FI106464B - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten pyridotiatsepiini-, pyrido-oksatsepiini-, pyridotiatsiini-, pyrrolo-oksatsepiini- ja pyrrolotiatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents
Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten pyridotiatsepiini-, pyrido-oksatsepiini-, pyridotiatsiini-, pyrrolo-oksatsepiini- ja pyrrolotiatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI106464B FI106464B FI942793A FI942793A FI106464B FI 106464 B FI106464 B FI 106464B FI 942793 A FI942793 A FI 942793A FI 942793 A FI942793 A FI 942793A FI 106464 B FI106464 B FI 106464B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- mmol
- ethyl acetate
- acid
- solution
- give
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
- C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D513/04—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C227/30—Preparation of optical isomers
- C07C227/32—Preparation of optical isomers by stereospecific synthesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C315/00—Preparation of sulfones; Preparation of sulfoxides
- C07C315/02—Preparation of sulfones; Preparation of sulfoxides by formation of sulfone or sulfoxide groups by oxidation of sulfides, or by formation of sulfone groups by oxidation of sulfoxides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
- C07C319/14—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
- C07C319/14—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides
- C07C319/20—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides by reactions not involving the formation of sulfide groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C327/00—Thiocarboxylic acids
- C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
- C07C327/32—Esters of monothiocarboxylic acids having sulfur atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
- C07C327/34—Esters of monothiocarboxylic acids having sulfur atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups with amino groups bound to the same hydrocarbon radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D498/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/07—Optical isomers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Reduction Or Emphasis Of Bandwidth Of Signals (AREA)
- Dram (AREA)
- Use Of Switch Circuits For Exchanges And Methods Of Control Of Multiplex Exchanges (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Adhesives Or Adhesive Processes (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Treatments Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
- Treatments For Attaching Organic Compounds To Fibrous Goods (AREA)
- Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
106464
Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten pyrido-tiatsepiini, pyrido-oksatsepiini-, pyridotiatsiini-, pyr-- rolo-oksatsepiini- ja pyrrolotiatsepiinijohdannaisten val mistamiseksi 5
Keksintö koskee uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan (I) mukaisten 5-okso-7H-pyrido[2,1-b]-* [1,3]tiatsepiini-, 5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]oksatse- piini-, 4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsiini-, 5-okso-10 pyrrolo[2,1-b][1,3]oksatsepiini- ja 5-oksopyrrolo[2,1-b]-[1,3]tiatsepiinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistusta 15 (αί^γ'^'Ί R12 R1 o cooh 20 jossa kaavassa X on O tai S, R-l on vety, alkyyli, jossa on 1 - 7 hiiliatomia, syk- loalkyyli-CH2, jossa sykloalkyylissä on 3 - 7.hiiliatomia, fenyyli-CH2-, naftyyli-CH2-, tienyyli-CH2 tai tiatsolyyli-·. - 25 CH2- ja R12 on vety, tai Rj. ja R12 muodostavat yhdessä hiilen kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, sykloalkyylirenkaan, jossa on 5 - 7 hiiliatomia, n on yksi tai kaksi, m on nolla tai yksi ja 30 r on nolla tai yksi.
Nämä yhdisteet ovat käyttökelpoisia angioten-siinikonvertaasi-inhibiittoreina. Jotkut näistä yhdisteis- 2 106464 ta omaavat myös neutraalin endopeptidaasin inhibiittiak-tiivisuuden.
Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja voidaan valmistaa siten, 5 että a) liitetään asyylimerkaptosivuketju, jolla on kaava
O O
II II
10 Rfi—C—S—(CH2)r—C^-C—OH (II)
Rl2 Rl jossa R6 on alkyyli, jossa on 1 - 4 hiiliatomia, tai fenyyli, 15 tai sen aktivoitu muoto amiinin kanssa, jolla on kaava (III) 20 H N^V/NVnJ^(CH2,IB (III) O COOR3 jossa R3 on vety, alkyyli, jossa on 1 - 4 atomia, tai . 25 fenyyli, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IV) o o I I I (IV)
30 II II
Rs-C—S— (CH2)r-C^-C-N^
Ri2 Ri H O COOR3 3 106464 b) käsitellään kohdasta a) saatua tuotetta asyy- 0
II
> liryhmän R6-C- poistamiseksi, ja kun R3 on muu kuin vety, muutetaan karboksyylihappoesteri COOR3 hapoksi ja sitten 5 mahdollisesti sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolak- seen.
Vaiheen a) mukainen reaktio voidaan suorittaa orgaanisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa, ja kytkentäreagenssin, kuten l-etyyli-3-(3-dimetyyliamino-10 propyyli)karbodi-imidin, disykloheksyylikarbodi-imidin, bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaatin tai karbonyylidi-imidatsolin ollessa läsnä. Vaihtoehtoisesti kaavan II mukainen asyylimerkap-tokarboksyylihappo voidaan muuttaa aktivoituun muotoon, 15 kuten happokloridiksi, seka-anhydridiksi, symmetriseksi anhydridiksi, aktivoiduksi esteriksi, jne. ennen liittämistä .
Kaavan IV mukainen tuote voidaan muuttaa merkaptääni tuotteeksi, jolla on kaava I, alalla tunnetuilla 20 menetelmillä. Esimerkiksi kun R6 on metyyli ja R3 on metyyli tai etyyli, käsittelystä metanolipitoisella natriumhydroksidilla, minkä jälkeen vesipitoisella hapolla saadaan tuotteet, R3 on vety.
Asyylimerkaptosivuketjuyhdisteet, joilla on kaava " 25 II, jossa R12 on vety, kuvataan kirjallisuudessa. Katso esimerkiksi Ondetti et ai. US-patentit 4 105 776 ja 4 339 600, Haslanger et ai., US-patentti 4 801 609, Delaney et ai., US-patentti 4 722 810, jne.
Kaavan III mukaiset fuusioituneet bisykliset ren-30 gasyhdisteet voidaan valmistaa seuraavien menetelmien mukaisesti. Esimerkiksi N-suojattu aminohappo, jolla on kaava (XXII) . 106464 4 r* (CH2)n
T
Pi N— CH COOH
5 voidaan liittää aminohappoesterin kanssa, jolla on kaava (XXIII) 10 HC -t O-alkyyli) 2 (CH2)2 (ch2)„ ! 15 H2N—CH—COOR3 jolloin saadaan dipeptidi, jolla on kaava (XXIV) HC "f O-alkyyli) _
20 I
X—P2 (CH2)2 (CH2)n (CH2)b
Px-N—CH — C — CH-COOR3
'• 25 OH
jossa Px on aminosuojaryhmä, kuten bentsyylioksikarbonyyli tai t-butyylioksikarbonyyli, tai ryhmä, joka yhdessä N-atomin kanssa muodostaa suojaryhmän, kuten ftalimido, P2 30 on hydroksi- tai merkaptosuojaryhmä ja R3 on helposti poistettava esterisuojaryhmä. Edulliset P2 suojaryhmät, kun X
• « on S, ovat asyyliryhmiä, kuten asetyyli tai bentsoyyli, erityisesti asetyyli. Edulliset P2 suojaryhmät, kun X on 0, ovat asyyliryhmiä, tetrahydropyraaneja, estyneitä silyyli-35 ryhmiä ja trityylejä, erityisesti trifenyylimetyyli ja ^ 106464 5 1,1-dimetyylietyylidimetyylisilyyli. Tämä liittämisreaktio suoritetaan edullisesti kytkentäreagenssin, kuten bentso-triatsol-l-yylioksitris-(dimetyyliamino)fosfonium heksa-fluorifosfaatin, etyyli-3-(3-dimetyyliamino)propyylikar-5 bodi-imidin tai metaanisulfonyylioksibentsotriatsolin ollessa läsnä.
P2 suojaryhmä voidaan poistaa selektiivisesti kaavan XXIV mukaisesta välituotteesta esimerkiksi käsittelemällä natriummetoksidilla metanolissa, kun P2 on asetyyli tai 10 bentsoyyli, tai käsittelemällä hapolla, kuten p-tolueeni-sulfonihapolla metanolissa, kun P2 on asetyyli, bentsoyyli, trityyli, tetrahydropyranyyli tai 1,1-dimetyylietyylidi-metyylisilyyli. Saatava tuote altistetaan sitten happo-katalysoidulle syklisointireaktiolle edullisesti käsitte-15 lemällä vahvalla hapolla, kuten trifluorietikkahapolla, para-tolueenisulfonihapolla tai kaupallisesti saatavalla polystyreenisulfonaatti polymeerityyppisellä ioninvaihto-hartsilla, kuten Amberlyst 15*. Tämä syklisointireaktio voidaan suorittaa ei-proottisessa liuottimessa, kuten me-20 tyleenikloridissa tai kloroformissa, jolloin saadaan välituote, jolla on kaava (XXV) O COOR3
Kaavan XXIV mukaiset yhdisteet P2 suojaryhmän poiston jälkeen ja ennen syklisointia, jossa yhdisteessä X on 30 O, voidaan muuntaa vastaaviksi yhdisteiksi, joissa X on S. Tämä voidaan tehdä lukuisilla menetelmillä. Esimerkiksi • « kaavan XXIV mukaista yhdistettä P2 ryhmän poiston jälkeen voidaan käsitellä trifenyylifosfiinilla, di-isopropyyli-atsodikarboksylaatilla ja tioetikkahapolla. Saatavaa tio-35 asetaattia käsitellään sitten natriummetoksidilla meta- .6 106464 nolissa, jolloin saadaan vastaava merkaptaani, joka voidaan sitten syklisoida, kuten edellä on kuvattu.
Toisessa menetelmässä kaavan XXIV mukaista yhdistettä P2-ryhmän poiston jälkeen käsitellään tunnetuilla 5 menetelmillä, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (XXVI) HC -f-O-alkyyli) _ 10 \ T·*» (CH2)n (CH2) g,
Pi— N— CH — C — |T CH — COOR3 O H 15 jossa L on poistuva ryhmä, kuten metaanisulfonyylioksi, para-tolueenisulfonyylioksi, jodi tai bromi. Esimerkiksi kaavan XXIV mukaisen yhdisteen käsittelystä P2-suojaryhmän poiston jälkeen metaanisulfonyylikloridin kanssa saadaan 20 yhdiste, jolla on kaava XXVI, jossa L on metaanisulfonyylioksi.
Kaavan XXVI mukaista yhdistettä käsitellään sitten cesiumtioasetaatilla, jolloin saadaan vastaava tioasetaat-ti. Käsittelystä natriummetoksidilla metanolissa saadaan 25 vastaava merkaptaani, joka voidaan sitten syklisoida kuten edellä on kuvattu.
Vaihtoehtoisesti yhdiste, jolla on kaava XXIV, jossa X on 0, voidaan muuntaa suoraan kaavan XXV mukaiseksi välituotteeksi käsittelemällä vahvalla hapolla, kuten tri-30 fluorietikkahapolla, para-tolueenisulfonihapolla tai kaupallisesti saatavalla polystyreenisulfonaatti polymeeri- • · tyyppisellä ioninvaihtohartsilla, kuten Amberlyst 15R, sopivassa liuottimessa kuten metyleenikloridissa tai kloroformissa.
7 106464 N-suojaryhma poistetaan sitten kaavan XXV mukaisesta yhdisteestä esimerkiksi käsittelemällä hydratsiini mo-nohydraatilla, kun P2 yhdessä N-atomin kanssa muodostaa ftalimidoryhmän, tai käsittelemällä joditrimetyylisilaa-5 nilla tai palladiumilla hiilellä ja ammoniumformaatilla tai vedyllä, kun Px on bentsoyylioksikarbonyyli, tai käsittelemällä kloorivetyhapolla dioksaanissa tai muulla vahvalla hapolla, kun Px on t-butoksikarbonyyli, jolloin saadaan kaavan III mukainen fuusioitunut bisyklinen rengas- 10 yhdiste.
Vielä yhdessä menetelmässä kaavan XXII mukainen N-suojattu aminohappo voidaan liittää hydroksiaminohappo-esterin kanssa, jolla on kaava (XXVII)
CH2—OH
15 , <ch2)2 (CH2)w
T
H2N— CH—COOR3 20 jolloin saadaan dipeptidi, jolla on kaava (XXVIII) ch2-oh X-P2 (CH2)2 (CH2) n (CH2) m „ T ▼ • —N—CH-C—N-CH-COOR3
O H
jossa Px ja P2 ovat edellä määriteltyjä. Tämä liittämis-reaktio suoritetaan edullisesti kytkentäreagenssin läsnä 30 ollessa, kuten metaanisulfonyylioksibentsotriatsolin tai etyy1i-3 -(dimetyyliamino)propyylikarbodi-imidin.
Hydroksiyhdiste XXVIII hapetetaan sitten aldehydik-, si, jolla on kaava (XXIX) 8 106464 HC=0 X-Pz (CHz)2 tCH2)n (CHj)m 5 ▼ ▼
Pi—N—CH C—N CH COORj
II I
O H
käsittelemällä oksalyylikloridi/dimetyylisulfoksidilla, 10 minkä jälkeen tertiaaärisellä amiinilla ei-proottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa. Kaavan XXIX mukaista aldehydiä käsitellään sitten kuten edellä on kuvattu, jolloin poistetaan P2 suojaryhmä, ja altistetaan sitten happokatalysoidulle syklisointireaktiolle kuten edellä on 15 kuvattu, jolloin saadaan kaavan XXV mukainen välituote.
Lähtöaine, jolla on kaava XXIII, jossa m on yksi, voidaan valmistaa L-e-hydroksinorleusiinin N-ätomin selektiivisellä suojauksella, jolloin saadaan (XXX) 20 /ch^oh CH,
__ P3-N —CH-COOK
• 25 jossa P3 on N-suojaryhmä. Esimerkiksi P3 ja N-atomi voivat muodostaa ftalimidoryhmän. Kaavan XXX mukaista N-suojattua L-6-hydroksinorleusiinia käsitellään sitten R3 happosuoja-30 ryhmän liittämiseksi esimerkiksi käsittelemällä metyyli-jodidilla emäksen läsnä ollessa, tai käsittelemällä vah- «· valla hapolla metanolissa, jossa R3 on metyyli. Tämä esteri hapetetaan sitten, jolloin saadaan aldehydi, jolla on kaava (XXXI) 9 106464
H
=o CH, ^ch2 5 f P3 N —CH-COOR3
Kaavan XXXI mukaista aldehydiä käsitellään sitten ortofor-maatilla, jolla on kaava (XXXII) 10 HC —fr- 0-alkyyli) 3 vahvan happokatalyytin ja vastaavan alkoholin ollessa läs-15 nä, so. HO-alkyyli, jossa alkyyli on sama kuin kaavan xxxil mukaisessa ortoformaatissa, jolloin saadaan (XXXIII)
H
^.C—t- O-alkyyli) 2 20 f2 ^/CH2
Pj N —CH COOR3 *· 25 N-suojaryhmän P3 poistosta esimerkiksi käsittelemällä hyd- ratsiinihydraatilla, kun P3 ja N-atomi muodostavat ftalimi-doryhmän, saadaan lähtöaine, jolla on kaava XXIII, jossa m on yksi.
Lähtöaine, jolla on kaava XXIII, jossa m on nolla, 30 voidaan valmistaa suojaamalla gamma-bentsyyliglutamaatin N-atomi, jolloin saadaan (XXXIV) 10 106464 cooch2—(δ) .ch2 5 f
P3 N —CH COOH
jossa P3 on N-suojaryhmä, kuten t-butyylioksikarbonyyli, tai jossa P3 ja N-atomi voivat muodostaa ftalimidoryhmän. 10 Kaavan XXXIV mukaista N-suojattua glutaamihappoa käsitellään sitten R3 happosuojaryhmän liittämiseksi, kuten edellä on kuvattu, jolloin saadaan (XXXV) cooch2—(O) 15 I '-' ^ch2 P3-N —CH-COOR3 20 Hydrogenolyysi, kun R3 on alempi alkyyli, poistaa bentsyy- liesteriryhmän yhdisteestä XXXV, jolloin saadaan (XXXVI)
COOK
rCH2 P3-N —CH-C00R3
Kaavan XXXVI mukaisen yhdisteen selektiivisestä pelkistyk-30 sestä esimerkiksi käsittelemällä etaanitiolilla, etyyli-3-(3-dimetyyliamino)propyylikarbodi-imidillä ja dimetyyli- ♦ * aminopyridiinillä, minkä jälkeen trietyylisilaanilla, palladiumilla hiilellä ja asetonitriilillä, saadaan aldehydi, jolla on kaava (XXXVII) X, 106464 HC=0 CH2 5 P3-N —CH-COOR3
Kaavan XXXVII mukaista aldehydiä käsitellään sitten kaavan XXXII mukaisella ortoformiaatilla, kuten edellä on kuvattu, ja N-suojaryhmä P3 poistetaan, kuten edellä on kuvattu, 10 jolloin saadaan lähtöaine, jolla on kaava XXIII, jossa m on nolla.
Kaavan XXVII mukainen hydroksiaminohappoesteri lähtöaine voidaan valmistaa saattamalla dietyyliasetamido-malonaatin liuos reagoimaan natriumhydridin sekoitetun 15 suspension kanssa, minkä jälkeen reaktiolla halogeeni-alkyyliasetaatin kanssa, jolla on kaava (XXXVIII)
O
halogeeni- (CH2)m- (CH2) 2-CH2-0-C-CH3 20 jossa halogeeni on Br, I tai Cl, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (XXXIX) f h2c-o-c-ch3 • 25 (CH2)2
o <?H2>« il I
H3C— C—NH- C— COOC2H5 cooc2h5 30
Kaavan XXXIX mukaista dietyyliesterin liuosta käsi-' tellään natriumhydroksidilla ja lämmöllä ja sitten tehdään happamaksi ja kuumennetaan uudelleen, jolloin saadaan hyd-roksiaminohappo, jolla on kaava (XL) 35 12 106464 h2c — oh (CH2)2 5 |j
H3C-C NH—CH—COOH
Kaavan XL mukaista hydroksiaminohappoa käsitellään sitten sianmunuaisasylaasilla tai muulla sopivalla hydro-10 lysoivalla entsyymillä, jolloin saadaan erottunut hydrok-siaminohappo, jolla on kaava (XLI) h2c —oh (CH2)2
15 I
(CH:)W
T
H2N-CH—COOH
Kaavan XLI mukainen hydroksiaminohappo muutetaan 20 sitten kaavan XXVII mukaiseksi esteriksi tavanomaisilla keinoilla. Esimerkiksi kaavan XLI mukaista hydroksiaminohappoa voidaan käsitellä metanolissa trimetyylisilyyli-kloridilla, jolloin saadaan kaavan XXVII mukaisen metyyli-esterin vetykloridisuola.
\ 25 Kaavan XXII mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa seuraavasti. Kun X on O, hydroksi a-aminohappo, jolla on kaava (XLII)
OH
30 (CH2)n
T
H2N-CH—COOH
saatetaan reagoimaan Px ja P2 suojaryhmien liittämiseksi. Esimerkiksi kaavan XLII mukaisen hapon käsittelystä N-kar-35 betoksiftalimidillä natriumkarbonaatin läsnä ollessa, min- 13 106464 kä jälkeen käsittelystä klooritrifenyylimetaanilla ja tri-etyyliamiinilla saadaan lähtöaine, jolla on kaava XXII, jossa X on O, Pj yhdessä N-atomin kanssa muodostavat ftali-midon, ja P2 on trityyli. Vaihtoehtoisesti kaavan XLII mu-5 kaisen hapon käsittelystä N-(bentsoyylioksikarbonyyliok-si)sukkinimidillä vesipitoisessa natriumkarbonaatissa ja asetonissa, minkä jälkeen käsittelystä t-butyylidimetyyli-silyylikloridilla tai kaavan V tai VI mukaisella asyloin-tiaineella, jolloin saadaan lähtöaine, jolla on kaava 10 XXII, jossa X on O, Px on bentsyylioksikarbonyyli ja P2 on t-butyylidimetyylisilyyli tai asyyliryhmä, kuten asetyyli.
Kun X on S ja n on yksi, N-Ν'-bis[(fenyylimetoksi)-karbonyyli]-L-kystiiniä voidaan käsitellä sinkkipölyllä ja vesipitoisella rikkihapolla, jolloin saadaan merkaptaani, 15 jolla on kaava (XLIII)
SH
o f* /T\ Il f
\U)-CH2— o-C NH— CH COOH
20
Kaavan XLIII mukaista merkaptaania käsitellään sitten P2 suojaryhmän liittämiseksi. Esimerkiksi kaavan XLIII mukaisen merkaptaanin käsittelystä etikkahappoanhydridillä saadaan lähtöaine, jolla on kaava XXII, jossa X on S, n on 25 yksi, P2 on asetyyli ja Pt on bentsyylioksikarbonyyli.
Kun X on S ja n on kaksi, L-metioniini voidaan suojata N-atomiin. Esimerkiksi reaktiosta bentsyylikloorifor-maatin tai N-(bentsyylioksikarbonyylioksi)sukkinimidin kanssa saadaan N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-metionii-30 ni, joka sitten esteröidään käsittelemällä alkoholilla, alkyyli-OH, happokatalyytin kuten p-tolueenisulfonihapon • ( läsnä ollessa. Käsittelystä hapetusaineen kanssa, kuten N-kloorisukkinimidi, vesipitoisessa liuottimessa saadaan sulfoksidi, jolla on kaava (XLIV) 14 106464
O
I! S—ch3 n <CH2)2
Il f 5 ©— CH2-0 C NH—CH—COOalkyyli
Kaavan XLIV mukaista sulfoksidia käsitellään sitten happoanhydridillä, kuten etikkahappoanhydridillä, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (XLV) 10 f s— ch2—o— c— ch3 n (CH2)2 O m /~\ Il » ( O >— CH2- O C NH— CH— COOalkyyli 15 Käsittelystä alkalimetallihydroksidilla, minkä jälkeen formaldehydin poistosta esimerkiksi käsittelemällä pelkis-tysaineella, esimerkiksi natriumboorihydridillä, minkä 20 jälkeen käsittelystä happoanhydridillä esimerkiksi etikkahappoanhydridillä saadaan lähtöaine, jolla on kaava XXII, jossa X on S, n on kaksi, P2 on asetyyli ja P2 on bentsyy-lioksikarbonyyli.
Kaavan I mukaiset yhdisteet sisältävät kolme asym-25 metristä keskusta rakenteen fuusioituneessa bisyklisessä osassa, lisäkeskukset ovat mahdollisia sivuketjussa. Vaikka edellä kuvattujen fuusiotuneiden bisyklisten tuotteiden optisesti puhdas muoto on edullinen, kaikki tällaiset muodot sisältyvät kaavan (I) mukaiseen yhdisteryhmään. Edellä 30 kuvatut menetelmät voivat käyttää rasemaatteja, enan-tiomeerejä tai diastereomeerejä lähtöaineina. Kun vai- • « mistetaan diastereomeerisia yhdisteitä, ne voidaan erottaa tavanomaisilla kromatografisilla tai jakokiteytysmene-telmillä. Edullisesti vety, joka on liittynyt sillan-35 päähiileen, on alla esitetyssä orientaatiossa 15 106464 (CH2 ) m
T T A
H ° COOR3
Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan eristää farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan muodossa. Sopivia suo-10 loja tätä tarkoitusta varten ovat alkalimetallisuolat, kuten natrium ja kalium, maa-alkalimetallisuolat, kuten kalsium ja magnesium, suolat, jotka on johdettu aminohapoista, kuten arginiini, lysiini, jne. ja suolat, jotka on johdettu amiineista, kuten alkyyliamiinit, esim. t-15 butyyliamiini, t-amyyliamiini, jne., substituoidut alkyyliamiinit, esim. bentsyyliamiini, dialkyyliamiinit, substituoidut dialkyyliamiinit, esim. N-metyyliglukamiini, trialkyyliamiinit, substituoidut trialkyyliamiinit ja kva-ternääriset ammoniumsuolat. Nämä suolat voidaan saada 20 saattamalla yhdisteen happomuoto reagoimaan emäksen kanssa, joka toimittaa halutun ionin, väliaineessa, jossa suola saostuu, tai vesipitoisessa väliaineessa, ja sitten lyofilisoimalla.
Kaavan (I) mukaisia edullisia yhdisteitä ovat ne, • 25 joissa: r on yks i;
Ri on bentsyyli, syklopropyylimetyyli tai haarautu-maton tai haarautunut 3-5 hiilen alkyyliketju, erityisesti bentsyyli; ja 3 0 R12 on vety.
Yksittäinen edullisin yhdiste on [4S-[4ft (R*) , 7a, 10aS] ]-oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] [l,3]tiatse-piini-7-karboksyylihappo, so. yhdiste, jolla on kaava 16 106464
5 I Λ i J
9Η2 η Ο COOH
© 10
Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat kaksoisinhibiit-toreita, jotka omaavat kyvyn inhiboida angiotensiini-konvertaasia ja neutraalia endopeptidaasia.
15 Siten kaavan I mukaiset yhdisteet mukaan lukien niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ovat käyttökelpoisia fysiologisten tilojen hoidossa, jossa an-giotensiinikonvertaasi-inhibiittorit ovat osoittautuneet käyttökelpoisiksi. Tällaisiin tiloihin kuuluvat tautiti-20 lat, joita karakterisoidaan epänormaalisuuksilla verenpaineessa, silmän sisäisessä paineessa ja reniinissä, mukaan lukien sydän- ja verisuonisairaudet, erityisesti korkea verenpaine ja kongestiivinen sydämen toiminnan vajavuus, glaukooma ja munuaissairaudet, kuten munuaisen ·, 25 vajaatoiminta, diabeettinen nefropatia ja munuaisen heik keneminen, mitä seuraa hoito syklosporiinilla ja muilla immunovaimentimilla. Muihin tiloihin, joissa an-giotensiinikonvertaasi-inhibiittoreiden on raportoitu olevan käyttökelpoisia, kuuluvat maksakirroosi, ateroskle-30 roosin etenemisen inhibointi, hypertensiivisen tai dia-/· beettisen retinopatian ehkäisy tai hoito, sydänlihaksen häiriön parantaminen myokardiaalisen infarktin aikana tai sen jälkeen, ja restinoosin ehkäisy angioplastian jälkeen. Kaksoisinhib-iittorit ovat käyttökelpoisia myös hoidettaes-35 sa fysiologisia tiloja, joissa neutraalit endopeptidaasi-inhibiittorit ovat osoittautuneet käyttökelpoisiksi. Täi- 106464 17 laisiin tiloihin kuuluvat myös sydän- ja verisuonisairaudet, erityisesti korkea verenpaine, hyperaldosteronemia, munuaissairauset, glaukooma, samoin kuin akuutin tai kroonisen kivun helpotus. Siten kaavan I mukaiset yhdisteet 5 ovat käyttökelpoisia alennettaessa verenpainetta, ja kaavan I mukaiset kaksoisinhibiittorit ovat lisäksi käyttökelpoisia tätä tarkoitusta varten johtuen niiden virtsaneritys ja natriumin eritys ominaisuuksista. Kaksoisinhibiittorit ovat erityisen käyttökelpoisia kongestiivisen 10 sydämen toiminnan vajavuuden hoidossa.
Kaavan I mukaiset yhdisteet mukaan lukien niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat voidaan antaa näitä vaikutuksia varten määrissä, jotka ovat samanlaiset kuin ne, joita on käytetty aikaisemmin angiotensiinikonvertaa-15 si-inhibiittoria varten. Esimerkiksi kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan antaa nisäkäsisännälle, kuten ihmiselle, noin 0,1 - 100 mg/kg kehon painoa kohti vuorokaudessa, edullisesti noin 0,5 - 25 mg/kg kehon painoa kohti vuorokaudessa. Kaavan I mukaisia yhdisteitä annetaan edullises-20 ti oraalisesti, mutta parenteraalisia reittejä, kuten ihonalaista, lihaksen sisäistä ja laskimonsisäistä, voidaan myös käyttää samoin kuin paikallisia antamisreittejä. Vuorokausiannos voidaan antaa yksittäisenä tai jaettuna 2-4 annokseen, jotka annetaan vuorokauden kuluessa.
25 Kaavan I mukaiset inhibiittorit voidaan antaa yh distelmässä ihmisen ÄNF 99 - 126 kanssa. Tällainen yhdistelmä sisältäisi kaavan I mukaista inhibiittoria noin 1 -100 mg/kg kehon painoa kohti ja ihmisen ANF 99 - 16 noin 0,001 - 0,1 mg/kg kehon painoa kohti.
30 Kaavan I mukaiset inhibiittorit voidaan antaa yh distelmässä muiden farmaseuttisesti aktiivisten yhdiste-luokkien kanssa. Esimerkiksi diureetti, kalsiumkanavasal-paaja, kaiiumkanava-aktivaattori, kolesterolia vähentävä aine, β-salpaaja, jne.
35 Kaavan I mukaiset inhibiittorit tai niiden farma seuttisesti hyväksyttävä suola ja muut farmaseuttisesti 18 106464 hyväksyttävät ainesosat voidaan formuloida edellä kuvattuja farmaseuttisia käyttöjä varten. Sopiviin koostumuksiin oraalista antamista varten kuuluvat tabletit, kapselit ja eliksiirit, ja sopiviin koostumuksiin parenteraalista an-S tamista varten kuuluvat steriilit liuokset ja suspensiot. Sopiviin koostumuksiin glaukooman hoitamiseksi kuuluvat myös paikalliset koostumukset, kuten liuokset, salvat ja kiinteät siirrännäiset, kuten on kuvattu US-patenttijulkaisussa 4 442 089. Noin 10 - 500 mg aktiivista ainesosaa 10 seostetaan fysiologisesti hyväksyttävän vehikkelin, kantajan, täyteaineen, sideaineen, säilöntäaineen, stabilointiaineen, makuaineen, jne. kanssa yksikköannosmuodossa, kuten hyväksyttävässä farmaseuttisessa käytännössä vaaditaan.
15 Seuraavat esimerkit ovat keksintöä havainnollista via. Lämpötilat annetaan Celsius-asteina. Ohutkerroskroma-tografia (TLC) suoritettiin silikageelissä ellei toisin mainita.
Esimerkki 1 20 [4S- [4a (R*) ,7a,10afi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok- so-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]-[1,3]-oksatsepiini-7-karboksyylihappo a) (S)-2-ftalimido-4-hydroksibutaanihappo, trietyy-liamiinisuola ·. 25 Liuosta, jonka muodostivat L-homoseriini (3,0 g, 25,2 mmol) ja natriumkarbonaatti (2,670 g, 25,2 mmol) vedessä (60 ml), käsiteltiin N-karbetoksiftalimidillä (5,570 g, 25,4 mmol). Kun liuosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 2 tuntia, se tehtiin happamaksi 6 N kloori-30 vetyhapolla ja uutettiin etyyliasetaattiin. Etyyliasetaat-J. tiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsul- faatti) ja suodatettiin trietyyliamiinin (4,0 ml) liuokseen metyleenikloridissa (40 ml). Samea liuos väkevöitiin ja trituroitiin etyyliasetaatilla ja etyylieetterillä, 35 jolloin saatiin 5,11 g otsikon yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena; sp. 142 - 144 °C. TLC (5-%:inen etikkahappo • etyyliasetaatissa) Rf = 0,36; 19 106464 [a]D = -6,2° (c = 0,8, kloroformi).
Anal, laskettu C18H26N205:lle: C, 61,70; H, 7,48; N, 7,99 Todettu: C, 61,45; H, 7,47; N, 7,84 5 b) (S)-2-ftalimido-4-(trifenyylimetoksijbutaanihap- po , trietyyliamiinisuola
Kohdan (a) tuotteen (1,890 g, 5,4 mmol) homogeenista liuosta kloroformissa (20 ml) käsiteltiin trietyyli-amiinilla (80 μΐ), minkä jälkeen kiinteällä klooritrife-10 nyylimetaanilla (1,590 g, 5,70 mmol). Kun liuosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 2,5 tuntia, se jakouutettiin etyyliasetaatilla ja 0,1 N kloorivetyhapolla (150 ml). Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin sitten (natriumsulfaatti) ja suodatettiin trietyy-15 liamiinin (1,0 ml) liuokseen metyleenikloridissa (30 ml). Liuos väkevöitiin öljyksi, liuotettiin uudelleen pieneen määrään metyleenikloridia ja etyyliasetaattia ja trituroi-tiin etyylieetterillä kunnes liuoksesta tuli samea. Seokseen lisättiin kidealkioita ja sen annettiin seistä huo-20 neenlämpötilassa. Saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin etyyliasetaatilla ja etyylieetterillä, ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 2,538 g otsikon yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena; sp. 165 - 170 °C (haj.). TLC (10-%:inen metanoli kloroformissa) Rf = 0,23; 25 [a]D = +7,0° (c = 1,2, kloroformi).
c) (S)-2-ftalimido-6-hydroksiheksaanihappo Liuosta, jonka muodostivat (+)-L-e-hydroksinorleu-siini [valmistettu julkaisun Bodanszky et ai., J. Med. Chem., 1978, 21, 1030 - 1035, menetelmän mukaisesti] 30 (1,030 g, 7,0 mmol) ja natriumkarbonaatti (745 mg, 7,0 \ mmol) vedessä (12 ml) , käsiteltiin N-karbetoksiftalimidil- lä (1,495 g, 7,0 mmol), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Liuos suodatettiin, jäähdytettiin 0 °C:seen ja tehtiin happamaksi 6 N kloorivetyhapolla, 35 jolloin saatiin valkoinen sakka. Kiinteä aine otettiin 20 106464 talteen suodattamalla ja kuivattiin tyhjössä 80 °C:ssa yhden tunnin ajan, jolloin saatiin 1,297 g otsikon yhdistettä; sp. 162 - 163 °C; [e]D = -35,7° (c = 1,3, metanoli) .
d) (S)-2-ftalimido-6,6-dimetoksiheksaanihappo, me-5 tyyliesteri
Lietettä, jonka muodostivat kohdan (c) tuote (3,752 g, 13,5 mmol) ja cesiumkarbonaatti (2,178 g, 6,7 mmol) dimetyyliformamidissa (44 ml), käsiteltiin metyyli-jodidilla (3,0 ml, 6,84 g, 48,2 mmol). Kun seosta oli 10 sekoitettu huoneenlämpötilassa 2 tuntia, se laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin peräkkäin vedellä, joka sisälsi pienen määrän natriumbisulfiittia, vedellä, 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suoda-15 tettiin ja tislattiin, jolloin saatiin välituote esteri värittömänä öljynä (3,825 g). Öljy' oli homogeeninen TLC:llä (1:1 asetonirheksaanit) Rf = 0,37.
-78 °C:ista oksalyylikloridin (1,37 ml, 2,00 g, 15,7 mmol) liuosta kuivassa metyleenikloridissa (58 ml) 20 käsiteltiin tipoittain kuivan dimetyylisulfoksidin (2,24 ml, 2,47 g, 31,6 mmol) liuoksella metyleenikloridissa (2 ml). 10 minuutin kuluttua edellä mainittu alkoholi-esterin (3,825 g, 13,1 mmol) liuos metyleenikloridissa (10 ml) lisättiin. Vielä 15 minuutin kuluttua lisättiin *, 25 trietyyliamiini (8,0 ml), ja seosta sekoitettiin > -78 °C:ssa 5 minuuttia, sitten lämmitettiin 0 °C:seen. Seos laimennettiin etyyliasetaatti/etyylieetterillä ja pestiin peräkkäin 1 N kloorivetyhapolla, vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suoda-30 tettiin ja tislattiin, jolloin saatiin raaka haluttu alde- ·. hydi. Öljy oli homogeeninen TLC:llä (1:1 asetoni:heksaa- nit) Rf = 0,48.
Edellä mainitun aldehydin liuosta metanolissa (17 ml) ja metyleenikloridissa (17 ml) käsiteltiin trime-35 tyyliortoformaatilla (1,7 ml), minkä jälkeen p-tolueeni- 21 106464 sulfonihappo monohydraatilla (180 mg) . Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia, sitten jakouutettiin etyyliasetaatilla ja 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja suolaliuok-5 sella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoitiin (Merck si-likageeli, 1:1 etyyliasetaatti:heksaanit), ja puhtaat tuo-tefraktiot kiteytettiin etyyliasetaatti/heksaaneista, jolloin saatiin analyyttisesti puhdas otsikon tuote (3,452 g, 10 ensimmäinen sato, ja 215 mg, toinen sato) valkoisina neulasina; sp. 69 - 70 °C. TLC (1:1 etyyliasetaatti:heksaa-nit) Rf = 0,35; [a]D = -27,4° (c = 1,5, kloroformi).
Anal, laskettu C17H21N06: C, 60,89; H, 6,31; N, 4,18 15 Todettu: C, 60,80; H, 6,32; N, 4,16 e) [S-(R* ,R*)]-2-[[2-ftalimido-4-(trifenyylimetok-si)-1-oksobutyyli]amino]-6,6-dimetoksiheksaanihappo, me-tyyliesteri
Kohdan (d) tuotteen (2,540 g, 7,57 mmol) lietettä 20 metanolissa (18 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilla (378 μΐ, 390 mg, 7,80 mmol). Seoksesta tuli homogeeninen 10 minuutissa. Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpö-tilassa 3 vuorokautta, saatu liete suodatettiin, tislattiin, lietettiin metyleenikloridiin, suodatettiin ja tis-\ 25 lättiin uudelleen, jolloin saatiin raaka välituote amiini värittömänä öljynä. Sillä välin kohdan (b) trietyyliamii-nisuolatuotteen (4,622 g, 7,80 mmol) liuosta metyleeniklo-ridissa (50 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaa-30 tiliä (3,519 g, 7,95 mmol). Seosta sekoitettiin 35 minuut-tia, käsiteltiin sitten edellä mainitun amiinin liuoksella metyleenikloridissa (15 ml) . 10 minuutin kuluttua 0 °C:ssa ja 2 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa, liuos jakouutettiin etyylieetterillä ja vedellä. Orgaaninen kerros pes-35 tiin 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja 22 106464 suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriurasulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoi-tiin (Merck silikageeli, 6:4 etyyliasetaatti:heksaanit), jolloin saatiin 3,580 g puhdasta otsikon yhdistettä val-5 koisena vaahtona. TLC (6:4 etyyliasetaatti:heksaanit) R£ = 0,32; [o]D = +26,2° (c = 0,6, kloroformi).
f) [S-(R*,R*)]-2-[(2-ftalimido-4-hydroksi-l-oksobu-tyyli)amino]-6,6-dixnetoksiheksaanihappo, metyyliesteri
Kohdan (e) tuotteen (5,420 g, 8,0 mmol) liuosta 10 metanolissa (60 ml) käsiteltiin p-tolueenisulfonihappo monohydraatilla (520 mg) . Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia, se jakouutettiin etyyliasetaatilla ja laimealla natriumbikarbonaatilla. Faasit erotettiin ja vesikerrosta uutettiin uudelleen etyyliasetaa-15 tiliä. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 8:2 etyyliasetaatti:heksaanit, minkä jälkeen 5-%:inen metanoli etyyliasetaatissa), jolloin saatiin 2,860 g otsi-20 kon tuotetta värittömänä öljynä. TLC (7:3 etyyliasetaatti :heksaanit) Rf = 0,26; [a]D = +18,7° (c = 1,3, kloroformi) .
g) [4S-(4a,7a,10a£)]-oktahydro-4-ftalimido-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]oksatsepiini-7-karboksyylihappo, me- *. 25 tyyliesteri
Kohdan (f) tuotteen (2,10 g, 4,95 mmol) liuosta metyleenikloridissa (100 ml) käsiteltiin AmberlystR 15 ioninvaihtohartsilla (240 mg, esi-pesty peräkkäin 6 N kloorivetyhapolla, vedellä, tetrahydrofuraanilla, sitten 30 metyleenikloridilla). Kun liuosta oli sekoitettu huoneen- \ lämpötilassa 2,5 tuntia, se suodatettiin, tislattiin ja flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 6:4 etyyliasetaatti :heksaanit, minkä jälkeen 100-%:inen etyyliasetaatti), jolloin saatiin 1,40 g otsikon tuotetta valkoisena 35 vaahtona.
23 106464 h) (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo
Natriumnitriitti (10,3 g, 280 mmol) lisättiin liuokseen, jonka muodostivat D-fenyylialaniini (30,0 g, 181 mmol) ja kaliumbromidi (73,5 g) rikkihapossa (2,5 N, 5 365 ml) , yhden tunnin aikana pitäen samalla reaktioseok- sen lämpötilan 0 °C:ssa. Seosta sekoitettiin vielä tunti 0 °C:ssa ja sitten yhden tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Reaktioliuosta uutettiin eetterillä, eetteri palautus-uutettiin vedellä, ja eetterikerros kuivattiin natriumsul-10 faatilla. Eetteri poistettiin tyhjössä, ja öljymäisen jäännöksen tislauksesta saatiin 25,7 g (R)-2-bromi-3-bent-seenipropaanihappoa; kp. 141 °C (73,33 Pa (0,55 mmHg)); [a]D = +14,5° (c = 2,4, kloroformi).
Seosta, jonka muodostivat tioetikkahappo (7 ml, 15 97,9 mmol) ja kaliumhydroksidi (5,48 g, 97,9 mmol) aseto- nitriilissä (180,5 ml), sekoitettiin käyttäen argonia suo-jakaasuna huoneenlämpötilassa 1 3/4 tunnin ajan. Seos jäähdytettiin jäähauteessa, ja (R)-2-bromi-3-bentseeni-propaanihapon (20,4 g, 89 mmol) liuos asetonitriilissä 20 (20 ml) lisättiin 10 minuutin jakson aikana. Reaktioseosta sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna huoneenlämpötilassa 5 tunnin ajan, suodatettiin ja asetonitriili poistettiin tyhjössä. Öljymäinen jäännös liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin ja pestiin 10-%:isella kaiiumbisulfaa-·. 25 tiliä ja vedellä. Etyyliasetaatin poistosta tyhjössä saa tiin 19,6 g raakatuotetta. Raakatuote puhdistettiin sen disykloheksyyliamiinisuolan kautta käyttäen isopropyyli-eetteriä liuottimena kiteytystä varten. (S)-2-(asetyyli-tio)bentseenipropaanihappo, disykloheksyyliamiinisuolan 30 analyyttinen näyte valmistettiin uudelleenkiteyttämällä etyyliasetaatista; sp. 146 - 147 °C; [a]D = -39,6° (c = 1,39, kloroformi).
Anal, laskettu C^H^OjS · C12H23N:lle: C, 68,11; H, 8,70; N, 3,45; S, 7,91 35 Todettu: C, 67,93; H, 8,71; N, 3,37; S, 7,94 24 106464
Vapaa happo regeneroitiin jakouuttamalla disyklo-heksyyliamiinisuola 5-%:isella kaliumbisulfaatilla ja etyyliasetaatilla, jolloin saatiin (S)-2-(asetyylitio)-bentseenipropaanihappo; [a]D = -70,1° (c = 1,91, kloro- 5 formi).
Anal, laskettu C1;1H1203S:lie: C, 58,91; H, 5,39; S, 14,30 Todettu: C, 58,73; H, 5,41; S, 14,53 i) [4S- [4a (R*) ,7a, 10aB] ] -oktahydro-4- [ [2- (asetyyli-10 tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1- b][l,3]oksatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (g) tuotetta (620 mg, 1,66 mmol) metanolissa (10 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilla (85 μΐ, 88 mg, 1,75 mmol), ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpöti-15 lassa 44 tuntia. Seos suodatettiin, ja kiinteä aine pestiin metanolilla. Suodos tislattiin, -trituroitiin mety-leenikloridilla, suodatettiin uudelleen ja tislattiin, jolloin saatiin raaka amiini sameana öljynä (noin 400 mg) .
Kylmää (0 °C) liuosta, jonka muodostivat (S)-2-20 (asetyylitio)bentseenipropaanihappo (410 mg, 1,83 mmol) ja trietyyliamiini (250 μΐ, 182 mg, 1,80 mmol) metyleeniklo-ridissa (10 ml) , käsiteltiin edellä mainitulla amiinilla (liuoksena 8 ml:ssa metyleenikloridia), minkä jälkeen bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium ·. 25 heksafluorifosfaatilla (808 mg, 1,83 mmol). Kirkasta, lä hes väritöntä liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 40 minuuttia ja sitten huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Seos jakouutettiin etyyliasetaatti/etyylieetterillä ja vedellä. Orgaaninen kerros pestiin peräkkäin 50-%:isella kylläisellä natrium-30 bikarbonaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin \ (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 60 - 70-%:inen etyyliasetaatti heksaaneissa) , jolloin saatiin 602 mg puhdasta otsikon tuotetta valkoisena vaahtona; TLC (6:4 etyy-35 liasetaatti:heksaanit) Rf = 0,27.
25 106464 j) [4S-[4a(R*),7a,10aB] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli) amino] -5-okso-7H-pyrido[2,1-b] - [1.3] oksatsepiini-7-karboksyylihappo 0 °C:ista kohdan (i) tuotteen (590 mg, 1,32 mmol) 5 liuosta metanolissa (10 ml, happi poistettu argonin kupli-tuksella) käsiteltiin 1 N natriumhydroksidilla (7 ml, happi poistettu argonin kuplituksella). Kun liuosta oli sekoitettu 15 minuuttia, se lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja sekoitusta jatkettiin käyttäen argonia suojakaasuna 10 vielä 4,5 tuntia. Seos tehtiin happamaksi 5-%:isella ka-liumbisulfaatilla, laimennettiin vedellä ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin noin 3 ml .-aan. Jäännös lietet-15 tiin etyyliasetaattiin ja pieneen määrään heksaania, ja saatu kiinteä aine otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 413 mg otsikon tuotetta; sp. 180,5 °C (haj.). TLC (2-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,39; [a]D = -37,6° (c = 0,36, metanoli).
20 HPLC: YMC S3 ODS kolonni (6,0 x 150 mm); eluoitiin 40-%:isella A:lla: 90 % vettä, 10 % metanolia, 0,2 % orto-fosforihappoa, ja 60-%:isella B:llä: 10 % vettä, 90 % metanolia, 0,2 % ortoforforihappoa; virtausnopeus 1,5 ml/min; detektio 220 nm:ssä; tR = 6,73 min (95,7 %) .
25 Anal, laskettu C20H28N2O4S · 0,12 etyyliasetaatille; C, 58,05; H, 6,24; N, 6,95; S, 7,96 Todettu:C, 58,23; H, 6,34; N, 6,83; S, 7,81
Esimerkki 2 [3R- [3a (S*) , 6a, 9aB] ] -heksahydro-3- [ (2-merkapto-l-30 okso-3-fenyylipropyyli)amino]-4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-b]- [1.3] tiatsiini-6-karboksyylihappo a) N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-kysteiini N,N' -bis [ (fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-kystiinin (4,658 g, 9,16 mmol) liuosta metanolissa (35 ml) käsitel-35 tiin 2 N rikkihapolla (23 ml), minkä jälkeen käsiteltiin « 26 106464 annoksittain sinkkipölyllä (2,442 g, 37,3 raraol). Seosta kuumennettiin 70 °C:ssa 1,5 tuntia, suodatettiin lämpimänä ja väkevöitiin kiertohaihduttimella. Jäljelle jäänyttä liuosta uutettiin etyylieetterillä ja eetteripitoinen uute 5 pestiin vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös (öljy) liuotettiin hiilitetrakloridiin, jäähdytettiin 0 °C:seen ja lisättiin kidealkio, jolloin saatiin hitaasti sakka. Kiinteä aine otettiin talteen suodattamalla ja 10 pestiin kylmällä hiilitetrakloridilla, jolloin saatiin 2,648 g tuotetta. Emäliuos tislattiin, flash-kromatogra-foitiin (Merck silikageeli, etyyliasetaatti, jonka jälkeen 4-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa), jolloin saatiin lisää tuotetta kiteytyksen jälkeen (246 mg). Tuotteen ko-15 konaissaanto oli 2,894 g. TLC (5-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,58.
b) S-asetyyli-N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L- kysteiini
Kohdan (a) tuotteen (2,70 g, 10,6 mmol) homogeenis-20 ta liuosta vedessä (30 ml, happi poistettu argonin kup-lituksen avulla), joka sisälsi kaliumbikarbonaattia (2,140 g, 21,4 mmol) käsiteltiin etikkahappoanhydridillä (8,0 ml, 8,66 g, 84,8 mmol). 10 minuutin kuluttua huoneenlämpötilassa seos tehtiin happamaksi 10-%:isella kloori-·, 25 vetyhapolla ja uutettiin etyylieetterillä. Etyylieetteri- uute pestiin kahdesti vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin, jolloin saatiin öljy. Jäännös atseotropoitiin kolme kertaa tolueenilla ja kahdesti etyylieetteri/heksaanilla, minkä 30 jälkeen öljy kiteytyi. Jäännös trituroitiin etyylieet-·, teri/heksaanilla ja kiinteä aine otettiin talteen suodat tamalla, jolloin saatiin 2,19 g puhdasta otsikon tuotetta. TLC (5-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,56.
27 1 0 6 4 6 4 c) (S)-2-[[N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli-S-asetyy-li-L-kysteinyyli]amino]-6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyy-liesteri (S)-2-ftalimido-6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyy-5 liesterin [valmistettu kuten on kuvattu esimerkissä 1(d), 1,158 g, 3,45 mmol] lietettä metanolissa (12 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilla (176 μΐ, 182 mg, 3,63 mmol). Seoksesta tuli homogeeninen 10 minuutissa. Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 67 tuntia, saatu 10 liete suodatettiin, tislattiin, lietettiin metyleeniklori-diin, suodatettiin ja tislattiin uudelleen, jolloin saatiin raaka välituote amiini värittömänä öljynä. Sillä välin kohdan (b) tuotteen (1,185 g, 3,98 mmol) osittaista lietettä metyleenikloridissa (14 ml) käsiteltiin trietyy-15 liamiinilla (555 μΐ, 403 mg, 3,98 mmol). Nyt homogeeninen liuos jäähdytettiin 0 °C:seen, käsiteltiin edellä mainitulla amiinilla liuoksena metyleenikloridissa (7 ml), käsiteltiin sitten bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyli-amino)fosfonium heksafluorifosfaatilla (1,762 g, 3,98 20 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2,5 tuntia, sitten huoneenlämpötilassa 45 minuuttia. Liuotin poistettiin, ja jäännös jakouutettiin etyyliasetaatilla ja vedellä. Orgaaninen kerros pestiin 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natrium-• 25 sulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kro- matografoitiin (Merck silikageeli, 65:35 etyyliasetaatti :heksaanit), jolloin saatiin 1,15 g puhdasta otsikon tuotetta valkoisena vaahtona. TLC (75:25 etyyliasetaatti :heksaanit) Rf = 0,42.
3 0 Analyysi lask. C22H32N208S: lie: C, 54,53; H, 6,66; N, 5,78; S, 6,62 Todettu: C, 54,79; H, 6,72; N, 5,77; S, 6,95 d) [3R-(3a,6a,9aB)]-heksahydro-3-[[(fenyylimetok-si)karbonyyli]amino]-4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-b][l,3]tiat- 35 siini-6-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (c) tuotteen (1,040 g, 2,15 mmol) liuosta, josta oli happi poistettu (argon-kuplitus), metanolissa 28 106464 (12 ml) O °C:ssa käsiteltiin natriummetoksidilla (25 pai-no-%:inen metanolissa, 490 μΐ, 463 mg, 2,14 mmol). 20 minuutin kuluttua seos vaimennettiin kylläisellä ammonium-kloridilla, laimennettiin vedellä ja uutettiin etyyliase-5 taatilla. Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös liuotettiin uudelleen mety-leenikloridiin (200 ml) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa AmberlystR 15 ioninvaihtohartsin kanssa (820 mg, esipes-10 ty peräkkäin 6 N kloorivetyhapolla, vedellä, tetrahydrofu-raanilla, sitten metyleenikloridilla). 3 tunnin kuluttua liuos suodatettiin, tislattiin ja flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 65:35 etyyliasetaatti:heksaanit), jolloin saatiin 757 mg otsikon tuotetta värittömänä öljynä. 15 TLC (75:25 etyyliasetaatti:heksaanit) Rf = 0,58.
e) [3R- (3a,6a,9afi)]-heksahydro-3-amino-4-okso-2H,6H-pyrxdo[2,1-b][1,3]tiatsiini-6-karboksyylihappo, me-tyyliesteri
Kohdan (d) tuotteen (752 mg, 1,99 mmol) liuosta 20 kuivassa metyleenikloridissa (15 ml) käsiteltiin huoneenlämpötilassa joditrimetyylisilaanilla (620 μΐ, 872 mg, 4,36 mmol). Kun seosta oli sekoitettu 3 tuntia, se vaimennettiin vedellä, käsiteltiin pienellä määrällä 10-%:ista kloorivetyhappoa ja uutettiin etyylieetterillä. Kerrokset ·, 25 erotettiin, ja eetteripitoinen kerros palautusuutettiin vedellä. Yhdistetyt vesikerrokset tehtiin emäksisiksi (pH 13) 10-%:isella natriumhydroksidilla ja uutettiin kahdesti metyleenikloridilla. Yhdistetyt metyleenikloridiuut-teet kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja tis-30 lättiin, jolloin saatiin 290 mg raakaa otsikon tuotetta *. värittömänä öljynä. TLC (10-%:inen metanoli metyleeniklo ridissa) Rt = 0,38.
f) [3R- [3a (S*) , 6a, 9aB] ] -heksahydro-3-[ [2- (asetyyli-tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli] amino]-4-okso-2H,6H-pyrido- 35 [2,1-b][1,3]tiatsiini-6-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kylmää (0 °C) liuosta, jonka muodostivat (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo (294 mg, 1,31 mmol) ja 29 106464 trietyyliamiini (180 μΐ, 131 mg, 1,29 mmol) metyleeniklo-ridissa (8 ml) , käsiteltiin kohdan (e) tuotteella (287 mg, 1,17 mmol) liuoksena 6 ml:ssa metyleenikloridia. Bentso-triatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksa-5 fluorifosfaatti (575 mg, 1,30 mmol) lisättiin sitten. Kir kasta, lähes väritöntä liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1 tunnin ajan ja sitten huoneenlämpötilassa 1 tunnin ajan. Liuotin poistettiin kiertohaihdutuksella, ja jäännös jako-uutettiin etyyliasetaatilla ja 5-%:isella kaliumbisul-10 faatilla. Orgaaninen kerros pestiin peräkkäin vedellä, 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 1:1 etyyliasetaattirheksaanit), jol-15 loin saatiin 412 mg puhdasta otsikon tuotetta valkoisena vaahtona. TLC (1:1 etyyliasetaatti:heksaanit) Rf = 0,27; [a]D = -107,0° (c = 0,6, kloroformi).
g) [3R- [3a (S*) , 6a, 9aB] ] -heksahydro-3- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-20 b][1,3]tiatsiini-6-karboksyylihappo
Kohdan (f) tuotteen (406 mg, 0,90 mmol) 0 °C:ista liuosta metanolissa (5 ml, happi poistettu argon-kuplituk-sella) käsiteltiin 1 N natriumhydroksidilla. (5 ml, happi poistettu argon-kulpituksella). Kun liuosta oli sekoitettu ·, 25 yksi tunti, se lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja sekoi tusta jatkettiin käyttäen argonia suojakaasuna vielä 1,25 tuntia. Seos tehtiin happamaksi 5-%:isella kaliumbisul-faatilla, laimennettiin vedellä ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä ja suolaliuok-30 sella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoitiin kahdesti (Merck silikageeli, 2-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) . Tuotefraktiot tarkistettiin HPLC:llä. Halutut fraktiot yhdistettiin, tislattiin ja atseotropoitiin kahdesti 35 etyyliasetaatilla. Jäännös otettiin talteen pieneen mää- 30 106464 rään etyyliasetaattia ja trituroitiin heksaaneilla. Liuotin tislattiin ja jäännös lietettiin heksaaneihin, tislattiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 98,3 mg otsikon tuotetta kovana valkoisena vaahtona. TLC (2-%:inen 5 etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,46; [a]D = -57,0° (c = 0,4, kloroformi).
HPLC: YMC S3 ODS kolonni (6,0 x 150 mm); eluoitiin 40-%:isella A:11a: 90 % vettä, 10 % metanolia, 0,2 % orto-fosforihappoa, ja 60-%:isella B:llä: 10 % vettä, 90 % melo tanolia, 0,2 % ortofosforihappoa; virtausnopeus 1,5 ml/ min, detektio 220 nm:ssä; tR = 8,33 min (95,0 %) .
Anal, laskettu C18H22N204S2 · 0,2 etyyliasetaatille: C, 54,79; H, 5,77; N, 6,80; S, 15,56 Todettu: C, 54,59; H, 6,04; N, 6,59; S, 15,16 15 Esimerkki 3 [4S-[4a(R*) ,7a,10a£]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli) amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) [S- (R* ,R*) ] -2- [ [2-f talimido-4- (asetyylitio) -1- 20 oksobutyyli]amino]-6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyylies-teri
Kylmää (0 °C) trifenyylifosfiinin (1,143 g, 4,36 mmol) liuosta tetrahydrofuraanissa (20 ml) käsiteltiin di-isopropyyliatsidodikarboksylaatilla (860 μΐ, 883 mg, 4,37 ·, 25 mmol). 5 minuutin kuluessa kehittyi valkoinen liete. 30 minuutin kuluttua [S-(R*,R*)-2-[(2-ftalimido-4-hydroksi-l-oksobutyyli]amino]-6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyylies-terin [valmistettu kuten esimerkissä 1(f) on kuvattu, 928 mg, 2,19 mmol] liuos tetrahydrofuraanissa (8 ml) li-30 sättiin, minkä jälkeen lisättiin puhdas tioetikkahappo (312 μΐ, 332 mg, 4,36 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1,25 tuntia, sitten jakouutettiin 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja etyyliasetaatilla. Etyyliase-taattiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natrium-35 sulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös liuotet- 31 106464 tiin uudelleen etyyliasetaattiin ja käsiteltiin pienellä määrällä heksaania, jolloin trifenyylifosfiinioksidi saostui. Seos suodatettiin, ja suodos flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 65:35 etyyliasetaatti .-heksaanit) , jol-5 loin saatiin 894 mg otsikon tuotetta värittömänä öljynä. TLC (75:25 etyyliasetaatti:heksaanit) Rf = 0,43.
b) [4S-(4a,7a,10a£)]-oktahydxo-4-ftalxmido-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepixnx-7-karboksyylihappo, me-tyyliesteri 10 Kohdan (a) tuotteen (814 mg, 1,65 mmol) liuosta, josta oli happi poistettu (argon-kuplitus) , metanolissa (15 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin natriummetoksidilla (25 painollinen metanolissa, 1,05 ml, 4,6 mmol). 5 minuutin kuluttua seos vaimennettiin kylläisellä ammoniumkloridillä, 15 laimennettiin vedellä ja uutettiin etyyliasetaatilla.
Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös liuotettiin uudelleen metyleenikloridiin (180 ml) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa AmberlystR 15 20 ioninvaihtohartsin kanssa (285 mg, esipesty peräkkäin 6 N kloorivetyhapolla, vedellä, tetrahydrofuraanilla, sitten metyleenikloridilla) . 46 tunnin kuluttua liuos suodatettiin, tislattiin ja flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, 1:1 etyyliasetaatti:heksaanit), jolloin saatiin 25 314 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona. Vaahdon tri- turoinnista etyylieetterillä saatiin otsikon tuote valkoisena kiinteänä aineena; sp. 147 - 148 °C. TLC (75:25 etyyliasetaatti : heksaanit ) Rf = 0,56; [a]D = -143,2° (c =0,6, kloroformi).
30 c) [4S- [4a (R*) ,7a,10a£] ] -oktahydro-4-[ [2-(asetyylx- : tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1- b][1,3]txatsepxinx-7-karboksyylxhappo, metyylxesteri
Kohdan (b) tuotetta (280 mg, 0,72 mmol) metanolissa (8 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilla (42 μΐ, 35 43,3 mg, 0,86 mmol), ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpö- 32 106464 tilassa 67 tuntia. Seos suodatettiin, ja kiinteä aine pestiin metanolilla. Suodos tislattiin, trituroitiin mety-leenikloridilla, suodatettiin uudelleen ja tislattiin, jolloin saatiin raaka amiini keltaisena öljynä (noin 5 205 mg).
Kylmää (0 °C) liuosta, jonka muodostivat (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo (178 mg, 0,79 mmol) ja trietyyliamiini (111 μΐ, 80 mg, 0,80 mmol) metyleeniklori-dissa (3 ml) , käsiteltiin edellä mainitulla amiinilla 10 (liuoksena 7 ml:ssa metyleenikloridia), minkä jälkeen bentsotriatsol-l-yylioksi(dimetyyliamino)fosfonium heksa-fluorifosfaatilla (353 mg, 0,80 mmol). Liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1 tunnin ajan ja sitten huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Liuotin tislattiin ja jäännös jakouutettiin 15 etyyliasetaatilla ja 5-%:isella kaliumbisulfaatilla. Or gaaninen kerros pestiin peräkkäin vedellä, 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin. Jäännös flash-kromatografoitiin (Merck silikagee-20 li, 1:1 etyyliasetaattitheksaanit), jolloin saatiin 272 mg puhdasta otsikon tuotetta valkoisena vaahtona.
d) [4S-[4a(R*) , 7o, 10afi] ]-oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo • 25 Kohdan (c) tuotteen (22 7 mg, 0,4 9 mmol) huoneenläm- pötilaista liuosta metanolissa (5 ml, happi poistettu ar-gon-kuplituksella) käsiteltiin 1 N natriumhydroksidilla (8 ml, happi poistettu argon-kuplituksella). Kun seosta oli sekoitettu 1 tunti, se tehtiin happamaksi 10-%:isella 30 kloorivetyhapolla, laimennettiin vedellä ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin. Saatu kiinteä aine lietettiin etyyliasetaattiin ja otettiin talteen suodattamalla. Suo-35 dos flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli, l-%:inen 33 106464
etikkahappo etyyliasetaatissa) ja halutut fraktiot yhdistettiin, tislattiin ja trituroitiin etyyliasetaatti/etyy-lieetterillä, jolloin saatiin lisää kiinteää ainetta. Kiinteät aineet yhdistettiin, jolloin saatiin yhteensä 5 150 mg otsikon tuotetta; sp. 216 - 217 °C (haj.) . TLC
(2-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,56; [a]D = -72,6° (c = 0,28, dimetyyliformamidi).
HPLC: YMC S3 ODS kolonni (6,0 x 150 mm); eluoitiin 40-%:isella A:lla: 90 % vettä, 10 % metanolia, 0,2 % orto-10 fosforihappoa, ja 60-%:isella B:llä: 10 % vettä, 90 % metanolia, 0,2 % ortofosforihappoa; virtausnopeus 1,5 ml/ min; detektio 220 nm:ssä; tR = 9,48 min (97,4 %) .
Anal, laskettu C19H24N204S2 · 0,14 etyyliasetaatille: C, 55,82; H, 6,02; N, 6,66; S, 15,24 15 Todettu:C, 55,53; H, 6,01; N, 6,63; S, 14,91
Esimerkki 4 [4S-[4a(R*> ,7a, 9aB] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok-so-3-fenyylipropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]ok-satsepiini-7-karboksyylihappo 2 0 a) (S) -2-ftalimido-5-okso-5- (fenyylimetoksi)pentaa- nihappo
Gamma-bentsyyli-L-glutamaatin (17,49 g, 73,70 mmol) liuokseen vesipitoisessa (180 ml) natriumkarbonaatissa (7,81 g, 73,70 mmol) ja dioksaanissa (120 ml) lisättiin • 25 N-karbetoksiftalimidi (16,50 g, 75,27 mmol, 1,02 ekv.).
Kun reaktioseosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 4,5 tuntia, se tehtiin happamaksi 6 N kloorivetyhapolla (30 ml) ja uutettiin etyyliasetaattiin (2 x 400 ml) . Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet pestiin 50-%:isella suola-30 liuoksella (200 ml) ja suolaliuoksella (200 ml), kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin, väkevöitiin ja kui-vattiin tyhjössä, jolloin saatiin raakaöljy (41,4 g) . Raa-kajäännöksen liuokseen etyylieetterissä (100 ml) lisättiin disykloheksyyliamiini (14 ml) . Kun seos oli seissyt jää-35 kaapissa yön yli, etyylieetteri poistettiin kiertohaihdut- 34 106464 tamalla ja öljymäinen jäännös kiteytettiin etyyliasetaat-ti/heksaanista. Saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin heksaanilla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 21,21 g otsikon tuotetta disykloheksyyliamiinisuo-5 lana. Tämän disykloheksyyliamiinisuolan suspensio etyyliasetaatissa (200 ml) pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaa-tilla (3 x 50 ml), suolaliuoksella (50 ml) ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 13,5 g otsikon tuotetta valkoisena vaahtona. TLC: 10 (3-%:inen etikkahappo 9:1 etyyliasetaattirheptaanissa) Rf = 0,30.
b) (S)-2-ftalimido-5-okso-5-(fenyylimetoksi)pentaa-nihappo, metyyliesteri
Kohdan (a) tuotteen (13,22 g, 36,0 mmol) ja cesium-15 karbonaatin (5,86 g, 18,0 mmol) liuokseen dimetyyliforma-midissa (100 ml) lisättiin jodimetaani (8,1 ml, 129,6 mmol, 3,6 ekv.). Keltaista liuosta sekoitettiin 2,5 tuntia ja sitten jakouutettiin etyyliasetaatilla (300 ml) ja vedellä (250 ml). Etyyliasetaattiuute pestiin 5-%:isella 20 natriumbikarbonaatilla (200 ml) ja suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 13,68 g keltaista öljyä. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 5 x 20 cm silikageelikolonnilla eluoiden 30-%:isella etyyliasetaatti/heksaanilla. Halutut | 25 fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 10,0 g otsikon tuotetta. TLC (1:1 etyyliasetaatti:heksaa-ni) Rf = 0,45.
c) (S) -2-ftalimido-4- (karboksi) butaanihappo, metyyliesteri 30 Kohdan (b) tuotteen (10,0 g, 26,22 mmol) liuokseen etyyliasetaatissa (115 ml) lisättiin 20-%:inen palladium-hydroksidi hiilellä -katalyytti (1,90 g), ja saatua suspensiota sekoitettiin vetyilmakehässä (ilmapallo) 2,5 tunnin ajan. Seos suodatettiin, pestiin huolellisesti etyy-35 liasetaatilla, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin 35 106464 saatiin 7,29 g raakaa otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 137 - 138 °C. TLC (10-%:inen metanoli/me-tyleenikloridi) Rf = 0,43.
d) (S)-2-ftalimido-5-okso-5-(etyylitio)pentaanihap-5 po, metyyliesteri
Kohdan (c) tuotteen (7,27 g, 24,95 mmol) liuokseen metyleenikloridissa (125 ml) 0 °C:ssa käyttäen argonia suojakaasuna lisättiin etaanitioli (4,81 ml, 64,92 mmol, 2,6 ekv.), 4-dimetyyliaminopyridiini (609 mg, 4,99 mmol, 10 0,2 ekv.) ja etyyli-3-(3-dimetyyliamino)propyyli karbo- diimidi, vetykloridisuola (5,27 g, 27,47 mmol, 1,1 ekv.). Kun reaktioseosta oli sekoitettu 0 °C:ssa 2 tuntia ja huoneenlämpötilassa 1 tunti, se väkevöitiin, laimennettiin etyyliasetaatilla (400 ml) ja pestiin 5-%:isella kaliumbi-15 sulfaatilla (200 ml) , kylläisellä natriumbikarbonaatilla (200 ml) ja suolaliuoksella (200 ml), kuivattiin natrium-sulfaatilla, suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 8,30 g otsikon tuotetta raakaöljynä. TLC (1:1 etyyliasetaatti:heksaani) Rf = 0,47.
20 e) (S)-2-ftalimido-5-oksopentaanihappo, metyyli- esteri.
Suspensiota, jonka muodostivat kohdan (d) tuote (8,30 g, 24,75 mmol) ja 10-%:inen palladium hiilellä (1,24 g) asetonitriilissä (150 ml), käyttäen argonia suo-: 25 jakaasuna käsiteltiin tipoittain trietyylisilaanilla (7,91 ml, 49,5 mmol, 2 ekv.) . Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 45 minuuttia, se suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä. Raakajäännös puhdistettiin kromatografiällä 5 x 25 cm silikageelikolonnilla eluoiden 30 25-%:isella etyyliasetaatti/heksaanilla (4 1), minkä jäl- *; keen 35-%:isella etyyliasetaatti/heksaanilla (2 1). Halu- tut fraktiot yhdistettiin, jolloin saatiin 5,60 g otsikon tuotetta. TLC (1:1, etyyliasetaatti:heksaani) Rf = 0,32.
f) (S)-2-ftalimido-5,5-dimetoksipentaanihappo, me-35 tyyliesteri
Kohdan (e) tuotteen (5,60 g, 20,34 mmol) liuosta ·. ' metanolissa (60 ml) ja metyleenikloridissa (40 ml) käsi- 36 106464 teltiin trimetyyliortoformaatilla {3,8 ml, 34,59 mmol, 1,7 ekv.) ja p-tolueenisulfonihappo monohydraatilla (280 mg). Kun reaktioseosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia, se vaimennettiin 2 ml:11a kylläistä natriumbikar-5 bonaattia, väkevöitiin ja jakouutettiin etyyliasetaatilla (400 ml) ja vedellä (100 ml). Etyyliasetaattiuute pestiin kylläisellä natriumbikarbonaatilla (100 ml) , suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin raakaöljyksi. Raakajäännös puhdistet-10 tiin kromatografiällä 5 x 20 cm silikageelikolonnilla eluoiden 30-%:isella etyyliasetaatti/heksaanilla (2 1).
Halutut fraktiot yhdistettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 6,20 g otsikon tuotetta. TLC (1:1, etyyliasetaatti:heksaani) Rf = 0,40.
15 g) (S)-2-amino-5,5-dimetoksipentaanihappo, metyyli- esteri
Kohdan (f) tuotteen (6,16 g, 19,18 mmol) liuosta metanolissa (125 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilla (0,98 ml, 20,14 mmol, 1,05 ekv.). Kun seosta oli 20 sekoitettu huoneenlämpötilassa 6 vuorokautta, saatu liete suodatettiin, väkevöitiin, trituroitiin metyleenikloridis-sa, suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 3,57 g otsikon tuotetta sameana öljynä. TLC (10-%:inen metanoli metyleenikloridissa) Rf = 0,41.
: 25 h) [S- (R* ,R*) ] -2- [ [2-ftalimido-4- (trifenyylimetok- si)-1-oksobutyyli]amino]-5,5-dimetoksipentaanihappo, me-tyyliesteri (S)-2-ftalimido-4-(trifenyylimetoksi)butaanihappo, trietyyliamiinisuolan [valmistettu kuten esimerkissä 1(b) 30 on kuvattu, 11,62 g, 19,60 mmol, 1,05 ekv.] liuosta metyleenikloridissa (100 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin bentsotriat-sol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluori-fosfaatti-reagenssilla (8,67 g, 19,60 mmol, 1,05 ekv.). Seosta sekoitettiin 45 minuuttia 0 °C:ssa, sitten käsitel-35 tiin kohdan (g) tuotteen (3,57 g, 18,67 mmol) liuoksella • 37 106464 metyleenikloridissa (50 ml) . 10 minuutin kuluttua 0 °C:ssa ja 2 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa liuos jakouutet-tiin etyyliasetaatilla (300 ml) ja vedellä (100 ml) . Etyy-liasetaattikerros pestiin 50-%:isella kylläisellä natrium-5 bikarbonaatilla (100 ml) ja suolaliuoksella (100 ml) , kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 5 x 25 cm silika-geelikolonnilla eluoiden 1:1 etyyliasetaatti/heksaanilla, jolloin saatiin 8,58 g otsikon tuotetta. TLC (1:1, etyyli-10 asetaatti :heksaani) Rf = 0,20.
i) [S-(R* ,R*)]-2-1(2-ftalimido-4-hydroksi-l-oksobu-tyyli)amino]-5,5-dimetoksipentaanihappo, metyyliesteri
Kohdan (h) tuotteen (8,58 g, 12,91 mmol) liuosta metanolissa (100 ml) käsiteltiin p-tolueenisulfonihappo 15 monohydraatilla (850 mg) . Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 3,5 tuntia, se jakouutettiin etyyliasetaatilla (200 ml) ja 10-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla (100 ml) . Faasit erotettiin ja vesikerrosta uutettiin uudelleen etyyliasetaatilla (100 ml) . Yhdistetyt 20 etyyliasetaattiuutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 5 x 20 cm silikageelikolon-nilla eluoiden 8:2 etyyliasetaatti:heksaanilla (1 1), minkä jälkeen l-%:isella metanolilla etyyliasetaatissa (2 1) .
: 25 Halutut fraktiot yhdistettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 4,33 g otsikon tuotetta. TLC (8:2 etyyliasetaatti:heksaani) Rf = 0,21.
j) [4S- (4α,7a,9a£) ] -oktahydro-4-ftalimido-5-okso-pyrrolo[2,1-b][l,3]oksatsepiini-7-karboksyylihappo, metyy- 30 liesteri I Kohdan (i) tuotteen (1,89 g, 4,48 mmol) liuosta metyleenikloridissa (90 ml) käsiteltiin AmberlystR 15 ioninvaihtohartsilla (400 mg, esipesty peräkkäin 6 N kloo-rivetyhapolla, vedellä, tetrahydrofuraanilla ja metyleeni-35 kloridilla). Kun liuosta oli sekoitettu huoneenlämpötilas- « 38 106464 sa 3 tuntia, se suodatettiin, väkevöitiin ja flash-kroma-tografoitiin 5 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden 6:4 etyyliasetaattirheksaanilla, jolloin saatiin 1,51 g otsikon tuotetta valkoisena vaahtona. TLC (8:2 etyyliasetaat-5 ti:heksaani) Rf = 0,32.
k) [4S-(4α,7α,9a£)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrro-lo[2,l-b][l,3]oksatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli-esteri
Kohdan (j) tuotteen (764 mg, 2,13 mmol) liuosta 10 metanolissa (15 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilia (109 μΐ, 2,24 mmol, 1,05 ekv.), ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 vuorokautta. Seos suodatettiin, ja kiinteä aine pestiin metanolilla. Suodos väkevöitiin, tri-turoitiin metyleenikloridilla, suodatettiin uudelleen ja 15 väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 2 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden 3-%:isella metanolilla metyleenikloridissa (3 1), minkä jälkeen 10-%:isella metanolilla metyleenikloridissa (1 1) . Halutut fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 451 mg otsi-20 kon tuotetta öljynä. TLC (10-%:inen metanoli metyleenikloridissa) Rf = 0,18.
l) [4S-[4a(R*) ,7a,9aB]]-oktahydro-4-[[2-(asetyyli-tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]oksatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri ; 25 (S)-2-asetyylitio-3-bentseenipropaanihapon disyklo- heksyyliamiinisuolan [valmistettu kuten esimerkissä 1 (h) on kuvattu, 870 mg, 2,14 mmol, 1,14 ekv.] suspensio etyyliasetaatissa (70 ml) pestiin 5-%:isella kaiiumbisulfaatilla (5 x 20 ml), 50-%:isella suolaliuoksella (20 ml) ja 30 suolaliuoksella (20 ml) , kuivattiin (vedetön natriumsul-1 faatti), suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä yön yli, jolloin saatiin (S)-2-(asetyylitio)bentseenipro-paanihappo.
Tämä vapaa happo liuotettiin kuivaan metyleeniklo-35 ridiin (10 ml) , jäähdytettiin 0 °C-.seen (jää-suola-haude) « 39 106464 ja käsiteltiin trietyyliamiinilla (298 μΐ, 2,14 mmol), minkä jälkeen kohdan (k) tuotteen (430 mg, 1,88 mmol) liuoksella metyleenikloridissa (10 ml) ja bentsotriatsol-1-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaa-5 tilla (947 mg, 2,14 mmol, 1,14 ekv.). Saatua liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 50 minuuttia, sitten huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin, laimennettiin etyyliasetaatilla (150 ml), pestiin 0,5 N kloorivetyhapol-la (50 ml) , vedellä (50 ml), kylläisellä natriumbikarbo-10 naatilla (50 ml) , vedellä (50 ml) ja suolaliuoksella, kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raakatuote adsorboitiin CeliteR:en ja kromatografoitiin silikageelikolonnilla (5 x 10 cm) , eluoiden 60-%:isella etyyliasetaatti/heksaanilla (3 1).
15 Halutut fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 779 mg puhdasta otsikon tuotetta. TLC (6:4, etyyliasetaatti :heksaani) Rf = 0,17.
m) [4S- [4a (R*) ,7a,9a£] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]ok-20 satsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (1) tuotteen (754 mg, 1,74 mmol) liuosta metanolissa (15 ml) puhdistettiin argonilla 30 minuuttia, jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-suola-haude), sitten käsiteltiin tipoittain aikaisemmin puhdistetulla (argon, 30 mi-.. 25 nuuttia) 1,0 N natriumhydroksidin (12 ml) liuoksella säi- lyttäen argonin kuplituksen koko lisäyksen ja reaktion ajan. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 3 tuntia, tehtiin happamaksi 0 °C:ssa 5-%:isella kaliumbisulfaatilla pH-arvoon 1, sitten uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 30 100 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 50-%:isella suolaliuoksella (100 ml), suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoinen vaahto. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 35 2,5 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden etyyliasetaa- • . .
40 106464 tiliä (500 ml) ja 0,3-%:isella etikkahapolla etyyliasetaatissa (1 1). Halutut fraktiot väkevöitiin, tislattiin kloroformilla ja kuivattiin tyhjössä yön yli 50 °C:ssa fosfo-ripentoksidilla, jolloin saatiin otsikon tuote valkoisena 5 vaahtona; sp. 88 - 92 °C; [o]D = -63,8° (c = 1,0, metano-li) . TLC (l-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,24.
^-NMR: 400 MHZ; CDC13: δ 1,80 - 2,31 (m, 7H) , 3,10 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 4,20 (m, 10 1H), 4,49 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 7,19 - 7,30 (m, 5H), 7,52 (d, 1H, J = 6 Hz).
13C-NMR: 100 MHz; CDCl3: δ 26,4; 32,0; 32,6; 41,2; 44,2; 53,0; 59,4; 70,6; 89,47; 126,9; 128,4; 129,3; 137,4; 171,2; 171,6; 174,8.
15 Anal, laskettu C18H22N205S · 0,85 H20:lle: C, 54,91; H, 6,07; N, 7,12; S, 8,14 Todettu: C, 54,85; H, 5,68; N, 7,18; S, 8,14 HPLC: tR = 13,5 min (96,7 %, UV 220); YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 30-%:inen B:A - 100-%:inen B:A, 25 20 minuutin linearinen gradientti (A = 90-%:inen vesi/metano- li + 0,2-%:inen ortofosforihappo, B = 90-%:inen metanoli/ vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo) virtausnopeus 1,5 ml/ min.
Esimerkki 5 j 25 [4S- [4a (R*) , 7a, 9aB] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok- so-3-fenyylipropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiat-sepiini-7-karboksyylihappo a) [S- (R* ,R*) ] -2- [ [2-f talimido-4- (asetyylitio) -1-oksobutyyli]amino]-5,5-dimetoksipentaanihappo, metyyli- 30 esteri ' 0 °C:ista trifenyylifosfiinin (1,26 g, 4,79 mmol, 1,5 ekv.) liuosta kuivassa tetrahydrofuraanissa (15 ml) käsiteltiin di-isopropyyliatsodikarboksylaatilla (943 μΐ, 4,79 mmol). Saatua valkoista lietettä sekoitettiin 30 mi-35 nuuttia ja käsiteltiin sitten [S- (R*, R*) ]-2-[ (2-ftalimido- 41 106464 4-hydroksi-l-oksobutyyli)amino]-5,5-dimetoksipentaanihap-po, metyyliesterin [valmistettu kuten on kuvattu esimerkissä 4(i), 1,35 g, 3,20 mmol] liuoksella kuivassa tetra-hydrofuraanissa (15 ml), minkä jälkeen puhtaalla tiolie-5 tikkahapolla (343 μΐ, 4,79 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1,5 tuntia ja sitten jakouutettiin etyyliasetaatilla (150 ml) ja 50-%:isella natriumbikarbonaatilla (100 ml) . Etyyliasetaattikerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin, väkevöi-10 tiin, adsorboitiin CeliteR:en ja kuivattiin tyhjössä. Raaka materiaali puhdistettiin kromatografiällä 2,5 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden 1:1 etyyliasetaatti theksaa-nilla (li) ja 6:4 etyyliasetaatti:heksaanilla (1 1). Halutut fraktiot yhdistettiin, väkevöitiin ja kuivattiin 15 tyhjössä, jolloin saatiin 1,35 g otsikon tuotetta öljynä. TLC (8:2, etyyliasetaatti:heksaani) Rf '= 0,42.
b) [S- (R*,R*) ] -2- [ (2-ftalimido-4-merkapfco-l-oksobu-tyyli)amino]-5,5-dimetoksipentaanihappo, metyyliesteri
Kohdan (a) tuotteen (1,33 g, 2,76 mmol) liuosta, 20 josta happi oli poistettu (argon-kuplitus), metanolissa (25 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin natriummetoksidilla (25 pai-no-%:inen metanolissa, 1,52 ml, 6,63 mmol, 2,4 ekv.). 3 minuutin kuluttua seos vaimennettiin kylläisellä amraonium-kloridilla (3 ml), laimennettiin vedellä ja uutettiin ; ' 25 etyyliasetaatilla (100 ml) . Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä (50 ml) ja suolaliuoksella (50 ml) , kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 5 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden 1:1 (3 1), minkä jälkeen 8:2 (2 1) etyyli-30 asetaatti:heksaanilla. Halutun tuotteen sisältävät frak-tiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 853 mg otsikon yhdistettä öljynä. TLC (8:2, etyyliasetaatti:hek-saani) Rf = 0,43.
42 106464 c) [4S-(4a,7a,9a£)]-oktahydro-4-ftalimido-5-okso-pyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepxini-7-karboksyylihappo, metyy-liesteri
Kohdan (b) tuotteen (847 mg, 1,93 mmol) liuosta 5 metyleenikloridissa (20 ml) käsiteltiin AmberlystR 15 ioninvaihtohartsilla (700 mg, esipesty peräkkäin 6 N kloo-rivetyhapolla, vedellä, tetrahydrofuraanilla ja metyleeni-kloridilla). Kun liuosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 17 tuntia, se suodatettiin, väkevöitiin ja flash-kroma-10 tografoitiin 2,5 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden 1:1 etyyliasetaatti:heksaanilla, jolloin saatiin 691 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona. TLC (8:2 etyyliasetaatti :heksaani) Rf = 0,48.
d) [4S-(4a,7a,9a£)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrro- 15 lo[2,l-b][1,3]tiatsepiinx-7-karboksyylihappo, metyylieste- ri
Kohdan (c) tuotetta (899 mg, 2,40 mmol) metanolissa (17 ml) käsiteltiin hydratsiini monohydraatilla (122 /xl, 2,52 mmol, 1,05 ekv.), ja liuosta sekoitettiin huoneenläm-20 pötilassa 3 vuorokautta. Seos suodatettiin, ja kiinteä aine pestiin metanolilla. Suodos väkevöitiin, trituroitiin metyleenikloridilla, suodatettiin uudelleen, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 572 mg otsikon tuotetta sameana öljynä. TLC (10-%:inen metanoli metylee-• 25 nikloridissa) Rf = 0,13.
e) [4S-[4a(R*) ,7a,9aB]]-oktahydro-4-[[2-(asetyyli-txo)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]fcxatsepxxni-7-karboksyylxhappo, metyyliesteri (S)-2-(asetyylitiö)bentseenipropaanihapon disyklo-30 heksyyliamiinisuolan [valmistettu kuten esimerkissä 1 (h) on kuvattu, 1,045 g, 2,58 mmol, 1,1 ekv.] suspensio etyyliasetaatissa (100 ml) pestiin 5-%:isella kaiiumbisulfaatilla (5 x 25 ml), 50-%:isella suolaliuoksella (25 ml) ja suolaliuoksella (25 ml) , kuivattiin (vedetön natriumsul-35 faatti), suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä 43 106464 yhden tunnin ajan, jolloin saatiin (S)-2-(asetyylitio)-bentseenipropaanihappo.
Tämä vapaa happo liuotettiin kuivaan metyleeniklo-ridiin (10 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-suola-haude) 5 ja käsiteltiin trietyyliamiinilla (360 μΐ, 2,58 mmol), bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaatilla (1,141 g, 2,58 mmol) ja sitten kohdan (d) tuotteen (572 mg, 2,34 mmol) liuoksella metyleeni-kloridissa (10 ml). Saatua liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 10 30 minuuttia, sitten huoneenlämpötilassa 2,5 tuntia.
Reaktioseos väkevöitiin, laimennettiin etyyliasetaatilla (100 ml), pestiin 0,5 N kloorivetyhapolla (50 ml), vedellä (50 ml) , kylläisellä natriumbikarbonaatilla (50 ml) , vedellä (50 ml) ja suolaliuoksella (50 ml), kuivattiin (ve-15 detön magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raakatuote adsorboitiin CeliteR:en ja kromato-grafoitiin silikageelikolonnilla (5 x 10 cm) eluoiden 25-%:isella (5 1), 30-%:isella (2 1), 35-%:isella (2 1) ja 40-%:isella (2 1) etyyliasetaatti/heksaanilla. Sekoitetut 20 fraktiot yhdistettiin ja kromatografoitiin uudelleen eluoiden samalla gradientilla. Halutut fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 490 mg puhdasta otsikon tuotetta. TLC (1:1, etyyliasetaattirheksaani) Rf = 0,16.
• 25 f) [4S-[4a(R*),7e,9aB]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l- okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]-tiatsepixni-7-karboksyylihappo
Kohdan (e) tuotteen (490 mg, 1,09 mmol) liuosta metanoli:tetrahydrofuraanissa (8 ml:4 ml) puhdistettiin 30 argonilla 30 minuutin ajan, jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-! suola-haude), sitten käsiteltiin tipoittain aikaisemmin puhdistetulla (argon, 30 minuuttia) 1,0 N natriumhydroksi-diliuoksella (10 ml) säilyttäen argon-kuplituksen koko lisäyksen ja reaktion ajan. Reaktioseosta sekoitettiin 35 0 °C:ssa 3 tuntia, tehtiin happamaksi 0 °C:ssa 5-%:isella 44 106464 kaliumbisulfaatilla pH-arvoon 2, sitten uutettiin etyyliasetaatilla {3 x 75 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella (75 ml), kuivattiin (vedetön nat-riumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja 5 kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoinen vaahto (489 mg). Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 2,5 x 15 cm silikageelikolonnilla eluoiden 9:1 etyyliasetaatti :heptaanilla (400 ml) ja 0,5-%:isella etikkahapolla 9:1 etyyliasetaatti:heptaanissa (1 1). Halutut fraktiot väke-10 voitiin, tislattiin metyleenikloridi/heptaanilla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 428 mg tuotetta. Puhdas aine uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatti/metanoli/hek-saani-seoksesta. Kiteet otettiin talteen suodattamalla, pestiin huolellisesti etyylieetterillä ja kuivattiin tyh-15 jössä yön yli 40 °C:ssa fosforipentoksidilla, jolloin saatiin 305 mg otsikon tuotetta valkoisina kiteinä; sp. 206 -208 °C; [a]D = -96,3° (c = 1,0, metanoli) . TLC (5-%:inen etikkahappo 9:1 etyyliasetaatti:heptaanissa) Rf = 0,29.
1H-NMR: 400 MHz; CDC13 w/ 2 tippaa CD3OD: δ 1,94 (m, 20 1H), 2,02 (d, 1H, J = 9 Hz), 2,08 (m, 1H), 2,20 - 2,55 (m, 4H) , 2,95 (m, 1H) , 3,08 (m, 1H) , 3,23 (m, 1H) , 3,27 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 4,54 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 4,60 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 7,18 - 7,34 (m, 5H), 7,63 (d, 1H, J = 6 Hz).
13C-NMR: 100 MHz; CDC13 w/ 2 tippaa CD3OD: δ 27,6; • 25 31,1; 32,1; 32,9; 41,1; 44,0; 52,8; 60,4; 62,2; 126,77; 128,3; 129,0; 137,4; 170,2; 171,4; 172,6.
Anal, laskettu C18H22N204S2 - 0,08 H20:lle: C, 54,60; H, 5,64; N, 7,07; S, 16,19 Todettu: C, 54,65; H, 5,54; N, 7,02; S, 15,80
30 HPLC: tR = 13,0 min (98,8 %, UV 220); YMC S-3 ODS
) (C-18) 6,0 X 150 mm; 40-%:inen B:A - 100-%:inen B:A, 25 minuutin lineaarinen gradientti (A = 90-%:inen vesi/meta-noli + 0,2-%:inen ortofosforihappo; B = 90-%:inen metano-li/vesi + -0,2-%:inen ortofosforihappo); virtausnopeus 35 1,5 ml/min.
« 45 106464
Esimerkki 6 [4S- [4α (R*) ,7α, 9a£) ] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]-tiatsepiini-7-karboksyylihappo 5 Esimerkin 5 tuote valmistettiin myös seuraavasti: a) N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-homoseriini N-(bentsyylioksikarbonyylioksi)sukkinimidi (23,57 g, 94,58 mmol) lisättiin liuokseen, jonka muodostivat L-homoseriini (10,24 g, 85,98 mmol) ja natriumbikarbonaatti 10 (7,95 g, 94,58 mmol, 1,1 ekv.) veden (100 ml) ja asetonin (100 ml) seoksessa. Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Asetoni poistettiin alennetussa paineessa (kiertohaihdutin), ja vesiliuos pestiin metyleenikloridillä (2 x 75 ml) . Vesikerros tehtiin sitten happamaksi pH-15 arvoon 2 lisäämällä 6 N kloorivetyhappoa ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 250 ml). Yhdistetyt etyyliasetaat-tikerrokset pestiin vedellä (2 x 100 ml) ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin, väkevöi-tiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 19,54 g otsi-20 kon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena. TLC (etyyliasetaatti :n-butanoli : et ikkahappo: vesi; 2:1:1:1) Rf = 0,74.
b) N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-O-(trifenyylime-tyyli)-L-homoseriini
Kohdan (a) tuotteen (19,51 g, 77,04 mmol) suspen-: ' 25 sioon kloroformissa (250 ml) lisättiin trietyyliamiini (12,35 ml, 88,59 mmol, 1,15 ekv.). Homogeenista seosta käsiteltiin trifenyylimetyylikloridilla (24,70 g, 88,59 mmol) ja reaktioseosta sekoitettiin 3 tuntia. Reaktio-seos väkevöitiin käyttäen alennettua painetta (kierto-30 haihdutin), jakouutettiin etyyliasetaatilla (400 ml) ja *· 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (200 ml). Etyyliasetatti- kerros pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (200 ml), vedellä (2 x 200 ml) ja suolaliuoksella (200 ml), kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jol-35 loin saatiin 45,4 g ainetta.' Jäännös kromatografoitiin 46 106464 10 x 30 cm silikageelikolonnilla eluoiden 6:4 etyyliasetaatti :heksaanilla (2 1), minkä jälkeen l-%:isella etikka-hapolla 8:2 etyyliasetaatti:heksaanissa, jolloin saatiin 8,76 g puhdasta otsikon yhdistettä.
5 c) (S)-2-amino-5,5-dimetoksipentaanihappo, metyyli- esteri (S)-2-ftalimido-5,5-dimetoksipentaanihappo, metyy-liesteriä [valmistettu kuten esimerkissä 4(f) on kuvattu, 3,35 g, 10,43 mmol] metanolissa (70 ml) käsiteltiin hyd-10 ratsiini monohydraatilla (531 μΐ, 10,95 mmol, 1,05 ekv.), ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 6 vuorokautta. Seos suodatettiin, ja kiinteä aine pestiin metanolilla. Suodos väkevöitiin, trituroitiin metyleenikloridilla, suodatettiin uudelleen, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, 15 jolloin saatiin 1,89 g otsikon tuotetta sameana öljynä. TLC (l0-%:inen metanoli metyleenikloridissa) Rf = 0,39.
d) [S- (R1,R1) ] -2-[ [2— [ [ (fenyylimetoksi)karbonyyli] -amino]-4-(trifenyylimetoksi)-1-oksobutyyli]amino]-5,5-di-metoksipentaanihappo, metyyliesteri 20 Kohdan (b) tuotteen (5,28 g, 10,65 mmol, 1,1 ekv.) liuosta kuivassa metyleenikloridissa (50 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin trietyyliamiinilla (1,48 ml, 10,65 mmol), minkä jälkeen kohdan (c) tuotteella (1,85 g, 9,68 mmol) kuivassa metyleenikloridissa (30 ml) ja bentsotriatsoi-1-yyliok-. 25 sitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaatilla (4,71 g, 10,65 mmol, 1,1 ekv.). Seosta sekoitettiin 1 tunti 0 °C:ssa ja sitten sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Reaktioseos jakouutettiin etyyliasetaatilla (300 ml) ja vedellä (150 ml) . Etyyliasetaattikerros pes-30 tiin 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla : (200 ml) ja suolaliuoksella (2 x 200 ml), kuivattiin mag nesiumsulfaatilla, suodatettiin, väkevöitiin, adsorboitiin CeliteR:en ja puhdistettiin 7 x 20 cm silikageelikolonnilla eluoiden 40-%:isella etyyliasetaatti/heksaanilla (3 1), 35 minkä jälkeen 50-%:isella (2 1) etyyliasetaatti/heksaanil- • , « 47 106464 la, jolloin saatiin 4,84 g otsikon tuotetta. TLC (etyyliasetaatti rheksaani, 1:1) Rf = 0,22.
e) [S- (R*,R*) ] -2- [ [2- [ [ (fenyylimetoksi) karbonyyli] -amino]-4-hydroksi-l-oksobutyyli]amino]-5,5-dimetoksipen- 5 taanihappo, metyyliesteri
Kohdan (d) tuotteen (4,80 g, 7,18 mmol) liuosta metanolissa (70 ml) käsiteltiin p-tolueenisulfonihappo monohydraatilla (300 mg). Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 2 tuntia, se jakouutettiin etyyliase-10 taatilla (400 ml) ja 25-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla (200 ml) . Faasit erotettiin ja vesikerrosta uutettiin uudelleen etyyliasetaatilla (100 ml). Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös 15 puhdistettiin kromatografiällä 5 x 20 cm silikageelikolon-nilla eluoiden 7:3 (1 1), 8:2 (1 1) etyyliasetaatti:hek- saanilla, minkä jälkeen 10-%:isella metanolilla etyyliasetaatissa (2 1). Halutut fraktiot yhdistettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 2,92 g otsikon 20 tuotetta. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 8:2) Rf = 0,09.
f) [S- (R*,R*) ] -2- [ [2- [ [ (fenyylimetoksi) karbonyyli] -amino]-4-(asetyylitio)-1-oksobutyyli]amino]-5,5-dimetoksi-pentaanihappo, metyyliesteri
Trifenyylifosfiinin (3,06 g, 11,65 mmol, 1,7 ekv.) :* 25 0 °C:ista liuosta kuivassa tetrahydrofuraanissa (40 ml) käsiteltiin di-isopropyyliatsodikarboksylaatilla (2,29 ml, 11,65 mmol). Saatua valkoista lietettä sekoitettiin 30 minuuttia ja käsiteltiin sitten kohdan (e) tuotteen (2,92 g, 6,85 mmol) liuoksella kuivassa tetrahydrofuraa-30 nissa, minkä jälkeen puhtaalla tiolietikkahapolla (833 μΐ, \ 11,65 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia ja sit ten jakouutettiin etyyliasetaatilla (300 ml) ja 50-%^sella natriumbikarbonaatilla (200 ml). Etyyliasetaattikerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, 35 suodatettiin, väkevöitiin, adsorboitiin CeliteR:en ja kui- « 48 106464 vattiin tyhjössä. Raaka materiaali puhdistettiin kromato-grafiällä 5 x 20 cm silikageelikolonnilla eluoiden 1:1 etyyliasetaattirheksaanilla (3 1). Halutut fraktiot yhdistettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saa-5 tiin 2,58 g otsikon tuotetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena. TLC (etyyliasetaatti-.heksaani, 8:2) Rf = 0,40.
g) [S- (R* ,R*) ] -2- [ [2- [ [ (fenyylimetoksi) karbonyyli] -amino] -4-merkapto-l-oksobutyyli] amino] -5,5-dimetoksipen-taanihappo, metyyliesteri 10 Kohdan (f) tuotteen (2,56 g, 5,28 mmol) liuosta, josta happi oli poistettu (argon-kuplitus), metanolissa (50 ml) 0 °C:ssa käsiteltiin natriummetoksidilla (25 pai-no-%:inen metanolissa, 3,62 ml, 15,84 mmol, 3 ekv.). 10 minuutin kuluttua seos vaimennettiin kylläisellä ammonium-15 kloridilla (40 ml), laimennettiin vedellä (100 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (300 ml). Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä (100 ml) ja suolaliuoksella (150 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 5 x 20 cm silika-20 geelikolonnilla eluoiden 1:1 (31) etyyliasetaatti:heksaa-nilla. Haluttu yhdiste yhdistettiin väkevöitiin, jolloin saatiin 1,99 g otsikon tuotetta öljynä. TLC (etyyliasetaatti :heksaani, 8:2) Rf = 0,43.
h) [4S-(4α,7a,9a£)]-oktahydro-4-[[(fenyylimetoksi)- . 25 karbonyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7- karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (g) tuotteen (2,16 g, 4,88 mmol) liuosta metyleenikloridissa (50 ml) käsiteltiin AmberlystR ionin-vaihtohartsilla (620 mg, esipesty peräkkäin 6 N kloorive-30 tyhapolla, vedellä, tetrahydrofuraanilla ja metyleeniklo-: ridilla). Kun liuosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa 3 tuntia, se suodatettiin, väkevöitiin ja flash-kromatogra-foitiin 5 x 20 cm silikageelikolonnilla eluoiden 6:4 etyyliasetaatti.: heksaanilla, jolloin saatiin 1,34 g otsikon 49 106464 tuotetta valkoisena vaahtona. TLC (etyyliasetaatti:heksaa-ni, 8:2) Rf = 0,51.
i) [4S- (4a, 7 a, 9a_B) ] -4-amino-oktahydro-5-oksopyrro-lo[2,l-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyylieste-5 ri
Kohdan (h) tuotteen [1,20 g, 3,17 mmol, tislattu tolueenin kanssa kolme kertaa ja kuivattu tyhjössä yön yli] liuosta kuivassa metyleenikloridissa (40 ml) käsiteltiin joditrimetyylisilaanilla (632 μΐ, 4,44 mmol, 1,4 10 ekv.) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 1,5 tuntia. Seos vaimennettiin vedellä (50 ml), käsiteltiin 10-%:isella kloorivetyhapolla (5 ml, pH 1) ja pestiin etyyliasetaatilla (50 ml) . Vesifaasia käsiteltiin 10-%:isella natriumhydroksidilla ja uutettiin 15 metyleenikloridilla (kolme kertaa). Yhdistetyt uutteet kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 396 mg otsikon tuotetta kirkkaana öljynä. TLC (10-%:inen metanoli metyleenikloridissa) Rf = 0,10.
20 j) [4S-[4a (R*) , 7a,9a£] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto-1- okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]-tiatsepiini-7-karboksyylihappo (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihapon liuosta kuivassa metyleenikloridissa käsiteltiin trietyyliamiinil-t' 25 la. Kohdan (i) tuotteen liuos metyleenikloridissa lisättiin sitten, minkä jälkeen bentsotriatsol-l-yylioksitris-(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaatti. Saatua liuosta käsiteltiin kuten esimerkissä 5 (e) on kuvattu, jolloin saadaan [4S- [4a (R*) , 7a, 9aS] ] -oktahydro-4 - [ [2- (ase-30 tyylitio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-oksopyrrolo- [2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri.
Tämän metyyliesterituotteen suspensio metanoli : tet-rahydrofuraanissa, joka on puhdistettu argonilla, jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin aikaisemmin puhdistetulla 35 1,0 N natriumhydroksidin liuoksella. Käsittelystä, kuten on kuvattu esimerkissä 5(f), saatiin otsikon tuote.
» 50 106464
Esimerkki 7 [4S-[4a(R*) ,7α, 9aB] ] -oktahydro-4- [ (3-sykloheksyyli-2-merkapto-l-oksopropyyli) amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 5 a) [4S-(4a,7a,9aB)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrro- lo[2,l-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyylieste-ri, p-tolueenisulfonihapposuola [4S- (4a,7a,9aE)]-oktahydro-4-[[(fenyylimetoksi)kar-bonyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-kar-10 boksyylihappo, metyyliesterin [valmistettu kuten on kuvattu esimerkissä 6(h), 738 mg, 1,95 mmol, tislattu kolme kertaa tolueenin kanssa ja kuivattu tyhjössä yön yli] liuosta kuivassa metyleenikloridissa (25 ml) käsiteltiin joditrimetyylisilaanilla (389 μΐ, 2,73 mmol, 1,4 ekv.) ja 15 sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suoja-kaasuna. Kahden tunnin kuluttua reaktioseosta käsiteltiin lisämäärillä joditrimetyylisilaania (40 μΐ) ja sekoitettiin 30 minuuttia. Seos vaimennettiin metanoli:dioksaanin (9:1; 9,7 ml) 0,4 M kloorivetyhappoliuoksella ja sekoitet-20 tiin 5 minuuttia. Haihtuvat aineet poistettiin tyhjössä (Rotovap) ja jäännös jakouutettiin vedellä ja etyyliasetaatilla. Erotettu etyyliasetaattikerros pestiin vedellä, ja yhdistetty vesifaasi pestiin etyyliasetaatilla. Vesi-faasi jäähdytettiin 0 °C:sen ja pH säädettiin arvoon 10,3 25 (tarkkailtiin pH-mittarilla) 1,0 N natriumhydroksidilla. Vesifaasia uutettiin metyleenikloridilla (kolme kertaa) ja vesifaasi tehtiin sitten kylläiseksi suolalla ja uutettiin uudelleen metyleenikloridilla (kolme kertaa). Yhdistetyt uutteet kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin, väke-30 voitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 455 mg .· vapaata amiinia kirkkaana öljynä. TLC (10-%:inen metanoli metyleenikloridissa) Rf = 0,28.
Tämä vapaa amiini liuotettiin etyyliasetaattiin (5 ml) ja käsiteltiin p-tolueenisulfonihappo monohydraatin 35 liuoksella (354 mg, 1 ekv.) etyyliasetaatissa (1 ml). Vai- i 51 106464 koiset kiteet muodostuivat heti. Kiteet varastoitiin jääkaappiin (5 °C) 30 minuutiksi ja otettiin sitten talteen suodattamalla pesten hyvin etyylieetterillä ja kuivaten yön yli tyhjössä, jolloin saatiin 639 mg otsikon tuotetta 5 valkoisena kiinteänä aineena.
b) (S)-2- (asetyylitio)-3-sykloheksyy1ipropaanihap-po, disykloheksyyliamiinisuola D-fenyylialaniinin (5,20 g, 31,5 mmol) liuos 2 M kloorivetyhapossa (75 ml) 500 ml:n Parr-hydrauspullossa 10 puhdistettiin typpikaasulla ja käsiteltiin platinaoksidil-la (640 mg, 2,82 mmol). Hydraus aloitettiin paineessa Pc = 292,3 kPa (42,4 psi) suljetussa pullossa, jota täytettiin uudelleen tarpeen mukaan. Vedyn kokonaiskulutus oli 575,0 kPa (83,4 psi) (teoriassa 577,8 kPa (83,8 psi)) 6 tunnin 15 aikana. Reaktioseos puhdistettiin typpikaasulla ja suoda tettiin CeliteR:n läpi pesten suodatinkakkua kuumalla vedellä. Suodos väkevöitiin noin 40 ml:aan ja varastoitiin 5 °C:ssa yön yli. Saadut kiinteät aineet otettiin talteen, pestiin pienellä määrällä kylmää vettä ja kuivattiin tyh-20 jössä 60 °C:ssa, jolloin saatiin 5,46 g (R)-2-amino-3-syk-loheksyylipropaanihappo, vetykloridisuolaa.
Tämän vetykloridisuolan (2,81 g, 13,5 mmol) sekoitettuun liuokseen 2,5 N rikkihapossa (32 ml) huoneenlämpö-tilassa lisättiin kaliumbromidi (10,0 g, 84 mmol). Reak-:· 25 tioseos jäähdytettiin -4 °C:seen, ja kiinteä natriumnit- riitti (1,75 g, 25,4 mmol) lisättiin annoksittain yhden tunnin aikana säilyttäen lämpötilan alle 0 °C:ssa. Reaktioseos vaahtosi ja öljyä alkoi muodostua. Kun lisäys oli viety loppuun, reaktioseosta sekoitettiin 1 tunnin ajan ja 30 lämmitettiin sitten huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin ·. vielä tunti. Reaktioseosta uutettiin sitten kahdesti eet terillä, uutteet kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 2,3 g (R)-2-bro-mi-3-sykloheksyylipropaanihappoa värittömänä öljynä.
52 106464
Kaliumtioasetaatin (1,07 g, 9,36 mmol) sekoitettuun lietteeseen kuivassa asetonitriilissä (15 ml) 0 °C:ssa käyttäen argonia suojakaasuna lisättiin (R) -2-bromi-3-syk-loheksyylipropaanihapon (2,20 g, 9,36 mmol) liuos aseto-5 nitriilissä (3 ml) 10 minuutin aikana. Reaktioseos lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 16 tuntia. Saatu liete suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin, pestiin kerran 5-%:isel-la kaliumbisulfaattiliuoksella, kuivattiin (natriumsul-10 faatti) ja haihdutettiin. Öljymäinen keltainen jäännös (2,21 g) liuotettiin eetteriin ja käsiteltiin disyklohek-syyliamiinin liuoksella (1,8 ml, 9,0 mmol) 5 ml:ssa eetteriä. Pullon pinnan naarmuttamisesta lasisauvalla saatiin 2,38 g valkoista kiteistä otsikon tuotetta; sp. 159 - 15 161 °C, [a]D = -41,2° (c = 1,0, kloroformi).
Anal, laskettu C23H41NS03: lie: C, 67,11; H, 10,04; N, 3,40; S, 7,79 Todettu: C, 66,95; H, 10,12; N, 3,25; S, 7,89 c) [4S-[4o(R*> ,7a,9a£] ] -oktahydro-4-[ [2-(asetyyli-20 tio)-3-sykloheksyyli-l-oksopropyyli]amino]-5-oksopyrrolo- [2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri Yhdisteen (S)-2-(asetyylitio)-3-sykloheksyylipro-paanihappo, disykloheksyyliamiinisuolan (285 mg, 0,69 mmol, 1,05 ekv.) suspensio etyyliasetaatissa (15 ml) 25 pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (3 x 10 ml), 50-%:isella suolaliuoksella (10 ml) ja suolaliuoksella (10 ml) , kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaatti) , suodatettiin, väkevöitiin, tislattiin metyleenikloridin kanssa (kahdesti) ja kuivattiin tyhjössä yhden tunnin ajan, jol-30 loin saatiin (S)-2-(asetyylitio)-3-sykloheksyylipropaani- happo öljynä.
Tämä vapaa happo liuotettiin kuivaan metyleeniklo-ridiin (5 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen (jäähaude) ja käsiteltiin trietyyliamiinilla (96 μΐ, 0,69 mmol, 1,05 ekv.), 35 sitten kohdan (a) tuotteella (275 mg, 0,66 mmol), trietyy- • 53 106464 liamiinilla (92 μΐ, 0,66 mmol) ja lopuksi bentsotriatsol-1-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaa-tilla (305 mg, 0,69 mmol). Saatua liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1 tunnin ajan, sitten huoneenlämpötilassa 2 tun-5 nin ajan. Reaktioseos väkevöitiin, laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (20 ml), 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla (20 ml), suolaliuoksella (20 ml) , kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaatti) , suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. 10 Raakatuote adsorboitiin CeliteE:en ja kromatografoitiin silikageelikolonnilla (2,5 x 10 cm), eluoiden 40-%:isella (1 1) etyyliasetaatti/heksaanilla. Halutut fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 246 mg puhdasta otsikon tuotetta. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 8:2) Rf = 15 0,53.
d) [4S-[4o(R*) ,7a,9aB] ] -oktahydro-4- [ (3-sykloheksyy-li-2-merkapto-l-oksopropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,Ib]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyyl±happo
Kohdan (c) tuotteen (245 mg, 0,54 mmol) liuosta 20 metanolissa (6 ml), joka oli puhdistettu argonilla 30 minuutin ajan, jäähdytetty 0 °C:seen, käsiteltiin tipoittain aikaisemmin puhdistetulla (argon, 30 minuuttia) 1,0 N nat-riumhydroksidin (5 ml) liuoksella säilyttäen argon-kupli-tuksen koko lisäyksen ja reaktion keston ajan. Reaktιοί;’ 25 seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia, tehtiin se happa maksi 0 °C:ssa 5-%:isella kaliumbisulfaatilla pH-arvoon 2, sitten uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 20 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 50-%:isella suolaliuoksella (20 ml) ja suolaliuoksella (20 ml) , kuivattiin (vedetön 30 magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin kui- *. viin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 2,5 x 10 cm « silikageelikolonnilla eluoiden 7:3 etyyliasetaatti:heptaa-nilla (300 ml) ja l-%:isella etikkahapolla 7:3 etyyliasetaatti :heptaanissa (500 ml) . Halutut fraktiot väkevöitiin, 35 tislattiin metyleenikloridin kanssa ja kuivattiin tyhjös- • 54 . 106464 sä, jolloin saatiin 172 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona; [a]D = -116,9° (c = 0,5, metanoli) . TLC (l-%:inen etikkahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,35.
XH-NMR: 400 MHz; CDCl3: δ 0,91 (m, 2H) , 1,22 (m, 5 3H) , 1,44 (m, 1H) , 1,55 (m, 1H) , 1,68 (m, 5H) , 1,83 (m, 1H) , 1,97 (m, 2H) , 2,12 (m, 1H), 2,19 - 2,40 (m, 3H) , 2,53 {m, 1H), 2,96 (ra, 1H), 3,38 (m, 2H), 4,62 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 4,70 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 6,4 Hz).
13C-NMR: 100 MHz; CDC13: δ 26,0; 26,1; 27,5; 31,5; 10 32,3; 33,0; 33,3; 35,2; 40,7; 43,0; 52,9; 60,6; 62,5; 170,9; 172,7; 175,3.
Anal, laskettu C18H28N204S2: lie: C, 53,98; H, 7,05; N, 6,99; S, 16,01 Todettu: C, 53,97; H, 7,18; N, 6,84; S, 15,75
15 HPLC: tR = 16 rain (>99 %, UV 217); YMC S-3 ODS
(C-18) 6,0 x 150 mm; 50 - 100-%:inen B:A, 25 minuutin lineaarinen gradientti (A = 90-%:inen vesi/metanoli + 0,2-%:inen ortofosforihappo; B = 90-%:inen metanoli/vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo); virtausnopeus 1,5 ml/min.
20 Esimerkki 8 [4S-[4a(R*) , 7a,9aB]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l-ok-soheksyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,l-b][1,3]tiafcsepiini-7-karboksyylihappo a) (S)-2-bromiheksaanihappo ; 25 Kaliumbromidi (15,9 g, 133 mmol) lisättiin sekoi tettuun D-norleusiinin (5,0 g, 38 mmol) liuokseen 2,5 N rikkihapossa (77 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseos jäähdytettiin -10 °C:seen, ja kiinteä natriumnitriitti (3,94 g, 57 mmol) lisättiin annoksittain säilyttäen lämpö-30 tilan välillä -10 - -5 °C. Kun lisäys oli suoritettu, ! vaahtomaista reaktioseosta sekoitettiin 1 tunnin ajan ja sitten lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin vielä tunti. Sitten reaktioseosta uutettiin kahdesti eetterillä, eetteriuutteet pestiin kerran vedellä, kuivattiin 35 (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 3,3 g raakaa otsikon tuotetta.
* » 106464 bb b) (S)-2-(asetyylitio)heksaanihappo, disykloheksyy-liamiinisuola
Sekoitettuun kaliumtioasetaatin (2,11 g, 18,5 mmol) lietteeseen 50 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä huoneenlämpö-5 tilassa käyttäen argonia suojakaasuna lisättiin kohdan (a) tuotteen (3,27 g, 16,8 mmol) liuos 26 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin 5 tuntia. Saatu liete suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin uudelleen etyylieetteriin, pestiin kerran 5-%:isella kaliumbisul-10 faattiliuoksella ja kerran suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin eetteriin (64 ml) ja käsiteltiin disykloheksyyliamiinilla (3,4 ml, 16,8 mmol). Eetteripitoinen liuos väkevöitiin tyhjössä ja trituroitiin heksaaneista, jolloin saatiin 15 valkoinen kiinteä aine, joka uudelleenkiteytettiin etyyli-eetteri/heksaaneista, jolloin saatiin otsikon tuote. Emä-liuos väkevöitiin ja uudelleenkiteytettiin kahdesti, jolloin saatiin kokonaissaanto 2,2 g otsikon tuotetta; sp. 145 - 147 °C; [a]D = -33,8° (c = 1,08, kloroformi).
20 c) [4S-[4tc(R*) ,7a,9aB]]-oktahydro-4-[ [2-(asetyyli- tio)-1-oksoheksyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiat-sepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (b) disykloheksyyliamiinisuolatuotteen (255 mg, 0,69 mmol, 1,05 ekv.) suspensio etyyliasetaatissa :* 25 (15 ml) pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (3x5 ml) ja suolaliuoksella (10 ml) , kuivattiin (vedetön magnesium-sulfaatti) , suodatettiin, väkevöitiin, tislattiin mety-leenikloridin kanssa (kahdesti) ja kuivattiin tyhjössä yhden tunnin ajan, jolloin saatiin vapaa happo öljynä.
30 Tämä öljy liuotettiin kuivaan metyleenikloridiin *. (6 ml) , jäähdytettiin 0 °C:seen (jäähaude) ja käsiteltiin trietyyliamiinilla (96 μΐ, 0,69 mmol, 1,05 ekv.), sitten [4S-(4α,7a,9aS)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri, p-to-35 lueenisulfonihapposuolalla [valmistettu kuten on kuvattu • 56 106464 esimerkissä 7(a), 275 mg, 0,66 mmol], trietyyliamiinilla (92 μΐ, 0,66 mmol) ja lopuksi bentsotriatsol-l-yylioksi-tris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaatilla (305 mg, 0,69 mmol). Saatua liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 5 yhden tunnin ajan, sitten huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin, laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (20 ml), 50-%:isel-la kylläisellä natriumbikarbonaatilla (20 ml), suolaliuoksella (20 ml) , kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaatti), 10 suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raakatuote adsorboitiin CeliteR:en ja kromatografoitiin silikageelikolon-nilla (2,5 x 10 cm) eluoiden 40-%:isella (1 1) etyyliase-taatti/heksaanilla. Halutut fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 258 mg puhdasta otsikon tuotetta. 15 TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 8:2) Rf = 0,54.
d) [4S-[4a(R*) ,7a,9a£] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-oksoheksyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,l-b][1,3]tiatsepiini- 7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen (255 mg, 0,54 mmol) liuosta 20 metanolissa (5 ml), joka oli puhdistettu argonilla 30 minuuttia, jäähdytetty 0 °C:seen, käsiteltiin tipoittain aikaisemmin puhdistetulla (argon, 30 minuuttia) 1,0 N nat-riumhydroksidin liuoksella (5 ml) säilyttäen argon-kupli-tuksen koko lisäyksen ja reaktion keston ajan. Reaktio-j' 25 seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia, tehtiin happamaksi 0 °C:ssa 5-%:isella kaliumbisulfaatilla pH-arvoon 2, sitten uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 20 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 50-%:isella suolaliuoksella (20 ml) ja suolaliuoksella (20 ml) , kuivattiin (vedetön 3 0 magnesiumsulfaatti) , suodatettiin ja haihdutettiin kui- *. viin. Jäännös puhdistettiin kromatografiällä 2,5 x 10 cm silikageelikolonnilla eluoiden 7:3 etyyliasetaatti:heptaa-nilla (300 ml) ja l-%:isella etikkahapolla 7:3 etyyliasetaatti :heptaanissa (500 ml) . Halutut fraktiot väkevöitiin, 35 tislattiin metyleenikloridilla ja kuivattiin tyhjössä, 57 106464 jolloin saatiin 170 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona; [a]D = -135,1° (c = 0,5, metanoli) . TLC (l-%:inen etik-kahappo etyyliasetaatissa) Rf = 0,32.
1H-NMR: 400 MHz; CDC13: δ 0,89 (t, 3H, J = 7 Hz), 5 1,32 (m, 4H) , 1,73 (m, 1H) , 1,96 (τη, 2H) , 2,00 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 2,11 (m, 1H) , 2,32 (m, 3H) , 2,52 (m, 1H) , 2,98 (m, 1H), 3,32 (m, 2H), 4,61 (t, 1H, J = 7,1 Hz), 4,72 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 7,63 (d, 1H, J = 6,4 Hz).
13C-NMR: 100 MHz; CDC13: 6 13,8; 22,2; 27,6; 29,2; 10 31,4; 32,6; 33,1; 35,3; 43,0; 52,8; 60,5; 62,42; 170,7; 172,5; 174,0.
Anal, laskettu C15H2404N4S20 * 0,08 H20:lle: C, 49,79; H, 6,73; N, 7,74; S, 17,72 Todettu: C, 49,90; H, 6,92; N, 7,63; S, 17,57
15 HPLC: tR = 9,4 min (>99 %, UV 220); YMC S-3 ODS
(C-18) 6,0 x 150 mm; 50 - 100-%:inen B:A, 25 minuutin lineaarinen gradientti (A = 90-%:inen vesi/metanoli + 0,2-%:inen ortofosforihappo; B = 90-%:inen metanoli/vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo); virtausnopeus 1,5 ml/min.
20 Esimerkki 9 [4S- [4a (R*) , 7a, 9aB] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok-so-4-metyylipentyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiat-sepiini-7-karboksyylihappo a) (S)-2-bromi-4-metyylipentaanihappo : 25 Kaliumbromidi (9,5 g, 80 mmol) lisättiin sekoitet- tuun D-leusiinin (3,0 g, 23 mmol) liuokseen 2,5 N rikkihapossa (47 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseos jäähdytettiin -10 °C:seen, ja kiinteä natriumnitriitti (2,4 g, 34 mmol) lisättiin annoksittain säilyttäen lämpötilan välillä 30 -10 - 5 °C. Kun lisäys oli suoritettu, reaktioseosta se- * koitettiin 1 tunnin ajan ja lämmitettiin sitten huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin vielä tunti. Reaktioseosta uutettiin sitten kahdesti eetterillä, eetteriuutteet pestiin kerran vedellä, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suo-35 datettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 2,7 g raakaa otsikon tuotetta.
t 106464 58 b) (S)-2-(asetyylitio)-4-metyylipentaanihappo, di-sykloheksyyliamiinisuola
Kaliumtioasetaatin (1,7 g, 15,0 mmol) sekoitettuun lietteeseen 50 mlrssa kuivaa asetonitriiliä huoneenlämpö-5 tilassa käyttäen argonia suojakaasuna lisättiin kohdan (a) tuotteen (2,6 g, 13 mmol) liuos 17 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin 4 tuntia. Saatu liete suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin uudelleen etyy-lieetteriin, pestiin kerran 5-%:isella kaliumvetysulfaat-10 tiliuoksella ja kerran suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin eetteriin (64 ml) ja käsiteltiin disykloheksyyliamiinilla (2,7 ml, 14 mmol). Liuoksesta alkoi heti saostua valkoinen kiinteä aine. Liuos suodatettiin ja valkoinen kiinteä aine 15 otettiin talteen, jolloin saatiin 2,0 g otsikon tuotetta; sp. 153 - 158 °C; [a]D = -54,5 °C (c = 0,61, kloroformi).
c) [4S-[4a(R*) , 7a, 9aB] ] -oktahydro-4- [ [2- (asetyylitio) -l-okso-4-metyylipentyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri 20 Kohdan (b) disykloheksyyliamiinisuolatuotteen (234 mg, 0,63 mmol) sekoitettu suspensio etyyliasetaatissa (15 ml) pestiin 5-%:isella vesipitoisella kaliumbisulfaa-tilla (3 x 5 ml). Orgaaninen uute kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaatti) , suodatettiin ja haihdutettiin kahdesti Ϊ* 25 heksaanista. Saatu öljy liuotettiin metyleenikloridiin (6 ml) ja sekoitettiin käyttäen typpeä suojakaasuna 0 °C:ssa. Tähän liuokseen lisättiin trietyyliamiini (88 μΐ, 0,63 mmol), sitten [4S-(4a,7a,9aE)]-4-amino-okta-hydro-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyyli-30 happo, metyyliesteri, p-tolueenisulfonihapposuola [val- \ mistettu kuten on kuvattu esimerkissä 7(a), 249 mg, 0,6 « mmol], lisämäärä trietyyliamiinia (84 μΐ, 0,60 mmol) ja 10 minuutin kuluttua bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyy-liamino)fosfonium heksafluorifosfaatti (279 mg, 0,63 35 mmol). Yhden tunnin kuluttua reaktio lämmitettiin huoneen- 1 9 59 106464 lämpötilaan ja sekoitettiin 2 tuntia. Saatu väritön liuos haihdutettiin alle 30 °C:ssa ja öljymäinen jäännös liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin. Liuos pestiin kerran 5-%:isella kaliumbisulfaattiliuoksella, kerran kylläisellä 5 natriumbikarbonaattiliuoksella ja kerran suolaliuoksella.
Orgaaninen kerros kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin 5 g:lie silikageeliä. Puhdistuksesta flash-kromatografiällä (2,5 x 15 cm kolonni, eluoi-den 1:1 etyyliasetaatti/heksaaneilla) saatiin 203 mg ot-10 sikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 101 -103 °C. [a]D = -157,5 °C (c = 1,04, kloroformi). TLC (etyyliasetaatti rheksaani, 1:1) Rf = 0,19.
d) [4S-[4a(R1> ,7a,9aii]]-oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-okso-4-metyylipentyyli) amino] -5-oksopyrrolo [2,1-b] [1,3] -15 tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen (184 mg, 0,44 mmol) liuos 5 ml:ssa metanolia puhdistettiin typellä 10 minuutin ajan ja jäähdytettiin 0 °C:seen. Tähän liuokseen lisättiin ti-poittain 5 ml typellä puhdistettua 1 M natriumhydroksidia. 20 Typpi kuplitettiin hitaasti liuoksen läpi reaktion aikana. Kahden tunnin kuluttua reaktioseos tehtiin happamaksi 2 ml :11a 6 M kloorivetyhappoa, uutettiin kahdesti etyyliasetaatilla ja uutteet yhdistettiin, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja haihdutettiin. Haihdutuksesta uudelleen . 25 heksaaneista ja jäännöksen trituroinnista metanoli/vedessä saatiin 132 mg otsikon tuotetta kiteisenä kiinteänä aineena, sp. 94 - 96 °C; [a]D = -158,6° (c = 0,42, metanoli). TLC (etyyliasetaatti:heksaani:etikkahappo, 4:4:0,1) Rf = 0,13.
30 Anal, laskettu C15H24N2S204 · 0,75 H20:lle: J ' C, 48,17; H, 6,87; N, 7,49; S, 17,15 • - Todettu: C, 48,33; H, 6,51; N, 7,37; S, 16,82 HPLC: R,. = 17,6 min; (99,2 %) YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 0 - 100 % B:A, 25 min lineaarinen gradientti 35 ja 15 min pysäytys, 1,5 ml/min; i 60 106464 A = 90-%:inen vesi/metanoli + 0,2-%:inen ortofosforihappo; B = 90-%:inen metanoli/vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo; 220 nm.
Esimerkki 10 5 [4S-[4o(R*) ,7a,10aB]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l- okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso[l,4]oksatsino[3,4-b]- [1,3]oksatsepiini-7-karboksyylihappo a) 2,2,2-triklooriasetimidohappo, 2-propenyylieste-ri 10 80-%:isen natriumhydridin (945 mg, 31,5 mmol; pesty kahdesti 25 ml :11a heksaania) suspensiota kuivassa eetterissä (30 ml) käsiteltiin tipoittain 2-propen-l-olin (21,4 ml, 18,3 g, 315 mmol) liuoksella kuivassa eetterissä (45 ml) , sekoitettiin 20 minuuttia huoneenlämpötilassa 15 käyttäen argonia suojakaasuna ja jäähdytettiin sitten 0 °C:seen (jää-suola-haude). Triklooriasetonitriili (30 ml tai 42,3 g, 0,30 mol) lisättiin 15 minuutin jakson aikana ja ruskehtavaa liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa 40 minuuttia, 10 °C:ssa 10 minuuttia ja huoneenlämpötilassa 10 minuut-20 tia. Reaktioseos väkevöitiin siirappimaiseksi, käsiteltiin metanolin (1,2 ml) liuoksella pentaanissa (30 ml) ja sekoitettiin voimakkaasti 5,0 minuuttia. Vaalean ruskeat sakat suodatettiin, pestiin pentaanilla (2 x 30 ml), ja yhdistetyt suodokset väkevöitiin vaalean ruskeaksi nes-: 25 teeksi. Neste liuotettiin uudelleen pentaaniin (30 ml), sekoitettiin muutama minuutti, ja saatu suspensio suodatettiin, ja saadut sakat pestiin pentaanilla (30 ml) toistaen menetelmää ainakin yhden kerran vielä. Kirkas suodos väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 54,0 g 30 otsikon yhdistettä vaalean punaisena nesteenä. Tämä aine .· varastoitiin liuoksena heksaanissa 10 °C:ssa.
b) N-ftaloyyli-L-seriini, metyyliesteri L-seriini, metyyliesteri, vetykloridin (25 g, 161 mmol) suspensio vedessä (350 ml) laimennettiin dioksaanil-35 la (250 ml), ja saatua kirkasta liuosta käsiteltiin kiin- 61 106464 teällä natriumkarbonaatilla (17 g, 1,0 ekv.), minkä jälkeen N-karbetoksiftalimidillä (37 g, 1,05 ekv.). Reaktio-seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2,5 tuntia käyttäen argonia suojakaasuna. Seosta uutettiin etyyliasetaa-5 tiliä (3 x 500 ml), ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin peräkkäin 5-%:isella natriumbikarbonaatilla (250 ml), 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (250 ml) ja suolaliuoksella (250 ml) , kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä. Tuo-10 teseos kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolonnia etyyliasetaatti:heksaani-seoksilla (1:3, 1:2), ja halutut fraktiot yhdistettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 31 g otsikon yhdistettä paksuna siirappimaisen aineena. TLC (etyyli-15 asetaatti :heksaani, 1:1) Rf = 0,52.
c) N-ftaloyyli-O-(2-propenyyli)-L-seriini, metyyli- esteri
Kohdan (b) tuotteen (7,37 g, 29,5 mmol) liuosta kuivassa metyleenikloridissa (30 ml) käsiteltiin kohdan 20 (a) tuotteen (11,97 g, 59,1 mmol, 2 ekv.) liuoksella syk- loheksaanissa (60 ml), minkä jälkeen trifluorimetaanisul-fonihapolla (0,37 ml), ja reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 20 tuntia käyttäen argonia suojakaasuna. Sakat suodatettiin, pestiin mahdollisimman pienellä mää-: 25 rällä metyleenikloridia, ja yhdistetyt suodokset pestiin 5-%:isella natriumbikarbonaatilla (30 ml) ja vedellä (30 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä. Raaka tuoteseos kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) 30 eluoiden kolonnia etyyliasetaatti:heksaanilla (1:9). Halutut fraktiot yhdistettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 7,56 g otsikon yhdistettä kirkkaana paksuna siirappimaisena aineena. TLC (etyyliasetaatti :heksaani, 1:1) Rf = 0,70.
62 106464 d) N-ftaloyyli-O- (asetaldehydi) -L-seriini, metyyli- esteri
Kohdan (c) tuotteen (2,5 g, 8,64 mmol) liuos kuivan metyleenikloridin (46,4 ml) ja metanolin (4,6 ml) seokses-5 sa jäähdytettiin -78 °C:seen (hiilihappojää-asetoni-haude) ja käsiteltiin otsonilla kunnes sininen väri säilyi (noin 15 minuuttia). Seosta puhdistettiin sitten typellä 10 minuuttia (kunnes sininen väri hävisi) , käsiteltiin dimetyy-lisulfidillä (14,0 ml, 0,19 mol, 22,1 ekv.), lämmitettiin 10 huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 2,5 tuntia käyttäen typpeä suojakaasuna. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin, ja jäljelle jäänyt siirappimainen aine liuotettiin etyyliasetaattiin (50 ml), pestiin vedellä (15 ml) ja suolaliuoksella (15 ml), kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaat-15 ti) , suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä.
Raakatuote kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolonnia etyyliasetaatti:heksaani-seoksilla (1:9, 1:4, 1:2), jolloin saatiin 1,54 g otsikon tuo-20 tetta. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 1:1) Rf = 0,33.
e) N-ftaloyyli-O-(2,2-dimetoksietyyli)-L-seriini, metyyliesteri
Kohdan (d) tuotteen (1,54 g, 5,29 mmol) liuosta kuivan metyleenikloridin (8,3 ml) ja kuivan metanolin • ' 25 (8,3 ml) seoksessa käsiteltiin trimetyyliortoformaatilla (0,84 ml, 7,68 mmol, 1,45 ekv.) ja p-tolueenisulfonihappo monohydraatilla (92 mg). Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 2,5 tuntia, sitten jakouutettiin etyyliasetaatilla (50 ml) ja kylläi-3 0 sellä natriumbikarbonaatilla (15 ml) . Orgaaninen faasi .· pestiin vedellä (15 ml) ja suolaliuoksella (15 ml) , kui vattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä. Raakatuote kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolon-35 nia etyyliasetaatti:heksaanilla (1:4), jolloin saatiin 63 106464 1,35 g otsikon tuotetta paksuna kirkkaana siirappimaisena aineena. TLC (etyyliasetaattirheksaani, 1:1) Rf = 0,58.
f) O- (2,2-dimetoksietyyli) -L-seriini, metyyliesteri
Kohdan (e) tuotteen (2,0 g, 5,93 mmol) liuosta kui-5 vassa metanolissa (14 ml) käsiteltiin hydratsiinihydraa-tilla (0,30 ml, 6,1 mmol) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 vuorokautta käyttäen argonia suojakaasuna. Saatu suspensio suodatettiin pesten sakat metanolilla (2 x 14 ml) , ja suodos väkevöitiin kuiviin. Siirappimainen aine 10 liuotettiin uudelleen metyleenikloridiin ja suodatettiin vielä kaksi kertaa kunnes sakkaa ei enää saatu. Kirkas suodos väkevöitiin, jolloin saatiin 1,17 g otsikon tuotetta vaalean keltaisena siirappimaisena aineena. TLC (mety-leenikloridi :metanoli, 9:1) Rf = 0,54.
15 g) N- [ (fenyylimetoksi) karbonyyli] -O- [ (1,1-dimetyy- lietyyli)dimetyylisilyyli]-L-homoseriini N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-homoseriinin [valmistettu kuten on kuvattu esimerkissä 6(a), 3,0 g, 11,85 mmol] liuosta kuivassa dimetyyliformamidissa (65 ml) käsi-20 teltiin [(1,1-dimetyylietyyli)dimetyylisilyylikloridilla (10,72 g, 71,1 mmol) ja imidatsolilla (9,65 g, 0,14 mol) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 24 tuntia. Reaktioseos laimennettiin metanolilla (207 ml) , sekoitettiin vielä 24 tuntia huoneenlämpötilassa 25 ja sitten väkevöitiin siirappimaiseksi aineeksi. Jäljelle jäänyt siirappimainen aine liuotettiin etyyliasetaattiin (200 ml), pestiin 10-%:isella sitruunahapolla (2 x 75 ml) ja suolaliuoksella, kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjös-30 sä. Raaka tuoteseos kromatografoitiin silikageelikolonnil- la (Merck) eluoiden kolonnia etyyliasetaatti:heksaanil-la (1:1), minkä jälkeen etyyliasetaatti:etikkahapolla (99,5:0,5). Halutut fraktiot yhdistettiin, väkevöitiin ja haihdutettiin useita kertoja tolueenista, jolloin saatiin 35 3,56 g otsikon yhdistettä vahamaisena kiinteänä aineena.
TLC (etyyliasetaatti:etikkahappo, 95:5) Rf = 0,82.
106464 68 b) [S- (R*, R*) ] -2- [ [4- [ [ (1, l-dimetyylietyyli)dimetyy-lisilyyli]oksi]-l-okso-2-[[(fenyylimetoksi)karbonyyli]amino ]bu tyyli] amino]-6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyylieste-ri 5 Kohdan (a) tuotteen (22,78 g, 61,97 mmol) liuok seen metyleenikloridissa (100 ml) , joka oli jäähdytetty 0 °C-.ssa, lisättiin N-metyylimorfoliini (6,81 ml, 61,97 mmol), minkä jälkeen hydroksibentsotriatsoli (8,37 g, 61,97 mmol), (S)-2-amino-6,6-dimetoksiheksaanihappo, melo tyyliesteri [valmistettu kuten on kuvattu esimerkissä 1(e), 10,6 g, 51,64 mmol] metyleenikloridissa (50 ml) ja sitten l-etyyli-3-(3-dimetyyliaminopropyyli)karbodi-imidi (11,88 g, 61,97 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan, sitten huoneenlämpötilassa yön yli. 15 Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös laimennettiin etyyliasetaatilla (600 ml), pestiin 5-%:isella kaliumbi-sulfaatilla (200 ml), 0,5 N natriumhydroksidilla (200 ml), vedellä ja suolaliuoksella, ja kuivattiin (natriumsulfaat-ti). Suodos väkevöitiin, ja jäännös otettiin talteen etyy-2 0 lieetteriin (150 ml) . Saatu suspensio suodatettiin, ja talteen otettu kiinteä aine pestiin huolellisesti etyyli-eetterillä. Suodos väkevöitiin tyhjössä kuiviin, jolloin saatiin 30 g raakaa otsikon tuotetta öljymäisenä yhdisteenä, jota käytettiin seuraavassa reaktiossa ilman puhdis- : 25 tusta. TLC (8:2, etyyliasetaatti:heksaani) Rf = 0,55.
c) [S- (R*,R*> ] -2- [ [4-hydroksi-l-okso-2- [ [ (fenyylimetoksi) karbonyyli]amino]butyyli]amino]-6,6-dimetoksiheksaa-nihappo, metyyliesteri
Kohdan (b) tuotteen (30 g) liuokseen metanolissa 30 (150 ml), joka oli jäähdytetty 0 °C:ssa, lisättiin para- « .* tolueenisulfonihappo monohydraatti (1,96 g). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia ennen kuin se vaimennettiin vesipitoisella natriumbikarbonaattiliuoksella (1,3 g natriumbikarbonaattia 100 mlrssa vettä). Seos väkevöitiin 35 tyhjössä, ja jäännös jakouutettiin etyyliasetaatilla 106464 69 (400 ml) ja vedellä (150 ml). Erotettua vesifaasia uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 150 ml) . Yhdistetyt etyyliase-taattikerrokset pestiin 10-%:isella natriumbikarbonaatilla, suolaliuoksella (2 kertaa) , kuivattiin (natriumsul-5 faatti), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös flash-kromatografoitiin 10 x 25 cm silikageelikolonnilla eluoiden 80-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa (5 1), etyyliasetaatilla (3 1) ja 2-%:isella metanolilla etyyliasetaatissa (5 1). Halutut fraktiot yhdistettiin ja väke-10 voitiin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 17,45 g otsikon tuotetta vaalean keltaisena öljynä. TLC (8:2, etyyliasetaattiiheksaani) Rf = 0,17.
d) [S- (R* ,R#) ] -2- [ [4- [ (metaanisulfonyyli) oksi] -1-okso-2- [ [ (fenyylimetoksi) karbonyyli] amino]butyyli] amino] -15 6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyyliesteri
Kohdan (c) tuotteen (17,40 g, 39,50 mmol) (tislattu tolueenin kanssa kolme kertaa ja kuivattu tyhjössä yön yli) liuokseen kuivassa metyleenikloridissa (250 ml) , joka oli jäähdytetty -15 °C:ssa (jää/asetoni), lisättiin tri-20 etyyliamiini (8,26 ml, 59,28 mmol, juuri tislattu), minkä jälkeen metaanisulfonyylikloridi (3,67 ml, 47,4 mmol) ti-poittain. Reaktioseosta sekoitettiin -15 °C:ssa 30 minuuttia, sitten vaimennettiin kylläisellä ammoniumkloridi-liuoksella (100 ml) . Kun seosta oli sekoitettu 5 minuut-: 25 tia, se laimennettiin etyyliasetaatilla (600 ml) ja pes tiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla, suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 20,40 g otsikon yhdistettä keltaisena öljynä, joka käytet-30 tiin seuraavassa reaktiossa ilman puhdistusta. TLC (8:2, etyyliasetaatti:heksaani) Rf = 0,35.
106464 70 e) [S- (R*,R*) ] -2- [ [4- (asetyylitio) -l-okso-2- [ [ (fe-nyylimetoksi) karbonyyli] amino] butyyli] amino] -6,6-dimetok-siheksaanihappo, metyyliesteri
Tioetikkahapon (5,09 ml, 71,10 mmol) liuokseen me-5 tanolissa (100 ml) lisättiin cesiumkarbonaatti (10,81 g, 33,18 mmol). Saatu liuos väkevöitiin tyhjössä. Kiinteä aine trituroitiin kuivan asetonin kanssa (3 kertaa) ja kuivattiin sitten tyhjössä fosforipentoksidilla yön yli, jolloin saatiin cesiumtioasetaatti.
10 Kohdan (d) tuotteen (20,40 g, 39,50 mmol) liuos kuivassa dimetyyliformamidissa (150 ml) lisättiin kanyylin kautta cesiumtioasetaatin (10,576 g, 50,85 mmol) suspensioon dimetyyliformamidissa (50 ml). Saatua keltaista liuosta sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna huo-15 neenlämpötilassa yön yli, sitten väkevöitiin korkeavakuu-missa, jolloin suurin osa dimetyyliformamidista poistui. Jäännös otettiin talteen etyyliasetaattiin (1 1) ja pestiin 10-%:isella natriumbikarbonaatilla (200 ml), vedellä (4 x 200 ml), suolaliuoksella (400 ml) ja kuivattiin (nät-20 riumsulfaatti). Suodos väkevöitiin, ja jäännös haihdutettiin tolueenin kanssa (3 kertaa), sitten kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 20 g otsikon yhdistettä vaalean keltaisena kiinteänä aineena, joka käytettiin seuraavaa reaktiota varten ilman puhdistusta. TLC (8:2, etyyliase-ϊ 25 taatti rheksaani) Rf = 0,47.
f) [S- (R*,R*) ] -2-[ [4-merkapto-l-okso-2- [ [ (fenyyli-metoksi)karbonyyli]amino]butyyli] amino]-6,6-dimetoksihek-saanihappo, metyyliesteri
Kohdan (e) tuotteen (20 g, 39,50 mmol) liuos meta-30 nolissa (250 ml), joka oli jäähdytetty 0 °C:ssa, puhdis-.· tettiin argonilla 15 minuutin ajan. Argon-puhdistusta jat kettiin, 25-%:inen (paino/paino, tiheys = 0,945) natrium-metoksidiliuos metanolissa (9,17 ml, 40 mmol) lisättiin tipoittain. Kun reaktioseosta oli sekoitettu 5 minuuttia, 35 se vaimennettiin kylläisellä ammoniumkloridiliuoksella 106464 71 (200 ml), ja seos jakouutettiin etyyliasetaatilla (1 1) ja vedellä (200 ml) . Vesifaasia uutettiin etyyliasetaatilla (200 ml) . Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin kylläisellä ammoniumkloridiliuoksella (400 ml), suolaliuoksella 5 (400 ml) , kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 17,5 g otsikon tuotetta keltaisena öljynä, joka käytettiin seuraavaa reaktiota varten ilman puhdistusta. TLC (8:2, etyyliasetaat-tirheksaani) Rf = 0,45.
10 g) [4S-(4a,7a,10a£)]-oktahydro-4-[[(fenyylimetok- si)karbonyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatse-piini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (f) tuotteen (17,5 g, 38,3 mmol) liuokseen metyleenikloridissa (600 ml) lisättiin AmberlystR 15 ionin-15 vaihtohartsi (6 g, esikäsitelty 6 N kloorivetyhapolla, vedellä, tetrahydrofuraanilla ja metyleenikloridilla, ja kuivattu). Suspensiota sekoitettiin käyttäen argonia suo-jakaasuna huoneenlämpötilassa 18 tuntia ja suodatettiin. Suodos väkevöitiin, ja jäännös adsorboitiin CeliteR:en, 20 puhdistettiin 10 x 30 cm silikageelikolonnilla eluoiden 20 - 30-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa. Halutut fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin tyhjössä kuiviin, jolloin saatiin 9,18 g otsikon tuotetta keltaisena öljynä. TLC (1:1, etyyliasetaattirheksaani) Rf = 0,32.
: 25 h) [4S-(4a,7a,10a£)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H- pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli-esteri
Kohdan (g) tuotteen (9,1 g, 23,19 mmol, haihdutettu tolueenin kanssa kolme kertaa ja kuivattu tyhjössä yön 30 yli) liuokseen kuivassa metyleenikloridissa (150 ml) li-J sättiin joditrimetyylisilaani (4,95 ml, 34,78 mmol) ti- poittain. Saatua keltaista liuosta sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia, sitten vaimennettiin 0,4 N kloorivetyhapolla metanoli/diok-35 saanissa (120 ml). Haihtuvat aineet poistettiin tyhjössä, 72 106464 ja jäännös jakouutettiin eetterillä (500 ml) ja vedellä (700 ml). Orgaanista faasia uutettiin 0,1 N kloorivetyha-polla (150 ml) , ja yhdistetty hapan vesiuute jäähdytettiin 0 °C:seen, tehtiin emäksiseksi 1 N natriumhydroksidilla 5 pH-arvoon 10,5 (tarkkailtiin pH-mittarilla), sitten uutettiin metyleenikloridilla (4 x 400 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natrium-sulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 6,45 g otsikon tuotetta keltaisena öljynä, joka 10 käytettiin seuraavaa reaktiota varten ilman lisäpuhdistus-ta. TLC (1:9, metanoli:metyleenikloridi) Rf = 0,20.
i) [4S- [4a (R*) ,7a, 10afi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] - [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 15 Kylmää (0 °C) (S)-(2-asetyylitio)bentseenipropaani- hapon ja trietyyliamiinin liuosta metyleenikloridissa käsiteltiin kohdan (h) tuotteen liuoksella metyleenikloridissa, minkä jälkeen bentsotriatsol-l-yylioksitris(dime-tyyliamino) fosfonium heksafluorifosfaatilla. Reaktioseosta 20 käsiteltiin esimerkissä 3(c) kuvatun menetelmän mukaisesti, jolloin saatiin [4S-[4a (R*) , 7a, 10aS] ]-oktahydro-4-[[2-(asetyylitio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, me-tyyliesteri.
ί 25 Tämän metyyliesterituotteen liuosta metanolissa, josta happi oli poistettu, käsiteltiin 1 N natriumhydroksidilla esimerkin 3(d) menetelmän mukaisesti, jolloin saatiin otsikon tuote.
Esimerkki 12 30 [4S-[4a(R*> , 7a, 10a£] ] -oktahydro-4-[ [2- (merkaptome- tyyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido-[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) (S)-2-[(asetyylitio)metyyli]bentseenipropaani-happo, efedriinisuola 35 (1R,2S)-(-)-efedriinin (17,3 g, 105 mmol) liuos dietyylieetterissä (175 ml) lisättiin yhdessä erässä t 106464 73 2-[(asetyylitio)metyyli]bentseenipropaanihapon (50,0 g, 210 mmol) liuokseen dietyylieetterissä (175 ml). Kun seos oli seissyt huoneenlämpötilassa 16 tuntia, kiteytynyt efe-driinisuola otettiin talteen suodattamalla (19,7 g); sp.
5 114 - 125 °C; [a]D = -40,6° (c = 1, metanoli) . Lisämäärä kiinteää ainetta [8,9 g, sp. 121 - 126 °C; [a]D = -47,2° (c = 1, metanoli)] erotettiin suodoksesta oltuaan huoneenlämpötilassa 20 tuntia. Kiinteät aineet yhdistettiin ja uudelleenkiteytettiin asetonitriilistä (1 500 ml) . 16 tun-10 nin kuluttua huoneenlämpötilassa 20,8 g kiinteää ainetta otettiin talteen; sp. 125 - 130 °C; [a]D = -48,9° (c = 1, metanoli). Tämä aine uudelleenkiteytettiin samalla tavalla asetonitriilistä (300 ml), jolloin saatiin 18,7 g, sp. 128 - 130 °C; [a]D = -48,9° (c = 1, metanoli). Kolmannesta 15 uudelleenkiteytyksestä asetonitriilistä (225 ml) saatiin 17,4 g kiinteää (S)-2-[(asetyylitio)metyyli]bentseenipro-paanihappo, efedriinisuolaa; sp. 128 - 129 °C; [a]D = -50,1° (c = 1, metanoli).
Anal, laskettu C12H1403S - C10H15NO: lie: 20 C, 65,48; H, 7,24; N, 3,47; S, 7,95
Todettu: C, 65,46; H, 7,34; N, 3,21; S, 8,00 b) [4S-[4a(R*) ,7tt,10a£] ] -oktahydro-4-[ [2- [ (asetyylitio) metyyli]-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli-• ' 25 esteri
Kohdan (a) efedriinisuolan (333,1 mg, 0,822 mmol) sekoitettu suspensio etyyliasetaatissa (5 ml) pestiin kolme kertaa 5 ml:n annoksilla 1 N kloorivetyhappoliuosta. Orgaaniset uutteet yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, 3 0 kuivattiin (magnesiumsulfaatti) , suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä 30 minuutin ajan. Saatu öljy liuotettiin metyleenikloridiin (2 ml) ja sekoitettiin käyttäen typpeä suojakaasuna 0 °C:ssa. Tähän liuokseen lisättiin [4S- (4a, 7ct, I0a£) ] -oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido-35 [2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesterin 106464 74 [200,0 mg, 0,774 mmol, valmistettu kuten esimerkissä 3(c) on kuvattu] liuos metyleenikloridissa (6 ml), sitten tri-etyyliamiini (0,113 ml, 0,813 mmol) ja lopuksi bentso-triatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksa-5 fluorifosfaatti (360,0 mg, 0,813 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa ja annettiin lämmetä hitaasti huoneenlämpötilaan. 19 tunnin kuluttua reaktioseos väkevöitiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin. Liuos pestiin kerran 5-%:isella kaliumbisulfaatin liuoksella 10 (20 ml) , kerran kylläisellä natriumbikarbonaatin liuoksel la (20 ml) ja kerran suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (magnesiumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin keltaiseksi vaahdoksi. Puhdistuksesta flash-kroma-tografialla (silikageeli, 230 - 400 mesh käytten 69 - 15 138 kPa (10 - 20 psi) typpipainetta) eluoiden 4:3 etyyli- asetaatti/heksaanilla saatiin 303 mg tuotetta kirkkaana öljynä.
c) [4S-[4a{R*) , 7a, lOaB] ] -oktahydro-4-[ [2- (merkapto-metyyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido-20 [2,l~b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (b) tuotteen (303,1 mg, 0,635 mmol) liuos metanolissa (6,5 ml, happo poistettu typpi-kuplituksella) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin 1 N natriumhydrok-sidilla (6,5 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella). Kun : 25 seosta oli sekoitettu yhden tunnin ajan 0 °C:ssa samalla puhdistaen jatkuvasti typellä, reaktioseos lämmitettiin huoneenlämpötilaan. Yhteensä kolmen tunnin kuluttua reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 5-%:isella kaliumbisulf aatilla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset 30 kerrokset yhdistettiin, pestiin vedellä, suolaliuoksel- ,·' la, kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja vä kevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 219 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 200 °C (haj.). TLC (6:0,01:3,99 etyyliasetaatti/etikkahappo/heksaani) Rf = 35 0,15.
75 106464 HPLC: tR = 26,3 min, epäpuhtaus 27,0 min:ssa; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 0 - 100 % B:A, 30 min lineaarinen gradientti ja 10 min pysähdys, 1,5 ml/min; A = 90-%:inen vesi:metanoli + 0,2-%:inen ortofosforihappo, B = 5 90-%:inen metanoli:vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo; 220 nm.
Anal, laskettu C20H26O4N2S2 · 0,11 C4H802 - 0,07 CH2Cl2:lle: C, 56,22; H, 6,21; N, 6,39; S, 14,63 Todettu: C, 56,46; H, 6,28; N, 6,31; S, 14,59 10 Esimerkki 13 [4S-[4a(R*> ,7a,10aB] ]-oktahydro-4- [ (2-merkapto-4-me-tyyli-l-oksopentyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) (R)-2-bromi-4-metyylipentaanihappo 15 Kaliumbromidi (9,5 g, 80 mmol) lisättiin sekoitet tuun D-leusiinin (3,0 g, 23 mmol) liuokseen 2,5 N rikkihapossa (47 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseos jäähdytettiin -10 °C:seen, ja kiinteä natriumnitriitti (2,4 g, 34 mmol) lisättiin annoksittain säilyttäen lämpötilan välillä 20 -10 - -5 °C. Kun lisäys oli suoritettu, reaktioseosta se koitettiin 1 tunti ja lämmitettiin sitten huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin vielä tunti. Reaktioseosta uutettiin sitten kahdesti eetterillä, eetteriuutteet pestiin kerran vedellä, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja : 25 haihdutettiin, jolloin saatiin 2,7 g raakaa otsikon tuo tetta .
b) (S)-2-(asetyylitio)-4-metyylipentaanihappo, di-sykloheksyyliamiinisuola
Sekoitettuun kaliumtioasetaatin (1,7 g, 15,0 mmol) 30 lietteeseen 50 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä huoneenlämpö-tilassa käyttäen argonia suojakaasuna lisättiin kohdan (a) tuotteen (2,6 g, 13 mmol) liuos 17 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin 4 tuntia. Saatu liete suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin uudelleen etyy-35 lieetteriin, pestiin kerran 5-%:isella käliumbisulfaatti- < 106464 76 liuoksella ja kerran suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin eetteriin (64 ml) ja käsiteltiin disykloheksyyliamiinilla (2,7 ml, 14 mmol). Valkoinen kiinteä aine alkoi saostua 5 heti liuoksesta. Liuos suodatettiin, ja valkoinen kiinteä aine otettiin talteen, jolloin saatiin 2,0 g otsikon tuotetta; sp. 153 - 158 °C; [a]D = -54,5° (c = 0,61, kloroformi) .
c) [4S-[4a(R*) ,7a,10a£]]-oktahydro-4-[[2-(asetyyli-10 tio)-4-metyyli-l-oksopentyylx]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1- b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (b) tuotteen (403,3 mg, 1,09 mmol) sekoitettu suspensio etyyliasetaatissa (5 ml) pestiin kolme kertaa 5 ml:n annoksilla 5-%:ista kaliumbisulfaattiliuosta. Or-15 gaaniset uutteet yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin, väkevöitiin ja kuivattiin tyhjössä 30 minuuttia. Saatu öljy (179,4 mg, 0,943 mmol) liuotettiin metyleenikloridiin (2 ml) ja sekoitettiin käyttäen typpeä suojakaasuna 0 °C:ssa. Tähän 20 liuokseen lisättiin [4S-(4α,7a,10a£)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido [2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo metyyliesterin [232,0 mg, 0,898 mmol, valmistettu kuten on kuvattu esimerkissä 3(c)] liuos metyleenikloridissa (6 ml), sitten trietyyliamiini (0,131 ml, 0,943 mmol) ja : 25 lopuksi bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fos- fonium heksafluorifosfaatti (417,1 mg, 0,943 mmol). Reak-tioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan ja 3,5 tuntia huoneenlämpötilassa. Yhteensä 4,5 tunnin kuluttua reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös liuotettiin 30 etyyliasetaattiin. Liuos pestiin kerran 5-%:isella kalium-! bisulfaatin liuoksella (20 ml) , kerran kylläisellä nat- riumbikarbonaatin liuoksella (20 ml) ja kerran suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin keltaiseksi vaahdoksi. Puh-35 distuksesta flash-kromatografiällä (silikageeli, 230 106464 77 400 mesh 69 - 138 kPa (10 - 20 psi) typpipainetta) eluoi-den 2:3 etyyliasetaatti/heksaanilla saatiin 209,4 mg otsikon tuotetta kirkkaana öljynä.
d) [4S-[4o(R*) , 7a, lOafi] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto-4-5 metyyli-l-oksopentyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen (209,4 mg, 0,486 mmol) liuos metanolissa (5 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin 1 N natriumhydrok-10 sidilla (5 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella). Kun reaktioseosta oli sekoitettu yksi tunti 0 °C:ssa samalla puhdistaen jatkuvasti typellä, se lämmitettiin huoneenlämpötilaan. Yhteensä 2,5 tunnin kuluttua reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 5-%:isella kaliumbisulfaatilla ja 15 uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdis tettiin, pestiin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä. Puhdistuksesta flash-kromatografiällä (silikageeli, 230 -400 mesh 69 - 138 kPa (10 - 20 psi) typpipaineessa) eluoi-20 den 6:0,01:3,99 etyyliasetaatti/etikkahappo/heksaanilla, johon johdettiin typpeä, saatiin 142,0 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena. TLC (6:0,1:3,9 etyyliase-taatti/etikkahappo/heksaani) Rf = 0,20. [a]D = -103,0° (c = 0,43, kloroformi). HPLC: tR = 26,7 min; YMC S-3 ODS (C-18) : 25 6,0 x 150 mm; 0 - 100 % B:A, 30 min lineaarinen gradientti ja 10 min pysähdys, 1,5 ml/min; A = 90-%:inen vesi:meta-noli + 0,2-%:inen ortofosforihappo, B = 90-%:inen metano-li:vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo; 220 nm.
Anal. laskettu C16H2604N2S2 '0,19 C4HB02 -0,18 C7H16 -0,9 H20: lie: 30 C, 50,87; H, 7,63; N, 6,58; S, 15,07
Todettu: C, 50,57; H, 7,20; N, 6,83; S, 14,75 106464 78
Esimerkki 14 [4S- [4α (R*) , 7α,9afi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok-sobutyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 5 a) (R)-2-bromibutaanihappo
Kaliumbromidi (7,85 g, 65,94 mmol) lisättiin (R)-2-aminobutaanihapon (2,0 g, 19,40 mmol) liuokseen 2,5 N rikkihapossa (25 ml) ja jäähdytettiin 0 °C:seen. Natriumnit-riitti (2,06 g, 29,87 mmol) lisättiin hitaasti useissa 10 annoksissa. Lämpötila pidettiin alle 2 °C:ssa tämän lisäyksen aikana. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1 tunti ja huoneenlämpötilassa 16 tuntia, sitten uutettiin 3 -50 ml:n annoksilla etyyliasetaattia. Yhdistetyt etyyliase-taattikerrokset pestiin 2-50 ml:n annoksilla vettä, 1 -15 50 ml:n annoksella suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsul faatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 2,86 g otsikon tuotetta raakaöljynä.
b) (S)-2-(asetyylitio)butaanihappo, disykloheksyy-liamiinisuola 20 Kaliumtioasetaatin 2,14 g (18,77 mmol) lietteeseen 15 ml:ssa asetonitriiliä, jota sekoitettiin huoneenlämpö-tilassa, lisättiin tipoittain 15 minuutin aikana (R)-2-bromibutaanihapon (2,83 g, 17,07 mmol) liuos 15 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpöti-* 25 lassa 16 tuntia, sitten suodatettiin. Suodos väkevöitiin tyhjössä, ja saatu öljy liuotettiin 30 ml:aan etyylieette-riä. Eetterikerros pestiin 2 -20 ml:n annoksilla 5-%:ista kaliumbisulfaattia, 2-20 ml:n annoksilla vettä, 2-20 ml: n annoksilla suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsul-30 faatti) ja suodatettiin. Suodokseen lisättiin 3,4 ml . (17,07 mmol) disykloheksyyliamiinia. Kun lietettä oli se koitettu huoneenlämpötilassa 2 tuntia, se suodatettiin, jolloin saatiin 1,24 g disykloheksyyliamiinisuolatuotetta. Toinen sato 724 mg disykloheksyyliamiinisuolatuotetta saa-35 tiin suodoksesta.
79 106464 c) [4S-[4a(R*> ,7a,9aB]]-oktahydro-4-[ [2-[ (asetyyli-tio) -1-oksobutyyli]amino] -5-oksopyrrolo[2,1-b] [1,3] tiatse-piini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (b) disykloheksyyliamiinisuolatuote (227 mg, 5 0,66 mmol) liuotettiin 15 mlraan etyyliasetaattia ja pes tiin kolmella 10 ml:n annoksella kaliumbisulfaattia, yhdellä 10 ml:n annoksella suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 108 mg (S)-2-(asetyylitio)butaanihappoa kirkkaana öljynä. 10 Tämän vapaan hapon (108 mg, 0,66 mmol) liuokseen 5 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, joka jäähdytettiin 0 °C:seen, lisättiin trietyyliamiini (90 pii, 0,66 mmol), minkä jälkeen [4S-(4a,7a,9aS)]-4-amino-oktahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyy-15 liesteri, p-tolueenisulfonihapposuola [250,0 mg, 0,66 mmol, valmistettu materiaalista, joka on kuvattu esimerkissä 5(d)] ja toinen erä trietyyliamiinia (90 pii, 0,66 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 20 minuuttia, sitten lisättiin bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyli-20 amino)fosfonium heksafluorifosfaatti (292 mg, 0,66 mmol) yhdessä erässä. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan, jäähdytettiin 56 tuntia, sitten sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin sitten tyhjössä, liuotettiin uudelleen 30 ml:aan etyyliase-: 25 taattia ja pestiin 20 ml:11a 5-%:ista kaliumbisulfaattia, 20 ml :11a kylläistä natriumbikarbonaattia, 2 0 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin raakaöljy. Raakaöljy flash-kro-matografoitiin (Merck silikageeli, 25 x 100 mm, 2:3 etyy-30 liasetaatti/heksaani), jolloin saatiin 208 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona.
« 106464 80 d) [4S- [4α (R*) , 7α, 9aB] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-oksobutyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen (225 mg, 0,559 mmol) liuos me-5 tanolissa (5 ml puhdistettiin argonilla 30 minuutin ajan ja jäähdytettiin 0 °C:seen. Tähän liuokseen lisättiin ti-poittain 5 ml 1 M natriumhydroksidia, joka myös puhdistettiin argonilla 30 minuutin ajan, ja jäähdytettiin 0 °C:seen. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 3 tuntia 10 puhdistaen jatkuvasti argonilla, sitten tehtiin happamaksi pH-arvoon 2 5-%:isella kaliumbisulfaattiliuoksella. Seosta uutettiin 3-40 ml:n annoksilla etyyliasetaattia, ja yhdistetyt etyyliasetaattikerrokset kuivattiin (magnesium-sulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin raaka 15 vaahto. Raakatuote flash-kromatografoitiin (Merck silika-geeli, 25 x 180 mm, 3-%:inen etikkahappo/etyyliasetaatti), jolloin saatiin valkoinen vaahto, joka liuotettiin mety-leenikloridiin ja trituroitiin heksaanilla, jolloin saatiin 176 mg otsikon tuotetta kompaktina valkoisena vaahto-20 na; [a]D = -125,4° (c = 1,0, kloroformi). TLC (metanoli/ metyleenikloridi 1:9) Rf = 0,16.HPLC: tR = 15,5 min (97 % kokonaisala, UV 220 nm); YMC S-3 ODS (C-18, 120A) 6 x 150 mm; 0 - 100 % B:A, 25 min lineaarinen gradientti (A = 90-%:inen vesi:metanoli + 0,2-%:inen ortofosforihappo, B = • 25 90-%:inen metanoli:vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo); virtausnopeus 1,5 ml/min.
Anal, laskettu C13H20N2S2O4 · 0,8 H20 · 0,2 C6H14 · 0,1 CH2Cl2: lie: C, 46,10; H, 6,66; N, 7,52; S, 17,21 30 Todettu: C, 46,00; H, 6,17; N, 7,52; S, 16,82 • 106464 81
Esimerkki 15 [4S- [4α (R1) ,7α,9aB] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok-sopentyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 5 a) (R)-2-bromipentaanihappo
Seuraten esimerkin 14(a) menetelmää, mutta käyttäen D-norvaliinia (R)-2-aminobutaanihapon sijaan, saatiin (R)-2-bromipentaanihappo kirkkaana nesteenä.
b) (S)-2-(asetyylitio)pentaanihappo, disykloheksyy- 10 liamiinisuola
Saattamalla (R)-2-bromipentaanihappo reagoimaan kaliumtioasetaatin kanssa asetonitriilissä, minkä jälkeen käsittelemällä disykloheksyyliamiinilla esimerkin 14 (b) menetelmän mukaan saatiin (S)-2-(asetyylitio)pentaanihap-15 po, disykloheksyyliamiinisuola valkoisena kiinteänä ainee na.
c) [4S-[4a(R1) ,7a, 9afl] ]-oktahydro-4-[ [2-(asetyylitio) -1-oksopentyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][l,3]tiat-sepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri 20 Saattamalla kohdan (b) disykioheksyyliamiinisuolan vapaa happo reagoimaan [4S-(4a,7a,9aS)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesterin kanssa esimerkin 14(c) menetelmän mukaisesti otsikon tuote saatiin valkoisena vaahtona.
j 25 d) [4S-[4a (R1) ,7a, 9aB] ]-oktahydro-4-[ (2-merkapto-l- oksopentyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini- 7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen liuosta metanolissa käsiteltiin 1 M natriumhydroksidillä esimerkin 14(d) menetelmän mukai-30 sesti ja saatiin otsikon tuote kompaktina valkoisena vaah- * tona; [a]D = -122,8° (c = 1,0, CDC13) . TLC (metanoli/mety-leenikloridi 1:9) Rf = 0,15. HPLC: tr = 20,5 min; (97 % kokonaisala, UV 220 nm); YMC S-3 ODS (C-18, 120A) 6 x 150 mm; 0 - 100 % B:A, lineaarinen 25 minuutin gradientti 35 (A = 90-%:inen vesi:metanoli + 0,2-%:inen ortofosforihap- 106464 82 po); B = 90-%:inen metanoli:vesi + 0,2-%:inen ortofosfori-happo; virtausnopeus = 1,5 ml/min.
Anal, laskettu C14H22N2S204 · 0,65 H20 · 0,20 C6H14:lle: C, 48,63; H, 7,01; N, 7,46; S, 17,08 5 Todettu: C, 48,86; H, 6,70; N, 7,24; S, 16,74
Esimerkki 16 [4S- [4a (R*) , 7a, 9a£] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-4,4-dimetyyli-l-oksopentyyli)] amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b] - [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 10 a) (R)-2-bromi-4,4-dimetyylipentaanihappo (R)-2-araino-4,4-dimetyylipentaanihapon (950 mg, 6,55 mmol) liuos 2,5 N vesipitoisessa rikkihapossa (13 ml, 33 mmol) jäähdytettiin -5 °C:seen ja käsiteltiin kalium-bromidilla (2,72 g, 22,9 mmol) yhdessä erässä. Väritöntä 15 liuosta käsiteltiin natriumnitriitillä (680 mg, 9,86 mmol) annoksittain pitäen lämpötilan välillä 0 - 3 °C 25 minuutin jakson aikana. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan ja huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia. Reak-tioseos kaadettiin veteen (10 ml). Tuotetta uutettiin eet-20 terillä (60 ml), pestiin vedellä (20 ml) ja suolaliuoksella (20 ml), kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon tuote värittömänä nesteenä .
b) (S)-2-(asetyylitio)-4,4-dimetyylipentaanihappo *_ 25 Kaliumtioasetaatin (750 mg, 6,58 mmol) ja asetonit- riilin (10 ml, molekyyliseulakuivattu) liete jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin kohdan (a) (R)-2-bromi-4,4-dime tyylipentaanihapon liuoksella asetonitriilissä (2 ml) 5 minuutin aikana. Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen-30 lämpötilaan ja sekoitettiin 2,5 tuntia. Liete suodatet-tiin. Suodos väkevöitiin tyhjössä. Jäännös laimennettiin « eetterissä (50 ml), pestiin kahdella erällä 5-%:ista vesipitoista natriumtiosulfaattia (50 ml) ja suolaliuoksella (25 ml) , kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin 35 tyhjössä. Vaalea keltainen öljy puhdistettiin flash-kroma- 106464 83 tografialla (Merck silikgeeli, 12 x 3 cm, 10-%:inen meta-noli/metyleenikloridi), jolloin saatiin 575 mg otsikon tuotetta vaalean keltaisena öljynä.
c) [4S-[4a(R*) ,7a,9aB]]-oktahydro-4-[[2-(asetyyli- 5 tio)-4,4-dimetyyli-l-oksopentyyli]amino]-5-oksopyrrolo- [2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (b) tuotteen (148 mg, 0,72 mmol) kirkas liuos metyleenikloridissa (5 ml, tislattu kalsiumhyd-ridistä) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin [4S-10 (4α,7a,9aS)]-4-amino-okstahydro-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]- tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri, p-tolueeni-sulfonihapposuolan [250,0 mg, 0,60 mmol, valmistettu esimerkissä 5(d) kuvatusta aineesta] liuoksella metyleenikloridissa (3 ml, tislattu kalsiumhydroksidista), trietyyli-15 amiinilla (122 mg, 1,2 mmol), minkä jälkeen bentsotriat-sol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluori-fosfaatilla (319 mg, 0,72 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 24 tuntia ja huoneenlämpötilassa 5 tuntia. Raaka tuoteseos väkevöitiin tyhjössä. Jäännös laimennet-20 tiin etyyliasetaattiin (50 ml) , pestiin 5-%:isella vesipitoisella kaliumbisulfaatilla (50 ml), 50-%:isella kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaattiliuoksella (50 ml) ja suolaliuoksella (50 ml), kuivattiin (natrium-sulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä. Raakatuote puhdis-• 25 tettiin flash-kromatografialla (20 g, Merck silikageeli, etyyliasetaatti), jolloin saatiin 244 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona.
d) [4S-[4a(R*) , 7a, 9aB] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto- 4,4-dimetyyli-l-oksopentyyli) amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- 30 [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen (240 mg, 0,56 mmol) kirkas liuos metanolissa (2 ml, typpeä johdettu) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin tipoittain 1 N natriumhydroksi-dilla (2,27 ml, 2,24 mmol, argonia johdettu) johtamalla 35 jatkuvasti 0 °C:ssa. Seoksen annettiin sekoittua 0 °C:ssa 106464 84 3 tuntia ja huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Seos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 5-%:isen vesipitoisen kaliumbisul-faatin liuoksella (argonia johdettu). Tuotetta uutettiin metyleenikloridilla (50 ml, typpeä johdettu), pestiin suo-5 laliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä. Raakatuote uudelleenkiteytettiin metyleeniklo-ridi/heksaanista, jolloin saatiin 75 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 124 - 126 °C; [ajD = -175° (c = 0,25, metanoli). TLC (etikkahappo/metanoii/melo tyleenikloridi 1:5:94) Rf = 0,65.
HPLC: tR (YMC, S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 1,5 ml/ min, lineaarinen gradientti 0 - 100 % B:tä 3 0 minuu tin aikana, puskuri A = metanoli/vesi/ortofosforihappo (10:90:0,2), puskuri B = metanoli/vesi/ortofosforihappo 15 (90:10:0,2)) = 24,4 min, 95 %:n piikin kokonaisala 254 nm:ssä.
Analyysi laskettu C16H26N204S2 · 0,13 C6H14: lie : C, 52,24; H, 7,28; N, 7,26; S, 16,62 Todettu: C, 51,97; H, 7,26; N, 7,09; S, 16,23 20 Esimerkki 17 [4S- [4a (R*) ,7a, 9afi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-ok-sopropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) (R)-2-bromipropaanihappo • 25 Seuraten esimerkin 14(a) menetelmää, mutta käyttäen D-alaniinia (R)-aminobutaanihapon sijaan, saatiin (R)-2-bromipropaanihappo vaalean keltaisena öljynä.
b) (S)-2-(asetyylitio)propaanihappo
Vaalean vihreään kaliumtioasetaatin (3,94 g, 34,5 30 mmol) liuokseen asetonitriilissä (150 ml) lisättiin (R)2-. bromipropaanihapon (4,8 g, 31 mmol) liuos asetonitriilissä (12 ml) huoneenlämpötilassa käyttäen argon-ilmakehää. Saatua valkoista lietettä sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia, sitten suodatettiin. Suodos väkevöitiin tyhjössä. 35 Jäännös laimennettiin etyyliasetaattiin (100 ml), pestiin 106464 85 10-%:isella kaiiumbisulfaatin vesiliuoksella (50 ml) ja suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöi-tiin tyhjössä. Raakatuote (4,61 g) puhdistettiin flash-kromatografiällä (60 g Merck silikageeli, 1:45:54 etikka-5 happo/etyyliasetaatti/heksaani) , jolloin saatiin 3,7 g otsikon tuotetta vaalean keltaisena öljynä; [a]D = -114° (c = 0,50, metanoli).
c) [4S-[4a(R*> ,7a,9afi]]-oktahydro-4-[[2-(asetyyli-tio)-l-oksopropyyli]eunino]~5-oksopyrrolo[2,l-b][1,3]tiat-10 sepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kirkas (S)-2-(asetyylitio)propaanihapon (86 mg, 0,58 mmol) liuos metyleenikloridissa (5 ml, tislattu kal-siumhydridistä) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin [4S-(4a, 7a,9aS)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrrolo[2,1-b]-15 [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri, p-to- lueenisulfonihapposuolan [200,0 mg, 0,48 mmol, valmistettu esimerkissä 5(d) kuvatusta aineesta] liuoksella metyleenikloridissa (5 ml, tislattu kaisiumhydridistä), trietyyli-amiinilla (98 mg, 0,97 mmol), minkä jälkeen bentsotriät-20 sol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluori- fosfaatilla (255 mg, 0,58 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 22 tuntia ja huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Raaka reaktioseos väkevöitiin tyhjössä. Jäännös laimennettiin etyyliasetaattiin (100 ml), pestiin 5-%:isella vesi-: 25 pitoisella kaliumbisulfaatilla (30 ml), 50-%:isella kyl läisellä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä. Raakatuote puhdistettiin flash-kromatografiällä (40 g, Merck silikageeli, etyyliasetaatti), jolloin saa-30 tiin 180 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 143 - 145 °C.
106464 86 d) [4S-[4a(R*) , 7a, 9aB] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-oksopropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini- 7-karboksyylihappo
Kohdan (c) tuotteen (180 mg, 0,48 mmol) kirkas 5 liuos metanolissa (2 ml) käyttäen argon-ilmakehää jäähdytettiin -10 °C:seen ja käsiteltiin tipoittain 1 N natrium-hydroksidilla (1,95 ml, 1,95 mmol), johon johdettiin argonia, pitäen lämpötilan alle 0 °C:ssa. Seoksen annettiin sekoittua, kun argonia johdettiin 0 °C:ssa 3 tunnin ajan.
10 Seos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 5-%risen kaliumbisul-faatin vesiliuoksella argon-ilmakehässä. Tuotetta uutettiin etyyliasetaatilla (100 ml), johon johdettiin typpeä, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä. Raakatuote puhdistettiin flash-kro- 15 matografiällä (40 g, Merck silikageeli, 1:5:94 etikkahap-po/metanoli/metyleenikloridi), jolloin 'saatiin 154 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 150 - 152 °C; [a]D = -156° (c 0 0,50, metanoli) . TLC (1:5:94 etikkahappo/metanoli/metyleenikloridi) Rf = 0,28.
20 HPLC: tR (YMC, S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 1,5 ml/min, lineaarinen gradientti 0 - 100 % B:tä 30 minuutin aikana. Puskuri A = metanoli/vesi/ortofosforihappo (10:90:0,2), puskuri B = metanoli/vesi/ortofosforihappo (90:10:0,2)) = 14,69 min, yli 95 % piikin kokonaisalasta • 25 254 nm:ssä.
Anal, laskettu C12H18N204S2 · 0,75 CH3C02H:lle: C, 44,61; H, 5,82; N, 7,71; S, 17,64 Todettu: C, 44,76; H, 5,71; N, 7,81; S, 17,76
Esimerkki 18 30 [4S-[4a(R*) , 7a, 9a£]] -oktahydro-4-[3-syklopropyyli-2- . merkapto-l-oksopropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) (R)-2-[[(fenyylimetoksi)karbonyyli]amino]-4-pen-teenihappo 35 Seosta, jonka muodostivat D-allyyliglysiini (2,8 g, 24,3 mmol), 1 M natriumhydroksidin vesiliuos (25 ml) ja 106464 87 tetrahydrofuraani (10 ml, tislattu ketyylistä), sekoitettiin huoneenlämpötilassa kunnes se oli homogeeninen, sitten jäähdytettiin jäähauteessa. Saatuun, nopeasti sekoitettuun liuokseen lisättiin noin 5 ml 1,0 M natriumhydrok-5 sidin vesiliuosta, sitten tipoittain noin 1 g bentsyyli-klooriformaattia. Tämä toistettiin vielä 4 kertaa kunnes yhteensä 28 ml 1,0 M natriumhydroksidin vesiliuosta ja 4,80 g (95 %, 27 mmol) bentsyyliklooriformaattia oli lisätty. Reaktioseosta sekoitettiin 15 minuuttia 0 °C:ssa, 10 sitten 30 minuuttia huoneenlämpötilassa ja uutettiin sitten 50 ml:11a eetteriä. Vesikerros tehtiin happamaksi (pH = 1,5) lisäämällä 6 N kloorivetyhappoliuosta (noin 10 ml), sitten uutettiin kolmella 50 ml:n annoksella eetteriä. Kolme eetteriuutetta yhdistettiin, kuivattiin (magnesium-15 sulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 6,01 g otsikon tuotetta värittömänä öljynä.
b) (R) -2-[[ (fenyylimetoksi)karbonyyli]amino]-4-pen-teenihappo, fenyylimetyyliesteri
Cesiumkarbonaatti (4,28 g, 13,1 mmol) lisättiin 20 kohdan (a) tuotteen (5,96 g, 23,9 mmol) liuokseen vedettömässä dimetyyliformamidissa (25 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseosta sekoitettiin 20 minuuttia, sitten bentsyyli-bromidi (4,5 g, 26,3 mmol) lisättiin nopeasti (lievästi eksoterminen). Seosta sekoitettiin 30 minuuttia, sitten 1 25 jakouutettiin 100 ml:11a vettä ja 100 ml:11a eetteriä.
Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin kolmella 100 ml:n annoksella vettä, 50 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin öljy. Raaka materiaali puhdistettiin flash-kromatografial-30 la (Merck silikageeli, 24 x 5,0 cm, 1:10 etyyliasetaatti/ . heksaani, sitten 1:4 etyyliasetaatti/heksaani), jolloin saatiin 6,13 g otsikon tuotetta värittömänä öljynä.
106464 88 c) (R) -a- [ [ (fenyylimetoksi) karbonyyli] amino] syklo-propaanipropaanihappo, fenyylimetyyliesteri
Palladium(II)asetaatti (65 mg, 0,29 mmol) lisättiin kohdan (b) tuotteen (5,78 g, 17,1 mmol) liuokseen vedet-5 tömässä eetterissä (60 ml) ja sekoitettiin 10 minuuttia. Saatu seos jäähdytettiin 0 °C:seen, ylimäärä eetteripi-toista diatsometaania (valmistettu 12 g:sta N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiini/120 ml eetteriä) lisättiin annoksissa noin 15 minuutin aikana. Reaktioseosta sekoitet-10 tiin 15 minuuttia, sitten vaimennettiin lisäämällä 1 ml jääetikkaa. Liuos siirrettiin erotussuppiloon, pestiin 100 ml :11a kylläistä natriumbikarbonaatin vesiliuosta, 50 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin keltainen öljy. Raa-15 ka materiaali puhdistettiin flash-kromatografiällä (Merck silikageeli, 20 x 5,0 cm, 1:4 etyyliasetaatti/heksaani), jolloin saatiin 5,74 g otsikon tuotetta värittömänä öljynä .
d) (R)-(α-amino)syklopropaanipropaanihappo 20 Palladium hiilellä -katalyytti (10-%:inen, 1,14 g) lisättiin kohdan (c) tuotteen (5,71 g, 16,2 mmol) liuokseen metanolissa (75 ml) ja sekoitettiin vety-ilmakehässä (ilmapallo) huoneenlämpötilassa 48 tuntia.. Reaktioseos suodatettiin, jolloin poistettiin katalyytti, ja katalyyt-t 25 ti huuhdeltiin lämpimällä vedellä. Suodos vietiin sitten 0,4 μΜ polykarbonaattimembraanisuodattimen läpi. Suodos väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 2,03 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena.
e) (S)-a-(asetyylitio)syklopropaanipropaanihappo 30 Kohdan (d) tuotteen (2,00 g, 15,5 mmol) seosta 2,5 N vesipitoisessa rikkihapossa (30 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa, kunnes se oli homogeeninen ja jäähdytettiin sitten -5 °C:seen. Kaliumbromidi (6,50 g, 54,6 mmol) lisättiin tähän liuokseen yhdessä erässä. Seosta 35 sekoitettiin kunnes se oli homogeeninen. Natriumnitriitti 106464 89 (1,60 g, 23,2 mmol) lisättiin sitten pienissä erissä noin 25 minuutin aikana säilyttäen reaktion lämpötilan alle 0 °C:ssa. Reaktioseosta sekoitettiin vielä 1 tunti 0 °C:ssa, sitten huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia. Saatu 5 seos laimennettiin 30 ml:11a vettä ja uutettiin kolmella 30 ml:n annoksella eetteriä. Yhdistetyt eetteriuutteet pestiin 25 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 2,82 g raakaa (R)-(α-bromi)syklopropaanipropaanihappoa vaalean 10 keltaisena öljynä.
Tämän raa'an (R)-(α-bromi)syklopropaanipropaaniha-pon liuos lisättiin asetonitriilissä (10 ml) 5 minuutin aikana sekoitettuun kaliumtioasetaatin (1,83 g, 16,1 mmol) lietteeseen asetonitriilissä (20 ml) samalla jäähdyttäen 15 jäähauteessa. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan, sitten huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Reak-tiseos suodatettin, ja suodos väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin öljy. Öljy jakouutettiin 50 ml:11a eetteriä ja 50 ml :11a 5-%:isa natriumtiosulfaatin vesiliuosta.
20 Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin 25 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin keltainen öljy. Raaka materiaali puhdistettiin flash-kromatografiällä (Merck silikageeli, 12 x 5,0 cm, 1:19 metanoli/metyleenikloridi), jolloin saa-t 25 tiin 1,52 g otsikon tuotetta keltaisena öljynä.
f) [4S-[4a(R*) , 7a9aB] ] -oktahydro-4-[ [2- (asetyyli-tio)-3-syklopropyyli-l-oksopropyyli]amino]-5-oksopyrrolo-[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri Bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fos-30 fonium heksafluorifosfaatti (292 mg, 0,66 mmol) lisättiin yhdessä erässä seokseen, jonka muodostivat [4S-(4a,7a,9aS)]-oktahydro-4-amino-5-oksopyrrolo[2,1-b] [1,3]-tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri, p-tolueeni-sulfonihapposuola [250 mg, 0,60 mmol, valmistettu mate-35 riaalista, joka on kuvattu esimerkissä 5(d)] metyleeniklo- 90 106464 ridissa (3 ml, tislattu kalsiumhydridistä), trietyyliamii-ni (121 mg, 1,20 mmol) ja kohdan (e) tuote (122 mg, 0,65 mmol) metyleenikloridissa (3 ml, tislattu kalsiumhydridistä) . Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1 tunti, sitten 5 huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia. Saatu seos jakouutettiin 20 ml :11a etyyliasetaattia ja 20 ml :11a 1 M kaliumbisul-faatin vesiliuosta. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin 20 ml :11a 5-%:ista natriumbikarbonaatin vesiliuosta, 20 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) ja 10 väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin öljy. Raaka materiaali puhdistettiin flash-kromatografiällä (Merck silika-geeli, 12 x 3,0 cm, 1:1 etyyliasetaatti/heksaani), jolloin saatiin 191 mg otsikon tuotetta kiinteänä valkoisena vaahtona .
15 g) [4S- [4a (R*) ,7a, 9afi] ] -oktahydro-4- [ (3-syklopropyy- li-2-merkapto-l-oksopropyyli)amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (f) tuotteen (185 mg, 0,45 mmol) liuokseen metanolissa (3 ml) johdettiin argonia 10 minuutin ajan 20 0 °C:ssa ja sitten lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesi- liuos (3 ml, juuri johdettu argonia 10 minuutin ajan). Reaktioseosta sekoitettiin 2,5 tuntia huoneenlämpötilassa johtamalla jatkuvasta argonia, sitten tehtiin happamaksi lisäämällä 20 ml IM kaliumbisulfaattiliuosta ja uutet-: 25 tiin 20 ml :11a etyyliasetaattia. Orgaaninen uute pestiin 20 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin kumimainen aine. Kumimainen aine huuhdeltiin vedettömällä eetterillä,.sitten väkevöitiin öljyssä pumpatussa tyhjössä, jolloin saa-30 tiin 121 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona; [a]D = -103° (c = 0,23, metanoli). TLC (1:10:90 etikkahappo/meta-noli/metyleenikloridi) Rf = 0,46.
HPLC: tR (YMC S-3 ODS 6,0 x 150 mm; 1,5 ml/min, lineaarinen gradientti 0 - 100 % B:tä 30 minuutin aikana, 35 puskuri A = metanoli/vesi/ortofosforihappo (10:90:0,2), • 106464 91 puskuri B = metanoli/vesi/ortofosforihappo (90:10:0,2)) = 20,7 minuuttia suurempi kuin 97 % piikin kokonaisalasta 254 nm:ssä.
Anal, laskettu ClsH22N204S2 · 0,20 H20:lle: 5 C, 49,77; H, 6,23; N, 7,74; S, 17,71
Todettu: C, 50,01; H, 6,27; N, 7,50; S, 17,40
Esimerkki 19 [4S- (4α,7a,9a£) ] -oktahydro-4- [ [ (1-merkaptosyklopen-tyyli)karbonyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatse-10 piini-7-karboksyylihappo a) 1-merkaptosyklopentaanikarboksyylihappo
Litiumdi-isopropyyliamidin liuos valmistettiin käyttäen typpeä suojakaasuna di-isopropyyliamiinista (5,4 ml, 38,5 mmol) ja n-butyylilitiumista (2,5 M heksaa-15 neissa, 15,4 ml, 38,5 mmol) tetrahydrofuraanissa (17,6 ml) säilyttäen lämpötila välillä -3 - 0 °C. Kun seosta oli sekoitettu 15 minuuttia, syklopentaanikarboksyylihappo (2,0 g, 17,5 mmol) lisättiin tetrahydrofuraanissa (2 ml) 0-3 °C:ssa 25 minuutin aikana. 15 minuutin kuluttua 20 0 °C:ssa haude poistettiin, ja reaktioseosta sekoitettiin vielä 15 minuuttia, mikä aiheutti lämpötilan kohoamisen 15 °C:seen. Maitomainen valkoinen liuos jäähdytettiin -78 °C:seen, ja rikki (S8, 618,0 mg, 19,3 mmol) lisättiin kiinteänä aineena säilyttäen lämpötilan -78 °C:ssa. Reak-25 tioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan in situ. 70 tunnin kuluttua reaktioseos jäähdytettiin 0 °C:seen, vaimennettiin vedellä (pH 8 - 9) ja tehtiin nopeasti happamaksi pH-arvoon 1 6 N kloorivetyhapolla. Vesiliuosta uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 30 ml), pestiin suola-30 liuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 2,62 g otsikon tuotetta keltaisena öljynä.
b) 1-(asetyylitio)syklopentaanikarboksyylihappo
Kohdan (a) tuotteen (1,44 g, 9,89 mmol) liuokseen 35 IN natriumhydroksidin liuoksessa (20 ml, 19,7 mmol), jo- 106464 92 hon johdettiin typpeä, 0 °C:ssa lisättiin etikkahappoan-hydridi (0,93 ml, 9,89 mmol) . Tetrahydrofuraani (13 ml) lisättiin muodostuneen öljyn liuottamiseksi. Kun reaktio-seosta oli sekoitettu yksi tunti 0 °C:ssa (pH 7), se läm-5 mitettiin huoneenlämpötilaan ja lisää etikkahappoanhydri-diä (0,47 ml, 4,9 mmol) lisättiin, samoin kuin kiinteä kaliumkarbonaatti (2,04 g, 14,8 mmol) pH-arvoon 10 ja tetrahydrof uraani (4 ml). Kun reaktioseosta oli sekoitettu huoneenlämpötilassa yön yli, se tehtiin happamaksi pH-ar-10 voon IIN kloorivetyhapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuutteet yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin keltainen kiinteä aine (1,61 g). Kiinteä aine uudelleenkiteytettiin kahdesti 15 etyyliasetaatti/heksaaneista, jolloin saatiin 614 mg otsikon tuotetta vaalean ruskeana kiinteänä aineena; sp. 119,5 - 121,5 °C.
c) [4S-(4a,7a,9aβ)]-oktahydro-4-[[1-(asetyylitio)-syklopentyyli]karbonyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]-20 tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (b) tuotteen (94,5, 0,502 mmol) liuokseen metyleenikloridissa (3,6 ml) 0 °C:ssa käyttäen typpeä suo-jakaasuna lisättiin trietyyliamiini (70 μΐ, 0,502 mmol), minkä jälkeen [4S-(4a,7a,9aS)]-4-amino-oktahydro-5-okso-25 pyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyy liesteri, p-tolueenisulfonihapposuola [valmistettu materiaalista, joka on kuvattu esimerkissä 5(d), 198,9 mg, 0,478 mmol] yhdessä erässä, minkä jälkeen trietyyliamiini (66,6 μΐ, 0,478 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 5 mi-30 nuuttia 0 °C:ssa. Bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyy- liamino)fosfonium heksafluorifosfaatti (222,0 mg, 0,502 mmol) lisättiin sitten kiinteänä aineena. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan ja sitten huoneenlämpötilassa 2,25 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin 35 tyhjössä, ja jäännös jakouutettiin etyyliasetaatilla ja 106464 93 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (20 ml). Orgaaninen kerros pestiin puolikylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin kirkkaaksi öljyksi. Puhdistuksesta flash-5 kromatografiällä eluoiden 11:9 etyyliasetaatti/heksaanilla saatiin 169,3 mg otsikon tuotetta kirkkaana öljynä.
d) [4S- (4α,7a,9aB)]-oktahydro-4-[[(1-merkaptosyklo-pentyyli)karbonyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiat-sepiini-7-karboksyylihappo 10 Kohdan (c) tuotteen (167,3 mg, 0,404 mmol) liuos metanolissa (4 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin 1 N natriumhydrok-sidilla (4 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella). Kun reaktioseosta oli sekoitettu 1,5 tuntia 0 °C:ssa puhdis-15 taen jatkuvasti typellä, se lämmitettiin huoneenlämpötilaan. Yhteensä kolmen tunnin kuluttua reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 5-%:isella kaliumbisulfaatilla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin vedellä (20 ml) , suolaliuoksella, kuivat-20 tiin (natriumsulfaatti), suodatettiin, väkevöitiin tyhjössä ja haihdutettiin uudelleen heksaaneista, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine. Yhdiste liuotettiin dioksaa-niin (vedetön) ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin 110 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; [a]D = 25 -106,5° (c = 0,68, kloroformi). TLC (7:2,9:0,1, etyyliase taatti /heksaani/etikkahappo) Rf = 0,12.
HPLC: tR = 21,5 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 0 - l00-%:inen B:A, 30 minuutin lineaarinen gra-dientti ja 10 minuutin pysäytys, 1,5 ml/min; A = 90 % vet-30 tä/10 % metanolia + 0,2 % ortofosforihappoa; B = 90 % me- tanolia/ 10 % vettä + 0,2 % ortofosforihappoa; 220 nm. Anal, laskettu C1EH22N204S2 · 0,15 C4H8O2-0,7 H20*0,08 C6H14:lle: C, 49,37; H, 6,63; N, 7,16; S, 16,39 Todettu: C, 49,03; H, 6,37; N, 7,21; S, 16,65 94 106464
Esimerkki 20 [4S- (4a,7a,10a£) ] -4- [ (2-karboksi-l-okso-3-fenyyli-propyyli) amino] okfcahydro-5-okso-7H-pyrido [2,1-b] [1,3] tiat-sepiini-7-karboksyylihappo 5 a) 3-(fenyylimetyyli)propaanidihappo, monoetyyli- esteri 3-(fenyylimetyyli)propaanidihappo, dietyyliesteriä (2,5 g, 10 mmol) 10 ml:ssa tetrahydrofuraania sekoitettiin yön yli 10 ml:n kanssa 1 N litiumhydroksidia. Reaktioseos 10 tehtiin happamaksi 11 ml :11a 1 N kloorivetyhappoa ja uutettiin kahdella 50 ml:n annoksella etyyliasetaattia. Etyyliasetaattiuutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä. Konsentraat-ti kromatografoitiin silikageelin (80 g) läpi käyttäen 15 5-%:ista metanoli:kloroformi-liuotinsysteemiä. Sopivat fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin; jolloin saatiin 1,23 g otsikon tuotetta.
b) [4S-(4a,7a,10afi)]-4-[[2-(etoksikarbonyyli)-1- okso-3-f enyylipropyyli] amino] oktahydro-5-okso-7H-pyrido-20 [2,1b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (a) tuote (0,222 g, 1 mmol) ja [4S-(4a,7a, 10aE)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido[2,Ib]-[1,3]-tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri [0,258 g, 1 mmol, valmistettu, kuten esimerkissä 3(c) on kuvattu] : 25 liuotettiin metyleenikloridiin (5 ml) ja jäähdytettiin 0 °C:seen. Trietyyliamiini (0,14 ml, 1 mmol) lisättiin, ja reaktioseosta sekoitettiin yhden tunnin ajan. Bentsotriat-sol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluori-fosfaatti (0,442 g, 1 mmol) lisättiin, ja liuosta sekoi-30 tettiin 0 °C:ssa 1 tunnin ajan ja huoneenlämpötilassa 2,5 tuntia. Reaktioseos laimennettiin 50 ml :11a metyleeniklo-ridia ja pestiin vedellä, 10-%:isella natriumbisulfaatil-la, kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaatilla, kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin 35 tyhjössä. Jäännös kromatografoitiin silikageelin läpi •« 106464 95 käyttäen 30-%:ista etyyliasetaattia heksaaneissa. Sopivat fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,22 g otsikon tuotetta.
c) [4S- (4a,7a,10aB)]-4-[(2-karboksi-l-okso-3-fenyy-5 lipropyyli) amino] oktahydro-5-okso-7H-pyrido[2 , lb] [1,3] -tiatsepiini-7-karboksyy1ihappo
Kohdan (b) tuotetta (0,22 g, 0,476 mmol) sekoitettiin 1 N litiumhydroksidin (5 ml) kanssa tetrahydrofuraanissa (5 ml) huoneenlämpötilassa 3 tunnin ajan. Reaktio-10 seos tehtiin happamaksi pH-arvoon 2 1 N kloorivetyhapolla ja väkevöitiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja pestiin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä 3 ml:ksi, jolloin tuote saostui. Seistyään 0 °C:ssa yön yli kiinteä 15 aine suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 0,16 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 159 -162 °C; [a]D = -84,92° (c = 0,7, metanoli) . TLC (kloroformi :metanoli, 9:1) Rf = 0,23, 0,28.
HPLC: tR = 16,15, 16,35 min; (UV 254 nm); YMC S-3 20 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm, 3 μ päätepeitetty kolonni, li neaarinen gradientti 50 - 90-%:inen vesipitoinen metanoli, joka sisältää 0,2-%:ista ortofosforihappoa, 20 min, 1,5 ml/min (44,9-%:inen, 55,l-%:inen isomeeriseos).
Anal, laskettu C20H24N2SO6 · 0,1 H20:lle: 25 C, 56,89; H, 5,78; N, 6,66; S, 7,59
Todettu: C, 56,98; H, 5,68; N, 6,58; S, 7,15
Esimerkki 21 [4S-[4a(R*) ,7a,10ali]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso[1,4]oksatsi.no[3,4-30 b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) 0-(2,2-dimetoksietyyli)-N-[N-[(fenyylimetoksi)-karbonyyli]-L-homoseryyli]-L-seriini, metyyliesteri N- [0-[(1,1-dimetyylietyyli)dimetyylisilyyli]-N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-homoseryyli]-0-(2,2-dime-35 toksietyyli)-L-seriini, metyyliesterin [5,56 g, 10 mmol, 96 106464 valmistettu, kuten on kuvattu esimerkissä 10(h)] liuos metanolissa (65 ml) jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-suola-haude) , käsiteltiin p-tolueenisulfonihappo monohydraatilla (386 mg, 2,0 mmol) ja sekoitettiin 0 °C:ssa 1,5 tuntia.
5 Reaktio vaimennettiin natriumbikarbonaattiliuoksella (198 mg, 20 ml:ssa vettä), sekoitettiin 5 minuuttia ja haihdutettiin sitten metanolin poistamiseksi. Vesifaasia uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 200 ml) ja yhdistetty orgaaninen uute pestiin vedellä (110 ml), 5-%:isella nat-10 riumbikarbonaatilla (80 ml) ja suolaliuoksella (80 ml) , kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä. Raakatuote kro-matografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolonnia etyyliasetaatti rheksaanilla (2:1) ja etyyliasetaat-15 ti:metanolilla (98:2), jolloin saatiin 3,975 g otsikon tuotetta siirappimaisena aineena. TLC (etyyliasetaatti :heksaani, 4:1) Rf = 0,17.
b) O-(2,2-dimetyylioksietyyli)-N-[O-(metyylxsulfo-nyyli) -N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-homoseryyli]-L-20 serxxnx, metyylxesteri
Kohdan (a) tuotteen (3,975 g, 8,98 mmol) liuos kuivassa metyleenikloridissa (52 ml) jäähdytettiin -15 °C:seen, käsiteltiin trietyyliamiinilla (1,82 ml, 13,1 mmol) ja metaanisulfonyylikloridilla (0,82 ml, 10,6 mmol) : 25 ja sekoitettiin -15 °C:ssa 30 minuuttia. Reaktioseos vai mennettiin 25-%:isella ammoniumkloridillä (19 ml), lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja laimennettiin etyyliasetaatilla (750 ml). Orgaaninen faasi pestiin 5-%:isella ka-liumbisulfaatilla (100 ml), 50-%:isella kylläisellä suo-30 laliuoksella (100 ml) ja kylläisellä suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatet- « tiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 4,9 g otsikon tuotetta vahamaisena kiinteänä aineena. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 4:1) Rf = 0,32.
• 4 97 106464 c) N-[S-asetyyli-N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-homokysteinyyli]-O-(2,2-dimetoksietyyli)-L-seriini, metyy-liesteri
Cesiumkarbonaatti (5,56 g, 17,04 mmol) lisättiin 5 tiolietikkahapon (2,6 ml) liuokseen kuivassa metanolissa (40 ml) , sekoitettiin 10 minuuttia, sitten haihdutettiin kuiviin. Saatu kiinteä aine trituroitiin asetonin kanssa (7 x 8 ml) ja saadut luonnonvalkoiset kiinteät aineet kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 4,39 g cesiumtiolietik-10 kahappoa.
Cesiumtiolietikkahapon (2,43 g, 1,3 ekv.) suspensiota kuivassa dimetyyliformamidissa (8,0 ml) käsiteltiin kohdan (b) tuotteen (4,9 g, 8,98 mmol) liuoksella kuivassa dimetyyliformamidissa (24 ml) ja sekoitettiin 16 tuntia 15 huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla (1,0 1), pestiin peräkkäin 5-%:isella natriumbikarbonaatilla (2 x 150 ml), vedellä (2 x 150 ml) ja suolaliuoksella (150 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kui-20 viin ja kuivattiin tyhjössä. Raakatuote kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolonnia etyyliasetaatti :heksaani-seoksilla (1:1, 2:1), jolloin saatiin 3,93 g otsikon tuotetta vahamaisena kiinteänä aineena. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 4:1) Rf = 0,63.
: 25 d) O- (2,2-dimetoksietyyli) -N- [N- [ (fenyylimetoksi) - karbonyyli]-L-homokysteinyyli]-L-seriini, metyyliesteri
Kohdan (c) tuotteen (200 mg, 0,49 mmol) liuos metanolissa (8,0 ml) puhdistettiin argonilla 30 minuutin ajan, jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-suola-haude) ja käsiteltiin 30 25-%:isella natriummetoksidilla metanolissa (0,11 ml, 0,5 mmol) säilyttäen argon-kuplituksen koko lisäyksen ja reaktion keston ajan. 5 minuutin kuluttua 0 °C:ssa seos vaimennettiin 25-%: isella ammoniumkloridilla (2,3 ml) ja jakouutettiin etyyliasetaatilla (2 x 12 ml) ja ve-35 dellä (2,3 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin ·« 98 106464 25-%:isella ammoniutnkloridilla (4,6 ml) ja suolaliuoksella (4,6 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 183,2 mg otsikon tuotetta valkoisena kiin-5 teänä aineena. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 4:1) Rf = 0,62.
e) [4S-(4α,7a,10aB)]-oktahydro-5-okso-4-[[(fenyyli-metoksi)karbonyyli]amino][l,4]oksatsino[3,4-b][1,3]tiatse-piini-7-karboksyylihappo 10 Kohdan (d) tuotteen (50 mg, 0,11 mmol) liuosta kui vassa metyleenikloridissa (2,0 ml) käsiteltiin AmberlystR 15:llä (H+ muoto; 13 mg), sekoitettiin 3 vuorokautta huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna, käsiteltiin vielä AmberlystR 15:llä (13 mg) ja sekoitettiin vielä 15 3 vuorokautta. Liuos dekantoitiin ja kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolonnia etyyliasetaatti :heksaani-seoksilla (1:3; 1:1), jolloin saatiin 21,1 mg otsikon tuotetta siirappimaisena aineena. TLC (etyyliasetaatti:heksaani, 4:1) Rf = 0,70.
20 f) [4S-(4a,7a,10aB)]-oktahydro-4-amino-5-okso[1,4]- oksatsino[3,4-b] [1,3] tiatsepiini-7-karboksyylihappo, me-tyyliesteri
Kohdan (e) tuotteen (421 mg, 1,01 mmol) liuosta kuivassa metyleenikloridissa (25 ml) käsiteltiin trimetyy-25 lisilyylijodidilla (0,72 ml, 5,06 mmol) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 1,75 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin ja saatu siirappimainen aine jakouutettiin etyylieetterillä (50 ml) ja 0,2 N k.loo-rivetyhapolla (2 x 25 ml). Vesifaasi vietiin pH-arvoon 10 30 kylläisellä natriumbikarbonaatilla (25 ml) , käsiteltiin kiinteällä natriumkloridilla (2,0 g) ja uutettiin metylee-nikloridilla (3 x 75 ml), jolloin saatiin 219 mg otsikon tuotetta siirappimaisena aineena. Vesifaasin toisesta käsittelystä natriumkloridilla (2,0 g) ja uudelleenuuttami-35 sesta metyleenikloridilla (2 x 100 ml) saatiin vielä 37 mg • i 106464 99 otsikon tuotetta. TLC (metyleenikloridi:metanoli, 9:1) Rf = 0,23.
g) [4S-[4a (R*) , 7a, 10aB] ]-oktahydro-4-[ [2-(asetyyli-tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli] amino]-5-okso[1,4]oksatsino-5 [3,4-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri (S)-2- (asetyylitio)bentseenipropaanihappo, disyklo-heksyyliamiinisuola (516 mg, 1,32 mmol, 1,2 ekv.) sus-pendoitiin etyyliasetaattiin (42 ml), pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (5 x 6,0 ml) ja suolaliuoksella 10 (6,0 ml), kuivattiin (vedetön magnesiumsulfaatti), suoda tettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä.
Vapaa happo liuotettiin kuivaan metyleenikloridiin (9,5 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-suola-haude) ja käsiteltiin peräkkäin kohdan (f) tuotteen (285,5 mg, 1,09 15 mmol) liuoksella kuivassa metyleenikloridissa (4,2 ml), trietyyliamiinilla (0,14 ml, 1,15 mmol) ja bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaa-tilla (484 mg, 1,09 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1,0 tuntia ja huoneenlämpötilassa 2,0 20 tuntia käyttäen argonia suojakaasuna, sitten tislattiin kuiviin. Jäljelle jäänyt siirappimainen aine liuotettiin etyyliasetaattiin (40 ml), pestiin 0,5 N kloorivetyha-polla (2 x 6,6 ml), vedellä (6,6 ml) ja suolaliuoksella (6,6 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatet-t 25 tiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä. Raaka-tuote kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden etyyliasetaattirheksaani-seoksilla (1:2, 1:1), jolloin saatiin 382,9 mg otsikon tuotetta siirappimaisena aineena. TLC (etyyliasetaatti .-heksaani, 1:1) Rf = 0,28.
30 h) [4S-[4a(R*),7a,10aB]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l- okso-3-fenyylxpropyyli)amino]-5-okso[1,4]oksatsino[3,4-b]- [1,3] tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (g) tuotteen (382,9 mg, 0,82 mmol) liuos metanolissa (9,0 ml) puhdistettiin argonilla 30 minuutin 35 ajan, jäähdytettiin 0 °C:seen (jää-suola-haude), käsitel- • « 106464 100 tiin sitten 1,0 N natriumhydroksidilla (3,32 ml, 4,0 ekv.; aikaisemmin puhdistettu argonilla 30 minuutin ajan) säilyttäen argon-kuplituksen koko lisäyksen ja reaktion keston ajan. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 5,0 tuntia 5 ja huoneenlämpötilassa 1,0 tuntia, vietiin pH-arvoon 2,0 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (14,5 ml), lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 50 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella (10 ml) , kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suo-10 datettiin, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin tyhjössä. Saatu siirappimainen aine haihdutettiin kahdesti heksaa-nista (25 ml) , ja saatu kiinteä vaahto kromatografoitiin silikageelikolonnilla (Merck) eluoiden kolonnia toluee-ni:etikkahappo-seoksilla (100:1, 50:1, 20:1), jolloin saa-15 tiin 212 mg otsikon tuotetta kiinteänä aineena; sp. 224 -226 °C; [a]D = -50,2° (c = 0,45, metanoli) . TLC (toluee- ni:etikkahappo, 5:1) Rf = 0,28.
HPLC: tR = 5,37 min (UV 220 nm) (98,9 %); YMC S-3 ODS (C-18) 6 x 150 mm; 60 % (10 % vettä, 90 % metanolia, 20 0,2 % ortofosforihappoa) / 40 % (90 % metanoli, 10 % vet tä, 0,2 % ortofosforihappoa), isokraattinen.
Anal, laskettu C18H22N205S2 · 0,14 H20:lle: C, 52,34; H, 5,44; N, 6,78; S, 15,53 Todettu: C, 52,58; H, 5,57; N, 6,44; S, 15,16 25 Esimerkki 22 [4S- [4a (R*) ,7a, 10afi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Esimerkkin 3 ja 11 tuote valmistettiin myös seuraa- 30 vasti: a) [4S-(4a,7a,10aB)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli-esteri , p-tolueenisulfonihapposuola [4S-(4a,7a,10aE)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-py-35 rido[2,l-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli- esteri (6,11 g) liuotettiin etyyliasetaattiin (noin « · 101 106464 100 ml) ja käsiteltiin p-tolueenisulfonihappo monohyd-raatin (4,52 g) liuoksella metanolissa (3 ml) ja etyyliasetaatissa (20 ml). Sakka muodostui heti. Seos laimennettiin uudella etyyliasetaatilla, ja kiinteä aine otettiin 5 talteen suodattamalla. Kiinteä aine pestiin etyylieette-rillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 7,908 g otsikon tuotetta vaalean keltaisena kiinteänä aineena 98-%:n puhtaudella; sp. 179 - 181 °C (haj.).
b) [4S-[4a(R*) ,7a,10aB] ] -oktahydro-4-[ [2- (asetyyli- 10 tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1- b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kohdan (a) tuotteen (636 mg, 1,48 mmol) lietettä metyleenikloridissa (5 ml) ja dimetyyliformamidissa (l ml) käsiteltiin N-metyylimorfoliinilla (163 μΐ, 150 mg, 1,48 15 mmol), minkä jälkeen l-hydroksi-7-atsabentsotriatsolilla (208 mg, 1,52 mmol). Vaalean keltaista liuosta käsiteltiin sitten (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihapolla (333 mg, 1,48 mmol) metyleenikloridissa (5 ml) ja jäähdytettiin jäähauteessa. Etyyli-3-(dimetyyliamino)propyyli-20 karbodi-imidi, vetykloridisuola (2,88 mg, 1,50 mmol) li sättiin ja seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 1 tunnin ajan ja huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia. Liuotin poistettiin kier-tohaihdutuksella ja jäännös jakouutettiin etyyliasetaatilla ja 0,5 N kloorivetyhapolla. Etyyliasetaattiuute pestiin t 25 peräkkäin vedellä (kahdesti), 50-%:isella kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja tislattiin, jolloin saatiin 651,2 mg otsikon tuotetta valkoisena vaahtona.
c) [4S-[4a(R*) ,7a,10afi]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l- 30 okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (b) metyyliesterituotteen liuosta metanolissa, josta happi oli poistettu, käsiteltiin 1 N natriumhyd-roksidilla esimerkin 3(d) menetelmän mukaisesti, jolloin 35 saatiin otsikon tuote.
• · 102 106464
Esimerkki 23 [4S- [4α (R*) ,7α, lOafi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido [2,1-b] - [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 5 Esimerkkien 3, 11 ja 22 tuote valmistettiin myös seuraavasti: a) H-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-metioniini 2 l:n kolvissa, joka oli varustettu mekaanisella sekoittimella ja sisäisellä lämpömittarilla, natriumhyd-10 roksidi (61,65 g, 1,541 mol) liuotettiin tislattuun veteen (1 000 ml) . Tähän liuokseen lisättiin L-metioniini (100,0 g, 0,670 mol) huoneenlämpötilassa. Liuos jäähdytettiin jäähauteessa (sisäinen lämpötila 3 °C) , ja bentsyyli-klooriformaatti (110 ml, 0,737 mol) lisättiin 10 minuutin 15 aikana. 15 minuutin induktioperiodin jälkeen sisäinen lämpötila nousi 3 °C:sta 12 °C:seen 30 minuutin aikana, ja putosi sitten 0 °C:seen 15 minuutin aikana. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia, jona aikana aluksi samea reaktioseos tuli homogeeniseksi. Jäähaude poistettiin, ja 20 reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan 1 tunnin aikana. Reaktioseos siirrettiin erotussuppiloon ja pestiin heksaanilla (2 x 300 ml). Vesikerros tehtiin happamaksi 6 N kloorivetyhapolla pH-arvoon 5 ja laimennettiin etyyliasetaatilla (600 ml). Seos tehtiin edelleen happa-• 25 maksi pH-arvoon 2. Orgaaninen kerros erotettiin, ja vesi- kerrosta uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 600 ml). Orgaaniset uutteet yhdistettiin ja pestiin suolaliuoksella (750 ml), kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin vaalean keltainen 30 öljy. Raakatuote (öljy) liuotettiin tolueeniin (1500 ml), ja liuos väkevöitiin puoleen tilavuuteensa. Toinen erä tolueenia (750 ml) lisättiin ja väkevöitiin uudelleen siten, että 630 ml tolueenia jäi jäljelle. Tätä liuosta varastoitiin 5 °C:ssa yön yli, jona aikana osa tuotteesta 35 kiteytyi liuoksesta. Kiinteä aine liuotettiin uudelleen »4 106464 103 lämmittämällä huoneenlämpötilaan. Tolueeni (134 ml) lisättiin sitten (muutama kidealkio jäi jäljelle). Sekoittaen mekaanisesti heptaani (500 ml) lisättiin 30 ml:n erissä 10 minuutin aikavälein (noin 3 tuntia kokonaislisäysaika).
5 Tässä vaiheessa tuote alkoi kiteytyä liuoksesta. Uusi erä heptaania (1020 ml) lisättiin 1,5 tunnin aikana, ja saatua lietettä sekoitettiin 2 tuntia. Tuote otettiin talteen tyhjösuodatuksella, pestiin 1:2 tolueeni:heptäänillä (3 x 150 ml) ja heptaanilla (3 x 500 ml) ja kuivattiin ilmalla, 10 jolloin saatiin 158,6 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 66 °C; [a]D = -1,5° (c = l, 95 % etanoli) . TLC (etanoli:vesi, 3:1) Rf = 0,78.
Anal, laskettu C13H17N04S: lie : C, 55,11; H, 6,05; N, 4,94 15 Todettu: C, 54,96; H, 6,20; N, 4,83 b) N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-metioniini, me-tyyliesteri 3 l:n kolvissa, joka oli varustettu mekaanisella sekoittimella ja argonin sisääntulolla, kohdan (a) tuo-20 te (100,0 g, 0,353 mol) liuotettiin metanoliin (2 1) ja p-tolueenisulfonihappo monohydraatti (6,71 g, 0,035 mol) lisättiin. Reaktioseosta sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna 21 tuntia. Trietyyliamiini (4,9 ml, 0,035 mol) lisättiin, ja reaktioseosta sekoitettiin vielä 15 25 minuuttia. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä vaalean keltaiseksi öljyksi. Öljy liuotettiin etyyliasetaattiin (900 ml) , ja liuos pestiin 1 N kloorivetyhapolla (740 ml) , kylläisellä natriumbikarbonaatilla (2 x 740 ml) ja suolaliuoksella (740 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin (magne-30 siumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä vaa lean keltaiseksi öljyksi. Öljy väkevöitiin heksaanista « (2 x 100 ml) , jolloin saatiin 98,22 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena.
106464 104 c) N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-metioniini, sulfoksidi, metyyliesteri 3 l:n kolvissa, joka oli varustettu mekaanisella sekoittimella, kohdan (b) tuote (97,95 g, 0,329 mol) 5 liuotettiin metanoliin (1675 ml) ja tislattuun veteen (215 ml). Liuos jäähdytettiin jäähauteessa, ja natriumbikarbonaatti (28,5 g, 0,339 mol) lisättiin. N-kloorisukki-nimidi (44,0 g, 0,329 mol) lisättiin pienissä erissä 25 minuutin aikana siten, että sisäinen lämpötila ei ylittä-10 nyt 7 °C. Reaktioseosta sekoitettiin jäähauteessa 1 tunnin ajan ja annettiin sitten lämmetä huoneenlämpötilaan 1 tunnin aikana. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä noin 75 %:lla metanolin poistamiseksi, laimennettiin etyyliasetaatilla (1 000 ml) ja pestiin suolaliuoksella (500 ml) . Suola- 15 liuoskerros palautusuutettiin etyyliasetaatilla (2 x 200 ml) . Orgaaniset uutteet yhdistettiin, kuivattiin (magnesiumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä kirkkaaksi, viskoosiksi öljyksi. Öljy väkevöitiin toluee-nista (3 x 100 ml) ja jäljelle jääneet liuottimet poistet-20 tiin korkeavakuumissa, jolloin saatiin raaka otsikon tuote kirkkaana öljynä, joka kiinteytyi valkoiseksi kiinteäksi aineeksi (131,4 g). Raakatuote sisälsi 12 paino-% sukkini-midiä ja 9 paino-% tolueenia NMRrllä. Tuote oli sulfoksi-didiastereomeerien seos.
25 d) S- [ (asetyyIloksi) metyyli] -N- [ (fenyylimetoksi) - karbonyyli]-L-homokysteiini, metyyliesteri 1 l:n kolviin, joka sisälsi kohdan (c) tuotteen (102,8 g korjattu paino, 0,328 mol), lisättiin tolueeni (480 ml), natriumasetaatti (32,3 g, 0,394 mol) ja etikka-30 happoanhydridi (186 ml, 1,970 mol). Saatua seosta palau-tusjäähdytettiin (118 °C) käyttäen argonia suojakaasuna 18 < tunnin ajan. Tumman ruskean reaktioseoksen annettiin jäähtyä huoneenlämpötilaan. Yhden tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseoksesta tuli erittäin paksu kiinteinä 35 aineina. Kiinteät aineet liuotettiin etyyliasetaatilla 105 106464 (100 ml) , ja seos väkevöitiin osittain tyhjössä viskoosiksi ruskeaksi jäännökseksi. Jäännös väkevöitiin tolueenista (240 ml) etikkahappoanhydridin poistamiseksi, laimennettiin etyyliasetaatilla (1000 ml), ja pestiin varovasti 5 kylläisellä natriumbikarbonaatilla (4 x 680 ml). Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella (450 ml) , kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä. Jäljelle jääneet liuottimet poistettiin korkeatyhjös-sä, jolloin saatiin vaalean ruskea kiinteä aine. Raakatuo-10 te liuotettiin n-butyyliasetaattiin (450 ml) lämmittäen (35 °C) ja sekoittaen. Huoneenlämpötilaan jäähdytyksen jälkeen heksaani (200 ml) lisättiin hitaasti liuokseen sekoittaen 15 minuutin aikana. Tässä vaiheessa tuote ki-teytyi liuoksesta. Uusi erä heksaania (700 ml) lisättiin 15 30 minuutin aikana, ja saatua lietettä sekoitettiin 3 tun tia. Tuote otettiin talteen suodattamalla ja pestiin 1:2 n-butyyliasetaattirheksaanilla (200 ml), 1:4 n-butyyli-asetaatti :heksaanilla (2 x 240 ml) ja heksaanilla (2 x 250 ml). Tuote kuivattiin ilmalla, sitten kuivattiin kor-20 keatyhjössä, jolloin saatiin 87,7 g otsikon tuotetta vaalean ruskeana kiinteänä aineena; sp. 73 °C; [a]D = -1,6° (c = 1, 95 % etanoli). TLC (5-%-inen metanoli/metyleeni- kloridi) Rf = 0,80.
Anal, laskettu C16H21N06S : lie : 25 C, 54,07; H, 5,95; N, 3,94
Todettu: C, 53,48; H, 5,74; N, 3,82 e) S-asetyyli-N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-ho-mokysteiini 1 l:n kolvissa kohdan (d) tuotteen (83,0 g, 0,233 30 mol) liuokseen tetrahydrofuraanissa (415 ml) johdettiin argonia 30 minuutin ajan. Erillisessä 2 l:n kolvissa, joka on varustettu mekaanisella sekoittimellä ja argon-sisääntulolla, 86,8-%:iseen kaiiumhydroksidin (62,7 g, 0,969 mol) liuokseen tislatussa vedessä (280 ml) johdettiin ar-35 gonia 15 minuutin ajan.
♦ « 106 106464
Tetrahydrofuraanin liuos lisättiin kaliumhydroksi-diliuokseen (sisäinen lämpötila 20 °C) nopeasti kanyylin kautta sekoittaen voimakkaasti käyttäen argonia suojakaa-suna. Kolvi, joka sisälsi kohdan (d) tuotteen, huuhdeltiin 5 20 ml :11a tetrahydrofuraania (johdettu argonia 15 minuutin ajan) ja huuhdos lisättiin reaktioseokseen. 30 minuutin kuluttua reaktioseos oli kirkas ja bifaasinen, ja eksoter-mia 28 °C:seen oli tapahtunut.
Vielä 2 tunnin kuluttua reaktioseos jäähdytet-10 tiin 1 °C:seen (sisäinen), ja natriumboorihydridi (2,75 g, 0,073 mol) lisättiin yhdessä erässä (eksotermia 6,8 °C:seen). Reaktioseosta sekoitettiin vielä 20 minuuttia 0 °C:ssa ja annettiin sitten lämmetä 11 °C:seen 30 minuutin aikana. Reaktioseos jäähdytettiin 1 °C:seen ja etikka-15 happoanhydridi (68,6 ml, 0,727 mol) lisättiin 10 minuutin aikana. Eksotermia 10 °C:seen tapahtui lisäyksen aikana. Sisäinen lämpötila putosi takaisin 4 °C:seen ennen kuin lisäys oli suoritettu loppuun. Jäähdytyshaude poistettiin, ja reaktioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 45 20 minuuttia.
Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä noin puoleen tilavuuteensa, tehtiin happamaksi pH-arvoon 2 6 N kloorive-tyhapolla (175 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 1,1 1). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuok-. 25 sella (560 ml) . Orgaanista kerrosta käsiteltiin aktiivi- hiilellä ja vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä keltaiseksi öljyksi, n-butyy-liasetaatti (380 ml) lisättiin, ja liuos väkevöitiin tyhjössä (45 °C) puoleen tilavuuteensa. Toinen erä n-butyy-30 liasetaattia (190 ml) lisättiin ja väkevöitiin uudelleen siten, että 190 ml n-butyyliasetaattia jäi jäljelle. Hep-taani (300 ml) lisättiin hitaasti sekoittaen sameaksi, ja kidealkiot lisättiin. 15 minuutin kuluttua valkoinen kiinteä aine kiteytyi liuoksesta. Toinen erä heptaania 35 (570 ml) lisättiin hitaasti 30 minuutin aikana, ja saatua • 106464 107 lietettä sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Tuote otettiin talteen suodattamalla, pestiin 1:3 n-butyyli-asetaatti:heptaanilla (2 x 275 ml) ja heksaanilla (2 x 275 ml) , kuivattiin ilmalla ja kuivattiin sitten korkea-5 tyhjössä, jolloin saatiin 50,1 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; sp. 73 - 74 °C; [a]D = -1,3° (c = 1, 95-%:n etanoli). TLC (etanoli:vesi, 3:1) Rf = 0,83.
Anal. laskettu C14H17NOsS: lie: C, 54,01; H, 5,50; N, 4,50 10 Todettu: C, 53,88; H, 5,45; N, 4,44
Suodos väkevöitiin siten, että 100 ml butyyliase-taattia jäi jäljelle. Tätä liuosta käsiteltiin 310 ml :11a heptaania, kuten on edellä kuvattu, jolloin saatiin toinen sato, 8,4 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena 15 kokonaissaannoksi 58,5 g.
f) [S- (R1,R1) -2- [ [4- (asetyylitio) -l-okso-2- [ [ (fenyy-1 imetoksi)karbonyyli]amino]butyyli]amino]-6,6-dimetoksi-heksaanihappo, metyyliesteri S-asetyyli-N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-ho-20 mokysteiini (0,456 mol) liuotettiin metyleenikloridin (600 ml) ja dimetyyliformamidin (90 ml) seokseen, ja hyd-roksibentsotriatsoli hydraatti (64,72 g, 0,479 mol) lisättiin. Seos jäähdytettiin jäähauteessa, ja (S)-2-amino-6,6-dimetoksiheksaanihappo, metyyliesterin [valmistettu, kuten 25 on kuvattu esimerkissä 1(e), 93,7 g, 0,456 mol] liuos liuotettuna metyleenikloridiin (600 ml) lisättiin. Lopuksi etyyli-3- (dimetyyliamino)propyylikarbodi-imidi, vetyklori-disuola (91,83 g, 0,479 mol) lisättiin,' ja reaktioseosta sekoitettiin yhden tunnin ajan 0 °C:ssa, sitten 2 tuntia 30 huoneenlämpötilassa. Tämän vaiheen lopussa reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös jakouutettiin etyyliasetaatilla (3 1) ja kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaatilla (1 1) . Orgaaninen uute pestiin vedellä (1 1) , 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (1 1), vedellä (1 1) ja 35 suolaliuoksella (1 1), sitten kuivattiin (natriumsulfaat- • . - 106464 108 ti) ja väkevöitiin tyhjössä 238 g:ksi raakatuotetta. Raa-katuote liuotettiin etyyliasetaatti:raetyleenikloridiin (1:1, 300 ml) ja levitettiin 10 x 15 cm Merck silikagee-likakulle. Eluoinnista 8:2 etyyliasetaatti:heksaanilla 5 (71), minkä jälkeen etyyliasetaatilla (4 1) saatiin 205,28 g otsikon tuotetta.
g) [4S- (4cc,7a,10a£) ] -oktahydro-4- [ [ (fenyylimetok-si)karbonyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatse-piini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri 10 Kohdan (f) tuotteen [205,28 g, 0,412 mol, kuivattu haihduttamalla metyleenikloridi/tolueenissa] liuos metano-lissa (2 1) jäähdytettiin 0 °C:seen (jäähaude) ja puhdistettiin argonilla 30 minuutin ajan. 25 paino-%:inen nat-riummetoksidin liuos metanolissa (95,1 ml, 1,01 ekv.) li-15 sättiin nopeasti jatkaen argon-puhdistusta, ja reaktio-seosta sekoitettiin 10 minuuttia pidempään, sitten vaimennettiin lisäämällä 1 1 kylläistä ammoniumkloridiliuosta, laimennettiin 0,5 1:11a vettä ja käsiteltiin 3 1:11a etyyliasetaattia. Saatu seos jaettiin kahteen erään, jotka 20 kumpikin väkevöitiin erikseen tyhjössä orgaanisten aineiden (etyyliasetaatti ja metanoli) poistamiseksi. Väkevöidyt jäännökset yhdistettiin uudelleen ja käsiteltiin 1 litralla etyyliasetaattia. Orgaaninen kerros erotettiin ja huuhdeltiin 0,5 1:11a kylläistä ammoniumkloridia. Yhdis-25 tettyjä vesiliuoksia uutettiin uudelleen 1 1:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset uutteet yhdistettiin ja pestiin 1 litralla vettä ja kahdella 1 l:n annoksella suolaliuosta, kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös haihdutettiin edelleen metyleenikloridil-30 la ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 182,65 g kohdan (f) tuotteen vapaata sulfhydryyliä.
Tämä vapaa sulfhydryyli välituote (0,400 mol) liuotettiin metyleenikloridiin (4 1) ja käsiteltiin 30,8 ml :11a (0,400 mol) trifluorietikkahappoa. Reaktioseosta 35 palautusjäähdytettiin 16 tuntia, sitten jäähdytettiin ja 109 106464 väkevöitiin tyhjössä. Saatu jäännös liuotettiin 2 l:aan etyyliasetaattia, sitten pestiin 400 ml:11a 0,1 N kloori-vetyhappoa, 1 1:11a vettä, 1 1:11a kylläistä natriumbikarbonaattia, 1 1:11a vettä ja 1 1:11a suolaliuosta, kuivat-5 tiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös haihdutettiin metyleenikloridilla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 166,24 g otsikon tuotetta.
h) [4S-(4a,7a,10a£)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli-10 esteri
Joditrimetyylisilaani (76,6 ml, 0,538 mol) lisättiin käyttäen argonia suojakaasuna liuokseen, joka sisälsi kohdan (g) tuotteen (162,43 g, 0,414 mol) liuotettuna me-tyleenikloridiin (1,5 1) . Kun reaktioseosta oli sekoitettu 15 1,5 tuntia, se väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös jakouutet- tiin 1 1:11a etyyliasetaattia ja 700 ml-:11a 1 N kloorive-tyhappoa (C02 kehittymistä tapahtui; pH 1,2). Etyyliase-taattikerros erotettiin ja uutettiin 300 ml :11a 1 N kloori vetyhappoa. Yhdistetyt happamat vesiuutteet pestiin 20 vielä 1 1:11a etyyliasetaattia, sitten jäähdytettiin 0 °C:seen ja tehtiin emäksiseksi 4 N natriumhydroksidilla (noin 275 ml) pH-arvoon 10,0. Vesikerros tehtiin kylläiseksi kiinteällä natriumkloridilla, sitten uutettiin viidellä 1 l:n annoksella metyleenikloridia. Yhdistetyt or-.. 25 gaaniset uutteet kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatet tiin ja väkevöitiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin uudelleen 1 l:aan metyleenikloridia ja huuhdeltiin 0,5 1:11a suolaliuosta, kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 98,8 g otsikon tuotetta. 30 i) [4S-[4a (R*) , 7a, lOaB] ]-oktahydro-4-[ [2-(asetyy- . litio)-l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido- [2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo,metyyliesteri (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo, disyklo-heksyyliamiinisuola (173,1 g, 0,427 mol) jakouutettiin 35 etyyliasetaatilla (1 1) ja 10-%:isella kaliumbisulfaatil- » i 106464 110 la (800 ml). Orgaaninen kerros erotettiin ja pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatilla (1 1), 50-%:isella suolaliuoksella (1 1) ja suolaliuoksella (1 1) , kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä.
5 Jäännös haihdutettiin useita kertoja metyleenikloridin kanssa, sitten kuivattiin yön yli tyhjössä, jolloin saatiin 97,3 g raakaa (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaani-happoa.
Tämän (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihapon 10 (0,427 mol) liuos liuotettuna metyleenikloridiin (900 ml) jäähdytettiin jäähauteessa ja käsiteltiin kohdan (h) tuotteen (100,28 g, 0,388 mol) liuoksella metyleenikloridissa (600 ml), trietyyliamiini (154,1 ml, 0,388 mol) ja lopuksi bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium 15 heksafluorifosfaatti (188,9 g, 0,427 mol) lisättiin yhdes sä erässä. Kun reaktioseos oli ollut yhden tunnin 0 °C:ssa ja 2 tuntia huoneenlämpötilassa, se väkevöitiin tyhjössä ja liuotettiin 2 l:aan etyyliasetaattia. Orgaaninen liuos väkevöitiin tyhjössä ja liuotettiin 2 l:aan etyyliasetaat-20 tia. Orgaaninen liuos pestiin 0,5 1:11a suolaliuosta, 1 litralla 0,5 N kloorivetyhappoa, 1 1:11a vettä, 2 1:11a kylläistä natriumbikarbonaattia, 1 1:11a vettä ja 1 1:11a suolaliuosta, kuivattiin (natriumsulfaatti),. suodatettiin ja väkevöitiin. Tässä vaiheessa niitä huuhteluliuoksia, .. 25 jotka sisälsivät tuotetta (TLC-indikaatio), uutettiin uudelleen etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuutteita käsiteltiin tavanomaisella tavalla ja kaikki yhdistettiin, jolloin saatiin raaka keltainen öljytuote. Keltainen öljy levitettiin 15 x 15 cm silikageelikakulle, joka valmistet-30 tiin 1:1 etyyliasetaatti:heksaaneissa ja eluoitiin 7 1:11a 1:1 etyyliasetaatti:heksaaneja, minkä jälkeen 4 1:11a 6:4 etyyliasetaatti:heksaaneja ja lopuksi 2 1:11a 7:3 etyyliasetaatti :heksaaneja. Suodokset, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin, jolloin saatiin 123,57 g otsikon 35 tuotetta.
♦ « < ♦ 106464 111 j) [4S-[4a(R1) ,7a,10a£] ] -oktahydro-4-[ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 12 l:n kolmikaulakolviin, johon liitettiin ylimää-5 räinen suppilo ja mekaaninen sekoitin, laitettiin kohdan (i) tuotteen (96,0 g, 0,207 mol) liuos metanolissa (1,1 1). Liuos puhdistettiin argonilla 30 minuutin ajan, sitten jäähdytettiin jäähauteessa kunnes sisäinen lämpötila oli +7 °C. Yhteensä 1,45 1 IN natriumhydroksidiliuosta 10 (aikaisemmin johdettu argonia 30 minuutin ajan) lisättiin 1 tunnin aikana. Reaktioseokseen johdettiin jatkuvasti argonia lisäyksen aikana. Reaktioseoksen lämpötila nousi +12 °C:seen ja säilytettiin lisäyksen aikana. Reaktioseos-ta sekoitettiin vielä 30 minuuttia, sitten lämmitettiin 15 huoneenlämpötilaan ympäröivällä vesihauteella ja sekoitettiin johtaen 2,5 tuntia. Noin 250 ml 6 N kloorivetyhappoa lisättiin tipoittain 15 - 20 minuutin aikana pH:n säätämiseksi arvoon 2. Kumimainen sakka muodostui happamaksi tekemisen aikana. Vielä 2 tunnin jatkuvan sekoituksen jäl-20 keen sakka muuttui hienoksi valkoiseksi kiinteäksi aineeksi joidenkin hieman suurempien kiinteiden tuotteiden ollessa läsnä. Tuote otettiin talteen 600 ml:n lasisintteri-suppilolla. Saadun kiinteän aineen pesemisestä 1 1:11a vettä, minkä jälkeen 2 1:11a vedetöntä eetteriä, ja lopuk-.. 25 si kuivaamisesta tyhjössä saatiin 70,3 g otsikon tuotetta
hienona valkoisena kiinteänä aineena; sp. 218 - 220 °C
(haj.). TLC (1:99 etikkahappo/etyyliasetaatti) Rf = 0,48.
HPLC: tR (YMC S-3 ODS 6,0 x 150 mm; 1,5 ml/min, iso-kraattinen 60-%:inen B, puskuri A = metanoli/vesi/ortofos-30 forihappo (10:90:0,2), puskuri B = metanoli/vesi/ortofos-j1 forihappo (90:10:0,2)) = 9,33 min, 99,3 % piikin kokonais- alasta 220 nm:ssä.
Anal, laskettu C19H24N204S2 : lie: C, 55,86; H, 5,92; N, 6,86; S, 15,70 35 Todettu: C, 55,83; H, 5,83; N, 6,96; S, 15,70 • 4 • - .
106464 112
Esimerkki 24 [4S- [4α (R*) ,7a,10a£] ] -oktahydro-4- [ [2- (asetyylitio) - l-okso-3-fenyylipropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1.3] tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri 5 Esimerkeissä 3(c), 11(i), 22(b) ja 23 (i) kuvattu kytkentäreaktio voidaan suorittaa myös seuraavasti: (S)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihapon (1,83 g, 8,14 mmol) ja [4S-(4α,7a,10aS)]oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] [l,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, me-10 tyyliesterin (2,11 g, 8,17 mmol) liuos kuivassa metyleeni-kloridissa (20 ml) jäähdytettiin 0 °C:seen, ja etyyli-3-(dimetyyliamino)propyylikarbodi-imidi, vetykloridisuola (1,77 g, 9,32 mmol) lisättiin yksittäisenä annoksena. Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 6 tuntia ja sitten 15 väkevöitiin öljymäiseksi vaahdoksi. Jäännös jakouutettiin sitten etyyliasetaatilla (100 ml) ja 1 N kloorivetyhapolla (50 ml) . Orgaaninen faasi pestiin 1 N kloorivetyhapolla (50 ml) , kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaatilla (2 x 50 ml) ja kylläisellä vesipitoisella natriumkloridil-20 la (50 ml), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 3,43 g otsikon tuotetta valkoisena vaahtona.
Esimerkki 25 [4S- [4a (R*) ,7a, lOafi] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l- . 25 okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] - * [1.3] tiatsepiini-7-karboksyylihappo, 1,1-dimetyylietyyli-amiinisuola 15 ml:n kolmikaulakolvi, joka oli varustettu palautus jäähdyttimellä, tyhjennettiin ja täytettiin uudelleen 30 argonilla kolme kertaa. [4S- [4a (R*) , 7a, 10aS] ] -oktahydro-4-[(2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo (0,20 g) ja absoluuttisen etanolin, josta kaasut oli poistettu, ja asetonitriilin 1:1 liuos (1,0 ml) vietiin kolviin. Kun 35 heterogeenista seosta sekoitettiin, tert-butyyliamiini 106464 113 (53,0 μΐ, 1,03 ekv.) lisättiin tipoittain. Liuoksesta tuli homogeeninen kolme minuuttia amiinilisäyksen päättämisen jälkeen. Liuos (sisäinen lämpötila 20 °C) laimennettiin hitaasti lisäämällä tipoittain asetonitriili lopulliseen 5 tilavuuteen 10 ml. Vielä 2 tunnin sekoituksen kuluttua kiinteät aineet suodatettiin, pestiin kerran 100-%:isella asetonitriilillä (5 ml), kuivattiin ilmalla ja laitettiin korkeatyhjöön 2 tunniksi jäljelle jääneiden liuottimien poistamiseksi, jolloin saatiin 0,2 g otsikon tuotetta valio koisena kiteisenä kiinteänä aineena.
Edellä mainittu aine yhdistettiin muista ajoista saadun aineen kanssa ja uudelleenkiteytettiin seuraavasti. 25 ml:n kolmikaulakolvi, joka oli varustettu palautusjääh-dyttimellä, magneettisekoitussauvalla ja lisäyssuppilolla 15 tyhjennettiin, tyhjennettiin ja täytettiin uudelleen argonilla kolme kertaa. 1,1-dimetyyliamiinisuolatuotteen (0,37 g) erät ja 59-%:inen asetonitriili/etanoli (2,28 ml) lisättiin kolviin. Kolvi ja sen sisältö lämmitettiin 29 -32 °C:seen, jolloin kiinteät aineet liukenivat. Liuos läi-20 mennettiin asetonitriilillä (27 ml). Lämpöhaude poistettiin, ja kolvin annettiin jäähtyä huoneenlämpötilaan (20 °C) . Vielä yhden tunnin sekoittamisen jälkeen seos suodatettiin ja kiinteät aineet pestiin kerran asetonitriilillä (10 ml), kuivattiin ilmalla ja laitettiin korkea-: : 25 tyhjöön jäljelle jääneiden liuottimien poistamiseksi, jol loin saatiin 0,29 g otsikon tuotetta valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena; sp. kutistuu 160 °C:ssa ja sulaa hitaasti ja hajoaa, kun lämpötila kohotetaan 190 191 °C:seen (190 - 191 °C:ssa, jäljelle jäänyt kiiltävä 30 aine sulaa nopeasti).
Esimerkki 26 [4S-(4a,7o,10aB)]-oktahydro-4-amino]-5-okso-7H-py-rido[2,l-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyli-esteri 35 Esimerkkien 3(c), 11(h) ja 23(h) välituote valmis tettiin myös seuraavasti: 106464 114 a) 2-(asetyyliami.no)-2-[4-(asetyylioksi)butyyli]-propaanidihappo, dietyyliesteri
Sekoitettu 95-%:isen natriumhydridin (60,8 g, 2,532 mol) suspensio vedettömässä dimetyyliformamidissa (500 ml) 5 argon-ilmakehässä jäähdytettiin 0 °C:seen (jäähaude). Di-etyyliasetamidomalonaatin (500 g, 2,302 mol) liuos vedettömässä dimetyyliformamidissa (1,2 1) lisättiin 45 minuutin jakson aikana pitäen reaktiolämpötilan alle 18 °C:ssa. Kun lisäys oli tehty, samea liuos lämmitettiin asteittain 10 huoneenlämpötilaan. Yhden tunnin sekoituksen jälkeen huoneenlämpötilassa 4-bromibutyyliasetaatti (471,5 g, 2,417 mol) lisättiin. Seosta sekoitettiin sitten 59 - 60 °C:ssa 18 tuntia. Saatu liete jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, vaimennettiin absoluuttisella etanolilla (40 ml) ja jää-15 etikalla (4 ml), sekoitettiin noin 15 minuuttia, kaadettiin 10-%:iseen litiumkloridiliuokseen ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 3 1). Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet pestiin 10-%:isella litiumkloridilla (3x3 1), kuivattiin (vedetön natriumsulfaatti) ja haihdutettiin tyhjössä, jol-20 loin saatiin 750 g otsikon tuotetta öljynä.
b) 2-(asetyyliamino)-6-hydroksiheksaanihappo
Kohdan (a) tuote (730 mg, 2,2 mol) punnittiin 5 l:n kolmikaulakolviin (varustettu lämpömittarilla, magneetti-sekoittimella ja ilmajäähdytetyllä jäähdyttimellä) ja laitti 25 mennettiin absoluuttisella etanolilla (300 ml) , minkä jälkeen lisäämällä vesipitoista 6 N natriumhydroksidia (1,6 1, 9,6 mol). Reaktioseosta kuumennettiin 68 - 70 °C:ssa 5 tuntia, ja saatiin homogeeninen liuos. Reaktio-seos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, ja 6 N kloorivety-30 happo (1,32 1) lisättiin hitaasti pH-arvoon 1,3. Kolvi varustettiin lyhytreittisellä kolonnin huipulla etanolin tislaamiseksi, kun lämpötilaa nostettiin hitaasti 87 - 90 °C:seen ja säilytettiin tässä lämpötilassa 8,5 tuntia. Havaittiin hidas hiilidioksidin kehittyminen. Tisleen ko-35 konaistilavuus oli 600 ml. Lopullisen liuoksen pH oli 3,0.
106464 115
Reaktioseosta väkevöitiin tyhjössä kunnes vesi oli kokonaan haihtunut ja sitten väkevöitiin tolueenista (2 x 500 ml) . Puolikiinteä massa trituroitiin absoluuttisella etanolilla (1 1), suodatettiin ja huuhdeltiin uudella ab-5 soluuttisella etanolilla (500 ml) . Suodos väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 509 g raakaöljyä (82 %:n puhtaus), joka sisälsi etanolia ja tolueenia.
c) (S)-2-amino-6-hydroksiheksaanihappo Kohdan (b) raakatuote (443 g, sisältää hieman to-10 lueenia ja etanolia, lähtöaineen painon arvioitiin olevan 394 g) liuotettiin veteen (3,31) ja 1 N litiumhydroksidia lisättiin kunnes pH oli 7,5 (1,53 1 vaadittiin). Seos kuumennettiin 35 °C:seen ja asylaasi (aste 1 sianmunuaisesta, 0,4 g) lisättiin ja reaktioseosta sekoitettiin 24 tuntia. 15 Tässä aikajakson vaiheessa pH oli 7,33. pH säädettiin uudelleen arvoon 7,5 1 N litiumhydroksidilla (noin 2 ml), lisättiin vielä asylaasia (0,4 g), ja reaktioseosta sekoitettiin vielä 17 tuntia (pH 7,3). Liuoksen pH säädettiin arvoon 5,9 etikkahapolla. CeliteR (20 g) ja puuhiili (20 g) 20 lisättiin, ja reaktioseos kuumennettiin 92 °C:seen ja säilytettiin siellä 5 minuuttia. Reaktioseos suodatettiin CeliteR kakun läpi ja väkevöitiin tyhjössä puolitahnaksi (441 g). Tämä trituroitiin 900 ml:lla 1:5:10 vesi:eta- noli :dimetyyliformamidia. Alkuperäisen kakun hajottamisek-: 25 si vaadittiin hieman lämmittämistä. Reaktioseosta jäähdy- tettiin yön yli, suodatettiin ja pestiin 200 ml :11a edellä mainittua liuotinseosta, jolloin saatiin 214 g raakaa materiaalia (noin 40-%:inen N-asetyyliaine). Tämä materiaali suspendoitiin metanoliin (500 ml) , lämmitettiin höyryhau-30 teella, annettiin seistä 2 tuntia ja suodatettiin. Tämä menetelmä toistettiin toisen kerran, jolloin saatiin 108 g otsikon tuotetta; [a]D = +22° (c = 1,44, 6 N kloorivety- happo) .
Vaihtoehtoisesti kohdat (b) ja (c) suoritettiin 35 myös seuraavasti: 116 b) 2-(asetyyliamino)-6-hydroksiheksaa pestur 5 l:iseen kolmikaulakolviin, joka o.' olivat mekaanisella sekoittimella ja termoelementtil , . „
J CeliteR
la, vietiin kohdan (a) tuote (631 g, 1,933 n , .. , haihdut 5 hydrofuraani (259 ml) . 6 N natriumhydrc 5 kullanri (1 385 ml, 8,31 mol) lisättiin sekoitettuur (10.1.1, minuutin aikana. Voimakasta eksotermiaa es c tarpeellista jäähdyttää reaktioseosta jääha tilan pitämiseksi alle 60 °C:ssa. Reaktiosec nisella 10 tiin sitten hieman palautusjäähdyttäen f „ , * 10 (b) tuot.
67 - 68 °C:ssa) 5,5 tuntia. . , pH saade.
Seosta sekoitettiin huoneeniämpöti tiumhydrc (16,5 tuntia). pH vietiin arvosta 12,75 arv sianmunuc mällä asteittain 6 N kloorivetyhappoliuost tettnn 3 15 mol) säilyttäen lämpötilan noin 25 °C:ssa. ..
15 tnn huon nettiin asteittain lyhyellä tislaushuipull; „ .....
11 5,9 lisää: ja kaasun (hiilidioksidi) kehittyminen alk< , . . „ .
hiili (29 nulämpötila, 70 °C huipun lämpötila) ja mail 91 pysähtyi ja kaasun kehittyminen tuli er ,, annettiin 20 (94,1 °C pannulämpötila, 50 °C huipun läm , , 2 0 111n 18,5 otettu kokonaistisle oli 410 ml ja pannuj huolellise 3,9. Kuumentamista jatkettiin vielä 10 , t, väkevoitu ylimääräistä kaasun kehittymistä. Ruumen tiin 476 g aika tislauksen alusta oli 7,5 tuntia.
(720 ml) 1 : 25 Kun seosta oli sekoitettu huoneei c· · • 25 tuli homog. yli, kirkas reaktioseos (pH 3,50) tisla- uudelleen duttimessa tyhjössä 60 °C:isessa hauteess valkoiseen jäännöstä sekoitettiin absoluuttisen ' kiertohaihd (750 ml). Saatu kiteinen suspensio tisle tia) ja sue 30 duttimessa (pumpattu tyhjö, 60 °C:inen 30 absoluuttis mainen jäännös poistettiin absoluuttis • ‘ kiopainoon 750 ml) avulla. Lopulliseen jäännöksee kiteistä ots luuttinen etanoli (1500 ml) ja seosti 10:1:1) Rf = °C:isessa hauteessa kunnes siitä tuli k
Anal, lasket 35 pensio, noin 20 minuuttia. Suspensio su. ^
Todettu: 106464 117 pestiin absoluuttisella etanolilla (2 x 3 00 ml) . Suodokset olivat sameita ja ne kirkastettiin edelleen suodattamalla CeliteR kakun läpi. Uusi, kirkas suodos tislattiin kierto-haihduttimessa, jolloin saatiin 434,6 g otsikon tuotetta 5 kullanruskeana paksuna siirappimaisena aineena. TLC (10:1:1, metanoli:etikkahappo:vesi) Rf = 0,59.
c) (S)-2-amino-6-hydroksiheksaanihappo 5 1 :n kolmikaulakolviin, joka oli varustettu mekaanisella sekoittimella ja lämpömittarilla, vietiin kohdan 10 (b) tuote (434 g, 1,93 mol) ja vesi (3 1). Samean liuoksen pH säädettiin arvosta 4,05 arvoon 7,50 lisäämällä 1 N li-tiumhydroksidi (705 ml). Liuos lämmitettiin 36 °C:seen ja sianmunuaisasylaasi I (0,710 g) lisättiin. Seosta sekoitettiin 35 - 36 °C:ssa 23,5 tuntia. Reaktioseos jäähdytet-15 tiin huoneenlämpötilaan, ja pH vietiin arvosta 7,0 arvoon 5,9 lisäämällä jääetikkaa (4,4 ml). CeliteR (29 g) ja puu-hiili (29 g) lisättiin ja lämpötila nostettiin sekoittamalla 91 °C:seen. Kuumentaminen poistettiin, ja seoksen annettiin jäähtyä huoneenlämpötilaan. Suspensio suodatet-20 tiin 18,5 cm suodatinpaperikiekon läpi ja kakku pestiin huolellisesti vedellä. Värittömät suodokset (noin 3,9 1) väkevöitiin kiertohaihduttimessa 60 °C:ssa, jolloin saatiin 476 g kirkasta, paksua öljyä. Absoluuttinen etanoli (720 ml) lisättiin ja seosta sekoitettiin kunnes siitä : 25 tuli homogeeninen kiteinen suspensio. Liuotin tislattiin uudelleen ja absoluuttinen etanoli (1 584 ml) lisättiin valkoiseen kiinteään jäännökseen. Suspensiota pyöritettiin kiertohaihduttimessa huoneenlämpötilassa yön yli (15 tuntia) ja suodatettiin 18,5 cm paperin läpi. Kakku pestiin 30 absoluuttisella etanolilla (7 x 100 ml) ja kuivattiin va-kiopainoon tyhjössä, jolloin 'saatiin 85,8 g valkoista, kiteistä otsikon tuotetta. TLC (metanoli:vesi:etikkahappo, 10:1:1) Rf = 0,62.
Anal, laskettu C6H13N03:lie: 35 C, 48,25; H, 8,94; N, 9,38
Todettu: C, 48,66; H, 8,77; N, 9,43 119 106464 karbonaatilla (100 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (100 ml) . Liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin valkoiseksi kiinteäksi aineeksi. Tähän kiinteään aineeseen lisättiin tert-butyylimetyylieetteri 5 (20 ml) ja saatua lietettä sekoitettiin huoneenlämpötilas sa 4 tuntia ja suodatettiin. Tuote pestiin tert-butyyli-metyylieetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,087 g otsikon tuotetta; sp. 89 - 90 °C.
e) [S-(R* ,R*)]-2-[[4-(asetyylitio)-l-okso-2-[[fenyy-10 limetoksi)karbonyyli]amino]butyyli]amino]-6-oksoheksaani- happo, metyyliesteri
Oksalyylikloridin (546 μΐ, 6,27 mmol) liuokseen kuivassa metyleenikloridissa (16 ml) -65 °C:ssa (sisäinen lämpötila) lisättiin tipoittain dimetyylisulfoksidin 15 (905 μΐ, 12,54 mmol) liuos metyleenikloridissa (13 ml) 12 minuutin aikana pitäen sisäisen lämpötilan välillä -65 --60 °C. Kohdan (d) tuotteen (1,90 g, 4,18 mmol) liuos metyleenikloridissa (7 ml) lisättiin reaktiokolviin 20 minuutin aikana, jolloin valmistui samea seos. Lisää mety-2 0 leenikloridia (1 ml) käytettiin päättämään alkoholin siir to reaktiokolviin, ja reaktioseoksen annettiin sekoittua -65 °C:ssa 40 minuuttia. Seuraavaksi N,N-di-isopropyyli-etyyliamiini (3,7 ml, 20,90 mmol) lisättiin tuottaen siten kirkkaan liuoksen. Kun reaktioseosta oli sekoitettu vielä • 25 30 minuuttia -65 °C:ssa, sen annettiin lämmetä -18 °C:seen 2 tunnin aikana. Reaktio vaimennettiin 10-%:isella vesipitoisella kalilumbisulfaatilla (30 ml) ja lämmitettiin sitten huoneenlämpötilaan. Reaktioseos laimennettiin 25 ml :11a vettä, sekoitettiin, ja faasit erotettiin. Vesi-30 fraktio palautusuutettiin metyleenikloridin kanssa (2 x . 25 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 10-%:isella vesipitoisella kaliumbisulfaatilla (25 ml) , kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaatilla (2 x 25 ml), suolaliuoksella .(25 ml), kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suo-35 datettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,84 g otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena.
• 120 106464 f) [4S-(4a,7a,10aB)]-oktahydro-4-[[(fenyylimetok-si)karbonyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatse-piini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri
Kuivaan kolviin vietiin käyttäen argonia suojakaa-5 suna kohdan (e) tuote (1,76 g, 3,89 mmol) ja metanoli (17 ml). Liuos jäähdytettiin 0 °C:seen ja argonia johdettiin 25 minuutin ajan. Natriummetoksidiliuos (25 paino-%:inen metanolissa, 983 μΐ, 4,28 mmol) lisättiin reaktio-seokseen noin 15 sekunnin aikana. Reaktio vaimennettiin 10 yhden tunnin jälkeen 1 N kloorivetyhappoliuoksella (20 ml) ja annettiin sitten lämmetä huoneenlämpötilaan. Etyyliasetaatti (35 ml) lisättiin ja sekoituksen jälkeen kerrokset erotettiin. Vesifraktio palautusuutettiin etyyliasetaatin kanssa (2 x 15 ml). Yhdistetyt orgaaniset fraktiot 15 pestiin 1 N kloorivetyhappoliuoksella (15 ml) , suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,69 g [S- (R*,R*) ]-2-[[4-merkapto-l-okso-2- [ [ (fenyylimetoksi)karbonyyli]amino] butyyli]amino]-6-oksoheksaanihappo, metyyliesteriä val-20 koisena vaahtona.
Tämän valkoisen vaahdon ja trifluorietikkahapon (305 μΐ, 3,95 mmol) liuosta metyleenikloridissa (17 ml) palautusjäähdytettiin 2,25 tuntia.. Kun reaktioseos oli jäähdytetty huoneenlämpötilaan, se väkevöitiin, ja jäännös i 25 liuotettiin etyyliasetaattiin (25 ml) , pestiin kylläisellä natriumbikarbonaattiliuoksella (2 x 20 ml) ja suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,50 g otsikon tuotetta valkoisena vaahtona.
30 g) [4S-(4a,7a,10aB)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H- pyrido[2,l-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyy-liesteri
Kohdan (f) tuotteen käsittely joditrimetyylisilaa-nilla esimerkin 23(h) tai 11(h) mukaisesti poistaa N-suo-35 jaryhmän ja saadaan haluttu 4-aminotuote.
121 106464
Esimerkki 27 (S)-2-ftalimido-6-hydroksiheksaanihappo
Esimerkin 1(c) tämä välituote valmistettiin myös seuraavasti: 5 2-(asetyyliamino)-2-[4-(asetyylioksi)butyyli]pro- paanidihappo, dietyyliesterin [730 g, 2,2 mol, valmistettu, kuten on kuvattu esimerkissä 24(a)] liuokseen absoluuttisessa etanolissa (300 ml) lisättiin 6 N natriumhyd-roksidiliuos (1,6 1). Reaktioseosta kuumennettiin 70 - 10 75 °C:ssa 5 tunnin ajan, sitten 90 - 95 °C:ssa suurimman osan etanolin tislaamiseksi. Reaktioseos jäähdytettiin ja tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,3 käyttäen 6 N kloorivety-happoa (noin 1,3 1), sitten kuumennettiin 90 - 100 °C:ssa, jolloin saatiin aikaan dekarboksylaatio. Päättyessä raaka 15 reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan.
Edellä mainittua raakaa reaktioseosta kuumennettiin 35 °C:seen ja käsiteltiin noin 600 ml:11a 6 N natriumhyd-roksidia, minkä jälkeen 1 N natriumhydroksidilla pH:n säätämiseksi arvoon 7,5 (lopullinen tilavuus oli noin 5,3 1). 20 Tähän seokseen lisättiin 0,6 g sianamunuaisasylaasi I. Kun seosta oli sekoitettu yön yli 35 °C:ssa, pH oli 7,25. pH säädettiin arvoon 7,5 ja lisättiin vielä 300 mg asylaasia. Yön yli sekoittamisen jälkeen reaktioseos näytti olevan noin 90-%:isen valmis. Reaktioseosta käsiteltiin seuraa-25 vaksi 20 g:11a puuhiiltä ja 20 g:lla CeliteR, sitten kuumennettiin 85 °C:seen ja pidettiin siinä lämpötilassa 10 minuutin ajan, sitten jäähdytettiin 50 °C:seen ja suodatettiin. Tässä vaiheessa suodoksen kokonaistilavuus oli noin 4,9 1. Suodos jäähdytettiin 5 °C:seen, ja kiinteä 3 0 natriumkarbonaatti lisättiin pH:n säätämiseksi arvoon 9,3. N-karbetoksiftalimidi (263,04 g, 1,2 mol) lisättiin yhdes- » sä erässä ja natriumkarbonaattia lisättiin tarpeen mukaan pitämään pH:n arvossa 9,3. Kahden tunnin kuluttua 5 °C:ssa, minkä jälkeen 3 tunnin kuluttua huoneenlämpöti-35 lassa pH putosi arvoon 8,5 ja suurin osa reagensseista • 122 106464 oli liuennut. Reaktioseos suodatettiin, jäähdytettiin 5 °C:seen ja tehtiin happamaksi pH-arvoon 2,3 6 N kloori-vetyhapolla. Saostunut kiinteä aine otettiin talteen suodattamalla ja pestiin 200 ml :11a kylmää vettä, sitten kui-5 vattiin tyhjössä, jolloin saatiin 220 g otsikon tuotetta.
Esimerkki 28 [4S- (4α,7a,10aB)]-oktahydro-4-[[2-merkapto-3-(1-naftalenyyli)-1-oksopropyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1- b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 10 a) (Asetyyliamino) (1-naf talenyylimetyyli) propaani- dihappo, dietyyliesteri
Natriumetoksidin (21-%:inen etanolissa, 4,613 g, 67,8 mmol) liuokseen etanolissa (100 ml) lisättiin dietyy-liasetamidomalonaatti (14,74 g, 67,8 mmol), sitten l-(bro-15 mimetyyli)naftaleeni (10,0 g, 45,2 mmol). Liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yhden tunnin ajan. Reaktioseos väkevöitiin sitten oranssiksi öljyksi. Öljy liuotettiin etyyliasetaattiin ja pestiin 50-%:isella kylläisellä am-moniumkloridilla, vedellä ja suolaliuoksella, sitten kui-20 vattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin oranssi kiinteä aine. Kiinteä aine uudel-leenkiteytettiin etyyliasetaatista ja heksaanista, jolloin saatiin beigenvärisiä kiteitä, jotka olivat kontaminoituneet dietyyliasetamidomalonaatilla. Kiinteä aine liuotettu 25 tiin 50-%:iseen etyyliasetaattiin heksaanissa ja puhdistettiin flash-kromatografiällä Merck silikageelillä 50-%:isessa etyyliasetaatissa heksaanissa. Ne fraktiot, jotka sisälsivät puhdasta tuotetta, yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 10,225 g tuotetta valkoisena 30 kiinteänä aineena; sp. 105 - 108 °C; Rf = 0,57 (50-%:inen etyyliasetaatti heksaanissa).
b) cc-amino-l-naf taleenipropaanihappo
Kohdan (a) tuotteen (16,182 g, 47,5 mmol) liuos suspendoitiin 48-%:iseen vetybromidiin (100 ml) ja palau-35 tusjäähdytettiin käyttäen argonia suojakaasuna 14 tunnin • 123 106464 ajan. Tuotteen vetybromidisuola suodatettiin liuoksesta valkoisena kiinteänä aineena, sitten otettiin talteen kuumaan (50 °C) veteen (500 ml) , ja liuos neutraloitiin väkevällä ammoniumhydroksidilla. Tuote saostettiin liuoksesta 5 hienona valkoisena kiinteänä aineena. Suodatuksesta ja kuivauksesta korkeatyhjössä yön yli (18 tuntia) saatiin 8,335 g tuotetta höytäleisenä valkoisena kiinteänä aineena; sp. 264 °C.
c) a-bromi-1-naftaleenipropaanihappo 10 Kohdan (b) tuotteen (4,000 g, 18,6 mmol) ja kalium- bromidin (7,63 g, 63,2 mmol) liuokseen 2,5 N rikkihapossa (35 ml), joka pidettiin 0 °C:ssa, lisättiin natriumnit-riitti (1,92 g, 27,8 mmol) yhden tunnin aikana. Seosta sekoitettiin vielä tunti 0 SCrssa, sitten lämmitettiin 15 huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 2,5 tuntia. Reaktio-seosta uutettiin sitten eetterillä (3x). Eetterikerrokset yhdistettiin ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöi-tiin, jolloin saatiin oranssi öljy. Öljy puhdistettiin 20 flash-kromatografiällä Merck silikageelillä 70-%:isessa etyyliasetaatissa heksaanissa, l-%:inen etikkahappo lisättiin vähentämään hännänmuodostusta. Ne fraktiot, jotka sisälsivät bromidia, yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin hieman kontaminoitunut tuote oranssina öljynä, ! 25 joka kiinteytyi seistessään yön yli. Rf = 0,40 (40-%:inen etyyliasetaatti heksaanissa l-%:isen etikkahapon kanssa), d.) a- (asetyylitio) -1-naf taleenipropaanihappo Kaliumtioasetaatin (0,912 g, 8,00 mmol) lietteeseen asetonitriilissä (300 ml) 0 °C:ssa lisättiin kohdan (c) 30 tuote (2,030 g, 7,27 mmol) liuoksena asetonitriilissä 83 ml) . Liuosta sekoitettiin yhden tunnin ajan 0 °C:ssa, sitten lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 15 tuntia. Kaliumbromidi suodatettiin sitten reaktioseoksesta ja suodos väkevöitiin, jolloin saatiin oranssi öljy. Öljy 35 liuotettiin etyyliasetattiin ja pestiin 10-%:isella ka- 124 106464 liumbisulfaatilla ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin oranssi öljy. Öljy puhdistettiin flash-kromatogra-fiällä Merck silikageelillä 50-%:isessa etyyliasetaatissa 5 heksaanissa, l-%:inen etikkahappo lisättiin vähentämään hännänmuodotusta. Ne fraktiot, jotka sisälsivät tuotetta, olivat kaikki kontaminoituneita yhdisteellä, jonka Rf = 0,43. Ne fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin oranssi öljy. Raakatuote puhdistettiin disyklohek-10 syyliamiinisuolan kautta liuottamalla oranssi öljy eetteriin ja lisäämällä disykloheksyyliamiiniekvivalentti (1,32 g, 7,27 mmol) liuokseen. Disykloheksyyliamiinisuola saatiin 2 erässä ruskeita kiteitä (1,450 g), jotka olivat vielä hieman kontaminoituneita epäpuhtauksilla. Kiteet 15 suspendoitiin etyyliasetaattiin ja ravisteltiin 10-%:isen kaliumbisulfaatin kanssa (3x). Orgaaninen kerros pestiin sitten vedellä ja suolaliuoksella, sitten kuivattiin natriumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 875 mg tuotetta keltaisena öljynä; Rf = 0,40 20 (40-%:inen etyyliasetaatti heksaanissa l-%:isen etikkaha- pon kanssa).
e) [4S-(4a,7a,10afi)]-oktahydro-4-[(2-(asetyylitio)-3-(1-naftalenyyli)-1-oksopropyyli] amino]-5-okso-7H-pyrido-[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri : 25 Kohdan (d) raseemisen happotuotteen liuos metylee- nikloridissa ja [4S-(4α,7a,10aS)]-oktahydro-4-amino-5-ok-so-7H-pyrido[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesterin liuos metyleenikloridissa saatetaan reagoimaan trietyyliamiinin ja bentsotriatsol-l-yylioksitris(di-30 metyyliamino)fosfonium heksafluorifosfaatin läsnä ollessa esimerkin 23 (i) menetelmän mukaisesti, jolloin saadaan otsikon tuote.
125 106464 f) [4S- (4a,7a,10aB) ] -oktähydro-4-[ [2-merkapto-3- (1-naftalenyyli)-1-oksopropyyli] amino]-5-okso-7H-pyrido-[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (e) tuotteen liuosta metanolissa käsitellään 5 IN natriumhydroksidilla esimerkin 23 (j) menetelmän mukaisesti, jolloin saadaan otsikon tuote.
Esimerkki 29 [4S- [4a (R*) , 7a, lOafi] ] -oktahydro-4- [ [2-merkapto-l-okso-3-(2-tienyyli)propyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-10 b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) (S)-a-(asetyylitio)-2-tiofeenipropaanihappo
Kaliumkloridi (3,0 g, 40,1 mmol) lisättiin β-(2-tienyyli)-D-alaniinin (1,37 g, 8,03 mmol) liuokseen 2,5 N kloorivetyhapossa (25 ml) huoneenlämpötilassa käyttäen 15 argonia suojakaasuna. 10 minuutin sekoituksen jälkeen saatu seos jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin natriumnit-riitillä (720 mg, 10,44 mmol). 2,5 tunnin kuluttua reak-tioseos lämmitettiin huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 1 tunti. Seos jakouutettiin vedellä ja etyyliasetaatilla, ja 20 orgaaninen kerros kuivattiin (natriumsulfaatti), suoda tettiin ja väkevöitiin. Jäännös flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli) eluoiden l-%:isella etikkahapolla 3:1 heksaani/etyyliasetaatissa, jolloin saatiin 760 mg (R)-a-kloori-2-tiofeenikarboksyylihappoa keltaisena öljynä.
25 Cesiumtioasetaatti (2,95 g, 14,19 mmol) lisättiin liuokseen, joka sisälsi edellä mainittua kloridia (750 mg, 4,73 mmol) dimetyyliformamidissa (15 ml) huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna. Kahden tunnin sekoituksen jälkeen reaktioseos jakouutettiin 10-%:isella ka-30 liumbisulfaatilla ja etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti), suodatettiin ja väkevöitiin, ja jäännös flash-kromatografoitiin (Merck silikageeli) eluoiden l-%:isella etikkahapolla 4:1 -heksaani/etyyliasetaatissa, jolloin saatiin 35 500 mg otsikon tuotetta öljynä. TLC (2-%:inen etikkahappo 3:1 etyyliasetaatti/heksaanissa) Rf 0,73.
« 126 106464 b) [4S-[4a(R*) ,7a,10a£] ] -oktahydro-4-[ [2- (asetyyli-tio)-l-okso-3-(2-tienyyli)propyyli] amino]-5-okso-7H-pyri-do[2,1-b][1/3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyylieste-ri 5 Kohdan (a) tuotteen liuos metyleenikloridissa ja [4S-(4α,7α,10a6)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesterin liuos metyleenikloridissa saatetaan reagoimaan trietyyli-amiinin ja bentsotriatsol-1-yylioksitris(dimetyyliamino)-10 fosfonium heksafluorifosfaatin läsnä ollessa esimerkin 23(i) mukaisesti, jolloin saadaan otsikon tuote.
c) [4S- [4a (R*> ,7a,10aB] ] -oktahydro-4- [ [2-merkapto-l-okso-3-(2-tienyyli)propyyli]amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1- b][1/3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 15 Kohdan (b) tuotteen liuosta metanolissa käsitellään 1 N natriumhydroksidilla esimerkin 23 (j) menetelmän mukaisesti, jolloin saadaan otsikon tuote.
Esimerkki 30 [4S- [4a (S*) ,7a,10a£] ] -oktahydro-4- [ [2-merkapto-l-20 okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo a) (R)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo, di-sykloheksyyliamiinisuola
Seuraten esimerkin 1(h) menetelmää, mutta korvaten t 25 D-fenyylialaniini L-fenyylialaniinilla saatiin (R)-2-(ase-tyylitio)bentseenipropaanihappo, disykloheksyyliamiinisuo-la.
b) [4S-[4a(S*) , 7a, 10aB] ]-oktahydro-4-[ [2-(asetyyli-tio)-l-okso-3-fenyylipropyyli] euaino]-5-okso-7H-pyrido [2,1- 30 b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri (R)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo, disyklo-heksyyliamiinisuolan (353,5 mg, 0,872 mmol) sekoitettu » suspensio etyyliasetaatissa (5 ml) pestiin 5-%:isella ka- liumbisulfaattiliuoksella (3x5 ml). Orgaaniset uutteet 35 yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (magne- i 106464 127 siumsulfaatti), suodatettiin, väkevöitiin, kuivattiin tyhjössä ja tislattiin kahdesti heksaaneista, jolloin saatiin (R)-2-(asetyylitio)bentseenipropaanihappo öljynä.
Saatu vapaa happo (181,4 mg, 0,809 mmol) liuotet-5 ti in metyleenikloridiin (2 ml) ja sekoitettiin käyttäen typpeä suojakaasuna 0 °C:ssa. Tähän liuokseen lisättiin [4S-(4a,7a,10aS)]-oktahydro-4-amino-5-okso-7H-pyrido[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri (200 mg, 0,774 mmol) metyleenikloridissa (6 ml), sitten 10 trietyyliamiini (0,113 ml, 0,813 mmol) ja lopuksi bentso-triatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfonium heksa-fluorifosfaatti (360 mg, 0,813 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa ja annettiin sitten hitaasti lämmetä huoneenlämpötilaan. Yhteensä 20 tunnin kuluttua reaktioseos 15 väkevöitiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, ja liuos pestiin 5-%:isella kaliumbisulfaatin liuoksella, kylläisellä natriumbikarbonaatin liuoksella ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (magnesiumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin keltaiseksi kiinteäk-20 si aineeksi. Puhdistuksesta flash-kromatografiällä (eluoi-den 2:3 etyyliasetaatti/heksaanilla) saatiin 261,7 mg otsikon tuoetta kirkkaana öljynä.
c) [4S-[4a(S*) ,7a,lOaB]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b]-25 [1,3]tiatsepxini-7-karboksyylihappo
Kohdan (b) tuotteen (261,1 mg, 0,562 mmol) liuos metanolissa (6 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin 1 N natriumhydrok-sidilla (6 ml, happi poistettu typpi-kuplituksella). Kun 30 reaktioseosta oli sekoitettu yksi tunti 0 °C:ssa puhdistaen samalla jatkuvasti typellä, se lämmitettiin huoneen-lämpötilaan. 30 minuutin huoneenlämpötilassa sekoittamisen jälkeen saatiin kirkas liuos. 5,5 tunnin kuluttua reaktio-seos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 5-%:isella kaliumbi-35 sulfaatilla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset • 128 106464 kerrokset yhdistettiin, pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väke-vöitiin tyhjössä. Puhdistuksesta flash-kromatografiällä (6 : 0,01:3,99 etyyliasetaatti:etikkahappo:heksaani) saatiin 5 190 mg otsikon tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; [a]D = -87,5° (c = 0,51, kloroformi). TLC (6:0,01:3,99 etyyliasetaatti:etikkahappo:heksaani) Rf = 0,20.
HPLC: tR = 25,3 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 mm; 0 - 100-%:inen B:A, 30 min lineaarinen gradientti 10 ja 10 min pysäytys, 1,5 ml/min; A = 90-%:inen vesi ^etanoli + 0,2-%:inen ortofosforihappo, B = 90-%:inen meta-noli:vesi + 0,2-%:inen ortofosforihappo; 220 nm.
Anal, laskettu C19H2404N2S2 · 0,15 C4H802*0,15 C7H16-0,39 H20:lle: C, 55,89; H, 6,45; N, 6,31; S, 14,45 15 Todettu: C, 56,19; H, 6,50; N, 6,71; S, 13,96
Esimerkki 31 [4S-(4α,7a,9a£)]-oktahydro-4-[[2-merkapto-l-okso-3-(4-tiatsolyyli)propyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1-b]- [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 20 a) (R) -2-amxno-3- (4-tiatsolyyli)propaanihappo 4 N kloorivetyhapon liuos dioksaanissa (10 ml) lisättiin (R)-2- [ [ (1,1-dimetyylietoksi)karbonyyli]amino]-3-(4-tiatsolyyli)propaanihapon (2,0 g, 7,3 mmol) liuokseen dioksaanissa (2 ml) . Reaktioseosta sekoitettiin huoneen-. 25 lämpötilassa 3 tuntia, väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös liuotettiin veteen (3 ml). pH säädettiin arvoon 6,5 1 N natriumhydroksidilla ja tämä liuos vietiin 20 ml:n DowexR AG50 (H+):n läpi. Kolonnia eluoitiin vedellä (250 ml), minkä jälkeen 2-%:isella pyridiinillä vedessä (300 ml). Tuotetta 30 sisältävät fraktiot väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,94 g otsikon tuotetta.
b) (R)-2-bromi-3-(4-tiatsolyyli)propaanihappo Kohdan (a) tuotteen (0,516 g, 3 mmol) ja kaliumbro-midin (1,19 g, 10,1 mmol) liuosta vedessä (5,94 ml) ja 35 rikkihapossa (0,43 ml) sekoitettiin -10 °C:ssa 5 minuut- 129 106464 tia, minkä jälkeen lisättiin annoksittain natriumnitriitti (0,318 g, 4,61 mmol) 10 minuutin jakson aikana. Reaktio-seosta sekoitettiin vielä 10 minuuttia 0 °C:ssa ja huoneenlämpötilassa yksi tunti, ja uutettiin sitten eetteril-5 lä (3 x 100 ml) . Eetteriuutteet pestiin suolaliuoksella (2 x 20 ml) , kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,37 g otsikon tuotetta; [a]D = +37,35° (c = 0,7, metanoli). Toinen ajo suoritettiin lähtien 2,67 mmol:sta kohdan (a) tuotetta 10 käyttäen samaa menetelmää, jolloin saatiin vielä 0,35 g otsikon tuotetta.
c) (S)-2-(asetyylitio)-3-(4-tiatsolyyli)propaani- happo
Kohdan (b) tuotetta (0,72 g, 3,05 mmol) ja kalium-15 tioasetaattia (0,35 g, 3,05 mmol) sekoitettiin asetonit-riilissä (9 ml) yön yli huoneenlämpötilassa ja 30 °C:ssa yhden tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja suodatettiin. Suödos väkevöitiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin 20 (100 ml) , pestiin vedellä (2 x 50 ml) ja suolaliuoksella (20 ml) , kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,52 g otsikon tuotetta; [a]D = -15,89° (c = 0,6, metanoli).
d) [4S-(4a,7a,9aB)]-oktahydro-4-[[2-(asetyylitio)- . 25 l-okso-3-(4-tiatsolyyli)propyyli]amino]-5-oksopyrrolo[2,1- b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri [4S-(4α,7a,9aS)]-4-amino-oktahydro-5-oksopyrrolo-[2,1-b] [1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo, metyyliesteri, p-tolueenisulfonihapposuola [0,367 g, 0,882 mmol, valmis-30 tettu aineesta, joka on kuvattu esimerkissä 5(d)] liuotettiin metyleenikloridiin (5 ml) 0 °C:ssa, minkä jälkeen lisättiin trietyyliamiini (0,12 ml, 0,868 mmol). Kohdan (c) tuote (0,2 g, 0,865 mmol) lisättiin tähän liuokseen, minkä jälkeen toinen erä trietyyliamiinia (0,12 ml, 0,865 35 mmol). Bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfo- 130 106464 nium heksafluorifosfaatti (0,383 g, 0,865 mmol) lisättiin ja reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa yhden tunnin ajan ja huoneenlämpötilassa 4 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin (60 ml) .
5 Orgaaninen uute pestiin 5-%:isella vesipitoisella kalium-bisulfaatilla (10 ml) ja suolaliuoksella (2 x 10 ml), kuivattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä. Tämä raaka-aine kromatografoitiin 100 g:n Merck silikageeliä läpi käyttäen 0,2-%:ista metanolia etyyliase-10 taatissa. Fraktiot, jotka oli rikastettu hitaammassa isomeerissä, väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,134 g otsikon tuotetta.
e) [4S-(4α,7α,9afi)]-oktahydro-4-[[2-merkapto-l-ok-so-3- (4-tiatsolyyli)propyyli] amino] -5-oksopyrrolo [2,1-15 b][l,3]txatsepiini-7-karboksyylihappo
Kohdan (d) tuote (0,135 g, 0,29 mmol) liuotettiin metanoliin (3 ml) ja argonia kuplitettiin liuokseen 30 minuuttia 0 °C:ssa. 1 N natriumhydroksidi (1,32 ml), joka myös oli puhdistettu argonilla, lisättiin edellä mainit-20 tuun liuokseen, ja reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa kuplittamalla argonia liuoksen läpi yhden tunnin ajan ja huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Reaktio vaimennettiin lisäämällä 5-%:ista vesipitoista kaliumbisulfaattia (20 ml) , ja orgaanisia aineita uutettiin etyyliasetaatilla (3 x . 25 50 ml) . Etyyliasetaattiliuos pestiin suolaliuoksella, kui vattiin (natriumsulfaatti) , suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä. Väkevöite kromatografoitiin 40 g:n Merck silikageeliä läpi käyttäen kloroformia, joka sisälsi 5 % metanolia ja 0,5 % etikkahappoa. Sopivat fraktiot yhdistettiin, 30 väkevöitiin ja jakouutettiin 20 ml :11a etyyliasetaattia ja 5-%:isella vesipitoisella kaliumbisulfaatilla. Etyyliasetaattiliuos pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatti) ja väkevöitiin tyhjössä. Jäännös lyofi-lisoitiin dioksaanista (4 ml), jolloin saatiin 36 mg otsi-35 kon tuotetta 70:30 isomeerien seoksena; sp. 95 - 115 °C; 131 106464 [a]D = -191,7° (c = 0,06, kloroformi). TLC (kloroformi :me-tanoli:etikkahappo, 8:2:0,2) Rf = 0,59.
HPLC: tR = 3,06 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 X 150 mm, 3 μ päätepeitetty kolonni, isokraattinen 60-%:inen 5 vesipitoinen metanoli, joka sisälsi 0,2 % ortofosforihap-poa, 25 min, 1,5 ml/min (95,4 %).
Anal, laskettu C15H19N304S3 · 0,2 C4H802 · 0,9 H20:lle: C, 43,59; H, 5,19; N, 9,65; S, 22,09 Todettu: C, 43,54; H, 4,89; N, 9,44; S, 21,90 10 Esimerkki 32 1 000 tablettia, joista kukin sisältää seuraavat ainesosat: [4S- [4a (R*) , 7a, 10aS] ] -oktahydro-4- [ (2-merkapto-l-okso-3-fenyylipropyyli)amino]-5-okso-7H-15 pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo 100 mg Maissitärkkelys 100 mg
Gelatiini 20 mg
Avicel (mikrokiteinen selluloosa) 50 mg
Magnesiumstearaatti 5 mg 20 275 mg valmistetaan riittävistä massamääristä sekoittamalla esimerkin 3 tuote ja maissitärkkelys gelatiinin vesiliuoksen kanssa. Seos kuivataan ja jauhetaan gienoksi jauheeksi. Avicel ja sitten magnesiumstearaatti seostetaan granulaa-25 tin kanssa. Seos puristetaan sitten tablettipuristimessa, jolloin muodostuu 1000 tablettia, joista kukin sisältää 100 mg aktiivista ainesosaa.
Samanlaisella tavalla voidaan valmistaa tabletit, jotka sisältävät 200 mg esimerkin 1, 2, 4 - 23, 25 ja 26 -30 31 tuotetta.
Samanlaisia menetelmiä voidaan käyttää muodostamaan tabletteja tai kapseleita, jotka sisältävät 10 - 500 mg aktiivista ainesosaa.
Claims (3)
1 II
35 Rs—C—S—(CH2)r—C^-C—OH (II) Rl2 R1 133 106464 jossa R6 on alkyyli, jossa on 1 - 4 hiiliatomia, tai fenyyli, tai sen aktivoitu muoto amiinin kanssa, jolla on kaava d11) 5 I I (III) H,HlY
10. COOR3 jossa R3 on vety, alkyyli, jossa 1-4 hiiliatomia, tai fenyyli, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IV) 15 (^2)^1^^1 Il \\ X.V^(CH2)m R6-C—S— (CH2) r-C^·C-Y Y (IV) R12 Rl H o COOR3 20 b) käsitellään kohdasta a) saatua tuotetta asyy- liryhmän Re-C- poistamiseksi, ja kun R3 on muu kuin vety, ·. 25 muutetaan karboksyylihappoesteri COOR3 hapoksi ja sitten mahdollisesti sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolak-seen.
1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan (I) mukaisten 5-okso-7H-pyrido[2,1-b]-5 [1,3]tiatsepiini-, 5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]oksatse- piini-, 4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsiini-, 5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]oksatsepiini- ja 5-oksopyrrolo-[2,1-b] [1,3]tiatsepiinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joilla on 10 kaava (I) y yLJwk (i)
15 HS— (CH2) r—C^- C- ΒΓ Rl2 Rl O COOH jossa kaavassa 20 X on O tai S, Ri on vety, alkyyli, jossa on 1 - 7 hiiliatomia, sykloal-kyyli-CH2~, jossa sykloalkyylissä on 3 - 7 hiiliatomia, fenyyli-CH2~, naftyyli-CH2-, tienyyli-CH2- tai tiatsolyyli-CH2- ja R12 on vety, tai Ri ja R12 muodostavat yhdessä hii-·. 25 Ien kanssa, johon ne ovat sitoutuneet, sykloalkyyliren- kaan, jossa on 5 - 7 hiiliatomia, n on yksi tai kaksi, m on nolla tai yksi ja r on nolla tai yksi, 30 tunnettu siitä, että V a) liitetään asyylimerkaptosivuketju, jolla on kaa va (II)
0 O
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan (I) mu-30 kainen yhdiste, jossa Ri on bentsyyli, X on S, n on kaksi, m on yksi ja r on 0.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [4S-[4a(R*), 7α,10θβ]]-oktahydro-4-[(2-merkapto-l-okso-3-fenyyli-35 propyyli)amino]-5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-7-karboksyylihappo. X34 1 0 6 4 6 4
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US7797893A | 1993-06-15 | 1993-06-15 | |
US7797893 | 1993-06-15 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI942793A0 FI942793A0 (fi) | 1994-06-13 |
FI942793A FI942793A (fi) | 1994-12-16 |
FI106464B true FI106464B (fi) | 2001-02-15 |
Family
ID=22141128
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI942793A FI106464B (fi) | 1993-06-15 | 1994-06-13 | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten pyridotiatsepiini-, pyrido-oksatsepiini-, pyridotiatsiini-, pyrrolo-oksatsepiini- ja pyrrolotiatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi |
FI20000815A FI111950B (fi) | 1993-06-15 | 2000-04-06 | 5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-, 4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsiini- ja 5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiinijohdannaisia |
FI20000814A FI111947B (fi) | 1993-06-15 | 2000-04-06 | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-okso-[1,4]oksatsino[3,4-b][1,3]oksatsepiini- ja -tiatsepiini-7-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI20000815A FI111950B (fi) | 1993-06-15 | 2000-04-06 | 5-okso-7H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsepiini-, 4-okso-2H,6H-pyrido[2,1-b][1,3]tiatsiini- ja 5-oksopyrrolo[2,1-b][1,3]tiatsepiinijohdannaisia |
FI20000814A FI111947B (fi) | 1993-06-15 | 2000-04-06 | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-okso-[1,4]oksatsino[3,4-b][1,3]oksatsepiini- ja -tiatsepiini-7-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi |
Country Status (38)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US5508272A (fi) |
EP (1) | EP0629627B1 (fi) |
JP (1) | JP3569550B2 (fi) |
KR (1) | KR100395604B1 (fi) |
CN (1) | CN1046525C (fi) |
AT (1) | ATE266032T1 (fi) |
AU (1) | AU672899B2 (fi) |
BG (1) | BG62139B1 (fi) |
BR (1) | BR1100970A (fi) |
CA (1) | CA2124375C (fi) |
CY (1) | CY2492B1 (fi) |
CZ (1) | CZ289488B6 (fi) |
DE (1) | DE69433752T2 (fi) |
DK (1) | DK0629627T3 (fi) |
EE (1) | EE03178B1 (fi) |
EG (1) | EG20537A (fi) |
ES (1) | ES2219644T3 (fi) |
FI (3) | FI106464B (fi) |
GE (1) | GEP19981301B (fi) |
HK (1) | HK1001814A1 (fi) |
HU (1) | HU216791B (fi) |
IL (2) | IL109924A (fi) |
LT (1) | LT3626B (fi) |
LV (1) | LV10622B (fi) |
MY (1) | MY123673A (fi) |
NO (1) | NO306405B1 (fi) |
NZ (1) | NZ260736A (fi) |
PH (1) | PH30830A (fi) |
PL (1) | PL178469B1 (fi) |
PT (1) | PT629627E (fi) |
RO (1) | RO112870B1 (fi) |
RU (1) | RU2125056C1 (fi) |
SG (1) | SG46510A1 (fi) |
SK (1) | SK282529B6 (fi) |
TW (1) | TW329423B (fi) |
UA (1) | UA39924C2 (fi) |
UY (1) | UY23787A1 (fi) |
ZA (1) | ZA944163B (fi) |
Families Citing this family (121)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5552397A (en) * | 1992-05-18 | 1996-09-03 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Substituted azepinone dual inhibitors of angiotensin converting enzyme and neutral exdopeptidase |
US5504080A (en) * | 1992-10-28 | 1996-04-02 | Bristol-Myers Squibb Co. | Benzo-fused lactams |
US5654294A (en) * | 1993-05-13 | 1997-08-05 | Bristol-Myers Squibb | Spiro lactam dual action inhibitors |
KR0156780B1 (ko) * | 1993-06-11 | 1998-11-16 | 나이토 하루오 | 아미노산 유도체 |
US5508272A (en) * | 1993-06-15 | 1996-04-16 | Bristol-Myers Squibb Company | Compounds containing a fused bicycle ring and processes therefor |
US5525723A (en) * | 1993-11-18 | 1996-06-11 | Bristol-Myers Squibb Co. | Compounds containing a fused multiple ring lactam |
US5587375A (en) * | 1995-02-17 | 1996-12-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Azepinone compounds useful in the inhibition of ACE and NEP |
US5877313A (en) | 1995-05-17 | 1999-03-02 | Bristol-Myers Squibb | Benzo-fused azepinone and piperidinone compounds useful in the inhibition of ACE and NEP |
US5635504A (en) * | 1995-06-07 | 1997-06-03 | Bristol-Myers Squibb Co. | Diazepine containing dual action inhibitors |
US5650408A (en) * | 1995-06-07 | 1997-07-22 | Karanewsky; Donald S. | Thiazolo benzazepine containing dual action inhibitors |
US6777550B1 (en) | 1996-04-12 | 2004-08-17 | Bristol-Myers Squibb Company | N-formyl hydroxylamine containing compounds useful as ACE inhibitors and/or NEP inhibitors |
WO1998041499A1 (de) | 1997-03-14 | 1998-09-24 | Basf Aktiengesellschaft | Cycloalkylalkancarbonsäureamide, deren herstellung und verwendung |
US6133002A (en) | 1997-09-25 | 2000-10-17 | Dsm N.V. | Process for preparing optically active 2-amino-ω-oxoalkanoic acid derivatives |
US6340752B1 (en) | 1998-01-06 | 2002-01-22 | Bristol-Myers Squibb Co. | Deprotection and recrystallization processes |
IT1298268B1 (it) * | 1998-02-18 | 1999-12-20 | Zambon Spa | Procedimento per la preparazione dell'acido (s)-2-bromo-3-fenil- propionico |
IT1298267B1 (it) * | 1998-02-18 | 1999-12-20 | Zambon Spa | Procedimento per la preparazione dell'acido (s)-2-acetiltio-3-fenil- propionico e dei suoi sali |
WO1999065500A1 (en) | 1998-06-17 | 1999-12-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Preventing cerebral infarction through administration of adp-receptor antiplatelet and antihypertensive drugs in combination |
EP1357109B1 (en) | 1998-06-18 | 2008-07-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Process for aryl alkyl sulfide |
US6174711B1 (en) | 1998-07-05 | 2001-01-16 | Mitsubishi Gas Chemical Company | Method for producing L-allysine acetal |
IL140898A0 (en) * | 1998-07-15 | 2002-02-10 | Bristol Myers Squibb Co | A process for preparing an alkylamino acid compound and new keto carboxylic acid derivatives |
US6468781B1 (en) | 1999-07-08 | 2002-10-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Stereoselective reductive amination of ketones |
US6162913A (en) * | 1998-07-15 | 2000-12-19 | Bristol-Myers Squibb Co. | Preparation of [4S-(4α,7α,10aβ)]-4-amino-octahydro-5-oxo-7H-pyrido[2,1 -b] [1,3]thiazepine-7-carboxylic acid, methyl ester and salts thereof via novel disulfides |
HUP0105151A3 (en) | 1998-07-15 | 2004-11-29 | Bristol Myers Squibb Co | Preparation of (s)-2-amino-6,6-dimethoxyhexanoic acid methyl ester via novel dioxolanes |
EP1109928A4 (en) | 1998-09-03 | 2004-10-13 | Bristol Myers Squibb Co | OXIDATIVE ENZYMATIC DEAMINATION PROCESS |
DE69923579T2 (de) | 1998-11-11 | 2006-01-12 | Novartis Ag | Herstellung von 2-amino-2(2-(4-alkylphenyl)äthyl)propan-1,3-diolen |
JP2002540157A (ja) * | 1999-03-29 | 2002-11-26 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | 狭心症を処置するためのバソペプチドインヒビターの使用 |
SE9903028D0 (sv) | 1999-08-27 | 1999-08-27 | Astra Ab | New use |
KR20020040795A (ko) * | 1999-08-30 | 2002-05-30 | 로버트 흐라이탁, 미쉘 베스트 | 심혈관 사고 예방용 레닌-안지오텐신 시스템 억제제의 용도 |
US6300503B1 (en) * | 1999-12-17 | 2001-10-09 | Dixie Chemical Company | Hydantoin intermediates for the synthesis of omapatrilat and methods for producing and using the same |
NL1014353C2 (nl) * | 2000-02-11 | 2001-08-15 | Dsm Nv | Werkwijze voor de bereiding van (R) -2-broom-3-fenylpropaanzuur. |
NL1014354C2 (nl) * | 2000-02-11 | 2001-08-14 | Dsm Nv | Werkwijze voor de bereiding van (S) -2-acethylthio-3-fenylpropaanzuur. |
US6509330B2 (en) | 2000-02-17 | 2003-01-21 | Bristol-Myers Squibb Company | Hydroxamic acid containing compounds useful as ACE inhibitors and/or NEP inhibotors |
EP1138671B1 (en) | 2000-03-30 | 2004-09-01 | Ajinomoto Co., Inc. | Production method of aromatic acylthiocarboxylic acid derivative |
US6620600B2 (en) * | 2000-09-15 | 2003-09-16 | Bristol-Myers Squibb Co. | Enzymatic resolution of aryl and thio-substituted acids |
EP1324975B1 (en) | 2000-09-29 | 2005-11-16 | Bristol-Myers Squibb Company | Dynamic resolution of isomers and resolved isomers |
US8168616B1 (en) | 2000-11-17 | 2012-05-01 | Novartis Ag | Combination comprising a renin inhibitor and an angiotensin receptor inhibitor for hypertension |
US6828119B2 (en) * | 2001-01-04 | 2004-12-07 | Bristol Myers Squibb Company | Enzymatic deprotection of amines and hydroxides |
US7119188B2 (en) * | 2001-01-04 | 2006-10-10 | Bristol-Myers Squibb Company | N-carbobenzyloxy (N-CBZ)-deprotecting enzyme and uses therefor |
AU2002365132A1 (en) * | 2001-10-17 | 2003-07-15 | Bristol-Myers Squibb Company | BICYCLIC LACTAM DERIVATIVES AS INHIBITORS OF MATRIX METALLOPROTEINASES AND/OR TNF-Alpha CONVERTING ENZYME (TACE) |
US7107198B2 (en) * | 2001-11-02 | 2006-09-12 | Sun Microsystems, Inc. | Automatic generation of reduced-size circuit models including inductive interaction |
AU2002348276A1 (en) | 2001-11-16 | 2003-06-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Dual inhibitors of adipocyte fatty acid binding protein and keratinocyte fatty acid binding protein |
WO2003053353A2 (en) * | 2001-12-20 | 2003-07-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Administration of vasopeptidase inhibitors to reduce pulse pressure |
US20070197552A1 (en) * | 2002-01-11 | 2007-08-23 | Novo Nordisk A/S | Method and composition for treatment of diabetes, hypertension, chronic heart failure and fluid retentive states |
AU2003201274A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-07-24 | Novo Nordisk A/S | Compositions comprising inhibitors of dpp-iv and nep enzymes for the treatment of diabetes |
DE60219152D1 (de) * | 2002-07-19 | 2007-05-10 | St Microelectronics Srl | Eine mehrphasige synchrone Pipelinestruktur |
US6842358B2 (en) * | 2002-08-01 | 2005-01-11 | Netlogic Microsystems, Inc. | Content addressable memory with cascaded array |
US7045653B2 (en) * | 2002-12-23 | 2006-05-16 | Pfizer, Inc. | Pharmaceuticals |
CL2004000544A1 (es) * | 2003-03-18 | 2005-01-28 | Pharmacia Corp Sa Organizada B | Uso de una combinacion farmaceutica, de un antagonista del receptor de aldosterona y un inhibidor de endopeptidasa neutral, util para el tratamiento y prevencion de una condicion patologica relacionada con hipertension, disfuncion renal, insulinopati |
US7459474B2 (en) | 2003-06-11 | 2008-12-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Modulators of the glucocorticoid receptor and method |
US20050054731A1 (en) * | 2003-09-08 | 2005-03-10 | Franco Folli | Multi-system therapy for diabetes, the metabolic syndrome and obesity |
US7371759B2 (en) | 2003-09-25 | 2008-05-13 | Bristol-Myers Squibb Company | HMG-CoA reductase inhibitors and method |
US7420059B2 (en) | 2003-11-20 | 2008-09-02 | Bristol-Myers Squibb Company | HMG-CoA reductase inhibitors and method |
GB0327839D0 (en) | 2003-12-01 | 2003-12-31 | Novartis Ag | Organic compounds |
US7273881B2 (en) | 2004-01-16 | 2007-09-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity and use thereof |
BRPI0508880A (pt) | 2004-03-17 | 2007-09-04 | Novartis Ag | uso de compostos orgánicos |
US7888381B2 (en) | 2005-06-14 | 2011-02-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity, and use thereof |
US20070015839A1 (en) * | 2005-07-14 | 2007-01-18 | Franco Folli | Daily Dosage Regimen for Treating Diabetes, Obesity, Metabolic Syndrome and Polycystic Ovary Syndrome |
GT200600381A (es) | 2005-08-25 | 2007-03-28 | Compuestos organicos | |
US7390789B2 (en) * | 2005-09-13 | 2008-06-24 | William H Simmons | Thio-containing inhibitors of aminopeptidase P, and compositions thereof |
US7400236B2 (en) | 2005-10-21 | 2008-07-15 | Gm Global Technology Operations, Inc. | Vehicular lane monitoring system utilizing front and rear cameras |
US7592461B2 (en) | 2005-12-21 | 2009-09-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Indane modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity and use thereof |
US8202902B2 (en) | 2006-05-05 | 2012-06-19 | The Regents Of The University Of Michigan | Bivalent SMAC mimetics and the uses thereof |
WO2007130626A2 (en) | 2006-05-05 | 2007-11-15 | The Regents Of The University Of Michigan | Bivalent smac mimetics and the uses thereof |
US7795291B2 (en) | 2006-07-07 | 2010-09-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted acid derivatives useful as anti-atherosclerotic, anti-dyslipidemic, anti-diabetic and anti-obesity agents and method |
EP2049517B1 (en) | 2006-07-20 | 2013-11-27 | Novartis AG | Amino-piperidine derivatives as cetp inhibitors |
JP2010508358A (ja) | 2006-11-01 | 2010-03-18 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | グルココルチコイド受容体、AP−1、および/またはNF−κB活性の調節剤、並びにその使用 |
WO2008057862A2 (en) | 2006-11-01 | 2008-05-15 | Bristol-Myers Squibb Company | MODULATORS OF GLUCOCORTICOID RECEPTOR, AP-1, AND/OR NF-ϰB ACTIVITY AND USE THEREOF |
EP2089389A2 (en) | 2006-11-01 | 2009-08-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Heterocyclic compounds as modulators of glucocorticoid receptor, ap-1, and/or nf-kappa-b activity |
TW200838501A (en) * | 2007-02-02 | 2008-10-01 | Theravance Inc | Dual-acting antihypertensive agents |
TWI448284B (zh) | 2007-04-24 | 2014-08-11 | Theravance Inc | 雙效抗高血壓劑 |
DK2170930T3 (da) | 2007-06-04 | 2012-11-05 | Synergy Pharmaceuticals Inc | Agonister af guanylatcyclase, anvendelige til behandlingen af gastrointestinale sygdomme, inflammation, cancer og andre sygdomme |
US8969514B2 (en) | 2007-06-04 | 2015-03-03 | Synergy Pharmaceuticals, Inc. | Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of hypercholesterolemia, atherosclerosis, coronary heart disease, gallstone, obesity and other cardiovascular diseases |
TWI406850B (zh) | 2007-06-05 | 2013-09-01 | Theravance Inc | 雙效苯并咪唑抗高血壓劑 |
JP2010538071A (ja) * | 2007-09-07 | 2010-12-09 | セラヴァンス, インコーポレーテッド | 二重作用性降圧剤 |
AU2008324243B2 (en) | 2007-11-05 | 2012-03-08 | Novartis Ag | 4-benzylamino-1-carboxyacyl-piperidine derivatives as CETP inhibitors useful for the treatment of diseases such as hyperlipidemia or arteriosclerosis |
ES2425776T3 (es) | 2007-12-03 | 2013-10-17 | Novartis Ag | Derivados 1,2-disustituidos de 4-bencilamino-pirrolidina como inhibidores CETP útiles para el tratamiento de enfermedades tales como hiperlipidemia o arteriosclerosis |
EP2234608A2 (en) | 2007-12-11 | 2010-10-06 | Viamet Pharmaceuticals, Inc. | Metalloenzyme inhibitors using metal binding moieties in combination with targeting moieties |
CN101896470B (zh) | 2007-12-11 | 2013-04-10 | 施万制药 | 双重作用的苯并咪唑衍生物和其作为抗高血压药剂的用途 |
EP2297113A1 (en) | 2008-04-29 | 2011-03-23 | Theravance, Inc. | Dual-acting antihypertensive agents |
JP2011522828A (ja) | 2008-06-04 | 2011-08-04 | シナジー ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 胃腸障害、炎症、癌、およびその他の障害の治療のために有用なグアニル酸シクラーゼのアゴニスト |
WO2009158380A1 (en) | 2008-06-24 | 2009-12-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclopentathiophene modulators of the glucocorticoid receptor, ap-1, and/or nf-kappa b activity and use thereof |
ES2624828T3 (es) | 2008-07-16 | 2017-07-17 | Synergy Pharmaceuticals Inc. | Agonistas de la guanilato ciclasa útiles para el tratamiento de trastornos gastrointestinales, inflamación, cáncer y otros |
EP2334651A2 (en) * | 2008-07-24 | 2011-06-22 | Theravance, Inc. | Dual-acting antihypertensive agents |
JP5654572B2 (ja) | 2009-05-15 | 2015-01-14 | ノバルティス アーゲー | アルドステロンシンターゼ阻害剤としてのベンズオキサゾロン誘導体 |
MA33358B1 (fr) | 2009-05-15 | 2012-06-01 | Novartis Ag | Arylpyridine en tant qu'inhibiteurs de l'aldostérone synthase |
US20100317593A1 (en) * | 2009-06-12 | 2010-12-16 | Astrazeneca Ab | 2,3-dihydro-1h-indene compounds |
WO2011005674A1 (en) | 2009-07-07 | 2011-01-13 | Theravance, Inc. | Dual-acting pyrazole antihypertensive agents |
ES2441419T3 (es) | 2009-07-22 | 2014-02-04 | Theravance, Inc. | Agentes antihipertensivos de doble acción basados en oxazol |
US8519134B2 (en) | 2009-11-17 | 2013-08-27 | Novartis Ag | Aryl-pyridine derivatives as aldosterone synthase inhibitors |
EP2507234B1 (en) | 2009-11-30 | 2014-03-12 | Novartis AG | Imidazole derivatives as aldosterone synthase inhibitors |
JP2013517295A (ja) | 2010-01-19 | 2013-05-16 | セラヴァンス, インコーポレーテッド | 二重に作用するチオフェン、ピロール、チアゾールおよびフラン抗高血圧症薬 |
TW201136582A (en) | 2010-03-16 | 2011-11-01 | Novartis Ag | Improved pharmaceutical compositions of aliskiren and methods of delivery |
US9616097B2 (en) | 2010-09-15 | 2017-04-11 | Synergy Pharmaceuticals, Inc. | Formulations of guanylate cyclase C agonists and methods of use |
US8993631B2 (en) * | 2010-11-16 | 2015-03-31 | Novartis Ag | Method of treating contrast-induced nephropathy |
NZ611528A (en) | 2010-12-15 | 2015-06-26 | Theravance Biopharma R & D Ip Llc | Neprilysin inhibitors |
ME02295B (me) | 2010-12-15 | 2016-02-20 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Inhibitori neprilizina |
ES2564275T3 (es) | 2011-02-17 | 2016-03-21 | Theravance Biopharma R&D Ip, Llc | Derivados aminobutíricos sustituidos como inhibidores de neprilisina |
CA2825737C (en) | 2011-02-17 | 2018-11-13 | Theravance, Inc. | Substituted aminobutyric derivatives as neprilysin inhibitors |
CN103582630B (zh) | 2011-05-31 | 2016-08-17 | 施万生物制药研发Ip有限责任公司 | 脑啡肽酶抑制剂 |
CA2835281A1 (en) | 2011-05-31 | 2012-12-06 | Theravance, Inc. | Neprilysin inhibitors |
ES2653215T3 (es) | 2011-05-31 | 2018-02-06 | Theravance Biopharma R&D Ip, Llc | Inhibidores de neprilisina |
TWI560172B (en) | 2011-11-02 | 2016-12-01 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Neprilysin inhibitors |
CA2871292A1 (en) | 2012-05-31 | 2013-12-05 | Theravance Biopharma R&D Ip, Llc | Nitric oxide donor neprilysin inhibitors |
EP2858650B1 (en) | 2012-06-08 | 2018-11-14 | Theravance Biopharma R&D IP, LLC | Neprilysin inhibitors |
RS55967B1 (sr) | 2012-06-08 | 2017-09-29 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Inhibitori neprilizina |
BR112015002821B1 (pt) | 2012-08-08 | 2022-10-18 | Theravance Biopharma R&D Ip, Llc | Compostos inibidores de neprilisina e composição farmacêutica |
WO2014085489A1 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-05 | Sanford-Burnham Medical Research Institute | Inhibitor of apoptosis protein (iap) antagonists |
RS56300B1 (sr) | 2013-03-05 | 2017-12-29 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Inhibitori neprilizina |
US9708367B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-07-18 | Synergy Pharmaceuticals, Inc. | Agonists of guanylate cyclase and their uses |
AU2014235209B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-06-14 | Bausch Health Ireland Limited | Guanylate cyclase receptor agonists combined with other drugs |
KR102272746B1 (ko) | 2013-06-05 | 2021-07-08 | 보슈 헬스 아일랜드 리미티드 | 구아닐레이트 사이클라제 c의 초순수 작용제, 및 이의 제조 및 사용 방법 |
WO2015027021A1 (en) | 2013-08-22 | 2015-02-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Imide and acylurea derivatives as modulators of the glucocorticoid receptor |
ES2718239T3 (es) | 2014-01-30 | 2019-06-28 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Inhibidores de neprilisina |
SG11201606057PA (en) | 2014-01-30 | 2016-08-30 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | 5-biphenyl-4-heteroarylcarbonylamino-pentanoic acid derivatives as neprilysin inhibitors |
JP6729963B2 (ja) | 2014-01-31 | 2020-07-29 | 株式会社エーピーアイ コーポレーション | ピペコリン酸4位水酸化酵素およびそれを利用した4−ヒドロキシアミノ酸の製造法 |
EP3151920A4 (en) | 2014-06-04 | 2017-12-27 | Sanford-Burnham Medical Research Institute | Use of inhibitor of apoptosis protein (iap) antagonists in hiv therapy |
US9212206B1 (en) | 2014-11-24 | 2015-12-15 | William H Simmons | 4-Fluoro-Thio-containing inhibitors of APP2, compositions thereof and method of use |
ES2923002T3 (es) | 2015-02-11 | 2022-09-22 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Acido (2S,4R)-5-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-il)-4-(etoxioxailamino)-2-hidroximetil-2-metilpentanoico como inhibidor de la neprilisina |
RS61325B1 (sr) | 2015-02-19 | 2021-02-26 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | (2r,4r)-5-(5'-hloro-2'-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-metiloksazol-2-karbonil)amino]pentanska kiselina |
HUE055546T2 (hu) | 2016-03-08 | 2021-12-28 | Theravance Biopharma R&D Ip Llc | Kristályos (2S,4R)-5-(5'-klór-2-fluor-[1,1'-bifenil]-4-il)-2-(etoximetil)-4-(3-hidroxi izoxazol-5-karboxamido)-2-metilpentánsav és alkalmazásaik |
WO2024103123A1 (en) * | 2022-11-17 | 2024-05-23 | Endothelium Scanning Nanotechnology Limited | The synthesis of omapatrilat |
Family Cites Families (49)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AT20991B (de) | 1903-12-22 | 1905-08-10 | Duplex Radiator Company | Heizkörper für Gas- und Petroleumöfen. |
AT198791B (de) | 1950-12-20 | 1958-07-25 | Westinghouse Air Brake Co | Steuerventil für Druckluftbremsen von Schienenfahrzeugen |
DE2210633C2 (de) * | 1972-03-06 | 1983-09-22 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Kondensierte Pyridinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel |
BG17877A1 (fi) * | 1972-09-26 | 1974-03-05 | ||
FR2265355B1 (fi) * | 1974-03-28 | 1977-11-04 | Blum Jean | |
US4105776A (en) * | 1976-06-21 | 1978-08-08 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Proline derivatives and related compounds |
US4339600A (en) * | 1976-05-10 | 1982-07-13 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Compounds for alleviating angiotensin related hypertension |
CA1067079A (en) * | 1976-07-22 | 1979-11-27 | Yamanouchi Pharmaceutical Co. | Nitrogen-containing heterobicyclic compounds |
US4225495A (en) * | 1978-12-07 | 1980-09-30 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Pyrrolo or pyrido [2,1-c][1,4] thiazines or thiazepines |
US4192945A (en) * | 1978-12-07 | 1980-03-11 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Process for preparing proline and homoproline derivatives |
IL58849A (en) * | 1978-12-11 | 1983-03-31 | Merck & Co Inc | Carboxyalkyl dipeptides and derivatives thereof,their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
IL61972A0 (en) * | 1980-01-30 | 1981-02-27 | Beecham Group Ltd | Azabicyclic compounds,their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
US4337201A (en) * | 1980-12-04 | 1982-06-29 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphinylalkanoyl substituted prolines |
US4415496A (en) * | 1981-03-23 | 1983-11-15 | Merck & Co., Inc. | Bicyclic lactams |
US4432972A (en) * | 1981-08-03 | 1984-02-21 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphonamidate compounds |
US4432971A (en) * | 1981-08-03 | 1984-02-21 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Phosphonamidate compounds |
US4873235A (en) * | 1982-06-01 | 1989-10-10 | Merck & Co., Inc. | Benzofused lactams as antihypertensives |
FR2540495B1 (fr) * | 1983-02-07 | 1986-02-14 | Roussel Uclaf | Nouveaux derives de o-mercaptopropanamide et de ses homologues, leur procede de preparation, leur application comme medicaments, les compositions les renfermant et les nouveaux intermediaires obtenus |
US4460579A (en) * | 1983-02-28 | 1984-07-17 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Thiazine and thiazepine containing compounds |
US4711884A (en) * | 1983-02-28 | 1987-12-08 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Thiazine and thiazepine containing compounds |
US4617301A (en) * | 1983-06-22 | 1986-10-14 | Merck & Co., Inc. | Sulfoxide and sulfone derivatives of bicyclic lactams as antihypertensives |
US4722810A (en) * | 1984-08-16 | 1988-02-02 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Enkephalinase inhibitors |
US4584294A (en) * | 1984-11-07 | 1986-04-22 | Merck & Co., Inc. | Fused tricyclic lactams as angiotensin converting enzyme inhibitors and as antihypertensive agents |
US4801609B1 (en) * | 1987-03-27 | 1993-11-09 | Mercapto-acylamino acid antihypertensives | |
EP0254032A3 (en) * | 1986-06-20 | 1990-09-05 | Schering Corporation | Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension |
US4749688A (en) * | 1986-06-20 | 1988-06-07 | Schering Corporation | Use of neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension |
CA1334092C (en) | 1986-07-11 | 1995-01-24 | David John Carini | Angiotensin ii receptor blocking imidazoles |
CA1337400C (en) * | 1987-06-08 | 1995-10-24 | Norma G. Delaney | Inhibitors of neutral endopeptidase |
CA1338238C (en) | 1988-01-07 | 1996-04-09 | David John Carini | Angiotensin ii receptor blocking imidazoles and combinations thereof with diuretics and nsaids |
US4879309A (en) * | 1988-09-27 | 1989-11-07 | Schering Corporation | Mercapto-acylamino acids as antihypertensives |
US5075302A (en) * | 1990-03-09 | 1991-12-24 | Schering Corporation | Mercaptoacyl aminolactam endopeptidase inhibitors |
FR2664269B1 (fr) * | 1990-07-05 | 1992-10-02 | Roussel Uclaf | Nouveaux derives n-substitues d'alpha-mercapto alkylamines, leur procede de preparation, leur application a titre de medicaments et les compositions les renfermant. |
CA2053340C (en) * | 1990-10-18 | 2002-04-02 | Timothy P. Burkholder | Mercaptoacetylamide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace |
US5232920A (en) * | 1990-12-21 | 1993-08-03 | Schering Corporation | N-(mercaptoalkyl)amides |
FR2679564A1 (fr) * | 1991-07-23 | 1993-01-29 | Inst Nat Sante Rech Med | Nouveaux acylmercaptoalcanoldipeptides, leur preparation et les compositions qui les contiennent. |
ZA927211B (en) * | 1991-09-27 | 1993-03-24 | Merrell Dow Pharma | Novel carboxyalkyl derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE. |
EP0534363B1 (en) * | 1991-09-27 | 1997-07-09 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Novel 2-substituted indane-2-mercaptoacetylamide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace |
AU657793B2 (en) * | 1991-09-27 | 1995-03-23 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Novel 2-substituted indane-2-carboxyalkyl derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE |
DE69317764T2 (de) * | 1992-02-14 | 1998-07-30 | Merrell Pharmaceuticals Inc., Cincinnati, Ohio | Aminoacetylmercaptoacetylamid derivate mit enkephalinase- und ace-hemmwirkung |
US5552397A (en) * | 1992-05-18 | 1996-09-03 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Substituted azepinone dual inhibitors of angiotensin converting enzyme and neutral exdopeptidase |
WO1994001436A1 (en) | 1992-07-10 | 1994-01-20 | The Boots Company Plc | Dioxcyclobutene derivatives as angiotensin ii antagonists |
DE69326474T2 (de) * | 1992-08-24 | 2000-02-17 | Merrell Pharmaceuticals Inc., Cincinnati | Neue 2-substituierte tricyclische derivate von indan-2-mercaptoacetylamid verwendbar als enkephalinase inhibitoren |
US5208236A (en) * | 1992-09-23 | 1993-05-04 | Schering Corporation | N-(acylaminomethyl)glutaryl amino acids and use |
US5504080A (en) * | 1992-10-28 | 1996-04-02 | Bristol-Myers Squibb Co. | Benzo-fused lactams |
JP3420766B2 (ja) * | 1992-10-30 | 2003-06-30 | メレルダウファーマス−ティカルズ インコーポレイテッド | エンケファリナーゼ及びaceの阻害剤として有用な新規なメルカプトアセチルアミド二環式ラクタム誘導体類 |
GB9302331D0 (en) * | 1993-02-05 | 1993-03-24 | Smithkline Beecham Plc | Process |
US5508272A (en) * | 1993-06-15 | 1996-04-16 | Bristol-Myers Squibb Company | Compounds containing a fused bicycle ring and processes therefor |
US5362727A (en) * | 1993-07-26 | 1994-11-08 | Bristol-Myers Squibb | Substituted azepino[2,1-a]isoquinoline compounds |
US5525723A (en) * | 1993-11-18 | 1996-06-11 | Bristol-Myers Squibb Co. | Compounds containing a fused multiple ring lactam |
-
1994
- 1994-05-05 US US08/238,764 patent/US5508272A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-17 TW TW083104449A patent/TW329423B/zh not_active IP Right Cessation
- 1994-05-26 CA CA002124375A patent/CA2124375C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-01 UA UA94005237A patent/UA39924C2/uk unknown
- 1994-06-07 IL IL10992494A patent/IL109924A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-06-08 CZ CZ19941402A patent/CZ289488B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-06-08 GE GEAP19941983A patent/GEP19981301B/en unknown
- 1994-06-10 CN CN94106426A patent/CN1046525C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-10 MY MYPI94001478A patent/MY123673A/en unknown
- 1994-06-10 JP JP12870694A patent/JP3569550B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-13 NO NO942208A patent/NO306405B1/no unknown
- 1994-06-13 PT PT94304266T patent/PT629627E/pt unknown
- 1994-06-13 ES ES94304266T patent/ES2219644T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-13 NZ NZ260736A patent/NZ260736A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-06-13 EP EP94304266A patent/EP0629627B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-13 ZA ZA944163A patent/ZA944163B/xx unknown
- 1994-06-13 SG SG1996005366A patent/SG46510A1/en unknown
- 1994-06-13 AT AT94304266T patent/ATE266032T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-06-13 DK DK94304266T patent/DK0629627T3/da active
- 1994-06-13 FI FI942793A patent/FI106464B/fi active
- 1994-06-13 DE DE69433752T patent/DE69433752T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-14 AU AU64667/94A patent/AU672899B2/en not_active Ceased
- 1994-06-14 RU RU94021350A patent/RU2125056C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1994-06-14 SK SK725-94A patent/SK282529B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-06-14 PL PL94303832A patent/PL178469B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1994-06-14 HU HU9401776A patent/HU216791B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-06-14 LT LTIP1954A patent/LT3626B/lt not_active IP Right Cessation
- 1994-06-14 RO RO94-01020A patent/RO112870B1/ro unknown
- 1994-06-14 LV LVP-94-122A patent/LV10622B/xx unknown
- 1994-06-14 PH PH48437A patent/PH30830A/en unknown
- 1994-06-14 EG EG35294A patent/EG20537A/xx active
- 1994-06-14 BG BG98854A patent/BG62139B1/bg unknown
- 1994-06-14 KR KR1019940013316A patent/KR100395604B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-06-15 UY UY23787A patent/UY23787A1/es not_active IP Right Cessation
- 1994-10-31 EE EE9400106A patent/EE03178B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-11-22 US US08/562,324 patent/US5672599A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-01-04 US US08/582,798 patent/US5627278A/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-17 US US08/588,037 patent/US5670699A/en not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-01-22 IL IL12005197A patent/IL120051A0/xx unknown
- 1997-05-09 US US08/853,398 patent/US5756832A/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-05-14 BR BR1100970-5A patent/BR1100970A/pt active IP Right Grant
-
1998
- 1998-01-27 HK HK98100738A patent/HK1001814A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-04-06 FI FI20000815A patent/FI111950B/fi active
- 2000-04-06 FI FI20000814A patent/FI111947B/fi active
-
2004
- 2004-10-06 CY CY0400073A patent/CY2492B1/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI106464B (fi) | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten pyridotiatsepiini-, pyrido-oksatsepiini-, pyridotiatsiini-, pyrrolo-oksatsepiini- ja pyrrolotiatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi | |
KR100277453B1 (ko) | 이중 작용 억제제 | |
US5552397A (en) | Substituted azepinone dual inhibitors of angiotensin converting enzyme and neutral exdopeptidase | |
FI87211B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiskt anvaendbara derivat av perhydro-1,4-tiazepin. | |
WO1997003047A1 (fr) | Nouveaux inhibiteurs de farnesyl transferase, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
NO163487B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk virksomme 1,5-benzoksazepiner. | |
US5506244A (en) | Cyclic amino acid derivatives | |
US5856476A (en) | Processes for preparing azepiones useful as intermediates in the preparation of inhibitors of angiotensin converting enzyme and neutral endopeptidase | |
US5616775A (en) | Process for preparing homocystein analogs useful as intermediates for compounds containing a fused bicyclic ring | |
EP0706525A1 (en) | Antihypertensive tricyclic azepine derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace | |
US4882326A (en) | Piperidine compounds and pharmaceutical uses thereof | |
FR2595704A1 (fr) | Derives de la proline | |
JPH08507552A (ja) | 抗腫瘍剤として有用な新規な3−(置換メチル)−4−オキサ−1−アザビシクロ[3.2.0]ヘプタン−7−オン誘導体 | |
HU217960B (hu) | Egy nitrogén- és kén- vagy oxigénatomos kondenzált biciklikus gyűrűt tartalmazó intermedier vegyületek, és eljárás előállításukra | |
JPH0741498A (ja) | 新規エンドセリン拮抗物質 |