EA024241B1

EA024241B1 - Оптически активное производное дибензиламина и способ его получения

Info

Publication number: EA024241B1
Application number: EA201291447A
Authority: EA
Inventors: Тадааки Охгия; Такеси Мураками; Кацутоси Мисава; Кимиюки Сибуя; Коити Ямадзаки; Таити Кусакабе
Original assignee: Кова Компани, Лтд.
Priority date: 2010-06-04
Filing date: 2011-06-03
Publication date: 2016-08-31
Also published as: IL223377A; EP2578574A4; IN2012CN10925A; JPWO2011152508A1; IL223377A0; ES2581557T3; ZA201209372B; PT2578574E; EP2578574B1; KR20130111512A; MX338024B; CN102933559B; EA201291447A1; WO2011152508A1; HK1179959A1; AU2011259929B2; TW201208688A; CA2801417C; MX2012014149A; CN102933559A

Abstract

Настоящее изобретение относится по существу к оптически чистой (S)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоте или ее фармацевтически приемлемой соли, которая обладает активностью в отношении снижения количества PCSK9-белка и повышения количества LDL-рецептора. Раскрыто лекарственное средство для профилактики и/или лечения заболевания, выбранного из гипер-LDL-холестеринемии, дислипидемии, артериосклероза, атеросклероза, периферических васкулярных заболеваний, гиперхолестеринемии, наследственной гиперхолестеринемии, сердечно-сосудистых функциональных нарушений, стенокардии, ишемии, сердечной ишемии, тромбоза, инфаркта миокарда, реперфузионных нарушений, рестеноза после ангиопластики и гипертензии, включающее указанное выше соединение или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента. Изобретение также относится к способу получения (S)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к оптически активному производному дибензиламина, пригодному в качестве активного ингредиента лекарственного средства или т.п., и к способу его получения.

Предпосылки создания изобретения

В последние годы число пациентов, страдающих дислипидемией (гиперлипидемией), и вызываемых в связи с этим артериосклеротических заболеваний быстро увеличивается вследствие изменений привычных диет за счет употребления высококалорийной и с высоким содержанием холестерина пищи вместе с улучшением уровня жизни, ожирением, недостаточностью физической нагрузки, старением и т.п. Согласно множеству этиологических исследований, включая исследование Фреминхема, обнаружено, что уровень холестерина в составе липопротеина низкой плотности (ЬНЬ) позитивно коррелирует с начальной интенсивностью заболеваний сердца. Следовательно, в случае лекарственных терапий в отношении дислипидемии и артериосклероза, внимание в значительной степени сосредоточено на уменьшении содержания ЬНЬ-холестерина (непатентный документ 1).

В случае гипер-ЬНЬ-холестеринемии, которая является одним из сильных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний, терапевтические способы заметно прогрессировали за счет использования ингибиторов НМС-СоА-редуктазы (статины). Однако, хотя статины сильно снижают уровень ЬНЬ-холестерина, уменьшение случаев инфарктов миокарда и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний остается так же высоким, как примерно 30%. Полагают, что более низкий риск смертельных случаев от сердечно-сосудистых заболеваний может быть достигнут путем дальнейшего снижения уровня ЬНЬ-холестерина. Однако введение высокой дозы статинов не может быть применено вследствие сильно повышающейся опасности острого некроза скелетных мышц.

Следовательно, требуется лекарственное средство, которое оказывает сильное уменьшающее воздействие на ЬНЬ-холестерин в крови и основано на способе воздействия, отличном от способа воздействия статинов.

Пропротеинконвертазы (РС) являются членами семейства серинпротеазы млекопитающего, в случае которых наблюдали гомологию с субтилизином у бактерий и кексином у дрожжей. Одна из РС, РС8К9 (пропротеинконвертаза-субтилизин/кексин 9), экспрессируется главным образом в печени и внеклеточно секретируется и затем связывается с ЬНЬ-рецептором на мембранных поверхностях гепатоцитов для промотирования миграции ЬНЬ-рецептора в клетки. ЬНЬ-рецептор, мигрировавший в клетки, разлагается клеточными органеллами. Так как ЬНЬ-рецептор выполняет функцию транспортировки липопротеинов, содержащих ЬНЬ-холестерин, в печень из циркулирующей крови, продуцирование РС8К9-белка ингибирует поглощение ЬНЬ-холестерина крови печенью, что приводит в результате к повышению уровня ЬЛЬ-холестерина в крови. В действительности, известно, что уровень ЬНЬ-холестерина в крови является высоким у людей с мутацией по типу вставки функции в РС8К9-гене, который имеет отношение к аутосомно-доминантной гиперхолестеринемии (непатентный документ 2). Низкий уровень ЬНЬ-холестерина в крови сохраняется у людей с мутацией по типу делеции функции в РС8К9-гене (непатентный документ 3). Далее, в случае животного было продемонстрировано, что уровень ЬНЬ-холестерина является низким у мышей с дефицитом РС8К9-гена в печени (непатентный документ 4).

На основании приведенных выше рассуждений полагают, что уменьшение количества РС8К9-белка путем подавления его продуцирования или ингибирования против функции РС8К9-белка приводит к увеличению количества ЬНЬ-рецептора и, таким образом, обеспечивает сильное, снижающее уровень ЬНЬ-холестерина, действие.

В данных условиях недавно были проведены активные исследования в отношении функционального ингибирования РС8К9-белка или подавления его продуцирования. Например, в качестве таких исследований с использованием антитела или антисмыслового олигонуклеотида, описаны функциональное ингибирование РС8К9-белка при использовании моноклонального антитела, направленного против РС8К9, подавление продуцирования РС8К9-белка, основанное на РНК-интерференции, и т.п. (непатентные документы 5-7). Далее, в качестве исследований с использованием низкомолекулярного соединения сообщалось, что берберин снижает уровень мРНК и РС8К9-белка в НерО2-клетках (непатентный документ 8) и 5-азацитидин, который является активатором аннексина А2, промотирует связывание РС8К9-белка с аннексином А2 и подавляет разложение ЬНЬ-рецептора (патентный документ 1). Однако почти нет сообщений о низкомолекулярных соединениях в качестве ингибиторов против функции РС8К9-белка или супрессоров против продуцирования РС8К9-белка, за исключением соединений, описанных выше.

- 1 024241

В патентном документе 2 раскрыты производные пиримидина, имеющие структуру дибензиламина, которые обладают сильной ингибирующей активностью против белка-переносчика сложных холестериловых эфиров (СЕТР), а также обладают сильным, повышающим уровень НИЬ-холестерина в крови действием. В этом документе раскрыто соединение следующей формулы (I) в виде рацемата в примере 45:

(транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин2-ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота, далее в данном описании также называемая как рацемическое соединение (I)). Однако какой-либо связи между рацемическим соединением (I) и РС8К9-белком не описывается или не предполагается.

Так как РС оказывают влияние на пролиферацию, подвижность, адгезию и инвазию раковых клеток, на них сосредоточено внимание в качестве мишени при лечении ракового заболевания (непатентный документ 9). Также известна связь РС с ожирением, диабетами и болезнью Альцгеймера и вовлечение РС в заболевания, такие как вирусные инфекционные заболевания, включая синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) и тяжелый острый респираторный синдром (δΆΚδ) (непатентные документы 10 и 11).

Следовательно, также предполагается использование соединения, обладающего воздействием в отношении уменьшения количества РС8К9-белка или ингибирующим воздействием против функции РС8К9-белка, в качестве активного ингредиента лекарственного средства в случае приведенных выше заболеваний.

Ссылки на известный уровень техники

Патентные документы:

патентный документ 1: международная патентная публикация \УО 2009/143633; патентный документ 2: международная патентная публикация \УО 2008/129951.

Непатентные документы:

непатентный документ 1: Νίρροη Ρίηδίιο. Уо1. 59, Ех1га 188ие 3, НурсгНрИспиа (νοί. 2), 381-386 (2001);

непатентный документ 2: Ναι. Оепе!., 34, 154-156 (2003); непатентный документ 3: Ν. Епд1. 1. МесЬ, 354, 1264-1272 (2006); непатентный документ 4: Ргос. №И. Асаб. 8с1. И8А, 102, 5374-5379 (2005); непатентный документ 5: Ргос. №И. Асаб. 8с1. И8А, 106, 9820-9825 (2009); непатентный документ 6: 1. Ыр1б Кез., 48, 763-767 (2007); непатентный документ 7: Ргос. №И. Асаб. 8ск И8А, 105, 11915-11920 (2008); непатентный документ 8: А1Ьего8с1его818, 201 (2), 266-73 (2008); непатентный документ 9: Мо1. Сагсшодеп., 44 (3), 151-161 (2005); непатентный документ 10: 1. Мо1. Меб., 83, 842-843 (2005); непатентный документ 11: 1. Мо1. Меб., 83, 844-855 (2005).

Сущность изобретения

Цель, достигаемая настоящим изобретением.

Задачей настоящего изобретения является обеспечение низкомолекулярного соединения, обладающего воздействиями в отношении снижения количества РС8К9-белка и увеличения количества ЬНЬ-рецептора, и лекарственного средства, содержащего указанное низкомолекулярное соединение в качестве активного ингредиента.

- 2 024241

Средство для достижения цели.

Авторы настоящего изобретения проводили различные исследования для достижения вышеуказанной цели. В результате авторы обнаружили, что рацемическое соединение (I) и один из его энантиомеров, (К)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота, представленная следующей формулой (II) (далее в данном описании также называемая как (К)-изомерное соединение (II)):

почти не оказывают воздействий на снижение количества РС8К9-белка и увеличение количества ЬНЬ-рецептора, в то время как авторы также обнаружили, что левовращающая (§)-транс-{4-[({2-[({1[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота, представленная следующей формулой (III) (далее в данном описании также называемая как (§)-изомерное соединение (III)):

или ее фармацевтически приемлемая соль оказывает воздействия в отношении сильного снижения количества РС8К9-белка и увеличения количества ЬНЬ-рецептора. Цель настоящего изобретения достигнута на основе приведенных выше данных.

Настоящее изобретение, таким образом, относится к (§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоте или ее фармацевтически приемлемой соли (предпочтительно по существу к оптически чистой (§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоте или ее фармацевтически приемлемой соли).

В качестве другого аспекта настоящее изобретение относится к левовращающему энантиомеру транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли (предпочтительно по существу к оптически чистому левовращающему энантиомеру транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли).

Настоящее изобретение также относится к лекарственному средству, включающему (§)-изомерное соединение (III) или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Данное лекарственноое средство снижает уровень ЬНЬ холестерина в крови и поэтому может быть использовано в качестве лекарственного средства для профилактики и/или лечения заболевания, являющегося результатом состояния, вызванного высоким уровнем ЬНЬ холестерина в крови (например, гипер-ЬЭЬ-холестеринемии, дислипидемии, артериосклероза, атеросклероза, периферических васкулярных заболеваний, гиперхолестеринемии, наследственной гиперхолестеринемии, сердечно-сосудистых функциональных нарушений, стенокардии, ишемии, сердечной ишемии, тромбоза, инфаркта миокарда, реперфузионных нарушений, рестеноза после ангиопластики, гипертензии т.д.)

Настоящее изобретение также относится к лекарственному средству для профилактики и/или лечения заболевания, выбранного из гипер-ЬЭЬ-холестеринемии, дислипидемии, артериосклероза, атеросклероза, периферических васкулярных заболеваний, гиперхолестеринемии, наследственной гиперхолестеринемии, сердечно-сосудистых функциональных нарушений, стенокардии, ишемии, сердечной ишемии, тромбоза, инфаркта миокарда, реперфузионных нарушений, рестеноза после ангиопластики и гипертензии включающему по существу оптически чистое (8)-изомерное соединение (III) или его фарма- 3 024241 цевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к подавляющему экспрессию мРНК РС8К9-белка агенту, который представляет собой (§)-изомерное соединение (III) или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к снижающему количеству РС8К9-белка агенту, который представляет собой (§)-изомерное соединение (III) или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к подавляющему продуцирование РС8К9-белка агенту, включающему (§)-изомерное соединение (III) или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к повышающему количество ЬНЬ-рецептора агенту, который представляет собой (§)-изомерное соединение (III) или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к способу получения по существу оптически чистой (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, включающему стадию удаления кристаллов с преобладанием рацемата из полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей общей формулой (IV):

где К представляет собой С_6-30-арильную группу или 5-10-членную гетероарильную группу и η представляет собой целое число от 1 до 6, путем предпочтительной кристаллизации из растворителя с получением по существу оптически чистого соединения, представленного следующей общей формулой (V):

где К и η имеют такие же значения, как указано выше, и стадию удаления группы, представленной как -(СН₂)_П-К, из соединения, представленного общей формулой (V).

В предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения по существу оптически чистой (§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, дополнительно включающему стадию взаимодействия полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей общей формулой (VI):

где К и η имеют такие же значения, как указано выше, с окислителем в растворителе, с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного общей формулой (IV).

В более предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения по существу оптически чистой (§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически при- 4 024241 емлемой соли, дополнительно включающему стадию взаимодействия полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей формулой (VII):

с соединением, представленным следующей общей формулой (VIII):

К-(СН2)п-ОН (VIII), где К и п имеют такие же значения, как указано выше, в растворителе в присутствии катализатора с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного общей формулой (VI).

В еще более предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения по существу оптически чистой (§)-транс-{4-[{{2-[{{1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, дополнительно включающему стадию гидролиза полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей общей формулой (IX):

где К¹ представляет собой С_1-6-элкильную группу, в растворителе в присутствии основания, с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного формулой (VII).

В еще более предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения по существу оптически чистой (§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, дополнительно включающему стадию взаимодействия соединения, представленного следующей общей формулой (X):

где X представляет собой атом галогена, и соединения, представленного следующей общей формулой (XI):

где К¹ имеет такое же значение, как указано выше, в растворителе в присутствии основания, с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного общей формулой (IX).

В другом предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения по существу оптически чистой (§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически при- 5 024241 емлемой соли, который дополнительно включает стадию галогенирования (§)-1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этанола в присутствии галогенирующего агента с получением соединения, представленного общей формулой (X).

Настоящее изобретение также относится к соединению, представленному общей формулой (IV)

где К представляет собой С_6-10-арильную группу или 5-10-членную гетероарильную группу, и η представляет собой целое число от 1 до 6, или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к соединению, представленному общей формулой (V)

В предпочтительном варианте настоящее изобретение также относится к соединению формулы (V), где К означает фенильную группу и η равно 1.

Настоящее изобретение также относится к способу получения (З)-изомерного соединения (III) и/или (К)-изомерного соединения (II) по существу в оптически чистой форме.

Несмотря на то, что в патентном документе 2 раскрывается способ получения рацемического соединения (I), крайне трудно получать (З)-изомерное соединение (III) или (К)-изомерное соединение (II) по существу в оптически чистой форме, как описано ниже.

Конкретно, с общепринятой точки зрения, известно, что по существу оптически чистое соединение можно получить, синтезируя рацемат и затем подвергая рацемат оптическому разделению с использованием хиральной колонки.

Однако при оптическом разделении с использованием хиральной колонки иногда очень трудно создавать условия разделения для определенного типа соединения, и способ является неподходящим для производства в промышленном масштабе. Практически найдено, что создание условий оптического разделения с использованием хиральной колонки для получения по существу оптически чистого (З)-изомерного соединения (III) или (К)-изомерного соединения (II) крайне затруднительно. Более конкретно, пытались фракционировать каждый энантиомер из рацемического соединения (I), полученного в соответствии со способом, описанным в патентном документе 2, пример 45, в то время как осуществляли различные изменения условий, например типы хиральных колонок (например, СШКАЬСЕЬ ΟΌ-Η, СНГКАЕСЕЬ 01-Н и т.п.), типы растворителя, используемого в качестве подвижной фазы (например, смесь МеОН/ТФУК, смесь ΕΐΟΗ/ТФУК и т.п.), и объемная скорость потока подвижной фазы. Однако, в случае почти всех используемых условий, разделение не было успешным. При данных обстоятельствах найдено, что каждый энантиомер успешно выделяется в условиях, описанных в примере 1-1, который будет приведен ниже. Однако также обнаружено, что в указанных выше условиях получают продукт разложения (соединение в виде сложного этилового эфира).

В патентном документе 2 также раскрывается, что рацемическое соединение (I) может быть получено способом, включающим стадии связывания промежуточного соединения (а) и рацемического бензилбромидного соединения (Ь) в присутствии основания, гидролиза сложноэфирной группы полученного соединения (с), с получением соединения (ά) и, наконец, окисления атома серы соединения (ά) в соответствии со схемой 1, представленной ниже.

- 6 024241

Что касается схемы 1, то авторы настоящего изобретения предприняли попытку получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) или (К)-изомерного соединения (II), используя оптически активный 1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]-1-метансульфонилоксиэтан вместорацемического бензилбромидного соединения (Ь). Однако предпочтительно протекает реакция элиминирования 1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]-1-метансульфонилоксиэтана, и получение целевого соединения оказалось безуспешным.

Далее, была предпринята попытка получения путем использования оптически активного бензилирующего агента, имеющего удаляемую группу, такую как толуолсульфонильная группа, хлорметансульфонильная группа или 2,4,6-триизопропилбензолсульфонильная группа, вместо метансульфонильной группы. Однако получение по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) или (К)-изомерного соединения (II) было безуспешным, как и в случае использования 1-[3,5-бис(трифторметил)фенил] -1 -метансульфонилоксиэтана.

Когда использовали бензилбромидное соединение (Ь), введение [3,5-бис-(трифторметил)фенил]-1этильной группы у атома азота промежуточного соединения (а) уже было успешно достигнуто. Соответственно, можно было ожидать получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) или (К)-изомерного соединения (II) путем использования оптически активного бензилбромидного соединения вместо рацемического бензилбромидного соединения (Ь).

Однако общеизвестно, что в случае реакции нуклеофильного замещения, при которой элиминируется бромид-ион, бромид-ион, получающийся во время реакции, взаимодействует с бензилбромидом в реакционной системе и происходит рацемизация. Далее, также общеизвестно, что в случае реакции нуклеофильного замещения в положении бензила, также конкурентно протекает реакция замещения 8Ы1-типа вследствие стабилизации бензильного катиона и, следовательно, частично происходит рацемизация.

Что касается соединения, имеющего среднюю оптическую чистоту, полученную в результате уменьшения оптической чистоты вследствие частичной рацемизации (в данном описании термин соединение, имеющее среднюю оптическую чистоту означает соединение, имеющее оптическую чистоту не ниже чем примерно 10% ее (избыток одного энантиомера), и ниже чем примерно 90% ее, предпочтительно примерно 20-80% ее и наиболее предпочтительно примерно 40-70% ее, и соединение, имеющее среднюю оптическую чистоту, далее также может называться как полухиральное соединение. Далее, что касается полухирального соединения, когда соединение, в котором асимметрический атом углерода, обозначенный *, в неполной структуре, указанной ниже, находится в 8-конфигурации, составляет большее количество по сравнению с соединением в К-конфигурации, это соединение конкретно называют как полухиральное соединение с преобладанием (8)-изомера. В то время как в отношении полухирального соединения, когда соединение, в котором асимметрический атом углерода, обозначенный *, находится в К-конфигурации, составляет большее количество по сравнению с соединением в 8-конфигурации, это соединение конкретно называют полухиральным соединением с преобладанием (К)-изомера):

известно, что оптическую чистоту соединения можно увеличивать, предпочтительно путем кри- 7 024241 сталлизации одного из энантиомеров.

Однако, согласно исследованию авторов настоящего изобретения, кристаллизация не наступает в случае рацемического соединения (I) или его производного в виде сложного этилового эфира, и его оптическую чистоту безуспешно увеличивать путем предпочтительной кристаллизации.

В случаях, описанных выше, авторы настоящего изобретения преобразовали карбоксильную группу рацемического соединения (I) в бензиловый эфир и обнаружили, что полученное в результате производное в виде сложного бензилового эфира успешно выделяется в виде кристаллов, включающих рацемат в качестве основного компонента.

Затем, путем получения полухирального соединения (IV) из арилалкильного или гетероарилалкильного сложноэфирного производного и последующего осуществления кристаллизации с получением кристаллов с низкой оптической чистотой, в основном содержащих рацемат в качестве компонента (далее также называемые кристаллами с преобладанием рацемата), и удаления этих кристаллов, с получением арилалкильного или гетероарилалкильного сложноэфирного производного (V) или (V) с высокой оптической чистотой, и затем путем использования соединения (V) или (V) в качестве исходного вещества, как показано на схеме 2, приводимой ниже, авторы настоящего изобретения успешно получали желаемый энантиомер рацемического соединения (I) ((8)-изомерное соединение (III) или (К)-изомерное соединение (II)) по существу в оптически чистой форме.

(На схеме К представляет собой С_6-ю-арильную группу, которая может иметь заместитель, или 5-10-членную гетероарильную группу, которая может иметь заместитель, и η представляет собой целое число от 1 до 6).

Таким образом, настоящее изобретение относится к способу получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) или по существу оптически чистого (К)-изомерного соединения (II), или его соли, который включает стадию удаления кристаллов с преобладанием рацемата из полухирального соединения соединения, представленного следующей общей формулой (IV):

(в формуле К представляет собой С_6-10-арильную группу, которая может иметь заместитель, или 5-10-членную гетероарильную группу, которая может иметь заместитель, и η представляет собой целое число от 1 до 6), путем предпочтительной кристаллизации из растворителя, с получением по существу оптически чистого соединения, представленного следующей общей формулой (V) или (V'):

- 8 024241

(в формулах К и η имеют такие же значения, как определено для общей формулы (IV)).

Вышеуказанным способом, когда соединение, представленное общей формулой (IV), является полухиральным соединением с преобладанием (8)-изомера, может быть получено (8)-изомерное соединение (III), и, когда соединение, представленное общей формулой (IV), является полухиральным соединением с преобладанием (К)-изомера, может быть получено (К)-изомерное соединение (II).

Настоящее изобретение также относится к вышеуказанному способу, который дополнительно включает стадию удаления группы, представленной как -(СН₂)_П-К, из соединения, представленного общей формулой (V) или (V').

Настоящее изобретение также относится:

(А) к вышеуказанному способу, который дополнительно включает стадию взаимодействия полухирального соединения, представленного следующей общей формулой (VI):

(в формуле К и η имеют такие же значения, как определено для общей формулы (IV)), с окислителем в растворителе с получением полухирального соединения, представленного общей формулой (IV);

(В) к вышеуказанному способу (А), который дополнительно включает стадию взаимодействия полухирального соединения, представленного следующей формулой (VII):

К-(СН₂)_П-ОН (VIII) (в формуле К и η имеют такие же значения, как значения, определенные для общей формулы (IV)), в растворителе в присутствии катализатора с получением полухирального соединения, представленного общей формулой (VI);

(С) к вышеуказанному способу (В), который дополнительно включает стадию гидролиза полухирального соединения, представленного следующей общей формулой (IX):

(в формуле К¹ представляет собой С_|-6-алкильную группу), в растворителе в присутствии основания с получением полухирального соединения, представленного формулой (VII); и

- 9 024241 (Ό) к вышеуказанному способу (С), который дополнительно включает стадию взаимодействия соединения, представленного следующей общей формулой (X) или (X'):

(в формуле X представляет собой атом галогена), и соединения, представленного следующей общей формулой (XI):

(XI) (в формуле К¹ имеет такое же значение, как значение, определенное для общей формулы (IX)), в растворителе в присутствии основания с получением полухирального соединения, представленного общей формулой (IX).

Настоящее изобретение также относится к вышеуказанному способу (Ό), который дополнительно включает стадию галогенирования оптически активного 1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этанола в присутствии галогенирующего агента, с получением соединения, представленного общей формулой (X) или (X').

В качестве другого аспекта, настоящее изобретение относится к соединению, представленному вышеприведенной общей формулой (IV), или его соли, или его сольвату. Соединение, где К означает фенил и η означает 1, его соль или его сольват, составляет предпочтительное воплощение данного изобретения.

Настоящее изобретение также относится по существу к оптически чистому соединению, представленному вышеприведенной общей формулой (V) или (V), или его соли. Соединение, где К означает фенил и η равно 1, или его соль, или его сольват, составляет предпочтительное воплощение данного изобретения.

Эффект данного изобретения.

(З)-изомерное соединение (III) обладает превосходным, снижающим количество РСЗК9-белка воздействием и увеличивающим количество ЬПЬ-рецептора воздействием, и обладает превосходным, снижающим уровень ЬПЬ-холестерина в крови воздействием. Следовательно, соединение пригодно, например, в качестве активного ингредиента лекарственного средства для снижения уровня ЬПЬ-холестерина в крови и т.п.

Далее, (З)-изомерное соединение (III) также пригодно в качестве активного ингредиента лекарственного средства для профилактики и/или лечения заболевания, в которое вовлечены РС, более конкретно, раковое заболевание, ожирение, диабет, болезнь Альцгеймера или вирусные инфекционные заболевания.

Далее, в соответствии со способом получения согласно настоящему изобретению, желаемый энантиомер рацемического соединения (I) ((З)-изомерное соединение (III) или (К)-изомерное соединение (II)) может быть подходящим образом получен в по существу оптически чистой форме. Например, способ может быть предпочтительно использован в качестве способа получения по существу оптически чистого (З)-изомерного соединения (III), которое пригодно в качестве активного ингредиента лекарственного средства или т.п.

Варианты осуществления данного изобретения

В данном описании термин по существу оптически чистый означает, что оптическая чистота соединения составляет 90% ее или выше, предпочтительно 95-100% ее, наиболее предпочтительно 97-100% ее.

Следовательно, например, по существу оптически чистая (3)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота, по существу оптически чистый левовращающий энантиомер транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты и по существу оптически чистое (З)-изомерное соединение (III) означают (З)-изомерное соединение (III), имеющее оптическую чистоту 90% ее или выше, предпочтительно 95-100% ее, наиболее предпочтительно 97-100% ее.

В настоящем изобретении оптическая чистота (З)-изомерного соединения (III) составляет предпочтительно 98% ее или выше, наиболее предпочтительно 99% ее или выше, как определено в аналитических условиях хиральной ВЭЖХ, описанных в примере 1-1, приведенном ниже, с точки зрения достиже- 10 024241 ния благоприятного, снижающего количество РС8К9-белка воздействия и/или повышающего количество ЬПЬ-рецептора воздействия. Если достигнута вышеуказанная оптическая чистота, то (8)-изомерное соединение (III) становится по существу не содержащим другого энантиомера ((К)-изомерное соединение (III)).

В данном описании термин С1_-6-алкильная группа означает алкильную группу с линейной или разветвленной цепью, имеющую 1-6 атомов углерода, и примеры такой группы включают, например, метильную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, н-пентильную группу, изопентильную группу, неопентильную группу, н-гексильную группу, изогексильную группу и т.п.

В данном описании остаток С_6-1о-арил С_6-1о-арильной группы, которая может иметь заместитель, означает ароматическую углеводородную группу, имеющую 6-10 атомов углерода, и примеры включают, например, фенильную группу, нафтильную группу, азуленильную группу и т.п.

В данном описании остаток 5-10-членный гетероарил 5-10-членной гетероарильной группы, которая может иметь заместитель, означает 5-10-членную ароматическую гетероциклическую группу моноциклического, полициклического типа или типа конденсированного кольца, содержащую 1-4 гетероатома, выбранных из атома кислорода, атома серы и атома азота, в качестве составляющих кольцо атомов. Примеры включают, например, фурильную группу, тиенильную группу, пирролильную группу, оксазолильную группу, изоксазолильную группу, тиазолильную группу, изотиазолильную группу, имидазолильную группу, пиразолильную группу, оксадиазолильную группу, тиадиазолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу, пиридильную группу, пиримидильную группу, пиразинильную группу, пиридазинильную группу, бензофуранильную группу, изобензофуранильную группу, бензотиенильную группу, индолильную группу, изоиндолильную группу, индазолильную группу, бензимидазолильную группу, бензоксазолильную группу, бензизоксазолильную группу, бензотиазолильную группу, бензизотиазолильную группу, бензоксадиазолильную группу, бензотиадиазолильную группу, бензотриазолильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, циннолинильную группу, хиназолинильную группу, хиноксалинильную группу, фталазинильную группу, нафтиридинильную группу, пуринильную группу, птеридинильную группу, фуропиридильную группу, тиенопиридильную группу, пирролопиридильную группу, оксазолопиридильную группу, тиазолопиридильную группу, имидазопиридильную группу и т.п.

В данном описании примеры заместителя С_6-10-арильной группы, которая может иметь заместитель и 5-10-членной гетероарильной группы, которая может иметь заместитель включают, например, атом галогена, карбоксильную группу, карбамоильную группу, сульфонильную группу, сульфамоильную группу, нитрогруппу и т.п. Количество заместителей составляет от 1 до максимального числа замещений, и эти группы могут, в целом, иметь 1-5 заместителей. В качестве атома галогена можно использовать любой из атома фтора, атома хлора, атома брома и атома йода.

В общих формулах С_6-ю-арильная группа, которая может иметь заместитель в виде К, представляет собой предпочтительно фенильную группу.

В общих формулах целое число в виде η представляет собой предпочтительно 1.

В общих формулах С1_-6-алкильная группа в виде К¹ представляет собой предпочтительно С1_-4-алкильную группу, более предпочтительно этильную группу.

В общих формулах атом галогена в виде X представляет собой предпочтительно атом хлора или атом брома, более предпочтительно атом брома.

В настоящем изобретении примеры солей каждого соединения (например, (8)-изомерное соединение (III), соединение, представленное общей формулой (IV), соединение, представленное общей формулой (V), соединение, представленное общей формулой (V) и т.п.) включают, например, кислотноаддитивные соли, основно-аддитивные соли и т.п., и соль конкретно не ограничивается, пока используется фармацевтически приемлемая соль. Конкретно, примеры кислотно-аддитивных солей включают кислотно-аддитивные соли с неорганической кислотой, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, нитрат и фосфат; и кислотно-аддитивные соли с органической кислотой, такие как бензоат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат, малеат, фумарат, тартрат, цитрат и ацетат. Примеры основно-аддитивных солей включают основно-аддитивные соли с металлом, такие как соль натрия, соль калия, соль лития, соль кальция и соль магния; соли с амином, таким как аммиак, триметиламин, триэтиламин, пиридин, коллидин и лутидин; основно-аддитивные соли с органическим основанием, таким как лизин и аргинин, и т.п.

Пример способа получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) по настоящему изобретению представлен на схеме 3, приведенной ниже, и пример способа получения по существу оптически чистого (К)-изомерного соединения (II) по настоящему изобретению представлен на схеме 4, приведенной ниже (на следующих схемах, К, К¹, X и η имеют такие же значения, как значения, определенные выше).

- 11 024241

Стадия А.

Эта стадия представляет собой взаимодействие амина (XI) с оптически активным бензилгалогенидом (X) или (X') в присутствии основания с получением полухирального соединения (IX).

Соединение (X) или (X¹) можно использовать в количестве, составляющем от 1,0 до 3,0 мол.экв. (мол.экв.), предпочтительно 1,5-2,5 мол.экв., в расчете на соединение (XI).

Амин (XI) представляет собой известное соединение, и способ его получения описан, например, в патентном документе 2.

Это взаимодействие можно осуществлять в растворителе в присутствии основания. Растворитель конкретно не ограничивают.

Например, можно использовать Ν,Ν-диметилформамид, Ν-метилпирролидон, диметилсульфоксид, диоксан, тетрагидрофуран, ацетонитрил, пропионитрил и т.п., индивидуально или в комбинации. Предпочтительные примеры растворителя включают тетрагидрофуран, Ν,Ν-диметилформамид и смеси этих растворителей. Объем растворителя конкретно не ограничивают.

Растворитель можно использовать в 2-20-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 5-12-кратном количестве (об./мас.), более предпочтительно в 7-10-кратном количестве (об./мас.), в расчете на соединение (XI).

Основание конкретно не ограничивают. Например, можно использовать гидриды щелочных металлов, такие как гидрид лития, гидрид натрия и гидрид калия; щелочные металлы, такие как литий, натрий и калий; гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид лития, гидроксид натрия и гидроксид калия; карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат лития, карбонат натрия, карбонат калия и карбонат цезия; амиды щелочных металлов, такие как диизопропиламид лития, диизопропиламид натрия, дии- 12 024241 зопропиламид калия, гексаметилдисилазид лития, гексаметилдисилазид натрия и гексаметилдисилазид калия; алкоксиды щелочных металлов, такие как трет-бутоксид натрия и трет-бутоксид калия; и органические соединения лития, такие как н-бутиллитий, втор-бутиллитий и трет-бутиллитий.

Предпочтительные примеры основания включают гидриды щелочных металлов, и более предпочтительным примером является гидрид натрия. Основание можно использовать в количестве, составляющем от 1,0 до 5,0 мол.экв., предпочтительно 2,0-4,0 мол.экв., в расчете на соединение (XI).

Температура реакции обычно находится в диапазоне от -80 до 100°С, предпочтительно от -30 до 50°С, более предпочтительно от -20 до 5°С. Время реакции обычно составляет от 5 мин до 48 ч, предпочтительно от 30 мин до 24 ч, более предпочтительно 3-8 ч. В случае этой реакции, предпочтительным является использование по существу оптически чистого бензилгалогенида (X) или (X'). При этой реакции происходит частичная рацемизация, и получают полухиральное соединение (IX). Это полухиральное соединение (IX) можно использовать на следующей стадии без какой-либо обработки. Оптическая чистота по существу сохраняется посредством стадий В-Ό, и может быть получено полухиральное соединение (IV), имеющее оптическую чистоту, сравнимую с оптической чистотой полухирального соединения (IX). Согласно исследованию авторов настоящего изобретения, даже если реакцию с оптически активным бензилгалогенидом (X) или (X') осуществляют на этой стадии путем использования амина (XI), где К¹ означает бензильную группу, то полухиральное соединение (IX) в качестве целевого соединения не может быть получено с удовлетворительным выходом, однако если используют С_1-6-алкильную группу в качестве К¹, то желательное полухиральное соединение (IX) может быть получено с достаточным выходом.

Стадия В.

Эта стадия представляет собой гидролиз полухирального соединения (IX) с получением полухирального соединения (VII).

Эту реакцию можно осуществлять в растворителе в присутствии основания. Хотя растворитель конкретно не ограничен, могут быть использованы, например, спирты, такие как метанол, этанол, пропанол, изопропанол и трет-бутанол, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν-метилпирролидон, диоксан, вода и т.п., индивидуально или в комбинации. Предпочтительные примеры растворителя включают комбинацию спирта и воды, и более предпочтительные примеры растворителя включают комбинацию этанола и воды. Хотя объем растворителя конкретно не ограничен, растворитель может быть использован в 10-100-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 20-50-кратном количестве (об./мас.), более предпочтительно в 30-40-кратном количестве (об./мас.), в расчете на соединение (IX).

Основание конкретно не ограничивают. Например, можно использовать гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид лития, гидроксид натрия и гидроксид калия; карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат лития, карбонат натрия, карбонат калия и карбонат цезия; гидроксиды четвертичного аммония, такие как гидроксид тетраметиламмония, гидроксид тетраэтиламмония, гидроксид тетрапропиламмония, гидроксид тетрабутиламмония и гидроксид бензилтриметиламмония (Тритон В), и т.п.

Предпочтительные примеры основания включают гидроксиды щелочных металлов, и более предпочтительные примеры включают гидроксид натрия. Основание может быть предпочтительно использовано в количестве, составляющем от 1,0 до 5,0 мол.экв., более предпочтительно 2,0-3,0 мол.экв., в расчете на соединение (XI).

Температура реакции обычно находится в диапазоне 0-100°С, предпочтительно 30-80°С, более предпочтительно 40-60°С. Время реакции обычно составляет предпочтительно от 5 мин до 48 ч, более предпочтительно от 30 мин до 12 ч, наиболее предпочтительно 2-5 ч.

Стадия С.

Эта стадия представляет собой конденсацию полухирального соединения (VII) и спирта (VIII) с получением полухирального соединения (VI). Спирт (VIII) может быть использован в количестве, составляющем от 0,8 до 2,0 мол.экв., предпочтительно 1,0-1,2 мол.экв., в расчете на соединение (VII).

Эту реакцию можно осуществлять путем использования агента конденсации в растворителе, в присутствии или в отсутствие основания. Реакция может быть осуществлена в присутствии ускорителя конденсации. Хотя растворитель конкретно не ограничен, можно использовать, например, галогенированные углеводороды, такие как 1,2-дихлорэтан, хлороформ и дихлорметан; эфиры уксусной кислоты, такие как этилацетат и изопропилацетат; ароматические углеводороды, такие как толуол и бензол; тетрагидрофуран, диоксан, ацетонитрил, пропионитрил и т.п. Предпочтительные примеры растворителя включают галогенированные углеводороды, и более предпочтительные примеры включают дихлорэтан. Хотя объем растворителя конкретно не ограничен, растворитель может быть использован в 5-100-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 10-20-кратном количестве (об./мас.), в расчете на соединение (VII).

Основание конкретно не ограничивают. Например, могут быть использованы органические основания, такие как пиридин, 4-диметиламинопиридин (ΌΜΑΡ), коллидин, лутидин, 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (ΌΒυ), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен (ΌΒΝ),

1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (ЭАВСО). триэтиламин, диизопропилэтиламин, диизопропилпентиламин и

- 13 024241 триметиламин; гидриды щелочных металлов, такие как гидрид лития, гидрид натрия и гидрид калия; гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид лития, гидроксид натрия и гидроксид калия; карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат лития, карбонат натрия, карбонат калия и карбонат цезия; бикарбонаты щелочных металлов, такие как гидрокарбонат натрия и гидрокарбонат калия, и т.п.

Хотя ускоритель конденсации конкретно не ограничен, можно использовать ΌΜΆΡ, 1-гидрокси-7азабензотриазол (НОЛ!), 1-гидроксибензотриазол (НОВ!), 3,4-дигидро-3-гидрокси-4-оксо-1,2,3бензотриазин (НОЭНЫ), Ы-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксиимид (НОИВ), пентафторфенол (НОРГр), Ν-гидроксифталимид (НОРН!), Ν-гидроксисукцинимид (НО8и) и т.п. В качестве ускорителя конденсации предпочтительным является ΌΜΛΡ. Ускоритель конденсации можно использовать в количестве, составляющем от 0,001 до 1,0 мол.экв., предпочтительно 0,05-0,5 мол.экв., в расчете на соединение (VII).

Хотя агент конденсации конкретно не ограничен, можно использовать дициклогексилкарбодиимид (ЭСС), диизопропилкарбодиимид (ИГРСЦ, И-(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимид (обычно называемый водорастворимым карбодиимидом ΑνδΕΊ)), ^§С-НС1 и т.п. В качестве агента конденсации предпочтительным является ^§С-НС1. Агент конденсации может быть использован в количестве, составляющем от 1,0 до 3,0 мол.экв., предпочтительно 1,0-1,2 мол.экв., в расчете на соединение (VII).

Температура реакции обычно составляет 0-100°С, предпочтительно 0-8°С, более предпочтительно 10-30°С. Время реакции обычно составляет предпочтительно от 5 мин до 48 ч, более предпочтительно от 30 мин до 24 ч, наиболее предпочтительно 8-16 ч.

Стадия Ό.

Эта стадия представляет собой окисление атома серы полухирального соединения (VI) с получением полухирального соединения (IV).

В качестве способа окисления можно использовать стандартные способы преобразования атома серы в сульфонильную группу. В качестве окислителя можно использовать, например, водный раствор пероксида водорода, как используемый в реакции окисления, используя каталитическое количество вольфрамата натрия, дихлорида диоксида молибдена или пентахлорида тантала, пербората натрия, Охопе (зарегистрированная торговая марка), перйодата натрия, перйодата калия, метахлорнадбензойной кислоты (тСРВА), пиридинийхлорхромата (РСС), пиридинийдихромата (РИС), Ν-хлорсукцинимида (ИС8), Ν-бромсукцинимида (ΝΒδ), Ν-йодсукцинимида (Ν!δ), йода, брома и т.п. Предпочтительный окислитель представляет собой комбинацию пентахлорида тантала и водного раствора пероксида водорода. Пентахлорид тантала можно использовать в количестве, составляющем от 0,001 до 1,0 мол.экв., предпочтительно 0,05-0,5 мол.экв., в расчете на соединение (VI). Водный раствор пероксида водорода можно использовать в количестве, составляющем от 1,0 до 10 мол.экв., предпочтительно 4,0-6,0 мол.экв., в расчете на соединение (VI).

Растворитель конкретно не ограничивают. Примеры включают, например, воду, спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол и трет-бутанол, ацетонитрил, ацетон, тетрагидрофуран, дихлорметан, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, тетрахлорид углерода, Ν,Ν-диметилформамид, уксусную кислоту и т.п. Предпочтительные примеры растворителя включают спирты, и более предпочтительные примеры включают 2-пропанол. Хотя объем растворителя конкретно не ограничен, растворитель может быть использован в 5-100-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 10-30-кратном количестве (об./мас.), в расчете на соединение (VI).

Температура реакции обычно может составлять 0-100°С, предпочтительно 10-60°С, более предпочтительно 10-30°С. Время реакции обычно составляет предпочтительно от 5 мин до 48 ч, более предпочтительно от 30 мин до 24 ч, наиболее предпочтительно 8-16 ч.

Стадия Е.

Эта стадия представляет собой предпочтительно кристаллизацию при получении кристаллов с преобладанием рацемата с низкой оптической чистотой из полухирального соединения (IV) с получением оптического изомера (V) или (V) с высокой оптической чистотой.

Эта стадия представляет собой кристаллизацию при получении кристаллов с преобладанием рацемата в растворителе, содержащем полухиральное соединение (IV), и затем удаление полученных кристаллов с преобладанием рацемата с получением левовращающего оптического изомера (V) или (V) с высокой оптической чистотой в маточном растворе.

Примеры растворителя включают спирты, такие как метанол, этанол, н-пропанол и изопропанол. Предпочтительными являются спирты, имеющие линейную или разветвленную цепь, содержащие 1-6 атомов углерода, и особенно предпочтительными являются этанол и изопропанол. Количество растворителя составляет 2-20-кратное количество (об./мас.), предпочтительно 4-10-кратное количество (об./мас.), более предпочтительно 5-8-кратное количество (об./мас.), в расчете на соединение (IV).

Кристаллизацию можно осуществлять путем растворения полухирального соединения (IV) в растворителе и перемешивания раствора при температуре 10-40°С, предпочтительно 15-20°С, в течение от 30 мин до двух суток, предпочтительно в течение 15-24 ч. Если желательно увеличить выход кристаллов, то перемешивание можно затем осуществлять в течение от 30 мин до 24 ч, предпочтительно в течение 2- 14 024241 ч, при охлаждении раствора до температуры от -10 до 10°С, предпочтительно от -5 до 5°С. Кристаллы с преобладанием рацемата могут представлять собой кристаллы, состоящие исключительно из рацемата, или они обычно могут быть кристаллами с низкой оптической чистотой (примерно 0-40% ее), содержащими примерно 60-100% рацемических компонентов.

Эту стадию можно осуществлять в присутствии отдельно полученных затравочных кристаллов рацемата. Затравочные кристаллы рацемата, используемые в этом способе, представляют собой кристаллы рацемата соединения, представленного общей формулой (IV). Примеры включают, например, кристаллы рацемата бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

Далее, кристаллы с преобладанием рацемата, полученные на стадии Е, можно использовать в качестве затравочных кристаллов рацемата без какой-либо обработки. Кристаллы, отдельно полученные путем получения рацемата соединения, представленного общей формулой (IV), и последующей кристаллизации, также могут быть использованы в качестве затравочных кристаллов рацемата. Такой рацемат соединения, представленного общей формулой (IV), может быть получен, например, описанным ниже способом.

В этой реакции рацемическое соединение (I) и спирт (VIII) конденсируют с получением рацемата (IV). Спирт (VIII) может быть использован в количестве, составляющем от 0,8 до 2,0 мол.экв., предпочтительно 1,0-1,2 мол.экв., в расчете на рацемическое соединение (I).

Эта реакция может быть осуществлена в растворителе при использовании агента конденсации в присутствии или в отсутствие основания. Реакцию можно осуществлять в присутствии ускорителя конденсации. Растворитель конкретно не ограничивают. Например, можно использовать галогенированные углеводороды, такие как 1,2-дихлорэтан, хлороформ и дихлорметан; эфиры уксусной кислоты, такие как этилацетат и изопропилацетат; ароматические углеводороды, такие как толуол и бензол; тетрагидрофуран, диоксан, ацетонитрил, пропионитрил и т.п. Предпочтительные примеры растворителя включают галогенированные углеводороды, и более предпочтительные примеры включают дихлорметан. Хотя объем растворителя конкретно не ограничен, растворитель может быть использован в 5-100-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 10-20-кратном количестве (об./мас.), в расчете на рацемическое соединение (I).

Основание конкретно не ограничивают. Например, можно использовать органические основания, такие как пиридин, 4-диметиламинопиридин (ΌΜΑΡ), коллидин, лутидин, 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец7-ен (ΌΒυ), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен (ΌΒΝ), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (ΌΑΒΟΟ), триэтиламин, диизопропилэтиламин, диизопропилпентиламин и триметиламин; гидриды щелочных металлов, такие как гидрид лития, гидрид натрия и гидрид калия; гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид лития, гидроксид натрия и гидроксид калия; карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат лития, карбонат натрия, карбонат калия и карбонат цезия; бикарбонаты щелочных металлов, такие как гидрокарбонат натрия и гидрокарбонат калия, и т.п.

Хотя ускоритель конденсации конкретно не ограничен, можно использовать ΌΜΑΡ, 1-гидрокси-7азабензотриазол (ΗΟΑΙ), 1-гидроксибензотриазол (ΗΟΒΙ), 3,4-дигидро-3-гидрокси-4-оксо-1,2,3бензотриазин (НОЭйЫ), ^гидрокси-5-норборнен-2, 3-дикарбоксиимид (ΗΟΝΒ), пентафторфенол (ΗΟΡίρ), Ν-гидроксифталимид (ΗΟΡΠΙ). Ν-гидроксисукцинимид (ΗΟδιι) и т.п. В качестве ускорителя конденсации предпочтительным является ΌΜΑΡ. Ускоритель конденсации может быть использован в количестве, составляющем от 0,001 до 1,0 мол.экв., предпочтительно 0,05-0,5 мол.экв., в расчете на рацемическое соединение (I).

Хотя агент конденсации конкретно не ограничен, можно использовать дициклогексилкарбодиимид (ΌΟΟ), диизопропилкарбодиимид (ΌΡΟΙ). ^(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимид (обычно называемый водорастворимым карбодиимидом (АЗСГ)), Α80-Η01 и т.п. В качестве агента конденсации предпочтительным является Α80·Η01. Агент конденсации может быть использован в количестве, составляющем от 1,0 до 3,0 мол.экв., предпочтительно 1,0-1,2 мол.экв., в расчете на рацемическое соединение (I).

Температура реакции обычно составляет 0-100°С, предпочтительно 0-80°С, более предпочтительно 10-30°С. Время реакции обычно составляет предпочтительно от 5 мин до 48 ч, более предпочтительно от 30 мин до 24 ч, наиболее предпочтительно 8-16 ч.

Кристаллизацию рацемата соединения, представленного общей формулой (IV) (получение затра- 15 024241 вочных кристаллов рацемата), можно осуществлять в условиях, подобно применяемым в случае предпочтительной кристаллизации, с получением кристаллов с преобладанием рацемата из полухирального соединения (IV).

Более конкретно, рацемическое соединение (IV) можно растворить в растворителе и раствор можно перемешивать при температуре 10-40°С, предпочтительно 15-20°С, в течение от 30 мин до двух суток, предпочтительно в течение 15-24 ч. Если желательно увеличивать выход кристаллов, то перемешивание можно дополнительно осуществлять в течение от 30 мин до 24 ч, предпочтительно в течение 2-5 ч, при охлаждении этого раствора до температуры от -10 до 10°С, предпочтительно от -5 до 5°С. Примеры растворителя включают спирты, такие как метанол, этанол, н-пропанол и изопропанол. Предпочтительными являются спирты, имеющие линейную или разветвленную цепь, содержащие 1-6 атомов углерода, и особенно предпочтительными являются этанол и изопропанол. Количество растворителя составляет 2-20-кратное количество (об./мас.), предпочтительно 4-10-кратное количество (об./мас.), более предпочтительно 5-8-кратное количество (об./мас.), в расчете на рацемическое соединение (IV).

Стадия Р.

Эта стадия представляет собой снятие защиты с соединения (V) или (V) высокой оптической чистоты с получением по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) или (К)-изомерного соединения (II).

Эту реакцию можно осуществлять путем каталитического восстановления, используя металлический катализатор и источник водорода, в растворителе, или путем реакции гидролиза, используя основание, в растворителе. Ели снятие защиты осуществляют путем каталитического восстановления, то в качестве растворителя можно использовать спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол и третбутанол; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран и диоксан; эфиры уксусной кислоты, такие как этилацетат и изопропилацетат; уксусную кислоту; воду и т.п. В качестве растворителя предпочтительными являются спирты, и более предпочтительным является этанол. Растворитель может быть использован в 5-30-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 5-15-кратном количестве (об./мас.), в расчете на соединение (V) или (V).

В качестве источника водорода можно использовать, например, водород, циклогексадиен, муравьиную кислоту, формиат аммония и т.п. В качестве источника водорода предпочтительным является водород. В качестве металлического катализатора можно использовать палладий-на-углеподе, палладиевую чернь, никель Ренея, диоксид платины, платиновую чернь и т.п. В качестве металлического катализатора предпочтительным является палладий-на-углероде. Палладий-на-углероде может быть использован в 0,001-0,5-кратном количестве (мас./мас.), предпочтительно в 0,05-0,2-кратном количестве (мас./мас.), в расчете на соединение (V) или (V), с точки зрения количества 10%-ного Рб-С (влажный).

Каталитическое восстановление, как правило, можно осуществлять при температуре в диапазоне от 0 до 100°С, предпочтительно 10-60°С, более предпочтительно 10-30°С. Время реакции обычно составляет предпочтительно от 5 мин до 24 ч, более предпочтительно от 30 мин до 16 ч, наиболее предпочтительно 1-6 ч.

Если снятие защиты осуществляют путем реакции гидролиза, то можно использовать, например, спирты, такие как метанол, этанол, пропанол, 2-пропанол и трет-бутанол, ацетонитрил, пропионитрил, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид, Ν,Ν-диметилформамид, Ν-метилпирролидон, диоксан, воду и т.п., индивидуально или в комбинации, хотя растворитель конкретно не ограничен. В качестве основания можно использовать, например, гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид лития, гидроксид натрия и гидроксид калия; карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат лития, карбонат натрия, карбонат калия и карбонат цезия; гидроксиды четвертичного аммония, такие как гидроксид тетраметиламмония, гидроксид тетраэтиламмония, гидроксид тетрапропиламмония, гидроксид тетрабутиламмония и гидроксид бензилтриметиламмония (ТгПоп В) и т.п., хотя основание конкретно не ограничено.

Оптически активный бензилгалогенид (X) или (X') можно синтезировать, например, способом, описанным ниже.

- 16 024241

Эта реакция состоит из стадии галогенирования оптически активного 1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этанола (XII) или (XII') в присутствии галогенирующего агента с высокоэффективным получением оптически активного 1-галоген-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана (X) или (X') по существу без уменьшения оптической чистоты.

Примеры галогенирующего агента, используемого для этой реакции, включают хлорирующие агенты, такие как тионилхлорид, трихлорид фосфора, пентахлорид фосфора и оксихлорид фосфора; бромирующие агенты, такие как трибромид фосфора, трибромид фосфора и бромистый водород (30%-ный раствор в уксусной кислоте), трибромид фосфора и пиридин, Ν-бромсукцинимид и метилсульфид, Ν-бромсукцинимид и трифенилфосфин, 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтан и трифенилфосфин, бромдиметилсульфонийбромид, бромид-пербромид пиридиния и гексаметилдисилан, бром и трифенилфосфин, бром и трибутилфосфин, бром и метилсульфид, бромид цинка и трифенилфосфин и диметилазодикарбоксилат, бромид лития и хлортриметилсилан, бромид лития и трифторуксусный ангидрид, бромтриметилсилан, тетрабромид углерода и трифенилфосфин, и тионилбромид; и йодирующие агенты, такие как йодистый водород, и йодид калия и фосфорная кислота. Если галогенирующий агент представляет собой бромирующий агент, то предпочтительными являются трибромид фосфора и бромистый водород (30%ный раствор в уксусной кислоте), 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтан и трифенилфосфин, и Ν-бромсукцинимид и метилсульфид.

Реакция с использованием трибромида фосфора и бромистого водорода в качестве галогенирующего агента и реакция с использованием 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтана и трифенилфосфина в качестве галогенирующего агента, в частности, будут конкретно объяснены ниже.

Реакция с использованием трибромида фосфора и бромистого водорода (30%-ный раствор в уксусной кислоте) в качестве галогенирующего агента.

Когда трибромид фосфора и бромистый водород (30%-ный раствор в уксусной кислоте) используют в качестве галогенирующего агента, трибромид фосфора используют в количестве, составляющем от 0,3 до 2,0 мол.экв., предпочтительно 0,4-0,6 мол.экв., в расчете на фенилэтанол (XII) или (XII'). Бромистый водород используют в количестве от 0,7 до 3,0 мол.экв., предпочтительно 0,8-1,2 мол.экв., в расчете на фенилэтанол (XII) или (XII').

Эту реакцию можно осуществлять в присутствии или в отсутствие растворителя. Когда реакцию осуществляют в присутствии растворителя, используемый растворитель конкретно не ограничивают, если только растворитель не принимает участия в реакции. Примеры включают, например, ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол, ксилол, мезитилен, хлорбензол, 1,2-дихлорбензол и нитробензол; алифатические углеводороды, такие как н-пентан, н-гексан, циклогексан, н-гептан, н-октан и ндекан; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан, хлороформ и тетрахлорид углерода, и т.п. Среди них предпочтительными являются бензол, толуол, ксилол, метиленхлорид,

1.2- дихлорэтан, н-пентан, н-гексан и н-гептан и, в особенности, более предпочтительными являются толуол, метиленхлорид и н-гептан. Эти растворители можно использовать индивидуально или в комбинации, и количество используемого растворителя конкретно не ограничено.

Температура реакции обычно может находиться в диапазоне от -50 до 150°С, более предпочтительно от -20 до 80°С, наиболее предпочтительно 0-15°С. Как правило, время реакции составляет предпочтительно от 5 мин до 48 ч, более предпочтительно от 30 мин до 36 ч, наиболее предпочтительно 12-24 ч.

Реакция с использованием 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтана и трифенилфосфина в качестве галогенирующего агента.

Когда 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтан и трифенилфосфин используют в качестве галогенирующего агента, 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтан используют в количестве, составляющем от 1,0 до 3,0 мол.экв., предпочтительно 1,0-1,2-мол.экв., в расчете на фенилэтанол (XII) или (XII'). Трифенилфосфин используют в количестве, составляющем от 1,0 до 3,0 мол.экв., предпочтительно 1,0-1,2-мол.экв., в расчете на фенилэтанол (XII) или (XII').

Эту реакцию можно осуществлять в присутствии растворителя. Используемый растворитель конкретно не ограничивают, если только растворитель не принимает участия в реакции. Примеры включают, например, ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол, ксилол, мезитилен, хлорбензол,

1.2- дихлорбензол и нитробензол; алифатические углеводороды, такие как н-пентан, н-гексан, циклогексан, н-гептан, н-октан и н-декан; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид,

1.2- дихлорэтан, хлороформ и тетрахлорид углерода, и т.п. Предпочтительные примеры растворителя включают ароматические углеводороды или галогенированные углеводороды, более предпочтительные примеры включают бензол, толуол, ксилол, метиленхлорид и 1,2-дихлорэтан, и особенно предпочтительные примеры включают толуол, метиленхлорид и 1,2-дихлорэтан. Эти растворители можно использовать индивидуально или в комбинации. Хотя объем растворителя конкретно не ограничен, растворитель можно использовать в 1-10-кратном количестве (об./мас.), предпочтительно в 2-4-кратном количестве (об./мас.), в расчете на фенилэтанол (XII) или (XII¹).

Температура реакции обычно может находиться в диапазоне от -50 до 150°С, более предпочтительно от -20 до 80°С, наиболее предпочтительно 0-30°С. Как правило, время реакции предпочтительно со- 17 024241 ставляет от 5 мин до 48 ч, более предпочтительно от 30 мин до 36 ч, наиболее предпочтительно 1-2 ч.

(8)-изомерное соединение (III) или его соль обладает подавляющим воздействием против экспрессии мРНК РС8К9, как конкретно продемонстрировано в примерах, описанных ниже. Вещество также обладает воздействием в отношении снижения количества РС8К9-белка и воздействием в отношении повышения количества ЬПЬ-рецептора, и оказывает воздействие в отношении снижения уровня ЬПЬ-холестерина в крови ίη νίνο.

Хотя настоящее изобретение не связано со следующим мнением, считают, что (8)-изомерное соединение (III) или его соль, или его сольват подавляет продуцирование РС8К9-белка, в связи с этим подавляет разложение ЬПЬ-рецептора и увеличивает количество ЬПЬ-рецептора, и, в результате, вещество промотирует включение ЬПЬ крови в ЬПЬ-рецептор. Также считают, что такое промотирование включения ЬПЬ крови в ЬПЬ-рецептор составляет один из факторов проявления воздействия в отношении снижения уровня ЬПЬ-холестерина в крови.

Следовательно, лекарственное средство, содержащее (8)-изомерное соединение (III) или его соль в качестве активного ингредиента, можно использовать в качестве лекарственного средства для профилактики и/или лечения гипер-ЬВЬ-холестеринемии, а также таких заболеваний, как дислипидемия (гиперлипидемия), артериосклероз, атеросклероз, периферические васкулярные заболевания, гиперхолестеринемия, наследственная гиперхолестеринемия, сердечно-сосудистые функциональные нарушения, стенокардия, ишемия, сердечная ишемия, тромбоз, инфаркт миокарда, реперфузионные нарушения, рестеноз после ангиопластики и гипертензия.

Далее, поскольку известно, что пропротеинконвертазы (РС), включая РС8К9, являются ферментами, вовлекаемыми в начало, прогрессирование, обострение и т.п. ракового заболевания, ожирения, диабетов, болезни Альцгеймера и вирусных инфекционных заболеваний, можно предполагать использование лекарственного средства и фармацевтической композиции, включающих в качестве активного ингредиента (8)-изомерное соединение (III) или его соль в качестве лекарственного средства для профилактики и/или лечения вышеуказанных заболеваний, в которые вовлечены РСк.

Рацемическое соединение (I) и соединение, описанное в патентном документе 2, пример 44 (транс{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота), обладает подавляющим воздействием против экспрессии мРНК НМО-СоЛ-редуктазы, как конкретно продемонстрировано в примерах, описанных ниже. Следовательно, также можно предполагать использование рацемического соединения (I), соединения, описанного в патентном документе 2, примере 44, или его энантиомера, или его соли в качестве лекарственного средства для профилактики и/или лечения заболевания, возникающего в результате экспрессии мРНК НМО-СоА-редуктазы (например, заболеваний, сопровождающихся продуцированием изопреноидов (фарнезилпирофосфорная кислота, геранилгеранилпирофосфорная кислота и т.п.), которые осуществляют посттрансляционную модификацию различных белков, таких как Как, К1о и Кас, с липидами, конкретно, воспаление, раковое заболевание, болезнь Альцгеймера, остеопороз, гипертрофия предстательной железы, гломерулярные заболевания, инфестация, вирусная инфекция, псориаз, дегенерация желтого пятна сетчатки и т.п.).

В качестве лекарственного средства согласно настоящему изобретению можно вводить, по существу, вышеуказанный активный ингредиент. Предпочтительно активный ингредиент можно вводить в виде фармацевтической композиции для перорального или парентерального введения, осуществляемого способами, хорошо известными специалисту в данной области. Примеры фармацевтической композиции, подходящей для перорального введения, включают, например, таблетки, капсулы, порошки, утонченные гранулы, гранулы, растворы, сиропы и т.п., и примеры фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения, включают, например, инъекции, такие как внутривенные инъекции и внутримышечные инъекции, капельные внутривенные вливания, суппозитории, средства для ингаляции, капли для глаз, капли для носа, трансдермальные готовые лекарственные формы, трансмукозальные готовые лекарственные формы и т.п., однако фармацевтическая композиция не ограничивается этими примерами.

Вышеуказанную фармацевтическую композицию можно получать путем добавления фармакологически и фармацевтически приемлемых добавок. Примеры фармакологически и фармацевтически приемлемых добавок включают, например, эксципиенты, связующие вещества, наполнители, дезинтегрирующие агенты, поверхностно-активные вещества, смазочные вещества, диспергирующие агенты, забуферивающие агенты, консерванты, корригирующие вещества, ароматизаторы, агенты для покрытия, разбавители и т.п., но не ограничиваясь этими примерами.

Доза лекарственного средства согласно настоящему изобретению конкретно не ограничена, и дозу можно соответствующим образом подбирать в зависимости от типа заболевания, цели введения, т.е. профилактического применения или терапевтического применения, типа активного ингредиента и т.п., и дозу также можно соответствующим образом увеличивать или уменьшать в зависимости от различных факторов, которые обычно должны быть приняты во внимание, таких как масса и возраст пациента, симптомы и путь введения. Например, для перорального введения лекарственное средство можно использовать в количестве, находящемся в диапазоне от примерно 0,1 до 500 мг, с точки зрения массы активного ингредиента, в качестве суточной дозы для взрослого человека. Дозу может соответствующим образом

- 18 024241 подбирать квалифицированный специалист в данной области, и доза не ограничена вышеуказанным диапазоном.

Примеры

Настоящее изобретение будет объяснено со ссылкой на примеры. Однако настоящее изобретение не ограничено этими примерами. Аббревиатуры, используемые в следующих примерах, имеют следующие значения:

с: синглет; д: дублет; т: триплет; кв: квартет; м: мультиплет; уш.: уширенный;

I: константа связывания;

Гц: Герц;

СЭС1₃: дейтерированный хлороформ;

'Н-ЯМР: протонный ядерно-магнитный резонанс;

ГК: спектр поглощения в ИК-диапазоне.

Пример 1. Разработка способа получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III).

Пример 1-1. Оптическое разделение с использованием хиральной колонки.

Обнаружено, что когда применяют следующие условия, каждый энантиомер может быть выделен из рацемического соединения (I), полученного в соответствии со способом, описанным в патентном документе 2 (международная патентная публикация \УО 2008/129951), пример 45, и что эти условия пригодны для определения оптической чистоты (З)-изомерного соединения (III) и (К)-изомерного соединения (II) путем анализа методом хиральной ВЭЖХ. Настоящее изобретение, таким образом, относится к способу определения оптической чистоты рацемического соединения (I), (З)-изомерного соединения (III) или (К)-изомерного соединения (II), или его соли, с использованием следующих условий анализа методом хиральной ВЭЖХ (особенно, комбинация колонки и подвижной фазы, указанная ниже).

Колонка: СШКАЬСЕЬ ΟΌ-Η.

Подвижная фаза: гексан/этанол/ТФУК = 90/10/0,1.

Объемная скорость потока: 1,0 мл/мин.

Температура колонки: 40°С.

Длина волны детектирования: 242 нм.

Время удерживания: первый пик: 21,3 мин ((К)-изомер), второй пик: 23,7 мин ((§)-изомер).

Однако также найдено, что, так как растворитель подвижной фазы, включенной в вышеуказанные условия, содержит ΕΐΟΗ и ТФУК, они реагируют с карбоксильной группой рацемического соединения (I) и/или каждого энантиомера с генерированием продукта разложения (соединение в виде сложного этилового эфира).

Следовательно, хотя оптическое разделение с использованием хиральной колонки при вышеуказанных условиях пригодно для определения оптической чистоты (анализ методом хиральной ВЭЖХ), оно непригодно для получения каждого по существу из оптически чистых энантиомеров, особенно для получения в большом масштабе.

Пример 1-2. Способ получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) путем предпочтительной кристаллизации.

Описание в общих чертах способа получения по существу оптически чистого (8)-изомерного соединения (III) путем предпочтительной кристаллизации, осуществленной авторами настоящего изобретения, представлено ниже в виде схемы 5.

Абсолютную конфигурацию каждого соединения определяли, исходя из абсолютной конфигурации (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана, подтвержденной на стадии 1.

Далее, оптическую чистоту (З)-изомерного соединения (III) ((§)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота), полученного на стадии 6, определяли путем анализа методом хиральной ВЭЖХ в условиях, описанных в вышеприведенном разделе 1-1.

Кроме того, оптическую чистоту 1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана, полученного на стадии 1, и бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты, полученного на стадиях 4 и 5, определяли путем анализа методом хиральной ВЭЖХ в следующих условиях. Настоящее изобретение, таким образом, также относится к способу определения оптической чистоты каждого соединения или его соли, при котором используют следующие условия анализа методом хиральной ВЭЖХ (особенно, комбинация следующей колонки и следующей подвижной фазы).

- 19 024241

Условия анализа методом хиральной ВЭЖХ для 1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана. Колонка: СШКАЬРАК АЗ-КН.

Подвижная фаза: этанол/вода = 60/40.

Объемная скорость потока: 0,5 мл/мин.

Температура колонки: 25°С.

Длина волны детектирования: 220 нм.

Время удерживания: первый пик: 21,8 мин ((К)-изомер), второй пик: 26,0 мин ((З)-изомер).

Условия анализа методом хиральной ВЭЖХ для бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

Колонка: СШКАЬСЕЬ ΟΌ-Η.

Подвижная фаза: гексан/этанол = 80/20.

Объемная скорость потока: 1,0 мл/мин.

Температура колонки: 40°С.

Длина волны детектирования: 242 нм.

Время удерживания: первый пик: 11,3 мин ((К)-изомер), второй пик: 13,0 мин ((З)-изомер).

(на схеме Εΐ означает этильную группу, и Вп означает бензильную группу).

Стадия 1. Получение (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана.

(К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этан получают способом, описанным в 1-(а), как указано ниже, и его абсолютную конфигурацию подтверждают следующим образом. Конкретно, подтверждение осуществляют путем преобразования полученного (К)-1-бром-1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этана в (З)-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этиламин и сравнения знака его фактически измеренного удельного вращения со знаком коммерчески доступного стандартного продукта, (З)-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этиламина, с известной абсолютной конфигурацией.

Далее, (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этан также получают способом, описанным в 1-(Ь), как указано ниже.

1-(а). Получение (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана (1).

В атмосфере аргона 1,2-дибром-1,1,2,2-тетрахлорэтан (7,57 г, 23,2 ммоль) растворяют в толуоле (12,5 мл), к раствору добавляют трифенилфосфин (6,1 г, 23,2 ммоль) при температуре 0°С, и смесь перемешивают в течение 30 мин. К реакционной смеси по каплям добавляют раствор (З)-1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этанола (1) (5,0 г, 19,4 ммоль, >99,5% ее) в толуоле (12,5 мл) при температуре 0°С

- 20 024241 в течение 10 мин или более, и затем смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч при той же самой температуре. К реакционной смеси добавляют н-гексан (25 мл) и смесь фильтруют через целит. Фильтрат последовательно промывают водой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и затем выпаривают при пониженном давлении. Полученный остаток подвергают дистилляции при пониженном давлении (56°С, 0,7 мм рт.ст.), с получением 5,52 г (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана (2) в виде бесцветного масла (выход: 8 8,6%).

Анализ методом хиральной ВЭЖХ: оптическая чистота >99,5% ее (основной пик: первый пик), степень конверсии >99%.

[α]_η ²⁵ = +59,1 (с=1,03, СНС1₃).

Ή-ЯМР (СОС1₃) δ: 2,08 (3Н, д, 1=7,1 Гц), 5,21 (1Н, кв, 1=7,1 Гц), 7,81 (1Н, с), 7,87 (2Н, с).

Подтверждение абсолютной конфигурации (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана.

К раствору (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана (2) (106 мг, 0,336 ммоль, 99% ее), полученного в примере 1-(а), приведенном выше, в Ν,Ν-диметилформамиде (1 мл) добавляют азид натрия (64,4 мг, 0,990 ммоль) и смесь перемешивают при температуре в диапазоне от -18 до -15°С в течение 4 ч. Реакционный раствор экстрагируют смесью этилацетат/н-гексан (1:1) и водой, органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении, с получением 111,5 мг 1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этилазида (неочищенный продукт: 111,5 мг).

Ή-ЯМР (СОС1₃) δ: 1,61 (3Н, д, 1=6,8 Гц), 4,79 (1Н, кв, 1=6,8 Гц), 7,78 (2Н, с), 7,84 (1Н, с).

Полученный 1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этилазид (неочищенный продукт: 111,5 мг) растворяют в метаноле (6 мл) и к раствору добавляют палладий-фиброин (18 мг), для замещения водорода, и затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь фильтруют через целит, фильтрат концентрируют при пониженном давлении и полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол = от 50:1 до 5:1), с получением 77,6 мг 1[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этиламина в виде бесцветного масла (выход: 91%, за 2 стадии).

Ή-ЯМР (СВС1₃) δ: 1,42 (3Н, д, 1=6,8 Гц), 1,58 (2Н, уш.с), 4,30 (1Н, кв, 1=6,8 Гц), 7,75 (1Н, с), 7,85 (2Н, с).

Удельное вращение полученного 1-[3,5-бис-(трифторметил)-фенил]этиламина представлено следующим образом: [а]_с ²⁵ = -15,9 (с=1,31, СНС1₃).

Удельное вращение коммерчески доступного стандартного продукта ((8)-1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этиламина (Сеп1га1 С1а88 Со., Ыб., Ьо1. 0102000, оптическая чистота: 99% ее)) представлено следующим образом:

[α]_η ²⁵ = -15,9 (с=1,15, СНС1₃).

Найдено, что знак фактически измеренного удельного вращения соответствует знаку коммерчески доступного стандартного продукта, и, соответственно, подтверждено, что полученный 1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этиламин представляет собой (§)-изомер. Далее, так как амин получают из 1-бром1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана посредством реакции нуклеофильного замещения азид-иона, подтверждено, что 1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этан, полученный на стадии 1-(а), приведенной выше, представляет собой (К)-изомер.

1-(Ь). Получение (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана (2)

В атмосфере аргона к (§)-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этанолу (1) (300 г, 1,16 моль, 96% ее) по каплям добавляют трибромид фосфора (157,3 г, 0,58 моль) при температуре ниже чем 20°С на водяной бане, и смесь перемешивают при температуре 19-22°С в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждают и к ней добавляют по каплям бромистый водород (30%-ный раствор в уксусной кислоте, 228 мл, 1,16 моль) при температуре ниже чем 0°С, и смесь перемешивают при температуре 13-15°С в течение 16 ч. Реакционную смесь выливают в смесь воды со льдом и полученную смесь экстрагируют н-гексаном (2 раза по 3 л). Органические слои объединяют, последовательно промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (3 л) и насыщенным раствором соли (3 л), сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении (90-100 мм рт.ст.), с получением 389,2 г неочищенного продукта. Полученный неочищенный продукт очищают с колоночной хроматографией (силикагель: 900 г, проявляющий растворитель: н-гексан), с получением 349,8 г (К)-1-бром-1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этана (2) в виде бесцветного масла (выход: 93,8%).

Первый пик наблюдают в виде основного пика при анализе методом хиральной ВЭЖХ, как описано ниже, и, соответственно, подтверждают, что 1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этан, полученный в случае 1-(Ь), также представляет собой (К)-изомер, подобный таковому, полученному в примере 1-(а).

Анализ методом хиральной ВЭЖХ: оптическая чистота: >93,9% ее (основной пик: первый пик), степень конверсии: 97,8%.

Ή-ЯМР (СПС1₃) δ: 2,08 (3Н, д, 1=7,1 Гц), 5,21 (1Н, кв, 1=7,1 Гц), 7,81 (1Н, с), 7,87 (2Н, с).

Стадия 2. Получение полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера транс-{4-[({2-[({1[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4- 21 024241 (трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты

В атмосфере аргона к раствору этил транс-[4-([(этил){2-[({5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}амино]метил)циклогексил]ацетата (3) (565,4 г, 0,99 моль), синтезированного способом, описанным в патентном документе 2 (международная патентная публикация νθ 2008/129951), в безводном тетрагидрофуране (ТГФ, 2,26 л) добавляют ΝαΗ (60%-ный раствор в масле, 119 г, 2,98 моль), при охлаждении льдом, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают до температуры -30°С и к ней добавляют по каплям раствор (К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этана (2) (682 г, 1,99 моль, 93,9% ее), полученного на стадии 1, в безводном Ν,Ν-диметилформамиде (4,53 л) так, чтобы температура внутри реакционной системы поддерживалась -15°С или ниже, и смесь перемешивают при температуре от -15 до -1°С в течение 5 ч. Реакционную смесь выливают в смешанный раствор воды со льдом (35 л) и толуола (30 л), к смеси добавляют лимонную кислоту вплоть до достижения рН, составляющего 6,9, и органический слой отделяют.

Водный слой дважды экстрагируют толуолом (20 л), органические слои объединяют, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении, с получением неочищенный продукт. Неочищенный продукт растворяют в этаноле (8л), к раствору добавляют 2 М водный раствор ΝαΟΗ (1,24 л, 2,48 моль), при охлаждении льдом, и смесь перемешивают при температуре 50°С в течение 3,5 ч. К реакционной смеси добавляют 1М водный раствор НС1, при охлаждении льдом, вплоть до рН смеси, составляющего 5,4, смесь выливают в воду (25 л) и смесь дважды экстрагируют этилацетатом (22 л). Органический слой промывают насыщенным раствором соли (12 л), сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель: 21 г, проявитель: гептан/ацетон=7/1^3/1), с получением полухирального соединения (4) транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилтио)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (масло желтого цвета, 744,1 г, выход: 96%).

(К)-1-бром-1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этан (2), абсолютная конфигурация которого подтверждена, как описано на стадии 1, приведенной выше, используют в качестве исходного вещества и проводят реакцию нуклеофильного замещения с амином (3). Соответственно, полученное полухиральное соединение (4) представляет собой соединение с преобладанием (8)-изомера.

Ή-ЯМР (ΟϋΟ1₃) δ: 0,85-0,96 (7Н, м), 1,35-1,45 (4Н, м), 1,60-1,78 (5Н, м), 2,18-2,21 (5Н, м), 2,69 (1Н, м), 2,81-2,91 (5Н, м), 4,16 (2Н, кв, 1=6,8 Гц), 4,61 (1Н, д, 1=17,1 Гц), 4,85 (1Н, д, 1=17,1 Гц), 6,22 (1Н, кВ, 1=6,8 Гц), 7,11 (1Н, д, 1=8,6 Гц), 7,23 (1Н, с), 7,37 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 7,70 (1Н, с), 7,73 (2Н, с), 8,14 (2Н, с).

Стадия 3. Получение полухирального соединения с преобладанием (8)-изомера бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

В атмосфере аргона к раствору полухирального соединения с преобладанием (8)-изомера (4) транс{4-[({2-[({ 1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (744,1 г, 0,95 моль), полученного на стадии 2, в безводном дихлорэтане (11,6 л) добавляют бензиловый спирт (113,1 г, 1,05 моль), νδΟ·ΗΟ1 (200,5 г, 1,05 моль) и ΌΜΆΡ (11,9 г, 98 ммоль), при охлаждении льдом, и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют воду (10 л) и смесь экстрагируют хлороформом (19 л, 14 л). Органический слой промывают насыщенным раствором соли (12 л), сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель: 28 г, проявитель: гептан/этилацетат=6/1), с получением полухирального соединения (5) бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (масло желтого цвета, 745,8 г, выход: 90%).

Полученное полухиральное соединение (5) представляет собой соединение с преобладанием (8)-изомера, полученное таким же образом, как полухиральное соединение (4).

Ή-ЯМР (СЛС1₃) δ: 0,87-0,95 (7Н, м), 1,37 (1Н, м), 1,43 (3Н, д, 1=7,1 Гц), 1,65-1,77 (5Н, м), 2,20 (2Н, д, 1=6,8 Гц), 2,22 (3Н, с), 2,66-2,71 (2Н, м), 2,82-2,91 (4Н, м), 4,15 (2Н, т, 1=6,6 Гц), 4,62 (1Н, д, 1=17,1 Гц), 4,85 (1Н, д, 1=17,1 Гц), 5,10 (2Н, с), 6,21 (1Н, кВ, 1=7,1 Гц), 7,10 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 7,22 (1Н, с), 7,28-7,38 (6Н, м), 7,70 (1Н, с), 7,73 (2Н, с), 8,14 (2Н, с).

Стадия 4. Получение полухирального соединения с преобладанием (З)-изомера бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

В атмосфере аргона к раствору полухирального соединения с преобладанием (З)-изомера (5) бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин2-ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (745,8 г,

- 22 024241

0,87 моль), полученного на стадии 3, в 2-пропаноле (15,2 л) добавляют пентахлорид тантала (31,3 г, 87,3 ммоль) и 30%-ный водный раствор пероксида водорода (4 96 мл, 4,38 моль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным водным раствором гидросульфита натрия (3,1 л) и добавляют воду (15 л), и смесь экстрагируют хлороформом (14 л, 12 л). Органический слой промывают насыщенным раствором соли (20 л), сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель: 26 кг, проявитель: гептан/этилацетат=3/1->2/1), с получением полухирального соединения (6) бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (аморфное вещество желтого цвета, 619,5 г, выход: 79%). Полученное полухиральное соединение (6) представляет собой соединение с преобладанием (8)-изомера, полученное таким же образом, как полухиральное соединение (4) и полухиральное соединение (5).

Анализ методом хиральной ВЭЖХ: оптическая чистота: 67,7% ее (основной пик: второй пик).

'Н-ЯМР (СЭС1₃) δ: 0,87-0,96 (7Н, м), 1,38 (1Н, м), 1,45 (3Н, д, 1=7,1 Гц), 1,65-1,80 (5Н, м), 2,21 (2Н, д, 1=6, 6 Гц), 2,69 (1Н, м), 2,81-2,91 (3Н, м), 3,08 (3Н, с), 3,44 (2Н, т, 1=5,4 Гц), 4,44 (2Н, т, 1=5,4 Гц), 4,64 (1Н, д, 1=17,1 Гц), 4,86 (1Н, д, 1=17,3 Гц), 5,10 (2Н, с), 6,19 (1Н, кВ, 1=6,9 Гц), 7,12 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 7,19 (1Н, с), 7,30-7,39 (6Н, м), 7,71 (1Н, с), 7,72 (2Н, с), 8,16 (2Н, с).

Стадия 5. Получение по существу оптически чистого бензилового эфира (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

Полухиральное соединение с преобладанием (8)-изомера (6) бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (111,7 г, 123,7 ммоль, 67,7% ее), полученного на стадии 4, растворяют в этаноле (825 мл) и к полученному раствору добавляют отдельно полученные затравочные кристаллы (кристаллы рацемата, полученные на стадии 7, описываемой ниже, 2,0 мг), при температуре 15-20°С, и смесь перемешивают при той же самой температуре в течение 21 ч и при температуре 0°С в течение 3 ч. Осадки отделяют фильтрованием и промывают охлажденным этанолом (165 мл), и затем маточный раствор концентрируют при пониженном давлении, с получением по существу оптически чистого бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (7) (аморфное вещество желтого цвета, 66,38 г, выход: 59%).

Полученный бензиловый эфир транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (7) получают путем отделения кристаллов с преобладанием рацемата от полухирального соединения с преобладанием (8)-изомера (6) фильтрованием и, следовательно, в результате получают (8)-изомер.

Анализ методом хиральной ВЭЖХ: оптическая чистота >99% ее (основной пик: второй пик);

|α| ² = -42,36 (с=1,0% мас./об., СНС1₃).

Оптическая чистота кристаллов с преобладанием рацемата, выделенных фильтрованием, составляет 22% ее, как определено анализом методом хиральной ВЭЖХ (43,39 г, выход: 39%).

Стадия 6. Получение по существу оптически чистой (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил) фенил] этил} { 5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил] -4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

В атмосфере азота к раствору бензилового эфира (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (7) (34,2 г, 37,88 ммоль, >99% ее), полученного на стадии 5, в этаноле (340 мл) добавляют 10%-ный Рб-С (влажный, 3,4 г), для замещения водорода, и затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную суспензию фильтруют через целит и промывают этанолом (50 мл), и промывочный раствор концентрируют при пониженном давлении, с получением по существу оптически чистой транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (III) (аморфное вещество белого цвета, 31,78 г, выход: 100%).

Полученное соединение представляет собой левовращающее соединение, как показано с помощью удельного вращения, указанного ниже. Далее, так как конечное соединение получают путем снятия защиты со сложноэфирного остатка (8)-изомерного бензилового эфира (7), полученное соединение также представляет собой (8)-изомер.

|α| ² = -46,68 (с=1,0, СНС1₃);

- 23 024241

Ж. (ЛТК) см^-1: 2921, 1706, 1479, 1279, 1134.

Ή-ЯМР (СИС1₃) δ: 0,80-0,96 (7Н, м), 1,38 (1Н, м), 1,47 (3Н, д, 1=7,1 Гц), 1,65-1,77 (5Н, м), 2,19 (2Н, д, 1=6,8 Гц), 2,72 (1Н, м), 2,81-2,91 (3Н, м), 3,08 (3Н, с), 3,45 (2Н, т, 1=5,2 Гц), 4,44 (2Н, кВ, 1=5,4 Гц), 4,62 (1Н, д, 1=17,1 Гц), 4,86 (1Н, д, 1=17,4 Гц), 6,21 (1Н, кВ, 1=7,1 Гц), 7,13 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 7,19 (1Н, с), 7,38 (1Н, д, 1=6,6 Гц), 7,71 (1Н, с), 7,73 (2Н, с), 8,15 (2Н, с).

Стадия 7. Получение затравочных кристаллов рацемата бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты.

К раствору транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (рацемическое соединение (I), 20 г, 24,61 ммоль), синтезированной способом, описанным в патентном документе 2 (международная патентная публикация νθ 2008/129951, пример 45), в безводном дихлорметане (200 мл) добавляют бензиловый спирт (2,93 г, 27,07 ммоль), ΌΜΛΡ (300 мг, 2,46 ммоль) и νδΟΗΟ (5,19 г, 27,07 ммоль), при охлаждении льдом, и смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. К реакционной смеси добавляют воду (100 мл) и смесь экстрагируют хлороформом (500 мл). Органический слой промывают 2М водным раствором хлористоводородной кислоты (100 мл) и насыщенным раствором соли (100 мл), сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель: 350 г, проявитель: нгексан/этилацетат=3/1^1/1) с получением бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (21,15 г, выход: 95,2%) в виде аморфного вещества белого цвета.

Полученный бензиловый эфир транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилтио)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (7,9 г), в виде аморфного вещества белого цвета, растворяют в этаноле (40 мл), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 ч и полученные осадки собирают фильтрованием, промывают охлажденным этанолом (20 мл) и сушат при температуре 60°С в течение 4 ч при пониженном давлении, с получением кристаллов рацемата бензилового эфира транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты (кристаллическое порошкообразное вещество белого цвета, 6, 98 г, выход: 88,4%).

Пример 2. Исследование воздействия (8)-изомерного соединения (III) на количество РС8К9-белка и количество ЬИГ-рецептора.

Воздействие тестируемого соединения на количество РС8К9-белка и количество ЬИГ-рецептора исследовали путем добавления тестируемого соединения к клеточному штамму гепатомы человека, НерО2-клетки, и измерения количества РС8К9-белка и количества ЬИГ-рецептора (ГИГК) путем вестерн-блоттинга после культивирования в течение 48 ч.

Конкретно, НерО2-клетки инокулировали на 6-луночный планшет при плотности 5/10⁵ клеток на лунку и культивировали в течение ночи, и тестируемое соединение, растворенное в диметилсульфоксиде (ДМСО), или только ДМСО добавляли к культуральной среде в 1/1000-кратном количестве. Клетки культивировали при температуре 37°С в течение 48 ч в инкубаторе в присутствии СО₂, к культуре добавляли 100 мкл ЫРЛ-буфера (50 мМ Трис-НС1, рН=7,8, 150 мМ ЫаС1, 1% ИР-40, 0,5% дезоксихолата натрия, 0,1% додецилсульфата натрия (δΌδ), ингибитор протеиназы) для дезинтеграции клеток и белки экстрагировали. Экстрагированные белки центрифугировали при ускорении 10000/д. супернатант собирали и добавляли буфер с δΌδ для образца (60 мМ Трис-НС1, рН=6,8, 2% δΌδ, 10% глицерина, 3% меркаптоэтанола), и смесь подвергали разделению путем δΌδ-РАОЕ (электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия), используя 8%-ный акриламидный гель. После завершения разделения белки фиксировали на нитроцеллюлозной мембране путем использования системы ίΒ1οΐ Ое1 ТгапзГег (ГОуЦгодеп) и блокировали, используя В1оск Асе (Όδ РЬагта ВютеШсак Са1а1од Νο. ИК-Β 80).

Детектирование ΡСδК9-белка, ГИГК и белка (3-актина и определение их количеств осуществляли путем мечения белков на мембране, используя анти-ΡСδК9 (Саутап, Са1а1од Νο. 1000718), анти-ЬОРК (Βίονίδίοη, Са1а1од Νο. 3839-100) и анти-в-актин (δίβΐηη, Са1а1од Νο. А5316), соответственно, в качестве первичного антитела, и пероксидазу хрена (НКР) против кроличьего иммуноглобулина О ЦдО) ^дта, Са1а1од Νο. А0545) или НКР против мышиного ЦО ^дта, Са1а1од Νο. А4416) в качестве вторичного антитела, взаимодействия хемилюминесцентного реагента (субстрат НКР) с вторичным антителом на мембране и затем измерения интенсивности сигнала с использованием анализатора Ьитто Опаде ΓΛδ3000 (Рцр РЬо1о РПт). Полученную интенсивность сигнала оценивали в числовом выражении, используя программное обеспечение Онаде Апа1у818 (анализа по образу), δ^ι^ ЬаЬ 2002 МиЫ Оаиде (Рцр РЬо1о РПт).

- 24 024241

Полученные в результате измеренные величины количества РСЗК9-белка и количества ЬОЬ-рецептора корректировали между величинами, полученными для образца с добавленным тестируемым соединением и контрольного образца (образец, к которому добавлен только ДМСО), используя количества белка β-актина в качестве показателя. Скорректированное количество РСЗК9-белка и количество ЬПЬ-рецептора в случае образца с добавленным тестируемым соединением представляли посредством относительных величин, базируясь на количестве РСЗК9-белка и количестве ЬПЬ-рецептора контрольного образца, соответственно, которые принимали за 1.

Результаты представлены в табл. 1.

В качестве тестируемого соединения использовали следующие соединения.

1: (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота ((З)-изомерное соединение (III)).

(З)-изомерное соединение (III) (оптическая чистота: >99% ее) добавляли к культуральной среде до конечной концентрации 10 мкМ.

2: (К)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота ((К)-изомерное соединение (II)).

(К)-изомерное соединение (II) (оптическая чистота: >98% ее) добавляли к культуральной среде до конечной концентрации 10 мкМ.

3: транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота (рацемическое соединение (I)).

Рацемическое соединение (I) добавляли к культуральной среде до конечной концентрации 10 мкМ.

Таблица 1

Тестируемое соединение	Доза (мкМ, концентрация в культуральной среде)	Количество РСЗК9белка (относительная величина, базирующаяся на величине контроля, принимаемой за 1)	Количество ЬЕ'1рецептора (относительная величина, базирующаяся на величине контроля, принимаемой за 1)
(3)-изомерное соединение (III)	10	0,28	1,73
(К)-изомерное соединение (II)	10	1,05	0, 93
Рацемическое соединение (I)	10	0, 68	0, 73

Как несомненно понятно из результатов, представленных в табл. 1, (З)-изомерное соединение (III) заметно снижает количество РСЗК9-белка и повышает количество ЬОЬ-рецептора по сравнению с контролем, тогда как (К)-изомерное соединение (II) и рацемическое соединение (I) почти не оказывают таких воздействий. Конкретно, количество ЬОЬ-рецептора существенно повышается только за счет (З)-изомерного соединения (III) по сравнению с контролем.

Из приведенных выше тест-результатов следует, что (З)-изомерное соединение (III) оказывает понижающее воздействие на количество РСЗК9-белка и повышающее воздействие на количество ЬОЬ-рецептора.

В дополнение, хотя настоящее изобретение не связано со следующим мнением, считают, что, так как рацемическое соединение (I) почти не оказывает понижающего воздействия на количество РСЗК9-белка и абсолютно не оказывает повышающего воздействия на количество ЬОЬ-рецептора, несмотря на тот факт, что оно содержит почти 50% (З)-изомерного соединения (III), (К)-изомерное соединение (II) в качестве составляющего компонента рацемического соединения (I) ингибирует экспрессию воздействий (З)-изомерного соединения (III) в рацемическом соединении (I). Также считают, что для повышения оптической чистоты (З)-изомерного соединения (III) предпочтительным является снижение содержания (К)-изомерного соединения (II), главным образом, для усиления повышающего количество ЬОЬ-рецептора воздействия.

Пример 3. Исследование влияния (З)-изомерного соединения (III) на экспрессию мРНК РСЗК9.

Для изучения механизма воздействия в отношении снижения количества РСЗК9-белка, указанного в примере 2, приведенном выше, тестируемое соединение добавляли к НерО2-клеткам и экспрессию количества мРНК РСЗК9 определяли путем количественного метода полимеразной цепной реакции (РСК) в реальном масштабе времени после культивирования в течение 24 ч.

Конкретно, НерО2-клетки инокулировали на 24-луночный планшет при плотности 2х10⁵ клеток на

- 25 024241 лунку и культивировали в течение ночи, и затем тестируемое соединение, растворенное в диметилсульфоксиде (ДМСО), или только ДМСО добавляли к культуральной среде в 1/1000-кратном количестве. Клетки культивировали при температуре 37°С в течение 24 ч в инкубаторе в присутствии СО₂ и после этого к ним добавляли 500 мкл КОСЕН (№ΡΡΟΝ ΟΕΝΕ, Са!а1од Νο. 31-02501) и экстрагировали общую РНК. кДНК синтезировали из экстрагированной общей РНК путем использования набора для обратной транскрипции кДНК высокой производительности (Ηί§1 СарасЬу οΌΝΆ Реуегзе ТгапзсбрЬп) (АррЬеб Вю8у8!ет8, Са!а1од Νο. 4368813). Экспрессионное количество мРНК человеческого РС8К9 определяли путем количественной РСК в реальном масштабе времени, используя праймер, специфический к человеческому РС8К9 (Коштта!е 8. е! а1., ί. ΒίοΙ. СЬет., νοί. 283, р9666), и Раз! 8УВК Сгееп Маз!ег Μίχ (АррЬеб Вю8У81ет8. Са!а1од Νο. 4385614). В качестве аппаратуры для измерения использовали систему Раз! КеаШте РСК (быстрая полимеразная цепная реакция в реальном масштабе времени) 7900НТ.

Полученные в результате измеренные величины экспрессионного количества мРНК РС8К9 корректировали между таковыми, полученными для образцов с добавленным тестируемым соединением (3 образца) и контрольными образцами (образец, к которому добавлен только ДМСО, 3 образца), используя экспрессионные количества мРНК β-актина в качестве показателя. Скорректированное экспрессионное количество мРНК РС8К9 в случае образцов с добавленным тестируемым соединением представляли посредством относительной величины (средняя величина ± стандартное отклонение), базируясь на средних экспрессионных количествах мРНК РС8К9 контрольных образцов, которые принимали за 1.

Результаты представлены в табл. 2.

В качестве тестируемого соединения использовали следующее соединение.

1: (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота ((8)-изомерное соединение (III)).

(8)-изомерное соединение (III) (оптическая чистота: >99% ее) добавляли к культуральной среде до конечной концентрации 10 мкМ.

Таблица 2

Тестируемое соединение	Доза (мкМ, концентрация в культуральной среде)	Экспрессионное количество мРНК РСЗК9 (относительная величина, базирующаяся на средней величине
контроля, принимаемой за	1)
(5)-изомерное соединение (III)	10	0,18+0,13

Из результатов, представленных в табл. 2, видно, что (8)-изомерное соединение (III) существенно снижает экспрессионное количество мРНК РС8К9 по сравнению с контролем.

Следовательно, полагают, что по меньшей мере часть снижающего количество РС8К9-белка воздействия (8)-изомерного соединения (III), указанного в примере 2, основана на подавляющем экспрессию РС8К9-гена воздействии, и (8)-изомерное соединение (III) обладает подавляющим продуцирование РС8К9-белка воздействием.

Пример 4. Исследование снижающего уровень ЬПЬ-холестерина в крови воздействия (8)-изомерного соединения (III).

(8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусную кислоту ((8)-изомерное соединение (III), оптическая чистота: >99% ее) суспендировали в 0,5%-ном растворе метилцеллюлозы и перорально неоднократно вводили обыкновенным хомякам (самцы сирийских хомяков) один раз в сутки в течение 14 суток путем использования металлического зонда. Спустя 4 ч после последнего введения, отбирали кровь и получали плазму. Липопротеины в плазме анализировали путем автоматического измерения, используя ВЭЖХ-систему, базирующуюся на методе пост-мечения согласно методу, описанному в ί. Ыр1б. Кез., 43, р805-814. Конкретно, 15 мкл образца плазмы разводили в 10 раз забуференным фосфатом физиологическим раствором (РВ8), содержащим 1 мМ ЕИТА, и 80 мкл разведенного образца вводили в колонку для гель-фильтрации (расположенные друг над другом 6 колонок (размер колонки: 10x300 мм), СЕ Неа1!Ьсаге Вюзаепсе), соединенную с ВЭЖХ-системой (устройство подачи жидкости: 81итаб/и ЬС-20А 8уз!ет, 81итаб/и). Разделение осуществляли при объемной скорости потока 0,5 мл в минуту и температуре колонки 40°С путем использования РВ8, содержащего 1 мМ ЕИТА в качестве подвижного буфера. Реагент для определения холестерина (СЬо1ез!его1 Е-Тез! \Уако, \Уако Риге СЬетюа1 ШбизШез) смешивали с элюатом из колонки при объемной скорости потока 0,25 мл в минуту и реакцию осуществляли при температуре 40°С в реакционном змеевике (0,5 мм х 15 м) с подачей элюата. Уровни холестерина в элюате, получаемом из реакционного змеевика, детектировали при длине волны 600 нм. Рассчитывали соотношение площади ΕΌΕ-фракции, базируясь на общей площади пика холестерина, и общее количество холестерина, измеренное заранее при использовании СЬо1ез!его1 Е-Ыез! \Уако, умно- 26 024241 жали на соотношение площади ЬЭЬ-фракции для расчета количества ЬНЬ-холестерина.

Использовали шесть обыкновенных хомяков для каждой контрольной группы (группа с введенным 0,5%-ным раствором метилцеллюлозы) и групп с введенным тестируемым соединением (группы с введением 10 мг/кг массы тела и 30 мг/кг массы тела (8)-изомерного соединения). Хомяков разделяли на группы заранее на основании содержания общего холестерина в плазме.

Количества ЬНЬ-холестерина в плазме групп (ЬНЬ-С, мг/дл) представлены в табл. 3. Символы * и *** в табл. 3 означают, что имеются значительные различия в случае уровня значимости от 5% или менее (р<0,05) и уровня значимости от 0,1% или менее (р<0,001), соответственно, как определено посредством теста сравнения в случае множественной группы (множественный тест сравнения Дюннета), осуществляемого между контрольной группой и каждой из групп с введенным тестируемым соединением. Далее, степень уменьшения количества ЬНЬ-холестерина у группы с введенным тестируемым соединением, базируясь на контрольной группе, рассчитывали в соответствии со следующим уравнением 1 как степень уменьшения ЬНЬ-холестерина и указывали в процентах. Степень уменьшения ЬНЬ-холестерина (%)=[(средняя величина количества ЬНЬ-холестерина контрольной группы - средняя величина количества ЬНЬ-холестерина группы с введенным соединением)/средняя величина количества ЬНЬ-холестерина контрольной группы] х100 (уравнение 1).

Таблица 3

Соединение	Доза (мг/кг)	Среднее значение количества ЪИЬ- холестерина+стандартное отклонение (мг/дл)	Степень уменьшения 1ЮЪхолестерина (%)
Контроль	-	50±3,0	-
(3)-Изомерное соединение (III)	10	40±2,б*	20,0
30	31±2,6***	зе,о

Из результатов, представленных в табл. 3, видно, что (8)-изомерное соединение (III) обладает превосходным, снижающим уровень ЬНЬ-холестерина воздействием.

Из приведенных выше результатов теста также видно, что (8)-изомерное соединение (III) пригодно в качестве ингредиента лекарственного средства, обладающего снижающим уровень ЬОЬ в крови воздействием, и т.п.

Пример 5. Исследование влияния рацемического соединения (I) и т.п. на экспрессию мРНК НМО-СоА-редуктазы.

Тестируемое соединение добавляли к НерО2-клеткам и клетки культивировали в течение 8 ч, и затем экспрессионное количество мРНК НМО-СоА-редуктазы определяли путем количественной РСК в реальном масштабе времени.

Конкретно, НерО2-клетки инокулировали на 24-луночный планшет при плотности 2х10⁵ клеток на лунку и культивировали в течение ночи, и затем тестируемое соединение, растворенное в диметилсульфоксиде (ДМСО), или только ДМСО добавляли к культуральной среде в 1/1000-кратном количестве. Клетки культивировали при температуре 37°С в течение 8 ч в инкубаторе в присутствии СО₂ и после этого к ним добавляли 500 мкл ΚΟΟΕΝ (NIРРОN ΟΕΝΕ, Са!а1од №. 31-02501) и экстрагировали общую РНК. кДНК синтезировали из экстрагированной общей РНК путем использования набора для обратной транскрипции кДНК высокой производительности (ШдЬ Сарасйу сЭНА Ке\'ег8е Тгапзотрйп) (АррПеб Вю8У81ет8, Са!а1од №. 4368813). Экспрессионное количество мРНК человеческой НМО-СоА-редуктазы определяли путем количественной РСК в реальном масштабе времени, используя набор следующих праймеров: 5'-ООТОТТСААООАОСАТОСАААО-3' и 5'-ТОАСААОАТОТССТОСТОССА-3', специфических к человеческой НМО-СоА-редуктазе, и Ра8! 8УВК Огееп Ма81ег М1х (АррПеб Вю8У81ет8, Са!а1од №. 4385614). В качестве аппаратуры для измерения использовали систему Ра8! КеаШте РСК (быстрая полимеразная цепная реакция в реальном масштабе времени) 7900НТ.

Полученные в результате измеренные величины экспрессионного количества мРНК НМО-СоА-редуктазы корректировали между величинами, полученными для образцов с добавленным тестируемым соединением (3 образца для каждого соединения) и контрольных образцов (образец, к которому добавлен только ДМСО, 3 образца), используя экспрессионные количества мРНК β-актина в качестве показателя.

Скорректированное экспрессионное количество мРНК НМО-СоА-редуктазы в случае образцов с добавленным тестируемым соединением представляли посредством относительной величины (средняя величина±стандартное отклонение), базируясь на средних экспрессионных количествах мРНК НМО-СоА-редуктазы контрольных образцов, которые принимали за 1.

- 27 024241

Результаты представлены в табл. 4.

1: (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота (рацемическое соединение (I)). Рацемическое соединение (I) добавляли к культуральной среде до конечной концентрации 10 мкМ. 2: транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилтио)этокси]пиримидин-2ил}амино)метил]-4-(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота (соединение, описанное в патентном документе 2, пример 44).

Соединение, описанное в патентном документе 2, пример 44, добавляли к культуральной среде до конечной концентрации 10 мкМ.

Таблица 4

Тестируемое соединение	Доза (мкМ, концентрация в культуральной среде)	Экспрессионное количество мРНК НМС-СоА-редуктазы (относительная величина, базирующаяся на средней величине контроля, принимаемой за 1)
Рацемическое соединение (Ιί	10	0,37+0,02
Соединение, описанное в патентном документе 2, пример 44	10	0,25±0,03

Из результатов, представленных в табл. 4, видно, что как рацемическое соединение (I), так и соединение, описанное в патентном документе 2, пример 44, существенно снижает экспрессионное количество мРНК НМО-СоА-редуктазы по сравнению с контролем.

Промышленная применимость.

(8)-изомерное соединение (III) обладает снижающим количество РС8К9-белка воздействием и повышающим количество ЬИЬ-рецептора воздействием и оказывает превосходное, снижающее уровень ЬИЬ-холестерина в крови воздействие. Следовательно, соединение может быть использовано, например, в качестве активного ингредиента лекарственного средства для снижения уровня ЬИЬ-холестерина в крови и т.п. и, таким образом, может быть использовано в фармацевтической промышленности.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. По существу оптически чистая (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис-(трифторметил)фенил]этил}{5-[2(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль.
2. По существу оптически чистый левовращающий энантиомер транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли по п.1.
3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, имеющие оптическую чистоту 99% ее или выше.
4. Лекарственное средство для профилактики и/или лечения заболевания, выбранного из гиперЬОЬ-холестеринемии, дислипидемии, артериосклероза, атеросклероза, периферических васкулярных заболеваний, гиперхолестеринемии, наследственной гиперхолестеринемии, сердечно-сосудистых функциональных нарушений, стенокардии, ишемии, сердечной ишемии, тромбоза, инфаркта миокарда, реперфузионных нарушений, рестеноза после ангиопластики и гипертензии, включающее соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому одному из пп.1-3 в качестве активного ингредиента.
5. Подавляющий экспрессию мРНК РС8К9-белка агент, представленный соединением или его фармацевтически приемлемой солью, по любому одному из пп.1-3 в качестве активного ингредиента.
6. Снижающий количество РС8К9-белка агент, представленный соединением или его фармацевтически приемлемой солью по любому одному из пп.1-3 в качестве активного ингредиента.
7. Подавляющий продуцирование РС8К9-белка агент, представленный соединением или его фармацевтически приемлемой солью по любому одному из пп.1-3 в качестве активного ингредиента.
8. Повышающий количество ЬОЬ-рецептора агент, представленный соединением или его фармацевтически приемлемой солью по любому одному из пп.1-3 в качестве активного ингредиента.
9. Способ получения по существу оптически чистой (8)-транс-{4-[({2-[({1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этил}{5-[2-(метилсульфонил)этокси]пиримидин-2-ил}амино)метил]-4(трифторметил)фенил}(этил)амино)метил]циклогексил}уксусной кислоты или ее фармацевтически при- 28 024241 емлемой соли, включающий стадию удаления кристаллов с преобладанием рацемата из полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей общей формулой (IV):

где К представляет собой С_6-10-арильную группу или 5-10-членную гетероарильную группу и η представляет собой целое число от 1 до 6, путем предпочтительной кристаллизации из растворителя с получением по существу оптически чистого соединения, представленного следующей общей формулой (V):

и стадию удаления группы, представленной как -(СН₂)_П-К, из соединения, представленного общей формулой (V).
10. Способ по п.9, дополнительно включающий стадию введения во взаимодействие полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей общей формулой (VI):

с окислителем в растворителе с получением полухирального соединения с преобладанием (8)-изомера соединения, представленного общей формулой (IV).
11. Способ по п.10, дополнительно включающий стадию введения во взаимодействие полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей формулой (VII):

с соединением, представленным следующей общей формулой (VIII):

К-(СН2)п-ОН (VIII) в растворителе в присутствии катализатора с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного общей формулой (VI).
12. Способ по п.11, дополнительно включающий стадию гидролиза полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного следующей общей формулой (IX):

- 29 024241 где К¹ представляет собой С1_-6-алкильную группу, в растворителе в присутствии основания с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного формулой (VII).
13. Способ по п.12, дополнительно включающий стадию введения во взаимодействие соединения, представленного следующей общей формулой (X):

где X представляет собой атом галогена, и соединения, представленного следующей общей формулой (XI):

где К¹ имеет такое же значение, как вышеуказанное значение, в растворителе в присутствии основания с получением полухирального соединения с преобладанием (§)-изомера соединения, представленного общей формулой (IX).
14. Способ по п.13, дополнительно включающий стадию галогенирования (§)-1-[3,5-бис(трифторметил)фенил]этанола в присутствии галогенирующего агента с получением соединения, представленного общей формулой (X).
15. Соединение, представленное общей формулой (IV) где К представляет собой С_6-1₀-арильную группу или 5-10-членную гетероарильную группу и η представляет собой целое число от 1 до 6, или его фармацевтически приемлемая соль.
16. Соединение, представленное общей формулой (V) где К представляет собой С_6-10-арильную группу или 5-10-членную гетероарильную группу и η

- 30 024241 представляет собой целое число от 1 до 6, или его фармацевтически приемлемая соль.
17. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.15 или 16, где К означает фенильную группу и η равно 1.