KR101541086B1 - 피롤로피리미딘 화합물 및 그 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 식 (I)로 표시되는, JAK 키나아제를 저해할 수 있는 피롤로피리미딘 화합물을 제공한다:

상기 식에서, R¹, R² 및 m은 본 발명의 명세서에 기재한 바와 같다. 또한, 본 발명은 상기 피롤로피리미딘 화합물을 함유하는 약학적 조성물 및 상기 피롤로피리미딘 화합물의 염증성 질환 및 암과 같은 장애 또는 질환 치료에의 용도를 제공한다.

Description

피롤로피리미딘 화합물 및 그 용도{PYRROLOPYRIMIDINE COMPOUNDS AND USES THEREOF}

본 발명은 약학 분야에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명은 특정 피롤로피리미딘 화합물, 상기 화합물을 함유하는 조성물 및 그 용도에 관한 것이다. 상기 피롤로피리미딘 화합물은 JAK 키나아제의 활성을 효과적으로 저해할 수 있다.

Janus kinase (JAK) 패밀리는 비수용체 티로신 키나아제(non-receptor tyrosine kinase)의 잘 알려진 패밀리 중 하나이다. JAK 패밀리는 사이토킨의 세포 표면 수용체에의 결합에 의해 활성화될 수 있다. 활성화된 Jak는 세포내 신호전달 연속반응(intracellular signaling cascade)을 개시시킬 수 있다. Jak 패밀리 및 신호 전달인자 및 전사 활성 인자(Signal Transducers and Activators of Transcription (STATs))는 광범위한 사이토킨의 신호 경로에 관련된다.

JAK/STAT 경로는 기도의 염증성 질환(inflammatory diseases of the respiratory tract), 다발성 경화증(multiple sclerosis), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 천식(asthma), 염증성 장질환(inflammatory bowel disease), 알레르기(allergies), 자가면역 질환(autoimmune diseases), 및 다른 면역 반응과 같은 염증성 질환에서 역할을 하는 것으로 나타났다. JAK/STAT 경로, 예를 들어 JAK3/STAT는 암에서도 역할을 할 수 있다.

Jak 패밀리의 저해제는 염증성 질환 또는 암의 치료 또는 예방을 위해 찾아지며, 알려져왔다.

단백질 티로신 키나아제의 Janus kinase (JAKs) 패밀리는 면역 반응에 관련된 세포의 증식 및 기능의 사이토킨 의존적 제어에 역할을 할 수 있다. 4개의 포유류 JAK 패밀리 멤버가 보고되었다: JAK1 (Janus kinase-1라고도 알려짐), JAK2 (Janus kinase-2라고도 알려짐), JAK3 (Janus kinase, leukocyte; JAKL; L-JAK 및 Janus kinase-3라고도 알려짐) 및 TYK2 (단백질-티로신 키나아제 2(protein-tyrosine kinase 2)라고도 알려짐). JAK 단백질은 크기가 120 내지 140 kDa 일 수 있으며 7개의 보존 JAK 상동 (JH) 도메인을 포함할 수 있다; 이들 중 하나는 기능적 촉매 키나아제 도메인일 수 있고, 다른 하나는 잠재적으로 제어 기능을 하는 및/또는 STAT의 도킹 사이트로서 역할을 하는 pseudokinase 도메인일 수 있다 (Scott, Godshall et al. Clin.Diagn.Lab.Immunol, 9 (6): 1153-1159, 2002). JAK1, JAK2 및 TYK2는 편재하여 발현될(ubiquitously expressed) 수 있는 반면, JAK3는 예를 들어 자연살해세포(natural killer (NK) cells)에서 발현되고, T 세포에서 휴지하지(rest) 않는 것으로 보고되는데, 이는 림프 활성화에서 역할을 시사한다 (Kawamura, M., D. W. McVicar, et al. "Molecular cloning of L-JAK, a Janus family protein-tyrosine kinase expressed in natural killer cells and activated leukocytes." Proc Natl Acad Sci USA 91(14): 6374-8, 1994).

JAK/STAT 경로는 천식 반응(asthmatic response), 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease), 기관지염(bronchitis), 및 하부 기도의 다른 관련 염증성 질환의 발병에 역할을 한다고 보고된다 ("JAK-STAT signaling in asthma." J Clin Invest 109(10): 1279-83, 2002). JAK/STAT 경로는 또한 홍채염(iritis), 포도막염(uveitis), 공막염(scleritis), 결막염(conjunctivitis)을 포함하되 이에 한정되지는 않는 눈의 염증성 질환/증상 뿐만 아니라 만성 알레르기 반응에 역할을 하는 것으로 알려져 왔다. 따라서, JAK 키나아제의 저해는 상기 질환의 치료에 유리한 역할을 할 수 있다.

또한, JAK 키나아제의 저해는 건선(psoriasis), 및 피부 감작(skin sensitization)과 같은 피부 면역 장애를 앓는 환자의 치료 효과를 가질 수 있다. 건선의 가장 흔한 형태인 심상성 건선(psoriasis vulgaris)에서, 활성화 T 림프구는 질병 및 그와 관련된 판상형 건선(psoriatic plaques)의 유지에 중요할 수 있다고 일반적으로 받아들여질 수 있다 (Gottlieb, A. B., et al, Nat Rev Drug Disc., 4:19-34, 2005). 판상형 건선은 백혈구 및 단핵백혈구를 포함하는 중요한 면역 침윤물(immune infiltrate)뿐만 아니라 증가된 케라티노사이트 증식을 갖는 복수의 상피층을 포함할 수 있다. 건선에서 면역 세포의 초기 활성화가 불분명한 매커니즘에 의해 발생할 수 있는 반면, 유지는 다양한 케모킨 및 성장 요소 뿐만 아니라 염증성 사이토킨의 개수에 의존적이라고 보고되고 있다 (JCI, 113:1664-1675, 2004). GM-CSF 및 IFNg 뿐만 아니라 인터류킨 -2, -4, -6, -7, -12, -15, -18, 및 -23을 포함하는, 상기 중 대부분이 Janus (JAK) 키나아제 (Adv Pharmacol . 47: 113-74, 2000)를 통하여 신호를 보낼 수 있다. 이와 같이, JAK 키나아제의 레벨에서 신호 전달을 차단하는 것은 건선 또는 피부의 다른 면역 장애를 앓는 환자에 치료 효과를 야기할 수 있다.

또한, JAK 키나아제의 레벨에서 신호 전달을 차단하는 것은 인간 암의 치료제 개발에 유망할 수 있다. 신호 전달자(signal transducer) gp130을 활성화할 수 있는 인터류킨 6 (IL-6) 패밀리의 사이토킨은 인간 다발성 골수종 (multiple myeloma(MM)) 세포에 주요 생존 및 성장 인자일 수 있다. gp130의 신호 전달은 JAK1, JAK2 및 TYK2 및 downstream effectors STAT3 및 마이토겐 활성화 단백질 키나아제 (mitogen-activated protein kinase (MAPK)) 경로를 포함하는 것으로 여겨진다. JAK2 저해제 티르포스틴 AG490으로 처리된 IL-6-의존적 MM 세포주에서, JAK2 키나아제 활성 및 ERK2 및 STAT3 인산화(phosphorylation)는 저해될 수 있다. 더욱이, 세포 증식은 억제될 수 있고 아포토시스(apoptosis)는 유도될 수 있다 (De Vos, J., M. Jourdan, et al.. "JAK2 tyrosine kinase inhibitor tyrphostin AG490 downregulates the mitogen-activated protein kinase (MAPK) and signal transducer and activator of transcription (STAT) pathways and induces apoptosis in myeloma cells." Br J Haematol 109(4): 823-8, 2000). 그러나, 어떤 경우에는, AG490는 종양 세포의 휴지(dormancy)를 유도할 수 있고, 종양 세포를 죽음으로부터 보호할 수 있다.

JAK2 티로신 키나아제의 저해가 골수증식성 질환(myeloproliferative disorder) 환자에 이로울 수 있다고 제안되어 왔다 (Levin, et al., Cancer Cell, vol. 7: 387-397, 2005). 골수증식성 질환(MPD)은 진성다혈구증(polycythemia vera (PV)), 본태성 혈소판 증가증 (essential thrombocythemia (ET)), 골수섬유증을 동반한 골수화생(myeloid metaplasia with myelofibrosis (MMM)), 만성 골수성 백혈병(chronic myelogenous leukemia (CML)), 만성골수단구성백혈병(chronic myelomonocytic leukemia (CMML)), 과호산구증후군(hypereosinophilic syndrome (HES)), 및 전신성 비만세포병(systemic mast cell disease (SMCD))을 포함할 수 있다. 골수증식성질환 (예를 들어 PV, ET 및 MMM)이 조혈 선조(hematopoietic progenitors)에서 획득 체세포 돌연변이에 의해 야기된다고 여겨지지만, 이러한 질병의 유전적 근거는 알려지지 않았다. 그러나, PV를 앓는 환자 대부분 및 ET 및 MMM을 앓는 환자의 상당수의 조혈세포는 JAK2 티로신 키나아제에서 재발성 체세포 활성화 돌연변이를 가진 것으로 보고되었다. 또한, 저분자 저해제를 이용한 JAK2V617F 키나아제의 저해는 조혈세포의 증식의 저해를 야기한다고 보고되며, 이는 JAK2 티로신 키나아제가 PV, ET 및 MMM를 앓는 환자의 약리학적 억제의 잠재적 목표일 수 있다는 것을 시사한다.

본 발명은 하기 화학식 (I)로 표시되는 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

.

상기 식에서, R¹ 은 수소, 알킬, 시클로알킬 및 헤테로사이클로부터 선택되고,

R² 는 아릴, 헤테로사이클, 헤테로아릴, -C(O)NR^cR^d, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d, 로부터 선택되며,

또는 R¹ 및 R² 는, 그들이 부착되는 N 원자와 함께, 선택적으로 한개 또는 두개의 추가적인 헤테로원자를 포함하고 선택적으로 치환된 헤테로아릴 또는 선택적으로 치환된 아릴 고리로 선택적으로 더 축합되는(fused) 선택적으로 치환된 3- 내지 7-원 고리를 형성하고;

R¹ 및 R² 에서 상기 각 알킬, 아릴, 시클로알킬, 헤테로사이클, 헤테로아릴은 선택적으로 치환된 저급(lower) 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;

m 및 n 은 독립적으로 0, 1, 및 2로부터 선택되고;

각각의 경우에, R^a, R^b, R^c, R^d, R^e 및 R^f 은 각각 독립적으로 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로사이클로부터 선택되고,

또는 R^c 및 R^d은 그들이 부착되는 질소와 함께 결합하여, 할로, 저급 알킬, 히드록시, 및 저급 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 헤테로사이클 고리를 형성하며, 상기 헤테로사이클 고리는 N, O 및 S로부터 선택되는 1 또는 2개의 추가적인 헤테로원자를 선택적으로 더 포함하고;

여기서 상기 각 선택적으로 치환된 기는 치환되지 않거나, C₁-C₄ 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로사이클, 헤테로아릴, 아릴-C₁-C₄ 알킬-, 헤테로아릴-C₁-C₄ 알킬-, C₁-C₄ 할로알킬-, -OC₁-C₄ 알킬, -OC₁-C₄ 알킬페닐, -C₁-C₄ 알킬-OH, -C₁-C₄ 알킬-O-C₁-C₄ 알킬, -OC₁-C₄ 할로알킬, 할로, -OH, -NH₂, -C₁-C₄ 알킬-NH₂, -N(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬), -NH(C₁-C₄ 알킬), -N(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬페닐), -NH(C₁-C₄ 알킬페닐), 시아노, 니트로, 옥소, -CO₂H, -C(O)OC₁-C₄ 알킬, -CON(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬), -CONH(C₁-C₄ 알킬), -CONH₂, -NHC(O)(C₁-C₄ 알킬), -NHC(O)(페닐), -N(C₁-C₄ 알킬)C(O)(C₁-C₄ 알킬), -N(C₁-C₄ 알킬)C(O)(페닐), -C(O)C₁-C₄ 알킬, -C(O)C₁-C₄ 페닐, -C(O)C₁-C₄ 할로알킬, -OC(O)C₁-C₄ 알킬, -SO₂(C₁-C₄ 알킬), -SO₂(페닐), -SO₂(C₁-C₄ 할로알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C₁-C₄ 알킬), -SO₂NH(페닐), -NHSO₂(C₁-C₄ 알킬), -NHSO₂(페닐), 및 -NHSO₂(C₁-C₄ 할로알킬)로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의, 예를 들어 1, 2, 또는 3개의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있으며, 여기서 각 페닐, 아릴, 헤테로사이클, 및 헤테로아릴은 할로, 시클로알킬, 헤테로사이클, C₁-C₄ 알킬, C₁-C₄ 할로알킬-, -OC₁-C₄ 알킬, C₁-C₄ 알킬-OH, -C₁-C₄ 알킬-O-C₁-C₄ 알킬, -OC₁-C₄ 할로알킬, 시아노, 니트로, -NH₂, -CO₂H, -C(O)OC₁-C₄ 알킬, -CON(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬), -CONH(C₁-C₄ 알킬), -CONH₂, -NHC(O)(C₁-C₄ 알킬), -N(C₁-C₄ 알킬)C(O)(C₁-C₄ 알킬), -SO₂(C₁-C₄ 알킬), -SO₂(페닐), -SO₂(C₁-C₄ 할로알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C₁-C₄ 알킬), -SO₂NH(페닐), -NHSO₂(C₁-C₄ 알킬), -NHSO₂(페닐), 및 -NHSO₂(C₁-C₄ 할로알킬)로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된다.

또한, 본 발명은 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 유효량을 적어도 하나의 키나아제에 접촉시키는 단계를 포함하는, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성을 저해하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 유효량을, 치료를 필요로하는 대상에 투여하는 단계를 포함하는, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 저해에 반응하는 염증성 질환의 치료 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 유효량을 치료를 필요로 하는 대상에 투여하는 단계를 포함하는, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 저해에 반응하는 암의 치료 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 본 명세서에 기재되는 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 저해에 반응하는 염증성 질환 또는 암 치료용 약제(medication)의 제조에의 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 저해에 반응하는 염증성 질환 또는 암을 치료하기 위한 약제 또는 약학적 조성물을 제공한다. 상기 약제 또는 약학적 조성물은 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다.

본 명세서에서 사용되는 하기의 단어, 문구 및 기호는 문맥에서 별도의 언급이 있는 경우를 제외하고, 일반적으로 하기에 설명한 의미를 갖는 것으로 의도된다. 하기 약자 및 용어는 하기에 언급된 의미를 갖는다:

대쉬 ("-")는 두 글자 또는 기호 사이에 사용하는 것이 아니고, 치환기의 부착 지점을 가리키기 위해 사용된다. 예를 들어, -CONH₂는 탄소 원자를 통해 부착된다.

용어 "알킬"은 1-6 탄소 원자, 1-4 탄소 원자와 같은 1-10 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄(straight or branched) 탄화수소를 가리킨다. 알킬기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, 및 t-부틸을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다. "저급 알킬(lower alkyl)"은 1-4 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 가리킨다.

용어 "알콕시"는 예를 들어 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, sec-부톡시, tert-부톡시, 펜톡시, 2-펜틸옥시, 이소펜톡시, 네오펜톡시, 헥속시, 2-헥속시, 3-헥속시, 3-메틸펜톡시 등과 같은 산소 가교를 통해 부착되는 언급된 수의 탄소 원자의 직쇄 또는 분지쇄 알킬기를 의미한다. 알콕시기는 보통 산소 가교를 통하여 부착된 1 내지 6개의 탄소 원자를 가질 것이다. "저급 알콕시"는 알킬부가 1-4개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 알콕시를 가리킨다.

용어 "알케닐"은 하나 이상의 C=C 이중 결합을 갖는 C_{2 -10} 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 가리킨다. 예를 들어, "알케닐"은 C_{2 -6} 알케닐을 가리킨다. 알케닐기의 예는 비닐, 2-프로페닐, 및 2-부테닐을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.

용어 "알키닐"은 하나 이상의 C≡C 삼중 결합을 갖는 C_{2 -10} 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 가리킨다. 추가 예로는, 알키닐은 C_{2 -6} 알키닐을 가리킨다. 알키닐기의 예는 에티닐, 2-프로피닐, 및 2-부티닐을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.

용어 "시클로알킬"은 예를 들어 3 내지 8개의 탄소를 갖는 포화 및 부분 불포화 일환식, 이환식 또는 삼환식 탄화수소 고리를 가리킨다. 시클로알킬기의 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로펜테닐, 시클로헥실, 시클로헥세닐, 시클로헵틸, 및 시클로옥틸을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다. 상기 고리는 본 명세서에서 정의된 대로, 포화될 수 있거나 하나 이상의 이중 결합을 가질 수 있으나 (즉, 부분적으로 불포화될 수 있다), 완전히 공액(conjugated)이 아니고, 방향족이 아니다.

"아릴"은 5- 및 6-원 탄소환 방향족 고리, 예를 들어 벤젠;

적어도 하나의 고리가 탄소환이고 방향족인 이환식 고리 시스템, 예를 들어 나프탈렌, 인단, 및 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀린; 및

적어도 하나의 고리가 탄소환이고 방향족인 삼환식 고리 시스템, 예를 들어 플루오렌을 포함한다.

예를 들어, 아릴은 부착 지점이 탄소환 방향족 고리인 경우, N, O, 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5- 내지 7-원 헤테로사이클릭 고리로 축합된 5- 및 6-원 탄소환 방향족 고리를 포함한다. 치환된 벤젠 유도체로부터 형성되고 고리 원자에서 자유 원자가를 갖는 2가 라디칼은 치환된 페닐렌 라디칼이라고 부른다. 자유 원자가를 갖는 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 이름이 "-일"로 끝나는 1가 다환식 탄화수소 라디칼로부터 유도되는 2가 라디칼은 당해 1가 라디칼의 이름에 "-이딘"을 붙여서 부른다. 예를 들어, 두개의 부착 지점을 갖는 나프틸기는 나프틸리딘이라고 부른다. 그러나, 아릴은 어떤 경우에도 하기에 별도로 설명한 헤테로아릴을 포함하거나 이와 겹치지 않는다. 따라서, 본 명세서에서 정의한 바와 같이, 하나 이상의 탄소환 방향족 고리가 헤테로사이클릭 방향족 고리와 축합되면, 그 결과 생성되는 고리 시스템은 아릴이 아니라 헤테로아릴이다.

용어 "할로"는 플루오로, 클로로, 브로모, 및 요오드를 포함하고, 용어 "할로겐"은 플루오린, 클로린, 브로민 및 이오딘을 포함한다.

용어 "헤테로아릴"은 N, O, 및 S로부터 선택되는 예를 들어 1 내지 4, 또는 일부 구현예에서는 1 내지 3의 헤테로 원자를 포함하는, 나머지 고리 원자는 탄소인 5- 내지 8-원 방향족, 일환식 고리;

N, O, 및 S로부터 선택되는 예를 들어 1 내지 6, 또는 일부 구현예에서는 1 내지 4, 또는 일부 구현예에서는 1 내지 3의 헤테로원자를 포함하는, 나머지 고리 원자는 탄소이고 적어도 하나의 헤테로원자는 방향족 고리에 존재하는 8- 내지 12-원 이환식 고리; 및

N, O, 및 S로부터 선택되는 예를 들어 1 내지 6, 또는 일부 구현예에서는 1 내지 4, 또는 일부 구현예에서는 1 내지 3 헤테로원자를 포함하는, 나머지 고리 원자는 탄소이고 적어도 하나의 헤테로원자는 방향족 고리에 존재하는 11- 내지 14-원 삼환식 고리를 가리킨다.

예를 들어, 헤테로아릴은 5- 내지 7-원 시클로알킬 고리에 축합된 5- 내지 7-원 헤테로사이클릭 방향족 고리를 포함한다. 고리 중 오직 하나만이 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 이러한 축합된, 이환식 헤테로아릴 고리 시스템은 부착 지점이 헤테로방향족 고리에 있을 수 있다.

헤테로아릴기에서 S 및 O 원자의 총 개수가 1을 초과할 때, 헤테로원자는 서로에 인접하지 않는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴기에서 S 및 O 원자의 총 개수는 2룰 넘지 않는다. 일부 구현예에서, 방향족 헤테로사이클에서 S 및 O 원자의 총 개수는 1을 넘지 않는다.

헤테로아릴기의 예는 (우선순위 1이 부여된 링키지 위치로부터 번호매김), 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2,3-피라지닐, 3,4-피라지닐, 2,4-피리미디닐, 3,5-피리미디닐, 1-피라졸릴, 2,3-피라졸릴, 2,4-이미다졸리닐, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 테트라졸릴, 티에닐, 벤조티에닐, 푸릴, 벤조푸릴, 벤조이미다졸리닐, 인돌리닐, 피리디지닐, 트리아졸릴, 퀴놀리닐, 피라졸릴, 및 5,6,7,8-테트라히드로이소퀴놀린을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.

자유 원자가를 갖는 탄소로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 이름이 "-일"로 끝나는 1가 헤테로아릴 라디칼로부터 유도되는 2가 라디칼은 당해 1가 라디칼의 이름에 "-이딘"을 붙여서 부른다. 예를 들어, 2개의 부착 지점을 갖는 피리딜기는 피리딜리딘이라고 부른다. 헤테로아릴은 상술하였듯이 아릴을 포함하거나 아릴과 겹치지 않는다.

치환된 헤테로아릴은 또한 피리디닐 N-옥사이드와 같은 하나 이상의 옥사이드(-O^-)로 치환된 고리 시스템을 포함한다.

용어 "헤테로사이클"은 산소, 황 및 질소로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 헤테로원자 뿐만 아니라 적어도 2개의 탄소 원자를 함유하는 4- 내지 12-원 일환식, 이환식 또는 삼환식 포화 또는 부분 불포화 고리이다. 또한, "헤테로사이클"은 부착 지점이 헤테로사이클릭 고리에서일 경우 5- 및 6-가 방향족 고리로 축합된 N, O, 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5- 내지 7-원 헤테로사이클릭 고리를 가리킨다. 상기 고리는 포화되거나 하나 이상의 이중 결합을 가질 수 있다 (즉, 부분 불포화일 수 있다). 헤테로사이클은 옥소에 의해 치환될 수 있다. 부착 지점은 헤테로사이클릭 고리에서 탄소 또는 헤테로원자일 수 있다. 헤테로사이클은 본 명세서에서 정의되었듯이 헤테로아릴이 아니다.

적절한 헤테로사이클은 예를 들어 (우선순위 1이 부여된 링키지 위치로부터 번호매김), 1-피롤리디닐, 2-피롤리디닐, 2,4-이미다졸리디닐, 2,3-피라졸리디닐, 1-피페리디닐, 2-피페리디닐, 3-피페리디닐, 4-피페리디닐, 및 2,5-피페라지닐을 포함한다. 2-모르폴리닐 및 3-모르폴리닐(산소가 우선순위 1을 부여받아 번호매김)을 포함하는 모르폴리닐기 또한 고려된다. 치환된 헤테로사이클은 또한 피페리디닐 N-옥사이드, 모르폴리닐-N-옥사이드, 1-옥소-1-티오모르폴리닐 및 1,1-디옥소-1-티오모르폴리닐과 같은 하나 이상의 옥소 잔기로 치환된 고리 시스템을 포함한다.

용어 "선택적" 또는 "선택적으로"는 뒤에 설명되는 사건 또는 상황이 발생할 수도 있고 발생하지 않을 수도 있고, 그 설명이 상기 사건 또는 상황이 발생하는 경우 및 발생하지 않는 경우를 포함한다는 것이다. 예를 들어, "선택적으로 치환된 알킬"은 "알킬" 및 "치환된 알킬"을 포함한다. 하나 이상의 치환기를 포함하는 기에 있어서, 통상의 기술자는 이러한 기가 입체적으로 비현실적인, 합성적으로 실현 불가능한 및/또는 본질적으로 불안정한 치환 또는 치환 패턴을 도입하는 것으로 의도되지 않는다는 것을 알 것이다.

용어 "치환된"은 지정된 원자의 정상 원자가가 초과되지 않을 경우에, 지정된 원자 또는 기 상의 하나 이상의 수소가 언급된 기로부터 선택된 것으로 치환된 것을 의미한다. 치환기가 옥소(즉=O)일 때 원자 상의 2개의 수소가 치환된다. 치환기 및/또는 변수의 결합은 이러한 결합이 안정적인 화합물 또는 유용한 합성 중간체를 야기할 경우에만 허용된다. 안정적인 화합물 또는 안정적인 구조는 적어도 실용적 유용성을 갖는 제제로서 반응 혼합물, 및 그 후의 제제로부터의 고립을 견딜 수 있을 정도로 충분히 강건한 화합물을 의미한다. 달리 언급되지 않는다면, 치환기는 코어 구조로 명명한다. 예를 들어, (시클로알킬)알킬이 가능한 치환기라고 나와있으면, 이 치환기의 코어구조에의 부착 지점은 알킬부에 있다는 것을 의미한다.

일부 구현예에서, "하나 이상의 기로 치환된"은 언급된 치환기의 그룹으로부터 선택된 2개의 치환기로 독립적으로 치환되는 지정 원자 또는 기 상의 두 수소를 가리킨다. 일부 구현예에서, "하나 이상의 기로 치환된"은 언급된 치환기의 그룹으로부터 선택된 3개의 치환기로 독립적으로 치환된 지정된 원자 또는 그룹 상에 3개의 수소를 가리킨다. 일부 구현예에서, "하나 이상의 기로 치환된"은 언급된 치환기의 그룹으로부터 선택된 4개의 치환기로 독립적으로 치환된 지정된 원자 또는 그룹 상의 4개의 수소를 가리킨다.

본 명세서에 기재되는 화합물은 가능하다면 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 기술을 가진 자가 통상적 실험으로 만들 수 있는 정도인 그의 광학 이성질체, 예를 들어 그의 거울상이성질체 및 부분입체이성질체, 라세미체, 부분입체이성질체의 혼합물 및 그 다른 혼합물을 포함하는 거울상이성질체의 혼합물을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다. 상기 상황에서, 단일 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체, 즉 광학적으로 활성인 형태가 비대칭 합성 또는 부분입체이성질체의 혼합물 또는 라세미체의 분할에 의해 수득될 수 있다. 부분입체이성질체의 혼합물 또는 라세미체의 분할은 가능하다면 예를 들어 분할제의 존재 하의 결정화 또는 예를 들어 키랄 고압 액체 크로마토그래피(HPLC) 칼럼을 이용한 크로마토그래피와 같은 종래의 방법에 의해 달성될 수 있다. 또한, 이러한 화합물은 탄소-탄소 이중결합을 갖는 화합물의 Z- 및 E- 형태 (또는 cis- 및 trans- 형태)를 포함한다. 본 명세서에 기재된 화합물이 다양한 호변이 형(tautomeric form)으로 존재할 때, 용어 "화합물"은 과도한 실험을 하지 않고 만들 수 있는 정도의 모든 화합물의 호변이형을 포함하는 것으로 의도된다. 이러한 화합물은 또한 통상의 기술자가 과도한 실험을 하지 않고 만들 수 있는 정도의 다형체 및 포접체를 포함하는 결정체 형태를 포함한다. 비슷하게, 용어 "염"은 통상의 기술자가 과도한 실험을 하지 않고 만들 수 있는 정도의 화합물의 염의 모든 이성질체, 라세미체, 다른 혼합물, Z- 및 E-형, 호변이 형 및 결정체 형태를 포함하는 것으로 의도된다.

"약학적으로 허용가능한 염"은 하이드로클로레이트, 포스페이트, 디포스페이트, 하이드로브로메이트, 설페이트, 술피네이트, 니트레이트 및 유사염(like salts)과 같은 무기산을 갖는 염 뿐만 아니라 말레이트, 말레에이트, 푸마레이트, 타트레이트, 숙시네이트, 시트레이트, 아세테이트, 락테이트, 메탄술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 2-하이드록시에틸술포네이트, 벤조에이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 및 아세테이트, n이 0-4인 HOOC-(CH₂)_n-COOH와 같은 알카노에이트 및 유사염과 같은 유기산을 갖는 염을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다. 비슷하게, 약학적으로 허용가능한 양이온은 소듐, 포타슘, 칼슘, 알루미늄, 리튬 및 암모늄을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.

또한, 본 명세서에 기재한 화합물이 산부가염으로 수득된다면, 유리염기는 산성염 용액을 염기성화함으로써 수득될 수 있다. 반대로, 산물이 유리염기이면, 부가염, 특히 약학적으로 허용가능한 부가염을 염기 화합물로부터 산부가염을 제조하는 종래의 방법에 따라, 적절한 유기 용매에서 유리염기를 용해시키고, 용액을 산으로 처리함으로써 수득할 수 있다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 무독성의 약학적으로 허용가능한 부가염을 제조하는 데 사용될 수 있는 다양한 합성 방법을 과도한 실험 없이 알 것이다.

"수화물"과 같은 "용매 화합물(solvate)"은 용매와 화합물의 상호작용에 의해 형성된다. 용어 "화합물"은 통상의 기술자가 통상의 실험으로 만들 수 있는 정도의 화합물의 수화물을 포함하는 용매 화합물을 포함하는 것으로 의도된다. 비슷하게, "염"은 통상의 기술자가 통상의 실험으로 만들 수 있는 정도의 염의 수화물과 같은 용매 화합물을 포함한다. 적절한 용매 화합물은 통상의 기술자가 통상의 실험으로 만들 수 있는 정도의 일수화물 및 반수화물을 포함하는 수화물과 같은 약학적으로 허용가능한 용해 화합물이다.

"킬레이트"는 화합물을 2(또는 그 이상) 포인트에서 금속 이온에 배위함으로써 형성된다. 용어 "화합물"은 화합물의 킬레이트를 포함하는 것으로 의도된다. 비슷하게, "염"은 염의 킬레이트를 포함한다.

"비 공유결합 복합체(non-covalent complex)"는 화합물 및 또 다른 분자의 상호작용에 의해 형성된다. 여기서, 공유결합은 화합물과 분자 간에 형성되지 않는다. 예를 들어, 복합화는 van der Waals 상호작용, 수소 결합 및 정전기 상호작용 (이온 결합이라고도 함) 을 통하여 발생할 수 있다. 이러한 비 공유결합 복합체는 용어 "화합물"에 포함된다.

용어 "수소 결합"은 음전기 원자(수소 결합 수용체라고도 알려짐)와 두번째의 상대적으로 음전기인 원자에 부착된 수소 원자(수소 결합 공여체라고도 함) 사이의 연관의 형태를 가리킨다. 적절한 수소 결합 공여체 및 수용체는 의약화학분야에 잘 알려져있다 (G. C. Pimentel and A. L. McClellan, The Hydrogen Bond, Freeman, San Francisco, 1960; R. Taylor and O. Kennard, "Hydrogen Bond Geometry in Organic Crystals", Accounts of Chemical Research, 17, pp. 320-326 (1984)).

본 명세서에서 사용되는 용어 "기(group)", "라디칼" 또는 "단편(fragment)"은 동의어이며 결합 또는 분자의 다른 단편에 부착가능한 분자의 단편 또는 작용기를 가리키는 것으로 의도된다.

용어 "활성제"는 생물학적 활성을 갖는 화학물질을 가리키는 데 사용된다. 일부 구현예에서, "활성제"는 약제학적 유용성을 갖는 화학물질이다.

"치료하는" 또는 "치료" 또는 "경감"은 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 질병 또는 장애를 갖는, 또는 질병 또는 장애의 증상을 갖는, 또는 질병 또는 장애에 대한 소인을 갖는 대상에 질병 또는 장애, 질병 또는 장애의 증상, 또는 질병 또는 장애에 대한 소인을 고치고, 치료하고, 경감하고, 완화하고, 바꾸고, 개선하거나 영향을 미치는 것을 목적으로 투여하는 것을 가리킨다. 일부 구현예에서, 상기 질병 또는 장애는 암일 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 질병 또는 장애는 염증성 질환일 수 있다.

용어 "유효량"은 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염이 대상의 질병 또는 장애를 "치료"하는 데 유효한 양을 말한다. 유효량은 상기 "치료하는", "치료" 및 "경감"의 정의에 설명되었듯이 대상에 관찰할 수 있는 또는 측정할 수 있는 변화를 야기할 수 있다. 예를 들어, 암의 경우, 유효량은 암세포 또는 종양세포의 수를 줄일 수 있다; 종양 크기를 줄일 수 있다; 말초 기관으로의 종양세포의 침입, 예를 들어 종양이 연조직 및 뼈로 퍼지는 것을 억제하거나 멈출 수 있다; 종양 전이를 억제하거나 멈출 수 있다; 종양 성장을 억제하거나 멈출 수 있다; 암과 관련된 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화할 수 있다; 사망률을 낮출 수 있다; 삶의 질을 높일 수 있다; 또는 상기 효과의 복합일 수 있다. 유효량은 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 저해에 반응하는 질병의 증상을 감소시키는 데 충분한 양일 수 있다. 암 치료는, 예를 들어 인 비보 효능이 생존 기간, 질병 진행까지의 시간(TTP), 반응률(RR), 반응 기간 및/또는 삶의 질을 평가함으로써 측정될 수 있다. 유효량은 통상의 기술자가 알 수 있듯이, 투여 경로, 부형제 사용, 및 다른 제제와의 공동 사용에 따라 달라질 수 있다. 유효량은 또한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학적 조성물이 규제 요건, 예를 들어 SFDA, USFDA, 또는 유럽 승인을 만족시켜, 상술한 인간 환자의 질병 또는 장애를 치료하기에 충분한 양일 수 있다. 또한, 유효량은 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학적 조성물이 랜덤화된 이중 블라인드 임상 실험에 의해 효능을 보여 상술하였듯이 인간의 질병 또는 장애를 "치료하기"에 충분한 양일 수 있다.

용어 "유효량"은 또한 JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성을 저해하기에 효과적인 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 양을 가리킬 수 있다.

용어 "저해(inhibition)"는 생물학적 활성 또는 공정의 기준치 활성의 감소를 가리킨다. "JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 저해"는 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염이 없을 때의 JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성에 비한, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 존재 하에 직접 또는 간접 반응으로서 JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성의 감소를 가리킨다. 활성의 감소는 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의, JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제와의 직접적 상호작용에 의한 것이거나, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의, 적어도 하나의 키나아제의 활성에 영향을 미칠 하나 이상의 다른 인자와의 상호작용에 의한 것일 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 존재는 적어도 하나의 키나아제에 직접 결합함으로써, 또 다른 인자가 (직접적으로 또는 간접적으로) 적어도 하나의 키나아제의 활성을 감소하게 함으로써, 또는 세포 또는 유기체 내에 존재하는 적어도 하나의 키나아제의 양을 (직접적으로 또는 간접적으로) 감소시킴으로써 적어도 하나의 키나아제의 활성을 감소시킬 수 있다.

본 발명은 하기 식 (I)

로 표시되는 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

상기 식에서, R¹ 은 수소, 알킬, 시클로알킬 및 헤테로사이클로부터 선택되고,

R² 는 아릴, 헤테로사이클, 헤테로아릴, -C(O)NR^cR^d, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d 로부터 선택되며,

또는 R¹ 및 R² 는, 그들이 부착되는 N 원자와 함께, 선택적으로 한개 또는 두개의 추가적인 헤테로원자를 포함하고 선택적으로 치환된 헤테로아릴 또는 선택적으로 치환된 아릴 고리로 선택적으로 더 축합되는 선택적으로 치환된 3- 내지 7-원 고리를 형성하고;

R¹ 및 R² 에서 상기 각 알킬, 아릴, 시클로알킬, 헤테로사이클, 헤테로아릴은 선택적으로 치환된 저급 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;

m 및 n 은 독립적으로 0, 1, 및 2로부터 선택되고;

각각의 경우에, R^a, R^b, R^c, R^d, R^e 및 R^f 는 각각 독립적으로 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로사이클로부터 선택되고,

또는 R^c 및 R^d는 그들이 부착되는 질소와 함께 결합하여, 할로, 저급 알킬, 히드록시, 및 저급 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 헤테로사이클 고리를 형성하고, 상기 헤테로사이클 고리는 N, O 및 S로부터 선택되는 1 또는 2개의 추가적인 헤테로원자를 선택적으로 더 포함하며;

여기서 상기 각 선택적으로 치환된 기는 치환되지 않거나, 또는 C₁-C₄ 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로사이클, 헤테로아릴, 아릴-C₁-C₄ 알킬-, 헤테로아릴-C₁-C₄ 알킬-, C₁-C₄ 할로알킬-, -OC₁-C₄ 알킬, -OC₁-C₄ 알킬페닐, -C₁-C₄ 알킬-OH, -C₁-C₄ 알킬-O-C₁-C₄ 알킬, -OC₁-C₄ 할로알킬, 할로, -OH, -NH₂, -C₁-C₄ 알킬-NH₂, -N(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬), -NH(C₁-C₄ 알킬), -N(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬페닐), -NH(C₁-C₄ 알킬페닐), 시아노, 니트로, 옥소, -CO₂H, -C(O)OC₁-C₄ 알킬, -CON(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬), -CONH(C₁-C₄ 알킬), -CONH₂, -NHC(O)(C₁-C₄ 알킬), -NHC(O)(페닐), -N(C₁-C₄ 알킬)C(O)(C₁-C₄ 알킬), -N(C₁-C₄ 알킬)C(O)(페닐), -C(O)C₁-C₄ 알킬, -C(O)C₁-C₄ 페닐, -C(O)C₁-C₄ 할로알킬, -OC(O)C₁-C₄ 알킬, -SO₂(C₁-C₄ 알킬), -SO₂(페닐), -SO₂(C₁-C₄ 할로알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C₁-C₄ 알킬), -SO₂NH(페닐), -NHSO₂(C₁-C₄ 알킬), -NHSO₂(페닐), 및 -NHSO₂(C₁-C₄ 할로알킬)로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의, 예를 들어 1, 2, 또는 3개의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있으며, 여기서 각 페닐, 아릴, 헤테로사이클, 및 헤테로아릴은 할로, 시클로알킬, 헤테로사이클, C₁-C₄ 알킬, C₁-C₄ 할로알킬-, -OC₁-C₄ 알킬, C₁-C₄ 알킬-OH, -C₁-C₄ 알킬-O-C₁-C₄ 알킬, -OC₁-C₄ 할로알킬, 시아노, 니트로, -NH₂, -CO₂H, -C(O)OC₁-C₄ 알킬, -CON(C₁-C₄ 알킬)(C₁-C₄ 알킬), -CONH(C₁-C₄ 알킬), -CONH₂, -NHC(O)(C₁-C₄ 알킬), -N(C₁-C₄ 알킬)C(O)(C₁-C₄ 알킬), -SO₂(C₁-C₄ 알킬), -SO₂(페닐), -SO₂(C₁-C₄ 할로알킬), -SO₂NH₂, -SO₂NH(C₁-C₄ 알킬), -SO₂NH(페닐), -NHSO₂(C₁-C₄ 알킬), -NHSO₂(페닐), 및 -NHSO₂(C₁-C₄ 할로알킬)로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된다.

일부 구현예에서, m은 1이다.

일부 구현예에서, R¹ 은 선택적으로 치환된 저급 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 알킬 및 시클로알킬로부터 선택된다.

일부 구현예에서, R¹ 은 알케닐, 알키닐 또는 시클로알킬로 선택적으로 치환된 알킬이다.

일부 구현예에서, R¹ 은 시클로알킬이다.

일부 구현예에서, R² 는 선택적으로 치환된 저급 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이다.

일부 구현예에서, R² 는 -C(O)NR^cR^d, 또는 -S(O)_nNR^cR^d 이다. 여기서, R^a, R^c, 및 R^d 는 각각 독립적으로 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로사이클로부터 선택되고,

또는 R^c 및 R^d 는, 그들이 부착되는 질소와 함께 결합하여, 할로, 저급 알킬, 히드록시, 및 저급 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 헤테로사이클 고리를 형성하며, 상기 헤테로사이클 고리는 N, O 및 S로부터 선택되는 하나 또는 두개의 추가적인 헤테로원자를 선택적으로 더 포함한다.

일부 구현예에서, R² 는 -C(O)NR^cR^d이다. 여기서, R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 알킬; CN, 할로, 알킬 및 할로알킬로 선택적으로 치환된 페닐; OH로 치환된 인다닐; 및 테트라히드로피라닐로부터 선택된다.

일부 구현예에서, R² 는 -S(O)_nNR^cR^d이다. 여기서, n 은 2이고, R^c 및 R^d 은 각각 독립적으로 H 및 알킬로부터 선택되거나, 또는 R^c 및 R^d은 그들이 부착되는 질소와 함께 피롤리디닐을 형성한다.

일부 구현예에서, R² 은 -S(O)_nR^f이다. 여기서, n은 2이고, R^f 는 알킬; 또는할로, -CN, -NO₂ 및 OR^b 로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 페닐 (여기서 R^b 는 -H 또는 알킬); 또는 시클로알킬이다.

일부 구현예에서, R¹ 및 R² 는 그들이 부착되는 N 원자와 함께, 인돌리닐, 또는 피리딘에 축합되는 이미다졸로닐을 형성한다. 여기서 상기 인돌리닐 및 피리딘은 -CN으로 선택적으로 치환된다.

일부 구현예에서, R₂는

로부터 선택되는 아릴 또는 헤테로아릴이다. 상기 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 할로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된다.

일부 구현예에서, R²는

로부터 선택되는 아릴 또는 헤테로아릴이며, 상기 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 할로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d으로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된다.

일부 구현예에서, R²는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 할로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는

이다.

일부 구현예에서, R²는

-CN;

할로;

할로알킬;

-NO₂;

아미노;

-S(O)_nR^f (여기서 n은 2이고 R^f 은 알킬 또는 할로알킬이다);

-CN, 알콕시 및 할로로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 페닐;

-OH로 선택적으로 치환된 인다닐; 테트라졸릴; 및

-C(O)NR^cR^d (여기서 R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 -H; -OH로 선택적으로 치환된 알킬; 알콕시; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; 및 -OH로 선택적으로 치환된 인다닐로부터 선택된다)

로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된

이다.

일부 구현예에서, R²는

선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 시클로알킬, 선택적으로 치환된 할로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된

이다.

일부 구현예에서, R²는

-CN;

알키닐;

할로;

-NO₂;

알킬;

아미노;

할로알킬;

-CN로 선택적으로 치환된 페닐;

테트라졸릴, 티에닐, 피리디닐 및 피라졸릴로부터 선택되고, 알킬로 선택적으로 치환된 헤테로아릴;

-OR^b (여기서 R^b 는 -H 또는 알킬이다);

-S(O)_nR^f (여기서 n 은 2이고 R^f 는 알킬이다);

COOR^b (여기서 R^b 는 -H 또는 알킬이다);

-C(O)NR^cR^d (여기서 R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 -H; OH로 선택적으로 치환된 시클로알킬; --OH 및 페닐로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 알킬; 알킬, 알콕시 및 할로로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐; 피리디닐; 및 티아졸릴로부터 선택된다);

NR^eS(O)_nR^f (여기서 n 은 2, R^e 은 -H, R^f 은 알킬; 시클로알킬; 할로 및 알킬로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 벤질; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; 티에닐; 또는 피리디닐이다);

-NR^eC(O)R^a (여기서 R^e 는 -H, R^a 는 시클로알킬; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; 또는 OR^b로 치환되는 알킬, 여기서 R^b 는 알킬);

NR^cR^d (여기서 R^c 및 R^d 는 각각 할로로 선택적으로 치환되는 벤질); 및

-S(O)_nNR^cR^d (여기서 n 은 2, R^c 및 R^d 은 각각 독립적으로 -H; 알키닐, 시클로알킬, 테트라히드로푸라닐, 및 할로 및 -OR^b로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 알킬 (여기서 R^b 는 -H 또는 알킬); -OH로 선택적으로 치환되는 시클로알킬; -OH로 선택적으로 치환되는 인다닐; 테트라히드로피라닐; 테트라히드로푸라닐; 옥세타닐; 알킬로 선택적으로 치환되는 피라졸릴; 및 할로로 선택적으로 치환되는 페닐로부터 선택되거나; 또는 R^c 및 R^d는 이들이 부착되는 질소와 함께 피롤리디닐, 피페라지닐 및 모르폴리닐로부터 선택되는 헤테로사이클 고리를 형성한다)

로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는

이다.

일부 구현예에서, R² 는 -CN, 알콕시, 모르폴리노, 피라졸릴, 이미다졸릴, 및 -NR^cR^d (여기서 R^c 및 R^d 은 각각 선택적으로 -OH로 치환되는 시클로알킬 및 알킬로부터 각각 독립적으로 선택된다)로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 피라지닐이다.

일부 구현예에서, R² 는 -CN, 할로, 및 할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 피리다지닐이다.

일부 구현예에서, R² 는 -CN, 할로, -NO₂, -OR^b, 및 -NR^cR^d (여기서 R^b, R^c 및 R^d 는 -H 및 알킬로부터 각각 독립적으로 선택된다)로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 피리미디닐이다.

일부 구현예에서, R¹ 은 선택적으로 치환된 저급 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 알케닐, 선택적으로 치환된 알키닐, 선택적으로 치환된 시클로알킬, -C(O)R^a, -C(O)OR^b, -CN, -C(O)NR^cR^d, 할로, 선택적으로 치환된 할로알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eC(O)OR^b, -NR^eC(O)NR^cR^d, -NR^eS(O)_nR^f, -NR^eS(O)_nNR^cR^d, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 C_1-3 알킬, 알릴, 프로파르길, 및 시클로프로필로부터 선택된다.

일부 구현예에서, R¹ 은 메틸이다.

일부 구현예에서, -N(R¹)(R²) 기를 지니는 절대 스테레오센터(absolute stereocenter)는 R-이소머이다.

또한, 본 발명은 화합물 1 내지 260으로부터 선택되는 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

본 명세서에 기재되는 화합물, 및/또는 그의 약학적으로 허용가능한 염은 본 명세서의 내용을 고려하여, 본 발명의 기술분야에서 잘 알려진 방법에 의해 시중에서 구입가능한 출발물질로부터 합성될 수 있다. 하기 도식은 본 명세서에 기재한 대부분의 화합물의 제조방법을 설명한다.

도식 I

도식 I에 나타나듯이, 식 (1)로 표시되는 화합물은 예를 들어 K₂CO₃, Na₂CO₃, NaH, Et₃N 또는 디이소프로필에틸아민(DIPEA)과 같은, 그러나 이에 한정되지는 않는 염기의 존재 하에, 식 (2)(여기서 m은 상기에서 정의한 바와 같다)로 표시되는 화합물과 반응하여 식 (3)으로 표시되는 화합물을 수득한다. HCl 또는 CF₃CO₂H와 같은, 그러나 이에 한정되지는 않는 산의 존재 하에, 식 (3)의 화합물에서 N-Boc 기는 탈보호되어 식 (4)의 화합물을 수득할 수 있다. 식 (4)의 화합물은 이어서 R¹X 및 R²X와 반응하여 (여기서, X 는 Cl, Br 또는 I이고, R¹ 및 R² 는 상기에 정의한 바와 같다) K₂CO₃, Na₂CO₃, Cs₂CO₃, NaH, t-BuONa, t-BuOK, Et₃N, 또는 디이소프로필에틸아민(DIPEA)과 같은, 그러나 이에 한정되지 않는 염기의 존재 하에 식 (I)의 화합물을 수득할 수 있다. R¹ 또는 R² 가 아릴 또는 헤테로아릴일 때, PdCl₂, Pd(OAc)₂ Pd₂(dba)₃ 또는 Pd(PPh₃)₄와 같은, 그러나 이에 한정되지는 않는 팔라듐 시약, 및 Ph₃P, ^t Bu₃P, 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프탈렌 (BINAP), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 (dppf) 또는 1,3-비스(2,6-디프로필페닐)-1H-이미다졸-3-이움 클로라이드와 같은 그러나 이에 한정되지는 않는 리간드를 반응 효율을 높이기 위하여 촉매로서 사용할 수 있다.

도식 II에서 나타나듯이, 식 (7)로 표시되는 화합물 (m은 상기에서 정의한 바와 같다) 은 도식 I에서 설명한 조건 하에서 식 (5)의 화합물과 반응하여 식 (8)의 화합물을 수득할 수 있다. 대안적으로, 식 (8)의 화합물은 또한 식 (9)(여기서, R^1a 및 R^1b 는 H, 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴로부터 선택되거나, 또는 R^1a 및 R^1b 는 부착된 탄소 원자와 함께 시클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬 고리를 형성한다.) 의 화합물과 식 (7)의 화합물의 반응에 의해 제조될 수 있다. 식 (8)의 화합물은 도식 I에서 설명한 조건 하에서 식 (6)의 화합물과 반응하여 식 (10)의 화합물을 수득할 수 있다. HCl 또는 CF₃CO₂H와 같은, 그러나 이에 한정되지는 않는 산의 존재 하에, 식 (10)의 화합물에서 N-Boc 기는 탈보호되어 식 (11)의 화합물을 수득할 수 있다. 상기 식 (11)은 K₂CO₃, Na₂CO₃, Cs₂CO₃, NaH, t-BuONa, t-BuOK, Et₃N, 또는 디이소프로필에틸아민(DIPEA)과 같은, 그러나 이에 한정되지는 않는 염기의 존재 하에 식 (1)의 화합물과 더 반응하여 식 (I)의 화합물을 수득할 수 있다. 필요하다면, 예를 들어, R¹ 또는 R² 이 아릴 또는 헤테로아릴일 때, PdCl₂, Pd(OAc)₂ Pd₂(dba)₃ 또는 Pd(PPh₃)₄ 와 같은, 그러나 이에 한정되지는 않는 팔라듐 시약, 및 Ph₃P, ^t Bu₃P, 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프탈렌 (BINAP), 9,9-디메틸-4,5-비스(디페닐포스피노)크산텐 (Xantphos), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센 (dppf) 또는 1,3-비스(2,6-디프로필페닐)-1H-이미다졸-3-이움 클로라이드와 같은 그러나 이에 한정되지는 않는 리간드가 반응 효율을 높이기 위해 촉매로서 사용될 수 있다.

도식 III은 식 (3)의 화합물이 LiAlH₄와 반응하여 식 (12)의 화합물을 수득하고, 식 (12)의 화합물이 도식 I에서 설명한 조건과 비슷한 조건에서 식 (5)의 화합물과 반응하여 식 (13)의 화합물을 수득할 수 있는 것을 보여준다.

위와 같이 수득된 화합물은 그들의 주변 위치에서 더 수정되어 원하는 화합물을 제공할 수 있다. 합성 화학 변환은 예를 들어 R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Ed., John Wiley and Sons (1999); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); 및 L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) 및 그의 차후 판에서 볼 수 있다.

사용 전에, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 칼럼 크로마토그래피, 고성능 액체 크로마토그래피, 결정화 또는 다른 적절한 방법에 의해 정제될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물을 제공한다.

본 명세서에 기재된 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물은 다양한 방법으로, 예를 들어 경구, 비경구, 흡입 분무 또는 이식 저장소에 의해 투여될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 용어 "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 동맥내, 활액내, 흉골내, 척추 강내, 병변내 및 두개내 주사 또는 축합 기술을 포함한다.

경구 조성물은 정제, 캡슐, 에멀전, 및 수성 현탁액, 분산액 및 용액을 포함하되, 이에 한정되지는 않는 경구적으로 허용가능한 복용 형태일 수 있다. 정제로 흔히 사용되는 담체는 락토오스 및 옥수수 전분을 포함한다. 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제 또한 전형적으로 정제에 첨가된다. 캡슐 형태의 경구 투여에서, 유용한 희석제는 락토오스 및 건조 옥수수 전분을 포함한다. 수성 현탁액 또는 에멀전이 경구 투여되면, 활성 성분은 유화제 또는 현탁제와 결합하여 오일상으로 현탁되거나 용해될 수 있다. 원한다면, 감미제, 착향료 또는 착색제를 첨가할 수 있다.

멸균 주사제 조성물 (예. 수성 또는 유성 현탁액)은 적절한 분산제 또는 습윤제 (예를 들어 Tween 80과 같은) 및 현탁제를 사용하여 기술분야에서 알려진 기술에 따라 제조될 수 있다. 또한, 멸균 주사제 중간체는 예를 들어 1,3-부탄디올에 용해시킨 용액으로서 무독성의 비경구적으로 수용가능한 희석제 또는 용매에 용해시킨 멸균 주사제 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용될 수 있는 약학적으로 허용가능한 비히클 및 용매는 만니톨, 물, 링거 용액 및 등장 식염 용액이다. 또한, 멸균 고정유는 종래의 방법대로 용매 또는 현탁 매질 (예. 합성 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드)로 사용된다. 올레산과 같은 지방산 및 그의 글리세라이드 유도체는 주사제의 중간체에 유용한데, 왜냐하면 그것들이 폴리옥시에틸화 버전의 올리브유 또는 피마자유와 같은 약학적으로 허용가능한 천연 오일이기 때문이다. 상기 오일제 또는 현탁액은 장쇄 알코올 희석제 또는 분산제 또는 카르복시메틸 셀룰로스 또는 비슷한 분산제를 함유할 수 있다.

흡입용 조성물은 약학 제제 분야에서 잘 알려진 기술에 따라 제조될 수 있으며, 벤질 알코올 또는 다른 적절한 보존제, 생체이용율을 증진시키기 위한 흡수촉진제, 플루오로카본 및/또는 기술분야에서 알려진 다른 가용화제 또는 분산제를 이용하여 식염수 용액으로 조제될 수 있다.

국소 조성물은 오일, 크림, 로션, 연고 등과 같은 형태로 조제될 수 있다. 상기 조성물에 적절한 담체는 식물성 오일 또는 미네랄 오일, 백색 페르토라텀 (백색 소프트 파라핀), 분지쇄 지방 또는 오일, 동물성 지방 및 고분자량 알코올 (C12보다 큰)을 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 담체는 활성성분이 가용성인 담체이다. 또한, 원한다면, 유화제, 안정화제, 보습제 및 항산화제 뿐만 아니라 색 또는 향 부여제가 포함될 수 있다. 또한, 피부침투 촉진제가 상기 국소 제제에 사용될 수 있다. 이러한 촉진제의 예는 미국특허번호 3,989,816 및 4,444,762에서 볼 수 있다.

크림은 미네랄 오일, 자가 유화성 비즈왁스 및 물의 혼합물로부터 제조될 수 있다. 상기 혼합물에는 아몬드 오일과 같은 오일의 소량에 용해된 활성성분이 혼합되어 있다. 이러한 크림의 예는 약 40부의 물, 약 20부의 비즈왁스, 약 40부의 미네랄 오일 및 약 1부의 아몬드 오일을 포함하는 크림이다. 연고는 아몬드 오일과 같은 식물성 오일에 활성성분 용액을 따뜻한 소프트 파라핀과 혼합하고 혼합물을 냉각시킴으로써 제조될 수 있다. 이러한 연고의 예는 약 30중량%의 아몬드 및 약 70중량%의 백색 소프트 파라핀을 포함하는 연고이다.

약학적으로 허용가능한 담체는 조성물의 활성성분과 양립가능하며 (일부 구현예에서는, 활성성분을 안정화할 수 있다) 치료될 대상에 해롭지 않은 담체를 가리킨다. 예를 들어, 시클로덱스트린과 같은 가용화제 (본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염과 함께 특정, 보다 가용성인 복합체를 형성함)가 활성성분의 운반을 위한 약제학적 부형제로 사용될 수 있다. 다른 담체의 예는 콜로이드 실리콘 디옥사이드, 마그네슘 스테아레이트, 셀룰로스, 소듐 로릴 설페이트 및 D&C Yellow#10과 같은 안료를 포함한다.

적절한 인 비트로 검사법이 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성 저해 효능을 예비 평가하는 데 사용될 수 있다. 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염을 인 비보 검사법에 의해 그 암 또는 염증성 질환의 치료 효능을 검사할 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 기재한 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 암 또는 염증성 질환을 앓는 동물 (예. 마우스 모델)에 투여될 수 있고, 그 치료 효과가 측정될 수 있다. 이 결과에 근거하여, 동물, 예를 들어 인간에 적절한 복용량 범위 및 투여 경로 또한 결정될 수 있다.

또한, 본 발명은 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성을 저해하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 적어도 하나의 키나아제를 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제의 활성을 저해하기에 충분한 양을 접촉시키는 단계를 포함한다.

본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들어 암을 앓는 대상에 이로운 치료 또는 예방 효과를 달성하는 데 사용될 수 있다. 본 명세서에 사용된 용어 "암"은 제어되지 않는 또는 조절되지 않는 세포 증식, 감소한 세포 분화, 주위 조직을 침해하는 부적절한 능력, 및/또는 이소성 부위에 새로운 성장을 형성하는 능력으로 특징지어지는 세포 장애를 가리킨다. 용어 "암"은 고형 종양 및 혈인성 종양을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다. 용어 "암"은 피부, 조직, 장기, 뼈, 연골, 혈액 및 혈관의 질병을 포함한다. 또한, 용어 "암"은 1차 및 전이성 암을 포함한다.

고형 종양의 비제한적 예는 췌장암(pancreatic cancer); 방광암(bladder cancer); 결장직장암(colorectal cancer); 전이성 유방암을 포함하는 유방암(breast cancer); 안드로겐 의존성 및 안드로겐 비의존성 전립선암을 포함하는 전립선암(prostate cancer); 예를 들어 전이성 신장 세포암(metastatic renal cell carcinoma)을 포함하는 신장암(renal cancer); 간세포암(hepatocellular cancer); 예를 들어 비 소세포 폐암(non-small cell lung cancer (NSCLC)), 기관지 폐포암(bronchioloalveolar carcinoma(BAC)) 및 폐 선암(adenocarcinoma of the lung)을 포함하는 폐암(lung cancer); 예를 들어 진행성 상피암(progressive epithelial cancer) 또는 일차성 복막암(primary peritoneal cancer)을 포함하는 난소암(ovarian cancer); 자궁경부암(cervical cancer); 위암(gastric cancer); 식도암(esophageal cancer); 예를 들어 두경부의 편평세포암(squamous cell carcinoma of the head and neck)을 포함하는 두경부암(head and neck cancer); 예를 들어 악성 흑색종(malignant melanoma)을 포함하는 피부암; 전이성 신경내분비계 종양(metastatic neuroendocrine tumor)을 포함하는 신경내분비암(neuroendocrine cancer); 예를 들어 신경교종(glioma), 악성 핍지교종(anaplastic oligodendroglioma), 성인 다형성 교모세포종(adult glioblastoma multiforme), 및 성인 악성 성상세포종(adult anaplastic astrocytoma)을 포함하는 뇌종양(brain tumors); 골암(bone cancer); 연조직 육종(soft tissue sarcoma); 및 갑상선암(thyroid carcinoma)을 포함한다.

혈액학적 악성종양(hematologic malignancies)의 비제한적 예는 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia (AML)); 만성 골수성 백혈병 가속기 및 만성 골수성 백혈병 급성기(CML-BP)를 포함하는 만성 골수성 백혈병(chronic myelogenous leukemia (CML)); 급성 림프구성 백혈병(acute lymphoblastic leukemia (ALL)); 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia (CLL)); 호지킨병(Hodgkin's disease (HD)); 소포 림프종(follicular lymphoma) 및 외투세포 림프종(mantle cell lymphoma)을 포함하는 비호지킨 림프종(non-Hodgkin's lymphoma (NHL)); B-세포 림프종(B-cell lymphoma); T-세포 림프종(T-cell lymphoma); 다발성 골수종(multiple myeloma (MM)); 발덴스트룀 마크로글로불린혈증(Waldenstrom's macroglobulinemia); 불응성 빈혈(refractory anemia), 환형 철아구를 갖는 불응성 빈혈(refractory anemia with ringed sideroblasts (RARS)), 과다 모세포를 갖는 불응성 빈혈(refractory anemia with excess blasts (RAEB)), 및 전환중인 모세포가 증가한 불응성 빈혈(RAEB in transformation (RAEB-T))을 포함하는 골수이형성 증후군(myelodysplastic syndromes (MDS)); 및 골수증식증후군(myeloproliferative syndromes)을 포함한다.

일부 구현예에서, 치료될 암의 예는 폐암, 두경부암, 결장직장암, 췌장암, 결장암(colon cancer), 유방암, 난소암, 전립선암, 위암, 신장암, 간암, 뇌암, 골암 및 백혈병을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.

본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 염증성 질환 또는 염증성 장애를 앓는 대상에 이로운 치료 또는 예방 효과를 달성하기 위하여 사용될 수 있다. 용어 "염증성 질환(inflammatory disease)" 또는 "염증성 장애(inflammatory disorder)"는 전형적으로 호중구 주화성(neutrophil chemotaxis)에 의해 야기되는 염증을 야기하는 병적 상태를 가리킨다. 이러한 장애의 예는 건선(psoriasis) 및 아토피 피부염(atopic dermatitis)을 포함하는 염증성 피부 질환; 전신성 경피증(systemic scleroderma) 및 전신성 경화증(systemic sclerosis); 염증성 장질환(inflammatory bowel disease (IBD) (예를 들어 크론씨병(Crohn's disease) 및 궤양성 대장염(ulcerative colitis))과 관련된 반응; 외과용 조직 재관류 손상(surgical tissue reperfusion injury), 심근경색(myocardial infarction), 심장마비(cardiac arrest), 심장 수술 후 재관류(reperfusion after cardiac surgery) 및 경피적 관상동맥형성술 후 협색증(constriction after percutaneous transluminal coronary angioplasty)과 같은 심근 허혈 장애(myocardial ischemic conditions), 뇌졸중(stroke), 및 복부 대동맥류(abdominal aortic aneurysms)를 포함하는 허혈성 재관류 장애(ischemic reperfusion disorders); 뇌졸중 후 뇌부종(cerebral edema secondary to stroke); 두개 외상(cranial trauma), 저혈량성 쇼크(hypovolemic shock); 질식(asphyxia); 성인 호흡곤란증후군(adult respiratory distress syndrome); 급성 폐손상(acute-lung injury); 베체트병(Behcet's Disease); 피부근염(dermatomyositis); 다발성근염(polymyositis); 다발성 경화증(multiple sclerosis (MS)); 피부염(dermatitis); 뇌수막염(meningitis); 뇌염(encephalitis); 포도막염(uveitis); 골관절염(osteoarthritis); 루수프 신염(lupus nephritis); 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis (RA)), 쇼그렌 증후군(Sjorgen's syndrome), 혈관염(vasculitis)과 같은 자가면역 질환(autoimmune diseases); 백혈구 누출(leukocyte diapedesis)을 수반하는 질병; 중추신경계 염증성 장애(central nervous system (CNS) inflammatory disorder), 패혈증(septicaemia) 또는 외상(trauma) 후 다발성 장기 손상 증후군(multiple organ injury syndrome); 알코올성 간질환(alcoholic hepatitis); 세균성 폐렴(bacterial pneumonia); 사구체신염(glomerulonephritis)을 포함하는 항원항체복합체 매개 질환(antigen-antibody complex mediated diseases); 패혈증(sepsis); 유육종증(sarcoidosis); 조직/장기 이식에 따른 면역병리학적 반응(immunopathologic responses to tissue/organ transplantation); 흉막염(pleurisy), 폐포염(alveolitis), 혈관염(vasculitis), 폐렴(pneumonia), 만성 기관지염(chronic bronchitis), 기관지 확장증(bronchiectasis), 미만성 세기관지염(diffuse panbronchiolitis), 과민성 폐렴(hypersensitivity pneumonitis), 특발성 폐섬유증(idiopathic pulmonary fibrosis (IPF)), 및 낭포성 섬유증(cystic fibrosis)을 포함하는 폐의 염증(inflammations of the lung) 등을 포함한다. 바람직한 징후(indications)는 제한없이 만성 염증(chronic inflammation), 자가면역성 당노병(autoimmune diabetes), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis (RA)), 류마토이드 척추염(rheumatoid spondylitis), 통풍성 관절염(gouty arthritis) 및 다른 관절염 증상, 다발성 경화증(multiple sclerosis (MS)), 천식(asthma), 전신성 홍반성 루푸스(systemic lupus erythrematosus), 성인 호흡곤란증후군(adult respiratory distress syndrome), 베체트병(Behcet's disease), 건선(psoriasis), 만성 염증성 폐질환(chronic pulmonary inflammatory disease), 이식편대숙주반응(graft versus host reaction), 크론씨병(Crohn's Disease), 궤양성 대장염(ulcerative colitis), 염증성 장질환(inflammatory bowel disease (IBD)), 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 및 염증 및 관련 장애와 관련된 질병 또는 장애를 수반하는 발열(pyresis)을 포함한다.

본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들어 자가면역성 질환을 앓는 대상에 이로운 치료 또는 예방 효과를 달성하기 위하여 사용될 수 있다. 용어 "자가면역성 질환(autoimmune disease)"은 개인의 조직 또는 장기로부터 야기되는 및/또는 유도되는 질환 또는 장애, 또는 그의 co-segregate 또는 징후, 또는 그로부터 야기되는 증상을 의미한다. 자가면역성 질환의 예는 루푸스(lupus), 중증 근무력증(myasthenia gravis), 다발성 경화증(multiple sclerosis (MS)), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis (RA)), 건선(psoriasis), 염증성 장질환(inflammatory bowel disease), 천식(asthma) 및 특발성 혈소판 감소성 자반증(idiopathic thrombocytopenic purpura), 및 골수섬유증(myelofibrosis), PV / ET (포스트 다혈구증(Post-Polycythemia) / 본태성 혈소판증가증 골수섬유증(Essential Thrombocythemia Myelofibrosis))과 같은 골수증식장애(myeloid proliferative disorder)를 포함하되 이에 한정되지는 않는다.

일부 구현예에서, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 다른 하나의 치료제와 함께 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 다른 하나의 치료제는 치료될 질병 또는 증상을 앓는 환자에 보통 투여되는 치료제이다. 예를 들어, 다른 하나의 치료제는 치료될 질환 또는 증상에 따라 항염증제 또는 항종양제일 수 있다. 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 단일 복용 형태 또는 분리 복용 형태로 다른 하나의 치료제와 함께 투여될 수 있다. 분리 복용 형태로 투여될 때, 다른 하나의 치료제는 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 그의 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염의 투여 전에, 동시에 또는 후에 투여될 수 있다.

일부 구현예에서, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 항염증제와 함께 투여된다. 항염증제의 비제한적 예는 코스티코스테로이드 (예. 플루티카손 프로피네이트(fluticasone propionate), 베클로메타손 디프로피네이트(beclomethasone dipropionate), 모메타손 푸로에이트(mometasone furoate), 트리암시놀론 아세토니드(triamcinolone acetonide) 또는 부데소니드(budesonide)), 질환 변경제(disease-modifying agents) (예. 항말라리아제(antimalarials), 메토트렉세이트(methotrexate), 술파살라진(sulfasalazine), 메살라민(mesalamine), 아자티오프린(azathioprine), 6-메르캅토푸린(mercaptopurine), 메트로니다졸(metronidazole), 주사가능 골드 및 경구 골드(injectable and oral gold), 또는 D-페니실라민(penicillamine)), 비스테로이드성 항염증제 (예. 아세토미노펜(acetominophen), 아스피린(aspirin), 소듐 살리실레이트(sodium salicylat), 소듐 크로모글리케이트(sodium cromoglycat), 마그네슘 살리실레이트(magnesium salicylate), 콜린 마그네슘 살리실레이트(choline magnesium salicylate), 살리실살리실산(salicylsalicylic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 나프록센(naproxen), 디클로페낙(diclofenac), 디플루니살(diflunisal), 에토돌락(etodolac), 페노프로펜 칼슘(fenoprofen calcium), 플루리프로펜(fluriprofen), 피록시캄(piroxicam), 인도메타신(indomethacin), 켑토프로펜(ketoprofen), 케토로락 트로메타민(ketorolac tromethamine), 메클로페나메이트(meclofenamate), 메클로페나메이트 소듐(meclofenamate sodium), 메페나믹산(mefenamic acid), 나부메톤(nabumetone), 옥사프로진(oxaprozin), 페닐 부틸 니트론(phenyl butyl nitrone (PBN)), 술린닥(sulindac), 또는 톨메틴(tolmetin)), COX-2 저해제, 사이토킨 합성/방출 저해제 (예. 항사이토킨 항제, 항사이토킨 수용체 항체 등)를 포함한다.

일부 구현예에서, 본 명세서에 기재한 적어도 하나의 화합물 및/또는 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 염은 항종양제와 함께 투여된다. 본 명세서에서, 용어 "항종양제(anti-neoplastic agent)"는 암 치료 목적을 위해 암을 앓는 대상에 투여되는 제제를 말한다. 항종양제의 비제한적 예는 방사선치료; 면역치료; DNA 손상 화학치료제; 및 세포복제를 방해하는 화학치료제를 포함한다.

DNA 손상 화학치료제의 비제한적 예는 토포이소머라아제 I 억제제(topoisomerase I inhibitors (예. 이리노테칸, 토포테칸, 캠토테신 및 그의 유사체 또는 대사체 및 독소루비신)); 토포이소머라아제 II 억제제(topoisomerase II inhibitors (예. 에토포시드, 테니포시드, 및 다우노루비신)); 알킬화제 (예. 멜팔란, 클로람부실, 부설팬, 티오테파, 이포스파마이드, 카르무스틴, 로무스틴, 세무스틴, 스트렙토조신, 데카르바진, 메토트렉세이트, 미토신 C, 및 시클로포스파미드); DNA 삽입체 (예. 시스플라틴, 옥사리플라틴, 및 카보플라틴); DNA 삽입체 및 블레오마이신과 같은 프리 라디칼 생성제; 및 뉴클레오시드 모방체 (예. 5-플루오로우라실, 카페시티빈(capecitibine), 젬시타빈, 플루다라빈, 시타라빈, 메르캅토푸린, 티오구아닌, 펜토스타틴 및 히드록시우레아)를 포함한다.

세포복제를 방해하는 화학치료제는 파클리탁셀, 도세탁셀, 및 관련 유사체; 빈크리스틴, 빈블라스틴 및 관련 유사체; 탈리도미드 및 관련 유사체(예. CC-5013 및 CC-4047); 단백질 티로신 키나아제 저해제(예. 이매티닙 메실레이트 및 제피티닙); 프로테아솜 저해제(예. 보르테조밉); I 카파 B 키나아제의 저해제를 포함하는 NF-카파 B 저해제; 암에서 과발현하는 단백질에 결합하여 세포복제를 하향조절하는 항체(예. 트라스투주맙, 리툭시맙, 세툭시맙, 및 베바시주맙); 및 암에서 상향조절, 과발현 또는 활성화되는 것으로 알려진, 세포복제를 하향조절하는 단백질 또는 효소의 다른 저해제를 포함한다.

실시예

하기의 실시예는 순전히 본보기를 위한 것이며 어떤 방식으로도 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 사용되는 숫자(예를 들어 양, 온도 등)의 정확성을 보장하기 위하여 노력하였으나, 약간의 실험 오류 및 편차는 고려되어야 한다. 다른 언급이 없다면, 부(parts)는 중량부(parts by weight)이고, 온도는 섭씨온도이고, 압력은 대기압 또는 그 근처이다. 모든 MS 데이터는 agilent 6120 및/또는 agilent 1100에 의해 체크하였다. 본 발명에 사용되는 중간체를 제외한 모든 시약은 시중에서 구입가능하다. 시약을 제외한 모든 화합물명은 Chemdraw 8.0에 의해 생성되었다.

하기 실시예에서, 하기의 약자가 사용되었다:

AIBN a,a'-아조-이소부티로니트릴

BINAP 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프틸

Boc 테르트-부톡시카르보닐

Boc₂O 디-t-부틸-디카르보네이트

i-BuNO₂ 이소부틸니트라이트

BTC 비스(트리클로로메틸)카르보네이트

DCM 디클로로메탄

DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMAP 4-디메틸아미노피리딘

DPPA 디페닐포스포릴 아지드

DBU 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운덱-7-엔

Et₃N 트리에틸아민

h 시간

HATU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라-메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트

HMTA 헥사메틸렌테트라민

HOAc 아세트산

Lawesson's reagent: 2,4-비스(4-메톡시페닐)-2,4-디티옥소-1,3,2,4-디티아디포스페탄

mL 밀리리터

min 분

MeOH 메탄올

MsCl 메탄술포닐 클로라이드

NBS N-브로모숙시니미드

PE 페트롤륨 에테르

Pd(dppf)Cl₂ 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드

Pd(dppf)Cl₂ㆍCH₂Cl₂ 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 복합체

Pd₂(dba)₃ 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)

Pd(PPh₃)₄ 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)

PdCl₂(PPh₃)₂ 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)디클로라이드

PPh₃ 트리페닐포스핀

THF 테트라히드로푸란

TFA 트리플루오로아세트산

TBTU o-벤조트리아졸-1-일-N,N, N' , N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트

중간체 1

( R )-테르트-부틸 3-(시클로펜틸(프로프-2-이닐)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

(A) ( R )-부틸 3-(시클로펜틸아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

THF (20 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.0 g, 5.3 mmol) 및 시클로펜타논(451 mg, 5.3 mmol) 용액에 NaBH(OAc)₃ (1.13 g, 5.3 mmol)을 천천히 첨가한 뒤 하룻밤 동안 주위 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 H₂O (20 mL)로 담금질하고 디클로로메탄 (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수 (3 x 5 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고, 여과하고 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 255 (M+H)⁺.

(B) ( R )-테르트-부틸 3-(시클로펜틸(프로프-2-이닐)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

아세토니트릴 (3 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 3-(시클로펜틸아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트 (200 mg, 0.78 mmol), 3-브로모-1-프로핀(140 mg, 1.18 mmol) 및 K₂CO₃ (217 mg, 1.57 mmol)의 혼합물을 하룻밤 동안 환류에서 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하였다. 잔여물을 실리카 겔 상 크로마토그래피(PE/EtOAc = 4:1)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 293 (M+H)⁺ .

중간체 2

( R ) -N- 메틸-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민

(A) ( R )-테르트-부틸 1-(7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일) 피롤리딘-3-일카르바메이트

EtOH (3 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 피롤리딘-3-일카르바메이트 (250 mg, 1.34 mmol), 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (206 mg, 1.34 mmol) 및 DIPEA (0.35 mL, 2.01 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 환류 온도에서 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하였다. 잔여물을 EtOAc (15 mL)에 용해시키고 여과하였다. 여과물을 염수(3 x 5 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고 농축시켜 표제 화합물 (360 mg, 88% 수득률)을 수득하였다. MS (m/z): 304 (M+H)⁺.

(B) ( R ) -N- 메틸-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일) 피롤리딘-3-아민

N₂ 하에서, 무수 THF(10 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일) 피롤리딘-3-일카르바메이트 (380 mg, 1.34 mmol) 용액에 수소화 알루미늄 리튬 (143 mg, 3.76 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하였다. 첨가 완료 후 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 수성 NaOH (15%)로 담금질하고, 여과하여 고체를 제거하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 예비 TLC로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (178 mg, 66% 수득률). MS (m/z): 218 (M+H)⁺.

중간체 3

( R ) 1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 하이드로클로라이드

(R)-테르트-부틸 1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일카르바메이트 (600 mg, 1.97 mmol)를 주위 온도에서 2시간 동안 HCl (MeOH에 용해시킨, 6 N, 5 mL)로 처리하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하여 (R)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 염산 염을 수득하였다. MS (m/z): 204 (M+H)⁺.

중간체 4

(R ) -N- 프로필-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민

THF (5 mL)에 용해시킨 (R)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 하이드로클로라이드 (50 mg, 0.24 mmol), 프로피온알데히드(15 mg, 0.26 mmol) 및 NaBH(OAC)₃(61 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음에, 물 (2 mL)로 담금질하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수 (3 x 5 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 여과하고, 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 246 (M+H)⁺.

중간체 5

( R )-6-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-yl)피롤리딘-3-일아미노)니코티노니트릴

(A) 4-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘

THF (50 mL)에 용해시킨 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (5 g, 32.6 mmol) 용액에 NaH (30%, 4 g, 50.0mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 (2-(클로로메톡시)에틸)- 트리메틸실란 (15 g, 90.0mmol) 첨가 한시간 전에 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음에, 물 (5 mL)로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 감압 하에 유기층을 농축시키고, 잔여물을 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 284 (M+H)⁺ (³⁵Cl), 286 (M+H)⁺ (³⁷Cl).

(B) ( R )-테르트-부틸 1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일카르바메이트

EtOH (20 mL)에 용해시킨 4-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(900 mg, 3.17 mmol), (R)-테르트-부틸 피롤리딘-3-일카르바메이트 (709 mg, 3.80 mmol) 및 DIPEA (618 mg, 4.75 mmol) 용액을 환류 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고 잔여물을 EtOAc (100 mL)에 용해시키고, 염수 (3 x 10 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄ 에 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 434 (M+H)⁺.

(C) ( R )-6-(1-(7-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-7 H - 피롤로[2,3- d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3- 일아미노 ) 니코티노니트릴

HCl (MeOH에 용해, 6 N, 5 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일카르바메이트 (700 mg, 1.61 mmol) 용액을 주위온도에서 3시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하였다. 잔여물을 DMSO (3 mL)에 용해시켰다. 그 다음에, 6-클로로니코티노니트릴 (323 mg, 2.41 mmol), KI (10 mg, 0.06 mmol) 및 DIPEA (311 mg, 2.41 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 14시간 동안 교반하고, 주위 온도로 냉각시키고, H₂O (20 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(3 x 10 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 436 (M+H)⁺.

중간체 6

( R ) -N- 메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민

중간체 2(B)의 프로시져에 따라 (R)-테르트-부틸 1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일카르바메이트를 사용하여 표제 화합물을 조제하였다. MS (m/z): 348 (M+H)⁺.

중간체 7

( R )-5-브로모 -N- 메틸 -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민

DIPEA (2.876 mmol)을 NMP (2 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (0.575 mmol) 및 2,5-디브로모피라진 (0.689 mmol) 용액에 첨가하였다. 그 다음에, 그것을 마이크로웨이브 반응기에서 45분 동안 200℃에서 가열하였다. 냉각 후, 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 결합된 유기층을 농축시키고, 그 결과 생성된 잔여물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 57.5%의 수득률로 (R)-5-브로모-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민을 수득하였다. MS (m/z): 504 (M+H)⁺, 506 (M+H)⁺.

중간체 8

( R )- N ² -메틸- N ² -{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-피리딘-2,5-디아민

(A) ( R )-메틸-(5-니트로-피리딘-2-일)-{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-아민

DMF (50 mL)에 용해시킨 (R)-메틸-{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-아민 (10 mmol), DIPEA (20 mmol) 및 2-브로모-5-니트로-피리딘(11 mmol) 의 혼합물을 100℃에서 24시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 물에 붓고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 물로 세정하고 이어서 염수로 세정한 뒤, 농축시켜 조(crude) 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

(B) ( R )- N ² -메틸- N ² -{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-피리딘-2,5-디아민

메탄올(100 mL)에 용해시킨 (R)-메틸-(5-니트로-피리딘-2-일)-{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-아민(10 mmol)의 용액에 라니 니켈을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 atm의 H₂ 하에 18시간 동안 교반하였다. 여과 후, 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 9

( R )- 테르트 -부틸 3-((5- 시아노피리딘 -2-일)( 시클로프로필 )아미노) 피롤리딘 -1-카 르복실레이 트

(A) ( R )-테르트-부틸 3-(시클로프로필아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

메탄올(30 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 3-아미노피롤리딘-1-카르복실레이트 (400 mg, 2.15 mmol), (1-에톡시시클로프로폭시)트리메틸실란 (1500 mg, 8.60 mmol)의 용액에 소듐 시아노보로하이드라이드 (569 mg, 8.60 mmol) 및 아세트산 (0.2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 환류 온도에서 10시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하였다. 잔여물을 물(20 mL)로 처리하고 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(3 x 10 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄ 에 건조하고, 여과하고 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 227 (M+H)⁺.

(B) ( R )-테르트-부틸 3-((5-시아노피리딘-2-일)(시클로프로필)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

중간체 2(A)의 프로시져에 따라 비슷한 조건 하에 (R)-테르트-부틸 3-(시클로프로필아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트 및 6-브로모니코니토니트릴을 사용하여 표제 화합물을 조제하였다. MS (m/z): 329 (M+H)⁺.

중간체 10

테르트-부틸 3-(5-시아노인돌린-1-일)피롤리딘-1-카르복실레이트

2.5 mL의 MeOH에 용해시킨 인돌린-5-카르보니트릴 (110 mg, 0.75 mmol) 용액에 테르트-부틸 3-옥소피롤리딘-1-카르복실레이트 (166 mg, 0.90 mmol)를 첨가한 뒤 HOAc (0.11 mL, 1.88 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 뒤, NaCNBH₃ (57 mg, 0.90 mmol)을 첨가하고 혼합물을 주위 온도에서 2일 동안 교반하였다. 휘발성물질을 진공에서 제거하였다. 잔여물을 EtOAc로 희석한 뒤, 1 N NaOH 용액 및 염수로 세정하고, Na₂SO₄ 에 건조하고 진공에서 증발시켜 추가의 정제 없이 다음 단계에서의 사용을 위한 조(crude) 표제 화합물을 수득하였다.

중간체 11

( R )-테르트-부틸 3-((5-시아노-6-메톡시피리딘-2-일)(메틸) 아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

(A) ( R )-테르트-부틸 3-((6-클로로-5-시아노피리딘-2-일)(메틸)아미노) 피롤리딘 -1-카르복실레이트

DMF (10 mL)에 용해시킨 2, 6-디클로로니코티노니트릴 (2.2 mmol) 및 DIPEA (10 mmol) 용액에 (R)-테르트-부틸 3-(메틸아미노) 피롤리딘-1-카르복실레이트를 실온에서 교반하면서 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 그 다음에, 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세정하고, 건조하고 여과하고 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

(B) ( R )-테르트-부틸 3-((5-시아노-6-메톡시피리딘 -2-일)(메틸) 아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트

MeOH (20 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 3-((6-클로로-5-시아노피리딘-2-일)(메틸)아미노) 피롤리딘 -1-카르복실레이트 (0.45 mmol) 용액에 MeOH (2 mL)에 용해시킨 NaOMe (0.9 mmol) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 뒤, 50℃로 가열하고, 2시간 더 교반한 뒤, 환류 온도에서 하룻밤동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, EtOAc로 희석시키고, 염수로 세정하고, 건조하고 여과하고 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다.

하기 중간체 12-14는 중간체 11(A)의 프로시져에 따라 통상의 기술자가 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

중간체 15

( R )-테르트-부틸 3-( N -메틸시클로프로판술폰아미도)피롤리딘-1-카르복실레이트

2.5 mL THF에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 3-(메틸아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트(100 mg, 0.5 mmol) 용액에 시클로프로판술포닐 클로라이드 (77 mg, 0.55 mmol) 및 DIPEA (0.10 mL, 0.60 mmol)을 주위 온도에서 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 하룻밤동안 교반하였다. 물을 첨가한 뒤 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 결합하고 염수로 세정하고 Na₂SO₄에 건조하고 진공에서 증발시켜 조 표제 화합물을 수득하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. MS (m/z): 305 (M+H)⁺.

중간체 16

( R )-테르트-부틸 3-( N -메틸시클로프로판술폰아미도)피롤리딘-1-카르복실레이트

(R)-테르트-부틸 3-(메틸아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1 mmol) 용액에TBTU (1.2 mmol), DIPEA (2 mmol) 및 2-(트리플루오로메틸)벤조산 (1 mmol)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반한 뒤 농축시켰다. 잔여물을 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 결합된 추출물을 추가 정제 없이 농축시켜 다음 단계에서의 사용을 위한 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 1: 화합물 1-260의 합성

화합물 1

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-시아노 -N- 메틸아세트아미드

THF (5 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (75 mg, 0.345 mmol) 및 2-시아노아세트산 (35 mg, 0.414 mmol) 용액에 HATU (157 mg, 0.414 mmol) 및 DIPEA (0.12 mL,0.69 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, EtOAc로 세정하고, 감압 하에 건조하여 표제 화합물을 수득하였다 (45 mg, 46%). MS (m/z): 285 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 1의 프로시져에 따라 통상의 기술자가 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 9

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-4-시아노 -N- 메틸벤젠술폰아미드

THF (2 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민(30 mg, 0.138 mmol) 용액에 4-시아노벤젠-1-술포닐 클로라이드 (42 mg, 0.208 mmol) 및 DIPEA (36 mg,0.28 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그 다음에, 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 결합하고 건조하고 농축시켰다. 잔여물을 예비 TLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (13.6 mg, 26%). MS (m/z): 383 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 9의 프로시져에 따라 통상의 기술자는 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 16

( R )-1-(1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-3-(3-시아노페닐)-1-메틸우레아

1,4-디옥산 (1 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (50 mg, 0.230 mmol) 및 3-이소시아나토벤조니트릴(37 mg, 0.257 mmol) 용액을 하룻밤동안 reflux하였다. 휘발성물질을 진공 하에 제거하고 잔여물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 362 (M+H)⁺.

하기 화합물을 통상의 기술자가 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 화합물 16의 프로시져에 따라 제조하였다.

화합물 18

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-2-(트리플루오로메틸)벤즈아미드

TFA (2 mL) 및 DCM (2 mL)에 용해시킨 (R)-테르트-부틸 3-(N-메틸-2-(트리플루오로메틸)벤즈아미도)피롤리딘-1-카르복실레이트(1 mmol) 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 농축시키고 물로 희석하였다. 그 다음에, pH가 ~9가 될 때까지 수성 NaHCO₃ 용액으로 염기화하고, EtOAc로 추출하였다. 결합된 추출물을 건조하고여과하고 농축시켜 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-2-(트리플루오로메틸)벤즈아미드를 수득하였다.

EtOH (3 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-2-(트리플루오로메틸)벤즈아미드 (1 mmol) 및 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (0.8 mmol) 용액에 DIPEA (2 mmol)을 실온에서 교반하면서 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤동안 reflux 하였다. 그 다음에, 혼합물을 농축시키고 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 390 (M+H)⁺.

하기 화합물을 통상의 기술자는 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 화합물 18의 프로시져에 따라 제조하였다.

화합물 23

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-(1 H -이미다졸-4-일) -N- 메틸아세트아미드

(A) ( R )-2-(1H-이미다졸-4-일) -N- 메틸 -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시) 메틸 )-7 H - 피롤로[ 2,3-d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3-일) 아세트아미드 .

THF에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (0.29 mmol), TBTU(0.35 mmol) 및 DIPEA (0.58 mmol) 용액에 2-(1H-이미다졸-4-일)아세트산 (0.29 mmol)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반한 뒤, 농축시키고 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 결합된 추출물을 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔여물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

(B) ( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-(1 H -이미다졸-4-일) -N- 메틸아세트아미드.

TFA (1 mL) 및 DCM (2 mL)에 용해시킨 (R)-2-(1H-이미다졸-4-일)-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)아세트아미드(0.11 mmol) 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔여물을 MeOH (2 mL)에 용해시키고 하룻밤동안 실온에서 에탄-1,2-디아민(0.2 mL)으로 처리하였다. 그 다음에, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고 잔여물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 326 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 23의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 29

1-(( R )-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-3-((1 R ,2 R )-2-히드록시-2,3-디하이드로-1 H -인덴-1-일)-1-메틸우레아

(A) 3-((1 R ,2 R )-2-히드록시-2,3-디하이드로-1 H -인덴-1-일)-1-메틸-1-(( R )-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)우레아.

무수 THF (2 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (0.29 mmol) 용액에 0℃에서 BTC를 첨가한 뒤 DIPEA(0.35 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하고 3시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 그 다음에, 0℃로 냉각하였다. (1R,2R)-1-아미노-2,3-디하이드로-1H-인덴-2-올 (0.35 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 그 다음에, 예비 TLC로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다.

(B) 1-(( R )-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-3-((1 R ,2 R )-2-히드록시-2,3-디하이드로-1 H -인덴-1-일)-1-메틸우레아.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 3-((1R,2R)-2-히드록시-2,3-디하이드로-1H-인덴-1-일)-1-메틸-1-((R)-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)우레아를 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 393 (M+H)⁺.

하기 화합물을 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 화합물 29의 프로시져에 따라 제조하였다.

화합물 39

( R ) -N- 시클로펜틸 -N- (프로프-2-이닐)-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민

( R)-테르트-부틸 3-(시클로펜틸(프로프-2-이닐)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트 (80 mg, 0.27 mmol)를 HCl (MeOH에 용해, 6N, 1 mL)로 2시간 동안 주위 온도에서 교반한 뒤 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 EtOH (3 mL)에 용해시키고 DIPEA (53 mg, 0.41 mmol)의 존재 하에 하룻밤 동안 환류 온도에서 4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(42 mg, 0.27 mmol)으로 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하고 잔여물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 310 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 39의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 63

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-클로로 -N- 메틸피리미딘-4-아민

DMF(6 mL)에 용해시킨 메틸 (R)-N-메틸-1-(7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (0.20 g, 0.92 mmol), 2,4-디클로로피리미딘 (0.18 g, 1.21 mmol) 및 DIPEA (0.25 g, 1.94 mmol) 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(5 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 8 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(2 x 30 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 크로마토그래피에 의해 실리카 겔(v. DCM/MeOH = 12/1) 상에 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 330 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 65의 프로시져에 따라 통상의 기술자가 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 103

( R )-4-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-3-플루오로벤조니트릴

DMSO (10 mL)에 용해시킨 메틸 (R)-N-메틸-1-(7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (0.50 g, 2.3 mmol), 3,4-디플루오로벤조니트릴 (0.48 g, 3.45 mmol) 및 DIPEA (0.59 g, 4.6 mmol)의 혼합물을 90℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수 (2 x 50 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (0.404 g, 52 % 수득률). MS (m/z): 337 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 103의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 119

( R )-3-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)벤조니트릴

(A) ( R )-3-(메틸(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)아미노)벤조니트릴.

N₂ 하에, 톨루엔 (2 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (50 mg, 0.14 mmol), 3-브로모벤조니트릴 (39 mg, 0.21 mmol), Pd₂(dba)₃ (1 mg, 0.002 mmol), BINAP (5 mg, 0.008 mmol) 및 t-BuONa (27 mg, 0.28 mmol)의 혼합물을 6시간 동안 환류 온도에서 교반하고, 주위 온도로 냉각하고, EtOAc (50 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 10 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄ 에 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 예비 TLC (DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 449 (M+H)⁺.

(B) ( R )-3-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-벤조니트릴.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-3-(메틸(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)아미노)벤조니트릴을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 319 (M+H)⁺.

화합물 120

( R ) -N- 메틸 -N- (4-(메틸술포닐)페닐)-1-(7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민

(A) ( R ) -N- 메틸 -N- (4-(메틸술포닐)페닐)-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시) 메틸)-7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민.

DMF (2 mL)에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (100 mg, 0.287 mmol) 및 1-플루오로-4-(메틸술포닐)벤젠 (150 mg, 0.861 mmol) 및 K₂CO₃ (158 mg, 1.142 mmol)의 혼합물을 120℃에서 하룻밤동안 교반한 뒤 주위 온도로 냉각하고, 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. EtOAc 층을 농축시키고, 예비 TLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

(B) ( R ) -N- 메틸 -N- (4-(메틸술포닐)페닐)-1-(7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-N-메틸-N-(4-(메틸술포닐)페닐)-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민을 사용하여 제조하였다.MS (m/z): 372 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 120의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 125

( R ) -N- (1-(7 H - 피롤로[ 2,3-d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3-일) -N- 메틸 -1 H -피라졸로[ 3,4-c ]피리딘 -5-아민

(A) ( R )- N ,4-디메틸-5-니트로 -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피리딘-2-아민.

NMP (1.5 mL) 에 용해시킨 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민 (0.287 mmol), 2-클로로-4-메틸-5-니트로피리딘 (0.347 mmol), 및 DIPEA (1.435 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 반응기에서 200℃에서 30분 동안 교반한 뒤 주위 온도로 냉각시켰다. 용액을 물에 붓고, EtOAc로 추출하고, 농축시키고, 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득률 86.3% 로 수득하였다.

(B) ( R ) -N- 메틸 -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-1 H -피라졸로[ 3,4-c ]피리딘-5-아민.

에탄올 (20 mL) 및 물 (5 mL)에 용해시킨 (R)-N,4-디메틸-5-니트로-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피리딘-2-아민 (0.248 mmol) 용액에 아이언 파우더 (0.752 mmol) 및 NH₄Cl (1.495 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 환류 온도에서 2시간 동안 교반하고, 냉각하고, 여과하였다. 여과물을 농축시키고, CH₃COOH (1.5 mL) 및 물 (2.5 mL)에 용해시켰다. 그 다음에, NaNO₂ (0.304 mmol)를 천천히 첨가하고, 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하고, 이어서 NH₃.H₂O로 처리하고 EtOAc (3 x 20 mL)로 세정하였다. 결합된 추출물을 농축시키고 잔여물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득률 33.0%로 수득하였다.

(C) ( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[ 2,3-d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-1 H -피라졸로[3,4- c ]피리딘-5-아민.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-아민을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 335 (M+H)⁺.

화합물 126

(R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(에틸)아미노)-니코티노니트릴

(A) ( R )-6-(에틸(1-(7-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-7 H - 피롤로[2,3- d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3-일)아미노) 니코티노니트릴 .

DMF(5.0 mL)에 용해시킨 (R)-6-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일아미노)니코티노니트릴 (200 mg, 0.46 mmol)의 용액에 NaH ( 55 mg, 2.3 mmol)를 부분으로 나누어 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 주위 온도에서 교반하고, 브로모에탄 (60 mg, 0.55 mmol) 을 한방울씩 첨가하고 반응 혼합물을 30분 더 주위 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (10 mL)로 담금질하고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 결합 추출물을 염수로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔여물을 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 464 (M+H)⁺.

(B) (R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(에틸)아미노)-니코티노니트릴.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-6-(에틸(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)아미노)니코티노니트릴을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 334 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 126의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 134

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-5-모르폴리노피라진-2-아민

(A) ( R ) -N- 메틸-5-모르폴리노 -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민.

NMP (0.5 mL)에 용해시킨 (R)-5-브로모-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민 (0.099 mmol) 및 모르폴린(1.5 mL)의 용액을 마이크로웨이브 반응기에서 195℃에서 2시간 동안 교반하였다. 주위 온도로 냉각한 후, 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 결합 유기 추출물을 농축시키고 잔여물을 실리카 겔 상 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

(B) ( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-5-모르폴리노피라진-2-아민.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-N-메틸-5-모르폴리노-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 381 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 134의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 139

( R )- N ⁴ -(1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)- N ² , N ⁴ -디메틸피리미딘-2,4-디아민

(R)-N-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-클로로-N-메틸피리미딘-4-아민 ( 26.0 mg, 0.08 mmol) 및 메틸아민 (THF에 용해, 2.0 M, 5.0 mL, 10.0 mmol)의 혼합물을 Initator^TM Biotage 마이크로웨이브 반응기에서 110℃에서 45분 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하고 잔여물을 실리카 겔 상에 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 325 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 139의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 142

( R )-2-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)피리미딘-5-카르보니트릴

5 mL의 DMFA에 용해시킨 (R)-N-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-브로모-N-메틸피리미딘-2-아민 ( 50.0 mg, 0.134 mmol), 디시아노징크 (15.7 mg, 0.134 mmol) 및 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (15.4 mg, 0.0134 mmol)의 혼합물을 Initator^TM Biotage 마이크로웨이브 반응기에서 120℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 15 mL 및 에틸 아세테이트 20 mL 사이에 분할하였다. 유기층을 염수로 세정하고, 건조하고, 농축하고 잔여물을 예비 TLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 321 (M+H)⁺.

화합물 143

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸피라진-2-아민

(A) ( R ) -N- 메틸 -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민.

EtOH (10.5 mL)에 용해시킨 (R)-5-브로모-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민 (55 mg, 0.10 mmol) 및 소듐 에톡시드 (680 mg, 10 mmol) 의 용액을 5일 동안 환류 온도에서 교반하였다. 그 다음에, 물로 처리하고 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 농축시키고 잔여물을 실리카 겔 상에 크로마토그래피로 정제하였다 (PE/EtOAc=1/1). 칼럼으로부터의 제 1화합물을 수집하여 (R)-5-에톡시-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)-메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민 [MS (m/z), 470 (M+1)⁺, 21 mg, 수득률 41.1%)인 것을 확인하고 칼럼으로부터의 그 후의 화합물을 분리하고 농축하여 표제 화합물을 수득하였다 (22 mg, 47.8% 수득률). MS (m/z), 426 (M+1)⁺

(B) ( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸피라진-2-아민.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 296 (M+H)⁺.

화합물 144

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-3,4'-비피리딘-6-아민

N₂ 하에서, DMF (5.0 mL)에 용해시킨 (R)-N-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-요오드-N-메틸피리딘-2-아민 (90.0 mg, 0.21 mmol), 피리딘-4-일 보론산(28.4 mg, 0.23 mmol), PdCl₂dppfㆍCH₂Cl₂ (17.2 mg, 0.02 mmol) 및 K₂CO₃ (0.058 g)의 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 그 다음에, 주위 온도로 냉각하고, 물 (5.0 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(3 x 5.0 mL)로 세정하고, Na₂SO₄ (무수)에 건조하고, 여과하고 농축시켰다. 잔여물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 372 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 144의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 151

N -(( R )-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-5-(1 H -피라졸-4-일)피라진-2-아민

(A) ( R ) -N- 메틸-5-(1 H -피라졸-4-일) -N- (1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민.

N₂ 하에서, 1,4-디옥산 (3 mL) / 물 (0.3 mL)에 용해시킨 (R)-5-브로모-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민 (64 mg, 0.127 mmol), 4-피라졸보론산 피나콜 에스테르(37 mg, 0.19 mmol), Pd(PPh₃)₄ (29 mg, 0.0254 mmol), Cs₂CO₃ (124 mg, 0.381 mmol)의 혼합물을 14시간 동안 환류 온도에서 교반하였다. 그 다음에, 주위 온도로 냉각하고, EtOAc 및 H₂O로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(50 mL)로 세정하고, Na₂SO₄에 건조하고, 진공에서 건조하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다.

(B) N -(( R )-1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-5-(1 H -피라졸-4-일)피라진-2-아민.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-N-메틸-5-(1H-피라졸-4-일)-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 362 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 151의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 153

N -(( R )-1-(7 H -피롤로[2,3 -d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-(1 H -이미다졸-1-일) -N- 메틸피라진-2-아민

(A) 5-(1 H -이미다졸-1-일) -N- 메틸 -N- (( R )-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3 -d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민.

NMP (2 mL) 에 용해시킨 (R)-5-브로모-N-메틸-N-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민 (50 mg, 0.0991 mmol ), 이미다졸 ( 14 mg, 0.198 mmol ), CuI ( 9.4 mg, 0.050 mmol ), Cs₂CO₃ ( 32 mg, 0.0991 mmol ), 및 1,10-페난트롤린 ( 9 mg, 0.050 mmol )의 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 180℃에서 45분 동안 교반하였다. 그 다음에, 주위 온도로 냉각하고 H₂O로 희석하고 EtOAc로 추출하고, 염수로 세정하고, 건조하고, 진공에서 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 상에 크로마토그래피에 의하여 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (20 mg, 41%).

(B) N -(( R )-1-(7 H -피롤로[2,3 -d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-(1 H -이미다졸-1-일) -N- 메틸피라진-2-아민.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 5-(1H-이미다졸-1-일)-N-메틸-N-((R)-1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피라진-2-아민을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 362 (M+H)⁺.

화합물 154

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸피리미딘-4-아민

수소 분위기 하에서, (R)-N-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-클로로-N-메틸피리미딘-4-아민 (30 mg, 0.09 mmol), Pd/C (10 wt.%, 20.0 mg)의 혼합물을 3.0 mL 메탄올에서 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과에 의해 제거하고 여과물을 농축시켰다. 잔여물을 예비 TLC(DCM/MeOH = 15/1)에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 296 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 154의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 160

( R ) -N- (1-(7 H - 피롤로[2,3- d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3-일) -N- 메틸 -5-(2 H - 테트라졸 -5-일)피리딘-2-아민

N,N-디메틸포름아미드(5.0 mL)에 용해시킨 (R)-6-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코티노니트릴 (100mg, 0.31mmol), 암모니아 클로라이드 (84 mg, 1.57 mmol) 및 소듐 아지드 (108 mg, 1.66 mmol)의 혼합물을 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 진공 하에 제거하고 잔여물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 363.0 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 160의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 162

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-에티닐 -N- 메틸피리딘-2-아민

(A) ( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-5-((트리메틸실릴)에티닐)피리딘-2-아민.

N₂ 하에서, DMF (3.0 mL)에 용해시킨 (R)-N-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-브로모-N-메틸피리딘-2-아민 (0.22 g, 0.58 mmol), 에티닐트리메틸실란 (0.22 mL, 1.6 mmol), Et₃N (0.24 mL, 1.5 mmol), CuI (5.0 mg, 0.03 mmol), PdCl₂(PPh₃)₂ (8.0 mg ,0.01 mmol) 및 PPh₃ (3.0 mg, 0.01mmol)의 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 교반하였다. 그 다음에, 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물(3 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 x 10 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(2 x 6 mL)로 세정하고, 무수 Na₂SO₄에 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 295 (M+H)⁺.

(B) ( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-5-에티닐 -N- 메틸피리딘-2-아민.

MeOH (4.0 mL)에 용해시킨 (R)-N-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-5-((트리메틸실릴)에티닐)피리딘-2-아민 (26 mg, 0.06 mmol) 및 K₂CO₃ (20.0 mg)의 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 제거하고 잔여물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 319 (M+H)⁺.

화합물 163

( R ) -N- (1-(7 H - 피롤로[2,3- d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3-일) -N- 메틸 -3 H - 이미다조[4,5- b ]피리딘 -5-아민

에탄올 (35 mL)에 용해시킨 (R)-N ²-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-N ²-메틸-5-니트로피리딘-2,6-디아민 (320 mg, 0.90 mmol)의 용액을 가스제거하고 N₂로 제거(purged)하였다. Pd/C (10%, 100 mg)를 첨가하고, 가스제거하고 H₂로 제거한 뒤 수소 분위기 하에서 주위 온도에서 20시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과에 의해 제거하고 여과물을 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 325 (M+H)⁺.

(B) ( R ) -N- (1-(7 H - 피롤로[2,3- d ]피리미딘 -4-일) 피롤리딘 -3-일) -N- 메틸 -3 H -이 미다조[4,5- b ]피리 딘-5-아민.

메탄올 (3.0 mL)에 용해시킨 (R)-N ²-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-N ²-메틸피리딘-2,5,6-트리아민 (35 mg, 0.11 mmol), 트리에톡시메탄 (0.58 mL, 3.45mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산 모노하이드레이트 (62mg, 0.33 mmol)의 용액을 Initator^TM Biotage 마이크로웨이브 반응기에서 150℃에서 5분 동안 교반하였다. 휘발성물질을 제거하고 잔여물을 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 335 (M+H)⁺.

화합물 164

( R )-5-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-1 H -이미다조[4,5- b ]피리딘-2(3 H )-온

테트라히드로푸란 (3.0 mL)에 용해시킨 (R)-N ²-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-N ²-메틸피리딘-2,5,6-트리아민 (35 mg, 0.11 mmol,) 및 1,1'-카르보닐디이미다졸 (21 mg, 0.13 mmol) 용액을 환류 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 제거하고 잔여물을 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 351 (M+H)⁺.

화합물 165

( R )-3-(1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-옥소-2,3-디하이드로-1 H -이미다조[4,5- b ]피리딘-6-카르보니트릴

(A) ( R )-6-(1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일아미노)-5-아미노니코티노니트릴.

표제 화합물을 화합물 163 (A)의 프로시져에 따라 (R)-6-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일아미노)-5-니트로니코티노니트릴을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 321 (M+H)⁺.

(B) ( R )-3-(1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-2-옥소-2,3-디하이드로-1 H -이미다조[4,5- b ]피리딘-6-카르보니트릴.

표제 화합물을 화합물 164의 프로시져에 따라 (R)-6-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일아미노)-5-아미노니코티노니트릴을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 347 (M+H)⁺.

화합물 166

( R )-4-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-3-아미노벤조니트릴

표제 화합물을 화합물 163의 프로시져에 따라 (R)-4-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-3-니트로벤조니트릴을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 334 (M+H)⁺.

화합물 167

( R ) -N- (1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일) -N- 메틸-3 H -[1,2,3]트리아졸로[4,5- b ]피리딘-5-아민

물(0.6 mL)에 용해시킨 (R)-N ²-(1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)-N ²-메틸피리딘-2,5,6-트리아민(50 mg, 0.15 mmol,) 현탁액에 농축 황산(23 uL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 0℃로 냉각하고 수성 소듐 니트라이트 (17 mg, 0.25 mmol, 0.1 mL의 물에 용해)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 수성 NaHCO₃ (10%)로 pH가 5가 될 때까지 중성화하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수(2 x 10 mL)로 세정하고, 농축하고, 잔여물을 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 336 (M+H)⁺.

화합물 168

( R )-메틸 6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코티네이트

염화수소(6M, MeOH에 용해, 5.0 ml)에 용해시킨 (R)-6-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코티노니트릴 (31.9 mg, 0.1 mmol) 용액을 65℃에서 14시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하고 잔여물을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 353 (M+H)⁺.

화합물 169

( R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코틴아미드

MeOH (1.0 mL)에 용해시킨 (R)-6-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코티노니트릴 (31.9 mg, 0.1 mmol), 수성 소듐 하이드록사이드 (1.0 M, 0.7 mL, 0.7 mmol,) 및 과산화수소 (30% in H₂O, 0.3 mL) 용액을 주위 온도에서 2시간 동안 교반한 뒤 과산화물이 검출되지 않을 때까지 수성 Na₂S₂O₃ (10%)로 처리하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하고 잔여물을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 결합된 추출물을 염수로 세정하고, 농축시키고 잔여물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 338 (M+H)⁺.

화합물 170

( R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코틴산

농축 염산(5.0 mL)에 용해시킨 (R)-6-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코티노니트릴(160 mg, 0.5 mmol) 용액을 100℃에서 14시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 339 (M+H)⁺.

화합물 171

( R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노) -N- 시클로프로필니코틴아미드

DMF (2 mL)에 용해시킨 (R)-6-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)니코틴산 (33.8mg, 0.1 mmol) 용액에 시클로프로필아민 (5.71 mg, 0.2 mmol), DIPEA (26 mg , 0.2 mmol) 및 HATU (38.0 mg, 0.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 휘발성물질을 감압 하에 제거하고 잔여물을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 378 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 171의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 210

( R ) -N- (6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)피리딘-3-일)에탄술폰아미드

(A) ( R )-에탄술폰산[6-( 메틸 -{1-[7-(2- 트리메틸실라닐 - 에톡시메틸 )-7 H - 피롤로[2,3- d ]피리미딘 -4-일]- 피롤리딘 -3-일}-아미노)-피리딘-3-일]-아미드.

DCM (5 mL)에 용해시킨 (R)-N ²-메틸-N ²-{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-피리딘-2,5-디아민 (0.25 mmol) 용액에 에탄술포닐 클로라이드 (0.3 mmol)를 첨가하고 Et₃N (0.3 mmol)를 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 18시간 동안 교반한 뒤 농축시켰다. 조 생성물을 예비 TLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득률 42%로 수득하였다.

(B) ( R ) -N- (6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-피리딘-3-일)에탄술폰아미드.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-에탄술폰산 [6-(메틸-{1-[7-(2-트리메틸실라닐-에톡시메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일]-피롤리딘-3-일}-아미노)-피리딘-3-일]-아미드를 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 402 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 210의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는 적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 230

( R )- N ⁵ -(4-플루오로벤질)- N ² -(1-(7 H -피롤로[2,3 -d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)- N ² -메틸피리딘-2,5-디아민

(A) ( R )- N ⁵ -(4-플루오로벤질)- N ² -메틸- N ² -(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피리딘-2,5-디아민.

DMF (5 mL)에 용해시킨 (R)-N ² -메틸-N ² -(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피리딘-2,5-디아민 (0.20 mmol) 용액에 실온에서 K₂CO₃ (0.24 mmol) 및 1-클로로메틸-4-플루오로-벤젠 (0.24 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 교반하고, 물에 붓고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 물로 세정한 뒤 염수로 세정하고 농축시켰다. 잔여물을 예비 TLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득률 30%로 수득하였다.

(B) ( R )- N ⁵ -(4-플루오로벤질)- N ² -(1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)- N ² -메틸피리딘-2,5-디아민.

표제 화합물을 화합물 23(B)의 프로시져에 따라 (R)-N ⁵ -(4-플루오로벤질)-N ² -메틸-N ² -(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)피리딘-2,5-디아민을 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 418 (M+H)⁺.

화합물 231

( R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)- N , N -디메틸피리딘-3-술폰아미드

(A) 6-클로로- N , N -디메틸피리딘-3-술폰아미드.

THF (2 mL)에 용해시킨 6-클로로피리딘-3-술포닐 클로라이드 (1 mmol), 디메탈아민 (2 mmol) 및 Et₃N (2 mmol) 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 염수로 세정하고 건조하고 여과하고 농축시켜 표제 화합물을 수득률 95%로 수득하였다.

(B) ( R )- N,N -디메틸-6-(메틸(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)아미노)피리딘-3-술폰아미드.

NMP (2 mL)에 용해시킨 6-클로로-N,N-디메틸피리딘-3-술폰아미드 (1 mmol) 및 DIPEA (2.5 mmol) 용액에 (R)-N-메틸-1-(7-((2-(트리메틸실릴) 에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-아민(0.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 200℃에서 60분 동안 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 염수로 세정하고, 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 잔여물을 MeOH/H₂O로 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색의 표제 화합물을 수득률 8%로 수득하였다.

(C) ( R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ] 피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)- N , N -디메틸피리딘-3-술폰아미드.

표제 화합물을 화합물 23 (B)의 프로시져에 따라 (R)-N,N-디메틸-6-(메틸(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)아미노)피리딘-3-술폰아미드를 사용하여 제조하였다. MS (m/z): 402 (M+H)⁺.

하기 화합물을 화합물 231의 프로시져에 따라 통상의 기술자라면 알 수 있는

적절한 조건 하에 당해 중간체 및 시약을 사용하여 제조하였다.

화합물 260

( R )-6-((1-(7 H -피롤로[2,3- d ]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-2-히드록시니코티노니트릴

(R)-6-((1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)피롤리딘-3-일)(메틸)아미노)-2-메톡시니코티노니트릴(0.43 mmol)을 HCl (농축, 0.4 mL) 및 TFA (2.0 mL)의 혼합물에 용해시켰다. 혼합물을 7시간 동안 reflux하고, 감압 하에 농축시키고, 예비 HPLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. MS (m/z): 336 (M+H)⁺.

실시예 2

효소적 측정법(Enzymatic Assay)

JAK1/2/3 키나아제 분석법을 Kit-Tyr 6 펩타이드 (Invitrogen, Cat.No. PV4122)를 사용하여 in vitro 수행하였다. TYK2 키나아제 분석법을 Z'-LYTE^TM Kinase Assay Kit-Tyr 3 펩타이드(Invitrogen, Cat.No. PV3192)를 사용하여 in vitro 수행하였다. 재조합(Recombinant) 인간 JAK1/2/3 또는 TYK2 촉매 도메인(catalytic domains)은 Invitrogen (Cat No. PV4774/PV4210/PV3855/PV4790) 제품이다; 모든 반응(20 ㎕)을 4% DMSO 용액에 용해시킨 시험 화합물 2.5 ㎕, 5 ㎕ 의 키나아제/펩타이드 기질 혼합물 (재조합 인간 JAK1/2/3 촉매 도메인에 3.2, 0.04, 0.2 또는 8 ㎍/mL , Z-LYTE^TM Tyr 6 펩타이드 또는 Z-LYTE^TM Tyr 3 펩타이드에 4 μM ) 또는 포스포-펩타이드 용액 (Invitrogen, Cat.No. PV3192, diluted with 1.33x Kinase Buffer), 2.5 ㎕ ATP 용액 (300/100/40/100μM, JAK1/JAK2/JAK3/TYK2) 또는 1.33 x Kinase Buffer (Invitrogen, Cat. No. PV3189, 증류수로 5x 희석)을 첨가함으로써 시작한다. 384-웰 assay plate (Corning, Cat.No. 3575)를 혼합하고 실온에서 1시간 동안 배양한다. JAK1, JAK2 및 JAK3 분석을 위하여 5 ㎕의 현상액 (Dilute Development Reagent A (Cat.No.PV3297)을 현상 버퍼(Cat.No.PV3127)로 1/64로 희석한다；TYK2 분석을 위하여 현상 시약 A (Cat.No.PV3297)를 현상 버퍼(Cat.No.PV3127)로 1/2048로 희석한다. 그 다음에, 희석된 현상액을 각 웰에 첨가하고, 혼합하고 실온에서 1시간 더 배양한다. 그 다음에, 키나아제 반응을 스톱 시약(Invitrogen, Cat.No. PV3094) 5 ㎕을 첨가하여 멈추고, 플레이트를 Wallac 1420 VICTOR³ Multilabel Counter (PerkinElmer^TM) 에 445 nm 및 520 nm 형광에 읽힌다. 모든 화합물을 처음에 1:3 연속 희석 계획을 사용하여 8개의 다른 농도(1μM 내지 0.0003μM)에서 시험한다.

본 명세서에 기재된 화합물의 대부분은 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제를 IC₅₀ < 1.0 uM로 저해하였다.

실시예 3

세포 측정법(Cellular Assays)

IL-6-유도 STAT3 인산화반응의 측정을 위하여, HepG2 세포 (SIBS)를 무혈청 DMEM 배지에서 하룻밤동안 웰 당 5.4×10³세포로 96 웰 플레이트에 시딩하고, 다양한 농도의 희석된 화합물의 존재 하에 또는 없이 37℃, 5% CO₂에서 30분동안 배양하였다. 각 웰에 10 ng/ml 인간 재조합 IL-6을 첨가하여 세포를 37℃, 5% CO₂에서 15분 동안 자극하였다. 그 다음에, 세포를 실온에서 45분 동안 2% 파라포름알데히드에서 고정시키고 30분 동안 얼음처럼 차가운 메탄올에서 배양하였다. PBS에서 세정한 후, 세포를 rabbit anti-phospho-STAT3 (Y705) (Cell Signaling Technologies, 항체 희석액에서 1:1000) 1차 항체와 함께 4℃에서 하룻밤동안 배양하였다. Goat anti-rabbit IgG Alexa 488 (Invitrogen, PBS에서 1:1,000 희석) 2차 항체를 PBS 세정 전에 90분 동안 첨가한다. 세포를 7.5uM 프로피디움 요오드화물, 100㎍/ml RNaseA, PBS 용액의 하기 배양에서 어둠 속에서 60분 동안 카운팅한다. 플레이트를 Acumen X3 instrument (TPP Labtech)에 읽힌다.

IL-3-유도 STAT5 인산화반응의 측정을 위하여, TF-1 세포(ATCC)를 10% FBS RPMI-1640 배지에서 37℃, 5% CO₂에서 3시간 동안 웰 당 1×10⁴ 세포로 96 웰 플레이트에 둔다. 세포를 다양한 농도의 희석된 화합물의 존재 하에 또는 없이 37℃에서 5% CO₂로 30분 동안 배양하였다. 세포를 각 웰에 10 ng/ml 인간 재조합 IL-3을 첨가함으로써 37℃, 5% CO₂로 30분 동안 자극하였다. 그 다음에, 세포를 실온에서 45분 동안 2% 파라포름알데히드에 고정하고 30분 동안 얼음처럼 차가운 메탄올에 배양하였다. PBS에서 세정한 후, 세포를 rabbit anti-phospho-STAT5 (Y694) (Cell Signaling Technologies, 항체 희석 용액에서 1:1000) 1차 항체로 4℃에서 하룻밤동안 배양하였다. PBS 세정 90분 전에 Goat anti-rabbit IgG Alexa 488 (Invitrogen, PBS에서 1:1,000 희석) 2차 항체를 첨가한다. 세포를 7.5uM 프로피디움 요오드화물, 100㎍/ml RNaseA, PBS 용액의 하기 배양에서 어둠 속에서 60분 동안 배양한다. 플레이트를 Acumen X3 instrument (TPP Labtech)에 읽힌다.

IL-4-유도 STAT6 인산화반응의 측정을 위하여, Ramos 세포 (ATCC)를 10% FBS RPMI-1640에서 웰 당 1.0×10⁴ 세포로 96 웰 플레이트에 두고 37℃, 5% CO₂로 3시간동안 배양한다. 세포를 interleukin-4 (10ng/ml final)로 30분 더 자극하기 전에 30분 동안 화합물로 배양하였다. 그 다음에, 세포를 2% 파라포름알데히드에서 45분 동안 고정하고 30분 동안 얼음처럼 차가운 메탄올에 배양하였다. PBS에서 세정 후, 세포를 rabbit anti-phospho-STAT6 (Y641) (Cell Signaling Technologies, 항체 희석액에 1:1000) 1차 항체와 함께 4℃에서 하룻밤동안 배양하였다. Goat anti-rabbit IgG Alexa 488 (Invitrogen, PBS에서 1:1,000 희석) 2차 항체를 PBS 세정 전에 90분 동안 첨가하였다. 세포를 하기 배양에서 7.5uM 프로피디움 요오드화물, 100㎍/ml RNaseA, PBS 용액에서 어둠 속에서 60분 동안 카운팅하였다. 플레이트를 Acumen X3 instrument (TPP Labtech)에 읽힌다.

저해 퍼센트는 하기 식으로 계산한다:

저해 (%) = 100-((저해제 처리-세포) / (자극제-세포))×100

여기서: 저해제 처리는 화합물 및 자극제(IL-6, IL-3 또는 IL-4)로 처리한 웰의 세포 활성화 퍼센트를 나타내고; 세포는 화합물이나 자극제(IL-6, IL-3 또는 IL-4)로 처리하지 않은 웰의 세포 활성화 퍼센트를 나타낸다. 자극제는 자극제(IL-6, IL-3 또는 IL-4)로만 처리한 웰의 세포 활성화 퍼센트를 나타낸다.

본 명세서에 기재한 화합물의 대부분은 세포 측정법에서 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2로부터 선택되는 적어도 하나의 키나아제를 IC₅₀ ＜ 10.0 uM로 저해하였다.

예를 들어, 상기 JAK1 키나아제 측정법에서, 본 발명의 화합물은 0.3 uM 농도(IR%)에서 하기 저해 퍼센트를 갖는다:

화합물 1, 3, 6, 7, 10, 12, 14, 15, 16, 17, 20, 21, 24, 27, 28, 29, 30, 31, 33, 38, 40, 41, 42, 45, 46, 47, 48, 49, 52, 53, 55, 56, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 67, 68, 70, 71, 72, 73, 74, 77, 79, 80, 81, 83, 84, 85, 86, 87, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 111, 112, 114, 115, 117, 119, 121, 122, 123, 124, 126, 127, 129, 131, 132, 133, 134, 136, 138, 144, 147, 150, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 161, 162, 163, 164, 167, 168, 170, 171, 174, 176, 177, 178, 179, 180, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 190, 191, 192, 195, 197, 199, 201, 202, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 212, 214, 218, 219, 220, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 229, 230, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 259, 260, 261, 262의 IR% 값은 50% 부터 100%미만의 범위이다;

화합물 4, 5, 8, 9, 11, 13, 19, 35, 43, 44, 39, 54, 57, 58, 65, 66, 75, 76, 78, 88, 100, 109, 110, 113, 116, 118, 120, 130, 135, 141, 142, 146, 148, 151, 160, 165, 166, 169, 172, 173, 175, 188, 189, 193, 194, 196, 198, 200, 203, 213, 221, 228, 232, 250, 257의 IR% 값은 20%부터 50% 미만의 범위이다.

또한, 상기 JAK1 키나아제 측정법에서, 화합물 1, 16, 21, 30, 33, 36, 37, 42, 67, 68, 77, 86, 104, 105, 106, 119, 121, 122, 123, 124, 125, 127, 128, 144, 154, 155, 161, 202, 214, 215, 217, 218, 219, 233, 234, 236, 237, 238, 239, 241, 242, 243, 245, 246, 247, 251, 252, 253, 254, 259의 IC₅₀ 값은 0.001 uM 에서 0.1 uM 미만의 범위이다.

상기 JAK2 키나아제 측정법에서, 화합물 1, 40, 41, 42, 46, 47, 48, 60, 61, 62, 63, 64, 66, 67, 71, 73, 80, 81, 84, 86, 87, 91, 92, 93, 94, 98, 99, 102, 103, 104, 111, 114, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 128, 129, 131, 134, 153, 155, 156, 157, 159, 161, 162, 163, 164, 168, 171, 174, 176, 179, 182, 184, 185, 187, 190, 192, 201, 202, 204, 208, 209, 210, 212, 236, 241, 242의 IC₅₀ 값은 0.001 uM 에서 0.1 uM 미만의 범위이다;

화합물 3, 6, 7, 10, 12, 16, 17, 30, 49, 52, 53, 55, 56, 57, 58, 68, 70, 72, 77, 79, 83, 85, 89, 90, 96, 97, 101, 107, 108, 115, 130, 136, 147, 154, 158, 160, 167, 170, 178, 195, 207, 217, 218, 239, 243, 252, 259의 IC₅₀ 값은 0.1 uM 에서 1 uM 미만의 범위이다.

상기 JAK3 키나아제 측정법에서, 화합물 42, 63, 66, 67, 121, 126, 129, 134, 162, 182, 208, 209, 236의 IC₅₀ 값은 0.001 uM 에서 0.1 uM 미만의 범위이다;

화합물 1, 17, 25, 40, 41, 48, 60, 62, 64, 70, 71, 73, 77, 79, 80, 81, 84, 86, 87, 91, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 102, 103, 104, 107, 111, 114, 131, 153, 156, 159, 163, 164, 168, 171, 174, 179, 184, 187, 190, 201, 202, 210의 IC₅₀ 값은 0.1 uM 에서 1 uM 미만의 범위이다.

실시예 2 및 3에서 시험한 일부 화합물의 실험 데이터를 하기 표에 나타낸다.

Claims (30)

1. 하기 식 (I)로 표시되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
   

   

   
   여기서,
   R¹ 은 수소, 선택적으로 C₂-C₆ 알키닐 또는 C_3-8 시클로알킬로 치환된 C_1-6 알킬, 및 C_3-8 시클로알킬로부터 선택되고,
   R² 는
   

   

   
   로부터 선택되는 아릴, 헤테로사이클 또는 헤테로아릴이고,
   상기 R²의 아릴, 헤테로사이클 및 헤테로아릴 각각은 하나 이상의 할로로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬; -CN, C_1-4 알콕시 및 할로로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐; C_2--6 알키닐; -C(O)OR^b; -CN; -C(O)NR^cR^d; 할로; C₁­C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 모르폴리닐 또는 피페라지닐; 피리디닐, 티에닐, 피라졸릴, 이미다졸릴 및 테트라졸릴로부터 선택되는 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 기로 치환되며;
   상기 헤테로아릴은 C_1-4 알킬; -NR^cR^d; -NR^eC(O)R^a; -NR^eS(O)_nR^f; -NO₂; 옥소; -OR^b; -S(O)_nR^f 및 -S(O)_nNR^cR^d 로 선택적으로 치환되고,
   m은 1이며,
   n은 2이고,
   상기 R^a 는 C_3-8 시클로알킬, ­OC₁­C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬, 또는 할로로 선택적으로 치환되는 페닐이며;
   상기 R^b 는 수소 또는 C_1-6 알킬이고,
   상기 R^c 및 R^d 는 각각 수소; OH, ­OC₁­C₄ 알킬, ­N(C₁­C₄ 알킬)(C₁­C₄ 알킬)로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 C_1-6 알킬; 할로, 테트라히드로푸라닐, 및 C_3-8 시클로알킬로 선택적으로 치환된 C_1-6 알킬; C_2-6 알키닐; -OH로 선택적으로 치환되는 C_3-8 시클로알킬; 할로, C₁­C₄ 알킬 및 ­OC₁­C₄ 알킬로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 페닐; -OH로 선택적으로 치환되는 인다닐; 옥세타닐; 테트라히드로피라닐; 피리디닐, 티아졸릴 및 피라졸릴로부터 선택된 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되고, 상기 헤테로아릴은 C₁­C₄ 알킬로 선택적으로 치환되거나;
   상기 R^c 및 R^d 는 그들이 부착되는 질소와 함께, 결합하여 피롤리디닐, 피페라지닐 및 모르폴리닐로부터 선택되는 헤테로사이클 고리를 형성하고, 상기 헤테로사이클은 -C₁-C₄ 알킬-O-C₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환되며;
   상기 R^e는 수소이고;
   상기 R^f는 수소; 할로, 또는 할로 및 C₁-C₄ 알킬로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; C_3-8 시클로알킬; 피리디닐 또는 티에닐이다.
2. 삭제
3. 제 1항에 있어서,
   상기 R¹ 은 C_3-8 시클로알킬로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
4. 제 1항에 있어서,
   상기 R² 는
   

   

   
   로부터 선택되는 아릴 또는 헤테로아릴이고,
   상기 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 하나 이상의 할로로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬; CN으로 선택적으로 치환되는 페닐; -C(O)OR^b; -CN; -C(O)NR^cR^d; 할로; C₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 모르폴리닐 및 피페라지닐; 피리디닐, 티에닐, 피라졸릴, 이미다졸릴 및 테트라졸릴로부터 선택되는 헤테로아릴로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되며,
   상기 헤테로아릴은 C₁-C₄ 알킬; -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eS(O)_nR^f, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d 로 선택적으로 치환되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
5. 제 4항에 있어서,
   상기 R²는 하나 이상의 할로로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬; CN으로 선택적으로 치환되는 페닐; -C(O)OR^b; -CN; -C(O)NR^cR^d; 할로; C₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 모르폴리닐 및 피페라지닐; 피리디닐, 티에닐, 피라졸릴, 이미다졸릴 및 테트라졸릴로부터 선택되는 헤테로아릴로서, 상기 헤테로아릴은 C₁-C₄ 알킬; -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eS(O)_nR^f, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d 로 치환되는

   

   인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
6. 제 5항에 있어서,
   상기 R²는
   -CN;
   할로;
   할로 C_1-6 알킬;
   -NO₂;
   아미노;
   -S(O)_nR^f (여기서, n 은 2이고, R^f 는 C_1-6 알킬 또는 할로 C_1-6 알킬이다.);
   -CN, C_1-6 알콕시 및 할로로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐;
   -OH로 선택적으로 치환되는 인다닐;
   테트라졸릴; 및
   -C(O)NR^cR^d (여기서, R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 -H; -OH 또는 ­OC₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환된 C_1-6 알킬; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; 및 -OH로 선택적으로 치환된 인다닐로부터 선택된다.)
   로부터 선택되는 하나 이상의 기로 치환되는
   

   

   인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
7. 제 4항에 있어서,
   상기 R²는 하나 이상의 할로로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬; CN으로 선택적으로 치환되는 페닐; C(O)OR^b; -CN; -C(O)NR^cR^d; 할로; C₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 모르폴리닐 및 피페라지닐; 피리디닐, 티에닐, 피라졸릴, 이미다졸릴 및 테트라졸릴로부터 선택되는 헤테로아릴이고, 상기 헤테로아릴은 C₁-C₄ 알킬; -NR^cR^d, -NR^eC(O)R^a, -NR^eS(O)_nR^f, -NO₂, -OR^b, -S(O)_nR^f, 및 -S(O)_nNR^cR^d 로 선택적으로 치환되는

   

   인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
8. 제 7항에 있어서,
   상기 R²는
   -CN;
   할로;
   -NO₂;
   C_1-6 알킬;
   아미노;
   할로 C_1-6 알킬;
   -CN으로 선택적으로 치환되는 페닐;
   테트라졸릴, 티에닐, 피리디닐 및 피라졸릴로부터 선택되고, C₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 헤테로아릴;
   -OR^b (여기서, R^b 는 -H 또는r C_1-6 알킬이다.);
   -S(O)_nR^f (여기서, n 은 2이고, R^f 는 C_1-6 알킬이다.);
   C(O)OR^b (여기서, R^b 는 H or C_1-6 알킬이다.);
   -C(O)NR^cR^d (여기서, R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 -H; -OH로 선택적으로 치환된 C_3-8 시클로알킬; -OH 및 페닐로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 C_1-6 알킬; C₁-C₄ 알킬, C₁-C₄ 알콕시 및 할로로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐; 피리디닐 및 티아졸릴로부터 선택된다.);
   -NR^eS(O)_nR^f, (여기서, n 은 2, R^e 은 H이고, R^f 는 C_1-6 알킬; C_3-8 시클로알킬; 할로 및 C₁-C₄ 알킬로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 벤질; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; 티에닐; 또는 피리디닐이다.);
   -NR^eC(O)R^a, (여기서, R^e 는 H, R^a 는 C_3-8 시클로알킬; 할로로 선택적으로 치환되는 페닐; 또는 -OC₁-C₄ 알킬로 치환된 C_1-6 알킬이다.);
   -NR^cR^d, (여기서, R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 할로로 선택적으로 치환되는 벤질이다); 및
   -S(O)_nNR^cR^d (여기서, n 은 2, R^c 및 R^d 는 각각 -H; C_3-8 시클로알킬, 테트라히드로푸라닐, 할로로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 페닐, 및 -OR^b 로부터 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고, R^b는 -H 또는 C₁-C₄ 알킬; -OH 로 선택적으로 치환되는 C_3-8 시클로알킬; -OH 로 선택적으로 치환되는 인다닐; 테트라히드로푸라닐; 옥세타닐; C₁-C₄ 알킬로 선택적으로 치환되는 피라졸릴; 및 할로로 선택적으로 치환되는 페닐로부터 선택되거나; 또는 R^c 및 R^d 는 그들이 부착되는 질소와 함께 피롤리디닐, 피페라지닐 및 모르폴리닐로부터 선택되는 헤테로사이클 고리를 형성한다.)
   로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는
   

   

   인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
9. 제 4항에 있어서,
   상기 R²는 -CN, C_1-6 알콕시, 모르폴리노, 피라졸릴, 이미다졸릴, 및 -NR^cR^d (여기서 R^c 및 R^d 는 각각 선택적으로 -OH로 치환되는 C_3-8 시클로알킬 및 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택된다)로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 피라지닐인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
10. 제 4항에 있어서,
    상기 R² 는 -CN, 할로 및 할로C_1-6 알킬로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 피리다지닐인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
11. 제 4항에 있어서,
    상기 R² 는 -CN, 할로, -NO₂, -OR^b, 및 -NR^cR^d (여기서, R^b, R^c 및 R^d 는 각각 독립적으로 -H 및 C_1-6 알킬로부터 선택된다.)로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 피리미디닐인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
12. 제 4항에 있어서,
    상기 R¹은 C_1-3 알킬 및 시클로프로필로부터 선택되고, 상기 C_1-3 알킬은 에티닐 및 시클로프로필로부터 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
13. 제 12항에 있어서,
    상기 R¹은 메틸인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
14. 제 1항에 있어서,
    -N(R¹)(R²)기를 지니는 절대 스테레오센터(absolute stereocenters)는 R-이소머인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
15. 제 12항에 있어서,
    -N(R¹)(R²)기를 지니는 절대 스테레오센터(absolute stereocenters)는 R-이소머인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
16. 제 13항에 있어서,
    -N(R¹)(R²)기를 지니는 절대 스테레오센터(absolute stereocenters)는 R-이소머인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
17. 제 1항에 있어서,
    상기 화합물은,
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    

    

    
    로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
18. 제 1항 및 제 3항 내지 제 17항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 염증질환 치료용 약학 조성물.
19. 제 1항 및 제 3항 내지 제 17항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 암 치료용 약학 조성물.
20. 제 1항 및 제 3항 내지 제 17항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 제 1항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과는 다른 항종양제를 포함하는 암 치료용 약학 조성물.
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