JP6628448B2 - 振とう型培養装置及びこれを用いた培養方法 - Google Patents
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Description
特許文献1には、撹拌翼を有した撹拌装置を気密に収納した培養袋が記載されている。この培養装置は、撹拌時に撹拌翼により、高いシェア(せん断応力)が系内において生じるものであった。また、撹拌翼の軸受け部分の摺動を原因としたパーティクルの発生があった。さらに、価格面の課題、撹拌翼と培養袋の接合方法の課題があった。
特許文献2には、平袋からなる培養袋をトレイ状の支持装置に固定した培養装置が記載されている。この培養装置の場合、平袋が横置きに配置されるため、大スケール化には占有面積の増大の課題があった。
正方向及び逆方向の回転が可能な機構を含むことが好ましい。
前記培養袋を収容した前記外殻容器の振とうの回転数が0.1〜2000rpm、振幅が0.1〜100mmであることが好ましい。
前記培養袋内の前記内容物の波の高さを検出する装置を含み、前記内容物の波の高さが一定となるように前記培養袋を収容した前記外殻容器の振とうの回転数を調整する調整機構を備えることが好ましい。
前記外殻容器が循環水を通すことができるジャケット構造又はラバーヒーターを含むことが好ましい。
前記培養袋は、前記内容物のpHを一定にするために酸又はアルカリの投入口を備えていることが好ましい。
前記培養袋は、前記内容物の追加及び取り出しのために、それぞれのチューブが連結できることが好ましい。
前記培養袋は、前記内容物に空気又は酸素を供給するための機構を備えていることが好ましい。
培養袋10の容量(大きさ)は特に限定されないが、例えば0.1L〜5000Lの大きさとすることができ、好ましくは1〜2000Lである。培養袋10は、シングルユース(使い捨て)であってもよい。
チューブの材質は特に限定されないが、シリコーン、熱可塑性エラストマー等、耐薬品性、耐候性等に優れる材質が好ましい。チューブには、フィルター、フローモニター、流量計、バルブ、ポンプ等を設けてもよい。培養袋10及びチューブ14,15は、培養前に滅菌されていることが好ましい。滅菌手段は培養目的等に応じて適宜選択でき、具体例として、γ線等の放射線、エチレンオキサイド等のガス、水蒸気等による加熱などが挙げられる。
外殻容器の構成は特に限定されないが、図2の外殻容器20は、側壁部21a及び底壁部21bを有する容器本体21と、側壁部21aの上方開口部を閉鎖する蓋部22とを備える。側壁部21aにより培養袋10の上下方向で全体又は大部分を収容できる場合、蓋部22を省略してもよい。培養袋10の側面の下部を容器本体21で覆い、培養袋10の側面の上部を蓋部22で覆うこともできる。
外装容器20(例えば、容器本体21及び蓋部22)の材質は、培養袋10を保護可能な硬さ(剛性)を有することが好ましく、例えば、ステンレス等の金属、樹脂、木材、集成材、繊維強化プラスチック等の複合材料が挙げられる。
外殻容器の内部空間は円柱形状であり、外殻容器の底面に円柱の円部分が位置することが、撹拌効率の観点から好ましい。内部空間の円柱の底面に位置する円の直径(内径)と円柱の高さとの比は、例えば1:2〜2:1である。内径と高さが同等(比が1:1)でもよい。
・培地のpH
・培地の空気通気量
・培地の温度
・液面の高さ(波の高さ)
(2)正回転→停止→正回転→停止→逆回転→停止→逆回転→(繰り返し)
(3)正回転→停止→正回転→停止→正回転→停止→正回転→(繰り返し)
水素イオン指数(pH)については、pH電極を培養袋に挿入する、もしくはpHで色の変わるチップを系内に貼ることで系内のpHを知ることができる。系内を酸性にしたい場合は、CO2ガスを導入する、もしくは、酸溶液を滴下することで酸性側にpHを変えることができる。CO2ガスを導入する場合は、CO2ガスが溶液中に必要以上に溶解することを防ぐため、培養袋の上面からCO2ガスを導入するか、培養袋の底部から間歇で導入することが好ましい。系内を塩基性としたい場合は、アルカリ溶液を添加することにより、pHを塩基性とすることができる。pHを一定にするための酸又はアルカリの投入口は、チューブ14,15や注出口16であってもよく、あるいは他に設けてもよい。
DO(溶存酸素濃度)については、空気通気量を測定し、フィードバック制御をかけ、酸素を導入することが好ましい。酸素(O2)の供給方法としては、溶液内に酸素がいきわたるように、溶液内(液面下)に出口を有するチューブから導入することが好ましい。
上記の振とう装置は、培養のほか、組成物(培地等)の撹拌、調製、化学反応、発酵等にも利用することができる。
Claims (6)
- 軟包装材からなる培養袋と、前記培養袋全体を収容してその温度調整を行うことができるように配置された外殻容器と、前記培養袋を収容した前記外殻容器を振とうさせる動力源とを含み、
撹拌翼を有しない振とう型培養装置であって、
振とう型培養装置が回転と停止をパターンで繰り返すプログラムを備えてなり、
前記培養袋を収容した前記外殻容器を振とうさせることにより、前記培養袋内の内容物を撹拌混合することができ、
前記培養袋がガゼット袋であり、注出口を備えており、
前記培養袋に内容物が収容され、前記内容物の重量により前記培養袋が変形して前記外殻容器の内面に密着することにより、前記培養袋が前記外殻容器に支持されており、
前記外殻容器の内部空間が円柱形状であり、外殻の底面に円柱の円が位置し、円の直径と、円柱の高さとの比が、1:2〜2:1の範囲内であることを特徴とする振とう型培養装置。 - 前記培養袋を収容した前記外殻容器が、水平方向に回転することを特徴とする請求項1に記載の振とう型培養装置。
- 正方向及び逆方向の回転が可能な機構を含むことを特徴とする請求項1又は2に記載の振とう型培養装置。
- 前記培養袋を収容した前記外殻容器の振とうの回転数が0.1〜2000rpm、振幅が0.1〜100mmであることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の振とう型培養装置。
- 前記培養袋内の前記内容物の波の高さを検出する装置を含み、前記内容物の波の高さが一定となるように前記培養袋を収容した前記外殻容器の振とうの回転数を調整する調整機構を備えることを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載の振とう型培養装置。
- 請求項1〜5のいずれか1項に記載の振とう型培養装置を用いた培養方法。
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