DE2327870C2 - Verfahren zur Herstellung eines mit 99↑m↑ Tc markierten Phosphat-Zinn-Komplexes zur Szintigraphie - Google Patents
Verfahren zur Herstellung eines mit 99↑m↑ Tc markierten Phosphat-Zinn-Komplexes zur SzintigraphieInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines mit 99" Technetium (Tc) markierten Phosphat-IS
Zinn-Komplexes auf der Grundlage von Natrium-Pyrophosphat und Zinn-II-chlorid als medizinisch-diagnostisches
Mittel zur Szintigraphie, besonders des Knochensystems, sowie dessen Verwendung als intravenös
injizierbares Diagnosemittel zur Szintigraphie.
gesucht sind. Dieses Isotop ist ausgehend von 99 Mo leicht erhältlich und weist eine qualitativ günstige Strahlung
mit einer y-Energie von 140 keV und einer kurzen Periode von 6 Stunden ohne Aussendung von ^-Strahlen
auf. Man kann damit eine gute Präzision der Diagnose, eine für den Patienten annehmbare Dosis und leichte
Gegenwärtig wird das 99"1Tc zur Untersuchung verschiedener Organe, wie Schilddrüsen, Gehirn, Leber, Milz,
Nieren und des Reticuloendothelsystems benutzt Zu diesem Zweck führt man das Isotop in den Organismus
zusammen mit einer Verbindung ein, die im Hinblick auf ihren Tropismus und ihre besonderen biologischen
Eigenschaften gewählt ist
Nach den Ergebnissen neuerer Untersuchungen [vgl. G. Subramanian u. a., 99mTc Polyphosphate PP 46 : A
new radiopharmaceutical for skeletal imaging - Journal of Nuclear Medicine, vol 12 (1971), S. 399/400] ist es
möglich, zur Szintigraphie mit 99" Tc markierte Polyphosphate zu verwenden. Von diesen feeben bestimmte
Produkte, wie das Triphosphat und bestimmte Polyphosphate mit einem Molekulargewicht von 4600 gute
Ergebnisse, nicht jedoch das zweibasische Phosphat und das Fluorophosphat, welche einen mittelmäßigen
Tropismus zeigen.
Die Markierung erfolgt, indem man zu einer Pertechnetatlösung eine frisch hergestellte Lösung von Zinn-II-chlorid
in verdünnter Salzsäure gibt, 3 bis S Minuten rührt, eine Polyphosphatlösung zugibt, wiederum gut
rührt, den pH-Wert durch Zugabe einer Natriumhydroxid- oder natriumbicarbonatlösung auf etwa 7,5 einstellt
und die Lösung dann steriiisert, indem man sie durch ein Membranfllter mit 0,2 um PorengröBe in eine zuvor
sterilisierte leere Flache filtriert
Dieses Markierungsverfahren hat mehrere Nachteile. Es ist kompliziert, liefert eine schlecht haltbare Lösung
und erfordert im Augenblick der Verwendung des Produkts eine Mehrzahl von Arbeitsgängen, die nur schwer
oder unmöglich unmittelbar vor der Injektion der Lösung in den Körper des Patienten durchgeführt werden
können.
Man hat beispielsweise nicht stets frisch herstelltes Zinn-II-chlorid zur Verfugung und die Zahl der erforderlichen
aufeinanderfolgenden Arbeitsgänge, Zugabe der Reagenzien, Rühren und Einstellungen des pH-Wertes
erschweren die Herstellung des Diagnosemittels.
Durch die Erfindung soll nun ein Verfahren zur Herstellung eines mit 99™ Tc markierten Phosphat-Zinn-Komplexes
zur Szintigraphie geschaffen werden, das von diesen Nachteilen frei ist und von einem neuen Grundgedanken
zur Radio-Markierung von Produkten ausgeht, der gegenwärtig Eingang in die pharmazeutische
Radiochemie findet Danach stellt man die Mitte! inaktiv («kalt»), ohne die Markierungssubstanz her und fügt
letztere erst im letzten Augenblick vor der Anwendung zu.
Die gestellte Aufgabe wird erfindungsgemäß gelöst durch ein Verfahren mit den im Patentanspruch 1 angegebenen
Merkmalen.
Die Lyophilisierung der neutralisierten Mischung der Lösungen erfolgt besonders unter Vakuum oder Argon.
Das 99" Tc wird vorzugsweise in Form des Natriumpertechnetats verwendet. Man erhält so ein intravenös
injizierbares Diagnosemittel zur Szintigraphie.
Für die praktische Brauchbarkeit des erfindungsgemäß hergestellten Diagnosemittels ist es sehr wesentlich,
daß der in der ersten Stufe erfindungsgemäß hergestellte Natriumpy rophosphat-Zinn-Komplex bei dem angegebenen
pH-Wert von etwa 6,3 über längere Zeit lagerfähig ist, und zwar sowohl als Lösung wie insbesondere nach
Lyophylisierung im Vakuum oder unter Argon. Damit ist eine wesentliche Voraussetzung für die problemlose
Lagerung vorbereiteter Packungen gegeben, denen vor der Verwendung die radioaktive Tc-Markierung beigefügt
wird, worauf mit Hilfe dieser «Einstufen-Packung» durch einen einzigen Verfahrensschritt, nämlich die
einfache Vermischung der Tc-Markierungslösung mit der Na-Pyrophosphat-Zinn-Komplexlösung oder deren
Lyophylisat das markierte intravenös injizierbare Diagnosemittel gebrauchsfertig erhalten wird.
Das so erhältliche Diagnosemittel weist auch wesentlich bessere diagnostische Eigenschaften als das
bekannte Diagnosemittel mit 99™ Tc-markiertem Polyphosphat-Zinn-Komplex auf, nämlich eine um Zehnerpotenzen
höhere Oberflächenaktivität des Rückenmarkkanals (mCi/cm2), wie sich aus den Untersuchungsergebnissen am Schluß der Beschreibung ergibt.
Herstellung eines Phosphat-Zinn-Komplexes auf der Basis von Na-Pyrophosphat und die beiden anderen Beispiele
auf die Herstellung von gebrauchsfertigen Diagnosemitteln beziehen.
Man gibt nacheinander in ein Gefäß eine Lösung, die 100 mg Na-Pyrophosphat Na2HzPiO? in 2 ml Wasser enthält,
und eine frisch hergestellte Lösung von Zinn-II-chlorid, welche 1,2 mg SnCh, 2H2O in 0,5 N-HCl enthält,
neutralisiert mit Natriumhydroxid bis auf einen pH von 6,5, und fügt dann 5 ml einer Lösung von Na TcO4 in
einem 9 %o NaCl enthaltenden Milieu zu, rührt 5 Minuten lang und Gltriert zum Steriiisieren durch ein Filter
mit Mikroporen (Membranfilter). Durch Chromatographie auf Papier im Milieu Methanol-Wasser 85% läßt sich
zeigen, daß die Markierungsausbeute 90% beträgt
Man stellt zwei Lösungen her, nämlich eine Lösung A, weiche 3 g Natriumpyrophosphat Na4P2O?,10 H2O
gelöst in 60 ml kochendem Wasser enhält, und eine Lösung B, die 0,6 g SnCh, 2 H2O in 500 ml 0,5 IN-HCl im
siedenden Wasser hergestellt, enthält. Umter einem Inertgasstrom gibt man zu 30 ml der Lösung B die Gesamtmenge
der Lösung A und rührt während 5 Minuten, worauf man mit 5 N NaOH auf pH 6,3 neutralisiert Die
erhaltene Lösung enthält so etwa 100 mg Na4PaOy, 10 H2O und 1,2 mg Sn Ch, 2 H2O auf 3 ml.
Man verteilt apf 30 sogenannte Penicillinfläschchen je 3 ml dieser Lösung. Diese Fläschchen werden dann im
Lyophylisator behandelt, um den Inhalt in Pulverform zu verwandeln, und werden verschlossen aufbewahrt, bis
zum Augenblick der Markierung mit dem 99" Tc.
Zum Markieren gibt man zum Inhalt jedes Fläschchens 5 ml der durch Elution des Generators auf der Grundlage
von 99 Mo erhaltenen Lösung von Na TcO4 in einem Milieu von 9%o NaCl, rührt 5 Minuten lang und
filtriert durch ein Mikroporenfilter (Membranfilter).
Die Prüfung der erfolgten Markierung wie im Beispiel 1 lieferte für Fläschchen, fjie jeweils 1—5—11-15—19
Tage gelagert waren eine Ausbeute von 97-97-98-98,5 bzw. 92%.
Man verfährt naJq dem Beispiel 2, führt jedoch die Lyophylisierung der 30 «Penicillin»-Flaschchen statt im
Vakuum unter Argon durch Die ucch Lagerung der Fläschchen für 1 —5—11 — 15—19 und 29 Tage erhaltene
Markserungsausbeute lag jeweils bei 91-94-95,2-93,7-91-91%.
Für alle in den drei Beispielen angc-^benen Markierungen wurde die Szintigraphie an Ratten vorgenommen
und lieferte in allen Fällen ähnliche Ergebnisse.
Untersuchungen an 99™ Tc-markierten Zinn-Na-Pyrophosphat-Komplexen
I. Lagerfähigkeit (Stabilität) des erfindungsgemäß zur Markierung verwendeten Phosphat-Zinn-y^omplexes
Die Markierung wurde durch Papierchromatographie überprüft. Tatsächlich erlaubt eine solche Methode nur
das Verschwinden des Pertechnetats im freien Zustand ijid nicht die Stoffmarkierung an sich zu messen. Da
jedoch die Abwesenheit von Pertechnetat eine kritische Bedingung für eine Einstufen-Packung (für ein Einstufen-Verfahren
bestimmte Packung) ist, und weil die Methode zeitsparend und ohne besondere Bedingungen
reproduzierbar ist, ist sie für Routinekontrollen brauchbar.
Die in der folgenden Tabelle I angegebenen Ergebnisse wurden mit dieser Analysemethode erhallten. Es sei
bemerkt, daß die in einer Stickstoffatmosphäre aulbewahrte Zinn-Na-Pyrophosphat-Lösung recht stabil ist, da
die Markierungsausbeute 60 Tage nach der Herstellung keine Verringerung zeigt, ''/as den Gedanken nahelegt,
daß diese Lösung weitaus länger als 60 Tage verwendbar bleibt.
Andererseits wurde beobachtet, daß eine ähnliche Lösung, die steril in Luft gehalten wurde, sich durch Oxida- so
tion rasch veränderte. Fs wurden 11,12,45 und 91% Pertechnetat nach 1,5,11 bzw. 15 Tagen zurückgewonnen.
Tabelle 1 gibt an, wie stabil die erfindungsgemäße Zinn-Na-Py tophosphatpackung nach einer Zeitdauer von 1
bis 60 Tagen sowohl in der Lösungsform (Spalte 1) wie in der lyophylisierten Form (Spalte 2) ist. Die Aktivität ist
angegeben in Prozent Tc nach 15 Minuten, 2 Stunden bzw. 24 Stunden nach der radioaktiven Markierung.
Die angegebenen Prozentzshlen beziehen sich auf den nicht komplexgebundenen Anteil des 99"1Tc, das heißt
die Ergebnisse sind um so besser, je kleiner die Zahlenwerte sind. Tabelle I zeigt deutlich, daß eine 60 Tage
zuvor hergestellte Packung noch durchaus wirksam ist und ihre Aktivität keine Verringerung gegenüber der im
Augenblick der Herstellung zeigt.
Die folgenden Untersuchungsergebnisse wurden durch klinische Tierversuche mit den erfindungsgemäß hergestellten
99" Tc-markierten Zinn-Na-Pyrophosphat-Komplex-Diagnosemitteln im Vergleich mit Diagnosemitteln
auf der Grundlage des bekannten Polyphosphatkomplexes in der Knochenszintigraphie erhalten. Die
Untersuchung erfolgte 2 Stunden bzw. 4 Stunden nach der intravenösen Injektion. Die folgende Tabelle II zeigt
die überraschenden erheblichen Vorteile des erfindungsgemäßen Diagnosemittels.
Stabilität der in »Einstufen-Packungen« enthaltenen Zinn-Na-Pyrophosphat-Komplex-Lösung
Anzahl Tage nach Herstellung der Packimg |
Prozent nicht im Komplex Komplex in Lösung 15 Min. 2 Std. |
0,5 | gebundenes TCO4, zu 24 Std. |
bestimmten Zeiten nach der Markierung lyophylisierter Komplex 15 Min. 2 Std. 24 Std. |
- |
1 | 0,2 | - | 0,5 | 0,1 0,5 | - |
8 | 0,5 | 0,6 | - | - | 0,6 |
13 | 0,3 | - | 0,6 | 0,3 0,5 | - |
23 | 0,4 | 0,6 | - | 0,1 | - |
40 | 0,8 | 1,7 | 04 | 0,1 0,1 | |
60 | 0,5 | — | 0,2 0,5 | ||
TabeUe Π | 2 Stunden | ||||
Polyphosphat markiert mit 99"Tc |
4 Stunden | Pyrophospbat markiert mit 99"Tc |
|||
Oberflächen aktivität (mCi/cm2) |
Pyrophosphat markiert mit 99"1Tc |
Polyphosphat markiert mit 99mTc |
Knochen 3,67
Rückenmarkskanal 85,5
4,9 111
3,83 63,7
5,83 79,3
Claims (2)
1. Verfahren zur Herstellung eines mit 99" Technetium markierten Phosphat-Zinn-Kompiexes zur
Szintigraphie, besonders des Knochensystems, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Lösung von
S Na-Pyrophosphat und eine frisch hergestellte Lösung, von Zinn-E-chlorid mischt, die auf einen pH-Wert von
6,3 neutralisierte Mischung iyophylisiert und das so erhaltene Pulver vor Gebrauch mit einer 99" Tc enthaltenden
Lösung mischt
2. Verwendung des nach Anspruch 1 hergestellten Produktes als intravenös injizierbares Diagnosemittel
zur Szintigraphie.
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