JP2002544272A

JP2002544272A - 置換３−ピリジル−４−アリールピロール並びに関連した治療及び予防法

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Publication number: JP2002544272A
Application number: JP2000618264A
Authority: JP
Inventors: バリントン，ジエイムズ
Original assignee: オーソ−マクニール・フアーマシユーチカル・インコーポレーテツド
Priority date: 1999-05-14
Filing date: 2000-04-28
Publication date: 2002-12-24
Also published as: MXPA01011720A; AU4677700A; MY127675A; HK1042901A1; IL146465A0; PT1178981E; ATE243690T1; ZA200110271B; AR023986A1; EP1178981B1; AU777702B2; ES2200878T3; WO2000069847A1; DK1178981T3; CN1210273C; EP1178981A1; KR20010114267A; US6562843B1; DE60003550T2; TWI229671B

Abstract

(57)【要約】本発明は、適当な細胞中のＴＮＦ−α生産及びｐ３８活性の減少により改善される障害を処置するのに有用な、化学構造（Ｉ）をもつ新規の置換３−ピリジル−４−アリールピロール及びそれを含んで成る製薬学的組成物を提供する。本発明はまた、本製薬学的組成物を使用する治療的及び予防的方法を提供する。【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の分野】

本発明は新規の、置換３−ピリジル−４−アリールピロール並びにそれらの治
療的及び予防的使用に関する。これらの化合物を使用して処置そして／又は予防
される障害は炎症性及びＡＩＤＳ関連障害を含む。

【０００２】

【発明の背景】ＴＮＦ−α及びｐ３８関連の障害ＴＮＦ−αのような炎症性サイトカインはキナーゼの活性により生成される。
これらのキナーゼはサイトカイン抑制抗炎症性薬剤結合タンパク質（ＣＳＢＰ）
／ｐ３８キナーゼ、セリン−スレオニンタンパク質キナーゼのミトーゲン−活性
化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼ族を含む。炎症性サイトカインは数々の炎症性
障害（１）、神経退行性障害（１０）、及びＡＩＤＳ関連障害（１１〜１４）に
おいて重要な役割を果す。ｐ３８のようなキナーゼの正確な機序は未知であるが
、ｐ３８はＴＮＦ−αの生産及びＴＮＦ−α受容体と関連した信号反応の両方に
おいて示唆された（６）。

【０００３】関節炎は炎症性障害の主要な例であり、従って本節において大部分焦点を当て
られた炎症性障害である。関節炎は何億の人々が罹患しており、ヒトの身体のあ
らゆる関節を侵す可能性がある。その症状は罹患関節の軽度の痛み及び炎症から
、重篤な衰弱させる痛み及び炎症までにわたる。本障害は主として高齢の成人に
関連するが、成人に制約はされない。

【０００４】最も一般的な慢性関節リューマチの治療は、症状を軽減させるための非ステロ
イド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）の使用を伴う。しかし、ＮＳＡＩＤの広範な使用
にもかかわらず、多数の患者は長期間にわたる障害の処置に必要な投与量に耐容
できない。更に、ＮＳＡＩＤは土台となる原因に影響を与えずに障害の症状を処
置するだけである。

【０００５】患者がＮＳＡＩＤに反応しない場合に、メトトレキサート、金の塩、Ｄ−ペニ
シラミン及びプレドニソンのような他の薬剤が使用されることが多い。これらの
薬剤もまた、有意な毒性をもち、それらの作用機序はまだ未知である。ＴＮＦ−
αに対するモノクロナール抗体及びインターロイキン１β（ＩＬ−１β）に対す
る受容体拮抗剤が、小規模なヒトの臨床試験において慢性関節リューマチの症状
を軽減させることが示された（２）。

【０００６】タンパク質に基づいた治療に加えて、これらのサイトカインの生産を阻害し、
動物の慢性関節リューマチモデルにおいて活性を示した小分子の薬剤が存在する
（３）。これらの小分子薬剤のうちで、ＳＢ２０３５８０は、５０〜１００ｎＭ
のＩＣ₅₀値を伴って、リポ多糖類（ＬＰＳ）刺激ヒト単核細胞ラインにおいてＴ
ＮＦ−α及び１Ｌ−１βの生産減少に有効であることが判明した（４）。

【０００７】インビトロ試験の結果に加えて、ＳＢ２０３５８０は１５〜２５ｍｇ／ｋｇの
ＩＣ₅₀値において、ラット及びマウスの炎症性サイトカインの生産を抑制するこ
とが示された（５）。ＳＢ２０３５８０は２００ｎＭのＩＣ₅₀において、ＣＳＢ
Ｐ／ｐ３８キナーゼの活性を阻害することにより炎症性サイトカインの生産を減
少させる（６）。ＳＢ２０３５８０の経***性及び動物モデルにおける強度のた
めに、研究者は、これらの活性プロファイルをもつ化合物が慢性関節リューマチ
の有望な処置法として可能性をもつことを示唆した（５）。

【０００８】ピリジルピロール及びそれらの類似体もまた、サイトカイン阻害剤及びグルカ
ゴン拮抗剤（７）として、そして特にＩＬ−１β、ＴＮＦ−α及びその他のサイ
トカインの阻害剤として調製された。アリールピロール（８）及びトリアリール
ピロール（９）もまた、サイトカイン阻害剤として調製された。

【０００９】ＣＳＢＰ／ｐ３８の役割は最近、様々な神経退化性及びＡＩＤＳ関連障害に示
唆されてきた。神経退化障害に関しては、ｐ３８は、細胞が、ニューロンのプロ
グラムされた細胞死又はアポプトーシスを生き残るか又は受けるかを決定するの
に役割をもつことが示された（１０、１１）。

【００１０】更にＡＩＤＳに関しては、カポジ肉腫関連のヘルペスウイルスＨＨＶ８が、ｐ
３８を活性化するＧタンパク質結合受容体をコード化することが示された。この
活性化が、カポジ肉腫に導く腫瘍発生及び脈管形成に寄与することが提唱された
（１２）。

【００１１】ＡＩＤＳと関連して、ＳＩＶによるＣＣＲ５⁺ヒトＴ細胞ラインの感染により
、ｐ３８の早急な活性化が誘導されるので、ｐ３８が早期のウイルス感染に役割
をもつ可能性があることを示唆している（１３）。更にｐ３８阻害剤はＴＮＦ−
α−依存性の可能性がある方法で、インビトロで、ＨＨＶ複製を阻害することが
示された（１４）。臨床的に有効な薬剤の不在概して、関節炎−特に慢性関節リューマチ−及びその他の炎症性及びＡＩＤＳ
関連障害の宿主はすべて、罹患されたものに重篤な犠牲を強いる。これらの障害
を処置するための小分子の薬剤の莫大な必要性が存在する。しかし、今日、この
ような薬剤は確認されず、ヒトに臨床的に有効であることは証明されていない。

【００１２】

【発明の要約】

本発明は構造、

【００１３】

【化１７】

【００１４】［式中、（ａ）Ｒ₁は（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、
チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールから選択さ
れるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、（ｖ）フェニル、（vi）１種類以上のＣ_1-5 アルキル、アミノ、置換アミノ、ニトロ、ニトリル及びスルホンで独立して置換
されたフェニル、並びに(vii)ピリジン、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂は（ｉ）水素、（ii）（ＣＨ₂）₃ＯＨ、（iii）置換又は未置換Ｃ_1- ₅ アルキルフェニル、並びに（iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピ
ペラジン、チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾール
から選択されるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、から成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₃は水素、ハロゲン、メトキシ、ニトロ、トリフルオロメチル、ヒド
ロキシ、ジメチルアミノ及びメチルスルホキシドから成る群から独立して選択さ
れる１種類以上の置換基であり、そして（ｄ）ＸはＣ又はＮのいずれかである］をもつ化合物又は製薬学的に許容できるその塩を提供する。

【００１５】本発明はまた構造、

【００１６】

【化１８】

【００１７】［式中、（ａ）Ｒ₁は（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、
チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールから選択さ
れるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、（ｖ）フェニル、（vi）１種類以上のＣ_1-5 アルキル、アミノ、置換アミノ、ニトロ、ニトリル及びスルホンで独立して置換
されたフェニル、並びに(vii)ピリジン、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂は（ｉ）水素、（ii）（ＣＨ₂）₃ＯＨ、（iii）置換又は未置換Ｃ_1- ₅ アルキルフェニル、（iv）及びチアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペ
ラジン、チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールか
ら選択されるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環体、から成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₄はピリジン、ピリミヂン、フラン又はチオフェンから選択される置
換又は未置換複素環であり、そして（ｄ）ＸはＣ又はＮのいずれかである］をもつ化合物又は製薬学的に許容できるその塩を提供する。

【００１８】本発明は更に、本化合物の１種類及び製薬学的に許容できる担体を含んで成る
製薬学的組成物を提供する。

【００１９】本発明は更に、治療的に有効投与量の本製薬学的組成物を被験体に投与するこ
とを含んで成る、適当な細胞中のＴＮＦ−α生産及び／又はｐ３８活性を減少さ
せることにより改善される障害を有する被験体を処置する方法を提供する。

【００２０】最後に、本発明は被験体に炎症反応を誘起すると予期される事象の前又は後の
いずれかに、予防的に有効量の本製薬学的組成物を被験体に投与することを含ん
で成る、被験体の炎症反応を予防する方法を提供する。

【００２１】

【発明の詳細な記述】

本発明は新規の置換３−ピリジル−４−アリールピロールを提供する。これら
の化合物はＴＮＦ−α生産及び／又はｐ３８活性の減少により改善される障害の
処置に驚くべき効果をもち、従ってＡＩＤＳ関連の障害のみならず、慢性関節リ
ューマチのような炎症性障害の処置に有用である。

【００２２】特に、本発明は構造、

【００２３】

【化１９】

【００２４】［式中、（ａ）Ｒ₁は（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、
チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールから選択さ
れるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、（ｖ）フェニル、（vi）１種類以上のＣ_1-5 アルキル、アミノ、置換アミノ、ニトロ、ニトリル及びスルホンで独立して置換
されたフェニル、並びに(vii)ピリジン、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂は（ｉ）水素、（ii）（ＣＨ₂）₃ＯＨ、（iii）置換又は未置換Ｃ_1- ₅ アルキルフェニル、並びに（iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピ
ペラジン、チオモルホリン、ピロリジニ、チアジン、ピロール及びイミダゾール
から選択されるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、から成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₃は水素、ハロゲン、メトキシ、ニトロ、トリフルオロメチル、ヒド
ロキシ、ジメチルアミノ及びメチルスルホキシドから成る群から独立して選択さ
れる１種類以上の置換基であり、そして（ｄ）ＸはＣ又はＮのいずれかである］をもつ第１の化合物又は製薬学的に許容できるその塩を提供する。

【００２５】第１の化合物の一態様において、（ａ）Ｒ₁が（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）ピペリジン、モルホリン及びピロリジンから選択される
Ｎ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、並びに（ｖ）アミノ、置換アミノ、ニトロ及び
ニトリルから成る群から選択される置換基で置換されたフェニル、から成る群か
ら選択され、（ｂ）Ｒ₂が水素及び（ＣＨ₂）₃フェニルから成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₃がハロゲン、ニトロ及びトリフルオロメチルから成る群から選択さ
れ、そして（ｄ）ＸがＣである。

【００２６】好ましい態様においては、第１の化合物は表１に示す化合物の群から選択され
る。

【００２７】

【表１】

【００２８】

【表２】

【００２９】本発明はまた構造、

【００３０】

【化２０】

【００３１】［式中、（ａ）Ｒ₁は（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、
チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールから選択さ
れるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、（ｖ）フェニル、（vi）１種類以上のＣ_1-5 アルキル、アミノ、置換アミノ、ニトロ、ニトリル及びスルホンで独立して置換
されたフェニル、並びに(vii)ピリジン、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂は（ｉ）水素、（ii）（ＣＨ₂）₃ＯＨ、（iii）置換又は未置換Ｃ_1- ₅ アルキルフェニル、並びに（iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピ
ペラジン、チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾール
から選択されるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、から成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₄はピリジン、ピリミヂン、フラン又はチオフェンから選択される置
換又は未置換複素環であり、そして（ｄ）ＸはＣ又はＮのいずれかである］をもつ第２の化合物又は製薬学的に許容できるその塩を提供する。

【００３２】第２の化合物の一態様においては、（ａ）Ｒ₁が（ｉ）Ｃ_1-5アルキル、（ii）置換又は未置換Ｃ_1-5アルキルアミ
ノ、(iii）置換又は未置換Ｃ_1-5アルキル複素環アミノ、（iv）フェニル及び（
ｖ）１種類以上のアミノ、置換アミノ、ニトロ又はニトリルで独立して置換され
たフェニル、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂が水素及び（ＣＨ₂）₃フェニルから成る群から選択され、そして（ｃ）ＸがＣである。

【００３３】本化合物は遊離塩基として単離し、使用することができる。それらはまた、製
薬学的に許容できる塩として単離、使用することができる。これらの塩の例は臭
化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、塩化水素酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、マレイン酸
塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、マンデル酸
塩、メタンスルホン酸塩、ヒドロエンタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩
、蓚酸塩、パモ酸塩（palmoic acid）、２−ナフタレンスルホン酸塩、ｐ−トル
エンスルホン酸塩、シクロヘキサンスルファミド酸塩及びサッカリン酸塩を含む
。

【００３４】本発明は更に、１種類の本化合物及び製薬学的に許容できる担体を含んで成る
製薬学的組成物を提供する。

【００３５】製薬学的に許容できる担体は当業者に周知であり、それらに制約はされないが
、約０．０１〜約０．１Ｍの、そして好ましくは０．０５Ｍのリン酸バッファー
又は０．８％生理食塩水を含む。これらの製薬学的に許容できる担体は水溶液、
非水溶液、懸濁液及びエマルションにすることができる。非水溶液溶媒の例はプ
ロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、及
び、オレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルである。水性の担体は、
生理食塩水及びバッファー溶媒を含む、水、エタノール、アルコール性／水性溶
液、グリセロール、エマルション又は懸濁液を含む。経口担体はエリキシル、シ
ロップ、カプセル、錠剤等にすることができる。具体的な固体担体はラクトース
、デンプン、グルコース、メチル−セルロース、ステアリン酸マグネシウム、リ
ン酸二カルシウム、マンニトール等のような不活性物質である。非経口担体は塩
化ナトリウム溶液、リンゲル氏デキストロース、デキストロース及び塩化ナトリ
ウム、乳酸化リンゲル及び固定油（fixed oil）を含む。静脈内担体は流体及び
栄養補給剤、リンゲルのデキストロースに基づいたもののような電解質補給剤等
を含む。例えば抗微生物剤、抗酸化剤、錯体形成剤、不活性ガス等のような、保
存剤及び他の添加剤もまた含むことができる。すべての担体は当該技術分野で知
られた通常の方法を使用して、崩壊剤、希釈剤、顆粒化剤、潤滑剤、結合剤等を
、必要に応じて混合することができる。

【００３６】本発明はまた更に、治療的に有効投与量の本製薬学的組成物を被験体に投与す
ることを含んで成る、適当な細胞中のＴＮＦ−α生産及び／又はｐ３８活性を減
少させることにより改善される障害をもつ被験体を処置する方法を提供する。

【００３７】一態様においては、当該障害は炎症性障害である。もう一つの態様においては
、当該障害はＡＩＤＳ関連障害である。本製薬学的組成物により処置可能な障害
の例は、制限なく、慢性関節リューマチ、骨粗しょう症、変形性関節症、アレル
ギー性炎症、歯周障害、炎症性腸疾患、敗血症ショック、インスリン依存型糖尿
病、非インスリン依存型糖尿病、悪液質、肺繊維症、重症筋無力症、クローン氏
病、肝炎、原発性胆管硬変、急性膵炎、同種移植拒絶症、グリア芽細胞腫、円形
脱毛症、乾癬、虚血、うっ血性心不全、再発狭心症、アテローム性動脈硬化症、
全身性エリテマドーデス、腎炎、ギラン−バール症候群、ウイルス心筋炎、ＨＩ
Ｖ反復、ＨＩＶ感染によるＴ−細胞枯渇、ニューロン炎症誘導の認識欠如、多発
性硬化症、心臓発作、ニューロパシー痛、ＨＩＶ痴呆及びアルツハイマー氏病、
を含む。好ましい態様においては障害は慢性関節リューマチである。

【００３８】「被験体」の用語は、本明細書で使用される場合は、制限なく、適当な細胞中
のＴＮＦ−α生産及び／又はｐ３８活性を減少させることにより改善される障害
をもつあらゆる動物又は人工的に修飾された動物を含む。好ましい態様において
は、被験体はヒトである。

【００３９】［適当な細胞］の用語は本明細書で使用される場合は、例えば、ＴＮＦ−αを
分泌する又は分泌することができる細胞、及びｐ３８が活性化された細胞を含む
。適当な細胞の具体的な例は、制限なく、単核細胞、マクロファージ、Ｔリンパ
球、繊維芽球、樹状突起細胞、ランゲルハンス細胞、クプファー細胞及び大グリ
ア細胞を含む。

【００４０】本製薬学的組成物を投与することは、当業者に知られた様々な方法のいずれか
を使用して利用又は実施することができる。本化合物は例えば、静脈内、筋肉内
、経口及び皮下投与することができる。好ましい態様においては、本製薬学的組
成物は経口投与される。更に、投与は、適当な期間にわたり複数の投与を被検体
に与えることを含んで成る可能性がある。これらの投与計画は、通常の方法に従
って決定することができる。

【００４１】製薬学的組成物の「治療的に有効量」は、本明細書で使用される場合は、障害
の進展を停止、逆転又は減少させるのに十分な量である。製薬学的組成物の「予
防的に有効量」は障害を予防、すなわち、障害の開始を回避、改善そして／又は
遅らせるのに十分な量である。本製薬学的組成物に対する治療的及び予防的有効
量を決定する方法は当該技術分野で知られている。例えばヒトに対する製薬学的
組成物の投与の有効量は動物研究の結果から数学的に決定することができる。

【００４２】一態様においては、治療的及び／又は予防的有効量は本製薬学的組成物を、体
重当たり約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇを配達するのに十分な量であ
る。もう一つの態様においては、治療的又は予防的有効量は約０．５ｍｇ／ｋｇ
〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重を配達するのに十分な量である。より具体的には、一態
様においては、経口投与量は１日約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇで
ある。もう一つの態様においては、経口投与量は１日、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜
約５０ｍｇ／ｋｇであり、そして更なる態様においては１日約０．０５ｍｇ／ｋ
ｇ〜２０ｍｇ／ｋｇである。更にもう一つの態様においては、注入量は、約数分
〜約数日の範囲の期間にわたり、製薬学的担体と混合された阻害剤を約１．０μ
ｇ／ｋｇ／１分〜約１．０×１０⁴μｇ／ｋｇ／１分の範囲にある。局所投与に
対する更なる態様においては、本化合物は約０．００１〜約０．１の薬剤／担体
比率で製薬学的担体と組み合わせることができる。

【００４３】本発明はまだ更に、被験体に炎症反応を誘起すると予期される事象の前又は後
のいずれかに、予防的に有効量の本製薬学的組成物を被験体に投与することを含
んでなる、被験体の炎症反応を予防する方法を提供する。好ましい態様において
はその事象は虫刺され又は動物にかまれることである。

【００４４】以下の化学用語は本明細書で使用される場合は、本節に示される意味をもたね
ばならない、すなわち、「独立して」は化学置換基に関して使用される場合は、
１個以上の置換基が存在する場合に、置換基は同一でも異なってもよい、「アル
キル」は直鎖、環式及び分枝アルキルを意味し、「アルコキシ」はＯ−アルキル
を意味し、「ハロゲン」はフッ素、塩素、臭素又はヨウ素を意味し、「Ｐｈ」は
フェニルを意味し、「ＴＣＡ」はトリクロロ酢酸を意味し、「ＦＣＳ」はコウシ
胎児血清を意味し、そして「ＲＰＭＩ」はRoswell Park Memorial Instituteか
らの培地（Sigmacat#R0833）を意味する。

【００４５】本発明は以下の実験の詳細を参照することにより、より良く理解されるであろ
うが、当業者はこれらが、以後に続く特許請求の範囲により完全に説明されるよ
うな本発明を具体的に示すのみであることを容易に理解するであろう。更に、こ
の出願書全体に様々な刊行物が引用されている。これらの刊行物の開示物は本発
明が関与する当該技術分野の状態をより完全に説明するために本出願明細書中に
引用により取り込まれている。

【００４６】実験の詳細１．概括的合成スキーム本発明の代表的化合物は、下記に説明され、以下の概括的スキームに示された
概括的合成法に従って合成することができる。幾つかのスキームの生成物は１個
以上の本化合物を生成するための中間体として使用することができる。これらの
場合に、本発明のその後の化合物を生成するために使用することができる中間体
の選択は、当業者の能力内に十分に入る判断事項である。

【００４７】

【化２１】

【００４８】スキーム１はＲ₁がメチルの本発明の化合物を生成するために使用することが
できる。１，２−二置換アルキンのような化合物１ａは、スキーム１の出発材料
として使用することができる。１，２−二置換アルキンは既知の手順に従い調製
することができる。本発明の化合物の置換基Ｘ及びＲ₃は化合物１ａの置換基に
より決定される。化合物１ａをトリメチルアミン−Ｎ−オキシドと組み合わせて
、ＴＨＦのような無水溶媒中に溶解し、０℃に冷却する。リチウム・ジイソプロ
ピルアミドのような塩基を添加し、反応物を０℃で１時間撹拌すると化合物１ｂ
を生成物として与える。

【００４９】

【化２２】

【００５０】スキーム２はＲ₁が水素の本発明の化合物を調製するために使用することがで
きる。１−［（１−イソシアノ−２−（３−メトキシ−フェニル）エテニル）ス
ルホニル］−４−メチルベンゼンのタイプの化合物２ａをスキーム２の出発材料
として使用することができる。化合物２ａは既知の手順に従い調製することがで
きる。本発明の化合物の置換基Ｒ₃は概括的に化合物２ａのエチニル基のフェニ
ル上の置換基により決定され、Ｘ原子は化合物２ｂの酢酸基のヘテロ芳香族置換
基により決定される。化合物２ａをエチレングリコールジメチルエーテルのよう
な無水溶媒に溶解し、０℃で、エチレングリコールジメチルエーテルのような無
水溶媒中で、４−ピリジル酢酸エチルのような化合物２ｂ及び、カリウムｔ−ブ
トキシドのような塩基の混合物に滴下する。添加完了後、反応物を２５℃に暖め
、３時間撹拌すると、中間体の化合物２ｃを与える。Ｒ₃がメトキシである時に
は、中間体化合物２ｃを−７８℃でＣＨ₂Ｃｌ₂のような不活性溶媒中でＢＢｒ₃
のような脱メチル化剤で処理して、化合物２ｄを与えることができる。

【００５１】

【化２３】

【００５２】スキーム３はＲ₁が水素であり、Ｒ₂が置換又は未置換の、本発明の化合物を生
成するために使用することができる。ジアリール置換α，β−未置換エステルの
化合物３ａをスキーム３の出発材料として使用することができる。このタイプの
化合物は既知の手順に従い調製することができる。化合物３ｂは他の出発材料、
既知の手順に従い調製することができる置換トシルメチルイソシアニド（ｔｏｓ
ＭＩＣ）誘導体にすることができる。

【００５３】例えば化合物３ａは４−フルオロ−α−［（４−ピリジル）メチレン］ベンゼ
ン酢酸エチルで、化合物３ｂは１−（４−トリルスルホニル）−１−（３−フェ
ニルプロピル）メチルイソアニドにすることができる。化合物３ａ及び化合物３
ｂをエチレングリコールジメチルエーテルのような無水溶媒に溶解し、エチレン
グリコールジメチルエーテルのような無水溶媒中のカリウムｔ−ブトキシドのよ
うな塩基の−４０℃混合物に滴下する。−４０℃における撹拌を１時間継続し、
次いで温度を−２０℃まで放置上昇させる。従って、生成する化合物３ｃは４−
（４−フルオロフェニル）−２−（３−フェニルプロピル）−３−（４−ピリジ
ル）ピロール（化合物２７）である。

【００５４】スキーム４に示すように、化合物２ｃ及び化合物３ｃは本発明の他の化合物を
形成するための中間体として使用することができる。

【００５５】

【化２４】

【００５６】スキーム４はＲ₁が置換されている本発明の化合物を生成するために使用する
ことができる。中間体化合物２ｃ又は化合物３ｃを０℃でジメチルホルムアミド
のような溶媒中で水素化ナトリウムのような塩基に滴下する。添加完了後、反応
物を更に１５分間０℃で撹拌し、次いで４−（２−クロロエチル）モルホリン塩
酸のようなアルキル化剤を分割して添加する。反応物を１６時間６０℃に加熱し
、次いで温度を２５℃に放置冷却すると化合物４ａを生成する。

【００５７】

【化２５】

【００５８】スキーム５はＲ₁が置換されている本発明の化合物を生成するために使用する
ことができる。Ｒ₁が４−ニトロフェニルである場合は、中間体化合物４ａは酢
酸エチルのような溶媒中で炭素上パラジウムのような触媒を使用して還元して、
化合物５ａを与えることができる。アミン化合物５ａを水のような溶媒中で、無
水酢酸のようなアシル化剤で処理すると、生成化合物５ｂを与えることができる
。

【００５９】

【化２６】

【００６０】スキーム６はＲ₂がヘテロ原子を含むアルキル鎖である、本発明の化合物を生
成するために使用することができる。中間体の化合物３ｃをエタノールのような
溶媒中で炭素上パラジウムのような触媒を使用する還元条件にさらし、それに濃
塩酸のような触媒量の酸を添加すると化合物６ａを与える。アルコール化合物６
ａをＣＨ₂Ｃｌ₂のような溶媒中で、塩化メシルのようなスルホン化剤及びトリエ
チルアミンのような塩基で処理すると中間体化合物６ｂを与えることができる。
次いで、化合物６ｂをＣＨ₂Ｃｌ₂のような溶媒中でモルホリンのような求核試薬
とともに加熱すると、化合物６ｃを与えることができる。 II．具体的な化合物の合成法本発明の代表である具体的な化合物は以下の実施例によるように調製すること
ができる。これらの反応で得た収量を最適化することは試みなかった。しかし、
当業者は、以下の例に基づいて、反応時間、温度、溶媒及び／又は試薬の通常の
変更により収率をいかに増加するかを知るであろう。

【００６１】ある合成法の生成物は１種類以上の本発明の化合物を生成するための中間体と
して使用することができる。これらの場合に、本発明の化合物を生成するために
使用される中間体の選択は当業者の能力内に十分に入る判断事項である。

【００６２】

【化２７】

【００６３】３−（３−ヒドロキシフェニル（−４−（４−ピリジル）ピロール臭化水素化合物１３（０．１５ｇ，０．００６モル）をＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍＬ）に溶解
し、−７８℃に冷却した。混合物を１６時間撹拌し、放置して温度を２５℃まで
暖めた。反応物をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で急冷し、固体になるまで蒸発させた。
固体をエーテルで摩砕し、濾過すると、化合物１２（０．１５ｇ，７９％収率）
を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．９１（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），９
．４７（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），８．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６），７．８
６−７．８６（３Ｈ，ｍ），７．２５−７．１４（１Ｈ，ｍ），７．０６（１Ｈ
，ｓ）、６．８０−６．６６（３Ｈ，ｍ）．

【００６４】

【化２８】

【００６５】３−（３−メトキシフェニル）−４−（４−ピリジル）ピロール１−［（１−イソシアノ−２−（３−メトキシフェニル）エテニル）スルホニ
ル］−４−メチルベンゼン（９．０ｇ，０．０２８５モル）を無水ＤＭＥ（２０
０ｍＬ）に溶解し、無水ＤＭＥ（１００ｍＬ）中の４−ピリジル酢酸エチル（９
．０ｇ，０．５４５モル）及びカリウムｔ−ブトキシド（７．１ｇ，０．０６３
３モル）の冷却（０℃）混合物に滴下した。添加完了後、反応物を２５℃に暖め
、３時間撹拌した。次いで反応物を氷水（１２００ｍＬ）中に注入し、ＣＨ₂Ｃ
ｌ₂（３×５００ｍＬ）中に抽出した。合わせた有機物をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し
、濾過し、真空蒸発すると固体を与えた。次いで、この固体をエーテルで摩砕し
、濾過すると、純粋の３−（３−メトキシフェニル）−４−（４−ピリジル）ピ
ロール３．０ｇを与えた。濾液を再度真空蒸発し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂及びエーテ
ルの５０／５０混合物で摩砕すると純粋生成物を更に１．５ｇを与えた。最後に
、濾液を真空蒸発させ、ＳｉＯ₂（酢酸エチルで溶離）上で精製すると、更に純
粋生成物０．５ｇを与え、合わせた収率７０％を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ
−ｄ６）δ１１．３８（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），８．３７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６
．１），７．２４−７．１７（４Ｈ，ｍ），７．０２−７．００（１Ｈ，ｍ），
６．８０−６．７７（３Ｈ，ｍ），３．６８（３Ｈ，ｓ）．

【００６６】

【化２９】

【００６７】４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−フェニルプロピル）−３−（４−ピリジル）ピロール１−（４−トリルスルホニル）−１−（３−フェニルプロピル）メチルイソシ
アニド（１０．９ｇ，０．０３４６モル）及び４−フルオロ−α−［（４−ピリ
ジル）メチレン］ベンゼン酢酸エチル（９．４ｇ，０．０３４６モル）を無水Ｄ
ＭＥ（２５０ｍＬ）に溶解し、無水ＤＭＥ（５０ｍＬ）中のカリウムｔ−ブトキ
シド（９．５ｇ、０．０８４７モル）の冷却（−４０℃）混合物に滴下した。混
合物を−２０℃まで温度に放置して暖めながら１時間撹拌した。混合物をＨ₂Ｏ
（１８００ｍＬ）中に注入し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（３×５００ｍＬ）中に抽出した。合
わせた有機物をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、真空蒸発させると固体を与えた。固体の
アセトニトリルとの摩砕により純粋な化合物２７（６．０ｇ，４９％収率）を与
えた。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．１７（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），８．３
８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），７．２７−６．９２（１２Ｈ，ｍ），２．６
１−２．５１（４Ｈ，ｍ），１．９３−１．８３（２Ｈ，ｍ）．

【００６８】

【化３０】

【００６９】１−メチル−３−（４−フルオロフェニル）−４−（４−ピリジル）ピロール４−［（４−フルオロフェニル）エチニル］ピリジン（２．０ｇ，０．０１０
１モル）及びトリメチルアミン−Ｎ−オキシド（１．０ｇ，０．０１３３モル）
を無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。リチウム・ジイソプロ
ピルアミド（ＴＨＦ中１．５Ｍ、１４ｍＬ）を添加し、反応物を１時間０℃で撹
拌した。次いで反応物をＨ₂Ｏ（２０ｍＬ）で急冷し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２×１００
ｍＬ）中に抽出した。有機物をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、真空蒸発すると油を与え
た。ＳｉＯ₂（ＥｔＡｃで溶離）により精製すると、０．３５６ｇ（１４％収率
）の化合物２８を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ８．４１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝
５．４Ｈｚ），７．１９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．７，６．０Ｈｚ），７．１１（
２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）、６．９９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．７，８．５Ｈｚ
），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ），６．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４
Ｈｚ），３．７１（３Ｈ，ｓ）．

【００７０】

【化３１】

【００７１】４−（４−フルオロフェニル）−１−（４−ニトロフェニル）−２−（３−フェニルプロピル）−３−（４−ピリジル）ピロール水素化ナトリウム（鉱油中６０％，０．８０ｇ，０．０２０９モル）をヘキサ
ンで３回洗浄し、次いでＤＭＦ（１５ｍＬ）中に溶解した。次いで、化合物２７
（６．０ｇ，０．０１６８３モル）を０℃で撹拌しながら分割して添加した。添
加完了後、反応物を更に１５分間０℃で撹拌し、次いで４−フルオロニトロベン
ゼン（２．４ｇ，０．１７０モル）を滴下した。反応物を１時間０℃で撹拌し、
次いで放置して温度を２５℃に暖めた。反応物を水１．５ｌ中に注入し、ＣＨ₂
Ｃｌ₂（３×５００ｍＬ）中に抽出した。合わせた有機物を水（４×５００ｍＬ
）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。真空乾燥すると、黄色の固体を与え、そ
れをアセトニトリルで摩砕し、濾過し、空気乾燥すると６．６ｇ（８２．５％収
率）の純粋な化合物３０を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ８．５２（２Ｈ，
ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），８．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），７．４６（２
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），７．１６−７．１３（３Ｈ，ｍ），７．０９−７．
０３（４Ｈ，ｍ），６．９５−６．８２（５Ｈ，ｍ），２．７３−２．６７（２
Ｈ，ｍ），２．３５−２．３２（２Ｈ，ｍ），１．５３−１．４３（２Ｈ，ｍ）
．

【００７２】

【化３２】

【００７３】１−（４−アセトアミノフェニル）−４−（４−フルオロフェニル）−２−（３ −フェニルプロピル）−３−（４−ピリジル）ピロール化合物３２（０．８５ｇ，０．００１９モル）を無水酢酸（２０ｍＬ）及びＨ ₂ Ｏ（５０ｍＬ）中に１６時間撹拌した。溶液を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に
抽出し、Ｈ₂Ｏ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、次いで飽和重炭酸ナトリウム（３×
５０ｍＬ）で洗浄し、次いでＨ₂Ｏ（２×５０ｍＬ）で再度洗浄した。有機物を
Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、真空蒸発すると、油として単離された化合物３１（０．
８９ｇ，９６％収率）を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ８．４１（２Ｈ，ｄ
，Ｊ＝５．６Ｈｚ），８．０５（１Ｈ，ｓ），７．７３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６
Ｈｚ），７．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），７．１７−７．０４（７Ｈ，
ｍ），６．９１−６．８５（４Ｈ，ｍ），６．７９（１Ｈ，ｓ），２．６６−２
．６１（２Ｈ，ｍ），２．３５−２．３０（２Ｈ，ｍ），２．２２（３Ｈ，ｓ）
，１．５６−１．５１（２Ｈ，ｍ）．

【００７４】

【化３３】

【００７５】１−（４−アミノフェニル）−４−（４−フルロフェニル）−２−（３−フェニルプロピル）−３−（４−ピリジル）ピロール化合物３０（６．６ｇ，０．０１３８モル）をエタノール（２００ｍＬ）及び
酢酸エチル（５０ｍＬ）中に懸濁させ、５０ＰＳＩでパール水素添加装置上で１
６時間還元状態にさらした。混合物をセライトを通して濾過し、真空蒸発すると
油を与えた。この油をアセトニトリルで摩砕し生成した固体を濾過すると化合物
３２の３．２ｇを与えた。濾液を真空蒸発し、ＳｉＯ₂（ヘキサン中５０％酢酸
エチルで溶離）上で精製すると、追加の生成物１．７５ｇ（合わせた収率７９％
）を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ８．４４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）
，７．２２−６．７１（１６Ｈ，ｍ），３．８５（２Ｈ，ｓ），２．６３−２．
５７（２Ｈ，ｍ），２．３８−２．３３（２Ｈ，ｍ），１．６１−１．４９（２
Ｈ，ｍ）．

【００７６】

【化３４】

【００７７】４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−ヒドロキシプロピル）−３−（４− ピリジル）ピロール濃ＨＣｌ（０．２ｍＬ）を含むエタノール（１２５ｍＬ）中２−（３−ベンジ
ルオキシプロピル）−４−（４−フルオロフェニル）−３−（４−ピリジル）ピ
ロール（０．９５ｇ，０．００２５モル）の溶液を炭素上Ｐｄ（０．２ｇ）に添
加した。この混合物を５０ＰＳＩのパール水素添加装置上で１６時間水素雰囲気
中に置いた。混合物をセライトを通して濾過し、トリエチルアミン（０．５ｍＬ
）を生成溶液に添加し、次いで真空蒸発すると固体を与えた。固体を酢酸エチル
（１００ｍＬ）中に抽出し、水（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機物をＮａ₂Ｓ
Ｏ₄上で乾燥し、真空蒸発させると淡黄色の固体（０．７ｇ，９６％収率）を与
えた。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．１０（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），８．４
４（２Ｈ，ｄ），７．０５（６Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｄ），４．５３（１
Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），３．４９（２Ｈ，ｂｒｓ），２．６４（２Ｈ，ｔ），
１．７２（２Ｈ，ｍ）．

【００７８】

【化３５】

【００７９】４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−モルホリノプロピル）−３−（４− ピリジル）ピロール４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−メシルオキシプロピル）−３−（
４−ピリジル）ピロール（０．２５ｇ，０．０００７モル）をＣＨ₂Ｃｌ₂（５０
ｍＬ）及びモルホリン（０．２５ｍＬ）中で１６時間還流した。溶液を冷却し、
ＣＨ₂Ｃｌ₂（〜１００ｍＬ）で希釈し、次いでＨ₂Ｏ（３×５０ｍＬ）で洗浄し
た。有機物をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、真空蒸発すると油を与えた。この油をＳｉ
Ｏ₂上（ＣＨ₂Ｃｌ₂中１０％ＭｅＯＨで溶離）で精製すると、固体（０．０８８
ｇ，３６％収率）として単離された４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−
モルホリノプロピル）−３−（４−ピリジル）ピ７ロールを与えた。¹ＨＮＭＲ
（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．１２（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），８．４２（２Ｈ，ｄ），
７．０５（６Ｈ，ｍ），６．９５（１Ｈ，ｄ），３．５５（４Ｈ，ｔ），２．６
２（２Ｈ，ｔ），２．２９（６Ｈ，ｍ），１．７１（２Ｈ，ｍ）．

【００８０】

【化３６】

【００８１】４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−メシルオキシロピル）−３−（４− ピリジル）ピロール４−（４−フルオロフェニル）−２−（３−ヒドロキシプロピル）−３−（４
−ピリジル）ピロール（０．５５ｇ，０．００１９モル）をＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍ
Ｌ）中のトリエチルアミン（０．５２ｍＬ，０．００３７モル）と合わせ、１０
℃に冷却した。メタンスルホニルクロリド（０．１６ｍＬ，０．００２０モル）
を滴下し、生成された混合物を放置して室温に暖めた。この混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂ （５０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機物をＮａ₂ＳＯ₄上で乾
燥し、真空蒸発すると油を与えた。この油をＥｔＯＡｃに溶解し、ＳｉＯ₂（〜
２０ｍＬ）の床（ＥｔＯＡｃで溶離）を通して精製した。溶媒を真空蒸発すると
、黄色の固体（０．６３ｇ，９１％収率）を与えた。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ
６）δ１１．２５（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），８．４５（２Ｈ，ｄ），７．０９（６Ｈ
，ｍ），６．９４（１Ｈ，ｄ），４．１９（２Ｈ，ｔ），３．１７（３Ｈ，ｓ）
，２．７１（２Ｈ，ｔ），１．９８（２Ｈ，ｍ）． III．生物学的アッセイ及び活性Ａ．ｐ３８阻害インビトロの酵素のアッセイ精製組み代え体ｐ３８（Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現した６×Ｈｉｓ−ｐ３８）、ミ
エリンを基礎にしたタンパク質基質（経験的に決定）及びｐＨ７．５のバッファ
ー（Ｈｅｐｅｓ，２５ｍＭ、ＭｇＣｌ₂，１０ｍＭ、ＭｎＣｌ₂，１０ｍＭ）の溶
液（３８μＬ）を９６ウェル丸底ポリプロピレン皿の９２個のウェルに添加した
。酵素量はアッセイの直線領域及びノイズ比率に対する許容信号に基づいて経験
的に決定された。残りのウェルはコントロール（「ＣＴＲＬ」）及び背景（「Ｂ
ＫＧ」）に使用した。ＣＴＲＬは酵素、基質バッファー及び２％ＤＭＳＯで調製
し、ＢＫＧは基質バッファー及び２％ＤＭＳＯで調製した。

【００８２】ＤＭＳＯ中の試験化合物の溶液（１２μＬ）を試験ウェルに添加した。化合物
を１０％ＤＭＳＯ／Ｈ₂Ｏ中の１２５μＭに希釈し、最終ＤＭＳＯ濃度が２％で
ある２５μＭでアッセイした。ＡＴＰ／³³Ｐ−ＡＴＰ溶液（５０μＭの未標識Ａ
ＴＰ及び１μＣｉ³³Ｐ−ＡＴＰを含有する１０μＬ）をすべてのウェルに添加し
、完了した皿を混合し、３０分間３０℃に保温した。氷冷した５０％ＴＣＡ／１
０ｍＭリン酸ナトリウム（６０μＬ）を各ウェルに添加し、皿を１５分間氷上に
維持した。各ウェルの内容物を９６−ウェル濾過皿（Millipore, MultiScreen-D
P）のウェルに移し、濾過皿を廃棄回収トレーにはめられた真空マニホールド上
においた。ウェルを１０％ＴＣＡ／１０ｍＭリン酸ナトリウム（２００μＬ）で
５回真空下で洗浄した。MicroScint-20のシンチレーション剤（scintillant）を
添加し、皿をTopseal-Sシートを使用してシールし、色彩急冷により修正された
ｃｐｍで出力される、色彩急冷修正物を伴う³³Ｐ液体プログラムを使用してPack
ard TopCountシンチレーション計測器で計測した。表２に示した各試験化合物の
抑制％を次の式により計算した、抑制％＝［１−（試料−ＢＫＧ）／（ＣＴＲＬ−ＢＫＧ）］×１００。

【００８３】

【化３７】

【００８４】

【表３】

【００８５】化合物は最初に２０μＭで試験されたが、保証された後は、化合物はまたその
濃度の上及び下の４倍量で試験した。更に、ＩＣ₅₀をDeltagraphの４−パラメー
ター曲線−挿入プログラムを使用して幾つかの化合物につき計算した。Ｂ．ＴＮＦ−α抑制に対するインビトロの全細胞アッセイ新鮮に獲得された静脈血をヘパリンで凝固抑制し、等量のリン酸バッファー生
理食塩水（「ＰＢＳ」）で希釈し、滅菌管又はその他の容器に入れた。この混合
物のアリコート（３０ｍＬ）をFicoll-Hypaque（１５ｍＬ）を下に入れた遠心分
離管に移した。準備した管を室温で３０分間破損せずに、４００×ｇで遠心分離
した。単核細胞帯より上の血小板層のほぼ１／２〜２／３をピペットで取り出し
た。大部分の単核細胞層をピペットを使用して注意して取り出し、これらのＰＢ
ＭＣをＰＢＳで希釈し、１５分間６００×ｇで回転させた。生成されたＰＢＭＣ
を他のＰＢＳ部分で洗浄し、室温で、１０分間４００×ｇで回転させた。回収し
たペレットを低エンドトキシンＲＰＭＩ／１％ＦＣＳ培養培地に希釈し、０．５
〜２．０×１０⁶ＰＭＢＣ／ｍＬの細胞濃度を与えた。少量の懸濁液を血球計数
器上で計数するために取り出し、残りの調製物を室温で１５分間２００×ｇで遠
心分離した。回収したペレットのＰＭＢＣを１．６７×１０⁶／ｍＬの濃度まで
ＲＰＭＩ／１％ＦＣＳ中に再懸濁させた。

【００８６】アッセイを実施するためにＰＢＭＣ懸濁液（１８０μＬ）を９６−ウェルの平
底微小滴定皿の二重ウェルに移し、３７℃で１時間保温した。試験化合物の溶液
（１０μＬ，２０×所望の最終濃度で調製）を各ウェルに添加し、皿を３７℃で
１時間保温した。ＲＰＭＩ／１％ＦＣＳ（２００ｎｇ／ｍＬ）中ＬＰＳの溶液（
１０μＬ）を添加し、ウェルを３７℃で一晩保温した。各ウェルから上澄み液（
supermate）（１００μＬ）を取り出し、ＲＰＭＩ／１％ＦＣＳ（４００μＬ）
で希釈した。試料を市販のＥＬＩＳＡキット（Genzyme）を使用してＴＮＦ−α
につき分析した。

【００８７】本発明のより抜きの化合物を表３に挙げる。化合物はＴＮＦ−α生産を抑制す
るそれらの性能を試験された。記載された化合物のＩＣ₅₀ｎＭの結果を挙げてい
る。

【００８８】

【化３８】

【００８９】

【表４】

【００９０】

【表５】

【００９１】Ｃ．ＴＮＦ−α生産の抑制に対するインビボの喫歯類のアッセイ以下のインビボの喫歯類のアッセイにおいて、ＬＰＳ誘導のＴＮＦ−α生産を
抑制する本化合物の性能を示した。マウス（ＢＡＬＢ／ｃＪ雌、Jackson Labora
tories）又はラット（ルイス雄、Charles River）を５〜５０ｍｇ／ｋｇの試験
化合物を５〜１０ｍＬ／ｋｇの経口投与の前３０分間絶食させた。投与後３０分
後に、動物に１ｍｇ／ｋｇでＬＰＳを腹腔内注射し、１時間ケージに帰した。Ｃ
Ｏ₂で動物を麻酔して、心臓穿刺により安楽死させ、全血を回収した（０．１〜
０．７ｍＬ）。血液を凝固させ、血清を遠心分離管に移した。この試料を遠心分
離し、血清を回収し、アリコートし、−８０℃で凍結させた。試料をＴＮＦ−α
につき市販のＥＬＩＳＡにより試験した（マウスのＴＮＦ−αに対してEndogen
及びラットのＴＮＦ−αに対してBisource）。本発明のより抜きの化合物に対す
るインビボの試験結果を表４に挙げている。化合物はマウスにおけるＴＮＦ−α
生産抑制能を試験し、データは２５ｍｇ／ｋｇにおける抑制％としてリストにし
ている。

【００９２】

【化３９】

【００９３】

【表６】

【００９４】本発明のより抜きの化合物のインビボ試験の結果を表５に挙げている。化合物
はマウスにけるＴＮＦ−α生産を抑制するそれらの性能を試験し、１０ｍｇ／ｋ
ｇの％抑制としてのデータをリストにした。

【００９５】

【化４０】

【００９６】

【表７】

【００９７】引用文献 1. C.Dinarello,et al.,Inflammatory Cytokines:Interleukin-1 and Tumor Nec
rosis Factor as Effector Molecules in Autoimmune Diseases, Curr.Opin.Imm unol .1991,3,941-48. 2. M.J.Elliot,et al.,Treatment of Rheumatoid Arthritis with Chimeric Mon
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1681-90. 3. J.C.Boehm, et al.,1-Substituted 4-Aryl-5-piridinylimidazoles:A New Cl
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───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 1/00 Ａ６１Ｐ 1/00 1/02 1/02 1/16 1/16 1/18 1/18 3/10 3/10 7/00 7/00 9/04 9/04 9/10 9/10 １０１１０１ 11/00 11/00 13/12 13/12 17/00 17/00 17/06 17/06 17/14 17/14 19/02 19/02 19/10 19/10 21/04 21/04 25/00 25/00 25/28 25/28 29/00 29/00 １０１１０１ 31/18 31/18 35/00 35/00 37/02 37/02 37/08 37/08 43/00 １１１ 43/00 １１１Ｃ０７Ｄ 401/14 Ｃ０７Ｄ 401/14 403/04 403/04 409/14 409/14 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4C063 AA01 AA03 BB01 BB03 CC12 DD04 EE01 4C086 AA01 AA02 AA03 BC17 BC21 BC73 GA07 GA08 GA09 GA12 MA01 MA04 NA14 ZA01 ZA15 ZA16 ZA37 ZA40 ZA45 ZA51 ZA59 ZA66 ZA67 ZA75 ZA81 ZA89 ZA92 ZA94 ZA96 ZA97 ZB07 ZB11 ZB13 ZB15 ZB26 ZB33 ZC35 ZC55

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】構造、【化１】［式中、（ａ）Ｒ₁は（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、
チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールから選択さ
れるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、（ｖ）フェニル、（vi）１種類以上のＣ_1-5 アルキル、アミノ、置換アミノ、ニトロ、ニトリル及びスルホンで独立して置換
されたフェニル、並びに(vii)ピリジン、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂は（ｉ）水素、（ii）（ＣＨ₂）₃ＯＨ、（iii）置換又は未置換Ｃ_1- ₅ アルキルフェニル、並びに（iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピ
ペラジン、チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾール
から選択されるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、から成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₃は水素、ハロゲン、メトキシ、ニトロ、トリフルオロメチル、ヒド
ロキシ、ジメチルアミノ及びメチルスルホキシドから成る群から独立して選択さ
れる１種類以上の置換基であり、そして（ｄ）ＸはＣ又はＮのいずれかである］をもつ化合物又は製薬学的に許容できるその塩。
【請求項２】式中、（ａ）Ｒ₁が（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）ピペリジン、モルホリン及びピロリジンから選択される
Ｎ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、並びに（ｖ）アミノ、置換アミノ、ニトロ及び
ニトリルから成る群から選択される置換基で置換されたフェニル、から成る群か
ら選択され、（ｂ）Ｒ₂が水素及び（ＣＨ₂）₃フェニルから成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₃がハロゲン、ニトロ及びトリフルオロメチルから成る群から選択さ
れ、そして（ｄ）ＸがＣである、請求項１の化合物。
【請求項３】構造、【化２】をもつ請求項１の化合物。
【請求項４】構造、【化３】をもつ請求項１の化合物。
【請求項５】構造、【化４】をもつ請求項１の化合物。
【請求項６】構造、【化５】をもつ請求項１の化合物。
【請求項７】構造、【化６】をもつ、請求項１の化合物。
【請求項８】構造、【化７】をもつ請求項１の化合物。
【請求項９】構造、【化８】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１０】構造、【化９】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１１】構造、【化１０】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１２】構造、【化１１】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１３】構造、【化１２】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１４】構造、【化１３】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１５】構造、【化１４】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１６】構造、【化１５】をもつ請求項１の化合物。
【請求項１７】構造、【化１６】［式中、（ａ）Ｒ₁は（ｉ）水素、（ii）Ｃ_1-5アルキル、（iii）置換又は未置換Ｃ_1-5 アルキルアミノ、(iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、
チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾールから選択さ
れるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、（ｖ）フェニル、（vi）１種類以上のＣ_1-5 アルキル、アミノ、置換アミノ、ニトロ、ニトリル及びスルホンで独立して置換
されたフェニル、並びに(vii)ピリジン、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂は（ｉ）水素、（ii）（ＣＨ₂）₃ＯＨ、（iii）置換又は未置換Ｃ_1- ₅ アルキルフェニル、並びに（iv）チアゾリジン、ピペリジン、モルホリン、ピ
ペラジン、チオモルホリン、ピロリジン、チアジン、ピロール及びイミダゾール
から選択されるＮ−含有Ｃ_1-5アルキル複素環、から成る群から選択され、（ｃ）Ｒ₄はピリジン、ピリミヂン、フラン又はチオフェンから選択される置
換又は未置換複素環であり、そして（ｄ）ＸはＣ又はＮのいずれかである］をもつ化合物又は製薬学的に許容できるその塩。
【請求項１８】式中、（ａ）Ｒ₁が（ｉ）Ｃ_1-5アルキル、（ii）置換又は未置換Ｃ_1-5アルキルアミ
ノ、(iii）置換又は未置換Ｃ_1-5アルキル複素環式アミノ、（iv）フェニル及び
（ｖ）１種類以上のアミノ、置換アミノ、ニトロ又はニトリルで独立して置換さ
れたフェニル、から成る群から選択され、（ｂ）Ｒ₂が水素及び（ＣＨ₂）₃フェニルから成る群から選択され、そして（ｃ）ＸがＣである、］請求項１７の化合物。
【請求項１９】請求項１又は請求項１７の化合物及び製薬学的に許容でき
る担体を含んで成る製薬学的組成物。
【請求項２０】治療的に有効投与量の請求項１９の製薬学的組成物を被験
体に投与することを含んで成る、適当な細胞中のＴＮＦ−α生産及び／又はｐ３
８活性を減少させることにより改善される障害をもつ被験体を処置する方法。
【請求項２１】障害が炎症性障害である請求項２０の方法。
【請求項２２】障害が慢性関節リューマチ、骨粗しょう症、変形性関節症
、アレルギー性炎症、歯周障害、炎症性腸疾患、敗血性ショック、インスリン依
存型糖尿病、非インスリン依存型糖尿病、悪液質、肺繊維症、重症筋無力症、ク
ローン氏病、肝炎、原発性胆管硬変、急性膵炎、同種移植拒絶症、グリア芽細胞
腫、円形脱毛症、乾癬、虚血、うっ血性心不全、再発狭心症、アテローム性動脈
硬化症、全身性エリテマドーデス、腎炎、ギラン−バール症候群、ウイルス心筋
炎、ＨＩＶ反復、ＨＩＶ感染によるＴ−細胞枯渇、ニューロン炎症誘導の認識欠
如、多発性硬化症、心臓発作、ニューロパシー痛、ＨＩＶ痴呆及びアルツハイマ
ー氏病、から成る群から選択される、請求項２０の方法。
【請求項２３】障害が慢性関節リューマチである、請求項２２の方法。
【請求項２４】被験体に炎症反応を誘起すると予期される事象の前又は後
のいずれかに、予防的に有効量の請求項１９の製薬学的組成物を被験体に投与す
ることを含んで成る、被験体の炎症反応を予防する方法。
【請求項２５】前記の事象が虫刺され及び動物にかまれることから成る群
から選択される、請求項２４の方法。