JPS61228355A - 凝集反応の自動検出方法及び装置 - Google Patents
凝集反応の自動検出方法及び装置Info
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- JPS61228355A JPS61228355A JP60070403A JP7040385A JPS61228355A JP S61228355 A JPS61228355 A JP S61228355A JP 60070403 A JP60070403 A JP 60070403A JP 7040385 A JP7040385 A JP 7040385A JP S61228355 A JPS61228355 A JP S61228355A
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- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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- G01—MEASURING; TESTING
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- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/82—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a precipitate or turbidity
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、試料を分析してその試料中に存在する特定の
免疫物質を検出する方法と、その方法を実施するための
装置とに関するものである。
免疫物質を検出する方法と、その方法を実施するための
装置とに関するものである。
凝集反応による抗原又は抗体の検出方法、特にタンニン
酸処理赤血球を用いる方法は、−元免疫拡散法、二元免
疫拡散法又は、交差電気泳動法と比べ検出感度が１００
〜１，０００倍以上高いことがら広く臨床検査の分野で
応用されている。
酸処理赤血球を用いる方法は、−元免疫拡散法、二元免
疫拡散法又は、交差電気泳動法と比べ検出感度が１００
〜１，０００倍以上高いことがら広く臨床検査の分野で
応用されている。
例えば、ＨＢｓ抗原を感作した赤血球を用いてａｎｔｉ
−ＨＢｓ抗体を測定する方法〔長潮ら：メディカル ポ
ストグラデュエイッ（Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｏｓｔ−ｇｒ
ａｄｕａ ｔｅｓ旦 （４１１３（１９７４）、館田ら
：基礎と臨床１１ （７１２０９１（１９７７）） 、
ａｎｔｉ −ＨＢ ｓ抗体を感作した赤血球を用いてＨ
Ｂｓ抗原を検出する方法〔日日ら：臨床検査η（４１４
３７（１９７８） ） 、または破傷風毒素を感作した
赤血球を用いて破傷風抗毒素を感作し、かくして感作さ
れた赤血球を用いて破傷風抗毒素抗体をスクリーニング
する方法〔エイ、バー（Ａ、 Ｂａｒｒ）ら：ジャーナ
ル オブ クリニカル バソロジー（Ｊ、 Ｃｌ１ｎ、
Ｐａｔｈ ２８．９６９（１９７５） ）等その利用
例は多い。
−ＨＢｓ抗体を測定する方法〔長潮ら：メディカル ポ
ストグラデュエイッ（Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｏｓｔ−ｇｒ
ａｄｕａ ｔｅｓ旦 （４１１３（１９７４）、館田ら
：基礎と臨床１１ （７１２０９１（１９７７）） 、
ａｎｔｉ −ＨＢ ｓ抗体を感作した赤血球を用いてＨ
Ｂｓ抗原を検出する方法〔日日ら：臨床検査η（４１４
３７（１９７８） ） 、または破傷風毒素を感作した
赤血球を用いて破傷風抗毒素を感作し、かくして感作さ
れた赤血球を用いて破傷風抗毒素抗体をスクリーニング
する方法〔エイ、バー（Ａ、 Ｂａｒｒ）ら：ジャーナ
ル オブ クリニカル バソロジー（Ｊ、 Ｃｌ１ｎ、
Ｐａｔｈ ２８．９６９（１９７５） ）等その利用
例は多い。
このように、検出感度が高いことがら広く応用されてい
る反面、本方法は、マイクロプレートを用いて陰性コン
トロールの凝集像と検体のそれとを肉眼的に観察した時
に差があるが否かをもって判定するため、判定誤差の大
きいことが欠点である。
る反面、本方法は、マイクロプレートを用いて陰性コン
トロールの凝集像と検体のそれとを肉眼的に観察した時
に差があるが否かをもって判定するため、判定誤差の大
きいことが欠点である。
本発明は、試料中に存在する特定の免疫物質を定量的に
自動読み取りのできる試験装置を提供することを目的と
する。さらに別の目的は、当＝亥方法を提供することに
ある。
自動読み取りのできる試験装置を提供することを目的と
する。さらに別の目的は、当＝亥方法を提供することに
ある。
〔問題点を解決するための手段及び作用の説明〕本発明
は、■抗原又は抗体を含む検体を、これらに対応する抗
体又は抗原をもって感作された凝集反応用支持体と接触
させ、生成する凝集沈降体の量を測定することによる検
体中の抗体又は抗原の定量方法において、凝集沈降体を
通過する光源よりの光の濃淡を、凝集沈降体の中心を結
ぶ直線上でとらえ、凝集沈降体の直径を一次元イメージ
センサーによって計測することからなる方法、並びに■
抗原又は抗体を含む検体を、これらに対応する抗体又は
抗原をもって感作された凝集反応用支持体と接触させ、
生成する凝集沈降体の量を凝集沈降体の直径を測定する
ことにより、定量をする装置において、少なくとも （ａ）光源、 （ｂｌ光源によって与えられる光線を凝集沈降体の入っ
た試料容器に対して通過させる手段、ＦＣｌ （ｂｌに
よって与えられる光線のうち、試料容器内の凝集沈降体
の中心を結ぶ直線上で光の強弱を連続的に検知し、凝集
沈降体の直径を一次元イメージセンサーによって計測す
る手段、＋ｄ） （Ｃ）によって計測された数値を、演
算処理して凝集沈降体の大きさを算出し、評価判定する
手段、 よりなる装置に関する。
は、■抗原又は抗体を含む検体を、これらに対応する抗
体又は抗原をもって感作された凝集反応用支持体と接触
させ、生成する凝集沈降体の量を測定することによる検
体中の抗体又は抗原の定量方法において、凝集沈降体を
通過する光源よりの光の濃淡を、凝集沈降体の中心を結
ぶ直線上でとらえ、凝集沈降体の直径を一次元イメージ
センサーによって計測することからなる方法、並びに■
抗原又は抗体を含む検体を、これらに対応する抗体又は
抗原をもって感作された凝集反応用支持体と接触させ、
生成する凝集沈降体の量を凝集沈降体の直径を測定する
ことにより、定量をする装置において、少なくとも （ａ）光源、 （ｂｌ光源によって与えられる光線を凝集沈降体の入っ
た試料容器に対して通過させる手段、ＦＣｌ （ｂｌに
よって与えられる光線のうち、試料容器内の凝集沈降体
の中心を結ぶ直線上で光の強弱を連続的に検知し、凝集
沈降体の直径を一次元イメージセンサーによって計測す
る手段、＋ｄ） （Ｃ）によって計測された数値を、演
算処理して凝集沈降体の大きさを算出し、評価判定する
手段、 よりなる装置に関する。
（イ）光源及び試料容器
本発明において使用される光源は、自然光及び単色光が
好適であり、使用される波長は、３００〜８００ｎｍが
好適である。光源は、試料容器に対して、下又は上方か
ら透過される。光量としては、ハロゲンランプを用いた
場合にはＩＷ−ＩＫＷの消費電力となる光量において好
適な結果を得られる。試料容器の底部の形状は、計測段
階で得られる数値を調整することにより、特に限定され
るものではないが、好ましい形態は、球面状又は円錐状
である。試料容器の側面は、通常円筒又は直方体であり
、その内径は３〜２０１１であることが操作及び測定上
便利である。
好適であり、使用される波長は、３００〜８００ｎｍが
好適である。光源は、試料容器に対して、下又は上方か
ら透過される。光量としては、ハロゲンランプを用いた
場合にはＩＷ−ＩＫＷの消費電力となる光量において好
適な結果を得られる。試料容器の底部の形状は、計測段
階で得られる数値を調整することにより、特に限定され
るものではないが、好ましい形態は、球面状又は円錐状
である。試料容器の側面は、通常円筒又は直方体であり
、その内径は３〜２０１１であることが操作及び測定上
便利である。
用いられる反応容器の材質は透光性かつ不活性であれば
よく、ガラス、アクリル樹脂、塩化ビニル樹脂又はスチ
ロール樹脂が好ましく、内でもスチロール樹脂が凝集像
の安定性からみて最も好ましい。しかし、容器の底部を
球型が傾斜型等その材質に通した型にすることにより安
定性を高めることができるので、特にスチロール樹脂に
限定する必要はない。
よく、ガラス、アクリル樹脂、塩化ビニル樹脂又はスチ
ロール樹脂が好ましく、内でもスチロール樹脂が凝集像
の安定性からみて最も好ましい。しかし、容器の底部を
球型が傾斜型等その材質に通した型にすることにより安
定性を高めることができるので、特にスチロール樹脂に
限定する必要はない。
（ロ）凝集反応
本発明で使用される凝集反応用支持体としては、従来公
知のラテックス樹脂類又は動物（例えば羊、モルモット
、０型の人、またはニワトリ）の赤血球をホルマリン、
グルクルデヒド、タンニン酸などで処理したものが使用
できるが、好ましいものは、処理変性された動物赤血球
である。
知のラテックス樹脂類又は動物（例えば羊、モルモット
、０型の人、またはニワトリ）の赤血球をホルマリン、
グルクルデヒド、タンニン酸などで処理したものが使用
できるが、好ましいものは、処理変性された動物赤血球
である。
この凝集反応用支持体は、一般に水性媒質に浮遊させて
抗体または抗原との感作に使用するのがよい。水性媒質
としては、例えば水、生理食塩水、各種緩衝液（リン酸
緩衝液、グリシン緩衝液、ホウ酸緩衝液など）などが挙
げられる。
抗体または抗原との感作に使用するのがよい。水性媒質
としては、例えば水、生理食塩水、各種緩衝液（リン酸
緩衝液、グリシン緩衝液、ホウ酸緩衝液など）などが挙
げられる。
通常、約０．１〜１０％（容量）程度になるように凝集
反応用支持体を水性媒質に浮遊させ、ｐＨ約７．０〜８
．９、特に７．２〜８．０程度に調整するのが好ましい
。この凝集反応用支持体への抗体又は抗原による感作処
理は、自体公知の方法〔医学のあゆみ、川、 ７５９−
７６０ （１９７０））に準じて行うことができる。感
作は上記水性媒質中で行われるのがよく、抗原又は抗体
浮遊液と凝集反応用支持体とを混合することによって行
われる。感作反応は、一般にｐＨ４，５〜８．６、温度
約１５〜３７℃、反応時間約１５〜６０分で行われる。
反応用支持体を水性媒質に浮遊させ、ｐＨ約７．０〜８
．９、特に７．２〜８．０程度に調整するのが好ましい
。この凝集反応用支持体への抗体又は抗原による感作処
理は、自体公知の方法〔医学のあゆみ、川、 ７５９−
７６０ （１９７０））に準じて行うことができる。感
作は上記水性媒質中で行われるのがよく、抗原又は抗体
浮遊液と凝集反応用支持体とを混合することによって行
われる。感作反応は、一般にｐＨ４，５〜８．６、温度
約１５〜３７℃、反応時間約１５〜６０分で行われる。
抗原又は抗体浮遊液と凝集反応用支持体との反応組成比
率は、精製法の違いによる抗原又は抗体浮遊率の種類と
凝集反応用支持体の種類によって冬至適濃度が選択され
るものであるが、例えば、グルタルデヒド処理羊赤血球
の５％浮遊液およびＨＢｓ抗原浮遊液を用いた時の濃度
は、ＨＢｓ抗原では吸光度ＣＥｘｍｏ値）の読みか０．
０１５〜０．１５の濃度に調整し、これにグルタルデヒ
ド処理羊赤血球（５％浮遊液）の１〜１１倍量を加える
。
率は、精製法の違いによる抗原又は抗体浮遊率の種類と
凝集反応用支持体の種類によって冬至適濃度が選択され
るものであるが、例えば、グルタルデヒド処理羊赤血球
の５％浮遊液およびＨＢｓ抗原浮遊液を用いた時の濃度
は、ＨＢｓ抗原では吸光度ＣＥｘｍｏ値）の読みか０．
０１５〜０．１５の濃度に調整し、これにグルタルデヒ
ド処理羊赤血球（５％浮遊液）の１〜１１倍量を加える
。
かくして感作反応後、感作した凝集反応用支持体は洗浄
し次いで適当な濃度の浮遊液とし、適当量ずつ小分けし
て凍結乾燥する。このものは前記反応容器内で用時適当
な水性媒質をもって希釈し、凝集反応定量用試薬として
測定に用いる。
し次いで適当な濃度の浮遊液とし、適当量ずつ小分けし
て凍結乾燥する。このものは前記反応容器内で用時適当
な水性媒質をもって希釈し、凝集反応定量用試薬として
測定に用いる。
ここに規定した反応容器を用いて凝集反応を行う時の感
作凝集反応用支持体と検体との混合割合は従来定性用の
凝集反応試薬で採用されている条件で良く、例えば感作
された赤血球の場合、その０．５％±０．１％の懸濁液
に等量の検体が混合振盪される。用いる検体の液量と感
作赤血球懸濁液の液量とは特に限定する必要はないが、
経済的な液量としては０．１〜０．５ｍｌを等量ずつ混
合する。
作凝集反応用支持体と検体との混合割合は従来定性用の
凝集反応試薬で採用されている条件で良く、例えば感作
された赤血球の場合、その０．５％±０．１％の懸濁液
に等量の検体が混合振盪される。用いる検体の液量と感
作赤血球懸濁液の液量とは特に限定する必要はないが、
経済的な液量としては０．１〜０．５ｍｌを等量ずつ混
合する。
感作赤血球と検体とを上記の反応容器内で混合し、凝集
像が得られるまでの時間は用いた感作赤血球の種類によ
り多少異なるが一般的には室温で反応容器を直立させて
静置した後１時間〜２時間で凝集像が明瞭となって来る
ので、判定はこの後２４時間以内に行えば良い。これら
のことば感作の支持体である赤血球をラテックス等一般
の凝集反応に通常用いられている支持体に変えても同じ
ことがいえる。
像が得られるまでの時間は用いた感作赤血球の種類によ
り多少異なるが一般的には室温で反応容器を直立させて
静置した後１時間〜２時間で凝集像が明瞭となって来る
ので、判定はこの後２４時間以内に行えば良い。これら
のことば感作の支持体である赤血球をラテックス等一般
の凝集反応に通常用いられている支持体に変えても同じ
ことがいえる。
（ハ）凝集沈降体の計測
検体中の抗原または抗体の定量は、反応容器内で生ずる
凝集を反応器の底部に沈降させ、凝集沈降体に対して、
光源より照射され、通過する光の濃淡を凝集沈降体の中
心を通る直線上でとらえ、−次元イメージセンサ−によ
って凝集沈降体の直第１図は、−次元イメージセンサ−
により得られる典型的な凝集沈降体の出力波形を示す。
凝集を反応器の底部に沈降させ、凝集沈降体に対して、
光源より照射され、通過する光の濃淡を凝集沈降体の中
心を通る直線上でとらえ、−次元イメージセンサ−によ
って凝集沈降体の直第１図は、−次元イメージセンサ−
により得られる典型的な凝集沈降体の出力波形を示す。
緩衝液のみのときの出力波形が図中■であり、■の波形
が陰性コントロールであり、■の波形が陽性検体である
。
が陰性コントロールであり、■の波形が陽性検体である
。
第２図は、陽性検体の出力波形でイは、容器のウェル（
穴）の間に生じる特有の波形である。口は（試料容器）
ウェルの端を示している。ハのくぼみの部分が凝集沈降
体によるもので、陽性・陰性などによってその波形の幅
、電位差が異なる。
穴）の間に生じる特有の波形である。口は（試料容器）
ウェルの端を示している。ハのくぼみの部分が凝集沈降
体によるもので、陽性・陰性などによってその波形の幅
、電位差が異なる。
陽性になる程幅が広くなり、電位差は大きくなる。陰性
はその逆となる。
はその逆となる。
第３図は、出力波形の一ケ所の拡大である。第３図中、
（ａｌは陰性コントロールのセンサー出力波形であり、
Ｖ Ｎ、 ＷＡＸはウェル両端電圧であり、ｆｂｌは陽
性検体のラインセンサーの出力波形であり、ＶＳ、ｔは
径測定基準電圧であり、ＶＩＮＩＮは検量小電圧である
。出力波形は、各検体、陽性・陰性コントロールによっ
て電圧変化の勾配が違う。そこで、池１市する多件の均
−什を行うため、除性コントロールのセンサー出力波形
のウェル内のバファーの基準電圧（ウェル両端電圧、Ｖ
１１． ＷＡＸ ）と各検体の検量小電圧ＶＳ、Ｍ□
８の中間的な電圧Ｖ３、。
（ａｌは陰性コントロールのセンサー出力波形であり、
Ｖ Ｎ、 ＷＡＸはウェル両端電圧であり、ｆｂｌは陽
性検体のラインセンサーの出力波形であり、ＶＳ、ｔは
径測定基準電圧であり、ＶＩＮＩＮは検量小電圧である
。出力波形は、各検体、陽性・陰性コントロールによっ
て電圧変化の勾配が違う。そこで、池１市する多件の均
−什を行うため、除性コントロールのセンサー出力波形
のウェル内のバファーの基準電圧（ウェル両端電圧、Ｖ
１１． ＷＡＸ ）と各検体の検量小電圧ＶＳ、Ｍ□
８の中間的な電圧Ｖ３、。
を求める。例えば中間値が両正の差の％の場合の電圧値
は以下のように求める。
は以下のように求める。
Ｖｓ、ｔ ＝ （ＶＮ、ＮＡＸ ＶＳ、ＭＩＮ ）Ｘ
’Ａ ＋ ＶＳ、ＮＩＮこの径測定基準電圧の値のと
きの、波形の巾：ｌをもって各検体の径として測定する
。この方法で行えば、凝集沈降体のｌｏｔのバラツキの
吸収及び測定条件の統一が図れるのである。
’Ａ ＋ ＶＳ、ＮＩＮこの径測定基準電圧の値のと
きの、波形の巾：ｌをもって各検体の径として測定する
。この方法で行えば、凝集沈降体のｌｏｔのバラツキの
吸収及び測定条件の統一が図れるのである。
（ニ）凝集沈降体の径の長さに基づく評価付前記（ハ）
において得られた径（Ｎ）の長さを定量的に評価し、格
付けを行う方法としては、陰性コントロールに対する陽
性検体中の抗原量の増加に伴う検量線を作成することに
よって行う。一般的な方法としては、ｌの増加比率によ
る方法と経験値との比較による方法がある。
において得られた径（Ｎ）の長さを定量的に評価し、格
付けを行う方法としては、陰性コントロールに対する陽
性検体中の抗原量の増加に伴う検量線を作成することに
よって行う。一般的な方法としては、ｌの増加比率によ
る方法と経験値との比較による方法がある。
（ａ）増加の比率による方法
陽性コントロールの径を“４”の評価、陰性コントロー
ルの径を“１”の評価として、各検体の径はその範囲内
であるから、陽性コントロールと陰性コントロールの径
の差を１とし、それに対しての検体と陰性コントロール
の径の差の比で格付けする。
ルの径を“１”の評価として、各検体の径はその範囲内
であるから、陽性コントロールと陰性コントロールの径
の差を１とし、それに対しての検体と陰性コントロール
の径の差の比で格付けする。
ｄ １＝１−Ｎｏ ／ｌａ Ｉｌ。
ｌ ：検体波形の巾
１、：陰性コントロールの巾
１ｓ ：ｖ４性コントロールの巾
これらについては、第４図の様な関係となる。
すなわち、第１表に示す通りとなる。
（以下余白）
第１表
ｆｂｌ既知数との比較をする方法
凝集反応試験の判定を行う作業者よりの経験値より判定
評価の数値が下記に示す値をとる。これを前記で求めた
径と比較を行い、判定評価する。
評価の数値が下記に示す値をとる。これを前記で求めた
径と比較を行い、判定評価する。
（以下余白）
第２表
上記（ａｌ （ｂｌで示した条件値は、経験的に設定し
たものであり、要時変更利用できる。
たものであり、要時変更利用できる。
以上の検量線又は評価付の内容をコンピューターにプロ
グラムして判定装置を動作させるが、そムを示す。
グラムして判定装置を動作させるが、そムを示す。
スタート
〔実施例〕
実施例１
スチロール製試験管（内容１４鶴、底部の曲面は内径の
２の半径とほぼ等しい球型）に、ａｎｔｉ −ＨＢｓ抗
体を感作したヒツジ赤血球〔アンティヘプセル（株式会
社ミドリ十字販売製品）〕の００．５％懸濁を０．２５
ｍ１ずつ分注した。ＨＢｓ抗原陽性の患者血清をストロ
ーマ含有のリン酸緩衝液にて×４〜×６４倍に希釈し、
この希釈液の０．２５ｍ１を上記のａｎｔｉ−ＨＢｓ感
作ヒツジ赤血球懸濁液を分注した試験管にとり振とう撹
拌後、室温にて３時間静置した。標準ＨＢｓ抗原として
精製ＨＢｓ抗原をｌＰｇ／ｍｌ含有するものをＸ ３２
０倍まで希釈し同様に操作した。３時間静直後、試験管
の底面に現れる凝集体の直径を本装置を用いて測定した
。
２の半径とほぼ等しい球型）に、ａｎｔｉ −ＨＢｓ抗
体を感作したヒツジ赤血球〔アンティヘプセル（株式会
社ミドリ十字販売製品）〕の００．５％懸濁を０．２５
ｍ１ずつ分注した。ＨＢｓ抗原陽性の患者血清をストロ
ーマ含有のリン酸緩衝液にて×４〜×６４倍に希釈し、
この希釈液の０．２５ｍ１を上記のａｎｔｉ−ＨＢｓ感
作ヒツジ赤血球懸濁液を分注した試験管にとり振とう撹
拌後、室温にて３時間静置した。標準ＨＢｓ抗原として
精製ＨＢｓ抗原をｌＰｇ／ｍｌ含有するものをＸ ３２
０倍まで希釈し同様に操作した。３時間静直後、試験管
の底面に現れる凝集体の直径を本装置を用いて測定した
。
直径は、陰性コントロールのセンサー出力波形のｖ８．
□８と検体のセンサー出力波形のｖＮ、□いと検体のセ
ンサー出力波形のｖ、９□９の差の２電圧値Ｖ、。、の
ときの波形中ｌを測定した。
□８と検体のセンサー出力波形のｖＮ、□いと検体のセ
ンサー出力波形のｖ、９□９の差の２電圧値Ｖ、。、の
ときの波形中ｌを測定した。
患者血清の凝集像の直径は×８〜×３２倍の間で直線性
を示した。
を示した。
実施例２
第５図に示される装置を作製した。■は反射鏡、２はハ
ロゲンランプ、３は鏡、４は均一拡散板、５はプレート
移動台、６は検査プレート、７は鏡、８は光学レンズ、
９はＣＯＤリニアイメージセンサ−１１０はＡ／Ｄコン
バーターユニット、１１はセンサー波形信号メモリバッ
ファ、 １２は操作パネルユニット、１３はコンピュー
ター波形処理ユニット、１４はプリンターからなり、−
の方向に従って処理は行われる。
ロゲンランプ、３は鏡、４は均一拡散板、５はプレート
移動台、６は検査プレート、７は鏡、８は光学レンズ、
９はＣＯＤリニアイメージセンサ−１１０はＡ／Ｄコン
バーターユニット、１１はセンサー波形信号メモリバッ
ファ、 １２は操作パネルユニット、１３はコンピュー
ター波形処理ユニット、１４はプリンターからなり、−
の方向に従って処理は行われる。
本発明によれば、凝集反応に基づく凝集体の格付は判定
が、自動的になされる。すなわち格付けの基準となる凝
集体の横断面積に相関をもつ量として、凝集体の直径を
直接に測定し、それにより試料中に存在する特定の免疫
物質の定量的な検出が可能となる。かくして提供される
本発明は、客観的に迅速に凝集体量を測定可能とするも
のであり、診断装置分野においてきわめて有用な凝集反
応の自動検出方法及び装置を提供するものである。
が、自動的になされる。すなわち格付けの基準となる凝
集体の横断面積に相関をもつ量として、凝集体の直径を
直接に測定し、それにより試料中に存在する特定の免疫
物質の定量的な検出が可能となる。かくして提供される
本発明は、客観的に迅速に凝集体量を測定可能とするも
のであり、診断装置分野においてきわめて有用な凝集反
応の自動検出方法及び装置を提供するものである。
第１図は、−次元イメージセンサ−により得られる典型
的な凝集沈降体の出力波形７ 第２図は、陽性検体の出力波形。 第３図は、出力波形の一ケ所の拡大図であり、（ａｌば
陰性コントロールのセンサー出力波形、（ｂｌは陽性検
体のラインセンサーの出力波形。 第４図は、５段階判定相関グラフ。 第５図は、装置の実施例の概略図。 ■−−−−−−−緩衝液のみのときの出力波形■・・・
・−陰性コントロールの出力波形■・−・・・陽性検体
の出力波形 Ｆ−−−−−一像（凝集沈降体） １−−−−一反射鏡 ２−・−・ハロゲンランプ ３−・・−鏡 ４−・・−均一拡散板 ５−・−・プレート移動台 ６−・・−検査プレート ７−・−−−−一鏡 ８−−−−−一光学レンズ ９−−−−− ＣＣＤリニアイメージセンサ・−１０−
〜−−−−Ａ ／ Ｄコンバーターユニノト１１−−−
−センサー波形信号メモリバッファ１２−−−−−一操
作パネルユニット １３−−−−−コンピューター波形処理ユニット１４−
−−−−・・プリンター 特許出願人 株式会社 ミドリ十字 第１図 ■ ■ ■ 第２図 第３図 第４図 Ｑ１２３４ 第５図 手 続 （甫 正 書１発） １、事件の表示 昭和６０年特許願第０７０４０３号 ２、発明の名称 凝集反応の自動検出方法及び装置 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 氏名（名称） 株式会社 ミドリ十字 ４、代理人■５４１ 住所 大阪市東区平野町４丁目５３番地３ニューライフ
平野町４０６号 電話（０６） ２２７−１１５６ 明細書の「発明の詳細な説明」の欄および「図面」 ６、補正の内容 （１）明細書第４頁、第１行のｒ Ｐａ ｔｈ Ｊをｒ
Ｐａｔｈ、Ｊに訂正する。 （２） 同書第１１頁、第１１行の「評価付」を「評
価付け」に訂正する。 （３）同書第１４頁、下から第３行の「評価付」７″を
「評価付け」に訂正する。 （４） 第３図を別紙のとおりに訂正する。 第３図 イり古号坩ｎ＝噸Ｌ（白仝） 手 続 主甫 正 書岨発） 昭和６０年６月２４日 昭和６０年特許願第０７０４０３号 ２、発明の名称 凝集反応の自動検出方法及び装置 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 氏名（名称） 株式会社 ミドリ十字 ４、代理人■５４１ 住所 大阪市東区平野町４丁目５３番地３ニューライフ
平野町４０６号 電話（０６） ２２７−１１５６ 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ６３補正の内容 −：Ｊ−１ツＬ↑… −１１−Ｗ ％−ルＩ昭和６１
年３月１４日
的な凝集沈降体の出力波形７ 第２図は、陽性検体の出力波形。 第３図は、出力波形の一ケ所の拡大図であり、（ａｌば
陰性コントロールのセンサー出力波形、（ｂｌは陽性検
体のラインセンサーの出力波形。 第４図は、５段階判定相関グラフ。 第５図は、装置の実施例の概略図。 ■−−−−−−−緩衝液のみのときの出力波形■・・・
・−陰性コントロールの出力波形■・−・・・陽性検体
の出力波形 Ｆ−−−−−一像（凝集沈降体） １−−−−一反射鏡 ２−・−・ハロゲンランプ ３−・・−鏡 ４−・・−均一拡散板 ５−・−・プレート移動台 ６−・・−検査プレート ７−・−−−−一鏡 ８−−−−−一光学レンズ ９−−−−− ＣＣＤリニアイメージセンサ・−１０−
〜−−−−Ａ ／ Ｄコンバーターユニノト１１−−−
−センサー波形信号メモリバッファ１２−−−−−一操
作パネルユニット １３−−−−−コンピューター波形処理ユニット１４−
−−−−・・プリンター 特許出願人 株式会社 ミドリ十字 第１図 ■ ■ ■ 第２図 第３図 第４図 Ｑ１２３４ 第５図 手 続 （甫 正 書１発） １、事件の表示 昭和６０年特許願第０７０４０３号 ２、発明の名称 凝集反応の自動検出方法及び装置 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 氏名（名称） 株式会社 ミドリ十字 ４、代理人■５４１ 住所 大阪市東区平野町４丁目５３番地３ニューライフ
平野町４０６号 電話（０６） ２２７−１１５６ 明細書の「発明の詳細な説明」の欄および「図面」 ６、補正の内容 （１）明細書第４頁、第１行のｒ Ｐａ ｔｈ Ｊをｒ
Ｐａｔｈ、Ｊに訂正する。 （２） 同書第１１頁、第１１行の「評価付」を「評
価付け」に訂正する。 （３）同書第１４頁、下から第３行の「評価付」７″を
「評価付け」に訂正する。 （４） 第３図を別紙のとおりに訂正する。 第３図 イり古号坩ｎ＝噸Ｌ（白仝） 手 続 主甫 正 書岨発） 昭和６０年６月２４日 昭和６０年特許願第０７０４０３号 ２、発明の名称 凝集反応の自動検出方法及び装置 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 氏名（名称） 株式会社 ミドリ十字 ４、代理人■５４１ 住所 大阪市東区平野町４丁目５３番地３ニューライフ
平野町４０６号 電話（０６） ２２７−１１５６ 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ６３補正の内容 −：Ｊ−１ツＬ↑… −１１−Ｗ ％−ルＩ昭和６１
年３月１４日
Claims (4)
- （１）抗原又は抗体を含む検体を、これらに対応する抗
体又は抗原をもって感作された凝集反応用支持体と接触
させ、生成する凝集沈降体の量を測定することによる検
体中の抗体又は抗原の定量方法において、凝集沈降体を
通過する光源よりの光の濃淡を、凝集沈降体の中心を結
ぶ直線上でとらえ、凝集沈降体の直径を一次元イメージ
センサーによって計測することからなる方法。 - （２）凝集沈降体の直径を陰性コントロールに基づく基
準電圧と検体に基づく電圧を比較し、それらの中間的な
電圧値のときのセンサー出力波形の巾をもって測定する
ことを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の方法
。 - （３）抗原または抗体を含む検体を、これらに対応する
抗体または抗原を以て感作された凝集反応用支持体と接
触させ、生成する凝集沈降体の量を凝集沈降体の直径を
測定することにより、定量をする装置において、少なく
とも （ａ）光源、 （ｂ）光源によって与えられる光線を凝集沈降体の入っ
た試料容器に対して通過させる手段、 （ｃ）（ｂ）によって与えられる光線のうち、試料容器
内の凝集沈降体の中心を結ぶ直線上で光の強弱を連続的
に検知し、凝集沈降体の直径を一次元イメージセンサー
によって計測する手段、（ｄ）（ｃ）によって計測され
た数値を、演算処理して凝集沈降体の大きさを算出し、
評価判定する手段、 からなる装置。 - （４）凝集沈降体の直径を陰性コントロールに基づく基
準電圧と検体に基づく電圧を比較し、それらの中間的な
電圧値のときのセンサー出力波形の巾をもって測定する
ことを特徴とする特許請求の範囲第（３）項記載の装置
。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60070403A JPS61228355A (ja) | 1985-04-03 | 1985-04-03 | 凝集反応の自動検出方法及び装置 |
| PH33583A PH26498A (en) | 1985-04-03 | 1986-03-25 | An apparatus for assaying an antigen or antibody |
| CA000505682A CA1269324A (en) | 1985-04-03 | 1986-04-02 | Method of automatically detecting agglutination reaction and apparatus therefor |
| KR1019860002514A KR920010295B1 (ko) | 1985-04-03 | 1986-04-02 | 응집반응의 자동검출 방법 및 장치 |
| DE8686104495T DE3687847T2 (de) | 1985-04-03 | 1986-04-02 | Verfahren zum selbsttaetigen nachweis von gewinnungsreaktionen und vorrichtung zu diesem zweck. |
| EP86104495A EP0198327B1 (en) | 1985-04-03 | 1986-04-02 | Method of automatically detecting agglutination reaction and apparatus therefor |
| ES553639A ES8802544A1 (es) | 1985-04-03 | 1986-04-02 | Un aparato de ensayo cuantitativo para detectar un antigeno o anticuerpo en una muestra. |
| CN86102177.0A CN1004172B (zh) | 1985-04-03 | 1986-04-03 | 自动检测凝集反应的方法及其装置 |
| MYPI87001429A MY102881A (en) | 1985-04-03 | 1987-08-24 | Method of automatically detecting agglutination reaction and apparatus therefor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60070403A JPS61228355A (ja) | 1985-04-03 | 1985-04-03 | 凝集反応の自動検出方法及び装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61228355A true JPS61228355A (ja) | 1986-10-11 |
Family
ID=13430456
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60070403A Pending JPS61228355A (ja) | 1985-04-03 | 1985-04-03 | 凝集反応の自動検出方法及び装置 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0198327B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61228355A (ja) |
| KR (1) | KR920010295B1 (ja) |
| CN (1) | CN1004172B (ja) |
| CA (1) | CA1269324A (ja) |
| DE (1) | DE3687847T2 (ja) |
| ES (1) | ES8802544A1 (ja) |
| MY (1) | MY102881A (ja) |
| PH (1) | PH26498A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01170834A (ja) * | 1987-12-08 | 1989-07-05 | Hugh V Cottingham | 凝集検出装置 |
| JPH0250271A (ja) * | 1988-05-17 | 1990-02-20 | Sanko Junyaku Kk | 画像自動判定方法及び装置 |
| JPH05297001A (ja) * | 1992-04-15 | 1993-11-12 | Fujirebio Inc | 磁性粒子を用いた自動免疫測定方法及び装置 |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2750605B2 (ja) * | 1989-05-17 | 1998-05-13 | スズキ株式会社 | 粒子凝集パターン判定方法 |
| DE3919260A1 (de) * | 1989-06-13 | 1990-12-20 | Hoechst Ag | Verfahren zum quantitativen auswerten von agglutinationsreaktionen |
| US5389555A (en) * | 1989-12-21 | 1995-02-14 | Olympus Optical Co., Ltd. | Particle pattern judging method |
| KR0166111B1 (ko) * | 1993-05-17 | 1999-05-01 | 후꾸야마 마사루 | 간접 응집 면역 측정 방법 및 장치 |
| US5541417A (en) * | 1995-05-18 | 1996-07-30 | Abbott Laboratories | Quantative agglutination reaction analysis method |
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| CN109738348A (zh) * | 2019-01-28 | 2019-05-10 | 大连医科大学 | 基于颗粒计数的免疫凝集反应强度定量分析方法 |
Citations (1)
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| JPS56154662A (en) * | 1980-05-01 | 1981-11-30 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | Semiquantitative measurement of aggregation state of latex aggregation reaction by optical means and its device |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4197088A (en) * | 1977-09-23 | 1980-04-08 | Akro-Medic Engineering, Inc. | Method for qualitative and quantitative determination of immunological reactions |
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| FR2545610B1 (fr) * | 1983-05-02 | 1989-04-21 | Materiel Biomedical | Procede et dispositif pour la detection et la quantification d'agglutinats |
| DE3810836A1 (de) * | 1988-03-30 | 1989-10-12 | Bosch Gmbh Robert | Gasbeheizter durchlauf-wassererhitzer |
-
1985
- 1985-04-03 JP JP60070403A patent/JPS61228355A/ja active Pending
-
1986
- 1986-03-25 PH PH33583A patent/PH26498A/en unknown
- 1986-04-02 ES ES553639A patent/ES8802544A1/es not_active Expired
- 1986-04-02 DE DE8686104495T patent/DE3687847T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-04-02 CA CA000505682A patent/CA1269324A/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-04-02 EP EP86104495A patent/EP0198327B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-04-02 KR KR1019860002514A patent/KR920010295B1/ko active IP Right Grant
- 1986-04-03 CN CN86102177.0A patent/CN1004172B/zh not_active Expired
-
1987
- 1987-08-24 MY MYPI87001429A patent/MY102881A/en unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56154662A (en) * | 1980-05-01 | 1981-11-30 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | Semiquantitative measurement of aggregation state of latex aggregation reaction by optical means and its device |
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| JPH05297001A (ja) * | 1992-04-15 | 1993-11-12 | Fujirebio Inc | 磁性粒子を用いた自動免疫測定方法及び装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0198327A2 (en) | 1986-10-22 |
| PH26498A (en) | 1992-07-27 |
| CA1269324A (en) | 1990-05-22 |
| KR920010295B1 (ko) | 1992-11-21 |
| DE3687847T2 (de) | 1993-07-15 |
| DE3687847D1 (de) | 1993-04-08 |
| ES8802544A1 (es) | 1988-06-16 |
| KR860008456A (ko) | 1986-11-15 |
| CN1004172B (zh) | 1989-05-10 |
| CN86102177A (zh) | 1986-11-12 |
| MY102881A (en) | 1993-03-31 |
| ES553639A0 (es) | 1988-06-16 |
| EP0198327B1 (en) | 1993-03-03 |
| EP0198327A3 (en) | 1989-08-23 |
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