FI83538B - Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. - Google Patents

Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. Download PDF

Info

Publication number
FI83538B
FI83538B FI830190A FI830190A FI83538B FI 83538 B FI83538 B FI 83538B FI 830190 A FI830190 A FI 830190A FI 830190 A FI830190 A FI 830190A FI 83538 B FI83538 B FI 83538B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
cells
cell
antibody
human
antibodies
Prior art date
Application number
FI830190A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI830190L (fi
FI830190A0 (fi
FI83538C (fi
Inventor
Gunnar Lars Oestberg
Original Assignee
Sandoz Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sandoz Ag filed Critical Sandoz Ag
Publication of FI830190A0 publication Critical patent/FI830190A0/fi
Publication of FI830190L publication Critical patent/FI830190L/fi
Publication of FI83538B publication Critical patent/FI83538B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI83538C publication Critical patent/FI83538C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/16—Animal cells
    • C12N5/166—Animal cells resulting from interspecies fusion
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus

Description

1 83538
Menetelmä hybridoomasolulinjan tuottamiseksi
Esitetään hybridooma-solulinjoja sekä menetelmiä niiden valmistamiseksi samoin kuin niiden käyttö erikois-aineiden kuten esimerkiksi vasta-aineiden valmistamiseksi.
5 Hybridooma on termi, jota käytetään soluista, jotka on muodostettu yhdistämällä "kuolemattomaksi tekevä" solu (erityisesti myelooma-solu) "normaaliin" ei-transformoituun soluun, joka tavallisesti valitaan kykynsä takia tuottaa jokin erikoisaine (esim. imusolu vasta-aineiden 10 tuottamiseksi) muodostamaan hybridi. Nämä hybridit voidaan valikoida ja kloonata solulinjojen saamiseksi, jotka tuottavat aineita, joilla on valittu rakenne ja/tai ominaisuus. Erityisesti tällaisia hybridoomia, jotka on muodostettu imusolujen kanssa, voidaan käyttää tuottamaan mono-15 klonaanisia vasta-aineita.
Hybridoomateknologian kehitys on viime vuosina suunnattu solulinjojen saamiseen, jotka ovat sekä pysyviä että runsaasti ja spesifisesti erikoisaineita tuottavia, joita halutaan saada. Tämän ongelman ratkaisemiseksi on 20 tehty erilaisia yrityksiä, jotka historiallisen alkuperän sä vuoksi ovat suuresti keskittyneet immunoglobuliinien/-vasta-aineiden alueelle.
Aikaisempien toimien tällä alueella tarkastelu antaa katsauksen kohdattavista ongelmatyypeistä ja tähänas-25 tisista eri ratkaisuista.
Alkusysäys hybridi-solulinjojen, jotka tuottavat monoklonaalisia tuotteita, tutkimiseen tuli immunobiolo-gian alalta, jolloin tuotteet olivat monoklonaalisia vasta-aineita.
30 Tavanomaiset antiseerumit sisältävät tavallisesti hyvin suuren joukon vasta-aineita, jotka poikkeavat toisistaan rakenteellisesti antigeenin sitomispaikan suhteen mutta jokainen sitoutuu samaan antigeeniin suuremmalla tai pienemmällä vetovoimalla ja/tai spesifisyydellä. Lisäksi 35 tavanomaiset antiseerumit sisältävät myös suuren joukon 2 83538 vasta-aineita, jotka kohdistuvat muita antigeenejä vastaan ja heijastavat isäntäyksilön, josta antiseerumi saatiin, aikaisempia puolustusreaktioita. Samalla kun tällaiset "laajat" antiseerumit olivat riittäviä useimpia tarkoituk-5 siä varten, tunnettiin, että suuremman spesifisyyden ja toistettavuuden saaminen merkitsisi merkittävää etua ja antaisi suunnattoman voimakkaan työvälineen, erityisesti taudinmäärityksen ja terapian alueella.
Ensimmäinen ja nyt klassinen ratkaisu oli Köhler'in 10 ja Milstein'in selostama [Nature , 256, 495-497 (1975)], jotka onnistuivat esi-immunisoidun hiiren pernasolujen yhdistämisessä "lääke" herkkiin hiiren myelooma-soluihin. Näin kuolemattomiksi tehtyjä yhdistettyjä soluja voitiin kasvattaa in vitro ja kloonata yksinkertaiselta solutasol-15 ta antamaan homogeeninen vasta-aine-populaatio (monoklo- naalisia vasta-aineita). Valikoimalla monien ainutlaatuisten solujen joukosta ja uudelleenkloonaamalla selektiivisesti oli mahdollista saada ja kasvattaa soluja, jotka tuottivat vasta-aineita, joilla oli haluttu antigeenispe-20 sifisyys.
Tällä tavalla valmistetut hiiri-vasta-aineet ovat osoittautuneet käyttökelpoisiksi tutkimus- ja taudinmääri-tystarkoituksiin ja joitakin on jopa käytetty terapeutti-— sesti ihmisille. Saavutettaisiin kuitenkin huomattava etu "'25 ihmisen immunoglobuliiniterapiassa, jos ihmisen vasta-ai neita, joilla olisi samanlainen spesifisyys ja toistettavuus, voitaisiin saada tällä tavalla. Tämä pienentäisi myös herkistymisvaaraa. Monia yrityksiä ongelman ratkaisemiseksi valmistaa tällaisia ihmisen vasta-aineita in vitro 30 on tehty, mutta tähän asti ne ovat olleet suurimmaksi osaksi menestyksettömiä. Tällaisia ovat: (i) Ihmisen normaalien imusolujen transformoiminen Epstein-Barr-viruksella (EBV). Tämä menetelmä on menestynyt heikosti, koska tämäntyyppisten solujen aikaansaaminen 35 vaatii pitkän ja aikaavievän prosessin ja niitä on äärimmäisen vaikea kloonata ja valikoida.
3 83538 (ii) Normaalien (ihmisen) imusolujen yhdistäminen ihmisen myelooma-solujen kanssa. Tämä menetelmä on ilmeisen yhdenmukainen hiiri-hiiri-hybridooma-yrityksen kanssa, mutta siinä on ongelmana, että ihmis-systeemissä ainoas- 5 taan yksi myelooma-solulinja on tehty laajalti saatavaksi ja tämän havaittiin olevan saastunut mykoplasmalla, mikä estää menestykselliset yhdistämiset.
(iii) Normaalien ihmis-imusolujen yhdistäminen EBV-transformoituun ihmisen lymfoblastoidi B-solulinjaan. Sa- 10 maila kun tämä todennäköisesti on tähän asti esitetyistä luotettavin ja parhain toistettava menetelmä, sitä rasittaa in vitro perushaitta, joka kohdataan lymfoblastoidi-soluilla; niitä on äärimmäisen vaikea kloonata, ja koska ne edustavat varhaisvaihetta B-solun erilaistumissukupe- 15 rässä, niiden kyky tuottaa ja erittää vasta-aineita on n. 10 kertaa pienempi kuin todellisilla myeloomilla.
(iv) Ihmisen imusolujen yhdistäminen hiirimyeloo-maan. Tämä menetelmä tuottaa soluja, joilla on samat erinomaiset in vitro-ominaisuudet kuin hiiri-hiirihybridoomil- 20 la, mutta tähän liittyy se suuri haitta, että tällaiset hybridit ovat luonnostaan geneettisesti pysymättömiä. Eräs erikoisen hankala seuraus tästä on, että ne karkottavat ihmis-kromosomin, jolla genomi immunoglobuliinin kevyen kappaketjun muodostamista varten sijaitsee.
25 Yhteenvetona on siten menetelmä (i) liian aikaa vievä ja tehoton ollakseen käyttökelpoinen; menetelmällä (ii) ei vielä ole mitään käytännön merkitystä; menetelmä (iii) on paras nykyään käytännössä saatavissa oleva ja menetelmä (iv), vaikka onkin elinvoimainen, ei voi ylläpi- 30 tää tuottavuutta edes äärimmäisen tarkoilla kloo-nausprosesseilla.
Samalla kun sekä edellä esitetty tarkastelu että suurin osa tähän asti tehdystä työstä on keskittynyt vasta-aineen tuottamiseen, on selvää, että "tuottava" solu- 35 osapuoli voidaan valita jonkun nimenomaisen aineen, jota 4 83538 halutaan saada, erittämistä varten ja yhdistää "kuolemattomaksi tekevään" solulinjaan.
Nyt on keksitty, että käyttämällä vierasgeenistä hybridooma-solua emäsoluna edelleen yhdistämistä varten 5 toiseen soluun on mahdollista saada hybridooma, jolla on suuresti parantunut pysyvyys.
Keksinnön kohteena on siten menetelmä valmistaa:
Hybridooma-solulinja, joka käsittää kuolemattomaksi tekevän solun yhdistettynä soluun, joka tuottaa en-10 naita määrättyä ainetta. Kuolemattomaksi tekevä solu on vierasgeeninen hybridooma-solu ja ainetta tuottava solu on geneettisesti yhteensopiva ei-transformoidun osapuolen kanssa vierasgeenisessä hybridoomassa. Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, mitä patenttivaati-15 muksessa 1 esitetään.
Tällaisten solujen pysyvyys perustuu niiden kykyyn, jos niitä on oikein viljelty, ylläpitää ennalta määrätyn aineen, kuten vasta-aineen, tuotanto.
Eräässä erikoistapauksessa kuolemattomaksi teke-20 väksi soluksi valittu vierasgeeninen hybridooma on myeloo-ma-hybridi, joka on menettänyt oman kykynsä tuottaa immu-noglobuliinia. Eräs esimerkki tällaisesta vierasgeenisestä hybridooma-solusta olisi myelooma-solun ja imusolun väli-— nen hybridooma. Esimerkkejä sopivista myelooma-soluista 25 ovat ne, joita saadaan hiiristä ja rotista ja edullisesti eivät tuota immunoglobuliinia. Nämä myeloomat voivat itse olla hybridejä (esim. hiiri-myelooma/hiiri-imusolu), jotka ovat vaikutukseltaan myeloomia. Tällainen solu on esim. hiiri-SP-2 myelooma-solulinja. Tämä yhdistetään sitten 30 esim. imusoluun, joka on saatu toisesta lajista, esim. ihmisen imusoluun.
Eräässä edullisessa suoritusmuodossa vierasgeenisiä hybridoomia, jotka ovat peräisin tällaisista yhdistymisistä ja jotka eivät enää tuota immunoglobuliinia, valitaan 35 edelleen yhdistettäviksi ainetta tuottaviin soluihin.
5 83538 Nämä vierasgeeniset hybridoomat antavat hyvänlaa-tuisemman ympäristön lisäpysyvyyttä varten kromosomihäviön suhteen.
Vierasgeeniset hybridoomat, joita käytetään kuo-5 lemattomaksi tekemiseen, tehdään lääkekestäviksi ennen edelleen yhdistämistä tavalliseen tapaan. Eräs erityis-menetelmä on valikointi 8-atsaguaniinin kestävyyden suhteen.
Näin saadut hybridoomat ovat pysyviä emäsoluja 10 edelleenyhdistämistä varten. Toinen fuusio-osapuoli valitaan kykynsä perusteella tuottaa ennalta määrättyä ainetta - eräs esimerkki olisi imusolun valinta vasta-aineen tuottamiseksi - ja tämä osapuoli on geneettisesti yhteensopiva ei-transformoidun osapuolen kanssa vierasgeenisessä hybri-15 doomassa.
Tarvittavan spesifisyys-asteen saavuttamiseksi on toivottavaa esiherkistää valittu solu tuottamaan haluttua ainetta. Tämä saavutetaan esimerkiksi vasta-aineiden tapauksessa immunisoimalla isäntä jollakin nimenomaisella 20 antigeenillä ja keräämällä sen jälkeen immunosyyttejä (ts.
soluja, jotka ovat immunologisesti kykeneviä), jotka tuottavat vastaavia vasta-aineita.
Nämä voivat olla esimerkiksi perna- tai imusolmuke-tai verisoluja.
·. 25 Vierasgeenisen hybridooma-emäsolun yhdistäminen ainetta tuottavaan soluun tapahtuu tavalliseen tapaan. Tämä käsittää tavallisesti huomattavien määrien molempia soluja inkuboinnin sopivassa elatusaineessa yhdessä aineen kanssa, joka edistää fuusiota (esim. PEG 1500). Haluttujen 30 hybridien valikointi on jälleen tavanomaista ja voidaan suorittaa valikoivissa elatusaineissa (esim. HAT:ssa (hy-poksantiini/aminopteriini/tymidiinissä), jos kuolemattomaksi tekevä solu ei sisällä hypoksantiinifosforibosyyli-transferaasia).
35 Syntyneet solulinjat ovat pysyviä ja antavat suu ria vasta-ainesaantoja.
6 83538
Niitä voidaan myös kloonata ja valikoida uudelleen, jos on tarpeen tai halutaan.
Keksinnön kohteena on siten menetelmä pysyvän hyb-ridooma-solulinjan aikaansaamiseksi, jossa menetelmässä 5 vierasgeeninen hybridooma-emäsolu tehdään lääkekestäväksi, yhdistetään tämä ainetta tuottavaan soluun, joka on geneettisesti yhteensopiva ei-transformoidun osapuolen kanssa vierasgeenisessä hybridoomassa, ja valikoidaan haluttu hybridi.
10 Vasta-aineen tuottaminen näitä soluja käyttäen voi tapahtua tavanomaisia teitä joko in vitro sopivissa ela-tusaineissa (esim. elatusaineissa, jotka sisältävät laimennettua vasikan sikiöseerumia) tai in vivo injektoimalla isäntään (esim. karvattomaan tai kateenkorvattomaan (an-15 thymic) hiireen tai rottaan) ja keräämällä vesivatsaneste talteen. Valitusta menetelmästä riippuen on yksi tai useampi puhdistusvaihe tarpeen.
Esitetään myös vasta-aineiden tuottaminen tällaisia solulinjoja käyttäen.
20 Samalla kun on selvää, että yksinkertaiset hybri- dooma-soluiinjät, joilla on halutut ominaisuudet, ovat taloudellisista syistä edullisia, on myös mahdollista, jos halutaan tai on tarve, yhdistää edelleen tällaisia solu-linjoja.
25 Tyypillinen keksinnön mukaisesti tuotettu vasta- ainetta tuottava hybridooma olisi hybridooma, joka on muodostettu hiiri-myeloomasta, joka on yhdistetty ihmisen imusolun kanssa emäsoluna ja esiherkistetyn ihmisen imusolun kanssa vasta-ainetuottajana. Mitkä tahansa myelooma-30 soluista voivat, jos on tarkoituksenmukaista, olla hybridejä (kuten esim. SP-2 hiiri-linjassa, joka itse on hii-ri/hiiri-hybridi).
Esimerkkejä kirjallisuudesta, joka kuvaa tavanomaisia menetelmiä ja aikaisempaa työtä ovat: 35 1. Köhler, G. ja Milstein, C. Nature, 256, 495-497 (1975) 7 83538 2. Nadler, L.M. et al., Cancer Research, 40, 3147-3154 (1980) 3. Cosimi, A.B. et al., N. Engl. J. Med. , 305, 308-314 (1981) 5 4. Zurawski, V.R. et al., Science, 199, 1439-1441 (1978) 5. Koskimies, S., Scand. J. Immunol., 11, 73-77 (1980) 6. Steinitz, M. et al., Nature, 287 , 443-445 (1980) 7. Olsson, L. ja Kaplan, H. S., Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A., 77, 5429-5431 (1980) 10 8. Croce, C.M. et al., Nature, 288, 488-489 (1980) 9. Nowinski, R. et al., Science, 210, 537-539 (1980) 10. Croce. C. M. et al., Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 76, 3416-3419 (1979) 11. Galfre, G. et al.. Nature 266, 550, 1977 15 12. Miller, R.A. et al., N. Engl. J. Med. 306, 517, 1982 13. Sikora K., et al., Lancet, i 11, 1982 ja esim. USP 4.172,124 EP hak.julk. no. 0043 718 ja 0044 722 sekä äskettäin julkaistu McIntyre'n kirja monoklonaalisia 20 vasta-aineista.
Tämä menetelmä, jossa käytetään vierasgeenistä fuu-sio-emäsolua (joka on menettänyt kykynsä tuottaa ennalta määrättyjä aineita) tekee mahdolliseksi saada hybridoomia, jotka ovat pysyviä, nopeasti kasvavia, helposti kloonatta-25 via ja joilla on suuri halutun aineen, esim. ihmisen vasta-aineiden tuotantokyky.
Ihmisen vasta-aineita, joita on tuotettu kuvatulla tavalla voidaan käyttää kuten on tavanomaista tällaisille vasta-aineille. Esimerkkejä tällaisista käyttöalueista 30 ovat:
Tarttuvat taudit: virukset (cytomegalo, varicella zoster, herpes simplex, hepatitis A & B, rubella jne). Bakteerit (anti-toksiinit, anti-soluseinä). Sienet (Candida).
35 Malignit sairaudet: vasta-aineita kaikenlaisia pa hanlaatuisia kasvaimia vastaan, joihin liittyy tai ei liity myrkkyjä.
s 83538
Myrkytys: vastamyrkky vasta-aineita (vastamyrkyt, digitalis, oopiumilääkkeet, trisykliset masennuslääkkeet, barbituraatit jne.).
Anti-idiotyypit: anti-anti-haima β-solu, anti-anti 5 asetyylikoliini-reseptori, reumatismin vastatekijä.
Veriryhmä-antigeenit: anti-Rh
Elinsiirto: anti T-solu hylkimisen hillitsemiseen, parantavia vasta-aineita vähentämään siirteen ärsytysky-kyä.
10 Allergia: IgG-vasta-aineita allergeeneille, vaih toehto aliherkistämiselle.
Hormonit: sikiön suonikalvo-gonadotropiini-vasta- aineita käytettäviksi hedelmöitystä ehkäisevinä aineina.
Itse hybridooma-soluja voidaan myös käyttää mRNA-15 lähteenä, jos aiotaan kloonata immunoglobuliinigeenejä.
Tämän keksinnön eräässä erikoissuoritusmuodossa käytetään SP-2 solulinjaa, joka alunperin itse oli hybri-dooma P3-X63-Ag8-linjan ja hiiren pernasolujen välillä, jotka tuottavat vasta-aineita lampaan punaisille veriso-20 luille, ja joka on menettänyt kykynsä tuottaa vasta-aineita (C. F. M. Shulmann et ai., Nature 276, 269, 1978).
Sitä on saatavissa esim. kokoelmasta NIGMS Human Genetic Mutant Cell Repository, Rf. GM 35669 A (ks. US DHHS 1982 Catalog of Cell Lines).
25 Tämä solulinja tehdään lääkkeenkestäväksi ja yhdis tetään sitten normaalien ihmisen ääreisimusolujen kanssa tavanomaisin menetelmin [C.F.G. Galfre et ai.. Nature 266, 550 (1977) ja R. Nowinski et ai., Science 210/537 (1980)]. Saadaan suuri joukko hybridejä ja n. 5 viikon kuluttua 30 valitaan 5 kloonia, joilla on nopea kasvu ja jotka eivät tuota vasta-ainetta. Nämä solut valitaan 8-atsaguaniini-resistenssin suhteen ja kolmella näistä linjoista on mahdollista saada mutantteja, jotka ovat resistenttejä 20 pg/ml:lle 8-atsa-guaniinia. Nämä solut ovat samanaikaises-35 ti herkkiä hypoksantiiniaminopteriini-tymidiini (HAT)-ela-tusaineelle, mikä osoitti, että ne olivat menettäneet kykynsä tuottaa hypoksantiini-fosforibosyyli-transferaasia.
9 83538
Yksi näistä linjoista (SPAZ4) yhdistetään sitten in vitro ihmisen kitarisaimusolujen kanssa käyttäen 10® kita-risasolua 2 x 107 SPAZ4-solun kanssa. Yhdistäminen suoritetaan standardimenetelmien mukaisesti. Vertailutarkoituk-5 siä varten yhdistetään myös SP/2 solulinja. Syntyneet solupopulaatiot valikoidaan HAT-elatusaineessa tarvittavien hybridien talteenottamiseksi. Heti kun kaikki solut yhdistämättömissä vertailuviljelyissä ovat kuolleet, HAT-ela-tusaine korvataan normaalilla ei-valikoivalla kasvu-10 alustalla.
Kahden viikon kasvun jälkeen alkutesti vasta-ainetuotannon suhteen suoritetaan ja havaittiin, että kaikki 47 viljelyä jokaisesta fuusiosta tuottivat ihmisen vasta-ainetta. Uudelleentestattaessa vielä 4 viikon kuluttua 15 havaittiin kuitenkin, että 83 % SPAZ-4-hybridoomista tuottavat vielä vasta-ainetta verrattuna 55 %:iin SP/2-hybri-doomia. Suuri tuotantomäärä havaitaan 28 %:ssa SPAZ-4-lin-joista verrattuna ainoastaan 3 %:iin SP/2-linjoilla.
Ottaen huomioon, että tärkeä tekijä vasta-ainetuo-20 tannon häviössä on L-ketju-genomin häviö, suoritetaan spe sifinen testi kevytketjutuotannon suhteen. Havaitaan, että 67 % SPAZ-4 linjoista tuottavat kappa-ketjuja ja 88 % lambda-ketjuja. Vastaavat arvot SP/2:lie ovat 39 % ja 61 % vastaavasti (nämä prosenttiluvut ovat tietenkin vertailu-25 kelpoisia tälle nimenomaiselle kokeelle ja käytetylle im-munoglobuliinille (Ig). Tulokset on koottu taulukkoon I. Haivataan, että SPAZ-4 on kaikissa tapauksissa parempi kuin SP/2, erityisesti mitä "voimakkaan" tuotannon arvoihin tulee, jotka ovat tärkeimpiä käytännön näkökannalta. 30 Kaikki nämä kokeet suoritetaan kloonaamattomilla soluilla paineen maksimoimiseksi kohti pysyviä klooneja (pysyvät kloonit sisältävät enemmän geneettistä ainesta ja kasvavat aina vähemmän hyvin kuin solut, jotka ovat onnistuneet torjumaan "tarpeettomat" kromosominsa).
35 Kokeita on kuitenkin tehty näiden solujen kloonaa miseksi. Tähänastiset tulokset osoittavat, ettei ainoata- 10 83538 kaan pysyvää ja tuottavaa SP/2-hybridiä ole saatu (ts. ei yhtäkään linjaa, jossa kaikki kasvavat solut tuottaisivat vasta-ainetta). Toisaalta SPAZ-4-hybrideissä on mahdollista kehittää tällaisia klooneja.
5 Tämä keksintö tekee mahdolliseksi saada olennai sesti parempia tuloksia kuin aikaisemmin tunnetuilla menetelmillä ratkaisemalla pysymättömyysongelma, samalla kun on mainitsemisen arvioista, että myös "klassiset" hiiri-hiiri-hybridoomat ovat pysymättömiä ja tarkka subkloonaus 10 on aina tarpeen, mutta silti niiden kanssa on käytännöllistä työskennellä. SPAZ-4-hybridoomien osoittama pysymät-tömyysaste on alempi kuin hiiri-hiiri-hybridoomille ja siten on käytännöllisempää työskennellä niiden kanssa.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
15 Esimerkki 1 SPAZ-4-linjan tuottaminen Ääreisveri-imusoluja (PBLs) eristetään terveen luovuttajan hepariinilla käsitellystä verestä sentrifugoimal-la Ficoll-Isopaque'11a. Pesun jälkeen 108 PBLs sekoitetaan 20 5 x 107 SP/2-solun kanssa 50 ml:ssa Dulbeccos H21-elatusai- netta, joka on asetettu pH 8,0:aan. Soluja pelletoidaan yhteen 600 x g:ssä 5 minuuttia, minkä jälkeen niiden päällä oleva neste varovasti poistetaan. Pitäen solut 37°:ssa lisätään hitaasti 1 minuutin aikana 1 ml 50-%:sta PEG 4000 25 H21:ssä. 2 minuutin aikana lisätään vielä 10 ml H21. Solut kootaan sentrifugoimalla (pelletoimalla) ja suspendoidaan uudelleen 55 ml:aan HAT-elatusainetta (HAT-elatusaine: Dulbeccos H21, jossa 20 % vasikan sikiöseerumia, 10 % NCTC 109, 1 % ei-olennaisia aminohappoja, 0,5 % pyruvaattia, 30 0,2 U/ml insuliinia, 1 mM oksaalietikkahappoa, 10'4M hypok- santiinia, 4 x 10'7M aminopteriinia ja 1,6 x 10'3M tymidii-niä) ja siirrostetaan 528:aan 0,1 ml:n viljelyyn tasapohjaisilla kudosviljelymikromaljoilla. Tuoretta HAT-elatusainetta lisätään viljelyihin aina 3-5 päivän väliajoin 2 35 viikon ajan, minkä jälkeen elatusaine vaihdetaan HT-elatu-saineeksi (Dulbeccos H21, jossa 10 % vasikan sikiöseerumia 11 83538 10*4 hypoksantiinia ja 1,6 x 10'3 tymidiiniä). 15 päivän jälkeen otetaan näytteitä ihmisen vasta-aineen testaamista varten. Valitaan 5 viljelyä, joilla on hyvä kasvu ja vasta-aineen tuotanto 0. Valikoidaan sitten 8-atsaguaniini-5 resistenttien alalinjojen tuotantoa varten.
Nämä viisi solulinjaa siirrostetaan määrässä 2 x 105 solua/ml Dulbeccos H21:een, jossa on 10 % vasikan si-kiöseerumia ja 20 pg/ml 8-atsaguaniinia. Kolmesta näistä viljelystä on mahdollista parin viikon kuluttua ottaa tallo teen elinvoimaisia, kasvavia soluja. Yksi näistä on SPAZ-4, joka on herkkä HAT:lie ja jota käytetään jatkotestausta varten.
Esimerkki 2
Yhdistäminen kitarisaimusolujen kanssa 15 Lapsen kitarisoista poistetaan sidekudos ja ne viedään hienosilmaisen metalliverkon läpi antamaan yksisolu-preparaatti. Punaisten verisolujen lukumäärän pienentämiseksi kaikki solut fraktioidaan Ficoll-Isopaque'11a. Syntyneestä solupopulaatiosta yhdistetään 108 solua 2 x 107 20 kanssa joko SPAZ-4- tai SP/2-soluja menetelmällä, joka on samanlainen kuin esimerkissä 1 kuvattu. Solut siirrostetaan myöhemmin 47:ään 0,5 ml:n viljelyyn HAT-elatusainees-sa, joka tällä kerralla on täydennetty 0,5 pg:lla syklo-sporiini A:ta/ml. Yhden päivän kuluttua lisätään 0,5 ml 25 HAT-elatusainetta ilman syklosporiini A:ta. Jo kolmantena päivänä vaihdetaan 50 % elatusaineesta HT-elatusaineeseen. Tämän jälkeen solut pidetään HT-elatusaineessa vaihtaen aina 3-5 päivän välein.
Testaus immunoglobuliini-tuotannon suhteen 30 Käytetään perinteistä ELISA (entsyymi-kytketty immunosorbenttianalyysi, "Enzyme-linked Immunosorbend Assay )-systeemiä. Kaniinin anti-ihmis-immunoglobuliinia tartutetaan Nunc EIA-levyille laimennussuhteessa 1:400 pH 9,6 bikarbonaatti-puskurissa. Levyjen pesun jälkeen viljely-35 supernatantteja inkuboidaan 30 minuuttia 37°:ssa. Vielä yhden pesukerran jälkeen inkubointeja käsitellään peroksi- i2 83538 daasi-konjugoidulla kaniinin anti-ihmis-IgG, IgM, IgA-rea-genssilla (Miles-Yeda) laimennuksessa 1:400. Pesun jälkeen entsyymi-reaktio kehitetään 1,2-fenyleenidiamiini-dihydro-kloridilla ja H202:lla.
5 Testi kevytketjutuotannon suhteen tehdään täsmäl leen samalla tavalla, paitsi että käytetään vuohen anti-ihmis-lambda- tai vuohen anti-ihmis-kappa-reagenssia (Ta-go) laimennuksessa 1:3000 kaniinin anti-ihmis-IgG, IgM, IgA:n asemesta.
10 Tulokset arvioidaan Titertek Multiscan Elisa-foto- metrillä ja arvot "4" ja "7" taulukossa 1 viittaavat pieniin ja vastaavasti suuriin lukemiin tällä fotometrillä.
Esimerkki 3
Monoklonaalisten vasta-aineiden valmistus influens-15 sa tyyppi A:ta ja B:tä vastaan (in vivo-immusoinnin j älkeen)_ Käytetty influenssa-rokote on SANDOVAC®, joka sisältää hemagglutiniinia ja neuraminidaasia A/Bang-kok'ista, A/Brasiliasta ja B/Singaporesta. Kolme tervettä 20 vapaaehtoista immusoidaan ja otetaan verta päivinä 3., 7., 10., 14. ja 17. Joka kerta imetään 50-60 ml verta kyynär-suonesta hepariinia sisältäviin ruiskuihin. Imusolut eristetään sentrifugoimalla Ficoll-Paque:11a (Pharmacia) ja pestään kahdesti suolaliuoksessa ennen käyttöä.
25 Fuusio-emäsolut ovat: a) SPAZ-4 (vrt. esim. 1) b) SP/2 (ks. edellä) c) GM 1500 ihmisen lymfoblastoidi-solu, joka on tehty 8-atsaguaniini-resistentiksi WISTAR INSTITUTE'ssa 30 (tuottaa ihmis-IgG2-kappaa).
SPAZ-4 ja SP-2 yhdistetään samalla tavalla. Mye-looma-solut (107 solua) ja ihmisen imusolut (n. 3 x 107 solua) sekoitetaan koeputkessa DMEM seerumivapaan elatus-aineen läsnäollessa pH 8,0:ssa. Soluja sentrifugoidaan 35 yhdessä 600 x g:ssä 5 minuuttia. Syntynyttä pellettiä käsitellään 50-%:isella PEG 4000 1 min., minkä jälkeen PEG
13 83538 hitaasti laimennetaan elatusaineella. Yhden pesun jälkeen solut siirrostetaan 176:een 100 μ1:η viljelyyn DMEM-HAT-elatusaineessa, joka sisältää 20 % vasikan sikiöseerumia. Soluja viljellään 37°C:ssa kosteassa 10 % C02 sisältävässä 5 atmosfäärissä.
GM 1500 solut (107 solua) sekoitetaan ihmis-imusolu-jen kanssa (n. 3 x 107 solua) seerumivapaassa DMEM:ssä, pH
8,0 ja sentrifugoidaan 600 x g:ssä 5 min. Pellettiä käsitellään 50-%:isella PEG 6000 5 min., jona aikana soluja 10 sentrifugoidaan 600 x g:ssä. Tämän ajan kuluttua PEG laimennetaan hitaasti elatusaineella. Yhden pesun jälkeen solut siirrostetaan 176:een 100 μ1:η viljelyyn RPMI 1640-HAT-elatusaineessa, joka sisältää 20 % vasikan sikiöseerumia. Soluja viljellään 37°C:ssa kosteassa 5 % C02 sisältä-15 vässä atmosfäärissä.
Suoritetaan yhteensä 35 fuusiota (15 GM 1500:lie, 14 SPAZ-4:lle ja 6 SP-2:lle), mikä käsittää 6160 viljelyä (2640 GM 1500:11a, 2464 SPAZ-4:llä ja 1056 SP-2:lla).
Elatusaineet vaihdetaan viljelyissä aina kun solu-20 jen lisääntyminen tekee sen tarpeelliseksi, ja säännönmukaisesti 3-5 päivän välein. Influenssan vastaisten vasta-aineiden läsnäolo supernatanteissa määritetään ELISA-menetelmällä: merkitykselliset influenssa-antigeenit tartutetaan mikrolevyn syvennyksiin (Nunc), lisätään superna-25 tantti ja annetaan olla vuorovaikutuksessa antigeenin kanssa. Pesun jälkeen syvennyksiin lisätään peroksidaasi-konjugoitua kaniinin anti-ihmis-IgG, IgA, IgM (Miles). Inkuboinnin jälkeen sitoutumaton peroksidaasi-konjugaatti pestään pois ja syvennyksiin lisätään väri-substraattia 30 entsyymiä varten. Reaktio arvioidaan silmämääräisesti ja vahvistetaan Titertek mikrolevy-fotometrillä. Positiivisia tuloksia antavat viljelyt kloonataan rajoitetuissa laimen-nusolosuhteissa 88:ssa uudessa syvennyksessä siirrostaen solut 1 solu/viljely 100 pl:ään DMEM + 20 % vasikan sikiö-35 seerumia yhdessä hiiri-tymosyytti-syöttösolujen kanssa (SPAZ-4 ja SP-2-peräisiä soluja) tai RPMI 1640 :ssa + 20 % i4 83538 vasikan sikiöseerumia MRC-5-syöttösoluilla (GM 1500-peräi-siä soluja). Tuottavia soluja kasvatetaan suuremmassa mittakaavassa ja jäädytetään nestemäisessä N2.
Yhteensä 86 viljelyä (58 GM 1500:sta, 26 SPAZ-4:stä 5 ja 2 SP-2:sta) kloonattiin. Käytetään melko vapaamielisiä arvosteluperusteita päätettäessä tulisiko joku solu kloonata vai ei, mikä on syynä todella positiivisten solujen pieneen saantoon kloonauksen jälkeen. Tämä on tehtävä, koska esimerkiksi GM 1500 ei tuota suurtuotantosoluja.
10 SPAZ-4-soluista tunnistetaan neljä positiivista kloonia, SP-2:sta yksi, joka ei kuitenkaan ollut hybridi vaan pikemminkin itsestään syntynyt EB-viruksen transformoima solu. GM 1500:sta ei kehity tuottavaa solua.
Fuusiotulokset on koottu seuraavaan taulukkoon.
15 Päivä GM1500_SPAZ-4_SP-2_
Vilje- pos.vil- Vilje- pos.vil- Vilje- pos. vil-lyjä jelyjä lyjä jelyjä lyjä jelyjä yhdis- yhdis- yhdis- _tetty_ tetty_tetty_ 20 3 528 0 528 0 176 0 7 528 0 352 2 176 0 10 528 0 528 1 176 0 14 528 0 528 0 354 Is 17 528 0 528 1 176 0 25 Summa 2640 0 2464 4 1056 1
Sltsestään syntynyt EBV-solu.
Näitä viittä positiivista solulinjaa kloonataan 30 uudelleen useita kertoja ja kasvatetaan suuressa mittakaavassa. Tästä on seurauksena EBV-linjan kuolema (on hyvin tunnettua, että tällaiset solupesäkkeet eivät jää eloon pientiheys-kloonauksessa).
Neljä positiivista SPAZ-4-hybridooma-solulinjaa 35 tunnistettiin C15:ksi, C28:ksi, C29:ksi ja C75:ksi.
is 83538
Esimerkki 4
Influenssan vastaisen hybridooman tuottaminen (in vitro-immunisoinnin jälkeen)_
Ihmisen pernasoluja siirrostetaan määrässä 106/ml 5 2 ml:n tasaosissa Falcon 2051 putkissa; yhteensä käyte tään 34 x 106 solua. Optimaalinen määrä sakkaroositiheys-gradientilla puhdistettua A/Bangkok-virusta lisätään ja viljelyjä pidetään RPMI 1640 elatusaineessa, jossa on 5 % ihmisen lämpöinaktivoitua plasmaa, 101 tuntia 37°C;ssa at-10 mosfäärissä, jossa on 5 % C02 ilmassa. Talteenotetut 9 x 106 solua yhdistetään samaan lukumäärään SPAZ-4 soluja kuten esimerkissä 3 selostettiin. Solut siirrostetaan 176 viljelyyn ja kasvatetaan Dulbecco'n MEMrssä, joka sisältää 20 % vasikan sikiöseerumia, HAT ja 1 pg/ml syklosporiini 15 Aita. 2 päivän kuluttua HAT-elatusaine syrjäytetään vähitellen HT-elatusaineella ja vaihdetaan sen jälkeen 4-5 päivän välein. Viljelmät seulotaan influenssan vastaisten vasta-aineiden suhteen päivinä 12 ja 19 yhdistämisen jälkeen ja positiiviset viljelyt kloonataan. Saadaan positii-20 vinen klooni (tunnistettu B2:ksi), joka pystyy kasvuun laajassa mittakaavassa ja jota voidaan käyttää "kemiallisten" määrien puhdasta vasta-ainetta in vitro-valmistuk-seen.
Esimerkki 5 25 Ihmisen influenssan vastaisten monoklonaalisten vasta-aineiden luonnehdinta_ a) Vasta-aine/C 15
Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on kappakevyt-ketju. Vasta-aine reagoi kaikkiin testattuihin influenssa 30 A-typin (HINi H2N2, H3N2) viruksille, se kohdistuu todennäköisimmin viruksen nukleoproteiinia vastaan. Tällä vasta-aineella ei ole neutraloivaa vaikutusta in vitro eikä suojaavaa vaikutusta in vivo.
b) Vasta-aine/C 28 35 Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on lambdake- vytketju. Vasta-aine reagoi ainoastaan H3N2-tyyppiselle i6 83538 influenssavirukselle, se kohdistuu todennäköisimmin viruksen hemagglutiniinia vastaan. Vasta-aineella on voimakas neutraloiva vaikutus in vitro ja dramaattinen suojaava vaikutus in vivo. Se voi neutraloida kaikki testatut H3N2 5 virukset, ts. virukset 1968:sta, 1969:stä, 1973:sta, 1974:stä, 1975:stä, 1977:stä, 1979:stä ja 1980:stä.
Testattuna 1973 A/Port Chalmers:11a MDCK-soluilla havaitaan vasta-aine-valmisteella, joka sisältää 1,5 mg/ml puhdasta vasta-ainetta, olevan neutraloiva tiitteri 10 = 12 800. Samassa kokeessa havaitaan ihmis-immunoglobulii- nin standardivalmisteella (Sandoglobulin) väkevyydessä 60 mg/ml olevan neutralointi-tiitteri = 50. Tämä tarkoittaa, että monoklonaalisella vasta-aineella C 28 samanarvoisella proteiinitasolla on teho, joka on 10 240 kertaa suurempi 15 kuin normaalilla immunoglobuliinilla. Tässä yhteydessä on sopiva korostaa sitä, että influenssan vastainen vasta-aine on yksi pääkomponenteista normaalissa immunoglobulii-ni-valmisteessa, mikä tarkoittaa, että vasta-aineet, joilla on sama neutraloimisteho kuin C 28:11a mutta jotka ovat 20 suunnatut esim. cytomegalo-virusta tai varicella-zoster-virusta vastaan, jossa vasta-ainetaso normaaleissa immuno-globuliini-valmisteissa on melko pieni, suhteellinen teho saattaa saavuttaa paljon suurempia arvoja.
c) Vasta-aine/C 29 25 Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on lambdake- vytketju. Vasta-aine reagoi influenssa tyyppi B/Singapo-relle, sitä ei ole testattu mitään muuta tyypin B virusta vastaan. Sillä ei ole vaikutusta tyypin A virusta vastaan.
d) Vasta-aine/C 75 30 Vasta-aine on IgG 3-luokkaa ja sillä on kappakevyt- ketju. Vasta-aine reagoi ainoastaan H3N2-tyyppisille viruksille, se on todennäköisimmin suunnattu viruksen hemagglutiniinia vastaan. Sillä ei ole neutraloivaa vaikutusta in vitro eikä suojaavaa vaikutusta in vivo.
i7 83538 e) Vasta-aine/B 2
Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on kappakevyt-ketju. Se reagoi ainoastaan H3N2-tyyppisille viruksille ja on todennäköisimmin suuntautunut viruksen hemagglutiniinia 5 vastaan. Vasta-aineella ei ole neutraloivaa vaikutusta in vitro, sitä ei ole testattu in vivo-suojauksen suhteen. Taulukko 1
Solu Päivä Immunoglobuliini kappa lambda 10 % % % _4_7_4 7 4 7 SPAZ-4 4 83 28 SP/2 4 55 3 SPAZ-4 5 67 25 88 46 15 SP/2 5 39 13 61 17 SPAZ-4 6 36 9 SP/2 6 25 2

Claims (2)

1. Menetelmä hybridoomasolulinjan tuottamiseksi, joka solullnja käsittää kuolemattomaksi tekevän jyrsijän 5 myeloomasolun yhdistettynä kädellisistä peräisin olevaan Imusoluun, joka tuottaa vasta-ainetta, tunnettu siitä, että muodostetaan vierasgeeninen hybridoomasolu, joka on menettänyt kykynsä muodostaa tai on muuten kykenemätön muodostamaan vasta-ainetta, ja että hybridoomasolu 10 fuusioidaan vasta-ainetta tuottavaan imusoluun, joka on geneettisesti yhteensopiva vierasgeenisen hybridooman ei-myelooma-osapuolen kanssa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että imusolu esiherkistetään. is 83538
FI830190A 1982-01-22 1983-01-20 Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. FI83538C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH409/82A CH652145A5 (de) 1982-01-22 1982-01-22 Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen.
CH40982 1982-01-22

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI830190A0 FI830190A0 (fi) 1983-01-20
FI830190L FI830190L (fi) 1983-07-23
FI83538B true FI83538B (fi) 1991-04-15
FI83538C FI83538C (fi) 1991-07-25

Family

ID=4186382

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI830190A FI83538C (fi) 1982-01-22 1983-01-20 Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje.

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4634664A (fi)
JP (3) JPS58128323A (fi)
AT (1) AT388932B (fi)
CH (1) CH652145A5 (fi)
CY (1) CY1488A (fi)
DE (1) DE3301249A1 (fi)
DK (1) DK23183A (fi)
FI (1) FI83538C (fi)
FR (1) FR2522679B1 (fi)
GB (1) GB2113715B (fi)
HK (1) HK52589A (fi)
IL (1) IL67721A (fi)
IT (1) IT1160468B (fi)
KE (1) KE3884A (fi)
MY (1) MY8700169A (fi)
SE (1) SE502344C2 (fi)
SG (1) SG28189G (fi)

Families Citing this family (170)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1247538A (en) * 1982-05-21 1988-12-28 Mark C. Glassy Human-human hybridomas for solid tumors
US4613576A (en) * 1983-03-09 1986-09-23 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Human monoclonal antibodies to cancer cells
EP0148644A3 (en) * 1984-01-06 1987-06-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University A novel fusion partner and its products
US4634666A (en) * 1984-01-06 1987-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Human-murine hybridoma fusion partner
US4764465A (en) * 1984-04-26 1988-08-16 Cetus Corporation Human monoclonal antibody against group A red blood cells
JPS6187630A (ja) * 1984-10-08 1986-05-06 Teijin Ltd 単純ヘルペスウイルスに対するヒトモノクロ−ナル抗体及びその製造法
DE3581400D1 (de) * 1984-09-28 1991-02-21 Teijin Ltd Maus/mensch-hybridoma mit erzeugung von antiviralen menschlichen antikoerpern, deren herstellung und antivirale menschliche monoklonale antikoerper.
US4693975A (en) * 1984-11-20 1987-09-15 The Wistar Institute Human hybridroma fusion partner for production of human monoclonal antibodies
JPS61155398A (ja) * 1984-12-28 1986-07-15 Teijin Ltd 抗緑膿菌ヒトモノクロ−ナル抗体及びその製造法並びにそれを有効成分とする治療剤
USH1198H (en) 1985-04-26 1993-06-01 Cetus Corporation Pseudomonas aeruginosa type-specific human monoclonal antibodies, their preparation and use
US4677070A (en) * 1985-04-26 1987-06-30 Cetus Corporation Pseudomonas aeruginosa exotoxin A antibodies, their preparation and use
CH670098B (fi) * 1985-05-23 1989-05-12
JPH0720885B2 (ja) * 1985-09-27 1995-03-08 帝人株式会社 単純ヘルペスウイルス感染症の予防又は治療剤
NZ218499A (en) * 1985-12-10 1990-04-26 Genetic Systems Corp Monoclonal antibodies against pseudomonas aeruginosa, pharmaceutical compositions and detection methods
AU613310B2 (en) * 1986-04-01 1991-08-01 Genelabs Incorporated Immortalized virus-specific tissue cells
WO1987005929A1 (en) * 1986-04-01 1987-10-08 Genelabs Incorporated Immortalized cells which produce tissue-specific products
US5565354A (en) * 1986-09-05 1996-10-15 Sandoz Ltd. Production of human monoclonal antibodies specific for hepatitis B surface antigen
US5646041A (en) * 1987-02-12 1997-07-08 Harfeldt; Elisabeth Monoclonal antibody to herpes simplex virus and cell line producing same
US5001065A (en) * 1987-05-27 1991-03-19 Cetus Corporation Human cell line and triomas, antibodies, and transformants derived therefrom
JPH01101896A (ja) * 1987-10-14 1989-04-19 Teijin Ltd カンジダに対するヒト・モノクローナル抗体とその製造法
US5215913A (en) * 1987-11-30 1993-06-01 Roger Williams General Hospital IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use
IT1226477B (it) * 1988-07-04 1991-01-16 Genetik Mab S R L Linee cellulari n omas quale un mezzo per immortalare cellule produttrici di sostanze di qualunque specie animale.
US7041871B1 (en) 1995-10-10 2006-05-09 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5770429A (en) * 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
JP2535455B2 (ja) * 1991-02-07 1996-09-18 帝人株式会社 サイトメガロウイルスに対するヒト・モノクロ―ナル抗体を産生するハイブリド―マ
EP0523949B1 (en) * 1991-07-15 2003-06-25 The Wellcome Foundation Limited Production of antibodies
JPH05276984A (ja) * 1991-09-05 1993-10-26 Teijin Ltd カンジダに対するヒト・モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ
JPH05260961A (ja) * 1992-05-21 1993-10-12 Teijin Ltd サイトメガロウイルスに対するヒト・モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ
BR9305557A (pt) * 1992-06-26 1997-03-25 Aetsrn Anticorpos monoclonais humanos anti Rhesus-D e composiçao farmacêutica que os contém
EP0583980A1 (en) * 1992-08-20 1994-02-23 Eli Lilly And Company Method for generating monoclonal antibodies from rabbits
HUT72546A (en) * 1992-11-06 1996-05-28 Sandoz Ag Production of human monoclonal antibodies active against hepatitis b surface antigen
US5750106A (en) * 1993-01-28 1998-05-12 Novartis Ag Human monoclonal antibodies to cytomegalovirus
US6046310A (en) * 1996-03-13 2000-04-04 Protein Design Labs., Inc. FAS ligand fusion proteins and their uses
JP4649602B2 (ja) 1997-02-07 2011-03-16 アメリカ合衆国 活性依存性向神経第▲ｉｉｉ▼因子（ａｄｎｆ▲ｉｉｉ▼）
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US7179892B2 (en) 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US6197582B1 (en) 1998-03-18 2001-03-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Development of human monoclonal antibodies and uses thereof
UA81216C2 (en) 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
EP1230269A2 (en) * 1999-11-03 2002-08-14 Maxygen, Inc. Antibody diversity generation
US7060802B1 (en) * 2000-09-18 2006-06-13 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Tumor-associated marker
PE20020574A1 (es) 2000-12-06 2002-07-02 Wyeth Corp Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta
EP2796546B1 (en) 2001-04-19 2017-08-09 The Scripps Research Institute Incorporation of unnatural amino acids
US7084257B2 (en) * 2001-10-05 2006-08-01 Amgen Inc. Fully human antibody Fab fragments with human interferon-gamma neutralizing activity
US20030086929A1 (en) * 2001-10-11 2003-05-08 Tso J. Yun Treatment of prostate cancer by inhibitors of ATP synthase
EP2436774A3 (en) 2002-08-01 2012-06-13 The Regents of The University of California Therapeutic monoclonal antibodies that neutralize botulinum neurotoxins
TW200509968A (en) 2002-11-01 2005-03-16 Elan Pharm Inc Prevention and treatment of synucleinopathic disease
US8506959B2 (en) 2002-11-01 2013-08-13 Neotope Biosciences Limited Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
WO2008103472A2 (en) 2007-02-23 2008-08-28 Elan Pharmaceuticals, Inc. Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
US7321065B2 (en) * 2003-04-18 2008-01-22 The Regents Of The University Of California Thyronamine derivatives and analogs and methods of use thereof
US7709610B2 (en) 2003-05-08 2010-05-04 Facet Biotech Corporation Therapeutic use of anti-CS1 antibodies
US20050025763A1 (en) 2003-05-08 2005-02-03 Protein Design Laboratories, Inc. Therapeutic use of anti-CS1 antibodies
ES2640669T3 (es) 2003-05-19 2017-11-03 Prothena Biosciences Limited Fragmentos truncados de alfa-sinucleína en enfermedad con cuerpos de lewy
US7358331B2 (en) 2003-05-19 2008-04-15 Elan Pharmaceuticals, Inc. Truncated fragments of alpha-synuclein in Lewy body disease
WO2005018539A2 (en) 2003-06-16 2005-03-03 Medimmune Vaccines, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
EP2392923B1 (en) 2003-06-18 2014-05-21 The Scripps Research Institute Method of producing proteins comprising unnatural amino acid
CA2879182C (en) 2004-05-25 2017-02-14 Medimmune, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
US7973134B2 (en) * 2004-07-07 2011-07-05 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in anaplastic large cell lymphoma signaling pathways
MX2007001679A (es) 2004-08-09 2007-05-23 Elan Pharm Inc Prevencion y tratamiento de la enfermedad sinucleinopatica y amiloidogenica.
US7935790B2 (en) * 2004-10-04 2011-05-03 Cell Singaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in T-cell receptor signaling pathways
US7807789B2 (en) * 2004-12-21 2010-10-05 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in EGFR-signaling pathways
EP2153848A3 (en) 2005-01-27 2010-07-21 The Regents of the University of California Therapeutic monoclonal antibodies that neutralize botulinium neurotoxins
CN101107007B (zh) 2005-01-27 2011-08-17 奥克兰儿童医院及研究中心 对脑膜炎奈瑟球菌所致疾病具有广谱保护作用的gna1870囊泡疫苗
EP1856271A4 (en) 2005-03-08 2009-11-18 Medimmune Vaccines Inc INFLUENZA HEMAGGLUTININE AND NEURAMINIDASE VARIANTS
US20090099340A1 (en) * 2007-10-12 2009-04-16 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
EP1915620B1 (en) * 2005-08-02 2010-06-02 Xbiotech Inc DIAGNOSIS, TREATMENT, AND PREVENTION OF VASCULAR DISORDERS USING IL-1alpha AUTOANTIBODIES
WO2007027906A2 (en) * 2005-08-31 2007-03-08 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in leukemia signaling pathways
US20100151495A9 (en) * 2005-08-31 2010-06-17 Cell Signaling Technolgy, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
DOP2006000277A (es) 2005-12-12 2007-08-31 Bayer Pharmaceuticals Corp Anticuerpos anti mn y métodos para su utilización
JP5514539B2 (ja) 2006-03-31 2014-06-04 メダレックス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー ヒト抗体の調製に用いるためのキメラ抗体を発現するトランスジェニック動物
WO2007119808A1 (ja) 2006-04-13 2007-10-25 Medical And Biological Laboratories Co., Ltd. 融合パートナー細胞
US20090298093A1 (en) * 2006-04-27 2009-12-03 Roberto Polakiewicz Reagents for the Detection of Protein Phosphorylation in ATM & ATR Kinase Signaling Pathways
US20110008282A1 (en) * 2006-05-15 2011-01-13 Xbiotech, Inc. IL-1alpha immunization induces autoantibodies protective against atherosclerosis
SI2109623T1 (sl) * 2006-05-22 2012-05-31 Xbiotech Inc Zdravljenje raka z anti il protitelesi
CA2657934C (en) 2006-07-19 2017-04-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Wsx-1/p28 as a target for anti-inflammatory responses
US7939636B2 (en) * 2006-08-11 2011-05-10 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in c-Src signaling pathways
US20090258442A1 (en) * 2006-08-31 2009-10-15 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
US8080645B2 (en) 2007-10-01 2011-12-20 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection/transport compositions and methods
US9481912B2 (en) 2006-09-12 2016-11-01 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
US8652782B2 (en) 2006-09-12 2014-02-18 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids
US8097419B2 (en) 2006-09-12 2012-01-17 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009
US9598462B2 (en) 2012-01-26 2017-03-21 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
WO2008083169A2 (en) * 2006-12-26 2008-07-10 The Johns Hopkins University Compositions and methods for the treatment of immunologic disorders
US7989173B2 (en) * 2006-12-27 2011-08-02 The Johns Hopkins University Detection and diagnosis of inflammatory disorders
CA2673659A1 (en) * 2006-12-27 2008-07-10 The Johns Hopkins University Methods of detecting and diagnosing inflamatory responses and disorders by determining the level of soluble b7-h4
US20090142342A1 (en) * 2006-12-27 2009-06-04 Johns Hopkins University B7-h4 receptor agonist compositions and methods for treating inflammation and auto-immune diseases
PT3067066T (pt) 2007-02-23 2019-06-17 Univ California Prevenção e tratamento da doença sinucleinopática e amiloidogénica
EP1972639A3 (en) 2007-03-07 2008-12-03 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
US20090068684A1 (en) * 2007-03-26 2009-03-12 Cell Signaling Technology, Inc. Serine and threoninephosphorylation sites
US20080238709A1 (en) * 2007-03-28 2008-10-02 Faramarz Vaziri One-way communication apparatus with dynamic key generation
EP1983002A3 (en) 2007-04-19 2009-03-11 Peter Hornbeck Tyrosine phosphorylation sites and antibodies specific for them
US7977462B2 (en) 2007-04-19 2011-07-12 Cell Signaling Technology, Inc. Tyrosine phosphorylation sites
EP1983003A3 (en) 2007-04-19 2009-03-11 Peter Hornbeck Tyrosine phosphorylation sites and antibodies specific for them
US20090053831A1 (en) 2007-05-01 2009-02-26 Cell Signaling Technology, Inc. Tyrosine phosphorylation sites
EP2185718B1 (en) 2007-08-03 2017-10-04 MUSC Foundation For Research Development Human monoclonal antibodies and methods for producing the same
CA2696263C (en) 2007-08-15 2017-06-13 Bing Liu Monospecific and multispecific antibodies and method of use
US9683256B2 (en) 2007-10-01 2017-06-20 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system
US11041215B2 (en) 2007-08-24 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences
WO2009029686A1 (en) 2007-08-27 2009-03-05 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Immunogenic compositions and methods
US10004799B2 (en) 2007-08-27 2018-06-26 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
CA2861667C (en) 2007-10-01 2017-06-13 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system and methods of use
US11041216B2 (en) 2007-10-01 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples
JP2010540953A (ja) 2007-10-05 2010-12-24 ナショナル インスティテュート フォー バイオプロセッシング リサーチ アンド トレーニング リミテッド 膵炎、敗血症および膵臓癌のためのグリコシル化マーカー
EP2062920A3 (en) 2007-11-21 2009-06-17 Peter Hornbeck Protein phosphorylation by basophilic serine/threonine kinases in insulin signalling pathways
US20090169549A1 (en) * 2007-12-19 2009-07-02 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Conformational isomers of alpha-synuclein, antibodies thereto and methods of their manufacture and use
US20090220991A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in leukemia signaling pathways
WO2009126306A2 (en) 2008-04-10 2009-10-15 Cell Signaling Technology, Inc. Compositions and methods for detecting egfr mutations in cancer
RU2498998C2 (ru) 2008-05-30 2013-11-20 ИксБиотеч, Инк. АНТИТЕЛА К ИНТЕРЛЕЙКИНУ-1α И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ
EP2309264A4 (en) * 2008-06-06 2011-11-23 Univ Toyama Nat Univ Corp FLU VIRUS DETECTION DEVICE
RU2523587C2 (ru) 2008-07-11 2014-07-20 МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи Варианты гемагглютинина и нейрамидазы вируса гриппа
JP5976319B2 (ja) * 2008-09-12 2016-08-23 エックスバイオテク，インコーポレイテッドＸｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ． 病原性単球の標的化
US20100260752A1 (en) 2009-01-23 2010-10-14 Biosynexus Incorporated Opsonic and protective antibodies specific for lipoteichoic acid of gram positive bacteria
SG2014010185A (en) 2009-02-12 2014-06-27 Medimmune Llc Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
CA2761310C (en) 2009-05-07 2017-02-28 Charles S. Craik Antibodies and methods of use thereof
CN102666581A (zh) 2009-08-31 2012-09-12 艾普利穆恩公司 用于抑制移植物排斥的方法和组合物
WO2011075185A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Oligasis Targeted drug phosphorylcholine polymer conjugates
KR102167261B1 (ko) 2010-06-18 2020-10-20 엑스바이오테크, 인크. 관절염 치료
EP2608808B1 (en) 2010-08-23 2017-01-18 XBiotech, Inc Treatment for neoplastic diseases
WO2012078688A2 (en) 2010-12-06 2012-06-14 Seattle Genetics, Inc. Humanized antibodies to liv-1 and use of same to treat cancer
US9724409B2 (en) 2011-04-01 2017-08-08 Xbiotech, Inc. Treatment of inflammatory skin disease
ES2697056T3 (es) 2011-04-01 2019-01-21 Xbiotech Inc Tratamiento para patologías dermatológicas
PT2750709T (pt) 2011-09-23 2018-11-22 Xbiotech Inc Tratamento da caquexia
US20130309223A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Seattle Genetics, Inc. CD33 Antibodies And Use Of Same To Treat Cancer
UA105278C2 (ru) 2012-09-06 2014-04-25 Інститут Біології Клітини Нан України Способ получения каталитически активных антител (абзимов) с сиалидазной активностью
US9545441B2 (en) 2012-09-18 2017-01-17 Xbiotech, Inc. Treatment of diabetes
EP2904010A4 (en) 2012-10-04 2016-06-01 Xbiotech Inc TREATMENT OF VASCULAR DISEASES AND ASSOCIATED COMPLICATIONS
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
PE20152004A1 (es) 2013-03-13 2016-02-07 Prothena Biosciences Ltd Inmunoterapia tau
JP6450381B2 (ja) 2013-07-05 2019-01-09 ユニバーシティ オブ ワシントン スルー イッツ センター フォー コマーシャリゼーション がんを処置するための可溶性ｍｉｃ中和モノクローナル抗体
WO2015004632A1 (en) 2013-07-12 2015-01-15 Neotope Biosciences Limited Antibodies that recognize iapp
WO2015004633A1 (en) 2013-07-12 2015-01-15 Neotope Biosciences Limited Antibodies that recognize islet-amyloid polypeptide (iapp)
JP6463361B2 (ja) 2013-09-08 2019-01-30 コディアック サイエンシーズ インコーポレイテッドＫｏｄｉａｋ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ． 第ｖｉｉｉ因子両性イオンポリマーコンジュゲート
PT3116911T (pt) 2014-03-12 2019-09-04 Prothena Biosciences Ltd Anticorpos anti-mcam e métodos de utilização associados
KR20160131082A (ko) 2014-03-12 2016-11-15 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 Lg1-3에 특이적인 항-라미닌4 항체
CA2938933A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Prothena Biosciences Limited Anti-laminin4 antibodies specific for lg4-5
TW201623331A (zh) 2014-03-12 2016-07-01 普羅帝納生物科學公司 抗黑色素瘤細胞黏著分子（ｍｃａｍ）抗體類及使用彼等之相關方法
EP3129051A1 (en) 2014-04-08 2017-02-15 Prothena Biosciences Limited Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
US20160075772A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva
JP6849590B2 (ja) 2014-10-17 2021-03-24 コディアック サイエンシーズ インコーポレイテッドＫｏｄｉａｋ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ． ブチリルコリンエステラーゼ両性イオン性ポリマーコンジュゲート
TWI718121B (zh) 2015-01-28 2021-02-11 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI769570B (zh) 2015-01-28 2022-07-01 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI718122B (zh) 2015-01-28 2021-02-11 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
AU2016255768B2 (en) 2015-04-29 2022-03-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
US9976136B2 (en) 2015-05-14 2018-05-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples
WO2017046776A2 (en) 2015-09-16 2017-03-23 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis
WO2017046774A2 (en) 2015-09-16 2017-03-23 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis
KR20180104635A (ko) 2015-12-30 2018-09-21 코디악 사이언시스 인코포레이티드 항체 및 이의 접합체
WO2017149513A1 (en) 2016-03-03 2017-09-08 Prothena Biosciences Limited Anti-mcam antibodies and associated methods of use
WO2017153955A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases
WO2017153953A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases
CU24537B1 (es) 2016-05-02 2021-07-02 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos monoclonales que compiten por unirse a tau humano con el anticuerpo 3d6
PE20190208A1 (es) 2016-05-02 2019-02-07 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que reconocen tau
WO2017208210A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Prothena Biosciences Limited Anti-mcam antibodies and associated methods of use
WO2018007922A2 (en) 2016-07-02 2018-01-11 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
EP3478716A2 (en) 2016-07-02 2019-05-08 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
JP7016470B2 (ja) 2016-07-02 2022-02-07 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
KR20190025689A (ko) 2016-07-06 2019-03-11 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 전체 및 s129 인산화된 알파-시누클레인을 검출하기 위한 검정
EP3582813A4 (en) 2017-02-16 2020-12-30 XBiotech, Inc TREATMENT OF SUPPURATIVE HIDRADENITIS
AU2018250695A1 (en) 2017-04-14 2019-11-07 Kodiak Sciences Inc. Complement factor D antagonist antibodies and conjugates thereof
AU2018263935A1 (en) 2017-05-02 2019-12-19 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
BR112020001255A2 (pt) 2017-07-21 2020-07-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services composições imunogênicas de neisseria meningitidis
KR20200074201A (ko) 2017-11-02 2020-06-24 바이엘 악티엔게젤샤프트 Alk-1 및 bmpr-2에 결합하는 이중특이적 항체
KR20210094609A (ko) 2018-11-28 2021-07-29 포티 세븐, 인코포레이티드 절제 레짐에 대해 저항성인 유전적으로 변형된 hspc
TW202045206A (zh) 2019-02-27 2020-12-16 美商健生生物科技公司 抗體調配物
JP2022524588A (ja) 2019-03-03 2022-05-09 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド タウ認識抗体
CN114786731A (zh) 2019-10-10 2022-07-22 科达制药股份有限公司 治疗眼部病症的方法
BR112022013589A2 (pt) 2020-01-08 2022-09-13 Regeneron Pharma Tratamento da fibrodisplasia ossificante progressiva
WO2021211924A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Janssen Biotech, Inc. Treatment of atopic dermatitis
WO2021247591A1 (en) 2020-06-02 2021-12-09 Arcus Biosciences, Inc. Antibodies to tigit
AU2022210371A1 (en) 2021-01-22 2023-07-20 Bayer Aktiengesellschaft Lrrc15 antibodies and conjugates thereof

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2757169A1 (de) * 1977-12-22 1979-07-05 Hoechst Ag Verfahren zur gewinnung insulin produzierender tierischer zellen
ZA806506B (en) * 1979-11-01 1981-09-30 Bio Response Inc A method for production of monoclonal antibodies
GB2079313A (en) * 1980-07-07 1982-01-20 Nat Res Dev Improvements in or relating to rat myeloma cell lines
DE3167442D1 (en) * 1980-07-07 1985-01-10 Nat Res Dev Improvements in or relating to cell lines
JPS57502090A (fi) * 1980-07-18 1982-11-25
JPS586475B2 (ja) * 1980-08-23 1983-02-04 株式会社 林原生物化学研究所 ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの製造方法
JPS6045849B2 (ja) * 1980-08-25 1985-10-12 林原 健 ヒトエリトロポエチンの製造方法
JPS585671B2 (ja) * 1980-08-27 1983-02-01 株式会社 林原生物化学研究所 ヒト卵胞刺激ホルモンの製造方法
JPS5743696A (en) * 1980-08-27 1982-03-11 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of human luteinizing hormone
US4474893A (en) * 1981-07-01 1984-10-02 The University of Texas System Cancer Center Recombinant monoclonal antibodies
US4529694A (en) * 1982-04-16 1985-07-16 The Children's Medical Center Corporation Cell fusion

Also Published As

Publication number Publication date
IT8319234A0 (it) 1983-01-21
KE3884A (en) 1989-08-11
FI830190L (fi) 1983-07-23
SE502344C2 (sv) 1995-10-09
JPH0365148B2 (fi) 1991-10-09
AT388932B (de) 1989-09-25
GB2113715A (en) 1983-08-10
ATA19583A (de) 1989-02-15
CH652145A5 (de) 1985-10-31
IT1160468B (it) 1987-03-11
IL67721A (en) 1986-04-29
MY8700169A (en) 1987-12-31
DE3301249C2 (fi) 1990-04-05
SE8300290L (sv) 1983-07-23
DE3301249A1 (de) 1983-09-22
IL67721A0 (en) 1983-05-15
SE8300290D0 (sv) 1983-01-20
US4634664A (en) 1987-01-06
FI830190A0 (fi) 1983-01-20
FR2522679B1 (fr) 1986-05-09
DK23183D0 (da) 1983-01-20
HK52589A (en) 1989-07-07
CY1488A (en) 1989-12-08
JPH0789909B2 (ja) 1995-10-04
GB8301384D0 (en) 1983-02-23
FR2522679A1 (fr) 1983-09-09
DK23183A (da) 1983-07-23
JPH0690753A (ja) 1994-04-05
FI83538C (fi) 1991-07-25
JPH0471520B2 (fi) 1992-11-13
SG28189G (en) 1989-08-11
JPS58128323A (ja) 1983-07-30
GB2113715B (en) 1986-06-04
JPH03236794A (ja) 1991-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI83538B (fi) Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje.
EP0014519B1 (en) Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies
US4594325A (en) High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line
CA1190873A (en) Recombinant monoclonal antibodies
US4451570A (en) Immunoglobulin-secreting human hybridomas from a cultured human lymphoblastoid cell line
CA1103157A (en) Method of producing antibodies
JPH05506573A (ja) ＨＩＶ―１糖タンパクに反応性を有するＩｇＧ―１ヒトモノクローナル抗体およびその使用方法
JPH06113832A (ja) ジゴキシンに対し高い親和性を有するモノクローナル抗体を産生するハイブリッドセルライン及びその製造法
US4752582A (en) Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof
EP0093775A1 (en) Monoclonal antibodies against brugia malayi
EP0157574B1 (en) Antitetanic antibody producing human-human hybridoma and method of producing the same
KR900007950B1 (ko) 모노클로날 항체의 제조방법
Vetterlein Monoclonal antibodies: production, purification, and technology
EP0093776A1 (en) Monoclonal antibodies against schistosoma
Bhat et al. Production of Monoclonal Antibody
RU1801117C (ru) Способ получения монокло- нального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jthfs-про- дуцентмоноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита чело- века, культивируемая клетка гибридомы jti-if3-f5 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека, культивируемая клетка гибридомы jti-id7 - про- дуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jt2-n15 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека
RU2031117C1 (ru) Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus - продуцент моноклональных антител к вирусу простого герпеса i типа
GB2145113A (en) Production of human monoclonal antibodies
JPH04190798A (ja) モノクローナル抗体
Chanu et al. Heterohybridoma for the production of non murine monoclonal antibodies
JPH0679553B2 (ja) 新規な雑種細胞

Legal Events

Date Code Title Description
PC Transfer of assignment of patent

Owner name: NOVARTIS AG

MM Patent lapsed

Owner name: NOVARTIS AG