JPS61216695A - ピルビン酸の製造方法 - Google Patents
ピルビン酸の製造方法Info
- Publication number
- JPS61216695A JPS61216695A JP5427985A JP5427985A JPS61216695A JP S61216695 A JPS61216695 A JP S61216695A JP 5427985 A JP5427985 A JP 5427985A JP 5427985 A JP5427985 A JP 5427985A JP S61216695 A JPS61216695 A JP S61216695A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- pyruvic acid
- tartaric acid
- pyruvic
- pseudomonas
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、L−酒石酸デヒドラターゼを有する微生物の
培養物又はその処理物の存在下%L−酒石酸またはその
塩からピルビン酸を生成蓄積せしめ採取する方法に関す
る。
培養物又はその処理物の存在下%L−酒石酸またはその
塩からピルビン酸を生成蓄積せしめ採取する方法に関す
る。
ピルビン酸は生体代謝の重要な中間体であり、各種医薬
、農薬等の有用な合成原料であるのみならず酵素法によ
るIa−)リデトファン、L −Vスティン、−−チロ
シフ等のアミノ酸合成の主要原料である。よって安価c
Il造し得れば、種々の合成原料として有用である。
、農薬等の有用な合成原料であるのみならず酵素法によ
るIa−)リデトファン、L −Vスティン、−−チロ
シフ等のアミノ酸合成の主要原料である。よって安価c
Il造し得れば、種々の合成原料として有用である。
従来、ピルビン酸を微生物により製造する方法としては
、酵母の変異株や担子菌類または特殊なバワテリアによ
る方法が知られているが、培地組成が複雑であり、副生
物が多(、工業的に満足すべきものではなかった。
、酵母の変異株や担子菌類または特殊なバワテリアによ
る方法が知られているが、培地組成が複雑であり、副生
物が多(、工業的に満足すべきものではなかった。
酵素法によるL−酒石酸からピルビン酸の製造に関して
は、わずかcL−酒石酸を脱水してオキザロ酢酸を生成
させ、化学的、生化学的に脱炭酸してピルビン酸を生成
せしめるも一酒石酸デヒドラターゼの精嶺傳素の研究(
MethQへ8in ICnzywology ’
Io工、 !! 、 68G(+966) )
力;有力な方法として知られているに過ぎない。
は、わずかcL−酒石酸を脱水してオキザロ酢酸を生成
させ、化学的、生化学的に脱炭酸してピルビン酸を生成
せしめるも一酒石酸デヒドラターゼの精嶺傳素の研究(
MethQへ8in ICnzywology ’
Io工、 !! 、 68G(+966) )
力;有力な方法として知られているに過ぎない。
しかしながら、かかる従来法はL−酒石酸デヒドラター
ゼの精製酵素のみについての研究であり、工業的に有利
な該酵素を含む生菌体を用いての検討は全くなされてい
なかった。しかも、従来法に従って、実際す一酒石酸を
用いて酵素筐底を行ってみると、長時間度広に於て活性
持続が困難であり反応を終結させるためには大量の菌体
を用いる他、手段がなかった。また生成ピルビン酸が生
化学的に分解されるためピルビン酸の収率が著しく低下
することがわかった。
ゼの精製酵素のみについての研究であり、工業的に有利
な該酵素を含む生菌体を用いての検討は全くなされてい
なかった。しかも、従来法に従って、実際す一酒石酸を
用いて酵素筐底を行ってみると、長時間度広に於て活性
持続が困難であり反応を終結させるためには大量の菌体
を用いる他、手段がなかった。また生成ピルビン酸が生
化学的に分解されるためピルビン酸の収率が著しく低下
することがわかった。
〔問題点を解決するための手段および作用〕本発明者ら
は、工業的に有利な生菌体またはその簡単な処理物を用
いてL−酒石酸からピルビン酸を酵素法により一造する
方法を搗供するとともに、従来技術の問題点を解消し、
生成したピルビン酸の分解を抑制し、少量の菌体な用い
て、ピルビン酸を高収率で取得するための工業的に実用
化可能な方法を搗供すべく鋭意研究した結果、本発明に
到達した。
は、工業的に有利な生菌体またはその簡単な処理物を用
いてL−酒石酸からピルビン酸を酵素法により一造する
方法を搗供するとともに、従来技術の問題点を解消し、
生成したピルビン酸の分解を抑制し、少量の菌体な用い
て、ピルビン酸を高収率で取得するための工業的に実用
化可能な方法を搗供すべく鋭意研究した結果、本発明に
到達した。
すなわち、本発明は、L−酒石酸デヒドラターゼを有す
る微生物の培養物又はその処理物の存在下、L−酒石酸
またはその塩からピルビン酸を生成蓄積せしめ採取する
際、系中にアミノポリカルボン酸系のキレート剤を添加
することを特徴とするビルピノ酸の製造方法である。
る微生物の培養物又はその処理物の存在下、L−酒石酸
またはその塩からピルビン酸を生成蓄積せしめ採取する
際、系中にアミノポリカルボン酸系のキレート剤を添加
することを特徴とするビルピノ酸の製造方法である。
本発明にお8いて、−一酒石酸デヒドツターゼを有する
微生iとして、シュードモナス(Paeudom+on
as )属に・属する微生物を用uすることは、好まし
い実施態様である。
微生iとして、シュードモナス(Paeudom+on
as )属に・属する微生物を用uすることは、好まし
い実施態様である。
以下、本発明を具体的に説明する。
本発明では原料としてL−酒石酸またはその塩及び、生
酒石などの非精製天然物を用いる。
酒石などの非精製天然物を用いる。
L−酒石酸の塩としては1例えばそのナトリウ゛ム塩、
カリウム塩、力〃シウム塩、アンモニウム塩などの無機
塩が用いられる。使用するL−酒石酸またはその塩の系
中での一度は(Ll〜Smo17gが好ましく、(L
1〜1.0 mol/lがさらに好ましい。
カリウム塩、力〃シウム塩、アンモニウム塩などの無機
塩が用いられる。使用するL−酒石酸またはその塩の系
中での一度は(Ll〜Smo17gが好ましく、(L
1〜1.0 mol/lがさらに好ましい。
L−酒石酸の系中への供給方法は特に限定されない9例
えばL−酒石酸が消費されるに従って固形状もしくは濃
厚液状のL−酒石酸またはその塩を遂次添加し、常にL
−酒石酸の濃度が一定になるように維持するのも良い方
法である。
えばL−酒石酸が消費されるに従って固形状もしくは濃
厚液状のL−酒石酸またはその塩を遂次添加し、常にL
−酒石酸の濃度が一定になるように維持するのも良い方
法である。
本発明□では、Ia−酒石酸デヒドラターゼを有する微
生物の培養物又は、その処理物の存在下に酵素度広を行
なう。
生物の培養物又は、その処理物の存在下に酵素度広を行
なう。
本発明で使用する微生物としては%L−酒石酸デヒドラ
ターゼ、すなわちL−酒石酸をピルビン酸へ変換する能
力を有する被生物であればいずれを用いることもできる
。
ターゼ、すなわちL−酒石酸をピルビン酸へ変換する能
力を有する被生物であればいずれを用いることもできる
。
例えば、シュードモナス属に属する微生物を用いること
ができ、具体的には、シュードモナス拳プチダ(pae
uaomonaa Puti4a J (AT c c
176423.3’ニードモナス−プチダ(ATea1
51’75J、シュードモナス・エスピー(pseua
omonas w8p1) (AT CCl 5915
)、シュードモナス拳フルオレッセンス(Pseud
omonasyluoresaense J (ATO
C+ 76543などが好ましく用いられる。
ができ、具体的には、シュードモナス拳プチダ(pae
uaomonaa Puti4a J (AT c c
176423.3’ニードモナス−プチダ(ATea1
51’75J、シュードモナス・エスピー(pseua
omonas w8p1) (AT CCl 5915
)、シュードモナス拳フルオレッセンス(Pseud
omonasyluoresaense J (ATO
C+ 76543などが好ましく用いられる。
本発明では、微生物の培養物又はその処理物を使用する
。すなわち、生菌体、真空乾燥、凍結乾燥、アセトン乾
燥などによる各種乾燥菌体、 □′菌体処理物、抽
出液、粗酵素などの状態で使用することができる。精製
酵素の使用は工業□的で 5ないので好ましくな
い。
。すなわち、生菌体、真空乾燥、凍結乾燥、アセトン乾
燥などによる各種乾燥菌体、 □′菌体処理物、抽
出液、粗酵素などの状態で使用することができる。精製
酵素の使用は工業□的で 5ないので好ましくな
い。
本発明においt系中で使用する微生物の量は、乾燥菌体
濃度に換算して1〜50g/lが好ましく、より好まし
くは・5〜20 g/lの範囲で使用される。
濃度に換算して1〜50g/lが好ましく、より好まし
くは・5〜20 g/lの範囲で使用される。
本発明で使用できるアミノポリカルボン酸系のキV−)
剤としては、例えばエチレンジアミン四酢酸、ジアミノ
デロノぐノール四酢酸、ジアミノプロパン四酢酸、ジエ
チレントリアミン五酢酸、グリコールエーテルジアミン
四酢酸、エチレンジアミン二酢酸、2−しドロキシエチ
ルエチレンジアミン三酢酸などが挙げられ、好ましくは
エチレンジアミン四酢酸、ジアミノプロパン四酢酸、ジ
アミノゾロパノール四酢酸、ジエチレントリアミン五酢
酸、グリコールエーテ〃ジアミン四酢酸等が用いられる
。
剤としては、例えばエチレンジアミン四酢酸、ジアミノ
デロノぐノール四酢酸、ジアミノプロパン四酢酸、ジエ
チレントリアミン五酢酸、グリコールエーテルジアミン
四酢酸、エチレンジアミン二酢酸、2−しドロキシエチ
ルエチレンジアミン三酢酸などが挙げられ、好ましくは
エチレンジアミン四酢酸、ジアミノプロパン四酢酸、ジ
アミノゾロパノール四酢酸、ジエチレントリアミン五酢
酸、グリコールエーテ〃ジアミン四酢酸等が用いられる
。
かかるキレート剤の系中での使用量は、キレート剤の系
中濃度で通常、2〜80 mmol/Jであり、好まし
くは5〜50 mmol/Jである。
中濃度で通常、2〜80 mmol/Jであり、好まし
くは5〜50 mmol/Jである。
本発明の系は、微生物の培養物又はその処理物が系中で
懸濁状で存在しているが、かかる系のpFIは通常5〜
11、好ましくは7〜9であり、反応温度は通常20〜
60℃、好ましくは25〜45℃である。
懸濁状で存在しているが、かかる系のpFIは通常5〜
11、好ましくは7〜9であり、反応温度は通常20〜
60℃、好ましくは25〜45℃である。
反応終了後、系中に生成蓄積したピルビン酸は常法によ
り、単離採取することができる。例、tG?、フェニル
ヒドラゾンとして沈殿単離することもできる。
り、単離採取することができる。例、tG?、フェニル
ヒドラゾンとして沈殿単離することもできる。
以下、実施例によって本発明を説明する。
実施例において生成したピルビン酸及び減少したL−酒
石酸の確認と定量は、高速液体クロマトグラフィーによ
り行った。
石酸の確認と定量は、高速液体クロマトグラフィーによ
り行った。
実施例1
L−酒石酸デヒドラターゼ生産直であるシュードモナス
・プチダ(ATOO17642)を11のエーレンマイ
ヤーフラスコ中の第1表に示す組成の培地100mJc
接種し、50℃で15時間培養した。培養終了後、za
mlずつ分注して遠心して集菌した。この20 tag
分の菌体なl OmJの蒸留水(KOFI−T:pHa
5c調整)C懸濁し、L−酒石酸二カリウム塩なa 6
77 g ((L 288 mol/J ) 、キレー
ト剤でアルエチレンジアミ・ン四酢酸(以下IDTAと
略す)を、第2表の濃度になるように添加した後、50
℃で振とうし、55時間後の生成ピルビン酸及び減少り
一酒石酸量を測定した。結果として第2表に示すように
、!!DTAを添加することにより反応が終結し、収率
も向上した。
・プチダ(ATOO17642)を11のエーレンマイ
ヤーフラスコ中の第1表に示す組成の培地100mJc
接種し、50℃で15時間培養した。培養終了後、za
mlずつ分注して遠心して集菌した。この20 tag
分の菌体なl OmJの蒸留水(KOFI−T:pHa
5c調整)C懸濁し、L−酒石酸二カリウム塩なa 6
77 g ((L 288 mol/J ) 、キレー
ト剤でアルエチレンジアミ・ン四酢酸(以下IDTAと
略す)を、第2表の濃度になるように添加した後、50
℃で振とうし、55時間後の生成ピルビン酸及び減少り
一酒石酸量を測定した。結果として第2表に示すように
、!!DTAを添加することにより反応が終結し、収率
も向上した。
第 1 表
L−酒石l! 15g
塩化アンモニウム 56
Mg5Oa・7Fi@O(Llg
CaOlg 4H10a 2 g
FeOll (L O5g酵母エ
キス 12g 第 2 表 実施例2 実施例1で、第1表のb−酒石酸15gの代わりに、生
酒石50gC1,−酒石酸含量約50%(W、/W))
を用いて、実施例1と同様に培養し、集菌した。この培
養液20 mJ分の菌体ヒ、生酒石(L9gをl Om
lの蒸留水(にOHでpHa s Cal!1 ) C
1111&濁シ、r+orat2omm添、mしたもの
としないものを、30℃で振とうし、55時間後の生成
ピルビン酸及び減少り一酒石酸量を測定した。結果を第
3表に示した。
キス 12g 第 2 表 実施例2 実施例1で、第1表のb−酒石酸15gの代わりに、生
酒石50gC1,−酒石酸含量約50%(W、/W))
を用いて、実施例1と同様に培養し、集菌した。この培
養液20 mJ分の菌体ヒ、生酒石(L9gをl Om
lの蒸留水(にOHでpHa s Cal!1 ) C
1111&濁シ、r+orat2omm添、mしたもの
としないものを、30℃で振とうし、55時間後の生成
ピルビン酸及び減少り一酒石酸量を測定した。結果を第
3表に示した。
第 3 表
・ミリモlL//l 実施例5 実施例1と同様にして菌体を集菌し、2 OIIL1分
tDM体ヲIOI!IItノ蒸留水(ICOH”QpH
&51C11iI盛JCII濁し、−一酒石酸二カリウ
ム塩をt t y s g (a s mo1/l J
、及び第3!!!に示すキレート剤を15 mM添加
し、50℃で振とうし、16時間後、55時間後の生成
ピルビン酸の量を測定した。
・ミリモlL//l 実施例5 実施例1と同様にして菌体を集菌し、2 OIIL1分
tDM体ヲIOI!IItノ蒸留水(ICOH”QpH
&51C11iI盛JCII濁し、−一酒石酸二カリウ
ム塩をt t y s g (a s mo1/l J
、及び第3!!!に示すキレート剤を15 mM添加
し、50℃で振とうし、16時間後、55時間後の生成
ピルビン酸の量を測定した。
結果を第4表に示した。
第 4 表
生成量を100とした相対値で示した。
実施例4
シュードモナス・グチダ(ATOO17642)の代わ
りに、第4表に示す微生物及びキレート剤を用いる以外
は、実施例2と同様の操作を行ない、結果を第5表に示
した。
りに、第4表に示す微生物及びキレート剤を用いる以外
は、実施例2と同様の操作を行ない、結果を第5表に示
した。
第 5 表
巖フ キレート剤無添加系の16時間後のピルビン讃の
生成量@1130とした相対値で示した。
生成量@1130とした相対値で示した。
(発明の効果〕
本発明によれば、−系中にアミノポリカルボン酸系のキ
V−)剤を添加することにより、工業的に有利な生コ体
またはその簡単な処理物の使用を可能にし、酵素の安定
性が増し、生成ビルビン酸の分解が抑えられることによ
り入手が容品で、安価なシー酒石酸よりピ〃ビン酸が高
収率で得られる。
V−)剤を添加することにより、工業的に有利な生コ体
またはその簡単な処理物の使用を可能にし、酵素の安定
性が増し、生成ビルビン酸の分解が抑えられることによ
り入手が容品で、安価なシー酒石酸よりピ〃ビン酸が高
収率で得られる。
Claims (2)
- (1)L−酒石酸デヒドラターゼを有する微生物の培養
物又はその処理物の存在下、L−酒石酸またはその塩か
らピルビン酸を生成蓄積せしめ採取する際、系中にアミ
ノポリカルボン酸系のキレート剤を添加することを特徴
とするピルビン酸の製造方法。 - (2)L−酒石酸デヒドラターゼを有する微生物がシュ
ードモナス(Pseudomonas)属に属する微生
物である特許請求の範囲第1項記載のピルビン酸の製造
方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP5427985A JPS61216695A (ja) | 1985-03-20 | 1985-03-20 | ピルビン酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP5427985A JPS61216695A (ja) | 1985-03-20 | 1985-03-20 | ピルビン酸の製造方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS61216695A true JPS61216695A (ja) | 1986-09-26 |
Family
ID=12966124
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP5427985A Pending JPS61216695A (ja) | 1985-03-20 | 1985-03-20 | ピルビン酸の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS61216695A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019199540A1 (en) * | 2018-04-13 | 2019-10-17 | Archer Daniels Midland Company | Dehydration and cracking of alpha-, beta-dihydroxy carbonyl compounds to lactic acid and other products |
-
1985
- 1985-03-20 JP JP5427985A patent/JPS61216695A/ja active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019199540A1 (en) * | 2018-04-13 | 2019-10-17 | Archer Daniels Midland Company | Dehydration and cracking of alpha-, beta-dihydroxy carbonyl compounds to lactic acid and other products |
CN112074500A (zh) * | 2018-04-13 | 2020-12-11 | 阿彻丹尼尔斯米德兰德公司 | α,β-二羟基羰基化合物脱水并裂解为乳酸和其他产物 |
CN112074500B (zh) * | 2018-04-13 | 2023-09-05 | 阿彻丹尼尔斯米德兰德公司 | α,β-二羟基羰基化合物脱水并裂解为乳酸和其他产物 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Young et al. | 2, 3-Dihydroxybenzoate as a bacterial growth factor and its route of biosynthesis | |
JPH0568578A (ja) | テアニンの製造方法 | |
JPS61216695A (ja) | ピルビン酸の製造方法 | |
JP3122990B2 (ja) | O−メチル−l−チロシン及びl−3−(1−ナフチル)アラニンの製造方法 | |
JPS60184393A (ja) | アラニンの製造法 | |
JPH01228468A (ja) | ヒドロキサム酸加水分解酵素 | |
JP3030916B2 (ja) | βーグルコオリゴ糖の製造方法 | |
JP2991395B2 (ja) | 5−アミノレブリン酸生産微生物および5−アミノレブリン酸の製造方法 | |
JPH1042886A (ja) | 微生物によるβ−アラニンの製造法 | |
JP4139502B2 (ja) | ピロール−2−カルボン酸の製造法 | |
JP2563074B2 (ja) | 天然型β−フェネチルアルコールの製造法 | |
JPS61173789A (ja) | 4−クロロ−3−ヒドロキシ酪酸の製造法 | |
JP2901458B2 (ja) | ゲンチアノースの製造方法 | |
JPS5816692A (ja) | 酵素によるl−トリプトフアンの製造方法 | |
JP3817725B2 (ja) | ピルビン酸の製造方法 | |
JP2899071B2 (ja) | L―α―アラニンの製造法 | |
JPH0661270B2 (ja) | 2−オキソ−4−フェニル酪酸の製造方法 | |
JPH02257874A (ja) | ロドコッカス属細菌及びそれを用いる2―ヒドロキシ酪酸の製造法 | |
JPH09168393A (ja) | 同位体を有する5−アミノレブリン酸の製造方法 | |
JPH0515394A (ja) | 光学活性(s)−3−フエニル−1,3−プロパンジオールの製造法 | |
JPH0378999B2 (ja) | ||
JPH01191697A (ja) | 光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製造法 | |
JPH0822222B2 (ja) | 2―ケト酪酸の製造法 | |
JPH08154692A (ja) | D−2−アミノ酪酸の製造方法 | |
JPH0353914B2 (ja) |