JPS639836B2 - - Google Patents

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JPS639836B2
JPS639836B2 JP59159275A JP15927584A JPS639836B2 JP S639836 B2 JPS639836 B2 JP S639836B2 JP 59159275 A JP59159275 A JP 59159275A JP 15927584 A JP15927584 A JP 15927584A JP S639836 B2 JPS639836 B2 JP S639836B2
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JP
Japan
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lipid
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linolenic acid
gla
carbon source
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JP59159275A
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JPS6137096A (ja
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Akira Seto
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Nisshin Oillio Group Ltd
Original Assignee
Nisshin Oil Mills Ltd
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Publication date
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
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    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi

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  • General Engineering & Computer Science (AREA)
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
＜産業上の利用分野＞ 本発明はタムニデイウム属に属するγ−リノレ
ン酸（以下GLAという）含量の高い脂質生産菌
を炭素源濃度の高い培地で培養し、集めた菌体よ
りGLA含量の高い脂質（中性脂質、極性脂質な
ど）を製造する方法に係る。 ＜従来の技術＞ これまでに報告されたGLA含有微生物につい
てはR.O.Mumma〔Lipids、６、584（1971）〕、R.
Shaw〔Biochem.Biphys.Acta.98、230（1965）〕、
鈴木ら〔油化学、30、863、（1981）〕などの文献
に記されているが、全脂質でのGLA含量は全体
に低く、十数％にすぎない。また、最近公告され
た鈴木らの発明（特公昭58―22199号）ではモル
テイエレラ属の糸状菌を用い、培地に炭化水素を
添加することにより、GLA含量が全脂質の脂肪
酸組成の20％以上になると報告されている。しか
し、このように、培地中に炭化水素を添加して
も、完全にその炭化水素を資化できず、醗酵終了
後も、いくらかが培地中に残存する。そのため総
脂質中に、この炭化水素が混入しその後のGLA
の精製に困難を生じるという問題があつた。 ＜発明が解決しようとする問題点＞ そこで本発明者らはGLA含量が高い、油
分含量が高い、生育速度が早いなどの条件を満
す菌株のスクリーニングを行つた結果、タムニデ
イウム・エレガンス（Thamnidium elegans以下
T.elegansと記す）〔NRRL−1613、2468、2469〕
が、これにほぼ適合するこを見出し、本発明を完
成するに至つた。 ＜問題点を解決するための手段＞ 本発明はタムニデイウム属に属するγ−リノレ
ン酸含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培
地で培養し、培養物からγ−リノレン酸含量の高
い脂質を採取することを特徴とする脂質成分の製
造方法である。 本発明で使用する菌は、上述のT.elegansが適
当であるが、タムニデイウム属に属するものであ
ればすべての菌が使用できる。例えば、タムニデ
イウムアノマラム（Thamnidium anomalum）
〔NRRL−2465〕などである。これらの菌はいず
れも米国ノーザンリージヨナルリサーチラボラト
リー（Northern Regional Research
Laboratory）に保存され、ガタログに記載され
ている糸状菌である。 培養する際の培地組成については、特に限定す
るものではないが、グルコース、酢酸ナトリウム
などの有機炭素源が好ましい。またその使用量は
３〜30重量％程度用いるのが望ましい。窒素源
は、酵母エキス、麦芽エキス等の有機窒素源のほ
か、硝酸塩、尿素なども使用できる。また、これ
らの組成分の他、ビタミンB6のようなビタミン
類の添加も、生育を早めるのに効果的である。 上記糸状菌の培養は、通常液体培地中で静置培
養、振とう培養、通気撹拌培養などにより行う。
培地中のPHは微酸性乃至中性が良い。培養温度は
15〜30℃程度が好ましく、培養期間は４〜15日間
程度が必要である。このようにして得られた培養
物より菌体を集め、その菌体より脂質抽出を行
う。GLAを含む脂質が培地中に分泌されること
はないので、培地を回収する必要はない。脂質の
抽出法については、湿菌体とガラスビーズを混合
してｎ−ヘキサンなどの溶剤とともにホモジナイ
ズする方法や、湿菌体を凍結乾燥後、ｎ−ヘキサ
ン：イソプロパノール混合溶剤などで抽出する方
法などで行われる。また、必要により得られた総
脂質を常法によりケン化分解すれば、GLA含量
の高い脂肪酸混合物が得られる。 GLAは、リノール酸から動物体内において合
成される脂肪酸であり、GLAとなつた後にもビ
スホモ−γ−リノレン酸を経由してプロスタグラ
ンジE1、F1およびE2、F2などに変換されるとい
う非常に重要な役割を持つ物質である。最近にな
り、リノール酸からGLAへの変換反応が、老化、
アルコール摂取、ビタミン不足などの要因により
著しく阻害されることが見出され、GLAの不足
による体内プロスタグランジンバランスの変化が
アレルギー疾患、血栓症、ガンなどの原因の１つ
にあげられるようになつている。 GLAは、月見草種子などのような植物種子中
にも微量存在することが知られているが、総脂質
の脂肪酸組成のせいぜい10％どまりである。ま
た、このような植物種子油はGLA以外の脂肪酸
主成分として70％ほどのリノール酸を含むためケ
ン化分解した後の脂肪酸混合物よりGLAを精製
する場合、溶剤分別などの手法を用いても、両者
が非常によく似た挙動を示すため分離が困難であ
つた。これに対し、本発明によるGLA高含量油
は表−１に示すようにGLAに対し、リノール酸
のような物理的性質のよく似た脂肪酸が比較的少
なく、GLAの精製も容易である。
【表】 また本発明方法によれば、炭素源はグルコース
などの安全性の確認された有機炭素源を使用でき
るから、このような場合は、炭化水素を炭素源と
する場合に比べ安全性が高いというメリツトもあ
る。またタムニデイウム属の菌は、これまでにア
フラトキシンなどの有毒物質を生産しないことが
確認されている。 実施例 １ 表−２に示すような有機栄養培地（１）に
T.elegans（NRRL−1613）を接種し、27℃、８
日間、200rpmで振とう培養した。培養後、ロ過
にて菌体を回収し凍結乾燥した。これにより、培
地１あたり4.0ｇの乾燥菌体を得た。この菌体
より、ｎ−ヘキサン：イソプロパノール＝３：２
（ｖ／ｖ）の混合溶剤で総脂質を抽出したところ、
0.9ｇの脂質が得られた。次に脂質の一部を常法
により、ケン化分解し、不ケン化物を除去した
後、脂肪酸を得、これをメチルエステル化して脂
肪酸組成を分析した。結果を表−３に示す。
【表】 （水で１にする）
【表】 実施例 ２ 表−４に示す培地（１）にT.elegans
（NRRL−2468）を接種し23℃、９日間200rpmで
振とう培養した。培養後、実施例１と同様に処理
した結果、乾燥菌体3.6ｇ、総脂質0.95ｇが得ら
れた。このものの総脂肪酸組成を表−５に示す。
【表】
【表】 実施例 ３ 表−６に示す培地（30）を、50のジヤーフ
アーメンターに入れ、加熱加圧殺菌後T.elegans
（NRRL−2468）を接種し、28℃、５日間の通気
撹拌培養を行つた。なお培地のPHは、常に4.0以
上となるよう調節した。 表−６ グルコース 200 ｇ／ 酵母エキス ２ 〃 尿 素 15 〃 KH2PO4 10 〃 MgSO4・7H2O ２ 〃 NaCl 0.3 〃 FeSO4・7H2O 30 mg／ CaCl2 30 〃 CuSO4・5H2O 0.5 〃 ZnSO4・7H2O ３ 〃 MnCl2・4H2O ３ 〃 ビタミンＢ ６ 〃 ビオチン 0.06 〃 培養後、実施例１と同様に処理した結果、乾燥
菌体1350ｇ、総脂質430ｇが得られた。このもの
の総脂肪酸組成を表−７に示す。
【表】 ＜発明の効果＞ 本発明のタムニデイウム属に属するγ−リノレ
ン酸含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培
地中で培養することによつて、培養物からγ−リ
ノレン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の20％以上で
ある高い脂質を採取することができた。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ タムニデイウム属に属するγ−リノレン酸含
    量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培
    養し、培養物からγ−リノレン酸含量の高い脂質
    を採取することを特徴とする脂質成分の製造法。 ２ タムニデイウム属に属するγ−リノレン酸含
    量の高い脂質生産菌がタムニデイウム・エレガン
    ス（Thamnidium elegans）である特許請求の範
    囲第１項記載の製造法。 ３ 培地の炭素源が有機炭素源である特許請求の
    範囲第１項記載の製造法。 ４ γ−リノレン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の
    20％以上である特許請求の範囲第１項又は第２項
    記載の製造法。 ５ 特許請求の範囲第１項、第２項又は第３項記
    載の方法で得られた脂質成分をケン化分解するこ
    とを特徴とするγ−リノレン酸含量の高い脂質成
    分の製造法。
JP15927584A 1984-07-31 1984-07-31 γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造法 Granted JPS6137096A (ja)

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JP15927584A JPS6137096A (ja) 1984-07-31 1984-07-31 γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造法
GB08518429A GB2163424B (en) 1984-07-31 1985-07-22 Process for preparing a lipid composition having a high y-linolenic acid content
US06/758,023 US4871666A (en) 1984-07-31 1985-07-23 Process for preparing a lipid composition having upon saponification a high gama-linolenic acid content

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DE3470061D1 (en) * 1984-02-09 1988-04-28 Agency Ind Science Techn A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom

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JPS6137096A (ja) 1986-02-21
GB2163424A (en) 1986-02-26
GB8518429D0 (en) 1985-08-29
GB2163424B (en) 1987-08-12

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