MX2012004160A - Fenilpropanoides digliceridos para el tratamiento del cancer. - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona un método para el tratamiento de un cáncer en un sujeto, que involucra administrar al sujeto un compuesto de fórmula (II) o (II´) en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. También se proporciona un compuesto de fórmula (II) o (II´), en donde R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, R3 y R4 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, R6 es H, alcoxi o alquilcarboniloxi, R5 es H, OH, o alquilcarboniloxi, R6 es H, o alcoxi, y R7 es H, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. (ver fórmulas).

Description

FENILPROPANOIDES DIGLICÉRIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CÁNCER CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a agentes terapéuticos para el tratamiento del cáncer. Más particularmente, la presente invención se refiere a los derivados del propano diilo dicinamato para tratar el cáncer y los métodos para su preparación.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud, los tumores malignos fueron responsables del 12 por ciento de los casi 56 millones de muertes en todo el mundo por diversas causas. En particular, 5.3 millones de hombres y 4.7 millones de mujeres desarrollaron un tumor maligno y en total 6.2 millones de personas murieron de la enfermedad. El informe también revela que el cáncer se ha convertido en un importante problema de salud pública en los países en desarrollo, igualando su efecto en las naciones industrializadas.

A pesar de importantes avances logrados en las últimas dos décadas, existen aún muchos tipos de cáncer para los cuales la terapia convencional es, ya sea parcial o totalmente, ineficiente. El principal problema común con estas terapias es una toxicidad inaceptable.

Debido a esto son necesarios nuevos compuestos, agentes o métodos, ya sea para evitar el desarrollo del cáncer, o, en el caso en el que ya la neoplasia se ha desarrollado, hacer que el organismo hospedero se libre del cáncer o reduzca su carga neoplásica a un nivel compatible con la vida o al menos facilite el uso de tratamientos concomitantes.

En su esencia, las neoplasias, que incluyen el cáncer, pueden ser consideradas como la acumulación inadecuada de células, donde se viola el delicado equilibrio entre la renovación celular y la muerte celular. Para que se desarrolle la neoplasia, o bien la renovación celular debe aumentar o debe disminuir la muerte celular o ambas cosas. Uri corolario a esta relación es el siguiente: un agente que afecte favorablemente estos procesos en el organismo hospedero (y, que por consiguiente, sea desfavorable para la neoplasia), es un fármaco antineoplásico potencial.

Se han aislado e identificado varios agentes antinepplásiqos a partir de fuentes naturales. Por ejemplo, la curcumina (diferuloilmetano) , un polifenol derivado de la planta Cúrcuma longa, comúnmente llamada cúrcuma ha sido ampliamente estudiada en los últimos 50 años, y estos estudios indican que este polifenol puede prevenir y tratar el cáncer. Más específicamente, esta serie de estudios han demostrado que la Curcumina suprime la proliferación en una amplia variedad de células tumorales, incluyendo el carcinoma de mama, carcinoma de colon, leucemia mielógena aguda, carcinoma de células básales, melanoma y carcinoma de próstata (1-7) . A pesar del notable perfil de seguridad farmacológica de este compuesto, su eficacia como un agente anticancerígeno convincente se ha visto limitada por la mala absorción sistémica y su transformación metabólica en las dosis administradas.

Se ha demostrado que un componente específico del propóleo, producto de la colmena de abejas, identificado como el éster fenilo del ácido caféico (CAPE) , inhibe selectivamente el crecimiento de células de roedores transformadas por yirus y transformadas por un oncogén así como el de las células tumorales humanas, incluyendo al glioblastoma multiforme (GBM-18), al adenocarcinoma de colon (HT-29) , y las células del melanoma (HO-1) . Estos estudios también muestran que el CAPE y varios ésteres más del ácido cafeico inhiben las lesiones preneoplásicas inducidas por el azoximetano y las actividades de la ornitina descarboxilasa, la proteína tirosina quinasa, y las actividades de lipoxigenasa relacionadas con la carcinogénesis de colon (8-13) .

Aunque procedente de diferentes fuentes naturales, el CAPE y los curcuminoides poseen una estructura similar que probablemente pueda explicar sus propiedades contra el cáncer o por lo menos parcialmente explicar su perfil de seguridad y de selectividad. La importancia de estas similitudes estructurales con respecto a sus propiedades contra el cáncer son actualmente desconocidas.

Un enfoque para desarrollar nuevos agentes antineoplásicos es el de sintetizar nuevos compuestos químicos que sean selectivos para el cáncer, estables en el medio biológico, que mantengan la potencia contra el cáncer y que exhiban una baja toxicidad general.

Banskota efe al. (Journal of Ethnopharmacology (2QQ2) , 80(1), 67-73) aislaron los derivados del ácido cinámico, a saber, cafeato de bencilo, cafeato de fenetilo y cafeato de cinamilo, así como los compuestos de dicinamato (2E, 2 ' E) -2-1-acetoxipropano, 1, 3-diilo bis (3- (4 -hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4 -hidroxi-3 -metoxifenil) acriloilo) oxi) -propil 3- (4 -hidroxifenil) acrilató a partir de un extracto de MeOH del propóleo de los Países Bajos. El cafeato de bencilo, el cafeato de fenetilo y el cafeato de cinamilo mostraron valores de EC50 de 2.03 µ?, 3.16 µ? y 1.92 µ?, respectivamente, contra B16-BL6. Los compuestos de dicinamato ( 2E, 2 ?) -2 -acetoxipropano-1 , 3-diilo bis (3- (4-hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E-3) - (4-hidroxi-3-metpxifenil) acriloilo) oxi) propil 3- (4 -hidroxifenil ) acrilato mostraron valores de EC50 moderados de 81.9 µ? y 66 µ?, respectivamente, contra la misma línea celular.

SUMARIO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a los agentes terapéuticos para el tratamiento del cáncer. Más específicamente, la presente invención se refiere a los derivados del propano diilo dicinamato para tratar el cáncer y los métodos para su preparación.

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de las fórmulas (I) o (I1) : donde : 1 y R2 son independientemente OH, alcoxi alquilcarboniloxi , R3 y R4 son independientemente H, OH, alcoxi alquilcarboniloxi, y R5 es H, OH o alquilcarboniloxi , y R6 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto no sea (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-dimetpxifenil) acrilpilp) xi) prppil 3- (4-metoxifenil) acrilato o (E)-3-(((E)-3- (3 , 4 -dimetoxifenil) acriloilo) oxi) -2-hidroxipropil 3- (4-metoxifenil) crilato.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para el tratamiento del cáncer en un sujeto, que comprende la administración al sujeto de un compuesto de las fórmulas (II) o (II¦ ) : en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi p, una sal farmacéutigamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto sea diferente a (2E 2'E,)-2-acetoxipropano-1, 3-diilo bis (3 - (4 -hidroxifenil) acrilato) y a (E) -2-acetoxi-3 - ( ( (E) -3- (4 -hidroxi-3 -metoxifenil) acriloilo) oxi) ropil 3- (4 -hidroxifenil) acrilato .

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto intermediario de la fórmula: en donde R1 y R2 son ambos alcoxi .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Estas y otras características de la invención se harán más evidentes a partir de la siguiente descripción en la que se hace referencia a las figuras adjuntas en donde: Las FIGS . 1 y 9-11 ilustran ejemplos de los esquemas de síntesis para producir compuestos diéster de la fórmula (II) .

La FIG. 2 ilustra ejemplos de los esquemas de síntesis para producir compuestos diéster de la fórmula (II1).

La FIG. 3 ilustra ejemplos de los métodos para producir los derivados glicidílieos del cinamato.

La FIG. 4 ilustra ejemplos de los esquemas de síntesis para producir compuestos diéster de las fórmulas (II) y (II' ) que tienen con extremos simétricos.

Las FIGS. 5 y 6 ilustran ejemplos de los esquemas de síntesis de la formación de los derivados tri-sustituidos de los productos intermediarios para la formación de los compuestos de la presente invención.

Las FIGS . 7 y 8 ilustran ejemplos de los esquemas de síntesis de la formación de los derivados di-sustituidos de los productos intermediarios para la formación de los compuestos de la presente invención.

La FIG. 12 muestra micrograficas de células e Carcinoma de Colon Humanas HCT116 durante el tiempo después del tratamiento sin compuesto (control) .

La FIG. 13 muestra micrograficas de células de Carcinoma de Colon Humanas HCT116 durante el tiempo después del tratamiento con compuesto 30 µ? (Ilb).

La FIG. 14 muestra micrográficas de células de Carcinoma de Colon Humanas HCT116 durante el tiempo después del tratamiento con compuesto 30 µ? (le) .

La FIG. 15 muestra micrográficas de células de Carcinoma de Colon Humanas HCT116 durante el tiempo despyés del tratamiento con compuesto 30 µ? (Id).

PESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a los agentes terapéuticos para el tratamiento del cáncer. Más particularmente, la presente invención se refiere a derivados del propano diilo dicinamato para tratar el cáncer y los métodos para su preparación.

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) o (?'): en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , R3 y R4 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R5 es H, OH o alquilcarboniloxi, y R6 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto no sea (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (3,4-dimetoxifenil) acriloilo) oxi) propil 3- (4-metoxifenil) acrilato, o (E) -3- ( ( (E) -3- (3,4-dimetoxifenil)acriloilo)oxi) -2-hidroxipropil 3- (4 -metoxifenil) acrilato .

En un ejemplo de la fórmula del compuesto definido anteriormente (I) o (?'), ambos R1 y R2 son OH, alcoxi o alquilcarboniloxi .

Más particularmente, la presente invención proporciona un compuesto de la fórmula (la) o (la1): R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R6 es H o alcoxi, o una sal f rmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto no sea (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (3 , 4-dimetpxifenil) criloilo) oxi) ropil 3- (4-metoxifenil) acrilato, o (E)-3-(((E)-3- (3 , 4-dimetoxifenil) acriloilo) oxi) -2-hidroxipropil 3- (4 -metoxifenil) acrilato .

En un ejemplo del compuesto anteriormente definido de las fórmulas (la) o (la1), ambos R1 y R2 son OH, alcoxi o alquilcarboniloxi .

En otros ejemplos, la presente invención se refiere a los compuestos de las fórmulas (I), (la), (?') y (la') descritos anteriormente, en donde R1 y R2 son ambos OH o ambos alcoxi .

La presente invención también se refiere a los compuestos anteriormente definidos de las fórmulas (I) , (la) , (?') y (la'), donde R4 es H u OH.

La presente invención también se refiere a un compuesto de la fórmula (Ib) o (Ib'): en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R5 es H, alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto no sea (E) -3- ( ( (E) -3- (3, 4 -dimetoxifenil) acriloilo) oxi) -2-hidroxipropil 3 - (4 -metoxifenil) acrilato .

En otro ejemplo, la presente invención se refiere a un compuesto de la fórmula (Ic) o (IC) : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , y R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Más particularmente, la presente invención se refiere a un compuesto de las fórmulas (Id) , (le) , (If) , (Ig) , (Ih) , (Ii), (Ij), (Id'), (le'), (If), (Ig'), (Ih'), (Ii'), (Ij'),: ?? En un segundo aspecto, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de un cáncer, tal como cáncer de pulmón, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de piel o leucemia en un sujeto, que comprende la administración al sujeto de un compuesto de la fórmula (II) o (II1): independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto sea diferente a (2E,2'E)-2-acetoxipropano-1, 3-dülo bis (3- (4-hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-hidroxi-3-metoxifenil) acriloilo) oxi)propil 3- (4 -hidroxifenil) acrilato .

En un tercer aspecto, la presente invención proporciona un uso de un compuesto de las fórmulas (II) o (II1) : en donde R1, R2 , R3 , R4, R5 , R5 y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto sea diferente a (2E,2'E)-2-acetoxipropano-1, 3-diilo bis (3 - (4 -hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-hidroxi-3-metoxifenil) acriloilo) oxi)propil 3- (4 -hidroxifenil) acrilato, para preparar un medicamento para tratar cáncer en un suj eto .

En un ejemplo del uso de acuerdo con el tercer aspecto de la presente invención, el cáncer es cáncer de pulmón, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de piel o leucemia.

En un cuarto aspecto, la presente invengión proporciona un método para matar células de cáncer, tal como células de cáncer de pulmón, células de cáncer de mama, células de cáncer de colon, células de cáncer de ovario, células de cáncer de piel o células de leucemia, que comprende poner en contacto las células de cáncer con un compuesto de las fórmulas (II) o (II1): en donde R1, R2, R3 , R , R5, R6 y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto sea diferente a (2E,2'E)-2-acetoxipropano-1, 3-diilo bis (3 - (4 -hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-hidroxi-3-metoxifenil) acriloilo) oxi)propil 3 - (4 -hidroxifenil ) acrilato .

En un quinto aspecto, la presente invención proporciona un uso de un compuesto de las fórmulas (II) o (II1) : en donde R1, R2, R3, R , R5, Rs y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto sea diferente a (2E,2'E)-2-acetoxiprppano- 1 , 3 -diilo bis (3 - (4 -hidroxifenil) acrilatp) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-hidroxi-3-metoxifenil) acriloilo) oxi)propil 3- (4-hidroxifenil) acrilato, para matar células de cáncer.

En un ejemplo del uso de acuerdo con el quinto aspecto de la presente invención, las células de cáncer son células de cáncer de pulmón, células de cáncer de mama, células de cáncer de colon, células de cáncer de próstata, células de cáncer de ovario, células de cáncer de piel o células de leucemia.

En un ejemplo de los métodos o usos definidos arriba, ambos R1 y R2 en el compuesto de las fórmulas (II) o (II' ) son OH, alcoxi o alquilcarboniloxi .

Más particularmente, la presente invención se refiere a los métodos o usos descritos arriba, en donde el compuesto de las fórmulas (II) o (II' ) es un compuesto de la fórmula (lia) o (Ha' ) : en donde R1, R2, R4, R6 y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal f rmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención se refiere a los métodos descritos anteriormente, en donde el compuesto de las fórmulas (II) o (11* ) es un compuesto de la fórmula (la) o (la') : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R5 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención se refiere además a los métodos o usos descritos anteriormente, en donde el compuesto de las fórmulas (II) o (II1) es un compuesto de la fórmula (Ic) o (IC): en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En un ejemplo de los métodos o usos anteriormente definidos, R1 y R2 en las fórmulas (II), (Ha), (la), (Ic) , (II1), (Ha1), (la') e (Ic') son ambos OH, alcoxi o alquilcarboniloxi.

En otros ejemplos, la presente invención se refiere a los métodos o usos definidos anteriormente, en donde R1 y R2 en las fórmulas (II), (Ha), (la), (le), (II'), (Ha'), (la') y (Ic') son ambos OH o ambos alcoxi .

La presente invención se refiere también a los métodos definidos anteriormente, en donde R4 en las fórmulas (II), (Ha), (la), (Ic) , (II'), (Ha'), (la') y (IC) es H u OH.

Más particularmente, la presente invención se refiere a los métodos y usos definidos anteriormente, en donde el compuesto que se le administra al sujeto es de las fórmulas (Id), (le), (If), (Ig), (Hb), (He) , (lid), (He), (Id'), (le'), (If), Ug'), (Hb'), (IIC), (Hd'), (He') o una combinación de las mismas : En un sexto aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende: en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , R3 y R4 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R5 es H, OH o alquilcarboniloxi, y R5 es H o alcoxi o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable, siempre que el compuesto no sea (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (3 , 4-dimetoxifenil) acriloilo) oxi)propil 3- (4 -metoxifenil) acrilato; o (E)-3-(((E)-3-(3, 4-dimetoxifenil) acriloilo) oxi) -2-hidroxipropil 3- (4 -metoxifenil) acrilato.

En un séptimo aspecto, la presente invención proporciona un compuesto intermediario de la fórmula: en donde R1 y R2 son ambos alcoxi .

La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica que comprende al compuesto definido anteriormente, y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable .

La presente invención se refiere también a las composiciones farmacéuticas y a las formas de dosificación que comprende a las fórmulas generales (I), (?'), (II) y (II1) o mezclas de las mismas.

Como se usa en la presente, el término "alquilo", se refiere a un radical hidrocarburo de cadena lineal o ramificada de fórmula general CnH2n+i, tal como un grupo alquilo que tiene de l a 10, l a 9, l a 8, l a 7, l a 6, l a 5, l a 4, l a 3 o de l a 2 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no están limitados al, metilo, etilo, propilo, isopropilo, y t-butilo.

El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que retiene la efectividad biológica y las propiedades de una base libre o de un ácido libre correspondiente, y que no sea biológicamente o de algún otro modo indeseable. La sal puede prepararse a partir de la adición de una base inorgánica o de una base orgánica a un ácido libre. Las sales derivadas de una base inorgánica incluyen, pero no se limitan a, las sales de sodio, potasio, litio, amonio, calcio, magnesio, y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas incluyen, pero no se limitan a sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas que aparecen naturalmente, aminas cíclicas y resinas de intercambio iónico básicas, tales como la isopropilamina, trimetilaminá, dietilamina, trietilamina, tripropilamina, etanolamina> lisina, arginina, N-etilpiperidina, piperidina, o una resina de poliamina.

Los compuestos de la presente invención o sus correspondientes sales farmacéuticamente aceptables pueden ser utilizados en la forma de composiciones farmacéuticas para administración enteral, parenteral o tópica. Se pueden administrar por ejemplo por vía oral, por ejemplo en la forma de comprimidos, comprimidos recubiertos, grageas, cápsulas de gelatina duras y blandas, soluciones, emulsiones o suspensiones; por vía rectal, por ejemplo en la forma de supositorios; por vía parenteral, por ejemplo en la forma dé soluciones inyectables o suspensiones o soluciones para infusión; o por vía tópica, por ejemplo en forma de ungüentos, cremas o aceites.

Los materiales de portador adecuados no son sólo materiales de portador inorgánicos, sino también materiales de portador orgánicos. Así, por ejemplo, la lactosa, el almidón de maíz o sus derivados como el talco, el ácido esteárico o sus sales se pueden utilizar como materiales de portador para comprimidos, comprimidos recubiertos, grageas y cápsulas de gelatina dura. Los materiales de portador adecuados para las cápsulas de gelatina blanda son, por ejemplo, los aceites vegetales, las ceras, las grasas y los polioles semi-sólidos y líquidos (dependiendo de la naturaleza del ingrediente activo podrían no necesitarse portadores, sin embargo, si se requerirían para el caso de las cápsulas de gelatina blanda) . Los materiales de portador adecuados para la producción de soluciones y jarabes son, por ejemplo, agua, polioles, sacarosa, azúcar invertido y similares. Los materiales de portador adecuados para las soluciones inyectables son, por ejemplo, el agua, los alcoholes, los polioles, el glicerol y los aceites vegetales. Los materiales de portador adecuados para los supositorios son, por ejemplo, los aceites naturales o endurecidos, las ceras, grasas y los polioles semi- líquidos o líquidos. Los materiales de portador adecuados para las preparaciones tópicas son los glicéridos, glicéridos semi sintéticos y sintéticos, aceites hidrogenados, las ceras líquidas, parafinas líquidas, los alcoholes grasos líquidos, esteróles/ polietilenglieoles y derivados de la celulosa.

Los derivados de propano diilo dicinamato representados por las fórmulas generales (I), (I1)/ (II) y (II1) definidas anteriormente son útiles para el tratamiento, profilaxis y prevención de cánceres y otras enfermedades proliferativas incluyendo, pero no limitadas a, los tumores, la inflamación y la inmunodeficiencia humana (VIH) . La actividad anticancerígena demostrada por los compuestos de la presente invención puede alcanzarse a través de la citotoxicidad, la anti proliferación, la inhibición de la quinasa del ciclo celular o a través de la diferenciación celular.

La presente invención también se refiere a procedimientos para la preparación de compuestos definidos por las fórmulas generales (I), (?'), (II) y (II1) o mezclas de las mismas, sus estéreo isómeros, sus polimorfos, sus sales farmacéuticamente aceptables, y sus solvatos farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos de la fórmula general (II) pueden formarse de acuerdo con las vías de síntesis descritas en las Figuras 1 y 9-11. Refiriéndose específicamente a la Figura 1, el 1,3 glicerol diéster 5 (fórmula (II), R4=OH) puede formarse cuando se permite reaccionar el derivado 1 ó 2 del ácido cinámico con el derivado glicidil cinamato 3 ó 4 correspondiente en la presencia de un catalizador de transferencia de fase (PTC) . El diéster 5 puede ser posteriormente alquilado o acilado para producir un diéster 6 derivado .

Los compuestos de la fórmula (II) , donde el R4 es el hidrógeno, pueden formarse por la reticulación de los derivados 1 y 2 del ácido cinámico con el agente de reticulación 7 para producir el compuesto diéster 8. La acilación posterior, parcial o completa del diéster 8 con un agente acilante, tal como el RC(0)L, proporciona el derivado acilado diéster 17.

Como se ilustra en la Figura 2, los compuestos de la fórmula (II' ) pueden producirse por esterificación de los derivados 9 ó 10 del ácido cinámico con el derivado glicidil cinamato 3 ' ó 4 correspondiente en la presencia de un catalizador de transferencia de fase (PTC) para formar el derivado 1,2 glicerol diéster 13, que puede ser alquilado o acilado posteriormente para producir el diéster 14.

Los compuestos de la fórmula (II' ), en donde el R4 es el hidrógeno, pueden formarse por la reticulación de los derivados 1 y 2 del ácido cinámico con el agente de reticulación 15 para producir el compuesto diéster 16. La acilación posterior, parcial o completa del diéster 8 con un agente acilante, tal como el RC(0)L, proporciona el derivado acilado diéster 18.

Los ejemplos de los catalizadores de transferencia de fase que pueden utilizarse en la formación de los compuestos diéster 5 y 13 incluyen al bromuro de tetrabutilamonio o al cloruro de tetrabutilamonio. Las reacciones ilustradas para la formación de los diésteres 5, 6, 8, 13, 14 y 16-18 se llevan a cabo en un solvente inerte adecuado, tal como el dioxano, y se realizan a una temperatura de reacción entre 60-120°C o 100-105°C.

Los ejemplos de los grupos salientes que pueden ser utilizados en los compuestos 7 y 15 incluyen,, sin limitación, un halógeno, tal como Cl, Br o yodo, metanosulfonilo, fenilsulfoniloxi, p-tosiloxi, metanosulfoniloxi , acetpxi o benzoiloxi .

Los compuestos intermediarios glicidil cinamato 3 y 4 pueden producirse por una reacción de sustitución que implica los derivados de cinamato 1 ó 2 correspondientes y una cantidad molar en exceso de epiclorhidrina u otra epihalohidrina adecuada (Figura 3) . La reacción se lleva a cabo en un solvente inerte adecuado, tal como el dioxano, y opcionalmente en presencia de un catalizador, a una temperatura de reacción de alrededor de 50-100°C ó 70-95°C, por 12 a 18 horas aproximadamente.

Cuando los sustituyentes R1, R2 y R3 son los mismos que los sustituyentes R7, R6 y R5, respectivamente, los compuestos de la fórmula general (II) se pueden preparar en una reacción que implica un derivado del haluro de cinamilo 9 y cantidades estequiométricas de glicerol en la presencia de una amina terciaria, tal como la piridina, para producir el 1,3 glicerol diéster 5 simétrico, que puede ser alquilado o esterificado posteriormente para dar el compuesto protegido 6 ( Figura 4 ) .

Para preparar compuestos de la fórmula general (II'), donde el R4 variable es H, y los R1, R2 y R3 variables son 3 O equivalentes a R7, R6 y R5, respectivamente, el derivado de haluro de cinamilo 9 se puede hacer reaccionar con metilgligol en la presencia de una cantidad catalítica de piridina, para producir el compuesto diéster 16.

El derivado 9 ó 10 del haluro de cinamilo se puede preparar haciendo reaccionar al derivado correspondiente del ácido cinámico con un haluro de tionilo, tal como el cloruro de tionilo, en un solvente adecuado, tal como el dipxano, a temperatura ambiente durante aproximadamente 15-20 minutos.

Las reacciones para formar los derivados diéster 5, 8, 13 y 16 se llevan a cabo normalmente en la presencia de piridina, dejando reaccionar durante aproximadamente 20-30 minutos. Después de terminadas las reacciones, la mezcla de reacción se neutraliza con bicarbonato de sodio u otro agente de neutralización adecuado. La mezcla de reacción es filtrada entonces y el compuesto final se aisla por secado de la capa orgánica bajo presión reducida seguida por la cristalización a partir de acetato de etilo o una mezcla de acetato de etilo y ciclohexano.

Las Figuras 5 y 6 ilustran los ejemplos de los esquemas de síntesis para la producción de diferentes derivados tri-sustituidos de los ácidos cinámicos 1 y 2. Cada uno de estos esquemas involucra inicialmente la esterificación del ácido gálico 20 para producir metil galato 21, que es selectivamente bencilado en la posición para a fin de producir' el derivado protegido 22. La alquilación del derivado 22 con dos equivalentes de un haluro de alquilo RX proporciona el éster dialquilado 23, que posteriormente se somete a hidrogenolisis para producir el derivado fenólico 24. La reducción del fenol 24 con hidruro de litio y aluminio (LAH) seguido por la oxidación parcial del alcohol alquilado resultante con clorocromato de piridinio (PCC) da como resultado la formación del aldehido 25, que se deja reaccionar con ácido malónico y piperidina en piridina para producir el derivado 26 del ácido cinámico.

Alternativamente, el metil galato 21 puede ser reducido directamente y el alcohol metileno resultante puede ser parcialmente oxidado con PCC para dar el aldehido 27, que posteriormente se deja reaccionar con ácido malónico y piperidina en piridina para producir el derivado 26 del ácido cinámico.

En otro ejemplo, la alquilación del derivado 22 con un equivalente de un haluro de alquilo RX proporciona el éster monoalquilado 29, que se somete posteriormente a hidrogenolisis para eliminar el grupo protector bencilo. El fenol resultante se reduce entonces con LAH para producir un alcohol metileno que es parcialmente oxidado con PCC para formar el aldehido 30, que se deja reaccionar con el ácido malónico y la piperidina en piridina para producir el derivado 31 del ácido cinámico.

La Figura 6 ilustra ejemplos de esquemas de síntesis para la producción de los derivados mono-, di- y trialquilados del ácido cinámico trihidroxiladp (34, 37 y 40) . Los esquemas de síntesis involucran la reacción inicial del metil galato 21 con 1, 2 ó 3 equivalentes de un haluro de alquilo RX, en presencia de yoduro de tetrabutilamonio y K2C03 para producir el éster mono-alquilado 32, el éster di-alquilado 35 y el éster trialquilado 38, respectivamente. Estos ésteres son entonces reducidos posteriormente con LAH para producir los respectivos alcoholes que se oxidan parcialmente con PCC para formar los aldehidos 33, 36 y 39, respectivamente, que posteriormente se dejan reaccionar con el¦ ácido malónico y la piperidina en piridina para producir los derivados alquilados del ácido cinámico 34, 37 y 40, respectivamente .

La Figura 7 ilustra ejemplos de esquemas de síntesis para la producción de derivados mono y di-alquilados del ácido cinámico dihidroxilado (44, 46 y 50). El ácido caféico 41 es primero esterificado en MeOH para producir el éster metílico 42 del ácido caféico, que luego se hace reaccionar con 1 o 2 equivalentes de un agente alquilante RX en presencia de TBAI y K2C03 para producir el intermediario monoalquilado 43 o el intermediario di-alquilado 45. Los ésteres 43 y 45 son entonces hidrolizados en condiciones básicas para producir los ácidos 44 y 46 correspondientes, respectivamente .

Para producir un derivado del ácido caféico que tenga un grupo alcoxi en la posición 3 del anillo bencénico, se protege primero al éster 42 con 1 equivalente de un haluro de benzoilo para producir el derivado protegido 47 que tiene un grupo benzoiloxi en la posición para del anillo fenilo, que posteriormente se hace reaccionar con 1 equivalente de un haluro de alquilo para producir el derivado mono^alquilado 48. La desprotegción del derivado 48 da como resultado la producción del éster 49 con un grupo hidroxilo libre en la posición para del anillo fénilo y un grupo alcoxi en la posición 3 del anillo fenilo. Finalmente, la hidrólisis del éster 49 en condiciones básicas produce el ácido carboxílico 50.

La Figura 8 muestra ejemplos de esquemas de síntesis para lá producción de derivados alquilados del ácido 3,5-dihidroxicinámico . En los esquemas de síntesis ilustrados, el ácido 3 , 5 -dihidroxicinámico 51 es esterificado primero en MeOH para producir éster metílico del ácido 3,5-dihidroxicinámico 52, que entonces reacciona con 1 ó 2 equivalentes de un agente alquilante RX en presencia de TBAI y 2C03 para producir el intermediario monoalquilado 53 o el intermediario di-alquilado 55. Los ásteres 53 y 55 son entonces hidrolizados en condiciones básicas para producir los ácidos correspondientes 54 y 56, respectivamente.

Similarmente , el derivado monoalquilado del ácido m- o p-cumárico puede ser producido por esterificación del ácido cumárico en MeOH para producir áster metílico del ácido cumárico, que entonces se hace reaccionar qon un agente alquilante para producir un intermediario mono-alquilado. Este intermediario es posteriormente hidrolizado en condiciones básicas para producir el derivado alquilado correspondiente del ácido m- o p-cumárico.

Las Figuras 9-11 ilustran ejemplos de esquemas de síntesis para formar diferentes derivados protegidos de los di ásteres 5 y 13. Refiriéndonos a la Figura 9, ahí se ilustra un ejemplo de un esquema de síntesis para la formación de los derivados diéster con residuos fenólicos acilados, que implica primeramente la protección del grupo hidroxilo secundario del diéster 5 con un grupo tert-butildimetilsililo (TBS) para formar el grupo TBS-éter 60 y, a continuación acilando los grupos hidroxilo fenólicos libres con un agente acilante, tal como un haluro de acilo, para formar el derivado protegido acilado 61. El grupo TBS entonces se elimina con fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF) para producir el alcohol 62, que luego puede ser más alquilado para producir el éter alquilp acilado 63.

En otro ejemplo ilustrado en la Figura 10, los grupos hidroxilo fenólicos del TBS éter 60 están parcialmente acilados para formar el TBS éter 61a que tiene uno o más grupos hidroxilo fenólicos libres . Después de la desprotección del TBS éter 61a con TBAF, los grupos hidroxilo fenólicos del alcohol 62a resultante son selectivamente protegidos con Cl de tritilo para formar los derivados tritilados 62b que tienen un grupo hidroxilo secundario libre. El alcohol 62b puede ser entonces alquilado para obtener el éter alquilo parcialmente acilado 63a.

En ejemplos adicionales ilustrados en la Figura 11, los grupos hidroxilo fenólicos libres y el grupo alcohol secundario del diéster 5 pueden ser acilados utilizando un exceso de un agente acilante, tal como un haluro de acilo. Alternativamente, los grupos hidroxilo fenólicos del diéster 5 pueden ser selectivamente protegidos con Cl de tritilo para formar el derivado tritilado 70 teniendo un grupo hidroxilo secundario libre. La alquilación o acilación posterior del alcohol 70 seguido por la desprotección de los grupos hidroxilo fenólicos da como resultado el derivado alquilado o acilado 72.

Los siguientes ejemplos no limitantes se presentan para ilustrar la invención: Ejemplos Ejemplo 1: Preparación del Cinamato Glicidil (130) A 5.66 g (0.10 moles) de hidróxido de potasio disuelto en 50 mi de agua desionizada y calentado a 50°-60°C se agregó 15 g (0.10 moles) de ácido cinámico (100) con agitación. La suspensión de la reacción resultante se secó en una estufa al vacío a 40-50°C para producir el cinamato de potasio (110) .

Método alternativo para producir cinamato de potasio (110) A una solución de ácido cinámico (100, 15 g, 0.10 mol) en THF (150 mL) en alrededor de 30°C se agregó 5.66 g (0.10 mol) de un polvo de peletizados de hidróxido de potasio recientemente molidos para producir un precipitado blanco de cinamato de potasio (110) . El precipitado se filtró y secó en un horno al vacío en 40-50°C.

Se agregaron (110; 5.3 g; 0.,028 mol) de cinamato de potasio y una cantidad catalítica (0.85 g; 2.7 mmol) de bromuro de tetrabutilamonio a 50 g (0-54 moles) de epiclorhidrina (120) en un recipiente de reacción equipado con un agitador mecánico y una unidad de reflujo montado y calentado a 95°-105°C para formar una mezcla que se dejó reaccionar durante 60 minutos. La mezcla se enfrió entonces a temperatura ambiente, se diluyó con 55 mi de cloroformo, y se filtró para eliminar los precipitados sólidos. El filtrado orgánico se lavó de forma secuencial con 50 mi de NaHC03 al 5% y agua desionizada y la capa orgánica resultante se destiló a presión reducida a 30°-40°C para obtener el cinamato glicidil (130) .

Ejemplo 2: Preparación de (E) - 3 - (cinamoiloxl) -2 -hidroxipropil 3- (3, 4-dimetoxifenil) acrilato (Id) Se disolvió 3,4-dimetoxi ácido cinámico (140; 3.82 g; 18.37 moles) en 60 mi de dioxano y se calentó a reflujo (60o-70 °C) . Se añadieron consecutivamente una cantidad catalítica (22.5 mg; 0.7 mmol) de bromuro de tetrabutilamonio y 1.5 g (7.35 mmol) de cinamato glicidil (130) a la solución de 3,4-dimetoxi ácido cinámico (140) . La mezcla resultante se calentó a 100°-105°C con agitación continua durante 15-16 horas y en seguida se destiló bajo presión reducida para producir el compuesto (Id). 1H-RMN (CD3OD) d 3.81 (s, 3H) , 3.83 (s, 3H) , 4.14 (ra, 1H) , 4.27 (d, 4H, J = 8 Hz) , 6.42 (d, 1H, J = 16 Hz) , 7.64 (d, 1H, J = 16 Hz) , 7.15 (dd, 1H, J = 8 Hz, 2 Hz) , 6.92 (d, 1H, J = 8 Hz) , 7.18 (d, 1H, J = 2 Hz), 6.53 (d, 1H, J = 16 Hz) , 7.70 (d, 1H, J = 16 Hz ) , 7.35 (m, 3H) , 7.56 (m, 2H) Ejemplo 3: Preparación de (E) -oxirano-2-ilmetil 3- (3,4- dimetoxi fenil) (170) A 5.0 g (0.24 moles) de hidróxido de potasio disuelto en 30 mi de agua desionizada y calentado a 50° -60° se le agregaron 1.34 g (0.024 moles) de ácido 3,4-dimetoxi cinámico (140) con agitación. La suspensión de la reacción resultante se secó en un horno al vacío a 40-50°C para obtener 3,4-dimetoxi cinamato de potasio (160) .

Se agregaron (160; 11.83 g; 0.048 moles) de cinamato de potasio 3,4-dimetoxi y 0.772 g (0.0024 moles) de bromuro de tetrabutilamonio a 55.32 g (0.60 moles) de epiclorhidrina (120) en un recipiente de reacción equipado con un agitador mecánico y una unidad de reflujo para formar una mezcla que se dejó reaccionar durante 60 minutos y se calentó a 80o-90°C. La mezcla se enfrió entonces hasta temperatura ambiente, se filtró para eliminar el precipitado y se secó al vacío para dar el Compuesto 170.

Ejemplo 4: Preparación del cloruro de (E)-3-(3,4-dimetoxifenil) acriloil (180) A 5 mi de cloruro de tionilo secado (S0C12) contenido en un recipiente de reacción se le agregaron lentamente 4 g (19 mmol) de ácido cinámico 3,4-dimetoxi (140) y 50 µ? de 'N'-dimetilformamida secada. Los componentes del recipiente de reacción se mezclaron continuamente a temperatura ambiente durante 10-15 minutos, y el producto resultante se secó in vacuo a 30-40°C para dar el cloruro de (E)-3-(3,4-dimetoxifenil) acriloil (180).

Ejemplo 5: Preparación de (E) -2- (cinamoiloxi) -3 -hidroxipropil 3- (3 , 4-dimetoxifenil) acrilato (Id' ) Se agregó a (180; 2.5 g; 11 mmol) de cloruro de 3,4-dimetoxi cinamoílo disuelto en 20 mi de dioxano una cantidad catalítica (250 mg) de bromuro de tetrabutilamonio y 1.33 g (6.5 mmol) de cinamato glicidil (130). La mezcla resultante se calentó a reflujo (90°-95°C) con agitación continua durante 16-17 horas y después se destiló bajo presión reducida para producir el compuesto (Id') .

Ejemplo 6: Preparación del Cloruro de Cafeoil (200) Se disolvieron 500 mg (2.78 mmol) de ácido cafeico (190) en 12 mi de dioxano seco a temperatura ambiente y se agregaron lentamente 600 pL de S0C12 (cloruro de tionilo) con léve agitación durante aproximadamente 20 minutos para producir una mezcla de reacción que contiene cloruro de cafeoil (200) .

Ejemplo 7: Preparación de (2E, 2 ?) -2 -hidroxipropano-1, 3 -diil bis (3- (3, 4-dihidroxifenil) acrilato (Ilb) A la mezcla de reacción cruda del Ejemplo 6 se le agregaron 248 mg (1.39 mmol) de glicerol anhidro y una cantidad catalítica (300 uL) de piridina. La mezcla se agitó durante 30-40 minutos, y en seguida se le agregaron aproximadamente 1.0 g de NaHCC>3 y 10 mi de una mezcla de acetato de metanol-etilo (50:50). Después de unos 30 minutos de agitación adicionales a temperatura ambiente, se filtró la mezcla de reacción y el disolvente se eliminó. La mezcla de reacción se secó entonces bajo presión reducida a una temperatura aproximada de 60° C. El material seco se disolvió en 50 mi de acetato de etilo, y se lavó tres veces con 100 mi de formiato de amonio, pH 3.7. La capa orgánica lavada se secó sobre Na2S04 y luego bajo presión reducida para obtener el compuesto (Ilb) . El compuesto (Ilb) luego se recristalizó a partir de una mezcla de acetato de etilo y ciclohexano (1:3). 1H-RMN (CD30P) d 4.15 (m, 1H) , 4.27 (m, 4H) , 6.32 (d, 2H, d = 16 Hz) , 7.60 (d, 2H, J = 16 Hz), 6.95 (dd, 2H, J = 8, 2 Hz) , 6.77 (d, 2H, d = 8 Hz), 7.05 (d, 2H, J = 2 Hz) Ejemplo-8: Preparación de 3 - ( -hidroxifenil) acrilato potasio (200) A 15 mi de una solución acuosa de hidróxido de potasio 0.002 mM se le agregó lentamente 5 g de ácido cumárico 190 (30 mmol) con agitación a 60-70°C. El cumarato de potasio resultante (200) se secó bajo vacío a 30-40°C.

Ejemplo 9: Preparación de (E) -3- ( (E) -3- (3,4-dimetoxifenil) acriloioxi) -2 -hidroxipropil 3- (4-hidroxifenil) acrilato (lie) A una solución de 1.5 g (5.68 mmol) de oxirano-2 -ilmetil 3- (3 , 4-dimetoxifenil) acrilato (170) disuelto en 30 mi de dioxano seco se le agregaron 2.29 g (11.36 mmol) de cumarato de potasio (200) disuelto en 20 mi de dioxano y 100 mg de bromuro de tetrabutilamonio, y la mezcla resultante se calentó a una temperatura de 105-110°C durante 16-18 horas para producir el diéster (lie) .

Ejemplo 10: Preparación de (E) -3- (cinamoiloxi) -2-hidroxipropil 3 - (3 , 4 -dihidroxifenil ) acrilato (le) El ácido caféico (41; 18.02 g, 0.10 mol) se disolvió en THF (180 mL) con agitación en alrededor de 30°C para producir una solución al 10%. Un polvo de peletizados de hidróxido de sodio de tierra fresca (4.00 g; 0.10 mol) se agregó a la solución de cido caféico y un precipitado sólido de cafeato de sodio (210) se formó, que se filtró y secó bajo presión reducida .

A una solución de cafeato de sodio (210; 7.35 mmol) en DMSO (20 mL) en 60°-70°C se agregó cinamato de glicidilo (130; 7.35 mmol). La mezcla resultante se calentó a 60°-75°C con agitación continua por 22-24 h y luego destiló bajo presión reducida para dar el compuesto (le) . 1H-RMN (CD30D) d 4.16 (s, 1H) , 2.28 (s, 4H) , 6.29 (d. 1H, J= 16 Hz) , 6.65 (d,-1H, J = 16 Hz) , 6.75 (d, 1H, J= 8 Hz), 6.93 (1H, dd, J= 8, 2 Hz), 7.03 (d, 1H, J = 2 Hz) , 7.37 (m, 1H) , 7.38 (m, 1H) , 7.55 (m) , 7.59 (d, 1H, J= 16 Hz) , 7.72 (d, 1H, J= 16 Hz).

Actividad anticancerígena Los compuestos preparados en la presente invención exhibieron una buena actividad anticancerígena in vitro para las líneas celulares del melanoma humano B-16. Las líneas celulares se mantuvieron en medio EMEM suplementado con FCS al 10%, bicarbonato de sodio al 0.1% y glutamina 12 mM. En un procedimiento típico, se sembraron 1 x 104 células en cada una de placa de 96 pozos en un volumen de 90 L de medio. Las placas fueron incubadas durante 24 h en presencia de C02 para permitir la adhesión celular. Después de 24 horas, los compuestos fueron evaluados en una serie de cinco suspensiones diluidas 10 veces, de 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10.000 y 1:100.000. A cada placa de prueba se le agregaron 100 L de la solución del compuesto a prueba y se agregó el medio con el vehículo a los pozos de control y las placas se incubaron aún más. Después de 24 h de incubación, se agregó a cada pozo 10 L de [3H] - timidina para obtener una concentración de 1µ Ci por pozo, incubándose durante otras 24 horas. Las placas estuvieron listas, las células colectadas y leídas en un lector de placas microbeta. Los resultados se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1. Valores de EC50 de compuestos de la presente invención en la línea celular de melanoma B-16, µ? Ensayos MTT (proliferación y viabilidad celular) para compuestos anticáncer de la presente invención Las líneas celulares de fibroblastos humanos normales (GM9503 y GM8399) y líneas celulares de carcinoma humano MCF-7, A549, HCT116, SKOV-3 y PC-3 se mantuvieron en DMEM (Medio Esencial Modificado de Dulbeco) complementado con FBS al 10% (Suero de Bovino Fetal) . Además, se mantuvieron células MDAY-D2 de leukemia de murino en medio RPMI 1640 complementado con FBS al 5%. Todos los medios se complementaron con 100 unidades/mL de estreptomicina y 100 yg/mL de penicilina (todo de Hyclone, Logan, UT) . Las células se incubaron en una atmósfera de aire humidificada que contiene C02 al 5% en 37 °C.

El crecimiento celular y viabilidad se midieron usando el ensayo de reducción de bromuro de 3- ( , 5-dimetiltiazol-2-il) -2 , 5-difenil tetrazolio (MTT) . El reactivo MTT (Sigma, St . Louis, MO) se preparó en 5 mg/ml en ddH20 (solución 5X) , filtro esterilizado y almacenado en la oscuridad a -20°C.

Para determinar el número óptimo de células a cosechar por pozo, los experimentos preliminares se llevaron a cabo examinando incrementar la densidad celular en las placas de 96 pozps. Las células se cosecharon en diversas densidades y examinaron bajo el microscopio después de 96 horas. Con base en estos experimentos y análisis de crecimiento de curva, las densidades celulares óptimas se seleccionaron para cada línea celular. En breve, las células exponencialmente crecientes se cosecharon y 100 µ?, de suspensión celular que contiene aproximadamente 2000 células se recubre en placas de microtítulo de 96 pozos. Después de 24 horas de incubación para permitir el enlace celular, las células se trataron con concentraciones de variación de muestras de pryeba en medio (60 pL/pozo) complementado con FBS al 5% e incubado por 72 horas a 37°C bajo C02 al 5%. Tres horas después de la adición de MTT, la cantidad de formazan formado se midió espectrofotométricamente en 570 nm con un lector de placa Spectramax Plus 384.

Para valorar los efectos de los compuestos novedosos en crecimiento y viabilidad, GM9503 (células de fibroblastos humanos normales; 2.08 x 103 células/pozo), GM8399 (células de fibroblastos humanos normales; 2.04 x 103 células/pozo), A549 (células de carcinoma de pulmón humano; 2.05 x 103 células/pozo) , HCT116 (células de carcinoma de colon humano) ; 2.19 x 103 células/pozo), CF-7 (células de carcinoma de pecho humano; 2.19 x 103 células/pozo), SKOV-3 (células de carcinoma de ovario humano; 2.10 x 103 células/pozo), PC-3 (células de carcinoma de próstata humano; 2.08 x 103 células/pozo) y MDAY-D2 (células de leucemia de murino; 2.5 x 103 células/pozo) se sembraron en placas de 96 pozos en medio complementado. Veinticuatro horas posterior al sembrado, las células se trataron con cualquier DMEM complementado con FBS al 5% (como un control) o con compuestos (Ilb) , (le) y (Id) en concentraciones incrementadas. Después de la incubación por 72 horas, el crecimiento celular y viabilidad se midieron. Cada compuesto se probó en triplicado y los datos mostrados en las Tablas 2-4 representan la media de las células viables comparadas con el control de medio.

Tabla 2. Inhibición in vitro de las células de carcinomas, EC50 comparativo (µ?) *NE (no tiene efecto inhibitorio significativo) Tabla 3. Inhibición in vitro de las células de carcinomas, EC50 comparativo (µ?) Tabla 4. Toxicidad comparativa de los compuestos de la presente invención en células de fibroblastos humanos normales in-vitro (ICSo, µ?) Como se muestra arriba en la Tabla 4, en las líneas celulares de fibroblastos humanos, paclitaxel y ácido caféico son más tóxicos que los compuestos (Ilb) , (le) y (Id) .

El índice terapéutico para un compuesto anticáncer compara la toxicidad del compuesto en una célula normal con un efecto anti-proliferativo en células de carcinoma. El índice es una medición de la seguridad del compuesto anticáncer. La relación de un valor IC5o en una célula humana normal (por ejemplo, una célula GM9503 de fibroblastos humanos) a un valor IC50 en una línea celular de carcinoma humano por un compuesto anticáncer particular proporciona información comparativa en la seguridad y selectividad del compuesto anticáncer. Los valores del índice terapéutico mostrados en la Tabla 5 demuestran que los compuestos anticáncer (Ib) , (le) , y (Id) tienen un índice terapéutico más grande y por lo tanto son menos tóxicos en comparación con paclitaxel (un fármaco anticáncer aprobado) . Estos resultados son significativos ya que una terapia anticáncer exitosa no debe únicamente demostrar citotoxicidad antitumor sino también mostrar toxicidad tolerable con respect células saludables normales.

Tabla 5. Valores de índice terapéutico (seguridad)* de compuestos anticáncer de la presente invención anticancerígena = IC50 (GM9503 ) /IC5C (Carcinoma) Mecanismo de acción Las líneas celulares de carcinoma de colon humano HCT116 se trataron con los compuestos (Ilb) , (le) y (Id) y observaron durante un período de tiempo para determinar el mecanismo de muerte celular. El experimento se llevó a cabo de la siguiente forma: Las células HCT116 fueron sembradas y tratadas con cada compuesto. En cada momento, las células se formaron imágenes usando un microscopio neytral en magnificación 63X antes de la fijación. Los momentos fueron 2, 4, 6, 8, 12, y 16 horas.

Las células tratadas con los compuestos (Ilb) , (le) , y (Id) , exhiben la morfología bulosa característica de la membrana celular comúnmente vista durante la apoptosis (ver figuras 12-15) . El compuesto (Ilb) parece ser el más agresivo, seguido por el compuesto (le) y el compuesto (Id) . A las 4 horas, algunas células en cada pozo presentan la bulosidad de la membrana y la mayor parte de la población celular inicial parece estar sufriendo de apoptosis a las 6 y 8 h en los puntos de tiempo del ensayo. En las horas 10 y 12 tienen significativamente un menor número de células vivas en comparación con lo observado a las 2 y 4 hr, sin embargo la población celular parece aumentar ligeramente a las 16 horas. Es probable que esto esté causado por una duplicación de la población celular en ese punto de tiempo.

Se ha de entender que las modalidades de la invención descritas en la presente son ilustrativas de los principios de la presente invención. Otras modificaciones que pueden ser utilizadas están dentro del alcance de la invención. Así, a modo de ejemplo, pero no de limitación, las configuraciones alternativas de la presente invención pueden ser utilizadas de acuerdo con las enseñanzas descritas en este documento. Por lo consiguiente, la presente invención no está limitada a aquello tal cual se ha demostrado y descrito.

Todas las patentes, solicitudes de patentes y publicaciones citadas en esta solicitud se incorporan aquí en su totalidad como referencia, para todos los efectos, en las mismas proporciones como si cada patente, solicitud de patente y publicación relacionada fueran denotadas individualmente .

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Claims (63)

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula (I) p (I1) : caracterizado porque: R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi alquilcarboniloxi , R3 y R4 son independientemente H, OH, alcoxi alquilcarboniloxi, y R5 es H, OH o alquilcarboniloxi, y R6 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, siempre que el compuesto no sea (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (3 , 4-dimetoxifenil) acriloil) oxi) propil 3- (4-metoxifenil) acrilato, (E)-3-(((E)-3-(3,4- dimetoxifenil) acriloil) oxi) -hidroxipropil 3- (4 -metoxifenil ) acrilato.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (la) en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi alquilcarboniloxi , R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R6 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (Ib) o (Ib1): en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi alquilcarboniloxi , y R6 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (Ic) (IC ) : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi alquilcarboniloxi, y R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque R1 y R2 son ambos OH.

6. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque R4 es H.

7. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque R4 es OH.

8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque R3 es H.

9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque R3 es H.

10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 y R2 son ambos alcoxi .

11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque R4 es H.

12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque R4 es OH.

13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque R3 es H.

14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque R3 es H.

15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (Id) o (Id'):

16. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (le) o (le') :

17. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (If) o (If ') :

18. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene la fórmula (Ig) o dg') =

19. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alqúilcarboniloxi , R3 y R4 son independientemente H, OH, alcoxi o alqúilcarboniloxi, y R5 es H, OH o alqúilcarboniloxi , y R6 es H o alcoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable, siempre que el compuesto no sea (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (3, 4-dimetoxifenil) acriloilo) oxi) propil 3- (4-metoxifenil) acrilato, o (E)-3-(((E)-3- (3, 4 -dimetoxifenil) acriloilo) oxi) -2-hidroxipropil 3- (4 -metoxifenil) crilato.

20. Un uso de un compuesto de la fórmula (II) p (II1) : en donde R1, R2, R3 , R4 , R5, R6 y R7 son independientemente H OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto sea distinto de (2E,2'E)-2-acetoxipropano-1, 3-diil bis (3- (4-hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-hidroxi-3-metoxifenil ) acriloil ) oxi) propil 3 - (4 -hidroxifenil) acrilato, para preparar un medicamento para el tratamiento del cáncer en un paciente.

21. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (lia) o (lia1) : en donde R1, R2 , R4 , R6 y R7 son independientemente uno del otro H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

22. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (la) o (la1) : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R6 es H, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

23. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (Ic) o (Ic') : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , y R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

24. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde R1 y R2 son ambos OH .

25. El uso de conformidad con la reivindicación 24, en donde R4 es H.

26. El uso de conformidad con la reivindicación 22, en donde R4 es OH.

27. E uso de conformidad con la reivindicación 25, en donde R3 es H.

28. El uso de conformidad con la reivindicación 26, en donde R3 es H.

29. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde R1 y R2 son ambos alcoxi.

30. El uso de conformidad con la reivindicación 29, en donde R es H.

31. El uso de conformidad con la reivindicación 29, en donde R4 es OH.

32. El \iso de conformidad con la reivindicación 30, en donde R3 es H.

33. El uso de conformidad con la reivindicación 31, en donde R3 es H.

34. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto tiene la fórmula (Id) o (Id') :

35. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (le) o (le') :

36. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (If) o (If ') :

37. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (Ig) p (Ig1) :

38. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (Ilb) o (IIfc>') :

39. El uso de conformidad con la reivindicación 20, en donde el compuesto es de la fórmula (lie) o (lie1) :

40. Un uso de un compuesto de la fórmula (II) o (II1) : en donde R1, R2, R3 , R4 , R5, R6 y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto es distinto de (2E,2'E)-2-acetoxipropano-1, 3-diil bis (3- (4-hidroxifenil) acrilato) y (E) -2-acetoxi-3- ( ( (E) -3- (4-hidroxi-3-metoxifehil) acriloil) oxi) propil 3- (4- hidrpxifenil) acrilato, para matar células de cáncer.

41. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (lia) o (lia1) : en donde R1, R2, R , R6 y R7 son independientemente H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

42. El uso de conformidad ccn la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (la) o (la') : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi , R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R6 es H, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

43. El uso de conformidad con la reivindicación 57, en donde el compuesto es de la fórmula (le) o (le') : en donde : R1 y R2 son independientemente OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, y R4 es H, OH, alcoxi o alquilcarboniloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

44. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde R1 y R2 son ambos OH.

45. El uso de conformidad con la reivindicación 44, en donde R4 es H.

46. El uso de conformidad con la reivindicación 42, en donde R4 es OH.

47. El uso de conformidad con la reivindicación 45, en donde R3 es H.

48. El uso de conformidad con la reivindicación 46, en donde R3 es H.

49. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde R1 y R2 son ambos alcoxi.

50. El uso de conformidad con la reivindicación 49, en donde R4 es H.

51. El uso de conformidad con la reivindicación 49, en donde R4 es OH.

52. El uso de conformidad con la reivindicación 50, en donde R3 es H.

53. El uso de conformidad con la reivindicación 51, en donde R3 es H.

54. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (Id) o (Id1) :

55. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (le) o (le1):

56. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (If ) o (If ) :

57. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (Ig) o (Ig1) :

58. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el ??G?? e??^ es de la fórmula (Ilb) o (Ilb') :

59. El uso de conformidad con la reivindicación 40, en donde el compuesto es de la fórmula (IIc) o (IIc1) :

60. Un uso del compuesto definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 para preparar un medicamento para el tratamiento del cáncer en un paciente.

61. Un uso del compuesto definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 para matar las células cancerosas.

62. Un uso del compuesto definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 y 40 59 para matar las células cancerosas por apoptosis.

63. Un uso del compuesto rinido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 y 20 39 para el tratamiento del cáncer en un paciente.