DE1941370C3 - Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Nitrit und nitritbildenden Bakterien in Körperflüssigkeiten - Google Patents
Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Nitrit und nitritbildenden Bakterien in KörperflüssigkeitenInfo
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Description
1
In den folgenden Beispielen soll die Erfindung näher
erläutert werden. 6
Filterpapier (Nr. 2316 Schleicher & Schüll) wird mit
einer Losung folgender Zusammensetzung getränkt
und danach getrocknet: Β«ι<ιηκΐ
Sulfanilamid q ·,
S-Hydroxy-l.Z^^tetrahydro-
'" g
benzo(h)chinolin 0 17 e
Wei nsäure ?*5
Methanol .".".".'.".".'.■.'.'.'.' 'ad' 100,0 ml
Das Testpapier reagiert mit nitrithaltigem Urin unter Bildung von rosa bis rotvioletter Farbe bei ein.-r is
unteren Nachweisgrenze von 0,OL bis 0,02 mg% Nitrit.
Filterpapiere (Nr. 2316 Schleicher & Schall) werden
mit Losungen aus 1 mMol 3-Hydroxytetrahydro- so
benzo(h)chinohn, 2 mMol der folgenden Diazokomponenten
und 1,5 g Oxalsäure in 100 ml Methanol getränkt:
Diazokomponente
Sulfanilsäure
Arsanilsäure
p-Aminobenzoesäure
Arsanilsäure
p-Aminobenzoesäure
Farbe mit nitrithaltigem Urin
rosa — rotviolett
rosa — purpur
bläulichrosa — blauviolett 370
Die untere Nachweisgrenze von Nitrit mittels der so entstandenen Testpapiere liegt zwischen 0,01 und
0,02 mg% Nitrit.
Filterpapiere (Nr. 2316 Schleicher & Schüll; werden mit Lösungen aus 2 mMol Sulfanilamid, 2 mMol der
folgenden Kupplungskomponenten und 2,5 g Weinsäure in jeweils 100 ml Methanol getränkt:
Kupplungskomponente | Farbe mit nitrithaltigem Urin |
1,2,3,4-Tetrahydro- benzo(h)chinolin |
rosa - |
1,2,3,4-Tetrahydro benzo(h)china!din |
rosa - |
3-Hydroxy-N-methyl-l,2,3, 4-tetrahydrobenzo( h )ch ino- lin |
rosa - |
3-Acetoxy-N-methyl-l,2,3, 4-tetrahydrobenzo(h)chino- lin |
rosa - |
N-Methyl-l^^-tetrahydro- benzo(h>chinolin |
rosa - |
— karmin | |
— karmin | |
— purpurrot | |
- purpurrot | |
- rot |
Die untere Nachweisgrenze der so hergestellten Testpapiere liegt zwischen 0,01 und 0,03 mg% Nitrit.
Claims (1)
1 2
den stark sauren Lösungen zu vermeiden. Die Reagenz-Patentanspruch:
mischung aus Sulfanilsäure, τί-Naphthylamin und einer
festen organischen Säure ist auf dem saugfähigen
Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Nitrit Träger im trockenen Zustand wesentlich beständiger
und nitritbildenden Bakterien, bestehend aus einem 5 als in Lösung, so daß entsprechende diagnostische
diazotierbaren Amin, einer mit Diazoniumsalzen Mittel längere Zeit gelagert werden können, ohne ihre
kuppelnden Komponente und einer festen orga- Empfindlichkeit zu verlieren. Beispiele für solche
nischen Säure auf einem saugfähigen Träger, diagnostischen Mittel sind die von Fisch 1 und
dadurch gekennzeichnet, daß als kup- P i η t ο (Clin. Chim. Acta 2, S. 527 bis 533 [1957])
pelnde Komponente Verbindungen der allgemeinen io vorgeschlagenen Testpapiere, die mit einem Gemisch
Formel aus Sulfanilsäure, ,x-Naphthylamin und Zitronensäure
s, R' imprägniert sind; ferner die Testpapiere entsprechend
R_ N ^ dem USA.-Patent 3 415 717, in dem ein Gemisch aus
einem diazotierbaren Amin, N,N-Dialkyl->-naph- »5 thylamin und einer festen organischen Säure beschrieben
ist.
Testpapiere, die nach diesen Vorschriften hergestel t wurden, besitzen eine untere Nachweisgrenze
von 0,1 bis 1 mg% Natriumnitrit. Da das von den
in der R Wasserstoff oder eine Alkylgruppe und 20 Bakterien gebildete Nitrit ausschließlich durch Reduk-R'
Wasserstoff, eine Alkyl-, Hydroxy- oder Acyl- tion von Nitrat entsteht, welches nur in Spuren mit der
oxygruppe bedeuten, enthalten sind. Nahrung aufgenommen wird, liegen die Nitrit-Spuren,
die bei einer bakteriellen Infektion noch nachgewiesen werden müssen, häufig unterhalb dieser Nachweis-
25 grenze. Es ist daher wünschenswert, stabile Testpapiere
mit wesentlich erhöhter Empfindlichkeit herzustellen.
Überraschenderweise wurde nun gefunden, daß man
stabile Testpapiere herstellen kann, die nach dem
Die Erfindung betrifft ein diagnostisches Mittel zum Prinzip der Grießschen Probe arbeiten und noch
Nachweis von Nitrit und nitritbildenden Bakterien, 30 Nitritspuren von 0,02 mg°/0 sicher anzeigen, wenn man
bestehend aus einem diazotierbaren Amin, einer mit als Kupplungskomponente 1,2,3,4-Tetrahydro-ben-Diazontumsalzen
kuppelnden Komponente und einer zo(h)chinolin oder seine Derivate verwendet. Demiesten
organischen Säure auf einem saugfähigen Träger, gemäß besteht die Erfindung in einem diagnostischen
Bakterielle Infektionen der Nieren und der ab- Mittel der eingangs genannten Art, bei dem als
leitenden Harnwege führen, wenn sie nicht rechtzeitig 35 kuppelnde Komponente Verbindungen der allgeerkannt
und behandelt werden, zu schweren gesund- menen Formel
heitlichen Schädigungen. Durch den Nachweis der im· v R'
heitlichen Schädigungen. Durch den Nachweis der im· v R'
Urin ausgeschiedenen Bakterien ist eine solche In- ^ N
fektion auch in ihrem Frühstadium zu erkennen. Der
wissenschaftlich exakte Nachweis erfolgt dabei durch 40 ^
Bebrüten des bakterienhaltigen Urins auf geeigneten S;
Nährböden und Keimzählung. Diese Methode ist
jedoch für die ärztliche Praxis zu zeitraubend und
umständlich und für einen Schnelltest völlig ungeeignet.
Die meisten bei Harnweginfektionen vorkommenden 45 in der R Wasserstoff oder eine Alkylgiuppe und
Bakterien reduzieren das in der Harnblase vor- R' Wasserstoff, eine Alkyl-, Hydroxy- oder Acyloxykommende
Nitrat zu Nitrit. Auf dem Nachweis gruppe bedeuten, enthalten sind,
dieser Nitritmengen im ausgeschiedenen Harn mittels Als diazotierbares Amin kommen Sulfanilsäure,
dieser Nitritmengen im ausgeschiedenen Harn mittels Als diazotierbares Amin kommen Sulfanilsäure,
der »Grießschen Probe« beruht eine bekannte, emp- Arsanilsäure, p-Aminobenzoesäure und vorzugsweise
■Rindliche Methode zum Bakteriennachweis im Harn- 50 Sulfanilamid in Frage. Als feste Säure haben sioh
trakt. Dem Harn wird dabei eine saure Lösung von Zitronensäure, Apfelsäure und vor allem Oxalsäure
Sulfanilsäure und a-Naphthylamin zugefügt; im Harn und Weinsäure bewährt. Die verschiedenen Kompovorhandenes
Nitrit diazotiert die Sulfanilsäure, und nenten werden vorzugsweise in einem niederen Alkohol
das Diazoniumsalz kuppelt mit dem Λ-Naphthylamin gelöst und Papiere oder andere saugfähige Träger mit
2IU dem bekannten roten Azofarbstoffe dessen Konzen- 55 dieser Lösung imprägniert und getrocknet,
tration der Konzentration des Nitrits entspricht. Die Kupplungskomponente und das diazotierbare
tration der Konzentration des Nitrits entspricht. Die Kupplungskomponente und das diazotierbare
Obwohl dieser Test ausreichend empfindlich ist, Amin werden in Mengen von 0,2 bis etwa 20, vorzugsum
die teilweise sehr kleinen Mengen von Nitrit bei weise 1 bis 2 mMol/100 ml Imprägnierlösung ver-Harnweginfekten
noch sicher nachweisen zu können, wendet. Das Verhältnis Kupplungskomponente zu
und auch für die ärztliche Praxis schnell und einfach 60 Diazokomponente ist praktischerweise 1:1, kann
genug durchzuführen, ist, hat er den großen Nachteil, aber auch Werte von 2:1 bis 1:5 annehmen. Die
daß die Reagenzlösungen nicht stabil sind. Die ent- Säure wird in Konzentrationen von 1 bis IC g/100 ml
sprechenden Lösungen müssen deshalb vor jeder Imprägnierlösung zugesetzt.
Probe neu angesetzt werden, was geschultes Personal Die Testpapiere sind natürlich nicht nur zum Nach-
und eine gewisse Laboreinrichtung voraussetzt. 65 weis von nitritbildenden Bakterien im Harn geeignet,
Es wurden deshalb schon mehrfach Versuche be- sondern ganz allgemein dort, wo es auf den Nachweis
schrieben, die Grießsche Probe auf saugfähigen Trä- von Nitrit bzw. nitritbildenden Bakterien ankommt,
eern durchzuführen, um so das lästige Arbeiten mit z. B. im Trinkwasser oder Lebensmitteln.
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