JP2002503097A - ミルク中の体細胞測定のための方法およびシステム - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.当該分析物質を代表する大量の液体試料を、暴露領域を規定する壁部を有 する試料コンパートメントに配置し、該壁部は該コンパートメント中の試料から の電磁信号が該壁を通過して外部に暴露されるようにするものであって、 該壁部を通過してきた該試料コンパートメント中の試料からの電磁信号の 少なくとも1次元空間表記を活性検出素子アレイ上に暴露し、該表記は、該体細 胞からの電磁信号の表記をバックグラウンドからの電磁信号の表記から明確に区 別するように、該暴露の最中に該検出素子アレイにより検出された強度の処理を 許すであろう条件下、個別の活性検出素子によって、強度として検出可能であり 、 該液体試料の体積サイズは充分大きくて、該体細胞数評価が実質的に1回 の暴露に基づく評価の統計的品質に対して予め決めた要求を満足することを許し 、 該体細胞からの信号をバックグラウンド信号から区別して同定するように 、検出素子によって検出された信号を処理し、 該処理の結果を該液体試料物質中の体細胞数と相関付けること を含む液状のミルクまたは乳製品の分析物質中の体細胞数の評価方法。 2.該電磁信号の空間表記が2次元イメージ表記である請求項1記載の方法。 3.一連の検出素子が実質的に直線を形成するように該検出素子アレイを配列 する請求項1または2記載の方法。 4.該検出素子が一連の実質的に平行な直線を形成し、該連が長方形を形成す るように該検出素子を2方向に配列する請求項3記載の方法。 5.該検出素子アレイ上への電磁信号の空間表記の暴露を、焦点調節手段を用 いて該暴露領域の少なくとも一部からの電磁信号のイメージを該検出素子アレイ 上に焦点調節することによって行う前記請求項いずれか1項記載の方法。 6.該焦点調節手段が1またはいくつかの素子からなるレンズである請求項5 記載の方法。 7.該検出素子アレイ上に暴露された空間表記を、該検出素子上の直線寸法の イメージの該暴露領域中の原直線寸法に対する比率が3:1ないし1:100の 間にある線形拡大に付す前記請求項いずれか1項記載の方法。 8.該比率が2:1ないし1:100の間の範囲にある請求項7記載の方法。 9.該比率が2:1ないし1:2の間の範囲にある請求項8記載の方法。 10.該比率が1.4:1ないし1:100の間の範囲にある請求項7記載の方 法。 11.該比率が1:1ないし1:10の間の範囲にある請求項10記載の方法。 12.評価されるべき個別の体細胞粒子をせいぜい25素子上に映し出す前記請 求項いずれか1項記載の方法。 13.該評価されるべき個別の体細胞粒子をせいぜい16素子上に映し出す請求 項12記載の方法。 14.該評価されるべき個別の体細胞粒子をせいぜい9素子上に映し出す請求項 13記載の方法。 15.該評価されるべき個別の体細胞粒子をせいぜい5素子上に映し出す請求項 14記載の方法。 16.該試料コンパートメントの内部が20μmおよび2000μmの間の平均 厚を有する前記請求項いずれか1項記載の方法。 17.該試料コンパートメントの内部が20μmおよび1000μmの間の平均 厚を有する請求項16記載の方法。 18.該試料コンパートメントの内部が20μmおよび200μmの間の平均厚 を有する請求項17記載の方法。 19.該試料コンパートメントが、該検出素子アレイに実質的に平行な方向に、 1mm×1mmおよび10mm×10mmの間の範囲にある寸法を有する前記請 求項いずれか1項記載の方法。 20.そこから電磁波が該アレイ上に暴露される液体試料の体積が0.01μl および20μlの間の範囲にある前記請求項いずれか1項記載の方法。 21.そこから電磁波が該アレイ上に暴露される液体試料の体積が0.04μl および4μlの間の範囲にある請求項20記載の方法。 22.該試料コンパートメント中の試料が、該暴露の最中、静止している前記請 求項いずれか1項記載の方法。 23.該試料コンパートメント中の試料を、該暴露の最中に該コンパートメント 全体にわたって動かし、該暴露の最中、静止状態を実質的に得るだけの充分短い 時間で該暴露を行う請求項1〜21いずれか1項記載の方法。 24.暴露の最中該試料から発せられる電磁波の少なくとも主要部分が、光源か ら該試料に負荷される電磁波に起因するか、またはそれによって引起され、該光 源からの放射の少なくとも主要な部分が該試料コンパートメントの壁を横切る方 向を有している前記請求項いずれか1項記載の方法。 25.該液体試料体積のサイズが充分大きくて、その中の少なくとも2つの体細 胞を同定できるようにする前記請求項いずれか1項記載の方法。 26.該液体試料体積のサイズが充分大きくて、その中の少なくとも4つの体細 胞を同定できるようにする請求項25記載の方法。 27.該液体試料体積のサイズが充分大きくて、その中の少なくとも10の体細 胞を同定できるようにする請求項26記載の方法。 28.該液体試料体積のサイズが充分大きくて、その中の少なくとも50の体細 胞を同定できるようにする請求項27記載の方法。 29.該液体試料体積のサイズが充分大きくて、その中の少なくとも100の体 細胞を同定できるようにする請求項28記載の方法。 30.0.01μlおよび20μlの間の範囲にある量の該分析物質を代表する 液体試料を、暴露領域を規定する壁部を有する試料コンパートメントに配置し、 該壁部は該コンパートメント中の試料からの電磁信号が該壁を通過して外部に暴 露できるようにするものであって、 該壁部を通過してきた該試料コンパートメント中の試料からの電磁信号の 少なくとも1次元空間表記を活性検出素子アレイ上に暴露し、該表記は、該体細 胞からの電磁信号の表記をバックグラウンドからの電磁信号の表記から区別して 同定するように、該暴露の最中に該検出素子アレイにより検出された強度の処理 を許すであろう条件下、個別の活性検出素子によって、強度として検出可能であ り、該条件は、該検出素子アレイ上の直線寸法のイメージの該暴露領域中の原直 線寸法に対する比率が3:1および1:100の間にあって、個別の体細胞を該 検出素子アレイのせいぜい25検出素子上に映し出すような線形拡大に関係し、 該試料コンパートメント中の試料が、該暴露の最中、静止しているか、ま たは実質的に静止しており、暴露の最中に該試料から発られた電磁波の少なくと も主要部分が、それからの電磁波の少なくとも主要部分が該試料コンパートメン トの壁を横切る方向を有する光源から該試料に負荷された電磁波に起因するか、 またはそれに引起され、 該体細胞からの信号をバックグラウンド信号から区別して同定するように 、検出素子によって検出された信号を処理し、 該処理の結果を該液体試料物質中の体細胞数と相関付けることを含む液状 のミルクまたは乳製品の分析物質中の体細胞数評価方法。 31.請求項2〜6、8〜11、13〜19、21、および25〜29いずれか 1項に特許請求されたいずれの特徴を示す請求項30記載の方法。 32.該検出素子によって検出される信号が、該生体粒子に結合するか、その内 部に保持されるか、またはそれと相互作用するタイプの1またはいくつかのタイ プの分子に起因し、該粒子は、暴露の前または最中に該試料または該単離された 粒子に添加され、該分子は以下の現象:電磁波の減衰、電磁波で照射された場合 のフォトルミネッセンス、電磁波の散乱、ラマン散乱のうち1またはいくつかを 生じる分子である前記請求項いずれか1項記載の方法。 33.1以上の核酸染料および/または1以上の電位膜染料の有効量を添加する 請求項32記載の方法。 34.1の核酸染料または複数の核酸染料を、0.3〜30μg/ml試料の量に て添加する請求項33記載の方法。 35.フェナンスリジン(例えば、臭化アクリジンCAS-1239-45-8,ヨウ化プロピ ジウムCAS-25535-16-4)、アクリジン染料(例えば、アクリジンオレンジCAS-65-6 1-2/CAS-10127-02-3)、シアニン染料(例えば、TOTOTM-1ヨウ素CAS#:143 413-84- 7-Molecular Probes,YO-PROTM-1ヨウ素CAS#:152 068-09-2-Molecular Probes) 、インドールおよびイミダゾール(例えば、Hoechst 33258 CAS#:023 491-45-4 ,Hoechst 33342 CAS#:023 491-52-3,DAPI CAS#:28718-90-3,DIPI(4',6-( ジイミダゾリン-2-イル)-2-フェニルインドール))よりなる群から選択される 1以上の核酸染料を添加する請求項33または34記載の方法。 36.添加される核酸染料がヨウ化プロピジウムCAS-25535-16-4である請求項3 5記載の方法。 37.該暴露時間が100ミリ秒ないし5秒の範囲にある前記請求項いずれか1 項記載の方法。 38.該暴露時間が0.5ないし3秒の範囲にある請求項37記載の方法。 39.該暴露を単一暴露として行う請求項37または38記載の方法。 40.該試料コンパートメントが使い捨てユニットの一部である前記請求項いず れか1項記載の方法。 41.該評価を、自動化システムにて、少なくとも1時間当たり300評価の速 度で行う前記請求項いずれか1項記載の方法。 42.該評価を実質的に搾乳と同時に行う請求項1〜40いずれか1項記載の方 法。 43.該評価を、搾乳システムのアットライン、および好ましくはインラインで 行う請求項42記載の方法。 44.該試料が、好ましくは該試料の組成が実質的に搾乳された全てのミルクの 組成を代表するように搾乳中に収集されたミルク試料である請求項42または4 3記載の方法。 45.該評価の結果を1またはいくつかの情報貯蔵手段に転送し、好ましくは、 該情報貯蔵手段は、同一の動物または群れから以前収集したミルクに関する情報 のごとき搾乳に関する他の情報も貯蔵できる請求項41ないし44いずれか1項 記載の方法。 46.該情報貯蔵手段が、搾乳されたミルクが1またはいくつかの貯蔵設備また は出口に向けられるべきであるかどうかを示唆する手段を含み、該示唆は体積当 たりの体細胞数評価に基づき、好ましくは、該示唆は該評価ならびに個別の動物 の搾乳または巨大タンクのミルク(bulk tank milk)に関して該情報貯蔵手段中 に存在する他の情報に基づき、該他の情報は、例えば、以下:導電率、インピー ダンス、温度、脂肪含有量、タンパク質含有量、ラクトース含有量、尿素含有量 、クエン酸含有量、ケトン含有量、体細胞カウントのうちの1またはいくつかで ある請求項45記載の方法。 47.搾乳されたいずれのミルクを1またはいくつかの貯蔵設備または出口に向 ける目的が、該大量のミルクと低めの体細胞カウントを有するミルクとを混合す ることによって、および/または予め決めた限界を超える体細胞カウントを有す るミルクを除去することによって、体積当たりの体細胞数に関するいずれの大量 のミルクの特性を調整することにある請求項46記載の方法。 48.該評価を搾乳した後に行い、好ましくは、該ミルクは測定前に実質的に変 質していない前記請求項いずれか1項記載の方法。 49.該評価を搾乳した後に行い、好ましくは、当該修飾が該試料物質の耐久性 を延長するように該ミルクが測定前に修飾されており、該修飾は、限定されない が:該試料物質中での細菌増殖を実質的に阻害する1以上の化学成分の添加、真 菌の増殖を実質的に阻害する1以上の化学物質の添加、当該着色を用いて該ミル クの視覚的認識を助ける着色特性を有する1以上の化学成分の添加のうちの1ま たはいくつかである請求項1〜47いずれか1項記載の方法。 50.該評価を、好ましくは該評価のための試料物質と実質的に同一の部分を用 いることによる該試料物質中のいずれの構成物の量の評価と実質的に同時に行い 、該構成物は、例えば、脂肪、タンパク質、ラクトース、尿素、クエン酸、グル コース、ケトン、二酸化炭素、酸素、pH、カリウム、カルシウム、ナトリウム のうちの1またはいくつかである前記請求項いずれか1項記載の方法。 51.いずれの化学的構成物の評価が分光測定に基づき、該分光測定は、例えば 、中赤外線減衰、近赤外線減衰、可視光線減衰、紫外線減衰、フォトルミネッセ ンス、ラマン散乱、核磁気共鳴のうちの1またはいくつかである請求項50記載 の方法。 52.いずれの化学的構成物の評価が、好ましくは、イオン選択性電極を用いる ことによる電位差測定に基づく請求項50または51記載の方法。 53.該試料物質が意見改善目的に用いられるミルク試料または支払い計画に用 いられるミルク試料のいずれかである請求項1〜52いずれか1項記載の方法。 54.該試料物質が***の四分の一から採取されたミルクであり、好ましくは、 該体細胞数評価の目的が健康状態を測定することにある請求項1〜53いずれか 1項記載の方法。 55.該体細胞またはそのフラグメントを測定し、該試料物質はミルク試料であ り、該試料物質の試料が試料コンパートメントにおいて電磁波で照射され、ここ に、該電磁波の少なくとも一部分はフォトルミネッセンス信号、好ましくは、蛍 光信号を与え得るエネルギーを有し、該信号は、少なくとも、該体細胞または該 体細胞の部分、あるいは該体細胞またはそれらの部分と相互作用するか、または それらに結合する成分に起因する前記請求項いずれか1項記載の方法。 56.該信号が、好ましくは該体細胞内に含有されるかそれに起因するDNA物 質と結合または相互作用することによって、該体細胞または該体細胞の部分に作 用するかまたは結合するか、あるいはそれらと相互作用し、該試料に意図的に添 加された分子のうちの1またはいくつかのタイプに起因する請求項55記載の方 法。 57.体細胞またはそれらのフラグメントを測定し、該試料物質はミルク試料で あり、該評価の目的が搾乳用動物の健康状態に関する情報を得ることにあり、好 ましくは、臨床的または準臨床的***炎についての情報を得ることにあり、該試 料物質の試料を、該試料コンパートメント内部の試料を異なる試料と置換できる フロー手段の使用によって、試料コンパートメント中に配置し、該試料コンパー トメントにおいて、該試料物質の試料を、当該電磁波の少なくとも一部分がフォ トルミネッセンス信号、好ましくは、蛍光信号を与えるエネルギーを有する電磁 波で照射し、該信号は、少なくとも、該体細胞または該体細胞の部分あるいは該 体細胞またはそれらの部分と相互作用または結合する成分に起因する請求項1〜 56いずれか1項記載の方法。 58.該信号が、好ましくは該体細胞内に含有されるかそれに起因するDNA物 質と結合または相互作用することによって、該体細胞または該体細胞の部分に作 用するかまたは結合するか、あるいはそれらと相互作用し、該試料に意図的に添 加された分子のうちの1またはいくつかのタイプに起因する請求項57記載の方 法。 59.体細胞またはそれらのフラグメントを測定し、該試料物質はミルク試料で あり、該試料物質の試料を、該試料コンパートメント内部の試料を異なる試料と 置換できるフロー手段の使用によって、試料コンパートメント中に配置し、試料 物質の置換の間の時間が30秒より短く、好ましくは15秒より短く、より好ま しくは10秒より短く、該試料コンパートメント中で、該試料物質の試料を、当 該電磁波の少なくとも一部分がフォトルミネッセンス信号、好ましくは、蛍光信 号を与えるエネルギーを有する電磁波で照射し、該信号は、少なくとも、該体細 胞または該体細胞の部分あるいは該体細胞またはそれらの部分と相互作用または 結合する成分に起因する請求項1〜56いずれか1項記載の方法。 60.該信号が、好ましくは、該体細胞内に含有されるかそれに起因するDNA 物質と結合または相互作用することによって、該体細胞または該体細胞の部分に 作用するかまたは結合するか、あるいはそれらと相互作用し、該試料に意図的に 添加された分子のうちの1またはいくつかのタイプに起因する請求項59記載の 方法。 61.体細胞またはそれらのフラグメントを測定し、該試料物質はミルク試料で あり、該評価を、実質的に搾乳の始めに、または搾乳の最中に、または搾乳した 直後に行い、該試料物質の試料を、該試料コンパートメント内部の試料を異なる 試料と置換でき、搾乳ユニットから直接ミルクを流すか、または搾乳の最中に徐 々に満たされる中間容器からミルクを流すフロー手段の使用によって、試料コン パートメント中に配置し、該試料コンパートメント中で、該試料物質の試料を、 当該電磁波の少なくとも一部分がフォトルミネッセンス信号、好ましくは、蛍光 信号を与えるエネルギーを有する電磁波で照射し、該信号は、少なくとも、該体 細胞 または該体細胞の部分あるいは該体細胞またはそれらの部分と相互作用または結 合する成分に起因する請求項1〜56いずれか1項記載の方法。 62.該信号が、好ましくは、該体細胞内に含有されるかそれに起因するDNA 物質と結合または相互作用することによって、該体細胞または該体細胞の部分に 作用するかまたは結合するか、あるいはそれらと相互作用し、該試料に意図的に 添加された分子のうちの1またはいくつかのタイプに起因する請求項61記載の 方法。 63.体細胞またはそれらのフラグメントを測定し、該試料物質はミルク試料で あり、試料物質の一部分を、実質的に評価毎に置換し得るか、または該ユニット の各々は単に1の試料物質の評価のみに用い得るユニットの少なくとも一部分で ある試料コンパートメントに配置し、該試料コンパートメント中で、該試料物質 の試料を、当該電磁波の少なくとも一部分がフォトルミネッセンス信号、好まし くは、蛍光信号を与えるエネルギーを有する電磁波で照射し、該信号は、少なく とも、該体細胞または該体細胞の部分あるいは該体細胞またはそれらの部分と相 互作用または結合する成分に起因する請求項1〜56いずれか1項記載の方法。 64.該信号が、好ましくは、該体細胞内に含有されるかそれに起因するDNA 物質と結合または相互作用することによって、該体細胞または該体細胞の部分に 作用するかまたは結合するか、あるいはそれらと相互作用し、該試料に意図的に 添加された分子のうちの1またはいくつかのタイプに起因する請求項63記載の 方法。 65.該試料が、該評価に用いる試薬であって、非水性である該試薬の添加を除 いて、希釈されていないミルクである前記請求項いずれか1項記載の方法。
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