DE2301540C3

DE2301540C3 -

Info

Publication number: DE2301540C3
Application number: DE2301540A
Authority: DE
Inventors: Townley Payne Culbertson; Theodore Herbert Haskell
Original assignee: Parke Davis and Co LLC
Current assignee: Parke Davis and Co LLC
Priority date: 1972-01-13
Filing date: 1973-01-12
Publication date: 1979-07-12
Also published as: US3784541A; CA971955A; DE2301540A1; GB1365462A; JPS4911849A; DE2301540B2; NL7300506A; FR2168038B1; BE793976A; FR2168038A1

Description

in der entweder R¹ = OH und R¹ = H oder R¹ = H und R² = OH bedeuten sowie deren pharmazeutisch geeignete Säureadditionssalze.

10

15

20

25 OH

5"-Amino-5"-desoxybutirosin B, 5-O-(5-Amino-5-desoxy-D-ribofuranosyl)-N'-(4-amino-2-hydroxybutyryi) - 4 - O - (2,6 - diamino - 2,6 - didesoxy - D - gl ucopyranosyl) - 2 - desoxystreptamin, besitzt als freie wasserfreie Base die empirische Formel

C₂i H₄₂N₆ O_n und die Strukturformel

CH₂NH₂ O

40

HO

Die vorliegende Erfindung betrifft den im Patentanspruch gekennzeichneten Gegenstand.

In der US-PS 35 41 078 ist eine chemische Verbindung beschrieben, die als Ambutyrosin bezeichnet wird (sowie dessen einzelne Komponenten Ambutyrosin A und Ambutyrosin B). Zur Zeit werden diese vi Verbindungen häufiger als Butirosin bezeichnet (und die einzelnen Komponenten Butirosin A und Butirosin B) und diese letztere Bezeichnung wird hier verwendet. Butirosin A und Butirosin B sind sowohl als freie Basen als auch in Form ihrer Säureadditionssalzc v, bekannt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können mit Hilfe der systematischen chemischen Nomenklatur bezeichnet werden, oder als Aminodesoxybutirosin (im einzelnen alsAminodesoxybutirosin A und Amino- <.o dcsoxybulirosin B).

5"-Amino-5"-desoxybutirosin A, 5-O-(5-Amino-5-desoxy-D-xylofuranosyl)-N'-(4-amino-2-hydroxybutyryl) - 4 - O - (2,6 - diamino - 2,6- didesoxy - D - glucopyranosyl)-2-desoxystreptamin, besitzt in Form der wasserfreien freien Base die empirische Formel

C₂₁H₄₂N_nO₁₁

H₂N

C-HN

HO—C-H

CH₂NH₂

CH₂ CH₂

NH₂

HO OH

Damit sind 5"-Amino-5"-desoxybutirosin A und 5"-Amino-5"-desoxybutirosin B Isomere, die sich in ihrer Konfiguration an einem Kohlenstoffatom in der Pentoseeinheit unterscheiden.

Erfindungsgemäß kann 5" - Amino - 5" - desoxybutirosin hergestellt werden durch Umsetzung des N,N',N",N'"-Tetra(trifluoracetyl)-derivates von 5" - Amino - 5" - desoxybutirosin mit einer Base in einem wäßrigen Medium und Isolieren des Produktes als freie Base oder als Säureadditionssalz. Wenn das Ausgangsmaterial das N,N',N",N'"-Tetra(trifluoracetyl)-derivat von 5"-Amino-5"-desoxybutirosin A ist, der Formel CH₂NHY

HO

0 / YHN

OH
C-HN

-CH \

1 CH₂NH₂ OY =
CH₂

Il

-C-CF₃

ist das Produkt 5"-Amino-5"-desoxybutirosin A. Wenn das Ausgangsmaterial das N,N',N",N'"-Tetra(trifluoracetyl)-derivat von5"-Amino-5"-desoxybutirosin B ist, der Formel

OY =

Il

CCF,

HO OH
ist das Produkt 5"-Amino-5"-desoxybutirosin B. Wenn das Ausgangsmaterial ein Gemisch der beiden speziellen Ausgangsmaterialien ist, ist das Produkt ein Gemisch aus 5" - Amino - 5" - desoxybutirosin A und 5" - Amino - 5" - desoxybutirosin B. In jedem Falle kann das Ausgangsmaterial zu dem Reaktionsgemisch als solches zugegeben werden oder es kann in situ gebildet werden, z. B. durch Hydrierung der entsprechenden 5-Azidoverbindung(en) in Gegenwart von Palladium auf Kohle als Katalysator. Finige Beispiele für geeignete Basen für die Reaktion sind Alkalihydroxide, wie Natriumhydroxid und Kaliumhydroxid und Erda Ikalihydroxide, wie Bariumhydroxid und Magnesiumhydroxid. Eine bevorzugte Base ist Natriumhydroxid oder ein anderes Alkalihydroxid. Eine bevorzugte Konzentration für die Base beträgt 0,1 bis 4,0 n. Geeignete Lösungsmittel sind Wasser und wäßrige niedere Alkanole. Die Reaktion läuft leicht bei Raumtemperatur ab und damit sind die Reaktionszeit und Temperatur nicht besonders kritisch. Im allgemeinen wird die Reaktion bei eineir Temperatur von ungefähr 0 bis 50⁰C innerhalb von 15 Minuten bis 8 Stunden durchgeführt, wobei die kürzeren Reaktionszeiten den höheren Temperatureia und höheren Basenkonzentrationen entsprechen. Temperaturen von mehr als 50° C sind ungünstig. Wenn man als Base 0,25 bis 0,75 η wäßriges Natriumhydroxid verwendet, ist die HydrolysereaktioD im wesentlichen, innerhalb von 3 Stunden bei Raumtemperatur vollständig. Das Produkt wird direkt als freie Base oder nach Behandlung

jo mit einer Säure als Säureadditionssatz isoliert. Eine bevorzugte Art, das Produkt zu isolieren, besteht darin, daß man eine Lösung des Produktes in Form der freien Base auf eine Säule aufgießt, die ein schwach saures Kationenaustauscherharz in Form der freien

j5 Säure enthält und das Produkt als freie Base durch Elution der Säule mit wäßrigem Ammoniak gewinnt.

Die Ausgangssubstanzen für das oben beschriebene

Verfahren können nach einer Anzahl von Verfahren aus Butirosin — entweder Butirosin A oder Butirosin B oder einem Gemisch von butirosin A und Butirosin B — hergestellt werden. Nach einem derartigen Verfahren wird Butirosin umgesetzt mit Athyltrifluoracetat und dann mit Trifluoressißsäureanhydrid unter Bildung von N,N',N",N'"-Tetrai{trifluoracetyl)-butirosin. Diese zuletzt genannte Verbindung wird umgewandelt in den 5-(p-Toluolsulfonat)-ester oder den 5 - (2,4,6 - Trimethylbenzolsulfonatjester durch Umsetzung mit dem entsprechendem Arylsulfonylchlorid und der so gebildete Ester wird umgesetzt mit

V) Natriumazid, um die Sulfonatestergruppe durch die Azidogruppe zu ersetzen. Durch katalytische Hydrierung der Azidogruppe erhält man damn das für das erfindungsgemäße Verfahren angewandte Ausgangsmaterial.

v-, Die erfindungsgemäßen freien Basen bilden Säureadditionssalze mit jeder von einer Vielzahl anorganischer und organischer Säuren. Pharmazeutisch geeignete Säureadditionssalze werden gebildet mit Säuren, wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Kohlensäure, Essigsäure, Bernsteinsäure, Zitronensäure, Maleinsäure, Apfelsäure und Pamoasäure. Die freien Basen und ihre Säureadditionssalze sind durch Einstellung des pH-Wertes ineinander überfuhrbar. Sie unterscheiden sich in den Löslichkeitseigenschaften, aber sind sonst für die erfindungsgemäßen Zwecke äquivalent.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in wasserfreien Form sowie in solvatisierter, einschließ-

lieh hydratisierter, Form vorliegen. Im allgemeinen sind die hydratisierten und die mit pharmazeutisch geeigneten Lösungsmitteln solvatisierten Formen den wasserfreien oder nicht solvatisierten Formen für die erfindungsgemäßen Zwecke äquivalent.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind sowohl als einzelne Isomere als auch als Gemisch und sowohl als freie Basen als auch als Säureadditionssalze geeignet als antibakterielle Mittel mit einem weiten antibakterielleu Wirkungsspektrum. Als Beispiel ist die antibakterielle Wirksamkeit für ein Produkt, enthaltend einen größeren Anteil (75% oder darüber) 5"-Amino-5"-desoxybutirosan A und einen kleineren Anteil (25% oder darunter) 5"-Amino-5"-desoxybutirosin B gegenüber repräsentativen Mikroorganismen in der folgenden Tabelle angegeben. In dieser Tabelle ist die in vitro antibakterielle Aktivität angegeben in Weiten für die minimale hemmende Konzentration, gemessen in Mikrogramm freie Base pro cm³ Medium, gegen verschiedene Arten von Bakterien. Die in der Tabelle angegebenen Daten wurden erhalten unter Anwendung üblicher Stä-nme der jeweiligen Organismen.

4ikroorganLsmus	Minimale
	Hemmkonzen
	iralinn
	(.ig Busc/cnr')
Staphylococcus aureus	0,25
Staphylococcus aureus	10,0
Pseudomonas aeruginosa	1,5
Escherichia coli	2,0
Shigella sonnei	>2,5
Mycobacterium tubercolusis	5,0

Bei Verwendung eines ähnlichen Gemisches von 5"-Amino-5"-desoxybutirosin A und 5"-Amino-5"-desoxybutirosin B wurde ein hoher Grad von antibakteriener in vivo Aktivität bei einem Versuch an akut infizierten Mäusen gezeigt. Die Mäuse wurden mit der lOOfachen mittleren letalen Dosis (100LD₅₀) von Pseudomonas aeruginosa intraperitoneal mit Mucin als Zusatz infiziert. Gleichzeitig wurde jeder Maus eine Einzeldosis 5"-Amino-5"-desoxybutirosin subkutan verabreicht. Die Dosis wurde in zunehmenden Mengen verabreicht und die Anzahl der Tiere, die starben und überlebten, wurde über einen Zeitraum von 7 Tagen notiert Die Dosis 5"-Amino-5"-desoxybutirosin, die erforderlich war, um 50% der Tiere vor einer gefährlichen Infektion zu schützen (PD₅₀), wurde zu 19 mg/kg bestimmt. Der entsprechende Wert Tür PD₅₀ für Butirosin betrug 45 mg/kg. Damit sind die erfindungsgemäßen Verbindungen wertvoll aufgrund ihrer antibakteriellen Wirksamkeit im allgemeinen und ihre Aktivität gegenüber Pseudomonas aeriginosa besonders. Sie können entweder oral, parenteral oder lokal verabreicht werden.

Aufgrund ihres breiten antibakteriellen Spektrums sind die erfindungsgemäßen Verbindungen geeignet als antibakterielle Mittel für in vitro Anwendungen, wie zum Sterilisieren von Laborgeräten und Oberflächen, zum Sterilisieren pharmazeutischer Produkte und zur Aufrechterhaltung steriler Bedingungen während pharmazeutischer Arbeiten. Zum Sterilisieren von Laborgeräten und Oberflächen u. ä. in vitro Anwendungen können die Verbindungen in Form einer 0,1- bis 1,0% igen wäßrigen Lösung angewandt werden.

Die Erfindung wird durch das folgende Beispiel näher erläutert.

Herstellung der Ausgangssubstanzen

In diesem Abschnitt bedeutet der Ausdruck »Butirosin« entweder Butirosin A, Butirosin B oder ein Gemisch von Butirosin A und Butirosin B. Die spe-

zifischen physikalischen Konstanten, die angegeben sind, beziehen sich auf die Derivate entsprechend einem größeren Anteil (75% oder darüber) Butirosin A und einem kleineren Anteil (25% oder weniger) Butirosin B.

Eine Lösung von 8,83 g Butirosin in 100 cm³ Methanol und 40 cm³ Äthyltrifluoracetat wurde 3 Stunden unter Rückfluß erhitzt und unter vermindertem Druck eingedampft. Der rohe Rückstand (14,5 g) wurde in 200 cm³ Acetonitril gelöst und 33 g pulverförmigos Calciumcarbonat wurden zugegeben. Das entstehende Gemisch wurde h-Λ 0 bis 5°C gerührt, während 22 cm³ TrifiuoressigsäureiLjihydrid innerhalb von 90 Minuten zugetropft wurden. Das Gemisch wurde weitere 30 Minuten bei 0 bis 5" C gerührt und dann 3 Stunden bei Raumtemperatur, Es wurde filtriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingedampft. Der sirupartige Rückstand wurde in 100 cm³ Methanol und 25 cm³ Wasser gelöst und die Lösung bei 0 bis 5° C gerührt, während Calciumhydroxid in Anteilen zugegeben wurde, bis ein pH-Wert von 5 bis 6 erhalten blieb. Das Gemisch wurde dann unter vermindertem Druck eingedampft und der Rückstand zwischen 300 cm³ Athylacetat und 25 cm³ Wasser verteilt. Die organische Phase wurde abgetrennt, 3mal

j5 mit je 30 cm³ Wasser gewaschen, getrocknet und eingedampft, wobei man einen Rückstand von . N,N',N",N'"-Tetra(trifluoracetyl)-butirosin erhielt. Das Infrarotabsorptionsspektrum zeigte charakteristische Maxima bei 1710, 1660 und 1560 cm"¹. Bei Dünnschichtchromatographie auf Silicagel mit einem 4:1-Gemisch von Benzol und Methanol und anschließende Behandlung mit Phosphormolybdatspray erhielt man einen einzelnen Fleck (R_f ungefähr 0,1).
Eine Lösung von 7,20g N,N',N'',N'"-Tetra(tri-

fluoracetyl)-butirosin in 100 cm³ trockenem Pyridin, die auf —10 bis —5°C unter Stickstoffatmosphäre gehalten wurde, wurde unter Rühren mit 2,2 gp-Toluolsulfonylchlorid, das in einzelnen Anteilen innerhalb I Stunde zugegeben wurde, behandelt. Das Gemisch

so wurde eine weitere Stunde bei — 10⁰C gerührt und dann 18 Stunden bei 0°C stehengelassen. Es wurde unter vermindertem Druck eingedampft und der Rückstand zwischen 200 cm³ Äthylacetat und 30 cm³ V'a^ser verteilt. Die organische Phase wurde abge-

5-> trennt, mit einzelnen Anteilen verdünnter Salzsäure und mit gesättigter wäßriger Natriumühloridlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde in 8 cm³ Methanol und 16cm¹ Benzol gelöst und die Lösung auf eine Säule, enthaltend 200 g

bo Silicagel, gegossen. Die Säule wurde mit einem 5:1-Gemisch von Benzol und Methanol eluiert und das Eluat in 10 cm³ Fraktionen gesammelt. Diejenigen Fraktionen, die einen einzelnen Fleck (beim Aufsprühen von Phosphormolybdatspray) R_f 0,29 bei

b5 der DUnnschichtchromatographie auf Silicagel mit einem 4:1-Benzol- und Methanol-Gemisch ergaben, wurden zusammengegeben und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhielt als Rückstand den

N,N',N".N""-Tetia(trifluüiaeetyl)-butirosin-5"-(p-toluolsulfonatj-ester. Dieses Produkt zeigt ein Ultraviolettabsorptionsmaxiiniim h-^; 251 um. Ej = 6.24 und Infrarotabsorptionsmaxima bei 1710. 1660, 1550 und 1350cm"¹. Die spezifische Drehung [\]j^! (0,94% in ■-, Methanol) = + 18.5 .

Nach einem unterschiedlichen Syntheseverfahren wurden 2.0 g 2.4,6 - Trimethylbenzolsulfonylchlorid nach und nach unter Rühren zu einer Losung von 8.33 g N,N'.N".N" - Tetra(trifluoracetyl) - butirosin m in 100 cm' trockenem Pyridin. die auf 0 bis 5~C gehalten und vor Feuchtigkeit geschützt wurde, zugegcbt.i. Das Gemisch wurde 16 Stunden bei OC. 5 Stunden bei 15'C und 2 Stunden bei Raumtemperaturstehengelassen. Es wurden weitere 0.10 g2.4.6-Tri- ι -, mcthylbenzolsulfonylchlorid zugegeben und das Gemisch weitere 16 Stunden stehengelassen. Es wurde dann unter vermindertem Druck eingedampft und der Rürlrctanrl 7Wjcrhpn

gp

\ rm Xthvlnrptat und

Wasser verteilt. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit 20 era' kalter 3 η-Salzsäure und mit gesättigter wäßriger Natriumchloridlosung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde in 8 cm³ Methanol und 16 cm¹ Benzol gelöst und die Lösung auf eine Säule gegossen, enthaltend 200 g Silicagel. Die Säule wurde m't einem 5:I-Gcmisch von Benzol und Methanol eluiert und das Eluat in Anteilen von 10'~nr' gesammelt. Diejenigen Fraktionen, die einen einzelnen Fleck (beim Aufsprühen von Phosphormolybdat) bei R, 0.36 bei der Dünn-Schichtchromatographie auf Silicagel mit einem 4:1-Gemisch von Benzol und Methanol zeigten, wurden zusammengegeben und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhielt einen Rückstand des N.N .N".N""-Tetra(trifluoracetyl)-butirosin-5"-(2.4. 6-trimethylbenzolsulfonatl-esters. Es wurden LJltraviolettabsorptionsmaxima beobachtet bei 285 nm. E| = 16.1:277 nm. Ej = 15.7; und 231 nm. Ej =86,5. Das Infrarotabsorptionsspektrum zeigte charakteristische Maxima bei 1710. 1655 und 1555 cm "'.

Ein Gemisch von 2.83 g N'.N'.N ".N"'-Tctra(trifluoracetyl(-butirosin-5"-Ip-toiuolsulfonat)-ester und 1.50 g Natriumazid in 75 cm' N.N'-Dimethylformamid wurde 4 Stunden auf 94 bis 100 C erhitzt und dann unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wurde zwischen 150 cm' Äthylacetat und 20 cm³ Wasser verteilt. Die organische Phase wurde abgetrennt. 2mal mit je 10 cm¹ W;i=ser gewaschen, getrocknet und eingedampft, wobei man das 5-Azidoderi\at erhielt. Das gleiche Produkt wurde erhalten unter Anwendung einer äquivalenten Menge des 5" - (2.4.6 - Trimethylbenzolsulfonat) - esters anstelle des 5" -Ip -Toluolsulfonat) · esters. Das 5"-Azidoderivat. das auf diese Weise erhalten wurde, und einen größerenAnteil(75°ooderdarüber)desN,N'.N".N'"-TeinM'rifluoracet'.li-derivales \on N"-l4-Amino-2-hydroxybutyryl ι - 5 - O - (5 - azido - 5 - desoxy - D - xylofuranosy I) - 4 - O - (2.6 - diamino - 2.6 - didesoxy - D - glucopyranosyli-2-desoxystreptamin und einen kleineren Anteil (25% oder weniger) des N.N'.N",N"'-Tetra(trifiuoracetyl)-derivats von N¹-(4-Amino-2-hydroxybuty ryl) - 5 - O -(5 - azido - 5 - desoxy - D - ribofuranosyl)-4-O-(2.6-diamino-2.6-didesoxy-D-gIucopyranosyl)-2-desoxysireptamin enthält, hat eine spezifische Drehung O] ;· (0.566% in Methanol) = +32,4'. Das inirarötabsorptiunsspcktrurn zciüic charakteristische Maxima bei 2100. 1710. 1660 und !555 cm"¹. Bei Dünnschichtchroinatographie auf Silicagel mit einem

50

to 3: !-Gemisch von Benzol und Methanol erhielt mai einen einzelnen Fleck (beim Aufsprühen von Phosphor molybdat) R_r ungefähr 0.30.

Beispiel

Ein Gemisch von 2 g des wie oben erhaltenen 5"-Azi doderivats, 100 cm' Methanol, 25 cm' Wasser um 200 mg 20%-Palladium-auf-Kohle als Katalysato wurde gerührt, während Wasserstoffgas 2 Stundei lang durchgeleitet wurde. Das Gemisch wurde filtriert um den Katalysator zu entfernen und das Fun." nute vermindertem Druck eingedampft, wobei man eil Produkt erhielt, bestehend aus einem größeren Antei (75% oder darüber) des N.N',N",N"'-Tetra(trifiuor acetyl)-derivats von 5"-Amino-5"-desoxy-butiro3iri/^ und einem kleineren Anteil (25% oder weniger) de; N.N'.N".N"-Tctra(lrifluoracctyl-derivats von 5"-Ami no-5"-desoxy-butirosin B. Dieses rohe Produkt wir\!·- unfein Vnhimi-n vnn 36 ΓΓΠ P>'' Wa«spr iinrl firm 2 n-wäßrigem Natriumhydroxid verdünnt und 3 Stun den bei Raumtemperatur gehalten. Die entziehende Lösung ourde auf eine Säule gegossen, die gepacki war mit 30 cm' eines schwach sauren Kationenaustauscherharzes in Form ('or freien Säure. Die Säule wu'Je mit Wasser gewaschen und das Produkt danr aus der Säule durch Eluieren mit 200 cm¹ 2n-wäß rigcm Ammoni ·'■ ; ntfernt. Das Eluat wurde untci vorminf¹ Ttem Druck auf ein kleines Volumen Lösung eingedampft, das dann gefriergetrocknet wurde, urr das Produkt als festen Rückstand zu erhalten. Diese: Produkt bestand aus einem größr ^ren Anteil (75% odci darüber) 5"-Amino-5"-desoxy-huti.osin A und einen kleineren Anteil (25% oder weniger) von 5"-Amino 5"-desoxy-butirosin B. Die spezifische Drehung [\]f-(0,96% in Wasser) +25,7". Dünnschichtchromato graphic über Silicagel unter Verwendung von 1 : 1 Methanol: 2n-wäßrigcr Ammoniak zeigte einen ein zelnen Punkt beim Aufsprühen von Ninhydrin. R, un gefahr 0.06.

Das oben als Gemisch der freien Basen erhalten! Produkt besitzt die empirische Formel 0'21H₄₂N₆O₁₁ Es reagiert leicht mit Kohlendioxid, wenn es der Luf ausgesetzt wird, wobei sich ein Dicarbonat der Forme CiIH₄₂N₆O_n · 2 H₂CO, bildet. Das Dicarbonat wan delt sich beim Erhitzen auf 170 C wieder in die freit Base um. Eine Lösung von 2,0 der freien Base ir 100 cm³ Wasser wurde mit 2n-Schwefelsäure au einen pH-Wert von 6.5 titriert und gefriergetrocknet wobei man als Rückstand das Disulfat-trihydrai erhielt. Die spezifische Drehung [\]i,·* (1% in Wasser 4-23.8". Beim Trocknen dieses Produktes bei IjO'C unter vermindertem Druck erhielt man das wasserfreie Disulfat C₂, H₄₂N₆O_n ■ 2 H₂SO₄.

Die oben erhaltene freie Base kann auch durch Umwandlung in das N,N',N'7N"\N""-Penta(trifluoracetylj-derivat identifiziert werden. Für dieser Zweck wurden 2 cm³ S-Äthylthiotrifluoracetat zi einer Lösung von 100 mg der oben angegebenen freier Base in 2 cm³ Methanol zugegeben. Die Lösung wurde 16 Stunden bei Raumtemperatur gehalten und danr unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wurde in 100 cm³ Acetonitril gelöst und 1 j; pulverförmiges Calciumcarbonat zugegeben. Untei äußerem Kühlen wurde das entstehende Gemisch be 0 bis 5" C gerührt und 0,6 cm³ Trifluoressigsäureanhydrid zugetropft. Das Gemisch wurde 3 Stunden be 0 bis 5 C gerührt, 2 Tage bei 0^r" C gehalten und filtriert Das Filtrat wurde unter vermindertem Druck ein-

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ίο

gedampft und der Rückstand in 8 cm' Methanol und 2 cm' Wasser gelost. Die Lösung wurde bei 0 bis 5"C gerührt und Calciumhydroxid zugegeben, bis ein pH-Wert von 5 emalten blieb. Das Gemisch wurde unter vermindertem Druck eingedampft und der Rückstand in 12 cm·¹ Äihylacetat gelöst. Die Äthylacciatlösung wurde 3mal mit je I cm' Wasser gewaschen getrocknet und eingedampft. Man erhielt als Rückstand das N,N',N",N'",N""-Penla(lrifluuracetyl) - derivat. Das Infrarotabsorptionsspektrum zeigte charakteristisch·· Maxima bei 1710, 1660 und 1560 cm"¹. Durch Dünnschichtchromatographie über Silicagel unter Verwendung eines 4: !-Gemisches von Benzol und Methanol erhielt man einen einzelnen f'ii'Ät, der durch Aufsprühen von Phosphorrrnlybdat entwickelt wurde. R_r ungefähr 0.23. Das N,N'.N".N'", N""-Pcnta(trifiuoracetyl)-derivat kann durch I ösen in Äthylacetat und wieder Ausfallen mit Äther weiter .,.,,.....;... ..,...-.ι....

Nach dem Verfahren des ersten Absatzes dieses Beispiels, aber unter Verwendung des reinen Ν,Ν',Ν". N'"-Telra-(tnritioracetyl)-derivats von N'-(4-Amino-2-hydroxybutyryl)-5-Ö-(5-azido-5-desoxy-D-xylofuranosyl)-4-0-(2,6-diam'no-2,6-didesoxy-D-glucopyranosyl)-2-desoxystreptamin ist das durch Hydrierung erhaltene Produkt das N.N',N",N'"-Tetra(trif1uoracetyl)-derivat von 5"-Amino-5"-desoxy-butirosin A. Dieses wurde durch Umsetzung mit wäßrigem Natriumhydroxid in der oben beschriebenen Weise umgewandelt in 5"-Amino-5 -desoxybutirosan A; [>]'/ +25,4 (c 1,0, H₂O).

Analyse für C₂₁H₄₂N_nO₁₁ I 2H₂O- 1/2 H₂Cf),:
Berechnet ... C 43,43. H 7,56. N 14,14;
gefunden ... C 43,45, H 7,64, N 14,10.

Nach dem in dem ersten Absatz beschriebenen Verfahren, aber unter Verwendung des reinen Ν,Ν',Ν". N"'-Tetra(trirluoracetyl)-derivats von N'-(4-Amino-2-hydroxybutyryl)-5-O-(5-a;rido-5-des('\y-D-ribofuranoxyl)-4-O-(2,6-di;imino-2,6-didesoxy-D-glucopyranosyl)-2-desoxystreptamin ist das durch Hydrierung erhaltene Produkt das N,N',N",N'"-Tetra(tri-I1uoracetyl)-dcrivat von 5"-Amino-5"-desoxybutirosin B. Dieses wird durch Umsetzung mit wäßrigem Natriumhydroxid in der beschriebenen Weise umgewandelt in 5"-Amino-^v'-dcsoxybutirosin B; [\]" -f 32 (c 1.0, H₂O;.

Analyse für C₂₁H₄₂N_nO₁, ■ H,CO.,:

Berechnet ... C 42.85. H 7.19. N 13,63;
gefunden ... C 42.92. H 7,11, N 12,22.

Jede der oben beschriebenen freien Polyaminobasen wurde umgewandelt in das Hydrochlorid, Sulfat, Phosphat, Maleat und Citrat durch Umsetzung mit Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure. Maleinsäure bzw. Citronensäure.

Claims

Patentanspruch:

5"-Amino-5"-desoxybutirosine A und B der allgemeinen Formel

und die Strukturformel

HO—C-H

OH