DE2310031B2

DE2310031B2 - 1 -Benzyl-1 H-indazol-3-carbonsäuren, -amide und -ester

Info

Publication number: DE2310031B2
Application number: DE2310031A
Authority: DE
Inventors: Giuseppe Palazzo; Bruno Silvestrini
Original assignee: Aziende Chimiche Riunite Angelini Francesco ACRAF SpA
Current assignee: Angelini Acraf SpA
Priority date: 1972-02-29
Filing date: 1973-02-28
Publication date: 1979-11-15
Also published as: NL7302669A; US3895026A; DE2310031A1; NL179729B; NL179729C; FR2181773A1; HU165172B; DE2310031C3; GB1381422A; IT1052111B; CA994347A; FR2181773B1; IN139264B

Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sieh auf eine Klasse substituierter ! Benzyl-1 H-indazol-3-carbonsäuren,-amide und -ester,der Formel

N
N

CH,

I κ.

Tabelle

worin

Ri R. Rj

H, F, Cl, Br, I oder CH₁;

Cl, Br oder CH₁;

H und Cl;

OH,OCH(CH.OH),,

OCH.CH(OH)CH.OH oder NH.

bedeuten.

Die erfindungsgeniäßen Verbindungen haben eine

in antispermatogene Wirkung.

Die Untersuchungen zur antispermatogenen Wirkung wurden an männlichen Rauen (Long-Evans) mit einem Gewicht von 90—15Og und einem A-ter von 34 bis 45 Tagen durchgeführt. Die Testverbindung waren in

ι ί einer O,5°/oigen Lösung von Methylcellulose suspendiert, wovon IO ml/kg verabreicht wurden; im Kontrollversuch erhielten die Ratten die gleiche Menge der Lösung ohne die entsprechenden Verbindungen. Nc-Ii 5 Tagen wurden die Tiere gewogen, durch Ätherasphyxie

jo getötet, ihre Testikcl entfernt und gewogen. Wenn das Gewicht dieser Organe im Vergleich zu den Kontrollen signifikant reduziert war, wurden diese fixiert, in Paraffinwachs eingebettet, Schnitte von 6 μ Dicke hergestellt und mit Hämatoxylm und Eosin zur

_>-> mikroskopischen Untersuchung angefärbt. Die antispermatogene Wirkung der Testsubstanzen wurde bestimmt aufgrund der statistisch signifikanten Gewiehtsreduktion der Testikel und deren histologischer Beschaffenheit.

in Zur Bestimmung der anlispermatcgenen Wirkung wurde die minimale wirksame Dosis (MED) folgendermaßen ermittelt:

|ede Verbindung wurde in einer Dosis verabreicht, die äquimolekular zu 400 mg/kg p. o. der Verbindung I

i". war. Wenn sich diese Dosis als wirksam erwies, wurde die Hälfte davon verabreicht; dies wurde solange fortgeführt, bis die inaktive Dosis gefunden wurde; die Dosis die unmittelbar darüber liegt, ist die minimale wirksa-ne Dosis (MFD). Für jede Dosis wurden

in mindestens IO Versuchstiere verwendet. Die TcMsubstanzcn wurden pro Versuchstier nur einmal verabreicht.

Chemische Daten und antispermatogene Wirkung von I ll-lnda/ol-Derivaten

-substituierten

,ι C R

I Ä

Verbindung	K	K'
Nr.
I	pci c„ii, cn,	(T)OII
2	Hi-(I CJl, (II,	COOII
.?	i)-(i(„ii, cn,	COOII
»	p-l· (Ji, CH.	COOII
	P-Hr CJI, CII.	coon
6	l'-l CJI, CII,	COOII
7	m.n-(l, („II, CII,	COOII

K)O
KH)
200
177
2.W
528
MX

Verbindung	K
Nr.
8	0,P-Cl₂-C₆Hj-CH₃
9	0,P-Br₃-C₆Hj-CH,
10	2,4,5-CIj-C₆H₃-CH₃
11	0-CH₃-C₆H₄-CH₂
12	0,P-(CHj)₂-C₆Hj-CFI,
13	0-CHj-P-CI-C₆Hj-CH,
14	P-CI-C₆H₄-CH₂
15	P-CI-C₆H₄-CH₂
16	0-Cl-C₆II₄-CH,

17 0,P-Cl₂-C₆H₁-CII,

18 2,4,5-CIj-C₆H₄CH,

19 P-CI-C₆H₄-CII,

" Anlispcrmatogene Wirkung (minimale wirksame Dosis |MEI)]), mg/kg, p.o.

COOH	56
COOH	76,5
COOII	248
COOFI	185,5
COOH	101
COOH	52
COOCH₂CH(OH)-	503
CH₂OH
COOCFI(Ch₂OFI)₂	503
COOCH,CFI(OF1)-	503
CH₂OH
COOCH₁CH(OH)-	69
CII₂OII
COOCIhCH(OII)-	299,5
CH,011
CONlI,	399

Hie erfindungsgemäßen Verbindungen sind schwer löslich, jedoch zeigen sie in Mengen von I g/kg p. o. keine Toxi/iläl beim Warmblüter.

Im Vergleich mit der Verbindung ähnlicher Wirkungsrichtung N,N'-Bis(dii:hlorac~iyl)-1.8-otandiamin (Vcrgleichsubsianz) slellt man fest, daß diese Verbindung eine dem Antabus ähnliche Wir¹ mg aufweist, die man bei den crfindiingsgemäßen Verbindungen nicht beobachtet.

Die erfindungsgcmäUcn Verbindungen können hergestellt werden, indem man

(a) ein Inda/ol der Formel

COR₁

N I Il

oder deren 4,'>.b,7-Telrahydrodcrivate. R₄ die vorher angegebenen liedeulungcn hat, mit einem Ben/ylderivat der Eomicl

C II,

R,

umscl/l. in der Ri. K.· und R₁ die vorher angegebenen llcdeiilungen haben und X ein Halogen oder eine ähnlich reaktive (inippe ist, und sodann eine oiler mehrere der folgenden Stufen, sofern erforderlich, durchführt, nämlich

(b) bei Verwendung des Teirahydroderivats der I OrIHeI(II) il.is gebildete Tetriihydroproilukt dehydrierI,

(c) eine Estersäure in einen Ester oder ein Amid, einen Ester in eine Säure oder ein Amid oder ein Amid in eine Säure überführt.

Die Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen kann man in üblicher Weise herstellen.

Slellt R4 eine OH-Gruppe dar, so kann man Salze mit beispielsweise Alkali- oder Erdalkalimetallen oder mit organischen Basen wie Diethylamin. Morpholin. Diisopropylamin, Diäthanolamin. Dimcthylaminoätru.nol und dergleichen bilden. Hat R₁ die Bedeutung NH;, so kann man Säurcadditionssalze herstellen, beispielsweise Dihydrochloride.

Aufgrund der aiilispcrmalogenen Wirkung sind die erfindungsgemäßen Verbindungen in der Human- und Veterinärmedizin geeignet.

Darüber hinaus inhibieren alle Verbindungen gemäß der Erfindung, in denen R₁ = OH ist. die Wärmekoagulation der Serumproleine in vilro. Die gleichen Produkte und deren Ester- und Amidderivale, die in dem Tierkörper in die entsprechenden Säuren übergeführt werden, inhibieren ebenfalls die Koagulation des Serum Albumin in vivo. Dieser Typus der biochemischen Wirkung wurde durch Mi/ushinia's Verfahren (»Inflammation«, Ed. Ii. Silvestrini S. Tura-International Coi.gress Series N. Ib5, Amsterdam l%8. Seile 37) modifiziert durch Silvestrini, Catanese und l.isciani (»Inflammation Biochemistry and Drug Interaction«. Ed. A. Bertelli und ). C. lloiick. International Congress Scries N. 188, Amsterdam l^l)b4, Seite 282) bewiesen. Die Verbindungen (I) stabilisieren deutlich Rinderserum-albiimin bei Kon/eniraiionen in der (iröUenordming von 30 (ig/iitl. welches der aktiven Konzentration von Indomethacin einspricht.

Beispiel I
l-p-C'hlorbenzyl-lll-indiizol- i carbonsäure

8 g Il llnda/ol- !-carbonsäure werden in einer Lösung von 8g NaOII in IbOmI Wasser aufgelöst, linier Erhitzung in einem Wasserbad werden 9,2g ρ Chlor-

benzyl-chlorid unter Rühren hinzugefügt. Nach weiterer Erhitzung während 3 Stunden wird die Lösung abgekühlt und mit verdünntem Chlorwasserstoff angesäuert. Die rohe l-p-Chlorbenzyl-lH-indazol-S-carbonsäure fällt aus und wird aus Essigsäure umkristallisiert. Die Verbindung weist einen Schmelzpunkt von 195° C auf. Die Ausbeute beträgt 70%. Das Morpholinsalz schmilzt bei 176 bis 178° C.

Beispiel 2
l-p-Chlorbenzyl-lH-indazol-S-carbonsäure

17 g lH-Indazol-3-carbonitril und sodann 18,2 g p-Chlorbenzylchlorid werden einer Natriumäthylatlösung aus 2,7 g Natrium und 170 ml wasserfreiem Äthanol hinzugefügt. Das Gemisch wird sodann während etwa 3 Stunden am Rückfluß gehalten. Nach Beendigung der Reaktion (der pH wird neutral) wird das Gemisch abgekühlt, die Fällung abgetrennt, in warmem Benzol aufgelöst und durch Zusatz eines kleinen Hexanvoiumens kristallisieren gelassen. Das Produkt wird aus Benzol-Hexan umkristallisiert und schmilzt bei 138° C. Das derart erzeugte Produkt stellt 1 -p-Chlorbenzyl-1 H-indazol-3-carbonitril dar und 2 g dieses Produktes werden einer Lösung von 2 g NaOH in 13 ml H2O hinzugefügt und unter Rührung während etwa 24 Stunden erhitzt. Das Gemisch wird sodann während es noch warm ist angesäuert. Der hierdurch gebildete Niederschlag wird gesammelt mit Wasser gewaschen und zweimal aus Essigsäure umkristallisierl, wodurch 1 -p-Chlorbenzyl-1 H-indazol-3-carbonsäure erhalten wird. Die Ausbeute ist fast quantitativ.

Beispiel 3

Λ-Glyzeryl-1-p-chlorbcnzyl-I H-indazol-3-carboxylat

12 g l-p-Chlorbenzyl-IH-indazol-3-carbonsäure werden portionsweise zu 48 ml Thionylchlorid hinzugefügt und das Gemisch wird während 10 Minuten auf 80°C erhitzt. Die Lösung wird unier verringertem Druck konzentriert und der Rückstand mit Benzol behandelt. -r> welches sodann zur Eliminierung der zurückbleibenden Thioiiyl-chlorid Spuren verdampft wird. Es werden 11 g l-p-Chlorbenzyl-lH-indazol-S-carbonylchlorid, das bei 165°C schmilzt, erhalten. Diese Substanz wird unter Rührung und in kleinen Teilen einer Lösung von 5 g ίο Aceton-Glyzerin 1.1 30 ml wasserfreiem Chinolin. das /uvor auf 0⁰C abgekühlt worden war, hinzugefügt.

Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur stehen gelassen. Sodann werden Wasser und Äther hinzugefügt, die ätherische Schicht wird abgetrennt, mit ">"> Wasser gewaschen und getrocknet. Der Äther wird verdampft und das Chinolin unter Vakuum entfernt.

Der Rückstand wird mit Chloroform behandelt, aus dem sich eine kleine Menge l-p-Chlorben/.yl-l H-indazol-3-carbonsäure abscheidet. Nach der Verdampfung wi des Chloroforms verbleibt ein viskoser, gefärbter Rückstand, der in 25 ml H2O aufgelöst und während 2 Stunden bei 60"C mit 50 mg p-Toluol-sulfonsäure behandelt wird. Das Gemisch wird mit Äther extrahiert, dieser getrocknet und auf ein kleines Volumen tv"> eingeengt. Es bildet sich ein farbloser Niederschlag, der abgetrennt und aus Benzol umkristallisierl wird. Das Produkt schmilzt L ^i 112"C.

Beispiel 4

ix-Glyceryl-l-o-chlorbenzyl-1 H-indazol-3-carboxylat

28 g 1-o-Chlorbenzyl-l H-indazoi-3-carbonsäure, 21 g Glycerin und 21 g Phenol werden unter Rührung während 4 Stunden am Rückfluß gehalten. Sodann wird das Phenol im Vakuum entfernt und der Rückstand mit Chloroform aufgenommen. Die Lösung wird gründlich mit Wasser gewaschen und zur Trockne gebracht. Der Rückstand wird in einem kleinen Benzolvolumen aufgelöst und mit Hexan behandelt. Es fällt der Glycerylester aus, der sodann in einem Mörser mit einem kleinen Ben/.olvolumen um Kristallisation zu η bewirken, digeriert wird. Der Glycerylester wird aus Benzol umkristallisiert und schmilzt bei 115° C.

Beispiel 5

, «-Glyceryl-l(2,4-dichlorbenzyl)-l H-indazol-

3-carboxy'at

6,5 g Glycerin werden auf iOO'C 'rhiizt und bei dieser Temperatur 3,2g 1-(2,4-Dichlorbenzyl)-1H-indazol-3-carbonsäure und ein Tropfen konzentrierte Chlorwas-

>"> serstoffsäure unter Rührung hinzugefügt. Die Temperatur wird während 8 Stunden auf 140°C gehalten. Das Reaktionsgemisch wird abgekühlt und mit Wasser und CH2CI2 behandelt. Die organische Schicht wird abgetrennt, mit Kohle behandelt, getrocknet und verdampft.

in Der Rückstand wird aus Toluol umkristallisiert. Die Verbindung schmilzt bei 137°C.

Beispiel 6
j) l-p-Chlorbenzyl-lH-indazol-3-carboxamid

Eine Lösung von 12 g i-p-Chlorbenzyl-IH-indazolO-carbonylchlorid in 15 ml Chloroform wird portionsweise in 200 ml konzentrierte Ammoniaklösung gegossen. Nach Rührung während einigen Stunden wird die Lösung mit Chloroform extrahiert und das Chloroform abgetrennt. Die wäßrige Lösung wird erneut mit Chloroform extrahiert. Die organische Schicht wird getrocknet und eingedampft. Der fesie Rückstand wird aus Äthanol umkrisiallisiert. Es werden 9 g Amid, das bei 150"CsChHiUZt.erhalten.

Beispiel 7
i-p-Chlorbcnzyl-IH-indazol-S-carboxamid

4 g Äthyl-1-p-chlorbenzyl-1 H-indazol-3-carboxylat werden während etwa 20 Stunden auf 150 bis 160°C in einem verschlossenen Rohr mit einem Überschuß an alkoholischem Ammoniak erhitzt. Die abgekühlte Lösung wird filtriert, auf ein kleines Volumen konzentriert und ein Niederschlug abgetrennt Die alKoholischc Lösung wird filtriert und sodann r.iit Wasser verdünnt. Es entsteh! ein durch i-p-Chlorbenzyl-IHindazol-3-carboxamid gebildeter Niederschlag. Diese SuhManz scheint mit Jer. die entsprechend Beispiel 1 erzeugt wurde, identisch zu sein.

Beispiel 8
l-p-Chlorbcnzyl-IH-inda/ol-S-carboxamid

5 ml einer VWoigcn Wasserstoffperoxidlösung werden zu Ig l-p-Chlorbcnzyl-lll-indazol-S-carhonitril, verdünnt in 10 ml Äthanol, hin/ucefiiet. .Sodann wird

25%ige NaOH zugefügt, bis pH 8 erreicht wird. Die Lösung wird während 90 Minuten auf 60⁰C erhitzt und nach Zusatz von weiteren 5 ml Wasserstoffperoxid wird sodann während 4 Stunden auf 60"C erhitzt. Die Lösung wird abgekühlt, mit 5%iger H2SO4 neutralisiert und der ausgefallene Niederschlag abgetrennt. Der Niederschlag wird sodann mit Wasser gewaschen und getrocknet. Die Substanz ist mit der gemäß Beispiel 6 erzeugten, identisch.

Beispiel 9

Äthyl 1 -p-Chlorbenzyl-1 H-inda/.ol-J-carboxylat

ι Ι

Lin aus ! g l-p-Cmörbenzyl-iü-indazolO-carbonitril, 5 ml absolutem Äthanol und 2,5 ml konzentrierter H2SO4 gebildetes Gemisch, wird während 6 Stunden

η.··.-,ι.π..η ..-L:.-. rv:~ ι ~. ...:„j „ι u.-.ui» ..-J

/.Ulli IVUV-IMlUL/ ΙΙΙΙΙΙΛΙ. L/IV, l_,VJ.lUllg VTIIU OLTg V, IVUI111 UIlU auf Eis gegossen. Der Niederschlag, der durch eine _><> kleine Menge absoluten Alkohol umkristallisiert werden kann, wird abgetrennt. Er ist mit dem gemäß Beispiel 3 erzeugten Produkt identisch.

Beispiel 10

Die nachstehend aufgeführten Verbindungen können auch durch die vorstehend beschriebenen Verfahren erzeugt werden. Exakter ausgedrückt, werden die nachstehend aufgeführten Verbindungen durch ein zu dem Verfahren des Beispiels I analoges Verfahren erzeugt:

I -o-Chlorbenzyl-1 H-indazol-3-carbonsäure.

Fp: 22O⁰C. I -m-Chlorbenzyl-1 H-indazol-3-carbonsäure,

Fp: 184°C. 1 -p-Brombenzyl-1 H-indazol-3-carbonsäure,

Fp: 197°C. 1 -p-Fluorbenzyl-1 H-indazol-3-carbonsäure,

Fp; 194⁰C. 1-mFluorbenzyl-1 H-indazol-3-carbonsäure,

Fp: 163° C. 1 (3.4-Dichlorbcn/yl)-1 -H-indazol-S-carbonsaurc.

Fp: 186° C. l-(2,4Dichlorbenzyl)-l H-indazol-3-carbonsäure.

Fp: 207 X. l-(2,6-Dichlorbenzyl)-l H-indazol-3-carbonsäure,

Fp: 265°C. Zersetzung. /•Chlor-l-p-chlorbenzyl-IH-indazol-Jcarbon-

säure. Fp: 214°C. Zersetzung. 1 .o,4-Dibro!iiber!?:¹'!^-! H-inday.ol-J-carb'jnsä'jre.

Fp: 228⁰C, Zersetzung. 1 (2,4.5-Trichlorbenzyl)-l H-indazol-3-carbonsäure. Fp: 256⁰C. Zersetzung.

Beispiel

Die nachstehend angegebenen Verbindungen werden durch ein zu Beispiel 3 analoges Verfahren, d. h. durch Reaktion eines geeigneten Alkohols mit dem Säurechlorid, erzeug'

■i-Glyceryl-l-(2,4-dichlorbenzyl)-IH-indazol·

3-carboxylat. Fp:l37°C. vGlyceryl-1 -(2,4,5-trichlorbenzyl)-1H indazoi-3-carboxylat. Fp: 123°C.

Claims

Patentanspruch:

1-Benzyl-1 rl-indazol-3-carbonsäuren, -amide und -ester der Formel

COR₄

worin

R, = H, F,Cl, Br I oderCH,;

R₂ = Ci, Br oder CH ι;

R. = H und Cl:

R₄ = OH,OCH(CH,OH)>,

OCH₂CH(OH)CH₂OHOdCrNH.

bedeuten.