JPS59500272A - 抗ガン剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 少なくとも一つの抗毒性物質と少なく とも一つのｍ個カルボキシイオン透過 担体との組合せからなる薬剤 この発明は少なくとも一つの抗弾性物質と少なくとも一つの一価カルゴキシイオ ン透過担体との組合せからなる薬剤に関す・る。

出願番号７８２７８３８　；　７９２４６５５　：　８１０７５９６　；８１２ １８３６のフランス特許出願には共再結合によりリチンのＡ＠を、仮象されるべ き細揖によシ保持された尻源に対して同けられた抗体又は抗体分画とカップリン グによって侍られるいわゆる共役抗ガン物質の製造について記載がなされている 。

このタイプの物質を本発明では抗毒性物質という一般名で表わされている。

前記フランス特許出願８１？１８３６にはさらにアンモニウムイオンの特性（そ れらの垣の形、特に塩化物）、すなわち、これら抗毒性物質の細胞８累性の複室 有効化作用が記載されている。

抗毒性物質の選択的細胞毎素性活性全有効化するアンモニウム塩の％注は下記の ２つの場合に２いて多くの利点を有する。

（ａ）　目標細胞を破壊するため試験管中で仇毒註物質全選択的細胞挿素性製剤 として使用する両会でるる。

治療において、特に、白血病患者め骨髄の処置に抗毒性物質を細胞毒性薬として 使用する場合゛に見られ、このように処理された骨髄はのちにフランス特許出願 ８１２１８３６に記載されているように移植される。

（ｂ）　抗毒性物質は生体中に治療剤として夏用する場合、アンモニウム塩とし て患者に予防的に、同時に、又は事後に投与して、上記特許出願に記載されてい るように抗毒性作用の有効化を図°る場合である。

しかし、抗毒性物質の生体中での使用で、有効化のためアンモニウム塩の使用は アンモニウムイオン自体の毒性のため、ある種の制限を受け、事実、患者の生理 液中のアンモニウムイオンの十分な一度’ｘｎＭ、的に維持することは比収的に 不都合である。

この発明は前記フランス特許出願に記載された抗毒性物質の選択的細胞禅性作用 の有効化を利用し強力な細胞毒性薬剤を製造することを目面とする。

多くの物質を研究したのち、−側カルボキシイオン透過担体が抗毒性物質の細胞 毒集注作用の有効化を図る特に興味深い物質として見出された。

ここで、カルボキシイオン透過担体とはストレプトマイセスねから分離された天 然物質を意味し、炭化水素線状構造、さらに酸素へテロ環を含むものであっても よい。この連鎖の一端にはカルボン酸官能基が存在し、他端には１又は数個のア ルコール官能基がある（　Ｂ、Ｃ＊　Ｐｒｅｓｓｍａｎ　：　Ａｎｎｕａｌ　Ｒ ｅｖｉｅｗ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｒｎｉｓｔｒｙ４５．５０１−５３０．（１９ ７６）参照）。

これらの物質は多くのカチオンを■する脂溶性錐体の形成能を有し、これらのイ オンを脂質・々リヤーに通過嘔せる。このような錯体を一価カチオンとともに形 成させる物質は一価カルボキシルイオン透過担体の類に属し、そのうち、最も代 表的なものはモネンシン、ニゲリシン、グリソリキシン、ラサロシドである。

これら−価カルボキシルイオン透過担体ハ柚々の生物学的特性、特に抗生物質的 および抗寄生虫特性？有する。たとえは、モネンシンを家畜の＠胃においてアジ −パント（補助薬）として及び家きんのコクジノオスタテイック剤として使用さ れる。

モネンシンおよびニゲリシンがある：但の細！ｉａラインに闇しリチンの細胞毒 素性を増加させるか指摘されている（　Ｂ、　Ｒａｙ　ａｎｄ　Ｈ，Ｃ＃　Ｗｕ 、　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　ａｎｄＣｅｌｌｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１　、５ ５２−５５９　、　（１９８１）’）。

しかし、この増加はわずか係数１０のオーク゛−である。

本発明に２いては一価カルボキシルイオン透過担体をそれ自オがあるラインに対 して細胞毒素性を示さない場合でも、抗毒性物質の特定の細胞毒素性を極めて大 きく（係数７０００〜５５０００）有効化することが見出された。

次に本発明をより理解されるためρ芙彊例について述べる。

この実施例は抗毒性物質、ａｎｔｉ−Ｔ−６５（フランス特許出願８１２１８３ ６に記載されたもの）の選択的細胞毒５　素性の有効化を抗源Ｔ−６５Ｔｈ持つ ＣＥＭラインのヒトＴリンパブラストイド細胞に関しておこなったものである。

これらの実験に２いて、細胞毒素性を既知量の抗毒性物質又は参照細胞毒素物質 の存在下で、かつイオン透過担体の不存在下又は存在下で３７℃で接極し、２４ 時間後の細胞への１４　Ｃ−ＩＪエニーンの添加の測定によシ評価した。

（１）−イオン透過担体の細胞毒素性の有効化Ｏこれらの実験の結果は投与蓋／ 効果曲紛、すなわち縦軸として細胞毒素性物質の不存在下で参照細凪中の侍られ た埴に対する係で計算され、トレーサの添加によシ上述の如く評価された細胞毒 性薬剤を、他方横軸として細胞毒素性物質の挿性サブユニットにおけるモル一度 をそれぞれ示した。モネンシンおよびグリソリキシンは５０ナノモルｍＷで、ニ ゲリシンは１０ナノモル濃度で、ラサロシドは１ミクロモル濃度でテストした。

なお、これらの物質は上述の濃度では１デ用された細屈に対し自動釣に細胞毒素 性を示さないことが予めチェックされた。

第１図はりチン（Ｒ）自体の細胞毒素性に対するモネンシンの効果、および参照 物質として分宵租した連鎖（Ａ）の効果を示している。モルＭＵ　（ＩＣ５Ｄ　 ）はトレーサの添加の５０チ抑制に相当する。４つの曲線はそれぞれ、リチンの 連鎖（Ａ）、リシンの連鎖Ａとモネンシンの混合物（Ａ）＋Ｍ、’Ｊチン（Ｒ） およびリチンとモネンシンの混合物（Ｒ）　＋　Ｍ　ｋ示している。

これらの結果はモネンシンのりチンの細胞毒素性に対する有効化作用（有効化係 数７）および連鎖（Ａ）の有効化作用（有効化係数４７）を示している。

第２．３図はＮＩ（４イオン（１０ｎＭ）、モネンシン（５０ｎＭ）、二ケ８リ シン（１０ｎＭ）、グ１ノソ１ノキンン（５０ｎＭ　）、ラサロシド（１７μＭ 　）のＣＥＭラインの細胞に対する有効化作用を比較して示している。モル濃度 （■Ｃ３ｏ）は表■のトレーサの姫刀口の５０％９市］１に相当する。

これら図において、種々の曲線はそれぞれ以下のもので得られた結果と関連して いる。すなわち、リチンの運ＭＡ（Ａ）；リチンの連鎖Ａとモネンシンとの混合 物囚＋（財）；共役抗−Ｔ−６５（ＡＴ６５）；およびニゲリシンで補助された 共役１Ｔ６５（ＡＴ６５Ｎ）、モネンシンで補助さｆ′Ｌｋ共役ＡＴ’６・５（ ＡＴ６５Ｍ）、同じく塩化アンモニウムで補助されたもの（ＡＴ６５Ｃ）、同じ くグリソリキシンで補助された葛の（ＡＴ６５Ｇ）、ラサロシドで補助されたも の（ＡＴ６５Ｌ）でろる。

これらの結果はニゲリシンの有効化作用はアンモニウムイオンに近似し、係数７ ０００のオーダであシ、モネンシンの有効化作用は著るしく高く、係数５５００ ０のオーダである。グリソリキシンおよび２サロシドは有効化作用はこれらの中 間にあって、それぞれ２７０００および３６０００の有効化係数を有する。これ らの係数はリーチン又は分選された連ｇｈよシも着るしく高いものである。特に モネンシンの存在下で抗福性物質、抗−Ｔ−６５はりチン目体よ９１０倍近い強 力な細胞毎葉性剤薬と■、かつ、リチンとは反対に目標細胞のみに対し、顕著な 辿択的係畝七Ｍする。

表　■ ２−イオン透過担体による細胞毎累性の退勤性の促進。

上記イオン透過担体の効果は抗毎性の細胞毒素性作用の顕著な増大に限らず、下 記実験で示す通り、抗播性の細胞毒素性の退勤性を着るしく促進させる。

こ１らの実数において前記同様に、ｌ１ｉＢｉ中に放射能トレーサの重加によシ 測定したが、今回は有効化剤として５０ｎＭモネンシンの存在下又は不存在下で 抗毒性ｗＪ質を用い、細胞の潜伏ル」の関数として評価をおこなった。この実験 は相応する特足物の抗壽性物質を用い２つの細胞モデルにつき、おこなったもの である。

すなわち、抗−Ｔ−６５抗毎性物質を５０ｎＭ−夏用いたＣＥＭヒトハイクォブ ラハトイドライン。これらの結果は第４図に示す。この第４図において、曲線は とモネンシン（ＡＴ６５Ｍ）の混合物を示す。ＷＥＨＩ７マウスリンパ庇ライン ｋう度５０　ｎＭで抗毎性物質、抗−Ｔｈｙ　１．２　（７ランス特許出願４７ ９２４６５５参照）で処理したもの。この結果は第５図に示す。この第５図にお いて、曲線はそれぞれ共役抗−Ｔｈｙ　１．２（ＡＴ１２）およびＡＴ１２とモ ネンシンとの浪合物（Ａ　Ｔ　１２．Ｍ　）に関するもので今る。

ＣＫＭについては有効化剤の不存在下では細胞毒紫性運動性は１「ａ”によシ極 峠て緩慢である。同様、の条件下でなされた他の実験結果からトレーサのふ加の ５０チ減少をもたらすのに必要な時間は２０時間程変であることが見出された。

他方、モネンシンのｎ＝下では曲、１”ｂ”に示される如く、連動性の顕著な促 進が見られ、上記５０％減少に要する時間はわずか３時間程度でめった。

ＷＥＨＩ　７についてもほぼ同保の結果が侍られ、モネンシンの不存在下および 存在下における上記５０チ抑制に要する時間はそれぞれ１０時間碕よび１，５時 間でありたＯ このような促進化作用は抗禅物質のすべての適用において極めて重要でアフ、特 に生体内への適用において薬剤の急運な作用は治療の有効性１高める上で極めて 有利な要区となる。

、次Ｋ、−（１ｆｌｉ力ルゴキシルイオン透過担体年独又はリチンのＡ鎖とのＨ ’＝４における毒性について述べる。

Ｊ、Ｗ、　Ｗｓｓｔｌｅｙ　（Ａｄｖ、ａｎｅｅｓ　ｉｎ　ＡｐｐｌｉｅｄＭｉ ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　、２２　、１７７　、　（１９７７）　）によれば５０ ％致命投与（ＬＤ５ｏ）はｉウス腹腔内投与で、モネンシンの場合１６．８？＃ 、ニゲリシンの場合６５ｍｇ７ｔｃｇ　、グリソリキシンの場合１５　ｍ９／ｋ ｆｊ、、ラサロシドの場合６４≠９である◎ これらの結果は我りも確証するところであって、腹腔内への単独投与において、 モネンシンの急性毒性はチャールスリバーフランスマウスの巧易合、マウス１匹 当９の５０％致命投与は３４０μ１１すなわち、体重１　ｔｃｇ当？）１７ｍ９ でるる０ さらに、上述の如くモネンシンは冶萎〒の細胞に対し、リチンのへ鎖の細肥毒索 活性を若干】ぼ効化するから、このモデルシステムの非：ｒ！ｊ足、ｌａ砲苺紫 注についてのチェック、すなわち、動グ全本に対するこの特性の全体的福物学同 ｊλ卓が何かを知ることは重要なことでめる、。そのため、我々はテヤールスリ ／＜−フランスＣＤＩマウムにおけるリチンのＡ鎖の５０係致命投与童（腹腔内 投与）をマウス１匹当りモネンシン１０μｓ又は２０μＩの共投与の有はの１１ 合について〒！Ｊ　＝−ｒ　Ｌ　７？：　。

その結果、見出≧れた数値は下記のｉＬｌシでるる。

ＬＤ５ｏＡ鎖単独　５１１μＩ／マウスＬＤ５ｏＡ鎖 ＋１０μｌモネンシン　３６３μｐｉ−ｒ　ウスＬＤ５ｏＡ鎖 ＋　２０μｇモネンシン　２０３μｂ〜ウスこれらの結果がちモネンシンと同時 に投与された場合にＡ鎖の毒性が若干増大することが明らかである。

禅性増加がわずか２．５の係数（テストされたモネンシンの最大投与について） でｂることに前述の如く抗毒性物質の細胞禅素性についての顕著な複合有効化作 用および促進作用を考鳳したとき、このイオン透過担体の生体中での使用を制限 するものとはならないでめろう口 したがって、抗毒性物質と一価カルポキシルイオン透過担体の組合せ物をヒトの 治療に用いることができる。これらはガン性又は非ガン・注に限らず抗毒素の製 造に・用いられる抗体に敏感な病気の治療に使用することができる。

ガン細胞の全てを除去することを目的として、−価カルボキシルイオン透過担体 の所定量とともに抗毒素の十分な量を用いて処置をおこなうことができ、その抗 毒素の各投与量は１〜１００■の範囲で選択することができよう。この治療処置 の期間は疾病“の性質トヒトの状態によって定まる。

本発明の新規な薬剤は注射用とし、て、特に好ましくは静脈投与用として包装さ れる。

又、好ましくはこれら各成分を別々に保存し、使用時に注射器内で、又は潅注用 溶媒と混合して使用される。

１、事件の表示 ＰＣＴ／ＦＲ８３１０００２５ 一価カルポキンイオン透過担μとの則合せからなる楽刑３、補正をする者 事件との関係　時評出願人 ８何Ｘ　サ　ノ　フ　イ ４代理人 住所　東京都港区虎ノ門１丁目２６番５号　第１７森ピル昭オ０５８年１１力８ 日 国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　少なくとも一つの抗毒性物質と、少なくとも一種のｍ個カルボキシルイオン 透過担体との組合せからなる薬剤。 ２、抗毒性物質が抗−Ｔ−６５であシ、該イオン透過担体がモネンシン、ニグリ ーシン、グリソリキシンおよびラサロシドから選ばれるものである請求の範囲第 １項記載の薬剤。 ３　抗毒性物質が抗−Ｔｈｙｌ、２でゃシ、該イオン透過損、体がモネンシン、 ニゲリシン、グリソリキシンおよびラサロシドから選ばれるものでめるめ請求の 範囲第１項記載の薬剤。 ４、注射用、好ましくは静脈注射用として包装された請求の範囲第１項ないし第 ３項のいずれかの項に記載されｙｃ薬剤。 浄書（内容に変更なし）