DK143905B - R analogifremgangsmaade til fremstilling af fusidinsyrederivate - Google Patents

Description

(19) DANMARK

® (12) FREMLÆGGELSESSKRIFT ud 11)3905 B

DIREKTORATET FOR PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Ansøgning nr. 2857/76 (51) (nt.CI.3 C 07 J 13/00 (22) Indleveringsdag 25· Jun. 1976 C 07 J 31/00 (24) Løbedag 25- jun. 1976 ® J *1/00 (41) Aim. tilgængelig 26. dec. 1976 J A3 00 (44) Fremlagt 26. okt. 1981 (86) International ansøgning nr. - (86) International indleveringsdag (85) Videreførelsesdag - (62) Stamansøgning nr. -

(30) Prioritet 25· Jun. 1975, 26989/75* GB 7. nov. 1975* 46229/75, GB

(71) Ansøger LEO PHARMACEUTICAL PRODUCTS LTD. A/S (INVENS KEMISKE FABRIK PRO= DUKTIONSAKTIESELSKAB), Industriparken 55* 2750 Ballerup, DK.

(72) Opfinder Welf von Daehne, DK: Poul Rødbroe Rasmussen, DK.

(74) Fuldmægtig - (54) Analogifremgangstnåde til fremstilling af fusidinsyrederivater.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte derivater af fusidinsyre og farmaceutisk acceptable salte deraf, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del angivne. De nye forbindelser har den almene formel I

H„C CH

n Y

D zk 0 f 6

J [ . COOR

,4rtJ

1 AV

: h C«, 2 143905

. i hvilken bindingen mellem C-24 og C-25 er enkelt eller dobbelt, 12 H

Q og Q står for en gruppe eller for oxygen, A står for oxygen, svovl eller for en sulfinylgruppe, R"*" står for en lige eller forgrenet alkylgruppe med fra 1 til 8 carbonatomer, såsom methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert-butyl, de kendte isomerer af pentyl, hexyl, heptyl og octyl, hvilke alkyl-grupper kan være mono-, di- eller tri substitueret med halogenatomer eller med hydroxy-, alkoxy-, aralkoxy-, aryloxy-, alkanoyloxy-, aralkanoyloxy-, aroyloxy-, sulfhydryl-, alkylthio-, aralkylthio-, arylthio-, alkanoylthio-, aroylthio-, azido-, nitro-, cyano-, thio-cyano-, hydroxykarbonyl-, alkyloxykarbonyl-, aryloxykarbonyl-, amino-, alkylamino-, dialkylamino-, arylamino-, alkanoylamino- eller aroyl-aminogrupper,. hvor de alkylholdige substituenter kan indeholde fra 1 til 4 carbonatomer i alkylgruppen, og idet R^ endvidere kan betyde en alkenyl— eller alkynylgruppe med fra 2 til 6 carbonatomer, såsom en allyl-, crotyl- eller propargylgruppe, en cykloalkylgruppe med fra 3 til 7 carbonatomer i den alicykliske ring, såsom en cyklopropyl-, cyklobutyl-, cyklopentyl-, cyklohexyl- eller cykloheptylgruppe, hvilken cykloalkylgruppe eventuelt kan være mono-, di- eller trisubsti-tueret med halogenatomer, C^-C^-alkyl—, C^-C^-alkoxy— eller hydroxy-grupper, og hvor R^" yderligere kan betyde en phenyl- eller phenyl--C^-C^-alkylgruppe, eventuelt mono-, di- eller trisubstitueret med halogen, nitro-, C^-C^-alkyl-, hydroxy- eller alkoxygrupper med 1 til 4 carbonatomer, en heterocyklisk eller en heterocyklyl-C^-C^--alkylgruppe, hvor den heterocykliske del indeholder 5 eller 6 ringatomer, hvoraf op til 4 kan være nitrogen og/eller 1 kan være oxygen eller svovl, hvilke heterocykliske ringe eventuelt kan være substitueret med en methylgruppe, såsom en 2- eller 3-pyrrolyl-, 2- eller 3-ftiryl-, 2- eller 3-thienyl-, 2-, 3- eller 4-pyridyl-, 2-, 4- eller 5-pyrimidyl-, 2- eller 3-pyrazolylgruppe, en imidazolyl-gruppe, fx en l-methyl-2-imidazolylgruppe, en triazolylgruppe, fx en 5-methyl-l,2,4-triazol-3-ylgruppe, en tetrazolylgruppe, fx en l-methyl-lH-tetrazol-5-ylgruppe, en thiazolylgruppe, eller en thia-diazolylgruppe, fx en 5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-ylgruppe, R^ betyder hydrogen eller en C^-Cg-alkanoyloxy-C^-Cy alkyl-, phenyl--C^-Cg-alkanoyloxy-C^-C^-alkyl-, benzoyloxy-C^-C^-alkyl-, C^-Cg-—alkoxycarbonyloxy-C^-C^-alkyl-, C^-C^-laktonyl-eller di-C^-Cg- -alkylamino-C,-C„-alkylgruppe, 1 -> 12 Af særlig interesse er forbindelser i hvilke Q og Q begge

H

står for , eller den ene af dem for oxygen, A er som defi- HU-- neret ovenfor, og R står for en lige eller forgrenet alkylgruppe 3 143905 med fra 1 til 4 carbonatomer, som eventuelt kan være substitueret med halogenatomer, hydroxygrupper eller en azidogruppe, og bindingen C-24 - C-25 er enkelt eller dobbelt.

Af særlig interesse mellem disse grupper er sådanne, i hvilke R"*" er ethyl eller Isopropyl, eventuelt substitueret med fluor.

Som farmaceutisk acceptable, ikke-toksiske salte kan nævnes alkalimetalsalte og jordalkalimetalsalte, fx natrium-, kalium-, magnesium- eller calciumsalte, såvel som ammoniumsalte eller egnede, ikke-toksiske aminsalte, fx lavere alkylaminer, såsom triethylamin, hydroxy-lavere alkylaminer, fx 2-hydroxyethylam.i n , bi s-(2-hydroxy-ethyl)-amin eller tri-(2-hydroxyethyl)~amin, cycloalkylaminer, fx dicyclohexylamin, eller benzylaminer, fx N,N*-dibenzyl-ethylendia-amin, og dibenzylamin. Til visse formål kan også bruges sølvsalte, særlig til lokalbehandling.

Let hydrolyserbare estre er alkanoyloxyalkyl-, phenylalka-noyloxyalkyl- eller benzoyloxyalkylestre, såsom acetoxymethyl-, pivaloyloxymethyl-, benzoyloxymethyl-, acetoxyethyl-, pivaloyloxy-ethyl- eller benzoyloxyethylestre, eller alkoxycarbonyloxyalkylestre, såsom methoxycarbonyloxymethyl-, ethoxycarbonyloxymethyl-, methoxy-carbonyloxyethyl- og ethoxycarbonyloxyethylestre eller laktonylestre, såsom phthalidylestre, eller dialkylaminoalkylestre, såsom diethyl-aminoethylestre.

Det er velkendt, at selve fusidinsyren er i besiddelse af antibakterielle egenskaber, og det er ligeledes kendt, at variationer i strukturen kan forårsage et totalt tab af disse egenskaber. Det har imidlertid nu vist sig, at forbindelserne fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse både in vitro og in vivo udviser interessante antimikrobielle og farmakokinetiske egenskaber, og at forbindelserne derfor kan bruges i behandlingen af bakterielle infektioner hos mennesker og dyr. In vitro undersøgelser har for eksempel vist, at stofferne er i høj grad virksomme over for en række af bakterier, fx stafylokokker, streptokokker, corynebakterier, neisseriae, clostridiae og bakterioides stammer og over for Bacillus subtilis, hvilket fremgår af den følgende tabel: h 143905 ,Λ o •d -Η (0 Ο -Η Μ h η <! ej σ'\

© ·Η Η OOOV3CMOOO ΕΛ Ο Ό VD

-r^ {^3 ·····««· ·· · ·

HacJO 1Λ Ρ}- Η Η ΕΛ CM ΙΛ Η Ο Ο C\! CM Ο Η Ε d h Ο Η Ο η <η j 60 ---——-—-—-----——---- 3- - (0 Μ ^ d ·Η <Λ

Η Η <* 00 CM

5Ρ η η μ woovowmiammmnw-a· ο

g ·Η Ρ ΟΟΡΓΗΟΟΟΟΟΟΟΟΟ CM

Η Ο ,Ώ Ο .............

gedde οοοοοοοοοοοοο ο 1 a α -*____ -Λ ® Ρι Ο CM Ο Ο C\ ~ © oHOinvoc^oocvimoow co ho« ............. .

° ρ © Ο Hooooo-H«ncncMj-Hn η ^ CO ^ Η___ rt ι Η ώ Ο .οι > ° Η Β Ém* O^hO^OOWO Ο O O C\ h n2 ft O CUOWHCVlO-d-O-OVOVOiOiO i> o 2 oo ............

tH S h £ OOOOOOOHHOHOO O

t* P O O

<H ' ° CQ fcOH

d fc--.-.- ^ (2 j O Ή d o ® Γ. <d O fp

H m · t-Ι CO

® 2 a i> wvoocoooiAOomvoin cv d " ftiiri nHin^-cMj-^j-NoiotWHfvi ch d .2 d d οοοοοοοοοοοοο o h R p © o .............

-g CO u o οο οοοοοοοοοοο o S h--:----

'Η’πίΛω P P P P

φ CM S HPHPHPH1I I II I

O 0--H © Η © Η O H O

® £¢£0,00,0=2 = = = = « o cm d £ w £ ,y £ ,¾ £ oW1^ o^odoflorriiii “ O i! tJ O tj O Ό o - T3 'd w g CM CM CM CM CM CM CM ^

Tj ^ ^ (=,1¾ (=,

f, cncnc^co<nr\coc^c^icMCMcocM

3 aaaffiHKaKWHKfca ® - Ά οοοοοοοοοοοοο , -—' '—' — ' — — - CM CM CM CM CM w

øh ffiWKKKKOKffiKKKS

H o οοοοοοοοοοο ο ο u £------

^ 0<J C0CQ°°CQMC0COOOOO

od tn m cd ----

£ -H

'T 4J >7* »T* »τ’· »T* «— H- Hh l-H HH

•ri* J-M HH HH H-» —- HH H-I HH

-P B .. oooo O O O o o

d £ fill II I II

<l do1 aaaaooaa oaoaa CO «<,·» «* n ·> 'T* Vr' *T* HH — t-r* *—I HH H“t HH HH >£h — t—* Hh hi hn HH HH M HH HH Η» HH «-Η I—« M HH Hh HH *—· HH HH HH I*1- H> HH HH HH V—< >—t . oooooc oooooo

CV I 1 I I I I I I I I I I

^ aaaaaaoaaaaaa awKsæaT saasaa H ~

O

ft ·· I '· lo HH^OO HCMJ-cnoO-iVDO "J i £ _j_______lu: 5 143905

W

o\ O O

hw n r^- cv m m *n n cm cm vo cm o vo o Jf)

S o fo HOO^OWH CM CM H CM -3· P £M

\ u (=, ooooooo o o oooooom tyD o #*····· * * ·····**

i X O OOOOOOO O O OOOOOOO

w . O v O vJ________ kO--- ' a i •H Cd C\!

c! U

S <η <! o Ό ° O W

^•05^3**·· ·

Xj P -ri Ό CM Ο O CM MO ^ ^ O

OHO H VOHHVOHOHH Η1Λ

tn Cd Η Θ H

- m &>-3______ >P. T" o i cm

«Π ·Η 0\ O

•P^CMr^OiOOOOCM CM O CM o _

tH^5M SO O O 1Λ CM CM -3" MO vo VOIMVO-cJ-OO

ffl tn O O o O O O O O C O Η O O O H O

O · vi 0) (0 FQ i—{ i-3 H ~--‘ 1 : u-j O · °»d P< ON ^ h p|®cMONOr^''oor'0i:vi ° w oo\

jj O £ S g ^ « O H c* o « ή ,M OOOO^^O

O U ' "

Ch O 0} C-j C] r. . h n O O VO ^

a 5Hft§HO^t0iV0iMHOV0 m \D O CM V£) CM CM

*1 *K l« a··**** · · · · · * · ^

in fi^oo CM Ο O '“i ° ° w 1-1 w rH H CM O CM O

c O P >> Φ tn ·η cn aj H p--------------- φ (ti pq ^ ^ nO _ •h e ^-cvjincviOvoOOO cm o cm cm o\

ja -g Hc^oolr'ONfv|-;:i· CM H- Ma vo t> O O

o β ^ ^ o o o o O O o o o o o o o o « -r O

^ O ft ffl «, W cd rH o

'H p ;d O

05 CO CtJ i—l ____________________________ p ~~~ 33 p i3 +5 i3 +3 +3- P P P P p T3 ^

φ 'f} 2? hhpHHHHH HHHHHHHH

P m m p 0 0 0 0 o Φ ΦΟΦΦΟΟΦ •ri J’pj πηφ,α,α^^,α ,ο,α,ο,α,α,α-α^

> O’, g iJ.QflrQrQ/l'ØP

•H 9 3 OOdOOOOO o ooooooo +3 I, -ri Tj-r(®T5T3’ardT3 •d'dfl'a'd’d^^1 M -£2-5--------:---- cd

H

•h m ^ p s ® ® W CM ^ CM CM ^ O ^ •p ch ch ch ^ J5 M ^ X X O ~ CH / i M Kffiffi cm cm γ o /¾¾. o 1Λ α ω 9 a /

ni '“t oooffiffiwoolf—v cm ffi ti cm g o_z I

Æ ίϊ U W CM O O W OJ / \ K vo « ffi \ 1 •H <0 w ϊ ^ M S S f O O O O ,r> _w \

P P I CM CM CM CM W g /CCCJZ

fl S U O O CM CM CM KKffiKyjO /"^ <0 x ~ x o o o o o ^ / S o o o g p_____________o__ p <; MWWOTcncnw ω ω cncocflcncocow tn -----—-———-- •Q ajKK h = ffirdBK'KKW-æ

3 o o O OOOO OO OO OOOO

W CM III III I I I I I ' I * Λ Λ o’ aaao««3« a o a « a d a „ _ ___hd it! ίτΐ_nq Ξ S_S_E__2S_E-E-3-£-3—g--

μ μ μ ΙΠΡΡΞ in s trlKKEE^E

h ooo oooo ooooooo? O Iliolll 1 1 lllll'l aaa aao a a a a a a a ° a xxx E s s s x kxw'ke ke w.incq cm æ s n pqnoca as 7] CM CM CM O 00 CM CM ΙΛ H w

_____jxj i?C___H

6 143SOS

(η ^ ' ·Η Η W ρ*\ Ε p ft oovoooocncnNovooc^oo m

> OHHfe-fefeHOOiAHO O

5?o oooooooooooo o I X o ............

' · ® oooooooooooo o O i-l_____ so

fl I

•H Hi W

C^.inow o ό Ξ Ή · · · * ·

Sj*tch) WOVOOC'iOOC'SOOOCV] h

Λ ft -fe o CM CM O Η H O CM

2 H 0 Η Η H

tn cd -H o) . Λ - m sos______1_il_____ 0 i c<n 1Λ -ri fe <ί 1Γ\ ΡΛ cn ft £ « ΟΜΝΟΟΡΛΙΛΝΟΟΟ^ O NO o

W 3 O O »Λ NO CM fe fe- NO NO CM o CM

tn tn o ............ .

® fe ft ® OOOO OOOOOfeOO O

in Η H S___ __

H

H 0

°ld ft o C\i ΡΛ VD

fe £2 © CM . . ..

2 fj ? „ fe-NOOCMOOPNNONOOONO H

s ° -P Οΰ fe CM C-N fe fe H fe Η H

k m fe fe 0 k--------"-'-- <h o tn fe Φ

ft , · S O ON

(S H ft O fe NOOOOOrNcomCMOCMNO i> ffl 0) SO ............

3 S ^ o o feHm^fcvifeowcnfe-cnfe o O O fe >. (!) tn -η ω ft fe fe fe----- CD 5i fe E k oo

S fe !N

•fe H o ΡΛ CM CM

fe ® »TivocvioococnmootnrNcn cn h 2 · ® S oocnfe-feofeoowfeo o O Ρί fe P o ............

ft O ft G) oooooooooooo o

fe (OHO

fe fe 3 CD

cd _tn cd fe___ _ fe *Λ SO 4J+3+3+3^J4J-J4J-P-Pfefe dJ d\! fi fefefefefefefet—ifefefefe fe •'•fe oøoocooooooo •fe fefefefefefefefefefepDfe !> cm pi fefefefefefefefefefefefi •fe i ·η ooooocccoooø fe do fe__Ti Ti Ti_TiTiETEESS_ fe

-J

fe O cn

•fe E

H o

<D CM O

ft , CMS cM^nso fe rrL — cfeoEHc-nesocn 1¾

O S-i s CE ^ I! O O fe CM CM CM CM CE CM

-2. o ε^ε ιπεοεεεεεε ft osoooooooooo

fe £ '—· O CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM

s ° E'—'EEEEESSEEE

< 3 o ooooooooooo p <J oooooooooooo 1 ! X É É E~ “s s S S X X X X ø fe OOOOOOOOOOOO Pi

CfiA, llllllllllll ft o· saaaaasda««o tn ------------ ri X s S S S E S Ξ Ξ E E E fe ~~ 7j ι-r-» i-r-* ι-r-» »-—· t-—* *-r-< »μ-i m *rl H oooooooooo o 2 or I I I I I I I I I I O I p aaassaaaaaa d fe

Wi-j-4 »-*-* »—-1 l-j-l »*—i »—« Ht-t I—I H-f

►J-, »-i-l »—i HH ι-fe hi- I—I HH M-C

tn· feCMi^-ONfel^*· On ON NO CM

X U ΙΛ lf\ C\ tfi 1Λ ^ NO fe· !> o ft E I__________i 7 143905

Endvidere er de nye 3toffer kemisk mere stabile end selve fusidinsyren, fx vil l6-acetoxygruppen i fusidinsyre under visse betingelser blive hydrolyseret til en hydroxygruppe, hvorved en betydelig nedgang i aktivitet finder sted. I stofferne fremstillet ifølge opfindelsen er l6-substituenterne ikke tilbøjelige til at blive hydrolyseret. For eksempel er det påvist, at når en 2# (w/v) opløsning af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen i vandig bufferopløsning på pH 9»6 holdes ved 40°C i 30 dage, kan der selv ved tyndtlagskromatografi ikke spores nogen nedbrydningsprodukter.

I lighed med fusidinsyre absorberes de nye stoffer effektivt fra den gastro-intestinale kanal og er praktisk taget utoksisko.

Den foreliggende opfindelse angår som nævnt en analogi fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse af formel I. Ved den omhandlede fremgangsmåde omsættes en forbindelse af den generelle formel Vb: H„C CH„ 3γί 3

J:2V

COOR3 j Vb 52=ΛΑ'"Υ CHjJ CH, /&[ f I CH- i.AAJ 3 ch3 1 1 H__ 2 i hvilken Q » star for Q eller en gruppe, R er en alkanoyl-, 2

aralkanoyl- eller en aroylgruppe, Q, er som ovenfor defineret, Y

g står for chlor, brom eller jod, og står for en lige eller forgrenet alkylgruppe med fra 1 til 6 carbonatomer, en aralkyl-, alkanoyl- eller aroylmethylgruppe, en alkanoyl- eller aroyl-oxy-alkylgruppe, en alkyloxymethyl- eller cyanoraethylgruppe, med en forbindelse af formel VII: R^-A-H, i hvilken R1 er som defineret ovenfor, og A står for oxygen eller svovl, hvorved der under omlejring af konfigurationen ved C-l6 dannes en forbindelse af formel VIII: s 143906

J

l^^COOR3 jC a-r1 * VI11 iXXT^i

Q

cn3 1 2 13 i hvilken Q 1, Q , R , R og den stiplede linie mellem C-2b og C-25 er som ovenfor defineret, og A er oxygen eller svovl. Når A i formlen VII og VIII står for oxygen, kan de reagerende forbindelser af formel VII med fordel bruges som opløsningsmidler, og reaktionen kan udføres i nærværelse af et sølv- eller kviksølvsalt, fx sølvkarbonat, sølvtrifluoracetat eller merkuriacetat, eller en base, fx kaliumkarbonat, natriumbikarbonat eller natriumalkoholat, og ved stuetemperatur eller let forhøjet temperatur.

Når A i formel VII og VIII står for svovl, kan reaktionen gennemføres i et inert organisk opløsningsmiddel, fortrinsvis ethanol eller dimethylformamid, i nærværelse af en base, fx kaliumhydroxid eller natriumhydrid, og under eller ved stuetemperatur eller ved let forhøjet temperatur.

I et sidste trin kan forbindelserne af formel VIII omdannes til forbindelser af formel I ved hydrolyse, fx i vandig methanol eller ethanol og i nærværelse af en base, såsom natrium- eller kaliumhydroxid eller -karbonat.

1 2

Forbindelser af formel VIII, i hvilken Q 1 og Q står for gruppen eller oxygen, og står for en let hydrolyserbar xiO- ^ estergruppe svarende til R , er uden videre omdannelse slutprodukter fremstillet ifølge opfindelsen.

Forbindelser af formel VIII, i hvilken QX' og står for H 3 o gruppen n.\eller oxygen, og RJ står for en usubstitueret eller xl U -- substitueret benzylgruppe, en cyanomethylgruppe, en alkanoyl- methyl- eller aroylmethylgruppe, kan også omdannes til forbin- 3 delser af formel I ved en reduktion. I tilfælde af at R^ står for en benzyl- eller cyanomethylgruppe, foretrækkes en katalytisk 3 hydrogenering, hvorimod,hvis R står for en acetonyl- eller 9 143905 phenacylgruppe, en reduktion med zink i eddikesyre vil være den foretrukne.

Forbindelser af formel I, i hvilken står for oxygen og

2 H

Q står for enten oxygen eller for gruppen n^->, kan også frem- XI v stilles af tilsvarende forbindelser af formel I, i hvilken Q og 2 jj Q står for gruppen HQ^>,ved oxydationsmetoder, som er velkendte for fagmanden.

1 2

Forbindelser af formel I, i hvilke Q eller Q står for H

7^* kan også fremstilles ved reduktion af tilsvarende for-H0~ 1 2 bindeiser, i hvilke Q og Q står for oxygen.

Forbindelser af den almene formel I eller VIII, i hvilke A står for en sulfinylgruppe, kan fremstilles ved at reagere de tilsvarende forbindelser af formel I eller VIII, i hvilke A står for svovl, med et oxydationsmiddel, fx hydrogenperoxid, natrium-metaperjodat eller chromsyre. Reaktionen udføres i et inert opløsningsmiddel, fx vand, eddikesyre, ethanol, eller acetone under eller ved stuetemperatur eller ved let forhøjet temperatur.

De let hydrolyserbare estre af forbindelser af formel I kan fremstilles på kendt måde ved metoder, der er beskrevet i litteraturen.

Forbindelser, i hvilke der er en enkelt binding mellem C-24 og C-25, kan også ifølge opfindelsen fremstilles ud fra de tilsvarende umættede forbindelser ved reduktion, fx en katalytisk hydrogenering, hvor der fx bruges palladium-på-carbon som katalysator.

Mellemprodukter af formel VIII kan endvidere fremstilles efter én eller flere af de følgende metoder: a) Forbindelser af den almene formel VIII, i hvilken A står for svovl, og R·*· er en aryl- eller aromatisk heterocyklylgruppe, kan fremstilles ved at reagere en forbindelse med den almene formel IV, i hvilken hydroxylgruppen ved C-l6 er tt-orienteret, med en phosphin, fx tributylphosphin eller triphenylphosphin, og en forbindelse med den almene formel R^SSR·*".

•Reaktionen udføres i et inert organisk opløsningsmiddel, fortrinsvis dimethylformamid eller pyridin, og under eller ved stuetemperatur.

b) I en anden udførelsesform af metoden reageres en forbindelse af formel IV, i hvilken hydroxylgruppen ved C-l6 er a-orienteret,

1 H

og Q 'er forskellig fra gruppen H0^, med et reaktionsdygtigt 10 143905 derivat af en alkyl- eller arylsulfonsyre, fx et syreklorid eller et syreanhydrid, hvorved der dannes en forbindelse af den almene formel IX: J3 )0R5

-OR5 IX

.

ch3

P Q

i hvilken Q. , R-3 og den stiplede linie mellem C-24 og C-25 er som defineret ovenfor for forbindelser af formel IV, Q1' står for oxygen eller gruppen R2Q (R er en alkanoyl-, aralkanoyl- eller aroylgruppe), og R står for en alkyl- eller en arylsul-phonylgruppe, fortrinsvis en methansulphonyl- eller en p-toluen-sulphonylgruppe.

I et følgende trin reageres en forbindelse af formlen IX med en forbindelse af den almene formel VII, hvorved dannes en forbindelse af den almene formel VIII. Hvis A i formel VII og VIII står for oxygen, kan forbindelserne af formel VII bruges som opløsningsmidler, og reaktionen kan udføres ved stuetemperatur eller let forhøjet temperatur, eventuelt i nærværelse af en organisk base, fx triethylamin. Når A i formel VII og VIII står for svovl, kan reaktionen udføres på samme måde som beskrevet ovenfor for omdannelsen af stoffer af formel Vb til forbindelser af formel VIII, i hvilke A står for svovl.

c) I en anden udførelsesform kan forbindelser af den almene 1 2 3 formel VIII, i hvilken Q 1, Q , R , den stiplede linie mellem C-24 og C-25 og A er som ovenfor defineret, og R^ står for en hydroxysubstitueret alkylgruppe, omdannes til tilsvarende forbindelser, i hvilke R"^ står for en halogensubstitueret alkylgruppe ved metoder, som er beskrevet nedenfor for omdannelser af forbindelser af formel IV til forbindelser af formel Va eller Vb.

11 U3905 I et følgende trin kan de halogensubstituerede alkylderi-vater af formel VIII omsættes med en alifatisk eller aromatisk alkohol, fortrinsvis i nærværelse af et sølvsalt eller en base, med en alifatisk eller aromatisk merkaptan, fortrinsvis i nærværelse af en base, med ammoniak eller en alifatisk eller aromatisk amin, eller med salte af lavere alkansyrer eller benzoesyre, med sølv- eller natriumfluorid, med alkalimetalazider, -nitritter, -cyanider eller -thiocyanater, eller med salte af lavere thioalkansyrer eller thiobenzoesyre, hvorved dannes forbindelser af formel VIII, i hvilken H1 står for en alkylgruppe substitueret fx med et fluoratom, en alkyloxy-, aralkyloxy-, aryloxy-, alkylthio-, aralkylthio-, arylthio-, amino-, alkylamino-, dialkylamino-, azido-, nitro-, cyano-, thiocyano-, alkanoyloxy-, aralkanoyloxy-, aroyloxy-, alkanoylthio- eller aroylthiogruppe.

d) De C-2k,25 umættede forbindelser kan i visse tilfælde med fordel hydrogeneres til de tilsvarende mættede mellemprodukter af formel VIII. Forbindelserne af formel VIII kan overføres til stoffer af den almene formel I, som allerede tidligere beskrevet.

Forbindelserne af formel Vb kan fremstilles ved en fremgangsmåde, hvori et første trin en forbindelse af formel II reageres med en forbindelse af formel III, hvorved der dannes en forbindelse af den almene formel IV

H3Sif3 H3<ViH3 β Έ

I COOX I

Tf'*'" L^cooir Q VYii^oH + y_r3_>

CH3 ?Η3 Ί CHI C.hT I

s.XXJ*’ .XØX

2 i hvilke formler Q 1, Q og den stiplede linie mellem C-24 og C-25 12 143905 er som ovenfor defineret, bølgelinien ved C-l6 hydroxylylgruppen viser, at den kan være oc- eller β-orienteret, X står for hydrogen eller en katjon, såsom Na+, K+, Ag+, en ammonium- eller en trialkyl- 3 ammoniumjon, Y er chlor, brom eller jod, og R står for en lige eller forgrenet alkylgruppe med fra 1 til 6 carbonatomer, fx en methyl-, ethyl-, eller tert-butylgruppe, en substitueret eller usubstitueret aralkylgruppe, fx en benzyl-, p-nitrobenzyl- eller p-methoxybenzyl-gruppe, en alkanoylmethyl- eller aroylmethylgruppe fx en acetonyl-eller phenacylgruppe, en alkanoyloxyalkyl- eller aroyloxyalkyl-gruppe, fx en acetoxymethyl-, pivaloyloxymethyl- eller benzoyl-oxymethylgruppe, en alkyloxymethylgruppe eller en cyanomethyl-gruppe.

Reaktionen udføres i et inert organisk opløsningsmiddel, fx dimethylformamid, og ved stuetemperatur eller noget forhøjet temperatur.

Fremstillingen af forbindelserne af formel II er enten kendt fra litteraturen, eller er beskrevet i USA patent nr.

4,004,004, eller kan fremstilles efter analoge metoder.

I det næste trin omdannes forbindelserne af formel IV til forbindelser af formel Va eller Vb J3 ΗΠ CH3 OOR^ L^^^COOR·^

CHj" CHj_J

/itV

I j CH_ 3 Va Vb 12 3 i hvilke formler Q ' , Q , R , Y og den stiplede lime mellem C-2h og C-25 er som ovenfor defineret.

Omdannelsen udføres ved at lade en forbindelse af formel 13 143905

IV reagere med en polyhalogenmethan, såsom tetrachlormethan eller tetrabrommethan, eller en N-halogenamid, såsom N-chlorsuccinimid, i nærværelse af triphenylphosphin, en trialkylphosphin, en tri-arylphosphit eller hexamethylphosphortriamid, eller med et im-moniumsalt med den almene formel VI

(ch^^ch-o-r^ Y~ VI

4 i hvilken R står for en usubstitueret eller substitueret phenyl-gruppe, en phenyloxykarbonylgruppe, en alkyl-, benzoyl- eller acetylgruppe, og Y- er en chlor-, brom- eller jodjon. Reaktionen udføres i et inert opløsningsmiddel, fx ether, tetrahydrofuran, dimethylformamid, acetonitril, og under eller ved stuetemperatur. Forbindelserne af formel Va og Vb kan også fremstilles ved at reagere en forbindelse af formel IV med et phosphorhalogenid, fx phosphorpentabromid eller phosphortrichlorid, med thionyl-chlorid eller med et (halogenmethylen)-dimethyliminiumhalogenid.

Omdannelsen af forbindelserne af den almene formel IV til forbindelser af formlerne Va og Vb bevirker normalt en omlejring af konfigurationen ved C-l6 carbonatomet. Således vil en forbindelse af formel IV med en cc-orienteret hydroxyl gruppe ved C-16 blive omlejret til en forbindelse af formel Va, og en forbindelse med formel IV med en β-orienteret hydroxylgruppe ved C—16 blive omdannet til en forbindelse af formel Vb. Imidlertid kan forbindelser af formel Va omlejres til de mere stabile forbindelser af formel Vb ved reaktion med et uorganisk eller organisk halogenid, fx lithiumbromid, tetrabutylammoniumbromid, natriumbromid, kaliumjodid eller natriumjodid, i passende opløsningsmidler, fortrinsvis dimethylformamid, acetonitril eller acetone, ved stuetemperatur eller ved noget højere temperatur. Når en forbindelse af formel IV, i hvilken hydroxylgruppen ved C-16 er α-orienteret, reageres i dimethylformamid med et overskud af en forbindelse af formel VI, fx phenyl-N,N-dimethylformimidatbromid, omlejres det først dannede stof af formel Va til et stof af formel Vb under reaktionen.

Forbindelserne af formel Va og Vb er nye forbindelser.

De ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede forbindelser kan indgå i farmaceutiske præparater, som kan bruges ved behandling af infektionssygdomme i human og veterinær praksis.

Med dette in mente vil sådanne præparater som en aktiv kom- 143905 ponent indeholde mindst én forbindelse af formel I, eller et salt deraf med en utoksisk, farmaceutisk acceptabel base, eller en let hydrolyserbar ester af disse forbindelser, sammen med faste eller flydende farmaceutiske bærere og/eller hjælpestoffer.

I sådanne kompositioner kan forholdet mellem terapeutisk aktivt materiale og bærer variere mellem 1 og 95 vægt %.

Præparaterne kan oparbejdes til forskellige farmaceutiske indgivelsesformer, såsom granulater, tabletter, piller, drageer, suppositorier, kapsler, tabletter med forsinket afgivelse, suspensioner, injektionspræparater, og for så vidt angår blandinger, kan de fyldes i flasker eller tuber eller lignende beholdere.

Den farmaceutiske præparation kan endvidere indeholde andre farmaceutisk aktive komponenter, som med fordel kan administreres sammen med forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen til behandling af infektionssygdomme, såsom andre egnede antibiotica, i særdeleshed sådanne antibiotica, som forøger aktiviteten og/eller forhindrer udviklingen af resistensdannelse. Sådanne antibiotica omfatter penicilliner, cephalosporiner, tetracykliner, rifamyciner, erythromycin, lincomycin og clindamycin. Blandt andre forbindelser, som med fordel kan kombineres med forbindelserne ifølge opfindelsen, særlig til lokalbehandling, kan nævnes corticosteroider, såsom hydrocortison, triamcinolon eller fluocinolon.

Når stofferne administreres i form af salte med farmaceutisk acceptable utoksiske baser, er de foretrukne salte fx de letopløselige natriumsalte eller diethanolaminsalte, men andre farmaceutisk acceptable utoksiske salte kan bruges, fx salte, der er kun lidt opløselige i vand, i den hensigt at opnå en speciel og egnet absorptionsrate.

I det følgende er angivet en række eksempler på præparation af mellemprodukter.

Preparation 1

Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre A. Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre

Natriumsaltet af 3-°-a-cetyl-l6-epideacetylfusidinsyre (5*38 g) og fenacylbromid (2,2 g) opløstes i dimethylformamid (4o ml).

Efter henstand i 16 timer ved stuetemperatur blev opløsningen fortyndet med 150 ml ether, vasket med vand (4 x 50 ml), tørret, og inddampet i vakuum, hvorved der isoleredes 6,2 g af phenacyl-esteren af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre som en farveløs skumagtig masse.

U3906 15 B, Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deaeetoxy-l6g-broinfusidineyre En suspension af dimethylformamid (l,l ml) og phenylchlor-format (5,04 ml) i 80 ml petroleumsether (Kp. 50°c) blev omrort kraftigt ved stuetemperatur. I løbet af en time dannedes kar-bophenoxy-N,N-dimethylformimidatchlorid som farveløse krystaller. Dette produkt afgav karbondioxid ved yderligere omrøring i 16 timer, hvorved dannedes krystallinsk phenyl-N,N-dimethylformimidatchlorid. Dette blev derefter omdannet til N,N-dimethylformamid-diphenylacetal ved tilsætning af en opløsning af phenol (3»76 g) og triethylamin (5»56 ml) i ether (10 ml) til reaktionsblandingen under omrøring. Efter yderligere omrøring i en time frafiltreredes det som biprodukt dannede triethylammoniumchlorid og vaskedes med 50 ml petroleumsether. Ved tilsætning af acetylbromid (2,0 ml) under omrøring til det samlede filtrat og vaskevæske dannedes phenyl-N,N-dimethylformimidatbromid som farveløse krystaller. Disse samledes og vaskedes med petroleumsether for at fjerne spor af phenylacetat.

Det således opnåede immoniumbromid (6 g) var meget hygroskopisk, og blev omgående sat til en opløsning af phenacyl-esteren af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre (6,2 g) i dimethylformamid (ko ml). Efter henstand i ^8 timer ved stuetemperatur blev denne opløsning fortyndet med ether (100 ml), vasket med 0,1 N natriumhydroxid (100 ml) og vand (3 x 50 ml)» torrot og inddampet i vakuum. Tilsætning af methanol (50 ml) fik remanensen til at krystallisere. Krystallerne frafiltreredes, blev vasket med methanol og tørret, hvorved der isoleredes 5»2 g phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre med et smeltepunkt på lhl-lh2°C.

Preparation 2-8

Estre af 3-0-acetyl-l6-deacetoxv-l6a-bromfusidinayre A. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 1 A, men erstatte det anvendte phenacylbromid med esterificeringsmidlet vist i tabel I, opnåedes estrene af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyro vist i tabel I.

B. Ved at erstatte phenacylesteren af 3-0-acetyl-l6-epideacetyl-fusidinsyre med estrene af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre vist i tabel I og i øvrigt følge fremgangsmåden beskrevet i pre- 16 143905 paration 1 B, opnåedes estrene af 3-0—acetyl—l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre vist i table I.

Tabel I: (næste side) Η3γΗ3 k / COOR2 ''r1

c hu ch.T T

JjL % i I

jTTTV

CH COO' J 1 CH3

Resulterende forbindelser Ϊ 2

Preparation Esterificeringsmiddel R R smeltepunkt _____(°C) 2 A chlormethylacetal OH CH^COCH^ amorf 2 B Br CHgOCOCH^ 102-105 3 A chlormethylpivalat OH CHgOCOCiCH^)^ amorf 3 B Br CH 0C0C(CH ) amorf

£ j J

4 A chlormethylbenzoat OH CH20C0CgH^ amorf 4 B Br CH20C0C6H5 93-9^ 5 A chloracetonitril OH CH2CN amorf 5 B Br CH2CN 122-123 6 A benzylbromid OH CHgCgH,, 108-109 6 B Br CH^gH 128-129 7 A p-methylbenzylbromid OH CH^gH^CH^ amorf 7 B Br CHgCgH^CH^ amorf 8 A chlormethylmethylether OH CHgOCH^ amorf 8 B Br CHo0CH„ amorf

<£ J

Preparation 9 p-Nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre

Natriumsaltet af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre (21,5 g) og p-nitrobenzylbromid (9»5 g) opløstes i dimethylformamid (200 ml). Opløsningen henstilledes ved stuetemperatur i 16 timer, hvorunder der dannedes p-nitrobenzylesteren af 3-0-acetyl-l6-epideacetyl- 17 1Λ3905 fusidinsyre. Derefter tilsattes phenyl-N,N-dimethylformimidatbromid (36 g; se preparation IB), og den dannede rødbrune opløsning herisattes ved stuetemperatur i 48 timer. Methanol (700 ml) og vand ^80 ml) tilsattes under omrøring, hvorved et krystallinsk produkt fældede ud. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med methanol: vand 3:1, og tørredes. Der isoleredes 26,1 g p-nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6oc-*bromfusidinsyre med smeltepunkt 151-157°C.

Preparation 10-12

Bstre af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6g-bromfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i preparation 9, men erstatte p-nitrobenzylbromid med et af de esterificeringsmidler, der er angivet i tabel II, opnåedes de estre af 3—0—acetyl—l6—deacetoxy— l6oc-bromfusidinsyre, der er vist i tabel II.

Tabel II: h3c ch3

k/ C00R

CH COO

J 1 ch3

Resulterende forbindelser smeltepunkt

Preparation Esterificeringsmiddel R (°C) 10 p-benzylphenacylbromid d^COC^H^CH^C^H^ 127-129 11 p-methoxyphenacylbromid CHoC0CgH^0CH3 114-116 12 bromacetone CHgCOCI^ 80-81 18 U3905

Preparation 13

Benzylester af 3~0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre A. Benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetylfusidinsyre

Til natriumsaltet af 16-deacetylfusidinsyre (84,7 s) 1 dimethylformamid (200 ral) blev sat benzylbromid (25 ml). Efter omrøring i 5 timer ved stuetemperatur afkøledes den dannede opløsning til 0°C, og der tilsattes pyridin (200 ml) og eddikesyre-anhydrid (170 ml). Efter henstand ved stuetemperatur i 16 timer blev blandingen igen afkølet til 0°C, og 50 ml vand blev tilsat under omrøring i et sådant tempo, at temperaturen forblev under 15°C (ca. 1 time). Så tilsattes methanol (800 ml) og vand (400 ml) for at fuldende fældningen af det ønskede produkt, som efter omrøring i 1 time ved 10°C blev frafiltreret, vasket med iskold methanol (3 x 20 ml) og tørret, hvorved opnåedes 68 g benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetylfusidinsyre som farveløse krystaller med smeltepunkt 154-158°C.

B. Benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6cx-bromfusidinsvre Den ovenfor fremstillede benzylester (68 g), natriumbromid (46,2 g), pyridin (22 ml) og dimethylformamid (400 ml) blandedes og omrørtes i 30 minutter ved stuetemperatur og afkøledes så til 0°C. Der tilsattes phenylchlorformat (56,5 ml) over en periode på 45 minutter, og blandingen blev i 18 timer omrørt ved stuetemperatur. Herefter fældedes reaktionsproduktet ud ved tilsætning af methanol (400 ml) og vand (300 ml). De farveløse krystaller frafiltreredes og vaskedes med methanol:vand (2 x 60 ml, for-ho.ld 2:l) og derefter med petroleumsether (3 x 30 ml). Efter tørring opnåedes 62,9 S benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a—bromfusidinsyre med smeltepunkt 124-126°C.

Preparation 14-15

Estre af 3-0-acetyl-l6-deacetoxv-l6a-bromfusidinsyre A. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 13 A, men erstatte benzylbromid med phenacylbromid eller p-nitrobenzylbromid opnåedes estrene af 3-0-acetyl-l6-deacetylfusidinsyre vist i tabel III.

B. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 13 B, men erstatte benzylesteren med phenacylesteren eller p—nitrobenzylesteren i tabel III, opnåedes estrene l4 B og 15 B vist i tabel III.

Tabel III: 19 143906 H_C CH_ r.

\>^COOR

CH„COO ''' 3 i CH3

Resulterende forbindelser

Preparation \ 2 Smeltepunkt (°C)

R R

l4 A β-ΟΗ CH2COC6H5 149-151 14 B α-Br CH2COC6H5 l4l-l42 15 A β-ΟΗ 0Η206Η4Ν02-(ρ) 141-143 15 B a-Br CH^gH^NO^(p) 157-159

Preparation 16

Pivaloyloxymethylester af 3-Q-acetyl-l6-deacetoxy-l6(X-bromfusidin-syre A. Pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6[3-bromfusidinsyre

Pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidin-syre (17,4 g) opløstes i tør ether (200 ml)} triphenylphospin (16 g) og tetrabrommethan (20 g) tilsattes. Efter omrøring i 16 timer ved stuetemperatur filtreredes reaktionsblandingen for at fjerne triphenylphosphinoxid, som dannedes som biprodukt.

Filtratet inddampedes i vakuum, og remanensen rensedes ved kro-roatografering på silicagel (cyklohexansethylacetat 8:2), hvorved der opnåedes 10,6 g pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6β-bromfusidinsyre i form af farveløse krystaller udkrystalliseret af ether-petroleumsether med et smeltepunkt 120-122°C. Omkrystallisering af ether-petroleumsether gav et analytisk rent produkt med smeltepunkt 120-122°C.

20 143905 B. Pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy—Ι6α-bromfusidinsyre

Den ovenfor beskrevne pivaloyloxymethylester (5 g) blev epimeriseret til l6oc-forbindelsen ved at lade den henstå med tetrabutylammoniumbromid (5 g) i acetonitril (60 ral) i tre dage ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen inddampedes i vakuum, og til remanensen blev sat ether, hvorved tetrabutylammoniumbromid udkrystalliserede. Krystallerne filtreredes fra, og filtratet vaskedes med vand (2 x 50 ml), tørredes og inddampedes i vakuum, hvorved opnåedes 4,87 g pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre som en farveløs gummi.

Preparation 17

Acetoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a:-bromfusidinsyre A. Acetoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l68-brom-fusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i preparation l6 A, men erstatte pivaloyloxymethylesteren af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre med den tilsvarende acetoxymethylester, fremstilledes acetoxy-methylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l63-bromfusidinsyre med smeltepunkt 119-120°C.

B. Acetoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-brom-fusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i preparation 16 B, men erstatte pivaloyloxymethylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-brom-fusidinsyre med den tilsvarende acetoxymethylester, fremstilledes acetoxymethylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidin-syre med smeltepunkt 102-105°C.

Preparation 18

Phenacvlester af l-0-acetvl-l6-deacetoxy-l6a-brom-24.25-άϊΙινάΓθ-fusidinsyre A. Phenacylester af l6-deacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre

Til en opløsning af natriumsaltet af l6-deacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre (4,99 g) i dimethylformamid (25 ml) blev sat phenacylbromid (l,99 g), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 4 timer. Efter fortynding med ether (lOO ml) 21 14890$ blev blandingen vasket med vand (4 x 25 ml). Den organiske fase blev skilt fra, tørret og koncentreret til ca. 20 ml, hvorved et krystallinsk produkt udfældede. Efter henstand i køleskab i 2 timer frafiltreredes krystallerne, vaskedes med ether og tørredes, hvorved der opnåedes 4,52 g af den ønskede forbindelse med smeltepunkt 92-94°C (sonderdeling).

B. Phenacylester af 3-0—acetyl—l6-deacetyl-24,25—dihydrofusIdin-syre

Til en opløsning af phenacylester af l6-deacetyl~24,25-dihydrofusidinsyre (2,38 g) i pyridin (8 ml) blev under omror ring sat eddikesyreanhydrid (4 ral), og blandingen henstilledes ved stuetemperatur i l6 timer. Efter fortynding af reaktions-blandingen med diisopropylether (60 ml) under omrøring udkrystalliserede en farveløs forbindelse, som efter vaskning med diisopropylether og tørring,gav 1,92 g af den ønskede forbindelse med smeltepunkt 133-135°C.

C. Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6(X-broni-24,25-dihydrofusidinsyre

Phenylchlorformat (1,26 ml) blev drnbevis og ved 0°C sat til en omrørt opløsning af phenacylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre (1,59 g), natriumbromid (l,03 g) og pyridin (0,52 ml) i dimethylformamid (15 ml). Efter at tilsætningen var fuldført (^15 min.), blev reaktionsblandingen omrørt i 2 timer ved 0°C og derefter ved stuetemperatur i 16 timer. Dråbevis tilsætning af methanol s vand ljl (15 ml) under omrøring til blandingen gav udfældning af et krystallinsk produkt, som frafiltreredes, vaskedes med methanol og tørredes. Derved opnåedes 1,22 g af det ønskede produkt, som efter omkrystallisation af methylenchlorid-methanol gav et analytisk rent produkt med smeltepunkt 130-132°C.

Preparation 19-20

Estre af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6ff-brom-24,25-dihydrofusidinsyr9 A. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 18 A, men erstatte phenacylbromid med benzylbromid eller p-nitrobenzylbromid, opnåedes estre af l6-deacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre vist i tabel IV nedenfor.

B. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 18 B, men er- 22 143905 statte phenacylesteren af l6-deacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre med tilsvarende estre vist i tabel XV, fremstilledes estre af 3—O—acetylforbindelserne vist i tabel XV.

C. Ved at føXge fremgangsmåden i preparation 18 C, men erstatte phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetyl-24, 25-dihydro-fusidinsyre med tilsvarende estre vist i tabel IV, fremstilledes estre af 3-0-acetyl-l6-d.eacetox.y-l6a-brom— 24, 25-dihydro-fusidinsyre vist i tabel IV.

Tabel IV; Η3<^ν/Η3 I^JSOOR3 Η0'άλ^η2

chJ Ch3_J

.v-Cu1^ k

Resulterende forbindelser 12 3 o

Preparation R R R-5 smeltepunkt ( C) 19 A Η β-ΟΗ CH2C6H5 amorf 19 B CH-CO β-ΟΗ CH-C^H- 162-163 J ^05 19 C CH„C0 α-Br CH^H- 104-105 j o 5 20 A Η β-ΟΗ CHgCgH^NOg-p amorf 20 B CH^CO β-ΟΗ 0Η206Η^Ν02-ρ amorf 20 C CH^CO ‘ α-Br ΟΗ^Η^ΝΟ,,-ρ l47-l49 ί

Preparation 21

Benzoyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6q-bromfusidinsyre A. ‘ Benzoyloxymethylester af l6-epideacetylfusidinsyre 16-Epideacetylfusidinsyre (35»5 S) opløstes i methanol (150 ml) og omdannedes til natriumsaltet ved titrering med 5 N natriumhydroxid og phenolphthalein som indikator. Efter ind-dampning til tørhed i vakuum blev det amorfe natriumsalt opløst i dimethylformamid (l50 ml), der tilsattes chlormethylbenzoat 2 j (l4,08 g), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur 1 16 timer. Vand (200 ml) tilsattes, og blandingen ekstraherede® med ether (kOO ml). Den organiske fase blev skilt fra, vasket med vand (k x 100 ml), tørret og inddampet til tørhed i vakuum, hvorved der opnåedes hk,G g benzoyloxymethylester af l6-epideV acetylfusidinsyre som et amorft produkt.

B. Benzoyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6g-bromfusidinsyre -

Den ovenfor fremstillede benzoyloxymethylester opløstes i dime thylf ormamid (300 ml); der til sattes phenyl-N, N-dimethyl-r formimidatbromid (67 g) under omrøring, og den rødbrune opløsning blev henstillet ved 5°C i 6-7 dage. Til blandingen sattes derefter methanol (150 ml) og under kraftig omrøring vand (ISO ml) fra en skilletragt, hvorved et krystallinsk produkt udfældede. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med methanol:vand 1:1, pg tørredes, hvorved der opnåedes 27,1 g benzoyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre med et smeltepunkt 131-135°C. To omkrystallisationer af ether-methanol hævede smeltepunktet til l40-l42°C.

Preparation 2Z-2k

Estre af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre A. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 21 A, men erstatte chlormethylbenzoat med benzylbromid, chlormethylpivalat eller chlormethylacetat, fremstilledes estrene af 16-epideacetylfusidin-syre vist i tabel V.

B. Ved at følge fremgangsmåden i preparation 21 B, men erstatte benzoyloxymethylesteren af 16-epideacetylfusidinsyre med de andre tilsvarende estre vist i tabel V, opnåedes estrene af 3-0-formylr l6-deacetoxy-l6ct-bromfusidinsyre vist i tabel V.

TT p ρττ

Tabel V: (næste side) 3 L^-COOR^

«4 <rHJ_J

, Æfv V ·. 143905 24

Resulterende forbindelser

Preparation pi p2 p3 smeltepunkt (°C) 22 A H OH CH2C6H5 95-98 22 B HCO Br CH^CgH^ 125-127 23 A H OH CH OCOC(CH ) amorf

J ^ J J

23 B 1 HCO Br CHgOCOCiCH^ amorf 2k A H OH CH^COCH^ amorf 2k B HCO Br CH2OCOCH3 123-125

Preparation 25

Benzylester · af 3-0-f‘ormyl-l6-deacetoxy-l6g-bromfusidinsyre A. Benzylester af 16-deacetylfusidinsyre

Til en opløsning af natriumsaltet af 16-deacetylfusidinsyre (^,97 g) i dimethylformamid (25 ml) blev sat benzylbromid (l,5 ml), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i k timer. Efter tilsætning af vand (lOO ml) blev blandingen ekstraheret med ether (2 x 50 ml) og de kombinerede organiske ekstrakter blev vasket med vand (4 x 20 ml), tørret og inddampet i vakuum. Remanensen opløstes i ether (50 ml), og ved tilsætning af petroleumsether (50 ml) under omrøring udfældede et krystallinsk produkt. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med ether:petroleumsether 1:2 og tørredes, hvorved der opnåedes 4,92 g af det ønskede produkt med smeltepunkt 117-119°C.

B. Benzylester af 3-0-formvl-l6-deacetylfusidinsyre

Til en opløsning af benzylester af 16-deacetylfusidinsyre (4,52 g) i pyridin (8 ml) blev under omrøring dråbevis ved 0°C sat 4 ml af det blandede anhydrid af eddikesyre og myresyre. Blandingen blev holdt ved den lave temperatur i 15 minutter. Under omrøring fortyndedes reaktionsblandingen med diisopropylether (4θ ml), hvorved et krystallinsk produkt fældede ud. Efter to timer i køleskab samledes krystallerne, vaskedes med diisopropylether og tørredes, hvorved der opnåedes 4,04 g af det ønskede produkt med smeltepunkt l43-l45°C. Omkrystallisation af ether-diisopropylether gav et analytisk rent produkt med smeltepunkt 145-147°C.

25 143905 C, Benzylester af 3-O-f ormyl-l6-deacetoxy-l6(X-bromfusidlnsyrc

Ved at følge fremgangsmåden i preparation 13 B, mon erstatte benzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetylfusidinsyre med benzylester af 3-0-formyl-l6-deacetylfusidinsyre, fremstilledes benzylester af 3~0~formyl-l6-deacetoxy-l6ct-bromfusidinsyre som farvelose krystaller med smeltepunkt 125-127°C.

Preparation 26

Pivaloyloxvmethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy~l6g-brom-fusidinsyre A. Pivaloyloxymethylester af 16-deacetylfusidinsyre

Til en. opløsning af det amorfe sølvsalt af 16-deacotyl-fusidinsyre (5»8 g) i dimethylformamid (50 ml) sattes chlorine thylpivalat (1,48 ml), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 48 timer. Uopløseligt materiale fjernedes med filter-aid, og efter vask af bundfaldet med ether (2 x 25 ml) blev ether og filtrat samlet og fortyndet med ether (lOO ml), og blandingen blev vasket med vand (4 x 50 ml). Don organiske fase blev tørret og inddampet i vakuum og gav rå-esteren som et gulligt skum. Den rensedes ved kromatografering på silicagel (opløsningsmiddel: cyklohexan:ethylacetat 3!7)* hvorefter den ønskede ester blev isoleret som et amorft produkt.

NMR spektret (CDCl^) viste signaler ved 0= 0,90 (d, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 1,22 (s, 9H; CfCH^), 1,38 (s, 3H), 1,62 og 1,68 (2 bs, 6H), 2,99 (m, IH; CH-13), 3,77 (m, IH; CH-3), 4,33 (m, IH; CH-ll), 5,00 (m, IH; CH-16), 5,12 (m, IH; CH-24), °g 5,15 og 5,42 (2 d, J=7, 2H; OCH^O) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

B. Pivaloyloxymethylester af 3-0-^ηην1-ΐ6-ά6ηοθΐν1^5ΐάϊη3νηο Ved at følge fremgangsmåden i preparation 25 B, men erstatte benzylesteren af 16-deacetylfusidinsyre med den tilsvarende pivaloyloxymethylester, opnåedes pivaloyloxymethylester af 3-0-formyl-16-deacetylfusidinsyre.

C. Pivaloyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i preparation 13 B, men erstatte benzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetylfusidinsyre med pivaloyl-oxymethylesteren af 3-0-formyl-l6-deacetylfusidinsyre 26 143905 opnåedes pivaloyloxymethylester af 3-O-formyl—l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre som et farveløst skum.

NMR-spektret viste signaler vedcf = 0,78 (s, 3H), 0,87 (d, J=7, 3H), 1,00 (s, 3H); 1,23 (s, 9H, c(CH3)3), 1,47 (s, 3H), l,6l og 1,68 (2 bs, 6H), 3,45 (m, IH; CH-13), 4,35 (m, IH; CH-ll), 5,08 (m, IH; CH-3), 5,12 (m, IH, CH-24), 5,62 (bt, IH, CH-16), 5,82 og 5,92 (2 d, J=6, 2H; 0CH20), og 8,15 (bs, IH, HCO) ppm. Tetra-methylsilan blev brugt som intern reference.

Preparation 27

Acetoxymethylester af 3-0—formyl-l6-deacetoxy-l6(X—brom-24,25-dihydrofusidinsyre A. Acetoxymethylester af l6-epideacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre Til en opløsning af kaliumsaltet af l6-epideacetyl-24,25- dihydrofusidinsyre (20,6 g) i dimethylformamid (l60 ml) blev sat chlormethylacetat (4,0 ml), og blandingen omrørtes ved stuetemperatur i 18 timer. Efter fortynding med ether (500 ml) blev blandingen vasket med vand (2 x 150 ml), og den organiske fase blev tørret og inddampet i vakuum, hvorved det ønskede produkt fremkom som et farveløst skum.

B. Acetoxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6a-brom-24.25-dihydrofusidinsyre

Til en opløsning af den ovenfor fremstillede ester og natriumbromid (20,6 g) i dimethylformamid (200 ml) blev under omrøring og ved 0°C dråbevis tilsat phenylchlorformat (25,2 ml).

Efter at tilsætningen var afsluttet (ca. 45 min.), blev blandingen omrørt ved 0°C i 3-4 timer og derefter ved stuetemperatur i yderligere 10-12 timer. Udfældet natriumchlorid blev frafiltreret og vasket med dimethylformamid (2 x 25 ml). Til det samlede filtrat og vaskevæske blev sat methanol:vand 1:1 (300 ml) under omrøring, hvorved et krystallinsk produkt fældede ud. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med methanol:vand 1:1, tørredes, og blev sluttelig omkrystalliseret af ether-diisopropylether, hvorved der opnåedes 15,35 S af det ønskede produkt med smeltepunkt 126-127°C.

Preparation 28-32

Estre af l6-deacetoxy-l6Q[:-bromfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i preparation l6, men erstatte 27 143906 pivaloyloxymethylesteren af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidin-syre med benzyl-, phenacyl-, pivaloyloxymethyl-, acetoxymethyl-eller benzoyloxymethylesteren af 16-epldeacetylfusldinsyre opnåedes estrene af l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre vist i tabel VI.

H C CH

Tabel VI;

X^-COOR

hox Ær c«3

Resulterende forbindelser

Preparation R smeltepunkt (°C) 28 CH„C/-H_. amorf 2 o 5 29 CH^COC^H- amorf 2 o 5 30 CH2OCOC(CH3)3 amorf 31 CH2OCOCH3 105-106 32 CH-OCOC^H _ amorf 2 6 5

Preparation 33

Phenacylester af 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidln-syre

Til en opløsning af phenacylester af 3-0—acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre (6,98 g) i acetone (70 ml) blev sat Jones reagens (3,0 ml), og blandingen blev omrørt i 30 minutter ved stuetemperatur. Efter fortynding med ether (lOO ml) og tilsætning af vand (70 ml) blev blandingen ydermere omrørt i 10 minutter.

Det organiske lag blev skilt fra, og det vandige lag blev igen ekstraheret med ether (100 ml). De samlede organiske ekstrakter vaskedes med vand til neutral reaktion, tørredes og koncentreredes til ca. 50 ml, hvorved der udfældedes et farveløst krystallinsk stof. Efter henstand i køleskab i 1 time blev krystallerne frafiltreret, vasket med iskold ether og tørret, hvorved der opnåedes 5,37 g phenacylester af 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deaootoxy-l6a-bromfusidinsyre med smeltepunkt 120-121°C, Ved koncentrering 28 143905 af moderluden opnåedes yderligere 0,95 g af det ønskede stof med smeltepunkt ll4-ll6°C. Omkrystallisation af methylen-chlorid-diisopropylether gav et analytisk rent stof med smeltepunkt 120-121°C.

Preparation

Benzylester af 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre Ved at følge fremgangsmåden i preparation 33, men erstatte phenacylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre med den tilsvarende benzylester, opnåedes benzylesteren af 3-0-acetyl-H-keto-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre som et farveløst skum. NMR-spektret (CDCl^) viste signaler ved £= 1,00 (s, 3H), 1,05(s, 3^), 1,02 (d, 3H), 1,27 (s, 3H), 1,62 og 1,68 (2 bs, 6h), 2,06 (s, 3H; CH^CO), 3,30 (m, IH; CH-13), 4-,95 (m, IH, CH-3), 5,05 (m, IH, CH-24), 5,22 (s, 2H; CHgCgH^, 5,60 (bt, IH; CH-16), og 7,35 (s, 5H; arom. CH) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Preparation 35

Acetoxymethylester af 3-0-formyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l6a-brom-24,25-dihydrofusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i preparation 33, men erstatte phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6oc-bromfusidinsyre med acetoxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6oc-brom-24,25-dibydrofusidinsyre, opnåedes acetoxymethylester af 3-0-formyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l6a-brom-24,25-dihydrofusidinsyre som et farveløst skum.

NMR-spektret (CDCl^) viste signaler ved<f = 0,87 (d, J=5,5 6h), 1,02 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 2,12 (s, 3H; ch3co), 3,35 (m, IH; CH-13), 5,10 (m, IH; CH-3), 5,68 (bt, IH; CH-16), 5,81 og 5,90 (2 d, J=5,5, 2Η; 0CH20), og 8,15 (bs, 1Η; HC0) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Preparation 36

Acetoxymethylester af 3-keto-l6-deacetoxy-l6(X-bromfusidinsyre A. Acetoxymethylester af 3-keto-l6-epideacetylfusidinsyre

Til en opløsning af kaliumsaltet af 3-keto-l6-epideacetyl-fusidinsyre (3,06 g) i dimethylformamid (30 ml) blev sat chlorine thylacetat (o,6 ml), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 18 timer. Reaktionsblandingen fortyndedes med ether (lOO ml) og vaskedes med vand (4 x 30 ml). Den organiske fase blev skilt 29 fra, tørret og inddampet i vakuum, hvorved der opnåedes 3»2 g af det ønskede produkt i form af et farveløst skum.

1Λ 3 9 ο ε B. Acetoxymethylester af 3-keto-l6-deacetoxy-l6g-bromfusidinsyre Ved at følge fremgangsmåden i preparation 27 B, men erstatte acetoxymethylesteren af l6-epideacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre med den ovenfor fremstillede acetoxymethylester af 3-keto-lé-epi-deacetylfusidinsyre, opnåedes acetoxymethylester af 3-keto-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre med smeltepunkt l44-l45°C.

Preparation 37

Methoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6g-chlorfusidin-syre

Methoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre (1,4 g), triphenylphosphin (2,6 g) og N-chlorsuccinimid (l,3 g) opløstes i tør ether. Efter en times henstand ved 35°C blev udfældet triphenylphosphinoxid frafiltreret, og filtratet blev inddampet i vakuum. Remanensen blev renset ved kromatografering på silica-gel (cyklohexan: ethylacetat 70) og gav 1,14 g methoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6P-chlorfusidinsyre. Efter omkrystallisation af cyklohexan opnåedes det rene produkt med smeltepunkt l49-151°C.

Preparation 38

Benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l60-chlorfusidinsyre

Carbophenoxy-N,N-dimethylformimidatchlorid fremstilledes ved at sætte phenylchlorformat (θ,3 ml) til N,N-dimethylformamid (l5 ml). Til denne opløsning sattes benzylester af 3-0-acetyl-l6-epideaeetylfusidinsyre (500 mg). Efter henstand i 16 timer ved stuetemperatur blev reaktionsblandingen fortyndet med ether (lOO ml), vasket med 2 N natriumhydroxid (25 ml) og vand (3 x 25 ml), tørret og inddampet i vakuum. Derved opnåedes 480 mg benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6P-chlorfusidinsyre, som udkrystalliserede af ether-petroleumsether med smeltepunkt l63-l65°C. Omkrystallisation af ethylacetat-petroleumsether gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt l65-l66°C.

Preparation 39

Benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6q-chlorfusidinsyre 30 143905

Til en iskold opløsning af benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetylfusidinsyre (1,36 g) i dimethylformamid (10 ml) og pyridin (0,44 ml) blev under omrøring sat phenylchlorformat (l,13 ml).i løbet af 30 minutter. Efter omrøring ved stuetemperatur i l6 timer fortyndedes den resulterende opløsning med éther (lOO ml), vaskedes med 2 N natriumhydroxid (25 ml) og vand (3 X 50 ml), tørredes og inddampedes i vakuum. Remanensen opløstes i ether (10 ml), og petroleumsether tilsattes for at fælde reaktionsproduktet ud som farveløse krystaller.

Disse blev frafiltreret, vasket med petroleumsether og tørret, og benzylester af 3“O-acetyl-l6-deacetoxy-l60C-chlorfusidinsyre med smeltepunkt 115-117°C isoleredes. Omkrystallisation af ethylacetat-petroleumsether hævede smeltepunktet til 120-122°C.

Opfindelsen vil blive yderligere beskrevet i de følgende eksempler.

Eksempel 1 l6-Deacetoxy-l6B-isopropylthiofusidinsyre A. p-Nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6g-iso- propylthiof usidinsyre p-Nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-brom-fusidinsyre (28,6 g) blev sat til en opløsning af kaliumhydroxid (lO g, 85^ rent) og isopropylmerkaptan (30 ml) i ethanol (lOOO ml), og suspensionen blev omrørt i 4 døgn. Derefter tilsattes 500 ml vand for at fuldende fældningen af det ønskede produkt. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med vand:ethanol (l:2) og tørredes. Der isoleredes 21,5 S rå p-nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-isopropylthiofusidinsyre med smeltepunkt 157-l6l°C.

B. l6-Peacetoxy-l68-isopropylthiofusidinsyre

En suspension af den ovenfor fremstillede p-nitrobenzylester i en blanding af ethanol (800 ml) og 2 N vandig natriumhydroxid (200 ml) blev opvarmet til 60°C i tre timer. Den resulterende mørke opløsning blev gjort sur med 4 N saltsyre (125 ml) og blev i 15 minutter behandlet med 5 S kul, medens den endnu var varm.

Efter filtrering blev der tilsat 500 ml vand, og efter afkøling til stuetemperatur blev det udfældede krystallinske produkt frafiltreret, vasket med vand og tørret, hvorved der isoleredes 14,1 g l6-deacetoxy-l6β-isopropylthiofusidinsyre med smeltepunkt

31 U390B

223—229°C· Omkryatallisation af 2-butanon gav et analytisk rent produkt med smeltepunkt 229-231°C.

Eksempel 2-10 l6p-Thioethere of l6-deacetoxyfusidinsyre A. p-Nitrobenzylester af ΐββ-thioethere af 3-0-acetyl-l6-deace toxyfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden 1 eksempel 1 A, men erstatte isopropylmerkaptan med merkaptanerne vist i tabel VII, fremstilledes en række p-nitrobenzylestre af ΐ6β-tbioethere af 3-0-acetyl-l6-deacetoxyfusidinsyre vist i tabel VII.

Tabel VII:. H^C CH^ cooch2-^0^-no2

^ «s_I

rfjV

i t CH3

Resulterende forbindelser smeltepunkt

Eksempel Merkaptan R ( C) 2 A ethylraerkaptan CHgCH^ ^ 3 A 2-hydroxyethyl CH2CH20H 192-194 merkaptan 4 A 2-aminoethyl CHgCHgNHg 188-191 merkaptan 5 A allylmerkaptan CH2CH=CH2 167-170 6 A isobutylmerkaptan CH2CH(CH3)2 104-112 7 A sec-butylmerkaptan CH^CH^JCHgCH^ 150-157 8 A cyclopentylmerkaptan cyclopentyl 100-109 9 A merkaptoeddikesyre CH COOCH 125-129

methylester J

10 A furfurylmerkaptan furfuryl l46-l48 B. l66-Thioethere af l6-deacetoxyfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 1 B, men erstatte p-nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6P-isopropyl-thiofusidinsyre med p-nitrobenzylesteren af de Ιόβ-ΐΙιΐοβΙΙιβΓρ 32 143905 af 3-0-acetyl-l6-deacetoxyfusid±nsyre, som er vist i tabel VIX, fremstilledes l6P-thioetherne af l6-deacetoxyfusidinsyre vist i tabel VIII.

Tabel VIII; H3\^H3

k^-COOH

h%^nJL-sr _I

Γ J ^H3 ho' CH3

Resulterende forbindelser_

Eksempel R Smeltepunkt (°c) 2 B CH2CH3 195-198 3 B CH2CH20H 179-182 4 B CH2CH2NH2 241-250 (sønderdeling·) 5 B CH2CH=CH2 196-199 6 B CH2CH(CH3)2 199-202 7 B CH(CH3)CH2CH3 218-222 8 B cyclopentyl 217-223 9 B CH2C00H 199-202 10 B furfuryl amorf NMR-spektret (CDC13) af forbindelsen i eksempel 10B viste signaler ved / = 0,97 (s, 6h), 1,32 (s, 3H), 1,60 og 1,68 (2 bs, 6H), 3,00 (m, IH; CH-13), 3,73 (m, IH; CH-3), 3,78 (bs, 2H; SCHg), 4,22 (d, IH; CH-I6), 4,30 (m, IH; CH-ll), 5,10 (m, IH; CH-24), 6,Ιό, 4 (m, 2H; arom. CH) og 7,32 (bs, IH; arom. CH) ppm. Tetra-methylsilan blev brugt som intern reference.

Eksempel 11 l6-Deacetoxy-l68-isopropylthio-24.25-dihydrofusidinsyre A. p-Nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l68-iso-propylthio-24,25-dih.ydrofusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 1 A, men erstatte 33 143905 p-nitrobenzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidin-syre med p-nitrobenzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-brom-24,25-dihydrofusidinsyre, fremstilledes p-nitrobenzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-isopropyl thio-24,25-dihydrofusidin-syre i form af farveløse krystaller med smeltepunkt 113-H6°C.

B. l6-Peacetoxy-l68-isopropylthio-24,25-dihydrofusldinsyro

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 1 B, mon erstatte p-nitrobenzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6(>-isopropyl-thiofusidinsyre med p-nitrobenzylostoren af 3-0-acetyl-l6-deacot-oxy-l6P-isopropylthio-24,25-dihydrofusidinsyre, fremstilledes l6-deacetoxy-l6p-isopropylthio-24,25-dihydrofusidi nsyre mod smeltepunkt 232-234°C.

Eksempel 12 l6-Deacotoxy-l6p-cyklohexylthiofusidinsyre

Til en opløsning af kaliumhydroxid (kOO mg; 85% rent) og cyklohexylmerkaptan (2 ml) i ethanol (lOO ml) blev sat p-nitro-benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyro (1,/43 g), og den resulterende opløsning blev henstillet ved stuetemperatur i 5 døgn. Derefter fortyndedes reaktionsblandingen med 150 ml ether, vaskedes med vand (3 x 75 ml), tørredes og inddampedes i vakuum. Den tilbageværende olie, som indeholdt don rå p-nitro-benzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l63-cyklohexylthiofusidin-syre, opløstes i ethanol (80 ml), og 20 ml af en 2 N vandig natriumhydroxid blev tilsat. Efter omrøring i tre timer ved 60°C tilsattes 100 ml vand, og den mørke opløsning blev gjort sur ved tilsætning af 4 N saltsyre (15 ml) og ekstraheret to gange med ether. De samlede organiske faser vaskedes med vand (3 x 50 ml), tørredes og inddampedes. Den olieagtige remanens rensedes ved kromatografi på silicagel (ether:petroleumsether:eddikesyre 70:30:0,5), hvorved der isoleredes l6-deacetoxy-l6(S-cyklohexyl-thiofusidinsyre ved krystallisation af ether-petroleumsether med smeltepunkt 215-220°C. Omkrystallisation af ethylacetat-petro-leumsether gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt 2l6-220°C.

Eksempel 13-15

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 12, mon erstatte cyklohexylmerkaptan med merkaptanerne vist i tabel IX, fremstilledes 16-thioetherne af 16-deacetoxyfusidinsyre vist i tabel IX.

, 143905 34

Tabel IX; H Q^CiH

ϊ

k^-COOH

HV>A^SR

ck[ CH3 I

Ho'''^vrx^ i CH3

Resulterende forbindelser

Eksempel Merkaptan R Smeltepunkt (°C) 13 2-phenylethyl- CH2CH C,H 208-214 merkaptan 14 n-butylmerkaptan 0Η„0Η_0Η„0Η„ 105-118 (sønder- ^ deling·) 15 methylmerkaptan CH^ amorf NMR-spektret (CD^OD) af forbindelsen i eksempel 15 viste signaler ved S = 0,89 (d, J=6, 3H), 1,00 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,38 (s, 3H), 1,62 (bs, 6h), 2,13 (s, 3HJ SCH ), 3,03 (m, 1H; CH-13), 3,67 (m, IH; CH-3), 4,03 (d, J=9, 1H} CH-16), 4,26 (m, 1H; CH-ll) og 5,10 (m, IH; CH-24) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Eksempel 16 16-Deacetoxy-l63-ethylthiofusidinsyre

Til en opløsning af ethylmerkaptan (2,5 ml) i dimethylformamid (lO ml) blev sat natriumhydrid (650 mg af en 55% suspension i olie). Efter at udvikling af hydrogen var ophørt, tilsattes pivaloyloxy-methylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6oc-bromfusidinsyre (750 mg). Efter henstand i en time ved stuetemperatur blev reaktionsblandingen fortyndet med ethylacetat (50 ml) og ekstraheret med 1 N saltsyre (25 ml) og vand (2 x 25 ml). Den organiske fase tørredes, filtreredes og inddampedes i vakuum. Det således opnåede råprodukt blev renset ved kromatografi på silicagel (ether:petroleumsether:eddikesyre kO:60:0.5) og gav ren 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l63-ethylthiofusidinsyre som en farveløs gummi, der opløstes i en blanding af ethanol (20 ml) og 2 N vandig natriumhydroxid (5 ml) og henstilledes ved 75°C i to timer. Reaktionsblandingen blev gjort sur med 1 N saltsyre (15 ml) og ekstraheredes med ethylacetat (50 ml). Den 35 143905 organiske fase vaskedes to gange med vand (20 ml), tørredes, og inddampedes i vakuum til en olie, som krystalliserede ud af ether-petroleumsether og gav l6-deacetoxy-l6β-ethylthiofusidinsyre som farveløse krystaller med smeltepunkt 195-198°C.

Eksempel 17-20 16-P-Thioethere af 16-deacetoxyfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 16, men erstatte ethylmerkaptan med merkaptanerne vist i tabel X, fremstilledes Ιββ-thioetherne af 16-deacetoxyfusidinsyre vist i tabel X.

Tabel X: Η3<"^^'!Η3

k^COOH H0\ /\>’\^SR

w 1T

ho^ ch3 __Resulterende resultater_

Eksempel Merkaptan R Smeltepunkt (°C) 17 n-propylmerkaptan CH^CH^CH^ amorf 18 t, butylmerkaptan 0(011^)^ 200-203 19 phenylmerkaptan CgH^ amorf 20 benzylmerkaptan CHgCgH^ amorf NMR-spektret (CD^OD) af forbindelsen i eksempel 17 viste signaler ved 6= 0,90 (d, 3H), 0,99 (s, 6h), 1,37 (s, 3H), 1,62 og 1,66 (2 bs, 6η), 2,58 (m, 2H; CHgS), 3,00 (m, IH; CH-13), 3,67 (m, IH; CH -3), 4,11 (d, IH; CH-16), 4,24 (m, IH; CH-ll) og 5,12 (m, IH; CH-24) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

NMR-spektret (CDCl^) af forbindelsen i eksempel 19 viste signaler ved é = 0,95 (s, 6h), 1,10 (s, 3H), 1,35 (s, 3H), 1,60 og 1,65 (2 bs, 6H), 3,10 (m, IH; CH-13), 3,74 (m, IH; CH-3), 4,30 (m, IH; CH-ll), 4,77 (d, IH; CH-16), 5,11 (m, IH; CH-24) og 7,0- 7,4 (5H; arom. CH) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

36 143905 NMR-spektret (CDCl^) af forbindelsen i eksempel 20 viste signaler ved <f = 0,97 (s, 6H), 1,36 (s, 3H), 1,62 og 1,66 (2 bs, 6H), 3,06 (m, IH; GH-13), 3,66 (m, IH; CH-3), 3,74 (bs, 2H; SCHg), 4,08 (d, IH; CH-16), 4,24 (m, IH; CH-ll), 5,l4 (m, IH; CH-24) og 7,3 (bs, 5H; arom. CH) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Eksempel 21 l6-Deacetoxy-l6B-(l -methyltetrazol-5 -ylthio)fusidinsyre

En opløsning af benzoyloxymethylester af l6-epideacetyl-fusidinsyre (2,2 g) og di(l-methyltetrazol-5-yl)disulfid (l,5 s) i tør pyridin (20 ml) blev afkølet i isbad, og der tilsattes tributylph.osphin (l,44 ml). Efter henstand i 18 timer ved stuetemperatur tilsattes vand (200 ml) og ether (400 ml). Den organiske fase blev skilt fra, vasket to gange med 1 N saltsyre og to gange med vand, blev tørret og inddampet i vakuum. Remanensen opløstes i methanol (50 ml), og kaliumkarbonat (2,4 g) tilsattes. Efter omrøring i 18 timer ved stuetemperatur blev opløsningen gjort sur med 4 N saltsyre (8 ml), og der tilsattes vand (200 ml) og ether (lOO ml). Den organiske fase skiltes fra, vaskedes to gange med vand, tørredes, og inddampedes, hvorved der opnåedes 1,84 g af et råprodukt, som rensedes ved kromat ograf ering på silicagel (ether:eddikesyre; 100:0,5) og gav i i .

800 mg l6-deacetoxy-l6P-(l -methyltetrazol-5 -ylthio)fusidinsyre som et farveløst skum.

NMR-spektret (CDCl^) viste signaler vedcf= 1,00 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 1,4o (s, 3H), 1,62 og 1,68 (2 bs, 6H), 3,17 (m, IH; CH-13), 3,75 (m, IH; CH-3), 3,87 (s, 3H; l'-CH3), 4,37 (m, IH, CH-ll) og 5,42 (m, IH; CH-16) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Eksempel 22 l6-Deacetoxy-l68-(2 ,5 -dichlorphenylthio)fusidinsyre

En opløsning af methoxymethylester af 3-0-acetyl-l6-epideacetylfusidinsyre (490 mg) og di(2,5-dichlorphenyl)disulfid (l,07 g) i tør pyridin (4 ml) afkøledes til 0°C, og tributylphosphin (0,72 ml) tilsattes. Den dannede opløsning henstilledes ved 5°C i tre døgn. Den blev derefter fortyndet med ether (lOO ml), vasket med 4 N saltsyre, 2 N natriumhydroxid 27 143905 og vand, tørret og inddampet i vakuum. Remanensen opløstes i en blanding af ethanol (20 ml) og 2 N vandig natriumhydroxid (8 ml), og henstillet ved 60°C i 1 time. Roaktionsblandingen blev s/i gjort sur med 4 N saltsyre (5 ml), og der tilsattes ether (.100 ml) og vand (200 ml). Den organiske fase blev skilt fra, vasket to gange med vand, tørret og inddampet i vakuum. Remanensen krystalliserede af ether-petroleumsether og gav l6-deacetoxy-l6f;-(2 ,5 -dichlorphenylthiojfusidinsyre med smeltepunkt. i6l-l64°C.

Eksempel 23 l6-Peacetoxy-l66-(2 -azidoethylthio)fusidinsyre i A. p-Nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6[l-( 2 -bromethyl thio )fusidinsyre

Til en opløsning af p-nitrobenzylester af 3-0-acotyl-l6-deacetoxy-l6p-(2 -hydroxyethylthio)fusidinsyre (l g) i 50 ml dimethylformamid sattes 3 g phenyl-N,N-dimethylformimidatbromid.

Efter henstand ved stuetemperatur i 18 timer fortyndedos reaktionsblandingen med ether (50 ml), vaskedes med 2 N natriumhydroxid (20 ml) og vand (3 x 50 ml), tørredes og inddampedes i vakuum. Tilsætning af ether-petroleumsether til remanensen fik den til at krystallisere. Efter frafiltrering, vask med petroleumsether og tørring opmledes 800 mg af p-nitrobenzylestoren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6(i-( 2 -bromethyl thio ) fusidinsyre mod smeltepunkt l48-150°C.

B. l6-Deacetoxy-l6B-(2 -azidoethylthio)fusidinsyre t

Den ovenfor fremstillede 2 -bromethylthioether oplostes i 25 ml dimethylformamid. Der tilsattes lithiumazid (400 mg), og reaktionsblandingen henstilledes ved 20°C i 24 timer. 100 ml ether blev tilsat, og den dannede opløsning vaskedes med vand (4 x 50 ml), tørredes, og inddampedes i vakuum. Remanensen opløstes i en blanding af ethanol (50 ml) og 2 N vandig natriumhydroxid. Efter henstand ved 60°C i 3 timer blev oplosningen gjort sur med 8 ml 4 N saltsyre, og der tilsattes vand (lOO ml) og ether (lOO ml). Den organiske fase blev skilt fru, vasket med vand (4 x 50 ml), tørret og inddampet i vakuum. Tilsætning af ether og petroleumsether til remanensen fik l6-deacetoxy-l6p-(2'-azidoethylthio)fusidinsyre til at fælde ud som farveløse krystaller, som efter filtrering, vask med petroleumsether og tørring gav l40 mg med smeltepunkt 173-170°C.

Eksempel 24 143905 38

Natriumsalt af l6-deacetoxy-l63-(2 -methoxyethylthio)fusidinsyre Til en opløsning af p-nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-(ϊθηοβΐο;χ3Γ-ΐββ-(2 -bromethylthio)fusidinsyre (l g) (se eksempel 23 A) i methanol (50 ml) sattes sølvkarbonat (l g), og blandingen blev omrørt ved stuetempe.ratur i 16 timer. Uopløseligt materiale frafiltreredes og vaskedes med methanol (lO ml). Det samlede filtrat og vaskevæske inddampedes i vakuum, og remanensen opløstes i en blanding af ethanol (lOO ml) og 2 N natriumhydroxid (20 ml). Efter omrøring i 3 timer ved 60°C blev den mørke opløsning gjort sur med 4 N saltsyre (15 ml), og der tilsattes vand (2OO ml) og ether (200 ml). Den organiske fase blev skilt fra, vasket to gange med vand, tørret og inddampet i vakuum. Remanensen blev renset ved kromatografering på silicagel (ether: eddikesyre, 100:0,5) og gav det ønskede produkt som et farveløst skum. Dette omdannedes til det krystallinske natriumsalt ved opløsning i methanol (25 ml), titrering med 2 N vandig natriumhydroxid, inddampning og tilsætning af acetone. Krystallerne frafiltreredes,vaskedes med acetone og tørredes.

NMR-spektret (CD^OD) viste signaler ved S = 1,00 (s, 6h), 1,36 (s, 3H), 1,62 (bs, 6H) 2,78 (2H; Cg2S), 3,51 (2H; Cg20), 3,68 (m, IH; Cg-3), 4,10 (d, IH; CH-l6), 4,21 (m, IH; CH-ll) og 5,11 (m, IH; CH-24) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Eksempel 25 l6-Peacetoxy-l63-(2 -isopropylthioethylthio)fusidinsyre

Til en opløsning af kaliumhydroxid (500 mg) og isopropyl- merkaptan (l,5 nil) i ethanol (50 ml) sattes p-nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l63-(2 -bromethylthio)fusidinsyre (l g) (se eksempel 23 A), og blandingen blev omrørt i 16 timer ved stuetemperatur. Yand (lOO ral) og ether (75 ml) tilsattes, den organiske fase blev skilt fra, vasket med 2 N natriumhydroxid (2 x 25 ml) og vand (2 x 25 ml), tørret, og inddampet i vakuum. Remanensen opløstes i en blanding af ethanol (lOO ml) og 2 N natriumhydroxid (20 ml), og opløsningen omrørtes i 3 timer ved 60°C. Derefter tilsattes 4 N saltsyre (15 ml), vand (250 ml) og ether (lOO ml). Den organiske fase blev skilt fra, vasket med vand (2 x 50 ml), tørret og inddampet i vakuum. Remanensen 39

U390S

rensedes ved kromatografi på silicagel (ether:petroleumsether: eddikesyre, 70:30:0,5) og gav 400 mg l6-deacetoxy-l6R-(7 -Isopropyl thioethylthio)fusidinsyre.

NMR-spektret (CDCl^) viste signaler ved ¢/ = 0,96 (bs, 6h), 1,22 (d, j=7, 6h), 1,33 (s, 3H), 1,58 og 1,67 (2 bs, 6H), 2,73 (bs, 4H; SCH2CH2S), 2,91 (m, IH; S-CH (CH^g), 3,01 (m, IH, CH-13), 3,71 (m, IH; CH-3), 4,21 (m, IH; CH-16), 4,28 (m, IH; CH-ll) og 5,08 (m, IH, CH-24) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

Eksempel 26-28

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 25, men erstatte isopro-pylmerkaptan med merkaptanerne vist i tabel XI, fremstilledes forbindelserne vist i tabel XI.

Tabel XI: H3<\x^H3

COOH

UA I

' ^"X^V^SC^ CH2 SR

ChJ CHj_J

-"V H3 HO' ch3

Resulterende forbindelser

Eksempel Merkaptan R Smeltepunkt (°C) 26 ethylmerkaptan CH^CH^ 149-152 27 t-butylmerkaptan CiCH^)^ 134-135 28 cyklohexylmerkaptan cyklohexyl amorf NMR-spektret af forbindelsen i eksempel 28 (CDCl^) viste signaler ved <f = 0,99 (s, 6h) , 1,37 (s, 3H), l,6l og 1,68 (2 bs, 6h), 2,78 (bs, 4H; SCH2CH2S), 3,07 (m, 1Η; CH-13), 3,76 (m, IH; CH-3), 4,26 (d, IH; CH-16), 4,35 (m, IH; CH-ll) og 5,12 (m, IH; CH-24) ppm. Tetramethylsilan blev brugt som intern reference.

4ο 143905

Eksempel 29 l6-Deacetoxy-l6B-(2 -fluorethylthio)fusidinsyre A. Benzoyloxymethvlester af 3-0-fo:rmyl-l6-deacetoxy-l6B-(2 -bromethylthio)fusidinsyre l6-Deacetoxy-l6p-(2 -hydroxyethylthio)fusidinsyre (53,¾ mg) opløstes i methanol (lO ml) og omdannedes til natriumsaltet ved titrering med 2 N natriumhydroxid med phenolphthalein som indikator. Efter inddampning i vakuum opløstes det amorfe natriumsalt i dimethylformamid (7,5 ml), der tilsattes chlormethyl-benzoat (0,16 ml), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur 1 48 timer. Vand (50 ml) blev tilsat, og blandingen ekstrahe-redes med ether (lOO ml). Den organiske fase skiltes fra, vaskedes med vand (4 x 100 ml), tørredes og inddampedes i vakuum.

. 1

Benzoyloxymethylesteren af l6-deacetoxy-l6p-(2 -hydroxyethylthio ) fusidinsyre isoleredes som et amorft produkt. Dette opløstes i dimethylformamid (10 ml), og der tilsattes phenyl-N,N-dimethylformimidatbromid (l,5 s) under omrøring, hvorefter opløsningen stilledes ved 20°C i 24 timer. Vand (50 ml) og ether (50 ml) blev tilsat, og den organiske fase vaskedes med 2 N natriumhydroxid (2 x 25 ml) og vand (2 x 25 ml), tørredes, og inddampedes i vakuum, hvorved benzoyloxymethylesteren af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6p-(2 -bromethylthio)fusidinsyre isoleredes som et amorft produkt.

B. l6-Deacetoxy-l6B-(2 -fluorethylthio)fusidinsyre

Det under A fremstillede stof opløstes i acetonitril (25 ml), der tilsattes sølvfluorid (500 mg) og den dannede suspension om-rørtes ved stuetemperatur i 2 timer. Ethylacetat (50 ml) tilsattes, og uopløseligt materiale frafiltreredes. Filtratet inddampedes i vakuum, remanensen opløstes i methanol (lO ml), og kaliumkarbonat (350 mg) blev tilsat. Efter omrøring i 30 minutter ved stuetemperatur tilsattes vand (lOO ml), 4 N saltsyre (5 ml) og ether (lOO ml), og den organiske fase blev skilt fra.

Den vaskedes to gange med vand, tørredes og inddampedes til et amorft produkt, som rensedes ved kromatografi (ether:eddikesyre, 100:0,5) til nent l6-deacetoxy-l6p-(2 -fluorethylthio)fusidinsyre, der udkrystalliseredes af ether-petroleumsether med smeltepunkt 157-159°C.

Eksempel 30 ki 143905 H-Keto-l6-deacetoxy-l6P-isopropylthiofusidinsyre A. p-Nitrobenzylester af 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deacetoxy-Ι6β-isopropylthiofusidinsyre

Pyridinchlorchromat (l,07 g) suspenderedes i methylen-chlorid (30 ml) under omrøring, og p-nitrobenzylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-isopropylthiofusidinsyre (l,5 S) tilsattes hurtigt. Efter omrøring i yderligere 1 time fortyndedes suspensionen med ether (lOO ml), opløsningsmidlet dekanteredes fra, og den sorte remanens vaskedes to gange med ether. Filtrering og inddampning af de samlede organiske ekstrakter gav en olieagtig rest, som krystalliserede af ether-petroleumsether. De farveløse krystaller samledes, vaskedes med petroleumsether, tørredes og gav 880 mg af det ønskede produkt med smeltepunkt 120-122°C.

B. H-Keto-l6-deacetoxy-l6l3-isopropyl thiofusidinsyre

Den ovenfor fremstillede p-nitrobenzylester opløstes i en blanding af ethanol (20 ml) og 2 N vandig natriumhydroxid (5 ml) og blev opvarmet til 60°C i 3 timer. Så tilsattes under omrøring k N saltsyre (3 ml), vand (100 ml) og ether (100 ml). Den organiske fase skiltes fra, vaskedes to gange med vand (25 ml), tørredes og inddampedes i vakuum. Den olieagtige rest rensedes ved kromatografi på silicagel (cyklohexan:ethylacetat, 7:3) og gav 380 mg H-keto-l6-deacetoxy-l6|3-isopropylthiofusidinsyre med smeltepunkt l67-l69°C (udkrystalliseret af ether-petroleums-ether).

Eksempel 31 ll-Keto-l6-deacetoxy-l6P-isopropylthio-24,25-dihydrofusidinsyro Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 30» men erstatte p-nitrobenzylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-isopropyl-thiofusidinsyre med p-nitrobenzylesteren 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6β-isopropylthio-24,25-dihydrofusidinsyre, fremstilledes like to-l6-deace toxy-l63-i sopropylthio-24, 25-dihydrofusidinsyre som farveløse krystaller med smeltepunkt 189—191 C· 42 1439Ό5

Eksempel 32 3-Keto-l6-deacetoxy-l63-isopropylthlofusidinsyre

Til en opløsning af acetoxymethylester af 16-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre (2,0 g) i 15 ml dimethylsulfoxid blev sat dicyklohexylkarbodiimid (3jl0 g) og orthophosphorsyre (160 mg), og blandingen henstilledes under omrøring ved stuetemperatur i 24 timer. En opløsning af oxalsyre (3 g) i methanol (20 ml) blev derefter tilsat for at destruere overskud af karbodiimid, og omrøringen fortsattes i 30 minutter. Ethyl-acetat (150 ml) blev så tilsat, og den dannede opløsning vaskedes med mættet vandig natriumhydrogenkarbonat (2 x 50 ml) og med vand (50 ml). Den tørredes og gav efter inddampning 1,9 g olie. Denne opløstes i methanol (4θ ml), og der tilsattes kaliumkarbonat (l,2 g). Efter omrøring i 1 time afdampedes methanolen i vakuum, og remanensen tilsattes ether (lOO ml) og 4 N saltsyre (50 ml). Den organiske fase vaskedes med vand (2 x 50 ml), tørredes og inddampedes i vakuum. Den resterende olie rensedes ved kromatografi på silicagel (cyklohexan:ethyl-acetat, 7 : 3) og gav 3-keto-l6-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidin-syre som farveløse krystaller med smeltepunkt 200-203°C.

Eksempel 33 l6-deacetoxy-l6β-isopropylsulfinylfusidinsyre

En opløsning af natriummetaperjodat (6 g) i 500 ml vand blev sat til en opløsning af l6-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre (10,0 g) i en blanding af methanol (200 ml) og 2 N natriumhydroxid (lO ml). Efter henstand i 1,5 time gjordes opløsningen sur med 4 N saltsyre (7>5 ml), hvorved et krystallinsk produkt udskiltes. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med vand (50 ml) og tørredes, og 10 g af det ønskede produkt isoleredes med smeltepunkt 158-159°C. Krystallerne overførtes i en anden krystalmodifikation ved behandling med kogende ethylacetat (400 ml). Efter afkøling til 0°C frafiltreredes produktet, vaskedes med ether (50 ml) og tørredes. Der opnåedes 9»θ4 g rent l6-deacetoxy-l63-isopropyl-sulfinylfusidinsyre med smeltepunkt 179-l8l°C.

Eksempel 34-39

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 33» men erstatte 16-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre med l63-thioetherne vist i tabel XII, fremstilledes sulfoxiderne vist i tabel XII.

43 143905

HaC CHo

Tabel XII: J

LxCOOH

c^l ch3_] 5 ( J ch3 HO '' i CH^

Resulterende forbindelser

Eksempel Thioether af l6-deacet- R Smeltepunkt oxy fusidlnsyre ( C) 34 Ιδβ-methylthioether CH^ 151-156 35 16β-ethylthioether CH2CH3 158-162,5 36 Ιββ-t-butylthioether θ(θΗ^)3 164-167 37 16β—(2 -hydroxyethyl- CH_CH_OH 163-168 thio jether 38 ΐ6β-(2'-azidoethylthio)- CH2CH2N l4l-l47 ether 39 Ιδβ-phenylthioether CgH^ amorf

Eksempel 40 16-Deacetoxy-163-isopropylsulfinyl-24,25-dihydrofusidinsyre Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 33, men erstatte l6-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre med 16-dcacetoxy--l63-isopropylthio-24,25-dihydrofusidinsyre, fremstilledes l6-deacetoxy-16β-isopropylsulfinyl-24,25-dihydrofusidinsyre som farveløse krystaller med smeltepunkt 184-186°C.

Eksempel 41 l6-Deacetoxy-3-keto-l63-isopropylsulfinylfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 33, men erstatte 16-deac e t oxy-16 β-i s opropyl thio fus idinsyre med l6-deacetoxy-3-lceto“ l6β-isopropylthiofusidinsyre, fremstilledes l6-deacetoxy-3-koto-l6p-isopropylsulfinylfusidinsyre som farveløse krystaller mod smeltepunkt 158-l6l°c.

143905 44

Eksempel kZ

ll-Keto-16-deacetoxy-163—isopropylsulfinylfusidinsyre

Til en opløsning af l6-deacetoxy-l6p-isopropylsulfinyl-fusidinsyre (l,l g) i 5 ml pyridin blev sat eddikesyreanhydrid (O,8 ml). Efter henstand i 48 timer ved stuetemperatur tilsattes 1 ml vand til opløsningen, som efter endnu 1 time fortyndedes med 50 ml ethylacetat, vaskedes to gange med k N saltsyre og to gange med vand. Derefter tørredes og inddampedes opløsningen, hvorved der opnåedes 94-0 mg krystallinsk 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-isopropylsulfinylfusidinsyre, med smeltepunkt 176-178°C.

Til en suspension af 770 mg af dette stof i acetone (lOO ml) sattes Jones reagens (0,78 ml). Efter henstand i 10 minutter ved stuetemperatur tilsattes vand (100 ml) og den resulterende opløsning koncentreredes i vakuum til 125 ml, hvorved 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l6p-isopropylsulfinylfusidinsyre udfældedes som farveløse krystaller, som frafiltreredes. Efter vask med vand og tørring vandtes 570 mg med smeltepunkt 151-l60°C.

400 mg af dette produkt opløstes i en blanding af ethanol (20 ml) og 2 N vandig natriumhydroxid (2 ml) og henstilledes ved stuetemperatur i 6 døgn. Derefter tilsattes 4 N vandig saltsyre (2 ml) under omrøring for at fælde det ønskede produkt som farveløse krystaller, som samledes, vaskedes med vand (l5 ml) og tørredes. Der vandtes 230 mg med smeltepunkt 174-178°C. Omkrystallisation af ethylacetat gav det rene ll-keto-l6-deacet-oxy-l6p-isopropylsulfinylfusidinsyre med smeltepunkt 181-183°C.

Eksempel 43 3.ll-Diketo-l6-deacetoxy-l6P-isopropylsulfinylfusidinsyre

Til en opløsning af l6-deacetoxy-l6P-isopropylthiofusidin-syre (500 mg) i 100 ml acetone sattes 1,6 ml Jones reagens. Efter henstand ved stuetemperatur i 10 minutter tilsattes 100 ml vand under omrøring. Det hvide bundfald, der dannedes, blev filtreret fra, vasket med vand og tørret, hvorved opnåedes 450 mg af en blanding af 3*ll-diketo-l6-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre og det ønskede produkt.

Krystallerne opløstes i varm ether (20 ml) og ved afkøling til 0°C fældede rent 3>H-diketo-l6-deacetoxy-l6p-isopropylsul-finylfusidinsyre ud. Krystallerne frafiltreredes, vaskedes med kold ether og tørredes, hvorved opnåedes 60 mg med smeltepunkt 154-162°c.

Eksempel 44 k5 143905 l6-Deacetoxy-l6P-ethoxyfusidinsyre

Til en suspension af phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacet-oxy-l6α-bromfusidinsyre (20,9^ g) i ethanol (300 ml) sattes sølvkarbonat (16,55 g), °g blandingen beskyttodes mod lys og rørtes ved stuetemperatur i 18 timer. Uoplost materiale fra-filtreredes og vaskedes med ethanol (2 x 30 ml). Til det samlede filtrat og vaskevæske blev sat 5 N vandig natriumhydroxid (120 ml), og blandingen blev tilbagesvalet i 2 timer. Efter afkøling til stuetemperatur fjernedes størstedelen af ethanol en i vakuum, og til resten sattes ethylacetat (l50 ml) og vand (lOO ml). Under omrøring blev blandingen gjort sur med k N saltsyre. Den organiske fase skiltes fra, og den vandige fase blev igen ekstraheret med ethylacetat (50 ml). De samlede organiske ekstrakter vaskedes med vand, tørredes og inddampedes i vakuum til en olie, som krystalliserede af diisopropylether. De farveløse krystaller samledes, vaskedes med diisopropylethor og tørredes, hvorved der opnåedes 5>^2 g l6-deacetoxy-16P-ethoxy-fusidinsyre med smeltepunkt l69-171°C. Efter oparbejdning af moderluden opnåedes ydermere 2,20 g af det ønskede stof med smeltepunkt 168-170°C. To omkrystallisationer af methanol-dliso-propylether gav det analytisk rene stof med smeltepunkt 177-17tf°C.

Eksempel 45-47 l6-Deacetoxy-l63-alkyloxyfusidinsyrer

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel kk, men erstatte ethanol med alkoholerne vist i tabel XIII, fremstilledes 16-deacetoxy-l6P-alkyloxyfusidinsyrerne vist i tabel XIII.

Tabel XIII: (næste side) hc ch

k^COOH

HO

CH, CH, T

[ Λ * J ch3 “3 46 143905 _ Resulterende forbindelser

Eksempel Alkohol R Smeltepunkt ( C) 45 Methanol CH3 175-176 46 2,2,2-Trifluorethanol CH^CF^ 202-203 47 Hexanol-(l) CH2(CH2 )^013^ amorf

Eksempel 48 l6-Peacetoxy-l60-(2 -fluorethoxy)fusidlnsyre

Benzoyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6a-brom-fusidinsyre (8,75 S) opløstes i 2-fluorethanol (25 ml), og der tilsattes sølvkarbonat (6,89 g). Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur og under udelukkelse af lys i 16 timer. Uopløst materiale frafiltreredes, vaskedes to gange med ether og det samlede filtrat og vaskeether blev inddampet til tørhed i vakuum.

Den resterende olie, som indeholdt den rå benzoyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6P-(2 -fluorethoxy)fusidinsyre, opløstes i methanol (85 ml), kaliumkarbonat (3,^6 g) tilsattes, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Størstedelen af opløsningsmidlet fjernedes i vakuum, og til resten sattes vand (lOO ml) og ether (lOO ml). Under omrøring blev blandingen gjort sur med 4 N saltsyre. Det organiske lag skiltes fra, det vandige lag blev ekstraheret igen med ether (50 ml), og de samlede organiske faser blev vasket med vand til neutral reaktion.

For at adskille det ønskede produkt fra biproduktet 16-deacetyl-fusidinsyrelakton blev etheropløsningen ekstraheret med 0,5 N natriumhydroxid (3 x 50 ml), og vasket med vand (3 x 25 ml).

Til den samlede vandfase og vaskevand sattes ether (lOO ml), og under omrøring blev blandingen gjort sur med 4 N saltsyre. Det organiske lag skiltes fra, og vandlaget ekstraheredes med ether (50 ml). De kombinerede organiske ekstrakter vaskedes med vand til neutral reaktion, tørredes og inddampedes i vakuum. Den amorfe remanens opløstes i diisopropylether (30 ml), og ved skrab-ning udfældede et krystallinsk produkt. Efter henstand i køleskab natten over frafiltreredes krystallerne, vaskedes med diisopropylether og tørredes. Derved opnåedes 2,32 g af 16-deacet-oxy-l6P-(2 -fluorethoxy)fusidinsyre med smeltepunkt 158-l60°C.

Fra moderluden kunne yderligere 0,48 g udvindes med smeltepunkt 155-159°C. To omkrystallisationer af methanol-diisopropylether gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt l62-l63°C.

Eksempel 49-50 47 143905 l6-Deacetoxy-l6P-alkyloxyfusidinsyrer

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 48, men erstatte 2-fluorethanol med alkoholerne vist i tabel XIV, opnåedes 16- deacetoxy-l6P-alkyloxyfusidinsyrerne vist i tabel XIV.

H„C CH

Tabel XIV: 3 X^COOH H0 . 1 ch3 ch3

Resulterende forbindelser

Eksempel Alkohol R Smeltepunkt ^ °g ^ 49 2-Acetoxyethanol CH^CH^OH 179-182 50 1,3-Difluorpropanol-(2) CH(CH2F)2 l6y-171

Eksempel 51-60 l6g-Ethere af 16-deacetoxyfusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 48, men erstatte benzoyloxymethylester af 3-0-formyl-l6-deacetoxy-l6a-brom-fusidinsyre med acetoxymethylester af l6-deacetoxy-l6ctr.brom-fusidinsyre, og erstatte 2-fluorethanol med alkoholerne vist. i tabel XV, fremstilledes l6p-etherne af 16-deacetoxyfusidinsyre vist i tabel XV.

Tabel XV; (næste side) h3cc:h3

X^COOH HO I

CH, CH T

jjL i y_i H0''|^Sv^ “3 48 143905

Resulterende forbindelser

Eksempel Alkobol R Smeltepunkt (°C) 51 Isopropanol CH(CH^)2 189-190 52 tert-Butanol C(CH^)^ 179-180 53 2,2-Dichlorethanol CH2CHC12 181-182 54 2,2,2-Trichlorethanol CH^CCl^ 212-213 55 1,3-Difluorpropanol-(2) CH(CH2F)2 169-171 56 1,3-Diacetoxypropanol- CH^CH-OH),, amorf (2) ^ 41 57 Allylalkohol CH2CH=CH2 154-156 58 2-Butenol-(1) CH CH=CHCH 128-135 (sønder- ^ deling) 59 2-Propynol-(1) CH2C=CH 134-136 60 Cyklopentanol cyklopentyl 188-189

Eksempel 61 16-Peacetoxy-l68-ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre A. Pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-epideacetvl-24t25-dihydrofusidinsyre

Til en opløsning af 3-0-a-cetyl-l6-epideacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre (31»12 g) i dimethylformamid (250 ml) blev sat triethylamin (li,92 ml) og efter 15 minutters omrøring chlor-methylpivalat (17,76 ml). Efter omrøring i 20 timer ved stuetemperatur fortyndedes blandingen med ethylacetat (750 ml) og vaskedes grundigt med vand (4 x 250 ml, 2 x 50 ml) for at fjerne uomsat udgangsmateriale og det meste af dimethylformamid. Den organiske fase tørredes og inddampedes i vakuum til en olieagtig remanens. Denne opløstes i ether (50 ml), petroleumsether (200 ml) tilsattes og blandingen blev omrørt i 2 timer. Det krystallinske bundfald frafiltreredes, vaskedes med ether:petroleumsether 1:4.

Det samlede filtrat plus vaskefaserne inddampedes i vakuum og gav 36 g rå pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-epideacetyl-24,25-dihydrofusidinsyre som et skum, der ikke krystalliseredes.

B. Pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-methansulfonyloxy-24,25-dihydrofusidinsyre

Til en opløsning af det ovenfor fremstillede råprodukt (30 g) i methylenchlorid (75 ml) og pyridin (75 ml) blev under -». ______________ *9 143905 omrøring dråbevis sat en opløsning af methansulfonylchlorid (l3,8 ml) i methylenchlorid (25 ml) ved en temperatur pn -20°C.

Efter tilsætningen var afsluttet, (ca. 15 minutter), omrortes blandingen ved -15°C i 1,5 time og henstilledes så i køleskab natten over. Is (ca. 15 g) tilsattes, og efter omrøring i 0,5 time hældtes blandingen ned i en blanding af ether (25Ο ml) og vand (100 ml) og rystedes kraftigt. Det organiske lag skiltes fra, og den vandige fase blev ekstraheret igen med ether (lOO ml).

De kombinerede organiske faser blev vasket med vand, 4 N saltsyre (for at fjerne pyridin), mættet vandig natriumchlorid, 0,5 M vandig natriumhydrogenkarbonat og igen med en mættet vandig natriumchlorid. Derefter tørredes den og inddampedes i vakuum til et lyst skum af pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacet-oxy-l6oc-methansulfonyloxy-24,25-dihydrofusidinsyre. Det ret ustabile produkt blev anvendt i det næste trin uden yderligere rensning. Det havde et IR-spektrum: IR (KBr): 1170 og 1365 cm C. Pivalovloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l68- ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre

En opløsning af ovennævnte råprodukt (2,6 g) i ethanol (25 ml) blev omrørt ved 60-65°C i to timer. Vand (lOO ml) tilsattes, og blandingen ekstraheredes med ethylacetat (2 x 25 ml).

De samlede organiske faser vaskedes med vand, tørredes og inddampedes i vakuum til en gullig gummi. Denne rensedes ved kromatografi på silicagel (cyklohexaniethylacetat 85:15) og Sav 0,72 g af pivaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre som et farveløst skum.

D. l6-Peacetoxy-l68-ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre

Til en opløsning af ΐόβ-ethoxyesteren beskrevet ovenfor i ethanol (10 ml) sattes 5 N vandig natriumhydroxid (2 ml), og blandingen blev henstillet ved stuetemperatur natten over. Efter tilsætning af vand (50 ml) blev blandingen gjort sur med 4 N saltsyre og ekstraheret med ethylacetat (2 x 25 ml). De samlede organiske ekstrakter vaskedes med vand, tørredes og inddampedes i vakuum. Der opnåedes 0,52 g af et amorft stof, som krystalliserede ved tilsætning af ether. Krystallerne filtreredes fra, vaskedes med ether og tørredes, hvorved der vandtes 0,26 g 16-deacetoxy-l6p~ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre med smeltepunkt 189-191°C. To omkrystallisationer af ether gav et analytisk rent produkt med smeltepunkt 192-193°C.

v Eksempel 62

50 1439OS

λ l6-Deacetoxv-l6B-methoxv-24.25-dihydrofusidinsyre ,.,¾. A. Pivaloyloxymethylester af 3-Q-acetyl-l6-deacetoxy-l63-methoxy-24.25-dihydrofusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 61 A-C, men erstatte ethanol med methanol, fremstilledes piyaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-methoxy-24,25-dihydrofusidinsyre.

B, l6-Deacetoxy-l63-methoxy-24,25-dihydrofusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 6l D, men erstatte l6P-ethoxy derivatet med ΐδβ-methoxy derivatet, fremstilledes l6-deacetoxy-l63-methoxy-24,25-dihydrofusidinsyre med smeltepunkt 152-154°C.

Eksempel 6.3 l6-Deacetoxy-l63-propyloxyfusidinsyre A. Piyaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6g-methansulfonyloxyfusidinsyre

En opløsning af methansulfonylchlorid (4,6 ml) i methylen-chlorid (10 ml) blev ved -20°C dråbevis og under omrøring sat til en opløsning af rå piyaloyloxymethylester af 3-0-acetyl-l6-. epideacetylfusidinsyre (lO g) i en blanding af methylenchlorid (25 ml) og pyridin (25 ml) anbragt i en trehalset 250 ml kolbe forsynet med termometer, skilletragt og tørrerør. Efter at tilsætningen var afsluttet, blev blandingen omrørt ved -15°C i endnu 1,5 time og så henstillet i køleskab natten over. Der tilsattes is (5 g), og efter omrøring i 0,5 time blev blandingen hældt i vand (50 ml) og ekstraheret med ether (2 x 50 ml). De samlede organiske faser vaskedes med vand, h N saltsyre (for at fjerne pyridin), mættet vandig natriumchlorid, 0,5 M vandig natriumhydrogenkarbonat og igen mættet vandig natriumchlorid.

Derefter tørredes og inddampedes i vakuum, hvorved opnåedes 10,6 g rå piyaloyloxymethylester af 3~0-acetyl-l6-deacetoxy— l6a-methansulfonyloxyfusidinsyre som et gulligt amorft produkt.

Det ustabile produkt blev uden yderligere rensning brugt i næste trin.

IR (KBr): 1170 og 1355 cm”1

Ved at følge fremgangsmåden beskrevet ovenfor, men erstatte methansulfonylchlorid med p-toluensulfonylchlorid, fremstilledes den tilsvarende l6(X—p—toluensulfonyloxy-forbindelse.

3i 143905 B. l6-Deacetoxy-l6P-propyloxyfusidinsyre

Til en opløsning af rå pivaloyloxyraethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-methansulfonyloxyfusidinsyre (1,42 g) i propanol-1 (10 ml) blev sat triethylamin (0,28 ml), og blandingen omrørtes ved stuetemperatur i 42 timer. Efter fortynding med ethylacetat (4θ ml) blev blandingen vasket med vand, fortyndet saltsyre og igen med vand, tørret og inddampet i vakuum til 1,28 g af et amorft produkt. Denne remanens rensedes ved kromatografi på silicagel (petroleumsether:ethylacetat, 85:15) og gav 0,36 g pivaloyloxyraethylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6p-propyloxyfusidinsyre som et farveløst skum.

Esteren hydrolyseredes ved opløsning i ethanol (5 ml), tilsætning af 5 N vandig natriumhydroxid (l ml) og kogning under tilbagesvaling i to timer. Efter oparbejdning som beskrevet i eksempel 61 D vandtes den krystallinske l6-deacetoxy-l63-propyloxy-fusidinsyre med smeltepunkt 176-177°C.

Eksempel 64-68 l6-Deacetoxy-l6p-alkyloxyfusidinsyrer

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 63, men erstatte propanol-1 med alkoholerne vist i tabel XVI, fremstilledes l6-deacetoxy-l63-alkyloxyfusidinsyrerne vist i tabel XVI.

H„C CH

Tabel XVI: 3

k/COOH HO I

_J

I I ch3 H0'" CH3

Resulterendeforbindelser

Eksempel Alkohol R Smeltepunkt (°c) 64 Butanol-(1) CH2CH2CH2CH3 167-169 65 Isobutanol CH2CH(CH3)2 189-190 66 2-Methoxyethanol CH2CH20CH3 163-165 67 2-Chlorethanol CH^CH^Cl 158-159 68 Benzylalkohol CH2C6H5 113-H9 52 143305

Eksempel 69 l6-Deacetoxy-l68-(2 -azidoethoxy)fusidinsyre A. Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6|3-(2 -hydroxy-ethyloxy)fusidinsyre

Til en opløsning af phenacylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre (13»96 g) i en 1:1 blanding af ethylenglycolmono- og-diacetat (80 ml) blev sat sølvkarbonat (ll,03 g).Blandingen beskyttedes mod lys og omrørtes ved stuetemperatur i 3 døgn. Uopløst materiale filtreredes fra og vaskedes med ether (2 x 20 ml). Efter fjernelse af opløsningsmidlet fra det samlede filtrat og vaskeether ved reduceret tryk fortyndedes den flydende remanens med methanol (320 ml), og kaliumkarbonat (5,53 s) blev tilsat. Blandingen blev omrørt 30 minutter ved stuetemperatur og inddampet i vakuum. Den resterende olie opløstes i en blanding af ether (200 ml) og vand (200 ml).

Under omrøring gjordes blandingen sur med fortyndet saltsyre, den organiske fase skiltes fra, og vandfasen reekstraheredes med ether (lOO ml). De samlede organiske ekstrakter vaskedes med vand til neutral reaktion, tørredes og inddampedes i vakuum.

Den gullige amorfe rest rensedes ved kromatografi på silicagel (petroleumsether:ethylacetat, 6:4) og gav 5,54 g af det ønskede produkt som et farveløst amorft pulver, som ikke krystalliserede.

B. Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6g-(2 -bromethoxy) fusidinsyre

Phenacylester af 3-0-ηοβΐν1-ΐ6^βησβΐοχν-ΐ6β-(2 -hydroxy-ethyloxy)fusidinsyre (4,21 g) opløstes i dimethylformamid (25 ml), og der tilsattes phenyl-N,N-dimethylformimidatbromid (4,6 g), hvorefter blandingen blev omrørt i 16 timer ved stuetemperatur.

Efter fortynding med ether (lOO ml) vaskedes blandingen med vand (4 x 25 ml), og den organiske fase tørredes og inddampedes i vakuum. Den resterende olie rensedes ved kromatografi på silicagel (petroleumsether : ethylacetat , 85:15) og gav 3,16 g phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l66-(2 -bromethoxy)fusidinsyre som et amorft farveløst produkt.

C. Phenacylester af 3-0-acetyl-l6-deacetoxy-l6(3-(2 -azidoethoxy)-fusidinsyre

En opløsning af den ovennævnte phenacylester (l,o4 g) og lithiumazid (0,34 g) i dimethylformamid (20 ml) omrørtes i 16 53 143905 timer ved stuetemperatur. Blandingen fortyndedes derefter med ether (8θ ml), vaskedes med vand (4 x 20 ml), og den organiske fase tørredes og inddampedes i vakuum til et skum af det ønskede stof.

IR (KBr)s 2100 cm'^-N^).

D. l6-Peacetoxy-l68~(2 -azidoethoxy)fusidinsyre

Til en opløsning af phenacylesteren af 3-0-acetyl-l6-deacet-oxy-l6P-(2 -azidoethoxy)fusidinsyre(O,95 g) i ethanol (20 ml) sattes 5 N natriumhydroxid (2,7 ml), og blandingen omrørtes i 18 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet fjernedes i vakuum, og olieremanensen opløstes i vand (40 ml) og ekstraheredes med ether (20 ml). Den vandige fase skiltes fra, gjordes sur med fortyndet saltsyre, og den udfældede olie ekstraheredes to gange med ether. De kombinerede etherfaser vaskedes med vand, tørredes, og inddampedes. Derved opnåedes 0,8 g af et amorft produkt, som krystalliseredes af diisopropylether og gav 0,4l g 16-deacetoxy-ΐ6β~(2 -azidoethoxy)fusidinsyre med smeltepunkt 179-l82°C. To omkrystallisationer af samme opløsningsmiddel gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt 184-185°C.

Eksempel 70 l6-Deacetoxy-l6g-ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre A. Benzylester af l6-deacetoxy-l68-ethoxyfusidinsyre

Til benzylester af l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre (3,14) i ethanol (25 ml) blev sat sølvkarbonat (2,76 g), og under udelukkelse af lys omrørtes blandingen ved stuetemperatur i 16 timer.

Uopløst materiale frafiltreredes, vaskedes med ethanol (2 x 5 ml), og de samlede filtrat og vaskevæsker inddampedes i vakuum. Don amorfe rest rensedes ved kromatografi på silicagel (petroleumsether: ethylacetat, 6θ:4θ) og gav 1,66 g af det ønskede produkt som et farveløst skum.

B. 16 Peacetoxy-l68-ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre

Til en opløsning af benzylester af l6-deacetoxy-l63-ethoxy-fusidinsyre (l,2 g) i ethanol (20 ml) sattes 10$ palladium på kul katalysator (0,4 g), og blandingen rystedes i en hydrogen atmosfære i 4θ minutter. Katalysatoren frafiltreredes, vaskedes med ethanol, og det samlede filtrat og vaskevæske inddampedes i vakuum. Remanensen krystalliseredes af ether og gav 0,92 g 16-deacetoxy-l6p-ethoxy-24,25-dihydrofusidinsyre med smeltepunkt 191-192°C.

Eksempel 71 5b 143905 l6-Deacetoxv-l6i3-( 2* .2% ,2 -trifluorethoxy)-24.2 5-dilrydrofusidinsvre Til en opløsning af l6-deacetoxy-l6p-(2 ,2 ,2 -trifluorethoxy) fusidinsyre (278 mg) i 96% ethanol (5 ml) sattes X0% palladium på kalciumkarbonat katalysator (50 mg), og blandingen rystedes i en hydrogen-atmosfære i 20 minutter. Katalysatoren fra-filtreredes, vaskedes med 96% ethanol, og de samlede ethanolfa-ser inddampedes til tørhed i vakuum. Remanensen krystalliseredes af diisopropylether og gav 220 mg af det ønskede produkt med smeltepunkt 204-205°C. Omkrystallisation af samme opløsningsmiddel gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt 204-205°C.

Eksempel 12 l6-Peacetoxy-l68-(2 -fluorethoxy)-24.25-dihydrofusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 71» men erstatte l6—deacetoxy-l63~(2 , 2 ,2 -trifluorethoxy)fusidinsyre med l6-deacetoxy-l6p-(2 -fluorethoxy)-fusidinsyre, fremstilledes 16-deacetoxy-l6p-(2 -fluorethoxy)-24,25-dihydrofusidinsyre med smeltepunkt 180-182°C.

Eksempel 7 3 ll-Keto-l6-deacetoxy-l68-ethoxyfusidinsyre

Til en suspension af phenacylesteren af 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l6a-bromfusidinsyre (5»57 g) i ethanol (60 ml) blev sat sølvkarbonat (4,4l g) og under beskyttelse mod lys omrørtes blandingen i 18 timer ved stuetemperatur. Uopløst materiale frafiltreredes og vaskedes med ethanol (2 x 20 ml).

De samlede ethanolopløsninger indeholdende den rå phenacylester af 3-0-acetyl-ll-keto-l6-deacetoxy-l63-ethoxyfusidinsyre fortyndedes med ethanol (80 ml), 5 N vandig natriumhydroxid (32 ml) tilsattes, og blandingen blev omrørt i 20 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet fjernedes i vakuum, og til remanensen sattes vand (lOO ml) og ether (lOO ml). Under omrøring gjordes blandingen sur ved tilsætning af k N saltsyre. Den organiske fase skiltes fra, den vandige fase ekstraheredes igen med ether (lOO ml), og de kombinerede etherfaser vaskedes med vand til neutral reaktion. Derefter tørredes etherfasen, og etheren af-dampedes i vakuum. Den resterende olie rensedes ved kromatografi på silicagel (ether:petroleumsether:eddikesyre, 50:50:0,5), 55 143905 og det gullige amorfe produkt krystalliseredes af diisopropyl-ether og gav 2,12 g H-keto-l6-deacetoxy-l63-ethoxyfusidinsyre med smeltepunkt l66-l67°C. Omkrystallisation af ether-diiso-propylether gav det analytisk rene stof med smeltepunkt l67-l68°C.

Eksempel 74 ll-Keto-l6-deacetoxy-l63-(2 -fluorethoxy)fusidinsyre

Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 73> men erstatte ethanol med 2-fluorethanol, fremstilledes ll-keto-l6-deacetoxy-Ι6β—(2 -fluorethoxy)fusidinsyre som et farveløst amorft pulver, som kunne omdannes til et krystallinsk natriumsalt (se eksempel 86).

Eksempel 75 3,ll-Diketo-l6-deacetoxy-l63-ethoxyfusidinsyre

Til en opløsning af l6-deacetoxy-l63-ethoxyfusidinsyre (10,24 g) i acetone (200 ml) sattes Jones reagens (l2,0 ml) dråbevis ved 15°C. Efter at tilsætningen var afsluttet, fjernedes kølebadet, og blandingen omrørtes i 30 minutter ved stuetemperatur. Til blandingen sattes ether (jOO ml) og vand (200 ml), og omrøringen fortsattes i 13 minutter. Det organiske lag skiltes fra, den vandige fase ekstraheredes igen med ether (100 ml), og de samlede organiske ekstrakter vaskedes med vand til neutral reaktion, og tørredes. Etherfasen koncentreredes til ca. 100 ml, hvorved et farveløst produkt udkrystalliserede. Efter henstand i køleskab natten over samledes krystallerne, hvorved der vandtes 7,02 g 3,H-diketo-l6-deacetoxy-l63-ethoxyfusidinsyre med smeltepunkt l85-l87°C. Fra moderluden udkrystalliseredes yderligere 0,84 g. Omkrystallisation af methylenchlorid-diisopro-pylether gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt 187-188°C.

Eksempel 76 3-Keto-l6-deacetoxy-l63-ethoxyfusidinsyre

En blanding af 3,H-diketo-l6-deacetoxy-l63~ethoxyfusidin-syre (6,0,5 g), 2-ethyl-2-methyl-dioxolan(-1,3) (60 ml) og p-toluensulfonsyre (0,24 g) varmedes under tilbagesvaling på en elektrisk varmeplade i 40 minutter. Efter afkøling til stuetemperatur tilsattes ether (200 ml) og pyridin (0,5 ml), og blandingen vaskedes med vand (4 x 50 ml). Den organiske fase tørredes og inddampedes i vakuum til en gummi af den rå 3-ethylenketal af 56 143905 3,ll-diketosyre, som ikke krystalliserede.

Denne opløstes under omrøring i ethanol (l4o ml), og ved 5°C tilsattes portionsvis fast natriumborhydrid (2 g). Derefter fjernedes kølebadet, og blandingen omrørtes i 45 minutter ved stuetemperatur. Der neutraliseredes med eddikesyre, tilsattes vand (420 ml), og den olie, der fældede ud, blev ekstraheret med ether (2 x 150 ml). De samlede ekstrakter vaskedes med vand (4 x 25 ml), tørredes og inddampedes i vakuum. Olieremanensen krystalliserede af ether—diisopropylether og gav 3,12 g af 3-ethylenketalen af 3-keto-l6-deacetoxy-l6P-ethoxy-fusidinsyre med smeltepunkt l66-l69°C. Koncentrering af moderluden gav 2,04 g med samme smeltepunkt. To omkrystallisationer af methylenchlorid-diisopropylether gav det analytisk rene produkt med smeltepunkt 171-172°C.

En opløsning af ovennævnte stof (3»98 g) i methanol (4θ ml) blev gjort sur med 2 N saltsyre (2 ml) og blev tilbagesvalet i 20 minutter på dampbad. Efter afkøling tilsattes vand (l60 ml), og olien, der fældede ud, blev ekstraheret med ether (2 x 100 ml).

De organiske ekstrakter vaskedes med vand til neutral reaktion, tørredes, og inddampedes i vakuum. Den amorfe rest krystalliseredes af ether og gav 2,94 g 3-keto-l6-deacetoxy-l6p-ethoxy-fusidinsyre med smeltepunkt 175-177°C. Omkrystallisation af samme opløsningsmiddel gav smeltepunkt 177-179°^.

Eksempel 77 β-Diethylaminoethylester af l6-deacetoxy-l63-isopropylsulfinyl-fusidinsyre

Til en opløsning af natriumsaltet af l6-deacetoxy-l6P-iso-propylsulfinylfusidinsyre (320 mg) i 2 ml dimethylformamid blev sat β-(diethylamino)ethylchlorid (θ,θ8 ml). Ved henstand ved stuetemperatur i 5 timer udkrystalliserede det ønskede produkt.

Der tilsattes vand (5 ml), og produktet frafiltreredes, vaskedes og tørredes, hvorved 310 mg af det ønskede produkt isoleredes med smeltepunkt 156-158°C.

Eksempel 78

Acetoxymethylester af l6-deacetoxv-l68-isopropylsulfinylfusidinsyre Til en opløsning af natriumsaltet af l6-deacetoxy-l63-isopropylsulfinylfusidinsyre (320 mg) i 2 ml 57 143905 dime thy lf orm amid blev sat chlorine thylacetat (0,05 ml). Efter henstand i 24 timer ved stuetemperatur tilsattes ethanol (5 nil) og vand (5 ml) til udfældning af det ønskede produkt som farveløse krystaller, der frafiltreredes, vaskedes, og tørredes.

Der vandtes 290 mg med smeltepunkt 151-153°0· Omkrystallisation af ethylacetat-petroleumsether gav et smeltepunkt 1^2-l^k C.

Eksempel 79

Acetoxymethylester af l6-deacetoxy-l6B-isopropylthiofusidinsyre Ved at følge fremgangsmåden i eksempel 78, men erstatte l6-deacetoxy-l6p-isopropylsulfinylfusidinsyre med 16-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre fremstilledes acetoxymethylesteren af l6-deacetoxy-l63-isopropylthiofusidinsyre med smeltepunkt 77-83°C.

Eksempel 80-87

Natriumsalte af l6B-ethere, l6B-thioethere og l6g-alkylsulfinyl forbindelser af 16-deacetoxyfusidinsyre og dets 3- og 11-keto derivater

Krystallinske natriumsalte af forbindelserne beskrevet i eksempel 1, 33j 44, 46, 48, 73, 74 og 76 opnåedes med følgende fremgangsmåde: en opløsning af syren i methanol titreredes med 2 N methanolisk natriumhydroxid med phenolphthalein som indikator. Efter inddampning til tørhed i vakuum, blev remanensen optaget i acetone (ca. 100 ml). Opløsningen koncentreredes til ca. halvt rumfang, og ved skrabning krystalliserede det ønskede natriumsalt. Efter 2 timer ved stuetemperatur samledes krystallerne, vaskedes med acetone og tørredes, hvorved der opnåedes det rene natriumsalt af den ønskede forbindelse. Natriumsaltene er vist i tabel XVII. Mikroanalyse, IR-spektrum og NMR-data for disse stoffer er i overensstemmelse med deres struktur. Natriumsaltene smelter alle under sønderdeling.

Hvor der i tabellen er anført en værdi i parentes, angiver dette den omtrentlige temperatur, ved hvilken sønderdelingen begynder.

Tabel XVII; H^C CH^ 58 143905 l^AJOONa "2vJL-»3

CH. CH| I

jcdV

'ch3 2_ 2 o syre beskrevet Smeltepunkt

Eksempel R R A RJ i eksempel °C

80 H, cc-OH Η,α-ΟΗ S ChXch^J^ Ϊ 239-245 81 Η,α-ΟΗ Η,α-ΟΗ s o ch(ch3)2 33 175-180 82 Η,α-ΟΗ Η,α-ΟΗ 0 CH^H^ 44 >300 ( ca. 250) 83 Η,α-ΟΗ Η,α-ΟΗ o CH2CF3 k6 >280 (ca.24o) 8b Η,α-ΟΗ Η,α-ΟΗ O CHgCHgF 48 199-206 85 Η,α-ΟΗ o O ch2ch3 73 >300 (ca.250) 86 Η,α-ΟΗ O o CH2CH2F 74 189-203 87 o Η,α-ΟΗ O CH2CH3 76 >300 ( ca.260)

Eksempel 88

Kalitunsalt af l6-deacetoxy-l68-(2 -hydroxyethoxy)fusidinsyre

En opløsning af l6-deacetoxy-l6P-(2 -hydroxyethoxy)fusidinsyre (2,64 g, som hemihydrat) i methanol (lO ml) titreredes mod phenolphthalein med 2 N methanolisk kaliumhydroxid. Efter ind-dampning til tørhed i vakuum blev den amorfe rest opløst i methanol (2,5 ml). Acetone (60 ml) tilsattes, og blandingen koncentreredes til ca. 15 ml ved reduceret tryk. Farveløse krystaller fældede ud ved skrabning, filtreredes fra, vaskedes med acetone og tørredes. Der opnåedes 2,32 g af det ønskede stof med et smeltepunkt på 243-248° (under sønderdeling).

Claims (1)

1. 3 Y? 3 ' C00R'> I vb f \ [ CH, Q1i#yv^ 3 0H3 1 „ 1 H 2 i hvilken Q 1 star for Q eller en gruppe, R er en alkanoyl-, 2 aralkanoyl- eller en aroylgruppe, Q er som ovenfor defineret, Y 3 står for chlor, brom eller jod, og R^ står for en lige eller for- 6i U3906 grenet alkylgruppe med fra 1 til 6 carbonatomer, en aralkyl-, alkanoyl- eller aroylmethylgruppe, en alkanoyl- eller aroyl-oxy-alkylgruppe, en alkyloxymethyl- eller cyanomethylgruppe, omsættes med en forbindelse af formel VII: R -A-H, i hvilken R1 er som defineret ovenfor, og A står for oxygen eller svovl, hvorved dannes en forbindelse af formel VIII: H3C cn3 il* ^ J:*.y COOR-3 Q2 jT A-R1 c^4_f VI11 cb3 12 1 3 i hvilken Q Q , R og R er som ovenfor defineret, og A er oxygen eller svovl, hvilken forbindelse derefter om ønsket og om nødvendigt underkastes en hydrolyse til en fri syre af formel I, og en forbindelse af formel VIII eller I i hvilken A står for svovl om ønsket oxyderes til den tilsvarende forbindelse, hvor A står for en sulfinylgruppe, og hvor en fri syre om ønsket omdannes til det tilsvarende salt eller en lethydrolyserbar ester, hvor R har den ovennævnte betydning bortset fra H, eller hvor forbindelser, i hvilke Q1 2 H og/eller Q står for , om ønsket oxyderes til en forbindelse r ^ 2 af formel I, hvori Q og/eller Q er oxygen, eller hvor en forbin- 1 2 delse, i hvilken Q og Q er oxygen, om ønsket reduceres til en 1 2 forbindelse af formel I, hvori Q eller Q er , eller hvor en forbindelse af formel I, i hvilken der er en dobbeltbinding mellem C-2k og C-25, om ønsket hydrogeneres til en forbindelse med en enkeltbinding mellem C-24 og C-25, eller b) en forbindelse af formel IV H C CH3 J: ^ [ COOR3 Q2 J VV A ^ OH IV Crf3T CHJ ,Χυ1"· CH3 - 1Λ3905 62 12 3 1 hvilken Q · , Q og R er som ovenfor defineret, og OH-gruppen ved C ,ς er α-orienteret, omsættes med en phosphin og en forbin- delse: R SSR , hvorved der opnås en forbindelse af formel VXXI (som vist ovenfor), i hvilken A står for svovl, og R^ er en aryl- 12 3 gruppe, medens Q Q og R er som ovenfor defineret, hvilken forbindelse derefter omdannes til en forbindelse af formel I, som ovenfor beskrevet under a), eller c) en forbindelse af formel IV H C CH J'yCf J \ a-y I COOR3 „ T _/ OH IV i \ I CH, ch3 i hvilken hydroxylgruppen ved C-^ er α-orienteret, og 1 2 er som ovenfor defineret, men forskellig fra j·*-gruppen, omsættes med HU-" et reaktionsdygtigt derivat af en alkylsulfonyl- eller en arylsul-fonylsyre, hvorved dannes en forbindelse af formel IX: HV"3 :zy f 3 C0°R 2 1 5 IX ^^rV0R CBsl _J δΗ3 2 3 i hvilken Q , R og den stiplede linie mellem C^ og er som H*- ovenfor defineret, Q ’ står for oxygen eller gruppen Ώ2»^> , hvor 2 5. u- R er som ovenfor defineret, og R står for en alkylsulfonyl- eller arylsulfonylgruppe, og den dannede forbindelse derefter omsættes med en forbindelse R^-A-H, hvori R er som ovenfor defineret, og A er oxygen eller svovl til dannelse af en forbindelse af formel