KR20040053125A

KR20040053125A - 암 치료용 1-글리옥실일아미드 인돌리진

Info

Publication number: KR20040053125A
Application number: KR10-2004-7003754A
Authority: KR
Inventors: 케이조 코야; 리준 선; 미츠노리 오노; 웨이웬 잉; 하오 리
Original assignee: 신타 파마슈티칼스 코프.
Priority date: 2001-09-13
Filing date: 2002-09-13
Publication date: 2004-06-23
Also published as: AU2002333626B2; HK1063322A1; EP1432709B1; MXPA04002323A; ATE300542T1; CA2459886A1; ES2245747T3; EP1432709B8; JP2005504795A; WO2003022846A1; US20040214850A1; NZ531700A; CN1568324A; DE60205265T2; PT1432709E; NO20041035L; ZA200401996B; IS7176A; DE60205265D1; US6861436B2

Abstract

본 발명은 하기 화학식(I)로 표시되는 화합물을 제공한다:

상기 식에서,

고리 A가 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴기에 융합되거나 융합되지 않고,

Z₁및 Z₂가 독립적으로 =O, =S, =N-OR₁₂또는 =NR₁₂이며,

R₁및 R₂가 독립적으로 -H, 지방족 기, 치환된 지방족 기, 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환되지 않은 아릴기 또는 치환된 아릴기이고, 단 R₁및 R₂는 동시에 -H가 아니거나, -NR₁R₂가 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 질소 함유 헤테로시클릭 기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 질소 함유 헤테로아릴기를 형성하며,

R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

X가 공유 결합, -C(R₄R₅)-, -N(R₄)-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-N(R₄)-, 또는 -N(R₄)-C(=O)-이며,

R₄및 R₅가 독립적으로 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

R₁₂가 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이다.

Description

암 치료용 1-글리옥실일아미드 인돌리진{1-GLYOXLYLAMIDE INDOLIZINES FOR TREATING CANCER}

현재 암 치료에 사용될 수 있는 다수의 방법이 있다. 그러나, 상당한 진전이 이루어졌음에도 불구하고, 많은 암에 대한 치료법은 여러 가지 이유로 충분치 않은 실정이다.

현재 활용할 수 있는 치료법에 단순하게 반응하지 않거나 불충분하게 반응하는 암은 여전히 존재한다. 치료할 수 있는 암환자라도 때로는 견디기 어려운 부작용을 일으키는 약물을 사용하는 화학요법을 받아야만 한다. 그런 약물중 소수만이 경구로 사용될 수 있다. 암 화학요법과 관련하여 가장 심각한 문제는, 아마도 많은 종류의 종양에 의한 다중-약물 내성이 발생한다는 것이다. 예를 들어, 초기에 크기 감소를 보이거나 심지어는 회복이 진행될 정도로 항암 치료법에 양성으로 반응하는 많은 종양이 종종 약물 내성을 나타낸다. 하나 이상의 약물에 대해 내성을 보이는 종양을 일컬어 "다중-약물 내성(multi-drug resistant)"이 있다라고 한다.일단 환자의 암이 다중-약물 내성이 되면 질병의 추가의 진행을 정지시키거나 지연시키기가 거의 불가능하다.

그러므로, 현재 암 치료에 사용되는 약물들에 대한 하나 이상의 상기 단점을 극복할 수 있는 신규 약물이 계속적으로 요구되고 있다. 따라서, 신규 항암 약물의 바람직한 성질에는, 현재 치료될 수 없거나 치료가 어려운 종양에 대한 효능, 다중-약물 내성 종양에 대한 효능, 경구 생체이용률 및/또는 감소된 부작용이 포함되어야 한다.

발명의 개요

1-글리옥실일아미드인돌리진 (1-glyoxlylamideindolizines)이 다중-약물에 내성인 암세포를 포함하여, 상이한 많은 조직 유형으로부터 유발되는 암세포에 대해 세포독성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 다중-약물 내성인 사람의 자궁 육종 세포주 MES-SA/DX5 및 사람 골수종 백혈병 세포주 HL60/TX1000에 대한 화합물 (1)-(8)의 IC₅₀은 0.1 μM 미만이었다 (하기 실시예 9-10 및 12 참조).

이들 화합물의 구조가 하기 실시예 2에 도시되어 있다. 또한 누드 마우스에서 사람 유방암 세포주 MDA435로부터 얻은 종양의 크기는 화합물(1)이 경구 투여되었을 때 50 % 이상 감소되었다 (실시예 11). 화합물 1로 처리한 마우스에서는 체중 변화가 거의 없거나 전혀 없었는데, 이는 이 화합물이 최소한의 부작용만을 유발시켰음을 나타낸다. 이런 결과를 토대로, 신규 1-글리옥실일아미드인돌리진, 이 1-글리옥실일아미드인돌리진을 포함하는 약제 조성물, 1-글리옥실일아미드인돌리진을 투여함으로써 암에 걸린 개체를 치료하는 방법, 및 1-글리옥실일아미드인돌리진의 제조 방법이 본원에 개시되어 있다.

화합물(1)

본 발명의 한 구체예는 하기 화학식(I)로 표시되는 화합물에 관한 것이다:

상기 식에서,

고리 A는 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴기(바람직하게는 치환된 또는 치환되지 않은 페닐)에 선택적으로 융합되어 있고,

Z₁및 Z₂는 독립적으로 =O, =S, =N-OR₁₂또는 =NR₁₂이며,

R₁및 R₂는 독립적으로 -H, 지방족 기, 치환된 지방족 기, 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환되지 않은 아릴기 또는 치환된 아릴기이고, 단 R₁및 R₂는 동시에 -H가 아니거나, -NR₁R₂가 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 질소 함유 헤테로시클릭 기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 질소 함유 헤테로아릴기이며,

R₃은 치환되거나 치환되지 않은 아릴기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

X는 공유 결합, -C(R₄R₅)-, -N(R₄)-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-N(R₄)-, 또는 -N(R₄)-C(=O)-이며,

R₄및 R₅는 독립적으로 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

R₁₂는 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이다.

본 발명의 다른 구체예는 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제, 및 상기 화학식(I)로 표시되는 화합물을 포함하는 약제 조성물에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 약제 조성물은 유효량의 화합물을 포함한다. 상기 약제 조성물은, 예컨대 암에 걸린 개체의 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 또 다른 구체예는 암에 걸린 개체 치료용 약물을 제조하기 위한 화학식(I)로 표시되는 화합물의 용도에 관한 것이다. 상기 약물은 유효량의 화합물을 포함한다.

또 다른 구체예는 암에 걸린 개체의 치료방법에 관한 것이다. 상기 방법은화학식(I)로 표시되는 화합물의 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함한다.

또 다른 구체예는 화학식(I)로 표시되는 화합물의 합성 중간체를 제조하는 방법에 관한 것이다. 이 중간체는 하기 화학식(Ia)로 표시된다:

상기 방법은 하기 화학식(Ib)로 표시되는 선구 화합물(precursor compound)과 Cu^I염을 반응시키는 단계를 포함한다:

상기 화학식(Ia)와 (Ib)에서, 고리 A, X, R₃, R₄및 R₅는 화학식(I)에 대해 설명된 바와 같으나, 단 X가 -C(R₄R₅)-인 경우에는 화학식(Ia)와 (Ib)에서의 R₃은 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기가 아니다.

개시된 1-글리옥실일아미드인돌리진은 암 치료에 사용되는 경우 많은 장점을 나타낸다. 가장 현저한 이점은, 이 화합물이 많은 다중-약물 내성인 세포주에 대해 세포독성이 있다는 것이고, 따라서 그 밖의 통상의 암 화학요법이 성공적이지 못한 경우에 사용될 수 있다는 것이다. 또한, 이 화합물은 최소한의 부작용을 나타내며, 경구 투여될 때 활성을 나타낸다.

본 발명은 현재의 화학요법제로 치료되기 어려운 종양 및 암, 특히 다중 약물에 내성인 암을 치료하기 위한 신규한 약물, 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

도 1은, 사람 유방 MDA435 종양을 유발시킨 누드 마우스에 경구 투여된 화합물(1)의 항종양 효과를 도시하는 그래프이다. 이 그래프는 비히클, 25 mg/kg의 화합물(1) 및 50 mg/kg의 화합물(1)이 투여되기 시작한 후 수일에 걸친 종양의 크기를 mm³단위로 표시한 것이다.

도 2는 비히클, 25 mg/kg의 화합물(1) 및 50 mg/kg의 화합물(1)이 투여된 누드 마우스에서 수일에 걸쳐 마우스 체중의 변화를 백분율로 표시한 그래프이다.

바람직한 구체예에서, 본 발명의 화합물은 고리 A가 치환되거나 치환되지 않은 아릴기이고, Z₁및 Z₂가 동시에 =O이며, R₁이 -H이고, R₂가 치환되거나 치환되지 않은 알킬 또는 아릴기이며, R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기이고, X가 -C(R₄R₅)-, -N(R₄)- 또는 -O- (바람직하게는, X는 -C(R₄R₅)-이다)이며, R₄, R₅, Z₁및 Z₂가 상기한 바와 같은 화학식(I)로 표시된다. 보다 바람직하게는 R₃이 치환되거나 치환되지 않은 페닐 또는 피리딜기이며, R₄및 R₅는 동시에 -H이다.

상기 주지된 바와 같이, R₁내지 R₃의 값은 치환되거나 치환되지 않은 아릴기를 포함한다. R₂의 경우, 바람직한 아릴기는 하기 화학식(II) 내지 (XV)로 표시된다:

고리 D-T는 치환되거나 치환되지 않는다. R₂에 대한 보다 바람직한 아릴기는 하기 화학식(XVI) 내지 (XXI)로 표시되는 것들이다:

R₆은 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이고, 고리 D, F, G, I, H, M 및 O는 상기한 바와 같다.

보다 더 바람직한 R₂에 대한 아릴기는 하기 화학식(XXII) 내지 (XXVII)로 표시된다:

상기 식들에서,

X₃은 -CH- 또는 -N-이고,

R₇및 R₈은 독립적으로 -H 또는 알킬기이거나, -NR₇R₈이 함께 질소 함유 비방향족 헤테로시클릭 기를 형성하며,

R₉는 알킬기이고,

R₁₀은 -H 또는 알킬기이다.

다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 화합물은 하기 화학식(XXVIII)로 표시된다:

화학식(XXVIII)에서, 고리 A 및 V는 독립적으로 치환되거나 치환되지 않으며, X는 -CH₂-, -CH(CH₃)-, -O-, -NH- 또는 -NCH₃-이고, Z는 -O-, -S-, -NR-, -C=C-, -CH=N-, -N=CH-, -N=N-이며, R은 -H 또는 C1-C4 알킬이고, R₁₀은 -H, 치환되지 않은 지방족 기 또는 치환된 지방족 기이다. 보다 바람직한 것은, 고리 A가 치환되지 않고, 고리 V가 하나 이상의 R₁₁로 표시되는 기로 치환된 것이고, 각각의 R₁₁은독립적으로 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN이다.

보다 바람직한 구체예에서 본 발명의 화합물은 하기 화학식(XXIX)로 표시된다:

화학식(XXIX)에서, 고리 A 및 U는 각각이 독립적으로 치환되거나 치환되지 않으며, R₁₀은 -H, 치환되지 않은 지방족 기 또는 치환된 지방족 기이다. 보다 바람직한 것은, 고리 A가 치환되지 않고, 고리 U가 R₁₁로 표시되는 하나 이상의 기로 치환된 것으로, 여기에서 각각의 R₁₁은 독립적으로 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN이다. 바람직하게는, R₁₁은 메틸렌기에 결합된 탄소에 대해 파라 위치에 있다.

용어 "아릴기"는 카보시클릭 방향족 기, 예컨대 페닐, 나프틸 및 안트라실기; 및 헤테로아릴기, 예컨대 이미다졸릴, 이소이미다졸릴, 티에닐, 푸라닐, 피리딜, 피리미딜, 피라닐, 피라졸릴, 피롤릴, 피라지닐, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 이소옥사졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 및 테트라졸릴기를지칭한다.

아릴기는 또한 카보시클릭 방향족 고리 또는 헤테로아릴 고리가 하나 이상의 다른 헤테로아릴 고리에 융합되어 있는 융합된 폴리시클릭 방향족 고리 시스템을 포함한다. 그 예로는, 벤조티에닐, 벤조푸라닐, 인돌릴, 퀴놀리닐, 벤조티아졸릴, 벤조이소티아졸릴, 벤조옥사졸릴, 벤조이소옥사졸릴, 벤즈이미다졸릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐 및 이소인돌릴이 있다.

지방족 기는 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 유닛을 함유하고 있는 직쇄, 분지쇄 또는 고리형 비방향족 탄화수소이다. 전형적으로 직쇄 또는 분지쇄 지방족 기는 탄소수 1 내지 약 10 개, 바람직하게는 탄소수 1 내지 약 4 개이며, 고리형 지방족 기는 탄소수 3 내지 약 10 개, 바람직하게는 탄소수 3 내지 약 8 개의 것이다. 바람직한 지방족 기는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기, 예컨대 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 2차-부틸, 3차-부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸 또는 옥틸, 또는 탄소수 3 내지 약 8개의 시클로알킬기이다. C1-C4 직쇄 또는 분지쇄 알킬기 또는 C3-C8의 시클릭 알킬기를 또한 "저급 알킬"기로서 지칭한다.

"알킬렌 기"는 -(CH₂)_n-으로 표시되는데, n은 1 내지 10의 정수이며, 바람직하게는 1 내지 4이다.

비방향족 헤테로시클릭 고리는 고리안에 질소, 산소 또는 황과 같은 헤테로원자를 하나 이상 포함하는 비방향족 카보시클릭 고리이다. 고리는 5-, 6-, 7- 또는 8-원일 수 있다. 그 예로는, 옥사졸리닐, 티아졸리닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오페닐, 모르폴리노, 티오모르폴리노, 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 및 티아졸리디닐이 있다.

지방족 기, 비방향족 헤테로시클릭 기, 벤질 고리 또는 아릴기 고리 탄소 (카보시클릭 및 헤테로아릴)에 대한 적당한 치환기는 개시된 화합물의 항암 활성을 실질적으로 방해하지 않는 것들이다. 적당한 치환기의 예로는 -OH, 할로겐(-Br, -Cl, -I 및 -F), -OR^a, -O-COR^a, -COR^a, -CN, -NO₂, -COOH, -SO₃H, -NH₂, -NHR^a, -N(R^aR^b), -COOR^a, -CHO, -CONH₂, -CONHR^a, -CON(R^aR^b), -NHCOR^a, -NRCOR^a, -NHCONH₂, -NHCONR^aH, -NHCON(R^aR^b), -NR^cCONH₂, -NR^cCONR^aH, -NR^cCON(R^aR^b), -C(=NH)-NH₂, -C(=NH)-NHR^a, -C(=NH)-N(R^aR^b), -C(=NR^c)-NH₂, -C (=NR^c)-NHR^a, -C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NH-C(=NH)-NH₂, -NH-C(=NH)-NHR^a, -NH-C(=NH)-N(R^aR^b), -NH-C(=NR^c)-NH₂, -NH-C(=NR^c)-NHR^a, -NH-C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NR^dH-C(=NH)-NH₂, -NR^d-C(=NH)-NHR^a, -NR^d-C(=NH)-N(R^aR^b), -NR^d-C(=NR^c)-NH₂, -NR^d-C(=NR^c)-NHR^a, -NR^d-C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NHNH₂, -NHNHR^a, -NHR^aR^b, -SO₂NH₂, -SO₂NHR^a, -SO₂NR^aR^b, -CH=CHR^a, -CH=CR^aR^b, -CR^c=CR^aR^b, -CR^c=CHR^a, -CR^c=CR^aR^b, -CCR^a, -SH, -SO_kR^a(k는 0,1 또는 2) 및 -NH-C(=NH)-NH₂. R^a-R^d는 각각 독립적으로 지방족, 치환된 지방족, 벤질, 치환된 벤질, 아릴 또는 치환된 아릴기, 바람직하게는 알킬, 벤질 또는 아릴기이다. 또한, -NR^aR^d는 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기를 형성할 수 있다. 비방향족 헤테로시클릭 기, 벤질기 또는 아릴기는 또한 치환기로서 지방족 또는 치환된 지방족 기를 포함할 수 있다. 치환된 지방족 기는 또한 비방향족 헤테로시클릭 고리, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 고리, 벤질, 치환된 벤질, 아릴 또는 치환된 아릴기를 치환기로서 포함할 수 있다. 치환된 지방족, 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 아릴, 또는 치환된 벤질기는 하나 이상의 치환기를 포함할 수 있다.

다른 헤테로아릴 고리 원자에 대해 세개의 공유 결합을 가진 헤테로아릴 고리 질소 원자에 대한 적당한 치환기에는 -OH 및 -알콕시 (바람직하게는 C1-C4)가 있다. 다른 헤테로아릴 고리 원자에 대해 세개의 공유 결합을 가진 치환된 헤테로아릴 고리 질소 원자는 양전하를 띄며, 클로라이드, 브로마이드, 포르메이트, 아세테이트 등과 같은 짝음이온에 의해 평형을 유지한다. 다른 적당한 짝음이온의 예는 적당한 약제학적으로 허용되는 염에 대한 하기 부분에 기재되어 있다.

다른 헤테로아릴 고리 원자에 대해 두개의 공유 결합을 가진 헤테로아릴 고리 질소 원자에 대한 적당한 치환기로는, 알킬, 치환된 알킬 (할로알킬을 포함함), 페닐, 치환된 페닐, -S(O)₂-(알킬), -S(O)₂-NH(알킬) 및 -S(O)₂-NH(알킬)₂가 있다.

고리 A에 대한 바람직한 치환기로는 -F, -Cl, -Br, -C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, -C1-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -CN 또는 -NH₂가 있다. 고리 A는 치환되지 않거나, 하나 이상의 치환기를 가질 수 있다.

고리 D-T에 대한 바람직한 치환기로는 C1-C4 알킬, C1-C4 히드록시알킬, N-모르폴리노, 피리미딜, 피리미딜로 치환된 C1-C4 알킬, -N(C1-C4 알킬)₂, -C(O)NH₂, -C(O)NH(C1-C4 알킬), C(O)N(C1-C4 알킬)₂, -NHC(O)(C1-C4 알킬), -NO₂, -C1-C4 알콕시, -C(O)O-CH₂CH₂-N(C1-C4 알킬)₂,, -NH-(페닐), -NH₂, -CH₂NH-C(O)-O-(C1-C4 알킬), -CH₂NH₂, -Cl, -F, -C(O)-O-(C1-C4 알킬), -C(O)-N-(C1-C4 알킬), C3-C7 시클로알킬, 페닐, -C(O)-N-모르폴리노, -S-(C1-C4 알킬), -CN, 푸릴, -S(O)₂-(C1-C4 알킬), -S(O)₂-NH₂, -S(O)₂-NH(C1-C4 알킬) 또는 -S(O)₂-N(C1-C4 알킬)₂이 있다.

고리 U, 고리 V, 및 R₃으로 표시되는 페닐 및 피리딜 고리에 대한 바람직한 치환기로는 -Br, -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -COOR^e, -N(R^e)₂, -CON(R^e)₂, -NR^eCOR^f, -NHCONH₂및 -SO₂N(R^e)₂가 있다. 각각의 R^e및 R^f는 독립적으로 -H, 알킬 또는 치환된 알킬로부터 선택된다. 고리 U, 고리 V, 및 R₃으로 표시되는 페닐 기에 대한 보다바람직한 치환기에는 -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -NH₂, -CONH₂또는 -NHCOR^f가 있다. 고리 U, 고리 V, 및 R₃으로 표시되는 페닐 기에 대한 보다 더 바람직한 치환기에는 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN 또는 -OCH₃이다. 고리 U, 고리 V, 및 R₃으로 표시되는 페닐 및 피리딜 고리는 치환되지 않거나 0, 하나 이상의 치환기를 가질 수 있지만, 바람직하게는 치환되지 않거나 일치환된다. 고리 U, 고리 V, 및 R₃이 6-원 방향족 고리이고 일치환된 경우에는, 상기 치환기가 메틸렌 기에 결합된 탄소 원자에 대해 파라 위치에 있다는 것이 바람직하다.

또한 본 발명에는 본원에 개시되는 화합물의 약제학적으로 허용되는 염이 포함된다. 본원에 개시된 화합물은 충분히 산성이거나 충분히 염기성이거나 이둘 모두의 성질을 갖는 작용기를 가지고 있어서, 많은 유기 또는 무기 염기, 및 무기 및 유기산중 어느 것과도 반응하여 염을 형성할 수 있다. 염기성 기를 가진 화합물로부터 산 부가염을 형성하는데 통상 사용되는 산은 무기산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 인산 등과, 유기산, 예컨대p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 옥살산,p-브로모페닐-술폰산, 탄산, 숙신산, 시트르산, 벤조산, 아세트산 등이다. 그러한 염의 예로는 황산염, 피로황산염, 중황산염, 아황산염, 중아황산염, 인산염, 일수소인산염, 이수소인산염, 메타인산염, 피로인산염, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 아세트산염, 프로피온산염, 데칸산염, 카프릴산염, 아크릴산염, 포름산염, 이소부틸산염, 카프로산염, 헵탄산염, 프로피온산염, 옥살산염,말론산염, 숙신산염, 수베르산염, 세바스산염, 푸마르산염, 말산염, 부틴-1,4-디올산염, 헥신-1,6-디올산염, 벤조산염, 클로로벤조산염, 메틸벤조산염, 디니트로벤조산염, 히드록시벤조산염, 메톡시벤조산염, 프탈산염, 술폰산염, 크실렌술폰산염, 페닐아세트산염, 페닐프로피온산염, 페닐부틸산염, 시트르산염, 락트산염, 감마-히드록시부틸산염, 글리콜산염, 타르타르산염, 메탄술폰산염, 프로판술폰산염, 나프탈렌-1-술폰산염, 나프탈렌-2-술폰산염, 만델산염 등이 있다.

염기 부가염으로는 무기 염기, 예컨대 암모늄 또는 알칼리 또는 알칼리성 토금속 수산화물, 탄산염, 중탄산염 등이 있다. 따라서 본 발명의 염을 제조하는데 유용한 염기로는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화암모늄, 탄산칼륨 등이 있다.

개시된 화합물은 다중-약물 내성 암을 포함하여 암에 걸린 개체를 치료하는데 사용될 수 있다. 암은, 종양이 초기에 약물에 반응한 후에 그 약물로 치료가 진행되는 동안 정상적인 종양 성장 속도로 되돌아간다면 약물에 대해 내성이다. 종양은 종양의 질량이 감소하거나 종양 성장 속도가 느려지는 경우에 "약물에 대해 반응한다"고 지칭한다. 용어 "다중-약물 내성 암"은 둘 이상의 약물, 전형적으로는 5개 이상의 약물에 대해 내성을 나타내는 암을 지칭한다.

"유효량"은, 화합물이 다중-약물 내성 암에 걸린 개체에게 투여되는 경우 유익한 임상적 결과가 얻어지는 화합물의 양이다. "유효한 임상적 결과"에는 종양 질량의 감소, 종양 성장 속도의 감소, 전이의 감소, 암과 관련된 증상의 중증도의 완화 및/또는 치료가 없었을 때와 비교하여 개체의 수명의 증가가 포함된다. 개체에게 투여되는 화합물의 정확한 양은 질병 또는 상태의 유형 및 중증도 및 환자의특성, 예컨대 일반적인 건강 상태, 연령, 성별, 체중 및 약물 내성에 따라 좌우될 것이다. 또한, 화합물의 정확한 양은 암의 정도, 중증도 및 유형에 따라서도 좌우될 것이다. 숙련된 전문가라면 이들 및 다른 인자에 따라 적절한 용량을 결정할 수 있을 것이다. 개시된 화합물의 유효량은 전형적으로 약 1 mg/mm²/일 내지 약 10 g/mm²/일이며, 바람직하게는 10 mg/mm²/일 내지 약 5 g/mm²/일이다.

개시된 화합물은 어떠한 적당한 경로, 예컨대 캡슐, 현탁액 또는 정제 형태로 경구, 또는 비경구 투여에 의해 투여된다. 비경구 투여에는, 예컨대 전신성 투여, 예를 들면 근육내, 정맥내, 피하, 또는 복강내 주사가 포함된다. 화합물은 또한 치료되어야 할 암의 유형에 따라, 경구로 (예컨대 식이요법으로), 국소적으로, 흡입에 의해 (예컨대, 기관지내, 비내, 경구 흡입 또는 비내 적하), 또는 직장을 통해 투여될 수 있다. 경구 또는 비경구 투여가 바람직한 투여 방식이다.

개시된 화합물은 암치료를 위한 약제 조성물의 일부로서 허용되는 약제학적 담체와 함께 환자에게 투여될 수 있다. 투여될 화합물의 제형은, 선택되는 투여 경로에 따라 달라질 것이다 (예컨대, 용액, 에멀션, 캡슐). 적당한 약제학적 담체는 화합물과 상호작용하지 않는 비활성 성분을 함유할 수 있다. 표준 약제학적 제형화 기법, 예를 들면 레밍턴의 제약학 (Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA)에 설명된 바와 같은 것들이 사용될 수 있다. 비경구 투여에 적당한 약제학 담체로는, 예를 들면 멸균수, 생리 식염수, 세균 발육 억제 식염수 (약 0.9 % mg/ml의 벤질 알코올이 함유되어 있다), 인산염-완충 식염수, 행크 용액, 링거-락테이트 등이 있다. 조성물을 캡슐화하는 방법 (예컨대, 경질 젤라틴 또는 시클로덱스트란의 코팅으로서)도 당해 분야에 공지되어 있다 (참조: Baker et al., "Controlled Release of Biological Active Agents", John Wiley and Sons, 1986).

임의로, 개시된 화합물은 탁솔(Taxol), 빈크리스틴(Vincristine), 아드리아마이신 (Adriamycin), 에토포시드(Etoposide), 독소루비신(Doxorubicin), 닥티노마이신(Dactinomycin), 미토마이신 C(Mitomycin C), 블레오마이신(Bleomycin), 빈블라스틴(Vinblastine), 시스플라틴(Cisplatin) 등과 같은 다른 항암제들과 함께 투여될 수도 있다. 바람직하게는, 개시된 화합물은 암이 다중-약물 내성으로 진행하기 전에 또는 암이 다중-약물 내성으로 진행함에 따라, 그러나, 암이 사용중인 항암 약물에 대해 완전히 내성이 되기 전에 함께 투여되는 것이 바람직하다. 상기 방법은 또한 수술, 방사선 요법 등과 같은 다른 암 치료법과 함께 병행될 수 있다.

"개체"는 포유류, 바람직하게는 사람이지만, 수의학적 치료가 필요한 동물, 예컨대 반려 동물 (예컨대, 개, 고양이 등), 농장 동물 (예컨대, 소, 양, 돼지, 말 등) 및 실험실 동물 (예컨대 쥐, 마우스, 기니아 피그 등)일 수 있다.

화학식(Ia)로 표시되는 화합물은 개시된 1-글리옥실일인돌리진의 합성 중간체이다. 이 중간체를 제조하는 한 가지 방법은 하기 반응식 1에 도시되어 있다:

반응식 1

화학식(Ia)로 표시되는 중간체는 화학식(Ib)로 표시되는 선구 화합물을 고리화함으로써 제조된다. 고리화 반응은 CuI, CuBr, CuCl, Cu(트리플레이트) 등과 같은 Cu^I염의 존재하에 수행된다. CuCl이 가장 흔하게 사용되는 Cu^I염이다. 전형적으로 등몰량의 Cu^I염과 선구 화합물이 사용된다. 그러나 과잉의 Cu^I염, 예를 들면 5배몰 이하의 과량, 보다 일반적으로는 3배몰 이하의 과량, 바람직하게는 단지 50%몰 과량의 상기 염을 사용하는 것이 또한 일반적이다. 이 반응에 적당한 용매로는 극성의 아프로틱(aprotic) 용매, 예를 들면 디메틸아세트아미드 (DMA), 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸술폭시드 (DMSO), 헥사메틸포스포르아미드 (HMPA) 및 N-메틸피롤리디논(NMO)이 있다. 반응은 전형적으로 고온, 예컨대 약 70 ℃ 내지 용매의 비등점 온도에서, 바람직하게는 100 ℃ 내지 160 ℃에서, 보다 바람직하게는 120 ℃ 내지 140 ℃에서 수행된다. 3차 아민은 전형적으로 보조 용매로서 반응 혼합물에 첨가되는데, 그 양은 극성 아프로틱 용매에 대하여 1:20 내지 4:1 v/v의양이 전형적이며, 보다 전형적으로는 약 1:10 내지 1:1 v/v이다. 적당한 3차 아민의 예로는 트리에틸 아민, 디이소프로필에틸아민, 디메틸아닐린, 디메틸아미노피리딘 등이 있다. 트리에틸아민이 가장 흔하게 사용된다. 이 반응을 수행하는데 사용되는 구체적인 조건의 예는 하기 실시예 3에서 기재되어 있다.

반응식 1에 따른 개시된 1-글리옥실일인돌리진의 합성의 다음 단계는 화학식(Ia)로 표시된 중간체를 옥살릴 클로라이드 또는 이의 합성 등가물(예컨대 옥살릴 브로마이드)로 아실화하는 것이다. 중간체와 아실화제가 등몰량으로 사용될 수 있다 하더라도, 전형적으로 아실화제가 과량으로, 예컨대 20 배몰 이하의 과량, 바람직하게는 10 배몰 이하의 과량, 보다 바람직하게는 3 배몰 이하의 과량으로 사용될 수 있다. 에테르성 용매 (예컨대 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, 글림(glyme), 디글림 및 메틸 3차-부틸 에틸)와 방향족 용매 (예컨대 벤젠, 톨루엔 및 크실렌)가 통상적으로 사용된다. 적당한 반응 온도 범위는 -50℃내지 용매의 비등점까지이고, 보다 전형적으로는 -10 ℃ 내지 실온까지이며, 바람직하게는 -10 ℃ 내지 10 ℃까지이다. 이 반응을 수행하는데 사용된 조건의 구체적인 예가 하기 실시예 3에 기재되어 있다.

반응식 1에 따른 개시된 1-글리옥실일인돌리진의 합성은, 아실화된 중간체를 아민 HNR₁R₂와 반응시킴으로써 완료되는데, 여기에서 R₁및 R₂는 상기한 바와 같다. 아실화된 중간체와 아민은 적당한 용매, 예를 들면 에테르성 용매 또는 방향족 용매중에서 혼합된다. 적당한 반응 온도는 아실화 반응에 대하여 상기한 바와 같다.한 반응물이 과량(예컨대, 10 배몰 이하의 과량으로)으로 사용될 수 있지만 , 전형적으로는 20 %몰 내지 100 %몰의 과량으로 사용될 수 있다. 2 당량 미만의 아민 HNR₁R₂가 사용되는 경우에는, 트리에틸아민 또는 디메틸아미노피리딘과 같은 3차 아민은, 아실화된 중간체에 대해 2 당량 이상의 아민이 반응 혼합물내에 존재하도록 첨가되는 것이 일반적이다. 이 반응을 수행하는데 사용된 조건의 구체적인 예가 하기 실시예 3에 기재되어 있다.

하기 도시되는 반응식 2는 화학식(Ia)로 표시되는 특정 중간체를 제조하기 위한 제 2 방법을 보여준다. 반응식 2에서, (100)으로 표시된 중간체는 디메틸포름아미드 및 디메틸술페이트, 또는 선택적으로는 디메틸포름아미드 디-3차-부틸아세탈로부터 제조된 시약으로 고리화된다. 이 반응은 2002년 9월 13일에 출원되어 공동 계류중인 미국 출원 (발명의 명칭: "3-아실-인돌리진의 제조 방법", Attorney Docket No. 3211.1007-000)에 보다 상세하게 설명되어 있으며, 이것의 전체 내용이 본원에 참고로 포함되어 있다. 이 반응을 수행하기 위한 구체적인 조건이 하기 실시예 6에 기재되어 있다.

반응식 2

반응식 2의 반응들이 화학식(I) 및 (Ia)에서 R₃에 상응하는 위치가 파라-시아노 페닐인 화합물을 제조하는 것과 관련하여 도시되지만, 다른 R₃의 값을 가진 화합물도 출발 물질과 조건을 적당하게 선택함으로써 제조될 수 있다.

하기 도시되는 반응식 3은 화학식(Ia)로 표시되는 특정 화합물을 제조하기 위한 제 3 방법을 보여준다. 이들 변형을 수행하기 위한 구체적인 조건이 하기 실시예 1에서 기재되어 있다.

반응식 3

반응식 3에서, "p-TSA"는 파라-톨루엔술폰산을 지칭하며; "NaCNBH₃"는 나트륨 시아노보로히드라이드를 지칭하며; "TMS-Cl"은 클로로트리메틸실란을 지칭한다. 반응식 3의 반응들이 화합물(1)의 제조와 관련하여 설명되었지만, 본 발명의 다른 인돌리진 화합물도 출발 물질과 반응 조건을 적당하게 선택함으로써 쉽게 제조될 수 있다.

본 발명을 하기의 실시예로 예시하나, 이는 본 발명을 어떤 식으로든 제한하려는 것은 아니다.

실시예 1 : 반응식 3의 방법에 의한 2-(3-(4-시아노-벤질)-인돌리진-1-일)-N-(3-메틸이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드의 제조

무수 아세토니트릴 (300 ml)중의 4-시아노펜아실 브로마이드(10)(5.02 g, 22.2 mmol) 용액에 피리딘 (3.6 ml, 45.3 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 이 혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 침전물을 여과한 후, 아세토니트릴 (20 ml)로 세척하고, 진공건조하여 1-(2-(4-시아노-페닐)-2-옥소-에틸)-피리디늄 브로마이드 (11)를 백색 분말로서 수득하였다 (100 %).¹H NMR (DMSO-d₆) δ 6.56 (s, 2H), 8.21 (m, 6H), 8.76 (t,J= 7.8, 1H), 9.03 (d,J= 6.6, 2H).

테트라히드로푸란 (250 ml)중의 1-(2-(4-시아노-페닐)-2-옥소-에틸)-피리디늄 브로마이드(11)(4.04 g, 13.2 mmol)와 탄산 칼륨 (2.21 g, 16.0 mmol)의 슬러리를 실온에서 10분동안 교반하였다. 이것에 3-부틴-2-온 (1.4 ml, 16.0 mmol)을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과로 제거하고, 그 여과물을 진공 농축하였다. 잔류물을 3:1의 헥산과 에틸 아세테이트를 사용하여 (R _f 0.2) 실리카 겔상에서 칼럼 크로마토그래피로 정제함으로써 1-아세틸-3-(4-시아노벤조일)인돌리진(12)을 노란색 고체로서 수득하였다 (2.55 g, 72 %).¹H NMR (CDCl₃) δ 2.56 (s, 3H), 7.23 (m, 1H), 7.62 (m, 2H), 7.90 (m, 4H), 8.72 (d,J= 9.0, 1H), 10.02 (d,J= 6.6, 1H) ; C_l8H_l2N₂0₂에 대한 ESMS 계산치: 288.1; 실측치: 289.1 (M+H)⁺.

벤젠 (150 ml)중의 1-아세틸-3-(4-시아노벤조일)인돌리진(12)(1.56 g, 5.69 mmol), 에틸렌 글리콜 (1 ml), 및p-톨루엔술폰산 (2.16 g, 11.38 mmol)의 용액을 3시간 동안 환류하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 포화 중탄산 나트륨 용액으로 중성화한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다 (3×50 ml). 회수된 층을 진공농축하였다. 그것을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (R _f 0.3, 헥산 중의 에틸 아세테이트)하여 3-(4-시아노벤조일)인돌리진(13)을 밝은 노란색 고체로서 수득하였다 (1.12 g, 80 %).¹H NMR (CDCl₃) δ 6.56 (d,J= 4.8, 1H), 7.04 (t,J= 6.9, 1H), 7.28 (m, 2H), 7.61 (d,J= 9.0, 1H), 7.78 (m, 2H), 7.89 (m, 2H), 9.98 (d,J= 7.2, 1H). C_l6H₁₀N₂0₂에 대한 ESMS 계산치: 246.1; 실측치: 247.1 (M+H)⁺.

얼음조에서 냉각된 3-(4-시아노벤조일)인돌리진(13)(0.19 g, 0.84 mmol) 및 클로로트리메틸실라넨 (0.65 ml, 5.06 mmol)의 아세토니트릴 (15 ml) 용액에 나트륨 시아노보로히드라이드(0.32 g, 5.06 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 이것을 중탄산 나트륨 수용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다 (3 ×25 ml). 회수된 유기층을 물로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시킨 후 진공농축하여 오일상의 잔류물을 수득하였고, 이것을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 적용하여 헥산중의 10 % 에틸 아세테이트를 사용함으로써 (R _f 0.3) 3-(4-시아노벤질)인돌리진(14)(0.11 g, 56 % 수율)을 수득하였다.¹H NMR (CDCl₃) δ 4.09 (s, 2H), 6.36 (m, 2H), 6.56 (m, 2H), 7.15 (d,J= 8.4, 2H), 7.32 (d,J= 9.3, 1H), 7.45 (m, 3H). C_l6H_l2N₂에 대한 ESMS 계산치: 232.1; 실측치: 233.1 (M+H)⁺.

40 ml의 무수 에틸 에테르중의 옥살릴 클로라이드 (1.13 ml, 12.9 mmol) 용액을 얼음조에서 냉각시킨 후, 에틸 에테르 (10 ml)중의 3-(4-시아노벤질)인돌리진(14)(1.04 g, 4.31 mmol)을 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 0 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 감압하에서 제거하였다 (이 때 온도는 25 ℃ 미만으로 유지하였다). 그런 다음, 잔류물을 THF (40 ml)에 용해시키고 0 ℃로 냉각하였다. 거기에 THF (10 ml)중의 5-아미노-3-메틸이소티아졸을 서서히 첨가하였다. 그 혼합물을 주위 온도에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 이를 진공농축한 후, 수득된 미정제 생성물을 1:1 에틸 아세테이트와 디클로로메탄 (R _f 0.3)을 사용하여 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 통해 정제하여 1.35 g (78 %)의 2-(3-(4-시아노벤질)-인돌리진-1-일) -N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드(1)을 수득하였다.¹H NMR (CDC1₃) δ 2.47 (s, 3H), 4.34 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 6.98 (m, 1H), 7.31 (m 3H), 7.61 (d,J= 7.2, 2H), 7.80 (d,J= 6.9, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.68 (d,J= 8.7, 1H), 10.36 (s, 1H). C₂₂H_l6N₄0₂S에 대한 ESMS 계산치: 400.1; 실측치: 399.1 (M-H)⁺.

실시예 2: 반응식 3의 방법에 따른 다른 1-글리옥실일아미드 인돌리진의 제조

하기 도시된 1-글리옥실일인돌리진을 실시예 1에서 설명된 방법에 따라 제조하였다. 각각의 화합물에 대한 분석 데이터가 함께 기재되어 있다.

화합물 (2)

¹H NMR (CDCl₃) δ 4.22 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 6.95 (m, 1H), 7.13 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.26 (m, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.84 (dd, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.65 (dd, 1H), 10.21 (s, 1H). C₂₁H₁₆ClN₃O₂S에 대한 ESMS 계산치: 409.1; 실측치: 410.1 (M+H)⁺.

화합물 (3)

¹H NMR (CDCl₃) δ 4.22 (s, 2H), 6.92 (m, 1H), 7.50 (m, 5H), 7.84 (m, 2H), 8.13 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.67 (d,J= 9.0 Hz, 1H), 8.85 (s, 1H), 9.71(s, 1H). C₂₆H₁₈ClN₃O₂에 대한 ESMS 계산치: 439.1; 실측치: 440.1 (M+H)⁺.

화합물 (4)

¹H NMR (CDC1₃) δ 2.50 (s, 3H), 4.30 (s, 2H), 6.81 (s, 1H), 7.2-7.4 (m, 3H), 7.6-7.7 (m, 3H), 8.20 (s, 1H), 8.62 (m, 1H), 10.36 (s, 1H) ppm; C₂₂H₁₅FN₄O₂S에 대한 ESMS 계산치: 418.09; 실측치: 419.1 (M+H)⁺.

화합물 (5)

¹H NMR (CDCl₃) δ 4.34 (s, 2H), 6.96 (m, 1H), 7.42 (m, 4H), 7.75 (m, 3H), 8.17 (m, 2H), 8.42 (d,J= 6.9 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.70 (d,J= 8.7 Hz, 1H), 8.87 (m, 1H), 9.69 (s, 1H). C₂₇H₁₈N₄O₂에 대한 ESMS 계산치: 430.1; 실측치: 431.1 (M+H)⁺.

화합물 (6)

¹H NMR (CDCl₃) δ 2.40 (s, 3H), 4.23 (s, 2H), 6.74 (s, 1H), 6.90 (m, 1H), 7.18-7.41 (m, 6H), 7.81 (m, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.62 (m, 1H), 10.22 (s, 1H); C_2lH_l7N₃0₂S에 대한 ESMS 계산치: 375; 실측치: 376 (M+H)⁺.

화합물 (7)

¹H NMR (CDCl₃) δ 2.40 (s, 3H), 4.22 (s, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.98 (m, 3H), 7.18 (m, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.84 (m, 1H), 8.16 (s, lH), 8.62 (m, 1H),10.20 (s, 1H); C₂₁H₁₆FN₃O₂S에 대한 ESMS 계산치: 393; 실측치: 394 (M+H)⁺.

화합물 (8)

^lHNMR (CDC1₃) δ 2.40 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 4.20 (s, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.81 (m, 2H), 6.92 (m, 1H), 7.13 (m, 2H), 7.40 (m, 1H), 7.87 (m, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.62 (m, 1H), 10.46 (s, 1H); C₂₂H₁₉N₃O₃S에 대한 ESMS 계산치: 405; 실측치: 406 (M+H)⁺.

화합물 (9)

¹H NMR (CDCl₃) δ 2.47 (s, 3H), 4.34 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 6.98 (m,1H), 7.31 (m 3H), 7.61 (d,J= 7.2, 2H), 7.80 (d,J= 6.9, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.68 (d,J= 8.7, 1H), 10.36 (s, 1H). C₂₂H₁₆N₄O₂S에 대한 ESMS 계산치: 400.1; 실측치: 399.1 (M-H)⁺.

화합물 (10)

¹NMR (CDCl₃) δ 2.49 (s, 3H), 2.77 (s, 3H), 4.24 (s, 2H), 6.75 (s, 1H), 6.85 (t, 1H), 7.11 (m, 3H), 7.26 (d, 2H), 7.67 (d, 1H), 8.01 (s, 1H), 10.34 (s, 1H); C₂₂H₁₈C1N₃0₂S에 대한 ESMS 계산치: 423.08; 실측치 424.0 (M+H)⁺.

화합물 (11)

¹H NMR (CDCl₃) δ 2.45 (s, 6H), 4.20 (s, 2H), 6.80 (m, 2H), 7.13 (d,2H), 7.27 (d, 2H), 7.72 (d, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 10.68 (s, 1H); C₂₂H₁₈ClN₃0₂S에 대한 ESMS 계산치: 423.08, 실측치 424.0 (M+H)⁺.

화합물 (12)

¹H NMR (CDC1₃) δ 2.56 (s, 3H), 4.73 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 7.15 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 7.45 (m, 2H), 7.65 (d, 1H), 7.83 (m, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.19 (m, 1H), 8.65 (d, 1H), 10.30 (s, 1H); C₂₅H_l8ClN₃0₂S에 대한 ESMS 계산치: 459.08, 실측치 460.0 (M+H)⁺.

화합물 (13)

¹H NMR (CDCl₃) δ 4.47 (s, 2H), 7.15 (t, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.81 (d, 2H), 8.09 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.38 (m, 2H), 8.83 (s, 1H), 10.68 (s, 1H); C₂₃H₁₇ClN₄O₃에 대한 ESMS 계산치 : 432.10, 실측치: 433.1 (M+H)⁺.

화합물 (14)

¹H NMR (CDC1₃) δ 1.45 (t, J=7.2Hz, 3H), 4.18 (q, J=7.2Hz, 2H), 4.35 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 7.00 (t, J=4.0Hz, 1H), 7.35 (AB, J=-7.8Hz, 2H), 7.40 (t, J=4.0Hz, 1H), 7.55 (d, J=1.5Hz, 1H), 7.62 (AB, J=7.8Hz, 2H), 7.82 (d, J=5.OHz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.65 (d, J=9.lHz, 1H), 9.46 (s, 1H) ppm; C₂₃H_l9N₅0₂에 대한 ESMS 계산치: 397.15; 실측치: 398.1 (M+H)⁺.

화합물 (15)

¹H NMR (DMSO-d₆) δ 4.45 (s, 2H), 7.15 (m, 1H), 7.55 (m, 3H), 7.8-8.0 (m, 6H), 8.40 (m, 2H), 10.82 (s, 1H)ppm; C₂₅H₁₈N₄O₃에 대한 ESMS 계산치: 422.14; 실측치: 423.2 (M+H)⁺.

화합물 (16)

^lH NMR (CDCl₃) δ 4.36 (s, 2H), 6.95 (t, J=3.8Hz, 1H), 7.3-7.5 (m, 3 H), 7.6-7.7 (m, 4H), 7.80 (d, J=3.9Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.5-8.7 (m, 3H), 9.60 (s, 1H) ppm; C₂₃H₁₆N₄O₂에 대한 ESMS 계산치: 380.13; 실측치: 381.1 (M+H)⁺.

화합물 (17)

¹H NMR (CDC1₃) δ 2.46 (s, 3H), 4.34 (S, 2H), 6.79 (s, 1H), 6.85 (m, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.31 (AB, J=8.1Hz, 2H), 7.6 (m, 3H), 8.14 (s, 1H), 10.42 (s, 1H) ppm ; C₂₂H₁₅FN₄O₂S에 대한 ESMS 계산치: 418.09; 실측치: 419.1 (M+H)⁺.

화합물 (18)

¹H NMR (CDCl₃) δ 6.82 (s, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.77 (m, 1H), 7.89 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.95 (d, J=9.0 Hz, 2H), 8.77 (d, J=9.6 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 10.07 (d, J=6.9 Hz, 1H), 10.22 (s, 1H). C₂₂H₁₄N₄O₃S에 대한 ESMS 계산치: 414.1;실측치: 415.1 (M+H)⁺.

화합물 (19)

^lH NMR (CDC1₃) δ 1.26 (t, J=7.0Hz, 3H), 1.45 (m, 2H), 2.00 (m, 2H), 3.05 (t, J=7.2Hz, 2H), 3.9-4.3 (m, 8H), 6.95 (t, J=4.3Hz, 1H), 7.38-7.78 (m, 7H), 8.05 (s, 1H), 8.62 (d, J=8.1Hz, 1H)ppm; C₂₆H₂₆N₄0₄에 대한 ESMS 계산치: 458.20; 실측치: 459.1 (M+1)⁺.

실시예 3: 반응식 1에 도시된 방법에 의한 4-(인돌리진-3-일)-벤조니트릴의 제조

N₂유입구와 연결되어 있고 온도계가 장착되어 있는 건조된 1 리터 들이 3구 둥근 바닥 플라스크를 N₂로 풀러싱하였다. 플라스크에 300 ml의 무수 THF (Aldrich), 62 ml (0.44 mol)의 N,N-디이소프로필아민을 넣고 -78 ℃로 냉각하였다 (30 분). 10분 이내에 n-BuLi (122 ml, 3.6 M, 0.44 mol)을 첨가하고, 이 때 내부온도를 -65 ℃로 증가시켰다. 생성되는 혼합물을 추가 30분 동안 -78 ℃에서 교반하였다. 상기 용액에 DMPU (53 ml, 0.44 mol)를 조금씩 첨가하였다. 그런 다음, 생성되는 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. p-톨루니트릴 (48 ml, 0.40 mol)을 20 ml의 THF에 희석시킨 다음, 상기 혼합물에 주사바늘을 통해서 25분에 걸쳐 서서히 첨가하고, 이 때 온도를 -70 ℃ 미만으로 유지하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응액은 노란색을 띄는 적색으로 변하였다. 거기에 프로파르길 브로마이드 (80 %, Aldrich, 22 ml, 0.2 mol)를 주사바늘을 통해서 20분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물은 밝은 노란색으로 변하였는데, 이것을 -78 ℃에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응액을 -40 ℃로 가온하였다. 거기에 100 ml의 포화 NH₄Cl을 첨가하고, 이어서 100 ml의 물을 첨가하였다. 이것을 실온에서 10분 동안 교반한 후, 100 ml의 에틸 아세테이트를 첨가한 다음, 혼합물을 분별 깔때기에 옮겼다. 유기층을 분리하고 수성층을 50 ml의 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 회수된 유기층을 물 (30 ml)과 염수 (30 ml)로 세척한 다음, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 간단히 여과하여 투명하고 밝은 노란색 용액을 수득한 다음, 이것을 진공농축하여 오일상의 잔류물을 수득하고, 이것을 0 ℃로 냉각하였다. 고체가 형성되었고, 이것을 여과하고 헵탄으로 세척함으로써 28.64 g (92 % 수율)의 4-부트-3-이닐-벤조니트릴을 수득하였다.¹H NMR (CDC1₃): δ (ppm) 7.60 (m, 2H); 7.36 (m, 2H), 2.90 (t,J=7.2 Hz, 2H); 2.51 (m, 2H); 1.99 (t,J=2.7 Hz, 1H). C₁₁H₉N에 대한 ESMS 계산치: 155.1; 실측치: 156.1 (M+H)⁺. 수득된 생성물을 추가로 정제하지 않고 후속 단계에 사용하였다.

N₂유입구와 연결되어 있고 온도계 및 자기 교반기가 장착되어 있는 건조된 1 리터 들이 3구 둥근 바닥 플라스크를 N₂로 풀러싱하였다. 4-부트-3-이닐-벤조니트릴 (49.38 g, 0.32 mol)을 250 ml의 THF에 용해시킨 후, 계속해서 트리에틸아민 (TEA)(250 ml, 1:1 TEA/THF), 브로모피리딘 (33.3 ml, 0.35 mol), Pd (pph₃)₂Cl₂(4.47 g, 6.0 mmol), 및 CuI (1.21 g, 6.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 65 ℃로 가열하고 그 온도에서 교반하였다. 가열하는 동안, 반응액은 진한 갈색으로변하였다. 2 시간후, 반응을 완료시키고 실온으로 냉각시킨 후, 물 (200 ml)과 에틸 아세테이트 (200 ml)를 첨가하였다. 유기층을 분리한 후, 물 (30 ml) 및 염수 (30 ml)로 세척한 다음, 황산 나트륨 상에서 건조시켰다. 그런 다음, 간단하게 여과함으로써 임의의 촉매 잔류물 및 건조제를 제거한 후, 진공 농축하여 오일을 얻었는데, 이것을 냉각시켰더니 즉시 고체가 되었다. 그런 다음, 고체를 여과하고 헵탄으로 세척하여 58.74 g (79.6 % 수율; 순도: 98 %)의 4-(4-피리딘-2-일-부트-3-이닐)-벤조니트릴을 수득하였다.¹H NMR (CDC1₃): δ (ppm) 8.54 (m, 1H); 7.59 (m, 3H); 7.39 (m, 2H); 7.31 (m, 1H); 7.19 (m, 1H); 3.01 (t,J=6.9 Hz, 2H); 2.75 (t,J=6.9 Hz, 2H). C_l6H_l2N₂에 대한 ESMS 계산치: 232.1; 실측치: 233.1 (M+H)⁺.

N₂유입구와 연결되어 있고 온도계 및 자기 교반기가 장착되어 있는 건조된 1 리터 들이 3구 둥근 바닥 플라스크를 N₂로 풀러싱하였다. 4-(4-피리딘-2-일-부트-3-이닐)-벤조니트릴 (58.73 g, 0.25 mol), DMA (490 ml) 및 TEA (70 ml)를 계속해서 플라스크에 넣었더니, 밝은 갈색 용액이 되었다. 그런 다음, CuCl (25.05 g, 0.25 mol)을 첨가하였는데, 이후 반응액이 진한 갈색이 되었다. 반응 혼합물을 130 ℃에서 교반하였다. 3시간 동안 130 ℃에서 교반한 후에 반응을 완료시키고, 실온으로 냉각하였다. 그런 다음, 반응액을 물 (300 ml)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (400 ml)를 첨가하였다. 생성되는 진한 갈색 혼합물을셀라이트 케이크를 통하여 여과함으로써 투명한 2층 혼합물을 얻었다. 이것을 분리한 후에, 건조 및 농축하여 진한 오일을 수득하였다. 진한 오일을 250 ml의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 15 g의 탈색 탄소에 적용한 후 20분 동안 교반하였다. 이것을 셀라이트 케이크를 통하여 여과한 후, 여과물을 물 (100 ml)로 2회 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 농축후 53.89 g (89 %)의 4-인돌리진-3-일메틸-벤조니트릴을 수득하였다.¹H NMR (CDC1₃): δ (ppm) 7.55 (d,J=8.1 Hz, 2H); 7.50 (d,J=9.0 Hz, 1H); 7.39 (d,J=9.0 Hz, 1H); 7.23 (d,J=7.8 Hz, 2H); 6.64 (m, 2H), 6.44 (m, 2H); 4.27 (s, 2H). C₁₆H₁₂N₂에 대한 ESMS 계산치: 232.1; 실측치: 233.1 (M+H)⁺.

실시예 4: 반응식 1의 방법에 의한 1-글리옥실일아미드 인돌리진의 합성을 위한 다른 인돌리진 중간체의 제조

하기 중간체들을 실시예 3에서 설명한 방법에 의해 적절한 출발 물질로 교환시킴으로써 제조하였다. 각각의 화합물에 대한 분석 데이터가 기재되어 있다.

중간체 (1)

4-(인돌리진-3-일옥시)-벤조니트릴

¹H NMR (CDC1₃): δ (ppm) 7.58 (m, 3H); 7.36 (d,J=9.0 Hz, 1H); 6.99 (m, 2H); 6.64 (m, 1H), 6.51 (m, 3H). C_l5H₁₀N₂0에 대한 ESMS 계산치: 234.1; 실측치: 235.1 (M+H)⁺.

중간체 (2)

4-(인돌리진-3-일-메틸-아미노)-벤조니트릴

¹H NMR (CDCl₃): δ (ppm) 7.43 (m, 4H); 6.72 (m, 1H); 6.63 (d,J=3.9 Hz, 1H); 6.49 (m, 4H). C₁₅H₁₀N₂O에 대한 ESMS 계산치: 247.1; 실측치: 248.1 (M+H)⁺.

중간체 (3)

4-(1-인돌리진-3-일-에틸)-벤조니트릴

¹H-NMR (CDCl₃) δ (ppm), 7.55 (d,J=8.7 Hz, 2H), 7.50 (d,J=8.9 Hz, 1H), 7.41 (d,J=8.9 Hz, 1H), 7.24 (d,J=8.7 Hz, 2H), 6.65 (m, 2H), 6.45 (m, 2H), 4.43 (q,J=6.7 Hz, 1H), 1.88 (d,J=6.7 Hz, 3H); C₁₇H₁₄에 대한 ESMS 계산치 : 246.12 ; 실측치: 247.1 (M+H)⁺.

중간체 (4)

4-(6-메틸-인돌리진-3-일메틸)-벤조니트릴

¹H-NMR (CDC1₃) δ (ppm), 7.58-7.55 (m, 3H), 7.33-7.23 (m, 3H), 6.54-6.50 (m, 2H), 6.39 (d,J=3.9 Hz), 4.25 (s, 2H), 2.17 (s, 3H); C_l7H_l4N₂에 대한 ESMS 계산치 : 246.12; 실측치: 247.1 (M+H)⁺.

중간체 (5)

4-(6-니트로-인돌리진-3-일메틸)-벤조니트릴

¹H-NMR (CDCl₃) δ (ppm), 8.92 (d,J=3.6 Hz), 7.76 (d,J=8.7 Hz), 7.56-7.55 (m, 2H), 7.44 (d, J=8.7 Hz, 2H); C₂₂H₁₅N₅O₄S에 대한 ESMS 계산치: 445.08; 실측치: 446.0 (M+H)⁺.

실시예 5: 실시예 4의 방법에 의해 제조된 인돌리진 중간체로부터 1-글리옥실일아미드 인돌리진의 제조

실시예 4에서 설명된 방법에 의해 제조된 인돌리진 중간체들을, 실시예 1에서 설명된 방법에 의해 1-글리옥실일아미드 인돌리진으로 전환시켰다. 이들 1-글리옥실일아미드 인돌리진의 구조 및 분석 데이터가 하기 기재되어 있다.

화합물 (20)

2-[3-(4-시아노-페녹시)-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H NMR (CDCl₃): δ (ppm) 10.34 (s, 1H); 8.66 (d, J=9.0, 1H); 8.02 (d, J=6.0, 1H); 7.89 (s, 1H); 7.68 (d, J=9.0, 2H); 7.46 (t, J=9.0, 1H) ; 7.29 (d, J=9.0, 2H); 7.06 (t, J=6.0, 1H); 6.87 (s, 1H). C₂₁H₁₄N₄O₃S에 대한 ESMS 계산치: 402.1; 실측치: 403.1 (M+H)⁺.

화합물 (21)

2-{3-[(4-시아노-페닐)-메틸-아미노]-인돌리진-1-일}-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H NMR (CDC1₃): δ(ppm) 10.34 (s, 1H); 8.70 (d, J=9.0, 1H); 8.02 (s, 1H); 7.77 (d, J=6.0, 1H); 7.50 (m, 3H); 7.03 (t, J=9.0, 1H); 6.78 (s, 1H);6.61 (d, J=9.0, 2H). C₂₂H₁₇N₅O₂S에 대한 ESMS 계산치: 415.1; 실측치: 416.1 (M+H)⁺.

화합물 (22)

2-{3-[1-(4-시아노-페닐)-에틸]-인돌리진-1-일}-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H-NMR (CDC1₃) δ(ppm), 10.52 (s, 1H), 8.65 (d,J=9.9 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.66 (d,J=6.6 Hz, 1H), 7.59 (d,J=8.7 Hz, 2H), 7.39 (dd,J ₁=9.9 Hz,J ₂=7.5 Hz), 7.28 (d,J=8.7 Hz, 2H), 6.89 (dd,J ₁ =6.6 Hz,J ₂= 7.5 Hz), 6.81 (s, 1H), 4.33 (q,J=6.9 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.83 (d,J=6.9 Hz, 3H); C₂₃H₁₈N₄O₂S에 대한 ESMS 계산치: 414.12; 실측치: 415.1 (M+H)⁺.

화합물 (23)

2-[3-(4-시아노-벤질)-6-히드록시-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드.

¹H-NMR (DMSO-d₆) δ (ppm), 10.06 (s, 1H), 8.37 (d,J=9.0 Hz, 1H), 7.82-7.76 (m, 3H), 7.63 (s, 1H), 7.48-7.45 (m, 2H), 7.26-7.23 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.39 (s, 2H), 2.34 (s, 3H); C₂₂H₁₆N₄O₃S에 대한 ESMS 계산치: 416.09; 실측치: 417.0 (M+H)⁺.

화합물 (24)

2-[3-(4-시아노-벤질)-6-메틸-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H-NMR (DMSO-d₆) δ (ppm), 8.40 (d,J=8.7 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.54 (d,J=8.1 Hz, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.52 (d,J=8.1 Hz, 2H), 7.43 (d,J=8.7 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.34 (s, 3H); C₂₃H₁₈N₄O₂S에 대한 ESMS 계산치: 414.12; 실측치: 415.1 (M+H)⁺.

화합물 (25)

2-[3-(4-시아노-벤질)-6-니트로-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H-NMR (DMSO-d₆) δ (ppm), 9.42 (d,J=1.2 Hz), 8.53 (d,J=9.9 Hz), 8.13 (dd,J ₁=9.9 Hz,J ₁=1.2 Hz), 7.84 (d,J ₁=8.4 Hz, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.55 (d,J ₁=8.4 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.64 (s, 1H), 2.35 (s, 3H); C₂₂H₁₅N₅O₄S에 대한 ESMS 계산치: 445.08; 실측치: 446.0 (M+H)⁺.

실시예 6: 반응식 2에 도시된 방법에 의한 4-(인돌리진-3-일)-벤조니트릴의 제조

EtOAc (150 ml)중의 4-아세틸벤조니트릴 (14.5 g, 100 mmol) 용액에 Br₂(5.1 ml, 100 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 0.5 시간 동안 교반한 후, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 CH₃CN (100 ml)에 용해시키고, 피콜린 (20 ml, 200 mmol)을 혼합물에 첨가한 다음, 30분 동안 실온에서 교반하고 추가 1시간 동안 0 ℃에서 교반하였다. 이 혼합물에 EtOAc (20 ml)를 첨가하고, 형성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 EtOAc로 세척함으로써 순수한 2-메틸-1-(4-시아노)-펜아실피리디늄 브로마이드 (20.3 g, 83 %)를 수득하였다.^lH NMR (300MHz, DMSO) : 9.05-8.03 (m, 8H), 6.78 (s, 2H), 2.74 (s, 3H).

1당량의 DMF와 1당량의 Me₂SO₄의 혼합물을 60 ℃에서 3시간 동안 교반한 후 실온으로 냉각시킴으로써, 400 ml의 DMF-Me₂SO₄시약 혼합물을 제조하였다. 이 시약을 2-메틸-1-(4-시아노)-펜아실피리디늄 브로마이드 (50 g, 120 mmol) DMF (500 ml) 현탁 용액에 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그런 다음, 이 혼합물에 Et₃N (700 ml)을 첨가하고, 온도를 40 ℃에서 유지하면서 1시간 동안 교반하였다. 생성되는 혼합물에 얼음물 (1200 ml)을 첨가하였다. 형성된 침전물을 수집하여 물로 세척하고 건조시킴으로써 4-(인돌리진-3-카르보닐)-벤조니트릴을 수득하였다 (29 g, 수율 76 %).¹H NMR (300MHz, CDC1₃) : 9.95 (d, 1H), 7.87-7.75 (m, 4H), 7.57 (d, 1H), 7.30-7.22 (m, 2H), 6.97 (m, 1H), 6.55 (d, 1H); C₁₆H₁₀N₂0에 대한 ESMS 계산치: 246.08; 실측치: 247.1 (M+H)⁺.

대안적인 과정으로, 4-(인돌리진-3-카르보닐)-벤조니트릴을, DMF (50 ml)중의 2-메틸-1-(4-시아노)-펜아실피리디늄 브로마이드 (5g, 12.2 mmol)의 현탁액에 N,N-디메틸포름아미드 디-t-부틸 아세탈 (30 ml)을 실온에서 첨가함으로써 제조하였다. 투명한 용액을 130 ℃에서 4분 동안 교반한 후 얼음조를 사용하여 실온으로냉각하였다. 거기에 물 (100 ml)을 첨가하고, 형성된 침전물을 수집하여 물로 세척한 다음 진공 라인으로 건조시킴으로써 4-(인돌리진-3-카르보닐)-벤조니트릴을 91 % 순도로 수득하였다 (3.9 g, 90%). 이 생성물을 CH₃CN (35 ml)(82 ℃ 내지 0 ℃)으로 결정화하여 순수한 2를 수득하였다 (3.2 g).¹H NMR (300MHz, CDC1₃): 9.95 (d, 1H), 7.87-7.75 (m, 4H), 7.57 (d, 1H), 7.30-7.22 (m, 2H), 6.97 (m, 1H), 6.55 (d, 1H); C₁₆H₁₀N₂0에 대한 ESMS 계산치: 246.08; 실측치: 247.1 (M+H)⁺.

MeOH (9 ml)를 함유하는 4-(인돌리진-3-카르보닐)-벤조니트릴 (24 g, 100 mmol) CH₃CN (600 ml) 용액에 BH₃-THF (1M, 480 ml)를 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 50 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응액을 물 (200 ml)로 켄칭하고 EtOAc (700 ml)로 추출한 다음, 물로 세척하였다 (300 ml ×3). 유기층을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 (또는 EtOAc)(400 ml)에 용해시킨 후 헥산 (100 ml)으로 희석하고 셀라이트를 사용하여 여과함으로써 4-인돌리진-3-일메틸-벤조니트릴을 수득하였다 (15.6 g, HPLC에 의한 92 % 순도). 이 생성물을 후속 단계에 직접 사용하였다. δ (ppm) 8.54 (m, 1H); 7.59 (m, 3H); 7.39 (m, 2H); 7.31 (m, 1H) ; 7.19 (m, 1H) ; 3.01 (t,J=6.9 Hz, 2H); 2.75 (t,J=6.9 Hz, 2H). C_l6H_l2N₂에 대한 ESMS 계산치: 232.1; 실측치: 233.1 (M+H)⁺.

실시예 7: 반응식 2의 방법에 의한 1-글리옥실일아미드 인돌리진의 합성을위한 다른 인돌리진 중간체의 제조

하기 도시된 인돌리진 중간체들을 실시예 6에서 설명한 방법에 의해 제조하였다. 분석 데이터도 각각의 화합물에 대하여 기재되어 있다.

중간체 (6)

4-(6-히드록시-인돌리진-3-카르보닐)-벤조니트릴

¹H-NMR (DMSO-d₆) δ (ppm), 9.94 (s, 1H), 9.64 (s, 1H), 8.00-7.98 (m, 2H), 7.88-7.84 (m, 2H), 7.73-7.69 (m, 1H), 7.15-7.11 (m, 2H), 6.61 (d,J=4.8 Hz, 1H); C₁₆H₁₀N₂O₂에 대한 ESMS 계산치: 262.07; 실측치: 263.1 (M+H)⁺.

중간체 (7)

푸란-2-일-인돌리진-3-일-메타논

¹H-NMR (CDCl₃) δ (ppm), 10.01 (d,J=7.2Hz, 1H), 8.05 (d,J=4.5Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.56 (d,J=8.7Hz, 1H), 7.29-7.27 m, 1H), 7.17 (t,J=6.9Hz, 1H), 6.91 (t,J=6.9Hz, 1H), 6.60-6.56 (m, 2H); C₁₃H₉NO₂에 대한 ESMS 계산치: 211.06; 실측치: 212.1 (M+H)⁺.

중간체 (8)

5-(인돌리진-3-카르보닐)-티오펜-2-카르보니트릴

¹H-NMR (CDCl₃) δ (ppm), 9.88 (d,J=6.9 Hz, 1H), 7.68-7.63 (m, 4H), 7.30-7.25 (m, 1H), 7.00 (t,J=6.9 Hz, 1H), 6.61 (d,J=4.5 Hz, 1H); C₁₄H₈N₂0S에 대한 ESMS 계산치: 252.04; 실측치: 253.0 (M+H)⁺.

중간체 (9)

5-인돌리진-3-일메틸-티오펜-2-카르보니트릴

¹H-NMR (CDC1₃) δ (ppm), 7.59(d,J=7.2 Hz, 1H), 7.46-7.40 (m, 2H),6.80-6.78 (m, 1H), 6.72-6.66 (m, 2H), 6.51 (t,J=6.6 Hz, 1H), 6.46 (d,J=3.9 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H); C_l4H₁₀N₂S에 대한 ESMS 계산치: 238.05; 실측치: 239.1 (M+H)⁺.

실시예 8: 실시예 6의 방법에 의해 제조된 인돌리진 중간체로부터 1-글리옥실일아미드 인돌리진의 제조

실시예 6의 방법에 의해 제조된 인돌리진 중간체를 실시예 1에서 설명한 방법에 의해 1-글리옥실일아미드 인돌리진으로 전환시켰다. 이들 1-글리옥실일아미드인돌리진의 구조 및 이것들의 분석 데이터가 하기 기재되어 있다.

화합물 (26)

2-[3-(3-시아노-벤질)-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H-NMR (CDC1₃) δ (ppm), 10.43 (s, 1H), 8.67 (d,J=9.0 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.82 (d,J=6.9 Hz, lH), 7.59-7.40 (m, 4H), 6.99 (t,J=6.6 Hz, 1H),6.78 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 2.46 (s, 3H); C₂₂H₁₆N₄O₂S에 대한 ESMS 계산치: 400.10; 실측치: 401.0 (M+H)⁺.

화합물 (27)

2-[3-(5-클로로-티오펜-2-일메틸)-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드

¹H-NMR (CDCl₃) δ (ppm), 10.52 (s, 1H), 8.64 (d,J=9.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.95 (d,J=6.9 Hz, 1H), 7.42 (t,J=7.2Hz, 1H), 7.00 (t,J=6.9Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.74-6.73 (m, 1H), 6.62-6.61 (m, 1H), 4.35 (s, 2H), 2.45 (s, 3H); C_l9H_l4ClN₃0₂S₂에 대한 ESMS 계산치: 415.02; 실측치: 416.0 (M+H)⁺.

화합물 (28)

2-[3-(5-시아노-티오펜-2-일메틸)-인돌리진-1-일]-N-(3-메틸-이소티아졸-5-일)-2-옥소-아세트아미드.

¹H-NMR (CDC1₃) δ (ppm), 10.40 (s, 1H), 8.66 (d,J=9.0 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.88 (d,J=6.9 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.03 (t,J=6.0 Hz, 1H), 6.88 (d,J=3.9 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 2.46 (s, 3H); C₂₀H_l4N₄0₂S₂에 대한 ESMS 계산치: 406.06; 실측치: 407.0 (M+H)⁺.

실시예 9: 화합물 (1)은 항암 활성을 나타낸다 (시험관내)

화합물의 시험관내 활성을 하기 7가지 사람 암 세포주로 측정하였다: MDA435 (사람 유방암), MIP101 (사람 결장암), HL-60 (사람 골수종 백혈병), U937(사람 백혈병), p388 (쥐 백혈병), DU-145 (사람 전립선암), MES-SA (사람 자궁 육종)를 ATCC (American Type of Culture Collection)로부터 입수하였다.

세포주를 10 %의 FCS, 100 유닛/ml의 페니실린, 100 ㎍/ml의 스트렙토마이신, 및 2 mM의 L-글루타민이 제공된 RPMI1640 (GIBCO)에서 유지시켰다. 세포를 매3일마다 분리시켜서, 실험 하루 전에 2×10⁵세포/ml의 농도로 희석하였다. 모든 실험은 지수적 성장 세포 배양물에 대해 수행하였다. 세포 밀도는 모든 실험에서 2.5×10⁴세포/ml이었다.

화합물 (1)의 저장 용액과 탁솔(Taxol)의 저장 용액 (양성 대조표준)을, 상기 화합물을 100 %의 DMSO중에 1 mM 농도로 용해시킴으로써 제조하였다. 최종 농도는 저장 용액을 직접 조직 배양 배지에 희석시킴으로써 수득하였다. 화합물의 농도를 다르게 하여 세포를 72시간 동안 인큐베이션하고, MTS [즉, 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸리움 브로마이드] 검정에 의해 IC₅₀을 측정하였다. IC₅₀은 종양 세포 성장을 50 % 억제하는 데 필요한 화합물의 농도를 나타낸다. 이 결과는 하기 표 1에 기재되어 있다.

표 1: 화합물 (1)과 탁솔 (양성 대조표준)의 시험관내 항암 활성

암 세포주	IC₅₀(μM)
MDA-435	화합물 (1)	탁솔
MDA-435	0.05	0.005
MIP-101	0.02	0.5
HL-60	0.01	0.005
U-937	0.05	0.005
p388	0.01	0.01
DU-145	0.05	0.005
MES-SA	0.01	0.005

상기 표 1의 데이터로부터 알 수 있는 것처럼, 화합물 (1)은 상이한 조직 유형으로부터의 7가지 암 세포주에 대해 상당히 높은 항암 활성 (IC₅₀: 0.01 ~ 0.05μM)을 나타내었다.

실시예 10: 화합물 (1)은 시험관내에서 다중-약물 내성인 암세포에 대해 항암 활성을 지닌다.

두 개의 MDR (다중 약물 내성) 사람 암 세포주에서 시험관내 활성을 측정하였다. HL-60/TX1000을, 점진적으로 더 높은 농도의 탁솔중에서 HL-60을 계대 배양함으로써 시험관내에서 분리하였다. HL-60/TX1000 세포는 항PGP 항체를 사용하여 표지화하는 면역형광법 및 웨스턴 블롯팅에 의해 측정되는 바, mdr-1 mRNA와 p-당단백질을 과발현한다. 세포는 탁솔, 빈크리스틴, 아드리아마이신, 에토포시드 및 독소루비신에 대해 교차-내성이다. MES-SA/Dx5를 증가하는 농도의 독소루비신의 존재하에 수립하였다. 세포는 mdr-1 mRNA와 p-당단백질을 높은 수준으로 발현하고, 탁솔, 에토포시드, 미토마이신 C, 콜히친, 빈블라스틴, 닥티노마이신, 5-플루오로우라실 및 메토트렉세이트를 포함하여 15가지 이상의 화학요법제에 대해 교차 내성을 나타낸다. MES-SA/Dx5는 ATCC로부터 구입하였다.

세포를 배양하는 과정과 암세포 성장 억제를 검정하는 과정은 실시예 3에 설명한 바와 같다. 그 결과가 하기 표 2에 기재되어 있다.

표 2: 다중 약물 내성 암 세포주에 대한 화합물 (1), 탁솔 (대조표준) 및 빈크리스틴 (대조표준)의 시험관내 항암 활성

세포주	IC₅₀(μM)
	화합물 (1)	탁솔	빈크리스틴
HL-60/TX1000	0.02	5	5
MES-SA/DX-5	0.05	5	1

탁솔과 빈크리스틴은 MDR 세포주 (MES-SA/DX5, HL-60/TX1000)에 대해서는 효과적이지 않았다 (IC₅₀: 1-5 μM). 다른 한편으로, 화합물 (1)은 이들 MDR 암 세포주에 대해 높은 항암 활성을 나타냈다.

실시예 11: 화합물 (1)은 사람 유방 종양 (MDA435) 이종이식편 모델에 대해 항암 효능을 입증한다 (생체내).

화합물 (1)의 생체내 항암 효능을, 종양을 유발시킨 마우스에서 종양 성장 억제 검정법을 사용하여 평가하였다. 사람 유방 종양 (MDA435) 세포를, 누드 마우스의 옆구리에 종양 세포 현탁액을 피하주사함으로써 이식하였다. 실험 화합물로 종양을 치료하는 것은 종양이 형성된 후 (크기가 대략 100 mm³이었다)에 시작하였다. 그런 다음, 이 동물에 대해 다중 주사 계획을 적용하기 시작하였는데, 상기 화합물은 경구로 투여하였다. 종양을 일주일에 2회씩 측정하였다. 이 검정 기간 동안, 체중 손실을 포함한 독성의 신호에 대해 동물을 매일 모니터하였다.

보충 배지를 50 %의 DMEM/둘베코 변형 이글 배지 (고농도의 글루코스), 50 %의 RPMI 1640, 10 %의 FBS/우태아 혈청 (하이브리도마 시험됨; 멸균 여과됨), 1 %의 L-글루타민, 1 %의 페니실린-스트렙토마이신, 1 %의 MEM 피루브산 나트륨, 1 %의 MEM 비-필수 아미노산으로부터 제조하였다. FBS는 시그마 케미칼사로부터 입수하고, 다른 성분들은 인비트로젠 라이프 테크놀로지[Invitrogen Life Technologies (USA)]로부터 입수하였다. 보충 배지를 37 ℃로 가온하고, 50 ml의 배지를 175 cm²의 조직 배양 플라스크에 넣었다.

검정에 사용한 세포는 아메리칸 타입 컬춰 컬렉션 (ATCC)으로부터 입수한 MDA435 사람 유방 암종 세포였다. 액체 질소 냉동 세포 저장 용액으로부터 한 바이얼의 MDA-435 세포를 취하였다. 냉동된 세포 바이얼을 즉시 37 ℃의 수조에 넣고 해동될 때까지 부드럽게 휘저어주었다. 냉동 바이얼을 70 %의 에탄올로 닦고, 세포를 즉시 보충 배지가 들어있는 175 cm²조직 배양 플라스크에 피펫을 사용하여 넣었다. 세포를 밤새 인큐베이션하고, 다음날 배지를 제거한 후 새로운 보충 배지로 채웠다. 플라스크내의 집밀도가 약 90 %가 될 때까지 플라스크를 인큐베이션하였다. 이것은 보통 약 5 내지 7일이 소요되었다.

플라스크를 10 ml의 실온의 멸균 인산염 완충 식염수 (PBS)로 세척하였다. 5 ml의 가온된 트립신-EDTA (Invitrogen)를 세포가 들어있는 플라스크에 첨가함으로써, 세포를 트립신 처리하였다. 그런 다음, 세포를, 세포가 플라스크의 표면으로부터 떨어져나가기 시작할 때까지 2 내지 3분 동안 37 ℃에서 인큐베이션하였다. 동일한 부피의 보충 배지 (5 ml)를 플라스크에 첨가하였다. 모든 세포를 50 ml의 튜브안에 수집하여 넣고, 1000 RPM에서 5분 동안 20 ℃에서 원심분리하였다. 상층액을 흡인하여 버리고, 세포 펠릿을 10 ml의 현탁 배지에 재현탁한 후 세포를 계수하였다. 플라스크당 1 내지 3백만 세포를 5 내지 7 개의 조직 배양 플라스크 (175 cm²)에 씨딩하였다. 각각의 플라스크에는 50 ml의 보충 배지가 들어있었다. 플라스크를 약 90 %의 집밀도에 이를 때까지 인큐베이션하였다. 세포의 계대는, 세포가 종양 이식에 대해 충분할 정도로 성장할 때까지 반복하였다.

세포를 트립신 처리하고 원심분리하는 상기 과정을 수행하였다. 상층액을 흡인하여 버리고, 세포 펠릿을 10 ml의 멸균 PBS에 재현탁한 후, 세포를 계수하였다. 세포를 원심분리한 후, 적절한 부피의 멸균 PBS에 재현탁하여 종양 이식에 필요한 정확한 수의 세포의 주사에 사용하였다. MDA-435의 경우, 100×10⁶개의 세포를 2.0 ml의 멸균 PBS로 현탁하여 최종 농도 50×10⁶세포/ml로 만들어서 마우스 당 0.1 ml중에 5×10⁶개의 세포를 주사하였다.

마우스 (CD-1 nu/nu)를 챨스 리버 라보라토리스(Charles River Laboratories)로부터 입수하였다: 명명: Crl:CD-1-nuBR, 월령: 6-8 주. 마우스를 실험 과정에 사용하기 전 1주일 동안 순응시켰다.

MDA-435 종양 세포 현탁액의 이식은 암컷 CD-1 nu/nu 마우스의 지방체(corpus adiposum)내로 이루어졌다. 이 지방체 (fat body)는 마우스의 복부 내장에 위치해 있다. 종양 세포를 골반뼈와 대퇴골의 연결부분에서 복부의 오른쪽 상한부에 위치한 지방체안에 피하 이식하였다. 멸균 PBS 0.1 ml중의 5×10⁶MDA-435 세포를 27G (1/2 인치) 주사바늘을 사용하여 주사하였다. MDA-435 종양은 이식후 2-3주에 나타났다.

화합물 투여를 위한 투약 용액은 1 g의 화합물 (1)을 10 ml의 아세톤 (HPLC 등급)에 용해시키고, 550 초음파 디스멤브레이터 (Sonic Dismembrator)를 사용하여 5분 동안 음파처리함으로써 제조하였다. 1.2 당량의 1 N HCl 수용액을 아세톤 용액에 첨가한 후, 5분 동안 음파처리하였다. 그런 다음, 모든 용매를 스피드 백 플러스 SC250 DDA를 사용함으로써 밤새 용액으로부터 증발시켰다. 건조된 분말을 화합물 (1)의 투약 용액의 제조에 사용하였다. 1.0 g의 메틸 셀룰로스, 400 cps의 U.S.P. (Spectrum Laboratory Products, Cat.# ME136)를 100 ml의 H₂O에 용해시킴으로써 1 %의 메틸 셀룰로스 (MC) 비히클을 제조하였다. 그런 다음, 이 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하여 투명한 1 % MC 용액을 제조하였다. 이 용액을 15분 동안 120 ℃에서 오토클레이브한 후, 1 % MC 용액을 실온에서 3시간 동안 놓아둔 후, 경구 투여되는 화합물을 제형하는 데 사용하였다. 화합물 (1)을 1 % MC 용액중에서 제조하여, 피하 주사바늘이 부착된 표준 위관영양 튜브를 통하여 마우스에 경구 투여하였다. 이 방법으로 화합물이 위안으로 직접 들어갈 수 있게 된다. 마우스에 대한 투약 용량은 10 ml/kg이었다.

화합물 (1)의 1 % MC 투약 용액을 하기 프로토콜을 따라서 MDA435 사람 유방 종양을 유발시킨 마우스에게 경구 주입하였다:

군 화합물 용량

1 비히클

2 화합물 (1) 25 mg/kg

3 화합물 (1) 50 mg/kg

투약 계획: 1주일에 3회 (월요일, 수요일, 금요일), 3주 동안 그리고; 각 군에 대해 5마리씩의 마우스를 사용하였다.

도 1은 화합물 (1)의 항종양 효능을 도시한다. 도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 화합물 (1)은 투약 의존 방식으로 25 mg/kg 및 50 mg/kg으로 사용되었을 때 누드 마우스에서 MDA435의 종양 성장을 상당히 억제한다. 도 2는 MDA435 사람 유방 종양을 유발시킨 누드 마우스의 체중에 미치는 화합물 (1)의 효과를 도시한다. 도 2에서 알 수 있는 바와 같이, 화합물 (1)은 마우스의 큰 체중 손실 없이 항암 활성을 나타낸다.

실시예 12: 화합물 (2)-(8)은 MES-SA/DX5에 대하여 높은 항암 활성을 나타낸다 (시험관내).

실시예 9 내지 10에서 설명된 프로토콜을 사용하여 다중 약물 내성 암 세포주 MES-SA/DX5, 즉 MDR 자궁 육종 세포주의 성장에 대한 화합물 (2) 내지 (8)에 의한 억제율을 검정하였다. 그 결과가 하기 표 3에 기재되어 있다.

표 3: 다중 약물 내성 사람 자궁 육종 세포주, MES-SA/DX5에 대한 화합물 (2)-(8)의 시험관내 항암 활성

화합물	IC₅₀(μM)
화합물 (2)	0.06
화합물 (3)	0.1
화합물 (4)	0.05
화합물 (5)	0.1
화합물 (6)	0.05
화합물 (7)	0.05
화합물 (8)	0.1

화합물 (2)-(8)은 MES-SA/DX5에 대하여 상당한 항암 활성 (IC₅₀: 0.05-0.1 μM)을 나타내는 반면, 탁솔은 MDR 세포주에 대하여 미약한 항암 활성 (IC₅₀: 5μM)을 나타내었다.

실시예 13: 화합물 (20), (21), (24) 및 (28)은 MES-SA 및 DU-145에 대하여 높은 항암 활성을 나타낸다 (시험관내)

실시예 9 내지 10에서 설명된 프로토콜을 사용하여, 암 세포주 MES-SA (사람 자궁 육종 세포주) 및 DU-145 (사람 전립선 암)의 성장에 대한 화합물 (20), (21), (24) 및 (28)에 의한 억제율을 검정하였다. 그 결과가 하기 표 4에 기재되어 있다.

표 4: MES-SA 및 DU-145에 대한 화합물 (20), (21), (24) 및 (28)의 시험관내 항암 활성

화합물	IC₅₀(μM)	IC₅₀(μM)
화합물	MES-SA	DU-145
화합물 (20)	0.05	0.05
화합물 (21)	0.05	0.05
화합물 (24)	0.05	0.05
화합물 (28)	0.1	0.1

화합물 (20), (21), (24) 및 (28)은 MES-SA 및 DU-145에 대하여 상당한 항암 활성 (IC₅₀: 0.05-0.1 μM)을 나타내었다.

본 발명을 바람직한 구체예를 참조로 구체적으로 도시하고 설명하였지만, 당업자들은 첨부되는 특허청구범위에 의해 포함되는 본 발명의 범주로부터 벗어남이 없이, 형태 및 상세한 내용에 다양한 변형이 이루어질 수 있다는 것을 이해해야 한다.

Claims

하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,

고리 A가 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴기에 융합되거나 치환되지 않고,

Z₁및 Z₂가 독립적으로 =O, =S, =N-OR₁₂또는 =NR₁₂이며,

R₁및 R₂가 독립적으로 -H, 지방족 기, 치환된 지방족 기, 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환되지 않은 아릴기 또는 치환된 아릴기이고, 단 R₁및 R₂는 동시에 -H가 아니거나, -NR₁R₂가 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 질소 함유 헤테로시클릭 기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 질소 함유 헤테로아릴기를 형성하며,

R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

X가 공유 결합, -C(R₄R₅)-, -N(R₄)-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-N(R₄)- 또는 -N(R₄)-C(=O)-이며,

R₄및 R₅가 독립적으로 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

R₁₂가 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이다.
제 1항에 있어서, 고리 A가 치환되거나 치환되지 않으며, Z₁및 Z₂가 모두 =O 이며, R₁이 -H이고, R₂가 치환되거나 치환되지 않은 알킬 또는 아릴기이며, R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기이고, X가 -C(R₄R₅)-, -N(R₄)- 또는 -O-임을 특징으로 하는 화합물.
제 2항에 있어서, R₂가 하기 화학식의 군으로부터 선택된 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 화합물:

상기 식에서,

고리 D-T가 치환되거나 치환되지 않는다.
제 3항에 있어서, 고리 D-T가 치환되지 않거나, 고리 D-T의 하나 이상의 고리 탄소 원자가 -OH, -Br, -C1, -I, -F, -OR^a, -O-COR^a, -COR^a, -CN, -NO₂, -COOH, -SO₃H, -NH₂, -NHR^a, -N(R^aR^b), -COOR^a, -CHO, -CONH₂, -CONHR^a, -CON(R^aR^b), -NHCOR^a, -NRCOR^a, -NHCONH₂, -NHCONR^aH, -NHCON(R^aR^b), -NR^cCONH₂, -NR^cCONR^aH, -NR^cCON(R^aR^b),-C(=NH)-NH₂, -C(=NH)-NHR^a, -C(=NH)-N(R^aR^b), -C(=NR^c)-NH₂, -C(=NR^c)-NHR^a, -C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NH-C(=NH)-NH₂, -NH-C(=NH)-NHR^a, -NH-C(=NH)-N(R^aR^b), -NH-C(=NR^c)-NH₂, -NH-C(=NR^c)-NHR^a, -NH-C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NR^dH-C(=NH)-NH₂, -NR^d-C(=NH)-NHR^a, -NR^d-C(=NH)-N(R^aR^b), -NR^d-C(=NR^c)-NH₂, -NR^d-C(=NR^C)-NHR^a, -NR^d-C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NHNH₂, -NHNHR^a, -NHR^aR^b, -SO₂NH₂, -SO₂NHR^a, -SO₂NR^aR^b, -CH=CHR^a, -CH=CR^aR^b, -CR^c=CR^aR^b, -CR^c=CHR^a, -CR^c=CR^aR^b, -CCR^a, -SH, -SR^a, -S(O)R^a, -S(0)₂R^a, 알킬기, 치환된 알킬기, 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 벤질기, 치환된 벤질기, 아릴기 또는 치환된 아릴기로부터 독립적으로 선택된 기로 치환되며, 여기에서 R^a-R^d는 각각 독립적으로 알킬기, 치환된 알킬기, 벤질, 치환된 벤질, 아릴 또는 치환된 아릴기이거나, 또는 -NR^aR^d가 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기를 형성할 수 있음을 특징으로 하는 화합물.
제 3항에 있어서, 고리 D-T가 치환되지 않거나, 고리 D-T의 하나 이상의 고리 탄소 원자가 C1-C4 알킬, C1-C4 히드록시알킬, N-모르폴리노, 피리미딜, C1-C4 알킬 치환된 피리미딜, -N(C1-C4 알킬)₂, -C(O)NH₂, -C(O)NH(C1-C4 알킬), -C(O)N(C1-C4 알킬)₂, -NHC(O)(C1-C4 알킬), -NO₂, C1-C4 알콕시, -C(O)O-CH₂CH₂-N(C1-C4 알킬)₂,, -NH-(페닐), -NH₂, -CH₂NH-C(O)-O-(C1-C4 알킬), -CH₂NH₂, -Cl, -F, -C(O)-O-(C1-C4 알킬), -C(O)-N-(C1-C4 알킬), C3-C7 시클로알킬, 페닐, -C(O)-N-모르폴리노, -S-(C1-C4 알킬), -CN, 푸릴, -S(O)₂-(C1-C4 알킬), -S(O)₂-NH₂, -S(O)₂-NH(C1-C4 알킬), -S(O)₂-N(C1-C4 알킬)₂로부터 독립적으로 선택된 기로 치환됨을 특징으로 하는 화합물.
제 5항에 있어서, R₂가 하기 화학식의 군으로부터 선택된 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 화합물:

상기 식에서,

R₆이 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이다.
제 5항에 있어서, R₂가 하기 화학식의 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 화합물:

상기 식에서,

X₃이 -CH- 또는 -N-이고,

R₇및 R₈이 독립적으로 -H 또는 알킬기이거나, -NR₇R₈이 함께 질소 함유 비방향족 헤테로시클릭 형성하며,

R₉는 알킬기이고,

R₁₀은 -H 또는 알킬기이다.
제 7항에 있어서, 고리 A가 -F, -Cl, -Br, -C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, -C1-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되거나 치환되지 않음을 특징으로 하는 화합물.
제 8항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않으며, R₃이 치환되지 않거나 -Br, -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -COOR^e, -N(R^e)₂, -CON(R^e)₂, -NR^eCOR^f, -NHCONH₂, -SO₂N(R^e)₂로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐기 또는 피리딜기이며, R₇및 R₈이 동시에 -H이고, R₉가 메틸이며, 각각의 R^e및 R^f가 독립적으로 -H, 알킬기 또는 치환된 알킬기임을 특징으로 하는 화합물.
제 9항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -NH₂, -CONH₂또는 -NHCOR^f로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐 고리임을 특징으로 하는 화합물.
제 10항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -CN, -F 또는 -Cl로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐 고리임을 특징으로 하는 화합물.
제 11항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -CH₂CH₃, -OCH₃, -CN, -F 또는 -Cl로 일치환된 페닐 고리이고, 페닐 고리 치환기가 파라 위치에 있음을 특징으로 하는 화합물.
제 4항에 있어서, R₂가 하기 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 화합물:
제 1항에 있어서, 화합물이 하기 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 화합물:

상기 식에서,

고리 A 및 V가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않고,

X는 -CH₂-, -CH(CH₃)-, -O-, -NH- 또는 -NCH₃-이며,

Z는 -O-, -S-, -NR-, -C=C-, -C=N-, -N=CH-, -N=N-이고,

R은 -H 또는 C1-C4 알킬이며,

R₁₀은 -H, 치환되지 않은 지방족 기 또는 치환된 지방족 기이다.
제 14항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않거나 -F,-Cl,-Br,-C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, -C1-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로 치환되고, 고리 V가 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN, -OCH₃로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되며, R₁₀이 -H, 메틸 또는 에틸임을 특징으로 하는 화합물.
제 15항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않고, 고리 V가 하나 이상의 R₁₁기로치환되고, 각각의 R₁₁이 독립적으로 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN임을 특징으로 하는 화합물.
하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,

고리 A 및 U가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않고,

R₁₀이 -H, 치환되지 않은 지방족 기 또는 치환된 지방족 기이다.
제 17항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않거나 -F, -Cl, -Br, -Cl-C4 알킬, Cl-C4 알콕시, -Cl-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로 치환되고, 고리 U가 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN, -OCH₃로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되고, R₁₀이 -H, 메틸 또는 에틸임을 특징으로 하는 화합물.
제 18항에 있어서, 고리 U가 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN 또는 -OCH₃로 일치환되고, 고리 U 치환기가 파라 위치에 있음을 특징으로 하는 화합물.
하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,

R₁₁이 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN이다.
하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 유효량을 개체에게 투여하는 것을 포함하여, 암에 걸린 개체를 치료하는 방법:

상기 식에서,

고리 A가 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴기에 융합되거나 융합되지 않고,

Z₁및 Z₂가 독립적으로 =O, =S, =N-OR₁₂또는 =NR₁₂이며,

R₁및 R₂가 독립적으로 -H, 지방족 기, 치환된 지방족 기, 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환되지 않은 아릴기 또는 치환된 아릴기이고, 단 R₁및 R₂가 동시에 -H가 아니거나, -NR₁R₂가 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 질소 함유 헤테로시클릭 기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 질소 함유 헤테로아릴기를 형성하며,

R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

X가 공유 결합, -C(R₄R₅)-, -N(R₄)-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-N(R₄)-, 또는 -N(R₄)-C(=O)-이며,

R₄및 R₅가 독립적으로 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

R₁₂는 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이다.
제 21항에 있어서, 고리 A가 치환되거나 치환되지 않으며, Z₁및 Z₂가 모두 =O이며, R₁이 -H이고, R₂가 치환되거나 치환되지 않은 알킬 또는 아릴기이며, R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기이고, X가 -C(R₄R₅)-, -N(R₄)- 또는 -O-임을 특징으로 하는 방법.
제 22항에 있어서, R₂가 하기 화학식의 군으로부터 선택된 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 방법:

상기 식에서,

고리 D-T가 치환되거나 치환되지 않는다.
제 23항에 있어서, 고리 D-T가 치환되지 않거나, 고리 D-T의 하나 이상의 고리 탄소 원자가 -OH, -Br, -C1, -I, -F, -OR^a, -O-COR^a, -COR^a, -CN, -NO₂, -COOH, -SO₃H, -NH₂, -NHR^a, -N(R^aR^b), -COOR^a, -CHO, -CONH₂, -CONHR^a, -CON(R^aR^b), -NHCOR^a, -NRCOR^a, -NHCONH₂, -NHCONR^aH, -NHCON(R^aR^b), -NR^cCONH₂, -NR^cCONR^aH, -NR^cCON(R^aR^b), -C(=NH)-NH₂, -C(=NH)-NHR^a, -C(=NH)-N(R^aR^b), -C(=NR^c)-NH₂, -C(=NR^c)-NHR^a, -C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NH-C(=NH)-NH₂, -NH-C(=NH)-NHR^a, -NH-C(=NH)-N(R^aR^b), -NH-C(=NR^c)-NH₂, -NH-C(=NR^c)-NHR^a, -NH-C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NR^dH-C(=NH)-NH₂, -NR^d-C(=NH)-NHR^a, -NR^d-C(=NH)-N(R^aR^b), -NR^d-C(=NR^c)-NH₂, -NR^d-C(=NR^C)-NHR^a, -NR^d-C(=NR^c)-N(R^aR^b), -NHNH₂, -NHNHR^a, -NHR^aR^b, -SO₂NH₂, -SO₂NHR^a, -SO₂NR^aR^b, -CH=CHR^a, -CH=CR^aR^b, -CR^c=CR^aR^b, -CR^c=CHR^a, -CR^c=CR^aR^b, -CCR^a, -SH, -SR^a, -S(O)R^a, -S(0)₂R^a, 알킬기, 치환된 알킬기, 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 벤질기, 치환된 벤질기, 아릴기 또는 치환된 아릴기로부터 독립적으로 선택된 기로 치환되고, 여기에서 R^a-R^d는 각각 독립적으로 알킬기, 치환된 알킬기, 벤질, 치환된 벤질, 아릴 또는 치환된 아릴기이거나, -NR^aR^d가 함께 치환되거나 치환되지않은 비방향족 헤테로시클릭 기를 형성할 수 있음을 특징으로 하는 방법.
제 23항에 있어서, 고리 D-T가 치환되지 않거나, 고리 D-T의 하나 이상의 고리 탄소 원자가 C1-C4 알킬, C1-C4 히드록시알킬, N-모르폴리노, 피리미딜, C1-C4 알킬 치환된 피리미딜, -NH(C1-C4)알킬, -N(C1-C4 알킬)₂, -C(O)NH₂, -C(O)NH(C1-C4 알킬), -C(O)N(C1-C4 알킬)₂, -NHC(O)(C1-C4 알킬), -NO₂, C1-C4 알콕시, -C(O)O-CH₂CH₂-NH(C1-C4 알킬), -C(O)O-CH₂CH₂-N(C1-C4)알킬₂,, -NH-(페닐), -NH₂, -CH₂NH-C(O)-0-(C1-C4 알킬), -CH₂NH₂, -Cl, -F, -C(O)-O-(C1-C4 알킬), -C(O)-NH-(C1-C4 알킬), C3-C7 시클로알킬, 페닐, -C(O)-N-모르폴리노, -S-(C1-C4 알킬), -CN, 푸릴, -S(O)₂-(C1-C4 알킬), -S(O)₂-NH₂, -S(O)₂-NH(C1-C4 알킬), -S(O)₂-N(C1-C4 알킬)₂로부터 선택된 기로 치환됨을 특징으로 하는 방법.
제 25항에 있어서, R₂가 하기 화학식의 군로부터 선택된 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 방법:

상기 식에서,

R₆이 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 알킬기이다.
제 26항에 있어서, R₂가 하기 화학식의 군으로부터 선택된 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 화합물:

상기 식에서,

X₃이 -CH- 또는 -N-이고,

R₇및 R₈이 독립적으로 -H 또는 알킬기이거나, -NR₇R₈이 함께 질소 함유 비방향족 헤테로시클릭 기를 형성하며,

R₉가 알킬기이고,

R₁₀이 -H 또는 알킬기이다.
제 27항에 있어서, 고리 A가 -F, -Cl, -Br, -C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, -C1-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되거나 치환되지 않음을 특징으로 하는 방법.
제 28항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않고, R₃이 -Br, -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -COOR^e, -N(R^e)₂, -CON(R^e)₂, -NR^eCOR^f, -NHCONH₂, -SO₂N(R^e)₂로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐기 또는 피리딜기이며, R₇및 R₈이 동시에 -H이고, R₉가 메틸이며, 각각의 R^e및 R^f가 독립적으로 -H, 알킬기 또는 치환된 알킬기임을 특징으로 하는 방법.
제 29항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -NH₂, -CONH₂또는 -NHCOR^f로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐 고리임을 특징으로 하는 방법.
제 30항에 있어서, R₃이, -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -CN, -F 또는 -Cl로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐 고리임을 특징으로 하는 방법.
제 30항에 있어서, R₃이 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -CN, -F 또는 -Cl로 일치환된 페닐 고리이고, 페닐 고리 치환기가 파라 위치에 있음을 특징으로 하는 방법.
제 21항에 있어서, 화합물이 다음 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 방법:

상기 식에서,

고리 A 및 V가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않고,

X가 -CH₂-, -CH(CH₃)-, -O-, -NH- 또는 -NCH₃-이며,

Z가 -O-, -S-, -NR-, -C=C-, -C=N-, -N=CH-, -N=N-이고,

R이 -H 또는 C1-C4 알킬이며,

R₁₀이 -H, 치환되지 않은 지방족 기 또는 치환된 지방족 기이다.
제 33항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않거나 -F, -Cl, -Br, -C1-C4 알킬,C1-C4 알콕시, -C1-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로 치환되고, 고리 U가 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN, -OCH₃로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되며, R₁₀이 -H, 메틸 또는 에틸임을 특징으로 하는 방법.
제 34항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않고, 고리 V가 하나 이상의 R₁₁기로 치환되고, 각각의 R₁₁이 독립적으로 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN임을 특징으로 하는 방법.
제 23항에 있어서, R₂가 하기 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 방법:
하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 개체에게 투여하는 것을 포함하여, 암에 걸린 개체를 치료하는 방법:

상기 식에서,

고리 A 및 U가 독립적으로 치환되거나 치환되지 않고,

R₁₀이 -H, 치환되지 않은 지방족 기 또는 치환된 지방족 기이다.
제 37항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않거나 -F, -Cl, -Br, -Cl-C4 알킬, Cl-C4 알콕시, -Cl-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되고, 고리 U가 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN, -OCH₃로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되고, R₁₀이 -H, 메틸 또는 에틸임을 특징으로 하는 방법.
제 38항에 있어서, 고리 U가 -CH₃, -CH₂CH₃, -F, -Cl, -CN, -OCH₃로 일치환되고, 고리 U 치환기가 파라 위치에 있음을 특징으로 하는 방법.
하기 화학식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 개체에게 투여하는 것을 포함하여, 암에 걸린 개체를 치료하는 방법:

상기 식에서,

R₁₁이 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN이다.
제 21항에 있어서, 암이 다중-약물(multi-drug) 내성임을 특징으로 하는 방법.
제 37항에 있어서, 암이 다중-약물 내성임을 특징으로 하는 방법.
제 40항에 있어서, 암이 다중-약물 내성임을 특징으로 하는 방법.
Cu^I염을 하기 화학식(Ib)로 표시되는 선구 화합물(precursor compound)과 반응시키는 것을 포함하여, 하기 화학식(Ia)로 표시되는 화합물의 제조 방법:

(Ia)

(Ib)

상기 식에서,

고리 A가 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴기에 융합되거나 융합되지 않고,

R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이고,

X가 공유 결합, -C(R₄R₅)-, -N(R₄)-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -C(=O)-, -C(=O)-N(R₄)- 또는 -N(R₄)-C(=O)-이며, 단 X가 -C(R₄R₅)-인 경우에는, R₃이 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기가 아니며,

R₄및 R₅는 독립적으로 -H, 또는 치환되거나 치환되지 않은 지방족 기이다.
제 44항에 있어서, Cu^I염이 CuI 또는 CuCl이고, Cu^I염과 선구 화합물이 3차 아민을 포함하는 용매중에서 반응함을 특징으로 하는 방법.
제 45항에 있어서, R₃이 치환되거나 치환되지 않은 아릴기이고, X가 -C(R₄R₅)-, -N(R₄)- 또는 -O-임을 특징으로 하는 방법.
제 46항에 있어서, R₃이 하기 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 방법:

상기 식에서,

고리 V가 치환되거나 치환되지 않고,

Z가 -O-, -S-, -NR-, -C=C-, -CH=N-, -N=CH-, -N=N-이며, 여기에서 R은 -H 또는 C1-C4 알킬이다.
제 47항에 있어서, 고리 A가 -F, -Cl, -Br, -Cl-C4 알킬, C1-C4 알콕시, -C1-C4 할로알킬, C1-C4 할로알콕시, -NH₂또는 -CN으로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되거나 치환되지 않음을 특징으로 하는 방법.
제 48항에 있어서, 고리 A가 치환되지 않고, R₃이, 치환되지 않거나 -Br, -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -COOR^e, -N(R^e)₂, -CON(R^e)₂, -NR^eCOR^f, -NHCONH₂, -SO₂N(R^e)₂로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐기 또는 피리딜기이며, R^e및 R^f가 독립적으로 -H, 알킬기 또는 치환된 알킬기임을 특징으로 하는 방법.
제 49항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -Cl, -F, -R^e, -OR^e, -CN, -NH₂, -CONH₂또는 -NHCOR^f로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐 고리임을 특징으로 하는 방법.
제 50항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -CN, -F 또는 -Cl로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐 고리임을 특징으로 하는 방법.
제 50항에 있어서, R₃이, 치환되지 않거나 -CH₂CH₃, -OCH₃, -CN, -F 또는 -Cl로 일치환된 페닐 고리이고, 페닐 고리 치환기가 파라 위치에 있음을 특징으로 하는 방법.
제 45항에 있어서, a) 화합물을 옥살릴 클로라이드와 반응시켜, 하기 화학식(IIa)로 표시되는 제 2 화합물을 형성하는 단계; 및

b) 제 2 화합물을 NHR₁R₂를 사용하여 아미드화시켜 하기 화학식(IIb)로 표시되는 제 3 화합물을 형성하는 단계를 추가로 포함함을 특징으로 하는 방법:

(IIa)

(IIb)

상기 식에서,

R₁및 R₂가 독립적으로 -H, 지방족 기, 치환된 지방족 기, 치환되지 않은 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환된 비방향족 헤테로시클릭 기, 치환되지 않은 아릴기 또는 치환된 아릴기이며, 단 R₁및 R₂가 동시에 -H가 아니거나, -NR₁R₂가 함께 치환되거나 치환되지 않은 비방향족 질소 함유 헤테로시클릭 기, 또는 치환되거나 치환되지 않은 질소 함유 헤테로아릴기를 형성한다.
제 53항에 있어서, -NR₁R₂가 하기 화학식으로 표시됨을 특징으로 하는 방법:
제 45항에 있어서, 선구 화합물이, 피리딘 출발 화합물과 알킨 출발 물질을 촉매량의 팔라듐^II염 및 Cu^I염의 존재하에서 반응시킴으로써 제조되고, 피리딘 출발 화합물이 화학식:으로 표시되고, 알킨 출발 물질이 화학식:으로 표시되며, R₂₀이 -Br 또는 -I임을 특징으로 하는 방법.
Cu^I염을 하기 화학식(IIIb)로 표시되는 선구 화합물과 반응시키는 것을 포함하여, 하기 화학식(IIIa)로 표시되는 생성 화합물의 제조 방법:

(IIIa)

(IIIb)

상기 식에서,

R₁₁이 -CH₃, -CH₂CH₃, -OCH₃, -F, -Cl 또는 -CN이다.