JP2007523202A - ４置換ピペリジン誘導体 - Google Patents

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Abstract

R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R2A、R3、R4、A、X、a、xおよびnが明細書に定められている通りである構造1によって表される置換ピペリジン化合物を提供する。構造Iの置換ピペリジン化合物は、神経細胞膜を通って神経細胞の内部に透過または浸透することができ、哺乳類の神経細胞に見られる細胞内Rhoキナーゼ酵素を阻害することができ、当該哺乳類の中枢および末梢神経系の損傷神経の修復に利用できる。これらの化合物は、哺乳類の神経細胞の軸索突起の再生または成長を誘発することができ、それにより損傷または疾患神経組織の再生を誘発することができる。これらの化合物は、Rhoキナーゼが関与する疾患状態の治療における酵素Rhoキナーゼの拮抗剤としてさらに利用できる。これらの置換ピペリジン化合物を含有する医薬組成物は、軸索突起成長の促進、およびRhoキナーゼ阻害が指示される疾患の治療に有用でありうる。

Description

本発明は、Rhoキナーゼの阻害剤である置換ピペリジン分子または化合物に関し、特には、膜浸透性を有することができ、神経突起成長を促進することができる置換ピペリジン化合物、およびこれらの化合物を含む医薬組成物に関する。本発明は、中枢神経系および末梢神経系における神経細胞および神経構造の構成要素の損傷を修復し、虚血性細胞死を防ぎ、Rhoキナーゼの不活性化または阻害を含む、様々な治療を行うためのこれらの組成物および化合物の使用にも関する。
中枢神経系(CNS)は、頭蓋に含まれる脳と、脊柱管における脊髄で構成される。脳は、12の脳神経を含む。脊髄神経は、脊髄から生じ、椎間孔を通じて伝達される。脳幹の真下に源を発する脊髄は、L1と呼ばれる第1の腰椎に伸びる。L1を越えると、脊髄は、馬尾になる。脊髄は、8対の頚髄神経、12対の胸神経、5対の腰髄神経および1対の尾骨脊髄神経を含む31対の神経で構成される。第1の頚髄神経(後頭下神経と呼ばれる)は、後頭骨と環椎の間の脊柱管から生じ、第8の頚髄神経は、第7の頚髄と第1の胸椎の間で生じる。各神経は、前根または腹根および後根または背根の2つの根(後者は脊髄神経節である神経節の存在によって特徴づけられる)によって脊髄に接続されている。各脊髄神経は、運動神経からの軸索を含む腹または前根、ならびに感覚神経からの神経線維を含む背根または後根から形成される。前根(前根;腹根)は、脊間孔付近に2つの束を形成するように合体するいくつかの細根または細糸(根糸)としての脊椎の全面から生じる。後根(後根;背根)は、サイズがより大きく、脊髄の後外側溝に沿って接続され、脊髄神経節に加わる2つの束を形成するように合体するその細根の数がより多いために、前根より大きい。第1の頚髄神経の後根は前根より小さい。脊髄神経節(ganglion spinale(脊髄神経節))は、脊髄神経の後根上の神経細胞の集合体である。各神経節は、形状が卵形で、色が赤色を帯び、そのサイズは、それが位置する神経根のサイズに比例する。それは、後神経根の2つの束がそれに加わる中央で二分されている。神経節は、常にではないが通常は、神経根が硬膜を貫通する点のすぐ外側の椎間孔に見いだされる。第1および第2の頚髄神経の神経節は、それぞれ環椎および軸の椎弓上に位置し、仙骨神経の神経節は、脊柱管内部に位置するが、尾骨神経の後根上の神経節は、硬膜の外皮内に位置する。背根と腹根が合体すると、運動および感覚効果をもたらす脊髄神経を形成する。脊髄神経は、背筋および深背筋の皮膚を神経支配する背枝と、首から下の他のあらゆる皮膚を神経支配するとともに、集束および/または分岐神経線維網である神経叢を形成する背枝との2つの主枝に分かれる。神経節は、単極神経細胞で構成され、これらの神経細胞から後根の線維が生じる。他の2つの形態の細胞、すなわちその軸索が細胞(ゴルジのII型)付近に分枝し、神経節内全体に分布するドジエルの細胞、ならびに交感神経節に見いだされる細胞と類似した多極細胞も存在する。第1の頚髄神経の神経節が存在しうるのに対して、神経細胞群からなる小さい異常神経節が、脊髄神経節と脊髄の間の後根上に見いだされることもある。各神経根は、軟膜を含む外皮を有し、クモ膜によって緩く覆われており、後者は、根が硬膜を貫通する点まで伸びている。2つの根が、個別に硬膜を貫通し、各々がこの膜から外皮を受け、それらの根は、脊髄神経を形成するように合体し、この外皮は、神経の鞘に続いている。
最大の神経根および最大の脊髄神経は、下部腰神経および上部仙骨神経であり、脊髄の頚髄および腰***に接続されている。これらの神経は、上部および下部肢まで分布している。それらの個々の細糸は、すべての脊髄神経のなかで最も多い。尾骨神経の根が最も小さい。脊髄神経節の真上において、前神経根と後神経根は、椎間孔を通じて生じる脊髄神経を形成するように合体する。各脊髄神経は、交感神経幹の隣接する神経節から枝(灰色交通枝)を受けるのに対して、胸部ならびに第1および第2の腰部神経は、それぞれ隣接する交換神経節に枝(白色交通枝)を得る。第2、第3および第4の仙骨神経も白色枝を得る。これらは、交感神経幹の神経節に接続されていないが、そのまま交感神経系の骨盤神経叢内に伸びている。典型的な脊髄神経は、2つの系、すなわち体神経系および交感または内蔵神経系に属する線維とともに、これらの系を互いに接続する神経系を含む。
体神経線維は、遠心性かつ球心性である。遠心性線維は、脊髄の前柱の細胞に起源を生じ、前神経根を通じて脊髄神経に伸びる。それらは、衝撃を随意筋に伝え、それらの起源からそれらの末梢分布へ連続する。球心性線維は、印象を例えば皮膚から内部へ伝え、脊髄神経節の単極神経細胞に起源を発する。これらの細胞の単一プロセスは末梢および中枢線維に分かれ、後者は、後神経根を通じて脊髄に入る。
交感線維も遠心性かつ球心性である。遠心性線維、神経節前線維は、脊髄の側柱に源を発し、前神経根および白色交通枝を通じて、交感神経幹の対応する神経節に伝達され、そこでその細胞の周囲に神経連鎖を形成することによって終端するか、あるいは神経節を通って、交感神経幹の他の神経節、または交感神経叢の1つにおけるより遠端に配置された神経節で終端しうる。それらは、他の神経細胞の周囲に神経連鎖を形成することによって終端する。神経節後線維は、交感神経幹の他の線維の神経節の細胞から起源を発し、これらのうちのいくつかは、灰色の交通枝を通じて伸びて、脊髄神経に加わり、それに沿って幹および枝の血管に運ばれるのに対して、他の線維は、直接、または遠端の神経節の1つで中断された後に内臓に伸びる。球心性線維は、一部には単極細胞から導かれ、一部には脊髄神経節の多極細胞から導かれる。それらの末梢プロセスは、白色交通枝を通じて運ばれ、中断することなく1つまたは複数の交感神経節を通過した後に、内臓の組織で終端する。単極細胞の中枢プロセスは、後神経根を通じて脊髄に入り、体または交感遠心性神経の周囲に神経連鎖を形成して、反射弓を完成させる。多極神経細胞の樹状突起は、脊髄神経節におけるII型の細胞(ドジエルの細胞)の周囲に神経連鎖を形成する。この経路により、本来の衝撃は、交感系から体系に伝達され、それを通じて感覚器に送られる。
各脊髄神経は、椎間孔から生じた後に、椎間孔を通じて脊柱管に再度進入し、脊椎およびそれらの靱帯、ならびに脊髄およびその膜の血管に供給を行う小さい髄膜枝を生じる。次いで、脊髄神経は、それぞれ両神経根から線維を受ける後または背部および前または腹部に分かれる。
脊髄は、脳と、体神経系(SNS)および自律神経系(ANS)を含む末梢神経系(PNS)の神経との間の運動および感覚伝達の手段を提供する。体神経系は随意的であり、筋骨格系および皮膚に奉仕する神経を含み、身体に影響を得る外部刺激に応答する。自律神経系は非随意的であり、恒常または正常機能を制御し、維持する。自律神経系は、飛躍または戦闘応答に関連する交感神経系と、通常の活動中の鼓動および呼吸等の規則的な生活機能の維持に携わる副交感神経系とで構成される。神経根は、椎間孔を通じて脊柱管から出て、運動活動に向けて身体の前方に分布し、または感覚活動に向けて身体の後方に分布する。前神経部は、肢を含む脊柱の前部に供給を行うのに対して、後神経部は、脊柱の背後の筋肉まで分布される。
脳脊髄液は、脳における脈絡叢から分泌され、脳室、脊柱管および脊髄に存在する。脳脊髄液は、これらの組織の間を循環し、CNSにおける組織を外傷の影響から保護する。通常の成人におけるCNSは、約150ミリリットルの脳脊髄液を含む。
脳および脊髄は、脊髄および神経根の灰色の外層としての強固な結合性硬膜組織または硬膜と、硬膜より薄いクモ膜と、軟膜、すなわち血液を神経構造に供給する繊細かつ高度に血管性の膜として神経を覆う最内膜とを含む髄膜によって覆われ、保護されている。
首の脊椎および神経根を覆う硬質は、硬膜外腔に囲まれている。神経は、硬膜外腔を通じて首、肩および腕に達する。これらの神経根の炎症は、損傷した円盤、または脊椎の骨構造との接触による刺激によりこれらの領域に痛みを引き起こすことがある。
脊髄における神経等の中枢神経系における神経の傷害は、感覚の永続的喪失および対麻痺の形をとりうる機能障害をもたらしうる。外傷性脊髄傷害、衝突傷害、または脊髄神経における病変等の脊髄傷害に関連する障害のほとんどは、脊髄および脳の神経で構成される中枢神経系(CNS)において損傷を受けた脊髄神経群における細胞死および軸索の損失に起因する。さもなければ、軸索は、CNSにおける損傷神経における病変部位にわたって再成長することはない。CNSの神経再生性疾患も細胞死および軸索損失に関連する。CNSの再生性疾患としては、卒中、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)痴呆、プリオン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、外傷性脳傷害および緑内障を含む障害をもたらしうる疾患が挙げられる。傷害、損傷、疾患またはその他の影響を受けた神経群からの軸索の成長を刺激する能力は、失われた神経機能の回復を向上させ、細胞死に対する保護は、CNSの損傷の範囲を制限することが可能である。例えば、白質卒中に続いて、神経細胞体が生きていても、軸索は損傷を受けて損失し、灰白質における卒中は、多くの神経および非神経(神経膠)細胞を殺す。
損傷を制限し、CNSに対する修復を誘発するために、効果的な神経保護および神経再生剤が望まれる。CNSにおける損傷、傷害および/または疾患を受けた神経を治療するために、CNSの神経細胞における軸索成長を促進する化合物が特に望まれる。また、PNSにおける損傷、傷害および/または疾患を受けた神経を治療するために、末梢神経系(PNS)の神経細胞における軸索成長を促進する化合物が特に望まれる。
脊髄の外傷性傷害は、永久的機能障害をもたらしうる。基体結合タンパク質として神経に隣接する解剖学的構造に存在する成長阻害タンパク質が軸索成長を阻止するため、哺乳類のCNSにおける傷害または病変の部位では、CNSの神経細胞における軸索再生が生じない。神経に隣接する髄鞘等の解剖学的構造を阻害性基体と呼ぶ。栄養因子等の化合物は、神経の差別化を促し、組織培養における軸索成長を刺激することが可能であるが、成長および差別化を促すたいていの因子および化合物は、阻害性基体上で軸索再生成長を促進することができない。
組織細胞培養において軸索成長を刺激し、成長阻害基体上での軸索成長を誘発する化合物は、CNSにおける病変の部位に直接適用するといったように、CNSに存在する細胞に適用する場合に、軸索再生における治療用途に潜在的に有用である。組織培養における許容的基体、すなわち阻害性タンパク質の不在下、または阻害性基体の不在下で成長を刺激する栄養および差別化因子としては、神経成長因子(NGF)および脳誘導成長因子(BDNF)等のニューロトロフィンが挙げられる。NGFもBDNFも阻害性基体上の神経細胞における神経突起成長または軸索再生を促進せず、いずれもインビボのCNSにおける神経細胞における軸索再生を促進する上で効果的ではない。
細胞死は、壊死および枯死という2つの主要メカニズムによって起こりうる。壊死性細胞死は、細胞分解および細胞内容物の放出をもたらすが、細胞枯死は、細胞内容物の放出を防止することによって死ぬ細胞の比較的整った集合をもたらすプログラム化された細胞死である。枯死は、形態学的には細胞収縮、核凝縮、染色質凝縮、および血漿膜の小疱形成によって特徴づけられる。外傷性傷害および虚血は、神経細胞および非神経細胞の両方の枯死をもたらす可能性があり、この細胞死は、傷害または虚血後の機能的障害の原因となる。分子および生化学的事象のカスケードは、DNAを開裂して、アガロースゲルにおけるDNA断片のラダーとして検出可能なオリゴヌクレオソームにする内因性エンドヌクレアーゼの活性化を含む枯死に関連づけられる。枯死性エンドヌクレアーゼは、古典的なDNAラダーを生成することによって細胞DNAに影響を及ぼすばかりでなく、これらのDNA断片のデオキシリボース末端において遊離3'-OH基を生成する。Tunel標識と呼ばれる技術は、枯死細胞を検出する手段としてDNA断片を標識する。
神経細胞等の細胞の内部に存在する酵素であるRhoキナーゼは、癌、転移癌および高血圧症の治療のための標的である。Rhoキナーゼ阻害剤は、緑内障等の眼疾患を治療するとともに、癌細胞移動および転移を抑制するのに有用でありうる。Rhoキナーゼ拮抗剤は、高血圧症、喘息、および血栓症等の血管病の治療に有用でありうる。
小さいGTP-結合タンパク質または小さいG-タンパク質の上科を、アミノ酸配列の類似性に応じて、Ras、Rho(Ras相同体の略)、Rab、Arfおよびその他の5つのグループに分類することが可能である。小さいGTP-結合タンパク質は、分子量が20,000〜30,000ダルトンで、GDPおよびGTPを特異的に結合させ、結合GTPを加水分解することによってGTPase活性を示す。Rhoは、特異的にADPリボシル化され、ボツリヌス毒素であるC3によって不活性化される。
タンパク質キナーゼは、ATP(アデノシン三リン酸)からのリン酸塩を他の(標的)タンパク質のアミノ酸、例えばセリン、スレオニンまたはチロシンへ移すことによって他のタンパク質をリン酸化し、その活性を制御するタンパク質である。リン酸化によって規制される標的タンパク質は、細胞環境における信号を変換する酵素、および特定の遺伝子をオンまたはオフし、それによって多くの異なる疾患の進行を規制することが可能である酵素を含む。
Rhoキナーゼは、細胞骨格組織、細胞接着および細胞運動性、ならびに細胞のサイクルを規制する。Rhoキナーゼは、セリン/スレオニンキナーゼであり、Rho結合タンパク質、またはGTP(グアノシン5'-三リン酸)+H2O(水)→GDP(グアノシン5'-二リン酸)+リン酸イオンの反応を触媒するGTPaseであるRhoのエフェクタであり、活性状態で細胞膜に結合される。本発明の化合物によるRhoキナーゼの阻害は、なかでも癌における腫瘍転位の低減、心臓血管病における血管張力の緩和、および緑内障における眼圧の低減等の、哺乳類における潜在的な治療用途を有することが可能である。2つの異なるRhoキナーゼ阻害剤、すなわちFasudil(登録商標)およびRadicut(登録商標)は、卒中の治療に向けてヒトに使用される。Rhoキナーゼは、ROK(Rho関連キナーゼ)およびROCK(Rho関連Rhoキナーゼ)、ROKaまたはROCKIと呼ばれる。ROCKのイソ型が存在する。ROCKIIは、ROCKIとの64%配列同一性を有し、ROKβは、90%同一である。タンパク質は、3つの重要な領域、すなわちRho結合領域(RB)、C-末端PH(Pleckstrin相同体)領域および触媒領域を有する。
ROCKIおよびROCKIIは、それぞれRhoによって活性化される。ROCKIとROCKIIの重要な差は、哺乳類におけるそれぞれのインビボ組織分布を含む(例えばNakagawaら、FEBS Lett.1966 Aug 26;392(2):189-93参照)。該当するmRNA濃度レベルの分析により、ROCKIは広範な組織分布を有するが、脳および骨格筋にはROCKIは比較的少ないことが示された。ROCKIIの発現は、脳、心臓および肺では高く、肝臓、胃、脾臓、腎臓および精巣では比較的低い。
タンパク質濃度レベルを調べるのに用いたウェスタンブロットは、肝臓および腎臓ではROCKII濃度レベルが低い(Wibberleyら、2003、British J.Pharmacology 138:757-766)のに対して、ROCKIIは、ROCKIに比べて脳での発現が高い(Leemhuisら、2002、J Pharmacol Exp Ther.300:1000)を示している。したがって、哺乳類のCNSにおける治療および診断では、ROCKIIの阻害に特異的な阻害剤が望まれることになる。この点において、知られているRhoキナーゼ阻害剤Y27632[ジヒドロクロライド塩としての(R)-(+)-トランス-4-(1-アミノエチル)-N-(4-ピリジル)シクロヘキセン-カルボキサミド]は、ROCKIおよびROCKIIの両方を不活性化する(Ishizakiら、2000、Molecular Pharmacology 57;976)。
加えて、卒中の治療に向けて臨床的に使用されるRhoキナーゼ阻害剤、Radicut(登録商標)(エダラボン;3-メチル-1-フェニル-2-ピラゾリン-5-オン;5-メチル-2-フェニル-2,4-ジヒドロ-3H-ピラゾール-3-オン)は、腎臓毒性を有していることが知られている。2001年に日本でその使用が承認されてからおよそ180,000人の患者がRadicut(登録商標)を服用してきた。93人が後に腎不全で倒れ、40人が死亡した。ROCKIIに対して特異的なRhoキナーゼ阻害剤は、一部に肝臓および腎臓ではROCKIIの存在度が低いため、この悪影響プロフィルを示すとは考えられない(Wibberleyら、2003、British J.Pharmacology 138:757-766)。
開発されたほぼすべてのタンパク質キナーゼは、ATP-競合的であり、この理由により、タンパク質キナーゼの「50%阻害に必要とされる薬物濃度」(IC50)は、検定に使用されるATPの濃度に依存する。細胞における標的物質のリン酸化を抑制するのに必要とされる薬物濃度は、インビトロのタンパク質キナーゼの阻害に必要とされる薬物濃度より高くなる。
Rhoキナーゼの活性を阻害することが知られている化合物は、Sigma Chemical CompanyおよびCalbiochemから粉末の形で入手可能であり、DMSO(ジメチルスルホキシド、Sigma)に溶解させることが可能であり、標準Rhoキナーゼ阻害化合物として有用でありうるY-27632として知られる(R)-トランス-4-(エタン-1'-アミノ)-N-(4"-ピリジル)シクロヘキサンカルボキサミドジヒドロクロライドである。
Rhoキナーゼは、神経細胞における軸索成長および再生、細胞運動性および転移、平滑筋収縮ならびに枯死を規制し、中枢神経系における修復を含む多くの疾患分野における治療処置のための標的になる。RhoキナーゼはRhoによって活性化され、Rhoキナーゼ阻害剤は、Rhoシグナリングを阻止する。Rho族規制タンパク質の変異が臨床腫瘍サンプルに見いだされたが、それは、Rhoシグナリング経路に対する摂動または変更または妨害または干渉が有用な治療様式でありうることを示唆している。Rhoに対する特異性についての例としては、肝細胞癌におけるDLC1遺伝子、膠腫および星状種において変化する領域に存在するp-190-A、白血病における機能変異が損失するGRAF、ならびに急性骨髄性白血病に見られるいくつかの遺伝子融合に見られるLARGが挙げられる。遺伝子組換え変異により、RhoAを活性化させ、インビトロの細胞形質転換を誘発することが可能である。
Rhoキナーゼ阻害剤は、特にRhoキナーゼが神経における可塑性および軸索再生を促す特性を有する場合に、神経変性病の治療における使用に対して広範な潜在力を有する。しかし、Rhoシグナリングと神経変性病との間の直接的な関連に対する多くの科学的証拠がある。アルツハイマー病(AD)の動物モデルにおいて、Rhoキナーゼ阻害剤は、その疾患の病理的特徴を低減できるという明らかな証拠がある。
Y27632と呼ばれるトランス-4-アミノ(アルキル)-1-ピリジルカルバモイルシクロヘキサンは、Rhoキナーゼ阻害剤であり、Calbiochemから入手可能である。Y27632は、その全内容が参照により本明細書に組み込まれている米国特許第4,997,834号に記載されている。Y27632を使用して、Rhoキナーゼの阻害が転移を防ぐのに効果的であることが証明された。他の化合物は、その全内容が参照により本明細書に組み込まれている米国特許第5,478,838号に記載されている。
Rhoシグナリング拮抗剤は、高血圧症の治療に有用でありうる。例えば、Y-27632は、平滑筋を緩め、血管の流れを増強させることが可能である。Y-27632は、細胞に進入できる小さい分子であり、10日間にわたって30mg/kgを経口投与した後のラットでは毒性はない。Y-27632は、高血圧症のラットの血圧を下げるが、正常なラットの血圧には影響しない。
いくつかのRhoキナーゼ阻害剤が知られている。例えば、化合物NHM-1152は、血管痙攣における血管弛緩剤として作用することが可能である。ヒドロキシファスジルとして知られる化合物は、静脈投与後の卒中の治療に使用することができ、梗塞量を低減し、結果を向上させることができ、血管痙攣性狭心症における抗虚血性特性を有することができ、虚血性脳における好中球移動を抑制する。HA-1077と呼ばれるファスジル化合物は、脳の血液動力学的活性を向上させ、ニューロトロフィルによる超酸化物アニオンの生成を抑制し、脊髄傷害、卒中、クモ膜下出血および脳梗塞の治療に使用できる。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第6,218,410号には、Rhoキナーゼ阻害剤が記載されている。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているUS 2002/0119140として公開されている米国特許出願第10/022,301号(McKerracherら)には、Rho族拮抗剤、および神経突起成長の阻害を阻止するためのそれらの使用が記載されている。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているカナダ国特許出願第2,304,981号(McKerracherら)および第2,325,842号(McKerracherら)には、例えばC3およびキメラC3タンパク質、ならびに知られているトランス-4-アミノ(アルキル)-1-ピリジル-カルバモイルシクロヘキサン化合物または軸索の再生に使用されるRhoキナーゼ阻害剤から選択される物質等のRho拮抗剤の使用が開示されている。C3は、ADP-リボシル化によってRhoを不活性化させ、治療有効投与量では神経細胞に対して比較的無毒でありうる。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第4,857,301号および第5,741,792号には、いくつかの4置換ピペラジン化合物が記載されている。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第6,140,333号には、特定のピペリジン化合物が記載されており、その1つは、炭素が結合するカルボニル基に隣接する炭素を含む基、アリール基および水酸基によってピペリジン環窒素でアシル化される4-アミノメチルピペリジンである。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許6,020,352号には、網膜および視神経の虚血性疾患を治療するための特定の1-フェニル-2-ピペリジノアルカノール誘導体の使用が記載されている。
それぞれの開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第4,849,521号、第4,584,302号、第4,866,077号、第4,933,353号および第6,169,097号には、ピペリジンの1個または複数の環炭素に結合した置換基を有するいくつかのピペリジンを調製する方法が開示されている。その開示内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第6,545,022号には、特定の4置換メチレン-4-アミノメチルピペリジンを含む特定の4置換-4-アミノアルキルピペリジンを調製する方法が記載されている。
Nakagawaら、FEBS Lett.1996 Aug 26;392(2):189-93 Wibberleyら、2003、British J.Pharmacology 138:757-766 Leemhuisら、2002、J Pharmacol Exp Ther.300:1000 Ishizakiら、2000、Molecular Pharmacology 57;976 米国特許第4,997,834号 米国特許第5,478,838号 米国特許第6,218,410号 米国特許出願第10/022,301号 カナダ国特許出願第2,304,981号 カナダ国特許出願第2,325,842号 米国特許第4,857,301号 米国特許第5,741,792号 米国特許第6,140,333号 米国特許6,020,352号 米国特許第4,849,521号 米国特許第4,584,302号 米国特許第4,866,077号 米国特許第4,933,353号 米国特許第6,169,097号 米国特許第6,545,022号 Greenら、「有機合成における保護基」、第2版、John WileyおよびSons、1991 Zhouら、Science 302、1215-1217、2003 McGeerら、1990;Lancet 335、1037 Weggenら、2001 Nature 414、212-216 Leeら、2001 Ann Rev.Neurosci.24:1121 Sayasら、2002 J.Neurosci.22:6863 Lancet 2000;356(9242):1627-31 Katoら(2004)、Biochem.Biophys.Acta.1689:267 del Pesoら、1997 Oncogene.15:3047-57 Remington、「The Science And Practice of Pharmacy」(第9版、1995) 医薬賦形剤のハンドブック、第2版、Wadeら、1994 Ishizakiら、1996、EMBO J.15:1885 米国特許第5,906,819号 Ishizakiら、1997、FEBS Lett.404:118 Ishizakiら、1997 McKerracherら、1994、Neuron 13:805-811
本発明は、新規な4置換ピペリジン化合物、当該新規な4置換ピペリジン化合物を調製するための方法、および新規な4置換ピペリジン化合物を含む医薬組成物を提供する。これらの化合物は、阻害性基体上の神経細胞における神経突起(軸索および樹状突起)成長を高めることができ、医薬組成物は、哺乳類に投与された場合に、CNSおよびPNSにおける外傷、損傷または疾患を受けた神経のインビボ治療方法に有用であり、その治療方法は、本発明の他の態様を含む。
神経の発達を通じて、神経または神経細胞は、集約的に神経突起と呼ばれる軸索および樹状突起を成長させることによって、機能的ネットワークに集成される。神経突起は、他の神経のそれらとシナプス接続し、互いの伝達に重要である。筋肉、皮膚および肝臓等の多くの組織は、傷害の後に修復、再成長する能力を有するが、CNSにおける神経は、傷害の後に修復、再成長する能力が非常に限られている、本発明の化合物は、神経突起成長を促進させ、脊髄傷害および外傷性脳傷害等の神経傷害、ならびにアルツハイマーおよびパーキンソン病および脳腫瘍等の神経関連疾患において潜在的な治癒効果を有する。
神経発達を通じて、成長する神経の軸索は自己配向し、適切な近隣の隣接神経まで達する。成長する軸索は、細胞の表面上、または組織の細胞外基質内の分子と直接相互作用し、それを通じて成長する。これらの物理的相互作用は、軸索が特定の方向に成長することを誘発し、他の方向に成長することを防止または抑制する。成長する軸索に同様に誘引または反発される拡散性分子も組織から分泌、放出されるものと考えられる。加えて、標的細胞上の表面「マーカー」または認識分子は、標的組織の適切な領域に軸索を誘導して、シナプスを形成するものと思われる。
成長する軸索は、誘引または反発物質を完治し、それに応じてそれらの成長を誘導する。軸索の成長端は、「成長円錐体」と呼ばれる多少円錐形の領域に拡大される。成長円錐体は、糸状加足と呼ばれる細胞質および膜の微細管を拡張、収縮させる運動性の高い構造体である。成長円錐体が前方に移動するに従って軸索が拡大し、新たな血漿膜が成長円錐体に加えられる。組織培養における生きた神経の成長円錐体は、活性の高度に動的な領域で、常に前進、後退および方向変換を行っている。
本発明は、その一態様において、式Iの一般構造の化合物および組成物、ならびにその(すなわち式IまたはI'で表される化合物の)薬学的に許容できる塩に関する。
(式中、
Aは、炭素C、または窒素Nであってもよく、
aは、Aが炭素である場合は1で、Aが窒素である場合は0であってもよく、
xは、0または1であってもよく、
Xは、炭素または硫黄であってもよく、ただし、xが0である場合にのみXが炭素であり、xが1である場合にのみXが硫黄であってもよく、
nは、0または1であってもよく、
ピペリジン環置換基であってもよいR1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、独立に、
水素、
直鎖状または分枝状であってもよいC1〜C30アルキル基、
C4〜C30シクロアルキルアルキル基、
C2〜C5架橋基を有していてもよいスピロシクロアルキル基、
C3〜C40アルケニル基、
C3〜C10アルキルチオアルキル基(例えばメチルチオエチル)
少なくとも1個の酸素原子および2から30個の炭素原子を含んでいてもよいアルコキシ含有アルキル基(アルコキシアルキル)、
3から30個の炭素原子を有していてもよく、アルケニル基の二重結合のアリル位にあってもよく、さらに離れていてもよい少なくとも1個の酸素原子を含んでいてもよいアルコキシ含有アルケニル基、
2から(約)30個の酸素原子を含んでいてもよく、水酸基またはメトキシル基で終端していてもよい2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基、
7から30個の炭素を含んでいてもよいアラルキル基(すなわち、例えばベンジルのようなアリールアルキル)であって、アリール基は置換アリール基であってもよいアラルキル基、
7から30個の炭素(C7〜C30)を含んでいてもよく、アラルキルのアルキル部はエーテル基を含んでいてもよいアラルキル基、および
7から30(C7〜C30)個の炭素を含んでいてもよく、オメガ-ヒドロキシル-終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、またはオメガ-メトキシ-終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で、3から30個の酸素原子を含んでいてもよい直鎖状ポリエチレングリコール基で置換されていてもよいアラルキル基からなる群から選択されていてもよく、
ただし、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの少なくとも4個が水素であってもよく、R1a、R1b、R1gおよびR1hの少なくとも2個が水素であってもよく、R1c、R1d、R1eおよびR1fの少なくとも2個が水素であってもよく、
R2およびR2Aは、独立に、
水素、
C1〜C30アルキル基、すなわちC1〜C30アルキルからなる群から選択されていてもよく、その群は、C1〜C10の低級アルキルの副群を含んでいてもよいアルキル基、
C3〜C10シクロアルキル基、すなわちC3〜C10シクロアルキルからなる群から選択されていてもよく、その群は、C3〜C6の低級シクロアルキルの副群を含んでいてもよいシクロアルキル基、
C4〜C30シクロアルキルアルキル基、すなわちC4〜C30シクロアルキルアルキルからなる群から選択されていてもよく、その群は、C4〜C8の低級シクロアルキルアルキルの副群を含んでいてもよいシクロアルキルアルキル基、
C3〜C40アルケニル基、すなわちC3〜C40アルケニルからなる群から選択されていてもよく、その群は、C3〜C10の低級アルケニルの副群を含んでいてもよいアルケニル基、
C3〜C40アルキニル基、すなわちC3〜C40アルキニルからなる群から選択されていてもよく、その群は、C3〜C10の低級アルキニルの副群を含んでいてもよいアルキニル基、
少なくとも1個のエーテル酸素原子、および2から30個の炭素原子を含むアルコキシ含有アルキル基、すなわち少なくとも1個のエーテル酸素原子、および2から30個の炭素原子を含むアルキル基を含み、またはそれから構成されていてもよく、その群は、エーテル酸素の形の1個の酸素原子、および2〜10個の炭素原子を含む低級アルコキシ基の副群を含んでいてもよいアルコキシ含有またはエーテル含有アルキル基、
少なくとも1個のヒドロキシル置換基を含んでいてもよい2〜30個の炭素原子を含んでいてもよいヒドロキシル含有アルキル基、すなわち少なくとも1個のヒドロキシル置換基を含む2から30個の炭素原子のアルキル基を含んでいてもよく、その群は、少なくとも1個のヒドロキシル置換基および2から10個の炭素原子を含んでいてもよい低級アルキル基を含んでいてもよいヒドロキシル含有アルキル基、
少なくとも1個のヒドロキシル置換基および少なくとも1個のエーテル酸素原子を含んでいてもよい4から30個の炭素原子のアルキル基を含んでいてもよく、ヒドロキシルおよびエーテル基は少なくとも2個の炭素原子によって分離されてもよく、その群は、1個のヒドロキシル置換基および2から10個の炭素原子を含むことができる低級アルキル基の副群を含むことができるヒドロキシル含有アルキル基、
3から30個の炭素原子を含むことができるアルケニル基の二重結合のアリル位にあっても、さらに離れていてもよい少なくとも1個の酸素原子を含んでいてもよいアルコキシ含有アルケニル基、
2から約30個の酸素原子を含んでいてもよく、2-メトキシエチル基(CH3O-CH2CH2-)または2-ヒドロキシエチル基(HO-CH2CH2)で終端していてもよい2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基、
6から10個の環炭素のアリール基(例えばフェニル、ナフチルのように非置換)であって、例えば低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン(F-、Cl-、Br-、I-)、過フルオロ低級アルキル基、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル(HOOC-)、カルボキシル置換低級アルキル(HOOC置換低級アルキル)、ヒドロキシ、フェニルオキシ、例えばオメガ-ヒドロキシル-終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、またはオメガ-メトキシ-終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で3から30個の酸素原子を含む直鎖状ポリエチレングリコール基、およびそれらの組合せからなる群から選択される基で置換されたアリール基であってもよい置換アリール基であってもよく、フェニルオキシ基は、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲンおよびそれらの組合せで置換されていてもよいアリール基、
7から30個の炭素を含むアラルキル基(すなわち、例えばベンジルのようなアリールアルキル)であって、アリール基は置換アリール基であってもよいアラルキル基、
7から30個の炭素(C7〜C30)を含んでいてもよく、アラルキルのアルキル部がエーテル基を含んでいてもよいアラルキル基、および
アルキル、アルコキシアルキル、シクロアルキルアルキル、アルコキシアルキル、または3から30個の酸素原子をPEG基またはメトキシ終端PEG基の形で含むポリエチレングリコール置換基を2-、4-または5-位に含んでいてもよい1-イミダゾリル基、
アルキル、アルコキシアルキル、シクロアルキルアルキル、アルコキシアルキル、または3から30個の酸素原子をHO-PEG-基またはメトキシ終端MPEG基の形で含むポリエチレングリコール置換基を1-または4/5-位に含んでいてもよい2-イミダゾリル基、
アルキル、アルコキシアルキル、シクロアルキルアルキル、アルコキシアルキル置換基、または3から30個の酸素原子をヒドロキシル-終端ポリエチレングリコール(PEG)基またはメトキシ-終端ポリエチレングリコール(MPEG)基の形で含むポリエチレングリコール置換基を含んでいてもよい4-イミダゾリル基、
例えば2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルから選択され、式(基-i):
で表されうるピリジニル基、
2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルまたは5-ピリジルまたは6-ピリジルから選択され、式(基-ii):
で表される置換ピリジニル基、
式(基-iii):
で表される1H-インドリル基、
式(基-iv):
で表される1H-インドリル含有基、
式(基-v):
で表される置換キノリル基、
式(基-vi):
で表される置換キノリル含有基、
式(基-vii):
で表される置換フェニル基、
式(基-viii):
で表される置換フェニル含有(またはフェニレン)基、
式(基-ix):
で表される置換ピペリジニル(またはピペリジリジニル)基、
式(基-x):
で表される置換ピペリジニル含有(またはピペリジリジニル)基、
式(基-xi):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル基、
式(基-xii):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル含有基、
式(基-xiii):
で表されるイソキノリニル基、
式(基-xiv):
で表されるイソキノリニル含有基、
ヒドロキシ基置換基を含んでいてもよい5-イソキノリル基、
式(基-xv):
で表される1H-イミダゾリル基、
式(基-xvi):
で表される1H-イミダゾリル含有基、
式(基-xvii):
で表される1H-インダゾリル基、
式(基-xviii):
で表される1H-インダゾリル含有基、
式(基-xix):
で表されるプリニル基(9H-プリニル基)、および
式(基-xx):
で表されるプリニル含有基(または9H-プリニル含有基)
からなる群から選択されていてもよく、
Bは、例えば、
(a)1から20個の炭素原子の非置換直鎖状アルキレン基、すなわちC1〜C20非置換直鎖状アルキレン結合基(例えばメチレン、すなわち-CH2-;エチレン、すなわち-CH2CH2-;トリメチレン、すなわち-CH2CH2CH2-;トリメチレン、すなわち-CH2CH2CH2-;テトラメチレン、すなわち-CH2CH2CH2CH2-;...;ドデカメチレン、すなわち-CH2-(CH2)18-CH2または-(CH2)20)、および
(b)1から4個の炭素原子のアルキル基で置換されていてもよい1から20個の炭素原子の直鎖状アルキレン基を含む分枝状アルキレン基(例えばメチルメチレン、すなわち-C(CH3)H-;1-メチルエチレン、すなわち-CH(CH3)-CH2-;3-エチル-テトラメチレン、-CH2-CH2-C(CH2CH3)H-CH2-;2,6-ジメチルオクタメチレン、すなわち-CH2-C(CH3)H-CH2-CH2-CH2-C(CH3)H-CH2-CH2-等)からなる群から選択されるアルキレン結合基であってもよく、
Rbは、水素(H)、アルキル、アミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択されていてもよく、
Rcは、水素(H)およびアルキルからなる群から選択されていてもよく、
Rdは、水素(H)、アルキルおよびアラルキルからなる群から選択されていてもよく、
nが1のときは、
R3およびR4は、それぞれ独立に、
水素、
6から10個の環炭素のアリール基(例えばフェニル、ナフチル)であって、低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン(F-、Cl-、Br-、I-)、過フルオロ低級アルキル基、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル(HOOC-)、カルボキシル置換低級アルキル(HOOC置換低級アルキル)、ヒドロキシ、フェニルオキシ、オメガ-ヒドロキシル-終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、またはオメガ-メトキシ-終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で3から30個の酸素原子を含んでいてもよい直鎖状ポリエチレングリコール基、およびそれらの組合せから選択される基で置換されていてもよく、フェニルオキシ基は、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲンおよびそれらの組合せで置換されていてもよいアリール基、
7から30個の炭素を含むアラルキル基(例えばベンジル、ベンズヒドリル)であって、アリール基は置換アリール基であってもよいアラルキル基、
7から30個の炭素(C7〜C30)を含んでいてもよく、アラルキルのアルキル部はエーテル基を含んでいてもよいアラルキル基、および
2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルから選択され、式(基-i):
で表されるピリジニル基、
2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルまたは5-ピリジルまたは6-ピリジルから選択され、式(基-ii):
で表される置換ピリジニル基、
式(基-iii):
で表される1H-インドリル基、
式(基-iv):
で表される1H-インドリル含有基、
式(基-v):
で表される置換キノリル基、
式(基-vi):
で表される置換キノリル含有基、
式(基-vii):
で表される置換フェニル基、
式(基-viii):
で表される置換フェニル含有(またはフェニレン)基、
式(基-ix):
で表される置換ピペリジニル(またはピペリジリジニル)基、
式(基-x):
で表される置換ピペリジニル含有(またはピペリジリジニル)基、
式(基-xi):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル基、
式(基-xii):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル含有基、
式(基-xiii):
で表されるイソキノリニル基、
式(基-xiv):
で表されるイソキノリニル含有基、
式(基-xv):
で表される1H-イミダゾリル基、
式(基-xvi):
で表される1H-イミダゾリル含有基、
式(基-xvii):
で表される1H-インダゾリル基、
式(基-xviii):
で表される1H-インダゾリル含有基、
式(基-xix):
で表されるプリニル基(9H-プリニル基)、および
式(基-xx):
で表されるプリニル含有基(または9H-プリニル含有基)からなる群から選択されていてもよく、
Bは、C1〜C20非置換(直鎖または線状)アルキレン基(例えばメチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン等)であってもよく、または1から4個の炭素原子のアルキル基で置換されたC1〜C20分枝アルキレン基(例えばメチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン等)であってもよく、
Rbは、水素(H)、アルキル、アミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択されていてもよく、
Rcは、水素(H)およびアルキルからなる群から選択されていてもよく、
Rdは、水素(H)、アルキルおよびアラルキルからなる群から選択されていてもよく、または、
それらの範囲を定める窒素原子をともに含むR3およびR4は、複素環式窒素含有環状基を形成してもよく、窒素含有環状基は、場合によっては、単一環内に酸素原子、硫黄原子またはさらなる窒素原子を有する5から7個の原子の前記窒素原子を含む単一環であってもよく、または窒素含有環状基は、場合によっては、縮合環構造内に、酸素原子、硫黄原子またはさらなる窒素原子を有する8から16個の原子の前記窒素原子を含む縮合環構造であってもよく、複素環式窒素含有環状基は、場合によっては、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルコキシアルキル、低級アルコキシ、カルボキシルメチルもしくはHOOC-CH2-等のカルボキシル-(低級アルキル)、カルボキシルメチルアミノもしくは(HOOC-CH2)2-NH-等のN-[カルボキシル-(低級アルキル)]アミノ、N,N-ジ(カルボキシメチル)アミノまたは(HOOC-CH2)2N-等のN,N-ジ(カルボキシル-低級アルキル)アミノ、アミノもしくはH2N-、ジ(低級アルキル)アミノ、ハロゲンおよび過フルオロ(低級アルキル)からなる群から選択されていてもよい置換基を有し、または
nが0のときは、
R3は、
6から10個の環炭素のアリール基(例えばフェニル、ナフチル)であって、低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン(F-、Cl-、Br-、I-)、過フルオロ低級アルキル基、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル(HOOC-)、カルボキシル置換低級アルキル(HOOC置換低級アルキル)、ヒドロキシ、フェニルオキシ、オメガ-ヒドロキシル-終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、またはオメガ-メトキシ-終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で3から30個の酸素原子を含んでいてもよい直鎖状ポリエチレングリコール基、およびそれらの組合せから選択される基で置換されていてもよく、フェニルオキシ基は、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲンおよびそれらの組合せで置換されていてもよいアリール基、
7から30個の炭素を含むアラルキル基(例えばベンジル、ベンズヒドリル)であって、アリール基は置換アリール基であってもよく、アラルキルのアルキル部は、場合によっては、少なくとも2個の炭素によってXから分離されたエーテル基を含んでいてもよいアラルキル基、および
ヘテロアリール環の炭素においてXに直接結合しているか、場合によっては、ヘテロアリール環の炭素において結合していてもよい基BによってXに結合し、1H-インドリル、XまたはBに結合していない炭素において基Rcで置換されているキノリル、ピペリジン環の1-位において基Rdで置換されているピペリジニル、1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル、イソキノリニル、1H-イミダゾリル、1H-インダゾリルおよび9H-プリニルからなる群から選択されるヘテロアリール基からなる群から選択されていてもよく、
Bは、1から4個の炭素原子のアルキル基で場合によっては置換されたC1〜C20直鎖状アルキレン基(例えばメチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン等)であってもよく、
Rcは、水素(H)およびC1〜C20アルキルからなる群から選択されていてもよく、
Rdは、水素(H)、C1〜C20アルキルおよびC7〜C20アラルキルからなる群から選択されていてもよく、
ただし、R3基において、Xに結合した炭素原子は、ヒドロキシル基およびアリール基の両方を含まず、またはヒドロキシル基およびヘテロアリール基の両方を含まない。
さらなる態様において、本発明は、式I'の化合物、およびその薬学的に許容できる塩に関する。
(式中、
Aは、例えば炭素または窒素であってもよく、
aは、例えば0または1であってもよく、aは、Aが炭素である場合は1であってもよく、Aが窒素である場合は0であってもよく、
xは、例えば0または1であってもよく、
Xは、例えば、炭素または硫黄であってもよく、ただし、xが0の場合は炭素であり、かつ/またはxが1の場合は硫黄であり、
nは、例えば0または1であってもよく、
R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、独立に、
水素、
直鎖状のC1〜C30アルキル基および分枝状のC1〜C30アルキル基からなる群から選択されていてもよいC1〜C30アルキル基、
C4〜C30シクロアルキルアルキル基、
例えばC2〜C5架橋基を有するスピロシクロアルキル基、
C3〜C40アルケニル基、
C3〜C10アルキルチオアルキル基、
例えば少なくとも1個の酸素原子を含み、2から30個の炭素原子を有していてもよいアルコキシ含有アルキル基、
3から30個の炭素原子を有していてもよく、少なくとも1個の酸素原子をさらに有していてもよく、その酸素原子は、アルケニル基の二重結合のアリル位にあるか、さらに離れていてもよいアルコキシ含有アルケニル基、
例えば2から30個の酸素原子を含んでいてもよく、場合によっては、ヒドロキシル基およびメトキシ基等からなる群から選択される基によって終端されていてもよい2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基、
例えば7から30個の炭素を含んでいてもよく、アリール基は、場合によっては、本明細書に定められる基で置換されていてもよい(すなわち基で置換されていても非置換でもよい)アラルキル基、および
例えば7から30個の炭素を含んでいてもよく、アラルキルのアルキル部は、例えばエーテル基を含んでいてもよいアラルキル基からなる群から選択されていてもよく、
例えば、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの少なくとも4個は水素であってもよく、より詳細には、R1a、R1b、R1gおよびR1hの少なくとも2個は水素であってもよく、R1c、R1d、R1eおよびR1fの少なくとも2個は水素であってもよく、
R2およびR2Aは、独立に、
水素、
C1〜C30アルキル基、
C3〜C10シクロアルキル基、
C4〜C30シクロアルキルアルキル基、
C3〜C40アルケニル基、
C3〜C40アルキニル基、
少なくとも1個のエーテル酸素原子を含んでいてもよく、2から30個の炭素原子をさらに含んでいてもよいアルコキシ含有アルキル基、
例えば少なくとも1個のヒドロキシル置換基を含む2から30個の炭素原子を含んでいてもよいヒドロキシル含有アルキル基、
例えば少なくとも1個のヒドロキシル置換基を含む4から30個の炭素原子のアルキル基を含んでいてもよく、アルキル基は、例えば少なくとも1個のエーテル酸素原子をさらに含んでいてもよく、ヒドロキシルおよびエーテル基は、少なくとも1個または少なくとも2個の炭素原子で分離されていてもよいヒドロキシル含有アルキル基。
アルケニル基の二重結合のアリル位にあってもよく、さらに離れていてもよい少なくとも1個の酸素原子を含んでいてもよく、例えば3から30個の炭素原子を含んでいてもよいアルコキシ含有アルケニル基、
例えば2から30個の酸素原子を含んでいてもよく、場合によっては2-メトキシエチル基、2-ヒドロキシエチル基または同様の基として終端していてもよい2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基、
場合によっては、例えば低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン、過フルオロ低級アルキル、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル、カルボキシル置換低級アルキル、ヒドロキシ、フェニルオキシ、3から30個の酸素原子を例えばオメガ-ヒドロキシル終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、オメガ-メトキシ終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で含む直鎖状ポリエチレングリコール基、およびそれらの組合せからなる群から選択される基で置換されていてもよく、フェニルオキシ基は、場合によっては、例えば低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲン、およびそれらの組合せからなる群から選択される基で置換されていてもよい6から10の環状炭素のアリール基、
例えば7から30個の炭素原子を含んでいてもよく、アラルキル基のアリール基は、場合によっては、本明細書に定められるような基で置換されていてもよいアラルキル基、
例えば7から30個の炭素原子を含んでいてもよく、アラルキルのアルキル部は、エーテル基を含んでいてもよいアラルキル基、
場合によっては、アルキル基、アルコキシアルキル基、シクロアルキルアルキル基、アルコキシアルキル基、またはPEG基またはメトキシ終端PEG基の形等で3から30個の酸素原子を含んでいてもよいポリエチレングリコール置換基等の基を2-、4-または5-位に含んでいてもよい1-イミダゾリル基、または同様に、
場合によっては、例えばアルキル基、アルコキシアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシアルキル基、3から30個の酸素原子をHO-PEG-基の形で含んでいてもよいポリエチレングリコール置換基、およびメトキシ終端MPEG基からなる群から選択されていてもよい基を1-または4/5位に含んでいてもよい2-イミダゾリル基、
場合によっては、アルキル基、アルコキシアルキル基、シクロアルキルアルキル基、アルコキシアルキル基、または(および)例えば3から30個の酸素原子を例えばヒドロキシ終端PEG基またはメトキシ終端PEG基の形で含むポリエチレングリコール基等の(からなる群から選択される)基を1-または2-位に含んでいてもよい4-イミダゾリル基、および同様に、
2-ピリジル、3-ピリジルおよび4-ピリジルからなる群から選択され、式(基-i):
で表されうるピリジニル基、
置換2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、5-ピリジルおよび6-ピリジルから選択され、式(基-ii):
で表されうる置換ピリジニル基、
式(基-iii):
で表される1H-インドリル基、
式(基-iv):
で表される1H-インドリル含有基、
式(基-v):
で表される置換キノリル基、
式(基-vi):
で表される置換キノリル含有基、
式(基-vii):
で表される置換フェニル基、
式(基-viii):
で表される置換フェニル含有(またはフェニレン)基、
式(基-ix):
で表される置換ピペリジニル(またはピペリジリジニル)基、
式(基-x):
で表される置換ピペリジニル含有(またはピペリジリジニル)基、
式(基-xi):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル基、
式(基-xii):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル含有基、
式(基-xiii):
で表されるイソキノリニル基、
式(基-xiv):
で表されるイソキノリニル含有基、
ヒドロキシ基置換基を含んでいてもよい5-イソキノリル基、
式(基-xv):
で表される1H-イミダゾリル基、
式(基-xvi):
で表される1H-イミダゾリル含有基、
式(基-xvii):
で表される1H-インダゾリル基、
式(基-xviii):
で表される1H-インダゾリル含有基、
式(基-xix):
で表されるプリニル基(9H-プリニル基)、および
式(基-xx):
で表されるプリニル含有基(9H-プリニル含有基)から選択されていてもよく、
Bは、例えば1から20個の炭素原子の非置換直鎖状アルキレン基、および例えば(場合によっては)1から4個の炭素原子のアルキル基で置換されていてもよい1から20の直鎖状アルキレン基を含んでいてもよい分枝状アルキレン基からなる群から選択されていてもよいアルキレン結合基であってもよい。
Rbは、例えば水素、アルキル、アミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択されていてもよく、
Rcは、例えば水素(H)およびアルキルからなる群から選択されていてもよく、
Rdは、例えば水素(H)、アルキルおよびアラルキルからなる群から選択されていてもよく、
例えばnが1の場合は、
R3'およびR4は、それぞれ独立に、
水素、
場合によっては、例えば低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン、過フルオロ低級アルキル、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル、カルボキシル置換低級アルキル、ヒドロキシ、フェニルオキシ、3から30個の酸素原子を例えばオメガ-ヒドロキシル終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、オメガ-メトキシ終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で含んでいてもよい直鎖状ポリエチレングリコール基、ならびに同様の基およびそれらの組合せからなる群から選択される基で置換されていてもよく、フェニルオキシ基は、場合によっては低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲン、およびそれらの組合せからなる群から選択されていてもよい基で置換されていてもよい6から10の環状炭素のアリール基、
7から30個の炭素を含んでいてもよいアラルキル基であって、アリール基は、場合によっては本明細書に定められる基で置換されていてもよいアラルキル基、
例えば7から30個の炭素を含んでいてもよく、アラルキルのアルキル部は、エーテル基を含んでいてもよいアラルキル基、および
例えば2-ピリジル、3-ピリジルおよび4-ピリジルからなる群から選択され、式(基-i):
で表されうるピリジニル基、
置換2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、5-ピリジルおよび6-ピリジルから選択され、式(基-ii):
で表されうる置換ピリジニル基、
式(基-iii):
で表される1H-インドリル基、
式(基-iv):
で表される1H-インドリル含有基、
式(基-v):
で表される置換キノリル基、
式(基-vi):
で表される置換キノリル含有基、
式(基-vii):
で表される置換フェニル基、
式(基-viii):
で表される置換フェニル含有(またはフェニレン)基、
式(基-ix):
で表される置換ピペリジニル(またはピペリジリジニル)基、
式(基-x):
で表される置換ピペリジニル含有(またはピペリジリジニル)基、
式(基-xi):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル基、
式(基-xii):
で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル含有基、
式(基-xiii):
で表されるイソキノリニル基、
式(基-xiv):
で表されるイソキノリニル含有基、
式(基-xv):
で表される1H-イミダゾリル基、
式(基-xvi):
で表される1H-イミダゾリル含有基、
式(基-xvii):
で表される1H-インダゾリル基、
式(基-xviii):
で表される1H-インダゾリル含有基、
式(基-xix):
で表されるプリニル基(9H-プリニル基)、および
式(基-xx):
で表されるプリニル含有基(9H-プリニル含有基)から選択されていてもよく、
B'は、例えばC1〜C20直鎖状または分枝状アルキレン基であってもよく、
Rb'は、例えば水素、アルキル、アミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択されていてもよく、
Rc'は、例えば水素およびアルキルからなる群から選択されていてもよく、
Rd'は、例えば水素、アルキルおよびアラルキルからなる群から選択されていてもよい。
式I'の化合物のB'基は、式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物の対応するB基で置き換え可能であってもよい。加えて、式I'の化合物のRb'、Rc'またはRd'基は、式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物の対応するRb、RcまたはRd基で置き換え可能であってもよい。同様に、本明細書に記載されている他の分子または化合物の対応する基で置き換え可能であってもよい例えばB"、Rb"、Rc"またはRd"等の他の基で置き換え可能であってもよい。
または
それらの範囲を定める窒素原子をともに含むR3'およびR4'は、複素環式窒素含有環状基を形成してもよく、窒素含有環状基は、例えば、A)単一環に、例えば酸素原子、硫黄原子およびさらなる窒素原子からなる群から選択される原子を場合によっては有していてもよい5から7個の原子(環部内)の窒素原子を含む単一環、およびB)縮合環構造に、酸素原子、硫黄原子およびさらなる窒素原子からなる群から選択されていてもよい原子を場合によっては有していてもよい8から16個の原子(環部内)の窒素原子を含む縮合環構造からなる群から選択されていてもよく、複素環式窒素含有環状基は、場合によっては、例えば低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルコキシアルキル、低級アルコキシ、カルボキシル(低級アルキル)、N-[カルボキシル-(低級アルキル)]アミノ、N,N-ジ(カルボキシル-低級アルキル)アミノ、アミノ、ジ-(低級アルキル)アミノ、ハロゲンおよび過フルオロ-(低級アルキル)からなる群から選択される置換基を有していてもよく、
またはnが0の場合は、
R3'は、例えば、
場合によっては置換されていてもよい6から10の環状炭素のアリール基、
7から30個の炭素を含んでいてもよく、アリール基は場合によっては置換されていてもよく、アラルキルのアルキル部は、場合によっては、例えば少なくとも2個の炭素でXから分離されたエーテルを含んでいてもよいアラルキル基、
ヘテロアリール環の炭素においてXに直接結合するか、場合によっては、例えばヘテロアリール環の炭素に結合していてもよい基B"によってXに結合していてもよく、ピリジニル、1H-インドリル、XまたはB"に結合しない炭素において基Rc"で置換されたキノリル、ピペリジン環の1-位において基Rd"で置換されたピペリジニル、1H-ピロール[2,3-b]ピリジニル、イソキノリニル、1H-イミダゾリル、1H-インダゾリルおよび9H-プリニルからなる群から選択されていてもよいヘテロアリール基からなる群から選択されていてもよく、
B"は、1から4個の炭素原子のアルキル基で場合によっては置換されていてもよいC1〜C20直鎖状アルキレン基であってもよく、
Rc"は、例えば水素およびC1〜C20アルキルからなる群から選択されていてもよく、
Rd"は、例えば水素、C1〜C20アルキルおよびC7〜C20アラルキルからなる群から選択されていてもよく、
ただし、R3'基において、Xに結合した炭素原子は、ヒドロキシル基およびアリール基の両方を含まず、またはヒドロキシル基およびヘテロアリール基の両方を含まない。
一態様において、本発明の化合物の例は、例えば、xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方は水素であり、他方はアルキルであり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の化合物は、例えば、xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方は水素であり、他方はアルキルであり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の化合物は、例えば、xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方は水素であり、他方はアルキルであり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の例示的な化合物は、xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方は水素であり、他方はアルキルであり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の他の例示的な化合物は、xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の化合物は、例えばxは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の化合物は、例えばxは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは0である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明の例示的な化合物は、xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物、またはxは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは1である構造Iの置換ピペリジン化合物であってもよい。
他の態様において、本発明は、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよい医薬組成物、あるいはより詳細には、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよく、その担体は、例えば、注射に好適な無菌等張水溶液を含んでいてもよい医薬組成物、あるいはさらにより詳細には、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよく、その担体は、例えば、注射に好適な無菌等張水溶液を含んでいてもよく、その溶液は緩衝塩を含んでいてもよい医薬組成物、あるいは例えば、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよく、その担体は、注射に好適な無菌等張水溶液を含んでいてもよく、その溶液は、例えばリン酸緩衝塩水を含んでいてもよい医薬組成物を提供する。
他の実施形態において、本発明は、さらに、(少なくとも1つの)置換ピペリジン化合物(および/またはその薬学的に許容できる塩)およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよく、その担体は、注射に好適な無菌等張水溶液を含んでいてもよく、その溶液は、リン酸緩衝塩水等の緩衝塩を含んでいてもよい医薬組成物に関する。
他の態様において、本発明は、さらに、構造IまたはI'の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療方法、あるいはより詳細には、本明細書に記載されている化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療方法に関する。
他の態様において、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物、または本明細書に記載されている化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療の(ための)方法を提供する。
他の実施形態において、本発明は、構造IまたはI'の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよく、本明細書に記載されている化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の癌の治療方法を提供する。
他の態様において、本発明は、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよい医薬組成物、あるいはより詳細には、本明細書に記載されている化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよい医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の癌の治療方法を含む。
他の態様において、本発明は、構造IまたはI'の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよく、本明細書に記載されている化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の黄斑変性症の治療方法を含む。
他の態様において、本発明は、構造IまたはI'の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよい医薬組成物、あるいは本明細書に記載されている化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含んでいてもよい医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含んでいてもよい哺乳類の黄斑変性症の治療方法に関する。
他の態様において、本発明は、構造IまたはI'の化合物を細胞に投与することを含んでいてもよく、その細胞は哺乳類に存在してもよい細胞における酵素rhoキナーゼを阻害する方法を含む。さらなる態様において、本発明は、本明細書に記載されている発明の化合物を細胞に投与することを含んでいてもよく、その細胞は、哺乳類に存在してもよい細胞における酵素rhoキナーゼを阻害する方法を含む。
本発明は、また、本明細書に定められている疾患(または疾患を有する固体)の治療のための、本明細書に記載されている化合物の使用に関する。
本発明は、さらに、本明細書に定められている疾患または状態の治療のための医薬組成物の製造における、本明細書に記載されている化合物の使用に関する。
I'の式Iで表される構造を有する化合物の医薬組成物等の化合物および組成物は、すべてのシスおよびトランス環置換異性体、すべての光学異性体およびエピマー、ならびに光学異性体、ラセミ混合物、ジアステレオ異性体、鏡像異性体、回転異性体、鏡像および配座異性体の混合物、ならびに薬学的に許容できる塩のような酸性塩等の式IまたはI'の化合物の塩の形で生じてもよい異性体を含む空間的または幾何学的に関連するすべての異性体を含んでいてもよい。
本発明の一態様において、本発明の例示的な化合物は、4-アミノアルキルピペリジンアミドであって、ピペリジン-1-窒素はアミドのカルボニルに結合していてもよく、このアミド化合物は、式IIで表され、例えば、xは0であってもよく、Xは炭素Cであってもよく、aは1であってもよく、Aは炭素Cであってもよく、nは0であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R2AおよびR3は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である4-アミノアルキルピペリジンアミド、またはその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明のさらなる例示的な化合物は、4-(アミノアルキル)ピペリジンを導入した尿素であって、ピペリジン-1-窒素は、尿素のカルボニルに結合していてもよく、この尿素化合物は、式IIIで表され、xは0であってもよく、Xは炭素Cであってもよく、aは1であってもよく、Aは炭素Cであってもよく、nは1であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R2A、R3およびR4は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である尿素、およびその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明のさらなる例示的な化合物は、4-(アミノアルキル)-1-(スルホニル)ピペリジンであって、ピペリジン-1-窒素は、スルホニル基の硫黄に結合していてもよく、このスルホニルピペリジン化合物は、式IVで表され、xは1であってもよく、Xは硫黄Sであってもよく、aは1であってもよく、Aは炭素Cであってもよく、nは0であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R2AおよびR3は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である4-(アミノアルキル)-1-(スルホニル)ピペリジン、およびその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明のさらなる例示的な化合物は、4-(アミノアルキル)-1-ピペリジンスルファミドであって、ピペリジン-1-窒素は、スルホニル基の硫黄に結合していてもよく、このスルファミド化合物は、式Vで表され、xは1であってもよく、Xは硫黄Sであってもよく、aは1であってもよく、Aは炭素Cであってもよく、nは1であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R2A、R3およびR4は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である4-(アミノアルキル)-1-ピペリジンスルファミド、およびその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明の他の例示的な化合物は、4-ヒドラジニルピペリジンアミドであって、ピペリジン-1-窒素は、アミドのカルボニルに結合していてもよく、このアミド化合物は、式VIで表され、xは0であってもよく、Xは炭素Cであってもよく、aは0であってもよく、Aは窒素Nであってもよく、nは0であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2およびR3は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である4-ヒドラジニルピペリジンアミド、およびその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明のさらなる例示的な化合物は、4-ヒドラジニルピペリジンを導入していてもよい尿素であって、ピペリジン-1-窒素は、尿素のカルボニルに結合していてもよく、この尿素化合物は、式VIIで表され、xは0であってもよく、Xは炭素Cであってもよく、aは0であってもよく、Aは窒素Nであってもよく、nは1であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R3およびR4は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である尿素、およびその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明のさらなる例示的な化合物は、4-ヒドラジニル-1-(スルホニル)ピペリジンであって、ピペリジン-1-窒素は、スルホニル基の硫黄に結合していてもよく、このスルホニルピペリジン化合物は、式VIIIで表され、xは1であり、Xは硫黄Sであってもよく、aは0であってもよく、Aは窒素Nであってもよく、nは0であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2およびR3は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である4-ヒドラジニル-1-(スルホニル)ピペリジン、およびその薬学的に許容できる塩である。
本発明の他の態様において、本発明のさらなる例示的な化合物は、4-(ヒドラジル)-1-ピペリジンスルファミドであって、ピペリジン-1-窒素は、スルホニル基の硫黄に結合していてもよく、このスルファミド化合物は、式IXで表され、xは1であってもよく、Xは硫黄Sであってもよく、aは0であってもよく、Aは窒素Nであってもよく、nは1であってもよく、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1g、R1h、R2、R3およびR4は、式Iについて上記に定められた通りであってもよい式Iの化合物である4-(ヒドラジル)-1-ピペリジンスルファミド、およびその薬学的に許容できる塩である。
式Iのピペリジン環上の環位2、3、5および6における置換基R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hに関連する置換パターンに関し、かつ式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIおよびIXで表される本発明の他の態様に関して、以下I-(i)からI-(xvii)の実施形態を得る。
I-(i):すべて水素の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の一実施形態において、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよい。
I-(ii):2位における1個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であってもよく、R1cおよびR1dの一方のみが水素であってもよく、、R1cおよびR1dの他方は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1cおよびR1dについて上記に定めた単一の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の2位(または光学的鏡像異性6位)を占めていてもよく、エキトリアルまたはアキシアル置換基を含んでいてもよく、すべての鏡像異性鏡像を含んでいてもよく、ピペリジンの4位における置換基に対して、エキトリアルまたはアキシアルであってもよい。
I-(iii):3位における1個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1aおよびR1bの一方のみが水素であってもよく、R1aおよびR1bの他方は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1aおよびR1bについて上記に定めた単一の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の3位(または光学的鏡像異性5位)を占めていてもよく、エキトリアルまたはアキシアル置換基を含み、すべての鏡像異性鏡像を含み、ピペリジンの4位における置換基に対して、エキトリアルまたはアキシアルである。
I-(iv):2位における2個の置換基(ジェミナル)の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1cおよびR1dの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1cおよびR1dについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の2位(または鏡像的には、光学的に鏡像異性の6位)をジェミナルに占めていてもよく、2位においてエキトリアルまたはアキシアル置換基を含んでいてもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何学異性体を含むことができる。
I-(v):3位における2個の置換基(ジェミナル)の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1aおよびR1bの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1aおよびR1bについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の3位(または鏡像的には、光学的に鏡像異性の5位)をジェミナルに占めていてもよく、3位においてエキトリアルまたはアキシアル置換基を含んでいてもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含むことができる。
I-(vi):1個が2位で1個が3位の2個の置換基(オルト)の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1aおよびR1bの一方のみが水素であってもよく、R1aおよびR1bの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1cおよびR1dの一方のみが水素であってもよく、R1cおよびR1dの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1aおよびR1bについて上記に定めた1個の非水素置換基は、3位を占めていてもよく、R1cおよびR1dについて上記に定めた1個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の2位(または鏡像的には、それぞれの光学的鏡像異性位置5および6)を占めていてもよい。2個の置換基は、互いにオルトであってもよい。それら2個の置換基は、ともにエキトリアル、ともにアキシアル、または1個がエキトリアルで1個がアキシアルとして幾何学的に関連していてもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(vii):1個が2位で1個が5位の2個の置換基(パラ)の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1eおよびR1fの各々は、水素であってもよく、R1cおよびR1dの一方のみが水素であってもよく、R1cおよびR1dの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1hおよびR1gの一方のみが水素であってもよく、R1hおよびR1gの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1cおよびR1dについて上記に定めた1個の非水素置換基は、2位を占め、R1hおよびR1gについて上記に定めた1個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の5位(または鏡像的には、それぞれの光学的鏡像異性位置6および3)を占めていてもよい。2個の置換基は、六員環において互いにパラであってもよい。それら2個の置換基は、ともにエキトリアル、ともにアキシアル、または1個がエキトリアルで1個がアキシアルとして幾何学的に関連していてもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(viii):1個が2位で1個が6位の2個の置換基(メタ)の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1eおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1cおよびR1dの一方のみが水素であってもよく、R1cおよびR1dの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1eおよびR1fの一方のみが水素であってもよく、R1eおよびR1fの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1cおよびR1dについて上記に定めた1個の非水素置換基は、2位を占めていてもよく、R1eおよびR1fについて上記に定めた1個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の6位[鏡像的には、2および6位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、六員環において互いにメタであってもよい。それら2個の置換基は、ともにエキトリアル、ともにアキシアル、または1個がエキトリアルで1個がアキシアルとして幾何学的に関連していてもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(ix):1個が3位で1個が5位の2個の置換基(メタ)の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1c、R1b、R1eおよびR1fの各々は、水素であってもよく、R1aおよびR1bの一方のみが水素であってもよく、R1aおよびR1bの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1gおよびR1hの一方のみが水素であってもよく、R1gおよびR1hの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1aおよびR1bについて上記に定めた1個の非水素置換基は、3位を占めていてもよく、R1gおよびR1hについて上記に定めた1個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の5位[鏡像的には、3および5位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、六員環において互いにメタであってもよい。それら2個の置換基は、ともにエキトリアル、ともにアキシアル、または1個がエキトリアルで1個がアキシアルとして幾何学的に関連していてもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(x):2個が2位で1個が3位の3個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1c、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1aおよびR1bの一方のみが水素であってもよく、R1aおよびR1bの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1cおよびR1dの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1aおよびR1bについて上記に定めた1個の非水素置換基は、3位を占めていてもよく、R1cおよびR1dについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の2位[鏡像的には、3および5位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよく、2,2および6,6位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、2位においてジェミナルであってもよく、1個の置換基は、六員環における2個のジェミナル置換基の各々に対してオルトであってもよい。R1aおよびR1bにおける単一の置換基は、アキシアルであってもエキトリアルであってもよく、それぞれR1cはアキシアルまたはエキトリアルであってもよく、R1dはエキトリアルまたはアキシアルである。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xi):2個が2位で1個が5位の3個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1eおよびR1fの各々は、水素であってもよく、R1gおよびR1hの一方のみが水素であってもよく、R1gおよびR1hの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1cおよびR1dの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1gおよびR1hについて上記に定めた1個の非水素置換基は、5位を占めていてもよく、R1cおよびR1dについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の2位[鏡像的には、5および3位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよく、2,2および6,6位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、2位においてジェミナルであってもよく、1個の置換基は、六員環における2個のジェミナル置換基の各々に対してパラである。R1gおよびR1hにおける単一の置換基は、アキシアルであってもエキトリアルであってもよく、それぞれ、R1cはアキシアルまたはエキトリアルであってもよく、R1dはエキトリアルまたはアキシアルであってもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xii):2個が2位で1個が6位の3個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1a、R1b、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1eおよびR1fの一方のみが水素であってもよく、R1eおよびR1fの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1cおよびR1dの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1eおよびR1fについて上記に定めた1個の非水素置換基は、6位を占めていてもよく、R1cおよびR1dについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の2位[鏡像的には、2,2,6および2,6,6位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、2位においてジェミナルであり、1個の置換基は、六員環における2個のジェミナル置換基の各々に対してメタであってもよい。R1eおよびR1fにおける単一の置換基は、アキシアルであってもエキトリアルであってもよく、それぞれ、R1cはアキシアルまたはエキトリアルであってもよく、R1dはエキトリアルまたはアキシアルであってもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xiii):1個が2位で2個が3位の3個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1cおよびR1dの一方のみが水素であってもよく、R1cおよびR1dの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1aおよびR1bの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1cおよびR1dについて上記に定めた1個の非水素置換基は、2位を占めていてもよく、R1aおよびR1bについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の3位[鏡像的には、2,3,3および6,5,5位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、3位においてジェミナルであり、1個の置換基は、六員環における2個のジェミナル置換基の各々に対してオルトであってもよい。R1cおよびR1dにおける単一の置換基は、アキシアルであってもエキトリアルであってもよく、それぞれ、R1aはアキシアルまたはエキトリアルであってもよく、R1bはエキトリアルまたはアキシアルである。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xiv):1個が5位で2個が3位の3個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1c、R1d、R1eおよびR1fの各々は、水素であってもよく、R1gおよびR1hの一方のみが水素であってもよく、R1gおよびR1hの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1aおよびR1bの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1gおよびR1hについて上記に定めた1個の非水素置換基は、5位を占めていてもよく、R1aおよびR1bについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の3位[鏡像的には、3,3,5および5,5,3位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、3位においてジェミナルであってもよく、1個の置換基は、六員環における2個のジェミナル置換基の各々に対してメタであってもよい。R1gおよびR1hにおける単一の置換基は、アキシアルであってもエキトリアルであってもよく、それぞれ、R1aはアキシアルまたはエキトリアルであってもよく、R1bはエキトリアルまたはアキシアルである。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xv):1個が6位で2個が3位の3個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1c、R1d、R1gおよびR1hの各々は、水素であってもよく、R1eおよびR1fの一方のみが水素であってもよく、R1eおよびR1fの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1aおよびR1bの各々は、上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1eおよびR1fについて上記に定めた1個の非水素置換基は、6位を占めていてもよく、R1aおよびR1bについて上記に定めた2個の非水素置換基は、式Iaのピペリジン環の3位[鏡像的には、3,3,6および5,5,2位は、関連する光学的鏡像異性位置であってもよい]を占めていてもよい。2個の置換基は、3位においてジェミナルであってもよく、1個の置換基は、六員環における2個のジェミナル置換基の各々に対してパラであってもよい。R1eおよびR1fにおける単一の置換基は、アキシアルであってもエキトリアルであってもよく、それぞれ、R1aはアキシアルまたはエキトリアルであってもよく、R1bはエキトリアルまたはアキシアルである。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xvi):2、3、5および6位のそれぞれに1個の4個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1aおよびR1bの一方のみが水素であってもよく、R1cおよびR1dの一方のみが水素であってもよく、R1eおよびR1fの一方のみが水素であってもよく、R1gおよびR1hの一方のみが水素であってもよく、R1aおよびR1bの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1cおよびR1dの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1eおよびR1fの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではなく、R1gおよびR1hの他方は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。この態様において、R1cおよびR1dの各々について上記に定めた1個の非水素置換基は、2位を占めていてもよく、R1aおよびR1bの各々について上記に定めた1個の非水素置換基は、3位を占めていてもよく、R1gおよびR1hの各々について上記に定めた1個の非水素置換基は、5位を占めていてもよく、R1eおよびR1fの各々について上記に定めた1個の非水素置換基は、式Iaのピペリジンリングの6位を占めていてもよい。本実施形態において、4個の置換基のいずれもが、ピペリジン環上でアキシアルまたはエキトリアルであってもよい。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
I-(xvii):2、2、3および3位のそれぞれに1個の4個の置換基の例
式Iの化合物、または式I'、II、III、IV、V、VI、VII、VIIIまたはIXの化合物、およびその薬学的に許容できる塩の他の実施形態において、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であってもよく、R1a、R1b、R1cおよびR1dの各々は上記に定められた通りであってもよいが、水素ではない。本実施形態は、すべての鏡像異性的鏡像、および4位に対する幾何異性体を含む。
式Iの化合物において、水素以外の置換基が、ピペリジン環の2位または3位に位置するときは、低級アルキル、低級アルキレニル、低級シクロアルキルアルキル、低級アルコキシアルキル、アラルキル、PEGおよびMPEGからなる群から選択されていてもよい。
より詳細には、本発明によれば、式(基-i)の基は、式(基-i-a)で表される4-ピリジニル、または式(基-i-b)で表される3-ピリジニルであってもよい。
式(基-ii)の基は、式(基-ii-a)で表される3-ピリジニルメチル、式(基-ii-b)で表される4-ピリジニルメチル、または式(基-ii-c)で表される2-ピリジニルエチルであってもよい。
式(基-iii)の基は、式(基-iii-a)で表される5-1H-インドリルであってもよい。
式(基-iv)の基は、式(基-iv-a)で表される2-(3-1H-インドリル)エチルであってもよい。
式(基-v)の基は、式(基-v-a)で表される3-キノリニル、式(基-v-b)で表される5-キノリニル、または式(基-v-c)で表される4-(2-メチルキノリニル)であってもよい。
式(基-viii)の基は、式(基-viii-a)で表される4-(N,N-ジメチルアミノフェニル)メチルであってもよい。
式(基-ix)の基は、式(基-ix-a)で表される4-(N-ベンジルピペリジニル)であってもよい。
式(基-xi)の基は、式(基-xi-a)で表される4-(1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル)であってもよい。
式(基-xiii)の基は、式(基-xiii-a)で表される8-イソキノリニルであってもよい。
式(基-xv)は、式(基-xv-a)で表される2-1H-イミダゾリルであってもよい。
式(基-xvii)の基は、式(基-xvii-a)で表される5-(1H-インダゾリル)であってもよい。
式(基-xix)の基は、式(基-xix-a)で表される6-(9H-プリニル)、およびその薬学的に許容できる塩、例えば本明細書に用いられる式では「HCl」で表すことができるHCl塩であってもよい。
本発明の特定の態様において、式(I)の例示的な化合物を参照すると、AがCHであり、Xが炭素であり、xが0であり、nが0であるときは、式IIで表される4-アミノメチルピペリジン-1-イルアミドが態様として得られ、R1、R2およびR3は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。より詳細には、本発明のこの態様の化合物は、II(a)において、R1はHであり、R2はプロピルであり、R3は2-ピリジニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)である式IIの化合物を含んでいてもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)の例示的な化合物を参照すると、AがCHであり、Xが炭素であり、xが0であり、nが1であるときは、式IIIで表される4-アミノメチルピペリジン-1-イル(R3R4)尿素が他の態様として得られ、R1、R2、R3およびR4は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)の他の例示的な化合物を参照すると、AがCHであり、Xが硫黄であり、xが1であり、nが0であるときは、式IVで表されるスルホニルピペリジン、例えば4-アミノメチル-1-(R3-スルホニル)ピペリジンがさらなる態様として得られ、R1、R2およびR3は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。より詳細には、本発明のこの態様の化合物は、IV(a)において、R1はHであり、R2はn-プロピルであり、R3は5-イソキノリニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)であり、IV(b)において、R1はHであり、R2はメチルであり、R3は5-イソキノリニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)である式IVの化合物を含んでいてもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)のさらなる例示的な化合物を参照すると、AがCHであり、Xが硫黄であり、xが1であり、nが1であるときは、式Vで表されるスルファミド、例えば4-アミノメチル-1-ピペリジン(R3R4)スルファミドがさらなる態様として得られ、R1、R2、R3およびR4は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)のさらなる例示的な化合物を参照すると、AがNであり、Xが炭素であり、xが0であり、nが0であるときは、式VIで表されるアミド、例えば4-ヒドラジニルピペリジン-1-イルアミドが他の態様として得られ、R1、R2およびR3は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩である。より詳細には、本発明のこの態様の化合物は、VI(a)において、R1はHであり、R2はn-オクチルであり、R3は4-ピリジニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)であり、VI(b)において、R1はHであり、R2はn-プロピルであり、R3は4-ピリジニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)であり、VI(c)において、R1はHであり、R2はn-オクチルであり、R3は3-ピリジニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)であり、VI(d)において、R1はHであり、R2はメチルであり、R3は3-ピリジニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)である式VIの化合物を含んでいてもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)のさらなる例示的な化合物を参照すると、AがNであり、Xが炭素であり、xが0であり、nが1であるときは、式VIIで表される尿素、例えば4-ヒドラジニルピペリジン-1-イル(R3R4)尿素がさらなる態様として得られ、R1、R2、R3およびR4は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)の例示的な化合物を参照すると、AがNであり、Xが硫黄であり、xが1であり、nが0であるときは、式VIIIで表されるスルホニルピペリジン、例えば4-ヒドラジニル-1-(R3-スルホニル)ピペリジンが他の態様として得られ、R1、R2およびR3は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。より詳細には、本発明のこの態様の化合物は、VIII(a)において、R1はHであり、R2はn-オクチルであり、R3は5-イソキノリニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)であり、VIII(b)において、R1はHであり、R2はn-プロピルであり、R3は5-イソキノリニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)であり、VIII(c)において、R1はHであり、R2はメチルであり、R3は5-イソキノリニル(場合によっては塩化水素塩または二塩化水素塩として)である式VIの化合物を含んでいてもよい。
本発明の他の特定の態様において、式(I)を参照すると、AがNであり、Xが硫黄であり、xが1であり、nが1であるときは、式IXで表されるピペリジンスルファミド、例えば4-ヒドラジニル-1-ピペリジン(R3R4)スルファミドがさらなる態様として得られ、R1、R2、R3およびR4は、上記に定める通り、およびその薬学的に許容できる塩であってもよい。
本発明の化合物のさらなる例としては、構造式AM-1からAM-39およびH-1からH-12で表される以下の化合物、ならびにその薬学的に許容できる塩が挙げられる。
一態様において、アルキル基は、直鎖状、分枝状または環状アルキル基であってもよいC1〜C30アルキル基を指していてもよく、その例としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、オクチル、3-エチルヘキシル、4-エチル-ヘキシル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、シクロヘキシル、シクロプロピル、オクタデシル、テトラデカニル、ヘキサデカニル、イコサニル、ドコサニル、テトラコサニル、ヘキソコサニルおよびオクタコサニルが挙げられる。
一態様において、アルキル置換基は、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルおよびデシル等1から10個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキル、さらには1から4個の炭素原子を有するアルキルであってもよい。
一態様において、シクロアルキル置換基は、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチル等のような3から7個の炭素原子を有するものであってもよい。
一態様において、シクロアルキルアルキル基は、例えばシクロプロピルメチル、2-シクロプロピルエチル、3-シクロプロピルプロピル、2-シクロヘキシルエチル、4-シクロプロピルブチル、2-メチルシクロペンチルメチル、4-エチルシクロヘキシルメチル、2-(4-エチルシクロヘキシル)エチル、4-イソプロピルシクロヘキシルメチル、4-デカリニルシクロヘキシルメチル、2-ビシクロ[4.4.0]デシルメチル、2,2-ジメチルシクロプロピルメチル、2,3-ジメチルシクロプロピルメチル、3-(4-メトキシエトキシシクロヘキシル)プロピルおよび4-(4-エトキシシクロヘキシル)メチルシクロヘキシルメチル等のC4〜C30シクロアルキルアルキル基のようなアルキルシクロアルキルアルキル基およびアルキルオキシシクロアルキルアルキル基等のシクロアルキル環置換シクロアルキルアルキル基であってもよい。
一態様において、シクロアルキルアルキルは、例えばシクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシルメチル、シクロヘプチルメチル、シクロプロピルエチル、シクロペンチルエチル、シクロヘキシルエチル、シクロヘプチルエチル、シクロプロピルプロピル、シクロペンチルプロピル、シクロヘキシルプロピル、シクロヘプチルプロピル、シクロプロピルブチル、シクロペンチルブチル、シクロヘキシルブチル、シクロヘプチルブチル、シクロプロピルヘキシル、シクロペンチルヘキシル、シクロヘキシルヘキシルおよびシクロヘプチルヘキシル等のような、3から7個の炭素原子を有する上述のシクロアルキル基と、1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキル(例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチルおよびヘキシル等)であるアルキル成分とを含んでいてもよい。
一態様において、スピロシクロアルキル基は、例えば、共通結合環状炭素と三員環を形成するエチリデン基、共通結合環状炭素と四員環を形成するプロピリデン基、および共通結合環状炭素と五員環を形成するブチリデン基等の、それらが共通に結合する環内の同一炭素原子にアルキレン基の末端が結合しているC2〜C5架橋アルキレン基であってもよい。場合によっては、スピロ基は、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級チオアルキル基、または低級アルキルアミノ基で置換されていてもよい。
一態様において、アルケニル基は、環状基が、飽和もしくは不飽和、かつ/または直鎖状または分枝状であってもよい低級アルキル基、シクロアルキル含有アルケニル基で置換されていてもよい直鎖状、分枝状、環状であってもよく、その例としてはアリル、cis-ブト-2-エニル、trans-ブト-2-エニル、cis-およびtrans-ペント-2-エニル、ペント-3-エニル、イソペンテニル、ヘキス-2-エニル、ヘキス-3-エニル、イソヘキセニル、ヘプト-6-エニル、オクト-2-エニル、イソプロペニルヘキシル、4-イソプロペニルシクロヘキシルメチル、9-ヘキサデセニル、cis-9-オクタデセニル、11-オクタデセニル、cis,cis-9,12-オクタデセニル、9,12,15-オクタデカトリエニル、6,9,12-オクタデカトリエニル、9,11,13-オクタデカトリエニル、8,11-イコサジエニル、5,8,11-イコサトリエニル、5,8,11,14-イコサテトラエニル、cis-15-テトラコセニルおよびカロテニルが挙げられるシスおよび/またはトランス二重結合を含んでいてもよいC3〜C40アルケニル基を含む1から11の二重結合を含んでいてもよい。
一態様において、アルコキシ含有アルキル基は、アルキル基は上記に定められた通りであり、メトキシメチル、2-メトキシエチル、2-エトキシエチル、3-エトキシプロピルおよび2-(2-(2-(2-メトキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル等の、1から6個の酸素原子および2から30個の炭素原子を含んでいてもよい基であってもよい。
一態様において、2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基は、2から約30個の酸素原子を含むポリ(2-オキシエチル)オキシエチル基等のPEG基ポリエーテルであってもよく、PEG基は、例えば2-エトキシエチル、2-(2-メトキシエチル)オキシエチル、4-メトキシシクロヘキシルメチル、10-メトキシ-5,8-ジオキシデク-2-エニル、および3から30個の酸素原子を含む2-(オメガ-メトキシ-(ポリオキシエチル)オキシエチル基等の、水酸基(PEG-OH)またはメトキシ基(PEG-OMe)またはエトキシ基(PEG-OEt)で終端していてもよい。
一態様において、アラルキル基は、アリール基およびアルキル成分を含んでいてもよく、アルキルは、例えば、ベンジル、1-フェニルエチル、2-フェニルエチル、3-フェニルプロピルおよび4-フェニルブチル等のフェニルアルキル基等の、1から4個の炭素原子を有していてもよい。例示的なアラルキル基は、本明細書に記載されている置換アリール基を含んでいてもよい。
一態様において、場合によっては置換されたフェニル環、および場合によっては置換されたアラルキルの環の置換基は、塩素、臭素、フッ素およびヨウ素を含むハロゲン、上述のアルキル、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、sec-ブトキシ、tert-ブトキシ、ペンチルオキシおよびヘキシルオキシ等のような1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルコキシであってもよいアルコキシ、例えばメチルチオ(CH3S-)、エチルチオ(CH3CH2S-)、プロピルチオ(CH3CH2CH2S-)、イソプロピルチオ、ブチルチオ(CH3CH2CH2CH2S-)、イソブチルチオ、sec-ブチルチオ、tert-ブチルチオ、ペンチルチオ(CH3CH2CH2CH2CH2S-)およびヘキシルチオ(CH3CH2CH2CH2CH2CH2S-)等のような1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルチオであってもよいアルキルチオ、上述のアラルキル、アルキルは、上述の通りであるが、1個またはすべての水素原子が窒素原子で置換されているフッ化アルキル(すなわち、例えばフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、2,2,2-トリフルオロエチルおよび2,2,3,3,3-ペンタフルオロプロピル等のような過フルオロアルキル)、ニトロ、アミノ、シアノおよびアジド等であってもよい。
一態様において、シクロアルキルの場合によっては置換された環、およびシクロアルキルアルキルの場合によっては置換された環の例示的な置換基は、塩素およびフッ素、上述のアルキル、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、sec-ブトキシ、tert-ブトキシ、ペンチルオキシおよびヘキシルオキシ等のような1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルコキシであってもよいアルコキシ、例えばメチルチオ(CH3S-)、エチルチオ(CH3CH2S-)、プロピルチオ(CH3CH2CH2S-)、イソプロピルチオ、ブチルチオ(CH3CH2CH2CH2S-)イソブチルチオ、sec-ブチルチオ、tert-ブチルチオ、ペンチルチオ(CH3CH2CH2CH2CH2S-)およびヘキシルチオ(CH3CH2CH2CH2CH2CH2S-)等のような1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルチオであってもよいアルキルチオ、上述のアラルキル、アルキルは、上述の通りであるが、1個またはすべての水素原子が窒素原子で置換されているフッ化アルキル(すなわち、例えばフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、2,2,2-トリフルオロエチルおよび2,2,3,3,3-ペンタフルオロプロピル等のような過フルオロアルキル)、ニトロ、アミノ、シアノおよびアジド等であってもよい。
一態様において、R3およびR4と、隣接する窒素原子とを組み合わせて形成された複素環基であって、当該複素環は、場合によっては環内に、酸素原子、硫黄原子、または場合によっては置換された窒素原子を有していてもよい複素環基は、例えば、それぞれが場合によっては本明細書に記載されている置換基で置換されている五員環、六員環、五員環に縮合された五員環、六員環に縮合された五員環、および六員環に縮合された六員環からなる群から選択される。R3およびR4と、隣接する窒素原子とを組合せを含む複素環の例としては、1-ピロリジニル、ピペリジノ、1-ピペラジニル、モルフォリノ、チオモルフォリノ、1-イミダゾリル、2,3-ジヒドロチアゾール-3-イル、イミダゾール-2-イル、チアゾール-2-イル、オキサゾール-2-イル、イミダゾリン-2-イル、3,4,5,6-テトラヒドロピリジン-2-イル、3,4,5,6-テトラヒドロピリミジン-2-イル、1,3-オキサゾリン-2-イル、1,3-チアゾリン-2-イル、または場合によってはハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル(例えばフルオロアルキル、クロロアルキル、ブロモアルキル、ヨードアルキル)、ニトロ、アミノ、フェニルおよびアラルキル等のような置換基を有し、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロアルキルおよびアラルキル置換基は上記に定められた通りである場合によっては置換されたベンゾイミダゾール-2-イル、ベンゾチアゾール-2-イルおよびベンゾキサゾール-2-イルが挙げられる。場合によっては置換された窒素原子の置換基は、上述したアルキル、アラルキルおよびハロアルキル等であってもよい。
一態様において、式IのAからその範囲が定められるアミノ基は、2から6個の炭素原子を有するアルカノイル(例えばアセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリルおよびピバロイル等)、ベンゾイル、またはアルカノイル成分が2から4個の炭素原子を有していてもよいフェニルアルカノイル(例えばフェニルアセチル、フェニルプロピオニルおよびフェニルブチリル等)によってアミドとしてアセチル化されてもよい。
一態様において、アルキルアミノは、例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、イソブチルアミノ、sec-ブチルアミノ、tert-ブチルアミノ、ペンチルアミノおよびヘキシルアミノ等の、1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルを有する1個または2個のアルキル成分で置換されてもよいアミノ基を指していてもよい。
一態様において、アシルアミノは、アシル成分が、2から6個の炭素原子を有するアルカノイル、ベンジル、アルカノイルが2から4個の炭素原子を有するフェニルアルカノイルであるアシルアミノ等、例えばアセチルアミノ、プロピオニルアミノ、ブチルアミノ、バレリルアミノ、ピバロイルアミノ、ベンゾイルアミノ、フェニルアセチルアミノ、フェニルプロピオニルアミノおよびフェニルブチリルアミノ等であってもよい。
一態様において、アルキルチオは、例えばメチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオ、sec-ブチルチオ、tert-ブチルチオ、ペンチルチオおよびヘキシルチオ等のような、アルキル成分が1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルであってもよい(チオエーテルとして)硫黄原子に結合したアルキル成分を指すものであってもよい。
一態様において、アラルキルオキシは、例えばベンジルオキシ、1-フェニルエチルオキシ、2-フェニルエチルオキシ、3-フェニルプロピルオキシおよび4-フェニルブチルオキシ等のような、アルキル成分が1から4個の炭素原子を有していてもよいアラルキルエーテルを指すものであってもよい。
一態様において、アラルキルチオは、例えばベンジルチオ、1-フェニルエチルチオ、2-フェニルエチルチオ、3-フェニルプロピルチオおよび4-フェニルブチルチオ等のような、アルキル成分が1から4個の炭素原子を有していてもよい(チオエーテルとして)硫黄原子に結合したアラルキルチオを指すものであってもよい。
一態様において、アルキルカルバモイルは、例えばメチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、エチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、プロピルカルバモイル、ジプロピルカルバモイル、ブチルカルバモイルおよびジブチルカルバモイル等のような、1から4個の炭素原子を有するアルキルで一または二置換されたカルバモイル基を指すものであってもよい。
一態様において、ヒドロキシアルキルは、例えばヒドロキシメチル、2-ヒドロキシエチル、1-ヒドロキシエチル、3-ヒドロキシプロピルおよび4-ヒドロキシブチル等のような、アルキル基が1から6個の炭素原子の直鎖状または分枝状アルキルであってもよいアルコール含有アルキル基を指すものであってもよい。
一態様において、アミノアルキルは、例えばアミノメチル、2-アミノエチル、1-アミノエチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチル、5-アミノペンチルおよび6-アミノヘキシル等のような、アルキルが1から6個の炭素原子の直鎖状または分枝状アルキルであってもよいアミン置換アルキル基を指すものであってもよい。
一態様において、アルキルアミノアルキルまたはジアルキルアミノアルキルは、例えばメチルアミノメチル、ジメチルアミノメイル、エチルアミノメチル、ジエチルアミノメチル、プロピルアミノメチル、ジプロピルアミノメチル、ブチルアミノメチル、ジブチルアミノメチル、2-ジメチルアミノエチルおよび2-ジエチルアミノエチル等のような、アルキルが1から4個の炭素原子を有していてもよい、それぞれモノアルキル置換またはジアルキル置換アミノアルキルを指すものであってもよい。
一態様において、カルバモイルアルキルのアルキルは、例えばカルバモイルメチル、2-カルバモイルエチル、1-カルバモイルエチル、3-カルバモイルプロピル、4-カルバモイルブチル、5-カルバモイルペンチルおよび6-カルバモイルヘキシル等のような、カルバモイルで置換された1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルであってもよい。
一態様において、フタルイミドアルキルのアルキルは、例えばフタルイミドメチル、2-フタルイミドエチル、1-フタルイミドエチル、3-フタルイミドプロピル、4-フタルイミドブチル、5-フタルイミドペンチルおよび6-フタルイミドヘキシル等のような、フタルイミドで置換された1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルであってもよい。
一態様において、アルキレン基は、例えばメチレン(-CH2-)、エチレン(-CH2CH2-)、プロピレンでもありうるトリメチレン(-CH2CH2CH2-)、ブチレンでもあるテトラメチレン(-CH2CH2CH2CH2-)、ペンチレンでもありうるペンタメチレン(-CH2CH2CH2CH2CH2-)、およびヘキシレンでもありうるヘキサメチレン(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)等の、1から6個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキレンであってもよい。
一態様において、アルケニレンは、例えばビニレン、プロペニレン、ブテニレンおよびペンテニレン等の、2から6個の炭素原子および少なくとも1個の-C=C-または二重結合を有する直鎖状または分枝状アルケニレンであってもよい。
一態様において、式IまたはI'および関連する式(例えばII〜IX)のR3(およびR4)において、複素環基は、例えばピリジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン、ピラゾールおよびトリアゾール等のような単環式の複素環基であってもよい。
一態様において、式IまたはI'および関連する式(例えばII〜IX)のR3(およびR4)において、複素環基は、例えば、1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン、1H-ピロロ[3,2-b]ピリジンおよび1H-ピロロ[3,4-b]ピリジンを含むピロロピリジン、1H-ピラゾロ[3,4-b]ピリジンおよび1H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジンを含むピラゾロピリジン、1H-イミダゾ[4,5-b]ピリジンを含むイミダゾピリジン、1H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、1H-ピロロ[3,2-d]ピリミジンおよび1H-ピロロ[3,4-d]ピリミジンを含むピロロピリミジン、1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジンおよびピラゾロ[1,5-a[ピリミジン、1H-ピラゾロ]4,3-d]ピリミジンを含むピラゾロピリミジン、イミダゾール[1,2-a]ピリミジンおよび1H-イミダゾ[4,5-d]ピリミジンを含むイミダゾピリミジン、ピロロ[1,2-a]-1,3,5-トリアジンおよびピロロ[2,1-f]-1,2,4-トリアジンを含むピロロトリアジン、ピラゾロ[1,5-a]-1,3,5-トリアジンを含むピラゾロトリアジン、1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジンを含むトリアゾロピリジン、1,2,4-トリアゾロ[1,5-a]ピリミジン、1,2,4-トリアゾロ[4,3-a]ピリミジンおよび1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-d]ピリミジンを含むトリアゾロピリミジン、シノリン、キナゾリン、キノリン、イソキノリン、ピリド[2,3-c]ピリダジンを含むピリドピリダジン、ピリド[2,3-b]ピラジンを含むピリドピラジン、ピリド[2,3-d]ピリミジンおよびピリド[3,2-d]ピリミジンを含むピリドピリミジン、ピリミド[4,5-d]ピリミジンおよびピリミド[5,4-d]ピリミジンを含むピリミドピリミジン、ピラジノ[2,3-d]ピリミジンを含むピラジノピリミジン、1,8-ナフチリジンを含むナフチリジン、テトラゾロ[1,5-a]ピリミジンを含むテトラゾロピリミジン、チエノ[2,3-b]ピリジンを含むチエノピリジン、チエノ[2,3-d]ピリミジンを含むチエノピリミジン、チアゾロ[4,5-b]ピリジンおよびチアゾロ[5,4-b]ピリジンを含むチアゾロピリジン、チアゾロ[4,5-d]ピリミジンおよびチアゾロ[5,4-d]を含むチアゾロピリミジン、オキサゾロ[4,5-b]ピリジンおよびオキサゾ[5,4-b]ピリジンを含むオキサゾロピリジン、オキサゾロ[4,5-d]ピリミジンおよびオキサゾロ[5,4-b]ピリジンを含むオキサゾロピリジン、オキサゾロ[4,5-d]ピリミジンおよびオキサゾロ[5,4-d]ピリミジンを含むオキサゾロピリミジン、フロ[2,3-b]ピリジンおよびフロ[3,2-b]ピリジンを含むフロピリジン、フロ[2,3-d]ピリニジンおよびフロ[3,2-d]ピリミジンを含むフロピリミジン、2,3-ジヒドロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジンおよび2,3-ジヒドロ-1H-ピロロ[3,2-b]ピリジンを含む2,3-ジヒドロピロロピリジン、2,3-ジヒドロ-1H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンおよび2,3-ジヒドロ-1H-ピロロ[3,2-d]ピリミジンを含む2,3-ジヒドロピロロピリミジン、5,6,7,8-テトラヒドロピイド[2,3-d]ピリミジン、5,6,7,8-テトラヒドロ-1,8-ナフチリジン、5,6,7,8-テトラヒドロキノリン、2,3-ジヒドロ-7-オキソ-1,8-ナフチリジン、および5,6,7,8-テトラヒドロ-7-オキソ-1,8-ナフチリジン等のような縮合環複素環基であってもよい。
複素環基は、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アラルキル、過フルオロアルキル等のハロアルキル、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキル、アジド、カルボキシル(HOOC-)、カルボキシルアルキル、カルバモイル、アルキルカルバモイル、メトキシメチル、メトキシエチル、メトキシプロピル、エトキシメチル、エトキシエチルおよびエトキシプロピル等を含むアルコキシアルキル、ならびに場合によっては置換されたヒドラジンの置換基が、一態様において上記に定められたアルキル、一態様において上記に定められたアラルキル、ニトリルおよびシアノ等を含み、例えばメチルヒドラジノ、エチルヒドラジノおよびベンジルヒドラジン等を含む場合によっては置換されたヒドラジン等の置換基で置換されていてもよい。
本発明の一態様において、「低級アルキル」という用語は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルおよびデシル等の直鎖または分枝状であってもよいC1〜C10アルキルを示す。より詳細には、「低級アルキル」という用語は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルまたはヘキシル等の直鎖または分枝状であってもよいC1〜C6アルキルを示す。ハロゲン化低級アルキル基は、トリフルオロメチル等の過フッ化低級アルキルであってもよい。
「低級アルケニル」という用語は、2-プロペニル、2-ブテニル、2-ペンテニル、2-ヘキセニル、2-メチル-2-プロペニル、3-メチル-2-ブテニル、2-ヘプテニル、2-オクテニル、イソ-オクテニル、2-ノネニルまたは2-デセニル等の二重結合を含むC3〜C10の直鎖または分枝状アルキル基を示す。
「ヘテロアリール基」という用語は、複素環に飽和炭素原子を含まない芳香族複素環基を指す。ヘテロアリール基としては、本明細書に記載されている基-i、基-iii、基-v、基-xi、基-xiii、基-xv、基-xviiおよび基-xixを挙げることができる。
「低級アルカジエニル」という用語は、2,4-ペンタジエニル、2-メチル-2,4-ペンタジエニル、2,4-ヘキサジエニル、2,4-ヘプタジエニル、2,4-オクタジエニル、2,4-ノナジエニルまたは2,4-デカジエニル等の、2個の二重結合を含むC5〜C10の直鎖または分枝状アルキル基を示す。
「低級アルキニル」という用語は、2-プロピニル、2-ブチニル、2-ペンチニル、2-ヘキシニル、4-メチル-2-ペンチニル、2-ヘプチニル、2-オクチニル、2-ノニニルまたは2-デシニル等の、三重結合を含むC3〜C10の直鎖または分枝状アルキル基を示す。
フェニル基がハロゲン、低級アルキルまたは低級アルコキシで置換される場合は、一、二、三置換されてもよく、それらが二または三置換される場合は、置換基は同じであっても異なっていてもよい。
「低級アルコキシ」という用語は、低級アルキル基が結合したオキシを示す。基の例としては、メトキシおよびエトキシが挙げられる。
本発明による化合物は、以下の非限定的方法および反応スキームによる方法等のいくつかの方法によって合成されうる。アミン等の窒素含有基、アルコール等の酸素含有基、およびチオール等の硫黄含有基等に対する有用な保護基は当該技術分野で知られており、例えばGreenら、「Protective Groups in Organic Synthesis」、第2版、John WileyおよびSons、1991で見ることができる。
方法1のスキームを参照すると、本明細書においてピペリジン-4-オン1と称することもあるオキソピペリジンを、市販の(シグマ-アルドリッヒ)試薬を使用するよく知られている方法に従って、ピペリジノニル窒素において、適切な保護基、例えばベンジルオキシカルボニル保護基またはtert-ブチルオキシカルボニル保護基等で保護して、N-保護ピペリジン-4-オン2を得る。N保護ピペリジン-4-オン2を好適に保護されたヒドラジン(有用な化合物としては、例えば、tert-ブチルカルバジド、ベンジルカルバジド等が挙げられる。方法1の工程「1)」における指定のH2NNHZ)と反応させて、生成するヒドラゾンを得る。次いで、例えばヒドラゾンをシアノ水酸化ホウ素ナトリウムおよびp-トルエンスルホン酸または他の好適な還元媒体で処理する等によって、生成したヒドラゾンを還元して、ヒドラジン3を得る。式IにおけるR2に対する先駆体としての例えばホルムアルデヒド、プロピオンアルデヒドおよびオクチルアルデヒド等のアルデヒドにおけるヒドラジン3とカルボニル基との間の還元的アミノ化、あるいは式IにおけるR2に対する先駆体(-R2は、アルデヒドまたはケトンの-CR5R6部を含む)としてのアセトン、メチルおよびエチルケトン等のケトンにおけるヒドラジン3とカルボニル基との間の還元的アミノ化を、酢酸の存在下で、シアノホウ素水酸化ナトリウム等の好適な還元試薬を使用して実施して、保護基Yを含むヒドラジン4を得る。構造4のピペリジニル窒素における保護基Yを除去して、式5の化合物を得る。
方法2のスキームを参照すると、トリエチルアミンの存在下で、アミン5を塩化スルホニル、例えば塩化5-イソキノリンスルホニルおよび塩化3-ピリジンスルホニル等とカップリングさせて、対応するZ保護基含有スルホニルピペリジン6を得、Z保護基の除去によってそれを脱保護して、式VIIIの化合物を得る。
方法3のスキームを参照すると、好適なカップリング条件(例えばカルボジイミドによる脱水)を用いて、アミン5を例えばイソニコチン酸またはニコチン酸等のカルボン酸、あるいはカルボン酸同等物(無水物、N-ヒドロキシスクシンイミドエステルおよび酸塩化物等)とカップリングさせて、対応するZ保護基含有アミド7を得、Z保護基の除去によってそれを脱保護して、式VIのアミド化合物を得る。
方法4のスキームを参照すると、アミン5を4-ピリジンイソシアネートまたはフェニルイソシアネート等のイソシアネートと反応させて、対応するZ保護基含有尿素8を得、Z保護基の除去によってそれを脱保護して、式VIIの尿素化合物を得る。
方法5のスキームを参照すると、4-ヒドロキシメチルピペリジン5中のピペリジン窒素をベンジルオキシカルボニル、tert-ブチルオキシカルボニル等の好適な保護基で保護して、式10の化合物を得、次いで例えばクロロクロム酸ピリジニウム、Dess-Martinペリオジナン等を使用して酸化して、アルデヒド11を得る。グリニャール試薬、銅塩、ボラン等の有機金属試薬をアルデヒド11に添加して、アルコール12を得る。メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、臭化物等により、スルホン酸エステルまたはハライド等のより活性の脱離基に変換することによって、アルコール官能基を活性化させる。好適な脱離基としてのアルコール活性化によって、例えば、塩化メタンスルホニルおよびトリエチルアミンを使用するアルコール12のアシル化した後に、アジドイオンで置換することによって、アジド13を調製する。トリフェニルホスフィンおよび水等の好適な還元剤でアジド13の還元を行って、アミン14を得ることができる。次いで、アミン14のアミン基を保護して、式15の化合物を得る。
方法6のスキームを参照すると、ピペリジンアルコール12を例えばクロロクロム酸ピリジニウム、Dess-Martinペリオジナン等を使用して酸化して、ケトン16を得る。グリニャール試薬、銅塩、ボラン等の有機金属試薬をケトン6に添加して、アルコール17を得る。メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、臭化物等により、スルホン酸エステルまたはハライド等のより活性の脱離基に変換することによって、アルコール官能基を活性化させる。好適な脱離基としてのアルコール活性化によって、例えば、塩化メタンスルホニルおよびトリエチルアミンを使用するアルコール17のアシル化した後に、アジドイオンで置換することによって、アジド18を調製する。トリフェニルホスフィンおよび水等の好適な還元剤でアジド18の還元を行って、アミン19を得ることができる。次いで、アミン19のアミン基を保護して、式20の化合物を得る。
方法7のスキームを参照すると、例えば酢酸の存在下でシアノ水素かホウ素ナトリウムおよび酢酸アンモニウムを使用して、ピペリジンアルデヒド11の還元性アミン化を行って、アミン21を得る。次いで、tert-ブチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル等の好適な保護基でアミノ基21を保護して、式22のアミン保護化合物を得る。
方法8のスキームを参照すると、式23の化合物を、所謂ルテニウム有機金属錯体の第1および第2の生成等の交差オレフィン複分解に知られ、使用される試薬等、またはパラジウム有機金属錯体、ホウ酸等のクロスカップリング反応に使用される有機試薬と反応させ、続いて得られた生成物を、化合物24を得るための還元、酸化、ハロゲン化および他の官能基操作等によって処理することによって式25の化合物を得る。化合物24を脱保護して、式25の化合物を得る。
方法9のスキームを参照すると、トリエチルアミン等の塩基の存在下で、アミン25を塩化5-イソキノリンスルホニル、塩化3-ピリジンスルホニル等と反応させて、スルホニルピペリジン26を得る。次いで、Z基の除去によってアミノ窒素を脱保護して、式IVの化合物を得る。
方法10のスキームを参照すると、カルボジイミド(例えばカルボン酸が使用されるときはジシクロヘキシルカルボジイミド)の存在下等の好適なカップリング条件を用いて、アミン25をイソニコチン酸、ニコチン酸等のカルボン酸、またはカルボン酸塩化物、無水物、活性エステル(例えばN-ヒドロキシスクシンイミドエステル等)等の活性化カルボン酸同等物とカップリングさせて、対応するアミド27を得る。次いで、アミノ窒素をZ基の除去によって脱保護して、式IIの化合物を得る。
方法11のスキームを参照すると、アミン25を4-ピリジンイソシアネート、フェニルイソシアネート等のイソシアネートと反応させて、尿素28を得ることができる。次いで、アミノ窒素をZ基の除去によって脱保護して、式IIIの化合物を得る。
方法12のスキームを参照すると、塩酸1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド[すなわちEDC]および4-(ジメチルアミノ)ピリジン[すなわちDMAP]の存在下で、β-アミノ酸29を例えばMeldrumの酸(マロン酸環状イソプロピリデンエステルである2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-4,6-ジオン)等の2,2-ジアルキル-1,3-ジオキサン-4,6-ジオンと縮合させた後に、約80℃の酢酸エチル等の温溶媒中で環化して、化合物29の窒素のアルファ置換基が、式2c、dで表されるピペリジン-4-オンの2位の置換基になるジオキソピペリジン30を得る。水酸化ホウ素ナトリウムまたはシアノ水酸化ホウ素ナトリウム等の好適な還元剤で化合物30の4-カルボニル基を還元して、式31のヒドロキシラクタム(環状アミド)を得る。例えば化合物30をボラン硫化メチルで処理することによって、アミドまたはラクタムカルボニル基をさらに還元して、ヒドロキシピペリジン32を得ることができる。次いで、アルコール32のヒドロキシル基を例えばクロロクロム酸ピリジニウム、または1,1,1-トリス(アセチルオキシ)-1,1-ジヒドロ-1,2-ベンジオドキソル-3-(1H)-オンとしても知られるDess-Martinペリオジナンで酸化して、R1cおよびR1dは、非限定的例として、Meldrumの酸からのメチル基であるピペリジン4-オン2c、dを得る。
方法13のスキームを参照すると、ジオキソピペリジン30をナトリウムビス(トリメチルシリル)アミド、NaH等の塩基で処理して、安定化アニオンを形成し(エノール化工程)、次いでそれをハロゲン化アルキル等の求電子試薬と反応させて(アルキル化工程)、式33の2,2,5-三置換ジオキソピペリジン化合物を得る。同様の反応条件下で、第2のエノール化/アルキル化手順を実施して、2,2,5,5-四置換ジオキソピペリジン34を得る。化合物34のカルボニルケトン基をNaBH4、NaBH3CN等の適切な還元剤と反応させて、式35のアルコールを得、それをさらに例えばボラン硫化ジメチルで還元して、アルコール36を得る。アルコール36をクロロクロム酸ピリジニウム、Dess-Martinペリオジネート等の好適な酸化剤で酸化して、4-オキソピペリジン2c、d、g、hを得る。
方法14のスキームを参照すると、塩基を使用する手順によって、(Z基等による)N-保護アミノエステル29をエステルのカルボニル基のアルファ位に置換させて、カルボニルのアルファ位の炭素にアニオンを形成した後に、アルキル化剤として作用するハロゲン化アルキル等の求電子試薬で処理して、構造37の化合物を得る。化合物37を塩基およびハロゲン化アルカリ等の他の(または同じ)アルキル化剤で同様に処理して、例えば方法13の条件と同様の条件を用いて化合物38を得ることができる。方法12に記載された条件等の反応条件を用いて、エステル37および38をピペリジンジオン40等のピペリジン類似体、ヒドロキシル含有ラクタム41、4-ヒドロキシピペリジン42およびピペリジン4-オン2a、b、c、dに変換する。例えば、ジオキサン等の混和性溶媒を含む水中で水酸化ナトリウムによりアミノエステル38を加水分解して、アミノ酸39を得る。式29の化合物を塩酸1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミドおよび4-(ジメチルアミノ)ピリジンの存在下でMeldrumの酸と縮合した後に、酢酸エチル等の溶媒中で、例えば約80℃のような室温より高い温度で環化させて、ジオキソピペリジン40を得る。水素化ホウ素ナトリウムまたはシアノ水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤でジオキソピペリジン40におけるケトン基を選択的に還元して、式41の化合物を得る。化合物41のアミノカルボニル基をボラン硫化メチル錯体等の好適な還元剤で還元して、4-ヒドロキシピペリジン42を得る。クロロクロム酸ピリジニウムおよびDess-Martinペリオジナン等の適切な酸化剤を使用して、式42の4-ヒドロキシピペリジンのヒドロキシル基を酸化して、ピペリジン-4-オン2a、b、c、dを得る。
方法15のスキームを参照すると、ピペリジン-1-窒素が例えばZ基で保護されたピペリジン-4-オン2a、b、c、dを、塩化トリメチルシリルメチル、すなわちTMSCH2MgClまたは塩化トリメチルシリルメチルマグネシウムから誘導されるグリニャール試薬等の、ピペリジン4位におけるオレフィンメチレンの導入に好適な試薬で処理し、酢酸(AcOH)とともに式43のアルケンを得る。例えば9-ボラビシクロ[3.3.1]ノナンまたは9-BBNでアルケン43をヒドロホウ素化した後に、過酸化水素(H2O2)等の過酸化物および水酸化ナトリウム(NaOH)のような好適な酸化剤で酸化して、ピペリジンメタノールまたは4-ヒドロキシメチルピペリジン10c、d、g、hを得る。
方法16のスキームを参照すると、N-保護ピペリジン-4-オン(N-保護オキソピペリジンと称することもある)2c、dを方法15の記載と同様にして、塩化(トリメチルシリルメチル)マグネシウムおよび酢酸で処理して、式44のアルケン、すなわち4-メチレンピペリジンを得る。9-ボラビシクロ[3.3.1]ノナン(9-BBN)等のヒドロホウ素化剤および酢酸(AcOH)および酢酸等の酸によりアルケン44をヒドロホウ素化した後に、過酸化水素および水酸化ナトリウム等の好適な酸化剤で酸化して、ピペリジンメタノール10c、dを得る。
方法17のスキームを参照すると、N-保護ピペリジン-4-オン(N-保護オキソピペリジンと称することもある)2a、b、c、dを、例えば塩化トリメチルシリルメチルマグネシウムおよび酢酸によってオレフィン45に変換して、式45のアルケンを得る。アルケン45を9-ボラビシクロ[3.3.1]ノナンまたは9-BBNでヒドロホウ素化した後に、過酸化水素および水酸化ナトリウム等の好適な酸化剤で酸化して、4-ヒドロキシメチルピペリジンまたはピペリジン-4-メタノール10a、b、c、dを得る。
R4が式IのR1aからR1hのいずれかを表す方法18のスキームを参照すると、ピペリジン-4-オンの窒素を、Rpgで表される当該技術分野で知られている好適な保護基(例えばベンジオキシカルボニル等)で保護し、1個の窒素においてブロックされているヒドラジン(例えば例示的な基としてt-ブトキシカルボニルまたはBOC)によってピペリジン-4-オンにおけるカルボニル基を還元アミノ化する。得られた4-(ブロックヒドラジニル)-1-(ブロック)ピペリジンを例えばアルデヒドまたはケトン(例えばシアノ水素化ホウ素ナトリウム)で還元アミノ化して、示されるようにヒドラジン窒素にR2基を導入する。次いで、ピペリジン環の窒素を非ブロック化して、Rpg保護基を除去(例えばパラジウム炭素の存在下で水素化)して、二級アミンを解放する。次いで、遊離二級アミンを有するピペリジンを、脱離基(例えば酸ハロゲン化物)の存在により反応に向けて活性化された、あるいは(カルボジイミド等で)脱水結合されたR3含有スルホニルまたはカルボニル化合物と反応させて、アミドまたはスルホンアミドを形成する。次いで、ヒドラジンのブロック基を除去して(例えばHCl)、式Iによりアミドまたはスルホンアミドを得る。あるいは、遊離2級アミンを有するピペリジンをR3含有イソシアネートと反応させて、尿素を得ることもできる。次いで、ヒドラジンのブロック基を除去して、式Iにより尿素を得る。
R4が式IのR1aからR1hのいずれかを表す方法19のスキームを参照すると、4-ヒドロキシメチルピペリジンの窒素を、Rpgで表される当該技術分野で知られている好適な保護基(例えばベンジオキシカルボニル、ベンジル等)で保護し、アルコールOHを(例えばDCCであるジクロロクロメート、DMSOであるジメチルスルホキシド、およびH3PO4であるリン酸で)酸化して、1-N-保護ピペリジン-4-カルボキサルデヒドを得る。そのアルデヒドを有機金属試薬(例えばグリニャール試薬、銅塩等)で処理して、カルボニル基の炭素にR2基を添加すると同時に、カルボニル基からヒドロキシル基を生成する。ヒドロキシル基を置換(例えばメシレートを生成するための塩化メシルとしての塩化メタンスルホニル、またはトシレートを生成するための塩化トシルとしての塩化トルエンスルホニルによるスルホン酸塩)に向けて活性化させ、次いで、スルホン酸塩をアジドイオンで置換して、アジド-N3を生成する。アジドを還元(例えば触媒水素添加)して、一級アミン基を得、次いで、それを保護基(例えばt-ブトキシカルボニルまたはBOC)で保護する。次いで、場合によっては基R2を分散させ、ピペリジン窒素の保護基を(例えばPd/C、HCOOH、MeOHを使用してベンジルを)除去して、1-H-ピペリジン含有化合物を得ることができる。次いで、遊離二級アミンを有するこのピペリジンを、(例えば酸ハロゲン化物としての)脱離基の存在により反応に向けて活性化された、あるいは(カルボジイミド等と)脱水結合されたR3含有スルホニルまたはカルボニル化合物と反応させて、アミドまたはスルホンアミドを得る。次いで、4-アルキルアミン窒素におけるブロック基(例えばHCl)を除去して、式Iによりアミドまたはスルホンアミドを得る。あるいは、遊離二級アミンを有するピペリジンをR3含有イソシアネートと反応させて、尿素を得る。次いで、4-アルキルアミン窒素におけるブロック基を除去して、式Iにより尿素を得る。
本発明の化合物、または本発明の鏡像異性またはジアステレオ異性化合物については、本発明の化合物を含む鏡像異性富化成分、または本発明の化合物を含むジアステレオ異性富化化合物、または本発明の鏡像異性的に純粋な化合物、または本発明のジアステレオ異性的に純粋な化合物を、例えば本明細書に記載されている方法5および6に従って、例えばキラル有機金属試薬等のキラル試薬を採用することによって調製することができる。あるいは異性体の混合物からの1つの異性体の選択的結晶化を用いるキラル分解技術を用いる、かつ/または当該技術分野で知られている方法および技能を用いて、固体支持体に結合するキラル物質を採用するクロマトグラフィ精製技術を用いることによって得ることができる。
本発明の化合物の調製に有用でありうる様々な置換ピペリジンが知られており、Sigma/Aldrich Chemical Co.等の様々な源から入手可能である。本発明の化合物の調製に有用でありうるピペリジンおよびピペリジンの酸塩としては、塩酸ピペリジン、4-アミノ-1-ベンジルピペリジン、1-アセチル-3-メチルピペリジン、デルタ-バレロラクタムまたは2-ピペリジノン、3-メチルピペリジン、(2S)-2-メチルピペリジン、4-メチルピペリジン、1-ピペリジンアミン、4-ピペリジンアミン、4-ヒドロキシピペリジンまたは4-ピペリジノール、3-ヒドロキシピペリジンまたは3-ピペリジノール、1-ピペリジンカルボニトリルまたは1-シアノピペリジン、3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2,4-ジオンのような3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン等の二環式ピペリジン、1-アザビシクロ[2.2.2]オクタン構造上の炭素原子において酸化されていてもよいキヌクリジン、トロパンまたは8-メチル-8-アザビシクロ[3.2.1]オクタン、(3R)-1-アザビシクロ[2.2.2]オクタン-3-アミン等の1-アザビシクロ[2.2.2]オクタン-3-アミン、(1S、2S、5R)-3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボン酸等の3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボン酸、cis-3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボン酸または(1R,2S,5S)-3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボン酸、(1R,2S,5S)-3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボン酸等の3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-2-カルボン酸、3-キヌクリジノールまたはキヌクリジン-3-オール、トロピノンまたは8-メチル-8-アザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-オン、トロピンまたは(1R,5S)-8-メチル-8-アザビシクロ[3.2.1]オクタン-3-オール、2-メチルキヌクリジン-3-オール、4-メチル-1-プロピルピペリジン、N-メチル-1-ピペリジンカルボキサミド、N,N-ジメチル(2-ピペリジニル)メタンアミン、cis-デカヒドロキノリンまたはtrans-デカヒドロキノリン等のデカヒドロキノリン、ペルヒドロイソキノリンまたはデカヒドロイソキノリン、グルタルイミドまたは2,6-ピペリジンジオン、1-メチル-2-ピペリジンオン、1-メチル-4-ピペリジンオン、1-ピペリジンカルバルデヒド、cis-2,6-ジメチルピペリジン、(2R,6S)-2,6-ジメチルピペリジン、2-エチルピペリジン、3,5-ジメチルピペリジン、cis-3,5-ジメチルピペリジン、trans-3,5-ジメチルピペリジン、シスおよびトランス異性体の混合物としての3,5-ジメチルピペリジン、1-エチルピペリジン、シスおよび/またはトランス異性体の混合物としての2,6-ジメチルピペリジン、4-ピペリジンオンオキシム、1-ニトロソピペリジン、4-ピペリジニルメタンアミンまたは4-アミノメチルピペリジン、3-ヒドロキシ-2-ピペリジンオン、2-ピペリジンメタノールまたは2-ピペリジニルメタノール、4-ピペリジンメタノールまたは4-ピペリジニルメタノール、1-メチル-4-ピペリジノール、3-ピペリジンメタノールまたは3-ピペリジニルメタノール、1-メチル-3-ピペリジノール、(2E)-2-ピペリジニリデンシアンミド、1-ピペリジニルアセトニトリル、1-エチル-4-ピペリジノン、1-エチル-4-メチルピペリジン、2-プウロピルピペリジンまたはラセミ(±)-コニインまたは(+)-コニインまたは(-)-コニイン、4-プロピルピペリジン、5-エチル-2-メチルピペリジン、3-ピペリジンカルボキサミド、1-ピペリジンカルボキサミド、4-ピペリジンカルボキサミド、1-アミノ-2,6-ジメチルピペリジンまたは2,6-ジメチル-1-ピペリジンアミン、1-メチル-4-(メチルアミノ)ピペリジンまたはN,1-ジメチル-4-ピペリジンアミン、N,N-ジメチル-4-ピペリジンアミン、1-アミノ-cis-2,6-ジメチルピペリジンまたは(2R,6S)-2,6-ジメチル-1-ピペリジンアミン、1-エチル-3-ピペリジンアミン、2-ピペリジノエチルアミンまたは2-(1-ピペリジニル)エタンアミン、1-ヒドロキシ-2,6-ピペリジンジオン、2-ピペリジンカルボン酸またはDL-ピペコリン-カルボン酸、イソニペコ酸または4-ピペリジンカルボン酸、3-ピペリジンカルボン酸またはニペコ酸または(±)-ニペコ酸、または(S)-(+)-ニペコ酸もしくは(3S)-3-ピペリジンカルボン酸等の光学的に純粋なその
異性体、四水化物もしくは2-ピペリジンカルボン酸等のDL-ピペコリン酸、DL-ピペコリン酸または2-ピペリジンカルボン酸、D-ピペコリン酸または(2R)-2-ピペリジンカルボン酸、(R)-(-)-ニペコ酸または(3R)-3-ピペリジンカルボン酸、L-ピペコリ酸または(2S)-2-ピペリジンカルボン酸、1-(2-ヒドロキシエチル)ピペリジンまたは2-(1-ピペリジニル)エタノール、1-メチル-2-ピペリジンメタノールまたは(1-メチル-2-ピペリジニル)メタノール、2-ピペリジンエタノールまたは2-(2-ピペリジニル)エタノール、1-エチル-3-ピペリジノール、2-(4-ピペリジニル)エタノール、4-クロロ-1-メチルピペリジン、二塩酸塩もしくは塩酸3-ピペリジンアミン等の酸塩としての3-アミノピペリジン、塩酸(R)-(+)-3-ヒドロキシピペリジンもしくは塩酸(3R)-3-ピペリジノール等の3-ヒドロキシピペリジン、塩酸4-ヒドロキシピペリジンもしくは塩酸4-ピペリジノール等の酸塩のような4-ヒドロキシピペリジン、塩酸3-ヒドロキシピペリジンもしくは塩酸3-ピペリジノール等の酸塩のような3-ヒドロキシピペリジン、1-ピペリジンプロピオニトリルもしくは3-(1-ピペリジニル)プロパンニトリル等のマイケル付加化合物、1-(2-メチル-1-プロペニル)ピペリジン、1-アセチル-4-ピペリジノンまたは1-アセチル-4-ピペリドン、1-プロピル-4-ピペリドンまたは1-プロピル-4-ピペリジノン、1-アセチル-4-メチルピペリジン、1-アセチル-3-メチルピペリジン、1-イソプロピル-4-ピペリジノン、2,6-ジメチル-1-ピペリジンカルバルデヒド、3-(1-ピペリジニル)-1-プロパンアミン、1,4-ジオキサ-8-アザスピロ[4.5]デカン、イソニペコ酸メチルまたは4-ピペリジンカルボン酸メチル、1-(1-ピペリジニル)-2-プロパノール、4-ピペリジニルメタンアミン、4-ピペリジンカルボキサミド、N〜1〜(4-ピペリジニルメチル)-1,2-エタンジアミン、4-(エチルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-イソペンチル-4-ピペリジンカルボキサミド、1-ペンチル-4-ピペリジンカルボキサミド、二塩酸塩もしくは二塩酸1-アザビシクロ[2.2.2]オクト-3-イルアミン等の塩のような3-アミノキヌクリジン、N-フェニルキヌクリジン-3-アミン、塩酸4-(ジメチルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-ヘキシル-4-ピペリジンカルボキサミド、tert-ブチル4(アミノメチル)-1-ピペリジンカルボキシレート、N-ベンジルキヌクリジン-3-アミン、4-アニリノ-4-ピペリジンカルボキサミド、4-(シクロヘキシルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-フェニル-1,3,8-トリアザスピロ[4.5]デカン-4-オン、N-[(4-フェニル-4-ピペリジニル)メチル]アセトアミド、1-フェニル-1,3,8-トリアザスピロ[4.5]デカン-4-オン、N-[(4-フェニル-4-ピペリジニル)メチル]アセトアミド、1-ベンジル-4-(メチルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-ベンジル-4-(エチルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-ベンジル-4-(イソプロピルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-ベンジル-4-(プロピルアミノ)-4-ピペリジンカルボキサミド、1-ベンジル-4-(1-ピロリジニル)-4-ピペリジンカルボキサミド、(1-ベンジル-4-フェニル-4-ピペリジニル)メチルフォルムアミド、4-アニリノ-1-ベンジル-4-ピペリジンカルボキサミド、N-[(1-ベンジル-4-フェニル-4-ピペリジニル)メチル]アセトアミドおよび1-ベンジル-4-(4-トルイジノ)-4-ピペリジンカルボキサミドが挙げられる。
本発明の化合物は、インビトロで、かつインビボで医薬組成物として哺乳類に投与した場合に、神経細胞等の哺乳類細胞においてRhoキナーゼ阻害作用を示すことができ、損傷神経細胞および損傷神経組織または神経部位傷害における軸索再生を誘発するための薬剤として使用できる。「神経傷害部位」という用語は、特に哺乳類における、外傷的神経傷害もしくは外傷的神経損傷、または疾患により引き起こされる神経傷害もしくは神経損傷もしくは神経異常を意味する。一態様において、神経傷害は、正常に存在する神経が、本来の神経の部分を含む少なくとも2つの残存神経部に分断または切断され、分断された神経の一部分の末端における細胞間の距離が、約1マイクロメートルから約1000マイクロメートルである完全分断神経を含むことができる。他の態様において、神経傷害は、正常に存在する神経が、本来の細胞に対する傷害の部位において約1%から約99%分断または切断され、本来の細胞は、神経に対する損傷の部位において約1%から約99%無傷に維持される部分分断神経を含むことができる。神経傷害部位は、単一神経(例えば坐骨神経)または神経路または多数の神経から構成される神経構造体に存在しうる(例えば、神経傷害部位は、脊髄の損傷領域を含むことができる)。神経傷害部位は、中枢神経系(例えば脳および/または脊髄)、または末梢神経系、または修復を必要とする任意の神経領域に存在していてもよい。神経傷害部位は、卒中によって引き起こされた損傷の結果として形成されうる。神経傷害部位は脳に位置し、例えば、正常に接続された脳組織の一部が、少なくとも2つの部分または領域に完全または部分的に切断または分断される外科手術の結果として、あるいは脳腫瘍の外科摘出の結果として、あるいは癌病変の存在、または続くその摘出において起こりうる放射線治療または化学療法等の治療の結果として生じうる脳組織に対する損傷を含んでいてもよい。神経傷害部位は、卒中、パーキンソン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化(ALS)、糖尿病、任意の他の種類の神経変性疾患に起因しうる。
本発明の化合物は、アルツハイマー病の治療に有用でありうる。アルツハイマー病は、進行性神経変性疾患である。ADの特徴的な病理学的特徴は、アミロイドの細胞外堆積の蓄積である。アミロイド溶血斑は、βおよびγセクレターゼによるアミロイド先駆体タンパク質(APP)の処理によって形成されるアミロイドβペプチド(Aβ)の凝集に起因する。炎症を低減することが知られている非ステロイド抗炎症薬(NSAID)を用いた研究によって、炎症とRhoシグナリングの間の関連性が示された(例えば、Zhouら、Science 302、1215-1217、2003を参照)。Rho阻害剤として作用するNAIDのみが、インビボでのAβ形成を低下させることができた。加えて、Rhoキナーゼ阻害剤Y-27632は、インビトロでのアミロイド凝集およびインビボでのアミロイド溶血斑の形成を低減させた。
NAIDは、病理学的Aβを低減し、ADを発生させる危険性を低下させることができる(McGeerら、1990;Lancet 335、1037、Weggenら、2001 Nature 414、212-216を参照)。本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、病理学的Aβを低減する能力をも有する(Zhoeら、Science 302、1215-1217、2003を参照)。重要なことは、Rhoキナーゼ阻害剤は、ADの治療に使用された場合に、NSAIDよりはるかに効果的であることが期待される。
Rhoキナーゼは、軸索溶血斑に存在する神経原線維濃縮体の形成である疾患進行に重要な他の経路に作用する。ADの特徴である神経原線維濃縮体は、微小管関連タンパク質であるタウと呼ばれるタンパク質のリン酸化過剰形態からなる(Leeら、2001 Ann Rev.Neurosci.24:1121を参照)。Rhoは、タウをリン酸化する2つのキナーゼを活性化させる(Sayasら、2002 J.Neurosci.22:6863)。この点において、タウの非リン酸化形態は濃縮体を形成しないため、本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、神経原線維濃縮体形成を低減する。本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、ADの治療での使用だけではなく、タウ濃縮体形成、すなわちタウ症によって病理学的に特徴づけられる前頭痴呆の治療での使用にも有効でありうる。
加えて、高コレステロール血症は、3-ヒドロキシ-3-メチルグルタリルコエンザイムA(HMG-CoA)還元酵素の競合的阻害剤であるスタチンと呼ばれる薬物群で治療される。スタチンは、コレステロールおよび低密度リポタンパク質(LDL)の血清値を低下させることができる。スタチンを摂取した患者において、ADの有病率の著しい低下が確認された(Lancet 2000;356(9242):1627-31)。スタチンは、Rhoキナーゼ阻害剤と同様に作用して、活性Rhoによるシグナリングを低減することができる(Katoら(2004)、Biochem.Biophys.Acta.1689:267)。本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、ADの治療における使用、および患者においてADを発生させる危険性を低下させるための使用に有効でありうる。
本発明の化合物は、例えば高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息、末梢循環疾患、早産、動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、消化管の細菌感染、骨粗鬆症、網膜症、脳機能疾患、外傷性脳傷害および脊髄傷害の疾患症状の治療に使用できる。
癌としては、骨髄性白血病、リンパ性白血病、胃癌、結腸癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、食道癌、卵巣癌、乳癌、皮膚癌、子宮頚癌、睾丸腫瘍、神経芽細胞腫、尿道上皮癌、多発性骨髄腫、子宮癌、黒色腫、脳腫瘍、および中枢神経系の癌等が挙げられる。抗癌とは、上述したような腫瘍の形成、浸透、転移および成長等の阻害を意味する。癌の病理学的進行は、腫瘍の形成をもたらしうる異常細胞成長、ならびに浸潤性および転移を生じうる細胞可動性の増強を含む。いずれもRhoキナーゼを活性化させるRho A、BおよびCは、細胞の成長および可動性を規制することによって、腫瘍生成および転移進行に役割を果たす。例えば、活性Rhoを移入した培養線維芽細胞は形態に変化を生じさせ、非移入細胞より高密度で成長する(del Pesoら、1997 Oncogene.15:3047-57)本発明の化合物の抗増殖活性をインビボで評価するための有用なモデルは、皮下(s.c.)腫瘍モデルを含む。このモデルでは、人間の癌細胞を皮下注射によってマウスに植えつける。移植片拒絶反応を防ぐために、CD-1ヌードマウス等の典型的な免疫障害マウスが使用される。
免疫疾患としては、アレルギー疾患および臓器移植拒絶等が挙げられる。
自己免疫疾患としては、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、シェーグレン病、多発性硬化症、重症性筋無力症、I型糖尿病、内分泌性眼障害、原発性胆汁性肝硬変、クローン病、糸球体腎炎、サルコイドーシス、乾癬、天疱瘡、ヒオプラスチック貧血症、本態性血小板減少および紫斑病等が挙げられる。
消化管の細菌感染は、サルモネラ、赤痢菌および腸病原性大腸菌等の腸粘膜上皮細胞への侵入によって引き起こされる様々な疾患を意味する。
網膜疾患は、血管障害性網膜疾患、動脈硬化性網膜疾患、中枢血管障害性網膜疾患、中枢血清網膜疾患、輪状網膜疾患、糖尿病性網膜疾患、異常タンパク血網膜疾患、高血圧性網膜疾患、白血病性網膜疾患、脂肪血網膜疾患、増殖性網膜疾患、腎性網膜疾患および妊娠中毒症性網膜疾患等を意味する。
脳機能疾患としては、脳出血、脳血栓、脳塞栓、くも膜下出血、一過性脳虚血発作、高血圧性脳症、脳動脈硬化症、硬膜下血腫、硬膜外血腫、脳低酸素症、脳浮腫、脳炎、脳腫瘍、頭の外傷、精神病、薬物代謝物によって引き起こされる中毒、薬物中毒、一時呼吸停止、作業中の深い感覚喪失および身体的疾患等に関連する、またはそれらによって引き起こされる精神病的状態、ならびに上述の疾患によって引き起こされる後遺症、注意力低下、活動過剰、言語障害、精神的発育遅れ、健忘および痴呆(痴呆に伴う迷走、夜間譫妄および攻撃的行動等を含む)が挙げられる。
本発明の化合物は、医薬用薬剤、特に、高血圧症の治療のための治療薬、狭心症の治療のための治療薬、脳血管収縮の治療のための抑制剤、喘息の治療のための治療薬、末梢循環疾患の治療のための治療薬、早産の治療のための予防薬、動脈硬化症の治療のための治療薬、癌の治療のための抗癌剤、炎症性疾患の治療のための抗炎症剤、自己免疫疾患の治療のための免疫抑制剤、自己免疫疾患の治療のための治療薬、エイズの治療のための治療薬、避妊薬、消化管感染の予防薬、骨粗鬆症の治療のための治療薬、網膜疾患の治療のための治療薬、脳腫瘍によって引き起こされる脳に対する損傷の治療のための治療薬、および脊髄傷害の治療のための治療薬等の、Rhoによって引き起こされる疾患、またはRhoキナーゼの阻害によって調停される疾患予防および治療のための薬剤として有効でありうる。知られている技術、例えば、そのすべてが参照により本明細書に組み込まれているRemington、「The Science And Practice of Pharmacy」(第9版、1995)に記載されている技術に従って、本発明による式IまたはI'の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を、投与に向けて、薬学的に許容できる担体に調合することができる。
本発明は、本発明による化合物(すなわち、その薬学的に許容できる塩を含む式(I)、(II)および(IIa)等の化合物)、および薬学的に許容できる担体を含む「医薬組成物」をも含む。「医薬組成物」は、本発明の1つまたは複数の当該化合物を含んでいてもよい。本明細書では、「医薬組成物」という表現は、本発明による化合物、すなわちその薬学的に許容できる塩を含む式(I)、(II)および(IIa)等の化合物を含む治療有効量の活性薬剤を含む組成物を意味するものと理解される。本明細書に用いられている「治療有効量」とは、所定の状態および投与療法に対して治療効果を提供する量を意味する。
「薬学的に許容できる担体」という用語は、本明細書では、本発明の化合物とともに、患者に対して医学的に許容可能に投与されうるとともに、その薬理学的活性に望ましくない影響をもたらさない任意の物質を意味する。したがって、「薬学的に許容できる担体」は、例えば、希釈剤、防腐剤、可溶化剤、乳化剤、張度調節剤および緩衝剤、ならびに任意の他の生理学的に許容可能なビヒクルを含む、またはそれらからなる群から選択される薬学的に許容できる要素であってもよい。
当該薬学的に許容できる担体としては、例えば、0.01Mから0.1Mリン酸緩衝剤等のリン酸緩衝液、および例えば0.05Mリン酸緩衝剤またはリン酸緩衝塩水、および0.8%塩溶液のような当該技術分野で知られている担体が挙げられる。また、当該薬学的に許容できる担体は、水溶液または非水溶液、懸濁液およびエマルジョンであってもよい。当該溶液、懸濁液およびエマルジョンは水性であってもよい。非水性溶媒の例としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油または大豆油等の植物油、および注射剤での使用に好適なオレイン酸エチル等の薬学的に許容できる有機エステルが挙げられる。水性担体としては、塩および緩衝媒体を含む水、アルコール/水溶液、エマルジョンまたは懸濁液を挙げることができる。非経口ビヒクルとしては、塩化ナトリウム溶液、リンガーブドウ糖、ブドウ糖および塩化ナトリウム、乳酸加リンガー液または不揮発性油を挙げることができる。静脈投与ビヒクルとしては、流体および栄養補充液、およびリンガーブドウ糖に基づく補充液のような電解質補充液等を挙げることができる。例えば抗微生物剤、酸化防止剤、整合剤および不活性ガス等の代表的な添加剤および他の添加剤が存在していてもよい。本発明の化合物の調合は、例えば窒素またはアルゴンのような不活性雰囲気中のような酸素不在下で実施されうる。本発明の調合組成物の調製に使用される液体を使用に先立って不活性ガスで噴霧して、空気および酸素のような望ましくない溶存ガスを実質的に除去することができる。また、当該組成物は、より詳細には、液体または凍結乾燥もしくは乾燥製剤であり、様々な緩衝含有物(例えばTris-HCl、酢酸塩、リン酸塩)、pHおよびイオン強度の希釈剤、本発明の活性化合物のガラス等の表面への吸着を防ぐことができるアルブミンまたはゲラチン、および薬学的に許容できる洗剤(例えばTween 20、Tween 80、Pluronic F68、胆汁酸塩)等の添加剤、可溶化剤(例えばグリセロール、ポリエチレングリコール)、酸化防止剤(例えばアスコルビン酸、亜硫酸水素ナトリウム)、防腐剤(例えばチメロサール、ベンジルアルコール、パラベンズ)、充填物質または張度調節剤(例えばラクトース、マンニトール)を含んでいてもよい。活性薬剤は、例えば、リポソーム、エマルジョン、ミクロエマルジョン、ミセル、単層または多層ベシクル、赤血球ゴーストまたはスフェロブラストに付随することができる、本発明の組成物は、徐放性組成物を含むことができ、親油性蓄積物(例えば脂肪酸、ワックス、油)で調合された本発明の化合物を含むことができる。その医薬組成物は、患者に対して、非経口的、傍癌腫的、経粘膜的、経皮的、筋肉内、静脈内、皮膚内、皮下、骨膜内、心室内、脳内、腫瘍内投与、または特には中枢神経系(CNS)病変部位もしくは末梢神経系(PNS)病変部位への直接投与が可能になるように、または投与に向けて調合されうる。
哺乳類に対する注射可能または移植可能な使用を目的とする本発明の組成物は、例えば、当該使用を目的とした膜またはフィルタによる濾過、例えばラジオアイソトープから誘導される照射線もしくは紫外線による照射、または(例えば121℃で約15分間以上等の有効な時間にわたる)蒸気滅菌等の熱滅菌もしくは蒸気が存在しない熱滅菌により滅菌可能でありうる。本発明の注射可能組成物は、例えば、本発明の化合物を単位投与量含み、バイアルまたはシリンジまたは薬学的に許容できるプラスチック袋に、窒素またはアルゴン等の不活性雰囲気下、あるいは本質的に窒素またはアルゴン等からなる雰囲気のような実質的に不活性な雰囲気下で充填され、例えばバイアルに対するストッパーまたはクリンプキャップで密封され、滅菌されうる。
本発明の一態様において、哺乳類の治療方法は、非経口的、傍癌腫的、経粘膜的、経皮的、筋肉内、静脈内、皮膚内、皮下、骨膜内、心室内、脳内、腫瘍内投与、または特には中枢神経系(CNS)病変部位もしくは末梢神経系(PNS)病変部位への直接投与から選択される経路により、本発明の化合物を薬学的に許容できる担体で投与することを含むことができる。
哺乳類への注射可能または移植可能な使用を目的とする本発明の組成物は、パートのキットを含むことができる。本発明のパートのキットは、2つのパートを含むことができ、当該キットの1つのパートは、例えばバイアルまたはシリンジの区画等の第1の容器に密封された本発明の化合物の凍結乾燥製剤等の本発明の乾燥組成物を含むことができ、当該キットの他のパートは、例えば第2の容器に密封された無菌水または緩衝水等の無菌水溶液から構成されていてもよく、第2の容器内の水溶液は、本発明の化合物の注射可能な単位投与形態を形成するのに好適な第1の容器内の凍結乾燥製剤への添加に好適な量とすることができ、水性媒体に均一に溶解または分散されうる。水性媒体の容器間の移動をシリンジまたはカニューレ等を介して行い、環境マイクロバイアルにより汚染を最小限にするようにして行うことができる。本発明に従って調製された単位投与形態を注射で投与することができる。場合によっては、パートのキットは、容器、あるいは再水化する前または場合によっては再水和化の間に、またはさらには本発明の製剤の投与中に、キットの他のパートを近接保持するのに好適な様式で成形された包装材料であってもよい第3のパートを含むことができる。キットの第3のパートは、例えば、場合によっては固定的または永久的にキットの第1の容器を保持するのに好適な大きさの第1のソケットまたはクラドルと、場合によっては固定的または永久的にキットの第2の容器を保持するのに好適な大きさの第2のソケットまたはクラドルとを含むことができ、場合によっては第2の容器から第1の容器への水性媒体の移動に使用されるカニューレを含むことができる。
本発明による化合物は、適用可能かつ望まれる場合は、薬学的に許容できる塩(例えば酸添加塩等の薬学的に許容できるアンモニウム塩)を含む。したがって、式(I)、(II)、(Ia)および(IIa)等の化合物は、適用可能かつ/または望まれる場合は、任意の従来の様式に従ってその薬学的に許容できる酸添加塩として取得されるか、当該塩に変換されうる。薬学的に許容できる酸添加塩を形成するための酸は、無機酸(例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸等)および有機酸(例えば酢酸、メタンスルホン酸、マレイン酸およびフマル酸等)から好適に選択されうる。これらの塩を、例えば水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム等のアルカリと反応させることによる従来の方法に従って対応する遊離塩基に変換することができる。適用可能または望まれる場合は、式(I)、(II)および(IIa)等の化合物を四級アンモニウム塩に変換することができる。式(I)、(II)、(Ia)および(IIa)等の化合物は、置換基としてカルボキシル基を有する化合物であり、カルボキシル基は、金属イオン(例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム)またはアミノ酸イオン(例えばリシン、オルニチン)を含む塩のような塩に変換されうる。式(I)、(II)および(IIa)等の化合物が酸機能(例えばカルボキシル基)を含む場合には、適用可能かつ/または望まれる場合は、当該化合物は、薬学的に許容できる金属イオン(例えばアルカリ金属イオン、例えばナトリウムイオン、またはアルカリ土類金属イオン、例えばカルシウムイオン)を含む塩として取得されるか、当該塩に変換されうる。
本発明の化合物の薬学的に許容できる酸添加塩の調製に使用される薬学的に許容できる酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重炭酸、重酒石酸、カルシウム二水素酸、カンファースルホン酸、炭酸、クエン酸、ドデシルスルホン酸、エデト酸、1,2-エタンジスルホン酸、エストル酸、エタンスルホン酸、2-エチルコハク酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルビオン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコリルアルサニル酸、ヘキシルレソルシン酸、臭化水素酸、塩酸、ヒドロキシナフトエ酸、3-ヒドロキシナフトエ酸、沃化水素酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリル硫酸、レブリン酸、リンゴ酸、マレイン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸、ニトリル酸、パモン酸、エンボン酸、パントテン酸、リン酸、ポリガラクツロン酸、プロピオン酸、サリチル酸、サッカリン酸、ステアリン酸、二次酢酸、スクシン酸、スルファミン酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸、テオクル酸、8-クロロテオフィリン酸、トリエチオド酸、およびそれらの組合せからなる群が挙げられ、当該群から選択される。
本発明の化合物の薬学的に許容できる塩の調製に使用される薬学的に許容できる酸は、アジピン酸、アルギン酸、アミノサリチル酸、アンヒドロメチレンクエン酸、アレコリン、アスパラギン酸、水素化硫酸、ショウノウ酸、ジグルコン酸、水素化コハク酸、グリセロリン酸、フッ化水素酸、メチレンビス(サリチル酸)、ナパジシル酸、1,5-ナフタレンジスルホン酸、ペクチン酸、過硫酸、フェニルエチルバルビツル酸、ピクリン酸、プロピオン酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、ウンデカン酸、およびそれらの組合せからなる群から選択されうる。
ヒドロキシナプト酸、ナパジシル酸、ナフタレンスルホン酸およびパモン酸は、本発明の化合物の水溶性を低下させることができる。
本発明による医薬製剤の調製において、1つまたは複数のその生理的に許容可能な塩を含むことができる式Iの化合物、あるいはIまたはI'の化合物の混合物を典型的にはとりわけ薬学的に許容できる担体と混合する。その担体は、固体もしくは液体、またはその両方であってもよく、0.01重量パーセントから99重量パーセント、または0.5重量パーセントから95重量パーセントの式Iの化合物または化合物の混合物を含有することができる単位投与製剤、例えば錠剤または注射可能懸濁液または注射可能溶液として式Iの化合物で調合されうる。
本発明の製剤の投与の方法は、経口投与、直腸投与、局所的投与、頬投与、舌下投与、腔口投与、非経口投与、皮下投与、筋肉内投与、皮膚内投与、静脈内投与、局所的投与、経皮投与、経粘膜投与、吸入投与、硬膜下注射、神経の病変部位における移植、神経の損傷部位において移植または注射された蓄積物または基質からの徐放、およびそれらの組合せからなる群から選択されうる。任意の与えられた場合における最も好適な経路は、特に状態が癌である場合に、治療されている状態の性質および重症度に依存することになる。癌が全身性である場合は注射可能製剤を使用できる。固形腫瘍が組織に存在する場合は、注射可能製剤を使用できる。他の製剤は、局所的および吸入製剤を含む。
本発明の化合物は、注射可能用途、経口用途、吸入用途、経皮用途および経粘膜用途等のための薬学的に許容できる投与形態で調合されうる。経口投与に好適な製剤は、カプセル、オブラート、糖衣錠、錠剤、ピル、粉末、顆粒、チューインガム、懸濁液および溶液等の個別的な単位または投与形態で提供されうる。各投与形態は、所定量の本発明の化合物を含有する。本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の溶液および懸濁液は、薬学的に許容できるpH緩衝剤で緩衝されたような水性液体、またはDMSO等の非水性液体であってもよく、あるいは水中油または油中水として調製されていてもよい。注射可能投与形態を薬学的に許容できる様式で、例えば約15から20分間にわたって120℃の不活性ガス雰囲気下で、バイアルに密封された水溶液を蒸気滅菌し、あるいは0.2またはより小さい孔径のフィルタで溶液を滅菌濾過した後に、場合によっては凍結乾燥工程を行い、または放射線核種源からの放射線による、本発明の化合物を含有する組成物を照射することによって滅菌することができる。
本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の製剤を任意の好適な製薬方法で調製することができる。例示的な方法は、例えば混合、溶解、懸濁、配合および顆粒化等によって、本発明の化合物またはその薬学的に許容できる塩と、液体等の薬学的に許容できる担体、例えば、水、薬学的に許容できる緩衝剤の水溶液、薬学的に許容できるアルコールの水溶液、食用植物油のような天然源からのトリグリセリドまたはトリグリセリドの混合物等の食用油等の薬学的に許容できる油、水を含み、pH緩衝剤、基質形成糖、薬学的に許容できる重合体、薬学的に許容できる張度調節剤、ミセルの形成またはリポソームの形成またはエマルジョンの形成に有用な表面改質剤または表面活性剤からなる群から選択される賦形剤等の1つまたは複数の賦形剤を含有することができる水性媒体に薬学的に許容できる油を含めたエマルジョン等とを会合させる工程を含むことができる。有用な薬学的に許容できる賦形剤は、参照により組み込まれている、医薬賦形剤のハンドブック、第2版、Wadeら、1994に見られる。
本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を、固体の形態で、離型剤もしくは圧縮剤、シリカ、セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、ポリビニルピロリジノン(PVP)、ゼラチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、マンニトール、ラクトース、着色剤、染料等の錠剤形成に使用される成分等の薬学的に許容できる賦形剤と混合し、錠剤、カプセル、オブラート、ピル、粉末および顆粒等に成形することができる。場合によっては、錠剤および関連する投与形態に、吹付、吹付乾燥または流動層乾燥法によって塗布できるような腸溶性および/または水分遮断性重合体被覆剤等の重合体被覆剤を塗布することもできる。
本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を1つまたは複数の薬学的に許容できる賦形剤とともに水性、水性有機または有機液体溶媒に混入し、次いで、例えば不活性または非酸化雰囲気中にて、吹付乾燥、凍結乾燥、流動層乾燥または蒸発によって乾燥させて、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が吸収され、または均一に分散もしくは懸濁される固体を形成する。本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩と、液体、または細かく分割された固体、または基質形成賦形剤もしくは賦形剤の混合物とを均一かつ均質混合等によって混合し、次いで必要であれば、目的とする使用に好適な投与形態に成形することによって、本発明の製剤を調製することができる。例えば、錠剤は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を含有する粉末または顆粒または粒質物を場合によっては1つまたは複数の補助成分とともに圧縮または成形することによって調製されうる。本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の混合物を1つまたは複数の薬学的に許容できる賦形剤材料とともに錠剤プレスにて圧縮することによって圧縮錠剤を調製することができ、その混合物は、場合によっては、バインダ、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性剤、分散剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される薬学的に許容できる材料と混合された粉末または顆粒等の自由流動形態をとることができる。本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を1つまたは複数の薬学的に許容できる賦形剤とともに錠剤成形機にて成形することによって成形錠剤を製造することができ、その混合物は、水またはアルコール等の不活性液体バインダで加湿される。
本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩による治療を必要とする患者に対する頬または舌下投与に好適な製剤としては、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩をサクロース、アカシアおよびトラガカント等の香味基質に含む糖衣錠、ならびに本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩をゼラチン、グリセリン、サクロースおよびアカシア等の不活性基質に含む香錠を挙げることができる。
哺乳類の損傷した神経付近、または神経病変部位付近への移植のための本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を含む組成物を、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を場合によっては薬学的に許容できる担体または溶媒の溶液または懸濁液として、化合物に対する基質形成賦形剤または蓄積物に吸収させることによって調製することができ、化合物の濃度、および基質の形状および寸法は目的とする使用に好適なものとする。有用な組成物は、神経の病変部位付近の移植に使用される、化合物を含む無菌等張性流体とともに飲み込むことのできるゲル泡沫吸収性ゼラチン(例えば、ゲル泡沫は、Pharmacia & UpjohnのGelfoam(登録商標)であってもよい)に本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を含む。
化合物を哺乳類に投与するのに使用される投与形態の本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩Rhoキナーゼ拮抗剤化合物の治療有効濃度は、(例えばRhoキナーゼ拮抗剤としてのその活性を求めるためのインビトロ細胞検定でのそのLC50濃度で測定された)活性、およびインビボでの化合物の生体可用性に依存する。投与形態の本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の量は、当該化合物またはその塩の少なくとも治療有効量でありうる。当該化合物の量は、例えば、約0.01重量%から約50重量%の投与形態、または0.1重量%から40重量%での範囲であってもよい。さらなる濃度は、0.1重量%から5重量%(重量パーセント)、0.1重量%から10重量%、0.1重量%から20重量%、1重量%から10重量%および1重量%から15重量%の投与形態からなる群から選択されうる。投与形態によっては、薬学的に許容できる賦形剤および水等の溶媒が、投与形態重量の残りを占めてもよい。糖(ラクトース、マンニトールおよびサクロース等、ならびに非還元糖)、ならびに包含複合体を形成して、本発明の化合物の溶解性および生体可用性を高めることができるポリビニルピロリドン、ポリ(ビニルアルコール)等の重合体、ゼラチン、薬学的に許容できるセルロース誘導体、シリカ、デキストリンおよびシクロデキストリンのような賦形剤は、固体経口投与形態として有用でありうる。
非経口投与に好適な本発明の製剤は、無菌水溶液、および本発明の化合物、または本発明のその薬学的に許容できる塩の注射に対して安全な有機溶媒の非水性溶液を含むことができる。本発明の化合物、または本発明のその薬学的に許容できる塩を含む有用な注射可能投与形態は、目的とする受給体の血液に対して等張性を有するものであってもよい。糖、緩衝塩およびそれらの組合せのごとき薬学的に許容できる注射水化溶性賦形剤を添加することによって、投与形態の等張性を調整かつ/または維持することができる。これらの投与形態は、場合によっては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、および目的とする受給体の血液に対する等張性を製剤に与える溶解溶質を含むことができる。水性および非水性無菌懸濁液は、薬学的に許容できる懸濁剤および増粘剤を含むことができる。本発明の製剤を単位投与または複数投与容器で提供することができる。例えば、注射可能な使用において、製剤を、例えば、窒素もしくはアルゴン、または他の非反応制ガスもしくは非反応ガスの混合物等の不活性な無酸素ガスの下でバイアル等に無酸素形態で封入するなどして、アンプルまたはバイアルに封入することができる。他の実施形態において、本発明の投与形態を、無水固形物、または例えば乾燥投与形態の0.01重量%から約5重量%の少量の水を含有する固形物としての凍結乾燥形態で保存することができ、次いでその投与形態に、無菌液体担体、例えば等張性水性塩溶液を添加し、場合によっては約pH5とpH9の間、またはpH6とpH8の間に緩衝し、あるいは使用直前に注射用水を添加することが必要である。即時調合注射溶液および懸濁液は、先述の種類の無菌粉末、顆粒および錠剤から調製されうる。
本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を含み、直腸投与に好適な本発明の製剤を単位投与坐薬として提供することができる。本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を含む坐薬投与形態は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩と、例えばココアバター等の1つまたは複数の従来の薬学的に許容できる固体の担体とを混合して、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を含む混合物を形成し、次いで得られた混合物を成形することによって調製されうる。
皮膚、または腫瘍切除後の腫瘍縁等に対する局所的塗布に好適な本発明の製剤は、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゲル、スプレー、煙霧剤、油またはそれらの組合せの形態であってもよい。本実施形態における薬学的に許容できる担体は、石油ゼリー、白色ワセリン、ラノリン、グリセロール、セチルアルコール等、ステアリン酸グリセロール、パルミチン酸イソプロピル、アテアリルアルコール、合成蜜蝋、ヘキシレングリコール、リン酸、ステアリン酸プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステル、アルコール、経皮浸透向上剤、ポリ(乳酸)、ポリ(グリコール酸)および乳酸とグリコール酸の共重合体等の生体吸収生重合体、ゲル泡沫等の生体吸収性ゼラチン、リン脂質およびそれらの組合せからなる群から選択されうる。
本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の経皮投与に好適な本発明の製剤を個別的なパッチ投与形態で提供することができる。そのパッチを、8時間から約48時間以上といった長時間にわたって、受給体の表皮または角質層との密着を維持するように構成できる。それぞれ患者の皮膚に接触する投与形態の2つの部分の間で異なる印加電圧を利用するなどによるイオン注入供給機構によって、経皮投与に好適な製剤を供給することができる。
その使用が本発明の範囲内にある本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の治療有効投与量は、化合物によって、かつ患者によって異なり、患者の年齢、患者の診断状態、および患者に対する投与形態の供給経路に左右されうる。治療有効投与量、および投与形態の投与頻度は、当業者に知られているルーチンの薬理学的手順に従って決定されうる。投与量および投与頻度は、時間および具体的な治療状態の関数として異なり、または変化することになる。例えば、約0.1から1000mg/kg、または約1から約100mg/kgの投与量は、特に腫瘍切除後における乳癌または脳腫瘍等の癌の治療に好適であり、当該化合物またはRhoキナーゼ阻害剤もしくは薬剤の薬理学的投与形態を、切除腫瘍の残留縁における残留組織に投与することができる。中枢神経系の損傷神経を治療するのに使用される場合は、心嚢等からの注射された薬理学的投与形態からの徐放に好適な溶液または懸濁液として脳脊髄に注射することによって投与することができる。硬膜、クモ膜、軟膜を通じたマイクロ注射等の注射などによって損傷神経の病変部位に注射することによって、神経細胞に投与することができる。
神経または神経細胞に投与される場合の本発明の組成物は、細胞の外部環境から細胞の内部環境(例えば流体または膜)へ神経細胞の該膜を交差することによって神経細胞に浸透することができる。本発明の化合物は、神経細胞における軸索再生および成長を誘発させ、損傷または傷害または破壊神経の瘢痕組織にわたって軸索の成長を誘発することができる。
哺乳類に投与される場合の本発明の組成物は、脊髄傷害、外傷性脊髄傷害、脊髄破壊傷害、または脊髄神経の病変、卒中、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)痴呆症、プリオン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、外傷性脳障害および緑内障の治療、ならびに癌の治療、特に腫瘍転移、および腫瘍の外科切除後の切除縁における腫瘍の再成長の予防に有用でありうる。
一態様において、本発明の化合物は、Rhoキナーゼ阻害剤化合物であり、Rhoキナーゼの阻害が治療的に有益な効果、または緩和もしくは治癒効果を有することができ、あるいは疾患の進行を止めるか、その速度を低下させ、もしくは患者の寿命を延ばすことができ、あるいは不快感を低減し、または疾患の症状を緩和もしくは消滅させることができる疾患の治療に有用な医薬品の調製において、治療に有効な薬剤として使用されうる。
一実施形態において、本発明の化合物は、神経細胞における軸索成長、および損傷神経における病変部位にわたる神経細胞接続を刺激するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
他の実施形態において、本発明の化合物は、CNSにおける虚血に続く枯死または細胞死を防止または抑制するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
他の実施形態において、本発明の化合物は、卒中の患者または神経変性病の患者を治療するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
他の実施形態において、本発明の化合物は、アルツハイマー病を治療するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
他の態様において、本発明の化合物は、神経変性の疾患であって、卒中、外傷性脳障害、パーキンソン病、アルツハイマー病およびALSを含むが、それらに限定されない疾患における神経細胞の修復を促進するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
他の実施形態において、本発明の化合物は、緑内障等の目の疾患を治療するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
他の実施形態において、本発明の化合物は、高血圧症、喘息および血管疾患ならびに陰茎***不全のような平滑筋弛緩の異常に関連する疾患を治療するのに有用でありうる治療活性薬剤であってもよい。
一態様において、本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の投与量は、治療効果を有するために約20から35mg/kgであってもよい。
一態様において、本発明の化合物は、プロトン化アミンの形態、または脱プロトン化カルボン酸塩もしくは他の酸形態のような薬学的に許容できる塩の形態であってもよい。静脈投与形態は、ときには、約20mg/kgまでの本発明のRhoキナーゼ阻害剤であってもよい。約30mg/kgから約50mg/kgの投与量を経口投与に採用できる。約20mg/kgから30mg/kgの投与量を筋肉投与に採用できる。本発明の投与形態の投与頻度は、一日当たり1回、2回、3回または4回であってもよい。患者の治療期間は、約1もしくは2日以内、約5から7日以内、約2もしくは3週間以内、または患者における疾患状態の症状が本質的に抑制されるまでとすることができる。
Rhoキナーゼ阻害剤としての本発明の化合物の相対活性を、Rhoキナーゼ阻害剤組織培養生体検体システムで求めることができる。Rhoキナーゼ阻害剤活性生体検定を用いて、脊髄傷害、卒中または神経変性病における軸索再生に効果的でありうる本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物を識別することができる。Rhoキナーゼ阻害剤活性生体検定は、例えばミエリン等の軸索成長阻害基体上などでの神経細胞における軸索突起成長を刺激するのに活性のある本発明の化合物を識別するのにも有用でありうる。
神経単位は、阻害性ミエリン基体上で軸索突起を成長させない。神経単位は、組織培養において阻害性基体上で培養されているときは、丸形を維持する。効果的なRhoキナーゼ阻害剤化合物が神経単位に添加されると、神経単位は、ミエリン基体上で軸索突起を成長させることが可能になる。Rhoキナーゼ阻害剤化合物の添加後に神経単位が軸索突起を成長させるのにかかる「T-ミエリン」で示される時間は、神経単位が、ラミニンまたはポリリシン等の成長許容基体上で培養されている場合に神経単位が軸索突起を成長させるのにかかる時間である「T-許容」で示される時間とほぼ同じである。時間T-ミエリンおよび時間T-許容は、神経単位細胞培養において通常約20時間から約60時間の範囲であってもよい。その結果生じた培養神経単位上での軸索突起成長の評価を目視手段で行うことができる。
1から2日等の時間(T-ミエリン)後に、成長する個別的な培養物において、培養神経単位上の軸索突起長を以下のように測定できる軸索突起成長の定量評価を行うことができる。
これらの個別的な神経単位細胞培養は、各培養物にすべて同じ細胞型の神経単位を含み、例えば、以下の神経単位培養セットを含むことができる。
各対照培養物において、神経単位を阻害性ミエリン基体上で培養し、神経単位をRhoキナーゼ阻害剤化合物で処理せず、培養神経単位を時間T-ミエリンにわたって成長させる1つまたは複数の対照神経単位培養物としての神経単位培養セットa)。
各対照培養物において、神経単位を許容基体、例えばポリリシン基体上で培養し、神経単位をRhoキナーゼ阻害剤化合物で処理せず、培養神経単位を時間T-ミエリンにわたって成長させる1つまたは複数の陽性対照神経単位培養物としての神経単位培養セットb)。
それぞれが神経単位培養セットa)と同様にして成長するいくつかの個別的な神経単位培養を含み、セットc)における神経単位培養物を、所定の試験濃度の本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物を含有する標準的な大きさの単一の大量分割量の溶液で個別的に処理し、所定の試験濃度は、DMSOを含む溶媒における前記化合物の個別的な対数的減少希釈濃度からなる群から選択され、その対数的減少濃度は、DMSOの化合物の1モル溶液または0.1モル溶液といったRhoキナーゼ阻害剤化合物の比較的高い第1の濃度から出発し[その標準的な大きさの分割量がT-ゼロの開始時間にセットc)の第1の神経単位培養物に添加される]、第1の濃度を10倍に希釈して、第1の濃度の0.1倍になる第2の濃度を形成し[その標準的な大きさの分割量がT-ゼロの開始時間にセットc)の第2の神経単位培養物に添加される]、例えばPBSで第2の濃度を10倍に希釈して、前記化合物の第2の濃度の0.1倍になる第3の濃度を形成し[その標準的な大きさの分割量がT-ゼロの開始時間にセットc)の第3の神経単位培養物に添加される]といった具合に繰り返すことを含む方法によって、前記化合物の減少試験濃度の溶液の順次希釈シリーズを作成することによって達成することができ、時間T-ゼロ後に、培養神経単位の各々を時間T-ミエリンにわたって成長させることができる神経単位培養セットc)。
それぞれ神経単位培養セットb)の培養物と同様にして成長するいくつかの個別的な神経単位培養物を含み、セットd)における神経単位培養物を、標準的な大きさの単一の大量分割量でセットc)と同様に個別的に処理し、セットc)に採用された本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物を含む溶液の希釈シリーズを形成し、セットの培養物に対して分割量を添加した時間T-ゼロ後に、培養神経単位の各々を時間T-ミエリンにわたって成長させることができる神経単位培養セットd)。
時間T-ミエリンの終わりに、セットa)、b)、c)およびd)からの神経単位培養物の各々を顕微鏡で調べて、神経単位上で成長した軸索の平均長さおよび数を測定により求めることができる。
高速検定を用いて、神経単位上で軸索突起成長を促進させる本発明のRhoキナーゼ阻害剤の能力を評価することもできる。この検定では、本発明のRhoキナーゼ阻害剤等の試験物質の存在または不在下で、NG108神経細胞を(ポリスチレン等の)プラスチック上で培養する。定量的には、より効果的なRhoキナーゼ阻害剤は、より効果の低いRhoキナーゼ阻害剤より迅速な軸索突起成長を促進させることになる。効果のないRhoキナーゼ阻害剤は、軸索突起成長を促進させない。プラスチック上で培養してから5時間後に培養物を同時に固定し、その後軸索突起を成長させたNG108細胞の数を数えることによって相対効果を評価することができる。Rhoキナーゼ阻害剤は、軸索突起成長を促進させる能力が成長因子と異なる。神経成長因子(NGF)等の成長因子は、ミエリンによる成長阻害を克服することができない。本明細書に記載されている組織培養は、網膜神経節細胞に対する成長因子BDNF(脳に由来する神経親和性因子)、またはPC-12細胞に対するNGF、またはNG108細胞に対するcAMPの存在下ですべて行われる。成長因子は、過渡的にインビボの枯死を防ぐことができるが、成長因子は成長阻害基体上での軸索突起成長を促進させることができないため、成長因子は、強靱な軸索突起成長を促進させない。
本発明の化合物は、
a)形質移入によりHela細胞または他の好適な細胞型において、mycエピトープ標識、またはGST標識、または続く免疫沈降用途に向けて抗体を得ることができる任意の他の好適な標識等の特定の標識で標識されうる組換えRhoキナーゼを発現させるステップと、
b)前記細胞を均質化し、特定の標識に対して誘導された1つまたは複数の抗体(例えばそれぞれmyc標識に対する抗体またはGST標識に対する抗体)による免疫沈降を用いて残留細胞ホモジネートから得られた、発現された特異的標識Rhoキナーゼを精製するステップ(あるいは精製されたRhoキナーゼをUpstate Biotechnology Inc.から購入してもよい)と、
c)ステップb)からの標識Rhoキナーゼの免疫沈殿物を回収し、本発明のRhoキナーゼ阻害剤等の試験化合物の存在または不在下で、基体としての放射線核種標識[32P]ATPおよびヒストン2型とともにそれらをインキュベートするステップと、
d)ヒストンまたはリン酸化ヒストンを単離するステップと、
d)ヒストンがリン酸化されているかいないかをリン放射線核種からの放射の検出によって判断し、Rhoキナーゼのリン酸化活性(すなわちヒストンのリン酸化)を試験化合物の存在下でブロックし、Rhoキナーゼ阻害剤の不在下でRhoキナーゼがヒストンをリン酸化し、Rhoキナーゼ阻害剤の存在下で、Rhoキナーゼのリン酸化活性(すなわちヒストンのリン酸化)をブロックし、そのようにして当該化合物をRhoキナーゼ拮抗剤として識別するとを含む方法により、Rhoキナーゼ阻害剤として識別されうる。
本発明の化合物によるRhoキナーゼ阻害を、市販の選別方法を用いる等による任意の他の知られている方法によって判断することができる。本発明のRhoキナーゼ拮抗剤を使用して、脊髄傷害を治療して、損傷神経構造の機能的修復を促進させることができる。
本発明のRhoキナーゼ拮抗剤を使用して、影響された神経群に対する薬物の浸透が効果的な治療のために必要とされうるアルツハイマー病およびパーキンソン病のような神経変性病を治療することができる。当該浸透は、本発明の化合物の医薬組成物の拡散、薬物動力学的分布、還流、または移植もしくは注射等の直接的な仕込みによるものであってもよい。
本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、卒中および外傷性脳障害に対しても有益である。
Rhoキナーゼ拮抗剤である本発明の化合物は、例えば癌細胞移動を緩和または防止または低減することにより癌の治療に有益でありうる。Rhoキナーゼ拮抗剤化合物は、血管疾患、高血圧症、喘息および陰茎機能不全等の平滑筋を含む疾患の治療にも有用である。
一態様において、脊髄傷害の治療のために、本発明のRhoキナーゼ阻害剤を細胞移植と併用することができる。シュワン細胞、成長因子を発現させるために改質された線維芽細胞、胎児脊髄移植体、胎児または成人幹細胞および嗅覚被鞘膠を含むが、それらに限定されない多くの異なる細胞移植体が、再生および修復を促進させるそれらの可能性について試験された。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物を1つまたは複数のニューロトロフィン、1つまたは複数の枯死阻害剤、または細胞死を防止する1つまたは複数の薬剤とともに患者に投与することができる。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物をL1、ラミニン等の細胞接着分子、および軸索成長を促進させる人工性調基質と併用することができる。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物を、成長阻害性タンパク質基体をブロックする1N-1モノクロナル抗体等のモノクロナルまたはポリクロナル抗体の投与と併用することもでき、あるいは本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物を治療ワクチンの投与と併用することもできる。
一態様における本発明は、式(I)および(II)等の化合物、その異性体、またはその薬学的に許容できる塩(例えば酸添加塩)を活性成分として含む医薬組成物に関する。当該医薬組成物は、抗高血圧症薬、狭心症治療薬、喘息治療薬、および末梢循環向上薬等として有用でありうる。
本発明の式(I)および(II)等の化合物、その異性体およびその薬学的に許容できる塩は、心臓および脳血流増強作用、ならびに腎臓および末梢動脈血流増強作用を有することができる。血流増強作用は、1分間から約1時間、または約6時間、または約12時間、または約24時間、または約48時間、または約1週間以上に及ぶ長時間にわたって持続することができ、抗高血圧症作用は、作用持続時間または化合物の治療効果継続時間を通じて、場合によっては化合物の次の投与物が治療を必要とする患者に投与されるまで、患者の異常血流状態を正常レベルに変えるのに十分なほど非常に強力でありうる。
よって、本発明の化合物は、抗高血圧症薬、ならびに心臓、脳、腎臓および末梢動脈における疾患の治療等の循環器における疾患の予防および治療のための薬剤として有用でありうる。
本発明の化合物は、高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息、末梢循環疾患、早産、動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、受精および受精卵着床、骨粗鬆症、網膜疾患、脳機能疾患、および消化管の細菌感染等の疾患の予防および/または治療のための効果的な薬剤でありうる。
一態様における本発明は、Rhoキナーゼ阻害剤として作用できる化合物を提供することに関する。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物は、抗高血圧症作用、抗狭心症作用、脳血管収縮抑制作用、抗喘息作用、末梢循環向上作用、早産予防作用、抗動脈硬化作用、抗癌作用、抗炎症作用、免疫抑制作用、自動免疫疾患改善作用、抗エイズ作用、受精および受精卵着床に対する予防作用、骨粗鬆症治療作用、網膜疾患治療作用、脳機能向上作用、消化管の細菌感染に対する予防作用を発揮することができる。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物は、薬剤、特に高血圧症の治療薬、狭心症の治療薬、脳血管収縮の治療薬、喘息の治療薬、末梢循環疾患の治療薬、早産の予防薬、動脈硬化症の治療薬、抗癌剤、抗炎症薬、免疫抑制剤、自己免疫疾患の治療薬、抗エイズ薬、骨粗鬆症の治療薬、網膜疾患の治療薬、脳機能向上薬、避妊薬、および消化管感染の予防薬として有用でありうる。
Rhoキナーゼを阻害する本発明の化合物は、酵素RhoおよびRhoキナーゼの研究のための試薬、ならびにRhoおよび/またはRhoキナーゼの阻害または拮抗が疾患の結果または症状に著しい影響をもたらす疾患の診断における診断薬として有用でありうる。
本発明は、本発明の化合物を含有する薬剤を含む。
本発明は、さらなる態様において、例えば、脊髄傷害、卒中、神経変性病、緑内障、高血圧症、狭心症、薬剤が脳血管収縮の抑制剤でありうる脳血管異常、喘息、末梢循環疾患、動脈硬化症、薬剤が抗癌剤でありうる癌、薬剤が抗炎症薬でありうる炎症、薬剤が免疫抑制剤でありうる組織または器官移植または移植片に関連する疾患または状態、自己免疫疾患、薬剤が抗エイズまたは抗HIV(ヒト免疫不全)薬でありうるエイズ、骨粗鬆症、網膜疾患、薬剤が、例えば脳機能向上薬でありうる脳の機能異常、および薬剤が早産の予防薬でありうる早産からなる群から選択される少なくとも1つの状態または疾患の治療に有用な治療薬、および薬剤が、例えば、受精卵着床の予防または転換に有用でありうる避妊薬および消化管の感染の治療に有用な予防薬でありうる本発明の化合物を含む薬剤を含む。
本発明は、治療有効量の本発明の化合物、ならびに要望に応じて薬学的に許容できる添加剤を含む医薬組成物を含む。
本発明は、本発明の化合物を含む試薬を含む。
本発明は、本発明の化合物を含む診断薬を含む。
本発明は、例えば、Rhoキナーゼ活性に関連する高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息および末梢循環疾患からなる群から選択される少なくとも1つの疾患の治療薬でありうる式(I)および(II)等の化合物、その異性体、および/またはその薬学的に許容できる塩を含む薬剤を含む。
本発明は、例えば、動脈硬化症の治療薬、抗癌剤、抗炎症薬、免疫抑制剤、自己免疫疾患の治療薬、抗エイズ薬、骨粗鬆症の治療薬、網膜疾患の治療薬、脳機能向上剤、早産の予防薬、避妊薬、および消化管感染の予防薬からなる群から選択される少なくとも1つの疾患の治療薬でありうる式(I)および(II)等の化合物、その異性体、および/またはその薬学的に許容できる塩を含む薬剤を含む。
本発明は、酵素Rhoキナーゼのインビボ阻害によって治療可能でありうる疾患または傷害の治療方法であって、該疾患は、例えば、高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息、末梢循環疾患、動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、骨粗鬆症、網膜疾患、脳機能疾患、早産、受精および受精卵の着床、ならびに消化管の感染からなる群から選択される少なくとも1つの疾患であってもよい方法を含み、該方法は、薬学的有効量の本発明の化合物または医薬組成物を患者に投与することを含むことができる。
本発明は、Rhoキナーゼによって引き起こされる高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息および末梢循環疾患、ならびに動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、骨粗鬆症、網膜疾患、脳機能疾患、早産、受精および受精卵の着床、および消化管の感染からなる群から選択される少なくとも1つの疾患の治療方法であって、薬学的有効量の式(I)および(II)等の化合物、その異性体、および/またはその薬学的に許容できる塩を投与することを含む方法を含む。
本発明は、Rhoキナーゼを阻害することによって治療可能な疾患の治療に有用な治療薬または医薬品を製造するための本発明の化合物の使用を含む。
一態様における本発明は、式(I)および(II)等の化合物、その異性体、またはその薬学的に許容できる塩(例えば酸添加塩)を活性成分として含む医薬組成物に関する。当該医薬組成物は、抗高血圧生薬、狭心症の治療薬、喘息の治療薬、および末梢循環を向上させるための薬剤として有用でありうる。
本発明の式(I)および(II)等の化合物、その異性体およびその薬学的に許容できる塩は、心臓および脳血流増強作用、ならびに腎臓および末梢動脈血流増強作用を有することができる。血流増強作用は、1分間から約1時間、または約6時間、または約12時間、または約24時間、または約48時間、または約1週間以上に及ぶ長時間にわたって持続することができ、抗高血圧症作用は、作用持続時間または化合物の治療効果継続時間を通じて、場合によっては化合物の次の投与物が治療を必要とする患者に投与されうるまで、患者の異常血流状態を正常レベルに変えるのに十分なほど非常に強力でありうる。
よって、本発明の化合物は、抗高血圧症薬、ならびに心臓、脳、腎臓および末梢動脈における疾患の治療等の循環器における疾患の予防および治療のための薬剤として有用でありうる。
本発明の化合物は、高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息、末梢循環疾患、早産、動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、受精および受精卵着床、骨粗鬆症、網膜疾患、脳機能疾患、および消化管の細菌感染等の疾患の予防および/または治療のための効果的な薬剤でありうる。
一態様における本発明は、Rhoキナーゼ阻害剤として作用できる化合物を提供することに関する。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物は、抗高血圧症作用、抗狭心症作用、脳血管収縮抑制作用、抗喘息作用、末梢循環向上作用、早産予防作用、抗動脈硬化作用、抗癌作用、抗炎症作用、免疫抑制作用、自動免疫疾患改善作用、抗エイズ作用、受精および受精卵着床に対する予防作用、骨粗鬆症治療作用、網膜疾患治療作用、脳機能向上作用、消化管の細菌感染に対する予防作用を発揮することができる。本発明のRhoキナーゼ阻害剤化合物は、薬剤、特に高血圧症の治療薬、狭心症の治療薬、脳血管収縮の治療薬、喘息の治療薬、末梢循環疾患の治療薬、早産の予防薬、動脈硬化症の治療薬、抗癌剤、抗炎症薬、免疫抑制剤、自己免疫疾患の治療薬、抗エイズ薬、骨粗鬆症の治療薬、網膜疾患の治療薬、脳機能向上薬、避妊薬、および消化管感染の予防薬として有用でありうる。
Rhoキナーゼを阻害する本発明の化合物は、酵素RhoおよびRhoキナーゼの研究のための試薬、ならびにRhoおよび/またはRhoキナーゼの阻害または拮抗が疾患の結果または症状に著しい影響をもたらす疾患の診断における診断薬として有用でありうる。
本発明は、本発明の化合物を含有する薬剤を含む。
本発明は、例えば、脊髄傷害、卒中、神経変性病、緑内障、高血圧症、狭心症、薬剤が脳血管収縮の抑制剤でありうる脳血管異常、喘息、末梢循環疾患、動脈硬化症、薬剤が例えば抗癌剤でありうる癌、薬剤が例えば抗炎症薬でありうる炎症、薬剤が免疫抑制剤でありうる組織または器官移植または移植片に関連する疾患または状態、自己免疫疾患、薬剤が抗エイズまたは抗HIV(ヒト免疫不全)薬でありうるエイズ、骨粗鬆症、網膜疾患、薬剤が例えば脳機能向上薬でありうる脳の機能異常、および薬剤が早産の予防薬でありうる早産からなる群から選択される少なくとも1つの状態または疾患の治療に有用な治療薬、および薬剤が受精卵着床の予防または転換に有用でありうる避妊薬および消化管の感染の治療に有用な予防薬でありうる本発明の化合物を含む薬剤を含む。
本発明は、治療有効量の本発明の化合物、ならびに要望に応じて薬学的に許容できる添加剤を含む医薬組成物を含む。
本発明は、本発明の化合物を含む試薬を含む。
本発明は、本発明の化合物を含む診断薬を含む。
本発明は、例えば、Rhoキナーゼ活性に関連する高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息および末梢循環疾患からなる群から選択される少なくとも1つの疾患の治療薬でありうる式(I)および(II)等の化合物、その異性体、および/またはその薬学的に許容できる塩を含む薬剤を含む。
本発明は、例えば、動脈硬化症の治療薬、抗癌剤、抗炎症薬、免疫抑制剤、自己免疫疾患の治療薬、抗エイズ薬、骨粗鬆症の治療薬、網膜疾患の治療薬、脳機能向上剤、早産の予防薬、避妊薬、および消化管感染の予防薬からなる群から選択される少なくとも1つの疾患の治療薬でありうる式(I)および(II)等の化合物、その異性体、および/またはその薬学的に許容できる塩を含む薬剤を含む。
本発明は、酵素Rhoキナーゼのインビボ阻害によって治療可能でありうる疾患または傷害の治療方法であって、該疾患は、例えば、高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息、末梢循環疾患、動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、骨粗鬆症、網膜疾患、脳機能疾患、早産、受精および受精卵の着床、ならびに消化管の感染からなる群から選択される少なくとも1つの疾患であってもよく、該方法は、薬学的有効量の本発明の化合物または医薬組成物を患者に投与することを含む方法を含む。
本発明は、Rhoキナーゼによって引き起こされる高血圧症、狭心症、脳血管収縮、喘息および末梢循環疾患、ならびに動脈硬化症、癌、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、エイズ、骨粗鬆症、網膜疾患、脳機能疾患、早産、受精および受精卵の着床、および消化管の感染からなる群から選択される少なくとも1つの疾患の治療方法であって、薬学的有効量の式(I)および(II)等の化合物、その異性体、および/またはその薬学的に許容できる塩を投与することを含む方法を含む。
本発明は、Rhoキナーゼを阻害することによって治療可能な疾患の治療に有用な治療薬または医薬品を製造するための本発明の化合物の使用を含む。
本発明の組成物および方法は、一般には、CNSにおける修復の観点から、またはそれに向けて記載されることになるが、本明細書に記載されている発明の化合物および技術は、癌、転移、高血圧症、心臓病、卒中、糖尿病性神経疾患、ならびに卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病および筋萎縮性側索硬化症(ALS)等の神経変性病を含むが、それらに限定されない多くの他の疾患における使用に拡張されうる。その薬学的に許容できる塩を含む本発明の化合物(例えばRhoキナーゼ阻害剤)による治療を用いて、末梢神経等の神経の軸索成長率を高めることができ、それにより手術後、例えば切除された肢の再接続後または前立腺手術後の損傷末梢神経の修復に効果的でありうる。また、その好適な塩を含む本発明の化合物による治療は、軸索成長促進効果を有するため、様々な末梢神経疾患(糖尿病性神経疾患)に効果的でありうる。
本発明の化合物および組成物は、Rhoキナーゼ阻害剤として使用でき、哺乳類の外傷的に損傷された神経系を治療するのに使用できる。本発明の組成物および方法を、卒中、多発性硬化症、HIV痴呆症、パーキンソン病、アルツハイマー病、外傷性脳傷害、プリオン病、またはCNS環境において軸索が損傷されるCNSの他の疾患等における疾患状態および原因から生じ、本明細書に特定されている疾患状態を含む疾患および細胞損傷の治療に適用することができる。
Rhoキナーゼ阻害剤であって、細胞膜浸透性を有することができる本発明の置換ピペリジン化合物は、Rhoキナーゼ活性の阻害が有用でありうる疾患の治療的処置における薬剤として有用でありうる。
Rhoキナーゼ阻害剤であって、細胞膜浸透性を有し、放射線核種、および赤外もしくは紫外光蛍光放射発色団等の蛍光放射発色団等の診断に有用な成分を含む本発明の置換ピペリジン化合物は、例えば、細胞、特にRhoキナーゼの阻害が疾患過程に関与する、または損傷もしくは疾患神経における病変の近隣の神経細胞等の細胞における傷害の修復に所望されうる細胞におけるRhoキナーゼ活性の阻害の原因および/または効果を検出するための診断薬として有用でありうる。
本発明の化合物は、平滑筋および内皮細胞に影響することができ、再狭窄を防ぐための被覆ステント等のステントに対する使用等の様々な治療態様における有用な用途を見いだすことができる。
一態様において、本発明の化合物および組成物は、哺乳類の中枢神経系(CNS)病変部位または末梢神経系(PNS)病変部位等の神経系の構成要素の修復、軸索再生および/または軸索発芽、軸索突起成長および/または神経変性および虚血性損傷の予防に使用できる。
他の態様において、本発明の化合物および組成物は、軸索再生および軸索成長のために、RhoおよびRhoキナーゼを含む細胞内シグナリング機構を標的とする。
他の態様において、本発明の化合物および組成物は、CNSにおける神経を囲む阻害性基体上の神経細胞における成長の軸索成長を促進させることができ、傷害CNSにおける神経の修復を促進することができる。
他の態様において、本発明の化合物および組成物は、傷害、切断、破壊あるいは損傷軸索、すなわち神経病変の部位の再生を刺激または促進することができ、本発明は、神経病変にわたる軸索の再生を刺激または促進することができる。
本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、癌、ならびに悪性腫瘍の形質転換および細胞の異常増殖の治療に治療用途を見いだすことができる。本発明のRhoキナーゼ阻害剤は、高血圧症、喘息、肺血管疾患、血管疾患、陰茎***不全、緑内障、悪性腫瘍性細胞形質転換、前立腺癌転移、肝細胞癌および転移、肝臓または腎臓等の器官の線維症、心臓保護および異型移植残存、ならびに脳血管痙攣の治療的処置に有用でありうる。
本発明による化合物またはRhoキナーゼ阻害剤は、Rhoキナーゼ阻害性Y27632等の知られているRhoキナーゼ阻害剤に対する改善型代替物を提供する。本発明による化合物または阻害剤は、Y27632と比較した場合に、異なる改善されたキナーゼ阻害プロフィルを発揮することができ、かつ/または成長阻害性基体上の軸索突起成長をより促進させることもできる。
本発明の化合物および組成物はRhoキナーゼの活性を阻害することが有利点である。これらの化合物および組成物は、Rhoキナーゼの活性を阻害し、置換ピペリジンは望ましくない免疫応答を発生させることができないためにインビボで免疫応答を発生しうるC3等のタンパク質およびペプチドに比べて有利でありうる。本発明の化合物は細胞浸透性を有することがさらなる有利点である。本明細書に開示されている新規な化合物および組成物は、障害を受けた哺乳類の中枢神経系に適用されると、神経細胞および神経構造の修復を促進できることが他の有利点である。
本発明の化合物および組成物は、成長阻害性基体上での軸索突起成長を促進させることができる。
本発明の新規な化合物および組成物は、軸索の再生の促進および神経保護に有用でありうるが、癌のような疾患の治療に関して言及されたものも含めて、本明細書で言及されている他の脈絡に該化合物および組成物を利用できることを理解すべきである。
本発明の化合物および組成物は、CNSおよびPNSにおける傷害、損傷または疾患神経の治療および修復に有用でありうる。CNSの脳および脊髄において、本発明の化合物および組成物は、脳神経、頚髄神経、胸髄神経、腰髄神経、仙髄神経、尾髄神経、後頭下神経、灰色交通枝の神経、白色交通枝の神経、およびそれらの組合せからなる群から選択される傷害、損傷または疾患神経の治療および修復に有用でありうる。本発明の化合物および組成物は、傷害、損傷または疾患神経節の治療および修復に有用でありうる。体神経系、交感または内臓神経系、これらの神経系を互いに接続する神経線維、およびそれらの組合せに属する傷害、損傷または疾患髄神経線維の治療および修復に有用でありうる。本発明の化合物および組成物は、単極神経細胞、ドギエルの細胞および多極細胞から選択される傷害、損傷または疾患神経細胞の治療および修復に有用でありうる。
本発明の化合物および組成物の投与は、例えば、軟膜被覆の下および硬膜被覆の下からの投与、あるいは脳室、脊柱管または脊髄における脳脊髄への直接投与によるものであってもよい。本発明の化合物および組成物の神経への投与は、硬膜組織、クモ膜および軟膜を含む髄膜の下に存在する治療を必要とする神経への投与によるものであってもよい。本発明の化合物および組成物の神経への投与を軟膜の血管成分への投与によって達成することができる。本発明の化合物および組成物の投与を、硬膜外腔に存在する治療を必要とする神経への投与によって達成することができる。
本発明の化合物および組成物は、CNSの神経変性病、細胞死に関連する疾患、軸索損失に関連する疾患および外傷の処置および治療に有用でありうる。CNSの代表的な疾患および外傷としては、卒中、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)痴呆症、プリオン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、外傷性脳障害および緑内障等が挙げられる。本発明の化合物および組成物は、傷害、損傷、疾患、あるいは異常神経群からの軸索の成長を刺激するのに有用でありうる。
例えば本明細書では、本明細書で言及される化合物の式(すなわち式(I)、(II)および(I')等)は、それぞれ本明細書に記載されている各々の個別の化合物(その異性体を含む)、ならびに各々の可能な類またはサブ群もしくはサブ類の化合物を含むことを理解すべきである。したがって、当該九日号物または類もしくはサブ類は、本質的に本明細書においてあらゆる可能な様式で定義されることを理解すべきである。したがって、例えば、任意の当該化合物または類もしくはサブ類に対する本明細書における定義は、ポジティブならびにネガチブな定義または除外定義を含むことを理解すべきである。すなわち、本明細書における定義は、特定の個々の化合物、類またはサブ類をポジティブに含み、かつ/または特定の個々の化合物、類もしくはサブ類またはそれらの組合せを除外するものとして表現できるあらゆる定義を組み込んでいる。例えば式(例えば(I)等)に対する除外定義を次のように表すことができる:「ただし、xが0の場合はXは炭素であり、xが1の場合はXは硫黄である」。
(実施例)
以下の実施例は、本発明の広範な潜在的用途を例示するものであって、その範囲を限定することを意図するものではない。本発明の主旨および範囲から逸脱することなく、修正および変更を加えることが可能である。本発明を試験するための応用において、本明細書に記載されているのと同様または同等のあらゆる方法および材料を用いることができるが、例示的な化合物、方法および材料が記載されている。
特に指定のない限り、すべての化学物質は、Aldrich Chemicals Inc.から購入され、さらなる精製を行わずに使用された。溶媒(N,N-ジメチルホルムアルデヒド(DMF)、ジクロロメタン(DCM)、ジエチルエーテル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン(THF))を溶媒分配システムの中性アルミナカラムによる濾過によって乾燥した。カラムクロマトグラフィーを230〜400メッシュのシリカゲル上で実施した。プロトン核磁気共鳴(1HNMR)スペクトルを、重水素化クロロホルム(CDCl3)またはメタノール(CD3OD)にてBruker ARX400およびAV400に記録した。化学シフトは、残留溶媒信号に対するppm(δ単位)で報告されている。結合定数(J)は、ヘルツ(Hz)で報告されている。
本発明の化合物の調製を非限定的に以下に例示し、以下の構造を有する化合物の調製の概略を説明する。これらの化合物は、E-1およびE-2等と番号付けされ、Eは、以下に記載する合成例に関連する化合物を示す。
(実施例1)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-オキソピペリジン(E-1)
塩酸4-オキソピペリジン水和物(1.0g、6.5mmol)を乾燥ジクロロメタン(DCM、40mL)に溶解させた攪拌溶液を0℃に冷却し、ジイソプロピリエチルアミン(3.40mL、19.5mmol)で処理し、5分間にわたって攪拌し、20分間にわたってクロロギ酸ベンジル(1.54mL、10.7mmol)で処理し、室温まで加温し、2時間攪拌した。その混合物をDCM(25mL)と水(15mL)の間で分離させた。それらの層を分離し、水相をDCM(2×25mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×15mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける20〜40%EtOAcの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した。回収された留分を蒸発させて、カルバメートE-1(1.20g、85%)を透明な油として得た。C13H15NO3(M+)に対して計算したHRMSは233.1051で、実測値は233.1048であった。1H NMR(CDCl3)δ2.43(s,4H)、3.78(d,4H,J=5.96)、5.16(s,2H)、7.35(m,5H)。
(実施例2)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)ヒドラゾノ]ピペリジン(E-2)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-オキソピペリジン(E-1、1.02g、4.65mmol)を乾燥トルエン(25mL)に溶解させた攪拌溶液に対して、室温にてtert-ブチルカルバザート(616mg、4.65mmol)を添加した。その混合物を5分間にわたって攪拌し、24時間室温で放置し、Na2SO4(1g)で処理し、3時間にわたって室温で攪拌し、濾過した。濾液を蒸発させて、油としてのヒドラゾンE-2を定量的に与え、それをさらに精製することなく次の工程で使用した。C18H26N3O4[(MH)+]に対して計算したHRMSは348.1923で、実測値は348.1935であった。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s,9H)、2.35(m,2H)、2.51(m,2H)、3.62(m,4H)、5.13(s,2H)、7.33(m,5H)、7.77(br s,1H)。
(実施例3)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-3)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-[(N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)ヒドラゾノ](E-2、1.56g、4.49mmol)を室温にて乾燥テトラヒドロフラン(THF、7.5mL)に溶解させた攪拌溶液をシアノ水素化ホウ素ナトリウム(353mg、5.61mmol)で処理した後に、ブロモクレゾールグリーン(2mg)で処理した。その混合物を室温にて激しく攪拌し、緑色混合物を維持するために、2時間にわたって、ρ-トルエンスルホン酸(773mg、4.49mmol)をTHF(8mL)に溶解させた溶液で処理した。その反応物をEtOAc(25mL)と塩水(20mL)の間で分離させた。それらの相を分離し、水相をEtOAc(3×10mL)で抽出した。一緒にした有機相をNaHCO3飽和溶液(2×15mL)および塩水(1×15mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それをジオキサン(10mL)に懸濁させ、水酸化ナトリウム水溶液(1N、3mL)で徐々に処理し、室温にて5分間攪拌し、EtOAc(25mL)と水(5mL)の間で分離させた。それらの相を分離し、水相をEtOAc(1×10mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×10mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける30〜45%EtOAcの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、ヒドラジンE-3(931mg、61%)を白色固形物として得た。融点は122〜124℃であった。C18H28N3O4[(MH)+]に対して計算したHRMSは350.2079で、実測値は350.2079であった。1H NMR(CDCl3)δ1.29(m,2H)、1.45〜1.51(m,10H)、1.79(m,2H)、2.94(m,3H)、4.06(s,2H)、5.11(s,2H)、6.14(s,1H)、7.34(m,5H)。
(実施例4)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N-'-(1'-オクチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-4a)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-ヒドラジノ]ピペリジン(E-3、225mg、0.65mmol)を室温にて乾燥アセトニトリル(4mL)に溶解させた攪拌溶液をオクタナル(494μL、3.16mmol)で処理した後に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(82mg、1.4mmol)で処理し、室温にて15分間攪拌し、酢酸で処理して、pHを約6(約30μL/100mgのE-3、68μL)とし、5時間にわたって攪拌した。反応の過程を通じて、少量の分割量の酢酸(5μL/100mgのE-3、13μL)を添加して、反応物pHを約6に維持した。反応物を水(4mL)とEtOAc(20mL)の間で分離させた。それらの相を分離し、水相をEtOAc(2×20mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×15mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける30%EtOAcを使用したカラムクロマトグラフィーによって精製して、対応するヒドラジンE-4a(210mg、70%)を透明な油として得た。C26H44N3O4[(MH)+]に対して計算したHRMSは462.3318で、実測値は462.3316であった。1H NMR(CDCl3)δ0.87(t,3H,J=5.88)、1.25(s,11H)、1.43〜1.52(m,13H)、1.80(m,2H)、2.67(m,2H)、2.81(m,2H)、4.16(br s,2H)、5.11(s,2H)、5.32(s,1H)、7.34(m,5H)。
(実施例5)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-4b)
上述の手順に従って、プロパナール(684μL、9.48mmol)を採用し、N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-3、680mg、1.95mmol)を反応させて、465mg(66%)の対応するヒドラジンE-4bを油として得た。C21H33N3O4(M+)に対して計算したHRMSは392.2549で、実測値は392.2547であった。1H NMR(CDCl3)δ0.90(t,3H,J=7.6)、1.42(m,13H)、1.79(m,2H)、2.64(m,2H)、2.81(m,3H)、4.15(m,2H)、5.10(s,2H)、5.33(br s,1H)、7.31(m,5H)。
(実施例6)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-4c)
上述の手順に従って、ホルムアルデヒド(889μL、11.0mmol)を採用し、N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-3、800mg、2.29mmol)を反応させて、589mg(71%)の対応するヒドラジンE-4cを油として得た。C19H29N3O4(M+)に対して計算したHRMSは363.2158で、実測値は363.2162であった。1H NMR(CDCl3)δ1.23(m,11H)、1.79(m,2H)、2.58(s,3H)、2.70(m,1H)、2.84(m,2H)、4.10(m,2H)、5.09(s,2H)、5.56(br s,1H)、7.32(m,5H)。
(実施例7)
4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5a)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-4a、200mg、0.430mmol)を室温にてメタノール(15mL)に溶解させた攪拌溶液をパラジウム炭素(10重量%、24mg)で処理し、H2(1気圧)下で12時間攪拌した。反応物をCelite(登録商標)で濾過し、濾液を蒸発乾固して、E-5a(125mg、89%)を得、それをさらに精製することなく次の工程に使用した。C18H37N3O2(M+)に対して計算したHRMSは328.2964で、実測値は328.2962であった。1H NMR(CDCl3):δ0.87(t,3H,J=6.28)、1.26(m,12H)、1.43(s,12H)、1.84(d,2H,J=11.36)、2.64(m,5H)、3.16(d,2H,J=12.16)、5.29(s,1H)。
(実施例8)
4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5b)
E-5aの合成について上述した手順に従って、N-ベンジルオキシカルボニル-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-4b、180mg、0.470mmol)に水素添加して、103mg(83%)のヒドラジンE-5bを油として得た。C13H27N3O2(M+)に対して計算したHRMSは257.2089で、実測値は257.2094であった。1H NMR(CDCl3):δ0.84(m,3H)、1.35(m,11H)、1.88(m,2H)、2.01(m,2H)、2.64(m,2H)、2.98(m,3H)、3.43(m,2H)、5.95(br s,1H)、9.06(br s,1H)。
(実施例9)
4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5c)
E-5aの合成について上述した手順に従って、N-ベンジルオキシカルボニル-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-4c、140mg、0.390mmol)に水素添加して、76mg(86%)のヒドラジンE-5cを油として得た。m/z(FAB)230.2[(MH)+]。1H NMR(CDCl3):δ1.40(s,9H)、1.91(m,2H)、2.09(m,2H)、2.62(s,3H)、2.94(m,1H)、3.04(m,2H)、3.46(m,2H)、6.24(br s,1H)、9.07(br s,1H)。
(実施例10)
N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-6a)
4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5a、50mg、0.15mmol)を室温にて3mLの乾燥DCMに溶解させた攪拌溶液をトリエチルアミン(63μL、0.45mmol)および塩化5-イソキノリンスルホニル(82mg、0.3mmol)で処理した。反応物を18時間にわたって攪拌し、DCM(5mL)で希釈し、NaHCO3の飽和水溶液(1×2mL)、水(1×5mL)および塩水(1×2mL)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、DCMにおける2%MeOHの溶出剤を使用したカラムクロマトグラフィーによって精製して、32mg(40%)の化合物E-6aを油として得た。C26H42O4N4S(M+)に対して計算したHRMSは519.2998で、実測値は519.2997であった。1H NMR(CDCl3)δ0.87(t,3H,J=6.68)、1.23(m,10H)、1.41〜1.53(m,11H)、1.58(m,2H)、1.87(d,2H,J=11.12)、2.67(m,5H)、3.84(d,2H,J=1.56)、5.27(br s,1H)、7.77(t,1H,J=7.8)、8.27(d,1H,J=8.16)、8.43(d,1H,J=7.24)、8.69(m,2H)、9.42(br s,1H)。
(実施例11)
N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-6b)
E-6aの合成について上述した手順に従って、4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5b、60mg、0.23mmol)を反応させて、44mg(42%)の化合物E-6bを油として得た。1H NMR(CDCl3)δ0.83(t,3H,J=7.28)、1.41(m,14H)、1.83(d,2H,J=12.6)、2.58(m,5H)、3.85(d,2H,J=11.4)、7.85(t,1H,J=8.16)、8.43(t,2H,J=7.28)、8.60(d,2H,J=6.48)、9.39(s,1H)。
(実施例12)
N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-6c)
E-6aの合成について上述した手順に従って、4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5c、50mg、0.20mmol)を反応させて、35mg(38%)の化合物E-6cを油として得た。C20H29O4N4S[(MH+)]に対して計算したHRMSは421.1909で、実測値は419.1904であった。1H NMR(CDCl3)δ1.39(s,9H)、1.53(m,2H)、1.86(d,2H,J=11.2)、2.54(m,4H)、2.68(m,2H)、3.76(m,2H)、5.46(br s,1H)、7.70(t,1H,J=7.64)、8.21(d,1H,J=8.12)、8.36(d,1H,J=7.36)、8.50(m,1H)、8.83(br s,1H)、9.36(br s,1H)。
(実施例13)
二塩酸N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(1'-オクチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-7;BA-1041)
N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-6a、30mg、0.06mmol)をメタノール(1.5mL)に溶解させた溶液を0℃に冷却し、次いでHClをMeOH(5.6M、3mL)に溶解させた溶液で一滴ずつ処理した。その混合物を室温まで加温し、4時間にわたって攪拌し、蒸発乾固して、23mg(90%)の対応する塩酸塩E-7aを得た。m/z(FAB)419.4[(MH)+]。1H NMR(CD3OD)δ0.90(t,3H,J=6.84)、1.35(m,12H)、1.84(m,4H)、2.11(d,2H,J=9.96)、2.82(q,2H,J=6.24)、3.13(m,2H)、4.08(q,2H,J=3.48)、8.22(t,1H,J=7.64)、8.84(m,3H)、9.20(d,1H,J=6.6)、10.01(s,1H)。
(実施例14)
二塩酸N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(1'-プロピル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-7b;BA-1042)
E-7aの合成について上述した手順に従って、N-(5-イソキノリンスルホニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-6b、14mg、0.030mmol)を脱保護して、10mg(86%)の化合物E-7bを油として得た。m/z(FAB)349.2[(MH)+]。1H NMR(CD3OD)δ0.97(t,3H,J=6.4)、1.63〜1.89(m,4H)、2.07(m,2H)、2.77(t,2H,J=11)、3.14(m,2H)、3.31(s,3H)、4.08(d,2H,J=11.92)、8.18(t,1H,J=7.88)、8.79(m,3H)、9.13(d,1H,J=7.12)、9.93(s,1H)。
(実施例15)
二塩酸N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(1'-メチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-7c;BA-1043)
E-7aの合成について上述した手順に従って、N-(5"'-イソキノリンスルホニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-6c、23mg、0.050mmol)を脱保護して、15mg(86%)の塩酸塩E-7cを黄色固体物として得た。m/z(FAB)321.2[(MH)+]。1H NMR(CD3OD)δ1.75(m,2H)、2.11(m,2H)、2.76(t,2H,J=10.6)、2.87(s,3H)、4.06(d,2H,J=11.04)、8.20(t,1H,J=7.92)、8.82(m,3H)、9.17(d,1H,J=6.88)、9.98(s,1H)。
(実施例16)
N-(4"'-ピリジンカルボニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-8a)
4-[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-5a、23mg、0.07mmol)をジメチルホルムアミド(2mL)に溶解させた攪拌溶液に対して、DIEA(74μL、0.42mmol)およびテトラフルオロホウ酸2-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウム(TBTU、91mg、0.28mmol)を室温にて添加した後に、イソニコチン酸(35mg、0.28mmol)を添加した。その混合物を一晩攪拌した。揮発物を減圧下で除去し、残渣を、2分間にわたって激しく攪拌しながら、EtOAc(10mL)と1N水酸化ナトリウム水溶液(2mL)の間で分離させた。それら2つの層を分離し、有機相を水(3×5mL)および塩水(3mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、CHCl3における1%メタノールを使用したカラムクロマトグラフィーで精製して、対応するアミドE-8aを油として得た。m/z(MAB)432.4(M+);1H NMR(CDCl3)δ0.87(t,3H,J=7)、1.26(m,11H)、1.54(m,11H)、1.59(m,1H)、1.78(d,1H,J=11)、1.95(d,1H,J=10.6)、2.71(m,2H)、3.05(m,3H)、3.64(d,1H,J=13.4)、4.56(d,1H,J=11.2)、5.28(s,1H)、7.28(d,2H,J=5.76)、8.69(m,2H)。
(実施例17)
N-(4"'-ピリジンカルボニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-8b)
E-8aの合成について上述した手順に従って、4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5b、46mg、0.18mmol)を反応させて、25mg(46%)のアミドE-8bを黄色の油として得た。m/z(MAB)362.2(M+)。1H NMR(CDCl3)δ0.91(t,3H,J=7.28)、1.44(m,13H)、1.82(m,1H)、1.97(m,1H)、2.71(m,2H)、3.01(m,3H)、3.64(d,1H,J=13.5)、4.56(d,1H,J=12.2)、5.33(br s,1H)、7.28(d,2H,J=5.28)、8.68(m,2H)。
(実施例18)
二塩酸N-(4"'-ピリジンカルボニル)-4-[N'-(1'-オクチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-9a;BA-1044)
N-(4-ピリジン)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-8a、12mg、0.03mmol)をメタノール(500μL)に溶解させた攪拌溶液を0℃に冷却し、HClをMeOH(5.6M、1.5mL)に溶解させた溶液で一滴ずつ処理し、室温まで加温し、4時間にわたって攪拌し、蒸発乾固して、8mg(89%)の塩酸塩E-9aを黄色固形物として得た。C19H32ON4(M+)に対して計算したHRMSは332.2562で、実測値は332.2564であった。1H NMR(CD3OD)δ0.91(t,3H,J=6.96)、1.18(m,13H)、1.85(m,3H)、2.02(m,1H)、2.18(m,1H)、3.01(t,1H,J=12.7)、3.28(m,2H)、3.66(d,1H,J=7)、4.78(d,1H,J=12.1)、8.19(d,2H,J=5.48)、9.01(d,2H,J=5.36)。
(実施例19)
二塩酸N-(4"'-ピリジンカルボニル)-4-[N'-(1'-プロピル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-9b;BA-1045)
E-9aの合成について上述した手順に従って、N-(4-ピリジン)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-プロピル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-8b、24mg、0.070mmol)を反応させて、15mg(88%)の塩酸塩E-9bを黄色固形物として得た。C14H22ON4(M+)に対して計算したHRMSは262.1794で、実測値は262.1803であった。1H NMR(CD3OD)δ1.02(t,3H,J=7.4)、1.82(m,3H)、2.02(m,1H)、2.20(m,1H)、3.01(t,1H,J=12.7)、3.16(m,2H)、3.31.(q,2H,J=11.6)、3.58(m,1H)、3.67(d,1H,J=13.8)、4.77(d,1H,J=13.4)、8.19(d,2H,J=6.24)、9.01(d,2H,J=6.16)。
(実施例20)
N-(3"'-ピリジンカルボニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-10a)
4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5a、60mg、0.18mmol)をジメチルホルムアミド(9mL)に溶解させた攪拌溶液に対して、DIEA(160μL、0.900mmol)およびTBTU(176mg、0.540mmol)を室温にて添加した後に、ニコチン酸(67mg、0.54mmol)を添加した。その混合物を一晩室温にて攪拌した。揮発物を減圧下で除去し、残渣を、2分間にわたって激しく攪拌しながら、EtOAc(20mL)と1N水酸化ナトリウム水溶液(4mL)の間で分離させた。それら2つの層を分離し、有機相を水(3×10mL)および塩水(6mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、CHCl3における1から3%メタノールの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーで精製して、45mg(56%)のアミドE-10aを油として得た。C20H40O3N4(M+)に対して計算したHRMSは432.3101で、実測値は432.3109であった。1H NMR(CDCl3)δ0.87(t,3H,J=6.96)、1.25(m,9H)、1.43(m,14H)、1.85(m,2H)、2.70(m,2H)、3.07(m,3H)、3.74(m,1H)、4.56(m,1H)、5.35(br s,1H)、7.37(m,1H)、7.75(d,1H,J=7.68)、8.65(br s,2H)。
(実施例21)
N-(3"'-ピリジンカルボニル)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-10b)
E-10aの合成について上述した手順に従って、4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-5c、52mg、0.23mmol)を反応させて、25mg(34%)のアミンE-10bを油として得た。C17H26O3N4(M)+に対して計算したHRMSは334.2005で、実測値は334.2007であった。1H NMR(CDCl3)δ1.43(m,12H)、1.59(m,1H)、1.83(m,1H)、1.95(m,1H)、2.63(s,3H)、2.83(m,1H)、3.07(m,1H)、3.73(m,1H)、4.52(m,1H)、7.36(m,1H)、7.74(d,1H,J=7.8)、8.65(br s,2H)。
(実施例22)
二塩酸N-(3"'-ピリジンカルボニル)-4-[N'-(1'-オクチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-11a;BA-1046)
N-(3-ピリジン)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-オクチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-10a、45mg、0.10mmol)をメタノール(1mL)に溶解させた攪拌溶液を0℃に冷却し、次いでHClをMeOH(5.6M、2mL)に溶解させた溶液で一滴ずつ処理した。その混合物を室温まで加温して、4時間にわたって攪拌し、蒸発乾固して、30mg(86%)の塩酸塩E-11aを黄色固形物として得た。m/z(FAB)333.3[(MH)+]。1H NMR(CDCl3)δ0.90(t,3H,J=6.92)、1.34(m,11H)、1.77(m,4H)、2.05(m,2H)、2.99(m,1H)、3.17(m,2H)、3.47(m,1H)、3.79(m,1H)、4.76(m,1H)、8.17(m,1H)、8.71(d,1H,J=7.68)、8.96(d,1H,J=5.16)、9.07(s,1H)。
(実施例23)
二塩酸N-(3"'-ピリジンカルボニル)-4-[N'-(1'-メチル)ヒドラジノ]ピペリジン(E-11b;BA-1047)
E-11aの合成について上述した手順に従って、N-(3-ピリジン)-4-{[N"-(tert-ブチルオキシカルボニル)-N'-(1'-メチル)]ヒドラジノ}ピペリジン(E-10b、18mg、0.05mmol)を脱保護して、10mg(83%)の塩酸塩E-11bを褐色の固形物として得た。m/z(FAB)235.3[(MH)+]。1H NMR(CDCl3)δ1.81(m,2H)、2.06(m,1H)、2.21(m,1H)、2.94(s,3H)、3.03(m,1H)、3.43(m,2H)、3.80(m,1H)、4.76(m,1H)、8.21(m,1H)、8.75(d,1H,J=7.24)、8.98(m,1H)、9.11(br s,1H)。
(実施例24)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-(ヒドロキシメチル)ピペリジン(E-12)
4-ヒドロキシメチルピペリジン(2.0g、17.4mmol)を乾燥ジクロロメタン(DCM、100mL)に溶解させた攪拌溶液を0℃に冷却し、トリエチルアミン(4.8mL、34.8mmol)で処理した後に、クロロギ酸ベンジル(3.7mL、34.8mmol)で処理し、室温まで昇温させ、2時間にわたって攪拌した。その混合物をDCM(50mL)と水(30mL)の間で分離させた。それらの層を分離し、水相をDCM(2×50mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×30mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける70から100%のEtOAcの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、3.85g(89%)のE-12を透明な油として得た。1H NMR(CDCl3)δ1.17(m,2H)、1.72(m,3H)、2.15(br s,1H)、2.78(t,2H,J=12.24)、3.47(d,2H,J=6.04)、4.20(d,2H,J=11.68)、5.12(s,2H)、7.33(m,5H)。
(実施例25)
N-ベンジルオキシカルボニル-4-(ホルミル)-ピペリジン(E-13)
N-(ベンジルオキシカルボニル)-4-(ヒドロキシメチル)ピペリジン(E-12、2g、8mmol)およびCelite(登録商標)(4g)を室温にて乾燥DCM(120mL)に懸濁させた攪拌懸濁液をクロロギ酸ピリジニウム(3.5g、16.0mmol)で処理し、3時間にわたって攪拌し、Celite(登録商標)で濾過した。濾液を蒸発させて暗色の残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける25から50%のEtOAcの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、透明な油としての1.5g(75%)のアルデヒドE-13を得、それをそのまま次の工程に使用した。1H NMR(CDCl3)δ1.43(dd,2H,J=10)、1.78(m,2H)、2.31(m,1H)、2.91(t,2H,J=10.6)、3.96(m,2H)、5.05(s,2H)、7.24(m,5H)、9.52(s,1H)。
(実施例26)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(ヒドロキシ)エチル]ピペリジン(E-14a)
N-(ベンジルオキシカルボニル)-4-(ホルミル)-ピペリジン(E-13、1g、4mmol)をジエチルエーテル(Et2O、40mL)に溶解させた溶液を-78℃に冷却し、20分間にわたって、臭化メチルマグネシウムのEt2O溶液(3M、3.2mL、9.6mmol)で処理し、-78℃で2時間にわたって攪拌し、Et2O(100mL)と飽和NH4Cl(15mL)の間で分離させた。それらの相を分離し、水相をEt2O(2×20mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×30mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける35から50%のEtOAcの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、715mg(67%)のアルコールE-13を油として得た。C15H21O3N(M+)に対して計算したHRMSは263.1521で、実測値は263.1526であった。1H NMR(CDCl3)δ1.18(d,3H,J=6.32)、1.25(m,2H)、1.44(m,1H)、1.63,(d,1H,J=12.6)、1.85(d,1H,J=13)、2.75(t,2H,J=12.4)、3.59(m,1H)、4.25(d,2H,J=10.1)、5.13(s,2H)、7.33(m,5H)。
(実施例27)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(ヒドロキシ)ブト-3'-エニル]ピペリジン(E-14b)
N-(ベンジルオキシカルボニル)-4-(ホルミル)-ピペリジン(E-13、1.5g、6.3mmol)をEt2O(60mL)に溶解させた溶液を-78℃に冷却し、20分間にわたって、臭化アリルマグネシウムのEt2O溶液(1M、12.5mL、12.5mmol)で処理し、2時間にわたって攪拌し、Et2O(100mL)と飽和NH4Cl(15mL)の間で分離させた。それらの相を分離し、水相をEt2O(2×20mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×30mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、溶出剤としてのヘキサンにおける25から45%のEtOAcの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、1.25g(71%)のアルコールE-14bを油として得た。C17H23O3N(M+)に対して計算したHRMSは289.1677で、実測値は289.1676であった。1H NMR(CDCl3)δ1.22(m,2H)、1.55(m,2H)、1.79(d,1H,J=12.7)、2.06(m,1H)、2.28(m,1H)、2.64(m,3H)、3.36(m,1H)、4.19(m,2H)、5.07(m,4H)、5.82(tt,1H,J=6.32)、7.30(m,5H)。
(実施例28)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(メタンスルホニルオキシ)エチル]ピペリジン(E-15a)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(ヒドロキシ)エチル]ピペリジン(E-14a、700mg、2.66mmol)をDCM(100mL)に溶解させた溶液を0℃に冷却し、塩化メタンスルホニル(412μL、5.32mmol)およびトリメチルアミン(1.1mL、7.98mmol)で処理し、1時間にわたって攪拌し、室温まで加温し、2時間にわたって攪拌した。反応混合物をDCM(100mL)で希釈し、1MのNaH2PO4(2×50mL)および塩水(1×25mL)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それをヘキサンにおける40%EtOAcを使用したカラムクロマトグラフィーによって精製して、747mg(82%)のメシレートE-15aを油として得た。C16H23O5NS(M)+に対して計算したHRMSは341.1297で、実測値は341.1302であった。1H NMR(CDCl3)δ1.27(m,2H)、1.39(d,3H,J=3.28)、1.73(m,3H)、2.74(m,2H)、2.98(s,3H)、4.24(m,2H)、4.61(m,1H)、5.11(s,2H)、7.33(m,5H)。
(実施例29)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(メタンスルホニルオキシ)ブト-3'-エニル]ピペリジン(E-15b)
E-15aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(ヒドロキシ)ブト-3'-エニル]ピペリジン(E-14b、1.0g、3.5mmol)を油としての997mg(79%)の対応するメシレートE-15bに変換した。1H NMR(CDCl3)δ1.23(m,2H)、1.64(m,1H)、1.76(m,2H)、2.45(m,2H)、2.69(m,2H)、2.95(s,3H)、4.21(m,2H)、4.54(d,1H,J=5.24)、5.12(m,4H)、5.78(tt,1H,J=9.84)、7.28(m,5H)。
(実施例30)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(1'-アジド-エチル)ピペリジン(E-16a)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(メタンスルホニルオキシ)エチル]ピペリジン(E-15a、740mg、2.17mmol)をDMF(50mL)に溶解させた攪拌溶液をアジ化ナトリウム(417mg、6.51mmol)で処理し、80℃まで加熱し、一晩攪拌した。揮発物を減圧下で除去し、残渣をEt2Oに懸濁させ、水(2×50mL)および塩水(1×25mL)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、蒸発させて、油としての350mg(56%)のアジ化物E-16aとした。アジ化物は、さらに精製することなく次の工程で使用するのに十分に純粋であった。。C15H20O2N4(M+)に対して計算したHRMSは288.1586で、実測値は288.1588であった。1H NMR(CDCl3)δ1.24(m,5H)、1.45(m,1H)、1.61(m,1H)、1.78(d,1H,J=12.9)、2.72(m,2H)、3.28(m,1H)、4.24(m,2H)、5.12(s,2H)、7.35(m,5H)。
(実施例31)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(1'-アジド-ブト-3'-エニル)ピペリジン(E-16b)
E-16aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[1'-(メタンスルホニルオキシ)ブト-3'-エニル]ピペリジン(E-15b、990mg、2.70mmol)を油としての655mg(77%)のアジ化物E-16bに変換した。C17H23O2N4[(MH)+]に対して計算したHRMSは315.1821で、実測値は315.1816であった。1H NMR(CDCl3)δ1.22(m,2H)、1.53(m,2H)、1.70(d,1H,J=17.3)、2.26(m,2H)、2.66(m,2H)、3.12(m,1H)、4.19(m,2H)、5,12(m,4H)、5.75(m,1H)、7.29(m,5H)。
(実施例32)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(エタン-1'-アミノ)ピペリジン(E-17a)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(1'-アジド-エチル)ピペリジン(E-16a、350mg、1.21mmol)を室温にてTHF(25mL)に溶解させた溶液をトリフェニルホスフィン(639mg、2.43mmol)および水(217μL、12.1mmol)で処理し、45℃で一晩加熱し、Et2O(100mL)で希釈し、水(2×50mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて、油としての270mg(85%)のアミンE-17aとした。アミンは、さらに精製することなく次の工程で使用するのに十分に純粋であった。1H NMR(CDCl3)δ1.05(d,3H,J=8.6)、1.25(m,3H)、1.48〜1.71(m,4H)、2.71(m,3H)、4.21(br s,2H)、5.13(s,2H)、7.46(m,5H)。
(実施例33)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(ブト-3'-エン-1'-アミン)ピペリジン(E-17b)
E-17aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(1'-アジド-ブト-3'-エニル)ピペリジン(E-16b、650mg、2.07mmol)を油としての488mg(82%)のアミンE-17bに変換した。1H NMR(CDCl3)δ1.24(m,2H)、1.67(m,3H)、1.98(m,2H)、2.26(m,1H)、3.73(m,3H)、3.73(t,1H,J=6.16)、4.25(br s,2H)、5.14(m,4H)、5.78(m,1H)、7.31(m,5H)。
(実施例34)
(R,S)-N-(ベンジルオキシカルボニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-18a)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(エタン-1'-アミノ)ピペリジン(E-17a、300mg、1.14mmol)を室温にてジメトキシエタンと水の混合物(1:1 v:v、30mL)に溶解させた攪拌溶液を炭酸ナトリウム(127mg、1.19mmol)および重炭酸ナトリウム(100mg、1.19mg)で処理した後に、重炭酸ジ-tert-ブチル(285mg、1.3mmol)で処理した。その混合物を室温にて一晩攪拌し、飽和NH4Cl(10mL)とEtOAc(30mL)の間で分離させた。それらの相を分離し、水相をEtOAc(2×25mL)で抽出した。一緒にした有機相を塩水(1×15mL)で洗浄し、、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、ヘキサンにおける30%EtOAcの溶出剤を使用したカラムクロマトグラフィーによって精製して、212mg(51%)のカルバマートE-18aを油として得た。C20H30O4N2(M+)に対して計算したHRMSは362.2205で、実測値は263.2205であった。1H NMR(CDCl3)δ1.07(d,3H,J=9.04)、1.20(m,1H)、1.43(m,10H)、1.66(m,2H)、2.69.(m,2H)、3.48(m,2H)、4.28(m,2H)、4.36(m,1H)、5.11(s,2H)、7.35(m,5H)。
(実施例35)
(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-ブト-3'-エン-1'アミノ]ピペリジン(E-18b)
E-18aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-(ブト-3'-エン-1'アミノ)ピペリジン(580mg、2.01mmol)を反応させて、476mg(61%)のカルバマートE-18bを油として得た。C22H32O4N2(M+)に対して計算したHRMSは388.2362で、実測値は388.2364であった。1H NMR(CDCl3)δ1.24(m,2H)、1.42(s,9H)、1.55(m,1H)、1.67(m,2H)、2.08(m,1H)、2.25(m,1H)、2.72(m,2H)、3.56(m,1H)、4.22(m,2H)、4.37(m,1H)、5.12(m,4H)、5.75(m,1H)、7.31(m,5H)。
(実施例36)
(R,S)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-19a)
(R,S)-N-(ベンジルオキシカルボニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-18a、65mg、0.17mmol)を室温でメタノール(5mL)に溶解させた攪拌溶液をパラジウム炭素(10重量%、7mg)で処理し、12時間にわたってH2(1気圧)下で攪拌した。反応物をCelite(登録商標)で濾過し、濾液を蒸発乾固して、E-19a(37mg、95%)を得、それをさらに精製することなく次の工程に使用した。C12H24O2N2(M+)に対して計算したHRMSは228.1838で、実測値は228.1839であった。1H NMR(CDCl3)δ1.08(d,3H,J=3.88)、1.39(s,9H)、1.65(m,2H)、1.80(m,2H)、2.81(m,3H)、3.48(m,2H)、3.58(m,1H)、4.47(br s,1H)、9.22(br s,1H)。
(実施例37)
(R,S)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-19b)
E-19aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-N-ベンジルオキシカルボニル-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-ブト-3'-エン-1'アミノ]ピペリジン(E-18b、120mg、0.31mmol)を油としての77mg(97%)のE-19bに変換した。C14H28O2N2(M+)に対して計算したHRMSは256.2151で、実測値は256.2163であった。1H NMR(CDCl3)δ0.86(t,3H,J=6.64)、1.24(m,3H)、1.38(m,10H)、1.68(m,3H)、1.82(m,2H)、2.80(m,2H)、3.47(m,3H)、4.38(d,1H,J=8.88)、9.14(br s,1H)。
(実施例38)
(R,S)-N-(3"-ピリジンカルボニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-20)
(R,S)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-19b、40mg、0.16mmol)をジメチルホルムアミド(5mL)に溶解させた攪拌溶液をDIEA(140μL、0.80mmol)およびテトラフルオロホウ酸2-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウム(TBTU、156mg、0.48mmol)で処理した後に、ニコチン酸(60mg、0.48mmol)で処理し、室温にて一晩攪拌した。揮発物を減圧下で除去し、残渣を、2分間にわたって激しく攪拌しながら、EtOAc(15mL)と1N水酸化ナトリウム水溶液(2mL)の間で分離させた。それら2つの層を分離し、有機相を水(3×10mL)および塩水(6mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、CHCl3における2から5%のメタノールの勾配を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製して、31mg(55%)のアミドE-20を油として得た。C20H31O3N3(M+)に対して計算したHRMSは361.2365で、実測値は361.2357であった。1H NMR(CDCl3)δ0.90(t,3H,J=6.92)、1.30(m,4H)、1.42(m,11H)、1.64(m,2H)、1.73(m,1H)、2.73(m,1H)、3.01(m,1H)、3.51(m,1H)、3.73(m,1H)、4.30(d,1H,J=9.56)、4.76(m,1H)、7.35(m,1H)、7.73(d,1H,J=7.48)、8.65(s,2H)。
(実施例39)
二塩酸(R,S)-N-(3"-ピリジンカルボニル)-4-[ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-21;BA-1048)
(R,S)-N-(3"-ピリジンカルボニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-20、25mg、0.07mmol)をメタノール(500μL)に溶解させた攪拌溶液を0℃に冷却し、HClをMeOHに溶解させた溶液(5.6M、1.5mL)で一滴ずつ処理し、室温まで加温し、4時間にわたって攪拌し、蒸発乾固して、15mg(83%)の塩酸塩E-21を白色固形物として得た。m/z(FAB)262.2[(MH)+]。1H NMR(CD3OD)δ0.96(t,3H,J=7.12)、1.36〜1.68(m,8H)、1.85(m,1H)、1.99(m,1H)、2.99(t,1H,J=11.9)、3.17(m,1H)、3.69(m,1H)、4.69(d,1H,J=12.1)、8.19(t,1H,J=7.56)、8.72(d,1H,J=7.72)、8.95(d,1H,J=5.4)、9.06(s,1H)。
(実施例40)
(R,S)-N-(5"-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-22a)
(R,S)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-19a、25mg、0.11mmol)を室温にて2mLの乾燥DCMに溶解させた攪拌溶液をトリエチルアミン(46μL、0.33mmol)および塩化5-イソキノリンスルホニル(60mg、0.22mmol)で処理した。反応物を18時間にわたって攪拌し、DCM(5mL)で希釈し、NaHCO3の飽和水溶液(1×2mL)、水(1×5mL)および塩水(1×2mL)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、蒸発させて残渣とし、それを、DCMにおける2%MeOHの溶出剤を使用したカラムクロマトグラフィーによって精製して、19mg(48%)のE-22aを油として得た。1H NMR(CDCl3)δ1.02(d,3H,J=9.12)、1.26(m,3H)、1.40(s,9H)、1.71(m,2H)、2.46(t,2H,J=11.3)、3.37(m,1H)、3.90(d,2H,J=12.0)、4.28(d,1H,J=7.68)、7.72(t,1H,J=7.6)、8.22(d,1H,J=8.2)、8.38(d,1H,J=7.24)、8.53(d,1H,J=5.6)、8.67(d,1H,J=5.72)、9.36(br s,1H)。
(実施例41)
(R,S)-N-(5"-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-22b)
E-22aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)-ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-37、45mg、0.17mmol)を油としての29mg(37%)のE-22bに変換した。C23H34O4N4S[(MH)+]に対して計算したHRMSは448.2270で、実測値は448.2262であった。1H NMR(CDCl3)δ0.85(t,3H,J=6.65)、1.31(m,6H)、1.39(m,10H)、1.67(m,2H)、2.45(t,2H,J=11.3)、3.41(m,1H)、3.90(d,2H,J=11.4)、4.24(d,1H,J=9.41)、7.71(t,1H,J=7.56)、8.21(d,1H,J=8.16)、8.36(d,1H,J=7.4)、8.51(d,1H,J=5.64)、8.67(d,1H,J=4.64)、9.35(s,1H)。
(実施例42)
二塩酸(R,S)-N-(5"-イソキノリンスルホニル)-4-[エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-23a;BA-1049)
(R,S)-N-(5'-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エチル-1'-アミノ]ピペリジン(E-22a、15mg、0.04mmol)をMeOH(500μL)に溶解させた溶液を0℃に冷却し、HClをMeOHに溶解させた溶液(5.6M、1.5mL)で処理し、室温まで加温し、4時間にわたって攪拌し、蒸発乾固して、9mg(82%)の塩酸塩E-23aを白色固形物として得た。m/z(FAB)320.2[(MH)+]。1H NMR(CD3OD)δ1.24(d,3H,J=9.01)、1.42(m,2H)、1.62(m,1H)、1.83(m,2H)、2.64(m,2H)、3.16(m,1H)、4.01(m,2H)、8.20(m,1H)、8.81(m,3H)、9.21(m,1H)、10.00(m,1H)。
(実施例43)
二塩酸(R,S)-N-(5"-イソキノリンスルホニル)-4-[ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-23b;BA-1050)
E-23aの合成について上述した手順に従って、(R,S)-N-(5"-イソキノリンスルホニル)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)ブタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-22b、25mg、0.06mmol)を白色固形物としての16mg(84%)の塩酸塩E-23bに変換した。m/z(FAB)348.2[(MH)+]。1H NMR(CD3OD)δ0.92(t,3H,J=7.12)、1.23〜1.67(m,6H)、1.70(m,1H)、1.76(t,2H,J=11.2)、2.58(t,2H,J=12)、3.03(m,1H)3.96(d,2H,J=10.5)、8.17(t,1H,J=7.96)、8.76(d,2H,J=7.44)、8.81(d,1H,J=8.22)、9.17(d,1H,J=6.84)、10.00(s,1H)。
(実施例44)
(R,S)-N-[(4-ピリジル)アミノカルボニル]-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-24)
(R,S)-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-19a、65mg、0.3mmol)をTHF(7mL)に溶解させた溶液を4-ピリジルイソシアネート(72mg、0.6mmol)で処理し、5時間にわたって還流加熱した。溶媒を減圧下で除去し、CHCl3における7%MeOHの溶出剤を使用したカラムクロマトグラフィーによって残渣を精製して、89mg(89%)のE-24を油として得た。1H NMR(CDCl3)δ1.06(d,3H,J=6.8)、1.21(m,2H)、1.41(s,9H)、1.49(m,1H)、1.65(d,1H,J=12.8)、1.72(d,1H,J=12.7)、2.78(t,2H,J=12.8)、3.53(m,1H)、4.16(d,2H,J=12.7)、4.56(d,1H,J=8.6)、7.36(d,2H,J=6.24)、7.72(s,1H)、8.33(d,2H,J=6.16)。
(実施例45)
二塩酸(R,S)-N-[(4-ピリジル)アミノカルボニル]-4-[エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-25;BA-1051)
(R,S)-N-[(4-ピリジル)アミノカルボニル]-4-[N'-(tert-ブチルオキシカルボニル)エタン-1'-アミノ]ピペリジン(E-24、10mg、0.03mmol)をMeOH(500μL)に溶解させた溶液を0℃に冷却し、HClをMeOHに溶解させた溶液(5.5M、1.5mL)で処理し、室温まで加温し、4時間にわたって攪拌し、蒸発乾固して、6mg(84%)の塩酸塩E-25を白色固体として得た。1H NMR(CD3OD)δ1.31(d,3H,J=6.72)、1.46(m,2H)、1.85(m,3H)、2.99(t,2H,J=12.96)、3.19(m,1H)、4.36(d,2H,J=13.6)、8.02(d,2H,J=7.08)、8.47(d,2H,J=7.04)。
(実施例46)
COS細胞で発現されるヒトRhoキナーゼ(ROK)の調製
ROKが調製され、いくつかの供給源からクローン化されたcDNAおよびヒトp160-ROK cDNA(p160-ROCK1)のクローニングが報告された(Ishizakiら、1996、EMBO J.15:1885および米国特許第5,906,819号を参照)。哺乳類の細胞におけるヒトRhoキナーゼの過発現は、便利で容易に更新されるROK活性源を提供する。ROKは、pCAG-myc-p160におけるクローンとして入手可能である(Ishizakiら、1997、FEBS Lett.404:118を参照)。この発現プラスミドにおけるmyc標識は、免疫学的技術を用いた精製を可能にする。
形質移入特性DNAは、midi-キット(Qiagen)を使用して、pCAG-myc-p160myc-727を含有する大腸菌(DH5αXL1-ブルー)から調製される(Ishizakiら、1997を参照)。この構造は、POK活性を構成的に発現させ、約98kDaのポリペプチドを生成する。COS細胞(ATCC(アメリカンタイプカルチャーコレクション)から入手可能)を培養し、一晩成長させる。リポフェクタミン(Qiagen)を使用して発現ベクターDNAを導入した後に、18時間インキュベーションを行う。以下の工程を氷上で行う。形質移入細胞を予め冷却したPBSで洗浄し、次いでプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤のカクテルを含む緩衝剤(20mM Tris-HCl(pH=7.5)、1mM EDTA,1mM EGTA、5mM MgCl2、25mM NaF、10mMβグリセロリン酸塩、5mMピロリン酸ナトリウム、0.2mMフッ化フェニルメチルスルホニル、2mMジチオスレイトール、0.2mMバナジン酸ナトリウム、0.05%トリトンX-100、0.1μMカリクリンA)で溶解させる。細胞を擦り取って1.5mLエッペンドルフ管に入れ、10,000gで10分間遠心分離させる。上澄液を新たな管に移し、ペレットを破棄する。抗myc抗体(9E10;Sigma#M5546)を添加し、管を4℃で2時間にわたって回転させる。溶解緩衝剤中の予め洗浄したタンパク質G-セファロース(Sigma、#P3296)を添加し、インキュベーションおよび回転を2時間にわたって継続する。次いで、懸濁液を1,000gで5分間遠心分離させ、ペレットを溶解緩衝剤で3回洗浄し、ROKキナーゼ緩衝剤(50mM Hepes-NaOH(pH=7.4)、10mM MgCl2、5mM MnCl2、2mMジチオスレイトール、0.02%Brij35)で1回洗浄する。ペレットをROKキナーゼ緩衝剤に懸濁させて、固定化ROKの標準酵素製品を得る。ROKを商業的に購入することも可能である。
(実施例47)
Rhoキナーゼ(ROK)活性の阻害剤としての本発明の化合物の評価
ROK活性を阻害する本発明の化合物の能力を、組換えROK酵素、放射性ATPおよびミエリン塩基タンパク質(MBP;Upstate(ニューヨーク州Lake Placid)から購入)を使用する無細胞検定システムで試験することができる。MBPは、高リン酸化タンパク質であり、精製された形態で安価に購入され、ROKによりリン酸化され、リン酸化のための検定基体として使用される。Rho関連キナーゼ(ROK)活性の測定は、新規な阻害剤の効力を判断するのに重要である。MBPは、ROKおよびいくつかの他のタンパク質キナーゼに対する基体であり、ROK活性を定量するとともに、ROKに対する新規な阻害剤の効力および特異性を示すのに有用である。他の基体の分析のために条件を調整することが可能である。検定は、他のタンパク質キナーゼに対するIC50(不活性化濃度50%)値を調べて、ROKキナーゼに対する特異性の指標を示すために最適な緩衝剤およびインキュベーション条件を提供するために必要に応じて修正される。ROKに対する特異性を評価するのに使用される他のタンパク質キナーゼとしては、PKCα、PKA、PKNおよびMLCKが挙げられる。
(実施例48)
キナーゼ検定
ROCKII(Upstate(ニューヨーク州Lake Placid)から購入)活性を、標準Rhoキナーゼ阻害剤を添加し、または添加せずに、脱リン酸化ミエリン塩基タンパク質(MBP、0.2mg/ml)を基体として、20mM MOPS(pH7.2)、25mM β-グルセロリン酸、5mM EGTA、1mMオルトバナジン酸ナトリウム、1mMジチオスレイトール中で検定する。放射標識[32P]ATP(Perkin-Elmerから入手)を使用して、50μlの容量で30℃にて30分間にわたって活性検定反応を実施する。ATPおよび塩化マグネシウムの濃度は、それぞれ100μMおよび75mMである。検定反応を、Mg2+/-ATPを各反応混合物に添加することによって開始し、40μlの各反応混合物をホスホセルロース紙(P81ペーパー、Whatman)上にスポットすることによって終了させた後に、0.75%リン酸で洗浄してATPを除去した後に乾燥させる。スポット紙をシンチレーションカクテルに仕込み、計数して、32P取込みを測定する。シンチレーションカウンタを使用して放射能を測定する。特定の阻害剤濃度に対する活性百分率は、100*(a-b)/(c-d)(a=cpm(酵素+阻害剤)、b=cpm(基体およびキナーゼの自己リン酸化)およびc=cpm(酵素-阻害剤))として計算される。評価された各阻害剤化合物についての投与応答図を作成し、次いでRhoキナーゼの阻害剤としての化合物の効力の尺度として、IC50(50%阻害における阻害剤濃度)の測定を行う。試験阻害剤化合物の濃度(x軸)とキナーゼ活性の阻害百分率(y軸)との対数のプロットを作成する。曲線を補間して、各化合物がRhoキナーゼの50%阻害を示す濃度を推定することが可能である。実験を2回または3回行う。ROCKIIおよび脱リン酸化ミエリン塩基タンパク質(MBP)をUpstate(ニューヨーク州Lake Placid)から購入することが可能である。ATPは、Boehringer Mannheimから入手され、[γ-32P]ATPは、Perkin-Elmerから入手される。ROCK-II(h)はヒトROCK-IIである。
Rhoキナーゼの1単位は、1分間当たり1pmolのリン酸塩を30℃で基体に組み込むのに必要とされるrhoキナーゼの量として定義されうる。
Rock IIキナーゼを阻害する能力について、またRock-IIキナーゼ活性の50%阻害(IC50値)を達成するのに必要とされるそれぞれの濃度を求めるために、本発明の化合物を評価することが可能である(Upstate Ltd.(英国))。
ATPが100μMの濃度で存在する状態でGSK3β(h)およびROCK-II(r)に添加された10μMの濃度の100%DMSOにおける溶液としてのキナーゼ阻害活性について、本発明の化合物を評価することが可能である。本発明の化合物の試料を10μMで試験することが可能である。
ATPを100μMとして、cSRC(h)、JNK1α1(h)、MAPK2(h)、PKA(b)、PKCα(h)、PKBα(h)およびFyn(h)に対して10μMで試料を試験することも可能である。
ATPを100μMとして、CDK5/p35(h)、JNK1α1(h)、MAPK1(h)、PKA(b)、PKCα(h)、PRK2(h)、ROCK-II(r)、GSK3β(h)、PKBα(h)およびFyn(h)に対して10μMで試料を試験することも可能である。
以下の式を用いて、活性(抑制率(%))としてキナーゼ検定を報告することが可能である。
試料(cpm)-ブランク(cpm)の平均値
活性(抑制率(%))=-------------------------------×100
対照(cpm)-ブランク(cpm)の平均値
生体検定について得られた結果を、Microsoft(登録商標)Excelの例えば2002バージョンSP-2を用いて解析することが可能である。
3.5μMおよび35μMの標準化合物濃度における相対的なROCKキナーゼ阻害としてデータを表すことが可能であり、0は、試験されたATP濃度(100μM)下における完全阻害を示す。ROCKキナーゼ活性は、ROCKキナーゼ阻害と反対であり、GSKBキナーゼ活性と比較される。
例えば100μMのATP濃度を用いて、本発明の化合物についてのIC50値を求めることが可能である。キナーゼ阻害剤は、頻繁にATP結合と競合し、ATP-競合性を有する。50%阻害(IC50)に必要とされる薬物濃度は、検定に用いられるATPの濃度に依存する。
本発明の化合物についてのIC50値を、本発明の化合物の濃度とROCK-II(h)のキナーゼ活性とのプロットから求めることが可能である。本発明の化合物についてのIC50値を、マイクロモル、ナノモルおよびピコモル等の単位で表すことができる。
本明細書では化合物BA-1049と称することもある本発明の化合物IV(b)の二塩酸添加塩について得られたIC50値は、対照の百分率としてのrhoキナーゼ阻害剤活性と、本明細書に記載されている方法のヒトRhoキナーゼ酵素ROCK-II(h)の阻害を測定するための検定におけるlog10濃度とのプロットから791nMであることが確認された。
対照データの%(パーセント)としての濃度および活性を表1に示す。表において、rhoキナーゼ阻害剤の濃度はマイクロモルであり、CPMは1分間当たりの計数であり、SDは標準偏差である。rhoキナーゼ阻害剤活性は、2回試験した。各々の場合において、キナーゼ活性は、調節インキュベーションにおける活性の百分率として表される。IC50値は、UpstateでPRISMによって導かれた。ATP濃度は、100マイクロモルである。
キナーゼ検定に用いられた反応条件を以下に記載する。
図1は、本発明の化合物BA-1049(化合物E-23a)の調節インキュベーションにおける活性の百分率としてのrhoキナーゼ阻害剤活性(ROCKII)(y軸)と、そのデータが791nMのIC50値の計算に用いられたlog10モル濃度(x軸)とのプロットである。
図2は、10μMにおける化合物E-7aからE-25によるROCKII活性の阻害のプロット。実験は2回行われた。検定において、ATPは100μMに存在した。
図3は、本発明の化合物BA-1049(化合物E-23a)の調節インキュベーションにおける活性の百分率としてのrhoキナーゼ阻害剤活性(ROCKI)(y軸)と、そのデータが20.6マイクロモル(μM)のIC50値の計算に用いられたlog10モル濃度(x軸)とのIC50プロットである。実験は2回行われた。検定において、ATPは100μMに存在した。
図4は、脊髄、肝臓、脳および網膜におけるROCKIおよびROCKIIの発現のパターンを示すウェスタンブロットである。ラットの脊髄、肝臓、脳または網膜からタンパク質を抽出した。20μgを7%SDS-PAGEに加えた。ROCKIまたはROCKIIに特異的な抗体(Santa Cruz Biotechnology Inc.)を使用したウェスタンブロットによって特異的なタンパク質発現が示された。結果は、ROCKIIが脊髄、脳および網膜で発現されることを示している。それに対して、ROCKIは、肝臓でより多く発現される。
図5は、異なるキナーゼ基体:cSRC、GSK3B、JNK1alpha1、MAPK1、MAPK2、MSK1、PKA、PKC alpha、PRK2、ROCKI、ROCKIIおよびTrkbに対して試験した10μMにおける化合物E-23aのキナーゼ選択性を示すヒストグラムである。E-23aは、ROCKIIを83%阻害する。E-23aは、ROCKIを31%阻害する。E-23aは、MSK1を43%阻害する、E-23aは、PRK2を52%阻害する。それらの値は、各キナーゼの阻害の百分率で表した。実験は2回行われた。検定において、ATPは100μMに存在した。
表2は、試験した異なるキナーゼに対して用いられた反応条件を示している。
(実施例49)
軸索突起成長促進活性を測定するための生体検定
高速生体検定を用いて、インビトロの軸索突起成長の刺激に対する試験化合物の効果を測定する。神経細胞系NG108-15(ATCC HB-12317)を10%胎児性ウシ血清(FBS)、ペニシリン/ストレプトマイシンおよびHAT補給物(Glibco/BRL)を補給されたダルベッコ最小基本培地(DMEM)における培養に維持する。その生体検定では、細胞をトリプシン処理によって回収し、5%FBS、ペニシリン/ストレプトマイシン、HAT補給物および0.25mg/mlのcAMPが補給されたDMEMに再懸濁し、1.0×104個/mlに調整する。それらの細胞を100μls(1000個)/ウェルで96ウェルプレートに仕込む。100μlの最終体積で、96ウェルプレートの1ウェル当たり1000個の濃度で、本発明の試験分子の存在下または標準化合物(Cethrin(登録商標)等)の存在下で、細胞を37℃および5%CO2で4時間インキュベートした。
インキュベーション後、35μlの16%PFAおよび5.4μlの2.5%グルタルアルデヒドを各ウェルの培地に添加することによって細胞を固定する。100μl/ウェルの濃度で15分間にわたって、ウェルをクレシルバイオレット0.05%溶液で着色する。(長さが1細胞体以上の)軸索突起を有する細胞を、倒立光学顕微鏡を使用して計数する。軸索突起を有する細胞の数の計数細胞の総数(時間100%)に対する比率を計算することによって軸索突起成長率を求める。
図6は、35μMの濃度における化合物E-7からE-25でNG-108細胞の細胞培養物を処理した後の軸索突起成長を調べるための実験の結果を示すヒストグラムである。35μMにおける化合物E-7aからE-25に対する軸索突起を有する細胞の百分率。実験は、3回行われた。細胞(1×104個/mL)をDMSO0.35%(対照)またはDMSOに4時間溶解させた試験化合物(35μM)の存在下でインキュベートした。軸索突起を有する細胞の百分率は、1細胞体の直径より長い軸索突起を有する細胞からの計数によって求められた。
(実施例50)
本発明の化合物で処理したNG108細胞に観察できる相対的軸索突起成長を測定するためのプラスチックによる生体検定
本発明の各化合物を2つの濃度、すなわちリン酸緩衝塩水(PBS)で希釈された7.35重量%DMSO溶液から調製された3.5μMおよび35μMにおいて3回試験する。それらの試料の20μLを、最終体積が420μLになるように400μLのNG108細胞懸濁物に添加する。このように、培養におけるDMSOの最終濃度は0.35%になる。培地にPBSのみが添加された細胞の観察と比較すると、PBSにおいてDMSOで処理された細胞の顕微鏡観察後のこの濃度において、DMSOは、細胞形態に影響しない。
本発明の化合物で処理されたNG108細胞で観察された軸索突起成長は、3.5μMおよび35μMの両濃度について、標準対照について得られた軸索突起成長の百分率として表される。
本発明の各化合物によってもたらされた軸索突起成長を比較するために、生体検定結果を所定濃度に対する対照化合物の効果の%で表すことが可能である。
負の対照と比較される軸索突起成長(倍増)は、以下の式を用いて求められる。
試験試料についての軸索突起成長率(%)
軸索突起成長(倍増)=--------------------------------------------
ビヒクル対照についての正味軸索突起成長率(%)
35マイクロモル濃度における正味軸索突起成長率(パーセント)を、BA-1043、BA-1049およびBA-1050で示される3つの化合物についての10マイクロモルにおけるRock阻害率(パーセント)とともに表3に示す。化合物BA-1043は、本発明の化合物である化合物VIII(c)の二塩酸塩添加塩である。化合物BA-1049は、本発明の化合物である化合物IV(b)の二塩酸塩添加塩である。化合物BA-1050は、本発明の化合物である化合物IV(a)の二塩酸塩添加塩である。Rock活性率(パーセント)は、100%からRock阻害率(パーセント)を引いたものに等しいことに留意されたい。
(実施例51)
成長阻害性ミエリン付随糖タンパク質(MAG)基体、および阻害性基体上で培養されると細胞の軸索突起の成長を誘発する本発明の化合物の能力に対する生体検定
PC-12細胞(ATCC CRL-1721)は、典型的には、NGFに応答して軸索突起を拡張させるが、阻害性基体上で培養されると、成長が阻害され、細胞は丸形にとどまる。本発明の化合物は、MAGによる成長阻害を克服することが可能である。Rhoキナーゼ阻害剤が存在しないMAG基体上では、神経細胞は丸形にとどまり、軸索突起を拡張することができない。Rhoキナーゼ阻害活性を示し、細胞膜に浸透して、神経細胞の内部に存在するRhoキナーゼに到達することができる本発明の化合物を神経細胞の培地に添加すると、該化合物はMAGによる成長阻害を克服することができ、細胞は分化し、長い軸索突起(培養物における神経細胞の平均直径より長い)を成長させる。MAGは、CNSに存在する阻害性タンパク質であり、MAGの受容体は、他の主なミエリン誘導阻害剤Nogoおよび乏突起膠細胞ミエリン糖タンパク質に共用される共通受容体である。MAG受容体は、Nogo-66またはNgRと呼ばれる。
本発明の化合物は、Nogo-66受容体依存性機構による成長阻害を克服することが可能である。本発明の化合物は、成長阻害環境を有する損傷または疾患神経の局所的な病変部位に投与すると、中枢神経系における神経細胞の軸索突起の成長を促進させるのに効果的である。
アメリカンタイプカルチャーコレクションから得られたPC12細胞を、10%ウマ血清および5%胎児性ウシ血清(FBS)を含むダルベッコ改質イーグル培地(DMEM)で成長させる。MAG基体による成長阻害を克服する化合物の能力を評価するために、PC12細胞をトリプシンEDTA(0.05%)で分離することによって回収し、次いでMAG基体上で培養する前にDMEM、1%FBSおよび50ng/ml神経成長因子に再懸濁させる。基体に使用されるMAGを、1%オクチルグルコシドで抽出し、イオン交換クロマトグラフィーで分離した後にミエリンから精製する(McKerracherら、1994、Neuron 13:805-811を参照)。基体を、層流フード(Nalge Nunc(イリノイ州Naperville))で一晩乾燥させることによって、96ウェルプレート均一な基体として調製する。37℃で3時間にわたってプレートにポリリシン(100μg/ml)を予め塗布し、次いで洗浄し、約1時間乾燥させる。8μgのタンパク質を一晩乾燥させることによって基体としてMAGを調製する。MAG基体上で培養後、細胞を本発明の化合物の存在または不在下で37℃にて2日間にわたって成長させて、軸索突起成長のための時間を得る。ポリリシン基体は、正の対照として使用される。
軸索突起成長のMAGによる成長阻害を克服する化合物の能力の定量解析を、ノーザンエクリプスソフトウェア(Empix Imaging(オンタリオ州Mississauga))を利用して遂行する。軸索突起を成長させる神経単位の数の観察された神経単位の全数に対する比率を軸索突起成長の百分率として計算する。Microsoft Excelを用いてデータ解析および統計調査を行うことができる。実験を3回行うことが可能である。
(実施例52)
軸索切断後の細胞生存
成体哺乳類CNSにおける線維路病変のモデルとしての成体ラットにおける視神経(ON)の切除により、病変後14日以内に網膜神経節(RGC)の80〜90%が遅延、主に枯死することになる。網膜および視神経の外科的接近が良好であるため、網膜視蓋突起は、神経細胞死の基礎となる分子的機構を調べるための便利なモデルを示すだけでなく、インビボの潜在的な神経保護剤に好適なシステムとして貢献する。視神経障害後のRGC細胞生存を支える本発明の化合物の能力を試験することが可能である。化合物の医薬組成物を目に一度注入し、1週間等の後に細胞生存を評価することが可能である。各処理群について3匹の動物を調べることが可能である。本発明の化合物の複数または慢性的適用は、傷害網膜神経節細胞を治療するのに効果的でありうる。
(実施例53)
網膜神経節細胞の逆行性標識化
成体の雌のCDラット(180〜200g;Charles River(カナダ))に対して実験を行うことができる。動物は、カナダ動物保護基準に従って扱われる。実験手順を通じて、Moduflex Access麻酔装置に接続されたイソフルオランによる全身麻酔をラットに施すことが可能である。角膜乾燥を防ぐために、眼軟膏(ポリスポリン)を塗布することが可能である。フルオロゴールド(Fluorochrome,Inc.(米国コロラド州Denver);10%ジメチルスルホキシドを含有する0.9%NaCl水溶液における2%)を小片のゲル泡で右上丘(SC)に投与して、網膜神経節細胞(RGC)を逆行的に標識することが可能である。視神経病変の1週間前にすべてのラットをフルオロゴールドで予め標識することが可能である。
(実施例54)
視神経切除および薬物投与
フルオロゴールド投与の1週間後に、左側視神経を目から1mm切除することが可能である。眼窩上静脈を無傷に保つように注意しながら、マイクロ鋏によって、軌道骨の上縁を覆う皮膚を側矢状に切開することによって、視神経を軌道内で評価することが可能である。ブラント処理を用いた涙腺の部分切除または反射に従って、上部外眼筋を小形牽引子または縫合6-10絹で広げて、両手を自由に保つことが可能である。上部軌道内容物を切り開き、直筋を水平に映すことが可能である。視神経を露出すると、周囲の硬膜外皮を縦に切断して、血管の切断を回避しながら、視神経を露出させることが可能になる。軟膜および視神経には血管が存在する。軟膜外皮を引き上げ、水平に切開して、視神経を露出させることが可能である。軟膜を切断する前に視神経を切断しないことが重要である。軟膜を切断すると、鋏を視神経の下を滑らせてそれを切断できるように、視神経を静かに移動させて、それをその外皮から離すことが可能である。この時点で、血液供給の低下を回避するために神経を引っ張らないことが重要である。視神経を十分に露出させると、小形鋏を視神経の下を接線方向に滑らせて、神経の他の側の末端を確認し、次いで目から1mmのところに1つの明瞭な切開を施すことが可能である。1mmの距離を推定するための参考として鋏刃を使用することが可能である。軸索切断後の硝子体内注射を受けるために割り当てられた一群の動物において、対象となる化合物(すなわち本発明の化合物)を硝子体空間に注射することが可能である。30ゲージの針で目の鼻側網膜上部に穴をあけ、次いでハミルトン注射器を使用して、1分間にわたって、試験化合物を約5マイクロリットルの容量で約10マイクログラム注射することが可能である。1分後に針を取り除くことが可能である。注射を完了すると、組織接着剤(Indermil)を使用して、被覆物をシールすることが可能である。RGCの生存に悪影響をもたらしうるレンズ傷害を回避すべきである。
双眼顕微鏡を使用して、注射中の目を観察することが可能である。皮膚をステープル(オートクリップ)で閉じることが可能であり、水を塗布した顕微鏡スライドを使用する術後検眼鏡によって、網膜血管系の保全性を評価することが可能である。血管系が損なわれたラットは、実験結果に含まれていない。次いで、それらの動物を籠に戻し、目覚めるまで詳細に監視する。軸索切断の7日後に、過剰投与量の抱水クロラールを腹腔内に注射することによって動物を殺し、次いで4%パラホルムアルデヒド(PFA)および0.1Mリン酸緩衝剤を灌流させることによって固定することが可能である。鋏および鉗子で眼筋を慎重に切除することによって目を取り除くことが可能である。目を4%PFAで固定し、角膜に穴をあけて、目の後極へのPFAの浸入を可能にすることができる。次いで、網膜を眼球から慎重に分離し、ガラススライド状に平らに載せて、4つの網膜象限に従って組織を切開することが可能である。UVフィルタ(365/420)を有する蛍光顕微鏡でRGCを調べることが可能である。視神経先端の脇に位置し、各々の網膜象限における視神経円板から1.35および2.7mmに位置する12の標準領域(それぞれ0.45×0.35mm)上の蛍光RGCの数を計数することが可能である。
(実施例55)
本発明の化合物のインビボ評価
本発明による化合物を使用して、インビボおよび/またはインビトロでの阻害性基体上の軸索成長を促進させることができる。インビボで軸索再生を促進させる本発明の化合物の能力を調べるために、化合物の薬学的に許容できる溶液の硝子体内注射の後に、哺乳類の視神経における網膜神経節細胞軸索の再生を調べることが可能である。網膜神経節細胞(RGC)軸索のすべてを切除する視神経破壊の直後に、本発明の化合物の薬学的に許容できる溶液をラットの硝子体に注射することが可能である。2週間後に、動物のコレラ毒素B副単位を目に注射して、再生するRGC軸索に順行的に標識することが可能である。次の日にそれらの動物を殺し、塩水を灌流させ、切開に向けて視神経を取り除くことが可能である。視神経の縦断切片を抗コレラ毒素免疫反応性に対して反応させて、順行的標識線維を観察することが可能である。本発明の化合物で処理した後にRGC軸索を観察することが可能であり、軸索成長の距離は500μmを超えることが期待される。緩衝剤で処理された対照動物では、観察可能な軸索再生は期待されない。
ラットにイソフロラン(2.4%)で麻酔を施し、頭を削ぐことが可能である。微小破壊病変を生じさせるために、左視神経を眼窩上アプローチによって露出させ、視神経外皮を縦方向に滑らせ、視神経を外皮から引き上げ、10.0縫合を60秒間保持させて締付けにより球から約1mmのところで破壊させることが可能である。視神経破壊の直後に、本発明の化合物を薬学的に許容できる担体溶液に含む試験溶液または緩衝対照(リン酸緩衝塩水)を、約5マイクロリットルの体積の約100マイクログラムの化合物の量で硝子体に注射することが可能である。2週間後に、続くPFAの灌流の24時間前に、すべてのラットに5μlの1%コレラ毒素β副単位(CTB;List Biological Labs(カリフォルニア州Campbell))の硝子体内注射を施すことが可能である。視神経を切開し、PFAで1時間後固定し、30%サッカロース中で一晩凍結保護し、OCT(Canlab(Quebec州Montreal))で-70℃に凍結させることが可能である。視神経の長さ方向の低温保持断片を14μmに切断し、Superfrost Plusスライド(Fisher(ケベック州Montreal))に載せることが可能である。網膜神経節細胞軸をCTBで標識し、ヤギ抗コレラゲノイド(List Biological Labs)、ビオチン化ウサギ抗ヤギ(Vector Labs(カリフォルニア州Burlingame))およびDTFA共役ストレプトビジン(Jackson Labs(ペンシルバニア州West Grove))を使用してCTBに対する免疫組織化学法により検出することが可能である。
本発明の化合物で処理された視神経の縦断切片においては、病変部位で、再生軸索が病変部位にわたって伸びるのが確認されるのに対して、対照視神経の縦断切片においては、軸索は病変の部位にわたって再生されないことが想定される。
(実施例56)
癌細胞に対する本発明の化合物の抗増殖効果の測定
(a)チミジン吸収検定
HEC-1Bヒト腺癌腫、SK-MEL-1ヒト悪性腫瘍黒色腫およびCaco-2ヒト結腸直腸腺癌腫等の培養で成長するいくつかの異なるヒト癌細胞系統を採用することができるチミジン吸収検定を用いて、本発明の化合物の抗増殖効果を評価することが可能である。それらの細胞を96ウェルプレートに接種し、2時間後に、本発明の化合物のDMSOを含む溶液または対照溶液で処理することが可能である。対照溶液を負の対照としてのPBSとすることができ、あるいは対照溶液を完全培地+DMSOビヒクル(0.1%または1%)とすることができる。本発明の化合物の溶液を3つの異なる濃度、例えば1μM、10μMまたは100μMで添加することが可能である。各対照溶液および試験溶液を細胞系統毎に3回接種することが可能である。プレートを37℃で5%CO2とともに加湿雰囲気で約54時間にわたってインキュベートすることが可能である。約1.0μのCiを含有することができる0.02mlの体積の放射線同位(トリチウム含有)3H-メチルチミジンを各ウェルに添加することが可能である。培養物をさらに18時間インキュベートすることが可能である。自動細胞ハーベスタを使用して、各ウェルからの細胞をガラス微繊維フィルタに吸引することが可能である。細胞を蒸留水で破壊して、主にDNAをフィルタ上に残すことが可能である。各フィルタをシンチレーション計数器(TopCount NXT)に配置することが可能である。3Hに対する適切な設定を行った後に、各フィルタを1分間にわたって計数することが可能である。結果をCPM(カウント毎分)で表すことが可能である。
癌は、最も典型的には1つまたは複数の腫瘍の形成をもたらす細胞群の被抑制的***によって特徴づけられる。Rhoキナーゼは、本発明の化合物によって阻害される。小さいGTPアーゼRhoは、悪性腫瘍黒色腫および乳癌等の特定の癌において上方制御される。Rhoの上方制御は、Rhoキナーゼを活性化させうる。Rhoキナーゼの不活性化は、悪性腫瘍を低減または治癒させることが期待される。
本発明の化合物は、例えば100μM、10μMおよび1μMの濃度で試験した場合に、ヒト悪性腫瘍黒色腫細胞系統であるSK-MEL-1細胞の細胞増殖を低減できることが期待される。本発明のたいていの化合物は、SK-MEL-1黒色腫細胞およびHEC-1Bヒト子宮膜腺癌細胞等の腫瘍細胞の細胞増殖を実質的に完全に抑制し、細胞移動を低減し、癌性病変および悪性腫瘍の転移を潜在的に低減できることが期待される。
(b)AlamarBlue(登録商標)検定
本発明の化合物の抗増殖効果を調べるための他の方法は、Alamar Blue検定の使用を含む。この検定では、細胞を実験前に少なくとも一度融解、接種させる。血清、および試験細胞系統に適した補給物で補給された培地で、培養皿において細胞を成長させる。細胞が対数的に成長すると、細胞にトリプシン処理を施して、培養皿から分離させ、計数する。細胞ペレットを再懸濁させ、2〜5×104個/mlに調整する。96ウェルマイクロプレートを実験に使用し、細胞を1000から5000個/ウェルの密度で100μLの成長培地に培養する。接種密度は、対照ウェルの細胞が全インキュベーション時間の後に過剰成長されないような密度とする。マイクロプレートを37℃、5%CO2および100%相対湿度の細胞培養インキュベータに18〜20時間にわたって配置し、次いでプレートにわたって均一に成長しているかどうかを調べるために位相差顕微鏡によって検査する。100μlの新鮮な培地を試験試薬とともに添加し、1つの対照には培地のみを得る。薬物添加後に、さらに24から96時間にわたってマイクロプレートをインキュベートする。インキュベーションが終わる1から4時間前に、20μLのAlamarBlue(登録商標)試薬を、既に200μLの培地を含むウェルに添加し、プレートを37℃、5%CO2および100%相対湿度で1〜4時間にわたってインキュベートする。インキュベーション時間の終わりに、蛍光密度を底読により96ウェルマイクロプレートリーダ(励起530〜560nm;放射590nm)で読み取る。AlamarBlue(登録商標)検定で生成された蛍光を停止させ、3%SDSを添加することによって安定化させることが可能である。100μlの原型培地当たり50μlの体積を用いる。次いで、内容物が光から保護され、被覆されて蒸発を防ぐ条件で、データを記録する前に、プレートを雰囲気温度で24時間以内の時間にわたって保存する。
試験物の各濃度について、以下の式を用いて成長率(%)を計算する。
式中、
T0=試験物添加時(時間0)における蛍光単位
C=対照(非試験物)に対する蛍光単位
Ti=試験物(異なる希釈法)に対する蛍光単位
図7は、異なる濃度のE-23a(x軸)の存在下での72時間にわたるインキュベーション後の対照細胞の百分率(Y軸)で表されるHEC-1B細胞の増殖低下を示す図である。正の対照として硫酸カドミウム水和物を(CAD)を使用した。処理後に、Alamar Blue検定を用いて増殖率を測定した。
(実施例57)
癌細胞の増殖に対する本発明の化合物の効果を調べるための方法
HEC-1Bヒト腺癌腫、SK-MEL-1ヒト悪性腫瘍黒色腫およびCaco-2ヒト結腸直腸腺癌腫等の培養で成長するいくつかの異なるヒト癌細胞系統を用いて、チミジン吸収検定により本発明の化合物の抗増殖効果を試験することが可能である。それらの細胞を96ウェルプレートに接種し、2時間後に、本発明の化合物または対照溶液で処理する。対照溶液は、(a)負の対照としてのPBSおよび(b)完全培地+DMSOビヒクル(0.1%または1%)。本発明の化合物を3つの異なる濃度、すなわち1μM、10μMまたは100μMで添加する。各対照溶液および試験溶液を細胞系統毎に3回接種する。プレートを37℃で5%CO2とともに加湿雰囲気で約54時間にわたってインキュベートする。約1.0μのCiを含有する0.02mlの体積の3H-メチルチミジンを各ウェルに添加する。培養物をさらに18時間インキュベートする。自動細胞ハーベスタを使用して、各ウェルからの細胞をガラス微繊維フィルタに吸引する。細胞を蒸留水で破壊して、主にDNAをフィルタ上に残す。各フィルタをシンチレーション計数器(TopCount NXT)に配置する。3Hに対する適切なシンチレーション計数器設定の際、各フィルタを1分間にわたって計数する。結果をCPM(カウント毎分)で表すことが可能である。
Rhoキナーゼ阻害剤は、癌における潜在的な治療用途を有する。細胞内酵素Rhoキナーゼは、細胞内酵素Rhoによって活性化され、Rhoキナーゼ阻害剤は、Rhoシグナリングをブロックする。臨床腫瘍学において変異が見いだされたいくつかのRho族調節タンパク質は、Rhoシグナリングの摂動が、例えば転移を防ぐ上での、また様々な形態の悪性腫瘍転換を処理するための療法として有用でありうることを示唆している。
本発明の化合物とY-27632等の対照化合物との相対的な抗増殖効果を、DNA合成の相対的尺度を提供するチミジン吸収検定を用いて評価することが可能である。本発明の有用な化合物は、例えばヒト悪性腫瘍黒色癌腫細胞の細胞増殖を、ビヒクル(DMSO)およびPBS対照のみを用いた細胞増殖に比べてブロックまたは阻害することが可能である。
(実施例58)
ヒト腫瘍のマウスへの移植後の固形腫瘍サイズの低減に対する本発明の化合物の効果の測定
試験化合物の抗増殖活性を試験するためのインビボモデルは、皮下(s.c.)腫瘍モデルである。このモデルでは、ヒト癌細胞を皮下注射によってマウスに接種する。典型的には、移植片拒絶応答を防ぐために、CD-1ヌードマウス等の免疫低下マウス細胞系統を使用する。試験化合物は、腫瘍への注射により、等張性リン酸緩衝塩水(PBS)等の注射用途に好適な薬学的に許容できるビヒクル中の製剤として投与される。異なる投与スケジュールを試験し、ビヒクル対照の注射を受けるマウスと比較することが可能である。動物への移植の前に、腫瘍細胞をそれらの特異的な組織培地で拡大させる。培地を1週間に2から3回交換する。それらは、(例えば1〜2分間放置された0.05%チプシン0.02%EDTA溶液の被覆層を使用した)穏やかなトリプシン処理で1:5から1:10に分割される。次いで、新鮮な培地をフラスコに加え、一定量の細胞を新しいフラスコに移す。細胞は、それらの成長の対数段階で常にマウスに注射される。有用な細胞は、例えば、ヒト腎臓癌系統であるCaki細胞である。細胞の数は、使用された細胞系統と増殖率の関数である。細胞は、261/2ゲージ針を有する1ml注射器を使用して、0.05mlの総体積で免疫低下マウス(ヌードマウス)の右側面に皮下注射される。注射の前に、注射部位を70%アルコールで殺菌する。通常は4日目までに、または細胞数および注射される細胞系統によってはそれ以降に、注射部位に可視で触知できる皮下結節が生じる。腫瘍成長を1週間に2回監視する。腫瘍体積をデジタルキャリパで測定し、幅2×長さ×0.5の式を用いて計算する。長さは、腫瘍塊の最も離れた2つの点の間の腫瘍の底の長さをとるのに対して、幅は、長さに対して直角に測定される。すべての測定を個々の動物に対して実施し、次いでそれを用いて腫瘍体積を計算する。腫瘍が平均体積の125mm3に達すると、処理を開始する。マウスを対照および処理グループに無作為に分け、各グループにおいてn=5〜10とする。動物を、耳のレベルにおける小さい切開(ノッチ、フラップまたはパンチ穴)により永久的な様式で識別する。皮下腫瘍には腫瘍中心に試験およびビヒクル物が注射され、投与体積を20μlから100μlとする。腫瘍体積および動物の体重を1週間に2回記録する。
図8は、対照に対して相対的な腫瘍サイズの成長率の低下に対するE-23の効果を示す図である。ヒト腎臓癌系統であるCaki細胞を組織培養で成長させた。成長の対数段階において、50から200μlの5×106個の細胞をヌードマウスに皮下注射した。腫瘍が形成されると、2週間にわたって毎日、対照腫瘍に50μLのPBSを注射し、処理腫瘍には40μMのE-23aとともに50μLのPBSを注射した。最終の注射から2週間の処理後に腫瘍を評価した。本発明の化合物E-23aの投与および対照ビヒクルの腫瘍サイズ変化に対する効果は、処理スケジュールの始めに求められたそれぞれの初期腫瘍体積の百分率で表される。実験は、7匹のマウス(対照)、およびE-23aで処理した6匹のマウスを用いて行われた。PBS中のE-23aで処理した腫瘍に観察された平均腫瘍サイズ増加は、初期腫瘍体積の約156%であったのに対して、対照ビヒクルで処理した腫瘍では初期腫瘍体積の304%の増加であった。
(実施例59)
化合物の抗血管形成活性の測定
血管内皮細胞の増殖に対する本発明の化合物(薬物)の効果を測定するために、HUVEC細胞(ヒト臍静脈内皮細胞)を使用する。内皮細胞(HUVEC)を適切な培地(例えば補給物を含むEBM-2;EBM=内皮基本培地)に維持し、対数成長段階の細胞を、その説明が参照により本明細書に組み込まれているClonetics(登録商標)臍静脈内皮細胞系(Cambrex Bio Science Walkersville,Inc.)によって説明されているようにトリプシン処理する。HUVEC細胞の通過数を注意深く監視し、培養において4から5回通過されたウィル細胞の間で実験を行う。遠心分離後に、細胞ペレットを完全培地に再懸濁させ、ウェル当たり2000個の細胞を100μlの培地で96ウェルマイクロプレート(表面:0.32cm2)に接種する。18時間後に、100μlの培地および20μlのAlamarBlue(登録商標)(Medicorp Inc.(カナダQuebec州Montreal))を2から4時間にわたって添加する。このプレートは、試験物(薬物)添加時(T0)におけるAlamaeBlue(登録商標)による細胞群の測定に使用される。適切な希釈によって達成される薬物濃度における100μlの試験物(薬物)の一定分量を既に100μlの培地を含む適切なウェルに添加する。薬物添加後に、マイクロプレートを37℃、5%CO2および100%相対湿度でさらに1から96時間にわたってインキュベートする。インキュベーション終了の4時間前に、既に200μlの培地を含むウェルの各々に20μLのAlamarBlue(登録商標)溶液を添加する。プレートを37℃、5%CO2および100%相対湿度でさらに4時間にわたってインキュベートする。蛍光強度をELISAプレートリーダで測定する(励起波長:530〜560nm;放射波長:590nm)。トラニラスト(N-(3'4'-ジメトキシンナモイル)アントラニル酸)(Calibiochem;EMD Bioscience,Inc)は、VEGF-(血管内皮成長因子)および血管浸透性因子誘発血管形成およびコラーゲン合成の強力な阻害剤として作用する。トラニラストは、VEGF結合またはVEGF受容体リン酸化に影響を得ることなく毛細管内皮細胞におけるVEGF-およびPMA-刺激PKC活性を阻害する。トラニラストは、正の対照として使用される。
図9は、ヒト内皮細胞(HUVEC細胞)に対する濃度(1、10、25、50および100μg/mLまたは1、10、25、50および100μM)の関数としての化合物E-23aおよびトラニラストの抑制の百分率としての相対的抗増殖効果を示す図である。2000のHUVEC細胞を異なる濃度のE-23aまたはトラニラスト、すなわち正の対照とともに72時間にわたってインキュベートした。処理後に、Alamar Blueを使用して増殖率を測定した。結果を、3回実施された2つの個別的な実験に対する平均値±SDで示す。
HUVEC細胞は、細胞外基質に見いだされるタンパク質からなるタンパク質基体上に接種されると、毛細管を形成することになる。HUVEC細胞を用いた実験に有用な典型的な基体は、Matrigel、フィブロネクチンまたはコラーゲンである。Matrigelは、細胞外基質を構成するいくつかのタンパク質からなる。細胞外基質を三次元細胞培養基体としての組織培養皿で培養することが可能である。基体として使用できる他の試薬は、Engelbreth Holm-Swarm(EHS)マウス腫瘍から導かれるタンパク質の再構成基底膜基質であるECMatrix(登録商標)(Chemicon International(カリフォルニア州Temecula))である。この基体は、22〜35℃で急速にゲル化する。したがって、ECMatrix(登録商標)を氷上または+4℃で一晩融解させる。96ウェルプレートを予め冷却し、100μlのECMatrix溶液を各ウェルに添加する。プレートを37℃で少なくとも1時間にわたってインキュベートして、基質溶液を固化させる。HUVECを回収し、内皮細胞成長補給物で補給された標準的な細胞成長培地に再懸濁させる。血清(0.5〜10%)の存在は随意である。EGM(内皮細胞成長培地)を使用することが可能である。HUVEC細胞を1ウェル当たり5×103から1×104個の密度で重合ECMatric(登録商標)の表面に接種し、次いで組織-培養インキュベータで一晩インキュベートする。細胞網状構造が12から18時間で十分に成長し、5〜6時間後に第1の兆候が現れる。24時間後に、細胞は枯死を開始する。抗血管形成因子の効果を調べるために、それらを細胞接種時に添加することが可能である。随意の組織培養は、細胞形、年齢および培地成長条件によって異なる。管を40X〜200Xの倍率の倒立光学顕微鏡で検査する。細胞網のコントラストが不足するため、Diff-QuickまたはWright-Giemsaまたはクリスタル-バイオレット等の一般的な細胞着色手順のいずれかで培養物を着色することが可能である。全毛細管長測定法を用いて、結果を定量化する。いくつかの(3〜10の)視野におけるすべての毛細管の全長をノーザンエクリプスソフトウェアで測定する。
図10は、ECMatrix(登録商標)のみ(Ctlまたは対照)、10μMのE-23aを含むECMatarix(登録商標)および50μMのE-23aを含むECMatarix(登録商標)に接種後のHUVEC管形成のマイクロフォトグラフを示す図である。管形成は、4xの倍率の顕微鏡で見たものである。写真は、5つの個別的な実験を表す。管形成は、E-23aの存在では対照に比べて実質的に低減されている。
図11は、管形成の100%相対量として定義される試験化合物(Ctl)の不在下でのHUVEC細胞の管形成;10μMのE-23aの存在下における管形成の相対量(対照に対して約40%);50μMのE-23aの存在下における管形成の相対量(対照に対して約35%);10μg/mLのトラニラストの存在下における管形成の相対量(対照に対して約35%);および50μg/mLのトラニラストの存在下における管形成の相対量(対照に対して約30%)の定量化によるヒストグラムを示す図である。トラニラストは、正の対照として使用される。この実験では、15,000のHUVEC細胞をECMatrix(登録商標)に接種し、定量化の前に6〜8時間のみにわたってインキュベートした。結果は、2回分析した1つの実験に対して平均値±SEMとして示される。トラニラスト(N-(3',4'-ジメトキシシンナモイル)アントラニル酸)(Calibiochem)は、VEGF-および血管浸透性因子誘発血管形成ならびにコラーゲン合成の強力な阻害剤として作用する。トラニラストは、VEGF結合またはVEGF受容体リン酸化に影響を及ぼすことなく毛細管内皮細胞におけるVEGF-およびPMA-刺激PKC活性を阻害する。それは、正の対照として使用される。
本発明の化合物の細胞移動に対する効果を細胞移動検定で試験することが可能である。一般的な検定は、BoydenまたはTranswellチャンバ、すなわち区画化された細胞培養システムを使用する。細胞をTranswellチャンバの上部隔室に接種し、例えばFluoroblok膜の孔を通じて底部隔室に移動する細胞移動を阻止する試験対象化合物の能力を測定する。細胞移動チャンバは、例えばBD BioScience(カナダ、オンタリオ州Mississauga)から市販されている。典型的には、化学誘引物質を底部ウェルまたは隔室に添加する。上皮細胞の場合には、有用な化学誘引物質は血管内皮成長因子(VEGF)である。VEGFは購入することが可能である(Cedarlane Laboratories Ltd.(カナダ、オンタリオ州Hornby)。体積および細胞密度に合わせて適切に補正された24ウェルプレート(個別的挿入またはマルチウェル挿入)または96マルチウェル挿入プレートで実験を実施することが可能である。24ウェルプレートについては、市販のチャンバパッケージを-20℃で保存する。パッケージを、開封する前に室温に対して平衡化させる。最初に低透過性(P<6)内皮細胞(EC)の細胞単層をトリプシン処理し、次いで100,000細胞または検定に必要な細胞密度で、血清を含まない、あるいは0.1%FBSを含む培地に細胞を再懸濁することによって細胞懸濁液を調製する。最初の接種密度は、無孔性表面に使用される同じ範囲の細胞密度を用いることが推奨される。内皮細胞は、通常は105個/cm2付近で接種される。0.5×105から5×105個/cm2の範囲の密度を評価することによって細胞密度を最適化することが可能である。試験物(すなわち評価する薬物)を含む、かつ含まない細胞懸濁液を250μl上部チャンバに加えて、約1.5×105個/cm2を得る。本発明の化合物を含む、または含まない基本培地に内皮細胞正常成長媒体または適切な成長因子(VEGF)を含む他の750μlの培地を、底部チャンバとの接触に利用可能なそれぞれの試料ポートを使用して、底部ウェルの各々に添加する。プレートを37℃、5%CO2雰囲気で20±1時間にわたってインキュベートする。カルセインAM染料(すなわち加水分解により蛍光性を帯びる(例えばλex:約496
nm、λemm:約516nm)カルセインの非蛍光細胞透過性誘導体であるカルセイン-O,O'-ジアセテートテトラキス(アセトキシメチル)エステル)等の好適な染料で細胞を標識することによって、細胞移動測定を容易にする。細胞染料を用いたインキュベーションに続いて、さらなる操作を行わずに、485/530nmの励起/放射波長で、底部読取機能を有する蛍光プレートリーダで被浸入細胞からの蛍光を読み取る。Fluoroblock膜の孔を通じて移動したそれらの標識細胞のみが検出されることになる。
データは、蛍光単位(FU)または「フォールド移動」、すなわち対照のFU値、すなわち阻害剤を伴わないFU値に相対的な阻害剤を伴う化学誘引物質に応答してフィブロネクチン塗布挿入膜を通じて移動する細胞のFU値で表されうる。「移動率(パーセント)」としてデータを表すことは、細胞接種の差および変動性等による異なる実験によるデータ変動を正規化するのに有用である。
図12は、ボイデンチャンバの底部チャンバにおいてVEGFの存在下での内皮細胞移動に対するE-23aの効果を示すヒストグラムである。10ng/mLのVEGFがフィブロネクチン塗布トランスウェルに補給された基本成長培地で0.1%FBSとともに20時間にわたってHUVEC細胞を培養した。50μMのE-23a、または内皮細胞移動の知られている阻害剤であるトラニラストを添加した。結果は、少なくとも2回分析された1つの実験に対して平均値±SDで報告される。100%の移動として定義されるCtl(対照)+VEGFに対して、Ctl-VEGFは、Ctl+VEGFで観察された量の約25%の移動を得る。E-23aの存在は、Ctl+VEGFで観察された量の約40%の移動を得る。正の対照であるトラニラストは、Ctl+VEGFで観察された量の約30%の移動を得る。
(実施例60)
本発明の化合物の細胞浸透性の測定
ヒト結腸直腸癌腫(コーカサス人結腸腺癌)から導かれるCaco-2細胞系統は、ヒトの腸での薬物吸収を予測するための確立されたインビトロモデルになった。Caco-2細胞は、半透膜上で培養されると、小腸円柱上皮と形態学および生化学的に極めて類似した高度に機能化された上皮バリヤに分化する。それにより、これらの分化された細胞単層を利用して、新規な化合物の膜移動特性を評価することが可能である。Caco-2細胞移動試験から得られた見かけの浸透係数(Papp)は、ヒトの腸の吸収に関連づけられることが示された。したがって、本発明の化合物の浸透性を評価するのに有用な方法は、半透膜に細胞を接種し、それらを所定時間にわたって培養し、次いで試験化合物を先端または基底外側の隔室に添加することからなる。インキュベーション後に、試料を先端または基底外側の隔室から取り出し、試験化合物の濃度をLCMS(液体クロマトグラフィー/質量分析)によって測定する。
Caco-2(ATCC番号:CRL-2002、HTB-37のクローン)細胞の保存培養物を、10%胎児性ウシ血清(FBS)、0.1mM非必須アミノ酸および1mMピルビン酸ナトリウムを含むMEMアール培地に、37℃で加湿および5%CO2雰囲気で維持する。細胞が80〜90%の集密度に達すると、保存培養物を7日毎に二次培養する。透過21と40の間で使用されるCaco-2細胞で試験を実施する。24ウェル培養プレートにおいて、細胞を1×104個/ウェルの密度でTranswell(登録商標)インサートに接種する。細胞を37℃、5%CO2雰囲気下でインキュベートし、培地(10%FBS、0.1mM非必須アミノ酸および1mMピルビン酸ナトリウムを含むMEMアール培地)を週に3回交換する。細胞を接種後20日と22日の間で浸透性試験に使用する。検定の日に、細胞単層を3回洗浄する。各洗浄は、先端(A)および基底外側(B)から液体を吸引し、Mg2+およびCa2+を含む新鮮なダルベッコリン酸緩衝塩水(pH7.4(PBS))をそれぞれ0.5および1mL添加することを含む。最終洗浄後に、電圧抵抗計を使用して、単層の保全性の尺度である経上皮電気抵抗(TEER)を測定する。TEER値が200オーム/cm2未満である場合は、細胞を使用しない。試験化合物の使用溶液をPBSで調製する。[3H]マンニトールおよび[3H]プロパノールをPBSにおける1μCi/mLの濃度で調製する。[3H]プロパノール溶液に非標識プロパノールを補給して、最終プロパノール濃度を100μMとする。各試験化合物および標準について、先端から基底外側(AからB)への移動および基底外側から先端(BからA)への移動を測定する。基底外側における最終体積は1mLであり、先端側における最終体積は0.3mLである。試験化合物使用溶液または放射標識標準溶液を[供与体]側に添加する。ブランク緩衝剤を[受容体]側に添加する。24ウェルプレート上で3回検定を実施する。プレートを150rpmで回転シェーカに37℃でインキュベートする。時間0において受容体隔室から200μLの培地をサンプリングした後に60分間のインキュベーションを行うことによって、各試験化合物および対照の浸透性を測定する。また、物質収支を測定するために、試験の始め(供与体隔室に添加した直後)に供
与体隔室から100μLの試料を採取し、インキュベーションの終わり(60分)に200μLの試料を採取する。すべての試料を標識された1.5mLのポリプロピレン管に仕込み、生体検定まで-70℃に凍結保存する。試験化合物の生体検定の前に、可動相の適切な分量の内部標準(IS)溶液を各試料の一定分量に対して添加する。E-23aの場合には、標準はE-23aの試料である。次いで、一定分量の上澄液をLC-MS/MS機器に注入する前に、試料を10,000xgで2分間遠心分離させる。放射標識標準物質を含む100μLの一定分量の試料を6.5mLシンチレーションバイアルに添加する。3mLの一定分量の液体シンチラントをバイアルに添加し、壊変毎分(dpm)を液体シンチレーション計数器で測定する。試験化合物とのインキュベーションを通じて試験化合物を含む単層のバリヤ機能がそのまま維持されていたかどうかを判断するために、先端および基底外側隔室に残留している試験化合物の溶液を除去する。検定緩衝剤にルシファーイエローを溶解させた100μM溶液をTranswellインサートの先端隔室(0.3mL)に添加し、1.0mLのブランク検定緩衝剤を基底外側隔室に添加する。プレートを150rpmに設定された回転シェーカ上に37℃でインキュベートする。100μLの培地を基底外側隔室からサンプリングした後に、60分間のインキュベーションを行うことによってルシファーイエローの浸透性を測定する。試験の始めに、2つの100μL試料を供与体隔室から採取する。ルシファーイエローを含む試料を96ウェルポリプロピレンプレートに添加し、励起および放射波長をそれぞれ485および530nmに設定して、蛍光をプレートリーダで読み取る。以下の式を用いて、各化合物および放射標識標準物質の浸透係数(Papp)を求める。
Papp=dQ×1/Ci×1/A
dT
(式中、dQ/dTは浸透率を示し、Ciは、供与体隔室における初期濃度を示し、Aはフィルタの表面積を示す)。Ciは、供与体隔室への添加直後に採取された二重試料の平均濃度から求められる。浸透率は、受容体隔室において測定された化合物の累積量を時間に対してプロットし、線形回帰解析により直線の勾配を求めることによって計算される。
各試験化合物および放射標識標準物質の回収率(%)(物質収支)を、以下の式を用いて求めることが可能である。
CDVD+CAVA
回収率(%)=--------×100%
CiVD
(式中、CDおよびCAは、最終サンプリング時点(60分)でのそれぞれ供与体および受容体隔室における化合物または放射標識標準物質の濃度を示し、VDおよびVAは、それぞれ供与体および受容体隔室の体積を示す)。
ルシファーイエロー(LY)浸透性を先端隔室に維持される比率(%)で表すことが可能であり、1-(60分の時点で基底外側(受容体)隔室に存在するLYの量÷t=0の時点で供与体隔室に添加されるLYの平均量)×100%で計算することが可能である。
表4は、Caco-2浸透性検定において試験化合物E-23aについて求められたPapp値の概要を示す。[3H]マンニトールおよび[3H]プロパノールを対照として使用した。その結果は、E-23aの浸透性が良好であることを示している。
(実施例61)
本発明の化合物の血漿タンパク質結合の測定
薬物の薬物動態学的および薬物動力学的特性は、一般には、薬物の血漿または血清タンパク質の可逆的結合の関数である。当該タンパク質としては、アルブミン、α1-糖タンパク質、リポタンパク質およびα、βおよびγグロブリンが挙げられる。一般には、未結合薬物のみが、細胞膜に対する拡散または移動、および薬理学的目標(例えば受容体、イオンチャネル、輸送体および酵素)との相互作用に利用可能である。その結果、薬物の血漿タンパク質結合の範囲は、薬物の作用、ならびにその分布および排出に影響する。血漿タンパク質結合の強い薬物は、血管の空間に閉じ込められることにより、比較的小さい分布体積を有する。対照的に、血漿においてほとんど未結合である薬物は、一般には、他の器官および組織への分布に利用可能であるため、分布の体積が大きくなる。血管空間および/または血管外空間における薬物のタンパク質に対する結合は、薬物クリアランスの縮小および薬物半減期の増加をもたらす。未結合薬物のみが、糸球体濾過、および場合によっては肝クリアランスに利用可能である。しかし、高抽出率薬物については、クリアランスは、タンパク質結合と比較的無関係である。平衡透析法を用いた血漿または血清タンパク質結合検定は、薬物の有効性を判断するのに使用される。96ウェルマイクロプレート形式を使用する、または従来の2チャンバテフロン(登録商標)透析細胞を使用する平衡透析試験を用いて、血漿または血清結合を測定することが可能であり、試験化合物の定量化にLC/MS/MS分析が用いられる。テフロン(登録商標)透析細胞システムは、一般には、平衡に達する時間、血漿タンパク質に結合した化合物および未結合の化合物の比率、ならびに結合の範囲に対する濃度の影響を判断するのに使用される。試験化合物の定量は、HPLCまたはLC/MS/MS分析によって行われる。
平衡透析を実施するために、以下の手順を用いることが可能である。0.990mLの溶解血漿(37℃)に対して、10μLの分量の保存溶液を試験化合物濃度が35μmになるように添加する。適切な体積の緩衝剤(ダルベッコリン酸緩衝塩水、pH7.4)に35μMの濃度で各試験化合物をスパイクする。各スパイク血漿および緩衝溶液の二重分量(130μL)を透析前に1.5mLの標識ポリプロピレン管内に回収し、-40℃で凍結保存する。有用な標準物質、すなわち[3H]-プロプラノロールおよび[3H]-ワルファリンを1μCi/mLの濃度で各試験対象種からの血漿において調製する。平衡透析を96ウェルテフロン(登録商標)透析ユニットにて実施する。ユニットのそれぞれのウェルは、分子量カットオフが12〜14KDaの縦に整列した透析膜(再生セルロース)によって仕切られた2つのチャンバからなる。最初に平衡透析膜を脱イオン水に30分間予め浸漬させ、次いで20%エタノールに20分間浸漬させた後に脱イオン水で2回洗浄する。平衡透析装置を製造元の説明に従って組み立てる。(膜の脱水を防止するために)各ウェルの1つのチャンバに150μLのブランク緩衝剤を充填する。一定分量(150μL)のスパイク血漿またはスパイク緩衝剤を各ウェルの反対のチャンバに添加する。プレートの上部を粘着性密閉フィルムで密閉して、蒸発を防止し、インキュベーションを通じて一定のpHを維持する。試験化合物および標準物質を用いたすべての透析実験を、二重の試料を使用して評価する。透析装置を軌道シェーカ/インキュベータ(Lab-Line Enviro)で37℃にてインキュベートし、24時間のインキュベーションの後に試料を回収する。試験化合物を含む試料は分析まで-70℃に凍結保存する。放射標識を含む試料(100μL)を添加し、渦巻によって混合する。各バイアルにおける壊変毎分(dpm)を液体シンチレーション計数器で測定する。ヒト血清タンパク質に対して未結合の各試験化合物および標準物質の比率(fu)を以下の式に従って計算する。
Cbuffer
fu=------
Cplasma
(式中、CbufferおよびCplasmaは、透析の後にそれぞれ緩衝剤および血漿チャンバで測定された化合物の濃度を示す)。血漿タンパク質に結合した比率(fb)は1- fuで求められる。透析装置からの化合物および標準物質の回収率(物質収支)を以下のように計算することが可能である。
CplasmaVplasma+CbufferVbuffer
回収率(%)=---------------------×100%
Cplasma(t=0)Vplasma
(式中、Cplasma(t=0)は、透析前の血漿において測定した化合物の濃度を示し、VplasmaおよびVbufferは、透析チャンバの反対側に添加されるそれぞれ血漿および緩衝剤の体積を示す)。
表5は、平衡透析法によって測定されたヒト血漿タンパク質に対するE-23aの結合を示す。(S)-プロプラノロールおよび(R,S)-ワルファリンを標準物質として使用した。その結果は、E-23aは、血漿中で未結合の形で比較的利用可能であることを示している。
本発明の化合物BA-1049(化合物E-23a)の調節インキュベーションにおける活性の百分率としてのrhoキナーゼ阻害剤活性(ROCKII)(y軸)の、そのデータが791nMのIC50値の計算に用いられたlog10モル濃度(x軸)に対するプロットである。 10μMにおける化合物E-7aからE-25によるROCKII活性の阻害のプロットである。実験は2回行われた。検定において、ATPは100μMに存在した。 本発明の化合物BA-1049(化合物E-23a)の調節インキュベーションにおける活性の百分率としてのrhoキナーゼ阻害剤活性(ROCKI)(y軸)の、そのデータが20.6マイクロモル(μM)のIC50値の計算に用いられたlog10モル濃度(x軸)に対するIC50プロットである。実験は2回行われた。検定において、ATPは100μMに存在した。 脊髄、肝臓、脳および網膜におけるROCKIおよびROCKIIの発現のパターンを示すウェスタンブロットである。ラットの脊髄、肝臓、脳または網膜からタンパク質を抽出した。20μgを7%SDS-PAGEに加えた。ROCKIまたはROCKIIに特異的な抗体(Santa Cruz Biotechnology Inc.)を使用したウェスタンブロットによって特異的なタンパク質発現が示された。結果は、ROCKIIが脊髄、脳および網膜で発現されることを示している。それに対して、ROCKIは、肝臓でより多く発現される。 異なるキナーゼ基体:cSRC、GSK3B、JNK1alpha1、MAPK1、MAPK2、MSK1、PKA、PKC alpha、PRK2、ROCKI、ROCKIIおよびTrkbに対して試験した10μMにおける化合物E-23aのキナーゼ選択性を示すヒストグラムである。E-23aは、ROCKIIを83%阻害する。E-23aは、ROCKIを31%阻害する。E-23aは、MSK1を43%阻害する。E-23aは、PRK2を52%阻害する。それらの値は、各キナーゼの阻害の百分率で表した。実験は2回行われた。検定において、ATPは100μMに存在した。 35μMの濃度における化合物E-7からE-25でNG-108細胞の細胞培養物を処理した後の軸索突起成長を調べるための実験の結果を示すヒストグラムである。35μMにおける化合物E-7aからE-25に対する軸索突起を有する細胞の百分率。実験は、3回行われた。細胞(1×104個/mL)をDMSO0.35%(対照)またはDMSOに4時間溶解させた試験化合物(35μM)の存在下でインキュベートした。軸索突起を有する細胞の百分率は、1細胞体の直径より長い軸索突起を有する細胞からの計数によって求められた。 異なる濃度のE-23a(x軸)の存在下での72時間にわたるインキュベーション後の対照細胞の百分率(Y軸)で表されるHEC-1B細胞の増殖低下を示す図である。正の対照として硫酸カドミウム水和物(CAD)を使用した。処理後に、Alamar Blue検定を用いて増殖率を測定した。 対照に対して相対的な腫瘍サイズの成長率の低下に対するE-23aの効果を示す図である。本発明の化合物E-23aの投与および対照ビヒクルの投与の腫瘍サイズ変化に対する効果は、 処理スケジュールの始めに求められたそれぞれの初期腫瘍体積の百分率で表される。 ヒト内皮細胞に対する濃度の関数としての化合物E-23aおよびトラニラストの抑制の百分率としての相対的抗増殖効果を示す図である。 フィブロネクチンのみ(対照)、10および50μMのE-23aを有するフィブロネクチン上に接種後のHUVEC管形成のマイクロ写真を示す図である。管形成は、E-23aの存在下では、対照に比べて実質的に低下している。 濃度を増加させたE-23a、および正の対照として使用されたトラニラストの存在下におけるHUVEC細胞の管形成の定量化によるヒストグラムを示す図である。 ボイデン室の底室におけるVEGFの存在下での内皮細胞移動に対するE-23aおよびトラニラストの効果を示すヒストグラムである。

Claims (49)

  1. 式Iで表される構造を有する置換ピペリジン化合物、およびその薬学的に許容できる塩。
    (式中、
    Aは、炭素または窒素であり、
    aは、Aが炭素である場合は1であり、Aが窒素である場合は0であり、
    xは、0または1であり、
    Xは、炭素または硫黄であり、ただし、xが0である場合にのみXが炭素であり、xが1である場合にのみXが硫黄であり、
    nは、0または1であり、
    R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は、独立に、
    水素、
    直鎖状であっても分枝状であってもよいC1〜C30アルキル基、
    C4〜C30シクロアルキルアルキル基、
    C2〜C5架橋基を有するスピロシクロアルキル基、
    C3〜C40アルケニル基、
    C3〜C10アルキルチオアルキル基
    少なくとも1個の酸素原子および2から30個の炭素原子を含むアルコキシ含有アルキル基、
    3から30個の炭素原子を有し、アルケニル基の二重結合のアリル位にあるか、さらに離れている少なくとも1個の酸素原子を含むアルコキシ含有アルケニル基、
    2から(約)30個の酸素原子を含み、水酸基またはメトキシル基で終端しうる2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基、
    7から30個の炭素を含み、アリール基は置換アリール基でありうるアラルキル基、および
    7から30個の炭素を含み、アラルキルのアルキル部はエーテル基を含むアラルキル基からなる群から選択され、
    ただし、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの少なくとも4個が水素であり、R1a、R1b、R1gおよびR1hの少なくとも2個が水素であり、R1c、R1d、R1eおよびR1fの少なくとも2個が水素であり、
    R2およびR2Aは、独立に、
    水素、
    C1〜C30アルキル基、
    C3〜C10シクロアルキル基、
    C4〜C30シクロアルキルアルキル基、
    C3〜C40アルケニル基、
    C3〜C40アルキニル基、
    少なくとも1個のエーテル酸素原子、および2から30個の炭素原子を含むアルコキシ含有アルキル基、
    少なくとも1個のヒドロキシル置換基を含む、2〜30個の炭素原子を含むヒドロキシル含有アルキル基、
    少なくとも1個のヒドロキシル置換基および少なくとも1個のエーテル酸素原子を含む4から30個の炭素原子のアルキル基を含み、ヒドロキシルおよびエーテル基は少なくとも2個の炭素原子によって分離されたヒドロキシ含有アルキル基、
    3から30個の炭素原子を含むアルケニル基の二重結合のアリル位にあるか、さらに離れている少なくとも1個の酸素原子を含むアルコキシ含有アルケニル基、
    2から30個の酸素原子を含み、2-メトキシエチル基または2-ヒドロキシエチル基で終端しうる2-ポリ(2-オキシエチル)エチル基、
    低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン、過フルオロ低級アルキル、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル、カルボキシル置換低級アルキル、ヒドロキシ、フェニルオキシ、オメガ-ヒドロキシル-終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、またはオメガ-メトキシ-終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で3から30個の酸素原子を含む直鎖状ポリエチレングリコール基、およびそれらの組合せから選択される基で置換されうる6から10個の環炭素のアリール基であって、フェニルオキシ基は、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲンおよびそれらの組合せで置換されうるアリール基、
    7から30個の炭素を含み、アリール基は置換アリール基でありうるアラルキル基、
    7から30個の炭素を含み、アラルキルのアルキル部がエーテル基を含むアラルキル基、および
    アルキル基、またはアルコキシアルキル基、またはシクロアルキルアルキル基、またはアルコキシアルキル基、または3から30個の酸素原子をPEG基またはメトキシ終端PEG基の形で含むポリエチレングリコール置換基を2-、4-または5-位に含むことができる1-イミダゾリル基、
    アルキル基、またはアルコキシアルキル基、またはシクロアルキルアルキル基、またはアルコキシアルキル基、または3から30個の酸素原子をHO-PEG-基またはメトキシ終端MPEG基の形で含むポリエチレングリコール置換基を1-または4/5-位に含むことができる2-イミダゾリル基、
    アルキル基、またはアルコキシアルキル基、またはシクロアルキルアルキル基、またはアルコキシアルキル基、または3から30個の酸素原子をヒドロキシル-終端PEG基またはメトキシ-終端PEG基の形で含むポリエチレングリコール基を含むことができる4-イミダゾリル基、
    2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルから選択され、式(基-i):
    で表されるピリジニル基、
    2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルまたは5-ピリジルまたは6-ピリジルから選択され、式(基-ii):
    で表される置換ピリジニル基、
    で表される1H-インドリル基、
    式(基-iv):
    で表される1H-インドリル含有基、
    式(基-v):
    で表される置換キノリル基、
    式(基-vi):
    で表される置換キノリル含有基、
    式(基-vii):
    で表される置換フェニル基、
    式(基-viii):
    で表される置換フェニル含有(またはフェニレン)基、
    式(基-ix):
    で表される置換ピペリジニル(またはピペリジリジニル)基、
    式(基-x):
    で表される置換ピペリジニル含有(またはピペリジリジニル)基、
    式(基-xi):
    で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル基、
    式(基-xii):
    で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル含有基、
    式(基-xiii):
    で表されるイソキノリニル基、
    式(基-xiv):
    で表されるイソキノリニル含有基、
    ヒドロキシ基置換基を含むことができる5-イソキノリル基、
    式(基-xv):
    で表される1H-イミダゾリル基、
    式(基-xvi):
    で表される1H-イミダゾリル含有基、
    式(基-xvii):
    で表される1H-インダゾリル基、
    式(基-xviii):
    で表される1H-インダゾリル含有基、
    式(基-xix):
    で表されるプリニル基(9H-プリニル基)、および
    式(基-xx):
    で表されるプリニル含有基(または9H-プリニル含有基)
    からなる群から選択され、
    Bは、1から20個の炭素原子の非置換直鎖状アルキレン基、および1から4個の炭素原子のアルキル基で置換されている1から20個の炭素原子の直鎖状アルキレン基を含む分枝状アルキレン基からなる群から選択されるアルキレン結合基であり、
    Rbは、水素、アルキル、アミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択され、
    Rcは、水素(H)およびアルキルからなる群から選択され、
    Rdは、水素(H)、アルキルおよびアラルキルからなる群から選択され、
    nが1のときは、
    R3およびR4は、それぞれ独立に、
    水素、
    低級アルキル、低級シクロアルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、ハロゲン、過フルオロ低級アルキル、ニトロ、シアノ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、カルボキシル、カルボキシル置換低級アルキル、ヒドロキシ、フェニルオキシ、オメガ-ヒドロキシル-終端ポリ(オキシエチル)(またはHO-PEG-)基の形、またはオメガ-メトキシ-終端ポリ(オキシエチル)(またはCH3O-PEG-またはMeO-PEGまたはMPEG)基の形で3から30個の酸素原子を含む直鎖状ポリエチレングリコール基、およびそれらの組合せから選択される基で置換されうる6から10個の環炭素のアリール基であって、フェニルオキシ基は、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルケニル、低級シクロアルキル、過フルオロ低級アルキル、ハロゲンおよびそれらの組合せで置換されうるアリール基、
    7から30個の炭素を含み、アリール基は置換アリール基でありうるアラルキル基、
    7から30個の炭素を含み、アラルキルのアルキル部がエーテル基を含むアラルキル基、および
    2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルから選択され、式(基-i):
    で表されるピリジニル基、
    2-ピリジルまたは3-ピリジルまたは4-ピリジルまたは5-ピリジルまたは6-ピリジルから選択され、式(基-ii):
    で表される置換ピリジニル基、
    式(基-iii):
    で表される1H-インドリル基、
    式(基-iv):
    で表される1H-インドリル含有基、
    式(基-v):
    で表される置換キノリル基、
    式(基-vi):
    で表される置換キノリル含有基、
    式(基-vii):
    で表される置換フェニル基、
    式(基-viii):
    で表される置換フェニル含有(またはフェニレン)基、
    式(基-ix):
    で表される置換ピペリジニル(またはピペリジリジニル)基、
    式(基-x):
    で表される置換ピペリジニル含有(またはピペリジリジニル)基、
    式(基-xi):
    で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル基、
    式(基-xii):
    で表される1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル含有基、
    式(基-xiii):
    で表されるイソキノリニル基、
    式(基-xiv):
    で表されるイソキノリニル含有基、
    式(基-xv):
    で表される1H-イミダゾリル基、
    式(基-xvi):
    で表される1H-イミダゾリル含有基、
    式(基-xvii):
    で表される1H-インダゾリル基、
    式(基-xviii):
    で表される1H-インダゾリル含有基、
    式(基-xix):
    で表されるプリニル基(9H-プリニル基)、および
    式(基-xx):
    で表されるプリニル含有基(または9H-プリニル含有基)
    からなる群から選択され、
    Bは、C1〜C20の直鎖状または分枝状アルキレン基であり、
    Rbは、水素、アルキル、アミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択され、
    Rcは、水素およびアルキルからなる群から選択され、
    Rdは、水素、アルキルおよびアラルキルからなる群から選択され、または、
    それらの範囲を定める窒素原子をともに含むR3およびR4は、複素環式窒素含有環状基を形成し、窒素含有環状基は、場合によっては、単一環内に酸素原子、硫黄原子またはさらなる窒素原子を有する5から7個の原子の前記窒素原子を含む単一環であってもよく、または窒素含有環状基は、場合によっては、縮合環構造内に、酸素原子、硫黄原子またはさらなる窒素原子を有する8から16個の原子の前記窒素原子を含む縮合環構造であってもよく、複素環式窒素含有環状基は、場合によっては、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルコキシアルキル、低級アルコキシ、カルボキシル(低級アルキル)、N-[カルボキシル-(低級アルキル)]アミノ、N,N-ジ(カルボキシル-低級アルキル)アミノ、アミノ、ジ(低級アルキル)アミノ、ハロゲンおよび過フルオロ(低級アルキル)からなる群から選択される置換基を有し、または
    nが0のときは、
    R3は、
    置換アリール基であることができる6から10個の環炭素のアリール基、
    7から30個の炭素を含み、アリール基は、置換アリール基であることができ、アラルキルのアルキル部は、場合によっては、少なくとも2個の炭素によりXから分離されたエーテル基を含むことができるアラルキル基、
    ヘテロアリール環の炭素においてXに直接結合しているか、場合によっては、ヘテロアリール環の炭素において結合している基BによってXに結合し、ピリジニル、1H-インドリル、XまたはBに結合していない炭素において基Rcで置換されているキノリル、ピペリジン環の1-位において基Rdで置換されているピペリジニル、1H-ピロロ[2,3-b]ピリジニル、イソキノリニル、1H-イミダゾリル、1H-インダゾリルおよび9H-プリニルからなる群から選択されるヘテロアリール基
    からなる群から選択され、
    Bは、1から4個の炭素原子のアルキル基で場合によっては置換されたC1〜C20直鎖状アルキレン基であり、
    Rcは、水素およびC1〜C20アルキルからなる群から選択され、
    Rdは、水素、C1〜C20アルキルおよびC7〜C20アラルキルからなる群から選択され、
    ただし、R3基において、Xに結合した炭素原子は、ヒドロキシル基およびアリール基の両方を含まず、またはヒドロキシル基およびヘテロアリール基の両方を含まない)。
  2. xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  3. xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  4. xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方が水素であり、他方がアルキルであり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  5. xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  6. xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  7. xは0であり、Xは炭素であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方が水素であり、他方がアルキルであり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  8. xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  9. xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  10. xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方が水素であり、他方がアルキルであり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  11. xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  12. xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  13. xは1であり、Xは硫黄であり、aは1であり、Aは炭素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2およびR2Aの一方が水素であり、他方がアルキルであり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  14. xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  15. xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  16. xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  17. xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  18. xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  19. xは0であり、Xは炭素であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  20. xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  21. xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  22. xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは0である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  23. xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  24. xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  25. xは1であり、Xは硫黄であり、aは0であり、Aは窒素であり、R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R1f、R1gおよびR1hの各々は水素であり、R2は、水素およびアルキルからなる群から選択され、nは1である請求項1に記載の置換ピペリジン化合物。
  26. 請求項1に記載の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
  27. 前記担体は、注射に好適な無菌等張性水溶液を含む請求項26に記載の医薬組成物。
  28. 前記溶液は、緩衝塩を含む請求項27に記載の医薬組成物。
  29. 前記溶液は、リン酸緩衝塩水を含む請求項27に記載の医薬組成物。
  30. 請求項2から25のいずれかに記載の化合物、およびその薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
  31. 前記担体は、注射に好適な無菌等張性水溶液を含む請求項30に記載の医薬組成物。
  32. 前記溶液は、緩衝塩を含む請求項31に記載の医薬組成物。
  33. 前記溶液は、リン酸塩緩衝塩水を含む請求項31に記載の医薬組成物。
  34. 請求項1に記載の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療方法。
  35. 請求項2から25のいずれかに記載の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療方法。
  36. 請求項26に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療方法。
  37. 請求項30に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の中枢神経系の神経の傷害または疾患の治療方法。
  38. 請求項1に記載の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の癌の治療方法。
  39. 請求項2から25のいずれかに記載の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の癌の治療方法。
  40. 請求項26に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の癌の治療方法。
  41. 請求項30に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の癌の治療方法。
  42. 請求項1に記載の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の黄斑変性の治療方法。
  43. 請求項2から25のいずれかに記載の化合物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の黄斑変性の治療方法。
  44. 請求項26に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の黄斑変性の治療方法。
  45. 請求項30に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳類に投与することを含む哺乳類の黄斑変性の治療方法。
  46. 請求項1に記載の化合物を細胞に投与することを含む、細胞の酵素rhoキナーゼの阻害方法。
  47. 前記細胞は哺乳類に存在する請求項46に記載の方法。
  48. 請求項2から25のいずれかに記載の化合物を細胞に投与することを含む、細胞の酵素rhoキナーゼの阻害方法。
  49. 前記細胞は哺乳類に存在する請求項48に記載の方法。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017513919A (ja) * 2014-04-28 2017-06-01 メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド Ｒｈｏキナーゼ阻害剤としてのイソキノリンスルホン誘導体
JP2020502248A (ja) * 2016-12-21 2020-01-23 バイオアクソン バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド Ｒｈｏキナーゼ阻害剤ＢＡ‐１０４９（Ｒ）及びその活性代謝物
US11198680B2 (en) 2016-12-21 2021-12-14 BioAxone BioSciences, Inc. Rho kinase inhibitor BA-1049 (R) and active metabolites thereof
US11701366B2 (en) 2015-01-26 2023-07-18 BioAxone BioSciences, Inc. Treatment of cerebral cavernous malformations and cerebral aneurysms with rho kinase inhibitors

Families Citing this family (83)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7375858B2 (en) 2002-03-19 2008-05-20 Fujifilm Corporation Image data control apparatus and method for image-recording device
JP2008520744A (ja) 2004-11-19 2008-06-19 ザ・レジェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・カリフォルニア 抗炎症性ピラゾロピリミジン
WO2006067529A1 (en) * 2004-12-21 2006-06-29 Merck Sharp & Dohme Limited Piperidine and azetidine derivatives as glyt1 inhibitors
CN101253166B (zh) * 2005-08-30 2013-07-10 旭化成制药株式会社 磺酰胺化合物
CA2647391C (en) 2006-04-04 2015-12-29 The Regents Of The University Of California Kinase antagonists
TW200815398A (en) * 2006-06-08 2008-04-01 Ube Industries A novel indazole derivative having spirocyclic structure in the side chain
JP2008099662A (ja) * 2006-09-22 2008-05-01 Institute Of Physical & Chemical Research 幹細胞の培養方法
WO2008049919A2 (en) * 2006-10-26 2008-05-02 Devgen N.V. Rho kinase inhibitors
WO2008105058A1 (ja) * 2007-02-27 2008-09-04 Asahi Kasei Pharma Corporation スルホンアミド化合物
AU2008220104B2 (en) * 2007-02-28 2012-09-27 Asahi Kasei Pharma Corporation Sulfonamide derivative
US8232292B2 (en) 2007-07-02 2012-07-31 Asahi Kasei Pharma Corporation Sulfonamide compound and crystal thereof
CA2697895C (en) 2007-08-29 2017-10-31 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Agent for promoting corneal endothelial cell adhesion
WO2009046448A1 (en) 2007-10-04 2009-04-09 Intellikine, Inc. Chemical entities and therapeutic uses thereof
JP2009100680A (ja) * 2007-10-23 2009-05-14 Univ Nagoya ヒト全身性強皮症動物モデルの作製方法、ヒト全身性強皮症動物モデル及びその用途
US8703777B2 (en) 2008-01-04 2014-04-22 Intellikine Llc Certain chemical entities, compositions and methods
US8193182B2 (en) 2008-01-04 2012-06-05 Intellikine, Inc. Substituted isoquinolin-1(2H)-ones, and methods of use thereof
US8637542B2 (en) 2008-03-14 2014-01-28 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
US8993580B2 (en) 2008-03-14 2015-03-31 Intellikine Llc Benzothiazole kinase inhibitors and methods of use
WO2010006086A2 (en) 2008-07-08 2010-01-14 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
WO2010006072A2 (en) 2008-07-08 2010-01-14 The Regents Of The University Of California Mtor modulators and uses thereof
CA2738429C (en) 2008-09-26 2016-10-25 Intellikine, Inc. Heterocyclic kinase inhibitors
US8841305B2 (en) * 2008-10-09 2014-09-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Activators of the human pyruvate kinase M2 receptor
EP2358720B1 (en) 2008-10-16 2016-03-02 The Regents of The University of California Fused ring heteroaryl kinase inhibitors
US8476431B2 (en) 2008-11-03 2013-07-02 Itellikine LLC Benzoxazole kinase inhibitors and methods of use
EP2352501B1 (en) * 2008-11-03 2014-01-01 ChemoCentryx, Inc. Compounds for use in the treatment of osteoporosis
AU2010234526B2 (en) 2009-04-06 2016-07-21 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase M2 modulators, therapeutic compositions and related methods of use
ES2619557T3 (es) 2009-05-04 2017-06-26 Agios Pharmaceuticals, Inc. Activadores de PKM2 para uso en el tratamiento del cáncer
JP5789252B2 (ja) 2009-05-07 2015-10-07 インテリカイン， エルエルシー 複素環式化合物およびその使用
PL2444395T3 (pl) 2009-06-19 2016-06-30 D Western Therapeutics Inst Inc Podstawiona pochodna izochinoliny
UA107667C2 (uk) 2009-06-29 2015-02-10 Аджиос Фармасьютікалз, Інк. Лікарські сполуки, що модулюють активність піруваткінази-м2, композиції на їх основі та застосування при лікуванні раку
JP5764555B2 (ja) 2009-06-29 2015-08-19 アジオス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 治療組成物および関連する使用方法
WO2011046771A1 (en) 2009-10-14 2011-04-21 Schering Corporation SUBSTITUTED PIPERIDINES THAT INCREASE p53 ACTIVITY AND THE USES THEREOF
US8980899B2 (en) 2009-10-16 2015-03-17 The Regents Of The University Of California Methods of inhibiting Ire1
EP2563761A1 (en) 2010-04-29 2013-03-06 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Activators of human pyruvate kinase
JP5951600B2 (ja) 2010-05-21 2016-07-13 インフィニティー ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド キナーゼ調節のための、化合物、組成物および方法
CN110003219A (zh) 2010-07-13 2019-07-12 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 作为irak4调节剂的吡唑并[1,5a]嘧啶和噻吩并[3,2b]嘧啶衍生物
CA2817577A1 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2012083246A1 (en) 2010-12-17 2012-06-21 Agios Pharmaceuticals, Inc. Novel n- (4- (azetidine - 1 - carbonyl) phenyl) - (hetero - ) arylsulfonamide derivatives as pyruvate kinase m2 (pmk2) modulators
JP6092118B2 (ja) 2010-12-21 2017-03-08 アジオス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ニ環式ｐｋｍ２活性化剤
TWI549947B (zh) 2010-12-29 2016-09-21 阿吉歐斯製藥公司 治療化合物及組成物
US8809349B2 (en) 2011-01-10 2014-08-19 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Processes for preparing isoquinolinones and solid forms of isoquinolinones
TWI592411B (zh) 2011-02-23 2017-07-21 英特爾立秦有限責任公司 激酶抑制劑之組合及其用途
BR112013028422B8 (pt) 2011-05-03 2022-01-11 Agios Pharmaceuticals Inc Ativadores de piruvato cinase para uso em terapia
AU2012284088B2 (en) 2011-07-19 2015-10-08 Infinity Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
AR088218A1 (es) 2011-07-19 2014-05-21 Infinity Pharmaceuticals Inc Compuestos heterociclicos utiles como inhibidores de pi3k
EP2751093A1 (en) 2011-08-29 2014-07-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
JP6342805B2 (ja) 2011-09-02 2018-06-13 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 置換ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジンおよびその用途
ES2716200T3 (es) 2011-12-06 2019-06-11 Astellas Inst For Regenerative Medicine Método de diferenciación dirigida que produce células endoteliales corneales
US9062071B2 (en) 2011-12-21 2015-06-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted piperidines as HDM2 inhibitors
ES2897740T3 (es) 2011-12-28 2022-03-02 Kyoto Prefectural Public Univ Corp Normalización del cultivo de células endoteliales de la córnea
US8940742B2 (en) 2012-04-10 2015-01-27 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
US8828998B2 (en) 2012-06-25 2014-09-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lupus, fibrotic conditions, and inflammatory myopathies and other disorders using PI3 kinase inhibitors
BR112015006828A8 (pt) 2012-09-26 2019-09-17 Univ California composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; composição farmacêutica; uso do composto; e método para modular a atividade de uma proteína ire1
CN108902893B (zh) 2013-02-08 2022-02-25 通用磨坊公司 低钠食品
US9481667B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Salts and solid forms of isoquinolinones and composition comprising and methods of using the same
WO2015016371A1 (ja) 2013-07-30 2015-02-05 京都府公立大学法人 角膜内皮細胞マーカー
US9751888B2 (en) 2013-10-04 2017-09-05 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
PE20160685A1 (es) 2013-10-04 2016-07-23 Infinity Pharmaceuticals Inc Compuestos heterociclicos y usos de los mismos
US11382904B2 (en) 2013-10-31 2022-07-12 Kyoto Prefectural Public University Corporation Therapeutic drug for diseases related to endoplasmic reticulum cell death in corneal endothelium
WO2015080297A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Kyoto Prefectural Public University Corporation Application of laminin to corneal endothelial cell culture
KR101491763B1 (ko) 2013-12-19 2015-02-16 대한민국 1-(2-((4-클로로-2-메톡시-5-메칠페닐)아미노)-2-옥소에틸)-ｎ-(2-하이드록시페닐)-피페리딘-4-카복사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 프리온 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물
SG10201808053XA (en) 2014-03-19 2018-10-30 Infinity Pharmaceuticals Inc Heterocyclic compounds for use in the treatment of pi3k-gamma mediated disorders
WO2015160975A2 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
EP3180003B1 (en) * 2014-07-01 2022-01-12 The Regents of the University of California Pkc-epsilon inhibitors
US9708348B2 (en) 2014-10-03 2017-07-18 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Trisubstituted bicyclic heterocyclic compounds with kinase activities and uses thereof
US10149856B2 (en) 2015-01-26 2018-12-11 BioAxone BioSciences, Inc. Treatment of cerebral cavernous malformations and cerebral aneurysms with rho kinase inhibitors
US9687483B2 (en) * 2015-01-26 2017-06-27 BioAxone BioSciences, Inc. Treatment of cerebral cavernous malformations and cerebral aneurysms with Rho kinase inhibitors
US10106525B2 (en) 2015-01-26 2018-10-23 BioAxone BioSciences, Inc. Rho kinase inhibitor BA-1049 (R) and active metabolites thereof
EP4344703A1 (en) 2015-06-11 2024-04-03 Agios Pharmaceuticals, Inc. Methods of using pyruvate kinase activators
WO2017048702A1 (en) 2015-09-14 2017-03-23 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of isoquinolinone derivatives, process of making, compositions comprising, and methods of using the same
JP7008337B2 (ja) 2016-02-15 2022-02-10 京都府公立大学法人 ヒト機能性角膜内皮細胞およびその応用
WO2017161116A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Isotopologues of isoquinolinone and quinazolinone compounds and uses thereof as pi3k kinase inhibitors
WO2017214269A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
CN109640999A (zh) 2016-06-24 2019-04-16 无限药品股份有限公司 组合疗法
WO2019014322A1 (en) * 2017-07-11 2019-01-17 BioAxone BioSciences, Inc. KINASE INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF DISEASES
WO2019057121A1 (zh) * 2017-09-25 2019-03-28 南京明德新药研发股份有限公司 一种异喹啉磺酰衍生物的晶型及其制备方法
JPWO2020045642A1 (ja) 2018-08-31 2021-08-12 学校法人同志社 眼細胞を保存または培養するための組成物および方法
US11445723B2 (en) 2018-10-02 2022-09-20 The Doshisha Method and container for preserving corneal endothelial cells
US20230257700A1 (en) 2020-02-27 2023-08-17 Kyoto Prefectural Public University Corporation Functional human corneal endothelial cells and application thereof
CN111840113B (zh) * 2020-09-11 2022-09-06 百草堂(湖北)制药有限公司 抗菌洁肤露
KR20230157307A (ko) 2021-01-11 2023-11-16 인사이트 코포레이션 Jak 경로 억제제 및 rock 억제제를 포함하는 병용 요법
AU2022270611A1 (en) 2021-05-03 2023-10-12 Astellas Institute For Regenerative Medicine Methods of generating mature corneal endothelial cells
US20230399311A1 (en) * 2022-06-10 2023-12-14 BioAxone BioSciences, Inc. Polymorphs of substituted isoquinoline-based rho kinase inhibitors

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11508599A (ja) * 1995-07-13 1999-07-27 クノル アクチエンゲゼルシャフト 複素環式カルボキシアミド誘導体及び治療剤としてのその使用
WO2000012074A2 (en) * 1998-08-28 2000-03-09 Scios Inc. Use of piperidines and/or piperazines as inhibitors of p38-alpha kinase
JP2001508419A (ja) * 1996-12-27 2001-06-26 クノル アクチエンゲゼルシャフト ５−ｈｔ受容体活性を有するスルホンアミド化合物
US20020037907A1 (en) * 2000-07-17 2002-03-28 American Home Products Corporation Substituted 2- (S) -hydroxy-3- (piperidin-4-yl-methylamino) -propyl ethers and substituted 2-aryl-2- (R) - hydroxy-1- (piperidin-4-yl-methyl) -ethylamine beta-3 adrenergic receptor agonists
WO2002080928A1 (en) * 2001-04-03 2002-10-17 Merck & Co., Inc. N-substituted nonaryl-heterocyclo amidyl nmda/nr2b antagonists
EP1295607A1 (en) * 2000-06-23 2003-03-26 Mitsubishi Pharma Corporation Antitumor effect potentiators
WO2003042174A1 (en) * 2001-11-14 2003-05-22 Schering Corporation Cannabinoid receptor ligands
JP2003528046A (ja) * 1999-12-17 2003-09-24 サノフィ−サンテラボ フェノキシプロパノールアミン類、それらの製造および治療的使用

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3539573A (en) * 1967-03-22 1970-11-10 Jean Schmutz 11-basic substituted dibenzodiazepines and dibenzothiazepines
US4584303A (en) * 1984-04-09 1986-04-22 The Boc Group, Inc. N-aryl-N-(4-piperidinyl)amides and pharmaceutical compositions and method employing such compounds
IL83275A (en) * 1986-09-08 1994-02-27 Novo Nordisk As Compounds 1,2, 4-Oxadiazolyl Pipridine Transformed, their preparation and pharmaceutical preparations containing them
GB8714789D0 (en) * 1987-06-24 1987-07-29 Lundbeck & Co As H Heterocyclic compounds
US4857301A (en) * 1987-09-25 1989-08-15 Schering Corporation Sulfonamide compounds, compositions and method of use
US4849521A (en) * 1987-11-02 1989-07-18 Boc, Inc. Stereoselective preparation of 3-substituted-4-piperidine compounds and derivatives
WO1990005723A1 (en) * 1988-11-24 1990-05-31 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Trans-4-amino(alkyl)-1-pyridylcarbamoyl-cyclohexane compounds and their medicinal use
EP0641781B1 (en) * 1991-09-06 2000-07-26 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. 4-amino(alkyl)cyclohexane-1-carboxamide compound and use thereof
US5770592A (en) * 1991-11-22 1998-06-23 Alcon Laboratories, Inc. Prevention and treatment of ocular neovascularization using angiostatic steroids
EP0661969B1 (en) * 1992-09-22 2003-03-12 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES Taxol for treating lymphomas and breast cancer and for reducing multi-drug resistance to taxol
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
US5906819A (en) * 1995-11-20 1999-05-25 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Rho target protein Rho-kinase
TW531537B (en) * 1995-12-27 2003-05-11 Janssen Pharmaceutica Nv 1-(1,2-disubstituted piperidinyl)-4-substituted piperidine derivatives
WO1997024123A1 (en) * 1996-01-02 1997-07-10 Synthelabo Use of polyamine site antagonist for the manufacture of a medicament for the treatment of ischemic disorders of the eye
SI0956865T2 (sl) * 1996-08-12 2011-04-29 Mitsubishi Pharma Corp Zdravila, ki obsegajo inhibitor Rho-kinaze
CA2214841A1 (en) 1997-10-31 1999-04-30 Lisa Mckerracher Rho antagonists and their use to block inhibition of neurite outgrowth
TR200001800T2 (tr) * 1997-12-16 2001-03-21 Warner-Lambert Company -4(3)-İkameli -4(3)- aminometil-(tio) piran veya- piperidin türevleri (=Gabapentin analogları), hazırlanmaları ve nörolojik hastalıkların tedavisinde kullanımları
KR20010040693A (ko) * 1998-02-04 2001-05-15 나가사까 겐지로 Ｎ-아실 환상 아민유도체
CA2325842C (en) 2000-11-02 2007-08-07 Lisa Mckerracher Methods for making and delivering rho-antagonist tissue adhesive formulations to the injured mammalian central and peripheral nervous systems and uses thereof
EP1403255A4 (en) * 2001-06-12 2005-04-06 Sumitomo Pharma INHIBITORS OF RHO KINASE

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11508599A (ja) * 1995-07-13 1999-07-27 クノル アクチエンゲゼルシャフト 複素環式カルボキシアミド誘導体及び治療剤としてのその使用
JP2001508419A (ja) * 1996-12-27 2001-06-26 クノル アクチエンゲゼルシャフト ５−ｈｔ受容体活性を有するスルホンアミド化合物
WO2000012074A2 (en) * 1998-08-28 2000-03-09 Scios Inc. Use of piperidines and/or piperazines as inhibitors of p38-alpha kinase
JP2003528046A (ja) * 1999-12-17 2003-09-24 サノフィ−サンテラボ フェノキシプロパノールアミン類、それらの製造および治療的使用
EP1295607A1 (en) * 2000-06-23 2003-03-26 Mitsubishi Pharma Corporation Antitumor effect potentiators
US20020037907A1 (en) * 2000-07-17 2002-03-28 American Home Products Corporation Substituted 2- (S) -hydroxy-3- (piperidin-4-yl-methylamino) -propyl ethers and substituted 2-aryl-2- (R) - hydroxy-1- (piperidin-4-yl-methyl) -ethylamine beta-3 adrenergic receptor agonists
WO2002080928A1 (en) * 2001-04-03 2002-10-17 Merck & Co., Inc. N-substituted nonaryl-heterocyclo amidyl nmda/nr2b antagonists
WO2003042174A1 (en) * 2001-11-14 2003-05-22 Schering Corporation Cannabinoid receptor ligands

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017513919A (ja) * 2014-04-28 2017-06-01 メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド Ｒｈｏキナーゼ阻害剤としてのイソキノリンスルホン誘導体
US11701366B2 (en) 2015-01-26 2023-07-18 BioAxone BioSciences, Inc. Treatment of cerebral cavernous malformations and cerebral aneurysms with rho kinase inhibitors
JP2020502248A (ja) * 2016-12-21 2020-01-23 バイオアクソン バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド Ｒｈｏキナーゼ阻害剤ＢＡ‐１０４９（Ｒ）及びその活性代謝物
US11198680B2 (en) 2016-12-21 2021-12-14 BioAxone BioSciences, Inc. Rho kinase inhibitor BA-1049 (R) and active metabolites thereof
JP7117306B2 (ja) 2016-12-21 2022-08-12 バイオアクソン バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド Ｒｈｏキナーゼ阻害剤ＢＡ‐１０４９（Ｒ）及びその活性代謝物
US11814361B2 (en) 2016-12-21 2023-11-14 BioAxone BioSciences, Inc. Rho kinase inhibitor BA-1049 (R) and active metabolites thereof
JP7461414B2 (ja) 2016-12-21 2024-04-03 バイオアクソン バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド Ｒｈｏキナーゼ阻害剤ＢＡ‐１０４９（Ｒ）及びその活性代謝物

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