JP6449177B2 - 新規アベキシノスタット塩、関連結晶形態、それらの調製方法およびそれらを含有する医薬組成物 - Google Patents

Description

本発明は、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛２−［３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチル）ベンゾフラン−２−イルカルボニルアミノ］エトキシ｝ベンズアミド・トシル酸塩、またはその溶媒和物に関する。

あるいは、本発明の主題は、式（Ｉ）のアベキシノスタット（abexinostate）：

のトシル酸塩に関する。

より詳細には、本発明は、式（ＩＩ）の塩：

に関する。

本発明はまた、Ｎ−ヒドロキシ−４−｛２−［３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチル）ベンゾフラン−２−イルカルボニルアミノ］エトキシ｝ベンズアミド・トシル酸塩の結晶形態Ｉに、その調製方法に、およびまたそれらを含有する医薬組成物に関する。

アベキシノスタットとしても公知のＮ−ヒドロキシ−４−｛２−［３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチル）ベンゾフラン−２−イルカルボニルアミノ］エトキシ｝ベンズアミドは、特許出願国際公開第２００４／０９２１１５号パンフレットに記載されているヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤である。それは、細胞成長の阻害を可能にし、インビトロで培養腫瘍細胞のアポトーシスを誘導し、およびインビボで異種移植モデルの腫瘍成長を阻害する（Ｂｕｇｇｙ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ ２００６ ５（５）１３０９）。その薬理学的プロファイルにかんがみて、アベキシノスタットは、癌の処置を意図したものである。

工業的観点からは、溶解、濾過、乾燥、製剤の容易さ、およびその長期保管を可能にする安定性といった有益な特性を有する化合物を、温度、光、湿気または酸素レベルについての特別な要件なしに、優れた純度で、特に、完全に再生可能な形態で合成することが必須である。

特許出願国際公開第２００４／０９２１１５号明細書には、アベキシノスタットを得るための２つの異なる経路が記載されている。両方の場合、３−メチル−ベンゾフラン−２−カルボン酸が出発原料として使用されるが、３−位のジメチルアミノメチル基によるこの中心核の官能化は、合成プロセスの異なる段階、すなわち、ベンゾフラン−２−カルボン酸誘導体と４−（２−アミノエトキシ）安息香酸メチルのカップリング前または後に行われる。アベキシノスタット塩酸塩の獲得は、国際公開第２００４／０９２１１５号明細書に具体的に記載されている。しかし、工業規模でのこの塩の使用は、その吸湿特性のため、細心の注意を要する。

本発明は、明確に定義された、完全に再現可能な結晶形態の、かつ医薬組成物の調製（特に乾燥）および保管の工業的制約に適合した非常に良好な安定性を提示する、アベキシノスタット・トシル酸塩（アベキシノスタット４−メチルベンゼンスルホン酸塩）を得るための製法を記載する。

アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉは、次の回折線を有する粉末回折パターンＸ（ブラッグ角θ、２度±０．２°で表示）によって特徴付けられる：６．５０；９．９４；１１．３５；１２．３３；１４．０８；１８．９５；２１．０８；２７．０５。よりいっそう詳細には、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉは、次の回折線によって特徴付けられる：６．５０；９．９４；１１．３５；１２．３３；１４．０８；１８．９５；１９．６１；１９．９６；２１．０８；２２．８２：２３．６１；２７．０５。

より具体的には、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉは、Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を備えたＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｒｏ ＭＰＤ回折計を使用して測定され、線位置（ブラッグ角２θ、度±０．２°で表示）および面間隔（Åで表示）で表示される、下記の粉末回折パターンＸを特徴とする：

さらに、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉをラマン分光法によって特徴付けた。有意なピークが次の位置で観察された：９４０ｃｍ^−１、１０８８ｃｍ^−１、１１３２ｃｍ^−１、１２４２ｃｍ^−１、１３６０ｃｍ^−１、１６０８ｃｍ^−１。

あるいは、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉは、１２本の有意な線を含む粉末回折パターンＸによって、およびまた位置１６０８ｃｍ^−１に有意なピークを有するラマンスペクトルによって特徴付けられ得る。

最後に、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを固体ＮＭＲ分光法によっても特徴付けた。有意なピークが、１２１．２ｐｐｍ、１２２．１ｐｐｍ、１２３．５ｐｐｍ、１２６．０ｐｐｍ、１２６．８ｐｐｍ、１２８．２ｐｐｍ、１２８．９ｐｐｍ、１４３．４ｐｐｍ、１４４．６ｐｐｍ、１５３．８ｐｐｍ、１５９ｐｐｍ、１６１．２ｐｐｍおよび１６２．１ｐｐｍで観察された。

より具体的には、^１３Ｃ ＣＰ／ＭＡＳ（交差分極マジック角回転）スペクトルは、以下のピーク（ｐｐｍ±０．２ｐｐｍで表示）を有する：

本発明は、アベキシノスタットをパラ−トルエンスルホン酸の存在下で極性媒体から結晶化させることを特徴とする、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの調製方法にも関する。好ましくは、前記極性媒体は、水、アルコール、ケトンおよびエステルから選択される１つ以上の溶媒から成り、これに関しては以下のとおり了解される：
−「アルコール」は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコール、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、イソペンタノール、ヘキサノールを意味する、
−「ケトン」は、Ｃ_３〜Ｃ_６ケトン、例えば、アセトン、メチルエチルケトン、２−ペンタノン、３−ペンタノン、３−メチル−２−ブタノン、２−ヘキサノン、３−ヘキサノン、エチルイソプロピルケトン、メチルイソプロピルケトン、２，２−ジメチル−３−ケトンを意味する、
−「エステル」は、Ｃ_３〜Ｃ_８エステル、例えば、ギ酸エチル、ギ酸イソプロピル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｔｅｒｔ−ブチル、酢酸ペンチル、酢酸イソペンチル、酢酸ヘキシルを意味する。

好ましいアルコールは、エタノールおよびイソプロパノールである。好ましい溶媒の中で、ケトンの中ではアセトンおよびメチルエチルケトン、ならびにエステルの中では酢酸エチルが優先される。

あるいは、前記極性媒体は、２成分混合物であり、そのうちの１成分は水である。よりいっそう好ましくは、前記極性媒体は、アセトン／水、エタノール／水、イソプロパノール／水、およびメチルエチルケトン／水の中から選択される２成分混合物である。

本発明の結晶化法では、任意の製法によって得たアベキシノスタット（遊離塩基）を使用してよい。

本発明は、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶化形態Ｉの別の調製方法にも関し、この製法での結晶化は、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを非常に少量使用して種晶添加される。

本発明によるこの第二の結晶化法では、任意の製法によって得たアベキシノスタット（遊離塩基）を使用してよい。

アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの獲得には、一貫性のある再生可能な組成物を有する医薬製剤であって、該製剤が経口投与を意図したものであるとき特に有利である良好な溶解および安定特性を提示する医薬製剤を調製することを可能にするという利点がある。より具体的には、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの使用は、その低い吸湿性にかんがみて工業状況下で特に有益である。

アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉは、癌の処置、より詳細には、癌腫、腫瘍、新生物、リンパ腫、黒色腫、神経膠腫、肉腫または芽種の処置を意図したものである。

本発明は、１つ以上の適切な非毒性不活性賦形剤とともに、活性成分としてアベキシノスタットのトシル酸塩、よりいっそう詳細にはアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを含む医薬組成物にも関する。本発明による医薬組成物の中で、より詳細には、経口、非経口（静脈内もしくは皮下）または経鼻投与に適しているもの、錠剤または糖衣丸、顆粒、舌下錠、カプセル、ロゼンジ、坐剤、クリーム、軟膏、皮膚用ゲル、注射用製剤、飲用懸濁液およびチューインガムを挙げることができる。

経口投与される医薬組成物が好ましい。

有用な投薬量は、患者の性別、年齢および体重、投与経路、癌の性質、および任意の関連処置によって変わり、有用な投薬範囲は、遊離塩基で表して１日２０ｍｇから４８０ｍｇのＮ−ヒドロキシ−４−｛２−［３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチル）-ベンゾフラン−２−イルカルボニルアミノ］エトキシ｝ベンズアミドの範囲である。

以下の実施例は、本発明を例証するものであるが、いかなる点でも本発明を限定しない。

実施例１：アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを得るための方法
１．６６ｋｇのアベキシノスタット（遊離塩基）を周囲温度で９．４８ｇのイソプロパノール／水（５０／５０重量／重量）混合物に入れる。パラ−トルエンスルホン酸・一水和物（０．８３ｋｇ）を周囲温度で２．３６ｋｇの水に添加する。その後、その混合物を７５℃で３０分間加熱した後、０℃に冷却する。結晶化が完了したら、その懸濁液を２０℃で濾過する。乾燥後、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを約８５％の収率および９９％より高い純度で得る。その固体を、下記実施例３〜６に示すように粉末回折パターンＸ、ラマンスペクトルおよびＮＭＲスペクトルによって特徴付けた。

実施例２：アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを得るための方法（種晶添加）
３３．９ｋｇのアベキシノスタット（遊離塩基）を周囲温度で１７０ｋｇのイソプロパノール／水（４５．６／５４．４重量／重量）混合物に入れる。水（２４．１ｋｇ）中のパラ−トルエンスルホン酸・一水和物（１７．０６ｋｇ）から成る溶液を添加する。その後、その媒体を７０〜７５℃で加熱し、冷却し、１．９３５ｋｇのアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを用いて種晶添加する。その後、その懸濁液を２０°で濾過する。乾燥後、アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを約８６％の収率および９９％より高い純度で得る。その固体を、下記実施例３〜６に示すように粉末回折パターンＸ、ラマンスペクトルおよびＮＭＲスペクトルによって特徴付けた。

実施例３：アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ（粉末回折パターンＸ）
Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒを備えたＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｒｏ ＭＰＤ回折計を以下の条件下で使用してデータの記録を行った。
−電圧４５ｋＶ、電流４０ｍＡ、
−載置：θ／θ、
−陽極：銅、
−Ｋα−１波長：１．５４０６０Å、
−Ｋα−２波長：１．５４４４３Å、
−Ｋα−２／Ｋα−１比：０．５、
−測定モード：０．０１７°刻みで３°から５５°（ブラッグ角２θ）まで連続的、
−ステップあたりの測定時間：３５．５３秒。

実施例１または２の方法に従って得たアベキシノスタット・トシル酸塩の形態Ｉの粉末回折パターンＸを、線位置（ブラッグ角２θ、度±２°で表示）、面間隔（Åで表示）および相対強度（最も強い線に対する百分率として表示）で表示する。有意な線を次の表で照合した。

実施例４：アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ（結晶単位格子）
２，２，２−トリフルオロエタノール中のアベキシノスタット・トシル酸塩の飽和溶液を、２４時間、周囲温度での懸濁液の撹拌、それに続く濾過によって調製する。その後、１ｍＬの得られた溶液を１．８ｍＬ ＨＰＬＣバイアルに注入し、それに０．２５ｍＬの水を添加する。その溶液を周囲温度で７５分間維持する。遠心分離およびその後の乾燥後、分析のために固体を単離する。得られた結晶の中から、十分な量の結晶を単結晶Ｘ線回折分析に使う。

モリブデン対陰極（λＭｏＫα１＝０．７０９３Å）を有するＦＲ５９０発生装置を装備したＢｒｕｋｅｒ Ｋａｐｐａ ＣＣＤ回折計を使用して、θに関しては２°から２７．５°の角度範囲を用いて、上記単結晶の結晶構造を決定した。以下のパラメータを確立した：
−結晶単位格子：三斜晶系
−単位格子パラメータ：ａ＝１０．４６７Å、ｂ＝１４．６３１Å、ｃ＝２０．１５９Å、α＝７３．９７１°、β＝７９．０４０°、γ＝７２．６８３°
−空間群：Ｐ−１
−単位格子内の分子数：４
−単位格子の体積：Ｖ_単位格子＝２８１３．０Å
−密度：ｄ＝１．３４５ｇ／ｃｍ^３。

実施例５：アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ（ラマンスペクトル）
アベキシノスタット・トシル酸塩の形態Ｉをラマン分光法によって特徴付けた。７８５ｎｍレーザーを使用して拡散反射率モード（Ｒａｍａｎ Ｓｔａｔｉｏｎ ４００、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でスペクトルを記録した。シグナルをＣＣＤ検出器によって記録した。波長シフトは材料に依存し、その材料に特有のものであり、これによって化学組成の分析および研究する試料の分子配列の分析が可能になる。最大出力（１００％レーザー能力）、１００μｍのスポットサイズ、２０回の２秒曝露、および２ｃｍ^−１のスペクトル分解でスペクトルを獲得した。活用したスペクトル範囲は、０から３２７８ｃｍ^−１にわたる。

有意なピークが次の位置で観察された：９４０ｃｍ^−１、１０８８^−１、１１３２−^１、１２４２^−１、１３６０^−１、１６０８^−１。

実施例６：アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ（固体ＮＭＲスペクトル）
アベキシノスタット・トシル酸塩の形態Ｉを固体ＮＭＲ分光法によっても特徴付けた。４ｍｍ ＣＰ／ＭＡＳ ＳＢ ＶＴＮ型プローブを備えたＢｒｕｋｅｒ ＳＢ Ａｖａｎｃｅ分光計を以下の条件下で使用して、周囲温度で^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを記録した：
−周波数：１２５．７６Ｈｚ、
−スペクトル幅：４０ｋＨｚ、
−試料のマジック角回転速度：１０ｋＨｚ、
−パルスシーケンス：ＳＰＩＮＡＬ６４デカップリング（デカップリングパワー：８０ｋＨｚ）でのＣＰ（交差分極）、
−繰り返し遅延：１０秒、
−獲得時間：３５ミリ秒、
−接触時間：４ミリ秒、
−スキャン数：４０９６。

フーリエ変換前にアポジゼーション機能（「５Ｈｚ線幅拡大」）を収集シグナルに適用する。それによって得たスペクトルをアダマンタンの試料を基準にして照合した（アダマンタンの高周波数ピークは、３８．３８ｐｐｍの化学シフトを有する）。

観察されたピーク（ｐｐｍ±０．２ｐｐｍで表示）を次の表で照合した：

実施例７：医薬組成物
１００ｍｇのアベキシノスタットを各々が含有する１０００個の錠剤の調製のための処方（塩基当量で表示）：

実施例８：吸湿性
重量水蒸気吸着（ＤＶＳ−動的蒸気収着）を用いて、アベキシノスタット・トシル酸塩の形態Ｉの吸湿性を評価した。正確に計量した５から１０ｍｇの薬物の試料を、湿度制御下、２５℃で動作するＤＶＳ試料皿に入れた。０パーセントＲＨ（相対湿度）下で乾燥させながら、かつ０〜９０パーセントＲＨ範囲内で毎時１０パーセントの速度で相対湿度を増加および減少させるその後の２サイクルの線形変動サイクル中に、質量変動を記録した。相対湿度が０または９０パーセントＲＨのいずれかに達したら、１５時間の制限時間内で質量変動が毎分０．００２パーセント未満になるまで相対湿度を一定に維持した。

２５℃で０％から９０％の間に含まれる相対湿度に試料を曝露したとき、０．５％未満の重量の増加がＤＶＳ分析により検出された。

Claims (19)

1. Ｎ−ヒドロキシ−４−｛２−［３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチル）ベンゾフラン−２−イルカルボニルアミノ］エトキシ｝ベンズアミド・トシル酸塩、またはその溶媒和物。
2. 式（Ｉ）のアベキシノスタット（abexinostate）：
   

   

   のトシル酸塩。
3. 式（ＩＩ）：
   

   

   の、請求項１または２に記載の塩。
4. 次の回折線（ブラッグ角２θ、度±０．２°で表示）：６．５０；９．９４；１１．３５；１２．３３；１４．０８；１８．９５；２１．０８；２７．０５を提示する粉末回折パターンＸを有することを特徴とする、請求項１から３の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ。
5. 次の回折線（ブラッグ角２θ、度±０．２°で表示）：６．５０；９．９４；１１．３５；１２．３３；１４．０８；１８．９５；１９．６１；１９．９６；２１．０８；２２．８２：２３．６１；２７．０５を有する粉末回折パターンＸを有することを特徴とする、請求項４に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ。
6. Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を備えたＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｒｏ ＭＰＤ回折計を使用して測定される、および線位置（ブラッグ角２θ、度±０．２°で表示）および面間隔（Åで表示）で表示される、以下の粉末回折パターンＸを有すること特徴とする、請求項４または５に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ：
   

   
7. 位置１６０８ｃｍ^−１に有意なピークを有するラマンスペクトルを有することを特徴とする、請求項４から６の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ。
8. 位置９４０ｃｍ^−１、１０８８ｃｍ^−１、１１３２ｃｍ^−１、１２４２ｃｍ^−１、１３６０ｃｍ^−１、１６０８ｃｍ^−１に有意なピークを有するラマンスペクトルを有することを特徴とする、請求項１から７の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ。
9. 次のピーク（ｐｐｍ±０．２ｐｐｍで表示）：１２１．２ｐｐｍ、１２２．１ｐｐｍ、１２３．５ｐｐｍ、１２６．０ｐｐｍ、１２６．８ｐｐｍ、１２８．２ｐｐｍ、１２８．９ｐｐｍ、１４３．４ｐｐｍ、１４４．６ｐｐｍ、１５３．８ｐｐｍ、１５９ｐｐｍ、１６１．２ｐｐｍおよび１６２．１ｐｐｍを有する固体^１３Ｃ ＣＰ／ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルを有することを特徴とする、請求項１から３の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ。
10. 以下のピーク（ｐｐｍ±０．２ｐｐｍで表示）を有する固体^１３Ｃ ＣＰ／ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルを有することを特徴とする、請求項９記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉ：
    

    
11. １つ以上の医薬的に許容される賦形剤に付随して請求項１から３の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩を活性成分として含有する医薬組成物。
12. １つ以上の医薬的に許容される賦形剤に付随して請求項４から１０の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを活性成分として含有する医薬組成物。
13. 癌の処置に使用するための、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
14. 前記癌が、癌腫、腫瘍、新生物、リンパ腫、黒色腫、神経膠腫、肉腫または芽種である、請求項１１から１３の一項に記載の医薬組成物。
15. 前記アベキシノスタットが極性媒体中、パラ−トルエンスルホン酸の存在下で結晶化される、請求項４から１０の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの調製方法。
16. 前記極性媒体が、水、アルコール、ケトンおよびエステルから選択される１つ以上の溶媒から成る、請求項１５に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの調製方法。
17. 前記極性媒体が、２成分混合物であり、その１成分が水である、請求項１６に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの調製方法。
18. 前記極性媒体が、アセトン／水、エタノール／水、イソプロパノール／水、およびメチルエチルケトン／水から選択される２成分混合物である、請求項１７に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの調製方法。
19. 結晶化が、前記アベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉを非常に少量使用して種晶添加されるものである、請求項１５から１８の一項に記載のアベキシノスタット・トシル酸塩の結晶形態Ｉの調製方法。