-CH2-('''X W 232 Cl nh-ch2-ch2-ch2-ch2—( ^ 165 Cl NH— CHj-CH-j-CH:—( c;ch:.J3 133 Fu (1 / 5) I NH-(CH2)9-CH3 147 Cl 23

Jj u

Ponto de fusão (°C) Forma de sal Estrutura tautomérica h3c^_ nh-ch2—/ > 210 Cl nh-ch2^3 223 Cl nh-ch2—/ \ óc2h5 H5C CH3 NH-O^-Ot—00½ r HjCO OCHs 1 J ÇH2-CH;— ^ OCH) | NH — CH-:-CH->—CHj—$ S Y 209 Cl I h3c O-t) 187 Fu (1,5) NC >rv£3 nh<3 102 Fu (1,5) NH—- CH2-CH2- V- OCH3 OCH3 201 Fu F NH—CH;—^ ^ 212 Cl 24 u

Ponto de fusão (°C) Forma de sal Estrutura tautomérica 0C?H3 NH-(CH2Yy-( J 145 Fu (1,5) NH-CH;—C(CHa)3 145 Fu (1,5) NH-CH2—VÓ 192 Fu (1,5) H’CCK NH—CHj—^ y 158 Fu (2) /"Λ NH'CH2-CH2“( ) 209 Cl NH—CH2—^ ^—F 170 Cl NH-CHj—^ V-CF3 138 Cl NH—CH;—^ ^ 188 Cl r\ NH—CH2—‘kg/ 222 Cl MH—(CHg)3—O—^ CN 144 Fu(1,5) O^H, NH-CH;;—/ \ 180 Fu (1,5) CFJW nh-ch2—{ y 210 Fu (1,5) nh-ch2—^ y 222 Cl 25

Tabela 2 εΗ3°Ύ^/\ ch3o^^S^' &-/ o Forma de sal Ponto de Fusão (°C) X= _^CF3 nh-ch2-ch^—/ ) OX 125-135 (decomp.) NH-CHr-CH;—/ >-CH3 BS 161-163 CL NH-CHj-CH,---^ ^ NH-CH2-CH2—^ ^ H3c NH-CH2-CH2—<f ) BS 118-120 nh-ch2 -CH2 —^>—α NH-CH,-Crtj— / Vo X=V H3COÍ ÔCH3 NH-Chjg-CHz— H3CO OC-Hj nh-ch2-ch? F nh-ch?-ch2—( \ BS 128-130 26 ^

Forma de sal Ponto de Fusão (°C) h3cv nh-ch2-ch2—/ s h3c>-/ nh-ch2-ch[^ \\ L Vi-/ J2 BS 185-187 F nh-ch2-ch3—( \ \ ...J n [cHí_0 L OX 128-130 NH-CH(CH,)-CH2-CH2— r VA N pHj-CHz—C 7 N jcHj—CH? -CH2—CH 2 —^ nh-ch2~ch2-ch j / \ j L ^-/ J 2 OX 70-80 (decomp.) NH-CH2-CH2-^^ BS 165-167 NH-CH2—CBí-CB;—CHj" / \ BS 102-104 Nl 1 — Chj—CHj CHj—^y~C!CH:J:, OX 124-127 NH—(CH2)9—CH3 OX 121-122 HsCV-\ nh-ch2—/ \ 27 Γ U ^ t

Tabela 3 çQ s-^cT Forma de sal Ponto de Fusão (°C) x= NH -CHj-CH2 —( OCH3 OCH3 BS amorfo 28 ΟΧ: oxalato BS: base livre

Decomp.: decomposição O objectivo da presente invenção constitui, para além disso, a utilização destes novos compostos.

Os compostos apresentam vantagens no tratamento de doenças degenerativas e necróticas do cérebro. Também é possível o tratamento preventivo destas doenças em pacientes de risco, através destes compostos. 0 efeito destes compostos não se revela através da melhora da irrigação dos tecidos pelo sangue. Os compostos são assim adequados para um novo tratamento de epilepsia e da doença de Alzheimer, e em especial para o tratamento de pacientes que sofreram um acidente vascular cerebral ou que estão em risco de sofrer um acidente vascular cerebral.

Um outro objectivo da presente invenção consiste na utilização dos compostos referidos para a preparação de agentes de tratamento para processos inflamatórios crónicos, da colite ulcerosa e do Morbus Chron, e de agentes com efeito antiproliferativo. 0 efeito dos compostos pode ser explicado através da sua inibição sobre os canais não selectivos de catiões (CNSC). A patofisiologia da bronquite asmática crónica está na origem de processos inflamatórios, que são promovidos através da activação de células inflamatórias. (BARNES, 1987; SEIFERT e SCHULTZ, 1991) . A activação das células inflamatórias reguladas pelos receptores (por exemplo granulocitos neutrófilos e células do intestino, em particular a sua linha permanente ou sensível de células HL-60, isto é, células RBL com gamaglobulina E) é inibida independentemente da forma do antagonista 29 t Γ estimulante (por exemplo, endotelina, PAF, leucotrieno, peptídeo quimiotáctico fMLP ou antigene contra células do intestino sensibilizadas) através do bloqueio dos canais não sensíveis a catiões (RINK, 1990) . Através destes canais é fornecido o cálcio extracelular às células, que é necessário para a persistência da activação das células pelos receptores (PUTNEY, 1990). Se este fluxo de cálcio for interrompido, resulta um bloqueio da activação das células inflamatórias.

Antagonistas de cálcio clássicos de di-hidropiridina, em particular do tipo fenilalquilamina, não inibem quer os canais não selectivos de catiões quer o processo inflamatório (WELLS et al., 1986).

Como medida da activação das células, em particular, como medida da sua inibição através dos canais não selectivos de catiões, é conseguido através de métodos de quantificação, por cinética fluorométrica, da concentração de cálcio citoplasmática em células com Fura-2 de acordo com GRYNKIEWCZ, et al., 1985). Este procedimento revelou-se, no âmbito da presente invenção, como um método fidedigno de "screening" na determinação de bloqueadores de canais não selectivos de catiões.

Para a caracterização de bloqueadores de canais não selectivos de catiões, são adequadas as inibições funcionais de TAPSIGARGINA. A TAPSIGARGINA, constitui um promotor de tumores descrito por THASTRUP et al., (Proc. Natl. Acad. Sei. (USA), 87, 2466-2470, 1990), que inibe selectiva e irreversivelmente a ATPase do Ca21 intracelular, armazenador de Ca2'1 sensível a IP3. Devido a este facto, assiste-se a um rápido esvaziamento do armazenador de Ca2!. Como foi descrito por J. PUTNEY (Calcium, 11, 611-624, 1990), está estabelecido que o esvaziamento destes armazenadores promovem a abertura dos canais não selectivos de catiões na membrana celular. 30

A consequência consiste num fluxo massivo de Na+ e Ca2+ para as células. Devido a estas características, a Tapsigargina adequa-se como estimulador indirecto para a abertura dos canais não selectivos de catiões não dependentes de agonistas e IP3.

No âmbito da presente invenção foi executada com sucesso uma estimulação por tapsigargina dos canais não selectivos de catiões em células HL 60 (células leucémicas humanas), em células neuronais hipocampais e corticais bem como em células RBL ("rat basophilic lymphoma cells"), sendo assim determinada a existência destes canais nas respectivas linhas de células. A concentração de Ca2" citoplasmático ([Ca2~]i desempenha um papel importante na proliferação celular e no crescimento de tumores (ver L.R. ZACHARRSKI, Journal of Medicine, 19: 145-177, 1988). Em especial, o fluxo de Ca2" nas células que é estimulado através da activação dos receptores com a consequente promoção da mediação inositol-trifosfato-(IP3) , deve possuir um papel determinante na proliferação de células oncogénicas (U. KIKKAWA e Y. NISHIZUKA, Ann. REV. CELL. BIOL. 2: 149-178, 1986). Este mecanismo possui também um papel da formação de metástases e na "Multi-Drug-Resistance). (ver a publicação acima referida de L.R. ZACHARSKI.) J. MED. 19: 145-177, 1980.

Esta hipótese foi assim verificada, já que a thapsigargina constitui um estimulante indirecto dos canais não selectivos de catiões bem como conduz a um excesso de Ca^‘ nas células, constituindo ainda um promotor de tumores com um efeito bastante elevado. (V. THASTRUP et al., Proceedings of the NATL. Acad. Sei: (USA) 87: 2466-2470, 1990). O bloqueio do fluxo de Ca2+ através dos canais não 31

selectivos de catiões conduz a uma normalização da concentração de Ca intracelular e assim a uma inibição do crescimento de tumores.

Os antagonistas de cálcio clássicos não inibem estes canais não selectivos de catiões. De uma forma surpreedente foi determinado que os compostos de acordo com a presente invenção inibem o fluxo de cálcio para as células através dos canais não selectivos de catiões.

Como foi demostrado por S. H. MURCH et al., (Lancet 339: 381-385, 15. Fev. 1992), a endotelina I possui um papel importante do ponto de vista patofisiológico em doenças inflamatórias do intestino, como a colite ulcerosa e o Morbus Chron. Com auxilio de métodos imuno-histoquimicos pôde ser verificado, que os pacientes com M. Chron na zona da submucosa e os pacientes com colite ulcerosa na zona da lamina própria no epitélio do intestino grosso, possuem uma significativa e forte concentração de endotelina I em comparação com pessoas saudáveis. Admite-se, que o lançamento local de endotelina, provoque vaso-espasmos massivos com consequente disseminação isquémica com micro-infartes, que são considerados a verdadeira origem das doenças referidas. A efectividade da vaso-espamogene da endotelina é explicada pelo excesso de Ca2+ dos miócitos vasculares. Aqui, a endotelina promove em primeiro lugar uma libertação de Ca2' mediado por IP3 transmembranar à qual se associa um fluxo de Ca2+ transmembranar massivo através de canais não sensíveis a di-hidropiridina. (M.S. Simonson et al., Clin. Invest. Med. 14: 499-507, 1991; T. Masakai, J. Cardiovasc. Pharmacol. 13: suppl. 2, S1-S4, 1989; D.W. Hay, R. J. Pharmacol. 100: 383-392, 1990). Estes canais são os canais não selectivos de catiões, cuja existência foi recentemente descrita em células da mucosa do intestino grosso. (Chr. Siemer e H. Gõgelein, Europ. J. Physiol. 420: 319-328, 1992). 32

Como modelo de "screening" para determinar antagonistas de endotelina funcionais, revelou-se adequado o fura-2 existente nas células humanas de leucemia (células HL 60) que actuam como estimulantes da activação de endotelina. De acordo com G. GRYNKIEWCZ et al·., (J. Biol. Chem., 260: 3440-3450, 1985) , a concentração de Ca2" no citoplasma de células HL 60 (suspensões) pode ser seguida através de métodos espectrofluorométricos, constituindo uma medida da actividade celular através da endotelina. O estimulo é executado através da adição de 0,1 mM de endotelina, que é inibida, dependendo da dose, através dos compostos de acordo com a presente invenção. O antagonismo funcional para endotelina dos compostos de acordo com a presente invenção, foi determinado através do bloqueio dos canais não selectivos de catiões. Por esta razão é também adequado a determinação do antagonismo funcional de tapsigargina em células RBL-hml como método de "screening" para antagonistas funcionais de endotelina.

Decurso das experiências:

Para efeitos de "screening", foram estimuladas células de RBL-hm 1 contendo fura-2 num meio de incubação sem Ca2+ com 0,1 μΜ de thapsigargina. Após 4 minutos foi reconstituído o Ca2h extracelular a um valor de 1,5 mM, e registado, através da fluorescência de fura-2, o aumento excessivo da concentração de Ca2+ citoplasmático, como consequência de um fluxo massivo transmembranar de Ca2+ através dos canais não selectivos de catiões.

Este fluxo é de facto inibido dependendo da dose, através de bloqueadores de canais não selectivos de catiões. Nem os antagonistas de cálcio clássicos nem os bloqueadores específicos de agonistas, que estimulam o "turnover" de 33 (í IP3, podem inibir o fluxo de Ca2' transmembranal provocado indirectamente pela thapsigargina. Os compostos de acordo com a presente invenção, revelam-se inibidores dos canais não selectivos de catiões. A medição fluorimétrica do cálcio no citoplasma de células unitárias de RBL-hm 1 decorre em analogia com o método descrito por KUDO e OGURA (1986) para células neurais. É utilizado um microscópio de fluorescência AXIOVERT 35 da ZEISS em combinação com um sistefflê de imagem da HAMAMUTSU, consistindo num sistema de tratamiuto de imagem ICMS, câmara de intensificação de luz com unidade de controlo e amplificador de imagem DVS 3000. A cinética da concentração de Ca2+ citoplasmática foi obtida através da curva concentração-tempo após activação das células por estímulo através de tapsigargina (0,1 μΜ) . Foram comparadas duas curvas de culturas de células activadas na presença e ausência de ΙΟμΜ de composto de teste. A área na zona inferior dessas curvas ("area under the curve" - AUC) é integrada e constitui a medida da actividade celular. A magnitude do efeito inibitório dos bloqueadores de canais não selectivos de catiões foi determinada de acordo com a seguinte relação: AUCmh x 100 %H= 100- AU C(conliolo) %H = percentagem da inibição do fluxo de cálcio através dos canais não selectivos de catiões que é estimulada e que é inibida através de 10μΜ de composto de teste. 34 ,ρ L-Ci ^ AUCmh = Área na zona inferior da curva, que é observado na presença do estimulante mais 10 μΜ de composto de teste inibitório. AUC-controlo) = Área na zona inferior da curva, que foi registada só por adição de estimulador.

Literatura dos esclarecimentos acima descritos:

BARNES P. J. , I. W. RODGER e N. C. THOMSON

Pathogenesis of asthma, em "ASTHMA, basic mechanism and clinicai management"

Ed. por P. J. BARNES; ACADEMIC PRESS, LONDON, 1988 GRYNKIEWCZ G., Μ. POENIE e R. Y. TSIEN A new generation of Ca^-indicators with greatly improved fluorescence properties J. BIOL. Chem. 260: 3440-3450, 1985

HIDE, M. e Μ. A. BEAVEN

Calcium influx in rat mest cell (RBL-2H3)line J. BIOL. CHEM. 266: 15221-15229, 1991

KUDO, Y. e A. OGURA

Glutamine-induced increase in intracellular Ca2~-concentration in isolated hippocampal neurones BR. J. PHARMACOL. 89: 191-198, 1986 PUTNEY, J. W., jr

Capacitative Calcium entry revised Cell CALCIUM 11: 611-624, 1990 RINK, T. J.

Receptor-mediated calcium entry FEBS LETT. 268: 381-385, 1990 35

y

t

SEIFERT, R. e G. SCHULTZ

The superoxide forming NADPH oxidase of phagocytes: An enzym sytem regulated by multiple mechanism REV. PHYSIOL. BIOCHEM. PHARMACOL., Vol. 117, SPRINGER VERL., 1991 WELLS, E., C. G. JACKSON, S. T. HARPER, J. Mann e R. P. EAOY Characterization of primate bronchoalveolar mast cells II, inhibition of histamine, LTCL e PGF2a release from primate bronchoalveolar mast cells and comparison with rat peritoneal mast cells J. IMMUNOL. 137: 3941-3945, 1986.

Resultados das medições São ilustrados os resultados da inibição percentual dos canais não selectivos de catiões após estimulo por tapsigargina (0,1 μΜ thapsigargina) em células RBL-hm 1. A concentração unitária dos compostos de teste é de 10"5 Mole, em particular 10-6 Mole.

Tabela 4 CMj0 hcTN H3C'l ir CH3 0 Forma de sal %H (10"3 M) %H (10“b M) x= NM-CH;-CH;— Fu (1,5) 71,9 NH-CHj - CH2—^ CH3 Fu 57,3 36 Π~ L-i η,

Forma de sal %H (IO-3 M) %H (10‘ô M) Ύ NH-CH;-CH2—ζ Fu (1,5) 71,2 NH-CH2-CH2—^ Cl 66, 4 h3c NH-CH2-CH2 —ί_y Fu(1,5) 53,3 Γ \ NH-Cht-CHj—^ V C1 Fu 70,7 NH-Cm-CH,—Vo ^“V NH-CH2—CH;—Í V-OCHa >=< H3C0 oCHa NH-CH2-CH2—( ') ^,V H3CO Fu (1,5) 60, 5 oçHg nh-ch2 -ch2- ^ y Cl 64,6 NH-CH2-CH2-0—/ % H3CT F NH-CH2-CH2—^ Cl 70, 1 n [ch2-^3 ]2 nh-ch(ch3)-ch3- ch2—< F. N jcHj CH2—ζ y 37

V

U, κ

Forma de sal %H (IO-3 M) %H (10'° M) N fcH-i - CHo-CH--CHo—/ V 1 Wj2 NH-CH2-CH2-CH j Fu 77,2 NH-CH2-CH ^ Fu 75, 7 m-CH2-CH2-^\ *-s Cl 24,8 nh-ch?--ch2-ch2~ch5—Λ Cl 64,4 NH-CH-J-C^-CI^—/^X-C(CH3h Fu (1,5) 74, 4 NH-(CH2)9-CH3 Cl 69, 7 HsCv^ NH-CH2—i \ Cl 45, 8 nh-ch2—^~^ Cl 80, 8 NH-CHs—/ \ OC2Hg HjC CH) NH-CHj —CH, —OCHj [ H3CO OCHi 1 NICH3 -CH2 — ( y- OCH] j (31 NH— CH2-CH;-CH2—( ^ Cl 64, 9 38

Forma de sal %H (10'b M) %H (10"b M) h3c O-Ò Fu(l,5) 66, 8 0^-0 NC NCN_t) nhK3 Fu (1,5) 73, 8 NH— CH2-CH2—<f V-OCH, M OCH3 Fu 29,2 NH-CH;—^ ^ Cl 72,7 oc2h5 Fu(l,5) 28,4 NH-CH2—C(CH3>3 Fu (1,5) 43, 2 nh-ch2—f y-o Fu (1,5) 16, 9 Η3°α NH-Chfe—/ % Fu (2) 35,7 NH- CH2-CH2—('_^ Cl 53, 3 NH—CH2—^ ^—F Cl 100, 0 60, 3 NH-CH; - -/ V- CFj Cl 93, 5 47,3 39 Γ u

Forma de sal %H (IO-5 M) %H (10~b M) NH—CH2—^ ^ Cl 99, 0 63, 7 ΓΛ NH—CH2—'bg/ Cl 96, 0 65, 4 NH-(CH2)3-0—CN Fu (1,5) 91, 6 65, 7 ΟΟ,Η.; NH-CHa—ί y Fu (1,5) 65, 8 ε>Λ nh-ch2—C 7 Fu (1,5) 51,1 NH-CHz— Cl 61,0

Tabela 5 CH3o s~-· o Forma de sal %H (IO-3 M) X= cf3 NH-CH?-CH2—^ y OX 20, 85 NH-CH2-CH2—(ζ CH; BS 59, 94 C1\ NH- CHj-CHj—ί \ NH-CH2-CH2—^ H3C NH-CH2-CH2--ί J BS 37,83 40 V.

41 p Lc,

42

Tabela 6 çp ^Vrx S-J o Forma de sal %H (10-3 M) x= NH-CH;-CH2—OCH3 OCH3 BS 27, 01

De acordo com o texto seguinte, pode ser verificada a efectividade funcional anti-inflamatória. São utilizadas unicamente células RBL-2H3 (uma das linhas de células do tumor intestino) que se encontram aderentes às paredes de vidro da placa. A cultura e aderência das células RBL-2H3 decorre de acordo com o método descrito por HIDE e BEAVEN (1991). Para a sensibilização das células aderentes de RBL-2H3, as células são incubadas 2 horas à temperatura ambiente com uma solução comercial diluida 1:2000 de gamaglobulina E, contra um complexo dinitrofenol-albumina de soro de vitelo (DNP-BSA-antigene). De seguida as células são lavadas. Após adição de 0,1 mL de uma solução de DNP-BSA (10 pg/mL), decorre uma activação imunológica das células massiva, que é verificada através de um excesso de Ca2" citoplasmático. A medição fluorométrica do cálcio no citoplasma apenas das células aderentes de RBL-2H3, decorre de acordo com o método descrito para células neuronais por KUDO e OGURA (1986), que também é esclarecido nesta descrição.

Como composto de comparação utiliza-se nestes 43 estudos (10 μΜ) de cromoglicato, que possui um efeito inibitório de 50% sob a activação das células induzida por antigene.

Neste teste os compostos acima descritos revelam um valores de %H, que são comparáveis aos valores indicados acima.

Em estudos em microculturas de diferentes linhas de células de tumores humanos, com auxilio do ensaio do tetrazolio, para determinação do efeito antiproliferativo dos compostos de acordo com a presente invenção, verificou-se surpreendentemente, que os compostos testados são 5 a 100 vezes mais efectivos que o composto de comparação verapamil. A efectividade antiproliferativa dos compostos em teste, foi determinada com auxilio do teste MTT (MTT = brometo de [3-(4,5-dimetiltiazolo-2-ilo)-2,5-difenilo-tetrazolo] de CHEMICON Inc. EI Segundo Ca, USA), descrito por MOSMANN (J. IMMUNOL. METH. 65: 55-63, 1983), DENIZOT et al., (J. IMMUNOL. METH. 89: 271-277, 1986), e por J. ELIASON et al., (INT. J. CÂNCER 46: 113-117, 1990). Este indicador só é metabolizado a um produto de formação azul através de células vivas com mitocôndrias intactas. Nos nossos testes, foram utilizadas as seguintes linhas de células de tumores: A 549 (adenocarcinoma do pulmão), A 431 (carcinoma da epiderme da vulva) , PC 3 (adenocarcinoma da próstata) , SK BR 3 (adenocarcinoma da mama), HT 29 (CX1 1) (adenocarcinoma do cólon) e K 562 (células mielóicas de leucemia crónica). O teste decorreu em micro placas. Cada orifício continha 100 pL de uma suspensão de células (0,2 x 106 células/mL) . Como meio de incubação, utilizou-se RPMI 1640 com 10% de soro fetal de bovino inactivado por aquecimento e 50 pg/mL de gentamicina. As suspensões de células foram incubadas 0, 44 r il t 24, 48 ou 72 horas em atmosfera saturada de humidade numa mistura de C0?. (5%)- ar (95%) a 37 °C, na presença e na ausência de concentrações variáveis de compostos de teste antiproliferativos. Os compostos de teste foram dissolvidos em DMSO (dluição final 0,1%). De seguida foi adicionada uma solução de 10 pL de MTT (3 mg/mL) e após 3 horas 100 pL de uma solução de isopropanol contendo 0,08 N de HCl. Após mais uma hora foi determinada a absorção a 570 nm (comprimento de onda de comparação 630 nm) num leitor de microplacas. A absorção é directamente proporcional ao número de células vivas. A concentração correspondente a metade da concentração máxima de inibição dos compostos em teste foi de 1 pg/mL. A efectividade vasopasmolitica dos antagonistas funcionais acima referidos de endotelina, em particular tapsigargina, foi determinada em preparados isolados: em corações LANGENDORF de ratos recém abatidos retroperfusionados, foi quantificada, através de medidas de fluxo electromagnético (aparelho de Hugo Sachs Elektronik, MARCH) a perfusão coronária. Através destas medidas é possível registar com grande exactidâo a amplitude, duração e forma dos espasmos dos tecidos. Se se perfusionar com uma concentração de 100 nM de endotelina, então o fluxo de perfusão é reduzido de 11 a 5 mL/min. A diminuição da perfusão pode ser aumentada através dos compostos de acordo com a presente invenção. A efectividade dos compostos de acordo com a presente invenção relativamente à inibição pela tapsigargina em células RBL-hm 1 com fura-2, em particular a efectividade da inibição pela endotelina em células HL 60 com fura-2 é correlacinada claramente com a efectividade vasopasmolitica determinada com preparado de Lagendorff das substâncias teste. Pode-se assim concluir que o antagonismo à endotelina vasopasmolitica das substâncias em teste é susceptível a um bloqueio dos canais não selectivos de catiões. 45 u

Exemplos de utilização farmacêutica a) Drageias 1 Núcleo de drageia contém:

Composto activo de fórmula geral I 30,0 mg

Lactose 100, 0 mg

Amido de milho 75,0 mg

Gelatina 3,0 mg

Estearato de magnésio 2,0 mg 210 mg

Preparação A mistura do composto activo com lactose e amido de milho é granulada com uma solução aquosa de 10% de gelatina através de um crivo com 1 mm de dimensão de poro, e seca a 40°C, seguida de novo de granulação num crivo. O granulado assim obtido é misturado com estearato de magnésio e é comprimido. Os núcleos assim obtidos são providos de um invólucro através de métodos habituais, com auxilio de uma suspensão aquosa de açúcar, dióxido de titãnio, talco e goma arábica. As drageias são finalmente polidas com cera de abelha. b) Comprimidos

Composto activo de fórmula geral I 30,0 mg

Lactose 100,0 mg

Amido de milho 70,0 mg

Amido solúvel 7,0 mg

Estearato de magnésio 3,0 mg 210 mg 46

Preparação 0 composto activo e estearato de magnésio são granulados com uma solução aquosa de amido solúvel, sendo o ganulado seco e misturado intimamente com lactose e amido de milho. A mistura é de seguida comprimida originando comprimidos com 210 mg de peso. c) Cápsulas 30.0 mg 230, 0 mg 40.0 mg 10.0 mg

Composto activo de fórmula geral I Lactose

Amido de milho Talco 300 mg

Preparação

Composto activo, lactose e amido de milho são misturados num misturador e de seguida submetidos a uma máquina de fragmentação. A mistura é de novo submetida a um misturador, misturada com talco e colocada por intermédio de máquinas, em cápsulas de gelatina dura. d) Comprimidos

Composto activo de acordo com a presente invenção 40,0 mg

Lactose 100,0 mg

Amido de milho 50,0 mg Ácido silicico coloidal 2,0 mg

Estearato de magnésio 3,0 mg

Total 195 mg 47 V ί

f

Preparação 0 composto activo é misturado com parte dos agentes adjuvantes seguido de granulação com uma solução de amido solúvel em água. Após secagem do ganulado, adicionam-se os restantes agentes adjuvantes, comprimindo-se a mistura para se obterem os comprimidos. e) Drageias

Composto activo de acordo com a presente invenção 20, 0 mg Lactose 100,0 mg Amido de milho 65,0 mg Ácido silicico coloidal 2,0 mg Amido solúvel 5,0 mg Estearato de magnésio 3,0 mg

Total 195 mg

Preparação O composto activo e os compostos adjuvantes, de acordo com o o descrita para o Exemplo 1, são comprimidos até formarem comprimidos, sendo transformados em drageias com açúcar, talco e goma arábica da forma habitual. f) Supositórios 50,0 mg 250,0 mg 1, 7 g

Composto activo de acordo com a presente invenção Lactose

Massa para supositório (quantidade que baste) 48 f-' U, ^

Preparação 0 composto activo e a lactose são misturadas entre si e a mistura suspensa de uma forma homogénea na massa para supositório fundida. A suspensão é lançada em formas para supositório arrefecidas e possui um peso de 1,7 g. g) Ampolas

Composto activo de acordo com a presente invenção 20, 0 mg

Cloreto de sódio 5,0 mg

Água bidestilada (quantidade que baste) 2,0 mL

Preparação 0 composto activo e o cloreto de sódio são dissolvidos em água bidestilada sendo esta solução introduzida nas ampolas esterelizadas. h) Ampolas

Composto activo de acordo com a presente invenção 10,0 mg

Cloreto de sódio 7,0 mg

Água bidestilada (quantidade que baste) 1,0 mL i)

Gotas

0,70 mg 0,07 mg 0,03 mg 100 mL

Composto activo de acordo com a presente invenção Éster metílico do ácido p-hidróxibenzóico Éster propilico do ácido p-hidróxibenzóico Água desmineralizada (quantidade que baste) 49

Preparação 0 composto activo e os agentes conservantes são dissolvidos em água desmineralizada, sendo a solução filtrada e introduzida em frascos com 100 mL de volume cada.

Lisboa, 23 de Novembro de 2000 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAI,

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula geral I

nr3r4 (D o onde, A significa um grupo benzénico, indolo ou tieno; em que se A é benzénico, m significa 2 ou 3, e os grupos R': são independentes entre si, e são hidróxilo, (C-.-Ci)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), (Ci-C4)-alquilo, metanosulfonilóxilo ou metanosulfonamido, ou dois grupos substituintes vizinhos R2 podem significar em conjunto -0-CH2-0- ou -0-CH2-CH2-0-; e quando A significa indolo ou tieno, m significa zero; R1 significa tienilo ou o grupo

onde, R7, R8 e Rs são independentes entre si e podem significar metilo, etilo, propilo, fenilo ou benzilo, em que nunca mais que 2 dos substituintes podem ser simultaneamente fenilo ou benzilo; R3 e R1 são independentes entre si e são l — L-Cj (a) Hidrogénio, (b) Alquenilos com 3 a 6 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, (c) Alquinilos com 3 a 6 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, (d) Alquilos com 1-12 átomos de carbono ramificados ou não ramificados, onde o grupo alquilo pode ser substituído com Hidróxilo, (Ci-C4)-alcóxilo, Di (C1-C4) -alquilamino, Furilo, Piridilo, Pirrolidinilo, N-metilpirrolidinilo, Morfolino, Indolilo, Nitrilo, Tienilo, Adamantilo, Ciclo-hexilo, Fenóxilo, Naftilóxilo ou fenilo, (onde este fenilo ou o fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, CN, (C1-C4)-alquilo, adamantilo, -SO2-NH2, -NHCOCH3, -NHSO2CH3 ou CH3SO2O- ou através da ponte -0-CH2-0-) ; ou através de dois grupos fenilo não substituídos; ou R3 significa hidrogénio e R4 significa ciclo--hexilo, fenilo (onde este fenilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C2-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, 2 Br, I), CF3, N3, (C1-C4) -alquilo, adamantilo, -SO2NH2, -NHCOCH3, -NHSO2CH-3 ou CH3S020- ou através da ponte -0-CH2-0-) , piridilo ou N--benzilpiperidilo; ou R3 e em conjunto com um átomo de azoto, estão ligados entre si sendo, Pirrolidinilo, Piperidinilo, Morfolinilo, tiomorfolinilo ou significam piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode eventualmente estar substituído em N- por metilo, fenilo não substituído, mono- ou di(C1-C4)-alcóxifenilo, fenilo cianosubstituído, pirimidinilo, fenilo (Ci-C4) alquilo, (Ci~ -C4) alquilfenilo ou —(CH2)n OCH3 ou seus sais obtidos de ácidos fisiologicamente compatíveis ou por formação de complexos.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R3 e R4 serem independentes entre si e serem (a) Hidrogénio, (b) Alquenilos, ramificados com 3 a 6 átomos ou não ramificados, de carbono, (c) Alquinilos, ramificados com 3 a 6 átomos ou não ramificados, de carbono, 3 V f L-L (d) Alquilos, com 1-12 átomos de carbono, ramificados ou não ramificados, onde o grupo alquilo pode ser substituído com Hidróxilo, (Ci-CU) -alcóxilo, Di (C1-C4) -alquilamino, Furilo, Piridilo, Pirrolidinilo, N-metilpirrolidinilo, Morfolino, Indolilo, Nitrilo, Tienilo, Adamantilo, Ciclo-hexilo, Fenóxilo, Naftilóxilo ou fenilo, (onde este fenilo ou o fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, (C1-C4)-alquilo, adamantilo, -SO2-NH2, -NHCOCH3, -NHSO2CH3, CH3S020-, ou através da ponte -0-CH2-0- ; ou R'? significar hidrogénio e R4 significar ciclo--hexilo, fenilo (onde este fenilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (Ci-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, (C1-C4)-alquilo, adamantilo, -S02- -NH2, -NHCOCH3, -NHSO2CH3 ou CH3S020- ou através de uma ponte -0-CH2-0-) , piridilo ou N--benzilpiperidilo; ou R e R-5 em conjunto com um átomo de azoto, estarem ligados entre si sendo, 4 \ f_\í

t Pirrolidinilo, Piperidinilo, Morfolinilo, tiomorfolinilo ou significarem piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode eventualmente estar substituído em N- por metilo, fenilo não substituído, mono- ou di (Ci-CJ-alcóxifenilo, pirimidinilo, fenilo (Ci~ -C4) alquilo, ou OCH3 ou seus sais obtidos de ácidos fisiologicamente compatíveis ou por formação de complexos.
3. Composto de fórmula geral I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 2 caracterizado por A ser benzénico ou um grupo tienilo, em que se A for benzénico, m significa 2, e ambos os grupos R2 nas posições 6 e 7 são independentes entre si, e são hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), (C1-C4)-alquilo, metanosulfonilóxilo ou metanosulfonamido, ou dois grupos substituíntes vizinhos podem significar em conjunto -0-CH2-0- ou -0-CH2-CH2--0-; e quando A significar tieno, m significa zero; RT ser definido de acordo com a reivindicação 1, RJ e R4 serem independentes entre si, significando (a) Hidrogénio, V

(b) Alquenilos, com 3 a 6 átomos de carbono, ramificados ou não ramificados, (c) Alquinilos, com 3 a 6 átomos de carbono, ramificados ou não ramificados, (d) Alquilos, com 1-12 átomos de carbono, ramificados ou não ramificados, onde o grupo alquilo pode ser substituído com Hidróxilo, (C1-C4) -alcóxilo, Di (C1-C4) -alquilamino, Furilo, Piridilo, Pirrolidinilo, N-metilpirrolidinilo, Morfolino, Indolilo, Nitrilo, Tienilo, Adamantilo, Ciclo-hexilo, Fenóxilo, Naftilóxilo ou fenílo, (onde este fenilo ou o fenilo contido no grupo fenóxilo poder ser substituído uma, duas ou três vezes por hidróxilo, (C1-C4)-alcóxilo, benzilóxilo, halogénio (F, Cl, Br, I), CF3, N3, (C1-C4)-alquilo, adamantilo, -S02-NH2, -NHCOCH3, ou através da ponte -0-CH2-0-; ou R3 significar hidrogénio e R4 significar ciclo--hexilo, fenilo, fluorofenilo piridilo ou N--benzilpiperidilo; ou R3 e R4 em conjunto com um átomo de azoto, estarem ligados entre si sendo, Pirrolidinilo, Piperidinilo, 6 jj- L·, ^ Morfolinilo, tiomorfolinilo ou significarem piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode eventualmente estar substituído em N- por metilo, fenilo não substituído, mono- ou di (Ci-C4)-alcóxifenilo, pirimidinilo, fenilo(Ci~ -C4) alquilo, ou

0CH3 (CH2)i^—O
4. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 2, caracterizado por A significar indolo e os outros substituíntes definidos de acordo com a reivindicação 1, de preferência NR3R4 ser ou um grupo morfolinilo ou em NR3R4, R3 significar hidrogénio e R4 um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, que pode ser substituído de acordo com o definido na reivindicação 1.
5. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 3, caracterizado por A ser benzénico ou tieno, e se A for benzénico então m significar 2 e ambos os grupos R2 serem independentes entre si e significarem metóxilo, hidróxilo, benzilóxilo, metilo ou cloro ou em conjunto formarem -0CH20-, em que ambos os grupos R2 se encontram nas posições 6 e 7.
6. Composto I de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por o grupo R‘ ser metóxilo, hidróxilo, benzilóxilo ou metilo.
7. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 5 ou 6, caracterizado por o grupo A tieno ser substituído por R2 e significar 6,7-di- hidróxibenzeno ou de 7

u t preferência 6,7-dimetóxibenzeno.
8. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 7, caracterizado por R1 ser 3-tienilo.
9. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 7, caracterizado por R1 ser tert-butilo.
10. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 9 caracterizado por NR3R4 possuir um dos seguintes significados: a) em NR3R4 , R3 é hidrogénio e R4 é Ci-C6 •alquilo; b) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 é um alquinilo, ramificado ou não ramificado, com 3 a 6 átomos de carbono; c) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 é um alquilo, ramificado ou não ramificado, com 1-4 átomos de carbono, em que o alquilo é substituído por Metóxilo, Dimetilamino, Pirrolidinilo, N-metilo-pirrolidinilo, Morfolino, Tienilo, Adamantilo, Piridilo, N-Benzilpiperidilo, Ciclo-hexilo, Fenóxilo, Naftilóxilo ou 1 ou 2 grupos fenilo, onde este grupo fenilo (quando existir apenas um grupo fenilo), ou o grupo fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por metóxilo, etóxilo, benzilóxilo, halogénio, CF3, N3, metilo, tert-butilo, -S02NH2 ou pela ponte -0-CH2-0- 8

Γ ou R3 significa hidrogénio e R4 significa ciclo--hexilo, fenilo, fluorofenilo, piridilo ou N- benzilpiperidilo; d) em NR3R4, R3 e R4 são independentes entre si e significam metilo, etilo, (CH2)i-4 fenilo (onde o grupo fenilo pode ser substituído de acordo com o descrito em c) para o grupo fenilo) ou

e) R3 e R4 em conjunto com um átomo de azoto, que está ligado aos dois grupos, significam Piperidinilo, Morfolinilo, tiomorfolinilo, ou Piperazinilo, onde o anel de piperazinilo pode ser eventualmente substituído no N- por metilo ou benzilo.
11. Composto I de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por NR3R4 possuir os seguintes significados a) em NRJR4 , R3 é hidrogénio e R4 é C2-C6-alquilo; b) em NR3R4, R'1 é hidrogénio e R4 é CH2CCH; c) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 significa um grupo alquilo, ramificado ou não ramificado, com 2 a 4 9

átomos de carbono, em que o grupo alquilo é substituído por Metóxilo, Dimetilamino, N-metilo-pirrolidinilo, Tienilo, Adamantilo, Fenóxilo, Naftilóxilo ou 1 ou 2 grupos fenilo, onde este grupo fenilo (quando existir apenas um grupo fenilo), ou o grupo fenilo contido no grupo fenóxilo pode ser substituído uma, duas ou três vezes por metóxilo, etóxilo, N3, metilo, tert-butilo, ou -S02NH2; d) em NR3R4, Rj e R4 são independentes entre si e significam metilo, etilo, (CH2)i-4 fenilo (onde o grupo fenilo pode ser substituído por F) ou

uom3 e) R3 e R4, significam em conjunto com um átomo de azoto que se encontra ligado a estes gupos, piperazinilo substituído em N- por metilo ou benzilo.
12. Composto I de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por NR3R4 possuir os seguintes significados. a) em NR3R4 , R3 é hidrogénio e R4 significa etilo, tert-butilo ou (CH2)iou2 -C(CH3)3; b) NR3R4 significa NHCH2CCH; c) em NR3R4, R3 é hidrogénio e R4 significa etilo, propilo, ou metilpropilo, que é 10 jj~ substituído por fenilo que pode ser substituído uma, duas ou três vezes por metilo ou metóxilo ou uma vez só por tert—butilo; d) em em NR3R4, R3 e R4 são iguais e significam

e) NR3R4, significa —N N—CU
13. Composto I de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por R3 ser hidrogénio ou (C1-C4) alquilo--fenilo e R4 ser (C1-C4) alquil-fenilo, em que nestes grupos ambos os fenilos são monosubstituídos com halogénio, CF3, metóxilo ou etóxilo.
14. Composto I de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 9, caracterizado por R3 ser hidrogénio e R4 a) significar (C1-C3) alquilo, que é substituído por fenilo que pode ser substituído por CF3, Cl, F, tert--butilo ou CH3, ou b) significar 2,2-difeniletilo ou 3,3-difenilpropilo, ou c) significar ciclo-hexilo. 11 U u
15. Composto de acordo com a reivindicação 9 de fórmula

caracterizado por X significar CF-, nh-ch2-ch2— NH-CH2-CH2—/ V-ch3

NH-CH2-CH2-CH nh-ch2-ch ΓΛ

2 / V nh-ch2 C(CH3)3 12 ou NH-CH2
16. Processo para a preparação de um composto de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 15, caracterizado por se transformar por ciclização, uma diamida do ácido malónico de fórmula geral IV (β^)πτ 0

H H na qual R1, R2, RJ, R4 e m serem definidos de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 15 e Ar significar fenilo, indolilo ou 2- ou 3-tienilo, na presença de um agente de condensação, num seu sal, se assim se desejar.
17. Preparação farmacêutica contendo um composto de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 15.
18. Processo para a preparação de um preparado farmacêutico de acordo com a reivindicação 17, caracterizado por se utilizar um composto de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 15 com os agentes adjuvantes e/ou agentes veiculares galénicos habituais transformando-os em formas de administração farmacêuticas habituais. 13
19. Utilização de um composto de fórmula I, de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 15, para a preparação de um agente cardioprotector, um agente protector do cérebro ou um agente para o tratamento de processos inflamatórios crónicos, um agente com actividade antiproliferativa ou um agente para o tratamento de colite ulcerosa ou Morbus Chron. Lisboa, 23 de Novembro de 2000 0 AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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