DE3872998T2 - Test auf okkultes blut im stuhl. - Google Patents
Test auf okkultes blut im stuhl.Info
- Publication number
- DE3872998T2 DE3872998T2 DE8888308548T DE3872998T DE3872998T2 DE 3872998 T2 DE3872998 T2 DE 3872998T2 DE 8888308548 T DE8888308548 T DE 8888308548T DE 3872998 T DE3872998 T DE 3872998T DE 3872998 T2 DE3872998 T2 DE 3872998T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- test
- enhancing compound
- solution
- occult blood
- developing solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 38
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims description 23
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims description 23
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 241000147041 Guaiacum officinale Species 0.000 claims abstract description 15
- 229940091561 guaiac Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N hydrogen peroxide Substances OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- BSWWXRFVMJHFBN-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tribromophenol Chemical compound OC1=C(Br)C=C(Br)C=C1Br BSWWXRFVMJHFBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- TUAMRELNJMMDMT-UHFFFAOYSA-N 3,5-xylenol Chemical compound CC1=CC(C)=CC(O)=C1 TUAMRELNJMMDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- -1 acetylaminophen Chemical compound 0.000 claims description 4
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 4
- LHGVFZTZFXWLCP-UHFFFAOYSA-N guaiacol Chemical compound COC1=CC=CC=C1O LHGVFZTZFXWLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000010998 test method Methods 0.000 claims description 4
- 229940090248 4-hydroxybenzoic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- VPOMSPZBQMDLTM-UHFFFAOYSA-N 3,5-dichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1 VPOMSPZBQMDLTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GZFGOTFRPZRKDS-UHFFFAOYSA-N 4-bromophenol Chemical compound OC1=CC=C(Br)C=C1 GZFGOTFRPZRKDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229960001867 guaiacol Drugs 0.000 claims description 2
- 208000035861 hematochezia Diseases 0.000 claims description 2
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 claims description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N ethylparaben Chemical group CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 5
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-M 4-hydroxybenzoate Chemical class OC1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 3
- NXXYKOUNUYWIHA-UHFFFAOYSA-N 2,6-Dimethylphenol Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1O NXXYKOUNUYWIHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 2-naphthol Chemical compound C1=CC=CC2=CC(O)=CC=C21 JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- QJRWLNLUIAJTAD-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-3-methoxybenzonitrile Chemical compound COC1=CC(C#N)=CC=C1O QJRWLNLUIAJTAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- QFOHBWFCKVYLES-UHFFFAOYSA-N Butylparaben Chemical compound CCCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QFOHBWFCKVYLES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 235000010228 ethyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 claims 2
- 239000004403 ethyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 claims 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- WDNBURPWRNALGP-UHFFFAOYSA-N 3,4-Dichlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 WDNBURPWRNALGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- CVNOWLNNPYYEOH-UHFFFAOYSA-N 4-cyanophenol Chemical compound OC1=CC=C(C#N)C=C1 CVNOWLNNPYYEOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QPJVMBTYPHYUOC-UHFFFAOYSA-N Methyl benzoate Natural products COC(=O)C1=CC=CC=C1 QPJVMBTYPHYUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- UDEWPOVQBGFNGE-UHFFFAOYSA-N benzoic acid n-propyl ester Natural products CCCOC(=O)C1=CC=CC=C1 UDEWPOVQBGFNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 14
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 abstract description 6
- 238000009534 blood test Methods 0.000 abstract description 5
- 125000005274 4-hydroxybenzoic acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 8
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 8
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 7
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 2
- RDCNGTQRYYMDQT-UHFFFAOYSA-N BrC1=CC=C(C=C1)O.C(#N)C1=CC=C(C=C1)O Chemical compound BrC1=CC=C(C=C1)O.C(#N)C1=CC=C(C=C1)O RDCNGTQRYYMDQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MWXTWPRTZICJGL-UHFFFAOYSA-N COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1.CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1.CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1.CCCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1.CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1.CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1.CCCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 MWXTWPRTZICJGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000887 hydrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
- G01N33/725—Haemoglobin using peroxidative activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
- Diese Erfindung betrifft einen verbesserten Test auf okkultes Blut im Stuhl, der die Empfindlichkeit erhöht, wobei gleichzeitig die Spezifizität verbessert oder beibehalten wird. Genauer gesagt betrifft sie eine verbesserte Wasserstoffperoxid-Entwicklungslösung für Tests auf okkultes Blut im Stuhl.
- Probehüllen und Verfahren zum Nachweis von okkultem Blut im Stuhl sind bestens bekannt. Zum Beispiel beschreibt das U.S.Patent Nr. 3,996,006 Probehüllen mit einem Probenaufnahmeblatt zwischen einer vorderen und hinteren Platte, wobei die vordere und hintere Platte Öffnungen aufweisen, und mit schwenkbaren Abdeckungen oder Klappen zum Abdecken dieser Öffnungen. Eine solche Testhülle wird unter der Marke 'Hemoccult' verkauft.
- Das Probenaufnahmeblatt ist im allgemeinen ein absorbierendes Papier, welches mit einem Guajak-Reagens imprägniert ist. Die hämoglobin-katalysierte Oxidation des mit dem Guajakextrakt beschichteten Papiers wird klinisch zum Nachweis von okkultem Blut im Stuhl verwendet. Der Testablauf ist kurz beschrieben wie folgt.
- Eine Stuhlprobe wird auf das Guajakpapier durch eine Öffnung der vorderen Platte geschmiert. Die Platte wird dann abgedeckt und die Klappe der hinteren Platte wird geöffnet. Eine Entwicklungslösung, wie z. B. Wasserstoffperoxid, wird durch die entsprechende Öffnung in der hinteren Platte auf das Guajakpapier aufgetragen. Wenn Blut im Stuhl enthalten ist, färbt die Guajakreaktion das Papier blau. Die Gesamtreaktion ist wie folgt: Guajak H&sub2;O&sub2; Hämoglobin "Oxidiertes" Guajak Farblos Blaue Farbe
- Eines der Probleme, die bei diesem Test auftreten, ist die Anzahl von falschen negativen Befunden, nämlich negativen Testergebnissen in Proben von bekannten blutenden Patienten. Der Test ist nicht empfindlich genug, um geringere Blutmengen im Stuhl nachzuweisen.
- Ein weiterer Nachteil des Guajaktests besteht darin, daß andere hämogloginfreie, im Stuhl enthaltene Verbindungen, wie z. B. Peroxidasen, die in bestimmten Nahrungsmitteln vorhanden sind, auch die Oxidation von Guajak katalysieren und eine Blaufärbung bewirken. Dies führt zu einer falschen positiven Reaktion, nämlich einer positiven Reaktion ohne okkultem Blut im Stuhl.
- Es wurden bereits Versuche gemacht, die Empfindlichkeit dieses Hemoccult-Tests zu erhöhen. Oft wird vor dem Entwickeln eine Hydratation des Abstriches vorgenommen. Die Hydratation ergibt zwar einen empfindlicheren Test, die Methode beeinflußt jedoch die Spezifizität des Tests nachteilig. Es entstehen dabei nicht akzeptable hohe falsche positive Raten durch die Reaktion mit anderen störenden Substanzen, wie z. B. Gemüseperoxidasen.
- Ein Versuch, die störenden Einflüsse von Peroxidasenenzym bei einem Guajak-Peroxidasetest auf okkultes Blut im Stuhl durch die Verwendung eines Spaltmittels in Form einer Protein-Wasserstoff-Bindung, wie z. B. Guanidinhydrochlorid, und eines Metallchelators zu hemmen, wird in EP-A-0 111 916 beschrieben. Dieser Versuch schlägt vor, das Spaltmittel in einem Alkohol-Wasser-Lösungsmittel zu lösen, bevor das Reagens der zu testenden Probe beigegeben wird. Urea und Salicylsäure werden als alternative Spaltmittel vorgeschlagen, Salicylsäure ist jedoch nicht ausreichend löslich, um in der darin beschriebenen Weise zu wirken.
- Es ist deshalb Ziel dieser Erfindung, die Empfindlichkeit des Tests zu erhöhen und gleichzeitig die Spezifizität des laufend verwendeten Hemoccult-Tests zu verbessern oder beizubehalten. Das Erhöhen der Empfindlichkeit umfaßt das Nachweisen von geringeren Blutmengen im Stuhl und das Erreichen besserer Lesbarkeit, nämlich das Erreichen einer klareren und tieferen Blaufärbung bei gleichen Konzentrationen.
- Diese Erfindung umfaßt kurz gesagt eine verbesserte Entwicklungslösung zum Nachweis von okkultem Blut im Stuhl in einer Probe unter Verwendung einer guajakhältigen Testmatrix. Die Lösung umfaßt eine Alkohollösung von Wasserstoffperoxid und bestimmte Verstärkungsmittel. Der Entwickler ist im wesentlichen alkoholisch und enthält eine minimale Menge Wasser. Es wurde unerwarteterweise festgestellt, daß bei Zugabe dieser Verstärkungsmittel zur Entwicklungslösung ein intensiverer und besser lesbarer blauer Endpunkt entstand als in den laufend verwendeten Tests auf okkultes Blut. Weiters werden durch die neue erfindungsgemäße Lösung die labileren Peroxidasen abgebaut und gehemmt, die die Oxidation auch katalysieren und dieselbe Farbveränderung bewirken.
- Die in dieser Erfindung verwendeten Verstärkungsmittel umfassen Phenolverbindungen. Beispiele für solche Verstärkungsmittel sind Ester von Hydroxybenzoesäure, wie z. B. Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl, Benzyl, und Phenylparahydroxybenzoate. Vorzugsweise werden die niederen Alkylester von p-Hydroxybenzoesäure mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, auch als Paraben bekannt, in dieser Erfindung verwendet. Andere Beispiele für Verstärkungsmittel sind Phenol, Guajacol, p-Hydroxybenzoesäure, 3,5-Dimethylphenol, Methylsalicylat, 3,5-Dichlorphenol, p-Nitrophenol und p-Bromphenol. Das Verstärkungsmittel ist in einer Menge von 0,4 bis 20 Gew.% der Entwicklungslösung enthalten. Vorzugsweise ist das Verstärkungsmittel mit 1 bis 10 Gew.% des Entwicklers enthalten.
- Die Entwicklungslösung ist weitgehend alkoholisch. Der verwendete Alkohol kann irgendein niederes Alkanol sein, nämlich eines mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Der Alkohol ist in einer Menge von 60 bis 90 Gew.% des Entwicklers, vorzugsweise 70 bis 90 %, enthalten. Vorteilhaft wird Ethanol als Alkohol verwendet.
- Das stabilisierte Wasserstoffperoxid ist mit 1 bis 10 Gew.%, vorzugsweise 3 bis 6 Gew.%, der Entwicklungslösung enthalten.
- Wasser ist mit 7 bis 23 Gew.%, vorzugsweise mit 7 bis 14 Gew.%, der Entwicklungslösung enthalten.
- Tests wurden durchgeführt, um die Vorteile der neuen erfindungsgemäßen Entwicklungslösung im Vergleich zum herkömmlichen Entwickler zu zeigen, der bei Tests auf okkultes Blut verwendet wird. Bei diesen Tests wurden Stuhlproben mit verschiedenen Blutkonzentrationen beschickt. Vollblut in Mengen von 0, 0,2, 0,5 und 1 ml Blut wurden 100 gm Stuhl beigegeben. Meerrettichperoxidase wurde auch zum Zwecke dieser Studie Stuhlproben beigegeben. Die verwendete Farbbewertungsskala war wie folgt.
- SKALA= BESCHREIBUNG
- - keine blaue Farbe
- + Sehr schwach, kaum feststellbares (Spur) Blau. Blaue Farbe verblaßt rasch und verschwindet innerhalb von einer Minute.
- ++ Schwach blaue Farbe nach Entwicklung.
- +++ Deutlich blaue Farbe.
- ++++ Intensive blaue Farbe. Größere blaufarbige Bereiche.
- Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung.
- Standardhemoccult-Probehüllen enthaltend Stuhlabstriche beschickt mit Konzentrationen von Vollblut und Meerrettichperoxidase, wie im weiteren angeführt, wurden mit der im Handel erhältlichen Entwicklungslösung (4-6% Wasserstoffperoxid in 70% wäßriger Ethanollösung) entwickelt. Hydratisierte Proben wurden ebenfalls hergestellt, indem ein Tropfen Wasser dem Stuhlabstrich beigegeben wurde. Das Wasser ließ man in den Abstrich einsickern und die Entwicklungslösung wurde dazugegeben. Im weiteren werden die Ergebnisse dieses Tests gezeigt. TESTMETHODE BLUTPROBENMENGE MEERRETTICHPEROXIDASE Einheiten/g Hemoccult® hydratisiertes
- Die Ergebnisse zeigen klar, daß durch das Hydratisieren des Stuhlabstriches zwar die Testempfindlichkeit erhöht wird, seine Spezifizität jedoch stark beeinträchtigt wird, eine Empfindlichkeitszunahme wird nämlich von einer Abnahme der Spezifizität begleitet.
- Der Test des Beispiels 1 wurde wiederholt, wobei eine Entwicklungslösung enthaltend ein Verstärkungsmittel verwendet wurde und die Ergebnisse mit den Hemoccult- und hydratisierten Hemoccult-Probehüllen verglichen wurden. Die Formulierung der Entwicklungslösung war wie folgt:
- Wasserstoffperoxid - 4,0 % Gew.%
- Methylparaben * - 8,9 %
- Wasser - 8,8 %
- Ethanol - 78,3 %
- * Methylparahydroxybenzoat
- Man erhielt die folgenden Ergebnisse. TESTMETHODE BLUTPROBENMENGE MEERRETTICHPEROXIDASE Einheiten/g Hemoccult® hydratisiertes Methyl
- Die Ergebnisse zeigen, daß bei Zugabe eines Verstärkungsmittels, wie z. B. Methylparaben, zur Standardentwicklungslösung die Effizienz des Tests im Vergleich zum Standardhemoccult- und hydratisierten Hemoccult-Test verbessert wird. Bessere Empfindlichkeit und Spezifizität ergaben sich daraus, nämlich man erhielt ein negatives Ergebnis, wenn Peroxidase im Stuhl enthalten war.
- Tests wurden durchgeführt, um zu zeigen, daß das Verstärkungsmittel Methylparaben die Empfindlichkeit des Tests auf okkultes Blut im Stuhl erhöht, wenn es mit verschiedenen Lösungsmittelsystemen in Form von niedrigem Alkanol verwendet wird. Man erhielt die folgenden Ergebnisse. ENTWICKLERSYSTEM* BLUTPROBENMENGE MEERRETTICHPEROXIDASE VERWENDETES LÖSUNGSMITTEL METHYLPARABEN Einheiten/g Ethanol Methanol Isopropanol n-Propanol 2-Methoxyethanol * Bei Entwicklersystemen ohne Methylparaben trifft die folgende Zusammensetzung zu: 4% (Gew.%) H&sub2;O&sub2;, 8,8% (Gew.%) Wasser und 87,2% (Gew.%) Lösungsmittel. * Bei Entwicklersystemen mit Methylparaben trifft die folgende Zusammensetzung zu: 4% (Gew.%) H&sub2;O&sub2;, 8,8% (Gew.%) Wasser und 8,9% Methylparaben und 78,3 (Gew.%) Lösungsmittel.
- Die Ergebnisse zeigen klar, daß die Verwendung eines Verstärkungsmittels (Methylparaben) zu einem empfindlicheren Test in Lösungsmittelsystemen, in denen verschiedene niedrige Alkanole verwendet werden, führen. Die Spezifizität wird von allen Lösungsmittelsystemen beibehalten.
- Diese Tests liefern Daten für verschiedene Phenol- Verstärkungsmittel im Vergleich zu jenen, die für Standard- und hydratisierten Hemoccult verwendet werden. Ethanol war das Lösungsmittel, welches in diesen Entwicklungslösungen zusammen mit 0,5M Verstärkungsmittel, 4 Gew.% Wasserstoffperoxidase und 8,8% Wasser verwendet wurden. Man erhielt bei diesen Tests die folgenden Ergebnisse. VERWENDETE VERSTÄRKUNGSMITTEL* BLUTPROBENMENGE MEERRETTICHPEROXIDASE Einheiten/g Hemoccult® Hydratisiertes Methylparaben Ethylparaben n-Propylparaben n-Butylparaben Acetaminophen4-Hydroxy-3-methoxybenzonitril 2,4,6-Tribromophenol p-Hydroxydiphenol p-Nitrophenol Phenol Guajacol p-Hydroxybenzoesäure 3,5-Dimethylphenol 2,6-Dimethylphenol 3,5-Dichlorophenol 3,4-Dichlorophenol B-Naphthol p-Cyanophenol p-Bromophenol
- Diese Ergebnisse zeigen, daß bei Vorhandensein irgendeines der oben angeführten Verstärkungsmittel in der Entwicklungslösung im Vergleich zum Standard-Hemoccult- Test ein empfindlicherer Test entsteht. Der hydratisierte Hemoccult-Test führt zu einem empfindlicheren Test, verliert jedoch seine Spezifizität durch falsche positive Ergebnisse mit Meerrettichperoxidase.
- Zusammenfassend wird festgestellt, daß die Ergebnisse der oben erwähnten Tests, Beispiele 1-4, zeigen, daß durch die Verwendung der neuen erfindungsgemäßen Entwicklungslösung die Gesamteffizienz des Standardtests auf okkultes Blut im Stuhl (Hemoccult) stark verbessert wurde. Die Ergebnisse zeigen verbesserte Empfindlichkeit bei gleichbleibender oder verbesserter Spezifizität. Geringere Blutmengen wurden im Stuhl festgestellt. Die Proben mit gleichen Blutmengen wiesen eine bessere Lesbarkeit auf, nämlich stärkere Blaufärbung, als der Standard- Hemoccult-Test.
Claims (15)
1. Methode zum Testen auf okkultes Blut im Stuhl
durch Aufbringen eines Stuhlabstriches auf eine
guajakhältige, feste Testmatrix und dann
Kontaktieren der bestrichenen Matrix mit einer
Entwicklungslösung aus Alkohol-Wasserstoffperoxid,
dadurch gekennzeichnet, daß die Entwicklungslösung
eine phenolartige Verstärkungsverbindung enthält.
2. Methode nach Anspruch 1, worin die
Verstärkungsverbindung ausgewählt wird aus der Gruppe
bestehend aus Phenol, Guajacol, p-Hydroxybenzoesäure,
Acetylaminophen, 4-Hydroxy-3-methoxybenzonitril,
2,4,6-Tribromphenol, p-Hydroxydiphenol,
p-Nitrophenol, 3,5-Dimethylphenol, 2,6-Dimethylphenol,
Methylsalicylat, 3,5-Dichlorphenol,
3,4-Dichlorphenol, β-Naphthol, p-Cyanophenol, p-Bromphenol
und Ester der Hydroxybenzoesäure.
3. Methode nach Anspruch 1, worin die
Verstärkungsverbindung ein Ester der Hydroxybenzoesäure ist.
4. Methode nach Anspruch 1, worin die
Verstärkungsverbindung ein Parahydroxybenzoatderivat ist.
5. Methode nach Anspruch 4, worin das Derivat
ausgewählt wird aus der Gruppe bestehend aus Methyl,
Ethyl, Propyl und Butylparahydroxybenzoaten.
6. Methode nach Anspruch 5, worin das
Parahydroxybenzoat Ethylparahydroxybenzoat ist.
7. Methode nach einem der Ansprüche 1 bis 6, worin
der Alkohol ausgewählt wird aus der Gruppe
bestehend aus Methanol, Ethanol und Propanol.
8. Entwicklungslösung zur Verwendung in einer Methode
zum Testen auf okkultes Blut im Stuhl nach
Anspruch 1, wobei diese Lösung alkoholisches
Wasserstoffperoxid und eine phenolartige
Verstärkungsverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 6
enthält.
9. Lösung nach Anspruch 8 zur Entwicklung eines Tests
auf okkultes Blut im Stuhl unter Verwendung einer
Guajakmatrix, welche 1 bis 10 Gew.%
Wasserstoffperoxid, 0,4 bis 20 Gew.% einer
Verstärkungsverbindung, 60 bis 90 Gew.% Alkohol und 7 bis 23
Gew.% Wasser enthält.
10. Lösung nach Anspruch 8 oder 9 enthaltend einen
Alkohol, welcher ausgewählt wird aus der Gruppe
bestehend aus Methanol, Ethanol und Propanol.
11. Lösung nach einem der Ansprüche 8 bis 10, worin
die Verstärkungsverbindung ein Ester der
Hydroxybenzoesäure ist.
12. Lösung nach Anspruch 11, worin die
Verstärkungsverbindung ein Parahydroxybenzoatderivat ist.
13. Lösung nach Anspruch 12, worin die
Verstärkungsverbindung ausgewählt wird aus der Gruppe
bestehend aus Methyl, Ethyl, Propyl und
Butylparahydroxybenzoat.
14. Lösung nach Anspruch 13, worin die
Verstärkungsverbindung Ethylparahydroxybenzoat ist.
15. Test-Kit zum Nachweisen von okkultem Blut im
Stuhl, umfassend eine Testmatrix enthaltend
Guajak, und eine Entwicklungslösung enthaltend
alkoholisches Wasserstoffperoxid, dadurch
gekennzeichnet,
daß die Entwicklungslösung eine
phenolartige Verstärkungsverbindung nach einem der
Ansprüche 1 bis 6 enthält.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US9699587A | 1987-09-16 | 1987-09-16 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE3872998D1 DE3872998D1 (de) | 1992-08-27 |
| DE3872998T2 true DE3872998T2 (de) | 1993-03-11 |
Family
ID=22260152
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE8888308548T Expired - Lifetime DE3872998T2 (de) | 1987-09-16 | 1988-09-15 | Test auf okkultes blut im stuhl. |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5391498A (de) |
| EP (1) | EP0308227B1 (de) |
| JP (1) | JP2645429B2 (de) |
| AT (1) | ATE78602T1 (de) |
| CA (1) | CA1322326C (de) |
| DE (1) | DE3872998T2 (de) |
| ES (1) | ES2051861T3 (de) |
| GR (1) | GR3005552T3 (de) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5447868A (en) * | 1993-09-14 | 1995-09-05 | Propper Manufacturing Co. Inc. | Method, reagent and kit for the detection of fecal occult blood |
| US5948687A (en) * | 1996-06-05 | 1999-09-07 | Cleator; Iain G.M. | Device and method for screening fecal occult blood specimens |
| US5747344A (en) * | 1996-06-05 | 1998-05-05 | Cleator; Iain G.M. | Device and method for screening fecal occult blood specimens |
| US6436714B1 (en) | 1998-08-11 | 2002-08-20 | Diagnostica, Inc. | Self-contained system and method for testing for fecal occult blood |
| USD427320S (en) * | 1998-08-11 | 2000-06-27 | Diagnostica, Inc | Test kit housing |
| WO2002056029A2 (en) * | 2001-01-12 | 2002-07-18 | Helena Laboratories Corporation | Occult blood test enhancer |
| US6850633B2 (en) * | 2001-02-23 | 2005-02-01 | Beckman Coulter, Inc. | Devices and methods for reading and interpreting guaiac-based occult blood tests |
| US7189356B1 (en) | 2002-05-03 | 2007-03-13 | Diagnostica, Inc. | Occult blood testing apparatus with features for enhancing ease of use |
| CN2718561Y (zh) * | 2003-07-11 | 2005-08-17 | 艾康生物技术(杭州)有限公司 | 用于取样签的保护套 |
| US7427505B2 (en) * | 2004-07-22 | 2008-09-23 | Immunostics, Inc. | Fecal occult blood testing device and method |
| ATE437365T1 (de) * | 2004-07-22 | 2009-08-15 | Immunostics Inc | Probentestträger und verfahren zur prüfung von okkultem blut im stuhl |
| US8679420B2 (en) * | 2004-07-22 | 2014-03-25 | Immunostics, Inc. | Fecal sampling device and method |
| US20080241940A1 (en) * | 2004-07-22 | 2008-10-02 | Lastella Vincent P | Fecal sampling device and method |
| US7195878B2 (en) * | 2004-09-30 | 2007-03-27 | Cryo-Genomics | Device and method for fecal testing |
| US20060184144A1 (en) * | 2005-02-01 | 2006-08-17 | Leslie Goulden | Fecal specimen collectors |
| US20090117660A1 (en) * | 2005-04-30 | 2009-05-07 | Oakville Hong Kong Co., Limited | Devices and methods for sample collection and analysis |
| US8062901B2 (en) * | 2005-04-30 | 2011-11-22 | Alere Switzerland Gmbh | Devices and methods for sample collection and analysis |
| US20070092401A1 (en) * | 2005-10-26 | 2007-04-26 | Feier Liao | Devices and methods for sample collection and analysis |
| US7592181B2 (en) * | 2006-09-25 | 2009-09-22 | Diagnostica, Inc. | Occult blood testing device |
| US7556769B2 (en) * | 2006-11-10 | 2009-07-07 | Kevin Kikta | Fecal occult test packaging |
| US8304596B2 (en) | 2008-04-11 | 2012-11-06 | Immunostics, Inc. | Fecal sampling device and method |
| EP2394170B1 (de) | 2009-02-03 | 2015-04-01 | MDxHealth SA | Verfahren zum nachweis von kolorektalkarzinom |
| GB201107466D0 (en) | 2011-05-05 | 2011-06-15 | Loktionov Alexandre | Device and method for non-invasive collection of colorectal mucocellular layer and disease detection |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL126365C (de) * | 1963-06-24 | |||
| CS175782B1 (de) * | 1974-10-16 | 1977-05-31 | ||
| DE2716060C3 (de) * | 1977-04-09 | 1980-06-12 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Stabilisierte Schnelldiagnostica mit Oxydationsindikatoren |
| US4260393A (en) * | 1979-01-15 | 1981-04-07 | Technology Resources, Inc. | Method and combined test elements for detection of heme |
| US4247631A (en) * | 1979-01-31 | 1981-01-27 | Millipore Corporation | Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide |
| DE2906732C2 (de) * | 1979-02-21 | 1981-10-01 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Peroxidase |
| US4290773A (en) * | 1979-11-13 | 1981-09-22 | Miles Laboratories, Inc. | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers |
| US4333734A (en) * | 1980-01-18 | 1982-06-08 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Diagnostic device for fecal occult blood and method of use |
| ZA829434B (en) * | 1982-01-05 | 1984-05-30 | Hematec Corp | Home diagnostic aid and method for determining the presence of occult blood for use by the general public |
| ZA831268B (en) * | 1982-04-30 | 1984-10-31 | Hematec Corp | Home diagnostic aid and method for determining the presence of occult blood for use by the general public |
| US4486536A (en) * | 1982-05-28 | 1984-12-04 | Smithkline Diagnostics, Inc. | Specimen slide for occult blood testing |
| US4460684A (en) * | 1982-08-02 | 1984-07-17 | Miles Laboratories, Inc. | Ascorbate-resistant broad range glucose test composition, test device and method |
| US4493892A (en) * | 1982-12-20 | 1985-01-15 | Memorial Hospital For Cancer & Allied Diseases | Solvent system for peroxidase inhibitor reagent for fecal occult blood determinations |
| EP0355864A3 (de) * | 1984-03-15 | 1991-09-18 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Verfahren zur quantativen Bemessung von oxydativen Agenzien durch Verwendung von Triphenylmethanleucoverbindungen als Farbstoffe |
| US4828983A (en) * | 1986-07-10 | 1989-05-09 | Eastman Kodak Company | Use of phenols and anilines to increase the rate of peroxidase catalyzed oxidation of leuco dyes |
-
1988
- 1988-09-02 JP JP63221221A patent/JP2645429B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-09-02 CA CA000576386A patent/CA1322326C/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-15 EP EP88308548A patent/EP0308227B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-15 ES ES88308548T patent/ES2051861T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-15 AT AT88308548T patent/ATE78602T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-09-15 DE DE8888308548T patent/DE3872998T2/de not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-12-13 US US07/806,752 patent/US5391498A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-08-27 GR GR920401883T patent/GR3005552T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2051861T3 (es) | 1994-07-01 |
| EP0308227B1 (de) | 1992-07-22 |
| US5391498A (en) | 1995-02-21 |
| DE3872998D1 (de) | 1992-08-27 |
| GR3005552T3 (de) | 1993-06-07 |
| ATE78602T1 (de) | 1992-08-15 |
| EP0308227A1 (de) | 1989-03-22 |
| CA1322326C (en) | 1993-09-21 |
| JP2645429B2 (ja) | 1997-08-25 |
| JPS6473253A (en) | 1989-03-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE3872998T2 (de) | Test auf okkultes blut im stuhl. | |
| EP0037056B1 (de) | Verfahren und diagnostische Mittel zum Nachweis von Redox-Reaktionen | |
| EP0054689B1 (de) | Stabilisierte Zubereitung von Tetrazoliumsalzen | |
| DE2265122C2 (de) | Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin | |
| EP0068356B1 (de) | Mittel und Verfahren zum Nachweis von Wasserstoffperoxid oder Peroxidasen | |
| DE2843539C3 (de) | Testmittel zur Bestimmung einer oxydierenden Substanz | |
| US5310680A (en) | Test for fecal occult blood | |
| DE2833612B2 (de) | Mittel und Verfahren zur Bestimmung von Wasserstoffperoxyd | |
| EP0071730B1 (de) | Stabilisiertes Reagenz zum Nachweis von Wasserstoffperoxid | |
| DE1177851B (de) | Diagnostisches Mittel zur Bestimmung von Albumin in Fluessigkeiten | |
| EP0098562A1 (de) | Verfahren zur Bestimmung von direktem und Gesamt-Bilirubin sowie hierfür geeignetes Reagens | |
| DE3125667C2 (de) | Verfahren und Mittel zum Nachweis von Wasserstoffperoxid | |
| DE3137668A1 (de) | Verfahren zum testen auf vitamin b(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts) und testsatz zu seiner durchfuehrung | |
| EP0340511B1 (de) | Trägergebundenes mehrkomponentiges Nachweissystem zur kolorimetrischen Bestimmung esterolytisch oder/und proteolytisch aktiver Inhaltsstoffe von Körperflüssigkeiten | |
| DE4401754A1 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Eisen | |
| EP0125513A1 (de) | Verfahren und Reagens zur Bestimmung des Hämoglobin-Haptoglobin-Komplexes in Gegenwart von freiem Hämoglobin | |
| DE2906732B1 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Peroxidase | |
| DE2302721B1 (de) | Verfahren zur Bestimmung der Creatinkinase | |
| DE69111016T2 (de) | Zusammensetzung von Agenzien zum Nachweis einer Redox-Reaktion. | |
| DE3539772C2 (de) | ||
| DE2623087C3 (de) | Teststreifen zum Nachweis von Bilirubin | |
| DD211874A5 (de) | Verbesserter proben-teststreifen und testverfahren fuer okkultes blut | |
| EP0809709B1 (de) | Starter-kit | |
| DE69020783T2 (de) | Stabilisierung von Wasserstoffsuperoxyd in Tests. | |
| DE2163315C3 (de) | Verfahren zum Nachweis und/oder zur quantitativen Bestimmung saurer Prostata-Phosphatase in biologischen Flüssigkeiten |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8364 | No opposition during term of opposition |