PL163417B1 - Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastkówUrzad Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej PL PL PL PL PL PL PL - Google Patents

Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastkówUrzad Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej PL PL PL PL PL PL PL

Info

Publication number
PL163417B1
PL163417B1 PL90283942A PL28394290A PL163417B1 PL 163417 B1 PL163417 B1 PL 163417B1 PL 90283942 A PL90283942 A PL 90283942A PL 28394290 A PL28394290 A PL 28394290A PL 163417 B1 PL163417 B1 PL 163417B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
zinc
solution
sodium
hyaluronate
ions
Prior art date
Application number
PL90283942A
Other languages
English (en)
Other versions
PL283942A1 (en
Inventor
Kalman Burger
Nagy Geza Takacsi
Ivan Rethey
Janos Illes
Bela Stefko
Erzsebet Neszmelyi
Istvan Gebhardt
Istvan Racz
Arpadne Kiraly
Viktoria Varkonyi
Original Assignee
Richter Gedeon Vegyeszet
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Richter Gedeon Vegyeszet filed Critical Richter Gedeon Vegyeszet
Publication of PL283942A1 publication Critical patent/PL283942A1/xx
Publication of PL163417B1 publication Critical patent/PL163417B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
    • C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/27—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/58—Metal complex; Coordination compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Abstract

1. Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastków, znamienny tym, ze dodaje sie wodny roztwór zawierajacy równowazna ilosc soli, korzystnie chlorku jednego z jonów metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastków do roztworu wodnego soli metalu alkalicznego, metalu ziem alkalicznych, soli srebra albo czwartorzedowej soli amoniowej kwasu hialuronowego, ewentualnie traktuje sie otrzymany wodny roztwór rozpu- szczalnikiem, który czesciowo miesza sie z woda, korzystnie n-butanolem, a nastepnie - wytraca otrzymany kompleks z wodnego roztworu za pomoca alkanolu lub alkanonu, - oddziela osad od roztworu, a nastepnie w razie potrzeby - suszy go w warunkach lagodnych. PL PL PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu układu okresowego pierwiastków.
Nowe kompleksy wytwarzane sposobem według wynalazku obejmują zasadniczo sole kwasu hialuronowego z cynkiem lub kobaltem. Kompozycje zawierające nowe kompleksy mogą być przeznaczone do celów terapeutycznych lub kosmetycznych albo do innych zastosowań. Kompozycje zawierające nowe kompleksy wytwarzane sposobem według wynalazku można stosować w takich dziedzinach, jak np. do przyspieszenia pokrywania ubytku warstwy komórek nabłonkowych powierzchni ciała, gojenia wrzodów udowych, odleżyn, niegojących się ran, oparzeń, ran spowodowanych radiacją lub ciepłem, trądzika pospolitego i innych, chociaż mogą być one używane także do innych zastosowań.
Kwas hiraluronowy stanowi makrocząsteczkę znaną od ponad pięciu lat, która została opisana najpierw przez Meyer 'a i współpracowników £2. Biol. Chem. 107, 629 /1954^7; J· Biol. Chem. 114, 689 /1936/, a budowa określona przez Weissman 'a i współpracowników /J. Am. Chem. Soc. 76, 1753 /1954//. Kwas hialuroniowy jest wysoce lepką glikozaminoglicyną zawierającą zmieniające się cząsteczki kwasu^u g1lkuronowego i β _4 glikozaminy, przy czym jego ciężar cząsteczkowy mieści się w zakresie od 50 000 do kilku /0-13/ milionów. Np. w opisach patentowych europejskim nr 0144019, Stanów Zjedn. Ameryki nr 4141973 i 4303676 przedstawiono wydzielanie i zastosowanie ekstraczystego kwasu hialuronowego. W ostatnich latach stosowano kwas hialuronowy w postaci soli sodowej, np. w terapii, a zwłaszcza w oftamologn, chirurgu i kosmetyce. Sole kwasu nialuronowego z jonami metali alkalicznych, metali ziem alkalicznych, magnezu, glinu, amonu, lub podstawionego amonu służyły jako nośniki do promotowanma absorbcji leków /patrz belgijski opis patentowy nr 904547/. Sole metali ciężkich kwasu hialuronowego /w których metal ciężki oznacza pierwiastek okresu 5-, 6- i 7-go ukła'u okresewoao prerwitktwów jak również lantanowce i aktynowce/^ a także sól srebra, stosuje się jako funkcjonalne czynniki, natomiast sól złota stosuje się do leczenia zapalenia stawów /patrz opis patentowy WO 87/05517/.
Różne netody elucji struktury potwierdzają, że struktura drugorzędowa, tj. potwierdzenie kwasu hinlugonowewo jest zmieniana przez wiązanie jonów metali /*W. T. Winter i A. Sruther;
16J 417
3. Mol. Biol. 517, 761 /1977/; 3. K. Sheehan i E. D. T. Atkins: Int. J. Biol. Macromol. 5, 215 /1983/; oraz N. Figueroa i 8. Chakrabarti: Biopolymers 17, 2415 /1978/J. Znaczące oddziaływanie różnych czynników na strukturę cząsteczki może być spowodowane nawet przez jony metali podobnego charakteru,jak przedstawiają badania porównawcze promieni X soli sodowej i potasowej kwasu hialuronowego C A. K. Mitra i współpracownicy: J. Macromol., Sci. Phys. 824. 1 i 21 /1985/^. Jest to bardzo ważne dla związków kwasu hialuronowego utworzonych z jonami metali różnego rodzaju mającymi różne ładunki.
Nie ma żadnych danych w literaturze dotyczących kompleksów kwasu hialuronowego z jonami metali 3d czwartego okresu układu okresowego. Aktualnie według badań chromatografii filtracyjnej żelowej kwas hialuronowy, w przeciwieństwie do heparyny nie ma zdolności wiązania jonów cynku £R. F. Parish i W. R. Fair: Blochem 3. 193, 407 - 410 /19181/ J.
W przeciwieństwie do tego, że według literatury kwas hialuronowy /lub jego sól sodowa/ jest niezdolny do wiązania jonów cynku, podjęto badania koordynacji chemicznej oddziaływanie wzajemne kwasu hialuronowego i jonów metali 3d czwartego okresu układu okresowego, a w tym zwłaszcza jonów cynku i kobaltu.
Ponieważ kwas hialuronowy występuje w handlu prawie wyłącznie w postaci soli sodowej, tak więc stanowi ona zasadniczą substancję wszystkich układów zawierających kwas hialuronowy i badania w tym kierunku rozpoczęto od wzajemnego oddziaływania jonów sodowych i hialuronowych. W tym celu mierzono aktywność wolnego jonu sodowego wodnych roztworów soli sodowej kwasu hialuronowego za pomocą selektywnej gazowej elektrody sodowej. W badaniach tych jednoznacznie stwierdzono, że nie więcej niż 60% jonów sodowych jest wprowadzonych jako równoważniki razem z grupami karboksylowymi hialuronowymi w postaci wolnych jonów w roztworach wodnych, natomiast pozostałe 40% jest związane w postaci soli hialuronowej.
Według tych pomiarów przez zwiększenie stężenia jonów sodu ilość związanych jonów sodu można zwiększyć do 50-55% w przeliczeniu na wszystkie dostępne grupy karboksylowe. Tak więc należy zweryfikować i stwierdzić, że przy różnych zwykłych właściwościach soli, sól sodowa kwasu hialuronowego nie jest całkowicie zdysocjowana w roztworze wodnym.
W następnym etapie badań wodny roztwór soli sodowej kwasu hialuronowego miareczkowano roztworem chlorku cynku z zastosowaniem selektywnej elektrody dla jonu sodowego wymienionej powyżej dla zmiany aktywności wolnych jonów sodu w tym układzie. Krzywą charakterystyczną obrazującą ten proces przedstawiono na rysunku fig. 1. Wskazuje on, że jony sodu oryginalnie związane z hialuronowymi uwalniają się pod działaniem jonów cynku. W oparciu o wyniki tych pomiarów całkowite stężenie jonów sodu uwalnia się równoważną ilością cynku i jednoznacznie należy stwierdzić, ze jony cynku są mocniej związane z hialuronowymi niż jony sodu.
Tak więc, wcześniejsze stwierdzenie, że kwas hialuronowy nie ma zdolności wiązania jonów cynku / R. F. Parrish i W. R. Fair: Blochem. 3. 193, 407 /1901/ / zostało doświadczalnie odrzucone.
W ten sposób dotychczasowa wiedza w tej dziedzinie nie potwierdziła się i była ważnr tylko dotąd.
Na podstawie omówionych powyżej badań jasno wynika, że przez wzajemne oddziaływanie równoważnych ilości soli sodowej kwasu hialuronowego oraz jonów cynku /chlorek cynku/ w roztworze wodnym wytwarza się kompleks cynku i kwasu hialuronowego w stechiometrycznej ilości.
Po odpowiedniej izotonizacji otrzymany roztwór można bezpośrednio stosować do celów terapeutycznych, a związek cynku nie musi być wytworzony w postaci stałej w oddzielnym procesie. Wstępne badania przeprowadzono z zastosowaniem jonu kobaltu, a inne jony metali 3d dają podobne wyniki.
Ponadto, kompleks wytworzono w postaci stałej dla określenia charakteru i bezpośredniego środowiska jonu cynku za pomocą metody określenia szczegółowej budowy rozległą absorpcją promieni X /EXAPS/. Stwierdzono, że cynk jest dookoła otoczony cztermma atomami tlenu w pierwszej sferze koordynacyjnej. Długość odległości wązania Zi-0 wynosi 199 pm, przy czym dwa atomy węgla są obecne w dłuższej odległości od atomu cynku wynoszącej 241 pm.
163 417 riedług przedstawionych badart hialuronian cynku znacznie różni się od analogicznego kompleksu miedzi, który zawiera cztery równoległe i dwa osiowe wiązania Cu-0 o wartości odpowiednio 194 i 234 pm. Odległość atomu miedzi od następnych dwóch atomów węgla wynosi 258 pm. Budowa kompleksu kobaltu jest podobna do kompleksu cynku lecz nie podobna do kompleksu miedzi.
Niniejszy wynalazek dotyczy więc sposobu wytwarzania kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metali 3d czwartego okresu układu okresowego pierwiastków.
Sposób wytwarzania nowych kompleksów według wynalazku polega na tym, że do roztworu wodnego soli metalu alkalicznego, metalu ziem alkalicznych, soli srebrowej albo czwartorzędowej soli amoniowej kwasu hialuronowego, dodaje się roztwór wodny zawierający równoważną ilość soli, korzystnie chlorku jednego z jonów metalu 3d czwartego okresu układu okresowego, ewentualnie traktuje się otrzymany wodny roztwór rozpuszczalnikiem, który częściowo miesza się z wodą, korzystnie π-butanolem; a następnie
- wytrąca otrzymany kompleks z wodnego roztworu działaniem alkanolu lub alkanonu, w znany sposób albo
- wydziela osad z roztworem, a następnie w razie potrzeby
- suszy w łagodnych warunkach.
Uytworzony kompleks znajduje zastosowanie w otrzymywaniu preparatów w postaci roztworów wodnych zawierających jako składnik aktywny kompleks kwasu hialuronowego z cynkiem lub odpowiedni podobny kompleks z jonem metalu 3d czwartego okresu układu okresowego. Roztwory te wytwarza się w każdym przypadku na drodze bezpośredniej reakcji jonu metalu ze składnikiem hialuronowym. Ta metoda wytwarzania powoduje konieczność uprzedniego rozdzielenia składników aktywnych wyżej wymienionych w stanie stałym. W roztworze wytworzonym przez zastosowanie sposobu według wynalazku ilość wolnych /niezwiązanych z metalem/ jonów hialuronowych jest oez znaczenia nawet w obecności równoważnej ilości cynku. Pod działaniem nadmiaru jonów cynkowych wytwarzanie kompleksu Kwasu hialuronowego z cynkiem zachodzi ilościowo.
Podczas wytwarzania kompleksów metali sposobem omówionym powyżej wartości pH wynosi około 5. W przypadku 0,2¾ wag/obj. roztworu hialuronowego wartość pH wynosi 5,4 , natomiast w przypadku 0,5¾ wag/obj. wartość pH wynosi 5. W razie potrzeby wartość pH reguluje się w układzie do 5,5 - 5,6 przez dodanie kilku kropli izotonicznego roztworu octanu sodu. Obydwa rodzaje roztworów zawierających kompleks kwasu hialuronowego z cynkiem jako składnik aktywny wytwarza się z zastosowaniem sposobu omówionego powyżej.
1. Roztwór hialuronianu cynku staje się izotoniczny przez nadmiar chlorku cynku:
Biorąc pod uwagę to, że sam wolny chlorek cynku może być również korzystnie stosowany w dermatologu, to ciśnienie osmotyczne roztworu hialuronianu cynku doprowadza do wartości izotonicznej przez stosowanie nadmiaru chlorku cynku. W ten sposób otrzymany roztwór nie zawiera w ogóle wolnego hyaluronianu /nedzwiązandgo z cynkiem/ lecz cały nadmiar chlorku cynku jest obecny w tym układzie razem z hialuronianem cynku.
2. Roztwór hialuronianu cynku staje się izotoniczny przez dodanie monosacharydów lub alkoholu cukrowego:
Do zastosowania terapeutycznego, w którym występowanie jonów cynku niezwiązanego z hialuronianen nie jest wskazane, roztwór zawierający jony cynku w ilości równoważnej hialuronowym staje się izotoniczny przez zastosowanie polialkoholu /alkoholu cukrowego, korzystnie sorbitu/ albo mono- lub disacharydów /korzystnie glukozy/. Zawartość walnych jonów cynkowych oraz wolnego hialuronowego w tych układach nie przekracza 5¾ odpowiednio zawartości całkowitej cynku lub całkowitej hyaluronianu.
Do zastosowania kompleksów według wynalazku ewentualnie mogą być pożądane kompozycje wolnych jonów. Mianowicie, kompleksy wytworzone sposobem według wynalazku zazwyczaj zawierają chlorek sodu lub inną sól wytworzoną z wyjściowego kationu hialuronowego oraz anion soli metalu 3d.
Do wytwarzania kompleksu soli wolnego kwasu hialuronowego z jonem metalu ed można stosować dwie odmiany sposobu opisane poniżej.
163 417 a/ Roztwór czwartorzędowej soli amoniowej dodaje się porcjami do roztworu znanej soli kwasu hialuronowego, korzystnie hialuronianu sodu. Po wystarczającym oczyszczeniu, wytrącony nowy kompleks czwartorzędowego hialuronianu amonu rozpuszcza się podczas energicznego mieszania w rozpuszczalniku sprzęgania zawierającym wodny roztwór jonu metalu 3d czwartego okresu układu okresowego oraz rozpuszczalnik, który częściowo miesza się z wodą, korzystnie n-butanol. Następnie, pozostawia się do rozdzielenia dwóch faz, po czym wytrąca kompleks hialuronianu przez dodawanie alkanolu lub alkanonu do fazy wodnej. Osad oddziela się i przemywa.
albo b/ Po dodaniu 2,0 - 3 objętości C^_jalkanolu lub Cj ^alkanonu podczas mieszania do roztworu hialurornanu cynku, odpowiednio do nie izotonizowanego roztworu zawierającego chlorek cynku w ilości równoważnej hialurornanowi, wytrącony hyalurornan cynku odsącza się i przemywa odpowiednio alkanolem lub alkanonem stosowanym do wytrącania. W razie potrzeby hyaluroruan cynku rozpuszcza się w wodzie wolnej od jonów i powtarza wytrącanie.
W celu wytworzenia hyalurornanu cynku wolnego od jonów w postaci stałej osad suszy się w warunkach łagodnych. Natomiast w celu wytworzenia roztworu hialurornanu cynku wolnego od jonów korzystnie rozpuszcza się hialurornan cynku wolny od tego rozpuszczalnika. Według obydwu odmian sposobu wolny od jonów stały lub rozpuszczony produkt otrzymuje się z czystością zależną od jakości wyjściowego hialurornanu cynku.
Wyniki farmakologicznych badań klinicznych kompozycji /przykład XIII/ zawierającej jako składnik aktywny hialurornanu cynku,według wynalazku,przedstawiono w odniesieniu do leczenia wrzodów udowych dla przyspieszenia pokrywania nabłonkiem powierzchni niedoboru nabłonka.
Jako kompozycję kontrolną stosowano kompozycję zawierającą hialurornan sodu.
Badanie prowadzono na 12 lub 14 wrzodach odpowiednio 8 lub 12 pacjentów wykazujących wrzód udowy. Pacjentów podzielono na dwie grupy według płci, wieku,jak również charakteru choroby w sposób podany w tablicy 1.
Tablica I
Składnik aktywny Liczba pacjen- tów Kobieta Mężczyzna Wiek średni Liczba leczonych wrzodów Rodzaj ♦ wrzodów
A V M
Hialuro- nian cynku 12 10 2 63,9 14 2 9 1
Hialuro- nian sodu 8 6 2 65,7 12 - 7 1
«
A = tętniczy; V - żylny; M - mieszany
Leczenie przeprowadzono w ten sposób, że przed podaniem terapii oczyszczającej przeprowadzono aktualne oadarna stanu klinicznego wrzodu. Leczenie odpowiednio hialurornanem cynku lub sodu rozpoczynano na wrzodach bliskich oczyszczeniu albo w przypadkach,gdzle obserwowano znaczne zmniejszenie wchłaniania. Leczenie prowadzono raz dziennie w taki sposób, że kompozycję wkraplano na powierzchnię oczyszczonego wrzodu w ilości zwilżającej powierzchnię ranKi cienką warstwą.
163 417
Kompozycję stosowano przez 4 tygodnie. Na początku leczenia, a następnie raz w tygodniu wypełniano dane i wrzody pacjentów dokumentowano fotograficznie. Pobierano również próbkę do oadania baktenologizznego.
Charrattrystyki , jak również ocenę uszkodzenia oznaczano symbolami według skali podanej w tablicy 2.
Tablica II
Charakterystyka Ocena
PowyeΓccazla /a/
0 0
Poniżej 10 cm 1
W zakresie 10 - 25 cm? 2
powyżej 25 cm? 3
Zakażność /b/
Kinicznie czysty 0
Pokryte w 50¾ 1
Pokryte w 100¾ 2
Martwica /c/
/tykko w przypadku wrzodu tętniczego/
ujemna 0
Poniżej 10¾ 1
U zakresie 10 - 15¾ 2
100¾ 3
Brak matwicy 4
Ocena. Do oceny wartości oddzielnych charakterystyk stosowano ogólną skalę ocen i określano ją nast^ujiąco: s = /a x b x c.’
Wynnki badać farmakologicznych kAmcnnych ilustruje rysunek na fig. 2. Wynnki leczenia aialuloπrzπem cynku przedstawiono na krzywej wyznaczonej krzyżykami, natomiast wyniki leczenia h i aluronannern sodu ilustruje krzywa wyznaczona kwadratami, jako funkcje ilości tygodni obejmujących leczenie. Oznaczenia wartości punkrów na rzędnej przedstawia ogólny indeks ocen obliczony za pomocą wyżej podanego uzoru.
Ola oardziej prawicowego porównania działania hyaluronianu cynku w stosunku do hialunnianu sodu stosowanego dla kontroli wartości relatywne przedstawiono w odniesieniu do wartości wyjśmowych jako 100¾ i przedstawiono na rysunku fig. 3.
Zmianę wartości względnych oceniono zadawalająco jako funkcję Rczby /1 do 4/ tygodni. Po leczeniu n i a lu romanem cynku i sodu lcczba wrzodów po upływie 1, 2, 3 i 4 tygodni badań zmniejszyła się poniżej odpowiednio 90¾. 00¾. 70¾ i 60¾.
Otrzymane wyniki podsumowano w tablicy III.
Tablica III
Skłamik aktywny Tydzień 1 T ydzień 2 Tydzień 3 Tydzień 4
klnpolceJl Pohzi a ł rei a tywnych wartości
90¾ poniżej powyżej poniżej ^'“powyżej 70¾ ponizej 60¾ powyżej poniżej powyżej
Huluronian
cynku 12 2 11 3 11 3 11 3
Hialurornan
sodu 4 8 7 5 6 6 3 9
163 417
Jak stwierdzono w tablicy 3 leczenie hyaluronianern cynku było ka2dego tygodnia bardziej korzystne w porównaniu z wynikami uzyskiwanymi działaniem hialuronianem sodu stosowanym do kontroli .
Statystyczne analizy otrzymanych wyników hipotezy na potwierdzenie korzystnego działania kompozycji hialurornanu cynku były znacznie wyższe /p 99%/ w porównaniu z działaniem hialuronianu sodu.
Podczas dalszych prac statystycznych zbadano bardziej szczegółowo rozdział względnych wyników wartości jako funkcji czasu leczenia. Otrzymane wyniki podsumowano w tablicy I/.
Tablica I/
Składnik ' aktywny kompozycji Liczba i wartość oceny wrzodów
powyżej 90% w zakresie 90 - 70% w zakresie 70 - 50% poniżej 50%
Tydzień 1
Hialurornan cynku 2 7 5 0
Hialuronian sodu 0 3 0 1
Tydzień 2
Hialuronian cynku 0 6 7 1
Hialurornan sodu 4 3 5 0
Tydzień 3
Hialurooman cynku 0 1 0 2
Hialurooman sodu 2 5 5 1
Tydzień 4
Hialuronian cynku 2 1 7 3
Hialurooman sodu 1 5 3 3
Dane z tablicy I/ stanowię poparcie korzyści zastosowania hialurornanu cynku. Bardziej szczegółowe badania statystyczne wykazuję znaczne zmniejszenie zależności od czasu leczenia.
Podsumowując: ocena badań farmakologiczno - klinicznych wykazuje wyższą skuteczność działania hialuronianu cynku nawet przy małej liczbie wrzodów; przy czym korzyść ta jest szczególnie uwydatniona w początkowym okresie leczenia.
Poniższe przykłady ilustrują przedmiot wynalazku.
Zawartość białka hialurornanu /HA/ określono z zastosowaniem metody 0. H. Lowry fi. Biol . Chem. 193 /1951/ _7. Lepkość hialurornanu mierzono lepkościomierzem Ostwald’a w roztworze fizjologicznym solanki w temperaturze 25°C. Wartość lepkości właściwej ekstrapolarowanej do stężenia 0, tj ./7^5'c podano poniżej. Zawartość HA określano metodą Bitter a ZAnal. Blochem. 4, 330 /1962/7.
Przykład I. Wytwarzanie roztworu hialurornanu cynku.
W 20,0 ml dwukrotnie przedestylowanej wody rozpuszcza się 40,10 mg hialuronianu sodu. Wyjściowo stężenie kwasu hialuronowego wynosi więc 2f009 mg/ml, a stężenie równoważne tego roztworu wynosi 4,241 x 10*3 mol/litr /Na + hjti jednostek dimeru kwasu hialuronawego/. W czasie pomiaru do mieszaniny reakcyjnej mikrobiuretą dodaje sią roztwór chlorku cynku o stężeniu 0,5154 mol/litr. Roztwór ten dodaje sią najpierw małymi porcjami /0,05 ml/, a następnie większymi porcjami /0,1 - 0,2 ml/. Zmianę potencjału roztworu mierzy się za pomocą precyzyjnego potencjometru z palczaście rozmieszczonymi elektrodami szklaną selektywną dla jonów sodowych i srebrnę/chlorek srebra. Miareczkowanie kontynuuje się do czasu aż pomiar potencjału nie ulega dalszym zmianom przez dodawanie dodatkowych porcji roztworu miareczkującego. /Układ pomiarowy kalibrowano w warunkach analogicznych do pomiarów praktycznych/.
163 417
Selektywność elektrody selektywnej dla jonów sodu obserwowano również w obecności jonów Zn + w celu kontroli, w której zmiana potencjału w pomiarach praktycznych była powodowana wydzieleniem jonów Na + , a nie Znz+ wprowadzanych do rozioru. foziór chlorku sodu 2,00 x 10 M miareczkowano z zastosowaniem roztworu miareczkującego chlorku cynku w warunkach analogicznych do opi.sanych powyżej. Przy zwiększeni stężenia ZnZ + od 0 do 4 x 10'6 mol/litr obserwowano wzrost potencjału około 2mV, przy czym pomiary praktyczne w analogicznych warunkach wykazywały zmiany około 20mV. Tak więc ocena ta nie stwarzała żadnych trudności. W trakcie pomiarów obliczono wzrost aktywności jonów sodowych z danych zweryfikowanych wytwarzania ilościowego kompleksu cynku.
Poniżej opisano wytwarzanie roztworu chlorku cynku.
Ponieważ roztwór zawierający chlorek cynku w dokładnym stężeniu nie można wytworzyć przez bezpośrednie odmierzenie, to wytwarza się roztwór o stężeniu przybliżonym do żądanego. Do wytwarzania tego roztworu nie ma potrzeby stosowania żadnego kwasu dlatego może mieć miejsce to, że odważony chlorek cynku nie będzie całkowicie rozpuszczalny. Po sedymentacji nierozpuszczalnej pozostałości /około 30 minut/ kolbę wolumetryczną napełnia się do oznaczenia i roztwór sączy się przez sączek bibułkowy.
Dokładne stężenie przesączu określa się przez kompleksometryczne miareczkowanie za pomocą buforu 10 i wskaźnika eryochromowej czerni-T. Roztwór chlorku cynku o dokładnym stężeniu 0,100 mola/litr wytwarza się przez precyzyjne rozcieńczenie tego roztworu.
Charakterystyka hialuronianu sodu stosowanego do wytwarzania roztworu jest następująca Ciężar cząsteczkowy : 1850000 daltonów
Zawartość białka : 0,07¾ wagowych
Absorpcja A ; Q
Lepkość/—^
1% 260 c-8 25 ' C
Zawartość HA *
0,075
13,7 dl/g 98,127 wagowych
HAX = kwas hialuronowy /w skrócie/
Przykład II. Wytwarzanie roztworu do zastosowania dermatologicznego i kosmetycznego .
Do 0,50 g hialuronianu sodu odważonego do 100 ml kolby wolumetrycznej dodaje się 12,5 ml roztworu chlorku cynku o stężeniu 0,100 mola/litr. Inne stężenie chlorku cynku może być również użyte, jednak ilość chlorku cynku powinna być taka sama. Hialuronian sodu pozostawia się do spęcznienia /na 12 h/ w roztworze uzupełnionym do oznaczenia wodą wolną od jonów z otrzymaniem roztworu hialuronianu cynku o 0,57 wag/obj.
Charakterystyka hialuronianu sodu stosowanego do wytwarzania powyższego roztworu jest następująca:
Lepkość ^-70^ : 16,0 dl/g
Zawartość białka : 0,8% wagowych.
Przykład III. Wytwarzania roztworu hialuronianu cynku stosowanego do wjekcji.
Proces opisany w tym przykładzie przeprowadza się w warunkach sterylnych.
Do 0,20 g hialuronianu /czysty jakościowo proszek/ odważonego w 100 ml kolbie wolumetrycznej dodaje się 5,0 ml roztworu chlorku cynku o stężeniu 0,100 mol/litr wytworzonego z dwukrotnie przedestylowanej wody /sterylna, wolna od pyrogenu woda stosowana du lcjekcji/ i uzupełnia do 50 ml dwukrotnie przedestylowaną wodą. Otrzymany roztwór sączy się przez sączek membranowy /wielkość porów 0,44^6/ z otrzymaniem roztworu hialuronianu cynku 0,27 wag/obj.
163 417
Do wytworzenia powyższego roztworu użyto hialuronian sodu o następującej charakterystyce
Jakość ; czysty, wolny od pirogenu sterylny proszek
Ciężar cząsteczkowy ; 1850000
Zawartość białek : 0,07¾ wagowych
1¾ Absorpcja uV a257 : 0,133
a1% ”280 : 0,075
Zawartość HA ; 98,12¾ wagowych
Lepkość ; 13,7 dl/g
Przykład IV. Wytwarzanie roztworu hialuronianu cynku wolnego od jonów. Podczas mieszania do 200 ml 0,50¾ wag/obj. roztworu hialuronianu cynku otrzymanego według przykładu II dodaje się 600 ml etanolu o czystości analitycznej. Wytrącony hialuronian cynku odsącza się na filtrze szklanym, przemywa dwukrotnie każdorazowo 50 ml etanolu tej samej jakości, a następnie suszy pod zmniejszonym ciśnieniem. W ten sposób otrzymuje się 0,88 g hialuronianu cynku, który stosuje się do wytworzenia roztworu 0,50¾ wag/obj. hialuronianu cynku w sposób opisany w przykładzie II.
Otrzymany roztwór hialuronianu cynku nie zawiera chlorku sodu przechodzącego z reakcji hialuronianu cynku z chlorkiem cynku, tak więc jest praktycznie wolny od jonów.
Przykład V. Wytwarzanie hialuronianu cynku wolnego od jonów lub jego roztworów do zastosowania terapeutycznego.
Proces opisany w tym przykładzie prowadzi się w warunkach sterylnych.
Do 500 ml roztworu hialuronianu cynku wytworzonego według przykładu III podczas mieszania dodaje się 1500 ml etanolu /jakościowo najczystszego/. Po dodaniu, układ ten miesza się w czasie 30 minut, osad hialuronianu cynku odsącza się na sączku szklanym, przemywa 3-krotnie każoorazowo 100” ml etanolj /jakościowo najczystszego/ i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem w łagodnych i sterylnych warunkach.
Przykład VI. Wytwarzanie hialuronianu cynku wolnego od jonów. Do roztworu zawierającego 1 g hialuronianu sodu w 400 ml dwukrotnie przedestylowanej wody podczas mieszania dodaje się 200 ml 10¾ wagowo roztworu Hyaminy 1622 /czystej/ /chlorekbenzylodimetylo/-2-/ 2-p-/l,1, 3,3-tetrametylobutylo/fenoksy/-etoksy/etylo/amonu/. Osad, tj. wytworzony kompleks soli czwartorzędowej amonowej kwasu hialuronowego, oddziela się przez odwirowanie, przemywa dwukrotnie każdorazowo 100 ml dwukrotnie przedestylowanej wody i powtórnie odwirowuje. Przemyty osad rozpuszcza się w rozpuszczalniku sprzęgania zawierającym 400 ml 2¾ wag/obj. chlorku cynku w roztworze wodnym /wartość pH 5,0 - 5,4/ oraz 400 ml n-butanolu. Po pozostawieniu do oddzielenia dwóch faz, fazę wodną zawierającą hialuronian cynku sączy się przez filtr membranowy /wielkość porów 0,45,/Ł/, po czym hyaluronian cynku wytrąca się przez dodanie 3 objętości etanolu, przesącza przez filtr szklany, przemywa etanolem i suszy w atmosferze azotu w warunkach łagodnych z otrzymaniem 0,02 g hialuronianu cynku.
W razie potrzeby, z otrzymanego hialuronianu cynku wytwarza się 0,50¾ wag/obj. roztwór, który następnie oczyszcza sięjak opisano w przykładzie IV.
Hialuronian sodu stosowany jako substancja wyjściowa ma następującą charakterystykę;
7C-00
-^7/25^0
Lepkość
Zawartość białka
Hialuronian cynku : 16,5 dl/g : 0,18¾ wag/obj.
można również otrzymać w sposób opisany powyżej wychodząc czwartorzędowych soli amonowych. Jako odpowiednie do tego celu inne czwartorzędowe suje się np:
a/ chlorek karbotetradecyloksymetylotrimetyloamonowy/ patrz węgierski opis patentowy b/ chlorek heksadecylopirydyniowy, c/ chlorek cetylopirydymowy, d/ chlorek trimetyloamonowy ltp.
z innych sole stonr 188537/
163 417
Przykład VII. Wytwarzanie hialuronmanu kobaltu. Proces opisany w przykładzie VI przeprowadza się z tym, że kompleks czwartorzędowej soli amonowej kwasu hialuronowego rozpuszcza się w roztworze wodnym rozpuszczalnika sprzęgania zawierającym 2¾ wag/obj. chlorku kobaltu /11/. 6 H^O oraz n-butanol.
Przykład VIII. Wytwarzanie roztworu wodnego zawierającego 0,50% wag/obj. hialurornanu cynku izotonicznego przez chlorek cynku.
Około 50 ml roztworu chlorku cynku o stężeniu 0,110 mola/litr dodaje się do 0,50 g hialuronianu sodu w 100 ml kolbie wolumetrycznej i pozostawia do spęcznienia na noc. Następnie, hyaluronian sodu rozpuszcza się przez wstrząsanie i kolbę uzupełnia się do oznaczenia roztworem chlorku cynku o stężeniu 0,110 mola/litr.
Ciśnienie osmotyczne otrzymanego roztworu wynosi 0,149 mola/litr wyrażone w równoważnym stężeniu chlorku sodu, a wartość pH wynosi 5,0. U razie potrzeby wartość pH doprowadza się do 5,5 - 5,6 przez dodanie 2,00 ml roztworu octanu sodu o stężeniu 0,150 ml/litr. Po uzyskaniu odpowiedniej wartości pH, ciśnienie osmotyczne roztworu wynosi 0,1489 wyrażone w równoważnym stężeniu chlorku sodu.
Roztwór hialurornanu cynku wytwarza się ze szczególnie czystego hialurornanu sodu opisanego w przykładzie III z dwukrotnie przedestylowanej wody w warunkach aseptycznych, po czym roztwór przesącza się przez filtr membranowy /wielkość porów 0,45/47.
Otrzymany roztwór stosuje się także jako kompozycję do mjekcji.
Przykład IX. Wytwarzanie roztworu wodnego zawierającego 0,2% wag/obj· hialuronianu cynku izotonicznego przez chlorek cynku. Dla końcowej objętości 100 ml odważa się 0,20 g hialurornanu sodu i rozpuszcza w roztworze chlorku cynku o stężeniu 0,120 mola/litr.
Rozpuszczanie i wytwarzanie roztworu chlorku cynku o stężeniu dokładnie 0,120 mola/litr przeprowadza się według przykładu I /w sensie zmiany ilości chlorku cynku/.
Olśnienie osmotyczne roztworu wynosi 0,154 mola/litr wyrażone w równoważnym stęźeeiu chlorku sodu, a wartość pH wynosi 5,3 - 5,4
Zawartość HA : 1,96 mg/ml
Lepkość : 15,9 dl/g
Zawartość białka : 0,015 mg/ml
Czystość roztworu : = 0,015
Oparto się na pomiarze absorbancji przy 660 mm w 1 cm kuwecie.
Roztwór ten wytworzono przez zastosowanie hialuronmanu sodu jakościowo scharakteryzowanego w przykładzie II i stosowanego przede wszystkim do wytwarzania kompozycji dermatologicznych i kosmetycznych.
Przykład X. wytwarzanie roztworu wodnego zawierającego 0,50% wag/obj. hialuromanu cynku czntonccznegn przez glukozę.
Roztwór w przykładzie tym zawiera hialurooman i obliczoną równoważną ilość chlorku cynku.
Oo 0,50 g hialuronmanu sodu odważonego do 100 ml wolumetrycznej kolby dodaje się 12,50 ml roztworu chlorku cynku o stężeniu 0,100 mola/litr. Można również stosować inne stężenie chlorku cynku, jednakże ilość chlorku cynku powinna być ta sama. Hialurornan sodu pozostawia się do spęcznienia na 12 h w roztworze chlorku cynku uzupełnionym do 50 ml wodą wolną od jonów, po czym rozpuszcza przez wstrząsanie. Następnie, dodaje się 24,50 nl roztworu glukozy o stężeniu 1,00 nol/litr i uzupełnia do oznaczenia wodą wolną od jonów.
Ciśnienie osmotyczne roztworu wynosiło 0,1495 mola/litr wyrażone w równoważnym stężeniu _o chlorku sodu, a wartość pH wynosi 5,4. Całkowite stężenie cynku = 1.25 x 10 mola/litr.
Roztwór wytwarza się przez zastosowanie hialuronmanu sodu jakościowo scharakteryzowanego w przykładzie II i stosowanego przede wszystkim do wytwarzania kompozycji dermatologicznych i Kosmetycznych.
Przykład XI. wytwarzanie roztworu wodnego zawierającego 0,2% wag/obj. hialuromanu cynku izotonicznego przez glukozę.
w' przykładzie tym roztwór zawiera hialurorman sodu i obliczoną równomierną ilość chlorku cynku
163 417
Οο 0,20 g hialuronianu sodu odważonego w 100 ml kolbie wolumetrycznej dodaje się 5,0 ml roztworu chlorku cynku o stężeniu 0,100 mola/litr, po czym objętość uzupełnia się do 50 ml dejonizowanę wodę. Po pozostawieniu do spęcznienia na noc, hialuronian sodu rozpuszcza się przez wstrząsanie, dodaje 27,0 ml roztworu glukozy o stężeniu 1,00 mnla/litr, i kolbę uzupełnia się do oznaczenia wodę wolną od jonów.
Ciśnienie osmotyczne roztworu wynosi 0,151 mola/litr wyrażone w równoważnym stężeniu chlorku sodu, a wartość pH wynosi 5,6 -5,7. Całkowite stężenie cynku = 5 x 10*5 mola/litr.
Przykład XII. Wytwarzanie roztworu wodnego zawierającego 0,5% wag/obj. hialuronianu cynku izotonicznego przez sorbit.
Roztwór hlaluronianu cynku opisany powyżej wytwarza się w warunkach aseptycznycn z hialuronianu sodu o szczególnie wysokiej czystości opisanego w przykładzie III i destylowanej wody. Roztwór zawiera chlorek cynku w ilości równoważnej przeliczonej na hialurornan sodu.
Sposób opisany w przykładzie X przeprowadza się z tym wyjątkiem, że zamiast roztworu glukozy stosuje się 23,50 ml roztworu sorbitu o stężeniu 1,00 mola/litr /182,19 g 0-sorbitolu w 1 litrze/, który dodaje się roztwór hlaluronianu sodu.
Otrzymany tym sposobem roztwór przesącza się przez filtr membronowy o wielkości porów
0,45/6. Roztwór ten można stosować w każdym celu z kompozycjami do mjekcji włącznie.
Ciśnienie osmotyczne roztworu wynosi 0,1520 mola/litr wyrażone w równoważnym stężeniu 2 chlorku sodu, a wartość pH wynosi 5,5. Całkowite stężenie cynku = 1,25 x 10 mola/litr.
P r z y k ł a d XIII. Wytwarzanie roztworu zawierającego 0,2% wag/obj. hlaluronianu cynku izotonicznego przez sorbit.
Roztwór opisany w tym przykładzie zawiera chlorek cynku w równoważnej ilości w przeliczeniu na hialuronian sodu.
Opisany poniżej roztwór hlaluronianu cynku wytwarza się w warunkach aseptycznych z hialurunianu sodu o szczególnie wysokiej czystości opisanego w przykładzie III z dwukrotnie przedestylowaną wodą.
Proces według przykładu XII powtarza się z wyjątkiem tego, że rozpuszcza się 0,2 g hialumnianu sodu i stosuje 5 ml roztworu chlorku cynku o stężeniu 0,100 mnla/lltr, po czym dodaje 26,50 ml roztworu sorbitu o stężeniu 1 mola/litr i na koniec roztwór uzupełnia się do 100 ml. Tak otrzymany roztwór przesącza się przez filtr membranowy /wielkość porów 0,45,/6/. Roztwór ten można zastosować w każdym celu z kompozycjami do mjekcji włącznie .
Ciśnienie osmotyczne roztworu wynosi 0,1501 mola/litr wyrażone w równoważnym stężeniu chlorku sndu, a wartość pH wynosi 5,6. Całkowi^ s^tę^nie cynku = 5 χ W3 mola/litr.
Zawartość hillurornanu : 2,03 mg/ml
Lepkość : 161 dl/g
Zawartość bułka : 0,016 mg/ml
Czystość rozporu* : A|gJ^m = 0,010 * U oparciu o absorbancję zmierzoną przy 660 mm w 1 cm kuwecie.
uaricic wy*i
163 417
Fig. 3
163 417
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 10 000 zł

Claims (3)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu układu okresowego pierwiastków, znamienny tym, że dodaje się wodny roztwór zawierający równoważną ilość soli, korzystnie chlorku jednego z jonów metalu 3d czwartego okresu układu okresowego pierwiastków do roztworu wodnego soli metalu alkalicznego, metalu ziem alkalicznych, soli srebra albo czwartorzędowej soli amoniowej kwasu hialuronowego, ewentualnie traktuje się otrzymany wodny roztwór rozpuszczalnikiem, który częściowo miesza się z wodą, korzystnie n-butanolem, a następnie
    - wytrąca otrzymany kompleks z wodnego roztworu za pomocą alkanolu lub alkanonu,
    - oddziela osad od roztworu, a następnie w razie potrzeby
    - suszy go w warunkach łagodnych.
    1, znamienny tym , że jako jon metalu 3d stosuje
  2. 2. Sposób według zastrz. się jon cynku.
  3. 3. Sposób według zastrz. się jon kobaltu.
    1, znamienny t m m , że jako jon metalu 3d stosuje
PL90283942A 1989-02-24 1990-02-23 Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastkówUrzad Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej PL PL PL PL PL PL PL PL163417B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU89891A HU203372B (en) 1989-02-24 1989-02-24 Process for producing hyaluronic associates and pharmaceutical compositions and cosmetics comprising such active ingredient

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL283942A1 PL283942A1 (en) 1991-01-28
PL163417B1 true PL163417B1 (pl) 1994-03-31

Family

ID=10951903

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL90283942A PL163417B1 (pl) 1989-02-24 1990-02-23 Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastkówUrzad Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej PL PL PL PL PL PL PL

Country Status (33)

Country Link
US (1) US5554598A (pl)
EP (1) EP0413016B1 (pl)
JP (1) JP2571312B2 (pl)
KR (1) KR960015624B1 (pl)
CN (2) CN1051228C (pl)
AR (1) AR243538A1 (pl)
AT (1) ATE98964T1 (pl)
AU (1) AU623232B2 (pl)
BG (1) BG61515B2 (pl)
CA (1) CA2027596C (pl)
CZ (1) CZ281000B6 (pl)
DD (1) DD292263A5 (pl)
DE (1) DE69005394T2 (pl)
DK (1) DK0413016T3 (pl)
ES (1) ES2061016T3 (pl)
FI (1) FI101707B1 (pl)
GE (2) GEP19981358B (pl)
GR (1) GR1000869B (pl)
HK (1) HK1003003A1 (pl)
HU (2) HU203372B (pl)
IE (1) IE62408B1 (pl)
IL (1) IL93489A (pl)
LT (2) LT3806B (pl)
LV (2) LV10112B (pl)
MY (1) MY105168A (pl)
NO (1) NO301169B1 (pl)
PL (1) PL163417B1 (pl)
PT (1) PT93237B (pl)
RU (2) RU2099350C1 (pl)
SK (1) SK85790A3 (pl)
UA (2) UA26324A (pl)
WO (1) WO1990010020A1 (pl)
ZA (1) ZA901357B (pl)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GR920100122A (el) * 1991-04-05 1993-03-16 Ethicon Inc Πολυσακχαρίτες οι οποίοι περιέχουν καρβοξύλιο με σταυροειδείς δεσμούς δια την πρόληψιν της προσφύσεως.
DE4115454A1 (de) * 1991-05-11 1992-11-12 Basf Ag Eisen-(iii)-hyaluronate
US5531716A (en) * 1993-09-29 1996-07-02 Hercules Incorporated Medical devices subject to triggered disintegration
IT1273742B (it) * 1994-08-01 1997-07-09 Lifegroup Spa Composizioni ad elevata bioadesivita' e mucoadesivita' utili per il trattamento di epitali e mucose
CN1064372C (zh) * 1994-08-26 2001-04-11 顾其胜 透明质酸钠制剂的制备方法
US6368356B1 (en) 1996-07-11 2002-04-09 Scimed Life Systems, Inc. Medical devices comprising hydrogel polymers having improved mechanical properties
HU225329B1 (en) * 1996-09-12 2006-09-28 Richter Gedeon Vegyeszet Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity
HU225991B1 (en) 1997-04-29 2008-02-28 Richter Gedeon Nyrt Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer
US7192984B2 (en) 1997-06-17 2007-03-20 Fziomed, Inc. Compositions of polyacids and polyethers and methods for their use as dermal fillers
US6869938B1 (en) 1997-06-17 2005-03-22 Fziomed, Inc. Compositions of polyacids and polyethers and methods for their use in reducing adhesions
US5906997A (en) * 1997-06-17 1999-05-25 Fzio Med, Inc. Bioresorbable compositions of carboxypolysaccharide polyether intermacromolecular complexes and methods for their use in reducing surgical adhesions
JP2003089647A (ja) 1999-03-10 2003-03-28 Takada Seiyaku Kk 関節性疾患治療剤
US6566345B2 (en) 2000-04-28 2003-05-20 Fziomed, Inc. Polyacid/polyalkylene oxide foams and gels and methods for their delivery
US6913765B2 (en) 2001-03-21 2005-07-05 Scimed Life Systems, Inc. Controlling resorption of bioresorbable medical implant material
CZ12015U1 (cs) * 2002-01-18 2002-02-25 Cpn Spol. S R.O. Přípravek pro prevenci adheze bandáľe na ránu
GB2392913B (en) * 2002-09-11 2007-04-04 Johnson & Johnson Medical Ltd Wound dressings comprising complexes of oxidised celluloses with silver
PL207044B1 (pl) 2002-09-11 2010-10-29 Johnson & Johnson Medical Ltd Materiał opatrunkowy na rany zawierający kompleks utlenionej celulozy ze srebrem, opatrunek zawierający ten materiał, oraz zastosowanie kompleksu do wytwarzania materiału opatrunkowego
HUP0303779A2 (en) * 2003-11-20 2006-02-28 Richter Gedeon Vegyeszet Pharmaceutical compositions containing hyaluronan complex for the treatment of sclerosis multiplex
WO2006121210A1 (ja) * 2005-05-13 2006-11-16 Takata Seiyaku Co., Ltd. 皮膚状態改善剤
JPWO2006121209A1 (ja) * 2005-05-13 2008-12-18 高田製薬株式会社 湿疹・皮膚炎群治療剤
JP4220513B2 (ja) * 2005-12-01 2009-02-04 株式会社資生堂 カチオン化ヒアルロン酸
CN100348621C (zh) 2005-12-02 2007-11-14 凌沛学 透明质酸铋及其制备方法和应用
CN1329414C (zh) * 2005-12-02 2007-08-01 凌沛学 透明质酸铋钾及其制备方法和应用
FR2918565B1 (fr) * 2007-07-12 2009-10-30 Biopharmex Holding Sa Hydrogel de carboxyalkylamide de chitosan, sa preparation et son utilisation cosmetique et dermatologique
ES2326721B1 (es) 2008-01-04 2010-07-16 Endor Nanotechnologies, S.L. Conjugado de acido hialuronico para el tratamiento cosmetico y procedimiento de preparacion.
TWI516269B (zh) 2009-08-14 2016-01-11 禾伸堂生技股份有限公司 使用於炎症性腸疾病（ｉｂｄ）治療和預防之透明質酸混合物
TWI383796B (zh) 2009-08-14 2013-02-01 Holy Stone Healthcare Co Ltd Use of hyaluronic acid mixture for the treatment and prevention of peptic ulcer and duodenal ulcer
HUP0900717A3 (en) 2009-11-18 2012-02-28 Richter Gedeon Nyrt Pharmaceutical composition for urological use containing zinc hyaluronate
CN102834417B (zh) * 2010-04-14 2015-11-25 丘比株式会社 透明质酸金属盐的制造方法、包含透明质酸金属盐的化妆品的制造方法以及透明质酸锌及其制造方法
ES2376680B8 (es) 2010-08-16 2013-04-30 Nylstar, S.A. Fibra textil cosmética, procedimiento de obtención y su empleo.
CN102552309B (zh) * 2010-12-15 2013-06-05 北京理工大学 一种透明质酸金的用途及其制备方法
JP5763953B2 (ja) * 2011-03-31 2015-08-12 ロート製薬株式会社 外用組成物
CN102961396A (zh) * 2012-12-17 2013-03-13 程玉李 透明质酸金属盐在制备治疗皮肤病药物中的应用、其药物组合物及其制备方法
JP2016535781A (ja) 2013-11-03 2016-11-17 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 経皮薬物送達のためのイオン性液体
EP3503927A1 (en) * 2016-08-29 2019-07-03 The Regents of the University of California Topical formulations based on ionic species for skin treatment
US10898613B2 (en) 2016-09-21 2021-01-26 Nestlé Skin Health Sa Hyaluronic acid gel with a divalent zinc cation
WO2019001784A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 Nestlé Skin Health Sa HYALURONIC ACID GEL WITH A DIVALENT CATION
HRP20240485T1 (hr) 2017-08-24 2024-07-05 Novo Nordisk A/S Pripravci glp-1 i njihova upotreba
US20230082544A1 (en) 2020-02-18 2023-03-16 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulations
CN111647100B (zh) * 2020-07-14 2022-03-01 山东华熙海御生物医药有限公司 一种高分子量透明质酸锌的制备方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US441973A (en) 1890-12-02 rapieff
US3074927A (en) * 1960-04-12 1963-01-22 Paul D Saltman Metallic complexes of reducing sugars
US4141973A (en) * 1975-10-17 1979-02-27 Biotrics, Inc. Ultrapure hyaluronic acid and the use thereof
HU172831B (hu) * 1976-03-31 1978-12-28 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar Sposob poluchenija kompleksov oligo- i poligalakturonnyk kislot s ionami zhiznenno vazhnykh metallov
US4303676A (en) 1980-03-21 1981-12-01 Balazs Endre A Hyaluronate based compositions and cosmetic formulations containing same
IT1229075B (it) 1985-04-05 1991-07-17 Fidia Farmaceutici Medicamenti per uso topico, ottenuti tramite l'impiego dell'acido ialuronico
US4623539A (en) 1983-02-04 1986-11-18 Tunc Deger C Nutrient barrier polysaccharide compositions and method of use
NO161573C (no) 1983-11-25 1989-08-30 Miles Inc Fremgangsmaate til fremstilling av hyaluronsyre.
JPS61286310A (ja) * 1985-06-10 1986-12-16 Kanebo Ltd メ−クアツプ化粧料
US4746504A (en) * 1986-03-14 1988-05-24 Bio-Technology General Corp. Heavy metal salts of hyaluronic acid and their use as antimicrobial agents
AU600483B2 (en) * 1986-03-14 1990-08-16 Bio-Technology General Corporation Heavy metal salts of hyaluronic acid
US4742215A (en) * 1986-05-07 1988-05-03 Personal Computer Card Corporation IC card system
EP0356435B1 (en) * 1987-03-19 1995-10-18 Arthropharm Pty. Limited Anti-inflammatory compounds and compositions

Also Published As

Publication number Publication date
EP0413016A1 (en) 1991-02-20
CN1024557C (zh) 1994-05-18
IE62408B1 (en) 1995-01-25
NO904584D0 (no) 1990-10-23
AR243538A1 (es) 1993-08-31
CA2027596C (en) 2001-01-02
PT93237A (pt) 1990-08-31
ES2061016T3 (es) 1994-12-01
KR920700231A (ko) 1992-02-19
DD292263A5 (de) 1991-07-25
GR1000869B (el) 1993-03-16
UA39174C2 (uk) 2001-06-15
JPH03505231A (ja) 1991-11-14
WO1990010020A1 (en) 1990-09-07
EP0413016B1 (en) 1993-12-22
MY105168A (en) 1994-08-30
GR900100137A (en) 1991-06-28
HU203372B (en) 1991-07-29
RU2021304C1 (ru) 1994-10-15
NO301169B1 (no) 1997-09-22
IL93489A (en) 1994-05-30
HU211465A9 (en) 1995-11-28
CN1051228C (zh) 2000-04-12
AU623232B2 (en) 1992-05-07
ATE98964T1 (de) 1994-01-15
CA2027596A1 (en) 1990-08-25
SK279530B6 (sk) 1998-12-02
IE900637L (en) 1990-08-24
US5554598A (en) 1996-09-10
CZ85790A3 (en) 1995-02-15
HUT53128A (en) 1990-09-28
JP2571312B2 (ja) 1997-01-16
KR960015624B1 (ko) 1996-11-18
HK1003003A1 (en) 1998-09-30
FI905109A0 (fi) 1990-10-17
LT3873B (en) 1996-04-25
GEP19971015B (en) 1997-05-30
FI101707B (fi) 1998-08-14
GEP19981358B (en) 1998-08-25
LV10965A (lv) 1995-12-20
DE69005394T2 (de) 1994-07-28
BG61515B2 (bg) 1997-10-31
CZ281000B6 (cs) 1996-05-15
LV10112B (en) 1995-02-20
AU5108890A (en) 1990-09-26
RU2099350C1 (ru) 1997-12-20
CN1045394A (zh) 1990-09-19
NO904584L (no) 1990-12-21
FI101707B1 (fi) 1998-08-14
SK85790A3 (en) 1998-12-02
LV10112A (lv) 1994-05-10
ZA901357B (en) 1990-11-28
UA26324A (uk) 1999-08-30
LTIP1418A (en) 1995-05-25
LTIP1474A (en) 1995-06-26
PL283942A1 (en) 1991-01-28
CN1086422A (zh) 1994-05-11
DK0413016T3 (da) 1994-02-14
DE69005394D1 (de) 1994-02-03
PT93237B (pt) 1996-01-31
LT3806B (en) 1996-03-25
LV10965B (en) 1996-08-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL163417B1 (pl) Sposób wytwarzania nowych kompleksów deprotonowanego kwasu hialuronowego z jonami metalu 3d czwartego okresu ukladu okresowego pierwiastkówUrzad Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej PL PL PL PL PL PL PL
JP2969584B2 (ja) 眼の治療用組成物
DE3850002T2 (de) Stabilisierung von Deferoxamin für die Chelatbildung mit freien Ionen in physiologischem Serum.
DE3854604T2 (de) Antientzündungsmittel und zusammensetzungen.
EP1561760B1 (en) Low molecular weight heparin salt with triethanolamine
JPS58500485A (ja) ヘパリンの調節解重合による生物学的活性の高純度ムコ多糖類の製法
DE3789432T2 (de) Hochmolekulare Verbindung, bestehend aus einer Einheit einer zum Asialoglykoproteinakzeptor leitenden Verbindung und aus einer Einheit einer chelatformenden, an dieser chemisch gebundenen, Verbindung, und ihre Verwendung.
IE45225B1 (en) New dicarboxylic acid bis-(3,5-dicarboamoyl-2,4,6-triiodoanilides)
WO2001032181A2 (en) Pharmaceutical compositions containing a fluoroquinolone antibiotic drug and xanthan gum
EP1698641A1 (en) Compound selected from sulfated cellulose and salts thereof and dermatitis therapeutic agent
US5472950A (en) Compositions containing cobalt hyaluronic acid complex
US6458774B1 (en) Compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing same
DE602004006024T2 (de) Pharmazeutische zusammensetzung mit einem zink/hyaluronat-komplex zur behandlung von multipler sklerose
DE60212542T2 (de) Injektionslösung enthaltend ein Kolloid aus Eisen und Haiknorpel-Chondroitinsulfat
JPH0539224A (ja) 抗炎症活性を有するコンドロイチン硫酸 コンプレツク ス，その製造方法およびそれを含有する医薬組成物
DE69003061T2 (de) Protein enthaltende wässerige Lösungen.
DE69012818T2 (de) Zusammensetzung zur beseitigung und inaktivierung von schadstoffen im blut oder sonstigen extrazellularen körperflüssigkeiten.
DE68922445T2 (de) Verwendung von Dextrinderivaten in der Behandlung von sauren Zuständen.
HRP930063A2 (en) Novel compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing the same
SI9010671A (en) Novel compositions containing complexes of the hyaluronic acid and the procedure for their preparation
JPS6025995A (ja) オリゴ糖を含む新規生成物、その製法並びに生物学的及び生化学的使用
JPS59116221A (ja) 白金またはパラジウム錯体
JP2873847B2 (ja) エタノール溶液の製造法と該エタノール溶液を使用する化粧料