DE1543720A1

DE1543720A1 - Verfahren zur Herstellung von L-Lysin aus 5-4(4-Aminobutyl)-hydantoin

Info

Publication number: DE1543720A1
Application number: DE19661543720
Authority: DE
Inventors: Hiroshi Hagino; Kiyoshi Nakayama
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Current assignee: KH Neochem Co Ltd
Priority date: 1966-03-14
Filing date: 1966-07-08
Publication date: 1972-02-24
Also published as: US3494831A; DK123649B; NL6609586A; BE683932A; GB1147229A; BR6681141D0; SU497768A3; CH465632A; ES328927A1

Description

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Kyowa Hakko Kogyo Go₀, Limited, 2okyo / Japan

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Verfahren zur Herstellung von !-Lysin aus 5-(4-Aminobutyl)-

-hydantoin

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von L-Lysin, insbesondere ein Verfahren zur Herstellung von L-Lysin durch biochemische Hydrolyse. Besonders betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von L-Lysin durch biochemische Hydrolyse von 5-(4-Aminobutyl)-hydantoin_e

Die bisher, zur Herstellung von L-Lysin angewandten Verfahren bestehen in der Extraktion aus natürlichen Proteinhydrolysatlö'sungen, Fermentierung und Synthese, wobei DL-Lysin aus verschiedenen Ausgangsmaterialien mit bestimmten organischen Verbindungen erhalten wird, worauf dann das Produkt optisch aufgelöst wird u,dgl. Bei den Syntheseverfahren sind beispielsweise die Verfahren der optischen Auftrennung und Racemisierung erforderlich. Derartige Verfahren sind jedoch technisch tmvorteilhaft und Verbesserungen hierfür sind seit langer 2eit nötig»

L-Lysin» die 2,6-Diaminohexancarbonsäure, ist eine sssentiell© ■bekannte Aminosäure. Sie wurde auf dem SeMet der lahrungsmittelanreicherung verwendet,:wobei die Srgänzrung von lahrung auf Getreidebasis mit Lysin deren ProteijicLUalitat uns sich ein verbessertes Wachs turn und Terbesserte these ergeben. Diese Verbindung wird auch medigiaiscli als läiäs?* stoff verv/endet, Deshalb ist ein Verfahren zur Herstellung der selben, das wirtschaftlich und vorteilhaft im grosstechnischen Maßstab ausgeführt werden kann, von erheblicher Bedeutung*

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BAD ORIGINAL ~ ^d "':...

Ein Ziel der Erfindung besteht in einem verbesserten Verfahren zur Herstellung von L-Lysin, bei dem die Nachteile und Mangel der bisherigen Verfahren beseitigt werden»

Ein weiteres Ziel der Erfindung besteht in einem Verfahren zur Herstellung von !-Lysin, das in wirksamer und einfacher Weise ausgeführt werden kann.

Ein weiteres Ziel der Erfindung besteht in einem Verfahren zur Herstellung von I-Lysin, bei dem das Produkt in hoher Reinheit und guter Ausbeute erhalten wird.

Ein weiteres Ziel der Erfindung besteht in einem Verfahren zur Herstellung von L-Lysin, das vorteilhaft im Industriemaßstab mit relativ niedrigen Kosten und mit hoher Produktausbeute durchgeführt werden kann₀

Diese und weitere Ziele der Erfindung sowie deren Vorteile ergeben sich im einzelnen aus der nachfolgenden Beschreibung.

Gemäß der vorliegenden Erfindung wurde festgestellt, dass grosse Mengen von L-Lysin erhalten werden, wenn 5-(4-Aminobutyl)-hydantoin in L-Lysin durch biochemische Hydrolyse überführt wird, wobei D-, L- oder DL-5-(4-aminobutyl)-hydantoin oder Substanzen, die diese enthalten, katalytisch in 6-egenwart von Mikroorganismen, die zur Spaltung des Hydantoinringes durch Hydrolyse geeignet sind, oder durch deren Enzyme oder Substanzen,, die dieselben enthalten, in einem wässrigen lährmedium oder einem Lösungsmittel mit einem pH-Wert von etwa 6 bis 11 umgesetzt werden. Unter optimalen Bedingungen kann L-Lysin praktisch quantitativ in einer Ausbeute von etv/a 90 bis 95$ aufgrund des vorliegenden Verfahrens hergestellt werden, und zwar völlig unabhängig von dem speziell als Ausgangsmaterialien angewandten L-, D- oder DL-IOrmen des 5-(4-Aminobutyl)-hydantoins.

Das gemäss der Erfindung eingesetzte Ausgangsmaterial, 5-

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(4-Aminobutyl)-hydantoin, ist ein Zwischenprodukt "bei der chemischen Herstellung von L-Lysin, wobei Furfural als Ausgangsmaterial verwendet wird. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wurde gefunden, dass I-Lysin durch spaltende Hydrolyse des Hydantoinringes gebildet wird, wenn die in den Zellen von bestimmten Mikroorganismen enthaltenen Enzyme mit 5-(4-Aminobutyl)-hydantoin unter geeigneten Bedingungen reagieren. Weiterhin wurde gefunden, dass hohe Ausbeuten an L-Lysin durch dieses Verfahren sowohl mit den L-, D-, oder DL-Formen des 5-(4-Aminobutyl)-hydantoins erhalten werden. Das hier beschriebene erfindungsgemässe Verfahren war bisher auf dem Gebiet der Mikrobiochemie nicht bekannte

Bs ist bekannt, dass bei der üblichen chemischen Hydrolyse L-Lysin, D-Lysin und DL-Lysin aus L-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin_s D-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin "bzw. DL-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin erhalten werden. Demzufolge war die optische Auftrennung von DL-Lysin und D-Lysin nach der Racemisierung notwendig, um das gesamte DL-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin in L-Lysin zu überführen_o Im Gegensatz hierzu ist die erfrindungsgemass durchgeführte biochemische Hydrolyse völlig unterschiedlich von den bisherigen, chemischen Hydrolysen. Insbesondere wird L-Lysin aus der als Ausgangsmaterial verwendeten L- oder B-Form des 5-(4-Aminobutyl) -hydantoins in jedem Fall gebildet. Deshalb ist es beim vorliegenden Verfahren nicht mehr notwendig, das D-Lysin in L-Lysin zu überführen, da die optische Isomerisierung von D-5-(4-Amino-» butyl)-hydantoin und die Spaltungshydrolyse des Hydantoinringes innerhalb des gleichen Reaktionsmediums und praktisch gleichzeitig erfolgte Dies ist ganz offensichtlich ein entschiedener Vorteil eines im Industriemaßstab durchführbaren Verfahrens.

Die im Rahmen der Erfindung eingesetzten Mikroorganismen sind solche, die zur Spaltung des Hydantoinringes durch Hydrolyse geeignet sind und die 5-(4-Aminobutyl)-hydantoin in L-Lysin in einem grösseren Verhältnis als 2 Mol-$ umwandeln, wenn ein Probeversuch während 72 Stunden unter den hier beschriebenen Bedingungen ausgeführt wird. Dieser Probeversuch besteht darin,

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dass die zu untersuchenden Mikroorganismenzellen (0,1 bis 0,3 g, angegeben als getrocknetes Material) mit einer wässrigen !lösung von 0,5 Gewichts-^ DL 5-(4~Aminobutyl)-hydantoin (30 ml) vermischt werden, wobei die Umsetzung bei einem pH-Wert γόη 6 bis 11 und bei einer Temperatur von 30 bis 37⁰G während 72 Stunden durchgeführt wird und dann quantitativ die Menge des erhaltenen L-iysins oder des gebildeten Salzes bestimmt wird,

Bakterien, Pilze, Hefen, Actinomyoeten und imperfekte Fungi, die sich bei dem Probeversuch als erfolgreich erweisen, lassen sich als Mikroorganismen beim erfindüngsgemässen Verfahren einsetzen. Derartige Mikroorganismen sind weitverteilt. Im allgemeinen ergeben, Bakterien die besten Ergebnisse.

Von besonderen Vorteil beim erfindüngsgemässen Verfahren sind die folgenden Familien, die zu Pseudomonadales und Bubakteriales gehören, d.h₀. Pseudomonadaceaes, Spirillaceae , Enterobacteriaceae, Achromobacteriaceae, Micrococcaceae, Brevibacteriaceae, Corynebacterianceae, Bacillaceae und dergleichen«, Jedoch können auch - wie vorstehend bereits ausgeführt - Mikroorganismen, die beim vorstehend geschilderten Probeversuch erfolgreich sind, ebenfalls beim erfindüngsgemässen Verfahren eingesetzt werden, selbst wenn sie nicht zu den vorstehend aufgeführten Familien und Ordnungen gehören.

Repräsentative Genera von Bakterien, die zu den vorstehend beschriebenen Familien gehören, sind die folgenden (Genus-Klassifizierung nach Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, 7. Auflage 1957)ί

Pseudomonas, Xanthomonas, Aeromonas, Vibrio, Alcaligenes, Achromobacter, Escherichia, Aerobacter, Microcoecms, Brevibacterium, öorynebacterium, Microbacterium, Oellulomonas, Arthrobacter, Bacillus«

Beispiele für Pilze, Hefen, Aotinomyceten und imperfekte Fungi,

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— ρ —

die als Mikroorganismen gemäss der Erfindung angewandt werden können, sind folgende (Barnett¹ s Illustrated Genera of Imperr fekt Fungi, 2_eAuflage, Burgess, I960):

Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Mucor, Rhizopus, Yerti~ cillium, Alternaria und Helminthosporium, sowie (Rodder et al₀, The Yeast, A Taxonomlc Study, Amsterdam, Uord-Holland)ι Saccharomyces, Pichia, Hansenula, Debaryomyees und Lipomyces, die zur Endomycetaceae gehören, sowie Oryptocoocus, Torulopsis, Candida, Trichosporon und Ehodotorula, die zu Cryptocoocaceae gehören, und (Waksman, The Actinomicetes, Williams & Wilkens, 1961): Streptomyces, Horcardia, Thermoactinomyces, Waksmania und Actinoplanes„

Die nachfolgend aufgeführten Species von Mikroorganismen erwiesen sich "besonders vorteilhaft im Rahmen der vorliegenden Erfindung. Weiterhin können Mutantenstamme derselben sowie analoge Stämme hierzu ohne weiteres angewandt werden. Zu den spezifischen Stämmen gehören:

Aerobacter aerogenes KY 5052

Arthrobacter flavescens EY 3154 Arthrobacter paraffineus KY 4311 (ATCG 19065) Arthrobacter roseoparaffineus KY 43Dl (ATOO 15584) Bacillus cereus KY 3315

Bacillus circulans KY 3324 (ATOO 7049) Bacillus coagulans KY 3325 (ATCC 9966) Bacillus licheniformis KY 3332 .

Bacillus macerans KY 3340 (NRRL-&-388) Bacillus polymyxa KY 3350 (1TRRL-694) Bacillus subtilis KY 3363

Brevibaoterium helvolum KY 3468 Brevibacterium ketoglutamicum KY 4305 (ATCC 15588) Brevibaoterium linens KY 3471

Cellulomonas cellasea KY 3491 (ATCC 487) Cellulomonas flavigena KY 3492 (ATCC 482) Cellulomonas gelida KY 3494 (ATCO 488)

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CoryneTDacterium micliiganense KY 3533 Ooryne"bacterium poinsettiae KY 3539 (ATGC 9682) Micrococcus paraffinolyticus KY 4306 (ATCC 15582) *) Microooceus glutamicus (ATCC 13286) Pseudomonas fluorescens KY 3954 (NRRL-B-6) Pseudomonas riboflavina KY 3959 Vibrio percolans KY 4171 (ATCC 15922) Endomyces fibuliger KY 5124
Kloeckera corticis KY 5203
Schizosaccharomyces octosporus KY 5391 Saccharomyces pastorianus KY 5460 Candida mycoderma KY 5804
Aspergillus awamori KY 3

*) = Dieser Mikroorganismus wurde umklassifiziert als Coryneform in Amino Acid, Band 2, 42 (l96O)_e

Die für das erfindungsgemässe Verfahren erforderlichen Enzyme werden hergestellt, indem die Mikroorganismen gemäss üblichen Verfahren kultiviert werden. Derartige Verfahren umfassen die Kultivierung in einem flüssigen Mährmedium oder unter Verwendung einer festen Öberflächenkultur, was von den speziellen Bedürfnissen und Notwendigkeiten abhängig ist. ■

Hinsichtlich der Zusammensetzung des Kulturmediums kann sowohl ein synthetisches als auch ein natürliches Kulturmedium verwendet werden, solange es die wesentlichen Nährstoffe für das Wachstum der angewandten Mikroorganismen enthält. Diese Nährstoffe sind auf dem Fächgebiet bekannt, und hierzu gehören· Substanzen, wie Kohlenstoffquellen, Stickstoffquellen, anorganische Verbindungen und dergleichen, die in geeigneten Mengen von dem angewandten Stamm verwertet werden. So seien als Kohlenstoff quellen z.B. Glucose, Fructose, Mannose, Galactose, Rohrzucker, Maltose, Lactose, Trehalose, Cellobiose, Raffinose, Arabit, Mannit, Sorbit, Inosit, Xylose, Arabinose, Stärkehydrolysate, Abfallmelassen und dergleichen aufgeführt. Diese

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Substanzen können sowohl allein als auch in Mischungen von zwei oder mehr angewandt werden. Als Stickstoffquelle kommen verschiedene Arten von anorganischen oder organischen Verbindungen oder Salzen in Betracht, wie z„B. Ammoniak, Ammonsulfat, Ammonchloriä, Ammonnitrat, Ammoncarbonat, Ammonacetat und dergleichen, Hitrate, Harnstoffe oder andere stickstoffhaltige Verbindungen wie Z₀B. Pepton, Gaeinhydrolysate, Fleischextrakt, Hefeextrakt, Maisquellflüssigkeit, lösliche Brauereirückstände, Fischmehl, entfettete Sojabohnenrückstände, Chrysalis, Fermentationsabfälle und ähnliches. Auch die stickstoffhaltigen Substanzen können einzeln oder als Gemische von mehreren Verbindungen verwendet werden. Weiterhin kann es notwendig sein, zu dem Kulturmedium wesentliche Nährstoffe für das Wachstum der Stämme zuzugeben, beispielsweise Aminosäuren wie Asparaginsäure, Glutaminsäure, Threonin, Methionin und dergleichen_f und/oder Vitamine wie Biotin, Thiamin, Cobalamin und dergleichen. Zu anorganischen Verbindungen, die dem Kulturmedium zugegeben werden können, gehören Kaliumdihydrogenphösphat, Kaliummonohydrogenphosphat, Magnesiumsulfat, Calciumcarbonate Mangansulfat und dergleichen«

Die Kultivierung wird im allgemeinen bei einer Temperatur von etwa 15 bis 50⁰C und bei einem pH-Wert von etwa 4,0 bis 9,0 ausgeführt. Aerobe Bedingungen werden hierbei angewandt und das Wachstum der Mikroorganismen wird bisweilen beschleunigt, wenn die Kultivierung unter Bewegung durchgeführt wird, beispielsweise aerobes Schütteln der Kultur oder unter Rühren einer Submers-Kultür bei Einleitung von sterilisierter Luft«

Es ist vorteilhaft, in geeigneter Weise die Menge der vorhandenen wesentlichen" Enzyme zu steigern* indem eine geringe Menge von 5-(4-Aminobutyl)-hydantoin zu dem Kulturmedium zugegeben wird. Ein Teil oder die Gesamtmenge des 5-(4-Aminobutyl)~ hydantoins kann dem Kulturmedium vor Beginn der Kultivierung zugesetzt werden. In diesem Fall findet die Kultivierung und

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das Reaktionsverfahren parallel statt. Die für das erfindungsgemäße Verfahren wesentlichen Enzyme können in Form von Substanzen, die sich aus der Kultivierung von Mikroorganismen ergeben,- lebenden Zellkörpern, den durch Aufschleifen der Zellkörper erhaltenen Substanzen, den durch Extraktion der Zellkörper.erhaltenen Substanzen und dergleichen verwendet werden. Im allgemeinen wird jedoch die günstigste Umsetzung erhalten, wenn die Kulturflüssigkeit, so wie sie ist, verwendet wir do

Beispiel 1

10 ml eines Kulturmediums aus 1$ Glucose, 0,2$ Ammoniumsulfat, Oo05$ K₂HPO₄, 0,05$ KH₂PO₄, 0,025$ MgSO₄₀TH₂O, 0,3$ Hefeextrakt und 0,3$ CaGO,, die in einem grossen Reagenzglas enthalten waren, wurden sterilisiert und D- oder L-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin hinzugegeben, so dass sich eine Konzentration desselben von 5 mg/ml ergab. Verschiedene Mikroorganismen, die in Tabelle I aufgeführt sind, wurden in dieses Kulturmedium inoculierto Die Kultivierung wurde unter aerobem Schütteln bei 30⁰O während 96 Stunden ausgeführt« Die verschiedenen in der Kulturflüssigkeit erhaltenen.Ausbeuten an !-lysin sind in Tabelle I zusammengefasst.

- Tabelle I «

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Tabelle I

Verwendete Mikroorganismen

Ausbeute an L-Lysin aus 5~ (4~Aminobutyl ).3ay dan to in

Aerobacter aerogenes KY 3052 Arthrobacter flavescans KY. 3154 Bacillus Cereus KY 3315 Bacillus subtilis KY 3363 Cellulomonas ce Hase a KY 3491

ATGO 487

Brevibacterium linens KY 3471 Corynebaeterium poinsettiae KY 3539

ATOC 9682

Micrococcus paraffinolyticus KY 4306

ATCO 15582

Pseudomonas riboflavina KY 3959 Vibrio percolans KY 4171 ATOO 15922 Endomyces fibuliger KY 5124 Candida mycoderma KY 5804 Aspergillus awamori KY 3

D-Form 51$ 49$ 49$ 28$	L-Form 49$
53$ 56$	%
49$	49$
49$	49$
49$
56$	56$ 56$

Beispiel 2

30 ml eines Kulturmediums aus 0,5$ Glucose, 1$ Hefeextrakt, 1$ Pepton und 0,3$ Natriumchlorid wurden in einen konischen Kolben von 250 ml gegossen und bei HO⁰O während 10 Minuten sterilisiert. Die Zellkörper von Pseudomonas fluorescens W 3954 (NEBL-B-6), die auf einem Bouillon-Agarschnitt bei 30⁰C während 24 Stunden kultiviert worden waren, wurden in dieses Medium inoculiertj dann wurde DL-5-(4-Aminobutyl-hydantoin hierzu zugesetzt, so dass sich eine Konzentration von 0,1 Gewichts-^ ergab. Die Kultivierung wurde dann unter aerobem Schüttelen bei 3O⁰O während 24 Stunden durchgeführt.

Die Zellkörper wurden aus der Kulturflüssigkeit nach beendeter Kultivierung mit einer Zentrifuge abgetrennt und einmal mit

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physiologischer Salzlösung gewaschen, wobei diese Lösung in einer Menge etwa entsprechend einem Yiertel der Kulturflüssigkeit angewandt wurde. Dann wurde eine Zentrifugaltrennung durchgeführt, und die Zellkörper.wurden gesammelt. 50 mg der dabei erhaltenen Zellkörper wurden zu 5 ml einer Phosphorsäurepufferlösung (l/l5 m) zugegeben, die 50 mg DL~5-(4~ Aminobutyl)-hydantoin bei einem pH-Wert von 8 enthielt. Nach 72-stündiger Umsetzung waren in der Lösung 38,4 mg L-Lysin gebildet. Dies entspricht einer 90$igen theoretischen Ausbeute O

Beispiel 3

Bs wurde das gleiche Verfahren wie in Beispiel 2 durchgeführt mit Ausnahme, dass Bacillus polymyxa 3350 (NREL-694) als Mikroorganismus angewandt wurde. In der Reaktionslösung wurden 37,0 mg L-Lysin gebildet,

Beispiel 4

■ 40 ml eines Kulturmediums aus 2,5$ Glucose, 0,5$ Ammoniumchlorid, 0,05$ KH₉PO., 0,05$ MgSQ,,7H₉O, 0,2$ N-Z-Amin (Warenbezeichnung für eine Reihe von Caseinhydrolysaten) und 0,5$ OaGO, wurden' in einen konischen Kolben von 250 ml gegossen und sterilisiert. Dann wurden 0,5 Gewichts-$-L-5-(4-Aminobutyl) -hydantoin zugegeben. Micrococous glutamicus Ur. 702 ATCO 13286, der in einem Bouillon-Agar-Schnitt bei 28⁰O während Stunden impfkultiviert worden war, wurde in das Kulturmedium inoculiert. Die Kultivierung wurde dann unter aerobem Schütteln bei 30⁰G während 72 Stunden durchgeführt.

Nach beendeter Kultivierung waren in der Lösung 2,0 mg/ml L-Lysin enthalten.

Beispiel 5

. 40 ml eines Kulturmediums aus 2,5$ Glucose, 0,2$ Ammoniumchlorid, 0,05$ KH₂PO,, 0,05$ K₂HPO₄, 0,05$ MgSO₄.7H₂O, 0,2$ Pepton und 0,5$ OaGO₃ wurden in einen konischen Kolben von

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250 ml gegossen. Bine Menge von 0,5 Gewichts-^ D-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin wurde zugegeben. Micrococcus glutamicus Nr « 901 ATGO 13287, der auf einem Bouillon-Agar-Schnitt bei 37⁰O während 24 Stunden impfkultiviert worden war, wurde dem Kulturmedium zugegeben. Dann wurde die Kultivierung unter aerobem Schütteln "bei 30⁰G während 72 Stunden ausgeführt.

Nach beendeter Kultivierung waren in der Kulturflüssigkeit 2,58 mg I-Lj^sin/ml vorhanden«

Im vorstehenden wurde die Erfindung anhand bevorzugter Ausführungsformen beschrieben. Die Erfindung kann jedoch vielfach variiert werdenο

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Claims

^afenfonwälfe
Dr.-lng. WS '-JSCHKE 1543720

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Kyowa Hakko Kogyo Go, Ltd_e

Patentansprüche

Io Verfahren zur Herstellung von L-Lysin, dadurch gekennzeichnet, dass D-j L- oder DL-5-(4~Aminobutyl)-hydantoin zu einem wässrigen Hährmedium zugegeben werden, das einen zur Spaltung eines Hydantoinringes durch Hydrolyse geeigneten Mikroorganismus, ein durch diesen Mikroorganismus gebildetes Enzym oder eine dasselbe enthaltende Substanz enthält, und die Umsetzung unter aeroben Bedingungen bei einem pH-Wert von etwa 6,0 bis 11,0 unter Bildung von L-Lysin durchgeführt und das gebildete L-Lysin gewonnen wird«,
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass mindestens ein Teil des Hydantoins zu dem wässrigen Nährmedium vor der Zugabe der Mikroorganismen zugegeben wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Umsetzung
durchgeführt wird«

dass die Umsetzung bei einer Temperatur zwischen 20 und 35°C
4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass ein Mikroorganismus verwendet wird, der 5-(4~Aminobutyl) -hydantoin in L-Lysin in einer grösseren Ausbeute als 2 Mol-$ überführt, wenn 0,1 bis 0,3 der getrockneten Zellen des Mikroorganismus mit 30 ml einer wässrigen Lösung von 0,5 G-ewichts- i» DL-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin bei einem pH Wert von 6,0 bis 11,0 und einer Temperatur von 30 bis 37⁰O während 72 Stunden umgesetzt wird.
5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass D-, L« oder DL-5-(4-Aminobutyl)«hydantoin zu einem wässrigen Nährmedium zugegeben wird, welches einen zur Spaltung eines Hydantoinringes durch Hydrolyse geeigneten Mikroorganismus enthält,

flaue Unterlagen

— MT —

dass die erhaltene Lösung unter aeroben Bedingungen "bei
einem pH-Wert von 4»0 bis 9,0 und einer Temperatur von etwa 15 bis 5O⁰C kultiviert wird,■dass die erhaltenen Mikroorganismenzellen abgetrennt und zu einer lösung mit einem pH-Wert von etwa 6,0 bis 11,0 zugegeben werden, die B-, L-
oder DL-5-(4-Aminobutyl!-hydantoin enthält, und die Umsetzung unter Bildung von L-Lysin durchgeführt und das gebildete L-Lysin gewonnen wird,
6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass
ein Mikroorganismus verwendet wird, welcher 5~(4-Aminobutyl) -hydantoin in L-Lysin in einer grösseren Ausbeute aus 2 MoI- io überführt, wenn 0,1 bis 0,3 der getrockneten Zellen des
Mikroorganismus mit 30 ml einer wässrigen Lösung mit 0,5 Gewichts-5£ DL-5-(4-Aminobutyl)-hydantoin bei einem pH-Wert von 6,0 bis 11,0 und einer üemperatur zwischen 30 und 37⁰Cwährend 72 Stunden umgesetzt wird.

7· Verfahren nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Umsetzung bei einer Temperatur von 20 bis 35⁰C durchgeführt wird«

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