MX2013006251A - Compuestos de purina y 7 - deazapurina substituidos como moduladores de enzimas epigeneticas. - Google Patents

Compuestos de purina y 7 - deazapurina substituidos como moduladores de enzimas epigeneticas.

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Kevin Wayne Kuntz
Richard Chesworth
Edward James Olhava
Victoria Marie Richon
Roy Macfarlane Pollock
Scott Richard Daigle
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Epizyme Inc
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Abstract

La presente invención se refiere a compuestos de purina y 7-deazapurina substituidos. La presente invención también se refiere a composiciones farmacéuticas conteniendo estos compuestos y métodos para tratar desórdenes, en los cuales metilación de proteína DOTI-mediada juega una parte, tal como desórdenes neurológicos y cáncer, al administrar estos compuestos y composiciones farmacéuticas a sujetos en necesidad de lo mismo.

Description

COMPUESTOS DE PURINA Y 7-DEAZAPU RIN A SUBSTITUIDOS COMO MODULADORES DE ENZIMAS EPIGENÉTICAS Referencia Cruzada con Solicitud Relacionada La presente solicitud reclama la prioridad y el beneficio de la Solicitud Provisional Norteamericana No. 61/419,661, presentada el 3 de diciembre de 2010, cuyo contenido está incorporado en su totalidad a la presente invención como referencia .
Antecedentes de la Invención En células eucarióticas, el ADN está empacado con histonas para formar cromatina. Aproximadamente 150 pares base de ADN se envuelven dos veces alrededor de un octámero de histonas (dos de cada una de las histonas 2A, 2B, 3 y 4) para formar un nucleosoma, la unidad básica de cromatina. Los cambios en la estructura ordenada de la cromatina pueden conducir a alteraciones en la transcripción de genes asociados. Este proceso está altamente controlado debido a que los cambios en los patrones de expresión genética, pueden afectar profundamente los procesos celulares fundamentales, tales como diferenciación, proliferación y apoptosis. El control de los cambios en estructura de cromatina (y por lo tanto de la transcripción) es transmitido por modificaciones covalentes a las histonas, más notablemente de sus colas N-terminal. Estas modificaciones con frecuencia son referidas como epigenéticas, debido a que conducen a cambios heredables en la expresión de gen, pero no afectan la secuencia del propio ADN. Las modificaciones covalentes (por ejemplo, metilación, acetilación, fosforilación y ubiquitinación) de las cadenas laterales de los aminoácidos, son transmitidas en forma enzimática.
Campo de la Invención La adición selectiva de los grupos de metilo a los sitios de aminoácido específicos en las histonas, se controla mediante la acción de una familia única de enzimas conocidas como metiltransferasas de histona. El nivel de expresión de un gen particular es influenciado por la presencia o ausencia de un grupo metilo en un sitio de histona relevante. El efecto específico de un grupo metilo en el sitio de histona particular, persiste hasta que el grupo metilo es eliminado a través de una demetilasa de histona, o hasta que la histona modificada es reemplazada a través del cambio de nucleosoma. En una manera similar, otras clases de enzimas pueden decorar el ADN, y las histonas con otras especies químicas y aún otras enzimas pueden eliminar estas especies para proporcionar el control temporal de la expresión genética.
La recolección orquestada de los sistemas bioquímicos detrás de la regulación de transcripción, debe ser controlada cercanamente, con el objeto de que el crecimiento y diferenciación celular procedan óptimamente. Los estados de enfermedad resultan cuando estos controles son interrumpidos por la expresión y/o actividad aberrante de las enzimas responsables de la modificación del ADN y la histona. En cánceres humanos, por ejemplo, existe una evidencia en crecimiento, que sugiere que la actividad de enzimas epigenéticas desactivadas contribuye a la proliferación de células no controladas asociadas con cáncer, así como a otros fenotipos relevantes de cáncer, tal como migración e invasión de célula incrementada. Más allá del cáncer, existe una evidencia cada vez mayor con respecto al desempeño de las enzimas epigenéticas en una cantidad de otras enfermedades humanas, incluyendo enfermedades metabólicas (tales como diabetes), enfermedades inflamatorias (tales como enfermedad de Crohn), enfermedades neurodegenerativas (tal como enfermedad de Alzheimer) y enfermedades cardiovasculares. Por consiguiente, el modular selectivamente la acción aberrante de las enzimas epigenéticas, mantiene una gran promesa para el tratamiento de un rango de enfermedades.
Existe una necesidad en curso de nuevos agentes que modulen la acción aberrante de las enzimas epigenéticas. La presente invención proporciona compuestos que cumplen con esta necesidad.
Breve Descripción de la Invención La presente invención proporciona compuestos útiles para modular la acción aberrante de las enzimas epigenéticas. La presente invención también proporciona sales, ésteres y/o N- óxidos farmacéuticamente aceptables de estos compuestos.
En un aspecto, la presente invención presenta un compuesto de purina o 7-deazapurina sustituido de la fórmula (I) que se encuentra a continuación, o una sal o éster farmacéuticamente aceptable del mismo.
En esta fórmula, A es O o CH2; cada uno de G y J, independientemente es H, halo, C(0)OH, CíOJO-CT-Ce alquilo o ORa, siendo Ra H, d-Ce alquilo o C(0)-Ci-C6 alquilo, en donde C(0)0-d-C6 alquilo, d-d alquilo o C(0)-d-C6 alquilo es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, ciano hidroxilo, carboxilo, d-C6 alcoxilo, amino, mono-d-Ce alquilamino, di-d-d alquilamino y C3-C8 cicloalquilo; Q es H, NH2, NHRb, NRbRc, Rb o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -?-,-?·,, en donde , es un enlace o enlazador d-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o d-C6 alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc, junto con el átomo N al cual se adhieren, forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que tienen 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcionalmente sustituido con Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-C6 alquilo, OC(O)-d-C6 alquilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de Rb, Rc y ?·, es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en d-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, Cedo arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o RSi, siendo RSi amino, d-C6 alcoxilo, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo RS1 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; L, es N(Y), S, SO o S02; L2 es CO o está ausente cuando L, es N(Y), o L2 está ausente cuando es S, SO o S02, en donde Y es H, Rd, S02Rd o CORd, cuando L2 está ausente, y Y es H o Rd cuando L2 es CO, siendo Rd d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rd opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, -C6 alcoxilo, d-C6 alquilsulfonilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros y con C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituidos con Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-d alquilo, OC(0)-d-d alquilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de R,, R2, R3, R4, R5, R6 y R7, es independientemente, H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo RS2 amino, C-\-C6 alcoxilo, C-¡-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo cada uno de Rs2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^-CQ alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; R8 es H, halo o RS3, siendo RS3 C -Ce alquilo, C2-C3 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo RS3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano amino, C -Ce alcoxilo, mono-CrCe alquilamino, di-CT-Ce alquilamino y C3-C8 cicloalquilo; R9 es donde cada uno de Re, Rf, Rg y Rh, es independientemente -M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazador O-C--C4 alquilo, enlazador Ci-CA alquilo, NH, o N(Rt), siendo Rt C -C6 alquilo, y T2 es H, halo, o RS4, siendo Rs4 C^-Cs alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, y cada uno de los enlazadores O-C1-C4 alquilo, el enlazador C -C4 alquilo, Rt y Rs4 siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, CrC6 alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, Cedo arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, R¡ es H o CrC6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, D es O, NRj o CRjRk, cada uno de Rj y Rk siendo independientemente H o d-C6 alquilo, o R¡ y Rk tomado junto con el átomo de carbono al cual se adhieren, forman un anillo C3-C10 cicloalquilo, y E es-M3-T3, siendo M3 un enlace o un enlazador Ci-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo o ciano, siendo T3 C3-C10 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o heterocicloalquilo de 4 a 10 miembros, y siendo T3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, t i o I , carboxilo, ciano, nitro, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, d-C6 alcoxilo, d-C6 haloalquilo, d-C6 haloalcoxilo, d-C6 alquiltio, d-C6 alquilsulfonilo, d-C6 haloalquilsulfonilo, Ci-C6 alquilcarbonilo, CrC6 alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C4-C12 alquilcicloalquilo, C6-C10 arilo, C6-C10 ariloxilo, C7-C14 alquilarilo, C6-C10 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, C^-CA alquilo, C -C haloalquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, C1-C4 alquilo y Ci-C6 alquilo que es sustituido con hidroxi, halo, C†-C6 alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, hidroxilo, o C^Ce alcoxilo; q es 0, 1 , 2, 3 o 4; m es 0, 1 o 2; y n es 0, 1 o 2.
Un subconjunto de los compuestos de la fórmula cluye los de la fórmula (II): Los compuestos de las fórmulas (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) y (IV) pueden incluir una o más de las siguientes características.
La suma de m y n es al menos 1. m es 1 o 2 y n es 0. m es 2 y n es 0.
A es CH2.
A es O.
L es N (Y) .
Li es SO o S02.
Y es Rd.
Rd es C-|-C6 alquilo.
L2 está ausente.
Al menos uno de Re, Rf, Rg y Rh es halo (tal como F, Cl y Br), C,-C6 alcoxiio opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como OCH3, OCH2CH3l O-iPr y OCF3), C -C6 alquilsulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como S02CF3), o C^-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como CH3, i-Pr, t-Bu y CF3).
R¡ es H o C!-Ce alquilo.
D es O.
D es NRj, por ejemplo, NH.
D es CRjRk, por ejemplo, CH2, CHCH3 o C(CH3)2.
E es -M3-T3, en donde M3 es un enlace o un enlazador d-C3 alquilo, T3 es fenilo, naftilo, tienilo, ciclopropilo o ciclohexilo y T3 es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, t i o I , carboxilo, ciano, nitro, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C^-C6 alcoxilo, CrC6 haloalquilo, d-Ce haloalcoxilo, Ci-C6 alquiltio, C^-Ce alquilsulfonilo, Ci-C6 alquilcarbonilo, d-C6 alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C-,-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C4-C12 alquilcicloalquilo, C6-C10 arilo, C6-C10 ariloxilo, C7-C1 a Iq u i la rilo , C6-C10 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con C!-C4 alquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con Ci-C4 alquilo y d-Ce alquilo que es sustituido con hidroxi, C -Ce alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros.
T3 es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, nitro, ?,-?ß alquilo, CrC6 alcoxilo, Ci-Ce haloalquilo, d-Ce haloalcoxilo, C -C6 alquilsulfonilo, Cedo arilo y C6-C10 ariloxilo, y C7-C14 alquilarilo.
X es N.
X es CRX, por ejemplo, CH.
Q es NH2 o NHR , en donde Rb es -??-??, M siendo un enlace o enlazador Ci-C6 alquilo, y siendo ?? C3-C8 cicloalquilo.
Q es H.
Al menos uno de Re, Rf, Rg y Rh se selecciona del grupo que consiste en F, Cl, CF3, OCF3, S02CF3, C -C4 alquilo y C^-C* alcoxilo. i, 2, R3, R4, R5, 6, 7 y Re cada uno son H.
La presente invención también se refiere a un compuesto de la fórmula (IV) o su N-óxido una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: en donde A es O o CH2; Q es H, NH2, NHRb, NRbRc, OH, Rb o ORb, en donde cada uno de R y Rc es independientemente d-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -IV -??, en donde Mi es un enlace o enlazador d-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o d-C6 alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc, junto con el átomo N al cual se adhieren, forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, que tiene 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcionalmente sustituido con d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-C6 alquilo, OC(O)-Ci-C6 alquilo, ciano, CrC6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-d alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de R , Rc y ?? es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de d-alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o Rsi, siendo RSi amino, d-C6 alcoxilo, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo RS1 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-d-Cs alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; Y es H, Rd, S02Rd o CORd, siendo Rd Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo R opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, d-C6 alquilsulfonilo, amino, mono-CrCs alquilamino, di-d-d alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, y con C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros siendo opcionalmente sustituidos con d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-d alquilo, OC(0)-d-C6 alquilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-d-d alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de y R2 es independientemente H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo Rs2 amino, d-alcoxilo, d-d alquilo, C2-C6 alquenilo o C2-C6 alquinilo, y siendo cada RS2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, d¡-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de Re, Rf, Rg y Rh, es independientemente -M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazador O-d-d alquilo, enlazador C1-C4 alquilo, NH, o N(Rt), siendo Rt d- alquilo y T2 es H, halo, o RS4, siendo Rs4 d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros y cada uno del enlazador O-d-d alquilo, enlazador d-C4 alquilo, Rt y Rs4 siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, d-d alcoxilo, amino, mono-d-d alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, y m es 0, 1 o 2.
Por ejemplo, A es O. En ciertos compuestos de la fórmula (IV), A es O y m es 2.
En ciertos compuestos de la fórmula (IV), X es N.
Por ejemplo, en ciertos compuestos, Q es NH2 o NHRb, en donde Rb es -IV -T-,, IV , siendo un enlace o enlazador C^-Ce alquilo, y siendo ?·, C3-C8 cicloalquilo Por ejemplo, en ciertos compuestos de la fórmula (IV), PM y R2 cada uno son H.
En ciertos compuestos de la fórmula (IV), Y es Rd. Por ejemplo, Rd es C-i-C6 alquilo opcionalmente sustituido con C3-C8 cicloalquilo o halo. Por ejemplo, Ra es C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con ?^?ß alquilo o halo.
La presente invención también se refiere a un compuesto de la fórmula (IV), en donde al menos uno de Re, Rf, Rg y Rh es halo, C -C6 alcoxilo opcionalmente sustituido con uno o más halo; C-,-C6 alquilsulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más halo; Ci-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, C3-C8 cicloalquilo, hidroxi y C^Ce alcoxilo; C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más Ci-C6 alquilo o CN; o heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, hidroxi, C-i-C6 alquilo y Ci-Ce alcoxilo. Por ejemplo, el compuesto de la fórmula (IV) tiene al menos uno de Re, Rf, Rg y Rh seleccionado de F; Cl; Br; CF3; OCF3; S02CF3; oxetanilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, hidroxi, Ci-Ce alquilo y C -C6 alcoxilo; C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de Ci-C4 alquilo; y C1-C4 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, C3-C8 cicloalquilo, hidroxi y C^-C3 alcoxilo.
Por ejemplo, la presente invención se refiere a compuestos de la fórmula (IV), en donde al menos uno de Rt y Rg es alquilo, opcionalmente sustituido con hidroxilo. Por ejemplo, la presente invención se refiere a compuestos en donde al menos uno de Rf y Rg es f-butilo sustituido con hidroxilo.
La presente invención se refiere a un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. La presente invención se refiere a una sal de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. La presente invención también se refiere a un N-óxido del compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. La presente invención también se refiere a una sal de un N-óxido de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. Por ejemplo, la presente invención se refiere a un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 7, 9 a 109 y 111-140.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula (IV) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de un compuesto de la fórmula (IV) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un hidrato de un compuesto de la fórmula (IV) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140, y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un N-óxido de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un N-óxido de la sal de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140, y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un hidrato de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV), y uno o más transportadores farmacéuticamente aceptables.
La presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir cáncer. La presente invención proporciona métodos para tratar cáncer. La presente invención también proporciona métodos para prevenir cáncer. El método incluye administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb) o (Ule). El cáncer puede ser un cáncer hematológico. Preferentemente el cáncer es leucemia. Más preferentemente, el cáncer es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda o leucemia de linaje mezclado.
La presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno transmitido por la translocación de un gen en el cromosoma 11q23. La presente invención proporciona métodos para tratar una enfermedad o trastorno transmitido por la translocación de un gen en el cromosoma 11q23. La presente invención también proporciona métodos para prevenir una enfermedad o trastorno transmitido por la translocación de un gen en el cromosoma. 11q23. El método incluye administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV).
La presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1, desempeña un papel importante en una enfermedad o trastorno transmitidos por metilación de proteína transmitida por DOT1. La presente invención proporciona métodos para tratar una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante, o una enfermedad o trastorno transmitida por la metilación de proteína transmitida por DOT1. La presente invención también proporciona métodos para prevenir una enfermedad o trastorno, en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante, o una enfermedad o trastorno transmitida por metilación de proteína transmitida por DOT1. El método incluye administrar a un sujeto que necesita del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV).
La presente invención proporciona métodos para inhibir la actividad de DOT1L en una célula. El método incluye contactar la célula con una cantidad efectiva de uno o más compuestos de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV).
Aún otro aspecto de la presente invención se refiere a un método para reducir el nivel de metilación del residuo de Lisina 79 de Histona H3 (H3-K79) en una célula. El método incluye contactar una célula con un compuesto de la presente invención. El método puede ser utilizado para disminuir cualquier condición que es originada por, o potenciada por la actividad de DOT1 a través de la metilación H3-K79.
La presente invención se refiere al uso de compuestos tal como aquí se describe en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir cáncer. El uso incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV) para la administración a un sujeto que necesita del mismo de una cantidad terapéuticamente efectiva. El cáncer puede ser un cáncer hematológico. Preferentemente el cáncer es leucemia. Más preferentemente el cáncer es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda o leucemia de linaje mezclada.
La presente invención proporciona el uso de los compuestos aquí descritos en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno transmitida por la translocación de un gen en el cromosoma 11q23. El uso incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV) para administración a un sujeto que necesita del mismo en una cantidad terapéuticamente efectiva.
La presente invención proporciona el uso de los compuestos aquí descritos en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante, o una enfermedad o trastorno transmitido por la metilación de proteína transmitida por DOT1. El uso incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (Ule) o (IV) para administración a un sujeto que necesita del mismo en una cantidad terapéuticamente efectiva.
La presente invención proporciona el uso de los compuestos aquí descritos para inhibir la actividad de DOT1L en una célula. El uso incluye contactar la célula con la cantidad efectiva de uno o más del compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV).
Aún otro aspecto de la presente invención se refiere al uso de los compuestos aquí descritos para reducir el nivel de la metilación del residuo de Lisina 79 de Histona H3 (H3-K79) en una célula. El uso incluye contactar una célula con un compuesto de la presente invención. Dicho uso puede disminuir cualquier condición que sea originada por, o potenciada por la actividad de DOT1 a través de la metilación H3-K79.
En las fórmulas aquí presentadas, se pueden seleccionar variables de los grupos respectivos de las porciones químicas posteriormente definidas en la sección de descripción detallada.
Además, la presente invención proporciona métodos para sintetizar los compuestos anteriores. Después de la síntesis, se puede formular una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos con un transportador farmacéuticamente aceptable para la administración a un mamífero, particularmente humanos, para utilizarse en la modulación de una enzima epigenética. En ciertas modalidades, los compuestos de la presente invención son útiles para tratar, prevenir o reducir el riesgo de cáncer, o para la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de cáncer. Por consiguiente, los compuestos de las formulaciones se pueden administrar, por ejemplo, vía oral, parenteral, ótica, oftálmica, nasal o rutas tópicas, para proporcionar una cantidad efectiva del compuesto al mamífero.
A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos aquí utilizados tienen los mismos significados a los comúnmente comprendidos por un experto en la técnica a la cual pertenece la presente invención. En la especificación, las formas singulares también incluyen el plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario. Aunque los métodos y materiales similares o equivalentes a los aquí descritos pueden ser utilizados en la práctica o pruebas de la presente invención, a continuación se describen métodos y materiales adecuados. Todas las publicaciones, solicitudes de patente, patentes y otras referencias aquí mencionadas están incorporadas a la presente invención como referencia. Las referencias aquí mencionadas no se admiten como una técnica anterior a la invención reivindicada. En caso de conflicto, la presente especificación, incluyendo las definiciones, tomarán el control. Además, los materiales, métodos y ejemplos son únicamente ilustrativos y no pretenden ser limitantes.
Otras características y ventajas de la presente invención, podrán ser apreciadas a partir de la siguiente descripción detallada y las reivindicaciones adjuntas.
Breve Descripción de las Figuras Las figuras 1A y 1B son respectivamente, una tabla y un trazo que demuestra la potencia y selectividad de la actividad anti-proliferativa del Compuesto 2 utilizando un panel de líneas de célula de leucemia humana reajustadas con MLL o no reajustadas con MLL. Las líneas celulares utilizadas en el estudio se describen en la figura 1A.
La figura 2, es un trazo que muestra el crecimiento de tumor en 21 días de dosificación.
La figura 3A, es un trazo que muestra las concentraciones en plasma de estado constante estimadas del Compuesto 2 en los Grupos 4 y 5, tal como se determina a través de las muestras de sangre promediadas tomadas los días 7, 14 y 21.
La figura 3B es un trazo que muestra las concentraciones en plasma del Compuesto 2 trazadas contra el tiempo después de inyección ip.
Descripción Detallada de la Invención La presente invención proporciona una familia de compuestos que se puede utilizar para modular selectivamente la acción aberrante de una enzima epigenética. Además, los compuestos pueden ser utilizados para tratar o prevenir un estado de enfermedad en un mamífero originado o transmitido por la acción aberrante de una enzima epigenética. La presente invención incluye sales, ésteres, tautómeros y N-óxidos farmacéuticamente aceptables de estos compuestos.
La presente invención proporciona compuestos de purina y 7-deazapurina sustituidos novedosos, métodos sintéticos para elaborar los compuestos, composiciones farmacéuticas que los contienen y varios usos de los mismos. 1. Compuestos de Purina Sustituidos v Compuestos de 7- Deazapurina sustituidos La presente invención proporciona los compuestos de la fórmula (I): una sal o éster farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: A es O o CH2; cada uno de G y J, independientemente es H, halo, C(0)OH, CíOJO-Ci-Ce alquilo o ORa, siendo Ra H, C!-Ce alquilo o 0(0)-0·,-06 alquilo, en donde CíOJO-Ci-Ce alquilo, Ci-Cs alquilo o CíOJ-Ci-Ce alquilo es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, ciano hidroxilo, carboxilo, C!-Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, d\-C^-C6 alquilamino y C3-C8 cicloalquilo; Q es H, NH2l NHRb, N RbRc, Rb o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -M1-T1, en donde M es un enlace o enlazador d-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o Ct-Ce alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc, junto con el átomo N al cual se adhieren, forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que tienen 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcionalmente sustituido con Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-Ci-C6 alquilo, OC(O)-C-\-C6 alquilo, ciano, C^-C6 alcoxilo, amino, mono-C C6 alquilamino, di-C-i-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de Rb, Rc y ?? es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en 0·,-06 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o RSi, siendo RSi amino, C^Ce alcoxilo, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo RSi opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C^-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; LÍ es N (Y) , S, SO o S02; L2 es CO o está ausente cuando L- es N(Y), o L2 está ausente cuando es S, SO o S02, en donde Y es H, Rd, S02Rd o CORd, cuando L2 está ausente, y Y es H o Rd cuando L2 es CO, siendo Rd Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rd opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C-,-C6 alcoxilo, C -C& alquilsulfonilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros y con C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituidos con Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-Ci-C6 alquilo, OCíOJ-CT-Ce alquilo, ciano, C^Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de R,, R2, R3, R4, R5, R6 y R7, es independientemente, H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo RS2 amino, C|-C6 alcoxilo, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo cada uno de RS2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C^-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; R8 es H, halo o RS3, siendo RS3 Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo RS3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano amino, C^-C3 alcoxilo, mono-C,-C6 alquilamino, di-Ci-Ce alquilamino y C3-C8 cicloalquilo; R9 es donde cada uno de Re, Rf, Rg y Rh, es independientemente -M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazador O-C!-C4 alquilo, enlazador Ci-C^ alquilo, NH, o N(Rt), siendo Rt d-Ce alquilo, y T2 es H, halo, o RS4 , siendo Rs4 C†-C3 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 a ri lo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, y cada uno de los enlazadores 0-C-|-C4 alquilo, el enlazador C!-C4 alquilo, Rt y s4 siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C!-Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-Ce alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, R¡ es H o C†-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, D es O, NRj o CRjRk, cada uno de Rj y Rk siendo independientemente H o Ci-C6 alquilo, o R¡ y Rk tomado junto con el átomo de carbono al cual se adhieren, forman un anillo C3-C10 cicloalq u ilo , y E es-M3-T3, siendo M3 un enlace o un enlazador C^-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo o ciano, siendo T3 C3-Ci0 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o heterocicloalquilo de 4 a 10 miembros, y siendo T3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, tiol, carboxilo, ciano, nitro, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, Ci-C6 alcoxilo, C^-Ce haloalquilo, C^-C6 haloalcoxilo, Ci-Ce alquiltio, C^Ce alquilsulfonilo, C^Ce haloalquilsulfonilo, Ci-Ce alquilcarbonilo, Ci-C6 alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono-Ci-Ce alquilamino, di-CfCe alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C4-C12 alquilcicloalquilo, C6-C10 arilo, C6-Ci0 ariloxilo, C7-C1 alquilarilo, C6-C10 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, Ci-C4 alquilo, Ci-C4 haloalquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, C1-C4 alquilo y Ci-Ce alquilo que es sustituido con hidroxi, halo, C^Ce alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, hidroxilo, o C -C6 alcoxilo; q es 0, 1 , 2, 3 o 4; m es 0, 1 o 2; y n es 0, 1 o 2.
Por ejemplo, la suma de m y n es al menos 1.
Por ejemplo, m es 1 o 2 y n es 0.
Por ejemplo, m es 2 y n es 0 Por ejemplo, A es CH2.
Por ejemplo, A es O.
Por ejemplo, L1 es N(Y).
Por ejemplo, L es SO o S02.
Por ejemplo, Y es Rd.
Por ejemplo, Rd es CrC6 alquilo.
Por ejemplo, L2 está ausente.
Por ejemplo, cada uno de G y J es independientemente ORa; Por ejemplo, Ra es H.
Por ejemplo, R9 es Por ejemplo, Por ejemplo, al menos uno de Re, Rf, Rg y Rh es halo (tal como F, Cl y Br), d-Ce alcoxilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como OCH3, OCH2CH3, O-iPr y OCF3), d-Ce alquilsulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como S02CF3) o d-Ce alquilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como CH3, i-propilo, n-butilo y CF3).
Por ejemplo, R¡ es H o Ci-C6 alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, s-pentilo y n-hexilo).
Por ejemplo, s bencimidazolilo no sustituido o uno de los siguientes grupos: Por ejemplo, D es O.
Por ejemplo, D es NRj.
Por ejemplo, R, es H .
Por ejemplo, D es CRjRk.
Por ejemplo, cada uno de Rj y Rk es H.
Por ejemplo, E es -M3-T3, en donde M3 es un enlace o enlazador (- -C3 alquilo, T3 es fenilo, naftilo, tienilo, ciclopropilo, o ciclohexilo y T3 es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, tiol, carboxilo, ciano, nitro, C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, Ci-C6 alcoxilo, Ci-C6 haloalquilo, Ci-C6 haloalcoxilo, Ci-C6 alquiltio, Ci-Ce alquilsulfonilo, C^-Ce alquilcarbonilo, C^Ce alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono-CT-Ce alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C4-C 2 alquilcicloalquilo, C6-C10 arilo, C6-C10 ariloxilo, C7-C14 alquilarilo, C6-C10 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con Ci-C alquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con C1-C4 alquilo y Ci-C6 alquilo que es sustituido con hidroxi, Ci-C6 alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros.
Por ejemplo, T3 es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, nitro, C-i-C6 alquilo (por ejemplo , metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, s-pentilo y n-hexilo), C^-C6 alcoxilo, C^-Ce haloalquilo, C^-C6 haloalcoxilo, C -C6 alquilsu Ifonilo, C6-C1D arilo (por ejemplo, fenilo o naftilo), y C6-C 0 ariloxilo y C7-C14 alquilarilo.
Por ejemplo, E es Por ejemplo, X es N.
Por ejemplo, X es CRX.
Por ejemplo, X es CH.
Por ejemplo, Q es NH2 o NHRb, en donde Rb es -M -T siendo M¡ un enlace o enlazador Ci-C6 alquilo y siendo ?? C3-C8 cicloalquilo.
Por ejemplo, Q es H.
Por ejemplo, R,, R2, R3, R , R5, Re, 7 y e cada uno son H.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que J, entonces J no es hidroxilo.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que G, entonces G no es hidroxilo.
Por ejemplo, T2 no es halo cuando M2 es S02, SO, S, CO o O.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, el cual se enlaza a M2 a través de un heteroátomo.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, el cual se enlaza a M2 mediante un átomo N.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, el cual se enlaza a M2 mediante un átomo C.
La presente invención proporciona los compuestos de la fórmula (II): sal o éster farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: A es O o CH2; Q es H, NH2, NHRb, NRbRc, R o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc son independientemente C^Ce alquilo, C2-Ce alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C 0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -M1-T1 en donde M es un enlace o un enlazador Ci-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo, o C-,-C6 alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc, junto con el átomo N al cual se adhieren, forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que tiene 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcionalmente sustituido con C^-Ce alquilo, C2-Ce alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-Ci-C6 alquilo, OC(0)-d-C6 alquilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de R , Rc y T es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano o Rsi, siendo RSi amino, C^-C6 alcoxilo, C -C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rsi opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; L1 es N (Y) , S, SO o S02; l_2 es CO o está ausente, cuando es N(Y) o L2 está ausente cuando es S, SO o S02, en donde Y es H, Rd, S02Rd o CORd, cuando L2 está ausente, o Y es H o Rd cuando L2 es CO, siendo Rd Ci-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rd opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^-C6 alcoxilo, Ci-C6 alquilsulfonilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros y con C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros siendo opcionalmente sustituidos con Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-C6 alquilo, OC(0)-d-d alquilo, ciano, d-d alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-d alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-d0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de Ri, R2, R3, R , Rs, e y R7, es independientemente H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo RS2 amino, Ci-C6 alcoxilo, C:-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo o C2-C6 alquinilo, y siendo cada RS2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; R8 es H, halo o RS3, siendo RS3 Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo o C2-C6 alquinilo, y siendo RS3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano amino, Ci-C6 alcoxilo, mono-CrC6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino y C3-C8 ciclo cual cada una de Re, Rf, Rg y , son independientemente -M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazador O-C1-C4 alquilo, enlazador C^-C4 alquilo, NH o N(Rt), siendo Rt C^-C6 alquilo y T2 es H, halo, o RS4, siendo RS4 C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros o heteroarilo de 5 a 10 miembros, y cada enlazador 0-d-C4 alquilo, enlazador d-d alquilo, Rt y Rs4 siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, d-d alcoxilo, amino, mono-d-d alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 a r i I o , heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, R¡ es H o CrC6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-d alcoxilo, amino, mono-d-d alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-CB cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, D es O, NR o CRjRk, cada uno de R, y Rk siendo independientemente H o d-d alquilo o R¡ y Rk tomados junto con el átomo al cual se adhieren, forman un anillo C3-C10 cicloalquilo, y E es -M3-T3, siendo M3 un enlace o enlazador d-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo o ciano, siendo T3 C3-C10 cicloalquilo, C6-d0 arilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros o heterocicloalquilo de 4 a 10 miembros, y siendo T3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, tiol, carboxilo, ciano, nitro, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, d-d alcoxilo, d-d haloalquilo, d-d haloalcoxilo, d-d alquiltio, d-d alquilsulfonilo, Ci-C6 haloalquilsulfonilo, d-d alquilcarbonilo, d-d alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono- Ci-C6 alquilamino, di-C^-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C -C12 alquilcicloalquilo, C6-C10 arilo, C6-C10 ariloxilo, C7-C14 alquilarilo, C6-C10 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, C1-C4 alquilo, Ci-C4 haloalquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, C1-C4 alquilo y Ci-C6 alquilo que se sustituye con hidroxi, halo, C -Ce alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, hidroxilo o C^Ce alcoxilo; q es O, 1 , 2, 3 o 4, m es 0, 1 o 2; y n es 0, 1 o 2.
Por ejemplo, la suma de m y n es al menos 1.
Por ejemplo, m es 1 o 2 y n es 0.
Por ejemplo, m es 2 y n es 0 Por ejemplo, A es CH2.
Por ejemplo, A es O.
Por ejemplo, L es N(Y).
Por ejemplo, es SO o S02.
Por ejemplo, Y es Rd.
Por ejemplo, Rd es C^-Ce alquilo.
Por ejemplo, L2 está ausente.
Por ejemplo, Por ejemplo, al menos uno de Re, Rf, Rg y Rh es halo (tal como F, Cl y Br), Ci-C6 alcoxilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como OCH3, OCH2CH3, O-iPr y OCF3), Ci-Ce alquilsulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como S02CF3), o C^Ce alquilo opcionalmente sustituido con uno o más de halo (tal como CH3, i-propilo, n-butilo y CF3).
Por ejemplo, R| es H o C^-Ce alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, pentilo o n-hexilo).
Por ejemplo, bencimidazolilo no sustituido o uno de los siguientes grupos: Por ejemplo, D es O.
Por ejemplo, D es NRj.
Por ejemplo, Rj es H .
Por ejemplo, D es CR¡Rk.
Por ejemplo, cada uno de Rj y Rk es H.
Por ejemplo, E es -M3-T3, en donde M3 es un enlace o un enlazador C^-C3 alquilo, T3 es fenilo, naftilo, tienilo, ciclopropilo, o ciclohexilo, y T3 es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, t i o I , carboxilo, ciano, nitro, Ci-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C-¡-C6 alcoxilo, C^-Ce haloalquilo, Ci-C6 haloalcoxilo, CrC6 alquiltio, d-Ce alquilsulfonilo, C-i-Ce alquilcarbonilo, d-Ce alcoxicarbon ilo , oxo, amino, mono-d-Ce alquilamino, di-d-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C -C12 alquilcicloalquilo, C6-C10 arilo, C6-C 0 ariloxilo, C7-C14 alquilarilo, C6-Ci0 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con d-d alquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con CrC4 alquilo, y CrC6 alquilo que es sustituido con hidroxi, CrC6 alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros.
Por ejemplo, T3 es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, nitro, d-d alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, s-pentilo y n-hexilo), d- alcoxilo, d-haloalquilo, d-d haloalcoxilo, d-C6 alquilsulfonilo, C6-Ci0 arilo (por ejemplo, fenilo o naftilo), y C6-Ci0 ariloxilo, y C7-C4 alquilarilo.
Por ejemplo, X es N.
Por ejemplo, X es CRX.
Por ejemplo, X es CH.
Por ejemplo, Q es NH2 o NHRb, en donde Rb es -? -? , siendo t un enlace o enlazador C -C6 alquilo y siendo ?? siendo C3-C8 cicloalquilo.
Por ejemplo, Q es H.
Por ejemplo, R f R2, R3, R , R5- Re, R7, y Rs cada uno son H.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que J, entonces J no es hidroxilo.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que G, entonces G no es hidroxilo.
Por ejemplo, T2 no es halo cuando M2 es S02, SO, S, CO o O.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 a través de un heteroátomo.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 mediante un átomo N.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 mediante un átomo C.
La presente invención proporciona los compuestos de la fórmula (Illa) o (lllb): sal o éster farmacéuticamente de los mismos, en donde: A es O o CH2; cada uno de G y J, es independientemente, es H, halo, C(0)OH , C(0)0-C C6 alquilo o ORa, Ra siendo H, d-C6 alquilo o C(0)-d-C6 alquilo, en donde C(O)O-d-C6alquil0, d-C6 alquilo o C(0)-Ci-C6 alquilo es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, ciano hidroxilo, carboxilo, d-C6 alcoxilo, amino, mono-d- C6 alquilamino, d¡-d-C6 alquilamino, y C3-C8 cicloalquilo; Q es H, NH2l NHRbl NRbRc, Rb, o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc es independientemente Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -MÍ-TÍ en donde i es un enlace o un enlazador d-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o C -C6 alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc. junto con el átomo N al cual se adhieren, forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que tiene 0 o 1 heteroátomo adicionales para un átomo N opcionalmente sustituido con C -C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, 0(0)0-0,-06 alquilo, OC(O)-Ci-C6 alquilo, ciano, C Ce alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de Rb, Rc. y es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-d-Ce alquilamino, C3-CB cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o RSi, siendo R amino, C ! - C 6 alcoxilo, Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo RSi opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C -C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C!-Cealquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; L, es N (Y) , S, SO, o S02; L-2 es CO o está ausente cuando !_·, es N(Y) o está ausente cuando es S, SO, o S02, en donde Y es H, Rd, S02Rd, o CORd cuando está ausente, o Y es H o cuando Rd es CO, siendo Rd C -C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C 0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rd opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en Ci-C6 alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-Ce alcoxilo, C!-Ce alquilsulfonilo, amino, mono-C^Ce alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C 0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros y con C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido en forma adicional con C!-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-C1-C6 alquilo, OC^-d-Ce alquilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-Ce alquilamino, di-Ci-Ce alquilamino, C3-C8cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de R,, R2, R3, R4, Rs, Re, y R?, es independientemente, H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo RS2 amino, Ci-Ce alcoxilo, Ci-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo cada uno de RS2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C1-C6 alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; R8 es H, halo o RS3> siendo RS3 d-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo RS3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano amino, Ci-C6 alcoxilo, mono-CrC6 alquilamino, di-C^Ce alquilamino, y C3-C8 cicloalquilo; cada uno de Re, Rf, Rg, y Rh, es independientemente es - M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazado a 0-C -CA alquilo, enlazado a Ci-C4 alquilo, NH, o N(Rt), siendo Rt d-Ce alquilo, y T2 es H, halo, o RS4, siendo RS4 d-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, y cada uno del enlazador O-d-C4 alquilo, enlazador C -C4 alquilo, RT, y siendo RS4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C-i-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C|-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros, RT es H o C^-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; q es 0, 1 , 2, 3, o 4; m es 0, 1 , o 2; y n es 0, 1 , o 2.
Por ejemplo, la suma de m y n es al menos 1.
Por ejemplo, m es 1 o 2 y n es Por ejemplo, m es 2 y n es 0.
Por ejemplo, A es CH2.
Por ejemplo, A es O. ejemplo, Li es N(Y) Por ejemplo, Li es SO o S02.
Por ejemplo, Y es RD.
Por ejemplo, Rd es CI-CB alquilo.
Por ejemplo, L2 está ausente.
Por ejemplo, cada uno de G y J es independientemente es ORa.
Por ejemplo, Ra es H.
Por ejemplo, al menos uno de Re, Rf, Rg, y Rh es halo (tal como F, Cl, y Br), Ci-Ce alcoxilo opcionalmente sustituido con uno o más halo (tal como OCH3, OCH2CH3, O-iPr, y OCF3), C -C6 alquiisulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más halo (tal como S02CF3), o d-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más halo (tal como CH3, i-propilo, n-butilo, y CF3).
Por ejemplo, R; es H o C,-C6 alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, s-pentilo y n-hexilo).
Por ejemplo, es bencimidazolilo no sustituido o uno de los siguientes grupos: F3C¾S :H v ofr a H- Por ejemplo, X es N.
Por ejemplo, X es CRX.
Por ejemplo, X es CH.
Por ejemplo, Q es N H2 o N H Rb, en donde R es -?,-?,, siendo un enlace o enlazador ?t-?ß alquilo y siendo ?·, C3-C3 cicloalquilo.
Por ejemplo, Q es H.
Por ejemplo, R, , R2, R3, R4, 5, e, R7, y Re cada uno son H.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que J, entonces J no es hidroxilo.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que G, entonces G no es hidroxilo.
Por ejemplo, T2 no es halo cuando M2 es S02, SO, S, CO o O.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 mediante un heteroátomo.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 a través de un átomo N.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 mediante un átomo C.
La presente invención proporciona los compuestos de la fórm u la (lile): sal o éster farmacéuticamente de los mismos, en donde: A es O o CH2; cada uno de G y J, es independientemente H, halo, C(0)OH , CíOJO-d-Ce alquilo o ORa, siendo Ra H, C^-Ce alquilo o C(0)-Ci-Ce alquilo, en donde C(0)0-Ci-C6 alquilo, Ci-C6 alquilo o CíOJ-C^-Ce alquilo es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, ciano hidroxilo, carboxilo, C^-C6 alcoxilo, amino, mono-Cr C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, y C3-C8 cicloalquilo; Q es H, NH2, N H Rb, NRbRc, Rb, o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc es independientemente d- alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -??-?? en donde IV es un enlace o enlazador C-i-C6 alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o d-C6 alcoxilo y T-, es C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o R y Rc, junto con el átomo N al cual se adhieren forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que tienen 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcionalmente sustituido con d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-Ce alquilo, OC(O)-d-d alquilo, ciano, d-d alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-d alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo 5 a 6 miembros, y cada uno de Rb, Rc, y T1 es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en CrC6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, Cedo arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o RS , siendo RSi amino, d-d alcoxilo, d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo RSi opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^Ce alcoxilo, amino, mono-C^Ce alquilamino, di-C!-Cealquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; L es N (Y) , S, SO, o S02; l_2 es CO o está ausente cuando es N(Y) o L2 está ausente cuando es S, SO, o S02, en donde Y es H, Rd, S02Rd, o cuando CORd está ausente, o Y es H o Rd cuando es CO, siendo Rd CrC6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y Rd siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, Ci-C6 alquilsulfonilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C!-Ce alquilamino, C3-C cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros y con C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con C^Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-Ci-C6 alquilo, OC(0)-C-i-C6 alquilo, ciano, d-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de R-i, R2, R3, R , Rs> e, y R7. es independientemente H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Rs2, siendo RS2- amino, C^-Ce alcoxilo, C-i-C6 alquilo, C2-C6alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo cada RS2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, (^-?ß alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; R8 es H, halo o RS3, s3 siendo C^Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6 alquinilo, y siendo RS3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano amino, C^-Ce alcoxilo, mono-C!-Ce alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, y C3-C8cicloalquilo; D es O, NRj, o CRjRk, cada uno de R¡ y Rk es independientemente siendo H o C^-Ce alquilo, o R¡ y Rk tomado junto, con el átomo de carbono al cual se adhieren forman un anillo C3-C10 cicloalquilo; E es -M3-T3, siendo M3 un enlace o enlazador Ci-Ce alquilo opcionalmente sustituido con halo o ciano, T3 siendo C3-C10 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o heterocicloalquilo de 4 a 10 miembros, y T3 siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, hidroxilo, tiol, carboxilo, ciano, nitro, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, d-C6 alcoxilo, Ci-C6 haloalquilo, d-C6 haloalcoxilo, d-C6 alquiltio, C,-C6 alquilsulfonilo, d-C6 haloalquilsulfonilo, d-C6 alquilcarbonilo, d-C6 alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono-Ci-C6alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C4-C12 alquilcicloalquilo, C6-Cio arilo, Ce-Cío ariloxilo, C7-C14 alquilarilo, C6-Cio aminoariloxilo, C6-Ci0 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, d-C4 alquilo, d-C4 haloalquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, d-d alquilo, y d-Ce alquilo que es sustituido con hidroxi, halo, d-C6 alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con halo, hidroxilo, o d-C6 alcoxilo; q es 0, 1 , 2, 3, o 4; m es 0, 1 , o 2; y n es 0, 1 , o 2.
Por ejemplo, la suma de m y n es al menos 1.
Por ejemplo, m es 1 o 2 y n es 0.
Por ejemplo, m es 2 y n es 0.
Por ejemplo, A es CH2.
Por ejemplo, A es O.
Por ejemplo, Li es N(Y).
Por ejemplo, Li es SO o S02.
Por ejemplo, Y es Rd.
Por ejemplo, Rd es C†-Ce alquilo.
Por ejemplo, L2 está ausente.
Por ejemplo, cada uno de G y J independientemente es ORa.
Por ejemplo, Ra es H.
Por ejemplo, D es O.
Por ejemplo, D es NRj.
Por ejemplo, R, es H .
Por ejemplo, D es CR,Rk.
Por ejemplo, cada uno de R, y Rk es H.
Por ejemplo, E es -M3-T3, en donde M3 es un enlace o enlazador C1-C3 alquilo, T3 es fenilo, naftilo, tienilo, ciclopropilo, o ciclohexilo, y T3 es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, t i o I , carboxilo, ciano, nitro, Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, d-C6 alcoxilo, d-C6 haloalquilo, C -C6 haloalcoxilo, C -C6 alquiltio, Ci-C6 alquilsulfonilo, C^-Ce alquilcarbonilo, C!-Ce alcoxicarbonilo, oxo, amino, mono-d-Ce alquilamino, d¡-C-i-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C4-C 2 alquilcicloalquilo, C6-C 0 arilo, C6-C10 ariloxilo, C7-C14 alquilarilo, C6-Ci0 aminoariloxilo, C6-C10 ariltio, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros opcionalmente sustituido con C1-C4 alquilo, heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con C-|-C6 alquilo, y Ci-C6 alquilo que es sustituido con hidroxi, Ci-Ce alcoxicarbonilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C 0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros.
Por ejemplo, T3 es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, nitro, C^Ce alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t- butilo, n-pentilo, s-pentilo y n-hexilo), C C6 alcoxilo, Ci-Ce haloalquilo, C!-Ce haloalcoxilo, C-,-C6 alquilsulfonilo, C6-C10 arilo (por ejemplo, fenilo o naftilo), y C6-C-|0 ariloxilo, y C7-C14 Por ejemplo, X es C X.
Por ejemplo, X es CH.
Por ejemplo, Q es NH2 o NHRb, en donde Rb es -??-??, MÍ siendo un enlace o un enlazador C^-C6 alquilo y siendo ?? C3-C8 cicloalquilo.
Por ejemplo, Q es H.
Por ejemplo, R1 f R2, R3, R4, R5, e, R7, y Re cada uno son H.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que J, entonces J no es hidroxilo.
Por ejemplo, cuando R8 es halo y se adhiere al mismo átomo de carbono que G, entonces G no es hidroxilo.
Por ejemplo, T2 no es halo cuando M2 es S02, SO, S, CO o O.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual se enlaza a M2 mediante un heteroátomo.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual es enlazado a M2 mediante un átomo N.
Por ejemplo, T2 es un heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros el cual es enlazado a M2 a través de un átomo C.
La presente invención también se refiere a un compuesto de la fórmula (IV) o su N-óxido o su sal farmacéuticamente aceptable del mismo: (IV), en donde A es O o CH2; Q es H, NH2, NHRb, N RbRc, OH, Rb, o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc es independientemente es C-i-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalq u ilo , C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -Mi-?? en donde Mi es un enlace o enlazador C,-C6alquilo opcionalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o Ci-C6 alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc, junto con el átomo N al cual se adhiere, forma un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros que tiene 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcionalmente sustituido con C-¡-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, CíOJO-Ci-Ce alquilo, OC(O)-C^-Cß alquilo, ciano, Ci-Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de Rb, Rc> y "? es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C!-Ce alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-Ce alquilamino, C3-C8cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o RSi, siendo R Si amino, Ci-Ce alcoxilo, C -C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y Rsi siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros; Y es H, Rd, S02Rd, o CORd, Rd siendo C C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rd opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de <- -06 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-Ce alcoxilo, C-1-Ce alquilsulfonilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C^Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroarilo de 5 a 6 miembros y con C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido con Ci-C6 alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-C6 alquilo, OCíOJ-C^Ce alquilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-C-|-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C 0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroariio de 5 a 6 miembros; cada uno de R^ y R2 es independientemente H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo RS2 amino, Ci-Ce alcoxilo, C -C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, o C2-C6alquinilo, y siendo cada Rs2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, Ci-C6 alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, d -C -C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroariio de 5 a 6 miembros; cada uno de Re, Rf, Rg, y Rh, es independientemente es -M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazador 0-C1-C4 alquilo, enlazador Ci-C4 alquilo, NH, o N(Rt), siendo Rt Ci-C6 alquilo, y T2 es H, halo, o RS4, siendo RS4 Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, o heteroariio de 5 a 10 miembros, y cada uno de enlazador 0-C!-C4 alquilo, enlazador C1-C4 alquilo, Rt, y siendo Rs4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C^-Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, d i -C t -C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, y heteroariio de 5 a 6 miembros, y m es 0, 1 , o 2.
Por ejemplo, A es O. En ciertos compuestos de la fórmula (IV), A es O y m es 2.
En ciertos compuestos de la fórmula IV), X es N.
Por ejemplo, en ciertos compuestos, Q es NH2 o NHRb, en donde Rb es -M1-T1, siendo Mi un enlace o enlazador Ci-C6 alquilo y siendo ?? C3-C8 cicloalquilo.
Por ejemplo, en ciertos compuestos de la fórmula (IV), y R2 cada uno son H.
En ciertos compuestos de la fórmula (IV), Y es Rd. Por ejemplo, Rd es (- -?ß alquilo opcionalmente sustituido con C3-C8 cicloalquilo o halo. Por ejemplo, Rd es C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con C^-C0 alquilo o halo.
La presente invención también se refiere a un compuesto de la fórmula (IV), en donde al menos uno de Re, Rf, Rg, y R es halo, ?^?ß alcoxilo opcionalmente sustituido con uno o más halo; C-i-C6 alquiisulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más halo; C,-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, C3-C8 cicloalquilo, hidroxi, y d-C6 alcoxilo; C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más Ci-C6 alquilo o CN; o heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, hidroxi, Ci-Ce alquilo y Ci-C6 alcoxilo. Por ejemplo, el compuesto de la formula (IV) tiene al menos uno de Re, Rf, Rg, y Rh seleccionado de F; Cl; Br; CF3; OCF3; S02CF3; oxetanilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, hidroxi, Ci-C6 alquilo y Ci-Ce alcoxilo; C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de C1-C4. alquilo; y C1-C4 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, C3-C8 cicloalquilo, hidroxi y Ci-C6 alcoxilo.
Por ejemplo, la presente invención se refiere a compuestos de la fórmula (IV) en donde al menos uno de Rf y Rg es alquilo, opcionalmente sustituido con hidroxilo. Por ejemplo, la presente invención se refiere a compuestos en donde al menos uno de Rf y Rg es /-butilo sustituido con hidroxilo.
La presente invención se refiere a un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. La presente invención también se refiere a una sal de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. La presente invención también se refiere a un N-óxido del seleccionado de los Compuestos 1 a 140. La presente invención también se refiere a una sal de un N-óxido del compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140. Por ejemplo, la presente invención se refiere un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 7, 9 a 109, y 111 a 140.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (IV) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de un compuesto de la fórmula (IV) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un hidrato de un compuesto de la fórmula (IV) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un N-óxido de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un N-óxido de la sal de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un hidrato de un compuesto seleccionado de los Compuestos 1 a 140 y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), o (lile), y uno o más transportadores farmacéuticamente aceptables.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), o (lile) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica de una cantidad terapéuticamente efectiva de un hidrato de un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), o (lile) y un transportador farmacéuticamente aceptable.
La presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir cáncer. La presente invención proporciona métodos para tratar cáncer. La presente invención también proporciona métodos para prevenir el cáncer. El método incluye administrar a un sujeto en necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), o (lile). El cáncer puede ser un cáncer hematológico. Preferentemente, el cáncer es leucemia mieloide. Más preferentemente el cáncer es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda o leucemia de linaje mezclado.
La presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir un trastorno, o enfermedad transmitida por una translocación de un gen en el cromosoma 11q23. La presente invención proporciona métodos para tratar una enfermedad o trastorno transmitido por la translocación de un gen en el cromosoma 11q23. La presente invención también proporciona métodos para prevenir una enfermedad o trastorno transmitida por la translocación de un gen en el cromosoma 11q23. El método incluye administrar a un sujeto que necesita del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb) , (lile) o (IV).
La presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante o la enfermedad o trastorno transmitido por metilación de proteína transmitida por DOT1. La presente invención proporciona métodos para tratar una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante o una enfermedad o trastorno transmitida por la metilación de proteína transmitida por DOT1.
La presente invención también proporciona métodos para prevenir una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante o una parte importante o una enfermedad o trastorno transmitido por la metilación de proteína transmitida por DOT1. El método incluye administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), (lile) o (IV).
La presente invención proporciona métodos para inhibir la actividad DOT1L en una célula. El método incluye contactar la célula con una cantidad efectiva de uno o más compuestos de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), (lile) o (IV).
Aún otro aspecto de la presente invención, se refiere a un método para reducir el nivel de metilación del residuo de Usina 79 de Histona H3 79 (H3-K79) en una célula. El método incluye contactar una célula con un compuesto de la presente invención. Dicho método puede ser utilizado para disminuir cualquier condición que sea originada por, o potenciada por la actividad de DOT1 a través de la metilación H3-K79.
La presente invención se refiere al uso de compuestos aquí descritos en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir cáncer. El uso incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), (lile) o (IV) para la administración a un sujeto que necesita del mismo en una cantidad terapéuticamente efectiva. El cáncer puede ser cáncer hematológico. Preferentemente, el cáncer es leucemia. Más preferentemente, el cáncer es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda o leucemia de linaje mezclado.
La presente invención proporciona el uso de los compuestos aquí descritos en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno transmitida por la translocación de un gen en el cromosoma 11q23. El uso incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), (Ule) o (IV) para la administración a un sujeto que necesita del mismo en una cantidad terapéuticamente efectiva.
La presente invención proporciona el uso de compuestos aquí descritos en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1 desempeña un papel importante o una enfermedad o trastorno transmitida por la metilación de proteína transmitida por DOT1. El uso incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), (lile) o (IV) para la administración a un sujeto que necesita del mismo en una cantidad terapéuticamente efectiva.
La presente invención proporciona el uso de compuestos aquí descritos para inhibir la actividad DOT1L en una célula. El uso incluye contactar las células con una cantidad efectiva para uno o más de los compuestos de la fórmula (I), (II), (llia), (lllb), (lile) o (IV).
Aún en otro aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de compuestos aquí descritos para reducir el nivel de metilación del residuo de resina 79 de Histona H3 (H3-K79) en una célula. El uso incluye contactar la célula con un compuesto de la presente invención. Dicho uso puede disminuir cualquier condición que sea originada, o potenciada por la actividad de DOT1 a través de la metilación H3-K79.
En las fórmulas aquí presentadas, las variables pueden ser seleccionadas de los grupos respectivos de porciones químicas definidas posteriormente en la descripción detallada.
Además, la presente invención proporciona métodos para sintetizar los compuestos anteriores. Después de la síntesis, se puede formular una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más de los compuestos con un transportador farmacéuticamente aceptable para administración a un mamífero, particularmente humanos, para utilizarse en la modulación de una enzima epigenética. En ciertas modalidades, los compuestos de la presente invención son útiles para tratar, prevenir, o reducir el riesgo de cáncer o para la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir o reducir el riesgo de cáncer. Por consiguiente, los compuestos o las formulaciones pueden administrarse, por ejemplo, vía oral, parenteral, ótica, oftálmica, nasal o rutas tópicas, para proporcionar una cantidad efectiva del compuesto al mamífero.
Los compuestos representativos de la presente invención incluyen, los compuestos descritos en la Tabla 1.
Tabla 1 Tal como se utiliza en la presente invención, "alquilo", "C,, C3, C4, C5 o C6 alquilo" o "d-Ce alquilo" pretende incluir C1t C3, C4, Cs o C6 grupos de hidrocarburo alifáticos saturados de cadena recta (lineal) y grupos de hidrocarburo alifático saturados de cadena ramificada de C3, C4, C5 o C6. Por ejemplo, Ci-C6 alquilo pretende incluir grupos d, C2, C3, C4, C5 y C6 alquilo. Los ejemplos de alquilo incluyen porciones que tienen de uno a seis átomos de carbono, tales como pero sin limitarse a, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, s-pentilo o n-hexilo.
En ciertas modalidades, un alquilo de cadena recta o ramificada tiene seis o menos átomos de carbono (por ejemplo, d-Ce para cadena recta, C3-C6 para cadena ramificada), y en otra modalidad, un alquilo de cadena recta o ramificada tiene cuatro o menos átomos de carbono.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "cicloalquilo" se refiere a un sistema de mono o multi anillo de hidrocarburo no aromático, saturado o insaturado, que tiene de 3 a 30 átomos de carbono (por ejemplo, C3-C10).
Los ejemplos de cicloalquilo incluyen pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo, y adamantilo. El término "heterocicloalquilo" se refiere a monocíclico de 5 a 8 miembros, bicíclico de 8 a 12 miembros o tricíclico de 11 a 14 miembros no aromático, saturado o insaturado que tiene uno o más heteroátomos (tal como O, N, S, o Se). Los ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen pero no se limitan a, piperazinilo, pyrrolidinilo, dioxanilo, morfolinilo, y tetrahidrofuranilo.
El término "alquilo opcionalmente sustituido" se refiere a un alquilo no sustituido o un alquilo que tiene sustituyentes designados que reemplazan uno o más átomos de hidrógeno en uno o más carbonos del esqueleto de hidrocarburo. Los sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluyendo alquilamino, d ia Iq u ila m i n o , arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromática.
Una porción " a r i I a I q u i I o " o "aralquilo" un alquilo sustituido con un a r i I o (por ejemplo, fenilmetilo (bencilo)). Una porción "alquilarilo" es un arilo sustituido con alquilo (por ejemplo, metilfenilo).
Tal como se utiliza en la presente invención, el "enlazador de alquilo" pretende incluir grupos de hidrocarburo alifáticos divalentes saturados de cadena recta (lineal) C,, C2, C3, C4, C5 o C6 y grupos de hidrocarburo alifáticos saturados de cadena ramificada C3, C4, C5 o C6. Por ejemplo, el enlazador C -C6 alquilo está proyectado para incluir grupos enlazadores de alquilo C,, C2, C3l C4, C5 o C6. Los ejemplos de enlazador de alquilo, incluyen porciones que tienen de uno a seis átomos de carbono, tal como, pero sin limitarse a, metilo (-CH2-), etilo (-CH2CH2-), n-propilo (-CH2CH2CH2-), i-propilo (-CHCH3CH2-), n-butilo (-CH2CH2CH2CH2-), s-butilo (-CHCH3CH2CH2-), i-butilo (-C(CH3) 2CH2-), n-pentilo (-CH2CH2CH2CH2CH2-), s-pentilo (-CHCH3CH2CH2CH2-) o n-hexilo (-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-).
El término "alquenilo" incluye grupos alifáticos insaturados análogos en longitud y posible sustitución para los alquilos descritos anteriormente, pero que contienen al menos un enlace doble. Por ejemplo, el término "alquenilo" incluye grupos alquenilo de cadena recta (por ejemplo, etenilo, propenilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, heptenilo, octenilo, nonenilo, decenil), y grupos alquenilo ramificados. En ciertas modalidades, un grupo alquenilo de cadena recta o ramificada tiene seis o menos átomos de carbono en su esqueleto (por ejemplo, C2-C6 para cadena recta, C3-C6 para cadena ramificada). El término "C2-C6" incluye grupos alquenilo que contienen dos a seis átomos de carbono. El término "C3-C6" incluye grupos alquenilo que contienen tres a seis átomos de carbono.
El término "alquenilo opcionalmente sustituido" se refiere a alquenilo no sustituido o alquenilo que tiene sustituyentes designados que reemplazan uno o más átomos de hidrógeno en uno o más átomos de carbono en el esqueleto de hidrocarburo. Los sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, a ri lea rbo n i la m in o , carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, a r i 11 i o , tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromático.
El término "alquinilo" incluye grupos alifáticos insaturados análogos en longitud y posible sustitución para los alquilo descritos anteriormente, pero que contienen al menos un enlace triple. Por ejemplo, el término "alquinilo" incluye grupos alquinilo de cadena recta (por ejemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo, heptinilo, octinilo, noninilo, decinilo), y grupos alquinilo ramificados. En ciertas modalidades, un grupo alquinilo de cadena recta o ramificada tiene seis o menos átomos de carbono en esqueletos (por ejemplo, C2-C6 para cadena recta, C3-C6 para cadena ramificada). El término "C2-C6" incluye grupos alquinilo que contienen dos a seis átomos de carbono. El término "C3-C6" incluye grupos alquinilo que contienen tres a seis átomos de carbono.
El término "alquinilo opcionalmente sustituido" se refiere a un alquinilo sustituido o alquinilo que tiene sustituyentes designados que reemplazan uno o más átomos de hidrógeno en uno o más átomos de carbono del esqueleto de hidrocarburo. Los sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi , alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidíno, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromática.
Otras porciones opcionalmente sustituidas (tal como cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo opcionalmente sustituidos) incluye tanto las porciones no sustituidas como las porciones que tienen uno o más de los sustitu entes designados.
El término "arilo" incluye grupos con aromaticidad, incluyendo, sistemas "conjugados" o multicíclicos con al menos un anillo aromático, y no contienen algún heteroátomo en la estructura de anillo. Los ejemplos incluyen fenilo, bencilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftalenilo, etc.
Los grupos "heteroarilo" son grupos arilo, tal como se definió anteriormente, excepto que tienen de uno a cuatro heteroátom os en la estructura del anillo, y también pueden ser referidos como "heterociclos de arilo" o "heteroaromáticos". Tal como se utiliza en la presente invención, el término "heteroarilo" está proyectado para incluir un anillo heterocíclico aromático monocíclico de 5 o 6 o bicíclico de 7-, 8-, 9-, 10-, 11-o 12 miembros estable, que consiste en átomos de carbono y uno o más heteroátomos, por ejemplo, 1 o 1-2 o 1-3 o 1-4 o 1-5 o 1-6 heteroátomos, o por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, o 6 heteroátomos, independientemente seleccionado del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre. El átomo de nitrógeno puede ser sustituido o no sustituido (por ejemplo N o NR en donde R es H u otros sustituyentes, tal como se definió). Los heteroátomos nitrógeno y azufre pueden ser opcionalmente oxidados (por ejemplo, N ? 0 y S(0)p, en donde p = 1 o 2). Se deberá observar que el número total de átomos S y O en donde el heterociclo aromático no es mayor a 1.
Los ejemplos de grupos heteroariio incluyen pirrol, furano, tiofeno, tiazol, isotiazol, imidazol, triazol, tetrazol, pirazol, oxazol, isoxazol, piridina, pirazina, piridazina, pirimidina, y similares.
Además, los términos " a r i I o " y "heteroariio" incluyen grupos arilo y heteroariio multicíclicos, por ejemplo, tricíclico, bicíclico, por ejemplo, naftaleno, benzoxazol, benzodioxazol, benzotiazol, benzoimidazol, benzotiofeno, metilenedioxifenilo, quinolina, isoquinolina, naftridina, indol, benzofuran, purina, benzofuran, deazapurina, indolizina.
En el caso de anillos aromáticos multicíclicos., únicamente uno de los anillos necesita ser aromático (por ejemplo, 2,3-dihidroindol), aunque todos los anillos pueden ser aromáticos (por ejemplo, quinolina). El segundo anillo puede ser fusionado o puenteado.
El anillo aromático de arilo o heteroariio puede ser sustituido en una o más posiciones de anillo con sustituyentes tal como se describió anteriormente, por ejemplo, por ejemplo, alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, hidroxilo, alcoxi, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, aralquilaminocarbonilo, alquenilaminocarbonilo, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, aralqullcarbonilo, alquenilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o hetero aromática. Los grupos arilo también pueden ser fusionados o puenteados con anillos alicíclico o heterocíclico, los cuales son no aromáticos para formar de esta manera un sistema multicíclico (por ejemplo, tetralina, metilendioxifenilo).
Tal como se utiliza en la presente invención, "carbociclo" o "anillo carbocíclico" pretende incluir cualquier anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico estable que tiene el número de carbonos específico, cualquiera de los cuales puede ser saturado, insaturado o aromático. Por ejemplo, se pretende que un C3-C14 carbociclo incluya un anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico que tiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 átomos de carbono. Los ejemplos de carbociclos incluyen pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, adamantilo, ciclooctilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo y tetrahidronaftilo. Los anillos puenteados también están incluidos en la definición de carbociclo, incluyendo, por ejemplo, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano y [2.2.2]biciclooctano. Un anillo puenteado ocurre cuando uno o más átomos de carbono enlazan dos átomos de carbono no adyacentes. En una modalidad, los anillos puenteados son uno o dos átomos de carbono. Se debe observar que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando se puentea un anillo, los substituyentes mencionados para el anillo también pueden estar presentes en el puente. También se incluyen anillos fusionados (por ejemplo, naftilo, tetrahidronaftilo) y espiro.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "heterociclo" incluye cualquier estructura de anillo (saturado o parcialmente insaturado) que contiene al menos un heteroatomo de anillo (por ejemplo, N, O o S). Los ejemplos de heterociclos incluyen pero no se limitan a, morfolina, pirrolidina, tetra h id roti of e n o , piperidina, piperazina y tetrahidrofurano.
Los ejemplos de heterocíclico grupos incluyen pero no se limitan a, acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benztiazolilo, benztriazolilo, benztetrazolilo , bencisoxazolilo, bencisotiazolilo, bencimidazolinilo, carbazplilo, 4a/--carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H.6H-1 ,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofuran, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, 1 H-indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3 H - i n d o I i I o , isatinoilo, ¡sobenzof uranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, metilenedioxifenilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1 ,2,3-oxadiazolilo, 1 ,2,4-oxadiazolilo, 1 ,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1 ,2,4-oxadiazol5(4H)-ona, oxazolidinilo, oxazolilo, oxindolilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidonilo, 4-piperidonilo, piperonilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinilo, piridilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrazolilo, 6H-1 ,2,5-tiadiazinilo, 1 , 2 , 3-tiad iazol i lo , 1 ,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1 ,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo, 1 ,2 ,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo y xantenilo.
El término "sustituido", tal como se utiliza en la presente invención, significa que cualquiera de uno o más átomos de hidrógeno en el átomo designado es reemplazado con una selección de los grupos indicados, siempre que la valencia normal del átomo designado no sea excedida, y que la sustitución de cómo resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es oxo o ceto (por ejemplo =0), entonces se reemplazan 2 átomos de hidrógeno en el átomo. Los sustituyentes ceto no están presentes en porciones aromáticas. Los enlaces de anillo doble, tal como aquí se utiliza, son enlaces dobles que se forman entre dos átomos de anillo adyacentes (por ejemplo, C = C, C = N o N = N). los términos "compuesto estable" y "estructura estable" significa que indican un compuesto que es lo suficientemente robusto para sobrevivir el aislamiento hasta un grado de pureza útil a partir de una mezcla de reacción, y la formulación en un agente terapéutico eficaz.
Cuando un enlace a un sustituyente se muestra cruzando un enlace que conecta dos enlaces en un anillo, entonces el sustituyente puede ser enlazado en cualquier átomo en el anillo. Cuando un sustituyente se describe sin indicar el átomo a través del cual se enlaza el sustituyente al resto del compuesto de una fórmula determinada, entonces el sustituyente puede ser enlazado a través de cualquier átomo en la fórmula. Las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles, pero únicamente si dichas combinaciones dan como resultado compuestos estables.
Cuando cualquier variable (por ejemplo, ocurre más de una vez en cualquier sustituyente o fórmula de un compuesto, su definición en cada surgimiento es independiente de su definición en cada otro surgimiento. Por lo tanto, por ejemplo, si se muestra un grupo como sustituido con 0 a 2 porciones Ri, entonces el grupo puede ser opcionalmente sustituido con hasta dos porciones en cada surgimiento se selecciona independientemente de la definición de R^ Asimismo, las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles, pero únicamente si dichas combinaciones dan cono resultado compuestos estables.
El término "hidroxi" o "hidroxilo" incluye grupos con un - OH o -O".
Tal como aquí se utiliza, el término "halo" o "halógeno" se refiere a fluoro, cloro, bromo y yodo. El término "perhalogenado", se refiere generalmente a una porción en donde todos los átomos de hidrógeno son reemplazados por átomos de halógeno. El término "haloalquilo" o "haloalcoxilo", se refiere a un alquilo o alcoxilo sustituido con uno o más átomos de halógeno.
El término "carbonilo" incluye compuestos y porciones que contienen un carbono conectado con un enlace doble a un átomo de oxígeno. Los ejemplos de porciones que contienen un carbonilo incluyen pero no se limitan a, aldehidos, cetonas, ácidos carboxílicos, amidas, ésteres, anhídridos, etc.
El término "carboxilo" se refiere a -COOH o su éster C^-C6 alquílico.
El término "acilo" incluye porciones que contienen el radical acilo radical (R-C(O)-) o un grupo carbonilo. El término "acilo sustituido" incluye grupos acilo en donde uno o más de los átomos de hidrógeno son reemplazados por, por ejemplo, grupos alquilo, grupos alquinilo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbon ilo , alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromática.
"Aroilo" incluye porciones con una porción arilo o porción heteroaromática enlazada a un grupo carbonilo. Los ejemplos de grupos aroilo incluyen fenilcarboxi, naftilo carboxi, etc.
Los términos "alcoxialquilo", "alquilaminoalquilo", y "tioalcoxialquilo" incluyen grupos alquilo, tal como se describió anteriormente, en donde los átomos de oxígeno, nitrógeno, o azufre remplazan uno o más átomos de carbono de esqueleto de hidrocarburo.
El término "alcoxi" o "alcoxilo" incluye grupos alquilo, alquenilo y alquinilo sustituidos o no sustituidos enlazados covalentemente a un átomo de oxígeno. Los ejemplos de grupos alcoxi o radicales alcoxilo incluyen pero no se limitan a, grupos metoxi, etoxi, isopropiloxi, propoxi, butoxi y pentoxi. Los ejemplos de grupos alcoxi sustituido incluyen grupos alcoxi halogenados. Los grupos alcoxi pueden ser sustituidos con grupos tales como alquenilo, alquinilo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilamí nocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo , ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o porciones aromáticas o heteroaromáticas. Los ejemplos de grupos alcoxi sustituidos con halógeno incluyen, pero no se limitan a, fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, clorometoxi, diclorometoxi y triclorometoxi.
El término "éter" o "alcoxi" incluye compuestos o porciones que contienen un oxígeno enlazado a dos átomos de carbono o heteroátomos. Por ejemplo, el término incluye "alcoxialquilo", que se refiere a un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo enlazado en forma covalente a un átomo de oxígeno el cual es enlazado en forma covalente a un grupo alquilo.
El término "éster" incluye compuestos o porciones que contienen un carbono o un heteroátomo enlazado a un átomo de oxígeno que se enlaza al carbono de un grupo carbonilo. El término "éster" incluye grupos alcoxicarboxi, tales como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxicarbonilo, pentoxicarbonilo, etc.
El término "tioalquilo" incluye compuestos o porciones que contienen un grupo alquilo conectado a un átomo de azufre. Los grupos tioalquilo pueden ser sustituidos con grupos tales como alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, carboxiácido, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhídrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o porciones aromáticas o heteroaromáticas.
El término "tiocarbonilo" o "tiocarboxi" incluye compuestos y porciones que contienen un carbono conectado con un enlace doble a un átomo de azufre.
El término "tioéter" incluye porciones que contienen un átomo de azufre enlazado a dos átomos de carbono o heteroátomos. Los ejemplos de tioéteres incluyen, pero no se limitan a alktioalquilos, alktioalquenilos, y alktioalquinilos. El término "alktioalquilos" incluyen porciones con un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo enlazado a un átomo de azufre que es enlazado a un grupo alquilo. En forma similar, el término "alktioalquenilos" se refiere a porciones en donde un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo es énlazado a un átomo de azufre que es enlazado covalentemente a un grupo alquenilo; y "alktioalquinilos" se refiere a porciones en donde un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo es enlazo a un átomo de azufre el cual es enlazado covalentemente a un grupo alquinilo.
Tal como se utiliza en la presente invención, "amina" o "amino" se refiere un -NH2 no sustituido o sustituido. El término "alquilamino" incluye grupos de compuestos en donde el nitrógeno de -NH2 se enlaza al menos a un grupo alquilo. Los ejemplos de grupos alquilamino incluyen bencilamino, metilamino, etilamino, fenetilamino, etc. "Dialquilamino" incluye grupos en donde el nitrógeno de -NH2 se enlaza al menos a dos grupos alquilo. Los ejemplos de dialquilamino grupos incluyen pero no se limitan a, dimetilamino y dietilamino. "Arilamino" y "diarilam ¡no" incluyen grupos en donde el nitrógeno se enlaza al menos a uno o dos grupos arilo, respectivamente. Los términos "aminoarilo" y "aminoariloxi" se refieren a arilo y ariloxi sustituidos con amino. "Alquilarilam ino," "alquilaminoarilo" o "arilaminoalquilo" se refieren a un grupo amino el cual se enlaza al menos a un grupo alquilo y al menos a un grupo arilo.
"Alcaminoalquilo" se refiere a un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo enlazado a un átomo de nitrógeno que también se enlaza a un grupo alquilo. "Acilamino" incluye grupos en donde el nitrógeno es enlazado a un grupo acilo. Los ejemplos de acilamino incluyen pero no se limitan a, grupos alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido.
El término "amida" o "aminocarboxi" incluyen compuestos o porciones que contienen un átomo de nitrógeno el cual se enlaza al carbono de un grupo carbonilo o tiocarbonilo. El término incluye grupos "alcaminocarboxi" que incluyen grupos alquilo, alquenilo o alquinilo enlazados a un grupo amino el cual se enlaza al carbono de un grupo carbonilo o tiocarbonilo. También incluye grupos "arilaminocarboxi" que incluyen porciones de arilo o heteroarilo enlazadas a un grupo amino que se enlazan al carbono de un grupo carbonilo o tiocarbonilo. Los términos "alquilaminocarboxi", "alquenilaminocarboxi", "alquinilaminocarboxi" y "arilaminocarboxi" incluyen porciones en donde las porciones alquilo, alquenilo, alquinilo y arilo porciones, respectivamente, se enlazan a un átomo de nitrógeno el cual a su vez se enlaza al carbono a un grupo carbonilo. Las amidas pueden ser sustituidas con sustituyentes tales como alquilo de cadena recta, alquilo de cadena ramificada cicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterociclo. Los sustituyentes en los grupos amida pueden ser sustituidos en forma adicional.
Los compuestos de la presente invención que contienen nitrógeno pueden convertirse a N-óxidos mediante el tratamiento con un agente de oxidación (por ejemplo, ácido 3-cloroperoxibenzoic (mCPBA) y/o peróxidos de hidrógeno) para producir otros compuestos de la presente invención. Por lo tanto, se consideran todos los compuestos que contienen nitrógeno mostrados y reivindicados, cuando es permitido por la valencia ya estructura, que incluyan tanto el compuesto tal como se muestra como su derivado de N-óxido (el cual puede ser designado como N?0 o ? -0"). Además, en otros casos, los nitrógenos de los compuestos de la presente invención pueden ser convertidos a compuestos N-hidroxi o N-alcoxi. Por ejemplo, los compuestos N-hidroxi pueden ser preparados mediante oxidación de la amina de origen a través de un agente de oxidación tal como m-CPBA. También se consideran todos los compuestos que contienen nitrógeno mostrados y reivindicados, cuando es permitido por la valencia y la estructura, para que cubran tanto el compuesto tal como se muestra como sus derivados N-hidroxi (por ejemplo, N-OH) y N-alcoxi (por ejemplo, N-OR, en donde R es Ci-C 6 alquilo sustituido o no sustituido, d-Ce alquenilo, 0·,-06 alquinilo, carbociclo de 3 a 14 miembros o heterociclo de 3 a 14 miembros).
En la presente especificación, la fórmula estructural del compuesto representa un cierto isómero por conveniencia en algunos casos, aunque la presente invención incluye todos los isómeros, tal como isómeros geométricos, isómeros ópticos basados en un carbono asimétrico, estereoisómeros, tautómeros y similares. Además, puede estar presente un polimorfismo de cristal para los compuestos representados por la fórmula. Se debe observar que cualquier forma de cristal, mezcla de forma de cristal o anhídrido o hidrato del mismo, se incluyen el alcance de la presente invención. Además, el denominado metabolito, el cual se produce mediante la degradación ¡n vivo del compuesto de la presente invención, se incluye en el alcance de la misma.
El término "¡somerismo", significa compuestos que tienen fórmulas moleculares idénticas, pero difieren en la secuencia de enlace de sus átomos o en el ajuste de sus átomos en el espacio. Los isómeros que difieren en el ajuste de sus átomos en el espacio son denominados "estereoisómeros". Los estereoisómeros que no están en imágenes de espejo uno del otro son denominados "diastereoisómeros", y los estereoisómeros que no son imágenes de espejo superimpuestas uno del otro, son denominados "enantiómeros" o algunas veces isómeros ópticos. Una mezcla que contiene cantidades iguales de formas enantioméricas individuales de quiralidad opuesta, es denominada "mezcla racémica".
Un átomo de carbono enlazado de cuatro sustituyentes no idénticos es denominado "centro quirálico".
El "isómero quirálico" significa un compuesto con al menos un centro quirálico. Los compuestos con más de un centro quirálico pueden existir ya sea como un diastereómero individual o como una mezcla de diastereómero denominado "mezcla diastereomérica". Cuando está presente un centro quirálico, un estereoisómero puede ser caracterizado por la configuración absoluta ( o S) de dicho centro quirálico. La configuración absoluta se refiere al ajuste en espacio de los substituyentes adheridos al centro quirálico. Los substituyentes adheridos al centro quirálico bajo consideración, son clasificados de acuerdo con la Regla de Secuencia de Cahn, Ingold y Prelog. (Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn y Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (Londres), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116).
El término "isómero geométrico", significa los diastereómeros que deben su existencia a la rotación obstaculizada alrededor de enlaces dobles o un enlazador de cicloalquilo (por ejemplo, 1 ,3-ciclobutil). Estas configuraciones son diferenciadas en sus nombres por los prefijos cis y trans, o Z y E, que indican que los grupos están en el mismo lado o uno opuesto del enlace doble en la molécula, de acuerdo con las reglas de Cahn-Ingold-Prelog.
Quedará entendido que los compuestos de la presente invención pueden ser ilustrados como isómeros quirálicos o isómeros geométricos diferentes. También deberá quedar entendido que cuando los compuestos tienen formas isoméricas quirálicas o geométricas, todas las, formas isoméricas están proyectadas para ser incluidas en el alcance de la presente invención, y la generación de nombres de los compuestos no excluye ninguna forma isomérica.
Por ejemplo, los compuestos de la fórmula (I) incluyen los de los siguientes isómeros quirálicos y geométricos.
Además, las estructuras y otros compuestos aquí descritos, incluyen todos los isómeros atrópicos de los mismos. Los "isómeros atrópicos" son un tipo de estereoisómero en donde los átomos de dos isómeros están ajustados en forma diferente en el espacio. Los isómeros atrópicos deben su existencia a una rotación restringida originada por la hidranza de rotación de grupos grandes alrededor de un enlace central. Dichos isómeros atrópicos, normalmente existen como una mezcla, sin embargo, como resultado de avances recientes en técnicas de cromatografía, ha sido posible separar mezclas de dos isómeros atrópicos en casos selectos.
El "tautómero" es uno de dos o más isómeros estructurales que existen en equilibrio y son fácilmente convertidos de una forma isomérica a otra. Esta conversión da como resultado la migración formal de un átomo de hidrógeno acompañado por un cambio de enlaces dobles conjugados adyacentes. Los tautómeros existen como una mezcla de un ajuste tautomérico en solución. En soluciones en donde es posible la tautomerización , se alcanzará un equilibrio químico de los tautómeros. La proporción exacta de los tautómeros depende de diversos factores, incluyendo temperatura, solvente y pH. El concepto de tautómeros que son interconvertibles mediante tautomerización, es denominado, tautomerismo.
De los diversos tipos de tautomerismo que son posibles, comúnmente se observan dos. En tautomerismo ceto-enol, ocurre un cambio simultáneo de electrones y un átomo de hidrógeno. El tautomerismo de cadena de anillo surge como resultado del grupo aldehido (-CHO) en una molécula de cadena de azúcar que reacciona con uno de los grupos hidroxi (-OH) en la misma molécula para proporcionarle una forma cíclica (en forma de anillo) tal como lo exhibe la glucosa.
Los pares tautoméricos comunes son: tautomerismo de cetona-enol, amida-nitrilo, lactam-lactim, amida-ácido imídico en anillos heterocíclicos (por ejemplo, en nucleobases tales como guanina, timina y citosina), amina-enamina y enamina-enamina. Los bencim idazoles también exhiben tautomerismo, cuando el bencimidazol contiene uno o más sustituyentes en las posiciones 4, 5, 6 o 7, en donde surge la posibilidad de diferentes isómeros. Por ejemplo, puede existir 2 , 5-d im eti I- 1 H-benzo[d]im idazol en equilibrio con su isómero 2,6-dimetil-1 H- benzo[d]¡midazol mediante tautomerización.
Otro ejemplo de tautomerismo se muestra a continuación.
Deberá quedar entendido que los compuestos de la presente invención pueden ser ilustrados como diferentes tautómeros. También deberá quedar entendido que cuando los compuestos tienen formas tautoméricas, todas las formas tautoméricas están proyectadas para estar incluidas dentro del alcance de la presente invención, y la generación de nombres de los compuestos no excluye ninguna forma tautomérica.
El término "polimorfos de cristal", "polimorfos", o "formas de cristal" significan estructuras de cristal en las cuales un compuesto (o una sal o solvente del mismo) puede cristalizarse en diferentes ajustes de empaque de cristal, los cuales todos tienen la misma composición elemental. Las diferentes formas de cristal normalmente tienen diferentes patrones de difracción de rayos X, espectro infrarrojo, puntos de fusión, dureza de densidad, forma de cristal, propiedades ópticas y eléctricas, estabilidad y solubilidad. El solvente de recristalización, rango de cristalización, temperatura de almacenamiento y otros factores pueden originar que una forma de cristal sea la dominante. Los polimorfos de cristal de los compuestos pueden ser preparados mediante cristalización bajo diferentes condiciones.
Los compuestos de la presente invención pueden ser cristalinos, semicristalinos, no cristalinos, amorfos, mesomorfos, etc.
Los compuestos de la fórmula (I), (II), (Mía), (lllb), (lile) o (IV) incluyen los propios compuestos, así como sus N-óxidos, sales, sus solvatos, y sus profármacos, si es aplicable. Una sal, por ejemplo, puede ser formada entre un anión y un grupo cargado en forma positiva (por ejemplo, amino) en un compuesto de purina o 7-deazapurina sustituido. Los aniones adecuados incluyen cloro, bromo, yodo, sulfato, bisulfato, sulfamato, nitrato, fosfato, citrato, metanosulfonato, trifluoroacetato, glutamato, glucuronato, glutarato, malato, maleato, succinato, fumarato, tartrato, tosilato, salicilato, lactato, naftalenosulfonato, y acetato.
De igual manera, también se puede formar una sal entre un catión y un grupo cargado en forma negativa (por ejemplo, carboxilato) o un compuesto de purina o 7-deazapurina sustituido. Los cationes adecuados incluyen ión de sodio, ión de potasio, ión de magnesio, ión de calcio y un catión de amonio, tal como un ión de tetrametilamonio. Los compuestos de purina o 7-deazapurina sustituidos también pueden incluir las sales que contienen átomos de nitrógeno cuaternario. Los ejemplos de profármacos incluyen ésteres y otros derivados farmacéuticamente aceptables, los cuales, al momento de la administración a un sujeto, tienen la capacidad de proporcionar compuestos de purina o 7-deazapurina sustituidos activos.
Además, los compuestos de la presente invención, por ejemplo, las sales de los compuestos, pueden existir en forma ya sea hidratada o no hidratada (anhidro) o como solvatos con otras moléculas solventes. Los ejemplos no limitantes de hidratos incluyen hemihidratos, monohidratos, dihidratos, trihidratos, etc. Los ejemplos no limitantes de solvatos incluyen solvatos de etanol, solvatos de acetona, etc.
El término "solvato" significa formas de adición de solvente que contienen cantidades de solvente ya sea estequiométricas o no estequiométricas. Algunos compuestos tienen la tendencia de atrapar una proporción molar fija de moléculas de solvente en el estado sólido cristalino, para formar de esta manera un solvato. Si el solvente es agua, el solvato formado es un hidrato; y si el solvente es alcohol, el solvato formado es un alcoholato. Los hidratos se forman mediante la combinación de una o más moléculas de agua con una molécula de la sustancia en la cual el agua retiene su estado molecular como H20. Se forma un hemihidrato a través de la combinación de una molécula de agua con más de una molécula de la sustancia en la cual el agua retiene su estado molecular como H20.
Tal como aquí se utiliza, el término "análogo" se refiere a un compuesto químico que es estructuralmente similar a otro pero difiere ligeramente en composición (como en el reemplazo de un átomo por un átomo de un diferente elemento o en la presencia de un grupo funcional particular, o el reemplazo de un grupo funcional por otro grupo funcional). Por lo tanto, un análogo es un compuesto que es similar o comparable en función y apariencia, pero no en estructura u origen al compuesto de referencia.
Tal como aquí se define, el término "derivado" se refiere a compuestos que tienen una estructura de centro común, y son sustituidos con varios grupos tal como aquí se describe. Por ejemplo, todos los compuestos representados por la fórmula (I), son compuestos de purina sustituidos o compuestos de 7-deazapurina sustituidos, y tienen la fórmula (I) como un centro común.
El término "bioisostero" se refiere a un compuesto que resulta del intercambio de un átomo o de un grupo de átomos con otro átomo o grupo de átomos ampliamente similar. El objetivo de un reemplazo bioisostérico es crear un nuevo compuesto con propiedades biológicas similares a las del compuesto de origen. El reemplazo bioisostérico puede ser de base fisioquímica o topológica. Los ejemplos de bioisosteros de ácido carboxílico incluyen pero no se limitan a sulfonimidas de acilo, tetrazoles, sulfonatos y fosfonatos. Ver por ejemplo la Publicación de Patani and LaVoie, Chem. Rev. 96, 3147-3176, 1996.
La presente invención está proyectada para incluir todos los isótopos de átomos que ocurren en los compuestos de la presente invención. Los isótopos incluyen los átomos que tienen el mismo número atómico pero diferente número de masa. A manera de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio, y los isótopos de carbono incluyen C-13 y C-14. 2. Síntesis de Compuestos de Purina Sustituidos v Compuestos de 7-Deazapurina Sustituidos La presente invención proporciona métodos para la síntesis de los compuestos de las fórmulas (I), (II), (Illa), (lllb), (Ule) y (IV). La presente invención también proporciona métodos detallados para la síntesis de varios compuestos descritos de la presente invención de acuerdo con los siguientes esquemas, tal como se muestra en los Ejemplos.
A lo largo de la descripción, cuando se describen composiciones como teniendo, incluyendo o comprendiendo componentes específicos, se contempla que las composiciones también consistan esencialmente en, o consistan en los compuestos mencionados. En forma similar, cuando los métodos o procesos se describen como teniendo, incluyendo, o comprendiendo pasos de procesos específicos, los procesos también consisten esencialmente en o consisten en los pasos de procesamiento mencionados. Además, deberá quedar entendido que el orden de los pasos o el orden para llevar a cabo ciertas acciones, es inmaterial, siempre que la presente invención permanezca operable. Además, se pueden llevar en forma simultánea dos o más pasos o acciones.
Los procesos sintéticos de la presente invención, pueden tolerar una amplia variedad de grupos funcionales, por lo tanto se pueden utilizar diversos materiales de partida sustituidos. Los procesos proporcionan generalmente el compuesto final deseado en o cerca del final del proceso general, aunque puede ser recoméndable en ciertos casos, convertir en forma adicional el compuesto a una sal, éster o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.
Los compuestos de la presente invención pueden ser preparados en una variedad de formas utilizando materiales de partida comercialmente disponibles, compuestos conocidos en la literatura o de intermediarios que se preparan fácilmente, empleando métodos sintéticos estándar y procedimientos ya sea conocidos para los expertos en la técnica, o que pueden ser apreciados por los expertos en la técnica a la luz de las enseñanzas aquí descritas. Los métodos y procedimientos sintéticos estándar para la preparación de moléculas orgánicas y transformaciones y manipulaciones del grupo funcional, se pueden obtener de la literatura científica relevante, o de libros de texto estándar en el campo. Aunque no se limita a cualquiera de una o diversas fuentes, los textos clásicos, tales como los de las publicaciones de Smith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5o edición, John Wiley & Sons: Nueva York, 2001; Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3o edición, John Wiley & Sons: Nueva York, 1999; R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); y L. Paquette, ed., Enciclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995), incorporadas a la presente invención como referencia, son libros de texto de referencia útiles y reconocidas con respecto a síntesis orgánicas conocidas para los expertos en la técnica. Las descripciones de métodos sintéticos que se encuentran a continuación, están diseñadas para ilustrar, pero no limitar, los procedimientos generales para la preparación de compuestos de la presente invención.
Los compuestos de la presente invención pueden ser preparados en forma covalente a través de una variedad de métodos familiares para los expertos en la técnica. Los compuestos de la presente invención con las fórmulas (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) y (IV) se pueden preparar de acuerdo con los procedimientos ilustrados en los esquemas A a W que se encuentran más adelante, a partir de materiales de partida comercialmente disponibles o materiales de partida que se pueden preparar utilizando procedimientos de la literatura. Los grupos R (tales como R, R' y Ra) en los Esquemas A-P pueden corresponder a las variables (por ejemplo, R1f R2, Rb y Re) tal como se define en la fórmula (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) o (IV), a menos que se especifique de otra manera. "PG" en los esquemas se refiere a un grupo de protección.
Un experto en la técnica podrá notar que, durante las secuencias de reacción y los esquemas sintéticos aquí descritos, se puede cambiar el orden de ciertos pasos, tal como la Introducción y eliminación de grupos de protección.
Un experto en la técnica reconocerá que ciertos grupos pueden requerir la protección de las condiciones de reacción a través del uso de grupos de protección. Los grupos de protección también se pueden utilizar para diferenciar grupos funcionales similares en las moléculas. Se puede encontrar una lista de grupos de protección y de como introducir y eliminar estos grupos, en la Publicación de Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3o edición, John Wiley & Sons: Nueva York, 1999.
Los grupos de protección preferidos incluyen pero no se limitan a: Para la porción hidroxilo: TBS, bencllo, THP, Ac Para ácidos carboxíllcos: éster bencílico, éster metílico, éster etílico, éster alílico Para aminas: Cbz, BOC, DMB Para dioles: Ac (x2) TBS (x2), o cuando se toman juntos, acetonidas Para tioles: Ac Para bencimidazoles: SEM, bencilo, PMB, DMB Para aldehidos: di-alquil acétales tales como dimetoxi acetal o dietil acetilo.
En los esquemas de reacción aquí descritos, se pueden producir estereoisómeros múltiples. Cuando no se indica un estereoisómero particular, quedará entendido que significa todos los posibles estereoisómeros que pueden ser producidos a partir de la reacción. Un experto en la técnica reconocerá que las reacciones pueden ser optimizadas para proporcionar un isómero preferentemente, o se pueden considerar nuevos esquemas para producir un solo isómero. Si se producen mezclas, para separar los isómeros se pueden utilizar técnicas tales como cromatografía de capa delgada de preparación, HPLC de preparación, HPLC quirálica de preparación o SFC de preparación.
Se utilizan las siguientes abreviaturas a lo largo de la especificación y se definen a continuación: AA acetato de amonio Ac acetilo AC N acetonitrilo AcOH ácido acético Atm atm ósfera Bn bencilo BOC ter-butoxi carbonilo BOP hexafluorofosfato de (benzotriazol-1¦ iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio Cbz benciloxicarbonilo COMU hexafluorofosfato de ( 1 -ciano-2-etox¡-2- oxoetilidenaminooxi)dimetilan morfolino- carbenio d días DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCE 1 ,2 dicloroetano DCM diclorometano DEA dietilamina DEAD azodicarboxilato de dietilo DIAD azodicarboxilato de diisopropilo DiBAL-H hidruro de diisobutilaluminio DIPEA ?,?-diisopropiletilamina (base de Hunig) DMAP N,N-dimetil-4-aminop¡ridina DMB 2,4 dimetoxibencilo DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido DPPA azida de difenilfosforilo EA o EtOAc acetato de etilo EDC o EDCI N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida ELS Dispersión de luz de evaporación ESI- Modo negativo de electrorocío ESI+ Modo positivo de electrorocío Et20 éter dietílico Et3N o TEA trietilamina EtOH etanol FA ácido fórmico FC cromatografía instantánea h horas H20 agua HATU hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)- ?,?,?',?'-tetrametiluronio HCI ácido hidroclórico HOAT 1 -hidroxi-7-azabenzotriazol HOBt 1 -hidroxibenzotriazol HOSu N-hidroxisuccinimida HPLC cromatografía líquida de alto desempeño Inj. Vol. volumen de inyección I.V. o IV intravenoso KHMDs hexametildisilazida de potasio LC/MS o LC-M S espectro de masa de cromatografía líquida LDA diisopropilamida de litio LG grupo de partida LiHMs hexametildisilazida de litio Molar m/z proporción de masa/carga m-CPBA ácido meta-cloroperbenzoico MeCN acetonitrilo MeOD d4-metanol MeOH metanol MgS04 sulfato de magnesio min minutos MS espectrometría de masa o espectro de masa Ms mesilo MsCI cloruro de metanosulfonilo MsO mesilato MWI radiación de microondas Na2C03 carbonato de sodio NaHC03 bicarbonato de sodio NaHMDs hexametildisilazida de sodio NaOH hidróxido de sodio NIS N-yodosuccinimida RMN Resonancia Magnética Nuclear o/n o O/N durante la noche PE éter de petróleo PG grupo de protección PMB para-metoxibencilo PPAA anhídrido cíclico de ácido 1 -propanofosfónico ppm partes por millón prep HPLC cromatografía líquida de alto desempeño de preparación prep TLC cromatografía de capa delgada de preparación p-TsOH ácido para-toluenosulfónico rt o PvT temperatura ambiente SEM 2-(trimetilsilil)etoximetilo SEMCI cloruro de (trimetilsilil)etoximetilo SFC cromatografía supercrítica SGC cromatografía de gel de sílice STAB triacetoxiborohidruro de sodio TBAF fluoruro de tetra-n-butilamonio TFA ácido trifluoroacético TfO tríflato THF tetrahidrofurano THP tetrahidropirano TLC cromatografía de capa delgada Ts tosilo TsOH ácido tósico UV ultravioleta La presente invención proporciona métodos para elaborar los compuestos de la misma. Los siguientes esquemas ilustran químicas de ejemplo disponibles para sintetizar los compuestos de la presente invención.
Esquema A: Síntesis de Ribosa de Purina 5'-Amino (A-V) Se pueden sintetizar intermediarios de ribosa-purina 5'-amino (A-V) tal como se ilustra en el esquema A anterior. Se convierte un derivado de adenosina 6-CI protegido adecuado (A-I) en un derivado de 6-amino (A-ll) a través del tratamiento con la amina adecuada (incluyendo amonia) en la presencia de una base tal como Et3N, K2C03 o base de Hunig en un solvente tal como MeCN o DMF, THF, /'PrOH o una mezcla de los mismos. Si se requiere, la reacción puede calentarse a una temperatura de 100°C (si la temperatura requerida es mayor al punto de ebullición de uno o más de los componentes en la mezcla, la reacción se puede llevar a cabo en un tubo sellado). Los grupos R en el esquema pueden representar grupos de protección alquilo (por ejemplo, 2,4 dimetoxibencilo). El producto 6-amino (A-ll) puede transformarse en el intermediario 5'-azido (A-lll), convirtiendo el grupo 5'-hidroxilo en un grupo de partida, tal como MsO (por ejemplo, CH3S(0)20) mediante el tratamiento con cloruro de metanosulfonilo (MsCI) en la presencia de una base tal como Et3N, piridina o K2C03 en un solvente inerte tal como CH2CI2, THF, MeCN, DMF o una mezcla de los mismos. El grupo de partida 5' posteriormente se desplaza con un anión de azida de NaN3 en un solvente inerte tal como DMF. Como alternativa, se puede transformar (A-ll) directamente en (A-lll) a través del tratamiento con DPPA, Ph3P y DIAD en un solvente tal como THF. El grupo azido de (A-lll) puede ser reducido a la amina primaria (A-IV) mediante reducción con H2 en la presencia de un catalizador de metal (por ejemplo Pd/C, Pt02) o a través de una reacción de Staudinger con una fosfina tal como Ph3P o PMe3. La amina primaria (A-IV) puede ser convertida en una amina secundaria (A-V) a través del tratamiento con la cetona o aldehido adecuados en la presencia de un agente de reducción adecuado, tal como NaBH(OAc)3 o NaCNBH3. Los reactivos adicionales tal como Ti(OiPr)4 pueden ser agregados.
Como alternativa, el intermediario de 5'-hidroxi (A-ll) puede ser tratado con la sulfonamida (A-VI), DEAD y Ph3P en un solvente inerte tal como THF. El producto de sulfonamida resultante puede ser tratado posteriormente con bencenotiol en la presencia de una base tal como K2C03, CS2C03 para proporcionar una amina secundaria (A-V).
Estas secuencias de reacción anteriores también pueden aplicarse a los derivados de lixosa comenzando a partir de (A-VII) para proporcionar el diastereómero con la configuración opuesta en la posición 5'.
Un conjunto de secuencias de reacción similares pueden emplearse para ribosa o lisoxa sustituidos para 2'-desoxi, o 3'-desoxi, o ribosa o lixosa sustituida (A- VI 11 ) anterior, para obtener intermediarios de ribosa/lisoxa de purina 5'-amino.
Un método alternativo para la introducción de un grupo 6-NH2, tal como se muestra más adelante, es mediante tratamiento (A-IX) de los derivados con NaN3 para producir un intermediario 6-azido seguido de reducción a la porción NH2 (A-X) con una fosfina de trialquilo tal como PMe3 o PPh3.
(A-IX) (A-X) Esquema B: Síntesis de Ribosa de 7-Deazapurina 5' Amino Se pueden sintetizar intermediarios de 5'-amino-7-deazapurina-ribosa (B-V) tal como se ilustra en el esquema B anterior. El intermediario de 7-deazapurina-ribosa protegido adecuado que contiene un sustituyente 6-cloro (B-l), puede convertirse en el derivado de 6-amino correspondiente (B-ll) mediante tratamiento con la amina adecuada (incluyendo amonia) en la presencia de una base tal como Et3N, K2C03 o base de Hunig en un solvente tal como MeCN o DMF, THF, iPrOH o una mezcla de los mismos. Si se requiere, la reacción puede calentarse a una temperatura de 100°C (si la temperatura requerida es mayor al punto de ebullición de uno o más de los componentes en la mezcla, la reacción puede llevarse a cabo en un tubo sellado). Los grupos R en el esquema pueden representar grupos de protección alquilo (por ejemplo, 2,4 dimetoxibencilo). El producto 6-amino (B-ll) puede transformarse en el intermediario 5'-azido (B-lll) convirtiendo el grupo 5'-hidroxilo en un grupo de partida tal como MsO mediante el tratamiento con MsCI en la presencia de una base tal como Et3N, piridina o K2C03 en un solvente inerte tal como CH2CI2, THF, MeCN, DMF o una mezcla de los mismos. El grupo de partida 5' posteriormente se desplaza con un anión de azida de una fuente de azida, tal como NaN3 en un solvente inerte tal como DMF. Como alternativa (B-ll) puede ser transformado directamente en (B-lll) mediante tratamiento con DPPA, Ph3P y DIAD en un solvente tal como THF. El grupo azido de (B-lll) puede ser reducido a la amina primaria (B-IV) mediante reducción con H2 en la presencia de un catalizador de metal (por ejemplo Pd/C, Pt02) o mediante una reacción de Staudinger con una fosfina tal como Ph3P o PMe3. La amina primaria (B-IV) puede ser convertida en la amina secundaria (B-V) mediante tratamiento con la cetona o aldehido adecuados en la presencia de un agente de reducción adecuado tal como NaBH(OAc)3 o NaCNBH3. Se pueden agregar reactivos adicionales tales como Ti(OiPr)4. Como alternativa, el intermediario 5'-hidroxi (B-ll) puede ser tratado con sulfonamida (B-VI), DEAD y Ph3P en un solvente inerte tal como THF. El producto de sulfonamida resultante posteriormente puede ser tratado con bencenotiol en la presencia de una base tal como K2C03, CS2CO3 para proporcionar la amina secundaria (B-V). Estas secuencias de reacción también pueden aplicarse a derivados de lixosa comenzando a partir de (B-VII) para proporcionar el diastereoisómero con la configuración opuesta en la posición 5'.
Se puede emplear un conjunto de secuencias de reacción similar para 2'-desoxi, o 3'-desoxi, o ribosa o lixosa sustituida ( B - V 111 ) anterior para obtener intermediarios de 5'-amino 7-deazapurina-ribosa/lixosa.
Un método alternativo para la introducción de un grupo 6- NH2, tal como se muestra más adelante, es mediante tratamiento (B-IX) de los derivados con NaN3 para producir un intermediario 6-azido seguido de reducción a la porción NH2 (B-X) con una fosfina de trialquilo tal como PMe3 o PPh3.
(B-IX) (B-X) Esquema C: Síntesis de Intermediarios Carbocíclicos-Purina Los intermediarios carbocíclicos de purina 5'-amino (C-X) pueden ser preparados tal como se ilustra en el Esquema C. El ciclopentano (C-l) es opcionalmente protegido a través de métodos conocidos para los expertos en la técnica, para proporcionar (C-ll). Se trata (C-ll) con la 4,6-dicloropirimidina-5-amina adecuada en la presencia de una base tal como Et3N en un solvente prótico tal como n-butanol. La reacción se calienta o se somete a condiciones de microondas para proporcionar el intermediario (C-lll). El intermediario de purina (C-V) se produce tratando (C-lll) con el ortoéster (C-IV) en la presencia de un ácido, tal como AcOH. Normalmente la reacción es calentada. El sustituyente 6-amino puede ser introducido mediante tratamiento con la amina adecuada (incluyendo amonia) en la presencia de una base tal como Et3N, K2C03 o base de Hunig en un solvente tal como MeCN o DMF, THF, iPrOH, o una mezcla de los mismos. Si se requiere, la reacción puede ser calentada a una temperatura de 100°C (si la temperatura requerida es mayor al punto de ebullición de uno o más de los componentes en la mezcla, la reacción se puede llevar a cabo en un tubo sellado). Los grupos R en el esquema pueden representar grupos de protección (por ejemplo, 2,4 dimetoxibencilo). El producto 6-amino (C-VI) puede ser transformado en el intermediario 5'-azido (C-VII), convirtiendo el grupo 5'-hidroxilo en un grupo de partida tal como MsO a través del tratamiento con MsCI en la presencia de una base tal como Et3N, piridina o K2C03 en un solvente inerte tal como CH2CI2, THF, MeCN, DMF o una mezcla de los mismos. El grupo de partida 5' posteriormente se desplaza con un anión de azida procedente de NaN3 en un solvente inerte tal como DMF. Alternativamente (C-VI) puede ser transformado directamente en (C-VII) mediante tratamiento con DPPA, Ph3P y DIAD en un solvente tal como THF. El grupo azido de (C-VII) puede ser reducido a la amina primaria (C-VIII) mediante reducción con H2 en la presencia de un catalizador de metal (por ejemplo Pd/C, Pt02) o a través de una reacción de Staudinger con una fosfina tal como Ph3P o PMe3. La amina primaria (C-VIII) puede convertirse en la amina secundaria (C-X) mediante tratamiento con la cetona o aldehido adecuado en la presencia de un agente de reducción adecuado tal como NaBH(OAc)3 o NaCNBH3. Se pueden agregar reactivos adicionales tal como Ti(OiPr)4. Alternativamente, el intermediario 5'-hidroxi (C-VI) puede ser tratado con la sulfonamida (C-IX), DEAD y Ph3P en un solvente inerte tal como THF. El producto de sulfonamida resultante posteriormente puede ser tratado con bencenotiol en la presencia de una base tal como K2C03, CS2C03 para proporcionar una amina secundaria (C-X).
Esquema D: Síntesis de Intermediarios carbocíclicos-7-Deazapurina Los intermediarios carbocíclicos 5'-amino 7-deazapurina (D-X) pueden prepararse tal como se ilustra en el Esquema D. El ciclopentano (D-l) es opcionalmente protegido a través de métodos conocidos para los expertos en la técnica para proporcionar (D-ll). Se trata (D-ll) con la 4,6-dicloropirimidina (D-lll) adecuada en la presencia de una base tal como Et3N en un solvente prótico tal como EtOH, n-butanol. La reacción se calienta para proporcionar el intermediario (D-IV). El intermediario (D-V) se produce tratando (D-IV) con un ácido, tal como HCI o AcOH.
El 5'-hidroxilo de (D-V) puede ser transformado en el intermediario 5'-azido (D-VI), convirtiendo inicialmente el grupo 5'-hidroxilo en un grupo de partida tal como MsO mediante tratamiento con MsCI en la presencia de una base tal como Et3N, piridina o K2C03 en un solvente inerte tal como CH2CI2, THF, MeCN, DMF o una mezcla de los mismos, y posteriormente desplazando el grupo de partida con anión de azida a partir de NaN3 en un solvente inerte tal como DMF. Alternativamente, (D-V) se puede transformar directamente en (D-VI) mediante tratamiento con DPPA, Ph3P y DIAD en un solvente tal como THF.
El sustituyente 6-amino puede ser introducido mediante tratamiento de (D-VI) con la amina adecuada (incluyendo amonia) en la presencia de una base tal como Et3N, K2C03 o una base de Hunig en un solvente tal como MeCN o DMF, THF, ¡PrOH o una mezcla de los mismos. Si se requiere, la reacción puede calentarse a una temperatura de 100°C (si la temperatura requerida es mayor al punto de ebullición de uno o más de los componentes en la mezcla, la reacción se puede llevar a cabo en un tubo sellado). Los grupos R en el esquema pueden representar grupos de protección alquilo (por ejemplo 2,4 dimetoxibencilo). El grupo azido de (D-VII) puede ser reducido a la amina primaria (D-VIII) mediante reducción con H2 en la presencia de un catalizador de metal (por ejemplo Pd/C, Pt02) o mediante una reacción de Staudinger con una fosfina tal como Ph3P o PMe3. La amina primaria (D-VIII) puede convertirse en la amina secundaria (D-X) a través de tratamiento con la cetona o aldehido adecuado en la presencia de un agente de reducción adecuado tal como NaBH(OAc)3 o NaCNBH3. Los reactivos adicionales tales como Ti(OiPr)4 pueden ser agregados. Alternativamente, el intermediario 5'-hidroxi (D-V) puede ser tratado con la sulfonamida (D-IX), DEAD y Ph3P en un solvente inerte tal como THF. El grupo 6-Amino puede ser introducido posteriormente utilizando condiciones similares a las utilizadas para convertir (D-VI) en (D-VII). El producto de sulfonamida resultante posteriormente puede ser tratado con bencenotiol en la presencia de una base tal como K2C03, CS2C03 para proporcionar la amina secundaria (D-X).
Un experto en la técnica reconocerá que el tener una dicloropirimidina (D-lll) sustituida en forma adecuada, permitirá la sustitución en la porción 7-deazapurina.
Esquema E. Inversión de estereoquímica en la posición 5' Para generar los intermediarios adecuados de la estereoquímica opuesta en la posición 5', se puede seguir una secuencia de reacción tal como se ilustra en el Esquema E. El ciclopentano (E-l) es opcionalmente protegido, en el cual se convierte 5'-hidroxilo en un grupo de partida mediante tratamiento con MsCI en la presencia de Et3N en un solvente tal como CH2CI2. El grupo de partida 5' se desplaza con Me2NH, mediante tratamiento con Me2NH como una solución 2.0M en THF en un tubo sellado. La reacción se calienta a una temperatura de 40 a 80°C. La amina terciaria resultante se oxida con un oxidante tal como mCPBA en un solvente tal como un CH2CI2 para proporcionar el N-óxido correspondiente. Posteriormente el N-óxido se somete a calentamiento, a una temperatura de 50 a 120°C en un solvente inerte tal como N,N-dimetilacetamida para proporcionar el alqueno (E-lll). El alqueno se somete a trabajo de hidroboración/oxidativo para producir el estereoisómero 5' invertido (E-IV). Los reactivos de hidroboración adecuados incluyen BH3-THF y las condiciones de trabajo oxidativo adecuadas incluyen H202/NaOH. Posteriormente el intermediario (E-IV) puede ser sometido a las secuencias de reacción ilustradas en los esquemas C y D para producir los intermediarios (E-V) y (E-VI).
Esquema F: 2' y 3' Desoxiciclopentanos y Ribosas El uso de los intermediarios (F-l) y (F-lll) en los procedimientos descritos en los Esquemas C y D, permite la síntesis de derivados desoxi carboxíclicos de purina y 7-deazapurina. Los intermediarios a base de ribosa (F-V), (F-VI), (F-Vlll) y (F-IX) pueden ser utilizados en procedimientos de reacción similares a los descritos en los Esquemas A y B anteriores.
Esquema G: Síntesis de Ciclobutano Los ciclobutanos de las fórmulas (G -V III), (G-XV) y (G-XXI) pueden ser sintetizados como se ilustra en el Esquema G. Los ésteres alquenílicos (G-l) pueden ser sometidos a una cicloadición [2 + 2] con cloruro de tricloroacetilo en la presencia de un acople Zn/Cu en un solvente inerte tal como Et20, DME, THF o una mezcla de los mismos. Alternativamente, la reacción de cicloadición [2 + 2] puede llevarse a cabo utilizando polvo Zn bajo condiciones de exposición a ultrasonido. Los dicloruros (G-II) se reducen mediante tratamiento con polvo Zn en la presencia de un donador de protones tal como NH4CI en un solvente tal como MeOH. Las ciclobutanonas (G-IV) (que incluyen (G-lll)) pueden elaborarse en forma adicional mediante tratamiento con un fosfonato (G-V) para proporcionar los ésteres a, ß insaturados (G-VI). El ácido (VI) se convierte a la amida de Weinreb (G-VII) bajo condiciones estándar (por ejemplo cloroformato de isobuti lo , base de Hunig, ?,?-dimetil hidroxilamina). El enlace doble posteriormente puede reducirse mediante hidrogenado utilizando H2 en la presencia de un catalizador de metal tal como Pd/C, Pt02 o Pd(OH)2 para proporcionar los intermediarios de ciclobutano (G-VIII).
Las ciclobutanonas (G-IX) pueden ser tratadas con el reactivo de Wittig (G-X) para proporcionar el éter de enol de ciclobutano (G-XI), el cual al momento de la desprotección proporciona el ácido correspondiente (G-X II).
Las ciclobutanonas (G-IX) también pueden ser tratadas con el fosfonato estabilizado (G-V) en la presencia de una base tal como KOtBu, LDA, NaHMDS, KHMDS o LiHMDS o con Et3N en la presencia de LiCI en un solvente inerte para proporcionar el éster a, ß insaturado (G-XIII) el cual puede ser reducido al (G-XIV) mediante tratamiento con H2 en la presencia de un catalizador de metal tal como Pd/C, Pd(OH)2 o Pt02 en un solvente inerte. La funcionalidad de ácido de (G-XIV) puede convertirse en la amida de Weinreb correspondiente mediante tratamiento con ?,?-dimetilhidroxilamina en la presencia de un agente de acoplamiento adecuado tal como isobutilcloroformato y una base tal como una base de Hunig para proporcionar (G-XV).
Las ciclobutanonas (G-XVI) también pueden ser tratadas con ?,?-dimetilhidroxilamina en la presencia de un agente de acoplamiento adecuado tal como isobutilcloroformato y una base tal como una base de Hunig para proporcionar la amida de Weinreb correspondiente (G-XVII), la cual al momento de la aminación reductiva con un equivalente de amonia seguido de desprotección según sea necesario, proporciona la amina (G-XVIII). Los equivalentes de amonia adecuados incluyen benzhidril amina, NH3, NH4CI, BnNH2) PMB-NH2, 2,4 D MB-N H2 que pueden ser tratados con cetona (G-XVII) y un agente de reducción tal como NaCN(BH3) o Na(OAc)3BH en la presencia de un ácido, si se requiere tal como HCI o AcOH. Los grupos de protección en los productos de aminación reductiva pueden ser eliminados a través de métodos conocidos para los expertos en la técnica. Alternativamente, la cetona (G-XVII) puede ser tratada con hidroxil amina para formar la oxima correspondiente que posteriormente puede ser reducida con H2 en la presencia de un catalizador de metal tal como Pd/C, Pt02 o Pd(OH)2 para proporcionar el intermediario (G-XVIII).
El ciclobutano (G-IV) puede convertirse en la amina (G-XXI) a través de una secuencia de pasos múltiples que implica tratamiento (G-IV) con el fosforano (G-V) para producir el éter de enol (G-XIX). El tratamiento de (G-XIX) con el cual posteriormente es ?,?-dimetilhidroxilamina en la presencia de un agente de acoplamiento adecuado, tal como cloroformato de iso-butilo y una base tal como una base de Hunig para proporcionar la amida de Weinreb correspondiente (G-XX), la cual después de la hidrólisis acuosa del éter de enol (por ejemplo TsOH/H20, HCI/H20) y la aminación reductiva con un equivalente de amonia seguido de desprotección según es necesario, proporciona la amina (G-XXI). Los equivalentes de amonia adecuados incluyen benzhidril amina, NH3, NH4CI, BnNH2, PMB-NH2, 2,4 DMB-NH2. Los agentes de reducción adecuados para la aminación reductiva incluyen NaCN(BH3) o Na(OAc)3BH utilizada en la presencia de un ácido si se requiere tal como HCI o AcOH. Los grupos de protección en los productos de aminación reductiva pueden ser eliminados a través de métodos conocidos para los expertos en la técnica.
Esquema H: Elaboración de Ciclobutanos (H-V) Las ciclobutanonas (H-l) pueden ser convertidas en los bencimidazoles (H-lll), ureas (H-IV) y amidas (H-V) mediante las secuencias de reacción ilustradas en el Esquema H. Los bencimidazoles (H-lll) pueden ser formados tratando los ácidos (H-l) con la diamina de benceno adecuada (H-ll) en la presencia de un agente de acoplamiento adecuado (por ejemplo, HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI), en la presencia de una base (por ejemplo, Et3N, base de Hunig, K2C03). Si es necesario se pueden agregar reactivos adicionales tales como HOAT, HOBt o HOSu. Las amino-amidas resultantes posteriormente se ciclan para los bencimidazoles en la presencia de ácido, por ejemplo AcOH que también pueden servir como el solvente. La reacción normalmente se lleva a cabo a temperaturas que fluctúan de temperatura ambiente a 80°C. Se pueden preparar las ureas (H- IV) con virtiendo los ácidos (H-l) tal como se indica a continuación. El ácido se reduce al alcohol primario correspondiente utilizando un reactivo tal como L i A I H 4 o BH3.THF. Si es necesario, la funcionalidad de cetona puede ser protegida primero, (por ejemplo, como un cetal) antes de la reducción, y subsecuentemente desprotegidas. El alcohol primario se convierte posteriormente en un grupo de partida tal como mesilato. El grupo de partida resultante se desplaza con la azida de una fuente tal como NaN3. El compuesto del producto de azido se reduce al compuesto de amino correspondiente utilizando H2 en la presencia de un catalizador de metal tal como Pd/C o mediante una reacción de Staudinger con una fosfina tal como P e3 o PPh3. Posteriormente la urea (H-IV) se forma mediante tratamiento de la amina primaria con el isocianato adecuado, R-C = N = 0 en la presencia de una base tal como Et3N o K2C03 en un solvente inerte tal como CH2CI2. Las amidas (H-V) se forman tratando los ácidos (H-l) con la amina adecuada R-NH2 en la presencia de un agente de acoplamiento adecuado (por ejemplo HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI), en la presencia de una base (por ejemplo Et3N, base de Hunig, K2C03). Los reactivos adicionales tales como HOAT, HOBt o HOSu pueden ser agregados si es necesario.
Esquema I: Elaboración de Amidas de Weinreb de ciclobutano Tal como se muestra en el esquema 1 anterior, las amidas de Weinreb (l-l) y (l-V) pueden ser transformadas en los aldehidos de bencimidazol (l-lll), aldehidos de urea (l-IV) y (I-VI) y aldehidos de amida (l-V), utilizando procedimientos similares tal como se describe en el Esquema H seguido de reducción de amida de Weinreb. La reducción de la amida de Weinreb se puede llevar a cabo utilizando DiBAL-H en un solvente inerte tal como CH2CI2, THF a una temperatura de 10 a -78°C. La amida de Weinreb de amino (l-V) también se puede convertir en la urea (l-VI) mediante tratamiento con el isocianato adecuado seguido de reducción con DiBAL-H.
Esquema J: Elaboración de Ciclobutano Los intermediarios de bencimidazol (J-V), urea (J-V I ) y amida (J-VII) se pueden sintetizar tal como se ilustra en el Esquema J. Las ciclobutanonas (J-l) se pueden someter a una reacción de Wittig con el fosforano (J-ll) para producir el éter de enol (J-lll). El ácido de éter de enol posteriormente se somete a condiciones de reacción similares a las descritas en el esquema H para producir los bencimidazoles de éter de enol, ureas y amidas correspondientes, que al momento del tratamiento con ácido acuoso, tal como TsOH/H20, HCI genera los intermediarios de aldehido correspondientes (J-V), (J-VI) y (J-VII) respectivamente.
Esquema K: Acoplamiento de Ciclobutanos a Aminas La fórmula (K-V) en el Esquema K anterior, representa los intermediarios (K-l a K-IV) que se encuentran a continuación y sus intermediarios 2'- o 3'-desox¡ correspondientes, cuyas síntesis se describen en los Esquemas (K-lll) (K-IV) Tal como se muestra en el Esquema K, las cetonas (K-VI), (K-VII) y (K-VIII) y los aldehidos (K-XII), (K-XIII) y (K-XIV) se convierten en los bencimidazoles correspondientes (K-IX) y (K-XV), ureas (K-X) y (K-XVI) y amidas (K-XI) y (K-XVII) mediante aminación reductiva con (K-V). La aminación reductiva puede llevarse a cabo'con un agente de reducción adecuado tal como NaCN(BH3) o Na(OAc)3BH en la presencia de un ácido, si se requiere, tal como HCI o AcOH o un ácido de Lewis/agente de deshidratación tal como Ti(OiPr)4 o MgS04.
Esquema L: Acoplamiento Alternativo En el esquema de reacción alternativo, los bencimidazoles (L-V), ureas (L-VI) y amidas (L-VII) representativos se pueden preparar mediante la secuencia de reacción ilustrada en el Esquema L. Las aminas (L-l), en donde Q y Rc tienen las mismas definiciones que en el Esquema K, se tratan con los ciclobutanos (L-ll) bajo condiciones de aminación reductiva utilizando un agente de reducción tal como NaCNBH3 o Na(OAc)3BH en la presencia de un ácido tal como HCI o AcOH o un ácido de Lewis tal como Ti(OiPr)4, para producir el ácido (L-III). El ácido puede convertirse en los bencimidazoles (L-V), ureas (L-VI) y amidas (L-VII) objetivo correspondientes, utilizando condiciones de reacción similares a los del esquema H.
Esquema M: Acoplamiento alternativo (M-IX) Los éteres de enol (M-1) pueden ser hidrolizados bajo condiciones ácidas (por ejemplo TsOH/H20, HCI/H20) para proporcionar los aldehidos (M-ll). La aminación reductiva de (M-II) se lleva a cabo con las aminas (M-lll) en donde Q y Rc tienen el mismo significado que en el esquema K, utilizando un agente de reducción tal como NaCNBH3 o Na(OAc)3BH en la presencia de un ácido tal como HCI o AcOH o un ácido de Lewis/agente de deshidratación tal como Ti(OiPr)4 o MgS04. Posteriormente se lleva a cabo la eliminación del grupo de protección de éster i subsecuente, para proporcionar el ácido (M-IV). Los ácidos (M-V) (incluyen los ácidos (M-IV)) pueden ser transformados en los bencim idazoles objetivo correspondiente (M-VII), ureas (M-VIII) y amidas (M-IX) objetivo correspondientes utilizando condiciones de reacción similares a las descritas en el esquema H.
Esquema N: Síntesis de Amidas 2. Desprotección (N-XI) (N-ll) (N-XIII) Los bencimidazoles, ureas y amidas de la fórmula (N-XIII) puede ser sintetizados como se ilustra en el Esquema N. El aldehido (N-l) en donde X representa una funcionalidad de bencimidazol, urea o amida, se puede convertir al ácido correspondiente mediante oxidación con un reactivo tal como tal como NaCI02. Las ciclobutanonas de la fórmula (N-lll) se pueden tratar con fosfonatos de la fórmula (N-IV) y una base adecuada tal como LiHMDS, NaHMDS, KHMDS, KOtBu, LDA o Et3N/LiCI en un solvente inerte para proporcionar los ciclobutanos (N-V), que al momento de la reducción mediante tratamiento con H2 en la presencia de un catalizador de metal adecuado tal Pd/C, Pt02 o Pd(OH)2, proporcionan el ácido (ÑIVO- Los ácidos de la fórmula (N-VII) que incluyen los ácidos de la fórmula (N-VI), se pueden convertir en los bencimidazoles (N-IX), ureas (N-X) y amidas (N-XI) correspondientes mediante una serie de reacciones similares a las ilustradas en el esquema H. Los bencimidazoles, ureas y amidas de la fórmula (N-ll) posteriormente se pueden convertir a los bencimidazoles, ureas y amidas de la fórmula ( N - X 111 ) a través de una reacción de acoplamiento de amida con la amina ( N-X III), en donde Re y Q tienen las mismas definiciones que en el Esquema K, utilizando un agente de acoplamiento adecuado (por ejemplo HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI), en la presencia de una base (por ejemplo Et3N, base de Hunig, K2C03). Los reactivos adicionales tales como HOAT, HOBt o HOSu pueden ser agregados necesario.
Esquema O: Análogos que Contienen 5'-Azufre (O-XV) Los tioéteres (O-X 111 ) , sulfóxidos (O-XIV) y sulfonas (O-XV) se pueden sintetizar tal como se describe en el Esquema O. Las ciclobutanonas (O-l), en donde X representa la funcionalidad bencimidazol, urea o amida, se pueden reducir con un reactivo de reducción tal como NaBH4, para proporcionar el alcohol correspondiente, el cual a su vez puede convertirse a un grupo de partida tal como MsO, mediante tratamiento con MsCI con una base tal como K2C03 en un solvente inerte. El ciclobutano ( O - 11 ) se convierte posteriormente al tiol correspondiente (O-lll), tratando primero con un nucleófilo a base de azufre tal como KSAc seguido de hidrólisis de tioéster bajo condiciones básicas, por ejemplo LiOH/H20/MeOH.
Los aldehidos (O-IV) pueden convertirse a los tioles correspondientes mediante una secuencia de reacción similar a la descrita para convertir (O-l) en (O-lll).
Las ciclobutanonas (O-VII) pueden convertirse en ácidos (O-IX) mediante tratamiento con un fosfonato de la fórmula (O-VIII) en la presencia de una base adecuada (CS2C03, K2C03, LiHMDS, NaHMDS, KHMDS, KOtBu, LDA), seguido de reducción utilizando H2 en la presencia de un catalizador de metal adecuado tal como Pd/C, Pt02 o Pd(OH)2. El ácido se reduce selectivamente al alcohol primario utilizando un reactivo tal como BH3:THF o mediante reacción con carbonildiimidazol, Et3N seguido de NaBH4. El alcohol primario se convierte al tiol correspondiente utilizando reacciones similares a las utilizadas para la síntesis de (O-lll) y (O-VI) a partir de sus intermediarios de alcohol secundarios.
Los tioles (O-XI) posteriormente pueden ser tratados con los intermediarios (0-XII) en donde Q' representa los intermediarios (O-XVI), (O-XVII), (O-XVIII) y (O-XIX) ilustrados más adelante (y también los intermediarios 2'-o 3'-desoxi correspondientes) y LG representa un grupo de partida tal como Cl, TfO o MsO. La reacción se puede llevar a cabo en la presencia de una base adecuada tal como K2C03, CS2C03, Et3N o base de Hunig para proporcionar los tioéteres (O-XIII) que pueden convertirse en los sulfóxidos (O-XIV) o sulfonas (O-XV) correspondientes mediante tratamiento con agentes de oxidación adecuados tales como H202 o mCPBA.
(O-XVIII) Esquema P: Tapones de Amina, Amida y Sulfonamida n=0-2 m=0-2 O O* R' Las moléculas objetivo de amina, amida y sulfonamida pueden ser sintetizadas a partir de las aminas (P-l), (P-H) y (P-III) utilizando condiciones de reacción estándar. Las moléculas objetivo de amida se pueden producir tratando las aminas con el ácido carboxilico adecuado en la presencia de un agente de acoplamiento adecuado (por ejemplo HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI), en la presencia de una base (por ejemplo Et3N, base de Hunig, K2C03). Los reactivos adicionales tales como HOAt, HOBt o HOSu pueden ser agregados si es necesario. Las moléculas objetivo de sulfonamida pueden ser producidas, tratando las aminas con el cloruro de sulfonilo adecuado en la presencia de una base tal como K2C03 o Et3N. Las moléculas objetivo de amina pueden formarse a través de una reacción de aminación reductiva con el aldehido o cetona adecuados en la presencia de un agente de reducción adecuado tal como NaBH(OAc)3 o NaCNBH3. Los reactivos adicionales tales como ácidos AcOH o HCI o los agentes de deshidratación/ácido de Lewis, Ti(OiPr)4 o MgS0 , pueden ser agregados.
Esquema Q: Preparación de 4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)benceno-1 ,2-diamina uema R: Preparación de 4-ciclobutilbenceno-1 ,2-diam Esquema S: Preparación de 1-(3,4-diaminofenil)ciclobutanocarbonitrilo Esquema Preparación de 4-ciclopropilbenceno-1 ,2-diamina B(OH), Esquema U: Preparación de 1-(3,4-diaminofenil)ciclopropanocarbonitrilo [f "CN Esquema V: Preparación de 4-(2,2,2-trifluoroetil)benceno- 1 ,2-diamina Etapa 3 PMe,, THF F- F kf*YNH2j «H?' EPtaDpCa, 4E,OH F F"Y K¿Y-{ Esquema W: Preparación de 2-(3,4-diaminofenil)-2 metilpropanonitrilo A lo largo de la descripción, cuando las composiciones se describen como teniendo, incluyendo o comprendiendo componentes específicos, o cuando los procesos se describen como teniendo, incluyendo o comprendiendo pasos de proceso específicos, se contempla que las composiciones de la presente invención también consistan esencialmente en, o consistan en los componentes mencionados, y que los procesos de la presente invención también consistan esencialmente en, o consistan en los pasos de procesamiento mencionados. Además, deberá quedar entendido que el orden de los pasos o el orden para llevar a cabo ciertas acciones, son irrelevantes, siempre que la presente invención permanezca operable. Además, se pueden llevar a cabo en forma simultánea dos o más pasos o acciones.
Los compuestos diseñados, seleccionados y/o optimizados a través de los métodos descritos anteriormente, una vez producidos, se pueden caracterizar utilizando una variedad de ensayos conocidos para los expertos en la técnica para determinar si los compuestos tienen actividad biológica. Por ejemplo, las moléculas pueden ser caracterizadas mediante ensayos convencionales incluyendo pero sin limitarse a los ensayos descritos más adelante, para determinar si tienen una actividad, actividad de enlace y/o especificidad de enlace anticipada.
Además, se puede utilizar clasificación de alto rendimiento para acelerar el análisis utilizando dichos ensayos. Como resultado, puede ser posible clasificar rápidamente las moléculas aquí descritas con respecto a la actividad, utilizando técnicas conocidas en el arte. Las metodologías generales para llevar a cabo clasificación de alto rendimiento se describen, por ejemplo en la Publicación de Devlin (1998) High Throughput Screening, Marcel Dekker; y en la Patente Norteamericana No. 5,763,263. Los ensayos de alto rendimiento pueden utilizar una o más diferentes técnicas de ensayo, incluyendo pero sin limitarse a las aquí descritas.
Para evaluar en forma adicional las propiedades tipo fármaco de un compuesto, también se puede medir la inhibición de las enzimas de citocromo P450 y la actividad de metabolización de enzimas fase II, ya sea utilizando sistemas de enzimas humanas recom binantes o sistemas más complejos tipo microsomas de hígado humano. Además, los compuestos, también pueden ser evaluados como substratos de estas actividades de enzimas metabólicas. Estas actividades son útiles para determinar el potencial de un compuesto para originar interacciones fármaco-fármaco o generar metabolitos que retienen o tienen actividad antimicrobiana no útil.
Para obtener un estimado del potencial que tiene el compuesto para ser oralmente biodisponible, también se puede llevar a cabo ensayos de solubilidad y Caco-2. El último es una línea celular de epitelio humano que permite la medida de la captación de fármaco y el pasaje a través de una monocapa de célula Caco-2 que con frecuencia crece dentro de los depósitos de una placa de microtitulacion de 24 depósitos equipada con una membrana de 1 miera. Se pueden medir concentraciones de fármaco libres en la parte basolateral de la monocapa, para evaluar la cantidad de fármaco que pasa a través de la monocapa intestinal. Se necesitan controles adecuados para asegurar la integridad de la monocapa y el hermetismo de las uniones de las aberturas. Utilizando este mismo sistema, se puede obtener un estimado del eflujo transmitido por P-glucoproteína. La P-glucoproteína es una bomba que se localiza en la membrana apical de las células, que forma monocapas polarizadas. Esta bomba puede abrogar la captación activa o pasiva a través de la membrana de célula Caco-2, dando como resultado que pase menos fármaco a través de la capa epitelial intestinal. Estos resultados con frecuencia se realizan junto con medidas de solubilidad, y ambos de estos factores son conocidos por contribuir a la biodisponibilidad oral en mamíferos. Las medidas de la biodisponibilidad oral en mamíferos y finalmente en los hombres, utilizando experimentos farmacocinéticos adicionales, determinarán la biodisponibilidad oral absoluta.
Los resultados experimentales también pueden ser utilizados para construir modelos que ayudan a anticipar parámetros físico-químicos que contribuyen a las propiedades tipo fármaco. Cuando dicho modelo es verificado, se puede reducir la metodología experimental, con una confiabilidad incrementada en la capacidad de anticipación del modelo. 3. Métodos de Tratamiento Le leucemia de linaje mezclado (MLL) es una forma genéticamente distinta de leucemia aguda que constituye aproximadamente el 70% de las leucemias infantiles, y aproximadamente el 10% de las leucemias mieloides agudas en adultos (AML) (Hess, J. L. (2004), Trends Mol Med 10, 500-507; Krivtsov, A. V., y Armstrong, S. A. (2007), Nat Rev Cáncer 7, 823-833). MLL representa una forma particularmente agresiva de leucemia, y los pacientes con esta enfermedad generalmente tienen pronósticos deficientes; estos pacientes con frecuencia padecen de recurrencia temprana después del tratamiento con las quimioterapias actuales. Por lo tanto, actualmente existe una gran necesidad de nuevas modalidades de tratamiento para pacientes que padecen de MLL.
Una característica universal de la enfermedad de MLL, es una translocación cromosomal que afecta el gen MLL en el cromosoma 11q23 (Hess, 2004; Krivtsov and Armstrong, 2007). Normalmente, el gen MLL codifica una metiltransferasa de histona de dominio SET que cataliza la metilacion de la lisina 4 de histona H3 (H3K4) en loci de gen específico (Milne et al. (2002) Mol Cell 10, 1107-1117; Nakamura et al. (2002), Mol Cell 10, 1119-1128). La localización de gen es conferida por interacciones específicas con elementos de reconocimiento dentro de MLL, externos al dominio SET (Ayton et al. (2004) Mol Cell Biol 24, 10470-10478; Slany et al., (1998) Mol Cell Biol 18, 122-129; Zeleznik-Le et al. (1994) Proc Nati Acad Sci U S A 91, 106 0- 0614). En las translocaciones enlazadas por la enfermedad, el dominio SET catalítico se pierde y la proteína MLL restante se fusiona a una variedad de partes, incluyendo miembros de la familia AF y ENL de proteínas tales como AF4, AF9, AF10 y ENL (Hess, 2004; Krivtsov and Armstrong, 2007; Slany (2009) Haematologica 94, 984-993). Estas partes de fusión tienen la capacidad de interactuar directa o indirectamente, con otra metiltransferasa de histona, DOT1L (Bitoun et al. (2007) Hum Mol Genet 16, 92-106; Mohán et al. (2010) Genes Dev. 24, 574-589; Mueller et al. (2007) Blood 110, 4445-4454;. Mueller et al. (2009) PLoS Biol 7, e1000249; Okada et al. (2005) Cell 121 , 167-178; Park et al. (2010) Protein J 29, 213-223; Yokoyama et al. (2010) Cáncer Cell 17, 198-212; Zhang et al. (2006) J Biol Chem 281, 18059-18068). Como resultado, los productos de translocación retienen elementos de reconocimiento específicos de gen dentro del resto de la proteína MLL, aunque también ganan la capacidad de reclutar DOT1 L, a estos lugares (Monroe et al. (2010) Exp Hematol. 2010 Sep18. [Epub en la parte superior de la impresión] Pubmed PMID: 20854876; Mueller et al., 2007; Mueller et al., 2009; Okada et al., 2005). DOT1L cataliza la metilación de H3K79, una modificación de cromatina asociada con genes transcritos activamente (Feng et al. (2002) Curr Biol 12, 1052-1058; Steger et al. (2008) Mol Cell Biol 28, 2825-2839). La metilación H3K79 ectópica que resulta del reclutamiento de la proteína de fusión MLL de DOT1L, conduce a la expresión incrementada de genes leucemogénicos, incluyendo HOXA9 y MEIS1 (Guenther et al. (2008) Genes & Development 22, 3403-3408; Krivtsov et al. (2008) Nat Rev Cáncer 7, 823-833; MMne et al. (2005) Cáncer Res 65, 11367-11374; Monroe et al., 2010; Mueller et al., 2009; Okada et al., 2005; Thiel et al. (2010) Cáncer Cell 17, 148-159). Por lo tanto, aunque DOT1L no se altera genéticamente en la enfermedad per se, su actividad enzimática mal ubicada es una consecuencia directa de la translocación cromosomal que afecta a pacientes MLL; por lo tanto, se ha propuesto DOT1L como un conductor catalítico de leucemogénesis en esta enfermedad (Krivtsov et al., 2008; Monroe et al., 2010; Okada et al., 2005; Yokoyama et al. (2010) Cáncer Cell 17, 198-212). El soporte adicional de un desempeño patogénico de DOT1L en MLL, viene de estudios en sistemas modelos que demuestran un requerimiento de DOT1L para propagar la actividad de transformación de las proteínas de fusión MLL (Mueller et al., 2007; Okada et al., 2005).
La evidencia indica que la actividad enzimática de DOT1L es importante para la patogénesis en MLL y la inhibición de DOT1L puede proporcionar una base farmacológica para intervención terapéutica en esta enfermedad. El tratamiento del compuesto da como resultado una exterminación dependiente de la concentración, selectiva de las células de leucemia que contienen la translocación-MLL sin tener efecto en las células transformadas sin MLL. El análisis de expresión de gen de las células tratadas con inhibidor, muestra la desactivación de genes sobreexpresados en forma aberrante en leucemias reajustadas por MLL y similitudes con los cambios de expresión genética originados por la eliminación genética del gen DotIL en un modelo de ratón de leucemia MLL-AF9.
La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular en un sujeto que necesita del mismo, administrando al sujeto que necesita de tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. El trastorno de proliferación celular puede ser cáncer o una condición precancerígena. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto de la presente invención o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular.
La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de cáncer hematologico o tumores hematologicos en un sujeto que necesita del mismo, administrando al sujeto que necesita de dicho tratamiento, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de cáncer hematológico o tumor hematológico.
La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de leucemia en un sujeto que necesita del mismo, a través de la administración a un sujeto que necesita de dicho tratamiento, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. La leucemia puede ser leucemia aguda o crónica. Preferentemente, la leucemia es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda o o leucemia de linaje mezclado. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de leucemia.
La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de una enfermedad o trastorno transmitido por la translocación de un gen en el cromosoma 11 q 23 en un sujeto que necesita del mismo, a través de la administración a un sujeto que necesita de dicho tratamiento, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. El gen puede ser el gen MLL. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de una enfermedad o trastorno transmitido por la traslocación de un gen en el cromosoma 11q23.
La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de una enfermedad o trastorno transmitido por metilación de proteína transmitida por DOT1 (por ejemplo, DOT1L) en un sujeto que necesita del mismo, a través de la administración a un sujeto que necesita de dicho tratamiento, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de una enfermedad o trastorno transmitido por metilación de proteína transmitida por DOT1L.
La presente invención proporciona métodos para el tratamiento de un trastorno cuyo curso es influenciado por la modulación del estado de metilación de las histonas u otras proteínas, en donde el estado de metilación es transmitido al menos en parte por la actividad de DOT1L. La modulación del estado de metilación de las histonas, a su vez puede influenciar el nivel de expresión de genes objetivo activados por metilación, y/o genes objetivos suprimidos por metilación. El método incluye administrar a un sujeto que necesita de dicho tratamiento, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.
El trastorno en el cual la metilación de proteína transmitida por DOT1L desempeña un papel importante, puede ser cáncer o una condición precancérigena o un trastorno neurológico. La presente invención proporciona además el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de cáncer o una enfermedad neurológica.
La presente invención también proporciona métodos para proteger contra un trastorno en donde la metilación de proteína transmitida por DOT1L desempeña un papel importante en un sujeto que necesita del mismo, a través de la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, a un sujeto que necesita de dicho tratamiento. El trastorno puede ser cáncer o una enfermedad neurológica. La presente invención también proporciona el uso de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de un medicamento útil para la prevención de un trastorno de proliferación celular.
Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para modular la metilacion de proteína (por ejemplo, histona), por ejemplo, para modular la actividad de la enzima de metiltransferasa de histona o dimetilasa de histona. La metilacion de histona ha sido reportada por estar implicada en la expresión aberrante de ciertos genes en cánceres, y en la silenciación de genes neuronales en células no neuronales. Los compuestos aquí descritos se pueden utilizar para tratar estas enfermedades, es decir, para disminuir la metilacion o restaurar la metilacion rigurosamente a su nivel en células normales de contraparte.
En general, los compuestos que son moduladores de la metilación pueden ser utilizados para modular de manera general la proliferación celular. Por ejemplo, en algunos casos, se puede reducir la proliferación excesiva con agentes que disminuyen la metilación, en donde una proliferación insuficiente puede ser estimulada con agentes que incrementan la metilación. Por consiguiente, las enfermedades que pueden ser tratadas a través de los compuestos de la presente invención, incluyen enfermedades hiperproliferativas, tales como crecimiento de célula benigna y crecimiento de célula maligna.
Tal como se utiliza en la presente invención, un "sujeto que necesita del mismo", es un sujeto que tiene un trastorno de proliferación celular, o un sujeto que tiene riesgo incrementado de desarrollar un trastorno de proliferación celular en forma relativa al grueso de la población. El sujeto puede tener cáncer o pre-cáncer. Preferentemente, un sujeto que necesita del mismo, tiene cáncer. Más preferentemente, un cáncer hematológico o leucemia. Un "sujeto" incluye un mamífero. El mamífero puede ser, por ejemplo, cualquier mamífero, por ejemplo, humano, primate, ave, ratón, rata, ave, perro, gato, vaca, caballo, cabra, camello, oveja o cerdo. Preferentemente, el mamífero es un humano.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "trastorno de proliferación celular" se refiere a condiciones en las cuales el crecimiento de las células desregulado o anormal, o ambos, puede conducir al desarrollo de una condición o enfermedad no deseada, que puede o no ser cancerígena. Los trastornos de proliferación celular de ejemplo de la presente invención, comprenden una variedad de condiciones en donde la división celular es desregulada. El trastorno de proliferación celular de ejemplo incluye, pero no se limita a, neoplasmas, tumores benignos, tumores malignos, condiciones pre-cancerígenas, tumores in situ, tumores encapsulados, tumores metastáticos , tumores líquidos, tumores sólidos, tumores inmunológicos, tumores hematológicos, cánceres, carcinomas, leucemias, linfomas, sarcomas, y células de división rápida. El término "célula de división rápida" tal como se utiliza en la presente invención, se define como cualquier célula que se divide en un rango que excede o es mayor a lo que se espera u observa entre células vecinas o yuxtapuestas dentro del mismo tejido. Un trastorno de proliferación celular incluye un precáncer o una condición precancerígena. Un trastorno de proliferación celular incluye cáncer. Preferentemente, los métodos aquí proporcionados se utilizan para tratar o aliviar un síntoma de cáncer. El término "cáncer" incluye tumores sólidos, así como tumores hematológicos y/o malignidades. Una "célula de precáncer" o "célula precancerígena" es una célula que manifiesta un trastorno de proliferación celular que es un precáncer o una condición precancerígena. Una "célula de cáncer" o "célula cancerígena" es una célula que manifiesta un trastorno de proliferación celular que es cáncer. Cualquier medio reproducible de medida puede ser utilizado para identificar células de cáncer o células precancerígenas. Las células de cáncer o células precancerígenas pueden ser identificadas mediante tipificación histológica o graduación de una muestra de tejido (por ejemplo, una muestra de biopsia). Las células de cáncer o células precancerígenas, se pueden identificar a través del uso de marcadores moleculares adecuados.
Las condiciones o trastornos no cancerígenas de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, artritis reumatoide; inflamación; enfermedad autoinmune; condiciones linfoproliferativas; acromegalia; espondilitis reumatoide; osteoartritis; gota, otras condiciones artríticas; sepsis; choque séptico; choque endotóxico; sepsis gram-negativa; síndrome de choque tóxico; asma; síndrome de incomodidad respiratoria en adultos; enfermedad pulmonar obstructiva crónica; inflamación pulmonar crónica; enfermedad inflamatoria del intestino; enfermedad de Crohn; psoriasis; eczema; colitis ulcerativa; fibrosis pancreática; fibrosis hepática; enfermedad renal aguda y crónica; síndrome de intestino irritable; piresis; restenosis; malaria cerebral; ataque y lesión isquémica; trauma neural; enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Huntington; enfermedad de Parkinson; dolor agudo y crónico; rinitis alérgica; conjuntivitis alérgica; falla cardíaca crónica; síndrome coronario agudo; caquexia; malaria; leprosa; leishmaniasis; enfermedad de Lyme; síndrome de Reiter; sinovitis aguda; degeneración muscular, bursitis; tendonitis; tenosinovitis; síndrome de disco intervertebral herniado de ruptura o prolapsado; osteoporosis; trombosis; restenosis; silicosis; sarcosis pulmonar; enfermedades de reabsorción de huesos, tal como osteoporosis; reacción de injerto versus huésped; Esclerosis Múltiple; lupus; fibromialgia; SIDA y otras enfermedades virales tales como Herpes Zoster, Herpes Simple I o II, virus de influenza y citomegalovirus; y diabetes melitus.
Los cánceres de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, carcinoma adrenocortical, cánceres relacionados con SIDA, linfoma relacionado con SIDA, cáncer anal, cáncer ano-rectal, cáncer del canal anal, cáncer de apéndice, astrocitoma cerebelar infantil, astrocitoma cerebral infantil, carcinoma de célula basal, cáncer de piel (sin melanoma), cáncer biliar, cáncer de ducto biliar extrahepático, cáncer de ducto biliar intrahepático, cáncer de vejiga, cáncer de vejiga urinaria, cáncer de hueso y articulación, osteosarcoma e histocitoma de fibrosis maligna, cáncer de cerebral, tumor cerebral, glioma de tronco cerebral, astrocitoma cerebelar, astrocitoma cerebral/glioma maligno, ependimoma, meduloblastoma, tumores neuroectodeimales primitivos suprasensoriales, trayectoria visual y glioma hipotalámico, cáncer de seno, adenomas bronquiales/carcinoides, tumor carcinoide, cáncer gastrointestinal del sistema nerviosos, linfoma del sistema nervioso, cáncer del sistema nerviosos central, linfoma del sistema nervioso central, cáncer cervical, cánceres infantiles, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielogenosa crónica, trastornos m ieloproliferativos crónicos, cáncer de colon, cáncer colo-rectal, Mnfoma de célula-T cutáneo, neoplasma linfoide, micosis fungoides, Síndrome de Seziary, cáncer endometrial, cáncer esofageal, tumor de célula germinal extracraneal, tumor de célula germinal extragonadal, cáncer de ducto biliar extrahepático, cáncer de ojos, melanoma intraocular, retinoblastoma, cáncer de vesícula, cáncer gástrico (estómago), tumor carcinoide gastrointestinal, tumor estromal gastrointestinal (GIST), tumor de célula germinal, tumor de célula germinal de ovario, glioma de tumor trofoblástico gestacional, cáncer de cabeza y cuello, cáncer hepatocelular (hígado), linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, melanoma intraocular, cáncer ocular, tumores de célula de isleto (páncreas endocrino), Sarcoma de Kaposi, cáncer de riñon, cáncer renal, cáncer de riñon, cáncer de laringe, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielogenosa crónica, leucemia de célula peluda, cáncer de labio y cavidad oral, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, cáncer de pulmón de célula no pequeña, cáncer de pulmón de célula pequeña, linfoma relacionado con SIDA, linfoma de no Hodgkin, linfoma del sistema nervioso central primario, macroglobulinemia de Waldenstram, meduloblastoma, melanoma, melanoma intraocular (ojo), carcinoma de célula de Merkel, mesotelioma maligno, mesotelioma, cáncer de cuello escamoso metastático, cáncer de boca, cáncer de la lengua, síndrome de neoplasia endógeno múltiple, fungoides micosis, síndromes m ielodisplásicos , enfermedades m ¡elodisplásicas/m ieloproliferativas, leucemia mielogenosa crónica, leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, enfermedades m ieloproliferativas crónicas, cáncer nasofaríngeo, neuroblastoma, cáncer oral, cáncer de cavidad oral, cáncer orofaríngeo, cáncer de ovario, cáncer epitelial de ovario, tumor de ovario de bajo potencial de malignidad, cáncer pancreático, cáncer pancreático de célula de isleto, cáncer de seno paranasal y cavidad nasal, cáncer de paratiroides, cáncer de pene, cáncer de faringe, feocromocitoma, pineoblastoma y tumores neuroectodérmicos primitivos suprasensoriales, tumor de pituitaria, mieloma múltiple/neoplasma de célula de plasma, blastoma pleuropulmonar, cáncer de próstata, cáncer rectal, pelvis renal y uréter, cáncer de célula transicional, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, cáncer de glándula salival, tumores de la familia de sarcomas de Ewing, Sarcoma de Kaposi, sarcoma de tejido blando, cáncer de útero, sarcoma de útero, cáncer de piel (sin melanoma), cáncer de piel (melanoma), carcinoma de piel de célula de Merkel, cáncer de intestino delgado, sarcoma de tejido blando, carcinoma de célula escamosa, cáncer de estómago (gástrico), tumores neuroectodérmicos primitivos suprasensoriales, cáncer testicular, cáncer de garganta, timoma, carcinoma de timoma y tímico, cáncer de tiroides, cáncer de célula transicional de la pelvis renal y uréter y otros órganos urinarios, tumor trofoblástico gestacional, cáncer uretral, cáncer uterino endometrial, sarcoma uterino, cáncer del cuerpo uterino, cáncer vaginal, cáncer bulbar, y Tumor de Wilm.
Un "trastorno de proliferación celular del sistema hematológico" es un trastorno de proliferación celular que implica células del sistema hematológico. Un trastorno de proliferación celular del sistema hematológico puede incluir linfoma, leucemia, neoplasmas mieloides, neoplasmas de mastocito, mielodisplasia, gamopatía monoclonal benigna, granulomatosis linfomatoide, papulosis linfomatoide, policitemia vera, leucemia mielocítica crónica, metaplasia mieloide agnogénica, y trobocitemia esencial. Un trastorno de proliferación celular del sistema hematológico puede incluir hiperplasia, displasia, y metaplasia de células del sistema hematológico. Preferentemente, las composiciones de la presente invención pueden ser utilizadas para tratar un cáncer seleccionado del grupo que consiste en un cáncer hematológico de la presente invención o un trastorno de proliferación celular hematológico de la presente invención. Un cáncer hematológico de la presente invención puede incluir mieloma múltiple, linfoma (incluyendo linfoma de Hodgkin, linfoma de no Hodgkin, linfomas infantiles, y linfomas de origen linfocítico y cutáneo), leucemia (incluyendo leucemia infantil, leucemia de célula peluda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielocítica crónica, leucemia mielogenosa crónica, y leucemia de mastocitos), neoplasmas mieloides y neoplasmas de mastocito.
Un "trastorno de proliferación celular del pulmón" es un trastorno de proliferación celular que implica células del pulmón. Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir todas las formas»de trastornos de proliferación celular que afectan las células del pulmón. Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir cáncer de pulmón, una condición precancerígena o de precáncer del pulmón, crecimientos o lesiones benignas del pulmón, y crecimientos o lesiones malignas del pulmón, y lesiones metastáticas en tejidos y órganos en el cuerpo además del pulmón. Preferentemente, las composiciones de la presente invención pueden ser utilizadas para tratar cáncer de pulmón o trastornos de proliferación celular del pulmón. El cáncer de pulmón puede incluir todas las formas de cáncer del pulmón. El cáncer de pulmón puede incluir neoplasmas de pulmón malignos, carcinoma in situ, tumores carcinoides típicos, y tumores carcinoides atípicos. El cáncer de pulmón puede incluir cáncer de pulmón de célula pequeña ("SCLC"), cáncer de pulmón de célula no pequeña ("NSCLC"), carcinoma de célula escamosa, adenocarcinoma, carcinoma de célula pequeña, carcinoma de célula grande, carcinoma de célula adenoescamosa, y mesotelioma. El cáncer de pulmón puede incluir "carcinoma de cicatriz", carcinoma bronquioalveolar, carcinoma de célula gigante, carcinoma de célula de rueda, y carcinoma neuroendocrino de célula grande. El cáncer de pulmón puede incluir neoplasmas de pulmón que tienen heterogeneidad histológica y ultraestructu ral (por ejemplo, tipos de células mezcladas).
Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células del pulmón. Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir cáncer de pulmón, condiciones precancerígenas del pulmón. Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir h iperplasla , metaplasia, y displasia del pulmón. Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir hiperplasia inducida por asbestos, metaplasia escamosa, y metaplasia mesotelial reactiva benigna. Los trastornos de proliferación celular del pulmón pueden incluir reemplazo del epitelio columnar con el epitelio escamoso estratificado, y displasia mucosa. Los individuos expuestos a agentes ambientales perjudiciales inhalados, tales como humo de cigarro y asbestos, pueden estar en riesgo incrementado de desarrollar trastornos de proliferación celular del pulmón. Las enfermedades del pulmón previas que pueden predisponer a los individuos al desarrollo de trastornos de proliferación celular del pulmón, pueden incluir enfermedad de pulmón intersticial crónica, enfermedad pulmonar necrotizante, escleroderm a, enfermedades reumatoides, sarcoidosis, pneumonitis intersticial, tuberculosis, pneumonías repetidas, fibrosis pulmonar idiopática, granulopatía, asbestosis, alveolitis fibrosante, y enfermedad de Hodgkin.
Un "trastorno de proliferación celular del colon", es un trastorno de proliferación celular que implica células del colon. Preferentemente, el trastorno de proliferación celular del colon es cáncer de colon. Preferentemente, las composiciones de la presente invención se pueden utilizar para tratar cáncer de colon o trastornos de proliferación celular del colon. El cáncer de colon puede incluir todas las formas de cáncer del colon. El cáncer de colon puede incluir cánceres de colon esporádicos y hereditarios. El cáncer de colon puede incluir neoplasmas de colon malignos, carcinoma in situ, tumores carcinoides típicos, y tumores carcinoides atípicos. El cáncer de colon puede incluir adenocarcinoma, carcinoma de célula escamosa, y carcinoma de célula adenoescamosa. El cáncer de colon puede estar asociado con un síndrome hereditario seleccionado del grupo que consiste en cáncer colo-rectal sin poliposis hereditario, poliposis adenomatosa familiar, síndrome de Gardner, síndrome de Peutz-Jeghers, síndrome de Turcot y poliposis juvenil. El cáncer de colon puede ser originado por un síndrome hereditario seleccionado del grupo que consiste en cáncer colo-rectal sin poliposis hereditario, poliposis adenomatosa familiar, síndrome de Gardner, síndrome de Peutz-Jeghers, síndrome de Turcot y poliposis juvenil.
Los trastornos de proliferación celular del colon pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células de colon. Los trastornos de proliferación celular del colon pueden incluir cáncer de colon, condiciones precancerígenas del colon, pólipos adenomatosos del colon y lesiones metacrónicas del colon. Un trastorno de proliferación celular del colon puede incluir adenoma. Los trastornos de proliferación celular del colon pueden ser caracterizados por hiperplasia, metaplasia, y displasia del colon. Las enfermedades del colon previas que pueden predisponer a los individuos a desarrollar trastornos de proliferación celular del colon pueden incluir cáncer de colon previo. La enfermedad en curso que puede predisponer a los individuos al desarrollo de trastornos de proliferación celular del colon, pueden incluir enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa. Un trastorno de proliferación celular del colon puede estar asociado con una mutación en un gen seleccionado del grupo que consiste en p53, ras, FAP y DCC. Un individuo puede tener riesgo elevado de desarrollar un trastorno de proliferación celular del colon, debido a la presencia de una mutación en un gen seleccionado del grupo que consiste en p53, ras, FAP y DCC.
Un "trastorno de proliferación celular del páncreas" es un trastorno de proliferación celular que implica células del páncreas. Los trastornos de proliferación celular del páncreas pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células pancreáticas. Los trastornos de proliferación celular del páncreas pueden incluir cáncer de páncreas, un precáncer o condición precancerígena del páncreas, hiperplasia de páncreas, y displasia de páncreas, crecimientos o lesiones benignas del páncreas, y crecimientos o lesiones malignas del páncreas, y lesiones metastáticas en tejidos y órganos en el cuerpo además del páncreas. El cáncer pancreático incluye todas las formas de cáncer del páncreas. El cáncer pancreático puede incluir adenocarcinoma ductal, carcinoma adenoescamoso, carcinoma de célula gigante pleomorfica, adenocarcinoma mucinoso, carcinoma de célula gigante tipo osteoclasto, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinoma acinar, carcinoma de célula grande no clasificado, carcinoma de célula pequeña, pancreatoblastoma, neoplasma papilar, cistadenoma mucinoso, neoplasma quístico papilar, y cistadenoma seroso. El cáncer pancreático también puede incluir neoplasmas pancreáticos que tienen heterogeneidad histológica y ultraestructural (por ejemplo, tipos de células mezcladas).
Un "trastorno de proliferación celular de la próstata" es un trastorno de proliferación celular que implica células de la próstata. Los trastornos de proliferación celular de la próstata pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células de próstata. Los trastornos de proliferación celular de la próstata pueden incluir cáncer de próstata, un precáncer o condición precancerígena de la próstata, crecimientos o lesiones benignas de la próstata, y crecimientos o lesiones malignas de la próstata, y lesiones metastáticas en tejidos y órganos en el cuerpo, además de la próstata. Los trastornos de proliferación celular de la próstata pueden incluir hiperplasia, metaplasia, y displasia de la próstata .
Un "trastorno de proliferación celular de la piel" es un trastorno de proliferación celular que implica células de la piel. Los trastornos de proliferación celular de la piel pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células de la piel. Los trastornos de proliferación celular de la piel pueden incluir un precáncer o una condición precancerígena de la piel, crecimientos o lesiones benignas de la piel, melanoma, melanoma maligno y otros crecimientos o lesiones malignas de la piel, y lesiones metastáticas en tejidos y órganos en el cuerpo, además de la piel. Los trastornos de proliferación celular de la piel pueden incluir hiperplasia, metaplasia, y displasia de la piel.
Un "trastorno de proliferación celular del ovario" es un trastorno de proliferación celular que implica células del ovario. Los trastornos de proliferación celular del ovario pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células del ovario. Los trastornos de proliferación celular del ovario pueden incluir un precáncer o una condición precancerígena del ovario, crecimientos o lesiones benignas del ovario, cáncer de ovario, crecimientos o lesiones malignas del ovario, y lesiones metastáticas en tejidos y órganos en el cuerpo además del ovario. Los trastornos de proliferación celular de la piel pueden incluir hiperplasia, metaplasia, y displasia de las células del ovario.
Un "trastorno de proliferación celular del seno" es un trastorno de proliferación celular que implica células del seno. Los trastornos de proliferación celular del seno pueden incluir todas las formas de trastornos de proliferación celular que afectan las células de los senos. Los trastornos de proliferación celular del seno pueden incluir cáncer de seno, un precáncer o condición precancerígena del seno, crecimientos o lesiones benignas del seno, y crecimientos o lesiones malignas del seno, y lesiones metastáticas en tejido y órganos en el cuerpo además del seno. Los trastornos de proliferación celular del seno pueden incluir hiperplasia, metaplasia, y displasia del seno.
Un trastorno de proliferación celular del seno puede ser una condición precancerígena del seno. Las composiciones de la presente invención se pueden utilizar para tratar una condición precancerígena del seno. Una condición precancerígena del seno puede incluir hiperplasia atípica del seno, carcinoma ductal in situ (DCIS), carcinoma intraductal, carcinoma lobular in situ (LCIS), neoplasia lobular, y crecimiento o lesión del seno etapa 0 o grado 0 (por ejemplo, cáncer de seno etapa 0 o grado 0, o carcinoma in situ). Una condición precancerígena del seno puede clasificarse de acuerdo con el esquema de clasificación TNM tal como lo acepta el American Joint Committee on Cáncer (AJCC), en donde el tumor primario (T) ha sido asignado a una etapa de TO o Tis; y en donde los nodos de la linfa regional (N) han sido asignados a una etapa de NO; y en donde la metástasis distante (M) ha sido asignada a una etapa de M0.
El trastorno de proliferación celular del seno puede ser cáncer de seno. Preferentemente, las composiciones de la presente invención se pueden utilizar para tratar cáncer de seno. El cáncer de seno incluye todas las formas de cáncer del seno. El cáncer de seno puede incluir cánceres de seno epitelial primario. El cáncer de seno puede incluir cánceres en los cuales el seno está implicado por otros tumores, tales como linfoma, sarcoma o melanoma. El cáncer de seno puede incluir carcinoma del seno, carcinoma ductal del seno, carcinoma lobular del seno, carcinoma no diferenciado del seno, filoídes de cistosarcoma del seno, angiosarcoma del seno, y linfoma primario del seno. El cáncer del seno puede incluir cáncer de seno Etapas I, II, MIA, IIIB, MIC y IV. El carcinoma ductal del seno puede incluir carcinoma invasivo, carcinoma invasivo in situ con componente intraductal predominante, cáncer de seno inflamatorio, y un carcinoma ductal del seno con un tipo histológico seleccionado del grupo que consiste en comedón, mucinoso (coloidal), medular, medular con infiltrado linfocítico, papilar, escirroso y tubular. El carcinoma lobular del seno puede incluir carcinoma lobular invasivo con componente in situ predominante, carcinoma lobular invasivo, y carcinoma lobular de infiltración. El cáncer de seno puede incluir enfermedad de Paget, enfermedad de Paget con carcinoma intraductal, y enfermedad de Paget con carcinoma ductal invasivo. El cáncer de seno puede incluir neoplasmas de seno que tienen heterogeneidad histológica y ultraestructu ral (por ejemplo, tipos de células mezcladas).
Preferentemente, el compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo, o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede utilizar para tratar cáncer del seno. Un cáncer de seno que será tratado puede incluir cáncer de seno familiar. Un cáncer de seno que será tratado puede incluir cáncer de seno esporádico. Un cáncer de seno que será tratado puede surgir en un sujeto hombre. Un cáncer de seno que será tratado puede surgir en un sujeto mujer. Un cáncer de seno que será tratado puede surgir en un sujeto mujer premenopáusico o un sujeto mujer postmenopáusico. Un cáncer de seno que será tratado puede surgir en un sujeto con edad igual o mayor a 30 años de edad, o un sujeto más joven a 30 años de edad. Un cáncer de seno que será tratado ha surgido en un sujeto con edad igual o mayor a 50 años de edad, o un sujeto más joven a los 50 años de edad. Un cáncer de seno que será tratado puede surgir en un sujeto con edad igual o mayor a 70 años de edad, o un sujeto más joven a 70 años de edad.
Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado para identificar una mutación familiar o espontánea de BRCA1, BRCA2, o p53. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como teniendo la amplificación del gen HER2/neu, tal como sobre-expresión de HER2/neu, o que tiene un nivel bajo, intermedio o alto de expresión HER2/neu. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado para un marcador seleccionado del grupo que consiste en receptor de estrógenos (ER), receptor de progesterona (PR), receptor-2 de factor de crecimiento epidérmico humano, Ki-67, CA 15-3, CA 27-29, y c-Met. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como ER-desconocido, alto contenido de ER o con deficiencia de ER. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como negativo-ER o positivo-ER. La tipificación de ER de un cáncer de seno puede llevarse a cabo a través de cualquier medio reproducible. La tipificación de ER de un cáncer de seno puede llevarse a cabo tal como se establece en la publicación de Onkologie 27: 175 a 179 (2004). Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como PR-desconocido, alto contenido de PR, o con deficiencia de PR. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como PR-negativo o PR-positivo. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como positivo de receptor o negativo de receptor. Un cáncer de seno que será tratado puede ser tipificado como estando asociado con niveles de sangre elevados de CA 15-3, o CA 27-29, o ambos.
Un cáncer de seno que será tratado puede incluir un tumor localizado del seno. Un cáncer de seno que será tratado puede incluir un tumor del seno que está asociado con una biopsia de nodo linfático de sentinel negativo (SLN). Un cáncer de seno que será tratado puede incluir un tumor del seno que está asociado con una biopsia de nodo linfático de sentinel positivo (SLN). Un cáncer de seno que será tratado puede incluir un tumor del seno que está asociado con uno o más nodos de linfa axilar positiva, en donde los nodos de linfa axilar han sido clasificados a través de cualquier método aplicable. Un cáncer de seno que será tratado puede incluir un tumor del seno que ha sido tipificado como teniendo estado negativo nodal (por ejemplo, negativo-nodo) o estado positivo nodal (por ejemplo, positivo-nodo). Un cáncer de seno que será tratado puede incluir un tumor del seno que tiene metástasis a otros lugares en el cuerpo. Un cáncer de seno que será tratado puede ser clasificado como teniendo metástasis a un lugar seleccionado del grupo que consiste en hueso, pulmón, hígado, o cerebro. Un cáncer de seno que será tratado puede ser clasificado de acuerdo con una característica seleccionada del grupo que consiste en metastásico, localizado, regional, regional-local, locamente avanzado, distante, multicéntrico, bilateral, i p s i I ate ra I , contralateral, recientemente diagnosticado, recurrente, e inoperable.
Un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede utilizar para tratar o prevenir un trastorno de proliferación celular del seno, o para tratar o prevenir cáncer de seno, en un sujeto que tiene un riesgo incrementado de desarrollar cáncer de seno en forma relativa al grueso de la población. Un sujeto con un riesgo incrementado de desarrollar cáncer de seno en forma relativa al grueso de la población, es un sujeto mujer con un historial familiar o historial personal de cáncer de seno. Un sujeto con un riesgo incrementado de desarrollar cáncer de seno en forma relativa al grueso de la población, es un sujeto mujer que tiene una mutación de línea germinal o espontánea en BRCA1 o BRCA2, o ambos. Un sujeto con un riesgo incrementado de desarrollar cáncer de seno en forma relativa al grueso de la población, es un sujeto mujer con un historial familiar de cáncer de seno y una mutación de línea germinal o espontánea en BRCA1 o BRCA2, o ambos. Un sujeto con un riesgo incrementado de desarrollar cáncer de seno en forma relativa al grueso de la población, es una mujer que tiene más de 30 años de edad, más de 40 años de edad, más de 50 años de edad, más de 60 años de edad, más de 70 años de edad, más de 80 años de edad, o más de 90 años de edad. Un sujeto con un riesgo incrementado de desarrollar cáncer de seno en forma relativa al grueso de la población, es un sujeto con hiperplasia atípica del seno, carcinoma ductal in situ (DCIS), carcinoma intraductal, carcinoma lobular in situ (LCIS), neoplasia lobular, o crecimiento o lesión etapa 0 del seno (por ejemplo, cáncer de seno etapa 0 o grado 0, o carcinoma in situ).
Un cáncer de seno que será tratado puede ser graduado histológicamente de acuerdo con el sistema de Scarff-Bloom-Richardson, en donde a un tumor de seno se le ha asignado una calificación de conteo de mitosis de 1, 2, o 3; una calificación de pleiomorf ismo nuclear de 1, 2, o 3; una calificación de formación de túbulo de 1, 2, o 3; y una calificación Scarff-Bloom-Richardson total de entre 3 y 9. A un cáncer de seno que será tratado, se le puede asignar un grado de tumor de acuerdo con el Panel de Consenso Internacional en el Tratamiento de Cáncer de Seno (International Consensus Panel on the Treatment of Breast Cáncer) seleccionado del grupo que consiste en grado 1, grado 1-2, grado 2, grado 2-3, o grado 3.
Un cáncer que será tratado puede clasificarse de acuerdo con el sistema de clasificación TNM del American Joint Committee on Cáncer (AJCC), en donde al tumor (T) se le ha asignado una etapa de TX, T1, T1mic, T1a, T1b, T1c, T2, T3, T4, T4a, T4b, T4c, o T4d; y en donde a los nodos linfáticos regionales (N) se les ha asignado una etapa de NX, NO, N 1 , N2, N2a, N2b, N3, N3a, N3b, o N3c; y en donde a la metástasis distante (M) se le puede asignar una etapa de MX, MO, o M1. Un cáncer que será tratado puede ser clasificado de acuerdo con la clasificación de la American Joint Committee on Cáncer (AJCC) como Etapa I, Etapa NA, Etapa IIB, Etapa IIIA, Etapa IIIB, Etapa 111 , o Etapa IV. A un cáncer que será tratado se le puede asignar un grado de acuerdo con la Clasificación AJCC como Grado GX (por ejemplo, grado que no puede ser evaluado), Grado 1, Grado 2, Grado 3 o Grado 4. Un cáncer que será tratado, se puede clasificar de acuerdo con una clasificación patológica AJCC (pN) de pNX, pNO, PNO (I-), PNO (l + ), PNO (mol-), PNO (mol + ), PN1, PN1 (mi), PN1a, PN1b, PN1c, pN2, pN2a, pN2b, pN3, pN3a, pN3b, o pN3c.
Un cáncer que será tratado puede incluir un tumor que se ha determinado con un diámetro menor o igual a aproximadamente 2 centímetros. Un cáncer que será tratado puede incluir un tumor que ha sido determinado para tener de aproximadamente 2 hasta aproximadamente 5 centímetros de diámetro. Un cáncer que será tratado puede incluir un tumor que ha sido determinado como teniendo más o igual aproximadamente a 3 centímetros de diámetro. Un cáncer que será tratado puede incluir un tumor que ha sido determinado como mayor a 5 centímetros de diámetro. Un cáncer que será tratado puede ser clasificado mediante apariencia microscópica como bien diferenciado, moderadamente diferenciado, deficientemente diferenciado, o no diferenciado. Un cáncer que será tratado puede ser clasificado mediante apariencia microscópica con respecto al conteo de mitosis (por ejemplo, cantidad de división celular) o pleiomorfismo nuclear (por ejemplo, cambio en células). Un cáncer que será tratado puede ser clasificado mediante apariencia microscópica como estando asociado con áreas de necrosis (por ejemplo, áreas de células muertas o de degeneración). Un cáncer que será tratado puede ser clasificado como teniendo un cariotipo anormal, que tiene un número anormal de cromosomas, o que tiene uno o más cromosomas que son anormales en apariencia. Un cáncer que será tratado puede ser clasificado como siendo aneuploide, triploide, tetraploide, o como teniendo un ploide alterado. Un cáncer que será tratado puede ser clasificado como teniendo translocación cromosomal, o una eliminación o duplicación de todo el cromosoma, o una región de eliminación, duplicación o amplificación de una parte de un cromosoma.
Un cáncer que será tratado puede ser evaluado mediante citometría de ADN, citometría de flujo, o citometría de imagen. Un cáncer que será tratado puede ser tipificado como teniendo el 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, o 90% de las células en la etapa de síntesis de división celular (por ejemplo, en la fase-S de división celular). Un cáncer que será tratado puede ser tipificado como teniendo una fracción de fase-S de bajo nivel o una fracción de fase-S de alto nivel.
Tal como se utiliza en la presente invención, una "célula normal" es una célula que no puede ser clasificada como parte de un "trastorno de proliferación celular". Una célula normal carece de crecimiento desregulado o anormal, o ambos, que pueda conducir al desarrollo de una condición o enfermedad no deseada. Preferentemente, una célula normal posee mecanismos de control de punto de revisión del ciclo celular que funcionan normalmente.
Tal como se utiliza en la presente invención, "contactar una célula " se refiere a una condición en la cual un compuesto u otra composición de materia, está en contacto directo con una célula, o está lo suficientemente cerca para inducir un efecto biológico deseado en una célula.
Tal como se utiliza en la presente invención, un "compuesto candidato" se refiere a un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, que ha sido o será probado en uno o más ensayos biológicos in vi tro o in vivo, con el objeto de determinar si dicho compuesto es probable que provoque una respuesta médica o biológica deseada en una célula, tejido, sistema, animal o humano que está siendo observado por un investigador o médico. Un compuesto candidato es un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. La respuesta biológica o médica puede ser el tratamiento de cáncer. La respuesta biológica o médica puede ser el tratamiento o prevención de un trastorno de proliferación celular. Los ensayos biológicos in vitro o in vivo pueden incluir, pero no se limitan a, ensayos de actividad enzimática, ensayos de cambio de movilidad electroforéticos, ensayos de gen reportero, ensayos de viabilidad celular in vitro, y los ensayos aquí descritos.
Tal como se utiliza en la presente invención, "monoterapia" se refiere a la administración de un compuesto activo o terapéutico simple a un sujeto que necesita del mismo. Preferentemente, la monoterapia implicará la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto activo simple. Por ejemplo, la monoterapia de cáncer con uno de los compuestos de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, análogo o derivado farmacéuticamente activo del mismo, a un sujeto que necesita de tratamiento de cáncer. En un aspecto, el compuesto activo simple es un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "tratamiento" o "tratar" describe el manejo o cuidado de un paciente con el propósito de combatir una enfermedad, condición, o trastorno, e incluye la administración de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para aliviar los síntomas o complicaciones de una enfermedad, condición o trastorno, o para eliminar la enfermedad, condición o trastorno.
Un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede ser utilizado para aliviar una enfermedad, condición o trastorno. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "prevenir" o "prevención" describe reducir o eliminar el desarrollo de los síntomas o complicaciones de la enfermedad, condición o trastorno.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "aliviar" se entiende que describe un proceso mediante el cual se disminuye la severidad de un signo o síntoma de un trastorno. De manera importante, se puede aliviar un signo o síntoma sin ser eliminado. En una modalidad preferida, la administración de las composiciones farmacéuticas de la presente invención conduce a la eliminación de un signo o síntoma, sin embargo, no se requiere la eliminación. Se espera que las dosis efectivas disminuyan la severidad de un signo o síntoma. Por ejemplo, un signo o síntoma de un trastorno tal como cáncer, el cual puede ocurrir en múltiples lugares, se alivia si la severidad del cáncer es disminuida dentro de al menos uno de los múltiples lugares.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "severidad" se entiende para describir el potencial que tiene el cáncer de transformarse de un estado precancerígeno, o benigno, en un estado maligno. Alternativamente, o en forma adicional, se entiende que la severidad describe una etapa del cáncer, por ejemplo, de acuerdo con el sistema TNM (aceptado por la International Union Against Cáncer (UlCC) y American Joint Committee on Cáncer (AJCC)) o por otros métodos reconocidos en la técnica. La etapa de cáncer se refiere al grado o severidad del cáncer, con base en factores tales como la ubicación del tumor primario, tamaño de tumor, número de tumores, e implicación de nodo linfático (dispersión del cáncer en los nodos linfáticos). Alternativamente, o en forma adicional, la severidad se entiende que describe el grado de tumor a través de métodos reconocidos en la técnica (consultar, National Cáncer Institute, www.cancer.gov). El grado de tumor es un sistema utilizado para clasificar células de cáncer en términos de que tan anormales se ven bajo un microscopio, y que tan rápido es probable que el tumor crezca y se disperse. Se consideran muchos factores cuando se determina el grado de tumor, incluyendo la estructura y patrón de crecimiento de las células. Los factores específicos utilizados para determinar el grado de tumor varían con cada tipo de cáncer. La severidad también describe un grado histológico, también llamado diferenciación, que se refiere a que tanto las células de tumor parecen células normales del mismo tipo de tejido (consultar, National Cáncer Institute, www.cancer.gov). Además, la severidad describe un grado nuclear, que se refiere al tamaño y forma del núcleo en las células de tumor y el porcentaje de las células de tumor que se están dividiendo (consultar, National Cáncer Institute, www.cancer.gov).
En otro aspecto de la presente invención, la severidad describe el grado en el cual el tumor ha secretado factores de crecimiento, degradado la matriz extracelular, se ha vuelto vascularizado, ha perdido adhesión a tejidos yuxtapuestos, o ha hecho metástasis. Además, la severidad describe el número de ubicaciones en las cuales ha hecho metástasis el tumor primario. Finalmente, la severidad incluye la dificultad de tratar tumores de diversos tipos y ubicaciones. Por ejemplo, tumores inoperables, los cánceres que tienen mayor acceso a múltiples sistemas corporales (tumores hematológicos e inmunológicos), y los que son los más resistentes a tratamientos tradicionales son considerados los más severos. En estas situaciones, prolongar la expectativa de vida del sujeto y/o reducir el dolor, disminuye la proporción de las células cancerígenas o restringir las células en un sistema, y mejorar la etapa de cáncer/grado de tumor/grado histológico/grado nuclear se considera que alivian un signo o síntoma del cáncer.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "síntoma" se define como una indicación de enfermedad, padecimiento, lesión, o que algo no está bien en el cuerpo. Los síntomas se sienten o son observados por el individuo que experimenta el síntoma, pero no son fácilmente observados por otros. Otros son definidos como los que no son profesionales en cuidados para la salud.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "signo" también se define como una indicación de que algo no está bien en el cuerpo. No obstante, los signos son definidos como cosas que pueden ser observadas por un doctor, enfermera, u otro profesional de cuidados de la salud.
El cáncer es un grupo de enfermedades que pueden originar casi cualquier signo o síntoma. Los signos y síntomas dependerán de en donde esté el cáncer, el tamaño del cáncer, y que tanto afecta los órganos o estructuras cercanas. Si un cáncer se dispersa (hace metástasis), entonces los síntomas pueden aparecer en diferentes partes del cuerpo.
Conforme crece un cáncer, comienza a empujar órganos, bazos sanguíneos, y nervios cercanos. Esta presión crea algunos de los signos y síntomas del cáncer. Si el cáncer está en un área crítica, tal como ciertas partes del cerebro, incluso el tumor más pequeño puede originar síntomas tempranos.
Aunque algunas veces los cánceres comienzan en lugares en donde no origina ningún síntoma hasta que el cáncer ha crecido bastante. Los cánceres de páncreas, por ejemplo, normalmente no crecen lo suficiente para ser sentidos desde fuera del cuerpo. Algunos cánceres pancreáticos no originan síntomas hasta que comienzan a crecer alrededor de nervios cercanos (esto origina dolor de espalda). Otros crecen alrededor del ducto biliar, lo cual bloquea el flujo de bilis y conduce a obtener un color amarillo en la piel, conocida como ictericia. Por el tiempo en el que cáncer pancreático origina estos signos o síntomas, normalmente ha alcanzado una etapa avanzada .
Un cáncer también puede originar síntomas tales como fiebre, fatiga, o pérdida de peso. Esto puede ser debido a que las células de cáncer utilizan mucho del suministro de energía del cuerpo, o liberan substancias que cambian el metabolismo del cuerpo. O el cáncer puede originar que el sistema inmune reaccione en formas que producen estos síntomas.
Algunas veces, las células de cáncer liberan substancias en el torrente sanguíneo que originan síntomas que normalmente no son considerados como que son resultados de cáncer. Por ejemplo, algunos cánceres de páncreas pueden liberar substancias que originan que se desarrollen coágulos en la sangre en las venas de las piernas. Algunos cánceres de pulmón elaboran substancias tipo hormonas que afectan los niveles de calcio en la sangre, afectando nervios y músculos, y originando debilidad y mareo.
El cáncer presenta diversos signos o síntomas generales que ocurren cuando una variedad de subtipos de las células de cáncer están presentes. La mayor parte de las personas con cáncer perderán peso cuando tienen algún tiempo con la enfermedad. Una pérdida inexplicada (no intencional) de 10 libras (4.53 kg) o más, puede ser un primer síntoma de cáncer, particularmente cánceres del páncreas, estómago, esófago, o pulmón.
La fiebre es muy común con cáncer, aunque con frecuencia se observa en la enfermedad avanzada. La mayor parte de los pacientes con cáncer, tendrán fiebre en algún momento, especialmente si el cáncer o su tratamiento afecta el sistema inmune y hace más difícil al cuerpo combatir la infección. Con menos frecuencia, la fiebre puede ser una etapa temprana de cáncer, tal como con leucemia o linfoma.
La fatiga puede ser un síntoma importante conforme progresa el cáncer. Puede suceder en forma temprana, aunque en cánceres, tales como leucemia, o si el cáncer está originando una pérdida de sangre, así como en cánceres de colon y estómago.
El dolor puede ser un síntoma temprano con algunos cánceres, tal como cánceres de huesos o cáncer testicular. Aunque con frecuencia el dolor es un síntoma de la enfermedad avanzada.
Junto con cánceres de la piel (ver la sección que se encuentra más adelante), algunos cánceres internos pueden originar signos en la piel que pueden ser observados. Estos cambios incluyen oscurecimiento de la pile (hiperpigmentación) color amarillo (ictericia), o rojo (eritema); o picazón; o crecimiento de cabello excesivo.
Alternativamente, o en forma adicional, los subtipos de cáncer presentan signos o síntomas específicos. Los cambios en hábitos del intestino o función de vejiga pueden indicar cáncer. El estreñimiento, diarrea, o cambio en el tamaño de las heces a largo plazo puede ser un síntoma de cáncer de colon. El dolor al orinar, sangre en la orina, o cambio en la función de la vejiga (tal como orina más frecuente o menos frecuente) puede estar relacionado con cáncer de vejiga o próstata.
Los cambios en la condición o apariencia de la piel de una nueva condición en la piel pueden indicar cáncer. Los cánceres de piel pueden sangrar o verse como llagas que no se curan. Una llaga de larga duración en la boca puede ser un cáncer oral, especialmente en pacientes que fuman, mastican tabaco, o beben frecuentemente alcohol. Las llagas en el pene o vagina pueden ser ya sea signos de infección o de un cáncer temprano.
El sangrado o descarga inusual puede indicar cáncer. El sangrado inusual puede suceder en cáncer temprano o avanzado. La sangre en el esputo (flema) puede ser un signo de cáncer de pulmón. La sangre en las heces (o una defecación oscura o negra) puede ser un signo de cáncer de colon o rectal. El cáncer cervical o del endometrio (que reviste el útero) puede originar sangrado vaginal. La sangre en la orina puede ser un signo de cáncer de vejiga o riñon. Una descarga sanguosa del pezón, puede ser un signo de cáncer de seno.
Un engrosamiento o borde en el seno u otras partes del cuerpo pueden indicar la presencia de un cáncer. Muchos cánceres pueden sentirse a través de la piel, en su mayoría en el seno, testículo, nodos linfáticos (glándulas), y en los tejidos blandos del cuerpo. Un nodulo o engrosamiento puede ser un signo temprano o tardío de cáncer. Cualquier nodulo o engrosamiento puede ser indicativo de cáncer, especialmente si la formación es nueva o ha crecido en tamaño.
La indigestión o los problemas para tragar pueden indicar cáncer. Aunque estos síntomas comúnmente tienen otras causas, la indigestión o problemas para tragar pueden ser un signo de cáncer del esófago, estómago, o faringe (garganta).
Los cambios recientes en una verruga o lunar pueden indicar un cáncer. Cualquier verruga, lunar, o peca que cambia de color, tamaño, o forma, o pierde sus bordes definidos indica el potencial del desarrollo de cáncer. Por ejemplo, la lesión en la piel puede ser un melanoma.
Una tos o ronquera persistente puede ser indicativa de cáncer. La tos que no se elimina puede ser un signo de cáncer de pulmón. La ronquera puede ser un signo de cáncer de la laringe (caja de voz) o tiroides.
Aunque los signos y síntomas descritos anteriormente son los más comúnmente observados con cáncer, existen muchos otros que son menos comunes y no se describen en el presente documento. Sin embargo, todos los signos y síntomas de cáncer reconocidos en la técnica están contemplados y comprendidos por la presente invención.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una reducción en el tamaño de un tumor. Una reducción en el tamaño de un tumor también puede ser referido como una "regresión de tumor". Preferentemente, después del tratamiento, el tamaño del tumor se reduce en un 5% o más en forma relativa a su tamaño antes del tratamiento; más preferentemente, un tamaño de tumor se reduce a un 10% o más; más preferentemente, se reduce a un 20% o más; más preferentemente, se reduce a un 30% o más; más preferentemente, se reduce a un 40% o más; incluso más preferentemente, se reduce a un 50% o más; y lo más preferentemente, se reduce en más del 75%. El tamaño de un tumor puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible. El tamaño de un tumor puede ser medido como un diámetro del tumor.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una reducción en el volumen de tumor. Preferentemente, después del tratamiento, el volumen del tumor se reduce en un 5% o más en forma relativa a su tamaño antes del tratamiento; más preferentemente, el volumen del tumor se reduce en un 10% o más; más preferentemente, se reduce en un 20% o más; más preferentemente, se reduce en un 30% o más; más preferentemente, se reduce en un 40% o más; incluso más preferentemente, se reduce en un 50% o más; y lo más preferentemente, se reduce en más del 75%. El volumen del tumor puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible.
El tratamiento de cáncer da como resultado una disminución en el número de tumores. Preferentemente, después del tratamiento, el número de tumor se reduce en un 5% o más en forma relativa a un número previo al tratamiento; más preferentemente, el número de tumor se reduce en un 10% o más; más preferentemente, se reduce en un 20% o más; más preferentemente, se reduce en un 30% o más; más preferentemente, se reduce en un 40% o más; incluso más preferentemente, se reduce en un 50% o más; y lo más preferentemente, se reduce en más del 75%. El número de tumores puede ser medido a través de cualquier medio de medición reproducible. El número de tumores puede ser medido contando los tumores visibles a simple vista o en una magnificación específica. Preferentemente, la magnificación específica es de 2x, 3x, 4x, 5x, 10x, o 50x.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una disminución en el número de lesiones metastáticas en otros tejidos u órganos distantes del sitio de tumor primario.
Preferentemente, después del tratamiento, el número de lesiones metastáticas se reduce en un 5% o más en forma relativa a un número previo al tratamiento; más preferentemente, el número de lesiones metastáticas se reduce en un 10% o más; más preferentemente, se reduce en un 20% o más; más preferentemente, se reduce en un 30% o más; más preferentemente, se reduce en un 40% o más; incluso más preferentemente, se reduce en un 50% o más; y lo más preferentemente, se reduce en más del 75%. El número de lesiones metastáticas puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible. El número de lesiones metastáticas puede ser medido contando las lesiones metastáticas visibles a simple vista o en una magnificación específica. Preferentemente, la magnificación específica es de 2x, 3x, 4x, 5x, 10x, o 50x.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población de sujetos tratados, en comparación con una población que recibe un transportador solo. Preferentemente, el tiempo de supervivencia promedio se incrementa en más de 30 días; más preferentemente, más de 60 días; más preferentemente, más de 90 días; y lo más preferentemente, más de 120 días. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población puede medirse a través de cualquier medio reproducible. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población puede medirse, por ejemplo, calculando para una población la longitud de supervivencia promedio después del inicio del tratamiento con un compuesto activo. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población también puede ser medido, por ejemplo, calculando para una población la longitud de supervivencia promedio después del término de una primera vuelta del tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población de sujetos tratados en comparación con una población de sujetos no tratados. Preferentemente, el tiempo de supervivencia promedio se incrementa más de 30 días; más preferentemente, más de 60 días; más preferentemente, más de 90 días; y lo más preferentemente, más de 120 días. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población se puede medir a través de cualquier medio reproducible. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población se puede medir, por ejemplo, calculando para una población la longitud promedio de supervivencia después del inicio del tratamiento con un compuesto activo. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población también puede ser medido, por ejemplo, calculando para una población la longitud promedio de supervivencia después del término de una primera vuelta del tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población de sujetos tratados, en comparación con una población que recibe monoterapia con un fármaco que no es un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, análogo o derivado farmacéuticamente activo del mismo. Preferentemente, el tiempo de supervivencia promedio se incrementa en más de 30 días; más preferentemente, más de 60 días; más preferentemente, más de 90 días; y lo más preferentemente, más de 120 días. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población se puede medir a través de cualquier medio reproducible. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población puede medirse, por ejemplo, calculando para una población la longitud promedio de supervivencia después del inicio del tratamiento con un compuesto activo. Un incremento en el tiempo de supervivencia promedio de una población también se puede medir, por ejemplo, calculando para una población la longitud promedio de supervivencia después del término de una primera vuelta del tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una disminución en el rango de mortalidad de una población de sujetos tratados, en comparación con la población que recibe solo transportador. El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una disminución en el rango de mortalidad de una población de sujetos tratados en comparación con una población no tratada. El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una disminución en el rango de mortalidad de una población de sujetos tratados en comparación con una población que recibe monoterapia con un fármaco que no es un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, análogo o derivado farmacéuticamente activo del mismo. Preferentemente, el rango de mortalidad se disminuye en más del 2%; más preferentemente, más del 5%; más preferentemente, más del 10%; y lo más preferentemente, más del 25%. Una disminución en el rango de mortalidad de una población de sujetos tratados se puede medir a través de cualquier medio reproducible. Una disminución en el rango de mortalidad de una población puede ser medida, por ejemplo, calculando para una población el número promedio de muertes relacionadas con la enfermedad por unidad de tiempo después del inicio del tratamiento con un compuesto activo. Una disminución en el rango de mortalidad de una población también se puede medir, por ejemplo, calculando para una población, el número promedio de muertes relacionadas con la enfermedad por unidad de tiempo después del término de una primera vuelta del tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una disminución en el rango de crecimiento del tumor.
Preferentemente, después del tratamiento, el rango de crecimiento del tumor se reduce en al menos 5% en forma relativa a un número previo al tratamiento; más preferentemente, el rango de crecimiento del tumor se reduce en al menos 10%; más preferentemente, se reduce en al menos 20%; más preferentemente, se reduce en al menos 30%; más preferentemente, se reduce en al menos 40%; más preferentemente, se reduce en al menos 50%; incluso más preferentemente, se reduce en al menos 50%; y lo más preferentemente, se reduce en al menos 75%. El rango de crecimiento del tumor puede ser medido a través de cualquier medio de medición reproducible. El rango de crecimiento del tumor puede medirse de acuerdo con un cambio en el diámetro del tumor por unidad de tiempo.
El tratamiento de cáncer puede dar como resultado una disminución en el recrecimiento del tumor. Preferentemente, después del tratamiento, el recrecimiento del tumor es menor a 5%; más preferentemente, el recrecimiento del tumor es menor a 10%; más preferentemente, menor a 20%; más preferentemente, menor a 30%; más preferentemente, menor a 40%; más preferentemente, menor a 50%; incluso más preferentemente, menor a 50%; y lo más preferentemente, menor a 75%. El recrecimiento del tumor puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible. El recrecimiento del tumor se mide, por ejemplo, midiendo un incremento en el diámetro de un tumor después la contracción de un tumor previo que ha seguido el tratamiento. Una disminución en el recrecimiento de tumor se indica a través de una falla de tumores que vuelven a ocurrir después de que el tratamiento se ha detenido.
El tratamiento o prevención de un trastorno de proliferación celular puede dar como resultado una reducción en el rango de proliferación celular. Preferentemente, después del tratamiento, el rango de proliferación celular se reduce en al menos 5%; más preferentemente, al menos 10%; más preferentemente, al menos 20%; más preferentemente, al menos 30%; más preferentemente, al menos 40%; más preferentemente, al menos 50%; incluso más preferentemente, al menos 50%; y lo más preferentemente, al menos 75%. El rango de proliferación celular puede ser medido a través de cualquier medio de medición reprqducible. El rango de proliferación celular se mide, por ejemplo, midiendo el número de células en división en una muestra de tejido por unidad de tiempo.
El tratamiento o prevención de un trastorno de proliferación celular puede dar como resultado la reducción en la proporción de células proliferantes. Preferentemente, después del tratamiento, la proporción de células proliferantes se reduce en al menos 5%; más preferentemente, en al menos 10%; más preferentemente, en al menos 20%; más preferentemente, en al menos 30%; más preferentemente, en al menos 40%; más preferentemente, en al menos 50%; incluso más preferentemente, en al menos 50%; y lo más preferentemente, en al menos 75%. La proporción de células proliferantes puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible. Preferentemente, la proporción de células proliferantes se mide, por ejemplo, cuantificando el número de células en división relativo al número de células sin división en una muestra de tejido. La proporción de células proliferantes puede ser equivalente al índice mitótico.
El tratamiento o prevención de un trastorno de proliferación celular puede dar como resultado una disminución en el tamaño de un área o zona de proliferación celular. Preferentemente, después del tratamiento, el tamaño de un área o zona de proliferación celular se reduce al menos el 5% relativa a su tamaño antes del tratamiento; más preferentemente, se reduce al menos 10%; más preferentemente, se reduce al menos 20%; más preferentemente, se reduce al menos 30%; más preferentemente, se reduce al menos 40%; más preferentemente, se reduce al menos 50%; incluso más preferentemente, se reduce al menos 50%; y lo más preferentemente, se reduce al menos 75%. El tamaño de un área o zona de proliferación celular puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible. El tamaño de un área o zona de proliferación celular puede medirse como un diámetro o ancho de un área o zona de proliferación celular.
El tratamiento o prevención de un trastorno de proliferación celular puede dar como resultado una disminución en el número o proporción de células que tienen una apariencia o morfología anormal. Preferentemente, después del tratamiento, el número de células que tienen morfología anormal se reducen al menos 5% en forma relativa a su tamaño previo al tratamiento; más preferentemente, se reducen al menos 10%; más preferentemente, se reducen al menos 20%; más preferentemente, se reducen al menos 30%; más preferentemente, se reducen al menos 40%; más preferentemente, se reducen al menos 50%; incluso más preferentemente, se reducen al menos 50%; y lo más preferentemente, se reducen al menos 75%. Una apariencia o morfología celular anormal puede medirse a través de cualquier medio de medición reproducible. Una morfología celular anormal puede medirse mediante microscopio, por ejemplo, utilizando un microscopio de cultivo de tejido invertido. Una morfología celular anormal puede tomar la forma de un pleimorfismo nuclear.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "selectivamente" significa que tiende a ocurrir con una mayor frecuencia en una población que en otra población. Las poblaciones comparadas pueden ser poblaciones celulares.
Preferentemente, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, actúa selectivamente en un cáncer o célula precancerígena pero no en una célula normal. Preferentemente, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, actúa selectivamente para modular un objetivo molecular (por ejemplo, una metiltransferasa de proteína objetivo) pero no modula significativamente otro objetivo molecular (por ejemplo, una metiltransferasa de proteína no objetivo). La presente invención también proporciona un método para inhibir selectivamente la actividad de una enzima, tal como una metiltransferasa de proteína. Preferentemente, ocurre un evento selectivamente en la población A relativa a la población B, si ocurre más de dos veces más frecuentemente en una población A en comparación con una población B. Un evento ocurre selectivamente si ocurre más de cinco veces más frecuentemente en la población A. Un evento ocurre selectivamente si ocurre más de diez veces más frecuentemente en la población A; más preferentemente, más de cincuenta veces; incluso más preferentemente, más de 100 veces; y lo más preferentemente, más de 1000 veces más frecuentemente en la población A en comparación con la población B. Por ejemplo, la muerte celular se puede decir que ocurre selectivamente en células de cáncer si ocurre más de dos veces de lo que es frecuente en células de cáncer en comparación con células normales.
Un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede modular la actividad de un objetivo molecular (por ejemplo, una metiltransferasa de proteína objetivo). La modulación se refiere a estimular o inhibir una actividad de un objetivo molecular. Preferentemente, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, modula la actividad de un objetivo molecular si estimula o inhibe la actividad del objetivo molecular en al menos 2 veces en forma relativa a la actividad del objetivo molecular bajo las mismas condiciones, pero carecen únicamente de la presencia del compuesto. Más preferentemente, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, modula la actividad de un objetivo molecular si estimula o inhibe la actividad del objetivo molecular en al menos 5 veces, al menos 10 veces, al menos 20 veces, al menos 50 veces, al menos 100 veces en forma relativa a la actividad del objetivo molecular bajo las mismas condiciones, pero carecen únicamente de la presencia del compuesto. La actividad de un objetivo molecular puede ser medida a través de cualquier medio reproducible. La actividad de un objetivo molecular puede ser medida in vitro o in vivo. Por ejemplo, la actividad de un objetivo molecular puede ser medida in vitro mediante un ensayo de actividad enzimática o un ensayo de enlace de ADN, o la actividad de un objetivo molecular puede ser medida in vivo, ensayando la expresión de un gen reportero.
Un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, no modula significativamente la actividad de un objetivo molecular, si la adición del compuesto no estimula o inhibe la actividad del objetivo molecular en más del 10% relativo a la actividad del objetivo molecular bajo las mismas condiciones, pero careciendo únicamente de la presencia del compuesto.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "¡soenzima selectiva" significa una inhibición o estimulación preferencial de una primera isoforma de una enzima, en comparación con una segunda isoforma de una enzima (por ejemplo, inhibición o estimulación preferencial de una isoenzima alfa de metiltransferasa de proteína en comparación con una isoenzima beta de metiltransferasa de proteína). Preferentemente, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, demuestran un mínimo de cuatro veces de diferencial, preferentemente diez veces de diferencial, más preferentemente cincuenta veces de diferencial, en una dosificación requerida para lograr un efecto biológico. Preferentemente, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, demuestra este diferencial a través del rango de inhibición, y el diferencial se ejemplifica como la IC5o, por ejemplo, una inhibición del 50%, para un objetivo molecular de interés.
La administración de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, a una célula o sujeto que necesita de la misma, puede dar como resultado la modulación (por ejemplo, estimulación o inhibición) de una actividad de una metiltransferasa de protelna de interés.
La presente invención proporciona métodos para evaluar la actividad biológica de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o métodos para identificar un compuesto de prueba como un modulador (por ejemplo, un inhibidor) de DOT1L. Los polipéptidos DOT1L y los ácidos nucleicos se pueden utilizar para clasificar compuestos que enlazan a y/o modulan (por ejemplo, incrementan o disminuyen) una o más actividades biológicas de DOT1L, incluyendo pero sin limitarse a actividad H3K79 HMTasa, actividad de enlace SAM, actividad de enlace de histona y/o nucleosoma, actividad de enlace AF10, AF10-MLL u otra actividad de enlace de proteína de fusión MLL, y/o cualquier otra actividad biológica de interés. Un polipéptido DOT1L puede ser un fragmento funcional de un polipéptido DOT1L de longitud total o equivalente funcional del mismo, y puede comprender cualquier dominio de interés DOT1, incluyendo pero sin limitarse al dominio catalítico, el dominio de enlace SAM y/o el dominio cargado en forma positiva, el dominio de interacción AF10 y/o una señal de exportación nuclear.
Los métodos para evaluar el enlace DOT1L a histonas, nucleosomas, ácidos nucleicos o polipéptidos se puede llevar a cabo utilizando técnicas estándar que puedan ser apreciadas por los expertos en la técnica (ver la Ejemplificación para métodos de ejemplo). Los métodos incluyen ensayos de dos híbridos de levadura y mamífero y técnicas de co-inm unoprecipitación.
Por ejemplo, un compuesto que modula la actividad DOT1L H3K79 HMTasa puede verificarse mediante: contacto de un polipéptido DOT1L con un substrato de histona o péptido que comprende H3 en la presencia de un compuesto de prueba; detectar el nivel de metilación H3K79 del substrato de histona o péptido bajo condiciones suficientes para proporcionar la metilación H3K79, en donde una elevación o reducción de la metilación H3K79 en la presencia del compuesto de prueba, en comparación con el nivel de metilación de histona H3K79 en la ausencia del compuesto de prueba, indica que el compuesto de prueba modula la actividad DOT1L H3K79 H M Tasa .
Los métodos de clasificación de la presente invención, se pueden llevar a cabo en un sistema a base de células o libre de células. Como alternativa adicional, el ensayo se puede llevar a cabo en un animal completo (incluyendo animales no humanos transgénicos). Además, con respecto a los sistemas a base de células, el polipéptido DOT1L (o cualquier otro polipéptido utilizando el ensayo) se pueden agregar directamente a las células o se pueden a partir de un ácido nucleico en la célula. El ácido nucleico puede ser endógeno para la célula o puede ser extraño (por ejemplo, una célula genéticamente modificada).
En algunos ensayos, son empleados los reactivos ¡nmunológicos, por ejemplo, anticuerpos y antígenos. La fluorescencia se puede utilizar en la medida de la actividad enzimática en algunos ensayos. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "fluorescencia" se refiere a un proceso a través del cual una molécula emite un fotón como resultado de absorber un fotón de entrada de mayor energía a través de la misma molécula. Los métodos específicos para evaluar la actividad biológica de los compuestos descritos se describen en los ejemplos.
La administración de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, a una célula o sujeto que necesita del mismo da como resultado la modulación (por ejemplo, estimulación o inhibición) de una actividad de un objetivo intracelular (por ejemplo, substrato). Se pueden modular varios objetivos intracelulares con los compuestos de la presente invención, incluyendo, pero sin limitarse a, metiltransferasa de proteína.
La activación se refiere a colocar una composición de materia (por ejemplo, proteína o ácido nucleico) en un estado adecuado para llevar a cabo una función biológica deseada. Una composición de materia con la capacidad de ser activada, también tiene un estado no activado. Una composición de materia activada puede tener una función biológica inhibidora o estimuladora, o ambas.
La elevación se refiere a un incremento en una actividad biológica deseada de una composición de materia (por ejemplo, una proteína o un ácido nucleico). La elevación puede ocurrir a través de un incremento en la concentración de una composición de materia.
Tal como se utiliza en la presente invención, una "trayectoria de punto de revisión del ciclo celular" se refiere a una trayectoria bioquímica que está implicada en la modulación de un punto de revisión del ciclo celular. Una trayectoria del punto de revisión del ciclo celular puede tener efectos estimuladores o inhibidores, o ambos, en una o más funciones que comprenden un punto de revisión del ciclo celular. Una trayectoria del punto de revisión del ciclo celular está comprendida de al menos dos composiciones de materia, preferentemente proteínas, ambas de las cuales contribuyen a la modulación de un punto de revisión del ciclo celular. Una trayectoria del punto de revisión del ciclo celular puede ser activada a través de una activación de uno o más miembros de la trayectoria del punto de revisión del ciclo celular. Preferentemente, la trayectoria del punto de revisión del ciclo celular es una trayectoria de señalización bioquímica.
Tal como se utiliza en la presente invención, el "regulador del punto de revisión del ciclo celular" se refiere a una composición de materia que puede funcionar, al menos en parte, en la modulación de un punto de revisión del ciclo celular. Un regulador del punto de revisión del ciclo celular puede tener efectos estimuladores o inhibidores, o ambos, en una o más funciones que comprenden un punto de revisión del ciclo celular. Un regulador del punto de revisión del ciclo celular puede ser una proteína o no una proteína.
El tratamiento de cáncer o un trastorno de proliferación celular puede dar como resultado la muerte celular, y preferentemente, la muerte celular da como resultado una disminución de al menos el 10% en el número de células en una población. Más preferentemente, la muerte celular significa una disminución de al menos 20%; más preferentemente, una disminución de al menos 30%; más preferentemente, una disminución de al menos 40%; más preferentemente, una disminución de al menos 50%; lo más preferentemente, una disminución de al menos 75%. Un número de células en una población puede medirse a través de cualquier medio reproducible. Un número de células en una población se puede medir mediante clasificación de célula activada por fluorescencia (FACS), microscopio de inmunofluorescencia y microscopio de luz. Los métodos para medir la muerte celular se muestran en la publicación de Li y asociados, Proc Nati Acad Sci E U A. 100(5): 2674 a 2678, 2003. En un aspecto, la muerte celular ocurre mediante apoptosis.
Preferentemente, una cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, no es significativamente citotóxica para células normales. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto no es significativamente citotóxica para las células normales, si la administración del compuesto en una cantidad terapéuticamente efectiva no induce a la muerte celular en más del 10% de las células normales. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto no afecta significativamente la viabilidad de las células normales, si la administración del compuesto en una cantidad terapéuticamente efectiva no induce a la muerte celular en más del 10% de células normales. En un aspecto, la muerte celular ocurre mediante apoptosis.
Contactar una célula con un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede inducir o activar selectivamente la muerte celular en células de cáncer. Administrar a un sujeto que necesita del mismo un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede inducir o activar la muerte celular selectivamente en células de cáncer. Contactar una célula con un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede inducir a la muerte celular selectivamente en una o más células afectadas por un trastorno de proliferación celular. Preferentemente, la administración a un sujeto que necesita del mismo de un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, induce a la muerte celular selectivamente en una o más células afectadas por un trastorno de proliferación celular.
La presente invención se refiere a un método para tratar o prevenir cáncer administrando un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, a un sujeto que necesita del mismo, en donde la administración del compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, polimorfo o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, da como resultado uno o más de los siguientes: acumulación de las células en la fase G1 y/o S del ciclo celular, citotoxicidad mediante muerte celular en células de cáncer sin una cantidad significativa de muerte celular en células normales, actividad antitumor en animales con un índice terapéutico de al menos 2, y activación de un punto de revisión del ciclo celular. Tal como se utiliza en la presente invención, un "índice terapéutico", es la dosis tolerada máxima dividida entre la dosis eficaz.
Un experto en la técnica puede referirse a textos de referencia generales para descripciones detalladas de las técnicas conocidas aquí descritas o técnicas equivalentes. Estos textos incluyen Ausubel y asociados, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Inc. (2005); Sambrook y asociados, Molecular Cloning, A Laboratory Manual (3a edición), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, Nueva York (2000); Coligan y asociados, Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, N.Y.; Enna y asociados, Current Protocols in Pharmacology, John Wiley & Sons, N.Y.; Fingí y asociados, The Pharmacological Basis of Therapeutics (1975), Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 18a edición (1990). Estos textos, por supuesto, también pueden ser referidos para elaborar o utilizar un aspecto de la presente invención.
Los compuestos de la presente invención también se pueden utilizar para tratar o prevenir enfermedades o trastornos neurologicos. Las enfermedades o trastornos neurologicos que se pueden tratar con los compuestos de la presente invención, incluyen epilepsia, esquizofrenia, trastorno bipolar u otros trastornos psicológicos y/o psiquiátricos, neuropatías, atrofias musculoesqueléticas, y enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo, enfermedad neurodegenerativa. Las enfermedades neurodegenerativas de ejemplo incluyen: enfermedad de Alzheimer, Esclerosis Lateral Amiotrófica (ALS), y enfermedad de Parkinson. Otra clase de enfermedades neurodegenerativas incluyen enfermedades originadas al menos en parte por la agregación de poli-glutamina. Las enfermedades de esta clase incluyen: Enfermedades de Huntington, Atrofia Muscular Espinalbulbar (SBMA o Enfermedad de Kennedy) Atrofia Dentatorubropalidolusiana (DRPLA), Ataxia Espinocerebelar 1 (SCA1), Ataxia Espinocerebelar 2 (SCA2), Enfermedad de Machado-Joseph (MJD; SCA3), Ataxia Espinocerebelar 6 (SCA6), Ataxia Espinocerebelar 7 (SCA7), y Ataxia Espinocerebelar 12 (SCA12).
Cualquier otra enfermedad en la cual la metilación epigenética, que es trasmitida por DOT1, desempeña un papel importante, puede ser tratable o se puede prevenir utilizando los compuestos y métodos aquí descritos. 4. Composiciones Farmacéuticas La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de las Fórmulas (I), (II), (Illa), (lllb), (lile) y (IV) en combinación con al menos un trasportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.
Una "composición farmacéutica" es una formulación que contiene los compuestos de la presente invención en una forma adecuada para administración a un sujeto. En una modalidad, la composición farmacéutica está en forma de dosificación unitaria o de volumen. La forma de dosificación unitaria es cualquiera de una variedad de formas, incluyendo, por ejemplo, una cápsula, una bolsa IV, una tableta, una bomba simple en un inhalador de aerosol o un frasco. La cantidad de ingrediente activo (por ejemplo, la formulación del compuesto descrito o una sal, hidrato, solvato o isómero del mismo) en una dosis unitaria de la composición es una cantidad efectiva y se varía de acuerdo con el tratamiento particular implicado. Un experto en la técnica apreciará que algunas veces es necesario realizar variaciones de rutina a la dosificación dependiendo de la edad y la condición del paciente. La dosis variará dependiendo de la ruta de administración. Están contempladas una variedad de rutas, incluyendo ruta oral, pulmonar, rectal, parenteral, transdérmica, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, inhalación, bucal, sublingual, intrapleural, intratecal, intranasal, y similares. Las formas de dosificación para la administración tópica o transdérmica de un compuesto de la presente invención incluyen polvos, rocíos, ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, soluciones, parches e inhalantes. En una modalidad, el compuesto activo se mezcla bajo condiciones estériles con un transportador farmacéuticamente aceptable, y con cualesquiera conservadores, amortiguadores, o propulsores que sean requeridos.
Tal como se utiliza en la presente invención, la frase "farmacéuticamente aceptable" se refiere a los compuestos, materiales, composiciones, transportadores, y/o formas de dosificación que, dentro del alcance del juicio médico notable, son adecuados para utilizarse en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación excesivo, con una proporción razonable de beneficio/riesgo.
El "excipiente farmacéuticamente aceptable" significa un excipiente que es útil para preparar una composición farmacéutica que generalmente es segura, no tóxica y no es ni biológica, ni de alguna otra manera indeseable, e incluye un excipiente que es aceptable para uso veterinario así como uso farmacéutico humano. Un "excipiente farmacéuticamente aceptable" tal como se utiliza en la presente invención y las reivindicaciones, incluye ambos y uno y más de dichos excipientes.
Una composición farmacéutica de la presente invención, se formula para ser compatible con su ruta de administración proyectada. Los ejemplos de rutas de administración incluyen administración parenteral, por ejemplo, intravenosa, intradérmica, subcutánea, oral (por ejemplo, inhalación), transdérmica (tópica), y transmucosa. Las soluciones o suspensiones utilizadas para aplicación parenteral, intradérmica, o subcutánea, pueden incluir los siguientes componentes: un diluyente estéril tal como agua para inyección, solución salina, aceites fijos, polietilénglicoles, glicerina, propilénglicol u otros solventes sintéticos; agentes antibacterianos tales como alcohol bencílico o parabenos de metilo; antioxidantes tales como ácido ascórbico o bisulfito de sodio; agentes de quelación tales como ácido etilenodiaminatetra-acético; amortiguadores tales como acetatos, citratos o fosfatos, y agentes para el ajuste de tonicidad tal como cloruro de sodio o dextrosa. El pH se puede ajusfar con ácidos o bases, tal como ácido hidroclórico o hidróxido de sodio. La preparación parenteral puede guardarse en ampolletas, jeringas desechables o frascos de dosis múltiple elaborados de vidrio o plástico.
Un compuesto o composición farmacéutica de la presente invención se puede administrar a un sujeto en muchos de los métodos bien conocidos actualmente utilizados para tratamiento quimioterapéutico. Por ejemplo, para el tratamiento de cánceres, un compuesto de la presente invención puede ser inyectado directamente en tumores, inyectados en el torrente sanguíneo o cavidades corporales, o tomados oralmente o aplicados a través de la piel con parches. La dosis elegida debe ser suficiente para constituir un tratamiento efectivo pero no tan alta que origine efectos secundarios inaceptables. El estado de la condición de enfermedad (por ejemplo, cáncer, precáncer, y similares) y la salud del paciente, preferentemente deben ser monitoreados cercanamente durante y por un período de tiempo razonable después del tratamiento.
El término "cantidad terapéuticamente efectiva", tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a una cantidad de un agente farmacéutico para tratar, disminuir, o prevenir una enfermedad o condición identificada, o para exhibir un efecto inhibidor o terapéutico detectable. El efecto puede se detectado a través de cualquier método de ensayo conocido en la técnica. La cantidad efectiva precisa para un sujeto, dependerá del peso corporal, tamaño y salud del sujeto; la naturaleza y grado de la condición; y el terapéutico seleccionado para administración. Las cantidades terapéuticamente efectivas para una situación determinada, se pueden determinar mediante experimentación de rutina que están dentro de las habilidades y juicio del médico. En un aspecto preferido, la enfermedad o condición que será tratada es cáncer. En otro aspecto, la enfermedad o condición que será tratada es un trastorno de proliferación celular.
Para cualquier compuesto, la cantidad terapéuticamente efectiva puede ser estimada inicialmente ya sea en ensayos de cultivo celular, por ejemplo, de células neoplásticas, o en modelos animales, normalmente ratas, ratones, conejos, perros, o cerdos. El modelo animal también se puede utilizar para determinar el rango de concentración y ruta de administración adecuada. La información posteriormente se puede utilizar para determinar dosis y rutas para administración útiles en humanos. La eficacia terapéutica/profiláctica y la toxicidad se pueden determinar a través de procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales experimentales, por ejemplo, ED50 (la dosis terapéuticamente efectiva en el 50% de la población) y LD50 (la dosis letal en el 50% de la población). La proporción de dosis entre los efectos tóxicos y terapéuticos es el índice terapéutico, y se puede expresar como la proporción, LD50/ED50. Se prefieren composiciones farmacéuticas que exhiban grandes índices terapéuticos. La dosis puede variar dentro de este rango dependiendo de la forma de dosificación empleada, la sensibilidad del paciente, y la ruta de administración.
La dosificación y administración se ajustan para proporcionar niveles suficientes del agente(s) activo y para mantener el efecto deseado. Los factores que se pueden tomar en cuenta incluyen la severidad del estado de la enfermedad, salud general del sujeto, edad, peso, y género del sujeto, dieta, tiempo y frecuencia de administración, interacción(s) del fármaco, sensibilidades de reacción, y tolerancia/respuesta a la terapia. Las composiciones farmacéuticas de acción prolongada pueden administrarse cada 3 a 4 días, cada semana, o una vez cada dos semanas dependiendo de la vida media y rango de despeje de la formulación en particular.
Las composiciones farmacéuticas que contienen compuestos activos de la presente invención, se pueden fabricar en una forma que es generalmente conocida, por ejemplo, por medio de mezclado, disolución, granulación, elaboración de pastillas, trituración en polvo o pasta, em ulsificación , encapsulación, atrapamiento, o procesos de liofilización convencionales. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular en una manera convencional utilizando uno o más transportadores farmacéuticamente aceptable que comprenden excipientes y/o auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos activos en preparaciones que se pueden utilizar en forma farmacéutica. Por supuesto, la formulación adecuada depende de la ruta de administración elegida.
Las composiciones farmacéuticas adecuadas para uso inyectable incluyen soluciones acuosas estériles (cuando son solubles en agua) o dispersiones y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. Para administración intravenosa, los transportadores adecuados incluyen solución salina fisiológica, agua bacteriostática, Cremophor EL™ (BASF, Parsippany, N.J.) o solución salina amortiguada con fosfato (PBS). En todos los casos, la composición debe ser estéril y debe ser fluida hasta el grado en que exista una fácil acción en jeringa. Debe ser estable bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento y debe conservarse contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El transportador puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilénglicol, y polietilénglicol líquido, y similares), y mezclas adecuadas de los mismos. Se puede mantener, por ejemplo, la fluidez adecuada a través del uso de un recubrimiento tal como lecitina, a través del mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión y a través del uso de tensoactivos. La prevención de la acción de microorganismos se puede lograr a través de diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, y similares. En muchos casos, se prefiere incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol y sorbitol, y cloruro de sodio en la composición. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede proporcionarse incluyendo en la composición un agente que retarda la absorción por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.
Se pueden preparar soluciones inyectables estériles, incorporando el compuesto activo en la cantidad requerida en un solvente adecuado, con uno o una combinación de los ingredientes descritos anteriormente, según se requiera, seguido de esterilización filtrada. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes requeridos de los descritos anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación son secados al vacío y secados por congelación que produce un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional de una solución filtrada previamente estéril del mismo.
Las composiciones orales generalmente incluyen un diluyente inerte o un transportador comestible farmacéuticamente aceptable. Pueden estar contenidas en cápsulas de gelatina o comprimirse en tabletas. Para el propósito de administración terapéutica oral, el compuesto activo puede ser incorporado con excipientes y utilizarse en la forma de tabletas, trociscos o cápsulas. Las composiciones orales también se pueden preparar utilizando un transportador fluido para utilizarse en la forma de un enjuague bucal, en donde el compuesto en el transportador de fluido se aplica oralmente y se enjuaga y se expectora o se traga. Los agentes de enlace farmacéuticamente compatibles, y/o los materiales adyuvantes se pueden incluir como parte de la composición. Las tabletas, pildoras, cápsulas, pastillas y similares pueden contener cualquiera de los siguientes ingredientes, o compuestos de naturaleza similar: un enlazador tal como celulosa microcristalina, tragacanto de goma o gelatina, un excipiente tal como almidón o lactosa, un agente de desintegración tal como ácido algínico, Primogel, o almidón de maíz, un lubricante tal como estearato de magnesio o Esterotes; tal como 'glidant', un deslizante tal como dióxido de silicón coloidal, un agente edulcorante tal como sacarosa o sacarina; o un agente de saborización tal como menta, salicilato de metilo, o saborizante de naranja.
Para administración mediante inhalación, los compuestos se suministran en la forma de un rocío en aerosol de un contenedor o abastecedor presurizado, que contiene un propulsor adecuado, por ejemplo, un gas tal como dióxido de carbono, o un nebulizador.
La administración sistémica también puede ser mediante medios de transmucosa o transdérmicos. Para administración transmucosa o transdérmica, se utilizan en la formulación penetrantes adecuados para la barrera que será permeada. Dichos penetrantes generalmente son conocidos en la técnica, e incluyen, por ejemplo, para administración transmucosa, detergentes, sales biliares, y derivados de ácido fusídico. La administración transmucosa puede lograrse a través del uso de rocíos nasales o supositorios. Para administración transdérmica, los compuestos activos se formulan en ungüentos, bálsamos, geles o cremas, tal como es sabido generalmente en la técnica.
Los compuestos activos se pueden preparar con transportadores farmacéuticamente aceptables que protegerán al compuesto contra la rápida eliminación del cuerpo, tal como una formulación de liberación controlada, que incluye implantes y sistemas de suministros microencapsulados. Se pueden utilizar polímeros biodegradables, biocompatibles, tal como acetato de vinil etileno, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres, y ácido poliláctico. Los métodos para preparación de estas formulaciones pueden ser apreciadas por los expertos en la técnica. Los materiales también se pueden obtener comercialmente en Alza Corporation y Nova Pharmaceuticals, Inc. Las suspensiones liposomales (incluyendo liposomas dirigidos a células infectadas con anticuerpos monoclonales para antígenos virales) también se pueden utilizar como transportadores farmacéuticamente aceptables. Estos se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos para los expertos en la técnica, por ejemplo, tal como se describe en la Patente Norteamericana No. 4,522,811.
Es especialmente conveniente formular composiciones orales o parenterales en una forma de dosificación unitaria para facilidad de administración y uniformidad de la dosis. La forma de dosificación unitaria, tal como aquí se utiliza, se refiere a unidades físicamente separadas adaptadas como dosificaciones unitarias para el sujeto que será tratado; conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada del compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el transportador farmacéutico requerido. La especificación para las formas de dosificación unitaria de la presente invención, está dirigida por y depende directamente de las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico particular que se logrará.
En aplicaciones terapéuticas, las dosificaciones de las composiciones farmacéuticas utilizadas de acuerdo con la presente invención, varían dependiendo de entre otros factores que afectan la dosificación seleccionada del agente, la edad, peso y condición clínica del paciente receptor, y la experiencia y juicio del médico o practicante que administra la terapia. Generalmente, la dosis debe ser suficiente para dar como resultado la disminución, y preferentemente la regresión del crecimiento de los tumores, y originando también preferentemente la regresión total del cáncer. Las dosificaciones pueden fluctuar de aproximadamente 0.01 mg/kg por día hasta aproximadamente 5000 mg/kg por día. En aspectos preferidos, las dosificaciones pueden fluctuar de aproximadamente 1 mg/kg por día hasta aproximadamente 1000 mg/kg por día. En un aspecto, la dosis está dentro del rango de aproximadamente 0.1 mg/día hasta aproximadamente 50 g/día; aproximadamente 0.1 mg/día hasta aproximadamente 25 g/día; aproximadamente 0.1 mg/día hasta aproximadamente 10 g/día; aproximadamente 0.1 mg hasta aproximadamente 3 g/día; o aproximadamente 0.1 mg hasta aproximadamente 1 g/día, en dosis simples, divididas o continuas (en donde la dosis puede ajustarse para el peso del paciente en kg, área de superficie corporal en m2, y edad en años). Una cantidad efectiva de un agente farmacéutico, es una que proporciona una mejoría objetivamente identificable tal como lo observa el médico u otro observador calificado. Por ejemplo, la regresión de un tumor en un paciente puede medirse con referencia al diámetro de un tumor. La disminución en el diámetro de un tumor, indica regresión. La regresión también está indicada por la falla de los tumores en volver a surgir después de que se ha detenido el tratamiento. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "forma de dosificación efectiva" se refiere a la cantidad de un compuesto activo que produce el efecto biológico deseado en un sujeto o célula.
Las composiciones farmacéuticas pueden incluirse en un contenedor, empaque o abastecedor, junto con instrucciones para administración.
Los compuestos de la presente invención tienen la capacidad de formar adicionalmente sales. Todas estas formas también están contempladas dentro del alcance de la invención reivindicada.
Tal como se utiliza en la presente invención, las "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a derivados de los compuestos de la presente invención, en donde el compuesto de origen es modificado, mediante la elaboración de sales de ácido o base del mismo. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen pero no se limitan a, sales ácidas minerales u orgánicas de residuos básicos tales como aminas, sales álcali u orgánicas de residuos ácidos tales como ácidos carboxílicos, y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto de origen formado, por ejemplo, de ácidos orgánicos o inorgánicos no tóxicos. Por ejemplo, las sales no tóxicas convencionales incluyen pero no se limitan a las derivadas de ácidos inorgánicos y orgánicos seleccionados de ácido 2-acetoxibenzoico, sulfónico 2-hidroxietano, acético, ascórbico, bencensulfónico, benzoico, bicarbónico, carbónico, cítrico, edetico, etandisulfónico, 1,2-etano sulfónico, fumárico, glucoheptonico, glucónico, glutámico, glicólico, glicolarsanilico, hexilresorcínico, hidrabamico, hidrobrómico, hidroclórico, hidroyódico, hidroximaleico, hidroxinaftoico, isetionico, láctico, lactobionico, laurilo sulfónico, maleico, málico, mandélico, metano sulfónico, napsílico, nítrico, oxálico, pamoico, pantotenico, fenilacético, fosfórico, poligalacturónico, propiónico, salicíclico, esteárico, subacético, succínico, sulfámico, sulfanílico, azufreico, tánico, tartárico, toluenosulfónico, y ácidos de amina que son de origen común, por ejemplo glicina, alanina, fenilalanina, arginina, etc.
Otros ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables, incluyen ácido hexanoico, ácidos ciclopentano propiónico, ácido pivúrico, ácido malónico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinámico, ácido 4-clorobencenosulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, ácido 4-toluensulfónico, ácido camforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo-[2.2.2]-oct-2-eno-1 -carboxílico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciario, ácido mucónico, y similares. La presente invención también comprende sales formadas cuando un protón ácido está presente en el compuesto de origen, el cual es ya sea reemplazado por un ión de metal, por ejemplo, un ión de metal álcali, un ión de tierra alcalina o un ión de aluminio; o se coordina con una base orgánica tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina, y similares.
Debe quedar entendido que todas las referencias a las sales farmacéuticamente aceptables incluyen formas de adición de solvente (solvatos) o formas de cristal (polimorfos) tal como aquí se define, de la misma sal.
Los compuestos de la presente invención también se pueden preparar en la forma de ésteres, por ejemplo, ésteres farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, se puede convertir un grupo de función de ácido carboxílico en un compuesto, en su éster correspondiente, por ejemplo, metilo, etilo u otro éster. Asimismo, se puede convertir un grupo de alcohol en un compuesto, en su éster correspondiente, por ejemplo, acetato, propionato u otro éster.
Los compuestos de la presente invención también se pueden preparar como profármacos, por ejemplo, profármacos farmacéuticamente aceptables. Los términos "pro-fármaco" y "profármacos" se utilizan de manera intercambiable en la presente invención y se refieren a cualquier compuesto que libera un fármaco de origen activo in vivo. Ya que los profármacos son conocidos por incrementar las numerosas cualidades deseables de los farmacéuticos (por ejemplo, solubilidad, biodisponibilidad, fabricación, etc.), los compuestos de la presente invención se pueden suministrar en forma de profármaco. Por lo tanto, la presente invención pretende cubrir profármacos de los compuestos aquí reivindicados, métodos para suministrar los mismos y composiciones que contienen los mismos. Los "profármacos" están proyectados para incluir cualquiera transportadores enlazados en forma covalente que liberen un fármaco de origen activo de la presente invención in vivo, cuando dicho profármaco se administra a un sujeto. Los profármacos en la presente invención se preparan modificando grupos funcionales presentes en el compuesto, de tal forma que se disocian las modificaciones, ya sea en manipulación de rutina o in vivo, para el compuesto de origen. Los profármacos pueden incluir, compuestos de la presente invención, en donde el grupo hidroxi, amino, sulfhidrilo, carboxi o carbonilo se une a cualquier grupo que pueda ser disociado in vivo para formar un grupo hidroxilo libre, amino libre, sulfhidrilo libre, carboxi libre o carbonilo libre, respectivamente.
Los ejemplos de profármacos incluyen pero no se limitan a, ésteres, (por ejemplo derivados de acetato, dialquilaminoacetatos, formatos, fosfatos, sulfatos y benzoatos) y carbamatos (por ejemplo, ?,?-dimetilaminocarbonil) de grupos funcionales hidroxi, ésteres (por ejemplo, ésteres etílicos, ésteres de morfolinoetanol) de grupos funcionales carboxilo, derivados de N-acilo (por ejemplo, N-acetil) bases N-Mannich, bases Schiff y enaminonas de grupos funcionales amino, oximas, acétales, cetales y ésteres de enol de cetona y grupos funcionales de aldehido en los compuestos de la presente invención, y similares. Ver la Publicación de Bundegaard, H., Design de Prodrugs, pl-92, Elesevier, Nueva York-Oxford (1985).
Los compuestos, o las sales farmacéuticamente aceptables, ésteres o profármacos de los mismos, se administran en forma oral, nasal, transdérmica, pulmonar, de inhalación, bucal, sublingual, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, intravenosa, rectal, intrapleural, intratecal y parenteral. En una modalidad, el compuesto se administra en forma oral. Un experto en la técnica reconocerá las ventajas de ciertas rutas de administración.
El régimen de dosificación que utiliza los compuestos, se selecciona de acuerdo con una variedad de factores que incluyen tipo, especie, edad, peso, sexo y condición médica del paciente; la severidad de la condición que será tratada; la ruta de administración, la función renal y hepática del paciente y el compuesto particular o la sal empleada del mismo. Un médico o veterinario experto puede determinar y prescribir fácilmente la cantidad efectiva de fármaco requerida para evitar, contrarrestar o detener el progreso de la condición.
Las técnicas para la formulación y administración de los compuestos descritos de la presente invención, se puede encontrar en la Publicación de Remington: hte Science and Practice of Pharmacy, 19° edición, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995). En una modalidad, los compuestos aquí descritos y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se utilizan en preparaciones farmacéuticas en combinación con un transportador o diluyente farmacéuticamente aceptable. Los transportadores farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen rellenadores o diluyentes sólidos inertes, y soluciones orgánicas o acuosas estériles. Los compuestos estarán presentes en composiciones farmacéuticas en cantidades suficientes para proporcionar la cantidad de dosificación deseada en el rango aquí descrito.
Todos los porcentajes y proporciones aquí utilizadas, a menos que se indique de otra manera, son en peso. Se podrán apreciar, a partir de diferentes ejemplos otras características y ventajas de la presente invención. Los ejemplos proporcionados ilustran diferentes componentes y metodologías útiles para practicar la presente invención. Los ejemplos no limitan la invención reivindicada. Con base en la presente descripción, el experto en la técnica puede identificar y emplear otros componentes y metodología útil para practicar la presente invención .
En los esquemas sintéticos aquí descritos, por simplicidad se pueden dibujar compuestos con una configuración particular. Dichas configuraciones particulares no serán construidas como limitantes de la presente invención a uno u otro isómero, tautómero, regioisómero, o estereoisómero, ni excluye mezclas de isómeros, tautómeros, regioisómeros o estereoisómeros.
Los compuestos aquí descritos se ensayan para la modulación de actividad, por ejemplo, metilación de histona, modulación de crecimiento celular y/o IC50, y se describen en los ejemplos que se encuentran a continuación. Los valores IC50 se presentan como A = <0.1 µ?; B = > 0.1 µ? y <1 µ?; C = > 1 µ? y < 10 µ?; y D = > 10 µ ? y < 50 µ?.
Todas las publicaciones y documentos de patente aquí mencionados están incorporados a la presente invención como referencia, como si cada una de dichas publicaciones o documentos estuviera indicada de manera específica e individual como incorporada a la presente invención como referencia. La mención de publicaciones y documentos de patente no está proyectada como una admisión de que es la técnica anterior pertinente, ni tampoco constituye alguna admisión para los contenidos o fecha de los mismos. La presente invención habiendo sido ahora descrita a manera de descripción escrita, los expertos en la técnica reconocerán que la misma puede practicarse en una variedad de modalidades, y que la descripción anterior y los ejemplos que se encuentran a continuación son con propósitos de ilustración y no de limitación de las reivindicaciones adjuntas. 5. Ejemplos Se obtuvieron espectros de resonancia magnética nuclear (RMN) en un Bruker Avance 400 que opera en una fuerza de campo de 400.130 MHz o un Bruker DRX 500 MHz. Se obtuvieron espectros RMN o HRMN en un espectrómetro 500 MHz Bruker AVANCE III. Los solventes de reacción comunes fueron de grado de cromatografía líquida de alto desempeño (HPLC) o de grado de la Sociedad Química Americana (ACS), y anhidros tal como se obtuvieron del fabricante a menos que se indique lo contrario. Se llevó a cabo LCMS en un Waters Micromass ZMD con Módulo de Separaciones Waters 2795 y un detector de formación de fotodiodo Waters 996 y Waters Micromass ZQ con un Módulo de Separación Waters 2695 y detector de formación de fotodiodo Waters 996 o un espectrómetro de masa de cuadrupolo simple Waters Micromass Platform LCZ con un módulo de suministro de solvente Waters 600, bombas auxiliares Waters 515, detector UV Waters 2487 y un automuestreador Gilson 215 y recolector de fracción. O, se llevaron a cabo análisis LCMS utilizando un espectrómetro de masa SQ acoplado a la AGILENT 1200 Serie HPLC. Los dato LCMS, cuando estuvieron disponibles, se proporcionan en los ejemplos que se encuentran a continuación, así como la tabla 1. Los datos MS se proporcionan utilizando la convención para m/z en el formato, [M + H] + .
Los compuestos de la presente invención se pueden preparar utilizando transformaciones químicas conocidas adaptadas a la situación particular del momento.
Ejemplo de Preparaciónl : Materiales de partida o intermediarios Paso 1: (1 R,2S,3R,5 ?)-3-((5-amino-6-cloropirimidin-4-il)amino)-5-(hidroximetil)ciclopentano-1,2-diol Se distribuyó de manera uniforme entre tres tubos una mezcla de clorhidrato de (1 f?,2S,3f?,5f?)-3-armino-5-(hidroximetil)ciclopentano-l ,2-diol (16.9 g, 45.1 mmol) y 4,6-dicloropirimidin-5-amina (5.7 g, 35 mmol) en etanol (45 ml_), y se sometió a condiciones de microondas (aparato CEM, 300 W max, 150°C max, 250 psi max, 3 minutos de elevación, 30 minutos de retención) para producir soluciones color café; HPLC/LC MS indicó la conversión al producto deseado. Las tres mezclas de reacción se combinaron y concentraron in vacuo para producir el compuesto del título crudo en la forma de un aceite color café oscuro, el cual se concentró a partir de tolueno (2 x 30 mL) y se llevó sin purificación adicional: MS (ESI + ) para C10H15CIN4O3 m/z 275.0 (M + H) + ; MS (ESI-) para C 0H15CIN4O3 m/z 273.0 (M-H)\ Paso 2: ((3a/?,4R,6R,6aS)-6-(6-cloro-9H-purin-9- etoxitetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metanol El ( 1 R,2S, 3 R,5f?)-3-((5-am i ??-6-cl oro pirim Id i n-4-¡l)am i no) -5-(hidroximetil)ciclopentano-1 ,2-diol crudo anterior, se trató con ortoformato de etilo (120 ml_, 720 mmol) y ácido 10-camforsulfónico (8.11 g, 34.9 mmol). Se agitó vigorosamente la mezcla color café heterogénea para producir una solución color café casi homogénea después de 10 minutos. A las 5 horas, LC MS indicó el producto deseado como el producto mayor, y la reacción se extinguió con NaHC03 acuoso saturado (120 mL). La mezcla se diluyó con agua (75 mL), se extractó con CH2CI2 (3 x 200 mL), y los orgánicos combinados se secaron con (Na2S04) y se concentraron in vacuo para producir el compuesto del título crudo en la forma de un líquido color café oscuro, el cual se llevó sin manipulación adicional: MS (ESI + ) para Ci4H17CIN404 m/z 341.0 (M + H) + .
Paso 3: ((3aR,4R,6R, 6aS)-6-(6-cloro-9H-purin-9-il )-2, 2-d¡met¡ltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol El producto crudo anterior ((3af?,4f?,6 ?,6aS)-6-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2-etoxitetrahidro-3a/-/-ciclopenta[d][ 1 ,3]dioxol-4-il)metanol se tomó en 2 ,2-dimetoxipropano (214 ml_, 1740 mmol) y se trató con monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (13.2 g, 69.5 mmol) para producir un aceite color café parcialmente suspendido en una solución nebulosa, la cual se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora 20 minutos; HPLC/LC MS indicó la conversión total al producto deseado. La reacción se extinguió mediante la adición cuidadosa de bicarbonato de sodio (8.76 g, 104 mmol) y una cantidad mínima de agua. Los volátiles se eliminaron in vacuo y la capa acuosa restante se diluyó con agua (100 mL) y se extractó con CH2CI2 (3 x 400 mL). Los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y se concentraron in vacuo para producir un aceite color café. La purificación mediante cromatografía de columna (7 x16 cm sílice; 0 a 5% eOH/CH2CI2) produjo el compuesto del título (8.30 g, 74% en 3 pasos) en la forma de una espuma amarilla: MS (ESI + ) para C14H17CIN403 m/z 325.1 (M + H) + ; MS (ESI-) paraC14H17CIN403 m/z 369.0 (M + HC02)"; pureza HPLC >95 área%.
Paso 4: 9-((3aS,4 ?,6R,6aR)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[ /][1 ,3]dioxol-4-il)-6-cloro-9H-purina Una mezcla de ((3aR,4f?,6f?, 6aS)-6-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/7-c¡clopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metanol (7.9 g, 24 mmol) y trifenilfosfina soportada con polímero (3 mmol/g carga; 11 g, 34 mmol) en THF (100 mL) se enfrió a una temperatura de 0°C (baño de hielo/salmuera) y se trató en forma de gotas con un azodicarboxilato de düsopropilo (6.7 mL, 34 mmol). La pasta color marrón se agitó durante 15 minutos, y se trató en forma de gotas con una solución de azida de difenilfosfónico (7.3 mL, 34 mmol) en THF (24 mL). La mezcla de reacción color café se agitó durante 18.5 horas conforme expiró el baño de hielo; HPLC indicó la conversión al producto deseado. A las 21.5 horas, la mezcla de reacción se filtró, los sólidos se lavaron con CH2CI2, y el filtrado se concentró in vacuo. El residuo color rojo-café se tomó en CH2CI2 (300 mL) y se lavó con NaHC03 acuoso saturado (1 x 100 mL), agua (1 x 100 mL), y salmuera (1 x 150 mL). La capa orgánica separada se secó (Na2S04) y concentró in vacuo para producir un aceite color rojo-naranja. La purificación mediante cromatografía instantánea (7 x 16 cm sílice; 0-10% acetona/CH2CI2) produjo el compuesto del título (4.82 g, 57%) en la forma de un aceite/espuma color amarillo: MS (ESI + ) para C14H16CIN702 m/z 350.1 (M + H) + ; MS (ESI-) para Ci4H16CIN702 m/z 394.1 (M + HC02)-; pureza HPLC >95 área%.
Paso 5: 9-((3aS,4K,6/?,6a/?)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3atf-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-W-(2,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina Una solución de 9-((3aS,4R,6f?,6af?)-6-(az¡dometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/--ciclopenta[d][1,3]d¡oxol-4-¡l)-6-cloro-9/--purina (1.29 g, 3.69 mmol) y (2,4-dimetoxifenil)metanamina (0.71 ml_, 4.7 mmol) en 1-butanol (10 mL), se trató con N,N-düsopropiletilamina (0.93 mL, 5.3 mmol) y se calentó a una temperatura de 80°C durante 16.5 horas; HPLC/LC MS indicó conversión al producto deseado. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron bajo un flujo de aire para producir una pasta color café-naranja. La purificación mediante cromatografía de columna (2x8 cm sílice; 0 a 10% acetona/CH2CI2) produjo el compuesto del título (1.72 g, 97%) en la forma de una espuma/aceite color amarillo/naranja: MS (ESI + ) para C23H28N8O4 m/z 481.2 (M + H) + ; pureza HPLC >95 área%.
Paso 6: 9-((3aS,4R,6/?,6a ?)-6-(am¡nometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-A/-(2,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina Una solución de 9-((3aS,43,6R,6a/?)-6-(azidomet¡l)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-¡l)-/V-(2 ,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina (1.72 g, 3.58 mmol) en THF (16 ml_) se enfrió a una temperatura de 0°C (baño de hielo/salmuera) y se trató en forma de gotas con una solución 1.0 M de trimetilfosfina en THF (6.30 ml_, 6.30 mmol). El baño frío se eliminó después de 30 minutos y la mezcla de reacción se agitó durante 1.5 horas; HPLC/LC MS indicó el consumo total de la azida de partida. Se agregó agua (2.84 ml_, 157 mmol) a la solución color naranja (se observó la evolución de gas) y la mezcla de reacción se agitó durante 2.75 horas a temperatura ambiente; HPLC indicó la conversión total a la amina deseada. La mezcla de reacción se concentró in vacuo para producir un aceite color naranja. El residuo se tomó en CH2CI2 (150 ml_) y se lavó con agua (2 x 50 ml_) y salmuera (1 x 75 ml_). La capa orgánica separada se secó (Na2S04) y se concentró in vacuo para producir el compuesto del título (1.6 g, 98%) en la forma de una espuma color amarillo: MS (ESI + ) para C23H30N6O4 m/z 455.2 (M + H) + ; pureza HPLC >95 área%.
Paso 1: 3-(3-((((3a ?,4/?,6R,6aS)-6-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil tetra hidro-3aH-ciclopenta[d][1 , 3] di oxo I -4- il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (0.839 g, 3.96 mmol) a una solución de 9-((3aS,4f?,6f?,6a ?)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-/V-(2,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina (1.5 g, 3.3 mmol), 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (0.562 g, 3.30 mmol) y ácido acético (0.188 ml_, 3.30 mmol) en 1 ,2-dicloroetano (26.0 ml_, 3.30E2 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche.
A la mañana siguiente el material de partida se consumió mediante HPLC, por lo que se agregó NaHC03 y la capa acuosa se extractó 3x con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y se purificaron mediante FC (DC M/ H3 7N en MeOH 95:5) para producir 3-3-((((3af?,4f?,6R,6aS)-6-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9--purin-9-il)-2,2-dimetiltetrah¡dro-3a/-/-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (1.5 g; 75%) en la forma de una resina/espuma color amarilla gruesa. MS (ESI + ) para C32H44N606 m/z 609.3 [M + H] + . Paso 2: 3-(3-((((3aR,4R,6 R,6aS)-6-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil tetra hidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4- il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Se tomó 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-dimetox¡bencil)amino)-9H-purin-9-¡l)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)c¡clobutil)propanoato de etilo (0.06 g, 0.1 mmol) en acetonitrilo (2.6 ml_, 50 mmol) y se agregaron yoduro de ¡sopropilo (0.098 ml_, 0.98 mmol) y trietilamina (0.21 ml_, 1.5 mmol). La reacción se calentó a una temperatura de 80°C durante 12 horas, punto en el cual la reacción pareció detenerse. Se agregaron otros 15 equivalentes de trietilamina y otros 15 equivalentes de yoduro de ¡sopropilo, y la reacción continuó durante 8 horas más. La reacción pareció haberse detenido nuevamente, de modo que se agregaron otros 15 equivalentes de cada uno de yoduro de ¡sopropilo y trietilamina. Al momento del consumo del material de partida, la reacción se concentró y se agregó NaHC03 saturado (20 mis) y DCM (20 mis). El residuo se dividió entre la capa orgánica y la capa acuosa. La capa acuosa se extractó 3 veces con DCM, posteriormente se secaron los orgánicos combinados se secaron y purificaron mediante FC (DCM/NH3 7N en MeOH 97:3). El producto estaba aún contaminado con TEA-H + I-, por lo que a 30 mi de la solución del producto en DCM, se le agregaron 20 mis de NaHC03 saturado y 10 mis NaOH 1N. La mezcla se agitó durante 15 minutos, posteriormente la capa acuosa se extractó con DCM 3 veces. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y el solvente se eliminó para producir 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo puro (0.045 g; 70%) en la forma de una espuma/sólido color café, sin más sales de amina presentes mediante RMN. S (ESI+) para C35H5oN606 m/z 651.3 [M + H] + .
Se agregó monohidrato de hidróxido de litio (0.838 g, 20.0 mmol) a una solución de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (1.3 g, 2.0 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL, 300 mmol) y metanol (6.5 mL, 160 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, y a la mañana siguiente el material de partida se había consumido y había transformado en el ácido. La reacción se acidificó con HCI 1N a pH = 6. Los volátiles se eliminaron in vacuo y se eliminó el agua restante mediante destilado azeotrópico con etanol seguido de 24 horas de liofilización . El sólido café resultante se utilizó sin purificación adicional. 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo El 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-dimetoxibencil)amino]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]metil}amino)ciclobutil]propanoato de etilo de amina (1.8 g, 3.0 mmol) se tomó en metanol (20 mL, 600 mmol) y se agregó cianoborohidruro de sodio (0.19 g, 3.0 mmol). El pH se ajustó a aproximadamente 6 utilizando una solución al 10% de AcOH en MeOH, posteriormente se agregó en una porción formalina (0.29 mL, 3.9 mmol). La reacción se dejo proceder durante 3 horas, tiempo en el cual MS indicó el consumo total del material de partida. Se agregó NaHC03 (saturado) a la mezcla de reacción, la cual posteriormente se extractó 3 veces con DC . Los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y se concentraron para obtener una resina color amarilla. Este residuo se purificó mediante FC (DCM/NH3 7N en MeOH 93:7) para producir 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (1.6 g; 87%) en la forma de una espuma incolora. MS (ESI + ) para C34H 7N5O6 m/z 622.3 [M + H]\ 1H RMN (400 MHz, d3-cloroformo) d? 8.282 (s, 1H), 7.203 -7.168 (m, 1H), 6.877 -6.865 (m, 1H), 6.399 - 6.334 (m, 2H), 6.242 - 6.236 (m, 1H), 5.330 (s, 1H), 4.890 - 4.835 (m, 2H), 4.664 - 4.650 (d, J =5.6 Hz, 2H), 4.391 - 4.354 (m, 1H), 4.067 -4.000 (m, 2H), 3.757 (s, 3H), 3.710 (s, 3H), 2.864 - 2.784 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 2.553 - 2.474 (m, 0.5H (metina de cis isómero), 2.432 - 2.370 (m, 1H), 2.322 - 2.278 (m, 2H), 2.212 -2.089 (m, 4H), 2.022 & 2.018 (s, 3H (traslape de singletos debido a N-metil de cis y trans isómeros), 1.964 -1.908 (m, 3H), 1.778 - 1.584 (m, 4H), 1.486 (s, 3H), 1.363 -1.296 (m, 1H), 1.219 (s, 3H), 1.182 - 1.146 (m, 3H). ((3a/?,4R,6/?,6aS)-6-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2-etoxitetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol (7ft,2S,3R,5R)-3-((5-am¡no-6-clorop¡r¡m¡din-4-il)am 5-(hidroximetil)ciclopentano- ,2-diol crudo anterior, se trató con ortoformato de etilo (120 rtiL, 720 mmol) y ácido 10-camforsulfónico (8.11 g, 34.9 mmol). La mezcla color café heterogénea se agitó vigorosamente para producir una solución color café casi homogénea después de 10 minutos. A las 5 horas, LC MS indicó el producto deseado como el producto principal, y la reacción se extinguió NaHC03 acuoso saturado (120 ml_). La mezcla se diluyó con agua (75 mL), se extractó con CH2CI2 (3 x 200 mL), y los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y se concentraron in vacuo para producir el compuesto del título crudo en la forma de un líquido color café oscuro, el cual se llevó sin manipulación adicional: MS (ESI + ) para C14H17CIN404 m/z 341.0 (M + H) + .
Paso 3:((3a R, 4f?, 6R, 6a S)-6-( 6 -cloro -9H-purin -9 -i I ) -2 , 2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol El ((3a R, 4f?,6R,6aS)-6-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2-etoxitetrahidro-3a/--ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol crudo anterior se tomó en 2 ,2-dimetoxipropano (214 mL, 1740 mmol) y se trató con monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (13.2 g, 69.5 mmol) para producir un aceite color café parcialmente suspendido en una solución nebulosa, la cual se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora 20 minutos; HPLC/LC MS indicó la conversión total al producto deseado. La reacción se extinguió mediante la adición cuidadosa de bicarbonato de sodio (8.76 g, 104 mmol) y una cantidad mínima de agua. Los volátiles se eliminaron in vacuo y la capa acuosa restante se diluyó con agua (100 ml_) y se extractó con CH2CI2 (3 x 400 ml_). Los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y concentraron in vacuo para producir un aceite color café. La purificación mediante cromatografía de columna (7x16 cm sílice; 0-5% eOH/CH2CI2) produjo el compuesto del título (8.30 g, 74% en 3 pasos) en la forma de una espuma amarilla: MS (ESI + ) para C^H^CllsUOa m/z 325.1 (M + H) + ; MS (ESI-) para C14H17CIN403m/z 369.0 (M + HC02)\ Paso 4: 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[cr][1 ,3]dioxol-4-il)-6-cloro-9H-pur¡na Una mezcla de {(3aR, 4R, 6f?,6aS')-6-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3a -/-ciclopenta[oí][1 ,3]dioxol-4-il)metanol (7.9 g, 24 mmol) y trifenilfosfina soportada con polímero (3 mmol/g carga; 11 g, 34 mmol) en THF (100 mL) se enfrió a una temperatura de 0°C (baño de hielo/salmuera) y se trató en forma de gotas con azodicarboxilato de diisopropilo (6.7 mL, 34 mmol). La pasta color marrón se agitó durante 15 minutos, y se trató en forma de gotas con una solución de azida de difenilfosfónica (7.3 ml_, 34 mmol) en THF (24 ml_). La mezcla de reacción color café agitó durante 18.5 horas conforme expiró el baño de hielo; HPLC indicó conversión al producto deseado. A las 21.5 horas, se filtró la mezcla de reacción, los sólidos se lavaron con CH2CI2, y el filtrado se concentró in vacuo. El residuo color rojo-café se tomó en CH2CI2 (300 ml_) y se lavó con NaHC03 acuoso saturado (1 x 100 ml_), agua (1 x 100 ml_), y salmuera (1 x 150 ml_). La capa orgánica separada se secó (Na2S04) y se concentró in vacuo para producir un aceite color rojo-naranja. La purificación mediante cromatografía de columna (7 x 16 cm sílice; 0-10% acetona/CH2CI2) produjo el compuesto del título (4.82 g, 57%) en la forma de un aceite/espuma: MS (ESI + ) para Ci4H16CIN702 m/z 350.1 (M + H) + ; MS (ESI-) para C14Hi6CIN7 02m/z 394.1 (M + HCO2)".
Paso 5: 9-((3aS,4/?,6R,6a/?)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[cf][1 ,3]dioxol-4-il)-/V-(2,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina Una solución de 9-((3aS,4f?,6R,6aft)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/-/-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-6-cloro-9H-purina (1.29 g, 3.69 mmol) y (2,4-dimetoxifenil)metanamina (0.71 mL, 4.7 mmol) en 1-butanol (10 mL) se trató con N,N- diisopropiletilamina (0.93 ml_, 5.3 mmol) y se calentó a una temperatura de 80°C durante 16.5 horas; HPLC/LC MS indicó conversión al producto deseado. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron bajo flujo de aire para producir una pasta color café-naranja. La purificación mediante cromatografía de columna (2x8 cm sílice; 0-10% acetona/CH2CI2) produjo el compuesto del título (1.72 g, 97%) en la forma de una espuma/aceite: MS (ESI + ) para C23H28N804 m/z 481.2 (M + H) + .
Paso 6: 9-((3aS,4/?,6 ?,6a/?)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-A/-(2,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina Una solución de 9-((3aS,4R,6ft,6af?)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/-/-ciclopenta[d][1 , Sldioxol^-i -ZV-^^-dimetoxibencilJ-gH-purin-e-amina (1.72 g, 3.58 mmol) en THF (16 mL) se enfrió a una temperatura de 0°C (baño de hielo/salmuera) y se trató en forma de gotas con una solución 1.0 M de trimetilfosfina en THF (6.30 mL, 6.30 mmol). El baño frío se eliminó después de 30 minutos, y la mezcla de reacción se agitó durante 1.5 horas; HPLC/LC MS indicó el consumo total de la azida de partida. Se agregó agua (2.84 mL, 157 mmol) a la solución color naranja (se observó evolución de gas) y la mezcla de reacción se agitó durante 2.75 horas a temperatura ambiente; HPLC indicó la conversión total a la amina deseada. La mezcla de reacción se concentró in vacuo para producir un aceite color naranja. El residuo de tomó en CH2CI2 (150 mL) y se lavó con agua (2 x 50 mL) y salmuera (1 x 75 mL). La capa orgánica separada se secó (Na2S04) y se concentraron in vacuo para producir el compuesto del título (1.6 g, 98%) en la forma de una espuma color amarillo pálido: MS (ESI + ) para C23H3o 604 m/z 455.2 (M + H) + .
Paso 1: 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 , 3] di oxo I -4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Una mezcla de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-c][1,3]dioxol-4-¡l)-9 --purin-6-am¡na (0.50 g, 1.6 mmol) y 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (0.27 g, 1.6 mmol) en metanol (10 mL) se trató con ácido acético (0.09 mL, 2 mmol) a temperatura ambiente y el frasco se evacuó y enjuagó con nitrógeno (x3). La mezcla de reacción se trató a temperatura ambiente con cianoborohidruro de sodio (0.26 g, 4.1 mmol), que produjo la evolución de gas instantánea y una solución clara, casi incolora en pocos minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente; HPLC/LC MS indicó una mezcla ~2:1 del producto de la amina de partida. A las 1.5 horas, se agregó 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo adicional (66 mg, 0.39 mmol) en MeOH (1.0 mL), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos; HPLC/LC MS indicó el -70% de conversión y cierta dialquilación. A las 2 horas 15 minutos, se agregó agua (4.0 mL) y la mezcla se concentró in vacuo. La capa acuosa residual se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (10 mL, para pH 9) y se extractó con CH2CI2 3 x 15 mL). Los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y concentraron in vacuo para producir el producto de aminación reductivo en la forma de una espuma color blanca, la cual se llevó sin purificación adicional: MS (ESI + ) para C22H32N605 m/z 461.1 (M + H) + , 483.1 (M + Na) + .
Paso 2: 3-(3-((((3af?,4R,6R,6aR)-6-(6-am ino-9H-puri ?-9-il )-2, 2-dimetiltetrahidrof uro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Se tomó la amina cruda secundaria anterior en metanol (10 mL) y se trató con cianoborohidruro de sodio (0.30 g, 4.8 mmol). Se agregó una solución de ácido acético al 10% v/v en metanol, para ajustar el pH a ~6, seguido de la adición en forma de gotas de formaldehído acuoso al 37% (0.65 mL, 6.3 mmol), el cual produjo la evolución de gas. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora; HPLC/LC MS indicó la conversión total al producto deseado. A las 1.5 horas, se agregó agua (5.0 mL) y la mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo de diluyó con NaHC03 acuoso saturado (10 mL, para pH ~9) y se extractó con CH2CI2 (3x 15 mL). Los orgánicos combinados se diluyeron con una pequeña cantidad de EtOH para producir una solución clara, se secó (Na2S04), y concentró in vacuo para producir un aceite casi incoloro. La purificación mediante cromatografía de columna (4 x 17 cm sílice; 0-5% NH3 metanólico 7N/CH2CI2) produjo el compuesto del título (0.50 g, 60%) en la forma de una espuma blanca/aceite incoloro: MS (ESI + ) para C23H34N605 m/z 475.1 (M + H) + , 497.1 (M + Na) + .
Paso 1: 3-(3-((((3aR,4R,6 ?,6a ?)-6-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-2,2-dimetiltetrahidrof uro[3,4-d][1 , 3]dioxol-4-¡l)met¡l)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Una mezcla de 9-((3aR,4R,6ft,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (2.04 g, 6.66 mmol) y 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (1.2 g, 7.0 mmol) en metanol (41 mL) se trató con ácido acético (0.37 mL, 6.5 mmol) a temperatura ambiente y el frasco se evacuó y enjuagó con nitrógeno (x3). La mezcla de reacción se trató a temperatura ambiente con cianoborohidruro de sodio (1.0 g, 16 mmol), el cual produjo la evolución de gas instantánea y una solución clara, casi incolora en pocos minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente; HPLC/LC MS indicó que aún había material de partida. A las 1 hora 20 minutos, se agregó 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo adicional (0.50 g, 2.93 mmol) en eOH (3 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos y se trató con agua (12 mL). La mezcla se concentró in vacuo y la capa acuosa residual se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (40 mL, para pH 9) y se extractó con CH2CI2 (3 x 60 mL). Los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y concentraron in vacuo para producir el compuesto del título crudo en la forma de una espuma blanca/aceite color amarillo muy pálido, que se llevó sin purificación adicional: MS (ESI + ) para C22H32N605 m/z 461.2 (M + H) + y 483.1 (M + Na) + .
Paso 2: 3-(3-((((3aR,4R,6R,6af?)-6-(6-am ino-9H-puri n-9-il)-2, 2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Una solución de 3-(3-((((3aR,4f?,6f?,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4- il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo curo anterior en acetonitrilo (30 mL) se trató con carbonato de potasio (6.3 g, 46 mmol) y yoduro de isopropilo (3.9 mL, 39 mmol). La mezcla de reacción se calentó en un tubo sellado a una temperatura de 90°C durante 6.5 horas; HPLC indicó una mezcla 4:1 del producto con el material de partida. La mezcla de reacción se agitó durante la noche (17.5 horas) a temperatura ambiente, se trató con yoduro de isopropilo adicional (2.0 mL, 20 mmol), y se calentó a una temperatura de 90°C durante 3 horas; HPLC/LC MS indicó la conversión casi completa. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se eliminaron mediante filtración al vacío, enjuagando con CH3CN, y el filtrado se concentró in vacuo para producir un aceite color naranja opaco con precipitado. La purificación mediante cromatografía de columna (5 x 14.5 cm sílice; 0-10% NH3 metanólico 7 N/CH2CI2) produjo el compuesto del título (0.49 g, 15%) en la forma de una espuma color blanco/aceite incoloro. Las fracciones mezcladas que contienen el producto se volvieron a purificar mediante cromatografía de columna (4 x 10.5 cm sílice; 0-5% NH3 metanólico 7 N/CH2CI2) para producir el compuesto del título (1.66 g, 40%) en la forma de una espuma color blanca/aceite incoloro contaminado con el subproducto de aminación bisreductiva del Paso 1: MS (ESI + ) para CzsHaeNeOg m/z 503.2 (M + H) + . 3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)metil)amino)ciclobutil)propanoato etilo Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (2.43 g. 11.5 mmol) una solución de (1 S,2R,3R,5R)-3-(aminonietil)-5-(4-((2,4-dimetoxibencil)aniino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)ciclopentano-1 ,2-diol (2 ,6 g, 5.7mmol) y 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (0.976 g, 5.73 mmol) y ácido acético (0.326 mi, 5,73 mmol) en 1 ,2-Dicloroetano (20 mi) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó NaHC03 y la capa acuosa se extractó 3x con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron, concentraron y purificaron mediante cromatografía instantánea (DCM/N H3 7N en MeOH 90:10) para producir el compuesto deseado (1.8 g) en la forma de una resina color amarillo gruesa .
N-(2,4-dimetox¡bencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6- ((isopropilamino)metil)-2, 2-dimetil tetra hidro-3aH- ciclopenta[d][1 ,3]d¡oxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimid¡n-4- amina Una solución de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2- dimetiltetrah¡dro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-¡l)-N-(2,4- dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡m¡din-4-am¡na (7.50 g, 16.5 mmol) en 1 ,2-Dicloroetano (140 ml_, 1800 mmol) se trató con Acetona (1.34 mL, 18.2 mmol) y ácido acético (0.94 ml_, 16 mmol) en forma de gotas, seguido de triacetoxiborohidruro de sodio (4.20 g, 19.8 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis HPLC indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se diluyó con 200 mL de CH2CI2 y se lavó con 150 mL de NaHC03 saturado. La fase acuosa se lavó con 100 mL de CH2CI2 y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04) se filtró y concentró para producir un aceite que produjo una espuma rígida que se colocó bajo alto vacío. El material crudo (9.3 g) se llevó directamente al siguiente paso. 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino) pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimet¡ltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Una solución de N-(2 ,4-dimetoxibencil)-7- ((SaS^R.eR.eaRJ-e-í sopropilaminoJmetil)^^-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (9.50 g, 15.3 mmol) en 1,2-Dicloroetano (75 ml_, 950 mmol) se trató con 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (3.92 g, 23.0 mmol) y ácido acético (1.0 ml_, 18 mmol) en forma de gotas seguido de triacetoxiborohidruro de sodio (4.58 g, 21.6 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 6 días. La mezcla de reacción se diluyó con 150 ml_ de CH2CI2 y se lavó con 100 ml_ NaHC03 saturado. La fase acuosa se lavó con 100 mL de CH2CI2 y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir un vidrio viscoso color café claro.
El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02 eluyendo con 2 a 3% NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para producir ligeramente un vidrio/espuma rígida (7.10 g). 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Una solución de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (8.00 g, 15.2 mmol) en 1 ,2-Dicloroetano (119.5 mL, 1517 mmol) se trató con 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (2.58 g, 15.2 mmol) y Ácido acético (0.86 mL, 15 mmol) en forma de gotas seguido de triacetoxiborohid ru ro de sodio (3.86 g, 18.2 mmol), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 19 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 150 mL de CH2CI2 y se lavó con 150 mL de NaHC03 saturado. La fase acuosa se lavó con 70 mL de CH2CI2 y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2S0 , se filtró y concentró para producir un vidrio color marrón que produjo una espuma pegajosa que se colocó bajo alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02 eluyendo con 3 a 4%NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para producir un aceite viscoso color amarillo claro que produjo una espuma pegajosa bajo alto vacío (5.03 g). MS 608.3 (M + H).
Ejemplo 1: Síntesis de 1 -((3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,4-dihidroxi tetra hidrofuran-2-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)metil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea (Compuesto 110) Paso 1 : Síntesis de 3-oxociclobutanocarboxilato de metilo A una solución de DCC (5.96 g, 28.95 mmol) en DCM (20 mi) se le agregó en forma de gotas una mezcla de ácido 3-oxociclobutanocarboxílico (3.0 g, 26.31 mmol), MeOH (1.68 g, 52.62 mmol) y DMAP (2.57 g, 21.05 mmol) en DCM (30 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de filtró. El filtrado se lavó con una solución HCI 0.5 M (50 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró. El residuo se purificó mediante SGC (PE:EA = 5:1) para obtener el compuesto del título (4.0 g). H RMN (500 MHz, CDCI3): d 3.77 (s, 3H), 3.42-3.26 (m, 5H) ppm.
Paso 2: Síntesis de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-¡l)metil)(metil)amino)ciclobutanocarboxilato de metilo Se agitó a una temperatura de 45°C durante 2 horas una solución de 3-oxociclobutanocarboxilato de metilo (1.28 g crudo), 9-((3aR,4R,6 ,6aR)-2,2-dimetil-6-((metilamino)metil)tetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (2.0 g, 6.25 mmol) (Townsend et al. Org Lett 2009, 11, 2976-2679) y Ti(iPrO)4 (1.78 g, 6.25 mmol) en MeOH (50 mL), posteriormente se agregó NaCNBH3 (0.79 g, 12.50 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se extinguió con NaHC03 acuoso saturado (40 mL), se filtró, se extractó con DCM (40 mL x 3), se secó sobre Na2S04 y se concentró. El residuo se purificó mediante SGC (DCM : MeOH =12:1) para obtener el compuesto del título (1.7 g, Rendimiento 63%). ? RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28-8.27 (m, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.20-6.18 (m, 1H), 5.52 (dd, J = 1.5, 6.0 Hz, 1H), 5.00 (dd.J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 5.33 (brs, 1H), 3.65-3.63 (m, 3H), 2.77-2.55 (m, 4H), 2.19-2.11 (m, 5H), 2.00-1.82 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.38 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 433.2 [M + 1] + .
Paso 3: Síntesis de (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)metanol A una solución de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutanocarboxilato de metilo (1.0 g, 2.31 mmol) en THF (40 mi) se le agregó LiAIH4 (0.53 g, 13.89 mmol) a una temperatura de 0°C y la mezcla se agitó durante la noche. Se agregaron lentamente a la mezcla agua (1.0 g) y una solución NaOH al 15% (3.0 g), y al momento de agitarse durante 15 minutos, se filtró la mezcla. El filtrado se concentró para obtener el compuesto del título crudo el cual se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 4: Síntesis de metanosulfonato de (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2 ,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)metilo A una solución de (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-¡l)met¡l)(metil)amino)ciclobut¡l)metanol tomado directamente del paso anterior en DCM (25 mi), se le agregó Et3N (467 mg, 4.62 mmol) y MsCI (264 mg, 2.31 mmol) en la forma de una solución en DCM (5 mi). La mezcla se agitó durante 2 horas. Se agregaron agua (20 mi) y DCM (30 mi x 2). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró, se purificó con TLC de preparación (DCM:MeOH = 10:1) para proporcionar el compuesto del título. (390 mg, Rendimiento 35% para dos pasos). 1 RMN (500 MHz, MeOD): QH 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.203-6.200 (m, 1H), 5.529 (dd, J = 2.0, 7.0 Hz, 1H), 5.010 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 4.354 (dd, J = 3.5, 8.0 Hz, 1H), 4.197-4.182 (m, 2H), 3.585 (brs, 1H), 3.073-2.948 (m, 5H), 2.595-2.513 (m, 2H), 2.394 (brs, 1H), 2.207 (brs, 1H), 2.107(s, 3H), 2.030-1.989 (m, 1H), 1.840-1.811 (m, 2H), 1.586 (s, 3H), 1.390 (brs, 1H), 1.329-1.280(m, 6H), 0.905-0.878 (m, 1H) ppm; ESI-MS (m/z): 483.3[M + 1] + .
Paso 5: Síntesis de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3- (azidometil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina A una solución de metanosulfonato de (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-2,2-dimetiltetrah¡drofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)am¡no)c¡clobutil)metilo (150 mg, 0.31 mmol) en DMF (3 mi) se le agregó NaN3 (81 mg, 1.24 mmol). La mezcla se calentó a una temperatura de 70°C durante 3 horas. Se agregó agua (30 mi) y la mezcla se extractó con acetato de etilo (20 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron. El residuo se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH = 30:1) para obtener el compuesto del título (90 mg, Rendimiento 67%). ESI-MS (m/z): 430.2 [M+ 1] + . Paso 6: Síntesis de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(aminometil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Se agregó Pd/C (10 mg) a una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3- (azidometil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]d¡oxol-4-il)-9H-purin-6-amina (90 mg, 0.21 mmol) en MeOH (6 mi). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo una atmósfera de H2. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para obtener el compuesto del título el cual se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 7: Síntesis de 1 -(^-((((SaR^R.eR.eaRJ-e-íe-amino-gH-purin-g-iO^^-dimetiltetrahidrofurolS^-dHI ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)metil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea A una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(aminometil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina en DCM (4 mi), se le agregó 1 -ter-butil-4-isocianatobenceno (37 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentró y purificó mediante TLC de preparación (DCM: eOH = 10:1) para proporcionar el compuesto del título (55 mg, Rendimiento 45% para dos pasos). ESI-MS (m/z): 578.3[ + 1] + .
Paso 8: Síntesis de Compuesto 110 Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas una solución de 1 -((3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)metil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea (55 mg) en HCI/MeOH (2.5 mol/L) (2 mL), y posteriormente se concentró hasta secarse. Se agregó K2C03 (52 mg) en agua (0.5 mL) y MeOH (5 mL). La mezcla resultante se agitó durante otros 10 minutos a temperatura ambiente, se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar el Compuesto 110 (10 mg, rendimiento: 25%) en la forma de un sólido color blanco. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.26 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.26-7.19 (m, 4H), 5.96 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.674-4.655 (m, 1H), 4.24-4.16 (m, 2H), 3.15 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.83-2.73 (m, 3H), 2.20-1.59 (m, 8H), 1.26 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 539.3 [M + 1] + .
Ejemplo 2: Síntesis de (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((lr,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol (Compuesto 2) Paso 1: Síntesis de c/'s y trans 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutanocarboxilato de metilo Se agitó a una temperatura de 45°C durante 2 horas, una solución de 3-oxociclobutanocarboxilato de metilo (4.60 g, 35.94 mmol), 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminomet¡l)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (11.0 g, 35.94 mmol) y Ti(iPrO)4 (4.0 g, 14.08 mmol) en MeOH (80 ml_), posteriormente se agregó NaCNBH3 (4.5 g, 71.87 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se extinguió con NaHC03 acuoso saturado (40 mL) y se filtró, se extractó con DCM (80 mL x 3), se secó sobre Na2S04 y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el compuesto del título (6.2 g, Rendimiento 41%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.38-8.34 (m, 1H), 7.90 (s, 1H), 5.98 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.75 (br s, 2H), 5.48-5.46 (m, 1H), 5.03-5.01 (m, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 3.69-3.66 (m, 3H), 3.50-3.17 (m, 1H), 3.05-2.73 (m, 3H), 2.48-2.44 (m, 2H), 1.95-1.91 (m, 2H), 1.62 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 419.2[M + 1] + .
La mezcla de cis/trans de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol- 4-il)metil)amino)ciclobutanocarboxilato de metilo (6.2 g), se separó mediante HPLC quirálico (CHIRALCEL AD-H 20*250mm, 5um (Daicel), Temperatura de columna: 35°C, Fase móvil: C02/Metanol (0.1% DEA) = 70/30, Rango de flujo: 50g/min) para proporcionar el producto cis puro (3.5 g) y el producto trans puro (1.7 g).
Paso 2: Síntesis de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutanocarboxilato de (1S,3s)-metilo A una solución de cis 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutanocarboxilato de metilo (2.0 g, 4.78 mmol) en CH3CN (15 mi), se le agregó 2-yodopropano (4.0 g, 23.92 mmol) y K2C03 (1.0 g, 7.18 mmol). La reacción se calentó durante la noche a una temperatura de 95°C en un tubo sellado. La mezcla se filtró, el filtrado se concentró y se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 12:1) para obtener el compuesto del título (1.9 g, Rendimiento 86%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.37 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.53-5.48 (m, 3H), 5.00 (br s, 1H), 4.25 (brs, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.19-3.18 (m, 1H), 2.96 (brs, 1H), 2.80-2.78(m, 1H), 2.67-2.58 (m, 2H), 2.20-2.12 (m, 4H), 1.62 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z):461.4[M + 1] + .
Paso 3: Síntesis de (1 S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dímetiltetrahidrofuro [3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isop ropil)amino)c¡clobu ta noca rb aldehido A una solución de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutanocarboxilato de (1S,3s)-metilo (1.2 g, 2.60 mmol) en DCM (50 mi) se le agregó en forma de gotas DIBAL-H a una temperatura de -78°C hasta que se consumió un material de partida tal como se determina mediante TLC. Se agregó MeOH (2 mi) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, tiempo en el cual se agregó agua (50 mi) y la mezcla se extractó con DCM (50 mi x 2). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró para obtener el compuesto del título crudo (1.0 g el cual se utilizó) directamente en el siguiente paso. 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 9.56 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.66 (br s, 2H), 5.50 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 3.5, 6.5 Hz, 1H), 3.331-3.337 (m, 1H), 2.96-2.97 (m, 1H), 2.77-2.59 (m, 3H), 2.14-2.05 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.01 (d, J = 6.5Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm.
Paso 4: Síntesis de (E)-etil 3-((1 S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)acrilato A una solución de carbaldehído de (1S,3s)-3-((((3aR,4R,6 ,6aR)-6-(6-am¡no-9H-purin-9-il)-2,2-dimet¡ltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(¡sopropil)am¡no)c¡clobutano (930 mg, 2.16 mmol) en CH3CN:DC = 5:1 (50 mi) se le agregó 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (484 mg, 2.16 mmol), DBU (328 mg, 2.16 mmol) y LiCI (91 mg, 2.16 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y posteriormente se concentró. Se agregó agua (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (25 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se concentraron y el residuo se purificó mediante SGC ( D C M : M e O H = 30:1) para obtener el compuesto del título (900 mg, Rendimiento 83%).1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.94-6.90 (m, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.72-5.89 (m, 1H), 5.57 (s, 2H), 5.52 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 3.5, 6.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.21-4.17 (m, 2H), 3.14 (brs, 1H), 2.961-2.936 (m, 1H), 2.74-2.52 (m, 3H), 2.22-2.14 (m, 2H), 1.79-1.76 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.30-1.27 (m, 3H), 1.00 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 501.4[M + 1] + .
Paso 5: Síntesis de 3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo A una solución de 3-((1 S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2 ,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil) acrilato de (E)-etilo (900 mg, 1.8 mmol) en MeOH (50 mi) se le agregó Pd/C (20 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para obtener el compuesto del título (700 mg, Rendimiento 78%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 5.51 (dd, J = 2.5, 8.0 Hz, 1H), 4.99 (dd, J = 4.0, 7.5 Hz, 1H), 4.26 (brs, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 2.99-2.92 (m, 2H), 2.706-2.655 (m, 1H), 2.539-2.486 (m, 1H), 2.18-2.02 (m, 4H), 1.76 (brs, 1H), 1.65-1.60 (m, 5H), 1.43-1.37 (m, 5H), 1.26-1.23 (m, 2H), 0.97 (d, J = 9.0 Hz, 3H), 0.79 (d, J = 8.5 Hz, 3H)ppm; ESI-MS (m/z): 503.4[ + 1] +.
Paso 6: Síntesis de ácido 3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico A una solución de 3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (650 mg, 1.29 mmol) en THF:MeOH = 5:1 (30 mi) se le agregó LIOH.H20 (543 mg, 1.29 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, se concentró y se tomó en MeOH (10 mi). Se agregó en forma de gotas una solución de HCI 1M a una temperatura de 0°C hasta pH = 7. La mezcla se concentró y purificó con HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del título (170 mg).
Paso 7: Síntesis de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (170 mg, 0.36 mmol) en DCM (15 mi) se le agregó 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (117 mg, 0.72 mmol), EDCI (137 mg, 0.72 mmol), HOBT (97 mg, 0.72 mmol) y TEA (217 mg, 2.15 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche y se concentró. Se agregó una solución de NaHC03 saturada (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas se secaron Na2S04 y se concentraron. El crudo se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH = 12:1) para proporcionar el compuesto del título (110 mg crudo). Paso 8: Síntesis de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2-(5- (ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida (110 mg) en AcOH (10 mi), se calentó durante la noche a una temperatura de 65°C. La mezcla se concentró, se agregó una solución de NaHC03 saturada (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título (105 mg crudo). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.48-7.24 (m, 3H), 6.01 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.60-5.53 (m, 3H), 4.98 (dd, J = 3.0, 6.5 Hz, 1H), 4.22 (brs, 1H), 2.97 (brs, 1H), 2.874-2.847 (m, 1H), 2.56-2.50 (m, 3H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.70-1.54 (m, 7H), 1.35-1.17 (m, 14H), 0.90 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.80 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 603.5[ + 1] + .
Paso 9: Síntesis del Compuesto 2 Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-IH-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (105 mg) en HCI/MeOH (2.5 mol/L) (10 mL), posteriormente se concentró hasta secarse. Se agregaron K2C03 (96 mg) en agua (0.5 mL) y eOH (5 mL), y la mezcla resultante se agitó durante otros 10 minutos a temperatura ambiente y posteriormente se filtraron. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante HPLC de preparación (x puente 30mm*150mm, Fase móvil: A: agua (10 mM NH4HC03) B: CAN, Gradiente: 35-45% B en 10 minutos, 45-45% B en 6 minutos, detención en 20 minutos, Rango de flujo: 50 ml/min) para proporcionar el Compuesto 2 (50 mg, rendimiento: 51%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.47-7.39 (m, 3H), 5.96 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.70-4.75 (m, 1H), 4.26-4.27 (m, 1H), 4.05-4.06 (m, 1H), 3.140-3.155 (m, 1H), 3.00-2.76 (m, 5H), 2.18-2.16 (m, 2H), 1.87-1.85 (m, 2H), 1.57-1.55 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 563.4 [M + 1] + .
Ejemplo 3: Síntesis de (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol (Compuesto 3) Paso 1: Síntesis de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin- 9-¡l)-2,2-dimetiltetrahidrofuro [3,4-d][1 ,3]dioxol-4- ¡l)metil)(isoprop¡l)amino)ciclobutanocarbox¡lato de (1R,3r)-metilo solución de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H purin-9-il)-2,2-dimetiltetrah¡drofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)met¡l)am¡no)ciclobutanocarbox¡lato de (1 R,3r)-metilo (1.7 g, 4.07 mmol) en CH3CN (15 mi) se le agregó 2-yodopropano (3.5 g, 20.3 mmol) y K2C03 (0.84 g, 6.10 mmol). La reacción se calentó durante la noche a una temperatura de 95°C en un tubo sellado. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró y purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 12:1) para obtener el compuesto del título (1.35 g, Rendimiento 72%). H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.36 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.55 ( m, 2H), 5.49 (dd, J = 1.5, 6.0 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 3.5, 6.0 Hz, 1H), 4.254-4.247 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.60-3.50 (m, 1H), 2.930-2.917 (m, 1H), 2.79-2.74 (m, 2H), 2.59-2.57 (m, 1 H), 2.25-2.12 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 461.3[M + 1] + .
Paso 2: Síntesis de (1 R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)am¡no)c¡clobutanocarb aldehido A una solución de 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutanocarboxilato de (1R,3r)-metilo (1.35 g, 2.93 mmol) en DCM (50 mi) a una temperatura de -78°C se le agregó en forma de gotas DiBAL-H hasta que el material de partida se consumió completamente tal como se determinó mediante TLC. Se agregó MeOH (2 mi) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente (RT) durante 30 minutos. Se agregó agua (50 mi) y la mezcla se extractó con DCM (50 mi x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron para obtener el compuesto crudo (1.1 g) el cual se utilizó directamente en el siguiente paso. 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 9.80 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.56 (S, 2H), 5.50 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.028-5.026 (m, 1H), 4.26 (brs, 1H), 3.33-3.30 (m, 1H), 2.956-2.930 (m, 1H), 2.80-2.55 (m, 3H), 2.27-2.07 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.82 (d,/= 6.5 Hz, 3H) ppm.
Paso 3: Síntesis de 3-((1 R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrah¡drofuro[3,4-d][1 , 3]dioxol-4-il)metil)(¡soprop¡l)amino)ciclobutil)acrilato de (E)-etilo A una solución de (1 R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro [3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutanocarbaldehído (1.1 g, 2.56 mmol) en CH3CN:DCM = 5:1 (50 mi) se le agregó 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (573 mg, 2.56 mmol), DBU (389 mg, 2.56 mmol) y LiCI (107 mg, 2.56 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y se concentró, momento en el cual se agregó agua (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (25 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentró. El residuo se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 30:1) para obtener el compuesto del título (1.0 g, Rendimiento 78%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.35 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.16-7.11 (m, 1H), 6.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.79-5.76 (m, 1H), 5.56 (s, 2H), 5.51 (dd, J = 1.5, 6.0 Hz, 1H), 5.02 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.22-4.17 (m, 2H), 3.44 (brs, 1H), 2.93 (brs, 1H), 2.78-2.56 (m, 3H), 2.27-2.16 (m, 2H), 1.93-1.91 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.31-1.27 (m, 3H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 501.4 [M + 1] + .
Paso 4: Síntesis de 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo A una mezcla de 3-((1 R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)acrilato de (E)-etilo (1.0 g, 2.0 mmol) y 10% Pd/C (30 mg) en MeOH (50 ml) se le agregó Pd/C (30 mg). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla resultante se filtró y el filtrado se concentró para obtener el compuesto del título (1.0 g, Rendimiento 100%). 1H RMN (500 M Hz, CDCI3): d? 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.58 (s, 2H), 5.51 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 3.5, 6.0 Hz, 1H), 4.276-4.269 (m, 1H), 4.13-4.09 (m, 2H), 3.38-3.37 (m, 1H), 2.94-2.54 (m, 3H), 2.22-1.97 (m, 5H), 1.79-1.62 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.28-1.23 (m, 2H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.79 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 503.4[M + 1] + .
Paso 5: Síntesis de ácido 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3] dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico A una solución de 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-M)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-¡l)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (360 mg, 0.72 mmol) en THF:MeOH = 5:1 (30 mi) se le agregó LIOH.H20 (301 mg, 7.20 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, se concentró, posteriormente se disolvió en MeOH (10 mi). Se agregó una solución HCI 1 M en forma de gotas a una temperatura de 0°C hasta pH = 7. La mezcla se concentró para proporcionar el compuesto del título crudo y se utilizó directamente en el siguiente paso.
Paso 6: Síntesis de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4- j|)metil)(isopropjl)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]d¡oxol-4-¡l)met¡l)(isopropil)amino)ciclobut¡l)propano¡co en DMF (5 mi) se le agregó 4-(ter-butil)benceno-1 ,2-d¡amina (235 mg, 1.43 mmol), EDCI (274 mg, 1.43 mmol), HOBT (193 mg, 1.43 mmol) y TEA (435 mg, 4.30 mmol). La mezcla se calentó durante la noche a una temperatura de 45°C y se concentró. Se agregó una solución de NaHC03 saturada (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron. El crudo se purificó con TLC de preparación (DCM:MeOH = 12:1) para producir el compuesto del título (110 mg), el cual se llevó al siguiente paso sin purificación adicional.
Paso 7: Síntesis de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Se calentó a una temperatura de 65°C durante la noche, una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]d¡oxol-4-il)metil)(isoprop¡l)amino)c¡clobutil)propanam¡da (110 mg) en AcOH (15 mi). La mezcla se concentró, se agregó una solución de NaHC03 saturada (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título (100 mg crudo). 1 H RMN (500 MHz, CDCI3): d? 8.36 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.48-7.27 (m, 3H), 6.07 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.64-5.58 (m, 3H), 5.02 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 4.30 (brs, 1H), 3.38-3.37 (m, 1H), 2.97-2.95 (m, 1H), 2.76-2.55 (m, 3H), 1.97-1.74 (m, 5H), 1.67-1.57 (m, 5H), 1.45-1.40 (m, 12H), 0.99 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 603.5[M + 1] + .
Paso 8: Síntesis del Compuesto 3 Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)- 2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (190 mg) en HCI/MeOH (2.5 mol/L) (15 ml_), y se concentró hasta secarse. Se agregaron K2C03 (161 mg) en agua (0.5 ml_) y MeOH (5 ml_). La mezcla resultante se agitó durante otros 10 minutos a temperatura ambiente, posteriormente se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante HPLC de preparación (x puente 30mm*150mm, Fase móvil: A: agua (10 mM NH4HC03) B: CAN, Gradiente: 35-45% B en 10 minutos, 45 a 45% B en 6 minutos, detención en 20 minutos, Rango de flujo: 50 ml/min) para proporcionar el Compuesto 3 (65 mg, rendimiento: 70%) en la forma de un sólido color blanco. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.47-7.28 (m, 3H), 5.95 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.744-4.724 (m, 1H), 4.27-4.26 (m, 1H), 4.07-4.06 (m, 1H), 3.56 (brs, 1H), 3.01-2.78 (m, 5H), 2.17 (brs, 2H), 2.00-1.93 (m, 2H), 1.80-1.79 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.02 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 563.5 [M + 1] + .
Ejemplo 4: Síntesis de (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((ls,3R)-3-(2-(5-cloro-6-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol (Compuesto 4) Paso 1 : Síntesis de N-(2-amino-4-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4- il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6- (6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil tetra h id rofu ro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (250 mg, 0.53 mmol) en DCM (30 ml) se le agregó 4-cloro-5-(trifluorometil)benceno-l ,2-diamina (221 mg, 1.05 mmol), EDCI (201 mg, 1.05 mmol), HOBT (142 mg, 1.05 mmol) y TEA (320 mg, 3.15 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente, momento en el cual se agregó la solución NaHC03 saturada (20 ml), y la mezcla se extractó con DCM (20 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y concentraron. El crudo se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH = 12:1) para producir el compuesto del título (250 mg crudo).
Paso 2: Síntesis de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 s,3R)-3-(2-(5-cloro-6-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Se calentó a una temperatura de 65°C durante la noche una solución de N-(2-amino-4-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida (250 mg) en AcOH (15 mi). La mezcla se concentró, se agregó una solución de NaHC03 saturada (20 mi) y la mezcla se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título (200 mg crudo).
Paso 3: Síntesis del Compuesto 4 Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((ls,3R)-3-(2-(5-cloro-6-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (200 mg) en HCI/MeOH (2.5 mol/L) (15 mL), momento en el cual se concentró hasta secarse. Se agregaron K2C03 (166 mg) en agua (0.5 mL) y MeOH (5 mL) y la mezcla resultante se agitó durante otros 10 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar el Compuesto 4 (80 mg, rendimiento: 43%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 5.96 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.748-4.730 (m, 1H), 4.284-4.263 (m, 1H), 4.09 (br s, 1H), 3.65-3.50 (m, 1H), 3.03-2.85 (m, 5H), 2.191-2.176 (m, 2H), 2.03-2.00 (m, 2H), 1.80 (brs, 2H), 1.02 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 609.2 [M + 1] + .
Ejemplo 5: Síntesis de (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-cloro-6-(trifluorometil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol (Compuesto 5) Paso 1 : Síntesis de N-(2-amino-4-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida una solución de ácido 3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)- 6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3] dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico en DCM : DM F =15:1 (30 mi) se le agregó 4-cloro-5-(trifluorometil)benceno-l ,2-diamina (334 mg, 1.60 mmol), EDCI (304 mg, 1.60 mmol), HOBT (215 mg, 1.60 mmol) y TEA (483 mg, 4.80 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró, se agregó una solución de NaHC03 (20 mi) y la mezcla resultante se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron. El residuo crudo se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH = 12:1) para producir el compuesto del título (220 mg).
Paso 2: Síntesis de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2-(5-cloro-6-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Se calentó a una temperatura de 65°C durante la noche, una solución de N-(2-amino-4-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-3-((1 S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2- dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida (220 mg) en AcOH (15 mi). La mezcla se concentró, se agregó una solución de NaHC03 saturada (20 mi), y la mezcla se extractó con DCM (20 mi x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título (190 mg).
Paso 3: Síntesis del Compuesto 5 Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2-(5-cloro-6-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (190 mg) en HCI/MeOH (2.5 mol/L) (15 mL), posteriormente se concentró hasta secarse. Se agregaron K2C03 (161 mg) en agua (0.5 mL) y MeOH (5 mL), y la mezcla resultante se agitó durante otros 10 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar el Compuesto 5 (90 mg, rendimiento: 51%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.67 (S, 1H), 5.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.736-4.716 (m, 1H), 4.268-4.246 (m, 1H), 4.070-4.051 (m, 1H), 3.15 (brs, 1H), 3.00-2.71 (m, 5H), 2.17 (brs, 2H), 1.93-1.88 (m, 2H), 1.58-1.56 (m, 2H), 1.01 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI- MS (miz): 609.2 [M + 1] + .
Ejemplo 6: Síntesis de (2R,3R,4S,5R)-2-(4-amino-7H- pirrolo[2,3-d]pirim¡din-7-¡l)-5-(((3-((5-(ter-but¡l)-1 H- benzo[d]imidazol-2- ¡l)rnet¡l)c¡clobutil)(metil)amino)metil)tetrah¡drofuran-3,4-diol (Compuesto 6) Paso 1: Síntesis de 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(azidometil)-2,2- dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4- dimetoxibenzil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se enfrió a una temperatura de 0°C en un baño de hielo/agua una solución de ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4- dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2- dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metanol (2.83 g, 6.20 mmol) y trifenilfosfina (2.28 g, 8.68 mmol) en tetrahidrofurano seco (32 ml_). Se agregó en forma de gotas azod icarboxilato de diisopropilo (1.71 ml_, 8.68 mmol), seguido de una solución de azida de difenilfosfónico (1.87 ml_, 8.68 mmol) en tetrahidrofurano (5.3 ml_, 66 mmol). Al momento de la adición de la solución DPPA, se formó un precipitado lechoso color blanco. Después de aproximadamente 30 minutos, la mezcla de reacción se dejó templar a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Después de 24 horas, HPLC indicó que se había consumido todo el material de partida. La mezcla de reacción se concentró hasta aproximadamente 1/2 del volumen original y se purificó mediante cromatografía de columna (175 g de gel de sílice, 10 a 55% EA/hept) para producir el compuesto del título (2.49 g, 83%) en la forma de una espuma rígida color ligeramente amarillo: MS (ESI + ) para C23H27N7O5 m/z 482.2 (M + H) + ; (ESI-) para C23H27N705 m/z 480.1 (M + H)", m/z 526.1 (M + C02H)-; pureza HPLC 97%.
Paso 2: Síntesis de 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pírimidin-4-amina Se trató en forma de gotas una solución de ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (2.49 g, 5.17 mmol) en tetrahidrofurano (50 mL, 600 mmol) con una solución de trimetilfosfina en tetrahidrofurano 1.0 M (7.24 mL, 7.24 mmol) y la mezcla se agitó durante 20 horas. La mezcla de reacción se trató con agua (1.80 mL, 99.9 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró, el producto crudo se tomó en 90 ml_ de CH2CI2 y se lavó con cuatro porciones de 30 mL de H20 y 15 ml_ de salmuera. La solución se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (120 g de gel de sílice, 3 a 10% 7N NH3 en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el compuesto del título (1.76 g, 75%) en la forma de una espuma: MS (ESI + ) pa ra C23 H29N505 m/z 456.2 (M + H) + ; (ESI-) para C26H35N505 m/z 454.1 (M-H) + ; pureza HPLC 92% (tiempo de retención, 2.65 minutos).
Paso 3: Síntesis de 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetil tetra hidro fu ro[3,4-d][1, 3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)acetato de metilo Se trató en forma de gotas una solución de 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (400 mg, 0.88 mmol) y 2-(3-oxociclobutil)acetato de metilo (100 mg, 0.70 mmol) [preparado utilizando el procedimiento que se encuentra en la Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana 2009/0118287] en 1,2-dicloroetano( 12 mL) con ácido acético (50 uL, 0.88 mmol). La solución se trató con triacetoxiborohidruro de sodio (260 mg, 1.2 mmol) en una porción y se dejó agitar a temperatura ambiente hasta completarse mediante HPLC. Después de 4 horas, la HPLC indicó que la reacción estaba aproximadamente el 80% completa. Se agregaron 20 mg adicionales de cetona y se continuó con la agitación durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 30 mL de CH2CI2 y se lavó con 15 mL de NaHC03 saturado. La fase acuosa se lavó con 15 mL de CH2CI2 y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04. La fase orgánica se filtró y concentró para proporcionar un vidrio amarillo claro el cual se purificó mediante cromatografía instantánea (70 g de gel de sílice; 2% NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para producir el compuesto del título (270 mg, 66%) en la forma de un vidrio incoloro: MS (ESI + ) para C3oH39N507 m/z 582.2 (M + H) + ; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 2.88 minutos).
Paso 4: Síntesis de 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)acetato de metilo Se trató con cianoborohidruro de sodio (380 mg, 6.1 mmol) una solución de 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)am¡no)ciclobut¡l)acetato de metilo (267 mg, 0.459 mmol) en metanol (12 mL). El pH de la solución se ajustó a ~6 mediante la adición en forma de gotas de una solución 10% (v/v) de ácido acético glacial en metanol. La mezcla se trató con 37% de formaldehído (0.57 mL, 7.6 mmol) en forma de gotas y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, tiempo en el cual, la HPLC indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla de reacción se concentró para eliminar el metanol. La solución acuosa que permaneció, se diluyó con 25 mL de NaHC03 y la fase acuosa se extractó con tres porciones 20 mL de CH2CI2. La fase orgánica se lavó con 20 mL de NaHC03 saturado, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para proporcionar el compuesto del título (272 mg, 100%) en la forma de una espuma rígida incolora la cual se encontró con suficiente pureza para utilizarse en el siguiente paso: MS (ESI + ) para C3iH 1N50 m/z 596.5 (M + H) + ¡ pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 2.89 minutos).
Paso 5: Síntesis de ácido 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metíl)(metil)amino)ciclobutil)acético Se trató en forma de gotas una solución de 2-(3- ((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)acetato de metilo (270 mg, 0.453 mmol) en metanol (8.6 mL), con una solución de hidróxido de sodio (36 mg, 0.91 mmol) en agua (0.9 mL, 50 mmol) y la mezcla se calentó a una temperatura de 50°C. Después de 17 horas, la HPLC indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se trató con 0.91 mL 1.0 N HCI para ajustar el pH a ~7. La solución se concentró para eliminar el metanol, y la suspensión acuosa resultante se liofilizó para producir un sólido color blanco. El material se utilizó como estaba en el siguiente paso, asumiendo una recuperación cuantitativa: MS (ESI + ) para C3oH39N507 m/z 582.4 (M + H) + ; MS (ESI-) para C3oH39N507 m/z 580.4 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 2.72 minutos).
Paso 6: Síntesis de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)acetamida Una solución de ácido 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)acético y 4-ter-butilbenceno-1,2-diamina (89.4 mg, 0.545 mmol) en N, N-dimetilformamida (4.5 ml_) se trató con N,N-diisopropiletilamina (0.261 ml_, 1.50 mmol) en forma de gotas seguido de hexafluorofosfato de ?,?,?',?'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (259 mg, 0.681 mmol). La solución se dejó agitar a temperatura ambiente durante 18 horas, tiempo durante el cual LCMS indicó que el material de partida había sido consumido. La mezcla de reacción se concentró bajo alto vacío. El residuo se tomó en 30 mL de acetato de etilo y 20 mL de una solución de 1/1 H20/NaHC03sat. La mezcla se extractó y se lavó la fase acuosa con 35 mL de acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con dos porciones de 20 mL de H20, y 20 mL de salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir una espuma rígida/vidrio color café marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (35 g de gel de sílice; 4% NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el compuesto del título (272 mg, 82%) en la forma de una espuma rígida/vidrio marrón claro, que fue una mezcla de amidas regioisoméricas: MS (ESI + ) para C41 H53N706 m/z 728.8 (M + H) + ; MS (ESI-) para C41H53N7O6 m/z 726.9 (M-H)"; pureza HPLC >95%, (tiempo de retención, 3.14, 3.17 minutos) se observaron dos picos debido a los regioisómeros de amida. Paso 7: Síntesis de 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-((5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina tomó en ácido acético (7.2 mL) N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)acetamida (272 mg, 0.374 mmol), y la solución se calentó a una temperatura de 65°C. Después de 1.5 horas, HPLC indicó que la reacción estaba completa. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo alto vacío. El residuo se tomó en 35 mL de CH2CI2 y la fase orgánica se lavó con 25 mL de una solución NaHC03 saturado y 20 mL 2% de Na2C03. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir una espuma rígida/vidrio marrón claro. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (30 g gel de sílice; 4% 7N NH3 en CH3OH/CH2CI2) para producir el compuesto del título (224 mg, 84%) en la forma de un vidrio marrón claro el cual fue una mezcla de diastereómeros cis y trans alrededor del anillo de ciclobutilo: MS (ESI + ) para C4oH5iN705 m/z 710.6 (M + H) + ; MS (ESI-) para C4iH51N705 m/z 708.7 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 3.29, 3.33 minutos), se observaron dos picos debido a los diastereómeros alrededor del anillo de ciclobutilo.
Paso 8: Síntesis del Compuesto 6 Se disolvió 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-((5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (170 mg, 0.24 mmol) en una mezcla de ácido trifluoroacético (5.0 mL) y agua (0.5 mL), el cual había sido enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, y se templó a temperatura ambiente. Después de 5 horas a temperatura ambiente, se concentró la mezcla de reacción que ahora tiene un color muy rosa. El residuo se tomó en 10 mL de MeOH y se concentró. Este procedimiento se repitió dos veces y el residuo se colocó en alto vacío durante 1 hora. El material se tomó en 7 mL de MeOH y se trató con 130 mg de K2C03 y cinco gotas de agua. La mezcla se dejó agitar durante 1 hora, tiempo durante el cual la solución se encontró como básica. La mezcla se filtró a través de un frit fino, los sólidos se lavaron con 10 mL de MeOH y el filtrado se concentró para producir un sólido casi incoloro. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (30 g gel de sílice; 12% NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el Compuesto 6 (81 mg, 65%) en la forma de una espuma rígida rígida/vidrio incoloro: MS (ESI + ) para C28H37N703 m/z 520.4 (M + H) + ; MS (ESI-) para C28H37N703 m/z 518.5 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 2.51 minutos); 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) d? ppm 8.08 (s, 1 H), 7.48 (brs., 1 H), 7.39 (d, J =8.50 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J =8.40, 4.87 Hz, 1 H), 6.63 (m, 1 H), 6.12 (d, J =4.15 Hz, 1 H), 4.40 (m, 1 H), 4.09 (m, 2 H), 3.15 (m, 0.5 H), 3. 02 (d, J =8.09 Hz, 1 H), 2.92 (d, J = 7.26 Hz, 1 H), 2.84 (m, 0.5 H), 2.65 (m, 2 H), 2.43 (m, 1 H), 2.29 (m, 1 H), 2.20 (d, J =5.80 Hz, 3 H), 2.13 (m, 1 H), 1.99 (br. s., 1 H), 1.67 (m, 1 H), 1.37 (d, 7 = 3.94 Hz, 9 H), 1.30 (dd, J =13.99, 4.66 Hz, 1 H).
Ejemplo 7: Síntesis de (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol (Compuesto 7) Paso 1 : Síntesis de 4,6-dicloro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidina Se preparó el compuesto del título a través del método de Montgomery, ver la Publicación de Montgomery , J. A.; Hewson, K. J. Med. Chem. 10, 665 (1967).
Paso 2: Síntesis de ( 1 f?,2S,3fl,5F?)-3-((6-cloro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidin-4-il)amino)-5-(hidroximetil)ciclopentano-1 ,2-diol Se tomó una mezcla de 4,6-dicloro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidina (5.35 g, 20.2 mmol) y cloruro de (1 ft,2S,3R,4R)-2,3-d¡hidroxi-4-(hidrox¡met¡l)c¡ cío pen tana minio (9.29 g, 24.3 mmol) en etanol (236 mL), se trató con Et3N (11.2 ml_, 80.8 mmol) y se calentó a reflujo durante 23 horas; HPLC/LCMS indicó el consumo de los materiales de partida y la presencia del producto. La mezcla de reacción se concentró para producir una pasta color marrón, la cual se llevó cruda: MS (ESI + ) para Ci6H26CIN305 m/z 376.2 (M + H) + ; MS (ESI-) para C16H26CIN305 m/z 374.2 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 2.436 minutos). Variación en la ruta de J. Med. Chem. 10, 665 (1967).
Paso 3: Síntesis de (íf?,2S,3R,5ft)-3-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-c/]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil)c¡clopentano-1 ,2-diol Una suspensión de ( 1 R,2S,3R,5R)-3-((6-c\oro-5-(2,2-dietoxietil)pirimidin-4-il)amino)-5-(hidroximetil)ciclopentano-1,2-diol en 1,4-dioxano (160 mL) se trató con una solución acuosa HCI 1 M (30 mL, 30 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 69.5 horas; HPLC indicó la conversión limpia a un producto, LCMS mostró la masa del producto deseado. La mezcla de reacción se neutralizó con NH4OH acuoso (al pH 7) y los volátiles se eliminaron in vacuo para producir sin purificación adicional: MS (ESI + ) para C12Hi4CIN303 m/z 284.1 (M + H) + ; MS (ESI-) para C^H^CINaOs m/z 282.2 (M-H)\ 328.2 (M + HC02)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 1.947 min). Variación en la ruta de J. Med. Chem. 10, 665 (1967).
Paso 4: Síntesis de ((3aR,4f?,6f?,6aS)-6-(4-cloro-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3a -/-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metanol A una mezcla de ( 7R,2S,3ft,5 )-3-(4-cloro-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(hidroximetil)ciclopentano-1 ,2-diol crudo (10 g, ~20 mmol, 54% puro mediante RMN) y 2,2-dimetoxipropano (100 ml_, 800 mmol) se trató con monohidrato de ácido p-toluensulfónico (7.28 g, 38.3 mmol), y la mezcla de reacción color amarillo-café se agitó vigorosamente durante 1.25 horas, tiempo en el cual los únicos sólidos fueron un precipitado fino color marrón. La HPLC indicó el consumo casi total del material de partida. La mezcla de reacción se diluyó con agua (30 mL) y se neutralizó con NaHC03 sólido (4.80 g, 57.1 mmol). Los volátiles se eliminaron cuidadosamente in vacuo y la solución acuosa color café resultante se extractó con EtOAc (3 x 100 mL). Los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y se concentraron in vacuo para producir una pasta color marrón. La purificación mediante cromatografía de columna (4 x 22 cm sílice; 0 a 66% EtOAc/Hex) produjo el compuesto del título (4.38 g, 70%, un paso) en la forma de una espuma/vidrio incoloro: MS (ESI + ) para C15H18CIN303 m/z 324.2 (M + H) + ; MS (ESI-) para C15H18CIN303 m/z 368.2 (M + HC02)~; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 3.034 minutos).
Paso 5: Síntesis de 7-((3aS,4 :?,6R,6af?)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrah¡dro-3a/7-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-4-cloro-7/-/-pirrolo[2,3-cf]pirimidina Se disolvió en THF (32 mL) ((3aft, 4R,6f?, 6aS)-6-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-o,]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/-/-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metanol (2.68 g, 8.28 mmol), se trató con PPh3 (3.05 g, 11.6 mmol), y el envase de reacción se enfrió en un baño de hielo-salmuera. Se agregó en forma de gotas mediante una jeringa azodicarboxilato de diisopropilo [DIAD] (2.3 mL, 12 mmol) y la mezcla se agitó durante 10 minutos. Se agregó en forma de gotas mediante jeringa una solución de azida difenilfosfónico [DPPA] (2.50 mL, 11.6 mmol) en THF (7.8 mL), para producir una mezcla color crema, la cual se agitó durante 21 horas, permitiendo que el baño de hielo se templará a temperatura ambiente. HPLC/LCMS indicó el consume total del material de partida y la formación del producto. En 22.5 horas, la mezcla de reacción se concentró ¡n vacuo y se purificó mediante cromatografía de columna (4 x 22 cm sílice; 0 a 25% EtOAc/Hex) para producir el compuesto del título (2.27 g, 78%) en la forma de un aceite incoloro, color claro: MS (ESI + ) para C15H17CIN602 m/z 349.2 (M + H) + ; MS (ESI-) para C15H17CIN602 m/z 393.2 ( + HC02)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 4.169 minutos).
Paso 6: Síntesis de 7-((3aS,4R,6R, 6af?)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/-/-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-A/-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-cf]pirimidin-4-amina Una solución de 7-((3aS,4f?,6 R,6a R)-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/--ciclopenta[ci][1,3]dioxol-4-il)-4-cloro-7 -/-pirrolo[2,3-d]pirimidina y 2,4-dimetoxibencilamina (1.2 mL, 7.8 mmol) en 1-butanol (18.6 mL) se trató con N,N-diisopropiletilamina (1.4 mL, 7.8 mmol) y se calentó a una temperatura de 80°C durante 22 horas; HPLC/LC MS indicó el ~90% de conversión al producto deseado. Los volátiles se eliminaron y la pasta color amarillo-café se tomó en CH2CI2 (90 mL) y se lavó con agua (2 x 30 mL) y salmuera (1 x 45 mL). La capa orgánica separada se secó (Na2S04) y se concentró ¡n vacuo para producir un aceite color naranja. La purificación mediante cromatografía de columna (2 x 22 cm sílice; 0 a 50% EtOAc/Hex) produjo el compuesto del título (2.23 g, 72%) en la forma de una espuma/vidrio color amarillo pálido: MS (ESI+) para C24H29N7O4 m/z 480.5 (M + H) + ; MS (ESI-) para C24H29N7O4 m/z 524.3 (M + HC02)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 3.551 minutos).
Paso 7: Síntesis de 7-((3aS,4/?,6ft,6aft)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/--ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-A/-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-c/]pirimidin-4-amina Una solución de 7-((3aS,4R,6f?,6a )-6-(azidometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3a/-/-ciclopenta[oí][1 ,3]dioxol-4-il)-/V-(2,4-dimetoxibencil)-7/--pirrolo[2,3-cf]pirimidin-4-amina (2.23 g, 4.65 mmol) en THF (33 mL, 410 mmol) se enfrió a una temperatura de 0°C y se trató en forma de gotas con una solución de 1.0 M de trimetilfosfina en THF (9.3 mL, 9.3 mmol). El baño frío se eliminó y la mezcla de reacción se dejo templar a temperatura ambiente con agitación durante 1 hora; no permaneció material de partida mediante HPLC. A las 1.5 horas, se agregó agua (4.3 mL, 240 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 horas 15 minutos; TLC indicó un producto. La mezcla de reacción se concentró in vacuo para producir una pasta color naranja claro. El residuo se diluyó con CH2CI2 (120 mL) y se lavó con agua (2 x 40 mL) y salmuera (1 x 40 mL). La capa orgánica se secó (Na2S04) y se concentró in vacuo para producir un aceite color naranja. La purificación mediante cromatografía de columna (2 x 22 cm sílice; 0 a 5% 7 N NH3 en CH3OH/CH2CI2) produjo el compuesto del título (1.97 g, 53% en 3 pasos) en la forma de una espuma incolora: MS (ESI + ) para C24H3iN504. m/z 454.3 (M + H) + ; pureza HPLC >95 % (tiempo de retención, 2.541 minutos).
Síntesis de 3-(2,2-dicloro-3-oxociclobutil)propanoato de Se trató en forma de gotas con cloruro de tricloroacetilo (25 g, 140 mmol) una mezcla de éster etílico de ácido 4-pentenoico (7.07 g, 55.2 mmol) y un acoplamiento de zinc de cobre (10.2 g, 140 mmol) en éter dietílico (170 mL) y 1,2-dimetoxietano (25 mL). La mezcla se agitó a una temperatura ambiente durante 3 días. Se filtró la mezcla de reacción heterogénea color rojiza a través de una almohadilla de celita, y la almohadilla se lavó con 300 mL de Et20. El filtrado se concentró aproximadamente a la mitad del volumen original y la fase orgánica se lavó con dos porciones de 150 mL de H20 y una porción de 150 mL de NaHC03 saturado. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y concentró para proporcionar un líquido color café. El material se purificó mediante destilado al vacío (90 a 100°C @0.044 torr) para producir el compuesto del título (10.49 g, 80%) en la forma de un líquido color amarillo claro: pureza GC 95.8% (tiempo de retención, 4.92 minutos).
Paso 9: Síntesis de 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo Se trató en pequeñas porciones una solución de 3-(2,2- dicloro-3-oxociclobutil)propanoato de etilo (10.49 g, 43.87 mmoles) y cloruro de amonio (12 g, 220 mmoles) en metanol (310 mL, 7600 mmoles) con polvo de zinc (14 g, 220 mmoles). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 3 horas, tiempo después del cual GC indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de Celita, lavando la almohadilla con Et20. El filtrado se concentró in vacuo para producir una solución amarillo pálida. La solución se diluyó con 200 mL de Et20 y se lavó con 100 mL de agua. La capa acuosa separada se volvió a extractar con 100 mL de Et20 y la fase orgánica combinada se lavó con 100 mL 1:1 de agua/salmuera, 50 mL de agua y 150 mL de NaHC03 acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y concentró in vacuo para producir el compuesto del título (4.49 g, 60%) en la forma de un aceite amarillo pálido el cual tenía suficiente pureza para ser utilizado en el siguiente paso: pureza GC >95% (tiempo de retención, 4.24 minutos).
Paso 10: Síntesis de ácido 3-(3-oxociclobutil)propanoico Una solución de 3-(3-oxociclobutil)propanoato de etilo (200 mg, 1.18 mmoles) en metanol (4 mL) se trató con agua (0.75 mL) y una solución 2N de hidróxido de sodio (0.75 mL, 1.41 mmoles) y la solución se calentó a una temperatura de 55°C hasta que el material de partida se consumió mediante TLC (25% EA/hept). Después de 1 hora, se descubrió que el material de partida se había consumido. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró para eliminar el MeOH. La fase acuosa se diluyó con 2 mL de H20 y se hizo ácida a un pH de ~2 con HCI 1N. La solución se saturó con NaCI y se extractó con tres porciones de 10 mL de acetato de etilo .
La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir el compuesto del título (157 mg, 94%) en la forma de un aceite viscoso color naranja claro el cual se utilizó en el siguiente paso: pureza GC 63.2% (tiempo de retención, 4.27 minutos).
Paso 11 : Síntesis de N-(2-amino-4-cloro-5- (trifluorometil)fenil)-3-(3-oxociclobutil)propanamida Se enfrió a una temperatura de 0°C una solución de ácido 3-(3-oxociclobutil)propanoico (157 mg, 0.696 mmoles) y 4-cloro-5-(trifluorometil)benceno-1 ,2-diamina (146 mg, 0.696 mmoles) en N,N-dimetilformamida (2.5 mL). La solución se trató con N,N-diisopropiletilamina (0.364 mL, 2.09 mmoles) en forma de gota seguido de hexafluorofosfato de N,N,N',N'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (291 mg, 0.765 mmoles) en una porción. La solución se dejó en agitación y se templó lentamente a temperatura ambiente. Después de 40 horas, la mezcla se concentró parcialmente bajo alto vacío. El cloruro líquido café restante se tomó en 25 mL de EA y 15 mL de 1/1 NaHC03/H20 y se extractó. La fase acuosa se lavó con dos porciones de 15 mL de acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lavó con porciones de 30 mL de H20 y salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y concentró para producir un vidrio/aceite viscoso color café marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (40 g de gel de sílice, 50-80% EA/hept) para producir el compuesto del título (72 mg, 31%) en la forma de una espuma rígida/vidrio ligeramente marrón: MS (ESI + ) para C14H14CIF3N202 m/z 335.2 (M + H) + ; MS (ESI-) para Ci4H14CIF3N202 m/z 333.3 (M-H)"; pureza HPLC 78.2% (tiempo de retención, 3.56 minutos).
Paso 12: Síntesis de 3-(2-(6-cloro-5-(tri flu oro metí l)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutanona Se tomó N-(2-amino-4-cloro-5-(trifluorometil)fenil)-3-(3-oxociclobutil)propanamida (72 mg, mmoles) en ácido acético (3.2 mL) y la solución se calentó a una temperatura de 65°C durante 26 horas, momento en el cual la HPLC indicó que el material de partida se había consumido y se había formado un nuevo producto. La mezcla de reacción se enfrió y el solvente se eliminó bajo alto vacío. El residuo color café claro se tomó en 20 mL de acetato de etilo y la fase orgánica se lavó con porciones de 10 mL de NaHC03 saturado y H20. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir un vidrio café claro. El material crudo se purificó mediante TLC de preparación (placa TLC de preparación 20cm x 20cm x 1.0 mm, 3% MeOH/EA) para producir el compuesto del título (45 mg, 66%) en la forma de un vidrio color marrón: MS (ESI + ) para C14H12CIF3N20 m/z 317.2 (M + H) + ; MS (ESI-) para Ci4H12CIF3N20 m/z 315.2 (M-H)"; pureza HPLC 84.1% (tiempo de retención, 2.98 minutos).
Paso 13: Síntesis de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hid ro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se trató en forma de gotas un ácido acético (10 uL, 0.18 mmoles) una solución de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (80 mg, 0.18 mmoles) y 3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutanona (45 mg, 0.14 mmoles) en 1 ,2-dicloroetano (2.4 ml_). La solución se trató con triacetoxiborohidruro de sodio (53 mg, 0.25 mmoles) en una porción y se dejó en agitación a temperatura ambiente hasta que se completó mediante HPLC. Después de 4 horas, la mezcla de reacción se diluyó con 10 ml_ de CH2CI2 y se lavó con 10 ml_ de NaHC03 saturado. La fase acuosa se lavó con 10 mL de CH2CI2 y la fase orgánica se secó sobre Na2S04. La solución se filtró y concentró para producir una espuma rígida/vidrio color marrón claro. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (25 g de gel de sílice; NH37N 5% en CH3OH/CHCI3) para producir el compuesto del título (76 mg, 71%) en la forma de una espuma rígida/vidrio incoloro: MS (ESI + ) para C38H43CI F3N704 /z 754.3 (M + H) + ; MS (ESI-) para C38H43C I F3N704 m/z 752.3 (M-H) + ; pureza HPLC 90.5% (tiempo de retención, 3.24 minutos).
Paso 14: Síntesis de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (76 mg, 0.10 mmoles) en metanol (2.5 mL) se trató con cianoborohidruro de sodio (84 mg, 1.3 mmoles). El pH de la solución se ajustó a ~6 mediante la adición en forma de gotas de una solución 10% (v/v) de ácido acético glacial en metanol. La mezcla se trató con 37% de formaldehído acuoso (0.12 mL, 1.7 mmoles) en forma de gotas y la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó mediante LCMS. Después de 2 horas, la reacción se completó y la mezcla de reacción se concentró para eliminar el metanol. La solución acuosa que permaneció se diluyó con 7 mL de NaHC03 y la fase acuosa se extractó con tres porciones 10 mL de CH2CI2. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir un vidrio/espuma rígida incolora. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (20 g de gel de sílice; 4% 7N NH3 en CH3OH/CH2CI2) para producir el compuesto del título (62 mg, 80%) en la forma de un vidrio incoloro: MS (ESI + ) para C39H45CIF3N7O4 m/z 768.0 (M + H) + ; MS (ESI-) para C39H45CIF3 704 m/z 766.3 (M-H)"; pureza HPLC 92.1% (tiempo de retención, 3.29 minutos).
Paso 15: Síntesis del Compuesto 7 Se disolvió 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hidro -3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-4-amina (60 mg, 0.078 mmoles) en una mezcla de ácido trifluoroacético (3.6 mL) y agua (0.4 mL) que se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos y posteriormente se templó a temperatura ambiente. Después de 3 horas a temperatura ambiente, HPLC indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción ahora color muy rosa se concentró. El residuo se tomó en 10 mL de MeOH y se concentró. Este procedimiento se repitió dos veces y el residuo se colocó en alto vacío durante 1 hora. El material se tomó en 7 mL de MeOH y se trató con 120 mg de K2C03 y diez gotas de agua. La mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla se filtró a través de un frit fino, los sólidos se lavaron con 10 mL de MeOH y el filtrado se concentró para producir un sólido casi incoloro. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (30 g de gel de sílice; 10 a 15% NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para producir el Compuesto 7 (31 mg, 69%) en la forma de una espuma rígida/vidrio: MS (ESI + ) para C27H3i C I F3N702 m/z 578.3 (M + H) + ; MS (ESI-) para C27H3iCIF3N702 m/z 576.4 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 2.57 minutos); 1H RMN (400 MHz, d4-MeOD) DH 8.06 (s, 1 H), 7.89 (d, J = 2.07 Hz, 1 H), 7.69 (d, J = 2.28 Hz, 1 H), 7.21 (dd, J = 3.42, 1.76 Hz, 1 H), 6.59 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.33 (t, J = 6.84 Hz, 1 H), 3.89 (q, J = 5.25 Hz, 1 H), 3.03 (m, 0.5 H), 2.89 (m, 2 H), 2.70 (m, 0.5 H), 2.49 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.27 (br. s., 2 H), 2.16 (d, J = 7.26 Hz, 4 H), 2.06 (m, 2 H), 1.91 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.52 (m, 1 H).
Ejemplo 8: Síntesis de los Compuestos 8 a 140 Se sintetizaron los compuestos 8 a 140 a través de métodos similares a los descritos para los Ejemplos 1 a 7 o mediante los esquemas de reacción ilustrados en los esquemas generales. Las descripciones detalladas de como se prepararon se proporcionan a continuación. Los datos MS y RMN de los Compuestos 2 a 140 se proporcionan en la tabla 1 o en los Ejemplos aquí proporcionados.
Compuesto 8: 1 -(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9- il)-3,4-dihidroxitetrahidrof uran-2-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea (3-oxociclobutil)carbamato de bencilo A una solución de ácido 3-oxociclobutanocarboxílico (1.0 g, 8.77 mmoles) y DIEA (1.92 g, 14.92 mmoles) en tolueno (8 mL) se le agregó DPPA (2.89 g, 10.52 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a una temperatura de 60°C bajo argón durante 3 horas, posteriormente se agregó alcohol bencílico (1.14 g, 10.52 mmoles). La mezcla se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C. La reacción se concentró, el residuo se purificó mediante SGC (PE: EA = 8:1) para producir el compuesto deseado (240 mg, rendimiento 50%). 1H RMN (500MHz, CDCI3): DH 7.38-7.33 (m, 5H), 5.12 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.34-4.33 (brs, 1 H), 3.44-3.39 (m, 2H), 3.10-3.07 (brs, 2H) ppm; ESI-MS (m/z): 220.2 [M + 1] + . (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 , 3] di oxo I -4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)carbamato de bencilo A una solución de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-d¡metil-6-((metilamino)metil)tetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (190 mg, 0.59 mmoles) y (3-oxociclobutil)carbamato de bencilo (240 mg, 1.37 mmoles) en MeOH (5 mL) se le agregó Ti[OCH(CH3)2]4 (216 mg, 0.59 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Posteriormente se agregó NaCN BH3 (95 mg, 1.52 mmoles), la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se filtró y evaporó, el residuo se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH = 20:1) para obtener el compuesto deseado (90 mg, rendimiento 29%). 1H RMN (500MHz, MeOD): DH 8.28 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.33-7.28 (m, 5H), 6.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.52-5.51 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 5.00-4.98 (m, 1H), 4.34 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 3.70 (m, 1H), 2.58-2.47 (m, 4H), 2.38-2.26 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.69-1.67 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.37 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 524.3 [M + 1] + .
N1-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)- 1 -metilciclobutano-1,3-diamina A una solución de (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)carbamato de bencilo (190 mg, 0.17 mmoles) y Pd(OH)2 (14 mg, 0.1 mmoles) en MeOH (5 mL) se le cargó H2. La reacción se agitó a una temperatura de 35°C durante 5 horas. La reacción se filtró con Celita y se concentró hasta secarse. El residuo se purificó mediante TLC de preparación (DCM: MeOH = 10:1) hasta obtener el compuesto deseado (28 mg, rendimiento 42%). 1H RMN (500MHz, MeOD): ? H 8.29 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.51 (dd, J = 6.5 y 2.0 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 6.0 y 3.5 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.14-3.11 (m, 1 H), 2.60-2.57 (m, 1 H), 2.52-2.48 (m, 2 H) , 2.34-2.31 (m, 2 H), 2.10 (s, 3 H), 1.66 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.48 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.37 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 390.2 [M + 1] + . 1-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea A una solución de N1 -(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimet¡ltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)-N 1 -metilc¡clobutano-1 ,3-diamina (28 mg, 0.072 mmoles) y TEA (22 mg, 0.22 mmoles) en THF (3 mL), se agregó en forma de gotas 1 -ter-but¡l-4-¡soc¡anatobenceno (18 mg, 0.11 mmoles) en DCM (0.5 mL). La reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La reacción se concentró y purificó mediante TLC de preparación (dos veces, DC M : MeO H : H4OH = 300:30:8, V/V) para obtener el compuesto deseado (28 mg, rendimiento: 88%) en la forma de un sólido color blanco pálido. 1H RMN (500MHz, MeOD): rJH 8.29 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.28-7.22 (m, 4H), 6.25 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.52-5.50 (m, 1H), 5.07-5.05 (m, 1H), 4.46-4.44 (m, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H), 2.97 (brs, 1H), 2.80-2.78 (m, 2H), 2.48-2.42 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.84-1.82 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.58-1.56 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.28 (s, 9 H) ppm; ESI-MS (m/z): 565.3 [M + 1] + . 1-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-3,4-dihidroxitetrahidrofuran-2-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea Una solución de 1 -(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-d¡metiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)-3-(4-(ter-butil)fenil)urea (125 mg, 0.23 mmoles) en TFA (0.90 mL) y 0.10 mL de agua, se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La reacción se concentró hasta secarse, se disolvió en MeOH (5 mL) y K2C03 (60 mg) en 0.5 mL de agua y se agregó en forma de gotas. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0.5 horas y se concentró para obtener el residuo el cual se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH:NH4OH = 300:30:8, V/V) para obtener el compuesto deseado (75 mg, rendimiento: 65%) en la forma de un sólido color blanco pálido. 1H RMN (500MHz, MeOD): DH 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.28-7.20 (m, 4H), 6.00-5.99 (m, 1H), 4.77-4.75 (m, 1H), 4.28-4.23 (m, 2H), 3.92-3.88 (m, 1H), 2.92 (brs, 1H), 2.83-2.81 (m, 2H), 2.59-2.56 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.74-1.64 (m, 2H), 1.27 (s, 9 H) ppm; ESI-MS (m/z): 525.3 [M + 1] + .
Compuestos 9 y 12 Compuesto 9: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol: 1H RMN (500 MHz, MeOD): DH 8.07 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.89 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 2.88 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.74-2.68 (m, 1H), 2.55-2.49 (m, 1H), 2.46-2.35 (m, 2H), 2.32-2.22 (m, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.00-1.90 (m, 3H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.58-1.48 (m, 2H) ppm; LC- S (m/z): 578.3 [M + 1] + .
Compuesto 12: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol: 1H RMN (500 MHz, MeOD): DH 8.07 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 7.0 y 6.0 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 3.05-3.00 (m, 1H), 2.92 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.55-2.49 (m, 1H), 2.47-2.35 (m, 2H), 2.32-2.22 (m, 1H), 2.20-2.02 (m, 8H), 1.93-1.86 (m, 2H), 1.70-1.60 (m, 1H) ppm; LC-MS (m/z): 578.3 [M + 1]+. Compuestos 10 y 11 Compuesto 10: (1 R,2S,3 ,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil((1 r,3S)-3-(2-(5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol: 1H RMN (500 MHz, MeOD): DH 8.06 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.62 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.32-3.31 (m, 1H), 2.89-2.86 (m, 2H), 2.67-2.66 (m, 1H), 2.48-2.26 (m, 6H), 2.14 (s, 3H), 1.95-1.93 (m, 3H), 1.62-1.48 (m, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 544.3 [M + 1] + .
Compuesto 11: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil((1s,3R)-3-(2-(5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol: 1H RMN (500 MHz, MeOD): DH 8.06 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 3.90-3.87 (m, 1H), 3.01-3.0 (m, 1H), 2.92-2.89 (m, 2H), 2.48-2.03 (m, 13H), 1.93-1.89 (m, 2H), 1.63-1.61 (m, 1H) ppm; LC-MS (m/z): 544.3 [M + 1] + .
Compuesto 13: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil(3-(2-(5-(trifluorometil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(2-amino-4-(trifluorometil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó hexafluorofosfato N,N,N,,N'-tetrametM-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (0.44 g, 1.2 mmoles) a una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetil tetra h id ro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (460 mg, 0. 77 mmoles), N,N Diisopropiletilamina (0.44 ml_, 2.6 mmoles) en N , N-Dimetilformamida (5 mL). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente, posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La capa acuosa se extractó 3x con EtOAc y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron, concentraron y purificaron mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 95:5) para producir el compuesto deseado (0.34 g) en la forma de un sólido.
N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)e ti l)ciclobutil)amino)metil) tetra hidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se agitaron durante la noche a una temperatura de 65°C N-(2-amino-4-(trifluorometil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (0.38 g, 0.50 mmoles) y ácido acético (5 mi). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilado azeotrópico con etanol seguido de 1 hora en alto vacío. El residuo resultante se dividió entre NaHC03 (saturado) y DCM. La capa acuosa se extractó (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron, concentraron y posteriormente se purificaron mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 93:7) para producir una espuma color crema. (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil(3-(2-(5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (5 mi) a una mezcla de agua (0.5 mi) N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS14R,6R,6aR)-2,2- dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirirriidin-4-amina (0.31 g, 0.42 mmoles) a temperatura ambiente. Se permitió que la reacción procediera durante la noche, y se extinguió con trietilsilano (0.13 mi, 0.84 mmoles). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se dividió entre NaHC03 y DCM/MeOH (10:1). La capa acuosa se extractó (3x) con más DCM/MeOH (10:1), y los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 87:13) para proporcionar el compuesto deseado (0.12 g) en la forma de una espuma/goma color crema. MS (ESI ) para C27H32F3N7O2IT1/Z 544.5 [M + H] + ; MS (ESI") para Czy^FaNyO;, m/z 542.3 [M-H]"; pureza HPLC >85% (tiempo de retención, 2.418 min.) 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) DH 8.078 (s, 1H), 7.812 (S, 1H), 7.654 - 7.634 (m, 1H), 7.507 - 7.487 (m, 1H), 7.229 - 7.214 (m, 1H), 6.617 - 6.608 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.361 -4.322 (m, 1H), 3.927 - 3.887 (m, 1H), 3.062 -3.024 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 2.944 - 2.873 (m, 2H), 2.758 - 2.554 (m, 0.5H (metina de cis isómero)), 2.554 - 2.507 (m, 1H), 2.447 - 2.351 (m, 2H), 2.291 - 2.263 (m, 2H), 2.194 - 2.054 (m, 6H), 1.960 - 1.887 (m, 3H), 1.686 - 1.480 (m, 2H). Tiempo de retención: 2.418 Condiciones HPLC: columna Agilent Zorbax Exlipse XDB-C18, 4.6 X 50 mm (empaque 1.8 um), Solvente A- Agua (0.1% TFA), Solvente B-Acetonitrilo (0.07% TFA). 6 minutos de gradiente de 5 a 95% B; 1 minuto de retención; posteriormente reciclar.
Compuesto 14: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó hexafluorofosfato de N,N,N',N'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazo]-1 -il}uronio (0.44 g, 1.2 mmoles) una solución ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pir rolo[23-d ]pirimidin-7-il)-2,2-dimetil tetra hidro -3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)am¡no)ciclobutil)propanoico (460 mg, 0.77 mmoles) y ?,?-diisopropiletilamina (0.44 mL, 2.6 mmoles) y 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (0.15 g, 0.93 mmoles) en N,N-dimetilformamida (5 mL, 60 mmoles). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente aproximadamente hasta 2 mis y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y se concentraron. Se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 95:5) para producir un sólido (0.24 g). 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(terl-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenla[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (0.24 g. 0.32 mmoles) en ácido acético (5 mi, 90 mmoles) se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo restante se dividió entre Na2C03 (2N) y DCM. La capa acuosa se extractó 3x con DCM y los orgánicos combinados se secaron con MgS04l se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 94:6) para producir el compuesto deseado (0.20 g) en la forma de un sólido. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3- (2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó acido trifluoroacético (5 mi) a una mezcla de agua (0.5 mi) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-¡l)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0.20 g, 0.28 mmoles) a temperatura ambiente. La reacción se dejó proceder durante la noche, momento en el cual se extinguió con trieti Isi la no (0.088 mi, 0.55 mmoles). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se dividió entre NaHC03 saturado y DCM/MeOH (10:1). La capa acuosa se extractó 3x con más DCM/MeOH (10:1) y los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04, se filtraron, concentraron y purificaron mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 87:13) para proporcionar el producto deseado en la forma de una espuma color crema (0.060 g). MS (ESI") para C3oH41N702 m/z 532.3 [M + H] + ; MS (ESI") para C3oH4iN702 m/z 530.4 [M-H]"; pureza HPLC >94% (tiempo de retención, 2.723 min.) 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) DH 8.079 (s, 1H), 7.500 (s, 1H), 7.418 -7.398 (m, 1H), 7.310 - 7.307 (m, 1H), 7.230 - 7.216 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.355 - 4.316 (m, 1H), 3.926 - 3.887 (m, 1H), 3.088 - 3.017 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 2.879 -2.809 (m, 2H), 2.745 - 2.685 (m, 0.5H (metina de cis isómero), 2.532 - 2.512 (m, 1H), 2.446 - 2.373 (m, 2H), 2.294 - 2.276 (m, 2H), 2.202 - 2.012 (m, 5H), 1.685 - 1.603 (m, 1H), 1.545 - 1.504 (m, 1H), 1.383 (s, 1H). Tiempo de retención: 2.723 minutos Condiciones HPLC: columna Agilent Zorbax Exlipse XDB-C18, 4.6 X 50 mm (empaque 1.8 um), Solvente A-Agua (0.1% TFA), Solvente B-Acetonitrilo (0.07% TFA). 6 minutos de gradiente de 5 a 95% B; 1 minuto de retención; posteriormente reciclar.
Compuesto 15: (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il}-5-{[propan-2-il({4-[5-(trifluorometil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]butil})amino]metil}ciclopentano-1,2-diol Paso 1: 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2, 2-dimetil-6-{[propan-2-¡ l({4-[5-(trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1,3-benzodiazol-2-il]butil})amino]metil}-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina A una solución de 3-{[5-(trifluorometil)-1 -{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1 -carbaldehído (243 mg, 0.59 mmoles), 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-[(propan-2-ilamino)metil]-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (170 mg, 0.49 mmoles) y MgS04 (710 mg, 5.90 mmoles) en DCE (10 mi) se agitó durante 15 minutos. Posteriormente se agregó a la mezcla de reacción STAB (175 mg, 0.83 mmoles) y se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La reacción se monitoreó mediante LCMS, no se observó amina después de una 1 hora. Se agregó NaHC03 saturado (20 mi) a la mezcla de reacción y se agitó durante 5 minutos. Posteriormente se agregó a la mezcla de reacción salmuera (10 ml). El producto se extractó con DCM (2 x 30 ml), se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (1:99 - 4:96) produjo el producto deseado (170 mg, 47%) en la forma de un aceite; MS (ESI + ) para CasH^FaN OaSi m/z 742.40 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.78 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) DH ppm -0.25 - 0.11 (9 H, m), 0.66 - 1.04 (8 H, m), 1.17-1.48 (5 H, m), 1.49 - 1.61 (3 H, m), 1.77 - 2.04 (2 H, m), 2.19 - 2.37 (5 H, m), 2.37 - 2.51 (2 H, m), 2.52 - 2.80 (2 H, m), 2.81 - 2.91 (1 H, m), 2.91 - 3.22 (2 H, m), 3.34 - 3.79 (2 H, m), 4.29 -4.52 (1 H, m), 4.78 - 5.12 (2 H, m), 5.28 - 5.70 (4 H, m), 6.34 (1 H, d, J = 3.63 Hz), 6.80 - 7.16 (1 H, m), 7.29 - 7.71 (2 H, m), 7.71 - 8.11 (1 H, m), 8.11 - 8.46 (1 H, m) Paso 2. (1 R, 2S ,3R,5R)-3-{4-am i no-7H-pirrolo[2,3-d]p¡ rim id in- 7-il}-5-{[propan-2-il({4-[5-(trifluorometil)-1 H-1 ,3-benzodiazol - 2-il]butil))amino]metil}ciclopentano-1,2-diol Se agregó lentamente HCI 12N (3 ml) a una solución de 7- [(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-({propan-2-il[(3-{[5- (trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3- benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (170 mg, 0.23 mmoles) en MeOH (3 mi) y se agitó a una temperatura de 40°C durante 2.5 horas. La reacción se monitoreó mediante LCMS, no se observó material de partida después de 2.5 horas. La mezcla de reacción se concentró ¡n vacuo, posteriormente se hizo base con NH3 7N en MeOH. Posteriormente se evaporó hasta secarse. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (1:9) produjo el producto deseado (100 mg, 76%) en la forma de un sólido color blanco; MS (ESI + ) para C29H36F3N703 m/z 572.40 [? + ? ; pureza HPLC 99% (tiempo de retención, 2.17 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) DH ppm 0.78 - 1.19 (6 H, m), 1.35 - 1.69 (2 H, m), 1.80 - 2.04 (1 H, m), 2.11 - 2.87 (10 H, m), 2.88 -3.18 (3 H, m), 3.79 - 4.06 (1 H, m), 4.15 - 4.47 (1 H, m), 4.82 - 5.12 (1 H, m), 6.43 - 6.77 (1 H, m), 7.19 (1 H, d, J = 3.47 Hz), 7.47 (1 H, d, J = 8.35 Hz), 7.63 (1 H, d, J = 8.51 Hz), 7.79 (1 H, s), 7.95 - 8.24 (1 H, m).
Compuesto 18: (1 R,25,3R, 5R)-3-{4-am i no-7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-7-il}-5-({metil[(3-{[5-(trifluorometil)-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)ciclopentano-1,2-diol Paso 1: ácido 3-[2-(benciloxi)-2-oxoetilideno]ciclobutano-1 -carboxílico Se calentó a reflujo bajo nitrógeno durante 4 horas una mezcla de ácido ciclobutanona-3-carboxílico (5 g, 43.82 mmoles), bencil-2-(dimetoxifosforil)acetato (13.58 g, 52.59 mmoles), LiOH (4.20 g, 23.95 mmoles) y cernidores moleculares activados 3Á (25 g, en forma de polvo) en THF (250 mi). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agregó EtOAc (100 mi) seguido de HCI (1N, 100 mi). Esta mezcla se filtró a través de celita. Las fases se separaron y la capa acuosa se extractó con EtOAc (4 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y concentraron para producir un aceite incoloro. La cromatografía instantánea seca sobre Si02, eluyendo con Hept: EtOAc de 7:3 a 1:1, produjo el producto deseado en la forma de un aceite incoloro (5.2 g, 39%); MS (ES + ) para Ci4H1404 m/z 269.05 [M + Na] + ; MS (ESI-) para C14H1404 m/z 245.15 [M-H ]; pureza HPLC 81% (tiempo de retención, 1.85 minutos); H RMN (250 MHz, CLOROFORMO-d) 0H ppm 2.95 - 3.62 (5 H, m), 4.96 -5.31 (2 H, m), 5.75 (1 H, t, J = 2.21 Hz), 7.27 - 7.45 (5 H, m). Paso 2. 2-{3-[metoxi(metil)carbamoil]ciclobutilideno}acetato de bencilo A una solución enfriada con hielo de ácido 3-[2-(benciloxi)-2-oxoetilideno]ciclobutano-1 -carboxílico (2.0 g, 8.12 mmoles), /V-Metil-morfolina (2.70 mi, 24.36 mmoles) en DCM (50 mi) se le agregó cloroformato de isobutilo (1.70 mi, 12.99 mmoles) en forma de gotas durante 5 minutos. Después de 5 minutos adicionales, se agregó clorhidrato de metoxi(metil)amina (1.58 g, 16.24 mmoles) y la mezcla se agitó durante la noche mientras se dejó templar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó posteriormente con DCM (30 mi), se lavó con HCI 0.1N (50 mi) posteriormente NaHC03 saturado (50 mi), se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con EtOAc:heptanos de 1:9 a 3:7 produjo el producto deseado (1.54 g, 65%); MS (ESI + ) para Ci6H19N04m/z 290.10 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.86 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) ? H ppm 2.96 (1 H, ddd, J = 16.98, 8.79, 1.81 Hz), 3.17 - 3.30 (4 H, m), 3.30 - 3.48 (2 H, m), 3.51 - 3.63 (1 H, m), 3.64 - 3.75 (3 H, m), 5.15 (2 H, s), 5.73 (1 H, quin, J = 2.25 Hz), 7.29 - 7.42 (5 H, m).
Paso 3. Ácido 2-{3-[metoxi(metil)carbamoil]ciciobutil}acético Se agregó paladio sobre carbono (10%, 0.1 g) a una solución de 2-{3-[metoxi(metil)carbamoil]ciclobutilideno}acetato de bencilo (1.54 g, 5.32 mmoles) en EtOH (20 mi) y se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 6 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celita y se evaporó hasta secarse para producir un aceite incoloro (1.04 g, 89%); M S (ESI*) para C9H15N04 m/z 202.00 [M + H] + ; MS (ESI)' para C9H15N04 m/z 200.05 [M-H]"; pureza HPLC 92% (tiempo de retención, 1.10 minutos); 1H RMN (500 MHz, MeOD) rjH ppm 1.84 - 2.08 (2 H, m), 2.28 - 2.53 (4 H, m), 2.56 - 2.72 (1 H, m), 3.06 - 3.22 (3 H, m), 3.38 - 3.56 (1 H, m), 3.68 (3 H, d, J = 8.04 Hz).
Paso 4i. 3-({[2-amino-5-(trifluorometil)fenil]carbamoil}metil)-A/-metoxi-A-metilciclobutano-1-carboxamida Se agregó TEA (1.49 mi, 10.70 mmoles) a una suspensión de ácido 2-{3-[metoxi(metil)carbamoil]ciclobutil}acético, EDC.HCI 1.18 g, 6.20 mmoles), HOBt.xH20 (0.77 g, 5.69 mmoles) en DCM (20 mi) a una temperatura de 0°C y se agitó durante 5 minutos antes de la adición de 4-(trifluorometil)benceno-l ,2-diamina (1.04 g, 10.34 mmoles). Esto se agitó durante 20 minutos adicionales a una temperatura de 0°C, posteriormente se templó a temperatura ambiente. La reacción se monitoreó mediante LC MS, después de 2 horas la mezcla de reacción se lavó con HCI 1N (50 mi) posteriormente NaHC03 saturado (50 mi). Esto se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó hasta secarse. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con EtOAc produjo el producto deseado (0.83 g, 44%) en la forma de un sólido color beige; MS (ESI + ) para CI6H20 3O3 m/z 360.00 [M + H] + ¡ pureza HPLC 90% (tiempo de retención, 1.64 minutos); 1H RMN (500 MHz, MeOD) DH ppm 2.02 - 2.16 (2 H, m), 2.31 -2.68 (4 H, m), 2.69 - 2.88 (1 H, m), 3.18 (3 H, d, J = 4.41 Hz), 3.36 - 3.59 (1 H, m), 3.65 - 3.76 (3 H, m), 6.81 - 6.97 (1 H, m), 7.02 - 7.27 (1 H, m), 7.28 - 7.48 (1 H, m).
Paso 4ii. W-metoxi-W-metil-3-{[5-(tr¡fluorometil)-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}-ciclobutano-1-carboxamida Una solución de la 3-({[2-amino-5- (trifluorometil)fenil]carbamoil}metil)-/V-metoxi-/V-metilciclobutano-1-carboxamida (0.82 g, 2.29 mmoles) en AcOH (10 mi) se calentó a reflujo (~125°C) mientras se agitó durante 2.5 horas. La reacción se monitoreó mediante LC MS. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y posteriormente se evaporó in vacuo. El residuo se disolvió en DCM (30 mi) y se lavó con NaHC03 saturado (50 mi), se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con MeOH : DCM (2:98 - 5:95) para producir un aceite color amarillo-café (0.75 g, 94%); MS (ESI + ) para C16H18F3N302 m/z 342.10 [M + H] + ; pureza HPLC 97% (tiempo de retención, 1.40 minutos); 1H RMN (500 MHz, MeOD) DH ppm 1.96 - 2.17 (2 H, m), 2.27 - 2.55 (2 H, m), 2.66 - 2.92 (1 H, m), 2.97 - 3.15 (2 H, m), 3.15 - 3.22 (3 H, m), 3.32 - 3.62 (1 H, m), 3.63 - 3.73 (3 H, m), 7.37 - 7.53 (1 H, m), 7.53 - 8.00 (2 H, m).
Paso 5. W-metoxi-N-metil-3-{[5-(trifluorometil)-1 -{[2- (trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 , 3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1-carboxamida Se agregó K2C03 (381 mg, 2.76 mmoles), seguido de SEM-Cl (430 µ?, 2.43 mmoles) a una solución de la A/-metoxi-/V-metil-3-{[5-(trifluorometil)-1H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1 -carboxamida (754 mg, 2.21 mmoles) en DMF (10 mi) a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se monitoreó mediante LCMS. La mezcla de reacción se diluyó con agua (3 mi), salmuera (30 mi) y posteriormente se extractó con EtOAc (2 x 50 mi). Esto se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó para producir un aceite color naranja claro. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con EtOAc:heptanos (1:1 - 1) produjo los productos deseados en la forma de aceites color beige como un regioisómero simple (217 mg, 21%); MS (ESI + ) para C22H32F3N303Si m/z 472.55 [M + H] + ; pureza HPLC 99% (tiempo de retención, 2.37 minutos); 1H R N (250 MHz, CLOROFORMO-d) DH ppm -0.31 - 0.22 (9 H, m), 0.83 - 1.00 (2 H, m), 2.03 -2.25 (2 H, m), 2.30 - 2.74 (2 H, m), 2.85 - 3.14 (3 H, m), 3.18 (3 H, s), 3.32 - 3.60 (3 H, m), 3.61 - 3.72 (3 H, m), 5.52 (2 H, s), 7.51 (1 H, dd, J = 8.38, 1.22 Hz), 7.70 (1 H, s), 7.79 (1 H, d, J = 8.53 Hz) y una mezcla de reg ioisómeros (280 mg, 27%); C22H32F3N303Si m/z 472.55 [ + ? ; pureza HPLC 72% y 21% (tiempo de retención, 2.39 y 2.36 minutos); 1H RMN (250 MHz, CLOROFORMO-d) ? ppm -0.08 - -0.01 (9 H, m), 0.81 - 0.99 (2 H, m), 1.94 - 2.24 (2 H, m), 2.38 - 2.74 (2 H, m), 2.90 - 3.14 (3 H, m), 3.14 - 3.22 (3 H, m), 3.33 - 3.63 (3 H, m), 3.63 -3.70 (3 H, m), 5.40 - 5.64 (2 H, m), 7.40 - 7.74 (2 H, m), 7.75 - 8.14 (1 H, m).
Paso 6. 3-{[5-(trifluorometil)-1 -{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1-carbaldehido Se agregó en forma de gotas DIBAL (0.69 mi, 0.69 mmoles, 1 M en THF) a una solución de la /V-metoxi-/V-metil-3-{[5-(trifluorometil)-1 -{ [2 - (t r i m et i I s i I i I ) etox i] m et i I}- 1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1 -carboxamida en THF a una temperatura de -10°C mientras se agitó. La reacción continuó durante 3 horas a una temperatura de -10°C. La mezcla de reacción se vertió sobre sal de Rochelle acuosa saturada (20 mi), diluida con Et20 (50 mi) y se agitó durante 30 minutos. Esto se separó posteriormente y la capa orgánica se lavó con sal de Rochelle (30 mi), NaHC03 saturado, (30 mi) y salmuera (30 mi). Esto se secó sobre Na2S04) se filtró y evaporó para proporcionar una goma incolora (190 mg, 87%); MS (ESI+) para C20H27F3 2O2S1 m/z 413.6 [M + H] + ; pureza HPLC 87% (tiempo de retención, 2.25 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) ? H ppm -0.10 - 0.09 (9 H, m), 0.88 - 1.00 (4 H, m), 1.63 - 1.97 (2 H, m), 2.07 - 2.23 (2 H, m), 2.24 - 2.37 (0 H, m), 2.37 - 2.42 (1 H, m), 2.43 - 2.66 (2 H, m), 2.93 - 3.34 (4 H, m), 5.49 - 5.61 (2 H , m), 7.16 - 7.31 (2 H, m), 7.32 - 7.32 (2 H , m), 7.49 - 7.61 (1 H, m), 7.73 (1 H, s), 7.83 (1 H , d, J = 8.35 Hz).
Paso 7. 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-({[(3-{[5- (trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)-hexahidrociclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-M]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se agitó durante 15 minutos una solución de 3-{[5-(t rif lu oro metí l)-1 -{[2-(trimetilsil¡l)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1 -carbaldehído (190 mg, 0.46 m moles), (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-5-(aminometil)ciclopentano-1 ,2-diol (140 mg, 0.46 mmoles) y MgS04 (554 mg 4.61 mmoles) en DCE (10 mi). Posteriormente se agregó STAB (137 mg, 0.645 mmoles) a la mezcla de reacción y se agitó. La reacción se monitoreó mediante LCMS, después de lo cual se observó amina. Se agregó NaHC03 saturado (20 mi) a la mezcla de reacción y se agitó durante 5 minutos. Se agregó salmuera (10 mi) a la mezcla de reacción y el producto se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (1:99 a 5:95) produjo el producto deseado en la forma de un sólido espumoso color rosa. Las fracciones mezcladas se combinaron y purificaron sobre una placa TLC de preparación eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (2 x 4:96) para producir un total de 170 mg, 53%. MS (ESI + ) para C35H48F3N703Si m/z 700 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.79 minutos); 1H RMN (250 MHz, CLOROFORMO-d) DH ppm -0.26 - 0.16 (9 H, m), 0.72 - 0.97 (2 H, m), 1.30 (3 H, s), 1.38 -1.60 (5 H, m), 1.91 - 2.59 (8 H, m), 2.60 - 3.27 (6 H, m), 3.35 - 3.70 (2 H, m), 4.52 (1 H, t, J = 5.94 Hz), 4.78 - 5.20 (4 H, m), 5.39 - 5.66 (2 H, m), 6.36 (1 H, d, J=3.65 Hz), 7.03 (1 H, d, J = 3.65 Hz), 7.42 - 7.59 (1 H, m), 7.69 (1 H, s), 7.79 (1 H, d, J = 8.53 Hz), 8.32 (1 H, s).
Paso 8. 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-({met¡l[(3-{[5-(tr¡fluoromet¡l)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se agregó formaldehído (36 pl, 0.49 mmoles, 37%(aq)) a una solución de 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-({[(3-{[5-(trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina en MeOH (5 mi) y THF (5 mi), y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se agregó en porciones NaCNBH3 (18 mg, 0.29 mmoles), y la reacción se agitó durante 2 horas adicionales a temperatura ambiente, después de lo cual LC MS mostró que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se concentró bajo vacío, y el residuo se diluyó entre agua (20 mi) y DCM (20 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extractó con DCM (2 x 20 mi), los orgánicos combinados se secaron posteriormente sobre Na2S04 y se concentraron. La purificación mediante TLC de preparación, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (5:95) produjo el producto deseado (114 mg, 66%) en la forma de un aceite incoloro; MS (ESI + ) para CgeHsoFa^OaSi m/z 714.45 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.77 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 0H ppm -0.14 - 0.05 (9 H, m), 0.85 - 0.99 (2 H, m), 1.18-1.35 (3 H, m), 1.37 - 1.53 (2 H, m), 1.52 - 1.64 (3 H, m), 1.89 - 2.15 (3 H, m), 2.18 - 2.28 (2 H, m), 2.29 -2.70 (6 H, m), 2.72 - 2.96 (1 H, m), 2.97 - 3.20 (2 H, m), 3.48 (3 H, s), 3.50 - 3.58 (2 H, m), 4.37 - 4.58 (1 H, m), 4.85 -5.05 (2 H, m), 5.11 - 5.38 (2 H, m), 5.41 - 5.57 (2 H, m), 6.35 (1 H, d, J = 3.63 Hz), 6.84 - 7.19 (1 H, m), 7.50 (1 H, d, J = 8.35 Hz), 7.68 (1 H, s), 7.78 (1 H , d, J = 8.35 Hz), 8.13 - 8.52 (1 H, m) Paso 9. (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il}-5-({metil[(3-{[5-(trifluorometil)-1 H-1 ,3-benzodiazol-2- il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó una solución de HCI en MeOH (1:1, 3 mi) a 7- [(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-({met¡l[(3-{[5-(trifluorometil)-1- {[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-1,3-benzodiazol-2- il]metil}ciclobutil)metil]amino}metil)- hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-¡l]-7H-pirrolo[2,3- d]pir¡midin-4-amina a una temperatura de 0°C y se agitó. Posteriormente esto se agitó inmediatamente a una temperatura de 40°C durante 4 horas (se monitoreó la reacción mediante LCMS). La reacción continuó durante 1 hora adicional. LCMS mostró aún el 30% de S desprotegido por acetal. Se agregó 1 mi adicional de HCI (36% acuosa) a la mezcla de reacción y se continuó a una temperatura de 40°C durante 1 hora adicional. La mezcla de reacción se evaporó posteriormente in vacuo. El residuo se disolvió en DCM (100 mi) + MeOH (1 mi) y se lavó con NaHC03 saturado (2 x 50 mi), se secó sobre Na2S04 se filtró y evaporó. La purificación mediante TLC de preparación, eluyendo con NH3 7N en MeOH :DCM (1:9); MS (ESI + ) para C27H32F3N7O2 m/z 544 [M + H] + ; pureza HPLC 96% (tiempo de retención, 2.03 minutos); H RMN (500 MHz, MeOD) DH ppm 1.47 - 1.58 (1 H, m), 1.58 - 1.69 (1 H, m), 1.87 - 2.12 (1 H, m), 2.12 - 2.54 (10 H, m), 2.53 - 2.91 (3 H, m), 2.93 - 3.15 (2 H, m), 3.88 - 4.08 (1 H, m), 4.32 (1 H, dd, J = 7.57, 6.15 Hz), 4.88 -5.01 (1 H, m), 6.59 (1 H, d, J = 3.63 Hz), 7.20 (1 H, d, J = 3.63 Hz), 7.42 - 7.53 (1 H, m), 7.63 (1 H, d, J = 8.20 Hz), 7.79 (1 H, s), 7.95 - 8.22 (1 H, m).
Compuesto 19: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (490 mg, 0.79 mmoles) y 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (155 mg, 0.946 mmoles) en N,N-Dimetilformamida (8.1 mi) se trató con N,N-Diisopropiletilamina (0.453 mi, 2.60 mmoles) en forma de gotas seguido de Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (449 mg, 1.18 mmoles) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo alto vacío y el residuo se dividió entre 50 mi de EtOAc y 50 mi de 1/1 H20/NaHC03 saturado. La fase acuosa se extractó con 30 mi de EtOAc y la fase orgánica combinada se lavó con porciones de 30 mi de H20 y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para proporcionar una espuma rígida/de vidrio. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 4% 7N N NH3 en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el intermediario deseado en la forma de una mezcla de regioisómeros de amida (400 mg). Se calentó una solución del intermediario (0.40 g) en ácido acético (15 mi) a una temperatura de 65°C durante 2.5 horas, la mezcla de reacción se enfrió y se colocó bajo alto vacío para eliminar el ácido acético. El residuo se tomó en 60 mi de CH2CI2 y se lavó con porciones de 40 mi de NaHC03 saturado y una solución de Na2C03 al 2%. La fase orgánica se secó sobre Na2S0 , se filtró y concentró para producir una espuma rígida/vidrio. El material se colocó en alto vacío y se utilizó directamente en el siguiente paso (380 mg). (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se disolvió 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (390 mg, 0.52 mmoles) en una mezcla de ácido trifluoroacético (7.2 mi) y agua (0.8 mi), el cual se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, posteriormente se templó a temperatura ambiente. Después de 2.5 horas a temperatura ambiente, el residuo se tomó en 15 mi de MeOH y se concentró. Este procedimiento se repitió dos veces y el residuo se colocó en alto vacío. El material se tomó en 15 mi de MeOH (proporcionó una pasta) y se trató con 500 mg K2C03 y 8 gotas de agua. La mezcla se dejó agitar durante 1 hora, tiempo durante el cual la solución se encontró como básica. La mezcla se filtró a través de un frit fino, los sólidos se lavaron con 10 mi de MeOH y el filtrado se concentró para producir un sólido color crema. El material se dejó durante la noche en alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 8 a 10% de NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar una espuma rígida/vidrio (0.22 g). 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.20 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 6.60 (m, 1 H), 4.32 (t, J = 6.43 Hz, 1 H), 3.93 (t, J = 5.29 Hz, 1 H), 3.54 (m, 0.2 H), 3.11 (t, J = 9.33 Hz, 1 H), 3.02 (m, 1 H), 2.82 (m, 2 H), 2.66 (dd, J=1 3.68, 8.09 Hz, 1 H), 2.46 (m, 1 H), 2.36 (m, 1 H), 2.23 (m, 3 H), 2.05 (m, 1 H), 1.91 (m, 3 H), 1.59 (m, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.02 (m, 6 H).
Compuesto 20: (1R,2S,3R,5 )-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se trató una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (78. 5 mg, 0.126 mmoles) y 4-cloro-5-(trifluorometil)benceno-1 ,2-diamina (31.9 mg, 0.151 mmoles) en N , N-Dimetilformamida (1.3 mi) con N,N-Diisopropiletilamina (72.5 ul, 0.416 mmoles en forma de gotas seguido de Hexafluorofosfato de N.N.N'.N'-Tetrametil-O-^-azabenzotriazol-1 -il)uronio (72.0 mg, 0.189 mmoles) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 7.5 horas. La mezcla de reacción se colocó en el refrigerador durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo alto vacío y el residuo se dividió entre 20 mi de EtOAc y 20 mi de 1/1 H20/NaHC03 saturado. La fase acuosa se extractó con 10 mi de EtOAc y la fase orgánica combinada se lavó con porciones de 10 mi de H20 y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7N al 3% en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el intermediario deseado en la forma de una espuma rígida/vidrio (amidas regioisoméricas y cis/trans diastereómeros, 87 mg). El intermediario (0.087 g) se tomó en ácido acético (4.5 mi), se calentó a una temperatura de 65°C durante 6 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. La reacción se calentó a una temperatura de 65°C durante 8 horas, posteriormente a temperatura ambiente o/n posteriormente a 65°C durante 6.5 horas adicionales. La mezcla se enfrió y colocó bajo alto vacío para eliminar el ácido acético. El residuo se tomó en 15 mi de CH2CI2 y se lavó con porciones de 10 mi de NaHC03 saturado y una solución de Na2C03 al 2%. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir una espuma rígida/vidrio. El material se colocó en alto vacío durante la noche. El material crudo se purificó mediante TLC de preparación en una placa TLC de preparación 20cm x 20cm x 1.0mm eluyendo dos veces con NH3 7N al 4%e n CH3OH/CH2CI2. La banda del producto se aisló para producir el producto en la forma de un sólido color blanco (48 mg). (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(6-cloro-5-(trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol disolvió 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-cloro-5- (trifluorometil)-1H-benzo[d]imidazol-2- M)etil)ciclobutM)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2 ,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2 ,3-d]p¡rim¡d¡n-4-amina (525 mg, 0.683 mmoles) en una mezcla de ácido trifluoroacético (9 mi) y agua (1 mi), la cual se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, posteriormente se templó a temperatura ambiente. Después de 4 horas a temperatura ambiente, se concentró la mezcla. El residuo se tomó en 20 mi de MeOH y se concentró. Este procedimiento se repitió dos veces y el residuo se colocó en alto vacío. El material se tomó en 15 mi de MeOH (produjo una pasta) y se trató con 500 mg de K2C03 y 15 gotas de agua. La mezcla se dejó en agitación durante 1 hora, tiempo durante el cual la solución se encontró como básica. La mezcla se filtró a través de un frit fino, los sólidos se lavaron con 10 mi de MeOH y el filtrado se concentró para producir un sólido color crema. El material se dejó durante la noche en alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7N al 12% en CH30H/CH2CI2) para producir una espuma rígida/vidrio incoloro. 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.89 (d, J = 2.07 Hz, 1 H), 7.69 (d, J = 2.28 Hz, 1 H), 7.21 (dd, J = 3.42, 1.76 Hz, 1 H), 6.59 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.33 (t, J = 6.84 Hz, 1 H), 3.89 (q, J = 5.25 Hz, 1 H), 3.03 (m, 0.5 H), 2.89 (m, 2 H), 2.70 (m, 0.5 H), 2.49 (m, 1 H) , 2.40 (m, 2 H), 2.27 (br. s., 2H), 2.16 (d, J = 7.26 Hz, 4 H), 2.06 (m, 2 H), 1.91 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.52 (m, 1 H).
Compuesto 21: (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-5-({[(3-{[6-cloro-5-(trifluorometil)-1 H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil](propan-2-il)amino}metil)ciclopentano-1,2-diol Paso 1: 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-6-({[(3-{[6-cloro-5- (trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil](propan-2-il)amino}metil)-2,2-dimetil-hexahidrociclopenta[d][1 , 3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se agitó durante 15 minutos una solución de 3-{[6-cloro-5-(trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutano-1 -carbaldeh ido (223 mg, 0.50 mmoles), 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-[(propan-2-ilamino)metil]-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (172 mg, 0.50 mmoles) y gS04 (600 mg, 5.00 mmoles) en DCE (10 mi). Posteriormente se agregó a la mezcla de reacción STAB (148 mg, 0.70 mmoles) y se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La reacción se monitoreó mediante LCMS, no se observó amina después de 2.5 horas. Se agregó NaHC03 saturado (20 mi) a la mezcla de reacción y se agitó durante 5 minutos. Posteriormente se agregó salmuera (20 mi) a la mezcla de reacción. El producto se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. La purificación mediante HPLC de preparación produjo el producto deseado (174 mg, 45%) en la forma de un sólido color blanco; MS (ESI + ) para C38H53CIF3N703Si m/z 776.30 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.68 minutos); 1H RMN (500 MHz, MeOD) DH ppm -0.25 - 0.11 (9 H, m), 0.90 (2 H, td, J = 7.88, 3.47 Hz), 1.30 (3 H, s), 1.37 (6 H, t, J = 7.49 Hz), 1.55 (3 H, s), 1.63 - 1.84 (1 H, m), 1.99 -2.37 (2 H, m), 2.37 - 3.03 (6 H, m), 3.04 - 3.28 (3 H, m), 3.34 - 3.50 (1 H, m), 3.61 (2 H, td, J = 7.92, 2.29 Hz), 3.79 (1 H, br. s.), 4.68 (1 H, t, J = 6.70 Hz), 4.95 - 5.27 (2 H, m), 5.55 - 5.81 (1 H, m), 6.88 (1 H, d, J = 3.63 Hz), 7.06 - 7.62 (2 H, m), 7.61 - 7.94 (1 H, m), 7.94 - 8.16 (1 H, m), 8.22 (1 H, s) Paso 2. (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-¡l}-5-({[(3-{[6-cloro-5-(tr¡fluoromet¡l)-1H-1 ,3-benzodiazol-2-il]metil}ciclobutil)metil](propan-2-il)amino}metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó lentamente HCI 12N (1.5 mi) a una solución de 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-6-({[(3-{[6-cloro-5-(trifluorometil)-1-{[2-(trimetilsilil)etox¡]metil}-1H-1,3-benzod¡azol-2-il]met¡l}ciclobutil)metil](propan-2-il)am¡no}metil)-2,2-dimetil-hexahidrociclopenta[d][1 , 3]dioxol-4-il]-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimid¡n-4-amina (174 mg, 0.22 mmoles) en MeOH (1.5 mi) y se agitó a una temperatura de 40°C durante 6 horas. La reacción se monitoreó mediante LCMS, no se observó material de partida después de 2.5 horas. La mezcla de reacción se concentró in vacuo, posteriormente se hizo base con NH3 7N en MeOH (5 mi). Posteriormente esto se evaporó hasta secarse. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (1:9) produjo el producto deseado (36 mg, 27%) en la forma de un sólido color blanco; MS (ESI + ) para C29H35CIF3N702 m/z 606.30 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 2.59 minutos); 1H RMN (500 MHz, MeOD) DH ppm 0.93 - 1.09 (6 H, m), 1.41 - 1.64 (2 H, m), 1.76 - 2.06 (1 H, m), 2.15 - 2.65 (9 H, m), 2.65 - 2.88 (1 H, m), 2.91 - 3.13 (3 H, m), 3.80 - 4.09 (1 H, m), 4.19 - 4.46 (1 H, m), 4.88 - 4.94 (1 H, m), 6.46 - 6.77 (1 H, m), 7.19 (1 H, d, J = 3.63 Hz), 7.69 (1 H, s), 7.89 (1 H, s), 8.06 (1 H, s).
Compuesto 22: (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-5-{[({3-[(5-ter-butil-1H-1,3-benzodiazol-2-il)metil]ciclobutil}metil)(propan-2-il)amino]metil}ciclopentano-1,2-diol Paso 1: 3-{[(2-amino-4-ter-butilfenil)carbamoil]metil}-A/-metoxi-W-metilciclobutano-l-carboxamida Se agregó N, /V-DMsopropiletilamina (5.19 mi, 29.82 mmoles) a una suspensión de ácido 2-{3-[metoxi(metil)carbamoil]ciclobutil}acético (3 g, 14.91 mmoles), 4-tBu fenileno diamina (2.69 g, 16.4 mmoles) y hexafluorofosfato de (1 -ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilamino-morfolino-carbenio (7.02 g, 16.4 mmoles) en diclorometano (60 mi) a una temperatura de 0°C y se agitó durante 20 minutos antes de dejarse templar a temperatura ambiente. La reacción se dejó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se volvió a disolver en EtOAc (60 mi). La solución se lavó con agua (3 x 60 mi), posteriormente salmuera (60 mi), se secó (MgS0 ) y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea seca, eluyendo con 100% de EtOAc para proporcionar el compuesto del título (3.74 g, 46%) en la forma de un aceite color café: MS (ESI + ) para C19H29N303 m/z 348.5 [M + H] + ; pureza LC 26% y 44% (UV), 18% y 68% (ELS) , (tiempo de retención, 1.65 y 1.71 minutos).
Etapa 2: 3-[(5-ter-butil-1 H-1 , 3-benzod iazol-2-il )metil]-N-metoxi-N-metilciclobutano-1-carboxamida Se calentó a reflujo durante 1 hora una solución agitada de 3-{[(2-amino-4-ter-butilfenil)carbamoil]metil}-/\/-metoxi-/V-metilciclobutano-1 -carboxamida (70%, 2.62 g, 5.28 mmoles) en ácido acético (25 mi). La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NaHC03 saturado (aq) (25 mi) y EtOAc (25 mi), y las capas se separaron. La capa acuosa se extractó con EtOAc (2 x 25 mi), los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mi), se secaron (MgS04) y concentraron. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna instantánea, eluyendo con 1 a 10% 2M NH3 en MeOH en DCM para producir el compuesto del título (2.02 g, 93%) en la forma de una goma color amarillo: MS (EST) para C19H27N302 m/z 330.5 [M + H] + ; pureza LC 80% (UV), 100% (ELS), (tiempo de retención, 1.51 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) DH ppm 7.56 (br. s., 1 H), 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 7.30 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 1 H), 3.80-3.90 (m, 1 H), 3.65 (s, 3 H), 3.47-3.57 (m, 1 H), 3.20 (s, 3 H), 2.94-3.13 (m, 2 H), 2.88 (dt, J = 16.1, 8.1 Hz, 1 H), 2.32-2.60 (m, 2 H), 2.01-2.17 (m, 2 H), 1.38 (s, 9 H).
Etapa 3: 3-[(5-ter-butil-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-benzodiazol-2-il)metil]-/V-metoxi-A-met¡lciclobutano-1-carboxamida A una solución de 3-[(5-ter-butil- 1 H-1 ,3-benzodiazol-2-¡l)metil]-/V-metoxi-/V-metilciclobutano-1 -carboxamida (80%, 2.02 g, 4.91 mmoles) en N, /V-dimetilformamida (40 mi) bajo N2 se le agregó carbonato de potasio (1.36 g, 9.81 mmoles) y la reacción se agitó durante 1 hora. Se agregó lentamente cloruro de 2-(trimetilsilil)etoximetilo (1.31 mi, 7.36 mmoles) y se mantuvo la agitación durante 20 horas. La mezcla de reacción se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se tomó en EtOAc (50 mi) y se lavó con agua (3 x 50 mi), posteriormente salmuera (50 mi), antes de secarse (MgS04) y se concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con 50 a 100% EtOAc en heptano para producir el compuesto del título (1.21 g, 54%) en la forma de una goma incolora: MS (ESI + ) para C25H41N303Si m/z 461.0 [M + H] + ; pureza LC 97% (UV), 100% (ELS) , (tiempo de retención, 1.98 minutos); 1 H RMN (500 Hz, CLOROFORMO-d) ? ppm 7.58-7.89 (m, 1 H), 7.33 (s, 2 H), 5.39-5.53 (m, 2 H), 3.65 (s, 3 H), 3.49-3.58 (m, 2 H), 3.41 (br. s., 1 H), 3.10-3.23 (m, 3 H), 3.03 (s, 3 H), 2.32-2.63 (m, 2 H), 2.00-2.18 (m, 2 H), 1.32-1.45 (m, 9 H), 0.91 (td, J = 8.1, 4.9 Hz, 2 H), -0.13-0.07 (m, 9 H).
Etapa 4: 3-[(5-ter-butil-1 -{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il)met i Ijciclobu ta ??-1-carb aldehido A una solución de 3-[(5 -te r-b u ti I- 1 -{[2- (trimetils¡lil)etoxi]metil}-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il)metil]-A/-metoxi-/V-metilc¡clobutano-1 -carboxamida (0.61 g, 1.32 mmoles) en tetrahidrofurano (15 mi) se le agregó en forma de gotas una solución de hidruro de diisobutilaluminio 1 M en tolueno (3.29 mi) bajo N2 a una temperatura de -10°C. La reacción se agitó a esta temperatura durante 2.5 horas antes de extinguirse mediante la adición de metanol (2 mi) y se agitó durante 5 minutos. La solución se vertió sobre sal de Rochelle acuosa saturada (20 mi), se diluyó con Et20 (30 mi) y se agitó durante 30 minutos. Posteriormente esto se separa y la capa orgánica se lavó con sal de Rochelle (30 mi), NaHC03 saturado (30 mi), y salmuera (30 mi). Éste se secó (MgS04) y se concentró para producir el compuesto del título (0.69 g, 130%) en la forma de una goma incolora la cual se utilizó cruda en la siguiente reacción.
Etapa 5: 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-6-{[({3-[(5-ter-butil-1 -{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1 H-1 , 3-benzod iazol -2-il)metil]ciclobutil}metil)(propan-2-il)amino]metil}-2,2-dimetil-hexahidrociclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se agitaron 3-[(5-te r-b uti I- 1 -{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-1,3-benzodiazol-2-il)metil]ciclobutano-1-carbaldehído (282.3 mg, 0.7 mmoles), 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-[(propan-2-ilamino)metil]-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (243.41 mg, 0.7 mmoles) y sulfato de magnesio (127.22 mg, 1.06 mmoles) en 1,2-dicloroetano (10 mi) durante 15 minutos. Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (179.21 mg, 0.85 mmoles) y la reacción se agitó durante la noche. La reacción se extinguió mediante la adición de Na2C03 saturado (10 mi), y la solución se extractó con DCM (3 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron (MgS04) y se concentraron. El material crudo se purificó mediante HPLC de preparación dirigido a masa (método de ácido). Después de combinar las fracciones, se agregó una pequeña cantidad de NH3 7M en MeOH para basificar la solución. Después de la concentración, el residuo se dividió entre agua (5 mi) y DCM (5 mi), y las capas se separaron. La capa acuosa se extractó con DCM (2x3 mi) y los orgánicos combinados se secaron (MgS04) y concentraron para producir el compuesto del título (58.7 mg, 11%) en la forma de una goma incolora: MS (ESI + ) para C^HesNyOaSi m/z 730.2 [M + H] + ; pureza LC 95% (UV), 100% (ELS), (tiempo de retención, 1.65 minutos); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) DH 8.30 (s, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 7.32 (s, 2 H), 7.04 (d, J = 3.6 Hz, 1 H), 6.37 (d, J = 3.6 Hz, 1 H), 5.40-5.50 (m, 2 H), 5.24 (br. s., 2 H), 4.89-5.04 (m, 2 H), 4.45 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 3.50 (s, 3 H), 2.11-3.09 (m, 13 H), 2.01 (s, 6 H), 1.34-1.49 (m, 6 H), 1.29 (s, 3 H), 0.85-1.02 (m, 8 H), -0.11-0.05 (m, 9 H).
Etapa 6: (1 R,2S,3R,5R)-3-{4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-5-{[({3-[(5-ter-butil-1 H-1 ,3-benzodiazol-2-il)metil]ciclobutil}metil)(propan-2-il)amino]metil}ciclopentano-1,2-diol Se disolvió 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-6-{[({3-[(5-ter-butil-1 -{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}-1H-1,3-benzodiazol-2- il)metil]ciclobutil}metil)(propan-2-il)amino]metil}-2,2-dimetil-hexahidrociclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimid¡n-4-amina (58.7 mg, 0.08 mmoles) en una solución de HCI concentrada (5 mi) y metanol (5 mi) y se calentó a una temperatura de 40°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, y el residuo se dividió entre NaHC03 saturado (aq) (10 mi) y EtOAc (10 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extractó con EtOAc (2 x 10 mi), los orgánicos combinados se secaron posteriormente (MgS04) y se concentraron. El material crudo se purificó mediante TLC de preparación, elu yendo con NH3 2M al 10% en MeOH en DCM para producir el compuesto del título (24.7 mg, 55%) en la forma de una forma de una goma incolora: MS (ESI + ) para C32H45N702 m/z 560.4 [M + H] + ; pureza LC 100% (UV), (tiempo de retención, 5.10 minutos); 1H RMN (500 MHz, Acetona) E3H 8.12 (s, 1 H), 7.30-7.60 (m, 2 H), 7.13-7.28 (m, 2 H), 6.54 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 6.33 (br. s., 1 H), 4.85 - 5.07 (m, 1 H), 4.36 (t, J = 6.2 Hz, 1 H), 4.08 (t, J = 5.2 Hz, 1 H), 3.01 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 2.93 (d, J = 7.4 Hz, 2 H), 2.78 (br. s., 2 H), 2.59-2.73 (m, 2 H), 2.15-2.56 (m, 7 H), 1.68 (dt, J = 12.4, 9.7 Hz, 1 H), 1.44-1.62 (m, 2 H), 1.35 (s, 9 H), 0.90-1.07 (m, 6 H).
Compuesto 23: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5,6-dicloro-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5,6-dicloro-1 H-benzo[d]imidazol- 2-il)et ¡l)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hid ro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se trató una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6- (4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2)3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (450 mg, 0.76 mmoles) y 4,5-Dicloro-1 ,2-fenilenodiamina (161 mg, 0.910 mmoles) en N, N-Dimetilformamida (7.8 mi) con N,N-Diisopropiletilamina (0.44 mi, 2.5 mmoles) en forma de gotas seguido de Hexafluorofosfato de N , N , ?' , N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -iljuronio (432 mg, 1.14 mmoles) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5.5 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo alto vacío y el residuo se dividió entre 50 mi EtOAC y 50 mi 1/1 H20/NaHC03 saturado. La fase acuosa se extractó con 30 mi de EtOAc y la fase orgánica combinada se lavó con porciones de 30 mi de H20 y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró hasta obtener una espuma. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02 eluyendo con NH3 7N al 5% en CH3OH/CH2CI2) para producir la amida intermediaria (como una mezcla de reg ioisómeros de amida, 520 mg).
La amida intermediaria (0.52 g) en ácido acético (16 mi) se calentó a una temperatura de 65°C durante 5.5 horas, la mezcla de reacción se enfrió y se colocó bajo alto vacío para eliminar el ácido acético. El residuo se tomó en 70 mi de CH2CI2 y se lavó con porciones de 50 mi de NaHC03 saturado y una solución Na2C03 al 2%. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir una espuma. El material se colocó en alto vacío durante la noche y el residuo se purificó dos veces mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7NH al 4% en CH3OH/CH2CI2, segunda columna eluyendo con EtOH del 2 al 6% saturado con /NH3/CH2CI2) para producir el compuesto deseado (377 mg) 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.10 (s, 1 H), 7.63 (d, J = 1.66 Hz, 2 H), 7.21 (m, 1 H), 7.13 (d, J = 8.29Hz, 1 H), 6.62 (d, J = 3.32 Hz, 1 H), 6.54 (d, J = 2.07 Hz, 1 H), 6.43 (dd, J = 8.40, 2.38 Hz, 1 H), 4.96(m, 2 H), 4.65 (s, 2 H), 4.51 (m, 1 H), 3.84 (d, J = 1.04 Hz, 3 H), 3.76 (s, 3H), 2.99 (m, 0.5 H), 2.83 (m, 2 H), 2.66 (m, 0.5 H), 2.38 (m, 4 H), 2.22 (m, 1 H), 2.15 (d, J = 7.67 Hz, 3 H), 2.08 (m, 2 H), 2.00 (m, 2 H), 1.90 (m, 1 H), 1.84 (m, 1 H), 1.53 (s, 3 H), 1.46 (m, 1H), 1.29 (s, 3 H). (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5,6-dicloro-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se disolvió 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5,6-Dicloro-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (377 mg, 0.513 mmoles) en una mezcla de ácido trifluoroacético (7.1 mi) y agua (0.8 mi) la cual se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, posteriormente se templó y se continuó con la agitación durante 3 horas a temperatura ambiente. La suspensión se concentró y el residuo se tomó en 15 mi de MeOH y se concentró. Este procedimiento se repitió dos veces y el residuo se colocó en alto vacío. El material se tomó en 10 mi de MeOH (produjo una pasta) y se trató con 500 mg de K2C03 y 0.2 mi de agua. La mezcla se dejó agitar durante 1.5 horas, tiempo durante el cual el pH de la solución fue de ~9. La mezcla se filtró a través de un frit fino, los sólidos se lavaron con 20 mi de MeOH y el filtrado se concentró para producir un sólido color crema. El material se dejó en alto vacío durante la noche y se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7N 10 a 12% en CH3OH/CH2CI2) para producir el producto deseado (227 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) rjH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.63 (m, 2 H), 7.21 (dd, J = 3.63, 2.38 Hz, 1 H), 6.59 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.32 (m, 1 H), 3.88 (m, 1 H), 3.01 (m, 0.5 H), 2.84 (m, 2 H), 2.70 (m, 0.5 H), 2.51 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.26 (m, 2 H), 2.17 (d, J = 7.05 Hz, 3 H), 2.11 (m, 2 H), 2.02 (m, 1 H), 1.90 (m, 3 H), 1.62 (m, 1 H), 1.49 (m, 1 H).
Compuesto 24: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(2-amino-4-(trifluorometoxi)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (1.2 g, 3,2 mmoles) a una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (1.25 g, 2.10 mmoles) y N,N-Düsopropiletilamina (1.2 ml_, 6.9 mmoles) y 4-(trifluorometoxi)benceno-l ,2-diamina (0.48 g, 2,5 mmoles) en N , N-Dimetilformamida (10 mL). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente casi a 2 mis y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/ NH3 7N en MeOH 95:5) para producir el compuesto deseado (2 g) en la forma de un aceite.
N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il) etil)ciclobutil)amino)metil) tetra hid ro-3aH-ciclopenla[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(trifluorometoxi)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (2 g, 2 mmoles) en ácido acético (4 mi) se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo restante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 92:8) para proporcionar el compuesto deseado (1 g) en la forma de un sólido. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7 ((metil(3-(2-(5-(tr¡fluorometoxi)-1 H-benzo[d]im¡dazol-2 ¡l)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (20 mi) a una mezcla de agua (2 mi) y N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimet¡l-6-((met¡l(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]im¡dazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (1 g, 1 mmol) a temperatura ambiente.
La reacción se agitó durante 1.5 horas, posteriormente se extinguió con Trietilsilano (0.43 mi, 2.7 mmoles). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se purificó dos veces mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 87:13) para proporcionar el producto deseado (0.28 g) en la forma de una espuma. MS (ESI + ) para C27H32F3N7O3 m/z 560.2 [M + H] + ; MS (ESI ) para CzyHazFaNyOa m/z 558.2 [M-H]"; pureza HPLC >93% (tiempo de retención, 2.504 minutos). H RMN (400 MHz, d4-MeOH) DH 8.081 (s, 1H), 7.551 - 7.530 (m, 1H), 7.414 (s, 1H), 7.230 - 7.216 (m, 1H), 7.156 - 7.134 m, 1H), 6.621 - 6.613 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.362 - 4.326 (m, 1H), 3.952 -3.915 (m, 1H), 3.237 - 3.182 (m, 0.5H (metina de trans isómero), 2.927 - 2.857 (m, 2.5H (contiene metina de cis isómero)), 2.697 - 2.646 (m, 1H), 2.590 - 2.515 (m, 1H), 2.479 -2.408 (m, 1H), 2,343 -2.305 (m, 5H), 2.210 - 2.174 (m, 2H), 2.086 - 1.949 (m, 4H), 1.721 - 1.545 (m, 2H). Tiempo de retención: 2.52 minutos Condiciones 1HPLC: columna Agilent Zorbax Exlipse XDB-C18, 4.6 X 50 mm (empaque 1.8 um), Solvente A - Agua (0.1% TFA) , Solvente B - Acetonitrilo (0.07% TFA) gradiente 6 minutos de 5 a 95% B; 1 minuto de retención; posteriormente reciclar.
Compuesto 25: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol- 2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (0.84 g, 2.2 mmoles) a una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4- (dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanoico (0.89 g. 1.5 mmoles) y N , N-Diisopropiletilamina (0,84 mi, 4.8 mmoles) y 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (0.29 g, 1.8 mmoles) en N,N-Dimetilformamida (9 mi). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente aproximadamente a 2 mi y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 94:6) para proporcionar el compuesto deseado (0.88 g) en la forma de un sólido incoloro. Tiempo de retención C: 3.363 minutos. 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenla[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanamida (0.88 g, 1.2 mmoles) en ácido acético (3 ml_) se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C, los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo restante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 93:7) para proporcionar el compuesto deseado (0.85 g) en la forma de una espuma. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (20 mL) a una mezcla de agua (2 mL) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-c¡clopenta[d][1,3]d¡oxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0.85 g, 1,2 mmoles) a temperatura ambiente. La reacción se dejó proceder durante una hora, tiempo durante el cual se agregó trietilsi laño (0.37 mL, 2.3 mmoles). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomó en MeOH (3 mis). Se agregaron 1 mi de K2C03 (saturado) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se dividió entre H20 y DCM/MeOH (9:1). La capa acuosa se extractó (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 90:10) para producir el producto deseado (0.150 g) en la forma de una espuma color crema. MS (ESI + ) para C3iH43N7C>2 m/z 546.3 [M + H] + ; MS (ESP) para C3iH43N702 m/z 544.3 [M-H]"; pureza HPLC >91% (tiempo de retención, 2.734 minutos). 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) rjH 8.081 (s, 1H), 7.493 (s, 1H), 7,414 - 7.393 (m, 1H), 7,291 - 7.266 (m, 1H), 7.215 - 7.202 (m, 1H), 6.619 -6.609 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4,345 - 4.312 (m, 1H), 3.923 - 3.885 (m, 1H), 2.994 - 2.915 (m, 0.5 H (metina de trans isómero)), 2.860 - 2.793 (m, 2H), 2.701 - 2.578 (m, 3H), 2.501 - 2.380 (m, 2H), 2.259 - 2.234 (m, 2H), 2.109- 2.008 (m, 3H), 1.920 - 1.880 (m, 3H), 1.658 - 1.499 (m, 2H), 1.364 (s, 9H), 1.036-0.991 (m, 3H). Tiempo de retención: 2.734 minutos. Condiciones HPLC: columna Agilent Zorbax Exlipse XDB-C18, 4.6 X 50 mm (empaque 1.8 um), Solvente A - agua (0.1% TFA), Solvente B -Acetonitrilo (0.07% TEA). Gradiente 6 minutos de 5 a 95% B; 1 minuto de retención; posteriormente reciclar.
Compuesto 26: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimid¡n-7-il)-5-(((3-(2-(5-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(2-amino-4-bromofenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol- -il)uronio (1.20 g, 3.16 mmoles) a una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4- dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (1.25 g, 2.10 mmoles) y ?,?-Düsopropiletilamina (1.21 ml, 6.95 mmoles) y 4-bromobenceno- ,2-diamina (0.472 g, 2.53 mmoles) en ?,?-Dimetilformamida (13.0 ml). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente aproximadamente a 2 mis y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 95:5) para proporcionar el compuesto deseado (1.2 g) en la forma de un sólido. 7-((3aS, R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-bromo-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hid ro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4- amina Una solución de N-(2-amino-4-bromofenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (1.2 g, 1.6 mmoles) en ácido acético (4 mi, 70 mmoles) se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C, los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo restante se purificó directamente mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 91:9) para proporcionar (0.9 g) en la forma de una espuma. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5- romo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (20 mi) a una mezcla de agua (2 mi) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0.9 g, 1 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante una hora, se agregó trietilsilano (0.39 mi, 2.4 mmoles). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se purificó dos veces mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 87:13). El residuo se tomó en MeOH/H20 (5:0.5 mi) y se agregó K2C03 (100 mg). La mezcla se agitó durante 1 hora, posteriormente se concentró y purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 87:13) para proporcionar el producto deseado (0.15 g) en la forma de una espuma/goma color crema. Ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1 ,2-diol (0.15 g; 20%) en la forma de una espuma/goma color crema. MS (ESI + ) para CzeHasBrNyOj m/z 554.1 [M + H] + ; MS (ESI") para C26H32BrN702 m/z 552.1 [M-H]"; pureza HPLC >90% (tiempo de retención, 2.298 minutos). 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) GH 8.080 (s, 1H), 7.652 (s, 1H), 7.425 - 7.403 (m, 1H), 7.342 - 7.7.312 (m, 1H), 7.232 -7.217 (m, 1H), 6.620 - 6.611 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.358 -4.318 (m, 1H), 3.928 - 3.888 (m, 1H), 3.099 - 3.039 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 2.898 - 2.829 (m, 2H), 2.777 - 2.726 (m, 0.5H (metina de cis isómero)), 2.580 - 2.529 (m, 1H), 2.453 - 2.397 (m, 2H), 2.307 -2.141 (7H), 2.068 - 2.017 (m, 1H), 1.955 - 1.891 (m, 3H), 1.695 - 1.506 (m, 2H).
Compuesto 27: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((isopropil(3-(2-(5-(1-metílc¡clobutil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((isopropil(3-(2-(5-(1 -m eti I ciclo b u til )- 1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Una solución de 5'-{[3-(2-carboxietil)ciclobutil](isopropil)amino}-5'-desoxi-2',3'-0-isopropilidenoadenosina (0.463 g, 0.976 mmoles) y 4-(1-metilciclobutil)benceno-1 ,2-diamina (0.184 g, 1.04 mmoles) en N,N-Dimetilformamida (10 mi), se enfrió a una temperatura de 0°C.
La solución se trató con ?,?-Diisopropiletilamina (0.462 mi, 2.65 mmoles) en forma de gotas seguido de Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotr¡azol-1-il)uronio (0.367 g, 0.965 mmoles) en una porción. La mezcla se agitó a una temperatura de 0°C durante 1 hora, posteriormente se templó lentamente a temperatura ambiente. Después de 5 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se almacenó en el refrigerador durante la noche, la mezcla de reacción se colocó bajo alto vacío. El vidrio resultante se tomó en 30 mi de H20 y se extractó con una porción de 30 mi de MeOH/EtOAc al 10%. La fase acuosa se extractó en forma adicional con una porción de 30 mi de EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con porciones de 25 mi de NaHC03 saturado y salmuera y se secaron sobre Na2S0 . La mezcla se filtró y concentró para proporcionar un vidrio/espuma (700 mg). El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, 4 a 5% NH3 7N en MeOH/CH2CI2) para proporcionar la amida intermediaria (pureza -80%, 390 mg).
Se tomó la amida intermediaria (110 mg, 0.174 mmoles) en 4 mi de ácido acético y la solución se calentó a una temperatura de 65°C. La mezcla de reacción se enfrió y los volátiles se eliminaron bajo alto vacío para producir un vidrio. El producto crudo se tomó en 25 mi de CH2CI2, y se lavó con 20 mi de NaHC03 saturado y una solución de Na2CC>3 al 2%, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para proporcionar una espuma rígida/vidrio. El material crudo se purificó mediante TLC de preparación (Si02, eluyendo con NH3 7N al 7% en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el producto deseado en la forma de una espuma rígida (54 mg). Este procedimiento anterior se repitió (excepto que la purificación fue mediante cromatografía instantánea, Si02 eluyendo con NH3 7N 4 a 5% en CH3OH/CH2CI2) en un lote adicional de la amida intermedia (389 mg) para producir 368 mg adicionales del compuesto deseado que se combinó con el bencimidazol anterior. (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((isopropil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1H-benzo[d]im¡dazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Se disolvió 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((isopropil(3-(2-(5-(1 -metilciclobutil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il) etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hid roturo [3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (422 mg, 0.686 mmoles) en una mezcla de ácido trifluoroacético (6.3 mi, 82 mmoles) y agua (0.7 mi, 40 mmoles), la cual se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, tiempo en el cual el lote de hielo se eliminó y la mezcla se templó a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas, momento en el cual se tomó en 12 mi de MeOH, se concentró hasta secarse. Esto se repitió dos veces, el vidrio resultante se colocó bajo alto vacío, el residuo crudo se diluyo con 11 mi de MeOH, se trató con 600 mg de K2C03 y 0.5 mi de H20 y se dejó agitar a temperatura ambiente hasta que la solución fue básica tal como se determina mediante papel de pH. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con 20 mi de MeOH. La solución se concentró hasta obtener un residuo que se colocó bajo alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH37N 10 a 12% en CH3O H/C H2CI2) para producir el compuesto deseado en la forma de una espuma rígida/vidrio (256 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.30 (m, 1 H), 8.20 (d, J = 1.04 Hz, 1 H), 7.38 (d, J = 8.09 Hz, 1 H), 7.22 (br. s., 1 H), 6.98 (dd, J = 8.50, 1.66 Hz, 1 H), 5.96 (m, 1 H), 4.74 (t, J = 4.87 Hz, 1 H), 4.27 (d. J = 3.11 Hz, 1 H), 4.08 (m, 1 H), 3.56 (m, 1 H), 3.13 (m, 1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.90 (dd, J = 14.51, 4.35 Hz, 1 H), 2.75 (m, 3 H), 2.41 (m, 2 H), 2.12 (m, 5 H), 2.00 (m, 1 H), 1.84 (m, 3 H), 1.58 (m, 1 H), 1.46 (s, 3 H), 1.02 (m, 3 H), 0.95 (d, J = 6.63 Hz, 3 H).
Compuesto 28 (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((isopropil((1 r,3S)-3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Los diastereómeros se separaron mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un polvo color blanco (132 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.38 (d, J = 8.09 Hz, 1 H), 7.22 (s, 1 H), 6.99 (dd, J = 8.40, 1.55 Hz, 1 H), 5.96 (d, J = 4.56 Hz, 1 H), 4.73 (m, 1 H), 4.26 (t, J = 5.29 Hz, 1 H), 4.07 (m, 1 H), 3.13 (m, 1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.90 (dd, J = 14.41, 4.46 Hz, 1 H), 2.76 (t, J = 7.15 Hz, 2H), 2.70 (m, 1 H), 2.42 (m, 2 H), 2.18 (m, 2 H), 2.11 (m, 3 H), 1.85 (m, 4 H), 1.57 (q, J = 8.85 Hz, 2 H), 1.47 (s, 3 H), 1.02 (d, J=6.84 Hz, 3 H), 0.95 (d, J = 6.63 Hz, 3 H) .
Compuesto 29: ( R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol (1-metilc¡clobutil)benceno Se enfrió a una temperatura de 0°C una mezcla agitada de benceno (5.0 mi, 56 mmoles) y ácido sulfúrico (1.17 mi, 21.9 mmoles) y se trató en forma de gotas con una solución de Metilenociclobutano (1.00 mi, 10.8 mmoles) en Benceno (3.0 mi, 34 mmoles) durante 1 hora. Al término de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora adicional mientras se templó a temperatura ambiente. La mezcla se extractó con 15 mi de hexano. La fase orgánica se lavó con 10 mi de H20 y 10 mi de NaHC03 saturado, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir un líquido incoloro. El líquido se purificó mediante destilado de Kugelrohr (5 a 10 torr) para producir el compuesto deseado en la forma de un líquido incoloro. La primera fracción se recolectó a una temperatura de 75 a 85°C en la forma de un líquido incoloro (330 mg) de producto en la forma de un líquido incoloro. 1-(1 -metilciclobutil) -4 -nitro benceno Se agregó en forma de gotas durante 60 minutos ácido nítrico al 70% (7:3, ácido nítrico: Agua, 0.375 mi, 5.92 mmoles), a una solución de (1 -metilciclobutil)benceno (346 mg. 2.37 mmoles) en anhídrido acético (1.4 mL, 15 mmoles) y se enfrió a una temperatura de 0°C. La temperatura de la solución se mantuvo debajo de 5°C durante la adición. Al término de la adición, la reacción se agitó durante 60 minutos con enfriamiento. La mezcla de reacción se vertió en 40 mi de agua de hielo y el hielo se dejó derretir. La fase acuosa se extractó con tres porciones de 20 mi de Et20 y la fase orgánica combinada se lavó con 25 mi de H20, seguido de dos porciones de 20 mi de una solución NaHC03 saturada. La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para producir el producto ligero en la forma de un aceite (418 mg), el cual se utilizó tal como está en el siguiente paso. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d ppm 8.16 (d. J = 8.71 Hz, 2 H), 7.29 (d, J = 8.71 Hz, 2 H), 2.41 (m, 2 H), 2.15 (m, 3 H), 1.88 (m, 1 H). 1.48 (s, 3 H) 4-(1-metilciclobutil)anilina Una solución de 1 -(1 -metilciclobutil)-4-nitrobenceno (708 mg, 3.70 mmoles) en Etanol (24 ml_, 410 mmoles) se trató cuidadosamente con 5% de Pd sobre carbono (87 mg. 0.041 mmoles). El frasco de reacción se evacuó y se llenó con gas de hidrógeno tres veces y la mezcla de reacción se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 19 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de solka floc® y la almohadilla se lavó con 25 ml_ de EtOH. El solvente se eliminó para producir un aceite el cual se colocó bajo alto vacío brevemente para producir el compuesto deseado (609 mg) el cual se utilizó directamente en el siguiente paso. H RMN (400 M HZ, CDCI3) d ppm 6.99 (m, 2 H), 6.66 (m, 2 H), 3.39 (br. s., 2 H), 2.35 (m, 2 H), 2.05 (m, 3 H), 1.82 (m, 1 H), 1.42 (s, 3H). 2,2,2-trifluoro-N-(4-(1-metilciclobutil)-2-nitrofenil)acetamida Se trataron 4-(1 -Metilciclobutil)anilina (500 mg, 2.79 mmoles) y Nitrato de Amonio (220 mg, 2.8 mmoles) con anhídrido trifluoroacético (1.97 mL, 14.0 mmoles) seguido de Cloroformo (10 mL, 120 mmoles). La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente hasta durante 5 horas, tiempo en el cual todos los sólidos se habían disuelto. La mezcla de reacción se vertió en 50 mi de H20 y se extractó con tres porciones de 25 mi de CH2CI2. La fase orgánica se lavó con 10 mL de NaHC03 saturado, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró hasta obtener un aceite. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 2.5 a 3.5% de éter etílico/hexano) para proporcionar el compuesto deseado (800 mg). 4-(1-metilciclobutil)-2-nitroanilina Una solución de 2,2,2-trifluoro-N-[4-(1 -metilciclobutil)-2-nitrofeniljacetamida (580 mg. 1.9 mmoles) en Metanol (18 mi, 440 mmoles) se trató con una solución de carbonato de potasio (788 mg, 5.70 mmoles) en agua (4.5 mi, 250 mmoles) y la mezcla se calentó a una temperatura de 45°C durante 50 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se eliminó en metanol in vacuo. La fase acuosa restante se diluyó con 10 mi de H20 y se extractó con tres porciones de 20 mi de EtOAc. La fase orgánica combinada se secó sobre Na2S0 , se filtró y concentró para producir un aceite. El material se colocó en alto vacío, en donde se solidificó para proporcionar el compuesto deseado (400 mg). El material se utilizó directamente en el siguiente paso. 1H RMN (400 MHz. CDCI3) d ppm 7.90 (d, J = 2.07 Hz, 1 H), 7.23 (dd, J = 8.50, 2.28 Hz, 1 H), 6.77 (d, J = 8.71 Hz, 1 H), 5.96 (br. s., 2 H), 2.33 (m, 2 H), 2.13 (m, 1 H), 2.04 (m, 2 H), 1.84 (m, 1 H), 1.43 (s, 3H). 4-(1-metilciclobutil)benceno-1,2-diamina Una solución de 4-(1 -metilciclobutil)-2-nitroanilina (138 mg. 0.668 mmoles) en etanol (8.5 ml_, 140 mmoles) se trató cuidadosamente con paladio sobre carbono al 10% (14.2 mg, 0.0134 mmoles) en la forma de una pasta en etanol. El frasco de reacción se evacuó y se llenó con gas de hidrógeno tres veces, y la mezcla de reacción se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 4 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Solka Floc®, y la almohadilla se lavó con 20 mi de MeOH. El filtrado se concentró para producir un aceite el cual se colocó bajo alto vacío para producir el compuesto deseado en la forma de un sólido (119 mg) el cual se utilizó directamente en el siguiente paso. H RMN (400 MHZ. CDCI3) üH ppm 6.66 (m, 1 H), 6.53 (m, 2 H), 3.34 (br. s., 4 H), 2.33 (m, 2 H), 2.08 (m, 1 H), 1.99 (m. 2 H). 1.80 (m, 1H), 1.42 (s, 3 H).
N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-d¡metil-6-((metil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1 H-benzo[d.]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (387 mg, 0.652 mmoles) y [8]4-(1 -metilciclobutil)benceno-1 ,2-diamina (120 mg, 0.68 mmoles) en N ,N-Dimetilformamida (6.7 mi, 87 mmoles) se trató con N ,?-Düsopropiletilamina (0.38 mi, 2.2 mmoles) en forma de gotas seguido de Hexafluorofosfato de ?,?,?',?'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (372 mg, 0.978 mmoles) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas, la mezcla de reacción posteriormente se concentró bajo alto vacío. El residuo se dividió entre 40 mi de EtOAc (se agregó parte de CH2CI2 para ayudar a la solubilización del producto) y 40 mi 1/1 H20/NaHC03 saturado. La fase acuosa se extractó con 30 mi 1/1 EA/CH2CI2 y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (S¡02, eluyendo con 5 a 6% NH3 7N en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el intermediario deseado en la forma de una mezcla de regioisómeros de amida.
El intermediario se tomó en ácido acético (5.4 mi, 95 mmoles) y la solución se calentó a una temperatura de 65°C durante 3 horas. El ácido acético se eliminó bajo alto vacío con la ayuda de un baño de agua caliente. El producto crudo se tomó en 30 mi de CH2CI2 y la fase orgánica se lavó con porciones de 10 mi de NaHC03 saturado y soluciones K2C03 al 2%, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para obtener un vidrio el cual produjo una espuma bajo alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02 eluyendo con NH3 7N al 5% en CH3OH/CH2CI2 para producir el producto deseado (140 mg). (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimid¡n-7-i ((metil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1 H-benzo[d]im¡dazol-2 il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se disolvió N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(1 -metilciclobutil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil) tetra hidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-4-amina (128 mg, 0.17 4 mmoles) en una mezcla de Ácido Trifluoroacético (3 .60 mi, 46.7 mmoles) y agua (0.4 mi, 20 mmoles) el cual se había calentando previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, posteriormente se eliminó el baño de hielo y la mezcla se templó a temperatura ambiente, y a esta temperatura se mantuvo durante 2.5 horas adicionales. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se tomó en 3 mi de MeOH y se concentró y el proceso se repitió dos veces. El residuo blanco resultante se colocó sobre alto vacío. El residuo crudo se combinó con otro lote de material crudo (preparado en forma idéntica, ~ 1/3 de la cantidad utilizada en esta reacción), se diluyó con 5 ml_ de MeOH, se trató con 140 mg de K2C03, 10 gotas de H20 y se dejó agitar a temperatura ambiente hasta que la solución se consideró básica a través del papel pH. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con 15 mi de MeOH. La solución se concentró hasta obtener un aceite que se colocó en alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 10 a 15% de NH3 7N en CH3OH/CH2CI2 para producir el producto deseado en la forma de una espuma rígida/vidrio (68 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) ? H ppm 8 06 (s, 1 H), 7.39 (d, J = 7.88 Hz, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 7.21 (dd, J = 3.63, 1.76 Hz, 1 H), 6.99 (m, 1 H), 6.60 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.93 (m, 1 H), 4.32 (m, 1 H), 3.89 (m, 1 H), 3.03 (m, 1 H), 2.83 (m, 2 H), 2.70 (q, J = 8.15 Hz, 1 H), 2.52 (m, 1 H), 2.40 (m, 4 H), 2.27 (m, 2H), 2.18 (d, J = 6.22 Hz, 3 H), 2.11 (m, 4 H), 2.03 (m, 1 H), 1.86 (m, 4 H), 1.62 (m, 1 H), 1.51 (m, 1 H), 1.47 (s, 3H).
Compuesto 30: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil((1r,3S)-3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Se separaron los diastereómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un polvo color blanco (67 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.27 (S, 1 H), 8.20 (S, 1 H), 7.38 (d, J = 8.29 Hz, 1 H), 7.22 (br. s., 1 H), 6.99 (dd, J = 8.40, 1.55 Hz, 1 H), 5.97 (d, J = 4.15 Hz, 1 H), 4.69 (dd, J = 5.18, 4.15 Hz, 1 H), 4.22 (t, J = 5.60 Hz, 1 H), 4.16 (m, 1 H), 2.77 (m, 2 H), 2.72 (d, J = 8.09 Hz, 1 H), 2.67 (m, 2 H), 2.42 (m, 2 H), 2.21 (m, 2 H), 2.15 (s, 3 H), 2.10 (m, 3 H), 1.85 (m, 4 H), 1.47 (s, 3 H), 1.46 (m, 2 H).
Compuesto 31: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- ((isopropil((1 s,3R)-3-(2-(5-(1 -metilciclobutil)-1 H- benzo[d]imidazol-2- il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Se separaron los diastereómeros mediante SFC. El material se descubrió como el trans diastereómero mediante RMN. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un polvo color blanco. (63 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.31 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.38 (d, J = 8.29 Hz, 1 H), 7.22 (s, 1 H), 6.99 (dd, J = 8.29, 1.66 Hz, 1 H), 5.97 (d, J = 4.56 Hz, 1 H), 4.74 (m, 1 H), 4.27 (t, J = 5.39 Hz, 1 H), 4.09 (m, 1 H), 3.53 (m, 1 H), 3.01 (m, 1 H), 2.93 (dd, J = 14.72. 4.35 Hz, 1 H), 2.80 (t, J = 7.46 Hz, 2H), 2.73 (dd, J = 14.51, 7.46 Hz, 1 H), 2,42 (m. 2 H), 2.13 (m, 5 H), 2.01 (m, 3 H), 1.82 (m, 3 H), 1.47 (s, 3 H), 1.02 (d, J = 6.63 Hz, 3 H), 0.95 (d, J = 6.63 Hz, 3 H). Compuesto 32:(1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diastereómeros fueron separados mediante SFC. Las condiciones que se describen más adelante produjeron 120 mg. Método de Preparación: IC (2 x 15 cm), 35% isopropanol (0.2% DEA))/C02, 100 bar, 60 mL/min, 220 nm., volumen de inyección: 0.75 mL, 4 mg/mL metanol Pico 1: 5.27 minutos. 1 H RMN (400 MHz, d4-MeOH) DH 8.080 (s, 1H), 7.495 (s, 1H), 7.417 - 7.395 (m, 1H), 7.303 - 7.281 (m, 1H), 7.220 - 7.212 (m, 1H), 6.619 -6.610 (m, 1H), 4.349 - 4.315 (m, 1H), 2.837 - 2.802 (m, 2H), 2.718 - 2.641 (m, 1H), 2.508 - 2.365 (m, 3H), 2.284 - 2.258 (m, 3H), 2.156 (s, 3H), 1.954 - 1.906 (m, 1H), 1.549 - 1.460 (m, 2H), 1.375 (s, 9H).
Compuesto 33: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil(3-(2-(5-(1 -metilciclobutil)-1 H-benzo[d]im¡dazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol 9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1H-benzo[d]imidazol-2- ¡l)et¡l)ciclobutil)am¡no)metil)tetrah¡drofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-¡l)-9H-pu rin-6-amina Se enfrió a una temperatura de 0°C una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimet¡ltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (0.461 g, 1.03 mmoles) y 4-(1 -metilciclobutil)benceno-1 ,2-diamina (0.150 g, 0.851 mmoles) en N , N-Dimetilformamida (11 mi, 140 mmoles). La solución se trató con N,N-Diisopropiletilamina (0.489 mi, 2.81 mmoles) en forma de gotas seguido de Hexafluorofosfato de N.N.N'.N'-Tetrametil-O-ÍT-azabenzotriazol-l-i uronio (0.388 g, 1.02 mmoles) en una porción. La mezcla se agitó a una temperatura de 0°C durante 30 minutos, posteriormente se templó lentamente a temperatura ambiente, se continuó con la agitación a temperatura ambiente durante 6 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 30 mi de H20 y se extractó con porciones de 25 mi de MeOH/EtOAc al 10%. La fase acuosa se extractó en forma adicional con dos porciones de 20 mi de EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con porciones de 25 mi de NaHC03 saturado, salmuera y se secó sobre Na2S04. La solución se filtró y concentró para producir un vidrio. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7N al 5% en MeOH/CH2CI2.
Se tomó la amida intermediaria en ácido acético (7.0 mi, 120 mmoles) y la solución se calentó a una temperatura de 65°C durante 2.5 horas, la mezcla de reacción se enfrió y el ácido acético se eliminó bajo alto vacío para producir un vidrio. El producto crudo se tomó en 25 mi de CH2CI2, y se lavó 20 mi de NaHC03 saturado, una solución Na2C03 al 2%, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró in vacuo para producir una espuma rígida/vidrio. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7N 5 a 7% en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el compuesto deseado (214 mg). (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Se disolvió 9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (188 mg, 0.320 mmoles) en una mezcla de Ácido Trifluoroacético (4.00 mi, 51.9 mmoles) y agua (0.4 mi, 20 mmoles) la cual se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C. La reacción se agitó durante 30 minutos a una temperatura de 0°C, posteriormente el baño de hielo se eliminó y la mezcla se templó a temperatura ambiente en donde se continuó la agitación durante 2 horas adicionales. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se tomó en 10 mi de MeOH y se concentró y el proceso se repitió dos veces. El vidrio resultante se colocó bajo alto vacío durante 1 hora. El residuo crudo se diluyó con 7 mi de MeOH, se trató con 150 mg de K2C03 y 10 gotas de H20 y se dejó en agitación a temperatura ambiente hasta que la solución se consideró básica a través de un papel de pH. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con 10 mi de MeOH. La solución se concentró hasta obtener un residuo que se colocó bajo alto vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con NH3 7N 10 a 15% en CH3OH/CH2CI2) para proporcionar el compuesto deseado en la forma de una espuma rígida/vidrio (66%). 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.28 (m, 1 H), 8.20 (m, 1 H), 7.38 (d, J = 8.29 Hz, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 7.00 (dd, J = 8.40, 1.55 Hz, 1 H), 5.98 (t, J = 3.21 Hz, 1 H), 4.70 (m, 1 H), 4.24 (q, J = 5.18 Hz, 1 H), 4.17 (m, 1 H), 3.10 (m, 0.4 H), 2.80 (m, 3 H), 2.71 (d, J = 5.60 Hz, 2 H), 2.43 (m, 2 H), 2.23 (dd, J = 11.71, 6.12 Hz, 1 H), 2.19 (m, 3 H), 2.12 (m, 4 H), 1.99 (m, 1 H), 1.85 (m, 4 H), 1.48 (s, 3H), 1.48 (m, 1 H).
Compuesto 34: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil((1s,3R)-3-(2-(5-(1-metilciclobutil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Los diastereómeros se separaron mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un polvo color blanco (30 mg) 1H RMN (400 MHz, MeOD) DH ppm 8.28 (s, 1 H), 8.19 (s, J = 4.15 Hz, 1 H), 4.69 (m, 1 H), 4.23 (t, J = 5.49 Hz, 1 H), 4.17 (m, 1 H), 3.07 (m, 1 H), 2.81 (t, J = 7.57 Hz, 2 H), 2.68 (m, 2 H), 2.42 (m, 2H), 2.17 (s, 3 H), 2.09 (m, 6 H), 1.97 (m, 2 H), 1.84 (m, 3 H), 1.47 (s, 3 H). 35: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)- 5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diasterómeros se separaron siguiendo la separación SFC (120 mg).
Método de Preparación: IC (2 x 15 cm), 35% isopropanol (0.2% DEA))/C02, 100 bar, 60 mL/min, 220 nm., volumen de inyección: 0.75 ml_, 4 mg/mL metanol. Pico 2: 6.24 minutos. 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) DH 8.078 (s, 1H), 7.501 (s, 1H), 7.422 - 7.401 (m, 1H), 7.310 -7.285 (m, 1H), 7.228 - 7.219 (m, 1H), 6.618 - 6.609 (m, 1H), 4.355 - 4.320 (m, 1H), 3.053 -2.977 (m, 1H), 2.874 - 2.836 (m, 2H), 2.535 - 2.268 (m, 4H), 2.177 -2.003 (m, 8H), 1.909 -1.869 (m, 2H), 1.677 - 1.595 (m, 1H), 1.381 (s, 9H).
Compuesto 36:(1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-N)-5-((metil((1 r,3S)-3-(2-(5-(1 -metilciclobutil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)met¡l)ciclopentano-1 ,2-diol Los diastereoisómeros se separaron mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un sólido color blanco (15 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) rjH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.38 (d, J = 8.09 Hz, 1 H), 7.23 (br. s., 1 H), 7.20 (d, J = 3.32 Hz, 1 H), 6.99 (m, 1 H), 6.60 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.95 (m, 1 H), 4.31 (t, J = 6.74 Hz, 1 H), 3.88 (m, 1 H), 2.81 (m, 2 H), 2.66 (m, 1 H), 2.40 (m, 5 H), 2.25 (m, 3 H), 2.14 (br. s., 3 H), 2.11 (m, 3 H), 1.91 (m, 2 H), 1.83 (m, 1 H), 1.61 (m, 1 H), 1.51 (m, 1 H), 1.47 (s, 3 H).
Compuesto 37: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil((1 r,3S)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diastereómeros se separaron mediante SFC. La liofilización produjo el producto deseado en la forma de un sólido incoloro (0.060 g). 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) DH 8.079 (s, 1H), 7.546 -7.524 (m, 1H), 7.409 (s, 1H), 7.226 - 7.217 (m, 1H), 7.150 - 7.124 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.355 - 4.320 (m, 1H), 3.912 - 3.885 (m, 1H), 2.881 - 2.845 (m, 2H), 2.727 -2.674 (m, 1H), 2.538 - 2.262 (m, 6H), 2.172 (s, 3H), 1.955 -1.916 (m, 3H), 1.670 - 1.492 (m, 3H).
Compuesto 38: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diastereoisomeros se separaron mediante SFC. Después de la liofilización , se recuperó el producto deseado en la forma de un c olido incoloro (32 mg).
Método de Preparación: Lux-3 (2 x 15 cm), 30% etanol (0.2% DEA))/C02, 100 bar, 65 mL/min, 220 nm., volumen de inyección: 0.4 ml_, 6.2 mg/mL metanol. 1H RMN (400 MHz, d - MeOH) DH 8.082 (s, 1H), 7.493 (s, 1H), 7.415 - 7.393 (m, 1H), 7.295 - 7.270 (m, 1H), 7.215 - 7.206 (m, 1H), 6.621 - 6.612 (m, 1H), 4.343 - 4.309 (m, 1H), 3.924 - 3.897 (m, 1H), 3.044 - 2.962 (m, 1H), 2.834 - 2.798 (m, 2H), 2.728 - 2.695 (m, 1H), 2.660 - 2.607 (m, 2H), 2.543 - 2.380 (m, 2H), 2.281 - 2.257 (m, 3H), 1.932 - 1.906 (m, 3H), 1.660 - 1.523 (m, 3H), 1.368 (s, 9H), 1.050 - 1.014 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
Compuesto 39: (1 R>2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-5-((metil((ls,3R)-3-(2-(5-(l-metilciclobutil)- 1H-benzo[d]imidazol-2- il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol separaron los diastereoisómeros mediante SFC. material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un polvo color blanco (19 mg). 1H R N (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1 H), 7.39 (d, J = 8.50 Hz, 1 H), 7.21 (m, 2 H), 6.99 (dd, J = 8.29, 1.45 Hz, 1 H), 6.59 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.94 (m, 1 H), 4.32 (dd, J = 7.77, 5.91 Hz, 1 H), 3.89 (m, 1H), 3.00 (m, 1 H), 2.83 (t, J = 7.57 Hz, 2 H), 2.49 (m, 1 H), 2.38 (m, 4 H), 2.23 (m, 1 H), 2.16 (s. 3 H), 2.11 (m, 5 H), 2 01 (m, 2 H), 1.84 (m. 3 H), 1.61 (m , 1 H), 1.46 (s, 3 H).
Compuesto 40: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡mid¡n-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclopropilmetil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un polvo color blanco (45 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (d, J = 8.29 Hz, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.20 (d, J = 3.73 Hz, 1 H), 6.60 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J = 7.36, 6.12 Hz, 1 H), 3.90 (m, 1 H), 3.06 (m, 1H), 2.81 (t, J = 6.84 Hz, 2 H), 2.74 (m, 1 H), 2.55 (dd, J = 12.75, 7.77 Hz, 1 H), 2.41 (m, 1 H), 2.37 (d, J = 6.84 Hz, 2 H), 2.29 (m, 3 H), 1.91 (m, 3 H), 1.60 (m, 1 H) , 1.50 (m, 2 H), 1.36 (s, 9 H) , 0.87 (m, 1 H), 0.48 (d, J = 8.09 Hz, 2 H), 0.10 (m, 2 H).
Compuesto 41: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC seguido de lofilización a partir de H20/MeOH/CH3CN para producir un polvo color blanco (100 mg). 1H RMN (400 M Hz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.20 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 6.60 (m, 1 H), 4.32 (t, J = 6.43 Hz, 1 H), 3.93 (t, J = 5.29 Hz, 1 H), 3.54 (m, 0.2 H), 3.1 1 (t, J = 9.33 Hz, 1 H), 3.02 (m , 1 H), 2.82 (m, 2 H), 2.66 (dd, J = 13.68, 8.09 Hz, 1 H), 2.46 (m, 1 H), 2.36 (m, 1 H), 2.23 (m, 3 H), 2.05 (m, 1 H), 1.91 (m, 3 H), 1.59 (m, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.02 (m , 6 H). Compuesto 42: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Paso 1: 3-((1 S,3r)-3-((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]p¡rimidin-7-il)- 2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo tomó 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-dimetoxibencil)amino]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-2,2-dimeti I tetra hidro -3a H-ciclopenta[d ][1,3]dioxol-4-il]metil}amino)ciclobutil]propanoatoa de etilo de amina (1.8 g, 3.0 mmol) en metanol (20 ml_, 600 mmol) y se agregó cianoborohidruro de sodio (0.37 g, 5.9 mmol). El pH se ajustó aproximadamente a 6 utilizando una solución al 10% de AcOH en metanol, posteriormente se agregó ciclobutanocarboxaldehído (0.32 g, 3.8 mmol) en una porción. La reacción se dejó proceder durante 5 horas, tiempo en el cual HPLC indicó que la reacción había sido detenido. Se agregaron otros 1.3 equivalentes de ciclobutanocarboxaldehído, y la reacción continuó durante la noche. Se agregó NaHC03 (saturado) a la mezcla de reacción, la cual posteriormente se extractó 3 veces con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y se concentraron para obtener una resina color amarillo. Los cis y trans isómeros se pudieron separar sobre sílice. La purificación mediante FC (DCM/ NH37N en MeOH 96:4) produjo 2 lotes separados del producto, cada uno enriquecido en un isómero respectivo en aproximadamente al 90%. Isómero superior: 0.38 g (mezcla 11:1, cis) Isómero inferior: 0.31 g (mezcla 6:1, trans). MS (ESI + ) para C35H49N5O6 m/z 616.1 [M + H] + ; pureza HPLC > 69% (tiempo de retención, 3.791).
Paso 2: N-(2-amino-5-(ter-butil)fenil)-3-((1 S.S -a- ciclobutilmetilM aaR^R.eR.eaSJ-e-^-^^-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida Isómero superior (cis): Se agregó monohidrato de hidróxido de litio (0.236 g, 5.62 mmol) a una solución de 3-((1 S,3r)-3-((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (6 mL, 70 mmol) y metanol (1.5 mL, 37 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y al siguiente día el material de partida se consumió y se había transformado en el ácido. La reacción se acidificó con HCI 1N a pH = 6. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilado azeotrópico con etanol seguido de 72 horas en el liofilizador. El sólido color crema resultante se utilizó sin purificación adicional. Tiempo de retención: 3.330 minutos MS (ESI + ) para 03ß?49?50ß m/z 648.4 [M + H]+; MS (ESI") para C36H49 506 m/z 646.4 [M-H]~; pureza HPLC > 97% (tiempo de retención, 3.329).
Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (0.334 g, 0.880 mmol) se agregó a una solución de ácido 3-{cis-3- [(ciclobutilmetil){[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-dimetoxibencil)amino]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]metil}amino]ciclobutil}propanoico (0.38 g, 0.59 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0.337 ml_, 1.94 mmol) y 4-ter-butilbenceno-1,2-diamina (0.116 g, 0.704 mmol) en N,N-dimetilformamida (3.63 ml_, 46.9 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, y a la siguiente mañana el material de partida se había consumido. La reacción se concentró parcialmente hasta aproximadamente 2 mLs y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc 3 veces y los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante FC (DCM/N H3 7N en MeOH 95:5) para producir N-(2-amino-5-(ter- butil)fenil)-3-((1 S,3r)-3-((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencM)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida (0.30 g; 64%) en la forma de un sólido amorfo color morado-café. Pureza HPLC >19% (tiempo de retención, 3.574 minutos).
Paso 3 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)c¡clobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-ter-butilfenil)-3-{cis-3-[(ciclobutilmetil){[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-dimetoxibencil)amino]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]metil}amino]ciclobutil}propanamida (0.3 g, 0.4 mmol) en ácido acético (1.0 ml_, 20 mmol) se agitó durante la noche a una temperatura de 65°C, y a la siguiente mañana se consumió el material de partida. Los volátiles se eliminaron ¡n vacuo y el residuo resultante se purificó mediante FC (DCM/NH3 7N en MeOH 93:7) para producir 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2- (5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2- il)etil)c¡clobut¡l)(ciclobutilmetil)amino)metil)-2,2- dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4- dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina en la forma de un sólido color crema. MS (ESI + ) para C46H61N7O4 m/z 111.1 [M + H] + ; pureza HPLC >64% (tiempo de retención, 3.690 minutos).
Paso 4: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il)-5-((((1 r,3S)-3-(2-(5-(tór-butil)-1 H-benzo[d] im idazol-2- il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetíl)amino)metil)ciclopentano- 1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (5 ml_, 60 mmol) a una mezcla de agua (0.5 ml_, 20 mmol) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6- ((((1 r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2- il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)-2,2- dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4- d¡metoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0.2 g, 0.2 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se dejó proceder durante la noche, tiempo en el cual la suspensión color rosa brillante se extinguió con trietilsilano (0.082 ml_, 0.52 mmol). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomó en metanol (15 mis). Se agregaron 500 mgs de K2C03 y 8 gotas de H20 y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con 10 mLs de metanol. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó mediante FC (DCM/NH3 7N en MeOH 90:10) para producir (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2- ¡l)etil)ciclobutil)(c¡clobutilmetil)amino)met¡l)c¡clopentano-1,2-diol (0.037 g; 20%) en la forma de un sólido incoloro. MS (ESI+) para C34H47N702 m/z 586.3 [M + H] + ; pureza HPLC >89% (tiempo de retención, 2.970 min.) 1H R N (400 MHz, d4-MeOH) d? 8.083 (s, 1H), 7.498 (s, 1H), 7.417 -7.396 (m, 1H), 7.302 - 7.277 (m, 1H), 7.206 - 7.197 (m, 1H), 6.621 - 6.612 (m, 1H), 4.347 -4.314 (m, 1H), 3.912 - 3.885 (m, 1H), 2.973 - 2.922 (m, 1H), 2.836 -2.800 (m, 2H), 2.662 -2.366 (m, 6H), 2.282 - 2.241 (m, 3H), 2.061 - 2.034 (m, 2H), 1.912 - 1.494 (m, 10H), 1.374 (s, 9H).
Compuesto 43: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirim¡din-7-¡l)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol 3-(3-(c¡clobut¡l(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirirnidin-7 dimetil tetra hidro-3aH-ciclopen ta [d][1,3]díoxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Se tomó 3-(3-(((3aR,4R,6R>6aS)-6-(4((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pir¡m¡d¡n-7-¡l)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][13]d¡oxo1 -4- il)metil)amiiio)ciclobutil)propanoato (0.84 g, 1.4 mmol) en metanol (10 mi) y se agregó cianoborohidruro de sodio (0.087g, 1.4 mmol). El pH se ajustó a aproximadamente a 6, utilizando una solución de AcOH al 10% en MeOH, posteriormente se agregó en una porción de ciclobutanona (0.15 mi, 2,1 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. Se agregó NaHC03 (saturado) a la mezcla de reacción, la cual posteriormente se extractó (3x) con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El material se utilizó sin purificación adicional. Ácido 3-(3-(ciclobutil(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibenc¡l)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetil tetra hidro-3aH-ciclopen ta [d][1, 3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoico Se agregó monohidrato de hidróxido de litio (0.58 g, 14 mmol) a una solución de 3-(3-(ciclobutil(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (0.91 g, 1.4 mmol) en Tetrahidrofurano (12 mi, 150 mmol) y Metanol (3 mi, 60 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, en donde se acidificó con HCI 1 N a un pH =6. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilado azeotrópico con el etanol seguido de 18 horas en el liofilizador. El sólido color crema resultante se utilizó sin purificación adicional.
N-(2-amino-4-(ter-butM)fenM)-3-(3-(c¡clobutil(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó hexafluorofosfato de N,N,N'.N'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (0.783 g, 2.06 mmol) a una solución de ácido 3-(3-(ciclobutil(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoico (0 .87 g, 1.4 mmol) y N,N-Diisopropiletilamina (0.789 mi, 4.53 mmol) y [8)4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (0 .270 g, 1.65 mmol) en N,N-Dimetilformamida (8.50 mi). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, en donde la mezcla se concentró parcialmente aproximadamente a 2 mis, y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 95:5) para proporcionar el compuesto deseado (0, 76 g) en la forma de un sólido. 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-bulil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobulil)(ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetil tetra hidro-3aH-ciclopenla[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2 ,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-(ciclobutil(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida (0.76 g, 0,97 mmol) en ácido acético (2 mi), se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo restante se purificó directamente mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 91:9) para proporcionar el compuesto deseado (0.61 g) en la forma de una espuma. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (1.0 mi, 200 mmol) a una mezcla de agua (1 mi, 80 mmol) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(c¡clobutil)am¡no)met¡l)-2,2-dimet¡ltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-4-am¡na (0,61 g, 0.80 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó o/n a temperatura ambiente y se extinguió mediante la adición de Trietilsilano (0.26 mi, 1.6 mmol), Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo se tomó en MeOH (15 mis), 500 mg K2C03 y se agregaron 8 gotas de agua y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con MeOH (10 mi). El filtrado se concentró y el residuo resultante purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 90:10) para proporcionar el producto deseado (0.13 g) en la forma de una espuma incolora. MS (ESI + ) para Caa^sNyOz m/z 572.2 [M + H] + ; MS (ESI") para C33H45N7O2 m/z 570.2 [M-H]-; pureza HPLC >90% (tiempo de retención, 2.850 min.) 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) d? 8.083 (s, 1H), 7.492 (s, 1H), 7.412 - 7.392 (m, 1H), 7.309 - 7.286 (m, 1H), 7.220 - 7.205 (m, 1H), 6.620 - 6.610 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.321 -4.283 (m, 1H), 3.888 - 3.848 (m, 1H), 3.505 - 3.417 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 3.231 - 3.147 (m, 0.5H) (metina de cis isómero)), 3.051 - 2,953 (m, 1H), 2.871 - 2.732 (m, 3H), 2.583 - 2.501 (m, 1H), 2.441 - 2.368 (m, 1H), 2.244 -2.205 (m, 3H), 2.170 - 1.833 (m, 1.695 - 1.560 (m, 4H), 1.384 (s, 9H).
Compuesto 44: (1 R,2S,3RJ5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclopropilmetil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol 3-(3-((ciclopropilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetil tetra hidro-3aH-ciclopen ta [d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo El 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4- dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]piriniidin-7-il)-2,2-d¡metiltetrahidro-3aH-cyclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo de amina (0.90 g, 1.5 mmol) se tomó en Metanol (10 ml_) y se agregó cianoborohidruro de sodio (0.093 g, 1.5 mmol). El pH se ajustó aproximadamente a 6 utilizando una solución de AcOH al 10% en MeOH. La reacción se agitó o/n a temperatura ambiente. Se agregó NaHC03 (saturado) a la mezcla de reacción, la cual se extractó posteriormente (3x) con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El material se utilizó sin purificación adicional.
Acido 3-(3-((ciclopropilmet¡l)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoico Se agregó monohidrato de hidróxido de litio (0.62 g, 15 mmol) a una solución de 3-(3- ((ciclopropilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (0 .98 g, 1,5 mmol) en Tetrahidrofurano (13 mi) y Metanol (3 mi). La reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente, se acidificó con HCI 1 N a un pH = 6. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilado azeotrópico con etanol seguido de 18 horas en el liofilizador. El sólido color crema resultante se utilizó sin purificación adicional.
N-(2-amino-4-(ter-butil)fen¡l)-3-(3-((ciclopropilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (0.846 g, 2.22 mmol) a una solución de de 3-(3-((ciclopropilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4- dimetoxibencM)amino)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoico (0 .94 g, 1.5 mmol) y ?,?-Diisopropiletilamina (0.852 mL, 4.89 mmol) y [8]4-ter-butilbenceno- ,2-diamina (0.292 g, 1.78 mmol) en N,N-Dimetilformamida (9.19 ml_, 119mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente aproximadamente a 2 mis y se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM /NH3 7N en MeOH 95:5) para proporcionar el compuesto deseado (0.92 g) en la forma de un sólido. 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclopropilmetil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3- ((ciclopropilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-¡l)metil)am¡no)c¡clobut¡l)propanamida (1.1 g, 1.4 mmol) en ácido acético (5 mi) se calentó durante la noche a una temperatura de 60°C durante la noche. La solución se concentró y purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/ NH3 7N en MeOH 93:7) para producir el compuesto deseado (0.57 g) en la forma de una espuma incolora. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclopropilmetil)amino)metil)ciclopentano-1,2- Se agregó ácido trifluoroacético (10 ml_) a una mezcla de agua (1 ml_) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclopropilmetil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4- dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (O .52 g, 0.68 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y se agregó trietilsilano (0.22 mL, 1.4 mmol). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomaron en MeOH (15 mis), 500 mgs de K2C03 y se agregaron 8 gotas de H20 y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con 10 mi de MeOH. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/N H3 7N en MeOH 90:1 0) para proporcionar el producto deseado (0.196 g) en la forma de una espuma color crema. MS (ES*) para C33H45N702 m/z 572.6 [M + H] + ; MS (EST) para C33H45N702 m/z 570.3 [M-H] + ; pureza HPLC >90% (tiempo de retención, 2.850 minutos). H RMN (400 MHz, d4-MeOH) d? 7.944 (s, 1H), 7.361 (s, 1H), 7.280 - 7.259 (m, 1H), 7.172 - 7.150 (m, 1H), 7.092 - 7.078 (m, 1H), 6.484 -6.475 (d, J =3.6 Hz, 1H), 4.222 - 4.185 (m, 1H), 3.815 -3.779 (m, 1H), 3.329 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 2.961 (m, 0.5H (metina de cis isómero), 2.745 - 2.627 (m, 3H), 2.503 -2.450 (m, 1H), 2.301 - 2.187 (m, 5H), 2.036 - 1.890 (m,2H), 1.793-1.776 (m,3H), 1.529 - 1.385 (m, 2H), 1.246 (s, 9H), 0.808 -0.739 (m, 1H), 0.394 - 0.362 (m, 2H), 0.012 - 0.013 (m, 2H). Tiempo de retención: 2.850 minutos. Condiciones HPLC: Agilerit Zorbax Exlipse columna XDB-C18, 4.6 X 50 mm (1,8 um empaque), Solvente A-Agua (0.1% TFA) , Solvente B-Acetonitrilo (0.07% TFA) 6 minutos de gradiente de 5 a 95% B; 1 minuto de retención; posteriormente reciclado.
Compuesto 45: 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim¡din-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 , 3]dioxol-4-il)metil)(isobutil)amino)ciclobutil)propanoato Se tomó 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[23-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo de amina (1.7 g, 2.8 mmol) en Metanol (20 mi) y se agregó cianoborohidruro de sodio (0.35 g, 5.6 mmol). El pH se ajustó aproximadamente a 6 utilizando una solución de AcOH al 10% en MeOH, posteriormente se agregó en una porción isobutiraldehído (0.33 mi, 3.6 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Se agregaron otros 1.3 equivalentes de isobutiraldehído y se continuó con la agitación durante la noche. Se agregó NaHC03 (saturado) a la mezcla de reacción, la cual se extractó posteriormente (3x) con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS04 y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 97:3) para proporcionar el compuesto deseado (1.75 g) en la forma de una espuma incolora. Ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH- ciclope n ta [d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isobutil)amino)ciclobutil)propanoico Se agregó monohidrato de hidróxido de litio (1.11 g, 26.4 mmol) a una solución de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isobutil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (1.75 g, 2.64 mmol) en Tetrahidrofurano (13 mi, 160 mmol) y Metanol (3 mi, 70 mmol). La reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente, se acidificó con HCI 1 N a un pH = 6, los volátiles se eliminaron ¡n vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilado azeotrópico con el etanol seguido de 18 horas en el liofilizador. El sólido color crema resultante se utilizó sin purificación adicional.
N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4- il)metil)(isobutil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazo]-1 -il)uron¡o (1.52 g, 4.01 mmol) a una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo [23-d]pirimid¡n-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isobutil)amino)ciclobutil)propanoico (1.7 g, 2.7 mmol) y N , N-Diisopropiletilamina (1.54 mi, 8.82 mmol) y 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (0 ,527 g, 3.21 mmol) en N,N-Dimetilformamida (16.6 mi). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se concentró parcialmente aproximadamente 2 mis y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). Posteriormente la mezcla se extractó con EtOAc 3x y los orgánicos combinados se secaron con MgS04 se filtraron, concentraron, purificaron mediante cromatografía instantánea (DCM/ NH3 7N en MeOH 95:5) para producir la amida deseada (1.71 g) en la forma de un sólido. 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isobutil)amino)metil>-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetilteti"ahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isobutil)amino)ciclobutil)propanoamida (1.71 g, 2.19 mmol) en ácido acético (6 mi) se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C, los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo restante se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, DCM/NH3 7N en MeOH 94:6) para producir el compuesto deseado (0.9 g) en la forma de una espuma. (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (20 mi, 300 mmol) a una mezcla de Agua (2 mi, 100 mmol) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isobutil)am¡no)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxíbencil)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidm-4-amina (0.9 g, 1 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante la noche y se agregó trietilsilano (0.38 mi, 2.4 mmol). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomó en MeOH (15 mi), 500 mgs de K2C03 y se agregaron 8 gotas de H20 y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con 10 mi de MeOH. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 90:1 0) para producir el producto deseado (0.274 g) en la forma de una espuma color crema. MS (ESI + ) para C33H47N7O2 m/z 574.6 [M + H] + ; MS (ES ) para C33H45N702 m/z 572.4 [M-H]"; pureza HPLC >86% (tiempo de retención, 2.918 minutos). 1H RMN (400 MHz, d4- eOH) d? 8.078 (s, 1H), 7.497 (s, 1H), 7.416 - 7.396 (m, 1H), 7.305 - 7.284 (m, 1H), 7.216 - 7.200 (m, 1H), 6.621 -6.612 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.368 - 4.334 (m, 1H), 3.930 - 3.894 (m, 1H), 2.934 - 2.918 (m, 1H), 2.866 - 2.797 (m, 2H), 2.652 -2.583 (m, 1H), 2.444 - 2.361 (m, 2H), 2.287 - 2.199 (m, 2H), 2.166 - 2.119 (m, 3.5H (contiene metina de trans isómero)), 2.048 - 2.012 (m, 1H), 1.921 - 1.748 (m, 3.5H (contiene metina de cis isómero)), 1.622 - 1.494 (m, 2H), 1.380 (s, 9H), 1.269 -1.252 (m, 1H), 0.932 - 0.879 (m, 6H).
Compuesto 46: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un polvo color blanco (23.7 mg). 1H RMN (400 MHZ, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (d. J = 8.71 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J = 8.60, 1.76 Hz, 1 H), 7.19 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 6.60 (d. J = 3.52 Hz, 1 H), 4.84 (m, 1 H), 4.28 (dd, J = 7.26, 6.22 Hz, 1 H), 3.84 (t, J = 5.70 Hz, 1 H), 3.16 (m, 1 H), 2.99 (m,l H), 2.80 (t, J = 7.15 Hz, 2 H), 2.73 (dd, J = 13.68, 6.22 Hz, 1 H), 2.49 (dd, J = 13.68, 7.67 Hz, 1 H), 2.38 (m, 1 H), 2.22 (m, 3 H), 2.00 (m, 4H), 1.91 (m, 3 H), 1.60 (m, 5 H), 1.36 (s, 9 H).
Compuesto 47: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-bromo-1 H- benzo[d]¡midazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un polvo color blanco (21 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s. 1 H), 7.63 (br. s., 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.30 (dd, J = 8.50, 1.66Hz, 1 H), 7.20 (d. J = 3.52 Hz, 1 H), 6.60 (d, J = 3.52 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J = 7.67, 6.01 Hz, 1 H). 3.88(m, 1 H), 2.82 (t, J = 7.15 Hz, 2 H), 2.71 (m, 1 H), 2.52 (m, 1 H), 2.41 (m , 2H), 2.25 (m, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 2.03 (m, 1 H), 1.92 (m, 3 H), 1.62 (m, 1 H), 1.51 (m, 2 H).
Compuesto 48:(1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((ls,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. Después de la liofilización se obtuvieron (78 mg) de un sólido incoloro, Compuesto 49:(1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC.
Lux-3 (2 x 15 cm), 30% etanol (0.2% DEA))/C02, 100 bar, 65 mL/min, 220 nm. Volumen de inyección: 0.4 ml_, 6.2 mg/mL metanol. 1H RMN (400 MHz, d4- eOH) d? 8.081 (s, 1H), 7.499 (s, 1H), 7.416 - 7.395 (m, 1H), 7.308 - 7.282 (m, 1H), 7.226 -7.216 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.344 - 4.310 (m, 1H), 3.922 - 3.895 (m, 1H), 3.410 - 3.329 (m, 1H), 2.875 - 2.837 (m, 2H), 2.738 - 2.689 (m, 1H), 2.659 - 2.607 (m, 2H), 2.535 - 2.483 (m, 1H), 2.452 - 2.380 (m, 1H), 2.311 - 2.224 (m, 1H), 2.158 -2.121 (m, 3H), 2.061 - 2.030 (m, 2H), 1.913 - 1.863 (m, 2H), 1.674 - 1.590 (m, 1H), 1.381 (s, 9H), 1.056 - 1.020 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
Compuesto 50: (1 R,2S,3R,5R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol 3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Se tomó 3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2 ,3- d¡hidroxiciclopent¡l)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo de amina (1.5 g, 2.5 mmol) en Acetonitrilo (66 mL) y se agregaron yoduro de isopropilo (2.5 mL, 25 mmol) y trietilamina (5.2 mL, 37 mmol). La reacción se calentó a una temperatura de 80°C durante 12 horas. Se agregaron otros 15 eq. De TEA y otros 15 eq de iPrl, y la reacción continuó durante 8 horas adicionales. Se agregaron otros 15 equivalentes de cada uno de iPrl y TEA y se continuó con el calentamiento durante la noche. La reacción se concentró y se agregaron Na2S03 saturado (20 mi) y DCM (20 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extractó en forma adicional 3 veces más, los orgánicos combinados se secaron y purificaron mediante cromatografía instantánea (Si02, DC /NH3 7N en MeOH 97:3).
El residuo obtenido se disolvió en 30 mi de DCM y se lavó con 20 mi de Na2S03 saturado y 10 ms NaOH 1 N. La capa acuosa se extractó con DCM 3 veces, los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 y el solvente se eliminó para producir el producto deseado (1.3 g) en la forma de una espuma/sólido, ácido (3-((((1 R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico Se agregó monohidrato de hidróxido de litio (0.838 g, 20.0 mmol) a una solución de ácido 3-(3(3-((((1 R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)met¡l)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico de etilo (1.3 g, 2.0 mmol) en Tetrahidrofurano (30 mi, 300 mmol) y Metanol (6.5 mi, 160 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se acidificó con HCI 1 N a un pH = 6. Los volátiles se eliminaron ¡n vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilación azeotrópico con etanol seguido de liofilización. El sólido resultante se utilizó sin purificación adicional.
N-(2-amino-4-(ter-butil)fen¡l)-3-(3-((((1 R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-dimetoxibencil)amino)-9H-purin-9-il)-2,3-dihidroxiciclopentil)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamid a Se agrego hexafluorofosfato de N,N,N',N'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (1.19 g, 3.13 mmol) a una solución de ácido 3-{3-[{[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{6-[(2,4-dimetoxibencil)amino]-9H-purin-9-il}-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]metil}{isopropil)amino]ciclobutil}propanoico (1.30 g, 2.09 mmol) y N , -Diisopropiletilamina (1.20 mi, 6.89 mmol) y 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (0.411 g, 2.50 mmol) en N,N-Dimetilfomiamida (12.9 mi). La reacción se agitó durante 2 horas, se agregó NaHC03 (saturado) y la mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM -> DCM/NH3 7N en MeOH 95:5) para producir la amida deseada (1.4 g) en la forma de un sólido. 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro- 3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-9H- rin-6-amina -amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((1 R,2R,3S,4R)-4-(6 ((2,4-d¡metox¡bencil)am¡no)-9H-purin-9-M)-2,3-d¡h¡droxiciclopentil)metil)(isopropil)amino)c¡clobutil)propanamid a (1.4 g, 1.8 mmol) en ácido acético (5 mi, 90 mmol) se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C. La reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM -> DCM/N H3 7N en MeOH 94:6) para producir el compuesto deseado (0.91 g) en la forma de una espuma. (1 R,2S,3R,5R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-(((3-(2-(5-ter-butil)1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (1 0 mi, 100 mmol) a una mezcla de agua (1 mi, 60 mmol) y 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2- M)etil)ciclobutil)(isopropM)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2 ,4-dimetoxibencil)-9H-purin-6-amina (0.91 g, 1.2 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Posteriormente la reacción se calentó a una temperatura de 35°C y se agregó trietllsilano (0.39 mi, 2.4 mmol). La reacción se agitó a una temperatura de 35°C durante 2 días adicionales. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomó en MeOH (15 mis). Se agregaron 500 mgs de K2C03 y 8 gotas de H20, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con 10 mis de MeOH. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 90:10) para proporcionar el producto deseado (0.142 g) en la forma de un sólido incoloro después de varios días de liofilización .
Compuesto 51: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC (25 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1H), 7.48 (br. s., 1H), 7.38 (d, J = 7.88 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 8.60, 1.55 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 3.73 Hz, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 3.85 (t, J = 5.60 Hz, 1H), 3.41 (m, 1H), 3.17 (m, 1H), 2.83 (t, J = 7.36 Hz, 2H), 2.74 (dd, J = 13.68, 6.63 Hz, 1H), 2.51 (dd, J = 13.79, 7.57 Hz, 1H), 2.38 (m, 1H), 2.18 (m, 3H), 2.09 (m, 1H), 2.02 (m, 5H), 1 83 (m, 2H), 1.60 (m, 3H), 1.36 (s, 9H).
Compuesto 52: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5,6-dicloro-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un sólido color crema (64 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1H), 7.63 (s, 2H), 7.20 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.73 Hz, 1H), 4.32 (dd. J = 7.88, 6.01 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 5.60, 4.77 Hz, 1H), 2.82 (t, J = 7.26 Hz, 2H), 2.69 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 2.38 (m, 2H), 2.24 (m, 3H), 2.15 (s, 3H),1.91 (m, 3H), 1.61 (m, 1 H), 1.50 (m, 2H).
Compuesto 53: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1R,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diastereoisómeros se separaron mediante SFC. Después de la liofilización se recuperó un sólido incoloro (85 mg)-Compuesto 54: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimid¡n-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2- ¡l)etil)ciclobutil)(ciclopropilmetil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diastereoisómeros se separaron mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un polvo color blanco (53 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1H), 7.48 (br. s., 1H), 7.39 (d, J = 8.50 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 8.60, 1.76 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 4.32 (dd, J = 7.67, 5.80 Hz, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.44 (m, 1H), 2.84 (t, J = 7.57 Hz, 2H), 2.78 (dd, J = 13.27, 7.05 Hz, 1H), 2.58 (dd, J = 13.06, 7.67 Hz, 1H), 2.40 (m, 3H), 2.11 (t, J = 6.22 Hz, 3H), 2.02 (m, 2H). 1.87 (m, 2H), 1.62 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 0.87 (m, 1H), 0.49 (m, 2H), 0.12 (m, 2H).
Compuesto 55: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-bromo-1 H-benzo[d]im¡dazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. 1H RMN (400 MHZ, MeOD) d? ppm 8.05 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.39 (m, 1H), 7.30 (dd, J = 8.50, 1.66 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.73 Hz, 1H), 4.32 (dd, J = 7.77, 5.91 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 5.70, 4.66 Hz, 1H), 2.99 (m. 1H), 2.84 (t, J = 7.57 Hz, 2H), 2.48 (m, 1H), 2.41 (dd, J = 7.98, 4.87 Hz, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.10 (m. 3H), 2.01 (m, 2H), 1.86 (t. J = 8.19 Hz, 2H), 1.61 (m, 1H).
Compuesto 56: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((isopropil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(2-amino-4-(trifluorometoxi)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-d¡metox¡bencil)am¡no)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim¡din-7-il)-2,2-dimetiltetrah¡dro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida Se agregó hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (1.19 g, 3.14 mmol) a una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[23-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetil tetra hidro -3aH-ciclopenta[d ][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (1,3 g. 2.1 mmol) y N,N-Di-isopropiletilamina (1,20 mL, 6.90 mmol) y 4-(trifluorometoxi)benceno-l ,2-diamina (0.482 g, 2.51 mmol) en N,N-Dimetilformam¡da (13.0 mL, 167 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y se concentró parcialmente aproximadamente a 2 mis, y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc (3x) y los orgánicos combinados se secaron con MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 95:5) para obtener la amida deseada (1.4 g) en la forma de un sólido.
N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((isopropil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se calentó en AcOH durante la noche a una temperatura de 60°C, N-(2-amino-4-(trifluorometoxi)fen¡l)-3-(3- ((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H pirrolo[2,3-d]p¡rim¡din-7-¡l)-2,2-d¡met¡ltetrah¡dro-3aH-c¡clopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida (1.4 g, mmol). La mezcla de reacción se concentró in vacuo proporcionar el producto crudo. (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5- ((isopropil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifluoroacético (10 ml_, 100 mmol) a una mezcla de agua (1 mL, 60 mmol) y N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((isoprop¡l(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)am¡no)met¡l)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0.91 g, 1.2 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, posteriormente se extinguió mediante la adición de trietilsilano (0.37 mL, 2.3 mmol). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomó en MeOH (15 mis). Se agregaron 500 mgs de K2C03 y 8 gotas de H20 y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con 10 mis de MeOH. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía instantánea (DCM/NH3 7N en MeOH 90:10) para producir el producto deseado (0.232 g) en la forma de una espuma color crema. MS (ESI + ) para C29H36F3N7O3 m/z 588.2 [M + H] + ; MS (ESI') para C^HgeFgNyOs m/z 586.2 [M-H]'; pureza HPLC >90% (tiempo de retención, 2.570 min.) 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) d? 8.082 & 8.079 (s, 1H, traslape de picos debido a cis y trans isómeros), 7.554-7.524 (m, 1H). 7.414 (s, 1H), 7.225-7.209 (m, 1H), 7.155-7.127 (m, 1H), 6.618-6.609 (m, 1H), 4.363-4.323 (m, 1H), 3.976-3.932 (m, 1H), 3.606-3.524 (m, 0.5H (metina de trans isómero)), 3.156-3.110 (m, 0.5 H (metina de cis isómero), 3.089-3,006 (m, 1H), 2.731-2.679 (m, 1H), 2.544-2.360 (m, 2H), 2.256-2.239 (m, 3H), 2.093-2.061 (m, 2H), 1.987-1.861 (m, 3H), 1.648-1.568 (m, 2H), 1.072-1.006 (m, 6H). Compuesto 57: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil((1s,3R)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. El material se liofilizó para proporcionar un sólido (78 mg). 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) d? 8.076 (s, 1H), 7.548-7.527 (m, 1H), 7.414 (s, 1H), 7.227-7.218 (m, 1H), 7.148-7.123 (m, 1H), 6.616-6.607 (m, 1H), 4.361-4.327 (m, 1H), 3.926-3.899 (m, 1H), 3.037-3.000 (m, 1H), 2.907-2.870 (m, 2H), 2.538-2.283 (m, 4H), 2.178-2.013 (m, 8H), 1.913-1.872 (m, 2H), 1.680-1.599 (m, 1H). Compuesto 58: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5,6-dicloro-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Los diastereoméros se separaron mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un polvo color marrón (73 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1H), 7.64 (s, 2H), 7.21 (d, J = 3.73 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 4.32 (dd, J = 7.77, 6.12 Hz, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.01 (m, 1H), 2.86 (t, J = 7.67 Hz, 2H), 2.51 (m, 1H), 2.40 (m, 2H), 2.27 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (m, 3H), 2.02 (q, J = 6.43 Hz, 2H),1.88 (t, J = 8.19 Hz, 2H), 1.63 (m, 1H).
Compuesto 59: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)c¡clopentano-1,2-diol Paso 1: 3-((1 R,3s)-3-((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim¡d¡n-7-M)-2,2-dimet¡ltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 , 3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo Se agregó 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-dimetoxibenc¡l)am¡no]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}amino)ciclobutil]propanoato de etilo de amina (1.8 g, 3.0 mmol) en metanol (20 ml_, 600 mmol) y se agregó cianoborohidruro de sodio (0.37 g, 5.9 mmol). El pH se ajustó aproximadamente a 6 utilizando una solución al 10% de AcOH en metanol, posteriormente se agregó en una porción ciclobutanocarboxaldehído (0.32 g, 3.8 mmol). La reacción se dejó proceder durante 5 horas, tiempo en el cual la HPLC indicó que la reacción se había detenido. Se agregaron otros 1.3 equivalentes de ciclobutanocarboxaldehído, y la reacción continuó durante la noche. Se agregó NaHC03 (saturado) a la mezcla de reacción, la cual posteriormente se extractó 3 veces con DCM. Los orgánicos combinados se secaron con MgS0 y se concentraron hasta obtener una resina color amarilla. Los cis y trans isómeros se pudieron separar sobre sílice. La purificación mediante FC (DCM/NH37N en MeOH 96:4) produjo 2 lotes de productos separados, cada uno enriquecido en un isómero respectivo hasta aproximadamente 90%. Isómero superior: 0.38 g (mezcla 5:1, cis), Isómero inferior: 0.31 g (mezcla 7:1, trans). MS (ESI + ) para C35H49N5O6 m/z 676.7 [M + H] + ; pureza HPLC > 69% (tiempo de retención, 3.791).
Paso 2: N-(2-amino-5-(ter-butil)fenil)-3-((1 R,3s)-3- ((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4- dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2- dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d] [1 , 3] di oxo I -4- il)metil)amino)ciclobutil)propanamida Isómero Inferior (trans): Se agregó monohidrato hidróxido de litio (0.192 g, 4.59 mmol) a una solución de ((1 R,3s)-3-((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-¡l)metil)amino)ciclobut¡l)propanoato de etilo (0.31 g, 0.46 mmol) en tetrahidrofurano (6 ml_, 70 mmol) y metanol (1.5 ml_, 37 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y a la mañana siguiente el material de partida se había consumido, y se había transformado en el ácido. La reacción se acidificó con HCI 1N a pH = 6. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el agua restante se eliminó mediante destilado azeotrópico con etanol seguido de 24 horas de liofilización . El sólido color crema resultante se utilizó sin purificación adicional. Pureza HPLC > 94% (tiempo de retención, 3.344).
Se agregó hexafluorofosfato de N , N , N', N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (0.273 g, 0.718 mmol) a una solución de ácido 3-{trans-3-[(ciclobutilmetil){[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-dimetoxibencil)amino]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il}-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il]metil}amino]ciclobutil}propanoico (0.31 g, 0.48 mmol) y N,N-di-isopropiletilamina (0.275 mL, 1.58 mmol) y 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (0.0943 g, 0.574 mmol) en N,N-dimetilformamida (2.96 mL, 38.3 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, y a la mañana siguiente el material se había consumido. La reacción se concentró parcialmente aproximadamente a 2 mis, y posteriormente se agregó NaHC03 (saturado). La mezcla se extractó con EtOAc 3 veces, y los orgánicos combinados se secaron con MgS0 y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante FC (DCM/NH37N en MeOH 95:5) para producir N-(2-amino-5-(ter-butil)fenil)-3-((1 R,3s)-3- ((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida (0.29 g; 76%) en la forma de un sólido amorfo color morado-café. Pureza HPLC >20% (tiempo de retención, 3.650 min.) Paso 3: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se agitó durante la noche a una temperatura de 65°C una solución de -amino-5-(ter-butil)fenil)-3-((1 R,3s)-3- ((ciclobutilmetil)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanamida (0.3 g, 0.4 mmol) en ácido acético (1.0 ml_, 20 mmol), y a la mañana siguiente el material se había consumido. Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se purificó mediante FC (DCM/NH3 7N en MeOH 93:7) para producir 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1 s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolot2,3-d]pirimidin-4-am¡na, en la forma de un sólido color crema. Pureza HPLC >73% (tiempo de retención, 3.709 min).
Paso 4: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se agregó ácido trifl uoroacético (5 mL, 70 mmol) a una mezcla de agua (0.5 mL, 30 mmol) y 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6- ((((1 s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2 ,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0.23 g, 0.30 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se dejó proceder durante la noche, tiempo en el cual la suspensión rosa brillante se extinguió con trietilsilano (0.095 ml_, 0.59 mmol). Los volátiles se eliminaron in vacuo y el residuo resultante se tomó en MeOH (15 mis). Se agregaron 500 mgs de K2C03 y 8 gotas de H2O, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se filtró y la pasta del filtro se lavó con 10 mLs de metanol. El filtrado se concentró y el residuo resultante se purificó mediante FC (DCM/N H3 7N en MeOH 90:10) para producir (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(ciclobutilmetil)amino)metil)c¡clopentano-1,2-diol (0.018 g, 10%) en la forma de un sólido incoloro. MS (ESI + ) para C34 H47N702 m/z 586.4 [M + H] + ; pureza HPLC >93% (tiempo de retención, 2.070 min.) 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) d? 8.083 (s, 1H), 7.501 (s, 1H), 7.421-7.400 (m, 1H), 7.315-7.290 (m, 1H), 7.218-7.209 (m, 1H), 6.621-6.612 (m, 1H), 4.350-4.317 (m, 1H), 3.930-3.903 (m, 1H), 3.403-3.367 (m, 1H), 2.880-2.843 (m, 2H), 2.722-2.360 (m, 6H), 2.323-2.241 (m, 2H), 2.173-1.606 (m, 13H), 1.387 (s, 9H).
Compuesto 60: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-M)-5-((isopropil((1 r,3S)-3-(2-(5-(trif luorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. Después de la liofilización, se recuperó un sólido incoloro (62 mg).
Compuesto 61: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((isoprop¡l((1s,3R)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se separaron los diastereoisómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para producir un polvo color crema (89 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.71 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.19 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 7.12 (m, 1H), 6.59 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 3.94 (t, J = 5.39 Hz, 1H), 3.52 (m, 1H), 3.01 (m, 1H), 2.87 (t, J = 7.15 Hz, 2H), 2.68 (dd, J = 13.48, 7.88 Hz, 1H), 2.47 (dd, J = 13.27, 7.46 Hz, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.21 (m, 3H), 2.04 (m, 3H), 1.84 (m, 2H), 1.58 (m, 1H), 1.02 (d, J = 6.63 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.43 Hz, 3H).
Compuesto 62: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol N-(4-(oxetan-3-il)fenil)acetamida Se pesaron en un frasco de reacción para microondas, ácido (4-Acetamidofenil)borónico (670 mg, 3. 7 mmol), yoduro de níquel (II) (35 mg, 0.11 mmol), trans-2-aminociclohexanol (17 mg, 0.11 mmol), y hexametildisilazano de sodio (690 mg, 3.7 mmol). El septo se colocó sobre la parte superior, el nitrógeno se purgó y se agregó alcohol isopropílico (5.7 mi, 75 mmol). El frasco se purgó con nitrógeno durante 10 minutos y se agregó 3-yodo-oxetano (344 mg, 1.87 mmol) en 0.75 mi de alcohol isopropílico. El septo se reemplazó con una tapa de frasco para microondas, y la mezcla se calentó en un reactor de microondas (condiciones de microondas: reactor de microondas CEM Discovery Explorer; Tiempo de elevación: 10 min; 80°C durante 30 min; potencia: 300 W). La mezcla de reacción cruda se diluyó con 8 mi de EtOH y la suspensión se filtró a través de una almohadilla de solka floc®. La almohadilla se lavó con 35 mi de EtOH y el filtrado se concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 40% a 60% EtOAc/CH2CI2) para proporcionar el producto deseado en la forma de un aceite (200 mg).
N-(2-nitro-4-(oxetan-3-il)fenil)acetamida Se agregó cuidadosamente ácido sulfúrico (9.4 mi, 180 mmol) a 70% de ácido nítrico (7:3, Ácido nítrico:Agua, 11 mi, 170 mmol) que se enfrió a una temperatura de 0°C durante aproximadamente 5 a 10 minutos. La mezcla se agitó durante 10 minutos a una temperatura de 0°C, posteriormente se dejó templar a temperatura ambiente, mediante la eliminación de un baño de hielo. La solución de ácido se transfirió a un embudo de separación y se agregó cloruro de metileno (20 mL, 300 mmol). El embudo se agitó durante 5 minutos, y las fases se dejaron separar.
La fase orgánica (fase superior) se aisló y el proceso se repitió con 20 mi de CH2CI2 adicionales. Los extractos orgánicos se combinaron, se asumió que la fase orgánica contenía aproximadamente 5 g (-80 mmol) de HN03 anhidro. Utilizando un exceso de 50 veces, esto requirió aproximadamente 25 mi de solución. La solución de ácido nítrico se enfrió en un baño de hielo. Se trató la N-(4-oxetan-3-ilfenil)acetamida (210 mg, 0.70 mmol) con 25 mi de una solución enfriada de HN03/CH2CI2 y se dejó agitar durante aproximadamente 30 minutos. La mezcla de reacción se vertió cuidadosamente en 45 mi de una solución de NH OH al 10% y se agitó cuidadosamente. Las fases se separaron y la fase acuosa se lavó con 20 mi de CH2CI2. La fase orgánica combinada se secó sobre Na2S0 , se filtró y concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 25% a 35% de EtOAc/CH2CI2) para producir el producto deseado en la forma de un sólido (170 mg). 2-nitro-4-(oxetan-3-il)anilina Se calentó una suspensión de N-(2-nitro-4-oxetan-3- ilfenil)acetamida (125 mg, 0.529 mmol) en hidrazina acuosa (8 mi, 160 mmol) a una temperatura de 70°C durante 2 horas, la mezcla de reacción se enfrió a una temperatura de 45°C y se eliminó la hidrazina in vacuo para producir un sólido. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 20% de EtOAc/CH2CI2 para producir el producto deseado (71 mg). 4-(oxetan-3-il)benceno-1 ,2-diamina Una solución de 2-nitro-4-oxetan-3°-ilanilina (91 mg, 0.47 mmol) en etanol (6.1 mi) se trató cuidadosamente con paladio sobre carbono al 10% (10 mg, 0.009 mmol) en la forma de una pasta en etanol. El frasco de reacción se evacuó y se llenó con gas de hidrógeno tres veces, y la reacción se dejó agitar bajo una atmósfera de hidrógeno durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de solka floc® y la almohadilla se lavó con 25 mi de MeOH. El filtrado se concentró para producir un aceite, el cual se solidificó bajo alto vacío durante la noche para proporcionar el compuesto deseado (72 mg). El material se utilizó como en el siguiente paso. 1H RMN (400 MHZ, CDCI3) d? ppm 6.81 (d, J = 1.52 Hz, 1H), 6.70 (m, 2H), 5.02 (dd, J = 8.34, 5.81 Hz, 2H), 4.74 (m, 2H), 4.09 (m, 1H), 3.45 (br. s., 2H), 3.37 (br. s., 2H).
N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim¡din-4-amina Una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2 ,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 , 3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (250 mg, 0.42 mmol) y 4-oxetan-3-ilbenceno-1 ,2-diamina (72 mg, 0.44 mmol) en N,N-Dimetilformamida (4.3 mi, 56 mmol) se trató con ?,?-Di-isopropiletilamina (0.24 mi, 1.4 mmol) en forma de gotas, seguido de Hexafluorofosfato de N,N,N',N'-Tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1 -il)uronio (240 mg, 0.632 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas, tiempo en el cual la mezcla de reacción se concentró bajo alto vacío. El residuo se dividió entre 30 mi de EtOAc (parte de MeOH se agregó para ayudar a la solubilización del producto) y 30 mi de 1/1 H20/NaHC03 saturado. La fase acuosa se extractó con 30 mL de EtOAc y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró hasta obtener una espuma rígida/vidrio. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 6% a 7% de NH3 7N en CH3OH/CH2CI2. Se encontraron dos grupos de productos, un par menos polar y un par más polar que corresponde a los 2 regio-isómeros. Cada regio-isómero se procesó por separado en el siguiente paso.
Se tomó la amida (130 mg) en 5 mi de ácido acético glacial y se calentó a una temperatura de 65°C durante 2.25 horas, la reacción se enfrió y colocó en el refrigerador durante la noche. El ácido acético se eliminó bajo alto vacío con la ayuda de un baño de agua templada. Los dos lotes de producto crudo se tomaron en 30 mi de CH2CI2, y la fase orgánica se lavó con porciones de 10 mi de NaHC03 saturado y soluciones Na2C03 al 2%, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02, eluyendo con 5.5% a 6.5% de NH3 7N en CH3OH/CH2CI2 para proporcionar el compuesto deseado (140 mg). (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol Se disolvió N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (115 mg, 0.159 mmol) en una mezcla de ácido trifluoroacético (4.00 mi, 51.9 mmol) y agua (0.40 mi, 22 mmol), la cual se había enfriado previamente a una temperatura de 0°C en un baño de hielo. La solución se agitó a una temperatura de 0°C durante 2 horas, la mezcla de reacción se dejó templar a temperatura ambiente. Después de 1 hora, la mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se tomó en 6 mi de MeOH, se concentró y el proceso se repitió dos veces. El residuo resultante se colocó en alto vacío. El residuo crudo se diluyó con 2 mi de MeOH, se trató con 140 mg de K2C03 y 10 gotas de H20, y se dejó agitar a temperatura ambiente hasta que la solución se consideró básica a través de un papel de pH. La solución se filtró a través de un frit fino y los sólidos se lavaron con MeOH. El filtrado se concentró hasta obtener un sólido el cual se colocó en alto vacío durante la noche. El material crudo se purificó mediante TLC de preparación sobre dos placas TLC de preparación 20 cm x 20 cm x 1.0 mm, eluyendo con 14% de NH3 7N en CH3OH/CH2CI2 para proporcionar el producto en la forma de un vidrio incoloro (37 mg) 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.06 (s, 1H), 7.52 (br. s., 1H), 7.48 (d, J = 8.29 Hz, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.20 (t, J = 3.42 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 3.52 Hz, 1H), 5.12 (m, 2H), 4.80 (m, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 3.89 (q, J = 5.60 Hz, 1H), 3.04 (m, 1H), 2.85 (m, 2H), 2.70 (m, 1H), 2.52 (m, 1H), 2.41 (m, 2H), 2.27 (dd, J = 10.99, 6.63 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.14 (m, 1H), 2.03 (d, J = 7.88 Hz, 1H), 1.91 (m, 3H), 1.62 (m, 1H), 1.51 (m, 1 H).
Compuesto 63: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- ((metil((1r,3S)-3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Se separaron los diastereómeros mediante SFC. El material se tomó en MeOH/H20 y se liofilizó para obtener un polvo color marrón (58 mg). 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.26 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.29 Hz, 1H), 7.26 (dd, J = 8.29, 1.45 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 3.94 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 8.29, 6.01 Hz, 2H), 4.79 (t, J = 6.32 Hz, 2H), 4.69 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.22 (t, J = 5.60 Hz, 1H), 4.15 (m, 1H), 2.79 (t, J = 7.15 Hz, 2H), 2.72 (m, 1H), 2.66 (m, 2H), 2.21 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.88 (m, 3H), 1.45 (m, 2H).
Compuesto 64: (2f?,3 ?,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Paso 1: Ácido 3-(3-((((3a/?,4A?,6 ?,6a ?)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico Una solución de 3-(3-((((3aft,4ft,6R,6aft)-6-(6-amino-9/-/-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-o'][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de etilo (0.39 g, 0.82 mmol) en metanol (14 mL) se trató con una solución acuosa 1 M de hidróxido de sodio (1.56 mL, 1.56 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a una temperatura de 50°C con agitación durante 3.5 horas; HPLC/LC MS indicó la conversión al producto deseado. La mezcla de reacción se concentró ¡n vacuo y el residuo acuoso se diluyó con agua (10 mL) y se extractó con CH2CI2 (3 x 5 mL). La capa acuosa se trató con una solución acuosa 1 M de cloruro de hidrógeno (1.44 mL, 1.44 mmol) para ajustar el pH 7. La solución clara, incolora se liofilizó para producir el compuesto del título crudo (0.487 g, 110%) en la forma de un sólido ligeramente color crema, produjo cuentas de 1.56 mmol de NaCI (91 mg): MS (ESI + ) para C21H30N6O5 m/z 447.1 (M + H) + ; MS (ESI-) para C21H3oN605 m/z 445.2 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención, 1.949 min).
Paso 2: A-(2-amino-5-(oxetan-3-il)fenil)-3-(3- ((((3a/?,4/?,6/?,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimet¡ltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida suspensión del ácido 3-(3-((((3aR,4R,6f?,6af?)-6-(6-amino-9 -/-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-cf][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico crudo anterior y 4-(oxetan-3-il)benceno-1 ,2-diamina (0.135 g, 0.822 mmol) en cloruro de metileno (8.0 mL), se trató con ?/,/V-di-isopropiletilamina (0.716 mL, 4.11 mmol) y se enfrió a una temperatura de -5°C (hielo/salmuera). Se agregó hexafluorofosfato de A/,N,/V',/V'-tetrametil-0-(7-azabenzotriazol-1-¡l)uronio [HATU] (0.469 g, 1.23 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5.25 horas, se calentó a una temperatura de 15°C; HPLC/LC MS indicó la conversión total. La mezcla de reacción se concentró in vacuo y se diluyó con CH2CI2 (15 ml_) y agua (7.5 ml_). La capa acuosa separada se extractó con CH2CI2 (2 x 10 mL). Los orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y se concentraron in vacuo para producir una espuma/aceite semi-opaco color café-morado. La purificación mediante cromatografía de columna (2 x 8 cm de sílice; 0% a 5% de NH3 metanólico 7 N/CH2CI2) produjo ambos regio-isómeros de amida del compuesto del título (0.45 g, 82%) en la forma de una espuma rosa semi-opaca: MS (ESI + ) para C3oH40N805 m/z 593.3 (M + H) + ; MS (ESI-) para C3oH40N805 m/z 591.3 (M-H)- y 637.4 (M + HCO,)"; pureza HPLC 90% (tiempo de retención, 2.097 min).
Paso 3: 9-((3aR,4/?,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1H-benzo[rf]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuro[3,4-o*][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Se tomó A/-(2-am¡no-5-(oxetan-3-il)fenil)-3-(3- ((((3afl,4R,6ft,6aR)-6-(6-amino-9H-pur¡n-9-¡l)-2,2-dimetiltetrahidrofurofS^-c/ni ,3]dioxol-4-il)met¡l)(metil)am¡no)ciclobutil)propanamida (0.446 g, 0.752 mmol) en ácido acético (7.7 ml_, 140 mmol) y se calentó a una temperatura de 65°C durante 3.5 horas; HPLC/LC MS indicó la conversión total. Después de 3.75 horas, el ácido acético se eliminó mediante destilado con templado mínimo para producir un aceite color naranja, el cual se tomó en CH2CI2 (45 ml_) y se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 30 ml_). La capa acuosa se trató con NaCI hasta que se saturó y extractó con CH2CI2 (2 x 20 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2S04) y concentraron in vacuo para producir un aceite naranja claro. La purificación mediante cromatografía de columna (2 x 8 cm de sílice; 0% a 5% de NH3 metanólico 7N/CH2CI2) produjo el compuesto del título (0.28 g, 65%) en la forma de una espuma color naranja claro: MS (ESI + ) para C30H38N8O4 m/z 575.3 (M + H) + ; MS (ESI-) para C3oH38N84 m/z 573.3 (M-H)"; pureza HPLC >95% (tiempo de retención 2.142 min).
Paso 4:. (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((met¡l(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol A un frasco enfriado (baño de hielo) que contiene 9-((3af?,4f?,6f?,6a )-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(oxetan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuro[3,4-aí][1,3]dioxol-4-il)-9/--purin-6-amina (0.28 g, 0.42 mmol), se le agregó una solución enfriada previamente (baño de hielo) de ácido trifluoroacético (6.4 ml_, 84 mmol) en agua (0.75 ml_, 42 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 5.75 horas a una temperatura de 0°C; HPLC/LC MS indicó el consumo casi total del material de partida. En 6 horas, se eliminó el frasco del baño de hielo y los volátiles se eliminaron mediante destilado a temperatura ambiente. El residuo se diluyó con MeOH (15 mL) y se trató con carbonato de potasio (0.32 g, 2.3 mmol) y agua (1 mL) y la mezcla se agitó durante 20 minutos a temperatura ambiente; pH 2. Se agregó carbonato de potasio adicional (0.20 g, 1.4 mmol) y la mezcla se agitó durante 20 minutos; pH 8 a 9. La solución se filtró a través de un frit fino, enjuagando con MeOH, y el filtrado se concentró ¡n vacuo para producir un semi-sólido color marrón. La purificación mediante cromatografía de columna (3 x 8 cm de sílice; 10% a 20% de NH3 metanólico 7N/CH2CI2) produjo el compuesto del título (123 mg, 55%) en la forma de un vidrio casi incoloro: MS (ESI + ) para C27H34N804 m/z 535.3 (M + H) + ; MS (ESI-) para m/z 533.3 (M-H)'; pureza HPLC >95% (tiempo de retención 1.765 min); 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) mezcla de cis/trans isómeros d? 8.29-8.25 (m, 1?), 8.21-8.17 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.26 (dd, J = 1.6, 8.3 Hz, 1H), 6.00-5.96 (m, 1H), 5.11 (dd, J = 5.8, 8.3 Hz, 2H), 4.81-4.76 (m, 2H), 4.73-4.68 (m, 1H), 4.40-4.31 (m, 1H), 4.27-4.13 (series de m, 2H), 3.13-3.03 (m, 0.4H), 2.86-2.66 (series de m, 4.6H), 2.30-1.80 (series de m, 8.6 H), 1.55-1.40 (m, 1.4H).
Compuesto 65: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- ((metil((1s,3R)-3-(2-(5-(oxetan-3-M)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol Se separaron los diastereómeros mediante SFC. El material se tomó en eOH/H20 y se liofilizó hasta obtener un polvo color blanco (35 mg), 1H RMN (400 MHz, MeOD) d? ppm 8.28 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.29 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 8,29, 1.45 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 4.15 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 8.40, 5,91 Hz, 2H), 4.79 (t, J = 6.32 Hz, 2H), 4.69 (dd, J = 5.39, 4.15 Hz, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.23 (t, J = 5.60 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2,83 (t, J = 7.46 Hz, 2H), 2,67 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.08 (m, 2H), 1,98 (m, 3H), 1,83 (m, 2H). Compuesto 67: (2 ?,3 ?,4S,5/?)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-[({3-[2-(5-ciclobutil-1H-1,3-benzodiazol-2-il)etil]ciclobutil}(propan-2-il)amino)metil]oxolano-3,4-diol Paso 1: 3-[3-({[(3a ?,4R,6A?,6a/?)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-¡l]metil}amino)ciclobutil]propanoato de bencilo Una suspensión de la 9-[(3af?,4f?,6f?,6af?)-6-(aminometil)- 2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]-9H-purin-6-amina (1.45 g, 4.736 mmol), 3-(3-oxociclobutil)propanoato de bencilo (1.21 g, 5.209 mmol) y ácido acético (246.45 µ?, 4.31 mmol) en DCE:iPrOH (4:1, 50 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se agregó un alícuota adicional de DCE (40 mi) y iPrOH (5 mi) a la mezcla de reacción y se continuó durante 1 hora. Posteriormente se agregó STAB (1.28 g, 6.03 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 18 horas. La mezcla de reacción se extinguió con Na2C03 1N (10 mi), y el producto se extractó con DCM (2 x 30 mi). Esto se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó hasta secarse. La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (1:99 a 3:97) produjo el producto deseado en la forma de un aceite incoloro, 1.51 g (58%); MS (EST) para C^h^NeOs m/z 523.65 [M + H] + ; pureza HPLC 97% (tiempo de retención, 1.43 min); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) d? ppm 8.35 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 33.8 Hz, 1H), 7.40-7.29 (m, 5H), 6.08-5.94 (m, 1H), 5.59-5.42 (m, 3H), 5.10 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 5.03-4.96 (m, 1H), 4.33 (dq, J = 7.3, 3.9 Hz, 1H), 3.12 (ddd, J = 23.0, 14.6, 7.5 Hz, 1H), 2.85-2.77 (m, 1H), 2.74 (dd, J = 12.5, 6.6 Hz, 1H), 2.39-2.07 (m, 4H), 1.90-1.64 (m, 5H), 1.61 (s, 4H), 1.38 (s, 3H), 1.28-1.06 (m, 1H).
Paso 2. 3-[3-({[(3a/?,4/?,6R,6aA?)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(propan-2-il)amino)ciclobutil]propanoato de bencilo Se agregó K2C03 (528.92 mg, 3.83 mmol) a una solución de 3-[3-({[(3aR,4R16f?,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2/--furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}amino)ciclobutil]propanoato de bencilo (1.00 g, 1.91 mmol) y 2-yodopropano (0.57 mi, 5.74 mmol) en MeCN y se agitó a una temperatura de 95°C en un tubo sellado durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mi), se filtró y se evaporó hasta secarse. La purificación mediante cromatografía de gel de sílice, eluyendo con NH3 7N en MeOH:DCM (1:99 a 5:95) produjo el producto deseado en la forma de un aceite incoloro, 700 mg (65%); MS (ESI + ) para C3oH4oN6Os m/z 565.70 [M + H] + ; pureza HPLC 96% (tiempo de retención, 1.48 min); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) d? ppm 8.35 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.44- 7.29 (m, 5H), 6.03 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 5.62-5.42 (m, 3H), 5.10 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 5.06-4.92 (m, 1H), 4.26 (dt, J = 9.9, 3.4 Hz, 1H), 3.46-2.84 (m, 2H), 2.88-2.61 (m, 1H), 2.51 (ddd, J = 14.0, 9.1, 7.5 Hz, 1H), 2.33-2.15 (m, 2H), 2.50-2.13 (m, 2H), 2.16-1.74 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.43-1.35 (m, 4H), 0.96 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.79 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
Paso 3. Ácido 3-[3-({[(3a ?,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4-il]metil}(propan-2-il)amino)ciclobutil]propanoico Se agregó Pd-C al 10% (70 mg) a una solución de 3-[3- ({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(propan-2-¡l)amino)ciclobut¡l]propanoato de bencilo (790 mg, 1.40 mmol) en EtOH (20 mi) y se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 18 horas a temperatura ambiente. Se agregó un alícuota adicional de Pd-C al 10% (70 mg) y la reacción continuó en agitación bajo hidrógeno durante 4 horas. Esto se filtró y evaporó in vacuo, y posteriormente se evaporó a partir de DCM (2 x 20 mi) para proporcionar 680 mg (cuant.) de un sólido espumoso color blanco; MS (ESI+) para C23H3 N605 m/z 475.20 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.11 min); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) d? ppm 8.29 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 6.86 (s, 2H), 6.05 (dd, J = 43, 1.7 Hz, 1H), 5.66-5.43 (m, 1H), 5.00 (ddd, J = 19.3, 6.3, 3.2 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.47-2.85 (m, 2H), 2.60 (ddd, J = 38.8, 24.1, 13.5 Hz, 2H), 2.19 (ddd, J = 14.7, 11.9, 7.1 Hz, 2H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.81 (dd, J = 65.1, 6.9 Hz, 3H), 1.66-1.46 (m, 5H), 1.45-1.22 (m, 4H), 1.00 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.89 (dd, J = 12.2, 6.6 Hz, 3H).
Paso 4. 3-[3-({[(3aR,4R,6 ?,6aR)-6-(6-amino-9H-pur¡n-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil>(propan-2-il)amino)ciclobutil]-N-(2-amino-4/5-ciclobutilfenil)propanamida Se agregó TEA (0.54 mi, 3.90 mmol) a una solución de ácido 3-[3-({[(3af?,4f?,6f?,6a :?)-6-(6-amino-9/-/-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2/-/-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(propan-2-il)amino)ciclobutil]propanoico (308.46 mg, 0.65 mmol), 4-ciclobutilbenceno-1 ,2-diamina (210.90 mg, 1.30 mmol), (2E)-ciano(hidroxi-imino)etanoato de etilo (184.75 mg, 1.30 mmol), y EDC.HCI (249.21 mg, 1.30 mmol) en DCM (15 mi) a temperatura ambiente y se agitó durante dos horas. La mezcla de reacción se concentró in vacuo, posteriormente se agregó DCM (50 mi). Esto se lavó con NaHC03 saturado (2 x 30 mi). La capa acuosa se extractó con DCM (50 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04, se filtraron y evaporaron. El producto se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice, eluyendo con EtOAc, y posteriormente NH3 7N en MeOH:DCM (5:95), para proporcionar un aceite color gris, 468 mg (93%); MS (ESI + ) para C33H46N804 m/z 619.35 [M + H] + ; pureza HPLC 80% (tiempo de retención, 1.44 min).
Paso 5. 9-[(3af?,4R,6R,6aR)-6-[({3-[2-(5-ciclobutil-1W-1 ,3-benzodiazol-2-il)etil]ciclobutil}(propan-2-il)amino)metil]-2,2-dimetil-tetrahidro-2W-furo[3,4-d][1 ,3]d¡oxol-4-il]-9/V-purin-6-amina Se agregó AcOH (10 mi) a 3-[3-({[(3aft,4R,6f?,6af?)-6-(6-amino-9/-/-purin-9-il)-2 , 2-d i metí l-tetra h¡dro-2H-f uro [3,4-d][1,3]dioxol-4-il]metil}(propan-2-il)amino)ciclobutil]-N-(2-amino-4/5-ciclobutilfenil)propanamida (468 mg, 0.61 mmol) y se calentó a una temperatura de 65°C mientras se agitó durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró in vacuo, posteriormente se disolvió en DCM (100 mi) y se lavó con NaHC03 saturado (2 x 80 mi), se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. La purificación mediante cromatográfica de gel de sílice instantánea (Biotage, Isolera, cartucho 25 g), eluyendo con amonia 3N en MeOH:DCM (0 a 1:9), produjo el producto deseado con una pureza aproximada de 80%. La purificación adicional mediante HPLC de preparación produjo el producto deseado en la forma de un aceite color gris, 120 mg (27%); MS (EST) para C33H44N8O3 m/z 601 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.43 min); 1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) d? ppm 8.62 (d, J = 53.1 Hz, 6H), 8.57 (s, 2H), 8.25 (d, J = 19.3 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 20.3 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.3, 3.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.18-7.06 (m, 1H), 6.52 (d, J = 96.3 Hz, 2H), 6.07 (dd, J = 10.2, 1.3 Hz, 1H), 5.52-5.39 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 6.2, 3.4 Hz, 1H), 4.44 (td, J = 9.3, 5.1 Hz, 1H), 3.59 (dq, J = 17.4, 8.7 Hz, 1H), 3.36-3.10 (m, 2H), 3.08-2.92 (m, 2H), 2.87-2.72 (m, 2H), 2.43-2.27 (m, 2H), 2.24-1.65 (m, 10H), 1.57 (s, 4H), 1.37 (s, 3H), 1.10 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.91 (dd, J = 8.9, 6.8 Hz, 3H).
Paso 6. (2R,3/?,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-[({3-[2-(5-ciclobutil-1H-1,3-benzodiazol-2-il)etil]ciclobutil}(propan-2-il)amino)metil]oxolano-3,4-diol Se agregó en forma de gotas HCI 12N (24 mmol, 2 mi) a una solución de 9-[(3aR,4ft,6ft,6aR)-6-[({3-[2-(5-ciclobut¡l-1 H-1,3-benzodiazol-2-il)etil]ciclobutil}(propan-2-il)amino)metil]-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]-9H-purin-6-amina (120 mg, 0.164 mmol) en MeOH (2 mi) a una temperatura de 0°C mientras se agitó. Posteriormente esto se dejó templar a temperatura ambiente y continuó durante 6 horas. La mezcla de reacción se enfrió a una temperatura de 0°C y se hizo base con NH3 7N en MeOH (10 mi). Posteriormente esto se evaporó in vacuo. El producto crudo se absorbió sobre gel de sílice (1 mi), se colocó en un cartucho Si instantáneo ¡soluto (10 g) y se purificó, eluyendo con NH3 7N en M e O H : D C M (1:9) para proporcionar un sólido color blanco, 36 mg (38%); MS (ESI + ) para C30H4oN803 m/z 561.45 [M + H] + ; pureza HPLC 100% (tiempo de retención, 1.13 min); H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) d? ppm 8.29 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.50-7.18 (m, 2H), 7.06 (ddd, J = 8.3, 4.6, 1.3 Hz, 1H), 6.01-5.90 (m, 1H), 4.73 (dd, J = 9.8, 5.1 Hz, 1H), 4.26 (q, J = 5.4 Hz, 1H), 4.14-4.03 (m, 1H), 3.60-3.15 (m, 2H), 3.07-2.86 (m, 2H), 2.84-2.67 (m, 3H), 2.42-2.31 (m, 2H), 2.25-2.11 (m, 4H), 2.10-1.95 (m, 2H), 1.92-1.74 (m, 4H), 1.57 (dd, J = 12.2, 6.2 Hz, 1H), 1.02 (dd, J = 6.6, 4.0 Hz, 3H), 0.95 (dd, J = 6.6, 2.3 Hz, 3H).
Compuesto 68: (2R,3/?,4S,5/?)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-5-{[(3-{2-[5-(1-metoxi-2-metilpropan-2-M)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]etil)ciclobutil)(metil)amino]metil}oxolano-3,4-diol Paso 1: 3-[3-({[(3aR,4R,6fl,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}amino)ciclobutil]propanoato de bencilo Se agitó una suspensión de 9-[{3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]-9H-purin-6-amina (5.00 g, 16.3 mmol), 3-(3-oxociclobutil)-propanoato de bencilo (4.17 g, 18.0 mmol) y ácido acético (0.85 mi, 14.8 mmol) en DCE:iPrOH (7:2) (90 mi) a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó triacetoxiborohídruro de sodio (4.40 g, 20.8 mmol) en porciones y la mezcla se dejó en agitación durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se extinguió con una solución Na2C03 1 M (10 mi) y el producto se extractó con DCM (3 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y evaporaron hasta secarse. La purificación mediante cromatografía de columna instantánea de gel de sílice eluyendo con NH3 7M al 1% en MeOH:99% de DCM produjo el producto en la forma de un aceite amarillo (5.25 g, 55%, 89% puro): MS (ESI + ) para C27H34N605 m/z 523.6 [M + H] + ; pureza LC 89% (tiempo de retención, 1.60 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 8.35 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.30-7.39 (m, 5H), 6.01 (dd, J = 3.0 Hz, 1.6, 1H), 5.72 (br. s., 2H), 5.50 (dt, J = 6.4 Hz, 3.3, 1H), 5.10 (d, J = 3.8 Hz, 2H), 4.98-5.04 (m, 1H), 4.31-4.38 (m, 1H), 2.97-3.34 (m, 1H), 2.72-2.85 (m, 2H), 2.22-2.35 (m, 3H), 2.14 (td, J = 8.3, 4.3 Hz, 1H), 1.73-1.90 (m, 4H), 1.64-1.71 (m, 1H,), 1.62 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.10-1.27 (m, 1H).
Paso 2: 3-[3-({[(3aR,4R,6/?,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(metil)amino)ciclobutil]propanoato de bencilo Se disolvió 3-[3-({[(3aR,4«,6«,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}amino)ciclobutil]propanoato de bencilo (3.2 g, 6.12 mmol) en metanol (32 mi). Se agregó formaldehído en agua (37%) (0.92 mi, 12.3 mmol) y se agitó durante 45 minutos antes de agregar el cianoborohidruro de sodio (0.54 g, 8.57 mmol) en porciones. La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente antes de agregarse agua (1 mi) y la evaporación del solvente a temperatura ambiente. El residuo se purificó mediante cromatografía con amonia 7M en metanol/DCM para proporcionar el compuesto deseado en la forma de un aceite color amarillo (mezcla de diastereómeros) (2.05 g, 62%, 82% puro): MS (ESI + ) para C28H36N605 m/z 537.6 [M + H] + ; pureza LC 82% (tiempo de retención, 1.60 min); 1H RMN (500 M Hz, CDCI3) d? 8.32-8.38 (m, 1?), 7.91-7.97 (m, 1H), 7.32-7.39 (m, 5H), 6.05-6.10 (m, 1H), 5.61 (br. s., 2H), 5.53 (ddd, J = 16.5, 6.4, 1.8 Hz, 1H), 5.11 (m, 2H), 4.93-5.00 (m, 1H), 4.32-4.40 (m, 1H), 2.50-2.88 (m, 1H), 2.37-2.49 (m, 2H), 2.21-2.30 (m, 2H), 2.10 (m, 3H), 1.91-2.04 (m, 1H), 1.73-1.79 (m, 2H), 1.64-1.72 (m, 2H), 1.56-1.63 (m, 4H), 1.41 (s, 3H), 1.15 (q, J = 9.7 Hz, 1H). Paso 3: Ácido 3-[3-({[(3a/?,4/?,6R,6aR)-6-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(metil)amino)ciclobutil]propanoico Se disolvió 3-[3-({[(3aR,4ft,6/?,6afi)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(metil)amino)ciclobutil]propanoato de bencilo (1.19 g, 2.22 mmol) en etanol (24 mi) y se agregó paladio sobre carbono al 10% (50% de pasta húmeda) (0.24 g). La suspensión se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 18 horas. Posteriormente se filtró y el sólido se lavó con etanol (10 mi). Ya que la reacción estaba incompleta, se agregó paladio sobre carbono adicional (0.21 g) y la reacción continuó bajo hidrógeno durante 24 horas adicionales. Se filtró a través de una fibra de vidrio doble, se lavó con etanol y se evaporó hasta secarse para proporcionar el compuesto deseado en la forma de una espuma color blanco (mezcla de d iastereómeros) (0.85 g, 86%): MS (ESI + ) para C21H3oN605 m/z 447.5 [M + H] + ; pureza LC 86% (tiempo de retención, 1.08 min); 1H RMN (500 MHz, d4- eOD) d? 8.18-8.35 (m, 2H), 6.14-6.30 (m, 1H), 5.25-5.56 (m, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 1H), 3.63-3.81 (m, 1H), 3.24-3.30 (m, 1H), 2.98-3.16 (m, 1H), 2.89 (ddd, J = 17.2, 13.4, 3.7 Hz, 1H), 2.36 (m, 2H), 2.17-2.26 (m, 1H), 1.98-2.17 (m, 3H), 1.67-1.92 (m, 3H), 1.49-1.64 (m, 4H), 1.39 (s, 3H), 1.20-1.33 (m, 1H).
Paso 4: 2-(4-f luorofenil)-2-metilpropanoato de metilo Se lavó hidruro de sodio (suspensión al 60% en aceite mineral) (2.64 g, 66 mmol) con heptanos (2 x 20 mi) y se suspendió en THF (40 mi). Se agregó una solución de 2-(4-fluorofenil)acetato de metilo (5.05 g, 30 mmol) en THF (10 mi) y se agitó durante 30 minutos. Se agregó yoduro de metilo (5.6 mi, 90 mmol) en porciones de 1 mi durante 30 minutos, inicialmente con enfriamiento a una temperatura de 10°C, posteriormente calentamiento suave a una temperatura de 50°C conforme terminó la evolución de gas. Después de 4.5 horas, se agregó agua (50 mi) y la mezcla se extractó con EtOAc (2 x 50 mi). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mi) y se secaron sobre MgS04 antes de filtrarse y se evaporaron hasta secarse para dejar un aceite color naranja (5.08 g, 79%, 91% puro mediante 1H RMN): MS (ESI + ) para C1 H13F02 m/z 196.2 [M + H] + ; pureza LC 80% (tiempo de retención, 1.94 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 7.29-7.34 (m, 2H), 6.98-7.05 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 1.58 (s, 6H).
Paso 5: 2-(4-Fluorofenil)-2-metilpropan-1 -ol Se disolvió 2-(4-fluorofenil)-2-metilpropanoato de metilo (5.08 g, 26.9 mmol) en THF (51 mi) y se enfrió a una temperatura de 0°C antes de agregarse a una solución de hidruro de aluminio de litio (1M en THF) (38.8 mi, 38.8 mmol) en forma de gotas durante 30 minutos. Cuando la adición estuvo completa, la reacción se templó a temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Después de enfriarse sobre hielo, se agregó con precaución agua (1.35 mi) seguido de NaOH al 15% en agua (1.35 mi) y más agua (4.05 mi). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de que el sólido se filtrara y se lavara con THF (2 x 30 mi). El solvente se evaporó y el producto se purificó mediante cromatografía con EtOAc/heptanos para proporcionar un aceite claro (3.48 g, 80%): MS (ESI + ) para C10H13FO m/z 168.2 [M + H] + ; pureza LC 94% (tiempo de retención, 1.76 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 7.41-7.32 (m, 2H), 7.15-7.00 (m, 2H), 3.62 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.35 (s, 6H).
Paso 6: 1 -Fluoro-4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)benceno Se suspendió hidruro de sodio (1.664 g, 41.6 mmol, 60% de dispersión en aceite mineral) en THF seco (18 mi) bajo N2 y 2-(4-fluorofenil)-2-metilpropan-1 -ol (3.500 g, 20.8 mmol) en THF seco (18 mi), se agregó lentamente a la suspensión a una temperatura de 0°C. Después de que se completó la adición, la reacción se templó a temperatura ambiente y se dejó durante 1 hora. Se agregó lentamente yodometano (6.5 mi, 0.104 mmol) a temperatura ambiente y la reacción se dejó durante 3 horas. La reacción se extinguió mediante la adición lenta de H20 (35 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extractó con EtOAc (3 x 35 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar el producto crudo. El producto se purificó mediante cromatografía de columna instantánea de gel de sílice utilizando entre 100% de heptano y 10% de EtOAc:90% de heptano como el eluente para proporcionar el producto en la forma de un aceite incoloro (2.991 g, 79%): pureza LC 98% (tiempo de retención, 2.16 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 7.40-7.32 (m, 2H), 7.11-6.96 (m, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.33 (s, 6H).
Paso 7: 1 -Fluoro-4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)-2-nitrobenceno Se enfrió Fluoro-4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)benceno (2.987 g, 16.4 mmol) en un baño de agua/hielo de sal a una temperatura de -20°C y se agregó lentamente en forma de gotas ácido sulfúrico (27 mi) con agitación. En la adición del ácido sulfúrico, la solución se volvió color naranja brillante. Se agregó lentamente en forma de gotas ácido nítrico (3 mi) durante 15 a 20 minutos. En la adición de ácido nítrico, la solución se volvió amarillo oscuro/café, y se precipitó parte de un sólido color blanco. La reacción se dejó durante 30 minutos, posteriormente se vertió sobre hielo (450 g). La mezcla se extractó con DCM (2 x 225 mi) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar el producto crudo. El producto se purificó mediante cromatografía de columna instantánea de gel de sílice utilizando entre 100% de heptanos y 20% de EtOAc:80% de heptanos para proporcionar el producto en la forma de un aceite amarillo (2.239 g, 60%): pureza LC 96% (tiempo de retención, 2.18 min); H RMN (500 Hz, CDCI3) d? 8.08 (dd, J = 7.1, 2.5 Hz, 1H), 7.67 (ddd, J = 8.7, 4.1, 2.5 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 10.6, 8.8 Hz, 1H), 3.41 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.37 (s, 6H).
Paso 8: 1 -Azido-4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)-2-nitrobenceno Se disolvió Fluoro-4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)-2-nitrobenceno (2.227 g, 9.80 mmol) en DMF (25 mi) y se agregó azida de sodio (1.274 g, 19.6 mmol) a temperatura ambiente y la reacción se agitó durante la boche. La reacción se extinguió con agua (75 mi) y la mezcla se extractó con TBME (3 x 75 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar el producto crudo. El producto se purificó mediante cromatografía de columna instantánea de gel de sílice utilizando entre 100% de heptano y 15% de EtOAc:85% de heptano como el eluente para proporcionar el producto en la forma de un aceite amarillo (2.301 g, 75%, 80% puro): pureza LC 79% (tiempo de retención, 2.15 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 7.97 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 7.33-7.22 (m, 1H), 3.40 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.36 (s, 6H).
Paso 9: 4-(1 -Metoxi-2-metilpropan-2-il)benceno-1 ,2-diamina Se disolvió Azido-4-(1-metoxi-2-metilpropan-2-il)-2-nitrobenceno (1.102 g, 3.52 mmol) en EtOH (30 mi) y se agregó Pd/C (10% en peso) (0.110 g, 10% en peso). La reacción se purgó 3 veces con N2, posteriormente 3 veces con H2 y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se filtró a través de Celita y el filtrado se concentró in vacuo para proporcionar el producto crudo. El producto se purificó mediante cromatografía de columna instantánea de gel de sílice utilizando entre 100% de heptano y 100% de EtOAc como el eluente para proporcionar el producto en la forma de un aceite color café pálido el cual se solidificó en un sólido naranja oscuro (0.481 g, 63%, 90% puro): MS (ESI + ) para C H18N20 m/z 195.1 [M + H] + ; pureza LC 87% (tiempo de retención, 0.99 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 6.65 (dd, J = 11.2, 1.9 Hz, 2H), 6.58 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.26 (s, 2H), 3.24 (s, 3H), 1.20 (s, 6H).
Paso 10: 3-[3({[(3a/?,4 ?,6R,6aR)-6-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]met¡l}(metil)amino)ciclobutil]-A-[2-amino-4-(1-metoxi-2-metilpropan-2-il)fenil]propanamida Se agregaron ácido 3-[3-({[(3a ?,4R,6R,6aR)-6-(6-Amino- 9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(metil)amino)ciclobutil]propanoico (0.620 g, 1.39 mmol), 4-(1 -metoxi-2-metilpropan-2-il)benceno-1 ,2-diamina (0.466 g, 2.08 mmol, 87% puro), EDC.HCI (0.532 g, 2.78 mmol) y OXYMA (etil-ciano(hidroxi-imino)acetato) (0.395 g, 2.78 mmol) a un frasco con un agitador, y posteriormente se purgó con N2. Se agregaron DCM seco (22 mi) y Et3N seco (1.2 mi, 8.33 mmol) a temperatura ambiente y la reacción se dejó durante la noche. La reacción se extinguió mediante la adición de una solución de NaHC03 saturada (25 mi) y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extractó con DCM (2 x 25 mi) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar el producto crudo. El producto se purificó mediante cromatografía de columna instantánea sobre gel de sílice utilizando primero 100% de EtOAc para eluir la dianilina, posteriormente entre 100% de DCM y 20% de NH3 2M en MeOH:80% de DCM como el eluente para producir el producto en la forma de un aceite color café (1.081 g, cuant.): MS (ESI + ) para C32H46N805 m/z 623.4 [M + H] + ; pureza LC 98% (tiempo de retención, 1.36 min); H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 8.39 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.42-7.30 (m, 1H), 7.24-7.00 (m, 1H), 6.96-6.81 (m, 1H), 6.12 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.63 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.14-4.93 (m, 1H), 4.60-4.31 (m, 1H), 4.28-3.69 (m, 2H), 3.48-3.03 (m, 5H), 2.65-2.48 (m, 1H), 2.46-2.33 (m, 1H), 2.34-2.10 (m, 7H), 2.10-1.98 (m, 1H), 2.00-1.66 (m, 4H), 1.62 (d, J = 15.7 Hz, 13H), 1.44 (d, J = 6.5 Hz, 4H), 1.30 (t, J = 3.3 Hz, 7H), 1.12 (d, J = 52.3 Hz, 1H).
Paso 11: 9-[(3aR,4/?,6fl,6af?)-6-{[(3-{2-[5-(1 -Metox¡-2-metilpropan-2-il)-1H-1 ,3-benzodiazol-2- il]etil}ciclobutil)(metil)amino]metil}-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]-9H-purin-6-amina Se disolvió 3-[3-({[(3aR,4 ,6f?,6af?)-6-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]metil}(metil)amino)ciclobutil]-N-[2-amino-4-(1-metoxi-2-metilpropan-2-il)fenil]propanamida (1.036 g, 1.66 mmol) en AcOH (17 mi) y se calentó a una temperatura de 50°C durante 5 horas. La reacción se concentró in vacuo y el residuo se disolvió en DCM (75 mi) y se agregó una solución de NaHC03 saturada (75 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extractó con DCM (2 x 75 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar el producto crudo en la forma de un aceite color naranja oscuro (0.850 g, 94%). El producto se purificó utilizando HPLC de preparación neutral para producir el producto en la forma de un aceite color amarillo pálido (0.485 g, 47%, 88% puro): MS (ESI + ) para C32H44N804 m/z 605.4 [M + H] + ; pureza LC 88% (tiempo de retención, 1.25 min); 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d? 10.44 (dd, J = 207.7, 22.9 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 7.89-7.58 (m, 1H), 7.54-7.29 (m, 2H), 6.15 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.92-5.56 (m, 3H), 4.98 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.76- 4.39 (m, 1H), 3.47 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.33 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 2.98-2.43 (m, 4H), 2.42-2.00 (m, 6H), 1.99-1.88 (m, 2H), 1.77-1.66 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.61-1.48 (m, 1H), 1.44 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 1.40 (d, J = 7.9 Hz, 6H), 1.28 (dd, J = 16.0, 9.0 Hz, 1H).
Paso 12: (2K,3/?,4S,5/?)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-5-{[(3-{2-[5-(1 -metoxi-2-etilpropan-2-il)-1 H-1,3-benzodiazol-2-il]etil}ciclobutil)(metil)amino]metil}oxolano-3,4-diol Se disolvió 9-[(3aft,4R,6ft,6a/?)-6-{[(3-{2-[5-(1 -Metoxi-2-metilpropan-2-il)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]etil}ciclobutil)(metil)amino]metil}-2,2-dimetil-tetrahidro-2H-furo[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il]-9H-purin-6-amina (0.485 g, 0.706 mmol, 88% puro) en MeOH (20 mi) y se agregó HCI concentrado (4.9 mi, 10 vol) a temperatura ambiente y la reacción se dejó durante 2.5 horas. La reacción se concentró in vacuo y el residuo se disolvió en una cantidad mínima de MeOH (~2 mi). La reacción se extinguió mediante la adición de una solución de NaHC03 saturado (10 mi) y EtOAc (30 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extractó con EtOAc (2 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar el producto crudo. El producto se purificó mediante cromatografía de columna instantánea de gel de sílice utilizando entre 100% de DCM y 20% de NH3 2M en MeOH:80% de DCM como el eluente para producir el producto en la forma de una espuma color blanco (0.213 g, 53%): MS (ESI + ) para C29H40N8O4 m/z 565.4 [M + H] + ; pureza LC 100% (tiempo de retención, 2.11 min) (7 min); 1H RMN (500 MHz, d4-MeOD) d? 8.28 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 6.01 (t, J = 3.9 Hz, 1H), 4.84-4.74 (m, 1H), 4.41-4.29 (m, 1H), 4.29-4.19 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.14-2.98 (m, 1H), 2.99-2.89 (m, 1H), 2.90-2.73 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.37-2.30 (m, 1H), 2.28-2.10 (m, 2H), 2.08-1.86 (m, 4H), 1.70-1.51 (m, 1H), 1.38 (s, 6H).
Compuesto 69: (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1 R,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidln-7-il)-5-((((1 R,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.06 (s, 1H), 7.47 (brs, 1H), 7.38 (d, J = 8.0 HZ, 1H), 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 3.88 (s, 1H), 2.80 (brs, 2H), 2.68 (brs, 1H), 2.49-2.10 (m, 9H), 1.90 (brs, 2H), 1.62-1.49 (m, 3H), 1.35 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 532.3 [M + 1]\ 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo Una solución de 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-d¡metiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (20 g, 43.91 mmol), 3-(3-oxociclobutil)propanoato de bencilo (12.2 g, 52.69 mmol) y HOAc (15 ml_) en DCE (200 ml_) se agitó a una temperatura de 30°C durante 3 horas. Se agregó NaBH(OAc)3 (18.6 g, 87.81 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a una temperatura de 30°C durante otra 1 hora. La mezcla se lavó con agua (100 ml_ x 2) y salmuera (100 ml_), se secó sobre Na2S0 , se filtró y concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice utilizando EA:DCM:MeOH = 10:10:1 como el eluente para producir el compuesto deseado (21 g, rendimiento: 65%, cis/trans = 52/47) en la forma de un sólido color amarillo. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.16 (brs, 1H), 7.36-7.29 (m, 5H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.66 (brs, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 8.5 y 2.0 Hz, 1H), 6.20 (brs, 1H), 5.41-5.39 (m, 1H), 5.08 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.99-4.95 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.30-4.25 (m,- 1H), 3.83 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.38-3.35 (m, 0.5H), 3.11-3.06 (m, 0.5H), 2.92-2.82 (m, 2H), 2.29-2.18 (m, 3H), 2.12-2.05 (m, 0.5H), 1.90-1.68 (m, 4H), 1.63-1.61 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.35-1.28 (m, 0.5H), 1.25 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.15-1.12 (m, 0.5H) ppm; ESI-MS (modo negativo, m/z): 670.3 [M-1] + . 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)c¡clobutil)propanoato de bencilo Una mezcla de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (4 g, 5.95 mmol), 2-yodopropano (6 g, 35.72 mmol) y K2C03 (2.5 g, 17.86 mmol) en CH3CN (50 ml_), se agitó a reflujo durante 2 días. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y la pasta filtrada se lavó con CH3CN (20 ml_). El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante Combi-Flash (80 g de gel de sílice, inicio EA: DCM : MeO H = 10:10:0 a 10:10:1 por gradiente, 60 mL/min, 40 min, 2.4 L de volumen de solvente total) para producir el compuesto deseado (3 g, rendimiento: 71%) en la forma de un sólido color amarillo. 1H RMN (500 MHz, MeO D) : d? 8.15 (s, 1H), 7.38-7.29 (m, 5H), 7.19 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 8.5 y 2.0 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.36-5.32 (m, 1H), 5.09 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.94-4.89 (m, 3H), 4.65 (s, 2H), 4.17-4.14 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.41-3.35 (m, 0.5H), 3.04-2.95 (m, 0.5H), 2.94-2.86 (m, 1H), 2.72-2.52 (m, 2H), 2.25 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 2.21 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 2.05-1.90 (m, 2H), 1.90-1.82 (m, 0.5H), 1.76-1.70 (m, 0.5H), 1.65-1.55 (m, 5H), 1.42-1.34 (m, 4H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83-0.80 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 714.4 [M + 1]+. Ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico A una solución de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (2.7 g, 3.78 mmol) en THF/MeOH (15 ml_ / 15 ml_) se le agregó una solución de LiOH.H20 (1.6 g, 37.82 mmol) en agua (5 mL). La mezcla se agitó a una temperatura de 30°C durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se diluyó con agua (10 mL) y se extractó con EA (15 mL x 2). Las capas de agua de la suspensión se ajustaron a un pH = 3 a 4 con una solución HCI 1N y se extractaron con EA (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2S0 , se filtró y concentró para producir el compuesto deseado en la forma de un sólido color amarillo (2.9 g). 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.20 (s, 1H), 7.92 (s, 0.5H), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.28-7.23 (m, 1.5H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 6.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.51-5.47 (m, 1H), 5.18-5.13 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.61 (s, 1H), 4.43-4.40 (m, 1H), 3.96-3.90 (m, 0.5H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.65-3.58 (m, 0.5H), 3.50-3.40 (m, 2H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.20-2.00 (m, 4H), 1.98-1.70 (m, 2.5H), 1.70-1.58 (m, 4.5H), 1.40 (s, 3H), 1.18 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 0.90 (t, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 624.3 [M + 1] + .
N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-d i metí I tetra hidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4- ((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (2.7 g, 4.33 mmol), 4-(trifluorometoxi)benceno-1 ,2-diamina (1.23 g, 6.49 mmol), HATU (2.5 g, 6.49 mmol) y HOAT (0.88 g, 6.49 mmol) en DCM (30 mL) se le agregó TEA (1.8 mL, 12.99 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. A la mezcla se le agregó DCM (70 mL) y se lavó con agua (20 mL x 2) y salmuera (50 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El residuo se purificó mediante Combi-Flash (80 g de gel de sílice, inicio EA:DCM:MeOH = 10:10:0 a 10:10:2 por gradiente, 60 mL/min, 40 min, 2.4 L de volumen total de solvente) para producir el compuesto deseado (2.2 g, rendimiento: 67% (dos pasos) en la forma de un sólido color café. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.21 (s, 1H), 7.28-7.12 (m, 3H), 6.73 (brs, 1H), 6.69 (brs, 1H), 6.56-6.52 (m, 2H), 6.42 (dd, J = 8.0 y 2.5 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.20-5.16 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.46-4.42 (m, 1H), 4.08-3.98 (m, 0.5H), 3.84 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.75-3.69 (m, 0.5H), 3.60-3.38 (m, 2H), 2.60-2.30 (m, 3H), 1.92-1.86 (m, 1H), 1.80-1.70 (m, 1H), 1.59 (d, J = 3.5 Hz, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.25 (t, J = 1.5 Hz, 3H), 1.00-0.80 (m, 2H) ppm; ESI-MS (m/z): 798.3 [M + 1] + .
N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((isopropil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2- il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrof uro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-M)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida (2.2 g, 2.5 mmol) en HOAc (20 ml_) se agitó a una temperatura de 65°C durante 5 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo se disolvió en DCM (50 ml_), se lavó con 15% de una solución Na2C03 (20 ml_ x 2), agua (20 ml_) y salmuera (30 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El residuo se purificó mediante Combi-Flash (80 g de gel de sílice, inicio EA:DCM:MeOH = 10:10:0 a 10:10:2 por gradiente, 60 mL/min, 35 min, 2.1 L de volumen total de solvente) para producir el compuesto deseado (1.4 g) en la forma de un sólido color café, el cual se separó mediante HPLC quirálico para producir el cis-isómero (600 mg, rendimiento: 28%) y el trans-isómero (480 mg, rendimiento: 22%). cis-isómero: H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.17 (s, 1H), 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.20 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 6.49 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.39 (dd, J = 8.5 y 2.0 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.35 (dd, J = 6.0 y 2.0 Hz, 1H), 4.68-4.60 (m, 2H), 4.18-4.13 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.10-3.02 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 2H), 2.69-2.57 (m, 2H), 2.12-2.02 (m, 2H), 1.86-1.76 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.52-1.40 (m, 2H), 1.37 (s, 3H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 780.4 [M + 1] + . trans-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD) 1H), 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.20 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 6.51 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.40 (dd, J = 8.0 y 2.5 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.35 (dd, J = 6.0 y 2.0 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.20-4.16 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.50-3.42 (m, 1H), 2.95-2.90 (m, 1H), 2.80 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.75-2.58 (m, 2H), 2.12-1.95 (m, 4H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 780.4 [M + 1] + .
Compuesto 70: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1,2-diol 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de metilo Una solución de 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4- ((2,4-dimetoxibencil)am¡no)-7H-pirrolo[2,3-d]p¡rimidin-7-il)-2,2-d ¡metil tetra hidro-3aH-ciclopen ta [d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)c¡clobutil)propanoato de metilo (1.85 g, 3.12 mmol) y NaBH3CN (590 mg, 9.36 mmol) en MeOH (25 ml_) se ajustó a un pH = 6 con AcOH, posteriormente se agregó formaldehído (936 mg, 31.2 mmol). La reacción se agitó durante la noche a una temperatura de 25°C. La reacción se extinguió con NaHC03 saturado (5 mL), se evaporó, se agregó agua (10 mL), se extractó con DCM (150 mL x 3), se lavó con salmuera (80 mL), se secó y concentró. El residuo se purificó mediante SGC para obtener el compuesto deseado (1.85 g, Rendimiento 97%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.12 (s, 1H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 8.5 y 2.5 Hz, 1H), 5.01-4.98 (m, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.60-4.58 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.44-3.38 (m, 1H), 2.80-2.73 (m, 2H), 2.48-2.43 (m, 4H), 2.32 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.20-2.16 (m, 4H), 1.95-1.94 (m, 2H), 1.82-1.81 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 608.3 [M + 1] + . Ácido 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico Una solución de 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4- ((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-212-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de metilo (1.85 g, 3.04 mmol) y LiOH (382 mg, 15.24 mmol) en TH F/MeOH/H20 (1:1:1, 30 mL) se agitó a una temperatura de 50°C durante 2 horas. La reacción se concentró para obtener el compuesto deseado (2.25 g, sal, pureza 85%) en la forma de un sólido color blanco. El crudo se utilizó directamente en el siguiente paso sin purificación adicional. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.11 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.30 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 10.0 y 2.5 Hz, 1H), 5.05-5.03 (m, 2H), 4.73 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.90-3.85 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.30-3.18 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.53-2.46 (m, 3H), 2.27-2.20 (m, 3H), 2.12-2.11 (m, 2H), 1.83-1.82 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 594.3 [M + 1]\ N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4- il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida Una solución de ácido 3-((1 R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (2.25 g, 3.8 mmol) HOAt (680 mg, 5 mmol) y HATU (1.9 g, 5 mmol) en DCM (60 ml_) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, posteriormente se agregaron en forma de gotas 4-ter-butilbencenodiamina (656 mg, 4 mmol) y TEA (1.21 g, 12 mmol) en DCM (3 ml_). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A la reacción se le agregó agua (20 ml_) y DCM (60 ml_), se extractó con DCM (60 ml_ x 2), se lavó con salmuera (10 mL), se secó y concentró. El residuo se purificó mediante SGC para obtener el compuesto deseado (1.1 g, Rendimiento 46%) en la forma de un sólido color amarillo. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.11 (s, 1H), 7.21 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 8.0 y 1.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 8.0 y 1.5 Hz, 1H), 5.02-4.99 (m, 2H), 4.65-4.61 (m, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.60-3.52 (m, 1H), 2.97-2.83 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.54-2.38 (m, 4H), 2.33-2.29 (m, 2H), 2.18-2.04 (m, 3H), 1.94-1.91 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 740.5 [M + 1]+. 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2- dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4- dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-((1 R,3s)-3- ((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-: pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4- il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (1.1 g, 1.49 mmol) en AcOH (8 ml_) se calentó a una temperatura de 65°C durante 3 horas. La reacción se evaporó, se disolvió en MeOH (5 mL), se ajustó a pH = 8 con una solución de NaHC03 saturada, se concentró y purificó mediante TLC de preparación para obtener el compuesto deseado (620 mg, 58%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.10 (s, 1H), 7.48 (brs, 1H), 7.38 (brs, 1H), 7.28 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.13(d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.62 (brs, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.98-4.90 (m, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.50 (brs, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.01-2.98 (m, 1 H), 2.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 2.44-2.34 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.12- 1.96 (m, 6H), 1.84 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.28 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 722.4 [M + 1] + . (1 R,2S,3R,5R)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5- ((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2- il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)ciclopentano-1.2-diol Una solución de 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1 s,3R)-3-(2-(5- (ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2- il)et¡l)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidro-3aH-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2 ,3-d]pirimidin-4-amina (620 mg, 0.86 mmol) en TFA (5 ml_, 90%) se agitó a una temperatura de 25°C durante 1 hora. La reacción se concentró hasta secarse, se disolvió en MeOH (5 mL) y se ajustó a un pH = 8 con una solución K2C03 saturada. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0.5 horas. Posteriormente la reacción se concentró para obtener el residuo. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el compuesto deseado (330 mg, Rendimiento 73%) en la forma de un sólido color blanco. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.07 (s, 1H), 7.49 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 11.0 y 2.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.33 (dd, J = 9.5 y 8.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.03-2.99 (m, 1H), 2.85 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 2.50-2.22 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.15-1.98 (m, 5H), 1.88 (t, J = 10.0 Hz, 2H), 1.68-1.59 (m, 1H), 1.37 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 532.3 [M + 1] + .
Compuesto 71: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-i!)-5-((((1 R,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Una mezcla de c/s-9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1 R,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2- ¡l)etil)ciclobutil)(metil)amino)met¡l)-2,2-dimetiltetrah¡dro furo [3,4-d][1 ,3]dioxol-4-¡l)-9H-purin-6-amina (920 mg, 1.60 mmol) en HCI 3 M/MeOH (20 mL) se agitó a una temperatura de 35°C durante 2 horas y se evaporó hasta secarse. El residuo se disolvió en MeOH (15 mL) y se agregó una solución de K2C03 saturada para ajustar la solución a un pH 8. Posteriormente, la mezcla se agitó durante 5 minutos y se filtró. El filtrado se concentró y el producto crudo se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el objetivo (400 mg, rendimiento: 47%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.27 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 5.98 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.24-4.20 (m, 1H), 4.18-4.15 (m, 1H), 2.81-2.76 (m, 2H), 2.75-2.69 (m, 1H), 2.67-2.62 (m, 2H), 2.25-2.18 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.90-1.85 (m, 3H), 1.49-1.41 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 535.3 [M + 1] + .
Compuesto 72: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5- ((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)tetrahidrofurano- Una mezcla d (5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (420 mg, 0.73 mmol) en HCI 3 M/MeOH (20 mL) se agitó a una temperatura de 35°C durante 2 horas y se evaporó hasta secarse. El residuo se disolvió en MeOH (15 mL) y se agregó una solución de K2C03 saturada para ajustar la solución a un pH 8. Posteriormente, la mezcla se agitó durante 5 minutos y se filtró. El filtrado se concentró y el crudo se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el objetivo (198 mg, rendimiento: 51%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.38 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28-7.26 (m, 1H), 5.98 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.23 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.19-4.16 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.80 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.68-2.64 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.09-1.95 (m, 5H), 1.85-1.80 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 535.3 [M + 1] + . 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo A una mezcla de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-¡l)metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (3.76 g, 7.2 mmol) y NaBH3CN (5.9 g, 93.6 mmol) en MeOH (40 ml_) se le agregó AcOH para ajustar el pH = 6. Posteriormente se agregaron 40% de MeCHO (8.7 ml_, 122.5 mmol) y la mezcla se agitó a una temperatura de 30°C durante 1.5 horas. Se agregó agua (15 ml_) y la mezcla se concentró in vacuo. Posteriormente, la mezcla se extractó con DCM (30 ml_ x 3). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El crudo se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 100:1 a 20:1) para obtener el objetivo (2.6 g, rendimiento: 66%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.26 (s, 1H), 8.23 (m, 1H), 7.37-7.28 (m, 5H), 6.24 (s, 1H), 5.52-5.49 (m, 1H), 5.10-5.06 (m, 3H), 4.41-4.40 (m, 1H), 3.20-2.90 (m, 2H), 2.80-2.60 (m, 2H), 2.12-1.77 (m, 4H), 1.74-1.60 (m, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.26-1.22 (m, 3H), 0.94-0.89 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 551.3 [M + 1] + . Ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanoico A una solución de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimet¡ltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (2.6 g, 4.73 mmol) en MeOH (40 mL), se le agregó Pd/C al 10% (2.3 g) y la mezcla se agitó bajo una atmósfera de H2 a una temperatura de 50°C durante 20 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para obtener el objetivo (2 g, rendimiento: 92%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.27 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.52-5.49 (m, 1H), 5.14-5.12 (m, 1H), 4.51-4.47 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 2H), 3.22-3.15 (m, 1H), 2.94-2.89 (m, 2H), 2.28-2.05 (m, 4H), 1.96-1.80 (m, 2H), 1.74-1.69 (m, 1H), 1.65-1.59 (m, 5H), 1.41-1.36 (m, 4H), 1.03-0.99 (m, 3H) ppm; ESI- S (m/z): 461.3 [M + 1] + .
N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9- i I )-2 , 2-d i meti I tetra h id rofuro [3,4 -d][1,3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanoico (2 g, 4.35 mmol), HOAT (768 mg, 5.65 mmol), HATU (2.2 g, 5.65 mmol) y TEA (3 mL, 21.3 mmol) en DCM (40 mL) se le agregó 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (785 mg, 4.79 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó agua (15 mL) y la mezcla se extractó con DCM (30 mL x 2). La fase orgánica combinada se lavó con H2Q (20 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y concentraron. El crudo se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 70:1 a 20:1) para obtener el objetivo (1.6 g, rendimiento: 61%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28-8.27 (m, 1H), 8.24-8.23 (m, 1H), 7.10-6.92 (m, 2H), 6.81-6.76 (m, 1H), 6.22 (s, 1H), 5.54-5.52 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.03-2.50 (m, 5H), 2.32-2.26 (m, 2H), 2.16-1.80 (m, 4H), 1.73-1.69 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.28-1.24 (m, 9H), 0.94-0.85 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 607.3 [M + 1] + . 9-((3aR,4R,6 ,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-d imetil tetra hidro fu ro[3,4-d][1, 3]dioxol-4-il)metil)(etil)amino)ciclobutil)propanamida (1.6 g, 2.64 mmol) en AcOH (20 mL) se agitó a una temperatura de 65°C durante 15 horas. La solución se concentró in vacuo y se diluyó con DCM (30 mL). La mezcla se lavó con una solución de NaHC03 saturada (20 mL x 2) y salmuera (20 mL x 1). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para obtener el objetivo 1.5 g (rendimiento: 97%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28-8.26 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 6.20-6.18 (m, 1H), 5.52-5.49 (m, 1H), 5.02-4.98 (m, 1H), 4.34-4.31 (m, 1H), 2.95-2.92 (m, 1H), 2.79-2.68 (m, 4H), 2.56-2.50 (m, 2H), 2.09-1.81 (m, 5H), 1.71-1.63 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.35-1.28 (m, 1H), 0.89-0.85 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 589.3 [M + 1] + .
Una mezcla de 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(etil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-M)-9H-purin-6-amina (1.35 g, 2.30 mmol) en HCI 3 M/MeOH (20 ml_) se agitó a una temperatura de 35°C durante 2 horas y se evaporó hasta secarse. El residuo se disolvió en MeOH (15 ml_) y se agregó una solución de K2C03 saturada para ajustar la solución a un pH 8. Posteriormente, la mezcla se agitó durante 5 minutos y se filtró. El filtrado se concentró y el crudo se separó mediante HPLC quirálico y se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el producto cis (280 mg, rendimiento total: 22%) y el producto trans (150 mg, rendimiento total: 12%) en la forma de sólidos color blanco.
Compuesto 73: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((1 R,3S)-3-(2-(5-(ter-butM)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(et¡l)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Cis-isómero: 1H RMN (500 MHz, eOD): d? 8.27 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 5.97 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.67 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.18-4.14 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.91-2.81 (m, 2H), 2.79-2.75 (m, 2H), 2.64-2.58 (m, 2H), 2.25-2.19 (m, 1H), 1.89-1.86 (m, 3H), 1.52-1.47 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 0.98 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 549.3 [M + 1] + .
Compuesto 74: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((1e,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(et¡l)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Trans-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 5.97 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.67 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.18-4.14 (m, 1H), 3.42-3.35 (m, 1H), 2.91-2.78 (m, 4H), 2.64-2.58 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 3H), 1.99-1.96 (m, 2H), 1.85-1.79 (m, 2H), 1.35 (m, 9H), 0.98 (t, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 549.3 [M + 1] + .
Compuesto 76: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((isopropil((1s,3R)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Una solución de trans-N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((isopropil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (480 mg, 0.62 mmol) en TFA al 90% (5 ml_) se agitó a una temperatura de 30°C durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Al residuo se le agregó MeOH (6 mL) y se ajustó al pH = 9-10 con NH3.H20. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para producir el compuesto deseado (182 mg, rendimiento: 50%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (400 MHz, MeOD): d? 8.09 (s, 1 H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.27 (d, J = 3.6 Hz, 1 H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.64 (d, J = 3.2 Hz, 1 H), 6.11 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 4.44 (t, J = 4.8 Hz, 1 H), 4.12 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 4.06-4.01 (m, 1 H), 3.62-3.53 (m, 1 H), 3.10-3.00 (m, 1 H), 2.92-2.65 (m, 4H), 2.25-2.15 (m, 2H), 2.10-1.98 (m, 3H), 1.85-1.76 (m, 2H), 1.03 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.4 Hz, 3H) ppm; 19F RMN (400 MHz, MeOD): d -59.80 ppm; ESI-MS (miz): 590.3 [M + 1] + .
Compuestos 77 y 78 Compuesto 78: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-am¡no-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-7-M)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(2,2,2-tri luoroetil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.09 (s, 1H), 7.48 (brs, 1H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.28 (dd, J = 10.5 y 1.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 3H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.78 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 2.28-2.20 (m, 2H), 1.92-1.78 (m, 3H), 1.55-1.45 (m, 2H), 1.37 (s, 9H) ppm; LC-MS (m/z): 602.3 [M + 1]*.
Compuesto 77: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.09 (s, 1H), 7.48 (brs, 1H), 7.39 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 10.5 y 2.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.14-4.09 (m, 2H), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.30-3.15 (m, 2H), 3.11-3.04 (m, 1H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.80 (t, J = 9.5 Hz, 2H), 2.12-2.03 (m, 3H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm; LC-MS (m/z): 602.3 [M + 1] + . 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo una mezcla de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4- il)metil)am¡no)ciclobutil)propanoato de bencilo (3.76 g, 7.2 mmol) y NaBH3CN (5.9 g, 93.6 mmol) en MeOH (40 mL) se le agregó AcOH para ajustar el pH = 6. Posteriormente, Se agregaron 37% de HCHO (8.7 mL, 122.4 mmol) y la mezcla se agitó a una temperatura de 30°C durante 1.5 horas. Se agregó agua (15 mL) y la mezcla se concentró in vacuo. Posteriormente, la mezcla se extractó con DCM (30 mL x 3). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El crudo se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 100:1 a 20:1) para obtener el objetivo (2.4 g, rendimiento: 67%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.27 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35-7.30 (m, 5H), 6.22 (s, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 5.09 (s, 2H), 5.04-5.01 (m, 1H), 4.40-4.38 (m, 1H), 2.76-2.65 (m, 3H), 2.29-2.22 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11-1.95 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.64-1.61 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.41-1.39 (m, 1H), 1.38 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 537.3 [M + 1]\ Ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R)6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 , 3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico A una solución de 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (2.4 g, 4.48 mmol) en MeOH (40 mL) se le agregó Pd/C al 10% (2.3 g) y la mezcla se agitó bajo una atmósfera de H2 a una temperatura de 50°C durante 15 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para obtener el objetivo (1.9 g, rendimiento: 95%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.27(s, 1H), 8.24 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.54-5.52 (m, 1H), 5.09-5.07 (m, 1H), 4.50-4.47 (m, 1H), 3.17-3.07 (m, 2H), 3.02-2.90 (m, 1H), 2.39-2.35 (m, 3H), 2.31-2.05 (m, 4H), 1.91-1.70 (m, 2H), 1.64-1.51 (m, 5H), 1.39 (s, 3H), 1.23-1.15 (m, 1H) ppm; ESI-MS (m/z): 447.2 [M + 1]+.
N-2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (1.9 g, 4.26 mmol), HOAT (753 mg, 5.54 mmol), HATU (2.1 g, 5.54 mmol) y TEA (3 mL, 21.3 mmol) en DCM (40 mL) se le agregó 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (769 mg, 4.69 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó agua (15 mL) y la mezcla se extractó con DCM (30 mL x 2). La fase orgánica combinada se lavó con H20 (20 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y concentraron. El producto crudo se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 70:1 a 20:1) para obtener el objetivo (1.8 g, rendimiento: 72%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28 (s, 1H), 8.23 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.10-6.92 (m, 2H), 6.81-6.76 (m, 1H), 6.21 (s, 1H), 5.56 (s, 1H), 5.49 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 2.69-2.49 (m, 3H), 2.31-2.27 (m, 2H), 2.13-2.00 (m, 5H), 1.88-1.81 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.41-1.35 (m, 4H), 1.28-1.25 (m, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 593.4 [M + 1] + . 9-((3a ,4R,6R,6aR)-6-((((1 r,3S)-3-(2-(5-(ter-but¡l)-1H-benzo[d]im¡dazol-2-il)etil)ciclobutil)(metil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 , 3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Una solución de N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (1.8 g, 3.04 mmol) en AcOH (20 mL) se agitó a una temperatura de 65°C durante 15 horas. La solución se concentró in vacuo y se diluyó con DCM (30 mL). La mezcla se lavó con una solución de NaHC03 saturada (20 mL x 2) y salmuera (20 mL x 1). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró para obtener 1.7 g (rendimiento: 97%) del producto deseado.
El producto se separó mediante HPLC quirálico para obtener 920 mg de c/s-isómero y 420 mg de rrans-isómero.
Cis-isómero: H R N (500 MHz, MeOD): d? 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 6.19 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 4.99-4.97 (ra, 1H), 4.35-4.31 (m, 1H), 2.77-2.73 (m, 2H), 2.62-2.46 (m, 3H), 2.10-2.01 (m, 4H), 1.84-1.81 (m, 3H), 1.58 (s, 3H), 1.38-1.36 (m, 12H), 1.19-1.14 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 575.3 [M + 1] + .
Trans-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 6.19 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 5.01-4.98 (m, 1H), 4.36-4.34 (m, 1H), 2.96-2.92 (m, 2H), 2.77 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.58-2.50 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.04-1.90 (m, 4H), 1.82-1.79 (m, 1H), 1.70-1.66 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 575.3 [M + 1] + .
Compuesto 87: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-M)-5-((isopropil((1 R,3S)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol Una solución de cis-N-(2,4-dimetoxibencil)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((isopropil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (600 mg, 0.77 mmol) en TFA al 90% (5 ml_) se agitó a una temperatura de 30CC durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Al residuo se le agregó MeOH (6 ml_) y se ajustó a pH = 9-10 con NH3.H20. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para producir el compuesto deseado (260 mg, rendimiento: 57%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (400 MHz, MeOD): d? 8.09 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.27 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 8.4 y 0.8 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.11 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.05-4.01 (m, 1H), 3.20-3.10 (m, 1H), 3.08-3.00 (m, 1H), 2.88-2.65 (m, 4H), 2.25-2.15 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 3H), 1.65-1.55 (m, 2H), 1.02 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.4 Hz, 3H) ppm; 19F RMN (400 MHz, MeOD): d -59.80 ppm; ESI-MS (m/z): 590.3 [M + 1] + .
Compuestos 90 y 75: 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo A una solución de 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(aminometil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (2.5 g, 5.49 mmol), 3-(3-oxociclobutil)propanoato de bencilo (1.66 g, 7.14 mmol) y HOAc (329 mg, 5.49 mmol) en DCE (40 ml_) se le agregó NaB(OAc)3H (2.33 g, 11 mmol) en una porción. Posteriormente, la mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó NaHC03 acuoso saturado (40 mL) para extinguir la reacción, posteriormente se extractó con DCM (50 mL x 3), se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró. El producto crudo se purificó mediante SGC (DCM : MeOH = 100:1 a 50:1) para producir el compuesto deseado (2.3 g, rendimiento: 64%) en la forma de un sólido color blanco. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35-7.28 (m, 5H), 7.20 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.40-5.39 (m, 1H), 5.08-5.07 (m, 2H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.26-4.24 (m, 1H), 3.82 (S, 3H), 3.75 (S, 3H), 3.10-3.05 (m, 0.55H), 2.86-2.82 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 3H), 2.10-1.59 (m, 5H), 1.58 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.35-1.25 (m, 0.6H), 1.15-1.08 (m, 0.5H) ppm; LC-MS (m/z): 672.4 [M + 1] + . 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo Se mezcló 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (2.3 g, 3.43 mmol) con K2C03 (3.3 g, 24 mmol) y 2-yodopropano (5.8 g, 34.3 mmol) en MeCN (25 mL) en un tubo sellado, posteriormente se calentó a una temperatura de 95°C con agitación durante 20 horas. La mezcla de reacción se filtró y se enjuagó con MeCN (30 mL), el filtrado se evaporó in vacuo para producir el compuesto deseado (2.1 g, rendimiento: 88%) en la forma de un sólido color blanco, el cual se utilizó para el siguiente paso sin purificación adicional. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.13 (s, 1H), 7.35-7.29 (m, 5H), 7.18 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 8.5 y 2.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.33-5.32 (m, 1H), 5.08-5.06 (m, 2H), 4.90-4.89 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.15-4.14 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.37-3.36 (m, 0.43H), 3.01-2.98 (m, 0.59H), 2.92-2.88 (m, 1H), 2.70-2.40 (m, 3H), 2.24-2.18 (m, 2H), 2.10-1.80 (m, 3H), 1.75-1.69 (m, 2H), 1.61-1.52 (m, 5H), 1.38 (s, 3H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.81-0.79 (m, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 714.0 [M + 1]\ Ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico Se disolvió 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoato de bencilo (1.5 g, 2.1 mmol) en MeOH (25 mL), se agregó Pd/C (10% sobre carbono, 70% de agua, 742 mg) y la mezcla resultante se agitó a una temperatura de 35°C bajo 1 atmósfera de H2 durante la noche. Posteriormente, la mezcla se filtró y se enjuagó con MeOH (15 mL x 3), el filtrado se evaporó in vacuo para producir el compuesto deseado (1.12 g, rendimiento: 85%) en la forma de un sólido color blanco, el cual se utilizó para el siguiente paso sin purificación adicional. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.18 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.35-7.32 (m, 1H), 7.23-7.22 (m, 1H), 7.12 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.66 (brs, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43-6.41 (m, 1H), 6.24-6.23 (m, 1H), 5.47-5.46 (m, 1H), 5.13-5.12 (m, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.41-4.37 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.64-3.58 (0.6H), 3.46-3.40 (m, 1.7H), 2.45-1.60 (m, 9H), 1.57 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.11 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 624.0 [M + 1] + .
N-(2-amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibencil)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanoico (1.1 g, 1.76 mmol), HATU (1 g, 2.64 mmol), HOAT (359 mg, 2.64 mmol) en DCM (30 mL), se le agregó una solución de 4-ter-butilbenceno-1 ,2-diamina (433 mg, 2.64 mmol) y TEA (533 mg, 5.28 mmol) en DCM (10 mL) en forma de gotas, posteriormente la mezcla de reacción resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Después de diluirse con DCM (50 mL), la mezcla se lavó con agua (30 mL x 3), se secó y concentró. El producto crudo se purificó mediante SGC (DCM:MeOH = 100:1 a 40:1) para producir el compuesto deseado (680 mg, rendimiento: 50%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.16 (s, 1H), 7.19 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.14-7.10 (m, 1.7H), 6.99-6.97 (m, 0.6H), 6.92 (s, 0.6H), 6.77 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 6.66-6.65 (m, 1H), 6.54-6.53 (m, 1H), 6.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.36-5.35 (m, 1H), 4.96-4.95 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.17-2.73 (m, 4H), 2.33-1.71 (m, 8H), 1.58 (s, 3H), 1.53-1.50 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.0 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 5.0 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 770.0 [M + 1] + . 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina Se disolvió N-(2-Amino-4-(ter-butil)fenil)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-dimetoxibenc¡l)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(isopropil)amino)ciclobutil)propanamida (670 mg, 0.87 mmol) en HOAc (8 mL), y posteriormente se calentó a una temperatura de 65°C con agitación durante la noche. El solvente se eliminó in vacuo. El residuo se disolvió en DCM (60 ml_), posteriormente se lavó con NaHC03 (saturado, 20 ml_) y agua (20 ml_), la fase orgánica se secó y concentró. El producto crudo se purificó mediante TLC de preparación (DCM:MeOH = 10:1) para producir el compuesto deseado (470 mg, rendimiento: 73%) en la forma de un sólido color blanco, el cual se separó posteriormente mediante HPLC quirálico para producir cis (243 mg) y trans isómeros (180 mg) en la forma de sólidos color blanco.
Cis-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.15 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 7.27 (dd, J = 8.5 y 1.5 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.38 (dd, J = 8.0 y 2.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 6.5 y 2.5 Hz, 1H), 4.92-4.91 (m, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.16-4.15 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.08-3.07 (m, 1H), 2.97-2.96 (m, 1H), 2.72-2.66 (m, 4H), 2.09-2.03 (m, 2H), 1.82-1.78 (m, 3H), 1.56 (s, 3H), 1.48-1.40 (m, 2H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (S, 9H), 0.95 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 752.0 [M + 1] + .
Trans-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.14 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 7.27 (dd, J = 8.5 y 1.5 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.39-6.37 (m, 1H), 6.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 6.0 y 2.5 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 6.5 y 3.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.17-4.15 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.44-3.43 (m, 1H), 2.93-2.90 (m, 1H), 2.77-2.68 (m, 3H), 2.62-2.60 (m, 1H), 2.05-1.93 (m, 5H), 1.68-1.67 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.36 (s, 12H), 0.95 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 752.0 [M + 1] + .
Compuesto 90: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1R,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol A una mezcla de TFA (2.7 ml_) y agua (0.3 mL) se le agregó c¡s-isómero-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter-butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrah¡drofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetox¡bencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim¡din-4-amina (235 mg, 0.31 mmol). La solución se dejó asentar a una temperatura de 35°C durante 2 horas y se evaporó hasta secarse. El residuo se evaporó junto con metanol dos veces. Posteriormente, el residuo se disolvió en MeOH (20 mL). La solución se neutralizó mediante K2C03 (124 mg, disuelto en 1 mL de H20) con agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente se eliminó in vacuo, posteriormente el producto crudo se purificó mediante HPLC de preparación para producir el compuesto deseado (90 mg, rendimiento: 51%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.08 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.28 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.43-4.41 (m, 1H), 4.12-4.09 (m, 1H), 4.04-4.01 (m, 1H), 3.15-3.13 (m, 1H), 3.04-3.01 (m, 1 H), 2.86-2.68 (m, 4H), 2.21-2.17 (m, 2H), 1.88-1.85 (m, 3H), 1.60-1.57 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.01 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 0.97 (d, J = 8.0 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 562.5 [M + 1] + .
Compuesto 75: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrof uran-3,4-diol A una mezcla de TFA (2.7 ml_) y agua (0.3 ml_) se' le agregó el trans-isómero 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(ter- butil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 ,3]dioxol-4-il)-N-(2,4-dimetoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (175 mg, 0.23 mmol). La solución se dejó asentar a una temperatura de 35°C durante 2 horas y se evaporó hasta secarse. El residuo se evaporó junto con metanol dos veces. Posteriormente, el residuo se disolvió en MeOH (20 ml_). La solución se neutralizó mediante K2C03 (97 mg, disuelto en 1 mL de H20) con agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente se eliminó ¡n vacuo, posteriormente, el producto crudo se purificó mediante HPLC de preparación para producir el compuesto deseado (95 mg, rendimiento: 71%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.09 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.41-7.39 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 2H), 6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.45-4.42 (m, 1H), 4.13-4.11 (m, 1H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.58-3.54 (m, 1H), 3.06-3.02 (m, 1H), 2.89-2.80 (m, 3H), 2.74-2.70 (m, 1H), 2.20-2.17 (m, 2H), 2.03-1.99 (m, 3H), 1.84-1.81 (m, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.03 (d, J = 8.5 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 8.0 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 562.5 [M + 1] + .
Compuesto 96: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil((1 R,3S)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofurano-3,4-diol N-2-amino-4-(trifluorometoxi)fenil)-3-(3((((3aR,4R,6R,6aR)-6- (6-amino-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida A una solución de ácido 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2 ,2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1 , 3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanoico (1.2 g, 2.91 mmol), HATU (2.17 g, 5.83 mmol) y HOAT (0.91 g, 5.83 mmol) en DCM (17 ml_), se le agregaron 4-(trifluorometoxi)benceno-1 ,2-diamina (1.1 g, 5.83 mmol) y TEA (2.05 mL, 14.56 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se diluyó con DCM (50 mL) y se lavó con agua (15 mL x 3) y salmuera (30 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y concentró. El residuo se purificó mediante Combi-Flash (40 g de gel de sílice, inicio EA:DCM:MeOH = 10:10:0 a 10:10:8 por gradiente, 40 mL/min, 50 min, 2.0 L de volumen de solvente total) para producir el compuesto deseado (1.0 g, rendimiento: 60%) en la forma de un sólido color amarillo. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1H), 8.25-8.24 (m, 1H), 7.20-7.13 (m, 1H), 6.95-6.85 (m, 0.4H), 6.73 (brs, 0.8H), 6.54 (d, J = 7.5 Hz, 0.8H), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.60-5.55 (m, 1H), 5.03-5.00 (m, 1H), 4.40-4.35 (m, 1H), 3.40-3.35 (m, 0.3H), 3.00-2.92 (m, 0.7H), 2.70-2.47 (m, 3H), 2.36-2.28 (m, 2H), 2.20-1.80 (m, 6H), 1.76-1.66 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.26-1.16 (m, 1H) ppm; ESI-MS (m/z): 621.3 [M + 1] + . 9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil<3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuro[3,4-d][1 , 3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina Una solución de N-(2-amino-4-(trifluorometoxi)fenil)-3-(3- ((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-amino-9H-purin-9-il)-2>2-dimetiltetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)metil)(metil)amino)ciclobutil)propanamida (1.0 g, 1.61 mmol) en HOAc (10 mL) se agitó a una temperatura de 65°C durante la noche. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo se disolvió en DCM (50 mL), se lavó con una solución de NaHC03 saturada (10 mL x 2), agua (20 mL) y salmuera (30 mL). El residuo se separó mediante HPLC quirálica para producir el cis isómero (460 mg, rendimiento: 47%) y el trans isómero (220 mg, rendimiento: 23%). cis-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.13 (dd, J = 8.5 y 1.0 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 6.5, 2.5 Hz, 1H), 5.01 (q, J = 3.5 Hz, 1H), 4.33-4.37 (m, 1H), 2.81-2.78 (m, 2H), 2.66-2.58 (m, 2H), 2.53-2.49 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 5H), 1.86-1.84 (m, 3H), 1.59 (s, 3H), 1.43-1.39 (m, 4H), 1.22-1.17 (m, 1H) ppm; LC-MS (m/z): 603.3 [M + 1] + . trans-isómero: 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.52 (brs, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.13 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 6.5 y 2.0 Hz, 1H), 5.01 (q, J = 3.0 Hz, 1H), 4.38-4.34 (m, 1H), 2.96-2.92 (m, 1H), 2.84-2.81 (m, 2H), 2.59-2.49 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.05-1.91 (m, 4H), 1.85-1.79 (m, 1H), 1.73-1.66 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 603.3 [M + 1] + .
Compuesto 96 Una solución de cis-9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil) tetra hidrofuro[3,4-d] [1,3] dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (460 mg, 0.77 mmol) en HCI 1 N/MeOH (10 mL) se agitó a una temperatura de 30°C durante 4 horas. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Al residuo se le agregó MeOH (10 mL) y se ajustó a pH = 10~11 con NH3.H20. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para producir el compuesto deseado (215 mg, rendimiento: 43%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.28 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1 H), 7.12 (dd, J = 8.5 y 0.5 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.71 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.84-2.81 (m, 2H), 2.77- 2.68 (m, 3H), 2.25-2.22 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.91-1.89 (m, 3H), 1.51-1.45 (m, 2H) ppm; LC-MS (m/z): 563.3 [ + 1] + .
Compuesto 97: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((metil((1s,3R)-3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrof uran-3,4-diol Una solución de trans-9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-dimetil-6-((metil(3-(2-(5-(trifluorometoxi)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)amino)metil)tetrahidrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-il)-9H-purin-6-amina (220 mg, 0.37 mmol) en HCI 1 N/MeOH (5 ml_) se agitó a una temperatura de 30°C durante 4 horas. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Al residuo se le agregó eOH (10 mL) y se ajustó a pH = 10-11 con NH3.H20. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para producir el compuesto deseado (80 mg, rendimiento: 39%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.29 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40 (s, 1 H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.25 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.18-4.20 (m, 1H), 3.04-3.08 (m, 1H), 2.83-2.86 (m, 2H), 2.64-2.72 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.97-2.10 (m, 5H), 1.82-1.85 (m, 2H) ppm; LC-MS (m/z): 563.3 [M + 1] + .
Compuesto 106 A una solución de (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((1 r,3S)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol (300 mg, 0.53 mmol) en dioxano acuoso al 30% (20 ml_) se le agregó MCPBA (91 mg, 0.53 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas y posteriormente se concentró. El crudo se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el producto deseado (160 mg, Rendimiento: 45%) en la forma de un sólido color blanco. H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.24 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.49 (brs, 1H), 7.42-7.38 (m, 1H), 7.31-7.29 (m, 1H), 6.00-5.96 (m, 1H), 4.68-4.65 (m, 2H), 4.43-4.36 (m, 1H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.88-3.76 (m, 1H), 3.68-3.49 (m, 1H), 3.46-3.37 (m, 1H), 2.84-2.81 (m, 2H), 2.42-2.15 (m, 4H), 1.95-1.89 (m, 3H), 1.39 (s, 1H), 1.35-1.27 (m, 3H), 1.25-1.21 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 579.4 [M + 1] +.
Compuesto 107 A una solución de (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-((((ls,3R)-3-(2-(5-(ter-butil)-1 H-benzo [d]im id azol -2 -il)etil)ciclobutil)(isopropil)amino)metil)tetrahidrofuran-3,4-diol (300 mg, 0.53 mmol) en dioxano acuoso al 30% (20 ml_) se le agregó MCPBA (91 mg, 0.53 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas y posteriormente se concentró. El crudo se purificó mediante HPLC de preparación para obtener el producto deseado (80 mg, Rendimiento: 26%) en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (500 MHz, MeOD): d? 8.25-8.22 (m,2H), 7.49 (brs, 1H), 7.42-7.38 (m, 1H), 7.31-7.28 (m, 1H), 6.02-5.97 (m, 1H), 4.69-4.60 (m, 2H), 4.47-4.32 (m, 2H), 3.86-3.74 (m, 1H), 3.70-3.54 (m, 1H), 3.45-3.35 (m, 1H), 2.97-2.72 (m, 4H), 2.15-1.75 (m, 5H), 1.39 (s, 1H), 1.34-1.28 (m, 3H), 1.26-1.22 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 579.7 [M + 1] +.
Ejemplo 9: Cromatografía de Fuido SuperCrítico Se purificaron compuestos mediante Cromatografía de Fluido Supercrítico (SFC) utilizando técnicas conocidas. Los métodos son los empleados por Lotus Separations, LLC, Princeton, NJ. Ver por ejemplo, el sitio http:www.lotussep.com. Ver también el sitio h ttp: www .g reen che mis trvg roup.org/Prog ram2009/html ..
A continuación se describen condiciones de separación SFC para ciertos ejemplos. Otros compuestos aquí descritos pueden ser separados a través de métodos similares.
Ejemplo 10: Protocolo de Bioensayo y Métodos Generales Cultivo celular. Se obtuvieron líneas de célula de tumor hematológicas humanas THP-1, RS4;11, y V4-11 en ATCC, se obtuvieron células DSMZ MOLM-13. Todas las líneas se crecieron en RPMI1640 que contiene 10% FBS y se mantuvieron utilizando las densidades celulares y condiciones ambientales recomendadas por el vendedor. El medio fue suplementado con aminoácidos no esenciales y L-Glutamina. Las células THP-1 también se suplementaron con 0.05 mM P-Mercaptoetanol.
Análisis de Metilación. Se sembraron células 5 X 105 células/mL en una placa de 12 depósitos en un volumen final de 2 ml_s. Las células se dosificaron con los compuestos en la concentración adecuada a partir de una solución de existencia de 50 mM DMSO. El compuesto y el medio fueron refrescados cada dos días durante el curso de incubación de siete días, contando las células utilizando exclusión azul trypan (Vi ce 11 ) , peletizando en 200 g durante 5 minutos y resuspendiendo el medio fresco que contiene el compuesto en una concentración celular final de 5 X 105 células/mL. Después de la incubación del compuesto, se extractaron las histonas de 1X106 utilizando un equipo de extracción de histona comercial (Active Motif). Las histonas purificadas fueron cuantificadas utilizando el ensayo de proteína BCA (Pierce) con una curva estándar BSA. Se fraccionaron 400 ng de histonas aisladas mediante SDS-PAGE en un gel del 4 al 20% y se transfirieron las membranas de nitrocelulosa. Las membranas se incubaron con diversos anticuerpos primarios y secundarios y se generaron imágenes en el sistema de generación de imágenes Licor (Odyssey). El policlonal de conejo H3K79- e2 se compró en Abcam. Otros anticuerpos policlonales de conejo, incluyendo H3K4-Me3, H3K9-Me3, H3K27-Me2, y H3K27-Me3 se compraron en Cell Signaling Technologies (CST). Se utilizó un anticuerpo H3total a monoclonal de ratón como un control de carga (CST). Se compraron anticuerpos secundarios etiquetados en forma fluorescente en Odyssey.
Crecimiento Celular y Análisis de Viabilidad. Las células fueron recolectadas de cultivos de células exponencialmente en crecimiento se sembraron en 3 X 104 células por depósito. Las muestras se mantuvieron en una placa de fondo claro con pared negra con 96 depósitos (Corning). Se agregó una concentración final de 50 uM de compuesto en 0.2% DMSO a los depósitos adecuados el día 0. El tratamiento de MV4-11 y MOLM-13 duró 14 días, en tanto que las células THP-1 fueron tratadas durante 18 días. El compuesto y el medio fueron reemplazados cada dos días durante la incubación, transfiriendo las muestras a una placa de fondo V (Corning), rotando en 200 g durante 5 minutos en un rotor a temperatura ambiente, resuspendiendo el medio fresco que contiene el medio, y transfiriendo nuevamente a la placa de ensayo. Las células se contaron periódicamente utilizando el ensayo Guava Viacount se leyeron en el instrumento EasyCyte Plus (Millipore). Las placas de ensayo se dividieron cuando fue necesario y en las densidades celulares recomendadas. Se ajustaron los conteos de células finales para tomar en cuenta las divisiones celulares, y se reportaron como células viables totales/depósito.
HOXA9 (qPCR). Las células se trataron con el compuesto durante 7 días en forma similar al ensayo de metilación. Las células se peletizaron en 200 g en un rotor de temperatura ambiente y ARN total aislado utilizando el equipo Qiagen RNeasy. La concentración ARN y la calidad se determinaron utilizando el Nanovue (GE Healtcare). El ARN total se transcribió en forma inversa utilizando un equipo de transcripción inversa de cADN de alta capacidad (Applied Biosystems). Se compró un conjunto de cebador etiquetado diseñado previamente para HOXA9 en Applied Biosystems. Las reacciones qPCR contenían 50 ng de cADN, cebador etiquetado 1X y mezcla maestra PCR universal 1X Taqman (Applied Biosystems). Las muestras se corrieron en una máquina PCR 7900 HT Fast Real Time (Applied Biosystems) con condiciones PCR de 2 minutos 50°C, 10 minutos 95°C, 40 ciclos en 15 segundos, 95°C y 1 minuto 60°C. Los números del ciclo HOXA9 fueron normalizados a la microglobulina del gen B2 de mantenimiento (control diseñado previamente B2M de Applied Biosystems). El porcentaje de control DMSO se calculó con la ecuación, control de porcentaje = (2? ??0?)*100, en donde ???? es la diferencia entre la muestra HOXA9 normalizada y el control (muestra ACT - control ACT = ????).
Determinación de IC50. Los compuestos de prueba se diluyeron en serie 3 veces en DMSO para 10 puntos y se revistieron 1 µ? en una placa de microtitulación de 384 depósitos. El control positivo (100% estándar de inhibición) tuvo una concentración final de 2.5 uM de S-adenosil-L-homocisteína y el control negativo (estándar de inhibición 0%) contenía 1 µ? de D SO. Posteriormente se incubó el compuesto durante 30 minutos con 40 1µ por depósito de DOT1L(1-416) (0.25 nM concentración final en amortiguador de ensayo: 20 mM TRIS, pH 8.0, 10 mM NaCI, 0.002% Tween20, 0.005% de Gelatina de Piel de Bovino, 100 mM KCI, y 0.5 mM DTT). Se agregaron para iniciar la reacción 10 µ? por depósito de la mezcla de substrato (mismo amortiguador de ensayo con 200 nM S-[metil-3H]-adenosil-L metionina, 600 nM de S-[metil-3H]-adenosil-L metionina no etiquetada, y 20 nM de oligonucleosoma). La reacción se incubó durante 120 minutos a temperatura ambiente y se extinguió con 10 µ? por depósito de 100 µ? de S-metil-adenosil-L metionina. Para detección, el substrato de 50 µ? de reacción fue inmovilizado en una placa Flashplate recubierta con estreptavidina de 384 depósitos (Perkin Elmer) (también recubierta con 0.2% de polietiienoimina) y se leyó en un contador Top Count (Perkin Elmer). Los valores IC50 se presentan en la tabla que se encuentra a continuación. En esta tabla, "A" indica valores IC50 de > 0.1 µ? y <1 µ?; "C" indica valores IC50 de > 1 µ? y < 10 µ?; y "D" indica valores IC5o de > 10 µ? y < 50 µ?.
Ejemplo 11: Ensayo Anti-Proliferación de Tumor Ensayo Anti-Proliferativo In Vitro. La potencia y selectividad de la actividad anti-proliferativa de los compuestos de la presente invención, se evaluó utilizando un panel de líneas de células de leucemia humana reajustadas con MLL y reajustadas sin MLL. Las líneas celulares utilizadas en el estudio se' describen en la figura 1A. El panel reajustado con MLL incluyó líneas celulares derivadas de ALL, AML y leucemias bifenotípicas que albergan fusiones MLL-AF4, MLL-AF9 o MLL-ENL. Estas líneas celulares reclutan DOT1L. El panel también incluyó cinco líneas celulares que no poseen un reajuste con MLL, y una línea celular que contiene una duplicación tándem parcial del gen MLL (MLL-PTD).
Se revistieron células que crecen exponencialmente, por triplicado, en placas de 96 depósitos en una densidad de 3 x 104 células/depósito en un volumen final de 150 µ?. Las células se incubaron en la presencia de concentraciones en incremento del Compuesto 2. Se determinó la actividad anti-proliferativa mediante medidas de viabilidad celular cada 3 a 4 días durante hasta 14 días. Los días de los conteos celulares, se reemplazó el medio del crecimiento y el Compuesto 2, y la división celular regresó a una densidad de 5 x 104 células/depósito.
Los resultados de la concentración inhibidora máxima media (IC50) en la figura 1, muestran que el Compuesto 2 demuestra potente actividad anti-proliferativa nanomolar contra tres de cuatro líneas celulares reajustadas con MLL probadas (MV4;11 (MLL-AF4), MOLM-13 (MLL-AF9), y KOPN-8 (MLL-ENL). Las células EOL-1 que expresan un MLL-PTD también fueron altamente sensibles al Compuesto 2 (IC50 =11 nM). Las células RS4;11 y dos células reajustadas sin MLL (Reh y Kasumi-1) tuvieron ordenes de 1 a 3 logaritmos menos sensibles, y dos células reajustadas sin MLL (Jurkat y HL-60) no mostraron actividad. En general, los resultados indican que el Compuesto 2 inhibe en forma potencial y selectiva la proliferación de las líneas de célula de leucemia reajustadas con MLL y un subconjunto de líneas de célula de leucemia reajustadas sin MLL.
Ensayo de Anti-Proliferativo In Vivo. La actividad antitumor ¡n vivo de los compuestos de la presente invención, se evaluó en un modelo de xenoinjerto de ratón de leucemia reajustada con MLL.
A cuatro grupos de 20 (Grupos 1,3,4 y 5), y un grupo de 8 (Grupo 2) ratones hembra desnudos (peso promedio de 0.023 kg) que contienen tumores de xenoinjerto MV4-11 con tamaños que fluctúan de 80 a 120 mm, se les implantaron en forma subcutánea minibombas (Alzet Model 2001). El grupo 1 recibió únicamente vehículo de la bomba. El grupo 2, recibió vehículo únicamente de la bomba más inyecciones ip tid (con 8 horas de separación) del vehículo. El grupo 3 recibió 112 mg/kg/día de la bomba más inyecciones ip tid (8 horas de separación) de 20 mg/kg del Compuesto 2 para una dosis diaria total de 172 mg/kg/día. El grupo 4 y 5 recibió 112 y 56 mg/kg/día del Compuesto 2 de las bombas, respectivamente. Las bombas se diseñaron para durar 7 días, y se intercambiaron dos veces para proporcionar una duración de infusión total de 21 días de exposición.
Se tomó una sola muestra de sangre de todos los animales en los Grupos 4 y 5 los días 7, 14, y 21 y se ensayó para los niveles de plasma del Compuesto 2. Las muestras de sangre se tomaron del Grupo 3 los días 7 y 14 en los siguientes puntos de tiempo (3 animales por punto de tiempo): 5 minutos pre-dosis ip, y 15 minutos, 30 minutos, 1, 2, y 4 horas post dosis ip. El día 21, tres horas después de la última inyección ip, se tomó una muestra de sangre simple del Grupo 3. Se midió cada 4 días el tamaño del tumor. Después de 21 días se terminó el estudio, se calculó el TGI promedio.
La figura 2 muestra el crecimiento de tumor en 21 días de dosificación. No hubo diferencia en el tamaño de tumor entre los dos grupos de control de vehículo. El grupo de minibomba de alta dosis suplementado con dosificación ip, mostró un TGI estadísticamente significativo de >70% en comparación con los controles. Los grupos de 56 y 112 mg/kg/día mostraron valores TGI estadísticamente no significativos del 43 y 38%, respectivamente, en comparación con los controles. El Compuesto 2 es referido como en el Ejemplo 2 de la figura 2.
La figura 3A muestra las concentraciones en plasma de estado constante estimado del Compuesto 2 en los Grupos 4 y 5, tal como se determina en muestras de sangre promediadas, tomadas los días 7, 14, y 21. Los datos sugieren que los niveles en plasma del Compuesto 2 de estado constante promedio fluctuaron de 99 a 152 ng/ml para el Grupo 4, y 52 a 238 ng/ml para el Grupo 5. El nivel de plasma promedio del último muestreo el día 21 fue del 99 ng/ml para el Grupo 4 y 52 ng/ml para el Grupo 5.
La figura 3B muestra las concentraciones en plasma del Compuesto 2 trazadas contra el tiempo después de la inyección ip. Las inyecciones ip produjeron un incremento significativo en la exposición en plasma al Compuesto 2 en términos tanto de Cma (4200 a 5000 ng/ml) después de cada una de las inyecciones tid, y las AUCs diarias con respecto a las producidas por el nivel en plasma del estado constante que resulta de la infusión continua. En general, los resultados indican que el Compuesto 2 demostró actividad antitumor significativa en un modelo de xenoinjerto de ratón de leucemia reajustada con MLL.
INCORPORACIÓN COMO REFERENCIA La descripción total de cada uno de los documentos de patente y artículos científicos aquí referidos, está incorporada para todos los propósitos a la presente invención como referencia.
EQUIVALENTES La presente invención se puede presentar en otras formas específicas sin apartarse del espíritu o características esenciales de la misma. Las modalidades anteriores por consiguiente serán consideradas en todos los aspectos, como ilustrativas en lugar de limitantes de la invención aquí descrita. Por lo tanto, el alcance de la presente invención está indicado a través de las reivindicaciones adjuntas, en lugar de a través de la descripción anterior, y todos los cambios que están dentro del significado y rango de equivalencia de las reivindicaciones, están proyectados para quedar abarcados en el presente documento.

Claims (20)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de la fórmula (IV) o su N-óxido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: en donde A es O o CH2; Q es H, NH2, NHRb, NRbRc, OH, Rb o ORb, en donde cada uno de Rb y Rc es independientemente Ci-Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 a ri lo, heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, heteroarilo de 5 a 10 miembros, o -MrT,, en donde IV es un enlace o enlazador d-C6 alquilo opcíonalmente sustituido con halo, ciano, hidroxilo o C -C6 alcoxilo y ?? es C3-C8 cicloalquilo, C6-C 0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros, o Rb y Rc> junto con el átomo N al cual se adhieren, forman un heterocicloalquilo de 4 a 7 miembros, que tiene 0 o 1 heteroátomos adicionales para el átomo N opcíonalmente sustituido con C -C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, ?(0)0-?!-?6 alquilo, OC(O)-C -Ce alquilo, ciano, C!-C6 alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y cada uno de Rb, Rc y T-, es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-d alcoxilo, amino, mono-CrCe alquilamino, di-d-Ce alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; X es N o CRX, en donde Rx es H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, o RSi, siendo RSi amino, Ci-C6 alcoxilo, d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo RSi opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-d alcoxilo, amino, mono-d-C6 alquilamino, di-d-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; Y es H, Rd, S02Rd o CORd, siendo Rd d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-Ce alquinilo, C3-Ce cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros, y siendo Rd opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de d-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-C6 alcoxilo, d-d alquilsulfonilo, amino, mono-d-d alquilamino, di-d-d alquilamino, d-d cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, y con C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros siendo opcionalmente sustituidos con C^-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, halo, hidroxilo, carboxilo, C(0)OH, C(0)0-d-C6 alquilo, OCíOJ-d-Ce alquilo, ciano, C^-C6 alcoxilo, amino, niono-CrCe alquilamino, di-Ci-C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-Ci0 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros o heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de y R2 es independientemente H, halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, RS2, siendo RS2 amino, d-Ce alcoxilo, Ci-C6 alquilo, C2-C6 alquenilo o C2-C6 alquinilo, y siendo cada RS2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, d-d alcoxilo, amino, mono-CrC6 alquilamino, di-d-d alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, C6-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros; cada uno de Re, Rf, Rg y Rh, es independientemente -M2-T2, en donde M2 es un enlace, S02, SO, S, CO, C02, O, enlazador 0-C1-C4 alquilo, enlazador d-d alquilo, NH, o N(Rt), siendo Rt d-d alquilo y T2 es H, halo, o RS4, siendo RS4 d-d alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, C3-C8 cicloalquilo, Cedo arilo, heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros, o heteroarilo de 5 a 10 miembros y cada uno del enlazador 0-Ci-C4 alquilo, enlazador d-d alquilo, Rt y Rs4 siendo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxilo, carboxilo, ciano, C^Ce alquilo, C2-C6 alquenilo, C2-C6 alquinilo, Ci-Ce alcoxilo, amino, mono-Ci-C6 alquilamino, d i-C t -C6 alquilamino, C3-C8 cicloalquilo, Ce-C10 arilo, heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros y heteroarilo de 5 a 6 miembros, y m es 0, 1 o 2.
2. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizado porque A es O.
3. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizado porque A es O y m es 2.
4. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizado porque X es N.
5. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizado porque Q es NH2 o NHRb, en donde Rb es -M l , siendo un enlace o enlazador C3-C8 cicloalquilo, y siendo Ti C3-C8 cicloalquilo.
6. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizado porque Ri y R2, cada uno son H.
7. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizado porque Y es Rd.
8. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 7, caracterizado porque Rd es ?^?ß alquilo opcionalmente sustituido con C3-C8 cicloalquilo o halo.
9. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 7, caracterizado porque Rd es C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con C^-C6 alquilo o halo.
10. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque al menos uno de Re, Rf, Rg, y Rh es halo, C -C6 alcoxilo opcionalmente sustituido con uno o más halo, C -C6 alquilsulfonilo opcionalmente sustituido con uno o más halo, Ci-C6 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, y C -C6 alcoxilo, C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más Ci-C6 alquilo, o heterocicloalquilo de 4 a 8 miembros opcionalmente sustituido con uno o más C^Ce alquilo.
11. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 10, caracterizado porque al menos uno de Re, Rf, Rg, y Rh se seleccionan del grupo que consiste en F, Cl, Br, CF3, OCF3, S02CF3, oxetanilo, C!-C alcoxilo, C3-C8 cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de C^-CA alquilo y CN, y C1-C4 alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de CN, halo, C3-C8 cicloalquilo, hidroxi y C^-Ce alcoxilo.
12. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto se selecciona de los Compuestos 1 a 7, 9 a 109, y 111 a 140.
13. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto tal como se describe en la reivindicación 1 , y un transportador farmacéuticamente aceptable.
14. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto tal como se describe en la reivindicación 12 y un transportador farmacéuticamente aceptable.
15. Un método para tratar cáncer, en donde el método comprende administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición tal como se describe en la reivindicación 13 o 14.
16. Un método para tratar un cáncer hematológico, en donde el método comprende administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición tal como se describe en la reivindicación 13 o reivindicación 14.
17. Un método para tratar leucemia, en donde el método comprende administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición tal como se describe en la reivindicación 13 o 14.
18. Un método tal como se describe en la reivindicación 17, caracterizado porque la leucemia, es leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia de linaje mezclado.
19. Un método para tratar un trastorno transmitido por translocación de un gen en el cromosoma 11q23, en donde el método comprende administrar a un sujeto que necesita del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición tal como se describe en la reivindicación 13 o 14.
20. Un método para tratar un trastorno transmitido por la metilación transmitida por DOT1L, en donde el método comprende administrar a un sujeto que necesita del mismo, una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición tal como se describe en la reivindicación 13 o 14.
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Families Citing this family (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112013013659B8 (pt) * 2010-12-03 2024-02-27 Epizyme Inc Compostos moduladores de enzimas epigenéticas, composição farmacêutica compreendendo ditos compostos e usos da dita composição farmacêutica para tratar câncer, câncer hematológico ou leucemia
WO2012082436A2 (en) 2010-12-03 2012-06-21 Epizyme, Inc. Modulators of histone methyltransferase, and methods of use thereof
EP2646441B1 (en) 2010-12-03 2015-12-02 Epizyme, Inc. Carbocycle-substituted purine and 7-deazapurine compounds
KR20130124959A (ko) 2010-12-03 2013-11-15 에피자임, 인코포레이티드 히스톤 메틸전달효소의 7-데아자퓨린 조절제 및 그의 사용방법
US9670463B2 (en) 2011-10-14 2017-06-06 Children's Medical Center Corporation Inhibition and enhancement of reprogramming by chromatin modifying enzymes
ES2702060T3 (es) 2011-12-22 2019-02-27 Alios Biopharma Inc Nucleósidos sustituidos, nucleótidos y sus análogos
US9441007B2 (en) 2012-03-21 2016-09-13 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
USRE48171E1 (en) 2012-03-21 2020-08-25 Janssen Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
US20150284422A1 (en) 2012-08-10 2015-10-08 Epizyme, Inc. Inhibitors of protein methyltransferase dot1l and methods of use thereof
AU2013312319B2 (en) * 2012-09-06 2018-04-19 Epizyme, Inc. Method of treating leukemia
JP2016510316A (ja) * 2012-12-21 2016-04-07 エピザイム，インコーポレイティド 白血病の治療に使用するためのｄｏｔ１ｌ阻害剤
LT3290421T (lt) 2013-02-22 2019-02-25 Pfizer Inc. Pirolo [2, 3 -d]pirimidino darinių derinys su vienu arba daugiau papildomų agentų, kaip janus kinazės (jak) inhibitorių
US20160031839A1 (en) 2013-03-14 2016-02-04 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
EP2970181B1 (en) 2013-03-14 2017-06-07 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
WO2014152261A1 (en) * 2013-03-14 2014-09-25 Epizyme, Inc. Substituted 7-deazapurine compounds
US9776972B2 (en) 2013-03-14 2017-10-03 Epizyme Inc. Pyrazole derivatives as arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
SG11201506972PA (en) 2013-03-14 2015-10-29 Epizyme Inc Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
EP2970135B1 (en) 2013-03-14 2018-07-18 Epizyme, Inc. Pyrazole derivatives as prmt1 inhibitors and uses thereof
JP2016518336A (ja) 2013-03-14 2016-06-23 エピザイム，インコーポレイティド Ｐｒｍｔ１阻害剤としてのピラゾール誘導体およびその使用
AU2014236348B2 (en) * 2013-03-14 2018-05-10 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
WO2014153214A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Epizyme, Inc. Arginine methyl transferase inhibtors and uses thereof
EP2970133B1 (en) 2013-03-14 2018-10-24 Epizyme, Inc. Pyrazole derivatives as prmt1 inhibitors and uses thereof
US9120757B2 (en) 2013-03-14 2015-09-01 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
US9446064B2 (en) * 2013-03-14 2016-09-20 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
WO2014153235A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
EP2968390A4 (en) * 2013-03-15 2016-10-26 Epizyme Inc INJECTABLE FORMULATIONS FOR THE TREATMENT OF CANCER
WO2014152566A2 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Epizyme, Inc. Methods of synthesizing substituted purine compounds
WO2015003131A1 (en) * 2013-07-03 2015-01-08 Epizyme, Inc. Substituted purine compounds
US9535067B2 (en) 2013-07-29 2017-01-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. DOT1L probes
CN105934521B (zh) 2013-08-02 2020-06-30 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 检测和治疗响应于dot1l抑制的白血病的方法
US10143704B2 (en) * 2013-11-13 2018-12-04 Epizyme, Inc. Methods for treating cancer
EP3160477A4 (en) * 2014-06-25 2018-07-04 Epizyme, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
WO2016024185A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Pfizer Inc. Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives useful for inhibiting janus kinase
JP2017527547A (ja) * 2014-08-13 2017-09-21 エピザイム，インコーポレイティド 癌を処置するための併用療法
US9458165B2 (en) 2014-08-27 2016-10-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. DOT1L inhibitors
AU2015318593A1 (en) * 2014-09-17 2017-02-23 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
EP3193879A4 (en) * 2014-09-17 2018-05-16 Epizyme, Inc. Injectable formulations for treating cancer
WO2016051396A1 (en) * 2014-09-30 2016-04-07 Susan Eve Vecht-Lifshitz Pharmaceutical compositions for treating ebola virus disease
WO2016123626A1 (en) * 2015-01-30 2016-08-04 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
US11453697B1 (en) 2015-08-13 2022-09-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
WO2017132398A1 (en) 2016-01-26 2017-08-03 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Targeting chromatin regulators inhibits leukemogenic gene expression in npm1 mutant leukemia
SG11201807965YA (en) 2016-03-15 2018-10-30 Oryzon Genomics Sa Combinations of lsd1 inhibitors for use in the treatment of solid tumors
WO2017157813A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Combinations of lsd1 inhibitors for the treatment of hematological malignancies
CN106432095B (zh) * 2016-09-09 2019-04-16 东南大学 匹莫苯丹关键中间体6-(3,4-二氨基苯基)-5-甲基-4,5-二氢哒嗪-3(2h)-酮的制备
CN110691779B (zh) 2017-03-24 2023-10-10 库拉肿瘤学公司 治疗血液***恶性肿瘤和尤因肉瘤的方法
CN109748943A (zh) * 2017-11-03 2019-05-14 中国科学院上海药物研究所 2’-c-甲基取代核苷类化合物及其制备与用途
CN109748944B (zh) * 2017-11-03 2021-12-10 中国科学院上海药物研究所 5’-脱氧-5’-异丙基取代氨基核苷类化合物、其制备方法和用途
EP3720495A4 (en) * 2017-12-05 2021-06-02 Angex Pharmaceutical, Inc. HETEROCYCLIC COMPOUNDS AS PRMT5 INHIBITORS
KR102118891B1 (ko) 2018-10-04 2020-06-04 성균관대학교산학협력단 매소니아노사이드 b를 유효성분으로 포함하는 혼합 직계성 백혈병 유전자 재배열 동반 백혈병 예방 및 치료용 약학적 조성물
EP3938340A4 (en) * 2019-03-11 2023-03-08 Collaborative Medicinal Development, LLC HETEROAROMATIC AND HETEROBICYCLIC AROMATIC DERIVATIVES FOR THE TREATMENT OF FERROPTOSE-RELATED DISORDERS
CN110092804A (zh) * 2019-03-29 2019-08-06 广州盈升生物科技有限公司 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法
EP3947388A4 (en) 2019-04-02 2022-12-21 Aligos Therapeutics, Inc. LINKS DIRECTED AGAINST PRMT5
CN113024620B (zh) * 2021-03-11 2023-02-28 沈阳药科大学 一种嘌呤衍生物及其制备方法和用途
WO2022271540A1 (en) * 2021-06-21 2022-12-29 Mayo Foundation For Medical Education And Research Inhibitors of dot1l
IL309666A (en) 2021-07-09 2024-02-01 Plexium Inc Aryl compounds and pharmaceutical preparations that modulate IKZF2
CA3221819A1 (en) * 2021-07-19 2023-01-26 Jun Qi Targeting dot1l and smarca4/2 for the treatment of mllr leukemia

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US5763263A (en) 1995-11-27 1998-06-09 Dehlinger; Peter J. Method and apparatus for producing position addressable combinatorial libraries
US20020127598A1 (en) 2000-03-27 2002-09-12 Wenqiang Zhou Solution-phase combinatorial library synthesis and pharmaceutically active compounds produced thereby
EP1138689A1 (en) 2000-03-28 2001-10-04 Roche Diagnostics GmbH N8- and C8-linked purine bases as universal nucleosides used for oligonucleotide hybridization
EP1138688A1 (en) 2000-03-28 2001-10-04 Roche Diagnostics GmbH N8- and C8- linked purine bases as universal nucleosides used for oligonucleotide hybridization
US6534651B2 (en) 2000-04-06 2003-03-18 Inotek Pharmaceuticals Corp. 7-Substituted isoindolinone inhibitors of inflammation and reperfusion injury and methods of use thereof
US20040043959A1 (en) 2002-03-04 2004-03-04 Bloom Laura A. Combination therapies for treating methylthioadenosine phosphorylase deficient cells
JP2005533108A (ja) * 2002-07-16 2005-11-04 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド Ｒｎａ依存性ｒｎａウイルスポリメラーゼの阻害剤としてのヌクレオシド誘導体
AU2002951247A0 (en) * 2002-09-06 2002-09-19 Alchemia Limited Compounds that interact with kinases
EP1572097A4 (en) 2002-09-30 2010-02-17 Smithkline Beecham Corp NUCLEOSIDE DERIVATIVES FOR THE TREATMENT OF INFECTIONS WITH THE HEPATITIS C-VIRUS
GB0301450D0 (en) * 2003-01-22 2003-02-19 Medical Res Council Protein crystal structure
ES2282924T3 (es) * 2003-12-19 2007-10-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibidores de la comt.
EP2266994B1 (en) 2004-08-02 2013-04-03 University Of Virginia Patent Foundation 2-propynyl adenosine analgos with modified 5'-ribose groups having A2A agonist activity
US7576069B2 (en) * 2004-08-02 2009-08-18 University Of Virginia Patent Foundation 2-polycyclic propynyl adenosine analogs having A2A agonist activity
US8058762B2 (en) * 2005-01-19 2011-11-15 Daikin Industries, Ltd. Rotor, axial gap type motor, method of driving motor, and compressor
EP1844062A2 (en) 2005-01-21 2007-10-17 Methylgene, Inc. Inhibitors of dna methyltransferase
AU2006210422B2 (en) 2005-02-04 2012-09-13 Takeda Pharmaceutical Company Limited Inhibitors of E1 activating enzymes
US8461128B2 (en) 2005-04-15 2013-06-11 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Anti-microbial agents and uses thereof
WO2006113458A1 (en) 2005-04-15 2006-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic inhibitors of protein arginine methyl transferases
EP2402334B1 (en) 2006-02-02 2016-06-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of E1 Activating Enzymes
JP5468782B2 (ja) 2006-03-02 2014-04-09 エージェンシー フォー サイエンス，テクノロジー アンド リサーチ 癌治療と幹細胞調節のための方法
GB0607953D0 (en) 2006-04-21 2006-05-31 Novartis Ag Organic compounds
US8188063B2 (en) 2006-06-19 2012-05-29 University Of Virginia Patent Foundation Use of adenosine A2A modulators to treat spinal cord injury
US20080132525A1 (en) 2006-12-04 2008-06-05 Methylgene Inc. Inhibitors of DNA Methyltransferase
WO2008124150A1 (en) 2007-04-09 2008-10-16 University Of Virginia Patent Foundation Method of treating enteritis, intestinal damage, and diarrhea from c. difficile with an a2a adenosine receptor agonist
CN101417967A (zh) 2007-10-26 2009-04-29 浙江海正药业股份有限公司 组蛋白去乙酰酶抑制剂、其组合物及其应用
KR101564793B1 (ko) 2007-11-05 2015-10-30 노파르티스 아게 고지질혈증 또는 동맥경화증과 같은 질환의 치료에 유용한 ｃｅｔｐ 억제제로서의 4-벤질아미노-1-카르복시아실-피페리딘 유도체
WO2009089425A1 (en) 2008-01-09 2009-07-16 Pgxhealth Llc Intrathecal treatment of neuropathic pain with a2ar agonists
AR072906A1 (es) 2008-08-06 2010-09-29 Novartis Ag Nucleosidos modificados utiles como antivirales
US20110171192A1 (en) 2008-09-05 2011-07-14 Hiroshi Tomiyama Substituted amine derivative and medicinal composition comprising same as the active ingredient
WO2010048149A2 (en) 2008-10-20 2010-04-29 Kalypsys, Inc. Heterocyclic modulators of gpr119 for treatment of disease
EA201290073A1 (ru) 2009-08-24 2013-01-30 Эсэпиен Фармасьютикалз, Инк. Соединения мочевины, содержащие 5,6-бициклический гетероарил, как ингибиторы киназ
BR112013013659B8 (pt) * 2010-12-03 2024-02-27 Epizyme Inc Compostos moduladores de enzimas epigenéticas, composição farmacêutica compreendendo ditos compostos e usos da dita composição farmacêutica para tratar câncer, câncer hematológico ou leucemia
KR20130124959A (ko) 2010-12-03 2013-11-15 에피자임, 인코포레이티드 히스톤 메틸전달효소의 7-데아자퓨린 조절제 및 그의 사용방법
EP2646441B1 (en) 2010-12-03 2015-12-02 Epizyme, Inc. Carbocycle-substituted purine and 7-deazapurine compounds
WO2012082436A2 (en) 2010-12-03 2012-06-21 Epizyme, Inc. Modulators of histone methyltransferase, and methods of use thereof
AU2013312319B2 (en) * 2012-09-06 2018-04-19 Epizyme, Inc. Method of treating leukemia
US9446064B2 (en) * 2013-03-14 2016-09-20 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
WO2014152566A2 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Epizyme, Inc. Methods of synthesizing substituted purine compounds
CN105934521B (zh) * 2013-08-02 2020-06-30 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 检测和治疗响应于dot1l抑制的白血病的方法
US10143704B2 (en) * 2013-11-13 2018-12-04 Epizyme, Inc. Methods for treating cancer

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