DE2731306C3 - 9-Desacetyl- und 9-Desacetyl-9-epi-daunorubicin, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft Anthracycline der allgemeinen Formel (I)

worin X bedeutet.

Ferner betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung dieser Anthracycline, das über 9-Desacetyl-9-keto-N-trifluoracetyl-daunorubicin verläuft, welches ein neues, unerwartet stabiles Zwischenprodukt darstellt. Dieses Zwischenprodukt wird nach dem Verfahren gemäß Anspruch 2 hergestellt und weiter umgesetzt.

Im nachstehenden Schema wird 13-Dihydrodaunorubicin (B) (DE-OS 22 02 690) in 9-Desacetyl-9-keto-N-trifluoracetyldaunorubicin (D) überführt.

In obigem Schema wurde das Diol (B) an der Aminogruppe des Zuckerrestes geschützt. Die N-Trifluoracetylgruppe ergab den gewünschten Schutz und konnte unter milden Bedingungen, die den übrigen Teil des Anthracyclinmoleküls nicht angreifen, entfernt werden. Die N-Trifluoracetylierung wurde durch Behandlung mit Trifluoracetanhydrid und nachfolgende Hydrolyse der O-Trifluoracetylgruppe mit Methanol durchgeführt, wobei das geschützte Derivat (C) in 74%iger Ausbeute erhalten wurde. Die Oxydation des Derivates (C) erfolgte in tert.-Butylalkohol mit 2 Äquivalenten Natriumperjodat bei Raumtemperatur während 2 Stunden. Das geschützte Daunorubicin (D), das in der Reaktionsmischung unlöslich ist, wurde in etwa 50%iger Ausbeute erhalten. Die Verbindung (D) wurde durch Behandlung mit Natriumcyanoborhydrid (NaBH[tief]3CN) unter sauren Bedingungen in eine epimere Mischung der Verbindungen (E) und (F) in ungefährem Verhältnis 8 : 1 übergeführt. Die Trennung dieser Verbindungen durch Chromatographie auf einer Kieselsäuresäule und nachfolgende milde alkalische Behandlung zur Entfernung der N-Trifluoracetylschutzgruppe ergab 9-Desacetyldaunorubicin (G) und 9-Desacetyl-9-epi-daunorubicin (H), die als Hydrochloride isoliert wurden.

Die neuen Verbindungen G und H zeigen antimitotische Wirksamkeit. Die Erfindung betrifft daher auch die Verwendung der Verbindungen nach Anspruch 1 bei der Bekämpfung von Tumorerkrankungen.

Beispiel

Eine Suspension von 2,8 g 13-Dihydrodaunorubicin (B) in 300 ml Chloroform wurde bie 0°C 1 Stunde lang mit 20 ml Trifluoracetanhydrid behandelt. Die Reaktionsmischung wurde im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde in 200 ml Methanol gelöst und mit einer wäßrigen gesättigten Natriumbicarbonatlösung neutralisiert. Nach 30 Minuten bei Raumtemperatur wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und die wässerige Lösung mit Chloroform extrahiert, bis die Extrakte nicht mehr gefärbt waren. Die organische Phase wurde mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, auf ein Volumen von 30 ml eingeengt und mit überschüssigem Petroläther gemischt, wobei 2,3 g reines N-Trifluoracetyl-13-dihydrodaunorubicin C erhalten wurden, Fp. 164 bis 166°C (Zers.); Dünnschichtchromatographie auf Merck Kieselgel 60 F[tief]254 unter Verwendung eines Chloroform-Aceton-Lösungsmittelsystems (2 : 1 V/V) : Rf 0,25.

Eine Lösung von 2,4 g der Verbindung (C) in 120 ml tert.-Butylalkohol wurde mit 1,6 g Natriumperjodat, gelöst in 120 ml Wasser, behandelt. Die Reaktionsmischung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die ausgefällte Verbindung D wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 1,4 g reine Verbindung D erhalten, Fp. 200°C (Zers.); Dünnschichtchromatographie auf Merck Kieselgel 60 F[tief]254 unter Verwendung eines Chloroform-Aeton-Lösungsmittelsystems (2 : 1 V/V) : Rf 0,57.

Analyse:

Berechnet für C[tief]27H[tief]24F[tief]3NO[tief]10:

H 4,18, C 55,9%

gefunden:

H 4,26, C 55,6%.

Eine Lösung von 1,7 g der Verbindung (D) in 250 ml Dioxan und 50 ml Wasser wurde mit wäßriger 1 N Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt und mit 1 g Natriumborhydridcyanid (NaBH[tief]3CN) 24 Stunden bei Raumtemperatur behandelt, wobei die sauren Bedingungen durch Zusetzen von 1 N Salzsäure aufrechterhalten wurden. Die Reaktionsmischung wurde mit 300 ml Wasser gemischt und fünfmal mit je 200 ml Chloroform extrahiert. Die mit Wasser gewaschene und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknete organische Phase wurde im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand (1 g), der die Verbindungen (E) und (F) enthielt, wurde auf einer Silikagelsäule unter Verwendung von Chloroform mit steigenden Mengen Aceton als Eluierungsmittel chromatographiert, wobei 0,85 g der reinen Verbindung (E), Fp. 204 bis 206°C (Zers.); Dünnschichtchromatographie auf Merck Kieselgel 60 F[tief]254 unter Verwendung eines Chloroform-Aceton-Lösungsmittelsystems (2 : 1 V/V) : Rf 0,44, und 0,1 g der reinen Verbindung F, Fp. 180 bis 182°C (Zers.) Rf unter den gleichen Bedingungen wie bei der Verbindung E : 0,3, erhalten wurden. Um die N-Trifluoracetylgruppe zu hydrolysieren, wurden die Verbindungen E und F wie folgt behandelt: 50 ml 0,1 N Natriumhydroxyd wurden zugesetzt nach 30 Minuten bei 0°C wurde der pH-Wert mit 0,1 N Salzsäure auf 8,4 eingestellt und die Lösung wiederholt mit Chloroform gewaschen. Die vereinigten Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum auf ein Volumen von 20 ml eingedampft. Die Lösung ergab bei Zusetzen der stöchiometrischen Menge an methanolischem Chlorwasserstoff und Diäthyläther einen roten Niederschlag, der gesammelt, mit Diäthyläther gewaschen und im Vakuum getrocknet wurde. Die Verbindung (G) hatte einen Fp. von 166 bis 167°C (Zers.); [kleines Alpha][hoch]25[tief]D 282° (c=0,15 in Methanol); Dünnschichtchromatographie auf Kieselgelplatten F[tief]254 (Merck) mit einem Chloroform-Aceton-Lösungsmittelsystem (13 : 6 : 1 V/V) : Rf 0,55.

Analyse:

Berechnet für C[tief]25H[tief]27NO[tief]9 x HCl:

H 5,42, C 57,52, N 2,68%

gefunden:

H 5,45, C 57,16, N 2,42%

Die Verbindung H hatte einen Fp. von 176°C (Zers.)

Rf unter den gleichen Bedingungen wie für die Verbindung G: 0,4.

Tabelle 1

Aktivität von Doxorubicin (NSC 123127), 9-Desacetyidaunorubicin (G) (NSC 268708) und 9-Desacetyl-9-epi-daunorubicin (H) (NSC 268709) auf P 388 Lymphotenleukämie bei männlichen C.D.F. Mäusen (Tumorinoculum 10[hoch]6 Zellen, i.p.). Behandlung i.p. vom 1. bis zum 9. Tag[hoch]a)

Tabelle 1 Fortsetzung

Claims (3)

1. 9-Desacetyl- und 9-Desacetyl-9-epi-daunorubicin der allgemeinen Formel (I)

in der X oder bedeutet.

2. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man N-Trifluoracetyl-13-dihydrodaunorubicin der Formel (C)

in tert.-Butylalkohol mit zwei Äquivalenten Natriumperjodat bei Raumtemperatur zwei Stunden oxydiert, das so erhaltene 9-Desacetyl-9-keto-N-trifluoracetyldaunorubicin der Formel (D)

mit Natriumcyanoborhydrid unter sauren Bedingungen bei Raumtemperatur 24 Stunden reduziert, das so erhaltene epimere Gemisch der N-Trifluoracetylderivate von 9-Desacetyldaunorubicin und 9-Desacetyl-9-epidaunorubicin durch Chromatographie auf einer Silikagelsäule unter Verwendung von Choroform mit zunehmenden Mengen Aceton als Eluierungsmittel trennt und die N-Trifluoaracetylgruppe der einzelnen epimeren Verbindungen mit 0,1 N Natriumhydroxyd während 30 Minuten bei 0°C abspaltet und die freien Basen der allgemeinen Formel (I) als Hydrochloride isoliert.

3. Verwendung der Verbindungen nach Anspruch 1 bei der Bekämpfung von Tumorerkrankungen.