JP5118849B2 - 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 - Google Patents
微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5118849B2 JP5118849B2 JP2006532327A JP2006532327A JP5118849B2 JP 5118849 B2 JP5118849 B2 JP 5118849B2 JP 2006532327 A JP2006532327 A JP 2006532327A JP 2006532327 A JP2006532327 A JP 2006532327A JP 5118849 B2 JP5118849 B2 JP 5118849B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- cartridge
- lysate
- region
- optical
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 239000012569 microbial contaminant Substances 0.000 title claims abstract description 61
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 39
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 63
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 8
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims abstract description 122
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims abstract description 122
- 210000003677 hemocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 229940000351 hemocyte Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 146
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 82
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 80
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 claims description 71
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 claims description 60
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 53
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 51
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 48
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 20
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 claims description 16
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims description 16
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 claims description 16
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 11
- 238000004891 communication Methods 0.000 claims description 8
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 7
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 114
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 abstract description 53
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 45
- 238000003367 kinetic assay Methods 0.000 abstract description 22
- 238000002820 assay format Methods 0.000 abstract description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 153
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 43
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 42
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 33
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 31
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 30
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 28
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 15
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 13
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 13
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 11
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 10
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 9
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 9
- 238000007817 turbidimetric assay Methods 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 8
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 7
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 7
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 6
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 6
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 6
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 6
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 6
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 6
- LOHQECMUTAPWAC-UHFFFAOYSA-N coagulin Natural products C1C(C)=C(CO)C(=O)OC1C1(C)C(C2(C)CCC3C4(C(=O)CC=CC4=CCC43)C)(O)CCC24O1 LOHQECMUTAPWAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 6
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 6
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 6
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001529572 Chaceon affinis Species 0.000 description 5
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 5
- 241000239218 Limulus Species 0.000 description 5
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 5
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 5
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 210000000087 hemolymph Anatomy 0.000 description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 5
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000239216 Carcinoscorpius Species 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- 238000011050 LAL assay Methods 0.000 description 4
- 241000239222 Tachypleus Species 0.000 description 4
- 108010055222 clotting enzyme Proteins 0.000 description 4
- 108010045487 coagulogen Proteins 0.000 description 4
- 239000012525 endotoxin sample Substances 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 4
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 3
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 3
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 3
- 241000239220 Limulus polyphemus Species 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 3
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 3
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 3
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 239000003805 procoagulant Substances 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SFKZPTYRENGBTJ-UHFFFAOYSA-N 4-methoxynaphthalen-2-amine Chemical compound C1=CC=C2C(OC)=CC(N)=CC2=C1 SFKZPTYRENGBTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JBNOVHJXQSHGRL-UHFFFAOYSA-N 7-amino-4-(trifluoromethyl)coumarin Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(=O)OC2=CC(N)=CC=C21 JBNOVHJXQSHGRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 2
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 2
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 241000239221 Tachypleus gigas Species 0.000 description 2
- 241000239224 Tachypleus tridentatus Species 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- GLNDAGDHSLMOKX-UHFFFAOYSA-N coumarin 120 Chemical compound C1=C(N)C=CC2=C1OC(=O)C=C2C GLNDAGDHSLMOKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 2
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](OC=2C=C3OC(=O)C=C(C)C3=CC=2)O[C@@H]1CO UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000002683 reaction inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- JMXPKRIWGQXFFC-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-(dinitroamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound [O-][N+](=O)N([N+]([O-])=O)[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 JMXPKRIWGQXFFC-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008001 CAPS buffer Substances 0.000 description 1
- 241000239219 Carcinoscorpius rotundicauda Species 0.000 description 1
- 108010065152 Coagulase Proteins 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 description 1
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 description 1
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000239205 Merostomata Species 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 activated Proteins 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- WGYFACNYUJGZQO-UHFFFAOYSA-N aminomethanetriol Chemical compound NC(O)(O)O WGYFACNYUJGZQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004423 amoeboid cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 238000007836 assay cartridge Methods 0.000 description 1
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 238000007820 coagulation assay Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003366 endpoint assay Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000004299 exfoliation Methods 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical group 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000017559 hemolymph coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 239000008191 permeabilizing agent Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000003466 welding Methods 0.000 description 1
- 150000008498 β-D-glucosides Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/579—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving limulus lysate
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
- B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
- B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
- B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
- B01L2200/16—Reagents, handling or storing thereof
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
- B01L2300/0816—Cards, e.g. flat sample carriers usually with flow in two horizontal directions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
- B01L2300/0867—Multiple inlets and one sample wells, e.g. mixing, dilution
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2400/00—Moving or stopping fluids
- B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
- B01L2400/0475—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure
- B01L2400/0487—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure fluid pressure, pneumatics
- B01L2400/049—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure fluid pressure, pneumatics vacuum
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2400/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates
- G01N2400/10—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- G01N2400/12—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar
- G01N2400/24—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar beta-D-Glucans, i.e. having beta 1,n (n=3,4,6) linkages between saccharide units, e.g. xanthan
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2400/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates
- G01N2400/10—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- G01N2400/50—Lipopolysaccharides; LPS
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Description
本出願は、2003年3月17日出願の米国特許出願第60/455,632号(その内容は、本明細書に参考として援用される)の優先権およびその利益を主張する。
本発明は、一般に、サンプル中の微生物夾雑物を検出および/または定量するための方法および組成物に関する。より具体的には、本発明は、サンプル中の微生物汚染を検出および/定量するために血球溶解物を使用する方法および組成物に関する。
例えば、グラム陽性細菌、グラム陰性細菌、酵母、真菌、および糸状菌による微生物汚染は、重篤な疾患を引き起こし得、いくつかの場合では、ヒトに死すらも引き起こす。特定の産業(例えば、製薬産業、医療デバイス産業、および食品産業)における製造業者は、厳しい基準を満たして、彼らの製品があるレベルの微生物夾雑物を含まない(さもなければ、レシピエントの健康状態を損なう)ことを確認しなければならない。これらの産業は、特定の基準(例えば、米国食品医薬品局(USFDA)または環境保護局によって課される基準)を満たすために、このような微生物夾雑物の存在に関して、頻度が高く、正確で、かつ感度の高い試験を要する。例えば、USFDAは、医薬品および侵襲性医療デバイスの特定の製造業者に、彼らの製品が、検出可能なレベルのグラム陰性細菌のエンドトキシンを含まないことを確証するように求めている。
本発明は、一部、血球溶解物ベースのアッセイにおいて使用するための固定化血球溶解物を含む光学カートリッジを作製および使用することが可能であるという発見に一部基づく。これらのカートリッジは、単独で、または光学検出器(例えば、携帯型光学検出器)と組み合わせて使用されて、現場でのサンプルのアッセイを可能にし、それにより、現場から離れた試験施設へサンプルを送る必要性が回避される。従って、そのカートリッジは、使用地点試験系(point−of−use test system)において使用され得る。さらに、本発明は、サンプル中の目的の微生物夾雑物の存在および/または量を決定するための迅速で、感度の高い、多工程動的アッセイの発見に一部基づく。この型のアッセイは、カートリッジで、または任意の他の望ましいアッセイ形式において実施され得る。さらに、本発明は、グルカン特異的血球溶解物の発見、およびこのような溶解物を作製する方法に一部基づく。そのグルカン特異的溶解物は、このようなカートリッジに組み込まれ得、そして/または多工程動的アッセイにおいて使用され得る。
本発明は、血球溶解物ベースのアッセイにおいて使用するための、固定化された血球溶解物を含む光学カートリッジを提供する。これらのカートリッジは、単独で使用されてもよいし、光学検出器(例えば、携帯型光学検出器)一緒に使用されてもよい。さらに、本発明は、サンプル中の微生物夾雑物の存在および/または量を決定するにあたって有用な、迅速で、感度の高い、広い範囲の、多工程アッセイを提供する。そのカートリッジおよび方法は、迅速な試験結果を提供するために、別個に使用され得るが、それらは、現場で使用され得るシステムを提供するために、一緒に組み合わせられる場合に特に有効である。このことにより、微生物汚染のより迅速な排除および/または処置が促進される。さらに、本発明は、サンプル中のグルカンの存在および/または量を検出するためのファクターC特異的溶解物を提供する。この溶解物は、従って、サンプル中の酵母または糸状菌の夾雑物の存在および/または量を決定するために使用され得る。
本発明のカートリッジは、1種以上の血球溶解物とともに系統立てられてもよく、サンプル中の微生物夾雑物の存在および/または量を検出するために種々のアッセイにおいて使用され得ることが予測される。微生物夾雑物の検出および/または定量のための多くの血球溶解物ベースのアッセイは、例えば、図2に例示されるように、本発明のカートリッジにおいて行われ得る。そのカートリッジは、それ自体または目視による試験結果に対して使用されてもよく、光学検出器(例えば、米国特許Des第390,661号に示され、記載されるような携帯型光学検出器)と組み合わせて使用されてもよい。
そのカートリッジを調製するために使用される全ての試薬および材料は、好ましくは、微生物夾雑物がなく、そのために、そのカートリッジは、最終的に、試験するために使用される。
そのカートリッジは、流体(例えば、哺乳動物に、局所的または全身に(例えば、非経口的に)投与されるべき流体)、または感染について試験される体液(例えば、血液、リンパ液、尿、血清、血漿、腹水、肺吸引液などが挙げられる)における微生物汚染のレベルを決定するために使用され得る。さらに、そのカートリッジは、上水道(例えば、飲料水の供給)における微生物汚染のレベルを決定するために使用され得る。さらに、そのカートリッジは、食品、医薬品または医療デバイスにおける微生物汚染のレベルを決定するために使用され得る。
種々の血球溶解物アッセイが、本発明のカートリッジにおいて使用され得ることが予測される(例えば、エンドポイント濁度測定アッセイ、動的濁度測定アッセイ、エンドポイント色素形成アッセイ、および一工程動的アッセイ)。さらに、本発明のカートリッジは、本明細書で記載されるように、多工程動的アッセイとともに使用され得る。
エンドポイント濁度測定アッセイは、Prior(1990)前出,pp.28−34に記載される。簡潔には、そのエンドポイント濁度測定アッセイは、以下の工程を包含する:(i)血球溶解物を分析されるべきサンプルで可溶化する工程、(ii)得られた混合物を、約0〜約40℃、好ましくは約25℃〜約40℃の温度で、所定の時間にわたってインキュベートする工程、および(iii)存在する場合、従来の凝固測定器(coagulometer)、比濁計(nepherometer)、または分光光度計を使用して、凝固の結果としての濁度の増加を測定する工程。
動的濁度測定アッセイは、Prior(1990)前出,pp.28−34に記載される。簡潔には、その動的濁度測定アッセイは、以下の工程を包含する:(i)血球溶解物を分析されるべきサンプルで可溶化する工程、(ii)その得られた混合物を、約0〜約40℃、好ましくは約25〜約40℃の温度で、所定の時間範囲にわたってインキュベートする工程、および(iii)従来の凝固測定器、比濁計、または分光光度計を使用して、所定の値または濁度の変化の比率のいずれかに達するために、凝固によって生じた濁度変化に要した時間を測定する工程。
そのエンドポイント色素形成アッセイは、Prior(1990)前出,pp.28−34および米国特許第4,301,245号および同第4,717,658号に記載される。簡潔には、そのエンドポイント色素形成アッセイは、以下の工程を包含する:(i)血球溶解調製物を分析されるべきサンプルで可溶化する工程、(ii)その得られた混合物を、約0〜約40℃、好ましくは約25〜約40℃の温度で、所定の時間範囲にわたってインキュベートする工程、(iii)色素形成性基質を含む試験デバイスと、そのインキュベートされたそのサンプル−溶解物混合物とを接触させる工程、(iv)反応インヒビターを添加する工程、および(v)プロテアーゼ活性によってその合成基質から遊離した物質を、例えば、比色変化によって測定する工程。
一工程動的アッセイ(例えば、一工程色素形成アッセイ)は、米国特許第5,310,657号に記載される。簡潔には、その動的色素形成アッセイは、以下の工程を包含する:(i)血球溶解物を、分析されるべきサンプルおよび色素形成性基質で同時に可溶化する工程、(ii)その得られた混合物を、約0〜約40℃、好ましくは約25〜約40℃の温度で、所定の時間範囲にわたってインキュベートする工程、および(iii)従来の分光光度計を使用して、所定の値または比色読み取り値の変化の比率のいずれかに達するために、比色変化に要した時間を測定する工程。
より詳細に議論されるように、そのカートリッジはまた、多工程動的アッセイを行うために使用され得る。その多工程動的アッセイに関連する種々の工程は、図7に模式的に示される。そのアッセイは、その試験されるべきサンプルとある容量の血球溶解物とを合わせて、サンプル−溶解物混合物を生成することによって、開始される。次いで、その混合物は、所定の期間にわたってインキュベートされる。そのサンプル−溶解物混合物は、次いで、基質(例えば、色素形成性基質)と接触させて、サンプル−溶解物−基質混合物を生成する。その後、光学特性の所定の変化(例えば、吸光度値における特定の変化または透過率値における特定の変化)が生じる時間が測定される。微生物夾雑物の存在および/または量は、次いで、予め較正された標準曲線(例えば、光学特性(吸光度または透過率)における所定の変化を起こす時間をY軸上に、対してエンドトキシン濃度をX軸上に示す標準曲線)に対して、その測定された時間を内挿することによって、決定され得る。
図2に示される例示的カートリッジを、以下のように調製した。図5Aを参照すると、LALおよび色素形成性基質を、それぞれ、Hamilton Microlab 540Bディスペンサー(Hamilton Company,Reno,NV)を用いて、カートリッジ1の底部半体2のコンジット8’の、それぞれ領域14’および16’に付与した。簡潔には、1% マンニトール(Osmitrol,Baxter,Deerfield,IL)および0.1% デキストラン(MW10〜100K,Sigma−Aldrich,St.Louis,MO)を含む10mg/mL Endosafe LAL(Charles River Endosafe,Charleston,SC)、4〜5.0μLを、領域14’に付与した。1% ポリビニルアルコール(PVA)(MW 7K〜30K,Sigma−Aldrich,St.Louis,MO)を含む(1.3 mg/mL)色素形成性基質Ile−Glu−Ala−Arg−pNA Chromogenix S−2423(Instrumentation Laboratories,Milan,Italy)、4〜5.0μLを、領域16’に付与した。そのカートリッジ1の底部半体2を、Lunaire Environmental Steady State&Stability Test Chamber(Lunaire
Environmental,Williamsport,PA)中で、Puregas HF200 Heatless Dryer(MTI Puregas,Denver,CO)で1時間、25℃±2℃の制御された温度および5%±5%の湿度下で乾燥させた。温度および湿度を、Watlow Series 96 1/16 DIN Temperature Controller(Watlow Electric Manufacturing Company,St.Louis,MO)によって制御した。
Heat Sealer(Packaging Aids Corporation,San Rafael,CA)でシールした。
この実施例は、本発明のカートリッジが、エンドポイント色素形成アッセイ、動的色素形成アッセイおよび多工程色素形成アッセイによって、微生物夾雑物の量を測定するために使用され得ることを実証する。
カートリッジを、スパイクをコンジットに添加しなかったことを除いて、本質的に実施例1に記載されるように調製した。1.0EU/mL、0.5EU/mL、0.25EU/mL、および0.125EU/mLのエンドトキシン標準物質のサンプルを調製し、各々の25μLを、4つのカートリッジ流体入り口ポートのうちの1つにピペットで入れた。その携帯型光学検出器を、試験の所要時間にわたって、37℃の温度を維持した。その携帯型光学検出器を、一連の工程を行うためにプログラムした。その携帯型光学検出器は、まず、各エンドトキシンサンプルを、乾燥LALを含むコンジットの領域に引っ張り、混合し、そのサンプルをLALとともに120秒(T=60〜T=180)にわたってインキュベートした。その携帯型光学検出器は、次いで、そのエンドトキシンサンプル−LAL混合物を、乾燥色素形成性基質を含むコンジットにおける領域に引っ張り、そのサンプル−LAL混合物をその基質と5秒にわたって混合した。その携帯型光学検出器は、次いで、そのサンプル−LAL−基質混合物をその光学セルに引っ張った。その携帯型光学検出器は、次いで、4つのチャネルの各々からの吸光度データを記録した。約10分(約780秒)後、その試験を、最後の吸光度(光学密度)値を読み取ることによって終了した。各エンドトキシンサンプルについての吸光度値曲線を、図10Aに示す。780秒で生成された吸光度値を記録し、エンドトキシン濃度の関数としてプロットして(図10B)、標準曲線を得た。この標準曲線は、そのサンプルを、標準物質と同じ様式で処理する場合に、目的のサンプル中のエンドトキシンの濃度を決定するために使用されうる。
その色素形成性基質を、LALと同じ領域に付与し、スパイクを、そのコンジットに添加しなかったことを除いて、カートリッジを、本質的に実施例1に記載されるように調製した。エンドトキシン標準物質(5.0EU/mL、0.5EU/mL、および0.05EU/mL)のサンプルを調製し、そして25μLの5EU/mL標準物質を、そのカートリッジの2つの流体入り口ポートにピペットで入れた。その携帯型光学検出器を、試験の所要時間にわたって37℃で維持した。その携帯型光学検出器を、一連の工程を行うためにプログラムした。その携帯型光学検出器は、まず、各エンドトキシンサンプルを、乾燥させたLALおよび色素形成性基質の両方を含むコンジットの領域に引っ張り、混合し、そのサンプルと、LALとを30秒間にわたってインキュベートした。その携帯型光学検出器は、サンプル−LAL−基質混合物を光学セルに引っ張った。その携帯型光学検出器は、両方のサンプルについての吸光度を記録し始めた。そのアッセイを0.5EU/mLおよび0.05EU/mL標準物質について報告した。
スパイクをそのコンジットに添加しなかったことを除いて、カートリッジを、本質的に実施例1に記載されるように調製した。1.0EU/mL、0.5EU/mL、0.25EU/mL、および0.125EU/mLのエンドトキシン標準物質のサンプルを調製し、各々の25μLを、4つのカートリッジ流体入り口ポートの1つにピペットで入れた。その携帯型光学検出器は、その試験の所要時間にわたって、37℃の温度を維持した。その携帯型検出器を、一連の試験を行うためにプログラムした。その携帯型光学検出器は、まず、各エンドトキシンサンプルを、乾燥LALを含むコンジットの領域に引っ張り、混合し、そのサンプルを、LALとともに240秒にわたってインキュベートした。その携帯型光学検出器は、次いで、そのエンドトキシンサンプル−LAL混合物を、乾燥色素形成性基質を含むコンジットにおける領域に引っ張り、そのサンプル−LAL混合物を、その基質と20秒にわたって混合した。その携帯型光学検出器は、次いで、そのサンプル−LAL−基質混合物を、その光学セルに引っ張った。その携帯型光学検出器は、その4つのチャネルの各々からの吸光度データを記録し始めた。各エンドトキシン標準物質−LAL−基質混合物の光学密度が0.05の光学密度に達する時間を、各標準物質についての開始時間として記録した(表1を参照のこと)。そのエンドトキシン濃度の対数(X軸)
対 開始時間の対数(Y軸)のプロットは、動的標準曲線を提供する(図12)。この標準曲線は、サンプルを標準物質と同じ様式で処理する場合、そのサンプル中のエンドトキシンの濃度を決定するために使用されうる。
この実施例は、微生物夾雑物(この実施例においては細菌エンドトキシン)の量が、エンドポイント色素形成アッセイ、一工程動的アッセイおよび多工程アッセイによって測定されうるように、マルチウェルマイクロタイタープレートが製造されうることを示す。
一工程動的色素形成アッセイを、以下のように行った。簡潔には、50μLのコントロールの目的の微生物夾雑物(例えば、5EU/mL、0.5EU/mL、または0.05EU/mLのEndosafe Control Standard Endotoxin(CSE),Charles River Endosafe,Charleston,SC)を、96ウェルの1以上のウェルに添加した。50μLの5mg/mL Endosafe LAL(Charles River Endosafe,Charleston,SC)および5μLの1.3mg/mL Chromogenix S−2423 色素形成性基質(Instrumentation Laboratories,Milan,Italy)を、各ウェルに添加し、37℃で32分間インキュベートした。各ウェル中の混合物の光学密度を、分光光度計(例えば、Sunrise micro
plate reader(Tecan,Research Triangle Park,NC)によりモニターした。各標準物質が0.1吸光度単位変化するのにかかった時間を、決定した(「開始時間」)。結果を以下の表2にまとめる。そのエンドトキシン濃度の対数(X軸) 対 開始時間の対数(Y軸)のプロットは、動的標準曲線を提供する(図13)。この標準曲線は、目的のサンプルを標準物質と同じ様式で処理する場合、そのサンプル中のエンドトキシンの濃度を決定するために使用されうる。
実施例3(I)における試薬を使用して、エンドポイント色素形成アッセイを、以下のように行った。簡潔には、例えば、5EU/mL、0.5EU/mL、または0.05EU/mLの濃度のコントロールの目的の微生物夾雑物(例えば、エンドトキシン)50μLを、96ウェルプレートの1以上のウェルに添加した。50μLの血球溶解物(5mg/mL)を、その標準物質を含む1以上のウェルに添加し、37℃で5分間にわたってインキュベートした。5μLの色素形成性基質(1.3mg/mL)を、1以上のウェルに添加し、37℃で5分間インキュベートした。次いで、その反応系を、100μLの50%酢酸を各ウェルに添加することによって停止させた。各ウェルのその混合物の光学密度を、分光光度計(例えば、Sunrise micro plate reader(Tecan,Research Triangle Park,NC))によって、405nmで測定した。780秒での各サンプルの吸光度(表3に示される)を、記録した。各サンプルの吸光度(Y軸)を、エンドトキシン濃度(X軸)に対してプロットして、標準曲線(図14に示される)を提供した。この標準曲線は、目的のサンプルをその標準物質と同じ様式で処理する場合、そのサンプル中のエンドトキシンの濃度を測定するために使用されうる。
実施例3(I)と同じ試薬を使用して、多工程動的色素形成アッセイを以下のように行った。簡潔には、5EU/mL、0.5EU/mL、または0.05EU/mLの濃度のコントロールの目的の微生物夾雑物(例えば、エンドトキシン)50μLを、96ウェルプレートの1以上のウェルに添加した。50μLの血球溶解物(5mg/mL)を1以上のウェルに添加し、37℃で3分間インキュベートした。5μLの色素形成性基質(1.3mg/mL)を、その標準物質を含む1以上のウェルに添加し、37℃で16.5分間インキュベートした。各ウェルのその混合物の光学密度を、分光光度計(例えば、Sunrise micro plate reader(Tecan,Research Triangle Park,NC)によってモニターした。各微生物夾雑物標準物質および/またはサンプルが0.1吸光度単位変化するのにかかった時間を、決定した(「開始時間」)。この結果を、表4にまとめる。そのエンドトキシン濃度の対数(X軸) 対 開始時間の対数(Y軸)のプロットは、動的標準曲線(図15)を提供する。この標準曲線は、目的のサンプルをその標準物質と同じ様式で処理する場合、そのサンプル中のエンドトキシン濃度を測定するために使用されうる。
図1に示されるように、粗製LALは、エンドトキシン(リポ多糖)およびグルカン両方と反応し、その結果、グラム陰性細菌および酵母/糸状菌細胞の両方に由来する細胞壁材料は、凝固カスケードを活性化させる。グラム陰性細菌の場合、凝固は、ファクターCカスケードを通じて媒介される。酵母および糸状菌の場合、凝固は、ファクターGカスケードを通じて媒介される。その2つの夾雑物がサンプル中に存在するか、またはどの割合で各々が混合した夾雑物に含まれうるかを決定するために、以下に記載されるように、LALがグルカンに対して特異的であるような条件下で、LALを生成した。
グルカン特異的LALを、実施例4に記載されるように、アメーバ様細胞を2M NaCl中で溶解することにより調製し、カートリッジベースの多工程動的アッセイ(例えば、実施例2(III)に記載されるもの)で試験した。
カートリッジベースの多工程動的LALアッセイ(例えば、実施例2(III)に記載されているもの)を、蛍光生成基質:Glu−Gly−Arg−AMC(Enzyme Systems Products,Livermore,CA)を用いて行った。そのカートリッジ、そのサンプルと光センサとの間に配置されたロングパスフィルタを備えるように改変し、励起波長(390nm)を有する光をブロックするが、460±25nmの波長の発光は通ることができ、そのセンサによって検出可能であるようにした。
マイクロタイタープレート多工程動的LALアッセイ(例えば、実施例3(III)に記載されているもの)はまた、リガンドの濃度を測定するために使用されうる。簡潔には、目的のリガンドを結合する抗体は、マイクロタイタープレートのウェルの表面に固定化される。次いで、その抗体のリガンド結合部位は、リポ多糖に連結されたリガンドを含む複合体で予め負荷される。そのリガンドを含むサンプルが、その固定化された抗体に曝される場合、そのリポ多糖標識リガンドは、LALとの反応によって、置き換えられ、定量される。この実施例において、検出されるリガンドは、フルオレセインであった。抗フルオレセイン抗体を、ウェルの表面に固定化し、フルオレセイン標識リポ多糖で予め負荷する。フルオレセイン標識抗体を含むサンプルを、その固定化抗体に曝すと、そのフルオレセイン−リポ多糖結合体は、その固定化抗体から遊離し、LALとの反応性によって測定される。
Trisで1/50、1/150、および1/450に希釈した。0.1M Trisをコントロールとして使用した。75μlのフルオレセイン標識ヤギ抗ニワトリ抗体を、1ウェルあたりに添加し、37℃で30分間インキュベートした。50μlを各ウェルから取り出し、きれいな96ウェルプレート(Falcon,353072,Becton
Dickenson,Franklin Lakes,NJ)に移した。50μlのEndochrome K(Charles River Endosafe)(これは、LAL基質およびLAL溶解物の1:1混合物である)を、各ウェルに添加した。そのプレートを、405nmで、37℃で60〜90分で、一定の時間間隔で(例えば、動的に)読み取った(最小OD:0、Max最大:0.8、開始OD:0.1)。
本発明は、その趣旨および本質的な特徴から逸脱することなく、他の具体的な形態において具現化され得る。前述の実施形態は、従って、全ての点において、本明細書に記載される発明を限定するのではなく、例示であるとみなされるべきである。よって、本発明の範囲は、前述の説明によって示されるのではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の意味および均等の範囲内に入る全ての変化は、その範囲内に包含されると解釈される。
(参考としての援用)
本明細書中で引用されるすべての刊行物および特許文献は、あたかも個々の刊行物および特許文献のそれぞれの全体の内容が、本明細書中に援用される場合と同程度で、それらの全体がすべての目的のために本明細書中に参考として援用される。
Claims (20)
- サンプル中の微生物夾雑物の存在または量を決定するためのカートリッジであって、該カートリッジは、以下:
(i)流体入り口ポート、光学セル、および該流体入り口ポートと該光学セルとの間に流体流動連絡を提供するための流体接触内側表面を有するコンジットを規定するハウジング;ならびに
(ii)乾燥された血球溶解物であって、該コンジットの該流体接触内側表面の領域に配置され、その結果、サンプルが該流体入り口ポートに付与される場合に、該サンプルが該領域を横断し、該光学セルへ移動する間に該血球溶解物を可溶化する、血球溶解物、
を備え、該微生物夾雑物が細菌エンドトキシンまたは(1→3)−β−Dグルカンである、カートリッジ。 - 前記流体接触表面の第2の領域に配置された色素形成性基質をさらに含む、請求項1に記載のカートリッジ。
- 前記第2の領域は、前記第1の領域の下流に存在する、請求項2に記載のカートリッジ。
- 前記コンジットの前記流体接触表面に位置した前記微生物夾雑物を示す、所定量の因子をさらに含む、請求項1に記載のカートリッジ。
- 前記因子は、前記第1の領域に配置されている、請求項4に記載のカートリッジ。
- 前記因子は、細菌エンドトキシンまたは(1→3)−β−Dグルカンである、請求項4に記載のカートリッジ。
- サンプル中の微生物夾雑物の存在または量を決定するためのカートリッジであって、該カートリッジは、以下:
(i)ハウジングであって:
第1の流体入り口ポート、第1の光学セル、および該第1の流体入り口ポートと該第1の光学セルとの間に流体流動連絡を提供するための流体接触内側表面を有する第1のコンジット、
第2の流体入り口ポート、第2の光学セル、および該第2の流体入り口ポートと該第2の光学セルとの間に流体流動連絡を提供するための流体接触内側表面を有する第2のコンジット、
を規定するハウジング;ならびに
(ii)第1の血球溶解物であって、該溶解物は、該第1のコンジットの該流体接触内側表面の第1の領域に配置され、そして該流体接触内側表面の第1の領域上で乾燥され、その結果、サンプルが該第1の流体入り口ポートに付与される場合に、該サンプルが該領域を横断し、該第1の光学セルへ移動する間に該第1の血球溶解物を可溶化する、第1の血球溶解物;ならびに
(iii)第2の血球溶解物であって、該溶解物は、該第2のコンジットの該流体接触内側表面の第1の領域に配置され、そして該流体接触内側表面の第1の領域上で乾燥され、その結果、サンプルが該第2の流体入り口ポートに付与される場合に、該サンプルが該領域を横断し、該第2の光学セルへ移動する間に該第2の血球溶解物を可溶化する、第2の血球溶解物、
を備え、該微生物夾雑物が細菌エンドトキシンまたは(1→3)−β−Dグルカンである、カートリッジ。 - 前記第1のコンジットの前記流体接触表面の第2の領域に配置された色素形成性基質をさらに含む、請求項7に記載のカートリッジ。
- 前記第2の領域は、前記第1の領域の下流に存在する、請求項8に記載のカートリッジ。
- 前記第2のコンジットの前記流体接触表面の第2の領域に配置される色素形成性基質をさらに含む、請求項8に記載のカートリッジ。
- 前記第2の領域は、前記第1の領域の下流に存在する、請求項10に記載のカートリッジ。
- 前記第1のコンジットの前記流体接触表面に位置する微生物夾雑物を示す、所定量の因子をさらに含む、請求項7に記載のカートリッジ。
- 前記因子は、前記第1の領域に配置されている、請求項12に記載のカートリッジ。
- 前記因子は、細菌エンドトキシンまたは(1→3)−β−Dグルカンである、請求項12に記載のカートリッジ。
- サンプル中の微生物夾雑物の存在を検出する方法であって、該方法は、以下の工程:
(a)サンプルを、請求項1〜6のいずれか1項に記載のカートリッジのサンプル入り口ポートに導入する工程;
(b)該サンプルを光学セルに移動させる工程;および
(c)該光学セル中の該サンプルの光学特性を測定する工程であって、ここで該光学特性の変化は、該サンプル中の微生物夾雑物の存在を示す、工程、
を包含する、方法。 - 前記光学特性の変化は、所定波長の光の吸光度の上昇である、請求項15に記載の方法。
- 前記光学特性の変化は、所定波長の光の透過率の低下である、請求項15に記載の方法。
- サンプル中の微生物夾雑物の量を決定する方法であって、該方法は、以下の工程:
(a)サンプルを、請求項1〜6のいずれか1項に記載のカートリッジのサンプル入り口ポートに導入する工程;
(b)該サンプルを光学セルに移動させる工程;
(c)該光学セル中の該サンプルの光学特性において所定の変化が生じる時間を測定する工程;ならびに
(d)工程(c)において測定した時間を、所定の標準曲線に対して比較して、該サンプル中の該微生物夾雑物の量を決定する工程、
を包含する、方法。 - 前記光学特性の変化は、所定波長の光の吸光度の上昇である、請求項18に記載の方法。
- 前記光学特性の変化は、所定波長の光の透過率の低下である、請求項18に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US45563203P | 2003-03-17 | 2003-03-17 | |
US60/455,632 | 2003-03-17 | ||
PCT/US2004/008013 WO2005010207A2 (en) | 2003-03-17 | 2004-03-17 | Methods and compositions for the detection of microbial contaminants |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010118755A Division JP5738543B2 (ja) | 2003-03-17 | 2010-05-24 | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007501020A JP2007501020A (ja) | 2007-01-25 |
JP2007501020A5 JP2007501020A5 (ja) | 2010-07-08 |
JP5118849B2 true JP5118849B2 (ja) | 2013-01-16 |
Family
ID=34102595
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006532327A Expired - Lifetime JP5118849B2 (ja) | 2003-03-17 | 2004-03-17 | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
JP2010118755A Expired - Lifetime JP5738543B2 (ja) | 2003-03-17 | 2010-05-24 | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
JP2014040309A Pending JP2014110806A (ja) | 2003-03-17 | 2014-03-03 | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010118755A Expired - Lifetime JP5738543B2 (ja) | 2003-03-17 | 2010-05-24 | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
JP2014040309A Pending JP2014110806A (ja) | 2003-03-17 | 2014-03-03 | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7329538B2 (ja) |
EP (1) | EP1606414B1 (ja) |
JP (3) | JP5118849B2 (ja) |
AT (1) | ATE452986T1 (ja) |
DE (1) | DE602004024769D1 (ja) |
WO (1) | WO2005010207A2 (ja) |
Families Citing this family (48)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE602004024769D1 (de) * | 2003-03-17 | 2010-02-04 | Charles River Lab Inc | Methoden und zusammensetzungen für den nachweis mikrobieller verunreinigungen |
JP4362532B2 (ja) | 2004-04-07 | 2009-11-11 | ウォードロウ パートナーズ エルピー | 生体液を分析する使い捨てチャンバ |
WO2007078268A2 (en) | 2004-12-02 | 2007-07-12 | Charles River Laboratories, Inc. | Methods and compositions for the detection and/or quantification of gram positive bacterial contaminants |
WO2006076617A2 (en) | 2005-01-13 | 2006-07-20 | Charles River Laboratories, Inc. | Method for classifying a microorganism in a biological sample |
US7731901B2 (en) | 2005-10-19 | 2010-06-08 | Abbott Laboratories | Apparatus and method for performing counts within a biologic fluid sample |
ATE539165T1 (de) * | 2007-10-19 | 2012-01-15 | Becton Dickinson Co | Verfahren zum nachweis von beta-lactamase |
US20090286692A1 (en) * | 2008-04-15 | 2009-11-19 | Wainwright Norman R | Cartridge and Method for Sample Analysis |
WO2010047778A1 (en) | 2008-10-20 | 2010-04-29 | Becton Dickinson And Company | Compositions for the detection of intracellular bacterial targets and other intracellular microorganism targets |
CN102448612B (zh) * | 2009-04-13 | 2014-12-03 | 精密公司 | 微流体临床分析器 |
CA2766288C (en) * | 2009-06-26 | 2020-05-05 | Charles River Laboratories, Inc. | Heat-treated limulus amebocyte lysates |
US20130130309A1 (en) * | 2009-09-23 | 2013-05-23 | Abt Molecular Imaging Inc | Radiopharmaceutical Production System and Quality Control System Utilizing High Performance Liquid Chromatography |
JP5709894B2 (ja) * | 2009-12-18 | 2015-04-30 | アボット ポイント オブ ケア インコーポレイテッド | 生物学的液体分析カートリッジ |
MY155541A (en) * | 2010-10-29 | 2015-10-30 | Universiti Malaysia Terengganu | Process for the preparation of amoebocyte lysate from the haemolymph of the horseshoe crab |
EP3351305B1 (en) * | 2010-12-09 | 2021-05-05 | Abbott Point Of Care, Inc. | Apparatus using anti-adsorption agent to facilitate sample mixing and analysis |
JP5620257B2 (ja) * | 2010-12-24 | 2014-11-05 | 積水化学工業株式会社 | 微生物夾雑物検出容器、微生物夾雑物検出システム、並びに、微生物夾雑物の検出方法 |
JP5727218B2 (ja) * | 2010-12-24 | 2015-06-03 | 積水化学工業株式会社 | マイクロ流体デバイス、微生物夾雑物検出システム、並びに、微生物夾雑物の検出方法 |
WO2012092593A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Abbott Point Of Care, Inc. | Biologic fluid analysis cartridge with sample handling portion and analysis chamber portion |
USD667022S1 (en) * | 2011-02-11 | 2012-09-11 | Charles River Laboratories, Inc. | Computer display with a graphical user interface |
JP5964555B2 (ja) * | 2011-05-20 | 2016-08-03 | ローム株式会社 | マイクロチップ、ならびに、それを用いた測定システムおよび測定方法 |
USD668779S1 (en) * | 2011-06-10 | 2012-10-09 | Mbio Diagnostics, Inc. | Diagnostic cartridge |
EP2748618A1 (en) | 2011-08-24 | 2014-07-02 | Abbott Point of Care Inc. | Biologic fluid sample analysis cartridge |
USD668350S1 (en) * | 2012-01-30 | 2012-10-02 | Mbio Diagnostics, Inc. | Diagnostic cartridge |
US8937287B2 (en) | 2012-04-19 | 2015-01-20 | Abt Molecular Imaging, Inc. | Self-referencing radiation detector for use with a radiopharmaceutical quality control testing system |
US9075042B2 (en) | 2012-05-15 | 2015-07-07 | Wellstat Diagnostics, Llc | Diagnostic systems and cartridges |
US9625465B2 (en) | 2012-05-15 | 2017-04-18 | Defined Diagnostics, Llc | Clinical diagnostic systems |
US9213043B2 (en) | 2012-05-15 | 2015-12-15 | Wellstat Diagnostics, Llc | Clinical diagnostic system including instrument and cartridge |
US11517000B2 (en) * | 2012-08-14 | 2022-12-06 | The Chugoku Electric Power Co., Inc. | Method of stopping larva from swimming or crawling |
CN104704369B (zh) | 2012-10-08 | 2018-05-25 | 通用电气公司 | 用于检测低水平的lal反应物质的灵敏快速方法 |
GB201223079D0 (en) * | 2012-12-20 | 2013-02-06 | Sepsis Ltd | Point of care sepsis assay device and method |
US10309947B2 (en) | 2013-02-27 | 2019-06-04 | Trace-Ability, Inc. | System and method for radiosynthesis, quality control and dose dispensing |
CN103235116B (zh) * | 2013-04-13 | 2015-06-03 | 福州大学 | 一种抗体标记信号或核酸探针标记信号放大的方法 |
GB201312635D0 (en) * | 2013-07-15 | 2013-08-28 | Univ Plymouth | Water testing |
JP2015021906A (ja) * | 2013-07-22 | 2015-02-02 | 東亜ディーケーケー株式会社 | 測定方法、測定用のカートリッジ及び測定装置 |
US11002717B2 (en) | 2014-02-26 | 2021-05-11 | Trace-Ability, Inc. | Systems and methods for characterizing radioactive analytes |
US10895563B2 (en) | 2014-02-26 | 2021-01-19 | Trace-Ability, Inc. | Palette-based systems for analyte characterization |
JP6215967B2 (ja) | 2014-03-24 | 2017-10-18 | 中国電力株式会社 | 光照射によって翼形類およびフジツボ類を殺す方法 |
US11140893B2 (en) | 2014-03-24 | 2021-10-12 | The Chugoku Electric Power Co., Inc. | Method for stopping swimming or crawling of adhesion-stage larvae |
EP3180978B1 (en) | 2014-12-08 | 2020-04-29 | The Chugoku Electric Power Co., Inc. | Method for restraining adhesion of barnacles |
US11134671B2 (en) | 2015-03-27 | 2021-10-05 | The Chugoku Electric Power Co., Inc. | Method for preventing settlement of sessile organisms |
USD812766S1 (en) * | 2016-07-12 | 2018-03-13 | EMULATE, Inc. | Microfluidic chip for use with a fluid perfusion module |
USD816861S1 (en) * | 2016-09-07 | 2018-05-01 | EMULATE, Inc. | Transparent microfluidic chip without pressure features for use with a fluid perfusion module |
SG11201906639QA (en) | 2017-01-27 | 2019-08-27 | Lonza Ag | Dynamically controlling an automated system |
JP2020526739A (ja) * | 2017-06-28 | 2020-08-31 | ロンザ ウォーカーズヴィル,インコーポレーテッド | エンドトキシン検出のためのカートリッジ |
US11892397B2 (en) * | 2017-10-17 | 2024-02-06 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Endotoxin testing assay and method of same |
CN109613250A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-04-12 | 中国大冢制药有限公司 | 焦磷酸柠檬酸铁原料细菌内毒素的检查方法 |
WO2020185646A1 (en) | 2019-03-08 | 2020-09-17 | Bl Technologies, Inc. | Method and system for visualization of endotoxins in a fluid sample |
US20220323952A1 (en) * | 2019-08-21 | 2022-10-13 | Lonza Walkersville, Inc. | Cartridge with mixing zone for endotoxin detection |
JP7397343B2 (ja) * | 2021-06-02 | 2023-12-13 | 東亜ディーケーケー株式会社 | エンドトキシンの測定方法 |
Family Cites Families (80)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3915805A (en) | 1970-05-25 | 1975-10-28 | Univ Johns Hopkins | Quantitative detection of endotoxin in biological fluids |
US3954663A (en) | 1972-12-18 | 1976-05-04 | Teikoku Horinine Mfg. Co. Ltd. | Process for the preparation of Limulina lysate |
US3944391A (en) | 1974-12-27 | 1976-03-16 | Preventive Systems, Inc. | In vitro process for detecting endotoxin in a biological fluid |
US4038029A (en) | 1976-01-20 | 1977-07-26 | Worthington Biochemical Corporation | Limulus lysate turbidity test for pyrogens |
US4038147A (en) | 1976-06-15 | 1977-07-26 | Becton, Dickinson And Company | Method for detecting endotoxins |
USD258144S (en) | 1977-11-11 | 1981-02-03 | Farrand Optical Co., Inc. | Optical cuvette insert for use with differential spectrofluorometer and absorption meter |
US4221865A (en) | 1978-10-06 | 1980-09-09 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for determining endotoxin concentration |
US4221866A (en) | 1978-10-06 | 1980-09-09 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for determining endotoxin concentration |
US4245044A (en) | 1979-02-01 | 1981-01-13 | Cutter Laboratories, Inc. | Fat emulsion pyrogenicity test |
US4376819A (en) | 1979-09-14 | 1983-03-15 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Biological extracts and method for making same |
US4279774A (en) | 1979-11-13 | 1981-07-21 | Dynasciences Corporation | Method of removing lipid inhibitors from limulus amebocyte lysate |
IL59383A (en) | 1980-02-14 | 1983-03-31 | Technion Res & Dev Foundation | Micromethod for the determination of endotoxins with limulus amebocyte lysate |
US4273557A (en) | 1980-03-31 | 1981-06-16 | Mallinckrodt, Inc. | Limulus lysate procedure for determining endotoxins |
US4301245A (en) | 1980-05-29 | 1981-11-17 | Dynasciences Corporation | Chromogenic method of detecting endotoxins in blood |
US4322217A (en) | 1980-06-27 | 1982-03-30 | Mallinckrodt, Inc. | Process for preparing Limulus lysate |
SE431228B (sv) | 1981-12-17 | 1984-01-23 | Kenneth Soderhell | Sett att bestemma bakteriella endotoxin medelst profenoloxidashaltigt blodkroppslysat fran kreftdjur eller insekter och reagens herfor |
USD278182S (en) | 1982-04-10 | 1985-03-26 | Olympus Optical Co. Ltd. | Cuvette for a sample of liquid serum or the like |
CA1236396A (en) * | 1983-04-01 | 1988-05-10 | Ryozo Numazawa | Endotoxin-detecting device |
JPS608875U (ja) * | 1983-06-29 | 1985-01-22 | 三菱レイヨン株式会社 | エンドトキシン検出測定用具 |
JPS6193958A (ja) | 1984-10-13 | 1986-05-12 | Daicel Chem Ind Ltd | エンドトキシンの定量法 |
US4606824A (en) | 1984-10-26 | 1986-08-19 | Chaokang Chu | Modified cellulose separation matrix |
US4717658A (en) * | 1985-12-03 | 1988-01-05 | Miles Inc. | Gram negative bacteria screening method with horseshoe crab amebocyte lysate (LAL) |
US4806316A (en) | 1987-03-17 | 1989-02-21 | Becton, Dickinson And Company | Disposable device for use in chemical, immunochemical and microorganism analysis |
DK255887D0 (da) * | 1987-05-20 | 1987-05-20 | Claus Koch | Immunoassay |
JPH0715474B2 (ja) * | 1988-02-27 | 1995-02-22 | 和光純薬工業株式会社 | エンドトキシンの測定法 |
KR0141685B1 (ko) * | 1988-09-01 | 1998-07-01 | 야마따니 와따루 | 참게 아메보사이트 라이세이트 g 인자 활성화 저해제 |
CA1328074C (en) | 1988-09-01 | 1994-03-29 | Shigenori Tanaka | Horseshoe crab amebocyte lysate factor g inhibitor |
JPH0375565A (ja) * | 1989-08-18 | 1991-03-29 | Taiyo Fishery Co Ltd | エンドトキシンの簡便な定量方法及びその方法に使用する試薬 |
EP0426395B1 (en) | 1989-10-30 | 1997-01-22 | Biowhittaker, Inc. | Kinetic assay for endotoxin using limulus amebocyte lysate and chromogenic substrate |
USD325090S (en) | 1989-11-30 | 1992-03-31 | Akzo N.V. | Cuvette |
JP2944709B2 (ja) | 1990-06-21 | 1999-09-06 | 生化学工業株式会社 | (1→3)―β―D―グルカンの測定剤 |
USD330428S (en) | 1990-07-20 | 1992-10-20 | Scott Lewis | Cuvette for a clinical laboratory analyzer |
JP2944721B2 (ja) | 1990-08-22 | 1999-09-06 | 生化学工業株式会社 | エンドトキシンの測定剤 |
DE69129365T2 (de) * | 1990-08-22 | 1998-10-08 | Seikagaku Kogyo K K Seikagaku | Testagens für endotoxin |
USD343905S (en) | 1990-08-23 | 1994-02-01 | Olympus Optical Co., Ltd. | Cuvette for use in chemical analysis |
JP3122454B2 (ja) * | 1990-09-27 | 2001-01-09 | 生化学工業株式会社 | カブトガニ・アメボサイト・ライセートの調製法 |
US5681710A (en) * | 1991-03-14 | 1997-10-28 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Reagent for determining (1→3)-β-D-glucan |
USD342793S (en) | 1991-05-07 | 1993-12-28 | Hoffmann-La Roche Inc. | Cuvette |
JP3034352B2 (ja) * | 1991-08-08 | 2000-04-17 | 生化学工業株式会社 | 安定な一重らせん構造の分子内架橋(1→3)−β−D−グルカン類及びその製造法 |
DE69211973T2 (de) * | 1991-12-25 | 1996-12-19 | Maruha Corp | Reagenzien und Verfahren zur Bestimmung von Beta-Glucanen |
JPH05306978A (ja) * | 1992-05-01 | 1993-11-19 | Meidensha Corp | 微生物測定装置 |
JP3524120B2 (ja) * | 1992-05-08 | 2004-05-10 | 生化学工業株式会社 | 前処理剤、前処理方法、前処理された試料による測定法、測定用キット及び試料の判定方法 |
USD353676S (en) | 1992-07-16 | 1994-12-20 | Spectrum Systems, Inc. | Cuvette for a chemical analyzer |
JP3322700B2 (ja) * | 1992-09-14 | 2002-09-09 | 生化学工業株式会社 | 固相系反応用エンドトキシン特異的測定剤 |
US5302348A (en) * | 1992-12-10 | 1994-04-12 | Itc Corporation | Blood coagulation time test apparatus and method |
CA2112776C (en) * | 1993-01-21 | 2002-11-12 | Masakazu Tsuchiya | Process for inhibiting activity of endotoxin |
JP3242733B2 (ja) * | 1993-02-26 | 2001-12-25 | 生化学工業株式会社 | エンドトキシン特異的測定剤 |
US5795962A (en) * | 1993-06-29 | 1998-08-18 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Horseshoe crab amebocyte lysate factor G subunit A |
US5496700A (en) * | 1993-08-06 | 1996-03-05 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Optical immunoassay for microbial analytes using non-specific dyes |
JP3429036B2 (ja) * | 1993-09-30 | 2003-07-22 | 生化学工業株式会社 | エンドトキシンの特異的測定剤 |
US5518006A (en) * | 1994-08-09 | 1996-05-21 | International Technidyne Corp. | Blood sampling device |
USD380555S (en) | 1994-08-31 | 1997-07-01 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Sample analysis cuvette |
US5504011A (en) * | 1994-10-21 | 1996-04-02 | International Technidyne Corporation | Portable test apparatus and associated method of performing a blood coagulation test |
US5637474A (en) * | 1994-10-31 | 1997-06-10 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Process for measuring amount of endotoxin or (1→3)-β-D-glucan by kinetic turbidimetric method |
US5731212A (en) * | 1994-12-20 | 1998-03-24 | International Technidyne Corporation | Test apparatus and method for testing cuvette accommodated samples |
US6046021A (en) * | 1995-04-12 | 2000-04-04 | Biolog, Inc. | Comparative phenotype analysis of two or more microorganisms using a plurality of substrates within a multiwell testing device |
JPH09131174A (ja) * | 1995-09-08 | 1997-05-20 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 微生物検出用プレ−ト |
JP3666621B2 (ja) * | 1995-10-05 | 2005-06-29 | 和光純薬工業株式会社 | 微生物由来成分の測定装置及び測定方法 |
USD391373S (en) | 1996-04-04 | 1998-02-24 | Biometric Imaging, Inc. | Cuvette for laboratory sample |
US6428971B1 (en) * | 1996-05-07 | 2002-08-06 | Pharmacia & Upjohn Company | Teichoic acid enzymes and assays |
DE69718245T2 (de) | 1996-06-28 | 2003-08-14 | Nitto Denko Corp | Druckempfindliches klebendes Blatt zum Nachweis von Mikroorganismen und Methode zum Nachweis von Mikroorganismen |
US6267858B1 (en) * | 1996-06-28 | 2001-07-31 | Caliper Technologies Corp. | High throughput screening assay systems in microscale fluidic devices |
US5820767A (en) * | 1996-07-29 | 1998-10-13 | Pall Corporation | Method for quantitation of microorganism contamination of liquids |
USD390661S (en) | 1996-10-04 | 1998-02-10 | International Technidyne Corporation | Blood coagulation analyzer |
US5836360A (en) * | 1997-03-25 | 1998-11-17 | International Technidyne Corporation | Volume controlled receptacle |
US6235471B1 (en) * | 1997-04-04 | 2001-05-22 | Caliper Technologies Corp. | Closed-loop biochemical analyzers |
US6303389B1 (en) * | 1997-06-27 | 2001-10-16 | Immunetics | Rapid flow-through binding assay apparatus and method therefor |
US6270982B1 (en) * | 1997-10-09 | 2001-08-07 | Charles River Laboratories | Methods and compositions for the detection of bacterial endotoxins |
JPH11178596A (ja) * | 1997-12-24 | 1999-07-06 | Nitto Denko Corp | 微生物検出用シート状物、それを含む微生物検出キットおよびそれを用いた微生物検出方法 |
GB9807814D0 (en) | 1998-04-09 | 1998-06-10 | Allied Therapeutics Limited | Solid phase test for endoxin |
USD437419S1 (en) | 1999-02-04 | 2001-02-06 | Eppendorf Ag | Cuvette |
US6451610B1 (en) * | 1999-04-14 | 2002-09-17 | International Technidyne Corporation | Method and apparatus for coagulation based assays |
USD445909S1 (en) | 1999-11-11 | 2001-07-31 | Hemocue Ab | Cuvette |
ES2395991T3 (es) * | 1999-12-03 | 2013-02-18 | Baxter International Inc. | Ensayo de pirogenicidad para su uso con sistemas de inmunoensayo automáticos |
USD463570S1 (en) | 2001-06-28 | 2002-09-24 | 3M Innovative Properties Company | Sample processing device |
JP3642319B2 (ja) * | 2002-01-30 | 2005-04-27 | トヨタ自動車株式会社 | 車両用電源の制御装置 |
USD472324S1 (en) | 2002-04-05 | 2003-03-25 | Charles River Laboratories, Inc. | Cuvette |
DE602004024769D1 (de) | 2003-03-17 | 2010-02-04 | Charles River Lab Inc | Methoden und zusammensetzungen für den nachweis mikrobieller verunreinigungen |
WO2007078268A2 (en) | 2004-12-02 | 2007-07-12 | Charles River Laboratories, Inc. | Methods and compositions for the detection and/or quantification of gram positive bacterial contaminants |
WO2006076617A2 (en) | 2005-01-13 | 2006-07-20 | Charles River Laboratories, Inc. | Method for classifying a microorganism in a biological sample |
-
2004
- 2004-03-17 DE DE602004024769T patent/DE602004024769D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 JP JP2006532327A patent/JP5118849B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 AT AT04775840T patent/ATE452986T1/de not_active IP Right Cessation
- 2004-03-17 EP EP04775840A patent/EP1606414B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-17 US US10/803,177 patent/US7329538B2/en active Active
- 2004-03-17 WO PCT/US2004/008013 patent/WO2005010207A2/en active Application Filing
-
2007
- 2007-04-09 US US11/784,778 patent/US20100047851A1/en not_active Abandoned
- 2007-08-01 US US11/832,261 patent/US7939291B2/en active Active
-
2010
- 2010-05-24 JP JP2010118755A patent/JP5738543B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2011
- 2011-04-27 US US13/095,390 patent/US10119969B2/en active Active
-
2014
- 2014-03-03 JP JP2014040309A patent/JP2014110806A/ja active Pending
-
2018
- 2018-11-02 US US16/178,856 patent/US20190271699A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20100047851A1 (en) | 2010-02-25 |
US20040241788A1 (en) | 2004-12-02 |
US10119969B2 (en) | 2018-11-06 |
ATE452986T1 (de) | 2010-01-15 |
JP5738543B2 (ja) | 2015-06-24 |
JP2010200766A (ja) | 2010-09-16 |
JP2007501020A (ja) | 2007-01-25 |
US20110201049A1 (en) | 2011-08-18 |
US20080020422A1 (en) | 2008-01-24 |
EP1606414B1 (en) | 2009-12-23 |
WO2005010207A2 (en) | 2005-02-03 |
WO2005010207A3 (en) | 2005-06-09 |
US7939291B2 (en) | 2011-05-10 |
EP1606414A2 (en) | 2005-12-21 |
US7329538B2 (en) | 2008-02-12 |
JP2014110806A (ja) | 2014-06-19 |
DE602004024769D1 (de) | 2010-02-04 |
US20190271699A1 (en) | 2019-09-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5118849B2 (ja) | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 | |
JP5096166B2 (ja) | 生体サンプル中の微生物を分類する方法 | |
Tanaka et al. | [23] Limulus test for detecting bacterial endotoxins | |
JPH03220456A (ja) | リムラス変形細胞溶解産物および発色原基質を用いたエンドトキシン反応速度論的アッセイ | |
US8440394B2 (en) | Methods for the detection and/or quantification of gram positive bacterial contaminants | |
JP2016145845A (ja) | 加熱処理したリムルスアメーバ様細胞溶解物 | |
EP1710584B1 (en) | Method of measuring lipoarabinomannan and application thereof | |
JPH10185924A (ja) | リムルス反応活性化物質、この物質の不活化方法及び測定方法並びにリムルス反応測定方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070305 |
|
A524 | Written submission of copy of amendment under article 19 pct |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A524 Effective date: 20070402 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100128 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100426 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100507 |
|
A524 | Written submission of copy of amendment under article 19 pct |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A524 Effective date: 20100524 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110330 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110629 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110706 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110729 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110805 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110829 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110905 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110929 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120502 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120831 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20120907 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120925 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20121022 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 5118849 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20151026 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |