JP2017502076A5 - - Google Patents

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  1. 配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129の群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるペプチド、および配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129と少なくとも90%相同的なそれらの変異配列および薬学的に許容可能なそれらの塩であって、前記変異体がT細胞と前記変異体ペプチドとの交差反応を誘発し、前記ペプチドが完全長ポリペプチドでない、ペプチド。
  2. 前記ペプチドまたはそれらの変異体が、ヒト主要組織適合性複合体(MHC)クラスIまたはIIの分子に結合する能力を維持し、前記ペプチドにCD4および/またはCD8T細胞を刺激する能力がある、請求項1に記載のペプチドまたはそれらの変異体。
  3. それらのアミノ酸配列が、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129の群に記載の連続する一続きのアミノ酸を含んでなる、請求項1または2に記載のペプチド。
  4. 前記ペプチドまたはそれらの変異体が、8〜100若しくは8〜30若しくは8〜16のアミノ酸全長を有し、又は前記ペプチドが、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129に記載のアミノ酸配列からなるグループから選択される一若しくはそれから本質的になる、請求項1〜3のいずれか一項に記載のペプチド。
  5. 前記ペプチドが、修飾されおよび/または非ペプチド結合を含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載のペプチド。
  6. 前記ペプチドが、HLA−DR抗原関連不変鎖(Ii)のN末端アミノ酸を含んでなる、融合タンパク質の一部である、請求項1〜5のいずれか一項に記載のペプチド。
  7. 請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチドをエンコードする核酸であって、任意選択的に異種プロモーター配列と結合する、核酸。
  8. 請求項7に記載の核酸を発現する能力がある、発現ベクター。
  9. 医療で使用するための、請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチド、請求項7に記載の核酸、または請求項8に記載の発現ベクター。
  10. 請求項7に記載の核酸または請求項8に記載の発現ベクターを含んでなる宿主細胞、抗原提示細胞若しくは樹状細胞。
  11. 請求項7に記載の核酸または請求項8に記載の発現ベクターを発現する、請求項10に記載の宿主細胞を培養するステップと、前記宿主細胞またはその培養液からペプチドを単離するステップとを含んでなる、請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチドを生成する方法。
  12. CTLを、適切な抗原提示細胞の表面または抗原提示細胞を模倣する人工コンストラクトの表面に発現される抗原負荷ヒトクラスIまたはII MHC分子に、前記CTLを抗原特異的様式で活性化するのに十分な時間にわたり、生体外で接触させるステップを含んでなり、前記抗原が、請求項1〜9のいずれか一項に記載のペプチドである、活性化細胞傷害性Tリンパ球(CTL)を生成するインビトロ法。
  13. 請求項1〜5のいずれか一項に記載のアミノ酸配列を含んでなるポリペプチドを異常に発現する細胞を選択的に認識する、請求項12に記載の方法によって生成される活性化細胞傷害性Tリンパ球(CTL)。
  14. 請求項13で定義される細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の有効数を患者に投与するステップを含んでなる、その標的細胞が請求項1〜5のいずれか一項に記載のアミノ酸配列を含んでなるポリペプチドを異常に発現する患者において、標的細胞を死滅させるための細胞傷害性Tリンパ球(CTL)
  15. 請求項1〜5のいずれか一項に記載のペプチド若しくはMHC分子と結合する請求項1〜5のいずれか一項に記載のペプチドを特異的に認識する、抗体。
  16. がんを治療するための薬剤若しくはワクチンにおける主要成分として含まれる、またはがんに対する薬剤若しくはワクチンの製造原料として使用される、請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチド、請求項7に記載の核酸、請求項8に記載の発現ベクター、請求項10に記載の細胞、請求項13に記載の活性化細胞傷害性Tリンパ球、または請求項15に記載の抗体。
  17. 前記がんが、PTPRZ1、BCAN、および/またはFABP7のおよび/または配列番号1〜配列番号49、配列番号71、および配列番号74〜129のペプチドがそれに由来する別のタンパク質の過剰発現を示す、星細胞腫、毛様細胞性星細胞腫、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、乏突起膠腫、上衣細胞腫、多形性神経膠芽細胞腫、混合神経膠腫、乏突起星細胞腫、髄芽細胞腫、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫、胚細胞腫、奇形腫、神経節膠腫、神経節細胞腫、中枢神経節細胞腫、原始神経外胚葉性腫瘍(PNET、例えば、髄芽細胞腫、髄上皮腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、脳室上衣芽細胞腫)、松果体実質腫瘍(例えば、松果体細胞腫、松果体芽細胞腫)、上衣細胞腫、脈絡叢腫瘍、起源不明神経上皮腫瘍(例えば、大脳神経膠腫症、星状芽細胞腫)、神経膠芽腫(、)前立腺腫瘍、乳がん、食道がん、結腸直腸がん、明細胞腎細胞がん、肺がん、CNS、卵巣、メラノーマ膵臓がん、扁平上皮がん、白血病髄芽細胞腫、結腸、直腸、胃、腎臓、肺、膵臓、前立腺、皮膚、およびその他の腫瘍から選択される、請求項16に記載のペプチド、核酸、発現ベクター、細胞、活性化細胞傷害性Tリンパ球、または抗体。
  18. (a)請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチド、請求項7に記載の核酸、請求項8に記載の発現ベクター、請求項10に記載の細胞、活性化細胞傷害性Tリンパ球、請求項13に記載のまたは請求項15に記載の抗体を含有する医薬組成物を溶液または凍結乾燥形態で含んでなる容器;
    (b)任意選択的に、前記凍結乾燥製剤のための希釈剤または再構成溶液を含有する第2の容器;
    (c)任意選択的に、配列番号1〜配列番号131からなる群から選択される少なくとももう1つのペプチド、および
    (d)任意選択的に、(i)前記溶液の使用、または(ii)前記凍結乾燥製剤の再構成および/または使用のための取扱説明書を含んでなるキット。
  19. (iii)緩衝液、(iv)希釈剤、(V)フィルター、(vi)針、または(V)シリンジの1つまたは複数をさらに含んでなる、請求項18に記載のキット。
  20. 前記ペプチドが、配列番号1〜配列番号19、配列番号42〜44、配列番号50〜配列番号65、および配列番号71〜配列番号88からなる群から選択される、請求項18または19に記載のキット。
  21. a)個々の患者からの腫瘍サンプルによって提示される腫瘍関連ペプチド(TUMAP)を同定するステップと;
    b)対応する正常組織との比較で、a)で同定されたペプチドを、免疫原性および腫瘍中の過剰提示について予備検査されたペプチドの貯蔵庫と比較するステップと;
    (c)前記患者において同定された腫瘍関連ペプチドと関連がある、前記貯蔵庫からの少なくとも1つのペプチドを選択するステップと
    d)ステップc)に基づいて個別化ワクチンを製造するステップと
    を含んでなる、個々の患者のための個別化抗がんワクチンを製造する方法。
  22. 前記TUMAPが、
    a1)前記腫瘍サンプルからの発現データを、前記腫瘍サンプルの組織型に相当する正常組織サンプルからの発現データと比較して、前記腫瘍サンプル中で過剰発現されまたは異常に発現されるタンパク質を同定するステップと;および
    (a2)前記発現データを前記腫瘍サンプル中のMHCクラスI/またはクラスII分子と結合するMHCリガンドの配列と相関させて、前記腫瘍によって過剰発現されまたは異常に発現されるタンパク質に由来するMHCリガンドを同定するステップと
    によって同定される、請求項21に記載の方法。
  23. 前記腫瘍サンプルから単離されたMHC分子から結合ペプチドを溶出させて、前記溶出したリガンドを配列決定することで、MHCリガンドの配列が同定される、請求項21または22に記載の方法。
  24. 前記腫瘍サンプルの組織型に対応する前記正常組織が、前記患者から得られる、請求項21〜23のいずれか一項に記載の方法。
  25. 前記貯蔵庫に包含されるペプチドが、
    a.前記悪性材料からのHLAリガンドが、質量分析法によって同定され;
    b.マイクロアレイによるゲノム規模メッセンジャーリボ核酸(mRNA)発現解析を使用して、一連の正常器官および組織と比較して、前記悪性組織(GBM)中の遺伝子過剰発現が同定され;
    c.前記同定されたHLAリガンドが、遺伝子発現データと比較され;
    d.ステップbで検出された選択的に発現されまたは過剰発現される遺伝子によってコードされるペプチドが選択され;
    e.mRNAレベルでの過剰発現の関連性が、腫瘍組織上における、ステップcからの選択されたTUMAPの再検出と、健常組織における検出の欠如またはまれな検出によって確認され;
    f.前記選択されたペプチドによる生体内T細胞応答の誘導が可能かどうかを評価するために、健常ドナーまたは前記患者からのヒトT細胞を使用して、生体外免疫原性アッセイが実施される
    ことによって同定される、請求項21〜24のいずれか一項に記載の方法。
  26. 前記貯蔵庫に包含される前記ペプチドの免疫原性が、生体外免疫原性アッセイ、個々のHLA結合についての患者免疫モニタリング、MHC多量体染色、ELISPOTアッセイおよび/または細胞内サイトカイン染色を含んでなる方法によって判定される、請求項21〜25のいずれか一項に記載の方法。
  27. 前記貯蔵庫が、配列番号1〜配列番号131からなる群から選択される複数のペプチドを含んでなる、請求項21〜26のいずれか一項に記載の方法。
  28. d)前記個々の患者からの正常な対応する組織と比較して、前記腫瘍サンプルに特有の少なくとも1つの変異を同定し、前記変異と関連があるワクチンへの包含のためにペプチドを選択するステップをさらに含んでなる、請求項21〜27のいずれか一項に記載の方法。
  29. 前記少なくとも1つの変異が、全ゲノム配列決定によって同定される、請求項28に記載の方法。
  30. 配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129からなる群から選択されるアミノ酸配列と、少なくとも80%の同一性を有するHLAリガンドに反応性である、T細胞受容体。
  31. 前記アミノ酸配列が、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129と少なくとも90%、または少なくとも95%同一である、請求項30に記載のT細胞受容体。
  32. 前記アミノ酸配列が、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129のいずれかを含んでなる、請求項30または31に記載のT細胞受容体。
  33. 前記アミノ酸配列が、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129のいずれかからなる、請求項30〜32のいずれか一項に記載のT細胞受容体。
  34. (a)配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129と少なくとも80%同一であるアミノ酸配列;および
    (b)HLA−DR抗原関連不変鎖(Ii)のN末端アミノ酸1〜80
    を含んでなる、融合タンパク質。
  35. 前記(a)のアミノ酸配列が、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129と少なくとも90%若しくは少なくとも95%同一である、請求項34に記載の融合タンパク質。
  36. 前記(a)のアミノ酸配列が、配列番号28、配列番号1〜27、配列番号29〜49、配列番号71、および配列番号74〜129を含んでなる、請求項35に記載の融合タンパク質。
  37. (a)請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチド;
    (b)請求項30〜33のいずれか一項に記載のT細胞受容体;または
    (c)請求項34〜36のいずれか一項に記載の融合タンパク質
    をエンコードする核酸。
  38. DNA、cDNA、PNA、RNAまたはそれらの組み合わせである、請求項に37記載の核酸。
  39. 請求項37または38に記載の核酸を含んでなる、発現ベクター。
  40. 請求項37または38に記載の核酸、または請求項39に記載の発現ベクターを含んでなる、宿主細胞。
  41. 樹状細胞若しくは抗原提示細胞である、請求項40に記載の宿主細胞。
  42. (a)請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチド;または(b)請求項30〜33のいずれか一項に記載のT細胞受容体;または(c)請求項34〜36のいずれか一項に記載の融合タンパク質を生成する方法であって、請求項41に記載の宿主細胞を培養するステップと、前記宿主細胞および/またはその培養液から前記ペプチド、前記T細胞受容体、または前記融合タンパク質を単離するステップとを含んでなる、方法。
  43. CTLを、適切な抗原提示細胞の表面に発現される抗原負荷ヒトクラスIまたはII MHC分子に、前記CTLが抗原特異的様式で活性化するのに十分な時間にわたり、生体外で接触させるステップを含んでなり、前記抗原が、請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチドである、活性化細胞傷害性Tリンパ球(CTL)を生成するインビトロ法。
  44. 前記抗原が、十分な量の前記抗原を抗原提示細胞に接触させることで、適切な抗原提示細胞の表面に発現されるクラスIまたはII MHC分子上に負荷される、請求項43に記載の方法。
  45. 前記抗原提示細胞が、請求項1〜6のいずれか一項に記載の前記ペプチドを発現する能力がある発現ベクターを含んでなる、請求項44に記載の方法。
  46. 請求項44〜46のいずれか一項に記載の方法によって生成される、活性化細胞傷害性Tリンパ球(CTL)。
  47. 前記患者に請求項46に記載の細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の有効数を投与するステップを含んでなる、患者において標的がん細胞を死滅させるための、細胞傷害性Tリンパ球(CTL)を含む薬剤
  48. 薬剤としての、または薬剤の製造における、請求項1〜6のいずれか一項に記載のペプチド、請求項30〜33のいずれか一項に記載のT細胞受容体、請求項34〜36のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項37または38に記載の核酸、請求項39に記載の発現ベクター、請求項40または41に記載の宿主細胞、または請求項46に記載の活性化細胞傷害性Tリンパ球の使用。
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