NO127347B

NO127347B -

Info

Publication number: NO127347B
Application number: NO00166196A
Authority: NO
Inventors: Giangiacomo Nathansohn; Giorgio Winters; Emilio Testa
Original assignee: Lepetit Spa
Priority date: 1966-01-11
Filing date: 1966-12-29
Publication date: 1973-06-12
Also published as: BE692434A; AT269383B; GB1119081A; NL6700108A; SE328283B; FR1509314A; NL6700157A; DE1568971B2; BE692432A; DE1568971A1; DE1568972A1; BE692433A; DE1618613C3; FR6765M; SE330884B; SE330885B; FR1509316A; IL27028A; FR1509315A; ES335489A1

Description

Analogifremgangsmåte til fremstilling av 9a-fluor-llB-hydroksy-pregna-1,4-dien- Illa,16a-d/-oksazolin-3,20-dioner.

Foreliggende oppfinnelse vedrbrer en analogifremgangsmåte til fremstilling av nye terapeutisk virksomme 9a-fluor-lip-hydroksy-pregna-l,4-dien-/l7a,l6a-d7-oksazolin-3,20-dioner med den generelle formel hvor R betegner hydrogen eller en hydroksy- eller alifatisk karboksylisk acyloksy-gruppe med 1-8 karbonatomer og R' betegner hydrogen, en alkylgruppe med 1-8 karbonatomer eller en fenylgruppe.

Disse forbindelser har meget hoy anti-inflammatorisk virkning, hvilket har vist seg ved granulom-pelletproven hos rotter (forsbksmetode som angitt av Meier, Experientia 6, 469, 1959). I denne henseende har de ved fremgangsmåten ifblge oppfinnelsen fremstilte forbindelser hbyere effekt enn andre, velkjente og i terapien benyttede anti-inflammatoriske forbindelser med lignende steroidstruktur, f.eks. hydrocortison; dette frem-går av nedenstående tabell. Hormonvirkningen som glucocorticoider og mineralcorticoider er også hby. Den nedenfor angitte tabell, viser den anti-inflammatoriske og glucocorticoide virkning av noen representative forbindelser fremstilt ifblge foreliggende frem-gangsmåte. Til sammenligning tjener virkningen av hydrocortison, hvis aktivitetsgrad i de to henseender vilkårlig er satt til 1. Den glucocorticoide virkning er.bestemt ved den metode som er angitt av Olson, Endocrinol. 35, 40, 1944.

Ifblge oppfinnelsen fremstilles forbindelsene med formel I ved at et 3, 20-dioksopregna-l, 4,9 (ll)-trien-/l7a, i6a-d7_oksazolin med den generelle formel hvor R og R<*>har den ovenfor angitte betydning, bringes i kontakt med N-brom-acetamid i nærvær av perklorsyre i et inert organisk opplosningsmiddel, hvoretter det oppnådde 9a-brom-ll|3-hydroksysteroid behandles med natriumhydroksyd i vann ved 0 - 5°C og det dannede 9P,ll(3-epoksy-steroid med formelen ; hvor R og R' har den ovenfor angitte betydning, bringes i kontakt med fluorsyre i et inert organisk opplosningsmiddel ved 0 - 5 C. Dette gir således de bnskede 9cc-fluor-lip-hydroksyderivater med formel I. ;De som utgangsmaterialer benyttede pregna-1,4,9(11)-trien-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-oksazoliner kan fremstilles på for-skjellige måter som er velkjente for fagmannen innen steroid-kjemi. For å anskueliggjbre mulighetene for fremstilling av ut-gangsforbindelsene er nedenstående eksempler også forsynt med an-visninger som er av verdi til disses fremstilling, men også andre fremgangsmåter kan brukes til utgangsmaterialets fremstilling. ;Fblgende eksempler tjener til nærmere belysning av frem- ;gangsmåten ifblge oppfinnelsen.;Eksempel 1 ;9ct- fluorpregna- l, 4- dien- llg, 21- diol- 3, 20- dion-/ i7a, l6a- d7- 2'-metyloksazolin. ;Til en opplbsning av 2,4 g pregna-1,4,9(11)-trien-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin 21-acetat i 24 ml tetrahydrofuran, tilsettes 12,8 ml 0,46 N perklorsyre ved 15°C under omrbring. N-bromacetamid (1,1 g) blir deretter tilsatt til blandingen som holdes i mbrket, og omrbres i 4 timer ved romtemperatur. Etter at temperaturen er senket til 10°C tilsettes en mettet opplbsning av natriumbisulfitt for å avfarge blandingen, som etter dette helles i 120 ml isvann. Det utskiller seg et produkt som oppsamles ved filtrering, vaskes med vann og tbrkes, og det oppnåes således 2,81 g urent 9a-brompregna-l,4-dien-lip,21-diol-3,20-dion-/l7a,l6oc-d7-2'-metyloksazolin 21-acetat (utbytte 93%), smeltepunkt 175 - 176°C. ;2,75 g 9a-brompregna-l,4-dien-lip,21-diol-3,20-dion-/I7a, l6oc-d7-2' -metyloksazolin 21-acetat opplbses under en nitro-genstrbm i 137 ml av en blanding metanol:kloroform (3:2). Opp-løsningen fores opp i et isbad og 5,5 ml 1 N NaOH tilsettes i lbpet av 10 minutter fulgt av 5,5 ml innen de neste 40 minutter. Blandingen rbres kraftig i 2 timer og temperaturen holdes mellom ;0 - 5°C, deretter stilles pH-verdien til 7-8 med iseddik. Opplbsningsmidlet inndampes under forminsket trykk til opplbsningen har et.volum på 20 ml, og dette helles i isvann (130 ml). Produktet oppsamles ved filtrering, vaskes med vann og tbrkes. Utbytte 1,6 g (80%), smeltepunkt 221-222°C, og produktet er 9(3,11(3-epoksypregna-1, 4-dien-21-ol-3, 20-dion-/l7a, I6ct-d7-2' -metyloksa-zolin. ;1 g av nevnte produkt opplbses i 9,4 ml av en blanding tilveiebragt ved å blande 4,67 ml hydrofluorsyre med 8,5 ml tetrahydrofuran ved en temperatur på 0°C. Denne opplbsning omrbres i 20 timer ved den samme temperaturen og deretter tilsettes 20 ml tetrahydrofuran under sterk omrbring og avkjbling. Opplbsningen nøytraliseres etterpå ved tilsetning av 24 g natriumbikarbonat fulgt av 1 g natriumsulfat. Det uorganiske stoffet oppsamles og vaskes med etylacetat. Filtratet inndampes til tbrrhet og produktet krystalliseres fra aceton hvilket gir 0,65 g (utbytte 61%) 9<x-fluorpregna-l,4-dien-ll(3,21-diol-3, 20-dion-/l7a, l6<x-d7-2'-metyloksazolin, smeltepunkt 241 - 244°C /a7D= +83,5 (c 0,5, ;CHClj). 21-acetatet smelter ved 252 - 255°C, /a7D= +54,8 (c 0,5, CHCl^). ;Fremstilling av utgangsforbindelsen pregna- 1, 4, 9( ll)- trien- 21- ol-3, 20- dion-/ 17a, l6q- d7- 2'- metyloksazolin 21- acetat. ;22,45 g av 5a-pregnan-3j3,llp-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin 3-acetat opplbses ved 60°C i 131,5 ml dimetylformamid og 44 ml kollidin. Blandingen avkjbles ved 10°C, deretter tilsettes 14,60 ml metansulfonsyreklorid og 15,6 ml dimetylformamid inneholdende SO 2 (5 vektprosent) langsomt under omrbring. Temperaturen gis anledning til å heve seg til ca. 35°C under kraftig omrbring. Temperaturen senkes senere til 15°C og 22 ml vann dryppes ned i blandingen, som så helles i 1500 ml isvann inneholdende 30 g natriumacetat. Bunnfallet oppsamles på et filter, vaskes med vann og tbrkes. Det veier 20,64 g (utbytte 94%), smeltepunkt 153 - 157°C. Det tilveiebragte produkt, som er 5oc-pregn-9(ll)-én-3p-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin 3-acetat, opplbses (20,5 g) i 400 ml metanol. En opplbsning av 11 g K0H i 110 ml vann tilsettes deretter under nitrogen. Blandingen kokes under tilbakelbp i 10 minutter, deretter avkjbles den til romtemperatur og dens pH-verdi stilles til 7-8 med 10 % eddiksyre. Opplbsningsmidlet fordampes under forminsket trykk og bunnfallet oppsamles på et filter, vaskes, tbrkes og omkrystalliseres fra etylacetat, og det tilveiebringes således 14,2 g (utbytte 80%) av 5oc-pregn-9(ll)-en-3|3-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin, smeltepunkt 212 - 214°C. ;Nevnte forbindelse (10,53 g) opplbses i 79 ml vannfri tetrahydrofuran og 79 ml metanol. Findelt kalsiumoksyd (16 g) og a,a'-azo-bis-isobutyronitril (0,52 g) tilsettes, reaksjonen startes ved 25°C etter ca. 1/2 time ved bruk av noen få dråper av en opplbsning av 10,53 g jod i 52 ml vannfri tetrahydrofuran og 32 ml metanol. Blandingen avkjbles så til 5 - 10°C og den resterende jodmengde absorberes i opplbsningen under sterk omrbring. Etter 2 timer finnes det ikke mere fritt jod og opplbsningen er klar. Opplbsningsmidlet fordampes i vakuum ved 25°C, og resten ekstraheres flere ganger med metylenklorid, den tilveiebragte opplbsning vaskes med vandig 2% natriumtiosulfat og deretter med vann. Opplbsningsmidlet fordampes til tbrrhet ved romtemperatur og den urene forbindelsen opplbses så i 58 ml aceton, denne opplbsning tilset tes til en omrort blanding inneholdende 96 ml trietylamin, 96 ml aceton og 58,2 ml eddiksyre. Etter 1 time fordampes aceton under forminsket trykk og produktet bunnfelles ved bruk av 800 ml vann. Det urene produkt krystalliseres fra etanol og veier 9,04 g (utbytte 74%), og produktet er 5a-pregn-9(ll)-en-3(3, 21-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin 21-acetat, smeltepunkt 258 - 26l°C. ;1 g av den ovenfor angitte forbindelsen, suspendert i;50 ml stabilisert aceton, oksyderes ved romtemperatur med ca.;0,7 ml 8 N kromsyre. Etter dette fortynnes blandingen med 50 ml vann og aceton fordampes i vakuum. Bunnfallet filtreres, vaskes med vann og tbrkes. Produktet krystalliseres fra etanol, utbytte 0,9 g (90%), smeltepunkt 205 - 210°C, og produktet er 5a-pregna-9(11)-21-01-3,20-dion-/17a,l6a-d7-2'-metyloksazolin 21-acetat. ;8 g av denne forbindelsen opplbses i 120"ml vandig dioksan og behandles ved 15°C med noen dråper av en opplbsning av 6,1 g brom i 60 ml vannfri dioksan. Reaksjonen startes med 8 ml av en opplosning inneholdende 31 vektprosent vannfri bromsyre i iseddik. På slutten av denne tilsetning gis oppløsningen anledning til å stå i 20 minutter ved 20°C, og helles deretter i 1500 ;ml isvann inneholdende 40 g kaliumacetat. Etter 30 minutter filtreres blandingen, vaskes og tbrkes ved 40°C og 10,3 g urent 2,4-dibrom-derivat tilveiebringes, og dette opplbses i 133 ml vannfri dimetylformamid under nitrogen. ;3,25 g vannfri litiumbromid og 6,53 g vannfri litiumkarbonat tilsettes og blandingen oppvarmes ved 130°C i 5 timer under omrbring;. den avkjbles så og helles i 1000 ml isvann. Produktet ekstraheres med kloroform, vaskes med vann, tbrkes og opplbsningsmidlet avdestilleres under forminsket trykk. Resten acetyleres ved romtemperatur i 15 minutter ved bruk av 6 ml eddiksyreanhydrid i 20 ml pyridin. Blandingen helles i 150 ml isvann inneholdende 15 ml konsentrert saltsyre, produktet oppsamles, vaskes og tbrkes; deretter opplbses det i benzen og denne opplbsning renses ved bruk av en kolonne med silisiumdioksyd og under anvendelse av benzen med en vektprosent etanol som eluerende opplosningsmiddel. Fra den resulterende opplbsning tilveiebringes 4 g (utbytte 50%) pregna-1,4,9(11)-trien-21-ol-3,20-dion-/l7ajl6a-d7-2'-metyloksazolin . 21-acetat. smeltepunkt 197 - 198°C. ;Eksempel 2 9 a- f luorpr egna- 1. 4- di en- 113, 21- di ol- 3. 20- di on- 111 a , 16 a- d7 - 2' - fenyl- oksazolin. ;Til en opplbsning av 1,17 g pregna-1,4,9(ll)-trien-21-' ol-3,20-dion-/l7a,l6oc-d7-2'-f enyloksazolin 21-acetat i 10,2 ml tetrahydrofuran, tilsettes 5,45 ml 0,46 N perklorsyre fulgt av 0,467 g N-bromacetamid i morke. Etter 4 timers rbring ved 15°C fjernes opplbsningsmidlet under forminsket trykk. Utbytte 1,48 g urent 9a-brompregna-l, 4-dien-lip, 21-diol-3, 20-dion-/l7cc,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 21-acetat, smeltepunkt 168 - 175°C. ;Til det ovenfor nevnte urene bromhydrin opplost i 50 ml metanol, tilsettes 2,8 ml N NaOH ved 0°C i lbpet av 10 minutter under en strbm av nitrogen, fulgt av ytterligere 2,8 ml i lbpet ;av 40 minutter. Etter 2 timer ved 0°C under omrbring gjbres blandingen nbytral ved tilsetning av eddiksyré. Metanolen destilleres av og isvann tilsettes. Det uoppløselige produkt (1 g) er 90,113-epoksypregna-l,4-dien-21-01-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-fenyl-oksazolin, smeltepunkt 146 - 147°C, /a7§° -50,3° (c 0,5, CHCl^). ;Dette epoksyd (580 mg) tilsettes til 4,7 ml av en opplbsning, avkjblt til 0°C, av 2,34 g HF i 4,23 ml tetrahydrofuran. Etter 1 time ved 0°C gis temperaturen anledning- til å stige til 20°C og blandingen omrbres i 5 timer. Etter tilsetning av 10 ml tetrahydrofuran avkjbles blandingen og 12 g NaHCO^ og 0,41 g Na2S0^tilsettes gradvis. Blandingen filtreres, bunnfallet vaskes på filteret med 50 ml varm etylacetat og de kombinerte filtrater inndampes til tbrrhet. Resten omkrystalliseres fra benzen-heksan. Utbytte 500 mg, smeltepunkt 181 - 183°C, /a7p° -12,9° (c 0,5, CHCl^),<E>lcm^jAmax 240 - 242. ;Fremstilling av utgangsforbindelsen pregna- 1, 4, 9( ll)- trien- 21- ol-3. 20- dion-/ l7( x, l6a- d7- 2' - f enyloksazolin 21- acetat. 1) 5a-pregnan-33,llp-dibl-20-on-/17a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 3-benzoat. ;Til 51 g av 5a-pregnan-33-ol-ll,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 3-benzoat opplost i en blanding av 1240. ml metanol ;og 200 ml kloroform, tilsettes en opplbsning av 29,7 g semikarbazid hydroklorid i 178 ml vann og 20 ml pyridin ved 60°C. Opplbsningen kokes under tilbakelbp i 5 timer, deretter fordampes opplbsningsmidlet under forminsket trykk inntil volumet har nådd 300 ml. Is- ;vann tilsettes (1 liter) og det tildannede bunnfall gjenvinnes,;vaskes med vann og tbrkes. 20-semikarbazonet som således oppnås;smelter ved 220 - 225°C og. veier 57 g. 11,05 g av dette produkt opplbses i 206 ml etanol og behandles med 32 ml 10% opplosning av natriumbikarbonat i vann ved 60 - 70°C under en nitrogenstrom. Natriumborhydrid (2,09 g) tilsettes deretter i små mengder og blandingen kokes under tilbakelbp i 1/2 time etter at tilsetning- ;en er ferdig. En annen mengde (2,09 g) tilsettes og så kokes opplbsningen under tilbakelbp i 90 minutter. Temperaturen gis an- ;ledning til å synke til 10°C, opplbsningen nbytraliseres med 10% eddiksyre, opplbsningsmidlet fjernes i vakuum og til den således tilveiebragte suspensjon tilsettes 200 ml vann. Bunnfallet er lip-hydroksy-20-semikarbazon-derivatet, av hvilket 11,05 g opp- ;samles, smeltepunkt 275 - 285°C. En mengde på 11 g av.dette produktet opplost i 100 ml metanol kokes under tilbakelbp med 10% ;saltsyre i 1 time. Opplbsningsmidlet fjernes under forminsket trykk og nbytraliseres etter avkjbling med 10% natriumhydroksyd. 5a-pre,gnan-3P,H3-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 3-ben- ;zoat som bunnfelles oppsamles på et filter, vaskes og tbrkes, ut-;bytte 28,53 g, smeltepunkt 203 - 205°C, /a7D+26,3 (c 0,5, CHCl^).;2) 5a-pregn-9(H)-en-3p-ol-20-on-2l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 3-benzoat. ;En opplbsning av 43 g 5a-pregnan-3|3,ll(3-diol-20-.on-/l7a, l6cx-d7-2'-fenyloksazolin 3-benzoat i 290 ml dimetylformamid og 96,7 ml kollidin avkjbles til 10°C, deretter tilsettes langsomt 25 ml; metansulfonsyreklorid og 32 ml dimetylformamid inneholdende ;6 vektprosent S02under kraftig omrbring. Temperaturen gis anled^-;ning til å stige til 32 - 34°C i 10 minutter, deretter senkes1den igjen og 45 ml vann tilsettes langsomt. Reaksjonsblandingen hel- ;les under omrbring i 3200 ml vann ved 80°C; etter avkjbling opp-;samles bunnfallet på et filter og vaskes med vann, 36 g av 9(11)-pregnen tilveiebringes, smeltepunkt 115 - 120°C. 3) '5a-pregn-9(ll)-en-3p-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-fenyl-oksazolin. 35 g 5a-pregn-9(H)-en-33-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-fenyl-oksazolin 3-benzoat opplbses ved kokepunktet i en blanding av 700 ml metanol, 100 ml vann og 20 g kaliumhydroksyd. Etter 60 ;minutter fjernes opplbsningsmidlet og opplbsningen nbytraliseres med fortynnet eddiksyre. Det tilveiebragte bunnfall (28 g) smel- ;ter ved 150 - 155°C;4) 5a-pregn-9(ll)-en-3p,21-diol-20-on-/i7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 21-acetat. ;17,24 g 5a-pregn-9(ll)-en-33-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin opplbses i 700 ral kloroform og behandles med 34,5 ml 24% bromsyre opplost i eddiksyre. Til denne blanding tilsettes 6,36 g brom opplost i 70 ml kloroform i lbpet av 40 minutter under rbring ved 20°C. Etter bromtilsetningen får blandingen anledning til å stå i 10 minutter og blir deretter vasket med en kald opplbsning av natriumbikarbonat inntil en nbytral pH nåes, opplbsningen tbrkes over natriumsulfat og opplbsningsmidlet avdestilleres og det oppnåes således en rest som veier 20,96 g. Dette produkt opplbses i 509 ml aceton og oppvarmes til koketem-peraturen under sterk rbring mens en opplbsning på,36,19 g kaliumacetat i 36,19 ml vann tilsettes sammen med en meget liten mengde jod. Blandingen kokes under tilbakelbp i 6 timer. Det forut tilsatte aceton fjernes så i vakuum og 500 ml vann tilsettes. ;Det utkrystalliseres et produkt og dette gjenvinnes ved filtrering og det er 21-ol-21-acetat-derivatet (16,33 g), smeltepunkt 132 - 134°C, /a7D-17,4 (c 0,5, CHClj), E^m261 per "Xmax 248 - 250 nyu (i metanol). ;Den samme forbindelsen kan også tilveiebringes gjennom 21-jod-derivatet og påfblgende reaksjon av dette med iseddik. 5) 5a-pregn-9(ll)-en-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 21-acetat. ;Til en opplbsning av 9,4 g 5a-pregn-9(ll)-en-33,21-diol-20-on-^l7a,l6a-d7-2<*->fenyloksazolin 21-acetat i 300 ml aceton, tilsettes ca. 6 ml 8 N kromsyre dråpevis under kraftig omrbring. Den endelige suspensjonen fortynnes med isvann og det organiske opplbsningsmidlet fordampes under forminsket trykk.

Ved filtrering tilveiebringes 8,4 g av 3-okso-derivatet, smeltepunkt 115 - 120°C. 6) Pregna-1,4,9(11)-trien-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 21-acetat.

En opplbsning av 25% bromsyre i eddiksyre og deretter

(i lbpet av 2 timer) 6,28 g brom opplost i 60 ml dioksan, tilsettes under omrbring over romtemperatur til en opplbsning av 9,35 g 5a-pregn-9(ll)-en-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-fenyloksazolin 21-acetat i dioksan. Etter 1/2 time helles blandingen i en annen

opplosning av 50 g kaliumacetat i 2000 ml isvann. Bunnfallet oppsamles, vaskes og torkes, deretter opploses det i 130 ml dimetylformamid og etter oppvarming ved 130°C, tilsettes 3,13 g litiumbromid og 6,28 g litiumkarbonat under omroring i en strom av nitrogen. Etter 3 timer helles blandingen i isvann og ekstraheres med etylacetat. Den tilveiebragte opplosning vaskes med vann, opplosningsmidlet fordampes til torrhet. Resten renses kromatografisk ved bruk av silisiumdioksydgel (100 g) og benzen-etylacetat (95:5) som eluerende opplosningsmiddel. Resten som oppnås ved inndampning av opplosningsmidlet renses videre ved krystalliser-ing fra ligroin. Det veier 5 g, smeltepunkt 191 - 194°C, /a7D-98,1 (c 0,5, CHC^, E^m561,5 A max 240 - 242 nyu (i metanol).

Eksempel 5»

9a- fluorpregna- l, 4- dien- ll( 3, 21- diol- 3, 20- dion-/ 17a, l6q- d7- 2'-butyloksazolin.

En opplosning av 4,74 g pregna-1,4,9(ll)-trien-21-ol-3,20rdion-/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin 21-acetat i 44 ml tetrahydrofuran omsettes ved 15°C under roring med 23 ml 0,46 N perklorsyre. Blandingen holdes i morket og 1,97 g N-bromacet-

amid tilsettes ved 10 - 15°C. Etter 1 time odelegges overskuddet av N-bromacetamid ved tilsetning av natriumbisulfitt, det organiske opplosningsmidlet fordampes i vakuum og bunnfallet vaskes med kaldt vann. Det tilveiebragte produkt veier 5,7 g, smeltepunkt 155 - 158°C.

2,5 g av det oppnådde 9oc-brompregna-l, 4-dien-ll(3,21-diol-3, 20-dion-/17a,l6a-d7-2'-butyloksazolin 21-acetat opploses i 120 ml av en blanding av metanol-kloroform (3:2) og behandles ved 0°C med 9,30 ml 1 N natriumhydroksyd i lopet av 40 minutter. Blandingen omrores i 2 timer med utvendig avkjoling, deretter nøytrali-seres den med eddiksyre og det organiske opplosningsmiddel inndampes under forminsket trykk og byttes med vann; det foretas en ekstraksjon med kloroform og den oppnådde opplosning vaskes, torkes og inndampes under forminsket trykk. Resten krystalliseres fra aceton-heksan (1,85 g) og smelter ved 135 - 138°C, /a7D+16,5°

(c 0,5, CHC13).

0,75 g av det tilveiebragte 9(3,113-epoksypregna-l,4-dien-21-ol-3, 20-dion-/l7a, l6cx-d7-21 -butyloksazolin tilsettes til 6 ml tetrahydrofuran inneholdende 3,27 g hydrogenfluorid. Bland-

ingen omrbres i 1 time ved. 0°C og etter dette i 5 timer ved romtemperatur, så helles den i 15 ml tetrahydrofuran og nbytraliseres med natriumbikarbonat. De tildannede uorganiske salter filtreres av og den oppnådde opplbsning konsentreres til torrhet. Resten renses kromatografisk på silisiumdioksydgel (5 g) og ved bruk av benzen-etylacetat (1:1) som eluerende opplosningsmiddel,

og dette gir 0,64 g av stoffet, smeltepunkt 120 - 125°C, /a7D+0,7°

(c 0,5, CHClj).

Fremstilling av utgangsforbindelsen pregna- 1, 4, 9( 11)- trien- 21-ol- 5, 20- dion-/ l7cc. l6cx- d7- 2' - butyloksazolin 21- acetat. 1) 5a-pregnan-33,llp-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin.

115 g av 5a-pregnan-3P-ol-ll,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin 3-valerat opplbses i metanol og opplbsningen varmes til kokepunktet; 540 ml vann, 62,2 ml pyridin og 88 g semikarbazid hydroklorid tilsettes. Blandingen kokes under tilbakelbp i 5 timer, og deretter, etter inndampning av metanolen, helles den i 3500 ml vann. Det dannes et bunnfall og dette er 21-semikarbazid-derivatet, som veier 117 g og smelter ved 229 - 232°C, /a7jQ+43,2 (c 0,5, CHCl^). 60 g av denne forbindelsen opplost i 1200 ml etanol oppvarmes ved 60 - 70 oC og til denne opplbsning tilsettes en annen opplbsning av 18,8 g KHCO^i 18,8 ml vann i en strbm av nitrogen. Deretter tilsettes forsiktig 14,4 g natriumborhydrid til den kokende blanding. Etter 90 minutters koking avkjbles blandingen og dens pH gjbres nbytral med 10% eddiksyre. Etanol avdestilleres, vann tilsettes og det foretas en ekstraksjon med kloroform. Produktet er nesten ikke opplbselig i kloroform slik at det utkrystalliserer seg og veier 58 g, smeltepunkt 235 - 238°C, og produktet er 113-hydroksy-derivatet.

En opplbsning av dette produkt (2 g) i 220 ml metanol

og 220 ml 10% saltsyre kokes under tilbakelbp i 90 minutter. Etanolen destilleres deretter av og den resulterende opplbsning avkjbles og gjbres alkalisk med 10% natriumhydroksyd. 21 g 5a-pregnan-33,113-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin oppnås, smeltepunkt 120 - 125°C. 2) 5a-pregnan-3P,113-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-butyl-oksazolin-2-acetat.

En blanding av 28,2 g 5<x-pregnan-33,113-di ol-20-on- /l7a,l6oc-d7-2'-butyloksazolin, 100 ml pyridin og 28,2 ml eddiksyreanhydrid oppvarmes på et vannbad i 45 minutter. Blandingen helles deretter i isvann inneholdende 100 ml konsentrert salt-

syre. Det dannes et bunnfall, som gjentatte ganger vaskes med vann og tbrkes. Den vandige opplbsning renses kromatografisk ved bruk av silisiumdioksydgel og benzen inneholdende 5% aceton som eluerende opplosningsmiddel. Ved inndampning av opplbsningsmid-

let oppnåes en annen mengde av produktet: totalt utbytte 22 g; smeltepunkt 143 - 145°C, /a7D+60,6 (c 0,5%, CHCl^).

3) 5a-pregn-9(ll)-en-3ø-ol-20-on-/17a,l6a-d7-2'-butyl-oksazolin-3-acetat. 4

17,34 g 5a-pregnan-33,113-diol-20-on-/l7a,l6a—d7-2'-butyloksazolin-3-acetat opplbses i 93,2 ml dimetylformamid og 30,9 ml kollidin. Til denne opplbsning tilsettes 10,45 ml metansulfonsyreklorid ved en temperatur på 10°C, deretter 8,4 ml di-metylf ormamid inneholdende SO2(6 vektprosent). Temperaturen gis nå anledning til å stige til 35°C, blandingen omrbres i 10 min-

utter og deretter avkjbles den og helles i 1000 ml isvann inne-

holdende 10 g natriumacetat. Det foretas en ekstraksjon med CHCl^

og den oppnådde opplbsning tbrkes over natriumsulfat, den filtrer-

es og opplbsningsmidlet fjernes. Det oljeaktige produkt som så-

ledes dannes veier 17,79 g og er 5a-pregn-9(ll)-en-33_°l-20-on-/l7oc, l6cc-d7-2' -butyloksazolin-3-acetat. 4) 5a-pregn-9(11)-en-33-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-butyl-oksazolin.

17,79 g 5a-pregn- 9(ll)-en-3p-ol-20-on- ^l7a,l6cc-d7-2'-butyloksazolin-3- acetat opplost i 300 ml metanol oppvarmes til tilbakelbpskoking, og deretter tilsettes en opplbsning av 4,86 g K0H i 80 ml vann. Blandingen gis anledning til å koke i 10 min-

utter og deretter avdestilleres det organiske opplbsningsmidlet og den resulterende opplbsning nbytraliseres med CH^COOH. Etter ekstraksjon med kloroform og inndampning av opplbsningsmidlet tas resten opp i etanol og bunnfelles ved fortynning med vann. Ut-

bytte 14 g, smeltepunkt 90 - 93°C /a7D+48,6 ( c 0,5%, CHClj).

5) 5 a-pregn-9(11)-en-3 3,21-di ol-20-on-/I7 a-16 a-d7-2'-butyloksazolin-21-acetat.

Til 9,74 g 5a-pregn-9(ll)-en-33-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin opplost i 290 ml kloroform, tilsettes 19,5 ml av en opplosning av 24 % bromsyre i eddiksyre og 4,15 g brom i 39 ml CHCl^. Blandingen gjbres noytral med natriumbikarbonat, kloro-formlaget separeres og inndampes til torrhet under redusert trykk. Resten er 21-brom-derivatet og dette opploses i 48 ml aceton, som tilsettes til en kokende opplosning med fblgende sammensetning: trietylamin, 79,5 ml, aceton 79,5 ml, iseddik 48 ml. Etter 1

times tilbakelopskoking fjernes det organiske opplosningsmiddel i vakuum og 200 ml vann tilsettes. Produktet ekstraheres med kloroform og krystalliseres fra isopropyl-eter og er 21-acetatet, som veier 7,79 g, smeltepunkt 176 - 179°C, /a7D+10,7 (c 0,5%,

<CHCl>j).

6) 5a-pregn-9(ll)-en-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin-21-acetat.

En opplosning av 30 g 5oc-pregn-9(H)-en-3P,21-diol-20-on-/17a,l6a-d7-2'-butyloksazolin-21-acetat i 1300 ml aceton oksyderes ved romtemperatur av et volum på 20 ml av en opplosning av 8 N kromsyre i svovelsyre..Blandingen fortynnes deretter med 1500 ml isvann og nesten alt det organiske opplosningsmiddel fordampes. En ekstraksjon med kloroform, som senere fjernes, gir et produkt som taes opp i dietyleter. Ved inndampning av opplbsningsmidlet oppnås 16,65 g av 3-okso-derivatet, smeltepunkt 170 - 174°C, /«7D +27,2 (c 0,5% CHC13). 7) Pregna-1,4,9(ll)-trien-21-ol-3,20-dion-j/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin-21-acetat.

En opplbsning av 8,36 g 5cc-pregn-9(ll)-en-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-butyloksazolin-21-acetat i 110 ml dioksan, inneholdende 8,36 ml av en opplbsning av 24% bromsyre i eddiksyre, omsettes i lbpet av 60 minutter med 5,68 g brom opplost i 57 ml eddiksyre. Blandingen gis anledning til å stå i 45 minutter og deretter helles den i 1000 ml vann inneholdende kaliumacetat (35 g), og filtreres slik at det dannes 10,7 g 2,4-dibrom-derivat„ Denne forbindelsen opplbses i 42 ml dimetylformamid og tilsettes til en suspensjon av 3,15 g litiumbromid og 6,36 g litiumkarbonat i 87 ml dimetylformamid, omrbres og oppvarmes til 130°C under en strSm av nitrogen i 4 timer, og deretter avkjbles blandingen og helles i isvann. En ekstraksjon med kloroform gir den bnskede forbindelsen, som omkrystalliseres fra aceton-heksan og den veier 8 g, smeltepunkt 127 131°C, /a7D-37,9 (c 0,5%, CHCl^).

Eksempel 4

9a- fluorpregna- l, 4- dien- llg- ol- 3, 20- dion-/ 17a, l6oc- d7- 2'- metyl-oksazolin.

Til en opplbsning av 6 g pregna-1,4,9(ll)-trien-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin i 70 ml tetrahydrofuran, tilsettes 37,5 ml 0,46 N HCIO^ved 10 - 15°C Reaksjonsbeholderen holdes i mbrket og 3,21 g N-bromacetamid tilsettes.

Blandingen omrbres i 1 time ved 10 - 15°C, den avfarges med en mettet opplbsning av natriumbisulfitt og det organiske opplosningsmiddel fjernes under redusert trykk. Resten tas opp i isvann (50 ml) og 9oc-brqm-110-hydroksyderivatet isoleres ved filtrering (7,5 g), smeltepunkt 175 - 178°C.

Dette.produkt opplbses i 400 ml metanol og 165 ml kloroform; til denne opplbsning tilsettes langsomt 20 ml 1 N NaOH ved 0°C under en strbm av nitrogen og blandingen rbres i 2 timer ved 0 - 4°C. Etter nøytralisering med eddiksyre, inndampes det organiske opplosningsmiddel under forminsket trykk og isvann tilsettes, slik at det utskilles 5 g (utbytte 78%) av den krystal-linske 90,11Ø-epoksyforbindelsen, smeltepunkt 266 - 267°C, /a7D+47,6 (CHC13). 16 g av den ovenfor fremstilte 93,H3-epoksypregna-l,4-dien^3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin tilsettes ved 0°C til 15,7 ml av en opplbsning fremstilt ved tilsetning av 7,8 g fluorsyre i 14 ml vannfri tetrahydrofuran. Blandingen omrbres deretter il/2 time ved-0°C og etter-dette i 5 timer ved romtemperatur, og så helles den i en beholder inneholdende 40 ml tetrahydrofuran og nbytraliseres med 40 g natriumbikarbonat og 1,5 g natriumsulfat ved 5°C Den uorganiske massen oppsamles på filteret, den vaskes med varm etylacetat og filtratet inndampes- under forminsket trykk. Det tilveiebringes en mengde på 1,13 g (utbytte 67%) av 9a-fluorpregna-1,4-dien-llB-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin ved omkrystallisering fra aceton, smeltepunkt 296 - 298°C, /a7D= +96,6 (CHC13). Fremstilling av utgangsforbindelsen pregna- 1, 4, 9( ll)- trien- 3. 20-dion-/ l7a. l6q- d7- 2'- metyloksazolin.

l) Til en opplbsning av 50 g 5oc-pregn-9(ll)-en-3B-ol-20-on-/l7a,l6a-d7-2'-metyloksazolin i 1500 ml aceton tilsettes dråpevis en 8 N opplbsning av kromsyre som er tilstrekkelig til å oksy-dere 30-hydroksy-gruppen, ved romtemperatur og under sterk omrbring.

Ved inndampning av det organiske opplosningsmiddel og tilsetning

av vann gjenvinnes 44 g av 3-ketoforbindelsen, utbytte 88%, smeltepunkt 205 - 207°C, /a7D= +74,7 (CHClj). 2) 10 g av den ovenfor fremstilte 5cc-pregn-9(ll)-on-3,20-dion-/l7a,l6oc-d7-2' -metyloksazolin opplost i en blanding tilveiebragt ved å blande 180 ml dioksan og 10 ml 25% bromsyre i eddiksyre, behandles i lbpet av 45 minutter med en opplbsning av 8,8 g brom opplost i 80 ml dioksan, ved romtemperatur. Etter 1/2 time helles blandingen i en annen opplbsning av 50 g. kaliumacetat i 2000 ml isvann, en mengde på 14 g 2,4-dibromderivat tilveiebringes, som deretter opplbses i 180 ml metylformamid. Til den tilveiebragte opplbsning tilsettes 4,5 g litiumbromid og 8,5 g litiumkarbonat, blandingen oppvarmes ved 135°C i 4 timer, så helles den i isvann og den oppnådde opplbsning ekstraheres flere ganger med etylacetat. Ved inndampning av opplbsningsmidlet oppnås 9,4 g av den tilsvarende 1,4,9(ll)pregnatrien. Denne forbindelsen kan renses ved bruk av silisiumdioksydgel under anvendelse av benzen-etylacetat som elueringsmiddel. Utbytte 6,1 g (60%), smeltepunkt 250 - 253°C (fra metanol), /a7D-10,6° (CHC13), E^m4,22 ved X max 238 - 240 nyu.

Eksempel 5

9a- fluorpregna- l, 4- dien- llB, 21- diol- 3, 20-/ l7a, l6q- d7- oksazolin.

Til en suspensjon av 3 g pregna-1,4,9(ll)-trien-21-ol-3,20-dion-^l7cc, I6oc-d7-oksazolin 21-acetat i 50 ml tetrahydrofuran, tilsettes gradvis 16,7 ml HCIO^0,46 N under omrbring. Etter tilsetning av 1,3 g N-bromacetamid rbres blandingen i 2 timer i mbrket, den avfarges med natriumsulfitt, fortynnes med 50 ml vann og det organiske opplbsningsmidlet avdestilleres. Den faste forbindelse oppsamles og tbrkes. Det er 9a-brompregna-l,4-dien-116, 21-diol-3,20-dion 21-acetat, smeltepunkt 157 - l6l°C, utbytte 3,5 g.

Til en opplbsning omrbrt ved 0°C, av 3,4 g av det ovenfor nevnte 9cc-brom-llB-hydroksyderivatet i 100 ml metanol og 30

ml diklormetan, tilsettes 16,1 ml N NaOH i lbpet av 30 minutter.. Etter omrbring i 2 timer ved 0°C tilsettes eddiksyre til det oppnås en nbytral reaksjon, deretter tilsettes 50 ml vann og det organiske opplosningsmiddel inndampes i vakuum til et volum på

ca. 20 ml og resten helles i isvann (150 ml). Bunnfallet oppsamles, vaskes med vann og tbrkes. Utbytte 2,5 g 96,116-epoksypregna-

1,4-dien-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-oksazolin, smeltepunkt 205 -

208°C, 71,6. En mengde på 1 g av nevnte produkt behandles med hydrogeWluorid i tetrahydrofuran noyaktig som beskrevet i det foregående eksempel. Utbytte 0,6 g 9cc-fluorpregna-1,4-dien-116,21-diol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-oksazolin, smeltepunkt 254 - 257°C, /a7D +146,8 (c 0,5, CH^OH).

Fremstilling av utgangsforbindelsen pregna- 1, 4, 9( ll)- trien- 21- ol-3, 20- dion-/ l7a, l6a- d7- oksazolin- 21- acetat.

En suspensjon av 100 g 5a-pregnan-3P-ol-ll,20-dion-/X7<x, l6a-d7-oksazolin 3-formiat med et smeltepunkt på 177 - 179°C,

og /a7D+98,2° (c 0,5, CHCl^), og 10 g vannfri pyridinhydroklorid i 3200 ml etylenglykol, destilleres langsomt (5 timer) under re-

dusert trykk i en slik hastighet at dampene har en temperatur på

85 - 90°C, til det nåes et restvolum på 400 ml. Denne rest av-

kjbles, nbytraliseres med vandig NaHCO^og fortynnes med 3200 ml vann<1>.. Bunnfallet oppsamles og tbrkes. Utbytte 98 g av 5a-pregnan-36-ol-H, 20-dion-/17a, l6oc-d7-oksazolin 20-etylenketal, smeltepunkt 230 - 233°C (fra etylacetat), /a7D100,6° (c 0,5, CHCl^).

Til en blanding av 95 g av det ovenfor angitte produkt

og 2800 ml etanol, oppvarmet til 60°C, tilsettes en opplbsning av 42,5 g KHC0, i 425 ml vann under omrbring. Blandingen oppvarmes til ca. 85 oC og deretter tilsettes gradvis natriumborhydrid, bland-

ingen kokes under tilbakelbp i 2 timer, avkjbles til 10°C og nbytraliseres med eddiksyre. Opplbsningsmidlet fjernes og 2000 ml isvann tilsettes til resten. Utbytte 87,4 g 5cc-pregnan-3B, 116-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-oksazolin 20-etylenketal, smeltepunkt 255 -

257°C (fra etanol), £x7D+96,1 (c 0,7, CB^OH).

Til en opplbsning av 80 g av det ovenfor nevnte ketal i

800 ml eddiksyre, oppvarmet ved 95°C, tilsettes 640 ml vann og oppvarmingen fortsettes i 30 minutter. Etter oppvarmingen tilset-

tes 8000 ml isvann. Bunnfallet (65 g) er 5a-pregnan-36,116-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-oksazolin, smeltepunkt 249 - 252°C, /a7D+135,5°

(c 0,7, CH30H).

3B-acetatet av den ovenfor angitte forbindelse fremstil-

les ved behandling med eddiksyreanhydrid ved romtemperatur. Dette foretas med 78 g, utbytte 80 g, smeltepunkt 210 - 212°C (fra meta-

nol), /a7D+105,2° (cl, CHC13).

En opplbsning av 7,5 g av 36-acetatet i 45 ml dimetyl-

formamid og 15 ml kollidin avkjbles til 10°C og behandles med 4,7 ml metansulfonsyreklorid, fulgt av 1,9 ml dimetylformamid inneholdende 6 % S02under kraftig omrbring. Temperaturen gis anledning til å stige til 35°C, massen avkjbles og 5,5 ml vann tilsettes dråpevis. Blandingen helles så i 500 ml isvann'inneholdende 10 g natriumacetat. Bunnfallet er pregn-9(ll)-en-3B-ol-20-on-/17cc,-l6a-d7-oksazolin 3-acetat, utbytte 69 g, smeltepunkt 140 - 141°C (etanol), /a7D62,1° (c 0,5, CHClj).

Dette acetatet deacyleres ved koking med kaliumhydroksyd i metanol-vann. Dette foretas ut fra 4,5 g, utbytte 3,95 g, smeltepunkt 196 - 197°C (etanol), /a7D73,7° (c 0,5, CHClj).

Til en opplbsning av 15,7 g pregn-9(ll)-en-3(3~ol-20-on-/17a,l6a-d7-oksazolin i 120 ml tetrahydrofuran og 120 ml metanol, tilsettes 24 g CaO og 0,8 g a,a'-aza-bis-isobutyronitril, fulgt av en dråpevis tilsetning av en opplbsning av 15,7 g jod i 80 ml tetrahydrofuran og 50 ml metanol. Diklormetan (800 ml) blir så tilsatt,blandingen filtreres så. Filtratet vaskes med vandig natriumbisulfitt, deretter med vann og inndampes til torrhet under redusert trykk. Resten opplbses i 80 ml aceton, tilsettes til en omrbrt blanding, oppvarmet til ca. 50°C, av 140 ml trietylamin, 140 ml aceton og 80 ml eddiksyre. Etter tilbakelbpskoking i 1 time avdestilleres acetonet under redusert trykk og 1000 ml isvann tilsettes. Utbytte 15 g av 5a-pregn-9(ll)-en-3(3, 21-diol-20-on-/l7a,l6a-d7-oksazolin 21-acetat, smeltepunkt 196 - 198°C, /a7D<+>37,9° (c 0,5, CHClj).

En opplbsning av 11,75 g av produktet ovenfor i 400 ml aceton oksyderes ved 20°C med 11 ml vandig 8 N kromsyre. Ved fortynning med vann tilveiebringes 10 g 5a-pregn-9(ll)-en-21-ol-3,20-dion-/17a,l6a-d7-oksazolin 21-acetat, smeltepunkt 228 - 230°C (etylacetat), /a7D+ 53,9° (c 0,5, CHC13).

Til en opplbsning av 8,5 g av det ovenfor nevnte produkt i 140 ml dioksan, tilsettes 1,7 ml 25 % HBr i eddiksyre under omrbring, fulgt av tilsetning av 6,77 g brom i 70 ml dioksan ved 25°C i lbpet av 1 time. Blandingen helles i 1700 ml isvann inneholdende 35 g kaliumacetat. Det faste stoffet oppsamles, vaskes, tbrkes og opplbses i 150 ml dimetylformamid. Opplbsningen oppvarmes i 5 timer ved 135°C med 3,6 g litiumbromid og 7,2 g litiumkarbonat, deretter helles den i 1200 ml vann. Etter innstilling av pH til 7-8 med HC1, ekstraheres blandingen med etylacetat.

Inndampning av opplbsningsmidlet til et volum på ca. 50 ml gir et

bunnfall, som oppsamles og tbrkes. Utbytte 5 g av pregna-1,4,9(li)-trien-21-ol-3,20-dion-/l7a,l6a-d7-oksazolin, smeltepunkt 253 -

255°C: (aceton), /a7D0° (c 0,5, CHClj), E^m380,6^max 238 -

240 n<y>u (Cf^OH).

Claims

Analogifremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk virksomme 9oc-fluor-llB-hydroksypregna-1,4-dien-^17a,l6cc-d7-oksazolin-3,20-dioner med den generelle formel

hvor R betegner hydrogen eller en hydroksy- eller alifatisk kar- boksylisk acyloksy-gruppe med 1-8 karbonatomer og R' betegner hydrogen, en alkylgruppe med 1-8 karbonatomer eller en fenyl- gruppe, karakterisert ved at et 3,20-dioksopregna- 1,4,9(ll)-trien-/l7a,l6a-d7-oksazolin med den•generelle formel

hvor. R og R' har den ovenfor angitte betydning, bringes i kontakt med N-bromacetamid i nærvær, av perklorsyre i et inert organisk opp- løsningsmiddel, hvoretter det oppnådde 9a-brom-llB-hydroksysteroid behandles med natriumhydroksyd i vann ved 0 - 5°C og det dannede 9(3,116-epoksy-steroid bringes i kontakt med fluorsyre i et inert organisk opplosningsmiddel ved 0 - 5°C.