JPH09131174A - 微生物検出用プレ−ト - Google Patents
微生物検出用プレ−トInfo
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- JPH09131174A JPH09131174A JP25219796A JP25219796A JPH09131174A JP H09131174 A JPH09131174 A JP H09131174A JP 25219796 A JP25219796 A JP 25219796A JP 25219796 A JP25219796 A JP 25219796A JP H09131174 A JPH09131174 A JP H09131174A
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- microorganism
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Abstract
(57)【要約】
【課題】検体中のグラム陰性菌、グラム陽性菌、真菌等
の微生物の検出と同時に、検出用試薬の劣化の有無及び
検体希釈液による影響の有無を確認し、判定の有効性を
判別できる微生物検出用プレ−トを提供する。 【解決手段】微生物由来成分検出用試薬を底部に位置さ
せた検体測定用ウエルと、前記微生物由来成分検出用試
薬を底部に位置させたポジテイブコントロ−ル用ウエル
及び/又は前記微生物由来成分検出用試薬を底部に位置
させたネガテイブコントロ−ル用ウエルとを1組とし、
これをプレ−ト上に1組若しくは前記微生物由来成分の
種類毎に複数組形成した。
の微生物の検出と同時に、検出用試薬の劣化の有無及び
検体希釈液による影響の有無を確認し、判定の有効性を
判別できる微生物検出用プレ−トを提供する。 【解決手段】微生物由来成分検出用試薬を底部に位置さ
せた検体測定用ウエルと、前記微生物由来成分検出用試
薬を底部に位置させたポジテイブコントロ−ル用ウエル
及び/又は前記微生物由来成分検出用試薬を底部に位置
させたネガテイブコントロ−ル用ウエルとを1組とし、
これをプレ−ト上に1組若しくは前記微生物由来成分の
種類毎に複数組形成した。
Description
【0001】
【発明の属する技術分野】この発明は、例えばグラム陰
性菌、グラム陽性菌、真菌等の微生物を目視で検出する
ための微生物検出用プレ−トに係り、詳記すれば、検出
用試薬の劣化の有無又は検体希釈液による影響の有無を
確認し、判定の有効性を同時に判別できる微生物検出用
プレ−トに関するものである。
性菌、グラム陽性菌、真菌等の微生物を目視で検出する
ための微生物検出用プレ−トに係り、詳記すれば、検出
用試薬の劣化の有無又は検体希釈液による影響の有無を
確認し、判定の有効性を同時に判別できる微生物検出用
プレ−トに関するものである。
【0002】
【従来の技術】エンドトキシン、(1→3)β−D−グ
ルカン(以下、β−グルカンと略記する。)及びペプチ
ドグリカン等は、各種微生物の細胞壁構成成分として知
られている。微生物の細胞壁中のこれら成分の有無を調
べることにより、検体中の真菌、グラム陰性菌、グラム
陽性菌等の微生物種の有無をある程度確定し得ること
は、従来から知られている。
ルカン(以下、β−グルカンと略記する。)及びペプチ
ドグリカン等は、各種微生物の細胞壁構成成分として知
られている。微生物の細胞壁中のこれら成分の有無を調
べることにより、検体中の真菌、グラム陰性菌、グラム
陽性菌等の微生物種の有無をある程度確定し得ること
は、従来から知られている。
【0003】従来、検体中のこれら微生物種の有無を確
定する方法としては、エンドトキシン検出用試験紙を使
用する方法(特開平6−341993号明細書参照)が
知られていた。しかしながら、β−グルカン及びペプチ
ドグリカンのようなエンドトキシン以外の微生物由来成
分を検出することは、現実に行われていないし、知られ
てもいない。
定する方法としては、エンドトキシン検出用試験紙を使
用する方法(特開平6−341993号明細書参照)が
知られていた。しかしながら、β−グルカン及びペプチ
ドグリカンのようなエンドトキシン以外の微生物由来成
分を検出することは、現実に行われていないし、知られ
てもいない。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】上記従来のエンドトキ
シン検出用試験紙では、グラム陰性菌の有無を検出する
ことはできるが、グラム陽性菌及び真菌等の微生物種の
有無を検出することはできない。そればかりか、上記試
験紙は、試験紙に含有させた検出用試薬の劣化や検体希
釈液の影響等によって、発色しなかったり、誤って発色
する場合もあるので、その判定結果は信頼性の点で十分
満足すべきものではなかった。
シン検出用試験紙では、グラム陰性菌の有無を検出する
ことはできるが、グラム陽性菌及び真菌等の微生物種の
有無を検出することはできない。そればかりか、上記試
験紙は、試験紙に含有させた検出用試薬の劣化や検体希
釈液の影響等によって、発色しなかったり、誤って発色
する場合もあるので、その判定結果は信頼性の点で十分
満足すべきものではなかった。
【0005】この発明は、検体中のグラム陰性菌、グラ
ム陽性菌、真菌等の微生物の検出と同時に、検出用試薬
の劣化の有無及び検体希釈液による影響の有無を確認
し、判定の有効性を判別できる微生物検出用プレ−トを
提供することを目的とする。
ム陽性菌、真菌等の微生物の検出と同時に、検出用試薬
の劣化の有無及び検体希釈液による影響の有無を確認
し、判定の有効性を判別できる微生物検出用プレ−トを
提供することを目的とする。
【0006】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明は、微生物由来成分検出用試薬を底部に位置
させた検体測定用ウエルと、前記微生物由来成分検出用
試薬を底部に位置させたポジテイブコントロ−ル用ウエ
ル及び/又は前記微生物由来成分検出用試薬を底部に位
置させたネガテイブコントロ−ル用ウエルとを1組と
し、これをプレ−ト上に1組若しくは前記微生物由来成
分の種類毎に複数組形成させてなることを特徴とする。
に、本発明は、微生物由来成分検出用試薬を底部に位置
させた検体測定用ウエルと、前記微生物由来成分検出用
試薬を底部に位置させたポジテイブコントロ−ル用ウエ
ル及び/又は前記微生物由来成分検出用試薬を底部に位
置させたネガテイブコントロ−ル用ウエルとを1組と
し、これをプレ−ト上に1組若しくは前記微生物由来成
分の種類毎に複数組形成させてなることを特徴とする。
【0007】微生物由来成分検出用試薬を底部に位置さ
せるということは、微生物由来成分検出用試薬若しくは
該試薬含有物を、好ましくはフイルム状若しくはシ−ト
状とし、これを底部に保持させるか、或は単に底部に載
置し、ウエル開口をフイルムで覆う等して、前記フイル
ム状若しくはシ−ト状物等が開口から飛び出さないよう
にすることである。
せるということは、微生物由来成分検出用試薬若しくは
該試薬含有物を、好ましくはフイルム状若しくはシ−ト
状とし、これを底部に保持させるか、或は単に底部に載
置し、ウエル開口をフイルムで覆う等して、前記フイル
ム状若しくはシ−ト状物等が開口から飛び出さないよう
にすることである。
【0008】
【発明の実施の形態】次に、本発明の実施の形態を図面
に基づいて説明する。図1に示すように、長方形の板状
プレ−ト4上には、3個の円形のウエル1,2,3が形
成されている。尚、1は、微生物由来成分検出用試薬シ
−ト5を底部に保持させた検体測定用ウエルであり、2
は、同シ−ト5を底部に保持させたポジテイブコントロ
−ル用のウエルであり、3は、同シ−ト5を底部に保持
させたネガテイブコントロ−ル用のウエルである。
に基づいて説明する。図1に示すように、長方形の板状
プレ−ト4上には、3個の円形のウエル1,2,3が形
成されている。尚、1は、微生物由来成分検出用試薬シ
−ト5を底部に保持させた検体測定用ウエルであり、2
は、同シ−ト5を底部に保持させたポジテイブコントロ
−ル用のウエルであり、3は、同シ−ト5を底部に保持
させたネガテイブコントロ−ル用のウエルである。
【0009】ウエル底部に位置させる微生物由来成分検
出用試薬としては、エンドトキシン検出用試薬、β−グ
ルカン検出用試薬及びペプチドグリカン検出用試薬が挙
げられる。ポジテイブコントロ−ル用ウエル2には、ポ
ジテイブコントロ−ル液を添加する。ポジテイブコント
ロ−ル液は、上記微生物由来成分の溶液、例えば上記微
生物由来成分の精製品の水溶液である。従って、ポジテ
イブコントロ−ル液を添加すれば、当然着色する筈であ
り、着色しない場合は、微生物由来成分検出用試薬が劣
化していると判断される。尚、ここでいう精製品とは、
目的の微生物由来成分以外には、ウエル中の微生物由来
成分検出用試薬と反応する成分を含まないものを言う。
また、その精製方法は特に限定されず、この分野で通常
利用される方法は全て利用可能である。
出用試薬としては、エンドトキシン検出用試薬、β−グ
ルカン検出用試薬及びペプチドグリカン検出用試薬が挙
げられる。ポジテイブコントロ−ル用ウエル2には、ポ
ジテイブコントロ−ル液を添加する。ポジテイブコント
ロ−ル液は、上記微生物由来成分の溶液、例えば上記微
生物由来成分の精製品の水溶液である。従って、ポジテ
イブコントロ−ル液を添加すれば、当然着色する筈であ
り、着色しない場合は、微生物由来成分検出用試薬が劣
化していると判断される。尚、ここでいう精製品とは、
目的の微生物由来成分以外には、ウエル中の微生物由来
成分検出用試薬と反応する成分を含まないものを言う。
また、その精製方法は特に限定されず、この分野で通常
利用される方法は全て利用可能である。
【0010】ネガテイブコントロ−ル用のウエル3に
は、ネガテイブコントロ−ル液を添加する。ネガテイブ
コントロ−ル液は、通常注射用水のような微生物由来成
分を含有しない水或は微生物由来成分を含有しない検体
希釈液を使用する。従って、ネガテイブコントロ−ル液
を添加しても、着色しない筈であり、着色した場合は、
微生物由来成分検出用試薬が劣化していると判断され
る。また、ネガテイブコントロ−ル液として、検体希釈
液を使用して着色した場合は、微生物由来成分検出用試
薬が劣化しているか、検体希釈液中に検出用試薬を着色
させる不純物が混入していると判断される。
は、ネガテイブコントロ−ル液を添加する。ネガテイブ
コントロ−ル液は、通常注射用水のような微生物由来成
分を含有しない水或は微生物由来成分を含有しない検体
希釈液を使用する。従って、ネガテイブコントロ−ル液
を添加しても、着色しない筈であり、着色した場合は、
微生物由来成分検出用試薬が劣化していると判断され
る。また、ネガテイブコントロ−ル液として、検体希釈
液を使用して着色した場合は、微生物由来成分検出用試
薬が劣化しているか、検体希釈液中に検出用試薬を着色
させる不純物が混入していると判断される。
【0011】ポジテイブコントロ−ル用のウエル2とネ
ガテイブコントロ−ル用のウエル3とは、いずれか一方
でも良いが、判定の信頼性を十分確保するには、両方設
けるのが好ましい。ポジテイブコントロ−ル用及びネガ
テイブコントロ−ル用の微生物由来成分検出用試薬は、
対応する検体測定用に使用した微生物由来成分検出用試
薬と同じものを使用する。例えば、検体測定用ウエルに
エンドトキシン検出用試薬を保持させた場合は、それに
対応するポジテイブコントロ−ル用のウエル2とネガテ
イブコントロ−ル用のウエル3にも、エンドトキシン検
出用試薬を保持させる。
ガテイブコントロ−ル用のウエル3とは、いずれか一方
でも良いが、判定の信頼性を十分確保するには、両方設
けるのが好ましい。ポジテイブコントロ−ル用及びネガ
テイブコントロ−ル用の微生物由来成分検出用試薬は、
対応する検体測定用に使用した微生物由来成分検出用試
薬と同じものを使用する。例えば、検体測定用ウエルに
エンドトキシン検出用試薬を保持させた場合は、それに
対応するポジテイブコントロ−ル用のウエル2とネガテ
イブコントロ−ル用のウエル3にも、エンドトキシン検
出用試薬を保持させる。
【0012】上記実施例では、ウエル1,2,3は円形
に形成されているが、これは必ずしもこのようでなくと
も良く、他の形状であっても差し支えない。図2は、本
発明の他の実施例を示すものであり、四角形の板状プレ
−ト4に、エンドトキシン検出用ウエル1−1、2−
1、3−1、β−グルカン検出用ウエル1−2、2−
2、3−2及びペプチドグリカン検出用ウエル1−3、
2−3、3−3の合計9個の円形の凹状ウエルが形成さ
れている。尚、1−1、1−2、1−3は、検体用ウエ
ル、2−1、2−2、2−3は、ポジテイブコントロ−
ル用ウエル、3−1、3−2、3−3は、ネガテイブコ
ントロ−ル用ウエルである。
に形成されているが、これは必ずしもこのようでなくと
も良く、他の形状であっても差し支えない。図2は、本
発明の他の実施例を示すものであり、四角形の板状プレ
−ト4に、エンドトキシン検出用ウエル1−1、2−
1、3−1、β−グルカン検出用ウエル1−2、2−
2、3−2及びペプチドグリカン検出用ウエル1−3、
2−3、3−3の合計9個の円形の凹状ウエルが形成さ
れている。尚、1−1、1−2、1−3は、検体用ウエ
ル、2−1、2−2、2−3は、ポジテイブコントロ−
ル用ウエル、3−1、3−2、3−3は、ネガテイブコ
ントロ−ル用ウエルである。
【0013】エンドトキシン検出用ウエル1−1、2−
1、3−1の底部には、エンドトキシン検出用試薬シ−
ト5aが保持され、β−グルカン検出用ウエル1−2、
2−2、3−2の底部には、β−グルカン検出用試薬シ
−ト5bが保持され、ペプチドグリカン検出用ウエル1
−3、2−3、3−3の底部には、ペプチドグリカン検
出用試薬シ−ト5cが保持されている。
1、3−1の底部には、エンドトキシン検出用試薬シ−
ト5aが保持され、β−グルカン検出用ウエル1−2、
2−2、3−2の底部には、β−グルカン検出用試薬シ
−ト5bが保持され、ペプチドグリカン検出用ウエル1
−3、2−3、3−3の底部には、ペプチドグリカン検
出用試薬シ−ト5cが保持されている。
【0014】上記実施例では、検体用ウエル1−1、1
−2、1−3、ポジテイブコントロ−ル用ウエル2−
1、2−2、2−3及びネガテイブコントロ−ル用ウエ
ル3−1、3−2、3−3は、それぞれ用途毎に同一列
となるように形成され、エンドトキシン検出用ウエル1
−1、2−1、3−1、β−グルカン検出用ウエル1−
2、2−2、3−2及びペプチドグリカン検出用ウエル
1−3、2−3、3−3は、微生物由来成分毎に同一列
となるように形成されている。このように形成すること
によって、実験操作とその判別を容易に間違えずに行う
ことができる。
−2、1−3、ポジテイブコントロ−ル用ウエル2−
1、2−2、2−3及びネガテイブコントロ−ル用ウエ
ル3−1、3−2、3−3は、それぞれ用途毎に同一列
となるように形成され、エンドトキシン検出用ウエル1
−1、2−1、3−1、β−グルカン検出用ウエル1−
2、2−2、3−2及びペプチドグリカン検出用ウエル
1−3、2−3、3−3は、微生物由来成分毎に同一列
となるように形成されている。このように形成すること
によって、実験操作とその判別を容易に間違えずに行う
ことができる。
【0015】板状プレ−ト4としては、検出用試薬等と
反応しないプラスチック等の適当な材料から形成するこ
とができる。板状プレ−ト4は、上面にウエルが形成で
きるものであれば良く、その形状は特に限定されない。
また、判定のし易さから、白色プレ−ト又は透明板の底
面を白色にしたプレ−トを使用するのが好ましい。上記
実施例では、1枚の板状プレ−ト4に9個のウエルを形
成しているが、エンドトキシン、β−グルカン及びペプ
チドグリカン検出用ウエル毎に別の板状プレ−トに形成
し、これらプレ−トを合わせてあるいは別々に使用する
ようにしても良い。
反応しないプラスチック等の適当な材料から形成するこ
とができる。板状プレ−ト4は、上面にウエルが形成で
きるものであれば良く、その形状は特に限定されない。
また、判定のし易さから、白色プレ−ト又は透明板の底
面を白色にしたプレ−トを使用するのが好ましい。上記
実施例では、1枚の板状プレ−ト4に9個のウエルを形
成しているが、エンドトキシン、β−グルカン及びペプ
チドグリカン検出用ウエル毎に別の板状プレ−トに形成
し、これらプレ−トを合わせてあるいは別々に使用する
ようにしても良い。
【0016】ウエル底部に所定の検出用試薬を保持させ
る方法としては、これら試薬を、検体を加えたときに反
応し得る状態でウエル底部に保持させることができれば
良く、特に限定されない。例えば、これら検出用試薬を
シ−ト状の吸収性担体に担持させたものを調製し、これ
を該ウエル底部に保持させる方法、これら検出用試薬を
水溶性で且つ被膜形成能を有する高分子化合物を用いて
フイルム状(シ−ト状)としたものを調製し、これを該
ウエル底部に保持させる方法等が好ましい。
る方法としては、これら試薬を、検体を加えたときに反
応し得る状態でウエル底部に保持させることができれば
良く、特に限定されない。例えば、これら検出用試薬を
シ−ト状の吸収性担体に担持させたものを調製し、これ
を該ウエル底部に保持させる方法、これら検出用試薬を
水溶性で且つ被膜形成能を有する高分子化合物を用いて
フイルム状(シ−ト状)としたものを調製し、これを該
ウエル底部に保持させる方法等が好ましい。
【0017】上記検出用試薬を担持させる吸収性担体と
しては、例えばポリプロピレン,ポリエチレン,ポリフ
ッ化ビニリデン,ポリアクリロニトリル,ナイロン,ポ
リエチレン,ポリ酢酸ビニル,ポリテトラフロオロエチ
レン,ポリウレタン等のプラスチック、ガラス繊維、セ
ルロ−ス、例えばメチルセルロ−ス,酢酸セルロ−ス,
ニトロセルロ−ス等のセルロ−ス誘導体等を素材とする
吸収性担体(より具体的には、例えば、織布、不織布、
濾紙、スポンジ等)が挙げられる。
しては、例えばポリプロピレン,ポリエチレン,ポリフ
ッ化ビニリデン,ポリアクリロニトリル,ナイロン,ポ
リエチレン,ポリ酢酸ビニル,ポリテトラフロオロエチ
レン,ポリウレタン等のプラスチック、ガラス繊維、セ
ルロ−ス、例えばメチルセルロ−ス,酢酸セルロ−ス,
ニトロセルロ−ス等のセルロ−ス誘導体等を素材とする
吸収性担体(より具体的には、例えば、織布、不織布、
濾紙、スポンジ等)が挙げられる。
【0018】また、水溶性で被膜形成能を有する高分子
化合物としては、例えばポリビニルアルコ−ル、例えば
ヒドロキシプロピルセルロ−ス,ヒドロキシプロピルメ
チルセルロ−ス,ヒドロキシエチルセルロ−ス等のセル
ロ−ス誘導体、例えばポリアクリル酸,ポリメタクリル
酸等のポリカルボン酸等が挙げられる。
化合物としては、例えばポリビニルアルコ−ル、例えば
ヒドロキシプロピルセルロ−ス,ヒドロキシプロピルメ
チルセルロ−ス,ヒドロキシエチルセルロ−ス等のセル
ロ−ス誘導体、例えばポリアクリル酸,ポリメタクリル
酸等のポリカルボン酸等が挙げられる。
【0019】また、これら検出用試薬を吸収性担体に担
持させるには、例えば吸収性担体に、検出用試薬溶液を
含浸させた後に乾燥させる等の公知の方法によって行え
ば良い。それぞれの検出用試薬を担持させた吸収性担体
或はフイルムをウエル底部に保持させる方法としては、
例えば、これらをウエル形状に合わせて切り出し、ウエル
底部に接着させるか密嵌圧入保持させる方法、これらを
ウエルが貫通状態で形成された板状物と当該ウエルが形成
されていない板状物との間に挟み込んで接着させる方法
等が挙げられる。
持させるには、例えば吸収性担体に、検出用試薬溶液を
含浸させた後に乾燥させる等の公知の方法によって行え
ば良い。それぞれの検出用試薬を担持させた吸収性担体
或はフイルムをウエル底部に保持させる方法としては、
例えば、これらをウエル形状に合わせて切り出し、ウエル
底部に接着させるか密嵌圧入保持させる方法、これらを
ウエルが貫通状態で形成された板状物と当該ウエルが形成
されていない板状物との間に挟み込んで接着させる方法
等が挙げられる。
【0020】本発明の微生物検出用プレ−トのウエル底
部に担持させるエンドトキシン検出用試薬としては、例
えばリムルス属(Limulus),タキプレウス属(Tachypleu
s),或はカルシノスコルピウス属(Calcinoscorpius)に属
するカブトガニの血球成分を含んでいるような試薬、所
謂リムルス試薬であってβ−グルカンとは反応しない性
質を有する試薬等が挙げられる。尚、本発明に於いて
は、目視によりエンドトキシンを検出するため、このよ
うな試薬は、エンドトキシンの存在により着色するよう
な合成基質法用試薬が好ましい。また、このような条件
を満たす市販の試薬、例えばバイオウイタカ−社(Biow
hittaker Inc.)、エンドセイフ社(Endosafe. Inc.)、生
化学工業(株)及び和光純薬工業(株)等から市販され
ているものであって、エンドトキシンに特異的な試薬
は、当然のことながら本発明の目的のために使用可能で
ある。
部に担持させるエンドトキシン検出用試薬としては、例
えばリムルス属(Limulus),タキプレウス属(Tachypleu
s),或はカルシノスコルピウス属(Calcinoscorpius)に属
するカブトガニの血球成分を含んでいるような試薬、所
謂リムルス試薬であってβ−グルカンとは反応しない性
質を有する試薬等が挙げられる。尚、本発明に於いて
は、目視によりエンドトキシンを検出するため、このよ
うな試薬は、エンドトキシンの存在により着色するよう
な合成基質法用試薬が好ましい。また、このような条件
を満たす市販の試薬、例えばバイオウイタカ−社(Biow
hittaker Inc.)、エンドセイフ社(Endosafe. Inc.)、生
化学工業(株)及び和光純薬工業(株)等から市販され
ているものであって、エンドトキシンに特異的な試薬
は、当然のことながら本発明の目的のために使用可能で
ある。
【0021】β−グルカン検出用試薬としては、例えば
昆虫の体液成分から調製されたβ−グルカンと特異的に
反応する試薬や、例えばリムルス属(Limulus),タキプ
レウス属(Tachypleus),或はカルシノスコルピウス属(Ca
lcinoscorpius)に属するカブトガニの血球成分を含みβ
−グルカンとは反応するがエンドトキシンとは反応しな
い性質を有する試薬であって、目視にてβ−グルカンの
存在を確認できる試薬(例えば合成基質を用いる試薬な
ど)が挙げられる。これら試薬は、市販されているもの
を適宜使用しても良いし、また公知の方法により自製し
たものを使用しても良い。
昆虫の体液成分から調製されたβ−グルカンと特異的に
反応する試薬や、例えばリムルス属(Limulus),タキプ
レウス属(Tachypleus),或はカルシノスコルピウス属(Ca
lcinoscorpius)に属するカブトガニの血球成分を含みβ
−グルカンとは反応するがエンドトキシンとは反応しな
い性質を有する試薬であって、目視にてβ−グルカンの
存在を確認できる試薬(例えば合成基質を用いる試薬な
ど)が挙げられる。これら試薬は、市販されているもの
を適宜使用しても良いし、また公知の方法により自製し
たものを使用しても良い。
【0022】ペプチドグリカン検出用試薬としては、例
えば昆虫の体液成分から調製されたペプチドグリカンに
対して特異的な試薬などが挙げられ、市販されているも
のを適宜使用しても良いし、また公知の方法により自製
したものを使用しても良い。
えば昆虫の体液成分から調製されたペプチドグリカンに
対して特異的な試薬などが挙げられ、市販されているも
のを適宜使用しても良いし、また公知の方法により自製
したものを使用しても良い。
【0023】昆虫の体液成分からβ−グルカン検出用試
薬又はペプチドグリカン検出用試薬を調製する方法とし
ては、例えば、β−グルカン検出用試薬については、特
開昭63−141598号公報、ペプチドグリカン検出
用試薬については、特開昭63−141599号公報に
示されているような方法が挙げられる。
薬又はペプチドグリカン検出用試薬を調製する方法とし
ては、例えば、β−グルカン検出用試薬については、特
開昭63−141598号公報、ペプチドグリカン検出
用試薬については、特開昭63−141599号公報に
示されているような方法が挙げられる。
【0024】次に、本発明の微生物の検出用プレ−トを
使用して、微生物の存否の判定を行った例を示す。検体
(1)〜(6)について、微生物の存否とその種類の判
定を行った。使用した本発明の微生物検出用プレ−ト
は、図2に示す形態のものであり、以下の操作により判
定を行った。
使用して、微生物の存否の判定を行った例を示す。検体
(1)〜(6)について、微生物の存否とその種類の判
定を行った。使用した本発明の微生物検出用プレ−ト
は、図2に示す形態のものであり、以下の操作により判
定を行った。
【0025】即ち、微生物検出用プレ−トの検体用ウエ
ル1−1、1−2、1−3には、所定の検体を、また、
ポジテイブコントロ−ル用ウエル2−1、2−2、2−3
及びネガテイブコントロ−ル用ウエル3−1、3−2、3
−3には、所定のコントロ−ル液を夫々一定量滴下し、
反応開始後所定時間経過後に、夫々のウエルに於ける発
色状況を目視により判定して、微生物の存否とその種類
を判定した。
ル1−1、1−2、1−3には、所定の検体を、また、
ポジテイブコントロ−ル用ウエル2−1、2−2、2−3
及びネガテイブコントロ−ル用ウエル3−1、3−2、3
−3には、所定のコントロ−ル液を夫々一定量滴下し、
反応開始後所定時間経過後に、夫々のウエルに於ける発
色状況を目視により判定して、微生物の存否とその種類
を判定した。
【0026】各ウエルにおける発色状況からの判定は、
ポジテイブコントロ−ルが陰性の場合と、ネガテイブコン
トロ−ルが陽性の場合を除いて、次のようにして行っ
た。尚、ポジテイブコントロ−ルが陰性の場合とネガテイ
ブコントロ−ルが陽性の場合は、無効と判断する。 ・エンドトキシン、β−グルカン及びペプチドグリカン
のいずれもが陰性の場合:微生物が存在しないと判定。 ・β−グルカンのみ陽性の場合:真菌が存在すると判
定。 ・ペプチドグリカンのみ陽性の場合:グラム陽性菌が存
在すると判定。
ポジテイブコントロ−ルが陰性の場合と、ネガテイブコン
トロ−ルが陽性の場合を除いて、次のようにして行っ
た。尚、ポジテイブコントロ−ルが陰性の場合とネガテイ
ブコントロ−ルが陽性の場合は、無効と判断する。 ・エンドトキシン、β−グルカン及びペプチドグリカン
のいずれもが陰性の場合:微生物が存在しないと判定。 ・β−グルカンのみ陽性の場合:真菌が存在すると判
定。 ・ペプチドグリカンのみ陽性の場合:グラム陽性菌が存
在すると判定。
【0027】・エンドトキシンとペプチドグリカンの両
方が陽性の場合:グラム陰性菌のみ、あるいはグラム陰
性菌とグラム陽性菌の両方が存在すると判定。 ・β−グルカンとペプチドグリカンの両方が陽性の場
合:グラム陽性菌と真菌の両方が存在すると判定。 ・エンドトキシン、β−グルカン及びペプチドグリカン
の三者が陽性の場合:グラム陰性菌と真菌の両方が存在
する、あるいはグラム陰性菌とグラム陽性菌と真菌の三
者が存在すると判定。
方が陽性の場合:グラム陰性菌のみ、あるいはグラム陰
性菌とグラム陽性菌の両方が存在すると判定。 ・β−グルカンとペプチドグリカンの両方が陽性の場
合:グラム陽性菌と真菌の両方が存在すると判定。 ・エンドトキシン、β−グルカン及びペプチドグリカン
の三者が陽性の場合:グラム陰性菌と真菌の両方が存在
する、あるいはグラム陰性菌とグラム陽性菌と真菌の三
者が存在すると判定。
【0028】次表1〜2に、検体(1)〜(6)の各ウ
エルにおける発色状況からの判定結果を示した。尚、表
1〜2中、+は発色していることを示し、−は発色して
いないことを示す。また略号は、それぞれ以下の意味を
表す。 S:検体 PC:ポジテイブコントロ−ル NC:ネガテイブコントロ−ル ET:エンドトキシン GL:β−グルカン PG:ペプチドグリカン
エルにおける発色状況からの判定結果を示した。尚、表
1〜2中、+は発色していることを示し、−は発色して
いないことを示す。また略号は、それぞれ以下の意味を
表す。 S:検体 PC:ポジテイブコントロ−ル NC:ネガテイブコントロ−ル ET:エンドトキシン GL:β−グルカン PG:ペプチドグリカン
【0029】
【表1】
【0030】
【表2】
【0031】次に、本発明のプレ−トを用いた微生物の
検出結果を無効と判断すべき場合の例を次表3に示す。
尚、表3中の各記号は、表1〜2と同じ意味を表す。
検出結果を無効と判断すべき場合の例を次表3に示す。
尚、表3中の各記号は、表1〜2と同じ意味を表す。
【0032】
【表3】
【0033】表3に示したような検出結果が得られた場
合は、その結果は信頼性に欠けるので、その検体につい
て再検討を行う必要がある。
合は、その結果は信頼性に欠けるので、その検体につい
て再検討を行う必要がある。
【0034】
【発明の効果】本発明によれば、研究室等で、検体中の
真菌、グラム陰性菌、グラム陽性菌等の微生物の存否と
その種類の判定を、一次スクリ−ニング的に定性的に行
うことができると共に、検体についての陽性または陰性
の判別と同時に、検出用試薬の劣化の有無又は検体希釈
液による検出反応への影響の有無を確認し、判定の有効
性を確認できるので、目視判定の精度を著しく高めるこ
とができる。
真菌、グラム陰性菌、グラム陽性菌等の微生物の存否と
その種類の判定を、一次スクリ−ニング的に定性的に行
うことができると共に、検体についての陽性または陰性
の判別と同時に、検出用試薬の劣化の有無又は検体希釈
液による検出反応への影響の有無を確認し、判定の有効
性を確認できるので、目視判定の精度を著しく高めるこ
とができる。
【0035】また、実験操作は、各ウエルに所定溶液を
一定量添加するだけであるので、簡単であるほか、各ウ
エルは、隔壁により隔てられているので、他のウエルに添
加される溶液により汚染されることなく正確に測定でき
る。
一定量添加するだけであるので、簡単であるほか、各ウ
エルは、隔壁により隔てられているので、他のウエルに添
加される溶液により汚染されることなく正確に測定でき
る。
【0036】
【図1】本発明の実施例を示す斜視図である。
【図2】本発明の他の実施例を示す斜視図である。
1,1−1,1−2,1−3 検体測定用ウエル 2,2−1,2−2,2−3 ポジテイブコントロ
−ル用ウエル 3,3−1,3−2,3−3 ネガテイブコントロ
−ル用ウエル 4 板状プレ−ト 5,5a,5b,5C 微生物由来成分検出
用試薬シ−ト
−ル用ウエル 3,3−1,3−2,3−3 ネガテイブコントロ
−ル用ウエル 4 板状プレ−ト 5,5a,5b,5C 微生物由来成分検出
用試薬シ−ト
Claims (9)
- 【請求項1】微生物由来成分検出用試薬を底部に位置さ
せた検体測定用ウエルと、前記微生物由来成分検出用試
薬を底部に位置させたポジテイブコントロ−ル用ウエル
及び/又は前記微生物由来成分検出用試薬を底部に位置
させたネガテイブコントロ−ル用ウエルとを1組とし、
これをプレ−ト上に1組若しくは前記微生物由来成分の
種類毎に複数組形成させてなることを特徴とする目視に
て微生物の有無を判別する微生物検出用プレ−ト。 - 【請求項2】前記微生物由来成分検出用試薬を底部に保
持させてなる請求項1に記載のプレ−ト。 - 【請求項3】前記微生物由来成分の種類が、エンドトキ
シン、(1→3)β−D−グルカン及びペプチドグリカ
ンの1種以上である請求項1または2に記載のプレ−
ト。 - 【請求項4】前記ウエルの組を、前記微生物由来成分と
してエンドトキシン、(1→3)β−D−グルカン又は
ペプチドグリカン毎に、別々に形成してなる請求項3に
記載のプレ−ト。 - 【請求項5】前記検体測定用ウエルと、前記ポジテイブ
コントロ−ル用及び/又はネガテイブコントロ−ル用の
ウエルとを、前記微生物由来成分毎に同一列となるよう
に形成し、且つ検体測定用、ポジテイブコントロ−ル用
及び/又はネガテイブコントロ−ル用の用途毎に同一列
となるように形成してなる請求項4に記載のプレ−ト。 - 【請求項6】前記ポジテイブコントロ−ル用ウエルがポ
ジテイブコントロ−ル液を添加するウエルであり、該ポ
ジテイブコントロ−ル液は、前記微生物由来成分を含有
する溶液である請求項1または5に記載のプレ−ト。 - 【請求項7】前記ネガテイブコントロ−ル用ウエルがネ
ガテイブコントロ−ル液を添加するウエルであり、該ネ
ガテイブコントロ−ル液は、前記微生物由来成分を含有
しない水若しくは検体希釈液である請求項1または5に
記載のプレ−ト。 - 【請求項8】前記微生物由来成分検出用試薬を担持させ
たシ−ト状の吸収性担体又は前記微生物由来成分検出用
試薬を含有させた水溶性高分子化合物のシ−ト状物を、
前記各々のウエル底部に保持した請求項2〜7のいずれ
かに記載のプレ−ト。 - 【請求項9】前記吸収性担体が、織布、不織布、濾紙若
しくはスポンジ状の高分子化合物である請求項8に記載
のプレ−ト。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP25219796A JPH09131174A (ja) | 1995-09-08 | 1996-09-04 | 微生物検出用プレ−ト |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP7-256961 | 1995-09-08 | ||
JP25696195 | 1995-09-08 | ||
JP25219796A JPH09131174A (ja) | 1995-09-08 | 1996-09-04 | 微生物検出用プレ−ト |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH09131174A true JPH09131174A (ja) | 1997-05-20 |
Family
ID=26540594
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP25219796A Withdrawn JPH09131174A (ja) | 1995-09-08 | 1996-09-04 | 微生物検出用プレ−ト |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH09131174A (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6987002B2 (en) | 2000-01-20 | 2006-01-17 | Samyang Genex Corporation | Composition for detecting β-1,3-glucan |
JP2007501020A (ja) * | 2003-03-17 | 2007-01-25 | チャールズ リバー ラボラトリーズ, インコーポレイテッド | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
JP2008504560A (ja) * | 2004-06-28 | 2008-02-14 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 溶解性フィルムおよびそれを含む方法 |
-
1996
- 1996-09-04 JP JP25219796A patent/JPH09131174A/ja not_active Withdrawn
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6987002B2 (en) | 2000-01-20 | 2006-01-17 | Samyang Genex Corporation | Composition for detecting β-1,3-glucan |
JP2007501020A (ja) * | 2003-03-17 | 2007-01-25 | チャールズ リバー ラボラトリーズ, インコーポレイテッド | 微生物夾雑物の検出のための方法および組成物 |
US7939291B2 (en) | 2003-03-17 | 2011-05-10 | Charles River Laboratories, Inc. | Methods for the detection of microbial contaminants |
US10119969B2 (en) | 2003-03-17 | 2018-11-06 | Charles River Laboratories, Inc. | Compositions for the detection of microbial contaminants |
JP2008504560A (ja) * | 2004-06-28 | 2008-02-14 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 溶解性フィルムおよびそれを含む方法 |
US9267167B2 (en) | 2004-06-28 | 2016-02-23 | Becton, Dickinson And Company | Dissolvable films and methods including the same |
US9410185B2 (en) | 2004-06-28 | 2016-08-09 | Becton, Dickinson And Company | Dissolvable films and methods including the same |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20031104 |