JPH03284691A - 抗ウイルス性ヌクレオシド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、抗ウイルス性ヌクレオシドに関する。さらに
詳しくは、本発明はとりわけ、ワクシニア、ポリオ、コ
ツフサツキ−、シンドビス、レオ、セムリキなどのウィ
ルス感染症の予防もしくは治療に使用するための抗ウィ
ルス剤に関する。

［従来の技術］ 後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）　、　Ｂ型肝炎をは
じめとするウィルス感染症に有効な薬剤開発が強く望ま
れ、抗ウィルス剤は高い安全性と確実な薬効が要求され
ている。近年、ヌクレオシド類似体の抗ウィルス剤はい
くつか報告されているが（Ｐｒｏｇ、　Ｄｒｕｕｇ、　
Ｒｅｓ、、（１９８４）　２８，１２８）有効なものは
少ない。

［発明の解決しようとする課題］ 従来のヌクレオシド系抗ウィルス剤は薬効・副作用の面
から必ずしも満足されるものでない。特に、ワクシニア
、ポリオ、コックサッキー、シンドビス、レオ、セムリ
キなどのウィルスに対し輔広い抗ウィルス作用を有する
薬剤はほとんど知られていない。

［課題を解決するための手段］ 本発明は、ワクシニア、ポリオ、コツフサツキ−、シン
ドビス、レオ、セムリキなどのウィルスに起因する疾病
の治療により有効な薬効を開発すべく、鋭意研究を重ね
た結果、３゛−デオキシ−３“−フルオロヌクレオシド
類がこれらのウィルス感染による疾病に対し、著しい薬
効を示すことを見出し　−の知見に基づいて本発明を完
成するにンっγ。

〜”　Ｉ、Ｉｉ　５も、不発明は、３−デオキシ−３゛
−フルオロヌク１ノオシド類を含有してなる抗ウィルス
剤を提供するものである。

３゛−デオキシ−３−フルオロヌクレオシド類の詳細お
よびこの化合物の製造法は、本出願人の出願した特許（
特開昭６２−８１３９７号）に記載されている。本発明
におけるヌクレオシド類はプリン残基を有するリボヌク
レオシドをいう。

プリン残基としては、アデニン、グアニン、ピポキサン
チン、およびキサンチンの残基があり、特に、アデニン
残基が薬効の面で好ましい。好ましい化合物は、３−デ
オキシ−３゛〜フルオロアデノシンである。以下に上記
先願に記載されている３°−デオキシ−３゛−フルオロ
アデノシンおよびその製造法の概略を説明するが、本発
明における化合物は必ずしもこれに限定されるものでは
ない。

３°−デオキシ−３゛−フルオロヌクレオシド類は下記
（１）で表される化合物（ただし、Ｒは核酸残基な表わ
す）である。

式（Ｉ）において、Ｒは好ましくはアデニン残基である
。この化合物は１位がハロゲン原子、アルコキシ基、水
酸基、あるいは保護さねた水酸基などの基である３−デ
オキシ−３−フルオロ−β−Ｄ−リボフラノシド誘導体
の該１位にアデニン残基を導入することにより製造され
る。また、該フルオローβ−Ｄ−リボフラノシド誘導体
は、１位がハロゲン原子、アルコキシ基、あるいは保護
された水酸基であり、かつ２位と５位の水酸基が保護さ
れているβ−Ｄ−キシロフラノシド誘導体の３位の水酸
基をフッ素化剤でフッ素化することにより得られる。

３位の水酸基に脱離基を導入しておくとフッ素化が容易
である。フッ素化剤により、フッ素原子は立体特異的に
３位の水酸基の反対位置に導入され水酸基が脱離する。

上記β−Ｄ−キシロフラノシド誘導体は３位の水酸基の
みが選択的に保護されず、他の水酸基はすべて保護され
ていなければならない。保護剤に対する水酸基の反応性
は微妙に異なるので、これを利用して上記β−Ｄ−キシ
ロフラノシド銹導体を製造することができる。３−デオ
キシ−３−フルオロ−β−Ｄ−リボフラノシド誘導体の
上記製造法の流れを以下に示す。

（１）　　　　　　　　　　　　（２）（３）　　　　
　　　　　　　　（４）上記において、Ｒ’はハロゲン
原子、アルコキシ基、あるいは保護された水酸基を表わ
す。

特に、メトキシ基などの低級アルコキシ基−；好ましい
。Ｒ２はアルキリデン基を表わす、特にインプロピリデ
ン基が好まし５い。Ｒ３およびＲｏは水酸基の保護基を
表わす。

たとえば、トリ（アルキル、アリール、あるいはアルア
ルキル）シリル基、アシル基、アルアルキル基などが適
当である。特にＲ３はベンジル基などのアルアルキル基
、Ｒ４はｔ−ブヂルジメチルシリル基などのトリアルキ
ルシリル基が好ましい。Ｙは脱離などを表わし、たとえ
ばメタンスルホニル基、トリフルオロメタンスルホニル
基、ｐ−）ルエンスルホニル基、アセチル基などがあり
、特にトリフルオロメタンスルホニル基が好ましい、フ
ッ素化剤としては。

種々のフッ素化剤を使用することができるが、その内で
もフッ化テトラ（アルキルあるいはアルアルキル）アン
モニウムが好ましい。特に低級アルキル基を有するフッ
化テトラアルキルアンモニウムが適当で、フッ化テトラ
ブチルアンモニウムが最も好ましい。上記（８）の化合
物に公知の方法でプリン残基を導入した後脱保護するか
、脱保護した後にプリン残基を導入して目的とする前記
式（Ｉ）で表わされる化合物を得る。プリン残基の導入
は、たとえば文献（Ｗｒｉｇｈｔ、Ｃａｒｂａｈｙｄｒ
ａｔｅ　Ｒｅ５ｅａｃｈ、３４５（１９７１））記載の
方法を採用することができる。

フルオロヌクレオシド類を前記ウィルスに起因する疾患
の予防・治療のために人その他の温血動物に投与する場
合には、それ自体、あるいは通常用いられる方法により
、たとえば薬理的に許容されつる担体、賦形剤、希釈剤
、溶解補助剤などを使用して、たとえば粉末、顆粒、錠
剤、カプセル剤、注射剤、生薬などの形態で経口的また
は非経口的に投与することができる。

投与量は症状、栄養状態、年齢、薬物などの投与経路な
どにより異なるが、たとえば経口投与する場合には１日
１〜５回程度、フルオロヌクレオシド類として１日当り
約５〜１００ｍｇ／ｋｇ体重が、また非経口投与当り約
１〜４０Ｂ／ｋｇ体重が好んで用いられる。

次に、本発明の詳細を合成および実施例で説明するが、
本発明は必ずしもこれらに限定されるものではない。な
お、合成例は前記製造法に従って、化合物（１）から化
合物（６）を製造し、次にプリン残基を導入して３°−
デオキシ−３−フルオロアデノシンを製造する例である
。

合成例 メチル２−０−ベンジル−３５−０−イソプロピ１デン
ー　−Ｄ−リボフラノシド　　２　におい１戒 メチル２−０−ベンジル−３，５−０−イソプロピリデ
ン−β−Ｄ−リボフラノシド１２．６ｇ（６１，６ｍｍ
ｏｌ）と、酸化銀（１５，０ｇ）のＮ、Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド懸濁液にベンジルプロミド（２１，２ｇ）を
加え、室温で３６時間撹拌した。反応液を濾過し、水を
加え、クロロホルム抽出した。有機層を水で洗浄後、硫
酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。カラムクロマトグ
ラフで精製した。ベンジルエーテル１２．６ｇ（収率６
９％）を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：δ１．３ｇ（ｓ、６）
１）、　３．４１（ｓ、３Ｈ）３、８−４．５　（ｍ、
　５Ｈ）　、　４．５９　（ｓ、　２Ｈ１。

４．９８（ｓ、ＩＨ）、　７．３２（ｓ、５Ｈ）メチル
２−０−ベンジル−３，５−０−インプロピリデン−β
−Ｄ−リボフラノシド３０、Ｉｇ（０，１０ｍｍｏｌ）
を酢酸（６０ｍｌ）　、水（２４ｍｌ）を溶解し、５０
℃の湯浴上で１時間反応させた。湯呑を５０℃に保った
ままで低沸点物を流出した。カラムクロマトグラフで精
製し、ジオール２０．３ｇ（収率８０％）を得た。

Ｒ，０，４０（ベンゼン−酢酸エチル＝１　：　１）合
成例■で合成したジオール２０．３ｇ　（８２ｍｍｏｌ
）を、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍｌ）に溶
解し、イミダゾール（１６，８ｇ）を加えた。この溶液
に、塩化ｔ−ブチルジメチルシラン１２．４ｇのＮ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド（６０ｍ１　）溶解な０℃で３
０分かけて滴下した。３時間撹拌の後常法に従い後処理
した。カラムクロマトグラフ精製して、シリルエーテル
３０．２ｇ　（収率１００％）を得た。

Ｉｎ−ＮＭＲ（ｃｎｃｘ、）　： ６０．１０（ｓ、６Ｈ）、０．９１（ｓ、９Ｂ）。

３、３７　（ａ、　３Ｈ）　、　３．９−４．１　（ａ
＋、　３Ｈ）４゜２−４．４　　［ｍ、３Ｈ）、４．６
１（ｓ、２Ｈ）。

４、９３　（ｓ、　ＩＩ）、　　７．３２　（ｓ、　５
Ｈ）上記合成例■で合成したメチル２−０−ベンジル−
５−Ｄ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−キシロフ
ラノシド１３．０ｇ（３５゜Ｏｍｚｏｌ）のジクロロメ
タン（８０ｎｌ）溶液に、２，６−ルチジン１１．４ｇ
を加え０℃で冷却した。ここへ無水トリフルフルオロメ
タンスルホンｔ！　（２０，０ｇ）を１５分かけて滴下
し、さらに３０分反応させた。氷を加えた後、処理し、
ショートし、カラムクロマトグラフで粗生成物を　１６
．ｌ１１ｇを取り出した。

このものをテトラヒドロフラン（６０ｎｌ）に溶解し、
フッ化テトラブチルアンモニウムのテトラヒドロフラン
溶液（ｆ　＝　１．０　）　９２＋＋＋１を０℃で２０
分かけて滴下した。０℃で２４時間室温で３時間撹拌の
後、テトラヒドロフランを留去し、飽和硫酸アンモニウ
ム水溶液で処理した。カラムクロマトグラフ精製をし、
標記のフッ素化体を５．４ｇ得た。

”Ｆ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１，、ＣＣｌ５Ｆ基準　）：〜２
０７．　ｌｐｐｍ　（ｄｄｄＪ＝５３．７．２２．０．
１３．４Ｈｚ）。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：δ　３．４７７（ｓ、
３Ｈ）、　４．０−４．２（ｍ。

２Ｈ）、　４．５５（ｓ、２１１）、４．６−５．２（
ｍ。

５Ｈ）、　７．３３（ｓ、５Ｈ） ３′−デオキシ−３′フルオロアデノシンの人上記化合
物■で合成したベンジルエーテル５、４ｇ（２１，ＩＱ
＋１１１０１）をエタノール７０ｍ１に溶解し、５％−
パラジウム黒５．５ｇ存在下、室温、常圧で水素添加し
た。１０時間後、セライト　５４５を通し濾過をして濃
縮した。

粗生成物をピリジン３５ｍ１に溶解し、ペンソイルクロ
リド６、１ｇを加えて室？温で３６時間反応した。ピリ
ジン留去後、カラムクロマトグラフ精製し、メチル２，
５−ジーＯ−ベンゾイル−３−フルオローβ−Ｄ−リボ
フラノシドを２．２ｇ得た。

”Ｆ−ＮＭＲｆＣＤＣｌ、、ＣＣＩヵＦ基準）ニー２１
１．６ｐｐａｌ（ｄｄｄ、　Ｊ＝５３．２．Ｃ８，１、
４，９Ｈｚ）このベンゾイル体２．２ｇ（５，９ｍｍｏ
ｌ）を酢酸（０，４ｍ１）に溶かす。ここに３０％−興
化水素一酢酸溶液を加えて室温で３時間攪拌する。酢酸
、無水酢酸など完全に留去後、ニトロメタン（１０ｎｌ
）に溶解し、アデニンモノベンゾエート　１．３ｇのニ
トロメタン溶液　（８０ｎｌ）に加え、さらにシアン化
第二水銀２ｇを加え、１時間加熱還流した。ニトロメタ
ンを留去後３０％ヨウ化カリウム水溶液、水で洗浄し濃
縮した。ショートカラムで粗分離し、次の反応に用いた
。

トリベンゾイル体１．２９ｇをメタノール（３８ｎｌ）
に溌解し、ここにＩＭ−ヅトリウムメトキシドーメタノ
ール溶液を加え、１時間加熱還流した。メタノールを留
去復水（４０ｎｌ）を加え、２Ｎ−酢酸水溶液で中和し
た。水層をクロロポルムで抽出し、有機物を除去した後
、濃縮した。

９９．５％−エタノールから再結晶し、最終生成物であ
る標言己の３′−デオキシ−３′フルオロアデノシン０
．６０ｇを得た。

”Ｆ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、、ＣＣ１，Ｆ基準〕　ニ
ー１９７．８　（ｃｌｔ、　５４．４．２２．１．Ｈ７
）’ｌ（−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　　　：　　６３
．　６−３．　７　（ｒｎ、　　　２Ｂ）４．２９（ｄ
ｔ、　Ｊ＝２７．６．３．７Ｈｚ、　　１ｔ−Ｉｔ、　
４８−５．０（ｍ、ＩＨ）、　５．０９（ｄｄ、　Ｊ：
５４．４．４．２）１ｚ、　ＩＨＩ。

５．６９（ｄｄ、　Ｊ＝７．３．４゜９Ｈｚ、　１Ｂ）
、　５．８９（ｄ。

、Ｊ−６，３Ｈｚ、　ＩＨ）、　５．９３（ｄ、Ｊ−８
，１Ｈｚ、　１）ｌ）７．３９（ｓ、　２Ｈ）、　８．
１３（ｓ、　ＩＨＩ、８．３６（ｓ、ＬＨ）１３Ｃ−Ｎ
ＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄｅ）　：６６１．１（ｄ、　、Ｃ１
２，２Ｈｚ。

Ｃ−５’）、　７２．０（ｄ、　、Ｃ１５，９Ｈｚ、　
Ｃ−２’）　　８３．９ｄ、　Ｊ＝１８１．８Ｈｚ、　
Ｃ−３’）、　Ｈ９，４（Ｃ−５）。

１４０．１（Ｃ−８１，１４９，１１（Ｃ−４＋、　１
５２．４（Ｃ−２１１５６、２（（：＝６）、 ＩＲ（ＫＢｒ錠剤）　３３００．１６５０ｃｍ−融点　
２０５．６℃ 実施例１ ｉｎ　ｖｉｔｒｏにおけるウィルスによる細胞変性の阻
害 抗ウイルス活性評価には次のようなウィルス及び宿主細
胞を用いた。ワクシニアウィルス（ウサギ腎細胞）、レ
オウィルス（ベロ細胞）シンドビスウィルス（ベロ細胞
）、コックスサラキーウィルス（ベロ細胞またはＨｅＬ
ａ細胞）、セムリキウィルス（ベロ細胞）、ポリオウィ
ルス（ＨｅＬａ細胞）。

マイクロプレート中の混合した細胞培養液を１００　Ｃ
ＣＩＤ、。で培養した（　Ｉ　　ＣＣＩＤａｏは、培養
細胞の５０％が感染しているウィルスストック液を示す
）。ウィルスを細胞に１時間吸着させた後、余分のウィ
ルスを除き、３％牛脂児血清と種々の化合物を含む細胞
培養液（イーグルＭＥＭ培地）を入れた。ウィルスによ
る細胞変性は、ワクシニアウィルスの場合２〜３日後、
レオウィルスの場合６〜７日後、シンドビスウィルスの
場合２〜３日後、コックスサッキーウイルス、セムリキ
ウィルス、ポリオウィルスの場合２日後に評価した。化
合物の抗ウィルス活性は、細胞変性を５０％阻害する濃
度で表わされる。

細胞毒性は、ウィルス感染させた細胞を培養と同時にウ
ィルスを含まず、種々の化合物のみを含む培養液を培養
することにより求めた。

表１、表２、表３より合成例■の化合物は、種々のウィ
ルスに対して、強い抗ウィルス作用を有することが判明
した。

表１　ウサギ腎細胞中での抗ワクシニアウィルス活性と
細胞毒性 表２　　ＶＥＲＯＩＢ胞中での抗レオウィルス、抗シン
ドビスウィルス、抗コックスサッキーウィルス、抗セム
リキウイルス活性と細胞毒性 ＰＦＵ／ｍｌを含むワクシニアウィルス０．２ｍｌ　　
を尾静脈より注入した。２〜５日連続で薬剤を腹腔内投
与し、感染後７日、尻尾の損傷を判定した。

表３　　ＨｅＬａ細胞中での抗コックスサッキーウィル
ス、抗ポリウィルス活性と細胞毒性 実施例２ マウスの尻尾のワクシニアウィルスによる損傷に対する
３′−デオキシ−３′−フルオロアデノシンの効果

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ワクシニア、ポリオ、コックサッキー、シンドビス
   、レオ、セムリキなどのウィルス感染症の予防もしくは
   治療に使用するための下記式（ I ）で表される化合物
   、またはその生理活性学的に許容し得る塩。 ▲数式、化学式、表等があります▼−−−（ I ） ２、式（ I ）の化合物が、３′−デオキシ−３′−フ
   ルオロアデノシンである特許請求の範囲第１項の化合物
   、またはその生理学的に許容し得る塩。