이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한 다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[제조예 1] 화합물 I 의 제조
3, 4-다이플루오르니트로벤젠 (158 g, 0.99 mol)을 아세토니트릴 (800 mL)에 녹인 후 에탄올아민 (117 g, 1.9 mol)을 넣고 4시간 동안 환류 교반했다. 상기 반응물을 상온으로 식힌 후, 감압농축하고 다이에틸이서(diethylether)로 고체화(trituration) 한 뒤 여과하여 노란색의 화합물 I (199 g, 0.99 mol, 100%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 7.97 (d, 1H, J = 8.8Hz), 7.87 (dd, 1H, J 1 = 11.6 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 6.65 (t, 1H, J = 8.8 Hz), 5.10-4.87 (bs, 1H), 3.97-3.83(m, 2H), 3.43-3.37(m, 2H).
[제조예 2] 화합물 II 의 제조
화합물 I (100 g, 0.5 mol), TBS-Cl (t-butyldimethylsilyl chloride, 97g, 0.65 mol) 및 이미다졸 (51 g, 0.75 mol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (700 mL)에 녹인 뒤 서서히 상온으로 올려 밤새 교반하였다. 상기 반응물을 감압농축 한 다음, 에틸아세테이트에 녹여 0.5 N HCl 로 세척하고, 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 알코올에 tbs 기가 붙은 화합물을 정량적으로 얻었다. 이 화합물을 THF (500 mL)에 녹인 뒤, 1.2 당량의 Boc2O 와 0.1 당량의 DMAP (4-dimethylaminopyridine)를 넣어주고 3시간 동안 상온에서 교반 시킨 뒤, 암모니아 수 (30 mL)를 넣고 다시 20분간 교반 시키고 감압농축 하였다. 농축액을 다시 에틸아세테이트에 녹인 뒤, 0.5 N HCl, 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 화합물 II 를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 8.06-7.98 (m, 1H), 7.95 (dd, 1H, J 1 = 10.2 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.57 (t, 1H, J = 7.8 Hz), 3.80 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 3.73 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 1.42 (s, 9H), 0.81 (s, 9H), 0.01 (s, 6H).
[제조예 3] 화합물 III 의 제조
화합물 II (92 g, 0.22 mol)을 메탄올 (600 mL)에 녹인 뒤 Pd/C (6 g)을 넣고 수소가스 풍선하에서 4시간 동안 교반하였다, 셀라이트(celite)를 이용하여 여과 한 후 감압농축하여 무색의 오일 화합물 III (86g)을 정량적으로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, chloroform-d1) δ 6.99 (t, 1H, J = 12.0 Hz), 6.44-6.30 (m, 2H), 3.81-3.63 (m, 4H), 3.63-3.52 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.35 (s, 6H), 0.86 (s, 9H), 0.03 (s, 6H).
[제조예 4] 화합물 IV 의 제조
화합물 III (86 g, 0.22 mol)을 다이클로로메탄 (300 mL)에 녹인 뒤 1N NaOH 수용액 (300 mL)을 넣고 교반하면서 서서히 Cbz-Cl (benzyl chloroformate, 38 mL, 0.27 mol)를 적가 하였다. 상온에서 1시간동안 교반 한 후, 유기층을 분리하여 물로 두번 세척하고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 노란색 오일 화합물 IV (116 g)를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.44-7.32 (m, 6H), 7.18 (t, 1H, J = 8.1 Hz), 6.96 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.84-6.66 (bs, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.82-3.63 (m, 2H), 3.63-3.58 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.35 (s, 6H), 0.86 (s, 9H), 0.02 (s, 6H).
[제조예 5] 화합물 V 의 제조
화합물 IV (116 g, 0.22 mol)을 THF (400 mL)에 녹인 뒤, n-부틸리튬(n-butyllithium, 2.5M solution in n-Hexane) (90 mL, 0.23 mol)을 -78℃에서 서서히 적가하고 20분간 교반하였다. (R)-글리시딜 부티레이트 ((R)-Glycidyl butyrate, 31.5 mL, 0.23 mol)를 넣은 뒤, 서서히 상온으로 올리며 3시간 동안 교반하고 암모늄 클로라이드 수용액으로 pH 를 6 정도로 맞춘 뒤 감압농축하였다. 농축액을 80% 에틸아세테이트/헥산으로 녹인 뒤, 물과 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하였다. 이 농축액을 40% 에틸아세테이트/헥산 용액으로 컬럼크로마토그래피를 이용하여 분리하여 무색 오일 화합물 V (45 g, 0.093 mol, 42%)를 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.50-7.48(m, 1H), 7.30-7.28(m, 1H), 7.17- 7.16(m, 1H), 4.74-4.70(m, 1H), 4.03-4.02(m, 1H), 3.98(m, 2H), 3.75(m, 3H), 3.65(m, 2H), 1.51(s, 3H), 1.36(s, 6H), 0.85(s, 9H), 0.02(s, 6H).
[제조예 6] 화합물 VI 의 제조
화합물 V (45 g, 0.093 mol)을 다이클로로메탄 (300 mL)에 녹인 뒤, 트리에틸아민 (26 mL, 0.186 mol)과 메탄술포닐 클로라이드(MsCl, 10.9 mL, 0.14 mol)를 0℃에서 순차적으로 서서히 적가하고 20분간 교반하였다. 상온으로 올린 뒤 1시간 동안 교반하고 감압농축하였다. 농축액을 에틸아세테이트로 녹인 뒤, 0.5 N HCl, 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 노란색 오일 화합물 VI (50g, 0.089 mol, 96%)를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.46(dd, 1H, J1=11.6Hz, J2=2.4Hz), 7.29(m, 1H), 7.13(m, 1H), 4.94-4.88(m, 1H), 4.50-4.39(m, 2H), 4.12(m, 1H), 3.92(m, 1H), 3.72(m, 2H), 3.64-3.62(m, 2H), 3.08(s, 3H), 1.49(s, 3H), 1.34(s, 6H), 0.83(s, 9H), 0.00(s, 6H).
[제조예 7] 화합물 VII 의 제조
화합물 VI (50 g, 0.089 mol)을 DMF (200 mL)에 녹인 뒤, NaN3 (7.16 g, 0.11 mol)를 넣고 80℃에서 3시간 교반하였다. 상온으로 식힌 뒤 에틸아세테이트로 묽히고, 물, 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 무색의 오일성 고체 화합물 VII (47g, 0.089 mol)를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.48(dd, J1=8.2Hz, J2=1.4Hz) 7.30(m, 1H), 7.16(m, 1H), 4.81-4.79(m, 1H), 4.09-4.08(m, 1H), 3.86(m, 1H), 3.74(m, 2H), 3.62-3.59(m, 1H), 1.51(s, 3H), 1.36(s, 6H), 0.85(s, 9H), 0.02(s, 6H).
[제조예 8] 화합물 VIII 의 제조
화합물 VII (47 g, 0.089 mol)을 메탄올 (400 mL)에 녹인 뒤 Pd/C (3.5 g)을 넣고 수소가스 풍선하에서 4시간 동안 교반하였다, 셀라이트(celite)를 이용하여 여과 한 후 감압농축하였다. 이 농축액을 다이클로로메탄 (130 mL)에 녹인 뒤 1N NaOH 수용액 (130 mL)을 넣고 교반하면서 서서히 Cbz-Cl (15.5 mL, 0.11 mol)를 적가 하였다. 상온에서 2시간동안 교반 한 후, 유기층을 분리하여 물과 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 세척하고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고, 20% 에틸아세테이트/헥산 용액으로 컬럼크로마토그래피를 이용하여 분리하여 연노란색 오일 화합물 VIII (50.5 g, 0.082 mol, 92%)를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.46-7.43(m, 1H), 7.36-7.35(m, 1H), 7.31(s, 6H), 7.11(m, 1H), 5.09(s, 2H), 4.75(m, 1H), 4.01(t, 1H, J=8.4Hz), 3.76-3.50(m, 1H), 1.49(s, 3H), 1.34(s, 6H), 0.83(s, 9H), 0.01(s, 6H).
[제조예 9] 화합물 IX 의 제조
화합물 VIII (50.5 g, 0.082 mol)을 다이클로로메탄 (100 mL)에 녹인 뒤 4N HCl in dioxane 용액 (130 mL)을 넣고 상온에서 3 시간 교반한 뒤 감압농축하여 흰색 고체 화합물 IX (36 g, 0.082 mol)를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.69(t, 1H, J=6.0Hz), 7.44-7.40(m, 1H), 7.32(s, 6H), 7.09-7.07(m, 1H), 6.88(t, 1H, J=9.2Hz), 5.03(s, 2H), 4.71- 4.68(m, 1H), 4.08-4.03(m, 2H), 3.73-3.69(m, 1H), 3.60-3.57(m, 3H), 3.39-3.34(m, 2H), 3.18-3.15(m, 2H).
[제조예 10] 화합물 XII 의 제조
화합물 IX (36 g, 0.082 mol)을 다이클로로메탄 (300 mL)에 녹인 뒤, 트리에틸아민 (34.5 mL, 0.245 mol)과 메탄술포닐 클로라이드 (MsCl, 9.5 mL, 0.123 mol)를 0℃에서 순차적으로 서서히 적가하고 10분간 교반하였다. 상온으로 올린 뒤 2시간 동안 교반하고 다이클로로메탄으로 묽힌 뒤, 물, 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하였다. 이렇게 얻은 고체를 다이에틸이서(diethylether) 용매로 다시 고체화(trituration)시키고 여과하여 흰색 고체 화합물 X (30.5 g, 0.063 mol, 77%)를 얻었다.
이렇게 얻은 화합물 X (20 g, 0.042 mol)를 에탄올 (100 mL)에 넣고 하이드라진 모노하이드레이트 (H2NNH2-H2O, 50 mL)를 첨가하고 60℃에서 2시간 동안 교반 하였다. 이 용액을 감압농축하여 오일 형태의 화합물 XI (17.4 g, 0.042 mol)을 얻었다.
이렇게 얻은 화합물 XI (17.4 g, 0.042 mol)을 아세트 산 (200 mL)에 넣고 트리메틸오르소포메이트(trimethylorthoformate, 100 mL)를 첨가하고 8시간동안 환류(reflux)시켰다. 이 용액을 감압증류 한 뒤, 다이클로로메탄으로 녹이고 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하였다. 이 농축액을 5% 메탄올/다이클로로메탄 용액으로 컬럼크로마토그래피를 이용하여 분리하여 흰색 고체 화합물 XII (5.8 g, 0.013 mol, 31%)를 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.55-7.53 (m, 1H), 7.30-7.28 (m, 6H), 7.19-7.18 (m, 1H), 7.11-7.08 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.27 (t, J = 6 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.77 (m, 1H), 4.03-4.00 (m, 1H), 3.97 (t, J = 4.8Hz, 2H), 3.81- 3.76 (m, 1H), 3.70 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.59-3.54 (m, 1H).
[제조예 11] 화합물 XIII 의 제조
화합물 XII (5 g, 0.011 mol)을 메탄올 (100 mL)에 녹인 뒤 Pd/C (0.5 g)을 넣고 수소가스 풍선하에서 4시간 동안 교반하였다. 셀라이트(celite)를 이용하여 여과 한 후 감압농축하여 오일릭 고체 화합물 XIII (3.2 g, 0.010 mol, 91%)를 얻었다.
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (s, 1H), 7.65-7.63 (m, 1H), 7.40-7.36 (m, 2H), 7.12 (s, 1H), 4.65-4.62 (m, 1H), 4.09-4.06 (m, 1H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.85 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.70 (t, J = 4.8 Hz, 2H),2.88-2.85 (m, 1H), 2.82-2.79 (m, 1H).
[제조예 12] 화합물 XV 의 제조
Boc-3-aminoisoxazole (1.22g, 6.6 mmol)을 DMF (40 mL)에 녹인 뒤, 50% NaH (0.32 g, 6.6 mmol)를 넣고 30분간 교반 한 뒤, 화합물 VI (3.6 g, 6.6 mmol)을 DMF (10 mL)에 녹인 용액을 천천히 적가하고 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 상온으로 식힌 뒤 에틸아세테이트로 묽히고, 물로 두번 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시키고 감압농축하여 화합물 XIV (4.16 g, 6.4 mmol)을 얻었다.
이렇게 얻은 화합물 XIV (4.16 g, 6.4 mmol)을 다이클로로메탄 (20 mL)에 녹 인 뒤 4N HCl in dioxane 용액 (20 mL)을 넣고 상온에서 밤새 교반한 뒤, 감압농축하고 다이에틸이서(diethylether) 용매로 고체화(trituration)시켜 흰색 고체 화합물 XV (2.2 g, 6.2 mmol, 94%)를 얻었다.
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.52 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 1.8 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.11 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.80-3.19 (m, 7H).
[제조예 13] 화합물 XIX 의 제조
화합물 VII (0.613 g, 1.2 mmol)을 다이옥산 (10 mL)에 녹인 뒤, 2,5-노보라디엔 (Norboradiene, 0.6 mL, 6 mmol)을 넣고 4시간 동안 환류교반 시킨 뒤, 상온으로 식혔다. 용매를 감압농축 한 뒤 다이클로로메탄으로 녹여 물로 세척하고 황산 나트륨으로 건조시켜 트리아졸 화합물 XVIII을 98% 수율로 얻은 뒤, 제조예 9와 동일한 방법으로 염산 처리하여 화합물 XIX (0.35 g, 1.1 mmol, 92 %)를 얻었다.
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.39 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.09-7.00 (m, 2H), 5.11 (m, 1H), 4.82 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.18 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.59 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.19 (t, J = 6.0 Hz, 2H).
[제조예 14] 화합물 XXVII - b 의 제조
화합물 VI (12 g, 21 mmol)을 DMF (100 mL)에 녹인 뒤, NaN3 (1.65 g, 26 mmol)를 넣고 80 ℃에서 3시간 교반하였다. 상온으로 식힌 뒤 에틸아세테이트/헥산 (150 mL/30 mL)으로 묽히고, 증류수 (200 mL)로 3회 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시키고 감압농축 한 뒤, 30% 에틸아세테이트/헥산 용액으로 컬럼크로마토그래피를 이용하여 분리하여 화합물 VII (9.6 g, 19 mmol, 89%)을 얻었다. 상기 얻어진 화합물 VII (9.6 g, 19 mmol)을 메탄올 (120 mL)에 녹이고 Pd/C (1 g)을 넣은 뒤, 수소가스 하에서 4시간 교반하고 셀라이트를 이용하여 여과하여 8.6 g 의 아민화합물을 95% 수율로 얻었다. 상기 아민 화합물 (8.6 g)을 다이클로로메탄 (120 mL)에 녹인 뒤, 포화 NaHCO3 수용액 (40 mL)을 넣고 0℃에서 사이오포스진 (thiophosgene, 1.6 mL, 21 mmol)을 첨가한 후 2 시간 동안 교반 시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고 감압 증류 한 뒤, 메탄올 (150 mL)에 녹여 밤새 환류교반 시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 화합물 XXVI -b (2.6 g, 7.6 mmol)를 얻은 뒤, 제조예 9와 동일한 방법으로 염산 처리하여 화합물 XXVII -b를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.35 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 6.99-6.89 (m, 2H), 6.70 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.10-3.91 (m, 6H), 3.88-3.78 (m, 3H), 3.32 (t, J = 5.2 Hz, 2H).
[제조예 15] 화합물 XXVII - a 의 제조
화합물 VI 으로부터 사이오포스진 대신 Ac2O를 사용하여 상기 제조예 14와 동일한 방법으로 화합물 XXVII-a 의 염산염 (3.4 g, 9.8 mmol, 85 %)을 얻었다.
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.69 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 7.46 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.41-7.26 (m, 5H), 7.18-7.11 (m, 1H), 7.00 (t, 1H, J = 9.6 Hz), 6.21-5.73 (m, 2H), 5.03 (s, 2H), 4.74-4.66 (m, 1H), 4.07 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.76-3.70 (m, 1H), 3.60 (t, 2H, J = 5.7 Hz), 3.42-3.33 (m, 2H), 3.19 (t, 2H, J = 5.7 Hz).
[제조예 16] 화합물 XXVIII - a 의 제조
화합물 XXV -a의 염산 염 (1.69 g, 4.86 mmol), 하이드록시프탈이마이드 (0.83 g, 5.11 mmol), 트리페닐포스핀 (1.34 g, 5.11 mmol) 및 트리에틸아민 (0.7 mL, 4.87 mmol)을 THF (20 mL)에 넣고 교반하면서 DIAD (Diisopropyl azodicarboxylate, 1.15 mL, 5.84 mmol)를 서서히 적가하고 3시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물을 여과한 후 여액을 감압농축 하여 컬럼크로마토그래피을 이용하여 분리하여 화합물 XXVIII -a (1.49 g, 3.26 mmol, 88%)을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.86(m, 2H), 7.76(m, 2H), 7.38(dd J=8.8, 1.6Hz, 1H), 7.00(dd J=8.8, 1.6Hz, 1H), 6.69(t, J =6.0Hz, 1H), 6.13(t, J =4.0Hz), 4.92(br s, 1H), 4.75(m, 1H), 4.42(t, J =3.6Hz, 1H), 4.00(t, J=6Hz, 1H), 3.70(m, 2H), 3.60(m, 1H), 3.50(br s, 2H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C22H21FN4O6 에 대하여 457(M+H+).
[제조예 17] 화합물 XXIII 의 제조
화합물V (26 g, 0.053 mol)을 다이클로로메탄 (180 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (diisopropylethylamine, 13 mL, 0.079 mol)과 벤조일 클로라이드 (Bz-Cl, 7.4 mL, 0.064 mol)를 0℃에서 순차적으로 서서히 적가하고 10분간 교반하였다. 상온으로 올린 뒤 소량의 DMAP를 넣고 2시간 동안 교반하였다. 이 용액을 감압농축하여 에틸아세테이트에 녹이고 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 화합물 XXII (31g, 0.053 mol)를 정량적으로 얻은 뒤, 제조예 9와 동일한 방법으로 염산 처리하여 화합물 XXIII를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.88 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.63 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.46 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 7.41 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.11 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 6.88 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 5.02 (m, 1H), 4.54-4.45 (m, 2H), 4.16 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.88 (m, 1H), 3.54 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.13 (t, 2H, J = 6.0 Hz).
상기 제조예 1 내지 17에서 제조된 중간체로부터 최종 화합물들의 합성법을 하기 실시예에 나타내었다.
[실시예 1] 화합물 1 의 제조
상기 제조예 11에서 얻은 화합물 XIII (0.1 g, 0.31 mmol)을 다이클로로메탄 (3 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (0.1 mL, 0.6 mmol) 및 Ac2O (0.06 mL, 0.6 mmol)를 순차적으로 적가하고 2시간 동안 상온에서 교반 한 후, 감압 농축하여 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 1을 얻었다(0.098 g, 0.27 mmol, 87%).
1H NMR (400MHz, chloroform-d4) δ 8.54(s, 1H), 7.59(dd J=13.6, 2.4Hz, 1H), 7.20(dd, J = 13.6, 2.4 Hz, 1H), 7.13(t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.88(s, 1H), 6.19(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.81(m, 1H), 4.05(t, J = 8 Hz, 1H), 3.99(t, J = 4.8Hz, 2H), 3.80(dd, J = 8.8, 6.8 Hz, 1H), 3.73(t, J =4 .8 Hz, 2H), 3.69(m, 2H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C16H18FN5O4 에 대하여 364(M+H+)
[실시예 2] 화합물 2 의 제조
화합물 1 (0.7 g, 1.93 mmol), 1,4-다이옥산에 녹여진 4N-염산 (3 mL, 12 mmol), Pd/C (70 mg)을 THF (20 mL)에 첨가 후 수소가스 하에서 2시간 동안 교반 한 후, 상기 반응물을 셀라이트을 이용하여 여과하고 감압 농축하여 백색고체로 표제 화합물 2을 얻었다(0.72g, 1.93mmol, 100%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.34-8.31(m, 2H), 7.68(dd J = 13.6, 2.4 Hz, 1H), 7.56(t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41(dd, J = 13.6, 2.4 Hz, 1H), 4.76(m, 1H), 4.15(t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.78(m, , 3H), 3.46(m, 2H), 3.35(t, J = 8.4 Hz, 2H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C15H18FN5O3 에 대하여 336(M+H+)
[실시예 3] 화합물 3 의 제조
화합물 2 (0.11 g, 0.34 mmol)을 메탄올 (3 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (0.17 mL, 1 mmol), 다이메틸설페이트 (52 mg, 0.41 mmol)를 넣어 6시간동안 상온에서 교반한 뒤 컬럼크로마토그래피를 이용하여 백색고체로 표제 화합물 3을 얻었다(29 mg, 0.083 mmol, 24%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.52 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.18-7.62 (m, 1H), 7.10 (t, 1H, 8.4 Hz), 6.90 (s, 1H), 6.70 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.82-4.75 (m, 1H), 4.04 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.85 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.82 (t, 1H, 4.8 Hz), 3.74-3.60 (m, 2H), 2.99 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 2.79 (s, 3H), 2.02 (s, 3H)
LCMS: C16H20F-1-N5O3 에 대하여 350 (M+H+)
[실시예 4] 화합물 4 의 제조
화합물 2 (0.21 g, 0.63 mmol)을 DMF (3 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (0.17 mL, 1 mmol), 알릴브로마이드(0.1 g, 0.8 mmol)를 넣어 6시간동안 상온에서 교반한 뒤 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 4을 얻었다(80 mg, 0.21 mmol, 33%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15-7.09 (m, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.18 (br t, 1H), 6.02 (m, 1H), 5.30-5.22 (m, 2H), 4.79 (m, 1H), 4.05 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.82 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.79-3.58 (m, 6H), 3.00 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H22F-1-N5O3 에 대하여 376 (M+H+)
[실시예 5] 화합물 5 의 제조
화합물 2 로부터 프로파질브로마이드 (propargyl bromide)를 사용하여 실시예 4와 동일한 방법으로 표제 화합물 5를 얻었다(34 mg, 0.091 mmol, 43%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16-7.11 (m, 2H), 6.95 (s, 1H), 6.00 (br t, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.04 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.85 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.82 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.79-3.62 (m, 3H), 3.13 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.31 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H20F-1-N5O3 에 대하여 374 (M+H+)
[실시예 6] 화합물 6 의 제조
화합물 2 (30 mg, 0.08 mmol), DIPEA (66 uL, 0.40 mmol), 에틸아요다이드 (ethyl iodide, 20 uL, 0.24 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (2 mL)에 순차적으로 넣은 후 8시간 동안 환류 교반 하였다. 상기 반응물을 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 노랑색거품으로 표제 화합물 6을 얻었다(5 mg, 0.01 mmol, 13%).
1H NMR (400MHz, chloroform-d4) δ 7.57(dd, J = 15 Hz, 1H), 7.18(s, 2H), 7.08(s, 1H), 6.31(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.83(m, 1H), 4.07(t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.90(t, J = 4.2 Hz, 2H), 3.83(dd, J = 8.0, 7.2 Hz, 1H), 3.74-3.65(m, 2H), 3.12(t, J = 5.4 Hz, 3H), 3.05(q, J = 6.6 Hz, 2H), 2.06(s, 3H), 1.31(t, J = 6.6 Hz, 3H)
LCMS: C17H22FN5O3 에 대하여 364(M+H+)
[실시예 7] 화합물 7 의 제조
화합물 2 (0.1 g, 0.3 mmol)을 DMF (3 mL)에 녹인 뒤, 1당량의 K2CO3 와 2당량의 클로로아세토나이트릴과 촉매량의 KI를 넣고 6시간 동안 80℃로 가열시킨 뒤, 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 7을 얻었다(107 mg, 0.287 mmol, 96%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.40 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.01 (dd, 1H, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 1.2 Hz), 6.69 (t, 1H, J = 9.3 Hz), 6.14 (d, 1H, J = 5.4 Hz), 4.78-4.72 (m 1H), 4.40 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 4.00 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.76-3.66 (m, 2H), 3.61 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 3.55 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 3.03 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C17H19FN6O3 에 대하여 374(M+H+)
[실시예 8] 화합물 8 의 제조
화합물 2 (0.1 g, 0.3 mmol)을 DMF (3 mL)에 녹인 뒤, 1당량의 K2CO3 와 2당량의 1,1,1-트리플루오로-2-아이오도에탄을 넣고 6시간동안 200℃로 가열시킨 뒤, 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 8을 얻었다(11 mg, 0.026 mmol, 9%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.52 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.18-7.07 (m, 2H), 6.86 (s, 1H), 6.32-6.24 (m, 1H), 4.90-4.76 (m, 1H), 4.04 (t, J = 8.7 Hz), 3.84 (t, 2H, J = 4.5 Hz), 3.81-3.76 (m, 1H), 3.62-3.52 (m, 2H), 3.24 (t, 4.5 Hz), 2.02 (s, 3H)
LCMS: C17H19F4N5O3 에 대하여 418 (M+H+).
[실시예 9] 화합물 9 의 제조
화합물 2 (150 mg, 0.40 mmol), DIPEA (200 uL, 1.20 mmol), 사이아노젠브로마이드(cyanogen bromide, 63 mg, 0.60 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (2 mL)에 순차적으로 넣은 후 0.5시간 동안 교반 하였다. 상기 반응물을 감압 농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 9를 얻었다(25mg, 0.07mmol, 17%).
1H NMR (400MHz, chloroform-d4) δ 7.60(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.20(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.13(t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89(s, 1H), 4.80(m, 1H), 4.05(t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.85-3.61(m, 2H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C16H17FN6O3 에 대하여 361(M+H+)
[실시예 10] 화합물 10 의 제조
화합물 2 (5 mg, 0.013 mmol), DIPEA (4 uL, 0.026 mmol), 아세틸클로라이드(1.5 uL, 0.02mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (2 mL)에 순차적으로 넣은 후, 1.5시간 동안 교반 하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (30 mL)을 첨가하고 포화된 중탄산나트륨 수용액 (15 mL)으로 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시 킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 10을 얻었다(2 mg, 0.004 mmol, 30%).
1H NMR (600MHz, chloroform-d4) δ 7.57(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.20(dd, J = 9.6, 2.4Hz, 1H), 7.13(t J = 9.6, Hz, 1H), 6.85(s, 1H), 6.03(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.80(m, 1H), 4.06(m, 2H), 3.79(dd, J = 9.0, 6.6 Hz, 2H), 3.71(m, 2H), 3.62(m, 1H) 2.03(s, 3H)
LCMS: C17H20FN5O4 에 대하여 378(M+H+)
[실시예 11] 화합물 11 의 제조
화합물 2 (30 mg, 0.08 mmol), PyBop (105 mg, 0.20 mmol), 시아노아세트산 (14 mg, 0.16 mmol), DIPEA (40 uL, 0.24 mmol)을 0℃에서 DMF (2 mL)에 순차적으로 넣은 후 1.5시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (30 mL)을 첨가하고 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 3회 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 11을 얻었다(5 mg, 0.01 mmol, 13%).
1H NMR (400MHz, chloroform-d4) δ 7.61(dd, J = 13.2, 2.8Hz, 1H), 7.25(dd, J = 13.2, 2.8Hz, 1H), 7.13(t, J = 8.8, Hz, 1H), 6.85(s, 1H), 6.19(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.81(m, 1H), 4.07(m, 2H), 3.85(m, 3H), 3.75(t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.68(m, 2H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C18H19FN6O4 에 대하여 403(M+H+)
[실시예 12] 화합물 12 의 제조
화합물 2 (200 mg, 0.54 mmol), PyBop ((1H-benzotriazole-1- yloxy)tripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate, 700 mg, 1.34 mmol), 글리콜산 (82 mg, 1.07 mmol), DIPEA (266 uL, 1.61 mmol)을 0℃에서 DMF (2 mL)에 순차적으로 넣은 후 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (100 mL)을 첨가하고 증류수로 3회 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 12를 얻었다(83 mg, 0.21 mmol, 39%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.25(t, J = 6 Hz, 1H), 7.62(dd J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.37(t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.32(dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.07(t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.74(m, 1H), 4.53(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.32(d, J = 6 Hz, 2H), 4.12(t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.89(t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.75-3.69(m, 3H), 3.40(m, 2H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C17H20FN5O5 에 대하여 394(M+H+)
[실시예 13] 화합물 13 의 제조
화합물 2 (35 mg, 0.09 mmol), DIPEA (45 uL, 0.28 mmol), 사이클로프로판카보닐클로라이드(13 uL, 0.14 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (3 mL)에 순차적으로 넣은 후 1시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물을 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 13을 얻었다(13mg, 0.03mmol, 33%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.25(t, J = 6 Hz, 1H), 7.6(d, J = 13.8 Hz, 1H), 7.39(t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.32(d, J = 13.8 Hz, 1H), 7.10(m, 1H), 4.75(m, 1H), 4.12(t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.90(s, 2H), 3.74(t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.70(s, 2H), 3.42(t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.69(t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.83(s, 3H), 0.85(d, J = 6.0 Hz, 3H)
LCMS: C19H22FN5O4 에 대하여 404(M+H+)
[실시예 14] 화합물 14 의 제조
화합물 2 (30 mg, 0.08 mmol), 트리에틸아민 (23 uL, 0.16 mmol), 트리메틸실릴아이소사이아네이트 (63 uL, 0.40 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (3 mL)에 순차적으로 넣은 후 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (30 mL)을 첨가하고 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 2회 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피를 이용하여 백색고체로 표제 화합물 14를 얻었다(8 mg, 0.02mmol, 26%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.26(t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.60(dd, J = 15.0, 2.4 Hz, 1H), 7.37-7.30(m, 2H), 6.96(d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.32(s, 2H), 4.74(m, 1H), 4.12(t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.78-3.67(m, 4H), 3.40-3.28(m, 3H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C16H19FN6O4 에 대하여 379(M+H+)
[실시예 15] 화합물 15 의 제조
화합물 2 (500 mg, 1.35 mmol)과 카보닐다이이미다졸 (437 mg, 2.7 mmol)을 반응시킨 후 에탄올아민을 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 표제 화합물 15을 얻었다(25 mg, 0.059 mmol, 42%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.69 (s, 1H), 7.54 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.16 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 7.10-7.08 (m, 1H), 6.87 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 6.78 (s, 1H), 6.72 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.83-7.49 (m, 1H), 4.04 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.95 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.76 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 3.72 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.67 (dd, 2H, J 1 = 6.0 Hz, J 2 = 4.8 Hz), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H23FN6O5 에 대하여 423(M+H+)
[실시예 16] 화합물 16 의 제조
상기 실시예 2에서 얻은 화합물 2로부터 카보닐다이이미다졸과 다이에탄올아민을 사용하여 실시예 15과 동일한 방법으로 표제 화합물 16을 얻었다(15 mg, 0.032 mmol, 25%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.70-7.62 (m, 1H), 7.37-7.30 (m, 2H), 7.1 (s, 1H), 4.81-4.76 (m, 1H), 4.45-4.40 (m, 2H), 4.14 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 4.01-3.94 (m, 2H), 3.82-3.78 (m, 4H), 3.55 (d, 2H, J = 4.8 Hz), 3.48-3.42 (m, 1H), 3.42-3.38 (m, 2H), 3.20-3.16 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.29 (t, 2H, J = 7.2 Hz)
LCMS: C20H27FN6O6 에 대하여 467 (M+H+)
[실시예 17] 화합물 17 의 제조
화합물 2로부터 다이플루오로아세트 산을 사용하여 실시예 11과 동일한 방법으로 표제 화합물 17을 얻었다(31 mg, 0.075 mmol, 88%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.61 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 3.0 Hz), 7.22 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.14 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 6.90 (s, 1H), 6.77 (t, 1H, J = 53.4 Hz), 6.04 (t, 1H, J = 6.3 Hz), 4.83-4.79 (m, 1H), 4.08 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 4.05 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.88-3.80 (m, 1H), 3.78 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.75-3.69 (m, 1H), 3.69-3.60 (m, 1H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C17H18F3N5O4 에 대하여 414 (M+H+)
[실시예 18] 화합물 18 의 제조
화합물 2 (35 mg, 0.09 mmol), DIPEA (45 uL, 0.28 mmol), 메탄술포닐클로라이드(11 uL, 0.14 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (3 mL)에 순차적으로 넣은 후 1시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물을 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 18를 얻었다(13 mg, 0.03 mmol, 33%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 7.61(d J = 13.8 Hz, 1H), 7.43(t, J = 9.6 Hz, 1H), 7.33(d J = 9.6 Hz, 1H), 7.21(s, 1H), 4.75(m, 1H), 4.13(t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.84(s, 1H), 3.74(t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.56(s, 2H), 3.41(t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.98(s, 3H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C16H20FN5O5S 에 대하여 414(M+H+)
[실시예 19] 화합물 19 의 제조
화합물 2 (30 mg, 0.08 mmol), DIPEA (66 uL, 0.40 mmol), 메틸아이소사이오사이아나이드 (6 uL, 0.24 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (2 mL)에 순차적으로 넣은 후 12시간 동안 교반하였다. 상기 반응물을 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 19을 얻었다(17 mg, 0.03 mmol, 38%).
1H NMR (600MHz, chloroform-d4) δ 7.78(s, 1H), 7.58(dd, J = 13.2, 2.4Hz, 1H), 7.21(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.13(t J = 8.4 Hz, 1H), 6.86(s, 1H), 5.96(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.80(m, 1H), 4.59(t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.05(t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.81-3.77(m, 3H), 3.71(m, 1H), 3.65m, 1H),3.20(d, J = 4.8 Hz, 1H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C17H21FN6O3S에 대하여 409(M+H+)
[실시예 20] 화합물 20 의 제조
화합물 2 (50 mg, 0.13 mmol), 트리에틸아민 (55 uL, 0.39 mmol), 아미도술포닐크로라이드 (145 uL, 0.26 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄 (3 mL)에 순차적으로 넣은 후 12시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (30 mL)을 첨가하고 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 2회 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 20을 얻었다(5 mg, 0.01 mmol, 10%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.26(t, J = 4.8 Hz, 1H) 7.60(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.42(t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.32(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.12(s, 1H), 7.05(s, 2H), 4.74(m, 1H), 4.12(t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.81(t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.73(dd, J = 9.2, 6.4 Hz, 1H), 3.50-3.38(m, 4H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C15H19FN6O5S에 대하여 414(M+H+)
[실시예 21] 화합물 21 의 제조
화합물 2 (50 mg, 0.13 mmol), 트리에틸아민 (36 uL, 0.26 mmol), 다이메틸아미노술포닐크로라이드 (16 uL, 0.15 mmol)을 0℃에서 DMF (1 mL)에 순차적으로 넣은 후 12시간 동안 상온에서 교반 하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (30 mL)을 첨가하고 포화된 중탄산나트륨 수용액(10 mL)으로 2회 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 21을 얻었다(6 mg, 0.01 mmol, 10%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.62(dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 7.19(dd, J = 13.2, 2.0 Hz, 1H), 7.12(t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.94(s, 1H), 6.00(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.80(m, 1H), 4.05(t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.85(t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.79(dd, J = 8.8, 6.8 Hz, 1H), 3.71-3.60(m, 4H), 3.03(s, 6H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C17H23FN6O5 에 대하여 443(M+H+)
[실시예 22] 화합물 22 의 제조
화합물 2 로부터 실시예 11과 동일한 방법으로 표제 화합물 22을 얻었다(36 mg, 0.085 mmol, 78%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.26(t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 7.37 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 5.61 (m, 1H), 4.72 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.72 (m, 1H), 3.41-3.35 (m, 2H), 3.08 (m, 2H), 2.86 (m, 2H), 1.83 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.24 (s, 3H)
LCMS: C19H24FN5O5 에 대하여 422(M+H+)
[실시예 23] 화합물 23 의 제조
화합물 2 (30 mg, 0.08 mmol), PyBop (105 mg, 0.20 mmol), Boc-Gly-OH (28 mg, 0.16 mmol), DIPEA (40uL, 0.24 mmol)을 0℃에서 DMF (2 mL)에 순차적으로 넣 은 후 1.5시간 동안 상온에서 교반 하였다. 상기 반응물에 다이클로로메탄 (30 mL)을 첨가하고 증류수(10mL)로 3회 씻어주고 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피로 분리한 후 1,4-다이옥산 (3 mL)에 녹여진 4N-염산을 넣은 후 0.5시간 동안 교반 하였다. 상기 반응물을 감압 농축하여 표제 화합물 23을 얻었다(10 mg, 0.02 mmol, 29%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.29(t, J = 6 Hz, 1H), 8.10(s, 3H), 7.62(dd, J = 15.0, 2.4 Hz, 1H), 7.40(t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.34(dd, J = 15.0, 2.4 Hz, 1H), 7.20(s, 1H), 4.74(m, 1H), 4.13(t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.99-3.94(m, 3H), 3.74(t, J = 4.0 Hz, 2H), 3.42(t, J = 4.8 Hz, 2H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C17H21FN6O4 에 대하여 393(M+H+)
[실시예 24] 화합물 24 의 제조
화합물 2 로부터 에틸 브로모아세테이트를 사용하여 실시예 7과 동일한 방법으로 표제 화합물 24를 얻었다(200 mg, 0.48 mmol, 34%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.50 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.13 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.10 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.89 (s, 1H), 6.70 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.82-4.79 (m, 1H), 4.25-4.21 (m, 2H), 4.04 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.84 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.82-3.80 (m, 1H), 3.77 (s, 2H), 3.66 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.24 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 2.02 (s, 3H)
LCMS: C19H24FN5O5 에 대하여 422(M+H+)
[실시예 25] 화합물 25 의 제조
화합물 24 (100 mg, 0.24 mmol)을 메탄올 (2 mL)에 녹인 뒤, 0.5 mL 암모니아수를 넣고 밀폐된 반응용기에서 100℃로 밤새 교반한 뒤 감압 농축하여 컬럼크로마토그래피로 분리하여 표제 화합물 25을 얻었다(20 mg, 0.051mmol, 21%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.25 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.56 (d, 1H, J = 14.0 Hz), 7.83-7.26 (m, 2H), 7.21-7.08 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 4.75-4.71 (m, 1H), 4.11 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.82-3.69 (m, 3H), 3.50-3.40 (m, 2H), 3.31 (s, 2H), 3.03 (t, 2H, J = 4.4 Hz), 1.83 (s, 3H)
LCMS: C17H21FN6O4 에 대하여 393 (M+H+)
[실시예 26] 화합물 26 의 제조
화합물 24 (100 mg, 0.24 mmol)을 메탄올 (20 mL)에 녹인 뒤, 메탄올 (20 mL)에 녹인 하이드록실 아민 용액 (2.4 g 의 NH2OH-HCl에 2.4 g 의 KOH를 넣고 여과하여 만든 용액)을 넣고 상온에서 밤새 교반한 뒤 감압 농축하여 컬럼크로마토그래피로 분리하여 표제 화합물 26을 얻었다(22mg, 0.054 mmol, 23%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.30-8.20 (m, 1H), 7.35-7.25 (m, 1H), 7.10-7.00 (m, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.33-5.28 (m, 1H), 4.71-7.64(m, 1H), 4.11 (t, 2H, J = 9.0 Hz), 4.04 (t, 2H, J = 8.4 Hz), 3.17 (s, 2H), 2.91(t, 2H, J = 6.6 Hz), 1.83 (s, 1H)
LCMS: C17H21FN6O5 에 대하여 409 (M+H+)
[실시예 27] 화합물 27 의 제조
상기 실시예 24 에서 얻은 화합물 24 (110 mg, 0.22 mmol)을 THF (10 mL)에 녹인 뒤, 2M LiBH4 용액 (0.2 mL. 0.4 mmol)을 넣고 상온에서 3시간 교반 시켰다. 소량의 물을 첨가 후 컬럼크로마토그래피로 분리하여 연노란색고체 표제 화합물 27을 얻었다(24 mg, 0.063 mmol, 29%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.54 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.16 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.12 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.90 (s, 1H), 5.98 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.87 (m, 1H), 4.05 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.97 (m, 2H), 3.85 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.82-3.6 (m, 3H), 3.07 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.00 (m, 2H), 2.04 (s, 3H)
LCMS: C17H22FN5O4 에 대하여 380(M+H+)
[실시예 28] 화합물 28 의 제조
화합물 XX ⅦI-a (0.22 g, 0.49 mmol), 하이드라진 (모노하이드레이트, 1 mL)을 메탄올 (10 mL)에 녹인 후 2시간동안 환류 교반하고 감압 농축한 후 트리메틸오르소포메이트 (5 mL), 아세트산 (5 mL)을 넣고 4시간 동안 환류 교반 하였다. 상기 반응물을 감압농축 하고 컬럼크로마토그래피로 분리하여 백색고체로 표제 화합물 28을 얻었다(32 mg, 0.10 mmol, 20%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.25(t, J = 6 Hz, 1H), 7.60(dd, J = 14.0, 2.4 Hz, 1H), 7.46(s, 1H), 7.38(t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.31(dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 4.74(m, 1H), 4.12(t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.04(t, J = 3.6 Hz, 2H), 3.75-3.67(m, 3H), 3.41(t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.83(s, 3H)
LCMS: C15H17FN4O4 에 대하여 337(M+H+)
[실시예 29] 화합물 29 의 제조
화합물 2 (100 mg, 0.27 mmol)을 클로로포름 (3 mL)에 녹인 뒤, 포화된 NaHCO3 수용액 (3 mL)을 넣고 0℃에서 사이오포스진 (0.021 mL)을 넣고 30분간 교반 시킨 뒤, 유기층을 분리하여 암모니아수 (1 mL)를 첨가하였다. 이 용액을 THF (10 mL)로 희석 시킨 후 감압증류하여 용매를 반으로 줄인 뒤 다시 의 암모니아수 (2 mL)를 넣어 주고 상온에서 밤새 교반하였다. 이 용액을 감압 증류한 뒤 에틸이서로 고체화하여 흰색고체로 표제 화합물 29을 얻었다(80 mg, 0.20 mmol, 74%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (t, 1H, J = 4.8 Hz), 7.98 (s, 1H), 7.62 (dd, 1H, , J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.59-7.46 (m, 1H), 7.42 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 7.34 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 7.16 (s, 1H), 7.51-6.89 (bs, 2H), 4.79-4.69 (m, 1H), 4.37 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 4.13 (t, 1H, J = 9.6 Hz), 3.79-3.70 (m, 3H), 3.42 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.38-3.29 (m, 1H), 1.83 (s, 3H)
LCMS: C16H19FN6O3S 에 대하여 395 (M+H+)
[실시예 30] 화합물 30 의 제조
화합물 2 (100 mg, 0.27 mmol)을 클로로포름 (3 mL)에 녹인 뒤, 포화된 NaHCO3 수용액 (3 mL)을 넣고 0℃에서 0.021 mL 사이오포스진을 넣고 30분간 교반 시킨 뒤, 유기층을 분리하여 감압증류 한 후 메탄올 (5 mL)을 첨가하여 상온에서 밤새 교반 하였다. 이 용액을 감압증류 한 다음 컬럼크로마토그래피로 분리하여 흰색고체 표제 화합물 30을 얻었다(31 mg, 0.20 mmol, 74%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 1.2 Hz), 7.25-7.18 (m, 1H), 7.16 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.96 (s, 1H), 6.51 (bs, 1H), 4.86-4.79 (m, 1H), 4.64-4.54 (m, 2H), 4.19 (s, 3H), 4.06 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.88-3.76 (m, 3H), 3.74-3.66 (m, 2H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C17H20FN5O4S 에 대하여 410 (M+H+)
[실시예 31] 화합물 31 의 제조
화합물 2 로부터 메탄올 대신 에탄올을 사용하여 실시예 30과 동일한 방법으로 표제 화합물 31를 얻었다(26 mg, 0.061 mmol, 32%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (d, J = 12.0 Hz), 7.24-7.18 (m, 1H), 7.15 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.97 (s, 1H), 6.32 (bs, 1H), 4.88-4.76 (m, 1H), 4.75-4.64 (m, 2H), 4.64-4.53 (m, 2H), 4.06 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 3.88-3.77 (m, 3H), 3.74-3.60 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.46 (t, 3H, J = 6.6 Hz)
LCMS: C18H22FN5O4S 에 대하여 424 (M+H+)
[실시예 32] 화합물 32 의 제조
화합물 2 로부터 메탄올 대신 에틸렌글리콜을 사용하여 실시예 30과 동일한 방법으로 표제 화합물 32을 얻었다(23 mg, 0.052 mmol, 22%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.62 (dd, 1H, J 1 = 12.6 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 7.23-7.19 (m, 1H), 7.18 (t, 1H, 9.0 Hz), 7.06 (s, 1H), 6.42 (t, 1H, J = 6.6 Hz), 4.96-4.86 (bs, 1H), 4.86-4.77 (m, 1H), 4.65 (t, 2H, J = 3.6 Hz), 4.59 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 4.07 (t, 1H, 9.0 Hz), 3.98-3.89 (m, 2H), 3.88-3.79 (m, 3H), 3.72-3.65 (m, 2H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H22FN5O5S 에 대하여 440 (M+H+)
[실시예 33] 화합물 33 의 제조
화합물 2 로부터 메탄올 대신 아미노에탄올을 사용하여 실시예 30과 동일한 방법으로 표제 화합물 33를 얻었다(16 mg, 0.036 mmol, 35%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.28 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 7.67-7.58 (m, 1H), 7.43 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 7.38-7.31 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.08 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 4.78-4.70 (m, 1H), 4.39 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 4.13 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.81-3.75 (m, 2H), 3.58 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.53 (t, 2H, J = 5.7 Hz), 3.42 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 1.83 (s, 3H)
LCMS: C18H23FN6O4S 에 대하여 439 (M+H+)
[실시예 34] 화합물 34 의 제조
화합물 2 (50 mg, 0.13 mmol)을 에탄올 (5 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (0.03 mL, 0.2 mmol), NaF (7 mg, 0.17 mmol), 에틸다이사이오아세테이트 (0.019 mL, 0.16 mmol)를 넣고 상온에서 밤새 교반 하였다. 이 용액을 감압증류 한 다음 컬럼크로마토그래피로 분리하여 흰색고체 표제 화합물 34를 얻었다(10 mg, 0.025 mmol, 19%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.62 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.25-7.21 (m, 2H), 7.16 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 5.93 (br t, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.73 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.06 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.83-3.62 (m, 5H), 2.81 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C17H20FN5O3S 에 대하여 394 (M+H+)
[실시예 35] 화합물 35 의 제조
상기 실시예 2에서 얻은 화합물 2로부터 카보닐다이이미다졸과 에탄올을 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 표제 화합물 35을 얻었다(35 mg, 0.086 mmol, 65%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.58-7.56 (m, 1H), 7.19-7.18 (m, 1H), 7.13-7.10 (m, 1H ), 6.92 (s, 1H), 6.21 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 4.33-4.32 (m, 2H), 4.06-4.03 (m, 1H), 3.99 (m, 2H), 3.81-3.77 (m, 3H), 3.71-3.66 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.38 (t, J = 6.3Hz, 3H)
LCMS: C18H22FN5O5 에 대하여 407 (M+H+)
[실시예 36] 화합물 36 의 제조
화합물 2 로부터 피루빅 산을 사용하여 실시예 11과 동일한 방법으로 표제 화합물 36를 얻었다(14 mg, 0.034 mmol, 74%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (t, J = 6.0 Hz, 1H) 7.61 (dd, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 3.0 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.33 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.74 (m, 1H), 4.13 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.77-3.72 (m, 3H), 3.42-3.30 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.83 (s, 3H)
LCMS: C18H20FN5O5 에 대하여 406 (M+H+)
[실시예 37] 화합물 37 의 제조
화합물 2 로부터 클로로아세톤을 사용하여 실시예 4와 동일한 방법으로 표제 화합물 37을 얻었다(13 mg, 0.033 mmol, 65%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.52 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15 (dd, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.09 (br t, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.04 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.85 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.79-3.62 (m, 5H), 3.12 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H22FN5O4 에 대하여 392 (M+H+)
[실시예 38] 화합물 38 의 제조
화합물 37 (7 mg, 0.018 mmol) 을 다이클로로메탄 (2 mL)에 녹인 뒤, 2M LiBH4 용액을 넣고 상온에서 2시간 교반 시켰다. 소량의 물을 첨가 후 컬럼크로마토그래피로 분리하여흰색고체 표제 화합물 38를 얻었다(3.6 mg, 0.009 mmol, 50%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.54 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15 (dd, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.09 (br t, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.04 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.85 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.79-3.62 (m, 5H), 3.12 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H24FN5O4 에 대하여 394 (M+H+)
[실시예 39] 화합물 39 의 제조
화합물 2 로부터 3-클로로-2-메틸프로펜을 사용하여 실시예 4와 동일한 방법으로 표제 화합물 39을 얻었다(15 mg, 0.039 mmol, 74%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15-7.09 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.06 (br t, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.93(s, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.04 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.81 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.78-3.61 (m, 3H), 3.48 (s, 2H), 2.94 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.83 (s, 3H)
LCMS: C19H24FN5O3 에 대하여 390 (M+H+)
[실시예 40] 화합물 40 의 제조
화합물 2 로부터 2,3-다이클로로-1-프로펜을 사용하여 실시예 4와 동일한 방법으로 표제 화합물 40을 얻었다(11 mg, 0.027 mmol, 34%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.52 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15-7.09 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.23 (br t, 1H), 5.49 (s, 1H), 5.42 (s, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.04 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.85 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.79-3.62 (m, 5H), 3.08 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C18H21ClFN5O3 에 대하여 410 (M+H+)
[실시예 41] 화합물 41 의 제조
화합물 2 (228 mg, 0.68 mmol), 사이클로부타논 (0.076 mL, 1.02 mmol), NaBH(OAc)3 (187 mg, 0.88 mmol)를 다이클로로메탄 (20 mL)에 녹인 뒤, 아세트산 (1 mL)을 첨가하고 2시간 동안 상온에서 교반 하였다. 상기 반응물을 다이클로로메탄으로 묽히고 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하여 흰색고체 표제 화합물 41를 얻었다(200 mg, 0.51 mmol, 75%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15-7.09 (m, 2H), 6.95 (s, 1H), 6.09 (br t, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.03 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.82 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.78-3.61 (m, 3H), 3.41 (m, 1H), 2.91 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.21-2.11 (m, 4H), 2.03 (s, 3H), 1.81-1.72 (m, 2H)
LCMS: C19H24FN5O3 에 대하여 390 (M+H+)
[실시예 42] 화합물 42 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII 로부터 상기 실시예 11과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 42을 얻었다(15 mg, 0.039 mmol, 79%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.61 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.38 (t, J =8.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.78 (m, 1H), 4.14 (t, J =9.2 Hz, 1H), 3.84 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.75-3.47 (m, 7H)
LCMS: C17H17FN6O4 에 대하여 389 (M+H+)
[실시예 43] 화합물 43 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII (190 mg, 0.6 mmol), 카보닐다이이미다졸 (143 mg, 0.9 mmol)을 다이클로로메탄 (5 mL)에 녹인 뒤, 트리에틸아민 (0.25 mL, 1.8 mmol)을 첨가하고 6시간 동안 상온에서 교반 하였다. 상기 반응물의 1/3을 취하여 감압증류 한 후 다이클로로메탄 (5 mL), 에탄올 (10 mL)에 다시 녹여 36시간동안 상온에서 교반시켰다. 이 용액을 증류수로 세척하고, 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 표제 화합물 43를 얻었다(23 mg, 0.058 mmol, 29%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.56 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (br t, 1H), 7.35-7.28 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 4.69 (m, 1H), 4.10 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.95 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 3.80-3.3 (m, 7H), 1.09 (t, J = 6.6 Hz, 3H)
LCMS: C17H20FN5O5 에 대하여 394 (M+H+)
[실시예 44] 화합물 44 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII (190 mg, 0.6 mmol), 카보닐다이이미다졸 (143 mg, 0.9 mmol)을 다이클로로메탄 (5 mL)에 녹인 뒤, 트리에틸아민 (0.25 mL, 1.8 mmol) 을 첨가하고 6시간 동안 상온에서 교반 하였다. 상기 반응물의 1/3을 취하여 감압증류 한 후 THF (5 mL), 에틸아민 (50 mg)에 다시 녹여 36시간동안 상온에서 교반시킨 후 2시간 동안 환류시켰다. 이 용액을 증류수로 세척하고, 황산마그네슘을 이용하여 탈수시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 표제 화합물 44을 얻었다(35 mg, 0.089 mmol, 45%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.59 (d, J = 13 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 9 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.75 (br s, 1H), 5.28 (br s, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.04 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 3.98-3.15 (m, 9H), 1.08 (t, J = 6.6 Hz, 3H)
LCMS: C17H21FN6O4 에 대하여 393 (M+H+)
[실시예 45] 화합물 45 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII을 사용하여 실시예 11의 방법으로 다이플루오로아세트 산을 사용하여 표제 화합물 45을 얻었다(840 mg, 2.1 mmol, 95%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.18 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.61 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.38 (t, J =8.8 Hz, 1H), 7.32 (dd, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.26 (t, J = 53 Hz, 1H) 4.82 (m, 1H), 4.16 (t, J =8.8 Hz, 1H), 3.84 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.80-3.53 (m, 5H)
LCMS: C16H16F3N5O4 에 대하여 400 (M+H+)
[실시예 46] 화합물 46 의 제조
상기 실시예 45 에서 얻은 화합물 45을 사용하여 실시예 2의 방법으로 표제 화합물 46을 얻었다(750 mg, 1.8 mmol, 84%).
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 9.17-9.30 (m, 1H), 8.43-8.28 (m, 1H), 7.67 9dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.61 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 7.44-7.36 (m, 1H), 6.27 (9t, 1H, J = 53.4 Hz), 4.85-4.80 (m, 1H), 4.19 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.81-3.75 (m, 2H), 3.38-3.32 (m, 2H)
LCMS: C15H16F3N5O3 에 대하여 372 (M+H+)
[실시예 47] 화합물 47 의 제조
상기 실시예 46 에서 얻은 화합물 46을 사용하여 실시예 12의 방법으로 표제 화합물 47을 얻었다(16 mg, 0.037 mmol, 25%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.57 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.21 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.13 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 6.96-6.90 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.94 (t, 1H, J = 54.0 Hz), 4.88-4.83 (m, 1H), 4.12 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 4.06 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 3.90-3.81 (m, 1H), 3.80-3.74 (m, 3H), 3.74-3.66 (m, 1H), 3.64 (s, 2H)
LCMS: C17H18F-3-N5O5 에 대하여 430 (M+H+)
[실시예 48] 화합물 48 의 제조
상기 실시예 46 에서 얻은 화합물 46을 사용하여 실시예 6의 방법으로 표제 화합물 48를 얻었다(16 mg, 0.04 mmol, 61%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.48 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.23 (t, 1H, J = 5.4 Hz), 7.16-7.08 (m, 2H), 6.94 (s, 1H), 5.94 (t, 1H, J = 54.0 Hz), 4.86-4.82 (m, 1H), 4.10 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.88-3.84 (m, 1H), 3.83 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.78-3.73 (m, 1H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.02 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.00-2.94 (m, 3H), 1.23 (t, 2H, 7.2 Hz)
LCMS: C17H20F-3-N5O3 에 대하여 400 (M+H+)
[실시예 49] 화합물 49 의 제조
상기 실시예 46 에서 얻은 화합물 46을 사용하여 실시예 5의 방법으로 표제 화합물 49을 얻었다(15 mg, 0.037 mmol, 57%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16-7.11 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.89 (br t, 1H), 5.94 (t, J = 54.0 Hz, 1H), 4.84 (m, 1H), 4.11 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.89-3.64 (m, 7H), 3.13 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.31 (t, J = 2.4 Hz, 1H)
LCMS: C18H18F-3-N5O3 에 대하여 410 (M+H+)
[실시예 50] 화합물 50 의 제조
상기 실시예 46 에서 얻은 화합물 46을 사용하여 실시예 7의 방법으로 표제 화합물 50을 얻었다(15 mg, 0.037 mmol, 68%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.53 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.17-7.13 (m, 2H), 7.01 (br t, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.94 (t, J = 54.0 Hz, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.11 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.98 (s, 2H) 3.89-3.66 (m, 5H), 3.15 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C17H17F-3-N6O3 에 대하여 411 (M+H+)
[실시예 51] 화합물 51 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII 을 사용하여 실시예 11의 방법으로 다이클로로아세트 산을 사용하여 표제 화합물 51를 얻었다(155 mg, 0.36 mmol, 86%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.99 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.61 (d, J = 12 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.16 (t, J =8.8 Hz, 1H), 3.84 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.74-3.66 (m, 3H), 3.55 (t, J = 5.2 Hz, 2H)
LCMS: C16H16Cl-2-FN5O4 에 대하여 432 (M+H+)
[실시예 52] 화합물 52 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII 을 사용하여 실시예 11의 방법으로 아이소옥사졸 산을 사용하여 표제 화합물 52를 얻었다(250 mg, 0.6 mmol, 92%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.32 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.75 (d, J =1.2 Hz, 1H) 8.42 (s, 1H), 7.60 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.38 (t, J =8.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J =1.2 Hz, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.18 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.88-3.82 (m, 3H), 3.69 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.64 (t, J = 5.6 Hz, 2H)
LCMS: C18H17-FN6O5 에 대하여 417 (M+H+)
[실시예 53] 화합물 53 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII (4.5 g, 14 mmol)을 다이클로로메탄 (75 mL)에 녹인 뒤, 포화 NaHCO3 수용액 (75 mL)을 넣고 0℃에서 사이오포스진 (1.1 mL, 14 mmol)을 첨가한 후 1 시간 동안 교반 시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고 감압 증류 한 뒤, 메탄올 (120 mL)에 녹여 밤새 환류교반 시킨 후 감압농축하고 컬럼크로마토그래피을 이용하여 흰색고체 표제 화합물 53를 얻었다(3.18 g, 8.05 mmol, 58%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.58 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.21 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.7 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.71 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.99 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.90 (m, 1H), 3.74 (t, J = 5.0 Hz, 2H),
LCMS: C16H18FN5O4S 에 대하여 396 (M+H+)
[실시예 54] 화합물 54 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII 로부터 상기 실시예 53와 동일한 방법으로 메탄올 대신 에탄올을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 54를 얻었다(210 mg, 0.51 mmol, 65%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.58 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.8 Hz, 1H), 7.21 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 3.8 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.75 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.54-4.44 (m, 2H), 4.09-4.02 (m, 3H), 3.98 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.73 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 1.31 (t, J = 7 Hz, 3H)
LCMS: C17H20FN5O4S 에 대하여 410 (M+H+)
[실시예 55] 화합물 55 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII 로부터 상기 실시예 53와 동일한 방법으로 메탄올 대신 아이소프로판올을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 55을 얻었다(52 mg, 0.12 mmol, 52%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.58 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.22 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.7 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.57 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 5.54 (m, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.12-4.06 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.99 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.73 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 1.32 (d, J = 6 Hz, 3H), 1.27 (d, J = 6 Hz, 3H)
LCMS: C18H22FN5O4S 에 대하여 424 (M+H+)
[실시예 56] 화합물 56 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII 로부터 상기 실시예 53와 동일한 방법으로 메탄올 대신 에틸아민을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 56을 얻었다(36 mg, 0.088 mmol, 57%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.58 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.20-7.19 (m, 1H), 7.13 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 6.88 (s, 1H), 4.92-4.96 (m, 1H), 4.10-4.06 (m, 3H), 3.99(t, 2H, J = 4.8 Hz), 1.44-1.43 (m,2H), 1.21 (t, 3H, J = 7.2 Hz)
LCMS: C17H21FN6O3S 에 대하여 409 (M+H+)
[실시예 57] 화합물 57 의 제조
상기 제조예 14에서 얻은 화합물 XXVII - b 로부터 상기 제조예 16과 동일한 방법으로 미쯔노브 반응을 시킨 뒤, 실시예 28와 동일한 방법으로 반응시켜 표제화합물 57를 얻었다(84 mg, 0.23 mmol, 31%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.25 (s, 1H), 7.62 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.30 (t, J = 9 Hz, 1H), 7.24 (dd, J 1 = 9 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 6.73 (br t, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.21-4.04 (m, 4H), 4.01 (s, 3H), 3.90 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.80 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C15H17FN4O4S 에 대하여 369 (M+H+)
[실시예 58] 화합물 58 의 제조
상기 실시예 53 에서 얻은 화합물 53 (400 mg, 1.01 mmol)을 메탄올 (20 mL)에 녹인 뒤, 4N HCl 다이옥산 용액 (2 mL)을 첨가하고, 10% Pd/C (50 mg)을 넣고 수소가스 하에서 2시간 교반시킨 뒤, 셀라이트로 여과하고, 감압증류하여 흰색고체 표제 화합물 58를 정량적으로 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 1.8 Hz, 1H), 7.16-7.10 (m, 2H), 6.89 (s, 1H), 6.78 (br t, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.10-3.98 (m, 6H), 3.88-3.81 (m, 3H), 3.32 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C15H18FN5O3S 에 대하여 368 (M+H+)
[실시예 59] 화합물 59 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 (150 mg, 0.41 mmol)을 다이클로로메탄 (5 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (0.14 mL, 0.82 mmol)을 넣고, 0℃에서 아세톡시아세틸 클로라이드(0.066 mL, 0.61 mmol)를 넣고, 상온에서 6시간 동안 교반한 뒤, 감압증류하여 흰색고체 표제 화합물 59을 얻었다(31 mg, 0.066 mmol, 16%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.58 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.22-7.11 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.69 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.96 (m, 1H), 4.10-3.89 (m, 9H), 3.74 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.20 (s, 3H)
LCMS: C19H22FN5O6S 에 대하여 468 (M+H+)
[실시예 60] 화합물 60 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 (0.013 mg, 0.035 mmol)을 DMF (2 mL)에 녹인 뒤, DIPEA (0.01 mL, 0.07 mmol), 아이오도메탄 (0.003 mL, 0.035 mmol)를 넣어 상온에서 밤새 교반한 뒤 컬럼크로마토그래피을 이용하여 백색고체로 표제 화합물 60을 얻었다(3.1 mg, 0.0081 mmol, 23%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.52 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.15 (dd, J 1 = 9 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 9 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.76 (br t, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.10-3.85 (m, 7H), 3.82 (t, , J 1 = 4.8 Hz, 2H), 2.99 (t, , J 1 = 4.8 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H)
LCMS: C16H20FN5O3S 에 대하여 382 (M+H+)
[실시예 61] 화합물 61 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 아이오도에탄을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 61를 얻었다(15 mg, 0.038 mmol, 45%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 1.8 Hz, 1H), 7.15 (dd, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (m, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.77 (br t, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.11-4.02 (m, 3H), 4.01 (s, 3H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.83 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.02 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.98-2.94 (m, 2H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
LCMS: C17H22FN5O3S 에 대하여 396 (M+H+)
[실시예 62] 화합물 62 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법 으로 아이오도메탄 대신 아릴브로마이드를 사용하여 반응시켜 표제 화합물 62을 얻었다(15 mg, 0.037 mmol, 67%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.51 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 7.15 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.11 (t, 1H, 8.4 Hz), 6.92 (s, 1H), 6.68 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 6.08-5.96 (m, 1H), 5.29 (dd, 1H, J 1 = 10.2 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 5.24 (dd, 1H, J 1 = 10.2 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 4.98-4.88 (m, 1H), 4.12-4.04 (m, 2H), 4.02-3.98 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.86 (dd, 1H, J 1 = 9.6 Hz, J 2 = 7.2 Hz), 3.82 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.58 (d, 2H, J = 6.0 Hz), 3.00 (t, 2H, J = 4.8 Hz)
LCMS: C18H22FN5O3S 에 대하여 408 (M+H+)
[실시예 63] 화합물 63 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 프로파질브로마이드를 사용하여 반응시켜 표제 화합물 63 를 얻었다(36 mg, 0.089 mmol, 68%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.53 (dd, 1H, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.16 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.13 (t, 1H, 8.4 Hz), 6.96 (s, 1H), 6.69 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.14-3.98 (m, 3H), 4.01 (s, 3H), 3.90-3.82 (m, 1H), 3.85 (t, 2H, J = 6.6 Hz), 3.83 (d, 2H, J = 2.4 Hz), 3.13 (t, 2H, J = 5.4 Hz), 2.31 (t, 1H, J = 2.4 Hz)
LCMS: C18H20FN5O3S 에 대하여 406 (M+H+)
[실시예 64] 화합물 64 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 1-브로모-2-부틴을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 64를 얻었다(16 mg, 0.038 mmol, 74%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.52 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.12 (t, 8.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.70 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.13-3.75 (m, 11H), 3.12 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 1.87 (t, J = 2.4 Hz, 3H)
LCMS: C19H22FN5O3S 에 대하여 420 (M+H+)
[실시예 65] 화합물 65 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 브로모아세토니트릴을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 65을 얻었다(22 mg, 0.054 mmol, 64%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.56 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.14 (t, 8.4 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.68 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.12-3.86 (m, 11H), 3.15 (t, J = 5.4 Hz, 2H)
LCMS: C17H19FN6O3S 에 대하여 407 (M+H+)
[실시예 66] 화합물 66 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 2,3-다이클로로프로펜을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 66을 얻었다(15 mg, 0.034 mmol, 54%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.52 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (t, 8.4 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.73 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.49 (s, 1H), 5.42 (s, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.12-3.84 (m, 9H), 3.72 (s, 2H), 3.08 (t, J = 5.4 Hz, 2H)
LCMS: C18H21ClFN5O3S 에 대하여 442 (M+H+)
[실시예 67] 화합물 67 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 41와 동일한 방법으로 사이클로프로판카복살데하이드를 사용하여 반응시켜 표제 화합물 67을 얻었 다(18 mg, 0.043 mmol, 84%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (t, 8.4 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.12-3.83 (m, 9H), 3.13 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.82 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.08 (m, 1H), 0.57 (m, 2H), 0.21 (m, 2H)
LCMS: C19H24FN5O3S 에 대하여 422 (M+H+)
[실시예 68] 화합물 68 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58로부터 상기 실시예 41와 동일한 방법으로 사이클로부탄논을 사용하여 반응시켜 표제 화합물 68를 얻었다(19 mg, 0.045 mmol, 76%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16-7.09 (m, 2H), 6.95 (s, 1H), 6.64 (br t, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.11-3.98 (m, 6H), 3.87 (m, 1H), 3.82 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.42 (m, 1H), 2.91 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.23-2.12 (m, 4H), 1.81-1.73 (m, 2H)
LCMS: C19H24FN5O3S 에 대하여 422 (M+H+)
[실시예 69] 화합물 69 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 에틸 브로모아세테이트를 사용하여 반응시켜 표제 화합물 69을 얻었다(24 mg, 0.053 mmol, 47%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.52 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 7.15 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.11 (t, 1H, 8.4 Hz), 6.91 (s, 1H), 6.83 (t, 1H, J = 6.6 Hz), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.26-4.21 (m, 2H), 4.13-3.97 (m, 3H), 4.01 (s, 3H), 3.85 (t, 2H, J = 4.2 Hz), 3.78 (s, 2H), 3.24 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 1.03 (t, 3H, J = 7.2 Hz)
LCMS: C19H24FN5O5S 에 대하여 454 (M+H+)
[실시예 70] 화합물 70 의 제조
상기 실시예 69 에서 얻은 화합물 69 (17 mg, 0.037 mmol)을 THF (2 mL)에 녹인 뒤, 2M LiBH4 용액 (1 mL)을 넣고 상온에서 3시간 교반 시켰다. 소량의 물을 첨가 후 컬럼크로마토그래피로 분리하여 흰색고체 표제 화합물 70을 얻었다(6.5 mg, 0.016 mmol, 43%).
1H NMR (600 MHz, chloroform-d1) δ 7.53 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 1.8 Hz), 7.17 (dd, 1H, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.12 (t, 1H, 9.0 Hz), 6.90 (s, 1H), 6.73 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.18-4.04 (m, 2H), 4.04-3.98 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.96 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.87 (dd, 1H, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 7.2 Hz), 3.84 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.07 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.00 (t, 2H, J = 4.8 Hz)
LCMS: C17H22FN5O4S 에 대하여 412 (M+H+)
[실시예 71] 화합물 71 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58 로부터 상기 실시예 60과 동일한 방법으로 아이오도메탄 대신 브로모에틸 아세테이트를 사용하여 반응시켜 표제 화합물 71을 얻었다(84 mg, 0.19 mmol, 76%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16-7.07 (m, 2H), 6.91-6.89 (m, 2H), 4.95 (m, 1H), 4.40 (t, J = 5.4 Hz, 2H) 4.13-3.86 (m, 7H), 3.83 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.15 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.09 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.10 (s, 3H)
LCMS: C19H24FN5O5S 에 대하여 454 (M+H+)
[실시예 72] 화합물 72 의 제조
상기 실시예 58 에서 얻은 화합물 58로부터 상기 실시예 53와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 72를 얻었다(54 mg, 0.12 mmol, 61%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 9.56 (t, J = 6 Hz, 1H), 7.62 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 9 Hz, 1H), 7.34 (dd, J 1 = 9 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.41 (br t, 2H), 4.17 (t, , J 1 = 9 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.85-3.76 (m, 5H)
LCMS: C17H20FN5O4S2 에 대하여 442 (M+H+)
[실시예 73] 화합물 73 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII (223 mg, 0.69 mmol), NaF (38 mg, 1.3 당량)을 에탄올 (10 mL)에 녹인 뒤, 에틸다이사이오아세테이트 (0.1 mL, 1.2 당량)를 넣고 상온에서 밤새 교반하였다. 감압증류 후 에틸아세테이트에 녹여 소금물로 세척하고 황산 나트륨으로 건조한 후 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 흰색고체 표제 화합물 73를 얻었다(220 mg, 0.58 mmol, 84%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H) 7.91 (br t, 1H), 7.56 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.7 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.28-4.24 (m, 1H), 4.12-4.07 (m 2H), 3.97 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.86-3.84 (m, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.58 (s, 3H)
LCMS: C16H18-FN5O3S 에 대하여 380 (M+H+)
[실시예 74] 화합물 74 의 제조
상기 실시예 73 에서 얻은 화합물 73 (220 mg, 0.58 mmol)을 메탄올 (10 mL)에 녹인 뒤, 4M HCl 다이옥산용액 (1 mL)을 첨가하고, 2시간 상온에서 반응 시켰다. 감압농축하여 표제 화합물 74을 염산 염의 형태로 정량적으로 240 mg 얻었다.
1H NMR (400MHz, , DMSO-d6) δ 10.5 (br t, 1H), 7.70 (d, J = 14 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.00 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 3.94-3.78 (m, 5H), 3.62 (br t, 2H), 2.45 (s, 3H)
LCMS: C15H18-FN5O2S 에 대하여 352 (M+H+)
[실시예 75] 화합물 75 의 제조
상기 실시예 74 에서 얻은 화합물 74를 사용하여 실시예 7과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 75을 얻었다(35 mg, 0.090 mmol, 42%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.74 (br t, 1H), 7.55 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 1.8 Hz, 1H), 7.18-7.12 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 5.01 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.12-4.04 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 3.88-3.83 (m, 3H), 3.15 (t, J = 4. Hz, 2H), 2.98-2.94 (m, 2H), 1.24 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 2.61 (s, 3H)
LCMS: C17H19-FN6O2S 에 대하여 391 (M+H+)
[실시예 76] 화합물 76 의 제조
상기 실시예 74 에서 얻은 화합물 74를 사용하여 실시예 12와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 76를 얻었다(35 mg, 0.086 mmol, 36%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.80 (m, 1H), 7.56 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.19-7.17 (m, 1H), 7.13-7.10 (m, 1H), 5.00-4.96 (m, 1H), 4.48 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 4.29-4.25 (m, 1H), 4.10-4.07 (m, 2H), 4.05 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.86-3.83 (m, 1H), 3.74 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.27 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 2.58 (s, 3H)
LCMS: C17H20FN5O4S 에 대하여 410 (M+H+)
[실시예 77] 화합물 77 의 제조
상기 제조예 11 에서 얻은 화합물 XIII을 사용하여 참고문헌 Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16, 3475-3478. 와 같이 Ph2CHCH2CH2OC(S)CHF2 를 사용하여 상온에서 밤새반응시켜 표제 화합물 77을 얻었다(350 mg, 0.84 mmol, 79%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 8.48 (br t, 1H), 7.56 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.20 (dd, J 1 = 8.8 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.22 (t, J = 56 Hz, 1H), 5.03 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.16 (t, J =8.8 Hz, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.99 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.82-3.73 (m, 3H)
LCMS: C16H16F3N5O3S 에 대하여 416 (M+H+)
[실시예 78] 화합물 78 의 제조
상기 실시예 77 에서 얻은 화합물 77을 사용하여 실시예 74와 동일한 방법으로 반응시킨 뒤, 실시예 5와 같이 반응 시켜 표제 화합물 103를 얻었다(26 mg, 0.061 mmol, 35%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.65 (br t, 1H), 7.49 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.14-7.13 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.22 (t, J = 56 Hz, 1H), 5.03 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.15 (t, J =8.8 Hz, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.86-3.78 (m, 5H), 3.14 (t, J =4.8 Hz, 2H), 2.31 (t, J = 1.8 Hz, 1H),
LCMS: C18H18F3N5O2S 에 대하여 426 (M+H+)
[실시예 79] 화합물 79 의 제조
상기 제조예 6 에서 얻은 화합물 VI을 사용하여 제조예 12에서 boc-아미노아이소옥사졸 대신 하이드록시아이소옥사졸을 사용하여 제조예 12와 동일한 방법으로 반응시킨 뒤, 다시 제조예 10과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 79을 얻었다(53 mg, 0.14 mmol, 28%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.65 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.0 Hz, 1H), 7.41-7.37 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.39 (d, J = 2 Hz, 1H), 5.10 (m, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.21 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.93 (m, 1H), 3.84 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.70 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C17H16-FN5O5 에 대하여 390 (M+H+)
[실시예 80] 화합물 80 의 제조
상기 제조예 6 에서 얻은 화합물 VI을 사용하여 제조예 12에서 boc-아미노아이소옥사졸 대신 boc-아미노사이아졸을 사용하여 제조예 12와 동일한 방법으로 반응시킨 뒤, 다시 제조예 10과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 80을 얻었다(26 mg, 0.064 mmol, 16%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.57 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.21 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.7 Hz, 1H), 7.13-7.08 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 6.55 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.34 (br s, 1H), 4.97 (m, 1H), 4.10 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.92-3.79 (m, 3H), 3.73 (t, J = 5.4 Hz, 2H)
LCMS: C17H17-FN6O3S 에 대하여 405 (M+H+)
[실시예 81] 화합물 81 의 제조
상기 제조예 13 에서 얻은 화합물 XIX을 사용하여 제조예 10과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 81를 얻었다(35 mg, 0.094 mmol, 25%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 1H), 7.77 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.41 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.08-7.04 (m, 2H), 6.84 (d, J = 1 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.06 (m, 1H), 4.78 (d, J = 4 Hz, 2H), 4.14 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.94-3.64 (m, 7H)
LCMS: C16H16-FN7O3 에 대하여 374 (M+H+)
[실시예 82] 화합물 82 의 제조
상기 실시예 81 에서 얻은 화합물 81를 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 82을 얻었다(84 mg, 0.24 mmol, 73%).
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.64-7.56 (m, 2H), 7.35 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.08-7.04 (m, 2H), 5.18 (m, 1H), 4.85 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.27 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.93 (m, 1H), 3.78 (br t, 2H), 3.35 (br t, 2H)
LCMS: C15H16-FN7O2 에 대하여 346 (M+H+)
[실시예 83] 화합물 83 의 제조
상기 실시예 82 에서 얻은 화합물 82 (62 mg, 0.16 mmol)을 메탄올 (5 mL)에 녹인 뒤, 4M HCl 다이옥산용액 (0.1 mL)을 첨가하고, 포르말린 (0.2 mL), Pd/C (6 mg)을 넣고 수소가스 하에서 2시간 상온에서 반응 시켰다. 셀라이트로 여과하고 증류수(10 mL)에 녹인 뒤, 중화시키고 다이클로로메탄으로 추출하여 황산나트륨으로 건조하고 감압농축하여 표제 화합물 83을 얻었다(34 mg, 0.086 mmol, 54%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.78 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.39-7.00 (m, 3H), 6.88 (s, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.80 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 4.15 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.80 (t, J = 4.6 Hz, 2H),2.98 (t, J = 4.6 Hz, 2H) 2.79 (s, 3H)
LCMS: C16H18-FN7O2 에 대하여 360 (M+H+)
[실시예 84] 화합물 84 의 제조
상기 실시예 82 에서 얻은 화합물 82을 사용하여 실시예 5와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 84을 얻었다(26 mg, 0.068 mmol, 74%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.39-7.03 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.80 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 4.15 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.84-3.82 (m, 4H), 3.12 (br t, 2H), 2.34 (s, 1H)
LCMS: C18H18-FN7O2 에 대하여 384 (M+H+)
[실시예 85] 화합물 85 의 제조
상기 제조예 12 에서 얻은 화합물 XV 을 사용하여 제조예 10과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 85을 얻었다(81 mg, 0.21 mmol, 31%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 1H), 8.02 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.54 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.7 Hz, 1H), 7.08 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.06 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.87-3.57 (m, 5H)
LCMS: C17H17-FN6O4 에 대하여 389 (M+H+)
[실시예 86] 화합물 86 의 제조
상기 실시예 85 에서 얻은 화합물 85을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 86을 얻었다(35 mg, 0.097 mmol, 71%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.40 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.70 (d, J = 13 Hz, 1H), 7.60 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.20 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.89-3.36 (m, 7H)
LCMS: C16H17-FN6O3 에 대하여 361 (M+H+)
[실시예 87] 화합물 87 의 제조
상기 실시예 86 에서 얻은 화합물 86을 사용하여 실시예 12와 동일한 방법으 로 반응시켜 표제 화합물 87을 얻었다(15 mg, 0.036 mmol, 35%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.62 (dd, J 1 = 14 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.38-7.33 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.56 (t, J = 6 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.91-4.87 (m, 1H), 4.54-4.52 (m, 1H), 4.32 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.18-4.15 (m, 1H), 3.89 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.83-3.80 (m, 1H), 3.70 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.46-3.43 (m, 2H)
LCMS: C18H19-FN6O5 에 대하여 419 (M+H+)
[실시예 88] 화합물 88 의 제조
상기 실시예 86 에서 얻은 화합물 86을 사용하여 실시예 59과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 88를 얻었다(210 mg, 0.46 mmol, 42%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ = 8.07 (d, 1H, J = 1.8 Hz), 7.58 (dd, 1H, J 1 = 13.2 Hz, J 2 = 3.0 Hz), 7.21 (dd, 1H, J 1 = 8.4 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.11 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.82 (s, 1H), 5.88 (d, 1H, J = 1.8 Hz), 5.08 (s, 2H), 4.96-5.00 (m, 1H), 4.40 (t, 1H, J = 6.6Hz), 4.09 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 4.02 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 3.77-3.78 (m, 1H), 3.74-3.76 (m, 1H), 3.66-3.62 (m, 1H)
LCMS: C20H21-FN6O6 에 대하여 461 (M+H+)
[실시예 89] 화합물 89 의 제조
상기 실시예 86 에서 얻은 화합물 86을 사용하여 실시예 3과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 89을 얻었다(36 mg, 0.096 mmol, 68%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.07 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.51 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.15 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.09 (t, 8.4 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.87 (d, J = 1.2 Hz 1H), 4.97 (m, 1H), 4.42 (t, J = 6 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.87-3.60 (m, 5H), 2.98 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H)
LCMS: C17H19-FN6O3 에 대하여 375 (M+H+)
[실시예 90] 화합물 90 의 제조
상기 실시예 86 에서 얻은 화합물 86을 사용하여 실시예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 90을 얻었다(15 mg, 0.039 mmol, 45%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.07 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 7.51 (dd, 1H, J 1 = 13.6 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.15 (dd, 1H, J 1 = 9.2 Hz, J 2 = 2.4 Hz), 7.09 (t, 1H, J = 8.8 Hz), 6.91 (s, 1H), 5.87 (dd, 1H, J = 1.6 Hz), 4.99-4.93 (m, 1H), 4.40 (t, 1H, J = 6.4 Hz), 4.07 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 3.86-3.81 (m, 3H), 3.78-3.72 (m, 1H), 3.64 (t, 1H, J = 3.2 Hz), 3.62-3.58 (m, 1H), 3.01 (t, 2H, J = 4.8 Hz), 2.95 (t, 2H, J = 7.07 Hz), 1.23 (t, 3H, J = 7.0 Hz)
LCMS: C18H21-FN6O3 에 대하여 389 (M+H+)
[실시예 91] 화합물 91 의 제조
상기 실시예 86 에서 얻은 화합물 86을 사용하여 실시예 5와 동일한 방법으 로 반응시켜 표제 화합물 91를 얻었다(25 mg, 0.063 mmol, 64%).
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.07 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.11 (t, 8.4 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.87 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.35 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.87-3.60 (m, 7H), 3.13 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.31 (t, J = 2.4 Hz, 1H)
LCMS: C19H19-FN6O3 에 대하여 399 (M+H+)
[실시예 92] 화합물 92 의 제조
상기 제조예 17 에서 얻은 화합물 XXIII 을 사용하여 제조예 10과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 92을 얻었다(240 mg, 0.75 mmol, 32%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.61 (dd, J 1 = 13 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.25 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.7 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.04-3.99 (m, 5H), 3.79-3.73 (m, 3H), 2.58 (br s, 1H)
LCMS: C14H15-FN4O4 에 대하여 323 (M+H+)
[실시예 93] 화합물 93 의 제조
상기 실시예 92 에서 얻은 화합물 92을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 93를 얻었다(190 mg, 0.65 mmol, 74%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 7.73 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.60 (t, J = 9 Hz, 1H), 7.45 (dd, J 1 = 9.0 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.11 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.78 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.70-3.55 (m, 2H), 3.36 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C13H15-FN4O3 에 대하여 295 (M+H+)
[실시예 94] 화합물 94의 제조
상기 실시예 93 에서 얻은 화합물 93 (150 mg, 0.51 mmol)을 메탄올 (5 mL)에 녹인 뒤, 포름알데하이드 (37% 수용액, 0.21 mL, 2.55 mmol), 아세트산 (0.03 mL, 0.51 mmol), NaBH3CN (48 mg, 0.77 mmol)을 첨가하고 1시간 상온에서 반응 시켰다. 이 용액을 감압증류하고 100 mL의 다이클로로메탄으로 녹인 뒤, 중탄산나트륨 포화수용액, 염화나트륨 포화수용액(brine)으로 순차적으로 씻어주고, 무수황산나트륨을 이용하여 탈수시켜 감압농축하고 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 분리하여 표제 화합물 94를 얻었다(71 mg, 0.23 mmol, 45%).
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (dd, J 1 = 13.8 Hz, J 2 = 2.4 Hz, 1H), 7.33-7.30 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 5.23 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.07 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.69-3.54 (m, 2H), 2.87 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.61 (s, 3H)
LCMS: C14H17-FN4O3 에 대하여 309 (M+H+)
[실시예 95] 화합물 95 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 4-플루오로나이트로벤젠을 사용하여 화합물 1 과 동일한 방법으로 합성하여 표제 화합물 95을 얻었다(300 mg, 0.86 mmol).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 7.07 (m, 2H), 6.00 (br t, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.07 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.02 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.81 (m, 1H), 3.76 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.72-3.61 (m, 2H), 2.03(s, 3H)
LCMS: C16H19N5O4 에 대하여 346 (M+H+)
[실시예 96] 화합물 96 의 제조
상기 실시예 95 에서 얻은 화합물 95을 사용하여 실시예 3와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 96을 얻었다(42 mg, 0.13 mmol, 48%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.48 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.02 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 5.93 (br t, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.05 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 3.81 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.79-3.58 (m, 3H), 3.01 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)
LCMS: C16H21N5O3 에 대하여 332 (M+H+)
[실시예 97] 화합물 97 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 4-플루오로나이트로벤젠을 사용하여 화합물 53 과 동일한 방법으로 합성하여 표제 화합물 97을 얻었다(540mg, 1.4 mmol).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1H), 7.55 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.11 (s, 1H), 7.07 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.69 (br t, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.13-4.05 (m, 3H), 4.04-3.99 (m, 5H), 3.90 (m, 1H), 3.76 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C16H19N5O4S 에 대하여 378 (M+H+)
[실시예 98] 화합물 98 의 제조
상기 실시예 97 에서 얻은 화합물 97을 사용하여 실시예 60과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 98를 얻었다(160 mg, 0.44 mmol, 62%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.48 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.02 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.69 (br t, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 4.01-3.95 (m, 4H), 3.86 (m, 1H), 3.81 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.01 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H)
LCMS: C16H21N5O3S 에 대하여 364 (M+H+)
[실시예 99] 화합물 99 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 4-플루오로나이트로벤젠을 사용하여 화합물 81 와 동일한 방법으로 합성하여 표제 화합물 99을 얻었다(340 mg, 0.96 mmol).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.80 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 7.03 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 5.08 (m, 1H), 4.81 (d, J = 4 Hz, 2H), 4.17 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.00-3.97 (m, 4H), 3.73 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C16H17-N7O3 에 대하여 356 (M+H+)
[실시예 100] 화합물 100 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 4-플루오로나이트로벤젠을 사용하여 화합물 85 과 동일한 방법으로 합성하여 표제 화합물 100을 얻었다(280 mg, 0.76 mmol).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 8.06 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9 Hz, 2H), 7.10 (s, 1H), 7.06 (d, J = 9 Hz, 2H), 5.89 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.10 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.89 (m, 1H), 3.75-3.72 (m, 3H), 3.62 (m, 1H)
LCMS: C17H18-N6O4 에 대하여 371 (M+H+)
[실시예 101] 화합물 101 의 제조
상기 실시예 100 에서 얻은 화합물 100을 사용하여 실시예 89과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 101를 얻었다(37 mg, 0.10 mmol, 68%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 7.48 (d, J = 9 Hz, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.01 (d, J = 9 Hz, 2H), 5.87 (s, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.40 (br t, J = 6 Hz, 1H), 4.09 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.85 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.80 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.89 (m, 1H), 3.76-3.59 (m, 2H), 3.00 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H)
LCMS: C17H20-N6O3 에 대하여 357 (M+H+)
[실시예 102] 화합물 102 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 4-플루오로나이트로벤젠을 사용하여 제 조예 14과 동일한 방법으로 만든 화합물 XXVII - c 를 사용하여 실시예 57과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 102을 얻었다(24mg, 0.069 mmol, 37%).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.54 (d, J = 9 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 9 Hz, 2H), 6.67 (br t, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.21 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.13-4.07 (m, 3H), 4.01 (s, 3H), 3.88 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C15H18-N4O4S 에 대하여 351 (M+H+)
[실시예 103] 화합물 103 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 3,4,5-트리플루오로나이트로벤젠을 사용하여 화합물81 와 동일한 방법으로 합성하여 표제 화합물 103를 얻었다(350 mg, 0.90 mmol).
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.77 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.81 (d, J = 4 Hz, 2H), 4.15 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.02-3.98 (m, 3H), 3.65 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C16H15-F2N7O3 에 대하여 392 (M+H+)
[실시예 104] 화합물 104 의 제조
상기 실시예 103 에서 얻은 화합물 103를 사용하여 실시예 83와 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 104를 얻었다(23 mg, 0.061 mmol, 62%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.81 (d, J = 4 Hz, 2H), 4.16 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.73 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.99 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C16H17-F2N7O2 에 대하여 378 (M+H+)
[실시예 105] 화합물 105 의 제조
상기 반응식 6에 설명한 바와 같이, 3,4,5-트리플루오로나이트로벤젠을 사용 하여 화합물 85 과 동일한 방법으로 합성하여 표제 화합물 105을 얻었다(640 mg, 1.6 mmol).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 8.08 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 5.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99 (m, 1H), 4.54 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 9 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.90-3.73 (m, 2H), 3.69-3.62 (m, 3H)
LCMS: C17H16-F2N6O4 에 대하여 407 (M+H+)
[실시예 106] 화합물 106 의 제조
상기 실시예 105에서 얻은 화합물 105을 사용하여 실시예 89과 동일한 방법으로 반응시켜 표제 화합물 106을 얻었다(24 mg, 0.061 mmol, 74%).
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99 (m, 1H), 4.92 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.89-3.61 (m, 5H), 3.00 (t, J = 4.8 Hz, 2H)
LCMS: C17H18-F2N6O3 에 대하여 393 (M+H+)
[실험예 1] 시험관 내 항균활성 측정
상기 실시예 1 내지 106에서 합성한 옥사졸리디논 유도체의 항균력을 알아보기 위하여 시험관 내 활성 검사를 하기와 같은 방법으로 수행하였다.
본 발명의 실시예 1 내지 106의 옥사졸리디논 유도체들의 시험관 내 항균 활성은 분광 측정에 의한 약물 비처리 대조군 성장과 비교하여 균의 성장을 90%까지 억제할 수 있는 항생제의 최소 농도인 90% 억제 농도(MIC90, ug/mL)를 측정하는 것으로 평가하였다. MIC90는 CLSI 표준[참고 : Clinical and Laboratory Standards Institute Document.(2000) Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Test for Bacteria that Grow Aerobically-Fifth Edition:M7-A5. CLSI, Villanova, PA]에 기초한 브로스 마이크로 희석법(Broth microdilution method)로 측정하였다.
1) 시험 균주
메티실린 감수성 스타필로코커스 아우레우스(MSSA, methicillin susceptible Staphylococcus aureus), 메티실린 내성 스타필로코커스 아우레우스(MRSA, methicillin resistant Staphylococcus aureus), 반코마이신 내성 엔테로코카이(VRE, Vancomycin resistant Enterococci), 반코마이신-리네졸리드 내성 엔테로코쿠스 패칼리스 (VLRE, Vancomycin - Linezolid Resistant Enterococcus faecalis), 해모필루스 인플루엔자(Haemophilus Influenzae)와 모락셀라(moraxella)등 모두 14개 균주 (S. aureus , S. aureus MR , S.epidermidis, S. epidermidis MR , E. faecalis , E. faecalis VanA , E. faecalis VanA LR, E. faecium VanA , E. faecium , E.coli, P. aeruginosa , K. pneumoniae , H. influenzae , M. catarrhalis)를 사용하여 항균력을 측정하였으며, 그 중 가장 중요한 두 균주 메티실린 내성 스타필로코커스 아우레우스(MRSA, methicillin resistant Staphylococcus aureus)와 반코마이신-리네졸리드 내성 엔테로코쿠스 패칼리스 (VLRE, Vancomycin -Linezolid Resistant Enterococcus faecalis)의 결과를 표 1에 나타내었다.
2) 시험물질 제조법
시험물질(실시예 1 내지 106에서 합성한 본 발명에 따른 옥사졸리디논 유도체 화합물 1 내지 106)을 10240 ug/mL의 농도로 DMSO에 녹인 후 2배(fold)씩 희석하여 멸균된 3차 증류수로 20배(fold) 희석하였다. 항균 실험 시 최종농도는 최고 128ug/mL에서 최저 0.0625ug/mL이었으며, 부형제로 사용된 DMSO의 농도는 최종적으로 2.5%(V/V)였다. 대조물질로는 파마시아 앤 업존의 리네졸리드(화학식 B)의 화합물을 사용하여 항균활성을 비교하여 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
[화학식 B]
[표 1] 화학식 1의 화합물들의 항균력 (MIC90, ug/mL)
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 옥사졸리디논 유도체는 대조물질인 리네졸리드에 비하여 훨씬 낮은 농도에서 기존 항생제에 내성을 갖는 스타필로코커스 아우레우스와 엔테로코쿠스 패칼리스 등의 그람 양성균에 대해 강한 항균력을 나타내었다. 또한 상기 표 1에는 나타내지 않았으나, 다양한 그람 양성균에 효과적이며, 해모필루스 인플루엔자 와 같은 그람 음성균에도 효과적인 경우도 있었다. 특히 리네졸리드 내성 엔테로코쿠스 패칼리스에 대해 탁월한 항균력을 보여주고 있어 최근 발현하기 시작하여 앞으로 큰 문제가 될 수 있는 리네졸리드 내성균에도 유용하게 사용 될 수 있음을 보여준다.
따라서, 본 발명의 옥사졸리디논 유도체는 그람 양성균에 대한 브로드 스펙트럼(broad spectrum)을 가지는 항생제로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
[실험예 2] 물에 대한 용해도(Aqueous solubility) 측정
본 발명에 따른 화학식 1의 옥사졸리디논 유도체 화합물 중 대표적인 화합물들의 메탄술폰산(MSA) 염의 물에 대한 용해도를 측정하여 하기 표 2에 나타내었다. 대조물질로는 상기 화학식 B에 나타낸 리네졸리드을 사용하였다.
용해도의 측정은 1H NMR 을 이용하였으며 자세한 방법은 다음과 같다. 먼저 화합물의 메탄술폰산 염 100 mg을 0.5 mL D2O 에 넣고 30분간 잘 흔들어서 포화 용액으로 만든 뒤, 여과하여 0.3 mL 를 취한다. 여기에 농도를 정확히 알고 있는 reference 화합물 용액(본 실험에서는 DMSO를 D2O로 희석시킨 용액을 사용함) 0.3 mL 를 넣어준다. 이 용액을 1H NMR 을 찍어 reference peak (DMSO) 와 샘플 peak 의 integral 비를 구한다. Reference 용액의 농도는 알고 있으므로 integral 비로 샘플의 mol 수를 계산한다. 이렇게 얻은 mol 수를 이용하여 1 mL 에 포화될 수 있는 샘플의 용해도를 계산한다.
[표 2] 화합물 염산 염과 메탄술폰산 염의 물에 대한 용해도
위 표에 나타낸 바와 같이 화학식 1의 화합물은 염의 형태로 만들 수 있으므로 물에 대한 용해도가 10%가 넘는다. 반면 대조물질인 리네졸리드는 물에 대한 용해도가 0.3%에 불과하다. 그러므로 본 발명의 화합물들은 리제졸리드에 비해 최고 50 배 이상 물에 대한 용해도가 좋다. 이러한 장점은 본 발명의 화합물들은 경구 주사 겸용제로 가능한 항생제로 개발 할 수 있어 리네졸리드의 단점을 극복 할 수 있으며, 또한 MRSA 뿐 만 아니라 리네졸리드 내성 균주에도 효과적이므로 리네졸리드를 대체 할 수 있는 뛰어난 항생제로의 가능성을 보여주고 있다.
[실험예 3] 화합물들의 세포독성 및 MAO(Monoamine Oxidase) 저해실험
1) MTT 방법을 이용한 세포 독성 측정법
MTT 방법은 포유동물 세포생존과 세포증식을 정량하는 발색법이다. 살아있는 세포의 마이토콘드리아 막에 존재하는 숙신산 탈수소효소(succinate dehydrogenase)가 MTT를 환원시켜 파란색 포마잔(formazan) 반응물을 생성한다. 이 방법은 세포의 호흡을 측정하는 것이며, 생성된 포마잔의 양은 배양액내 살아있는 세포의 숫자와 비례적인 관계에 있다. 본 실험에서는 Chinese Ovary Cell(CHO-K1)을 사용하였으며 미국 ATCC사에서 구입하였다. 계대배양중인 CHO 세포를 trypsin-EDTA 용액을 처리하여 배양용기에서 분리시킨후 96 well microplate에 5000개씩 seeding하였다. 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양한후 상기 실시예에서 합성한 본 발명에 따른 옥사졸리디논 유도체를 7개의 다양한 농도구배를 처리하였다. 37℃, 5% CO2 incubator에서 다시 48시간 배양한후 5mg/mL의 MTT 용액을 15uL씩 넣은후 37℃, 5% CO2 incubator에서 2시간정도 반응시켰다. 2시간후 세포배양 배지를 버리고 100uL의 DMSO 용액을 각 well에 가했다. Microplate를 30분 교반한 후, Spectramax plus 190 plate reader(Molecular Devices, USA)를 이용하여 550nm에서의 흡광도를 측정하였다. 화합물을 처리하지 않은 대조군 대비 화합물 처리군의 흡광도 감소는 살아있는 세포의 감소를 나타내며, 화합물의 세포 독성 정도를 측정할 수있다. 본 발명에 따른 화합물의 CC50값은 다양한 농도구배 하에서의 흡광도를 대조군 대비 백분율로 환산한 후 에리타쿠스 소프트웨어(Erithacus Software)에서 구입한 GraFit(version 5.0.12) 통계처리 프로그램을 사용하여 세포증식을 50% 감소시키는 농도로 구하였다.
2) MAO ( Monoamine Oxidase ) Inhibition
Linezolid는 모노아민 산화효소(monoamine oxidase)에 대해서 비선택적, 가역적 억제제로 작용하는 것으로 알려져 있으며 아드레날린 작용성(adrenergic) 혹은 세로토닌 작용성 (serotonergic)약물과 작용할 가능성이 있다. 상기 실시예에서 합성한 본 발명에 따른 옥사졸리디논 유도체의 monoamine oxiase(MAO) A형과 B형에 대한 활성 억제를 측정하였다. MAO-GLO assay kit를 미국 Promega사에서 구입하였으며 MAO A형과 B형 효소는 미국 Sigma-Aldrich사에서 구입하였다. MAO 효소가 기질의 아민기(amine)에 작용하여 생긴 알데히드(aldehyde) 반응물로부터 루시페린 메틸 에스터(luciferin methyl ester)가 생성된다. 여기에 루시페린 검출 시약(luciferin detection reagent)를 가하여 MAO 효소반응을 비활성시킨다. 동일시약에 들어있는 에스터 분해효소(esterase)와 루시페린 분해효소(luciferase)는 루시페린(luciferin)을 를 산화시켜서 빛(light)을 생성시키며 이 발광을 측정하여 MAO효소의 활성을 측정하였다. 발광은 LEADseeker(Amershan Bioscience, Sweden)이때 본 발명에 따른 화합물은 3.9~500uM의 화합물 존재하에 MAO활성을 측정한후 화합물을 처리하지 않은 대조군의 활성대비 억제정도를 비교하였다. 대조물질로는 리네졸리드(Linezolid)를 사용하였다. 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물의 MAO에 대한 억제 활성을 측정하고자 할 때 효소 활성을 50% 억제하는 화학식 1의 화합물의 농도, 즉 IC50값(이는 억제 상수 Ki와 관계가 있다)을 측정하여 평가할 수 있다. 가수분해의 상대속도(억제되지 않은 대조군과 비교) 대 화학식 1의 화합물의 농도의 로그를 플로팅한후, 기질 가수 분해의 속도를 50% 감소시키는 억제제의 농도를 구할 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물의 MAO 억제효과는 억제상수 Ki 값을 결정함으로써 측정하였다.
수학식 1
Ki=IC50/{1+([S]/Km)}
상기 식에서 Km은 미하엘리스-멘텐(Michaelis-Menten)상수이며 효소반응의 최대속도의 1/2일때 기질의 농도를 나타내고, IC50는 기질 가수 분해의 속도를 50% 감소시키는 억제제의 농도를 나타낸다. 가수분해의 상대속도(억제되지 않은 대조군과 비교) 대 화학식 1의 화합물의 농도의 로그를 플로팅 한후, IC50농도를 구했으며 에리타쿠스 소프트웨어(Erithacus Software)에서 구입한 GraFit(version 5.0.12) 통계처리 프로그램을 사용하였다.
본 발명에 따른 화학식 1의 옥사졸리디논 유도체 화합물 중 대표적인 화합물들의 세포독성 실험과 MAO 저해 실험의 결과를 아래 표 3에 나타내었다.
대조물질인 리네졸리드는 상당한 MAO 저해효과를 보임으로 독성 또는 부작용의 가능성이 높은 약물로 MAO 저해 효과가 없는 화합물을 찾기 위해 많은 노력을 하고 있다. 일반적으로 옥사졸리디논 계열의 화합물이 MAO 저해제로 사용 될 수 있을 정도로 강한 MAO 저해 효과를 보여준다. 그러나 MAO 저해제가 필요한 사람에게는 약이 되지만 항생제의 용도로 사용 될 때에는 부작용 혹은 독성으로 나타나게 된다. 따라서 옥사졸리디논계 항생제에서는 MAO 저해의 효과를 반드시 측정하며, 이 효과가 적을수록 유리한 화합물이 된다.
하기 표 3에는 대조물질로 리네졸리드와 상기 화학식 D에 나타낸 동아제약에서 개발한 TR-700을 사용하였다. TR-701은 TR-700의 프로드럭 이므로 in vitro 실험에서는 실제 약효를 내는 TR-700을 사용하는 바람직 하다.
[표 3] 세포독성 및 MAO(Monoamine Oxidase Inhibition) 저해실험
위 표에서 나타난 바와 같이 TR-700 은 상당한 세포독성을 보여주고 있으며 또한 강한 MAO 저해효과를 나타내고 있다. 그러나 본 발명의 화합물들은 대부분 세포독성에는 안전하며 MAO 저해 효과 또한 10배 이상 떨어짐을 보인다.
이와 같이 본 발명의 화합물들은 독성도 적으면서 높은 용해도와 높은 항균력을 보여 주고 있으므로 차세대 항생제로 가능성이 아주 크다고 할 수 있다.