CZ405498A3

CZ405498A3 - Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho použití

Info

Publication number: CZ405498A3
Application number: CZ984054A
Authority: CZ
Inventors: Dominique Meyer; Marc Port; Olivier Rousseaux; Christian Simonot
Original assignee: Guerbet S. A.
Priority date: 1997-12-10
Filing date: 1998-12-09
Publication date: 1999-06-16
Also published as: CN1132822C; KR19990063025A; DE69807830D1; JP3020938B2; CZ293218B6; IL127467A0; HUP9802849A3; BR9805801A; CN1225922A; EP0922700A1; HU9802849D0; TR199802559A3; PL330214A1; DK0922700T3; EA199800998A3; PT922700E; HUP9802849A2; NO318037B1; IL127467A; HK1021976A1

Description

Chelát kat iontu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho použití

Oblast techniky

Vynález se týká chelátu kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho použití k diagnostickému znázorňování zvláště magnetickou rezonancí (IRM) magnetických kationtů.

Dosavadní stav techniky

Relaxivity π a Γ2 a zejména první z nich jsou mírou magnetické účinnosti takového chelátu a dovolují vyhodnocovat jeho užitečnost jako kontrastního produktu. U produktů současně obchodně dostupných nepřekračuje ri 6 mM^_1s¹(při 20 MHz a 37 ’C), kde cheláty jsou lineární (gadopentetát nebo DTPA gadoversetamid) nebo makrocyklické (gadoterát nebo DOTA a gadoteridol). Jinak se tyto sloučeniny, podávané intravenosně, rychle rozptylují z cévní oblasti do intersticiálních mimobuněčných oblastí a dosud není obchodně dostupný produkt, který by zůstával dostatečně lokalizován v cévách k umožnění dobrého vyhodnocení pronikání tkáněmi, kapilární permeabi1 i ty nebo krevního objemu.

ti.,

Makromolekulám! deriváty, které jsou výsledkem roubování klasického chelátu na biokompatibilni polymer, například získaný vázáním gadopentetátu na polyethylenglykol nebo polylysin nebo gadopentetát a gadoterát na polysacharid, jež byly popsány před 10 lety a které byly testovány na zvířatech, nejsou dosud vyvinuty pro humánní použití.

Bylo již navrhováno roubovat tyto klasické cheláty (DTPA nebo DOTA) na rozvětvené polymery jednotné molekulové hmotnosti, nazývané kaskády nebo dendrimery sestávající z opakovaných pozměněných jednotek, jako například v patentových spisech Číslo EP-A-430863 nebo EP-A-607222. Připomíná se, že relaxivity těchto produktů jsou zvýšené a představují určitou tkáňovou remanenci, avšak tyto výsledky zůstávají ojedinělé, jelikož například polyaminy, nesoucí 24 nebo 48 molekul gadopentetátu, popsané v patentovém spise číslo EP-A-430863, mají pres svůj tvar pouze jedinou relaxivitu π řádově pouze 13 mM“¹s ¹ , a to pouze pro 4,8 mM“¹s“¹ gadopentetát; ostatně se jeviio jako obtížné izolovat syntézou jedinou sloučeninu, k získání substituce všech koncových skupin takového polyaminu za předpokladu, že by bylo možno získat jednotnou molekulovou hmotnost, což by se vyhnulo rozptylu fyzikálně-chemických a farmakokinetických vlastností sloučenin podané dávky, což je známá nedostatek derivátů klasických polymerů, která omezila jejich rozvoj.

Z novější literatury, zaměřené na získání molekul.se silnou relaxivitou jednotné molekulové hmoty a přinášejících jen jedin/é cheiátové seskupení, je možno citovat patentové spisy EP-A-661279 a WO 97/01359, které zdůrazňují záměr zavést do známých molekulových struktur alespoň tři boční hydrofi lni větve o hmotě vyšší než 200 na bočních substituentech poskytujících atomy dusíku, které nesou ostatní koordinační skupiny, které by měly být skupinami kyselin nebo jejich derivátů; jmenovitě se naznačuje, že komplexy gadolinia sloučenin odvozez gadoterátu obecného vzorce

HOOC COOH

I I r-hc-n-ch₂-ch,-n-ch-r

I I

CH, CH,

R-HC-N-CH,-CH,-N-CH-R HOOC COOH kde znamená R skupinu

X CONR^ (CH₂)₂-CONH-CH₂-CONH-\ Vx x conr₁r₂ mají relaxivitu π >20mM¹s^-1 při 20 MHz a 37 ”C.

Jako sloučeninu se silnou relaxivitou a představující určitou cévní remanenci je třeba také citovat popis v patentovém spise číslo WO 96/23526, struktury zřetelně odlišné oproti předchozím strukturám, z nichž jeden reprezentant, MS325, komplex gadolinia obecného vzorce

O=P-OH

CO₂H co₂h

se váže reversibilně na albumin plasmy tak, že jeho relaxivita π v tomto prostředí je prakticky 10-násobkem relaxivity gadopentetátu, z něhož je odvozen, pro poločas životnosti násobený 4 a s distribučním objemem děleným 2,5 u králíka (Acad. Radiol. str. 356 až 358, 1996).

Na rozdíl od MS325 a jeho homologů mají kovové paramagnetické komplexy podle vynálezu zvýšené relaxivity, i ve vodě, jelikož π je vyšší než 30 mM ¹ s^-1 ( 20 MHz a 37 °C); nadto

- 4 0 0 0 »00 «

0 4 vzhledem k tomu, že se prakticky nevážou na plasmový albumin, představují zřetelnou cévní lokalizací a jsou zásadně vylučovány ledvinami tak, že jich lze s výhodou používat v IRM jako kontrastní látky zviditelňující oběhový systém.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou obecného vzorce.. I . _ . ._...... ... ....... ......

HOOC COOH

I I

RHN-OC-(CH₂)_m-HC-N-CH_rCH₂-N-CH-(CH₂)_m-CO-NHR·

I I ch₂ ch₂

Íh₂ ch₂

I I

R'N-CH₂-CH₂-N- CH-(CH₂)_m-CO-NHR COOH kde znamená m 1 nebo 2,

R’ atom vodíku, skupinu alkylovou nebo hydroxyalkylovou vždy s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu CH2 -COOH nebo CH2-CONZ1Z2, kde znamená Zi a Z2 na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou, nebo R’ znamená skupinu

HOOC-CH-(CH2 ) n-CONHR, skupinu obecného vzorce

a

R_g r₄ « * kde znamená a 1 nebo 2,

Z vazbu, skupinu CH2 , CH2CONH nebo {CH2)2NHCO

Z’ vazbu, atom kyslíku, atom síry, skupinu NQ, CH2,

CO, CO-NQ, NQ-CO, NQ-CO-NQ nebo CO-NQ-CH2-CONQ,

Z’’ skupinu CO-NQ, NQ-CO, CO-NQ-CH2-CONQ nebo skupinu

NQ-CO-CH2-CONQ, kde zanemná Q atom vodíku nebo skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou,

Ri , R2 , Ra ,

R4 a Rs na sobě nezávisle atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu, skupinu CO-NQiQ2 nebo N(Qi)-CO-Q2, kde znamená Qi a Q2, které jsou stejné nebo různé, skupinu alkylovou s 2 až 6 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou, popřípadě přerušenou atomem kyslíku, takže Qi a Q2 mají dohromady 4 až 10 hydroxylových skupin, přičemž alespoň jedna a lépe dvě skupiny symbolu Ri, R2, R3, Ra a Rs znamenají amidoskupinu, a jeho farmaceuticky vhodné soli s minerální nebo s organickou zásadou.

Kovové kationty, vytvářející chelát podle vynálezu, jsou voleny ze souboru zahrnujícího paramagnetické kationty, obecně používané v IRM, zvláště trojmocné kationty železa, chrómu, europia, gadolinia, terbia a zvláště gadolinia a pro scintigrafii kationty radioaktivních prvků es«Tc nebo ¹¹¹In.

Minerální zásady, které poskytují faziologicky vhodné soli s případnou volnou kyselinou kovového komplexu sloučeniny k * ··· obecného vzorce I, jsou s výhodou ze souboru zahrnujícího hydroxidy a uhličitany alkalických kovů (draselné nebo sodné) nebo kovů alkalických zemin (vápenaté a horečnaté), zatímco zásady organické se volí ze souboru zahrnujícího aminy například aminoethano1, thromethamin a N-methylglukamin a aminokyseliny, jako je lyzin, glycin nebo arginin.

Přednost se dává sloučeninám obecného vzorce I, kde znamená m 2 a a 1, R’ jinou skupinu než vodík nebo alkyl, Z vazbu,

CHz - nebo- CH2-CGNH-, Z- skupinu- CONH, NHCO, -CONHCH3CONH nebo-.....

NHCONH, Z’’ skupinu CONH nebo CONHCH2CONH, R3 skupinu CONQi Q2 a Ri , R2, R4 a Rs na sobě nezávisle atom vodíku, bromu, chlor ru nebo jodu nebo R2 = R4 a znamená skupinu CONQiQ2 a v tomto případě Ri, R3 a Rs na sobě nezávisle znamenají atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu, nebo znamená Z’’ skupinu NHCO a R3 v tomto případě skupinu N(Qi)COQ2 a Ri , R2 , R4 a Rs na sobě nezávisle atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu nebo R2 - R4 a znamená skupinu N(Qi)COQ2 a v tomto případě Ri , Ra a Rs na sobě nezávisle atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu.

Ze shora uvedených sloučenin se dává přednost sloučeninám obecného vzorce I, kde znamená Z’ skupinu CONH, CONHCH2CONH nebo NHCONH a zvláště skupinu CONH, kratší vazbu, Ri , R3 a Rs vždy atom bromu nebo jodu a R2 = R4 a znamená skupinu N(Qi)COQ2 , přičemž Qi a Q2 znamenají hydroxylovanou alkylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, mající 6 až 10 hydroxylových skupin nebo v případě, že Qi a/nebo Q2 jsou přerušeny atomem kyslíku, mají 4 až 8 hydroxylových skupin.

Způsob přípravy chelátu kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou obecného vzorce I spočívá podle vynálezu v tom, že se nechává reagovat chelát obecného vzorce II, kationt kovu M³⁺ a sloučenina obecného vzorce II’ • « • ·· · *

HOOC COOH

RHN-OC-(CH₂)_m-HC-N-CH₂-CH₂-N-CH-(CH₂)_m-CO-NHR

CH

ÓH ch₂

I ch₂

CIIJ

R'N-CH₂-CH₂-N- CH-(CH₂VCO-NHR COOH amin obecného vzorce III

význam, v přitomvhodného pro příkde jednotlivé symboly mají shora uvedený nosti kopulačního činidla, zvláště činidla právu peptidu, přizpůsobeného reakčnímu prostředí, vodnému nebo organickému, ve kterém jsou sloučeniny obecného vzorce II a III alespoň částečně rozpustné. Za těchto podmínek nereagují skupiny karboxylové kyseliny, chráněné na atomech uhlíku a dusíkových atomů sloučeniny obecného vzorce II.

Vynález se také týká kontrastních produktů pro znázorňování v případě lidí nebo zvířat scintigrafií, pokud je chelát radioaktivně značen nebo magnetickou rezonancí, pokud chelát obsahuje paramagnetický iont popřípadě ve formě soli minerálního nebo organického kationtu, přičemž produkt obsahuje farmaceuticky vhodný nosič spolu se vhodnými excipienty.

Vynález se také týká způsobu zviditelnění lidského nebo zvířecího těla, při kterém se subjektu podává jednotná dávka účinné látky podle vynálezu a tkáň nebo zóna se studuje ve vhodném magnetickém poli pro sledování magnetické rezonance

9 9 9

9 99 »99 9 9

9 9 protonu nebo scintigrafií, když chelát obsahuje radioaktivní prvek.

Cheláty obecného vzorce I» mající čtyři stejné substituenty na atomech dusíku centrálního makrocyklu, 1,4,7,10-tetraazacyklododekanu nebo cyklenu, se připravují jinými způsoby než sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená R’ atom vodíku, skupinu CH2-COOH nebo CH2-CONZi Z2 nebo skupinu alkylovou nebo hydroxyalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, jelikož se musí dočasně selektivně chránit na jednom ze čtyř atomů dusíku cyklenu labilní skupinou nebo se musí předběžně makrocyklus monosubsti.tuovat skupinou R’.

Skupiny symbolu R sloučenin podle vynálezu mají tři nebo čtyři fenylová jádra, z nichž nejvíce vzdálené makrocyklu jsou substituované jednou z hydrofilních skupin, které ovlivňují rozpustnost ve vodě a biokompatibi1 i tu chelátu. Z těchto hydrofilních skupin se dává přednost terciárním anidovým skupinám, jejichž substituenty jsou hydroxylované alkylové skupiny s 2 až 6 atomy uhlíku, popřípadě přerušené atomem kyslíku a zvláště skupinám odvozeným od lineárních aminoalkoholů obecného vzorce HNQiQ2, kde znamenají Qi a Q2 na sobě nezávisle skupinu CH2(CHOH)n(CH2OCH2)r(CHOH)pCH2OH a pokud ve skupině symbolu Qi a Qj r znamená nulu, tedy p znamená nulu a n může znamenat O až 4 a Qi a Q2 mají dohromady 5 až 10 hydroxylových skupin, odovídá skupina obecného vzorce HNQi Q2 skupině vzorce HN-[CH2 (CHOH)4-CH2OH]2 a

HN-CHa (CHOH)4-CH₂OH t

CH2-CHOH-CH2OH a pokud ve skupině symbolu Qi a/nebo Qa r znamená 1, p a n na sobě nezávisle nulu nebo 1 a Qi a Q2 mají dohromady 4 až 8 hydroxylových skupin, odovídá skupina obecného vzorce HNQi Q2 skupině vzorce

HN-CH2(CHOH)3“CH2OH (CH2 )2-OCH2-CH2OH

• 4444

4 4·

4 « · « 4 «4 ··

HN-CH2(CHOH)2-CH2 OH

CH2-CHOH-CH2 OCH2-CH2 OH

HN-CH2(CHOH)2-CH2OH

I

CH2-CH2-OCH2-CHOH-CH2 OH

Tyto aminoalkoholové prekursory jsou obchodními produkty a mohou se připravovat bud ze vhodných primárních aminoalkoholů, například cukru a redukcí způsobem popsaným v- evropskémpatentovém spise Číslo EP-A-675105, jestliže n znamená 4a p stejně jako r nulu nebo . jest 1iže n.znamená.3 a p stejně jako r nulu způsobem popsaným v evropském patentovém spise číslo EPA-558395, nebo působením cukru na benzyiamin, následným zavedením druhého hydroxyloveného substituentu působením vhodného halogenátu nebo sulfonátu a eliminací benzylu katalytickou hydrogenací.

Pokud skupiny symbolu Qi a/nebo Q2 mají ve svém řetězci atom kyslíku, připravují se aminoa1 koho 1y, pokud nap znamenají nulu, z 2-aminoethoxyethanolu, se kterým se může nechávat reagovat epoxid nabo halogenid vhodného hydroxylovaného alkylu nebo také alifatický hydroxylovaný aldehyd, například monosacharid za vytvoření iminu, který se následně katalyticky nebo chemicky redukuje.

Jestliže n znamená 1, mohou se aminoa1 koholý připravovat působením epoxidu obecného vzorce

CH2-CH-CH2-O-CH2-(CHOH)_P-CH₃ OH \ / se vhodným primárním aminoalkoholem, přičemž se používaný epoxid získá oxidací odpovídajícího ethylenového derivátu působením peroxykyse1iny nebo peroxyimidové kyseliny (J. Org. Chem. 26, str. 659 až 663 a 48, str. 888 až 890, 1983).

« 4 4·· · 4 · · • 4 4444 4 • 4 4 4

4444 44 44

4

Přítomnost halogenových atomů na amidických skupinách fenylového kruhu je výhodná, přičemž se dává přednost skupinám R, kde Ri =Ra =Rs a znamená vždy atom bromu nebo atom jodu a R2 = R4 a znamená skupinu CO-NQi Q2 , zvláště pro jejich· stabi 1 itu.

Je možno vytáret můstek Z’’ mezi dvěma fenylovými kruhy h před mebo za můstky Z’.

Například se může připravovat sloučenina obecného vzorce

IV

Z'

H₂N-Z-^~y

COOH (iv) v případě, kdy Z znamená vazbu z derivátu fenolu obecného vzorce V

COOH (v;

kde Z’ má u obecného vzorce I uvedený význam, nebo z jeho esterů.

V literatuře jsou popsány sloučeniny obecného vzorce V, kde znamená Z’ nulu (Makromolekulare Chemie 130, str. 103 až ' 144, 1969); kde znamená Z’ skupinu NH (Indián J. Chem. 13,str.

až 37, 1975); kde znamená Z’ skupinu CH2 nebo CO (J. Pharm. Sci. 55(3),str. 295 až 302, 1966); kde znamená Z’vazbu (Synth. Comm. 24(22), str. 3307 až 3313, 1994) a kde znamená Z’ atom síry (II Farmaco 44(7-8), str. 683 až 684, 1989).

Jiné sloučeniny obecného vzorce V se mohou připravovat analogickými způsoby. Například v případe, když znamená Z*sku · · · • · «« to ··» » * • · · • · pinu. HNCONH, působením sloučeniny vzorce O2NC6H4NCO na sloučeninou vzorce H2NC6H4COOH v bezvodém prostředí, nebo když znamená Z’skupinu HNCO nebo CONH, působením chloridu aromatické kyseliny na vhodný anilin ve vhodném aprotickém rozpouštědle, jako je CH2CI2 , CeHsCH3, CH3CON(CH3)2 nebo aromatické kyseliny na anilin v přítomnosti chloridu sulfonové kyseliny, triethylaminu a dimethylaminopyridinu (Synth, Communications 25(18), str. 2877 až 2881, 1995).

........Redukce nitroskupiny na aminoskupinu- se může-provádět o sobě známým způsobem vodíkem v přítomnosti katalyzátoru nebo chemicky.

Jestliže Z ve sloučenině obecného vzorce IV znamená skupinu CH2-CONH, může se nechávat reagovat aktivovaný glycin, vé kterém je aminoskupina chráněna na sloučeninu obecného vzorce IV, ve které Z znamená vazbu, nebo na anilin mající skupinu, která je prekursorem Z’, popřípadě chráněným. Glycin je chráněn například ve formě karbamátu, zvláště terc.-butylkarbamátu (Synthesis 48, 1986) a benzylkarbamátu (Chem. Ber. 65, str. 1192, 1932), ve formě ftalimidu (Tetrahedron Letters 25, 20, str. 2093 až 2096, 1984), benzylovou skupinou (Bull. Soc. Chim. Fr., str. 1012 až 1015, 1954), N-allylovou skupinou (Tetrahedron Letters 22, 16, str. 1483 až 1486, 1981). Zároveň se připomíná publikace Protective groups in Organic Synthesis, str. 315 až 349 (T.W. Greene, John Wiley & Sons lne.).

Skupina chránící aminoskupinu, fixovaná na Z, se obecně odstraňuje ze sloučeniny obecného vzorce III. Klasicky se ftalimidoskupina odstraňuje působením hydrazinu, zatímco benzyloxykarbonylová nebo benzylová skupina se odstraňuje katalytickou hydrogenací.

Pokud Z znamená skupinu CH2 ve sloučenině obecného vzorce IV a Z’ skupinu CONH nebo CONHCH2CONH, může se nechávat « · • · · ·» • · ··*· * > · · t • <*·· ·« ·· • · · » · · « ·· ·» reagovat kyselina 4-aminomethylbenzoová, ve které je aminoskupina chráněna ve formě karbamátu nebo ímidu (J. Org. Chem. 43, str. 2320 až 2325, 1978 nebo Rec. Trav. Chim. Pay-Bas, 79, str. 688, 1960) za získání chráněné kyseliny benzoové vhodně substituované.

Pokud Z znamená skupinu (CH2 )2NHC0, může se sloučenina obecného vzorce III připravovat působením nadbytku ethylendiaminu na vhodný ester benzoové kyseliny mající bud vázanou substituovanou skupinu {Z ’-fenyl )a-Z ’ ’ rfenylo.vou nebo mající jen prekursor skupiny Z’ popřípadě chráněné.

Ostatně jestliže a znamená 2, může se nechat reagovat sloučenina obecného vzorce IV, jejíž aminoskupina je popřípadě chráněná, s amonobenzoovou kyselinou, jejíž kyselinová skupina je popřípadě chráněná, pro získání sloučeniny obecného vzorce IV*, ve které druhé Z’ je CONH, obecného vzorce IV’

2' _ _. 1 ,_N._Z ry

COOH

(iv’)

Následně se může nechávat reagovat fenylový kruh koncový, vhodně substituovaný obecného vzorce VI

(VI kde znamenají Ri , R2 , R3, R4 , Rs vždy atom vodíku, halogenu, skupinu CO-NQ1Q2, jako v obecném vzorci I nebo jsou popřípadě chráněné a R’’ znamená skupinu vzorce CO-CHa-NHs nebo atom vodíku, v organickém nebo ve vodném roztoku, přičemž jsou sloučeniny obecného vzorce IV nebo IV’ bud ve formě chloridu • · • · · · * • · I • ♦ φ • · i « · I kyseliny nebo v přítomnosti kopulačního činidla, jakého se používá pro syntézu peptidů a například chlorformiátu, su1 fochloridu nebo alifatického karbodiimidu, popřípadě mající aminoskupinu nebo kvarterní amoniovou solubi1ízační skupinu.

Amid obecného vzorce VI, kde znamená R’’ atom vodíku, se připravuje pro pracovníky v oboru o sobě známými způsoby ze vhodné aromatické aminokyseliny, popřípadě halogenované, ve které je každá karboxylové skupina aktivovaná ve formě chloridu kyseliny nebo směsného anhydridu nebo z nitrované aromatické kyseliny, která se amiduje před redukcí nitroskupiny.

Sloučeniny obecného vzorce VI, kde Ri=R3=Rs a znamená vždy atom bromu nebo jodu a Rí a Rí skupinu CO-NQ1Q2, kde znamená Qi skupinu CK2 (CHOH)4CH2OH a Q2 skupinu CH2CH2OH nebo skupinu CH2(CHOH)1 -3-CH2OH a R’’ skupinu CO-CH2-NH2 jsou popsány ve světovém patentovém spise číslo WO 97/01359. Jiné deriváty, popřípadě halogenované, a zvláště deriváty obecného vzorce VI, kde skupiny Qi a Q2 jsou přerušeny atomem kyslíku, se mohou připravovat obdobnými způsoby ze vhodných aminoalkoholů.

Pokud znamená 2 vazbu, nechává se s výhodou reagovat sloučenina nitrovaná například obecného vzorce V na anilin obecného vzorce VI před provedením redukce.

Také se popřípadě může nechávat reagovat sloučenina obecného vzorce IV nebo IV’ na prekursor sloučeniny obecného vzorce VI, mající skupinu COOH, popřípadě chráněnou ve formě esteru místo skupiny CO-NQ1Q2, pro přípravu monoaminu nebo diaminu nebo ještě se nechává reagovat sloučenina obecného vzorce

kde NL1L2 znamená chráněnou aminoskupinu se sloučeninou obec9 «

něho vzorce

takovou, aby Z’i a Z’2 zreagovaly za získání Z’.

Pro přípravu sloučeniny obecného vzorce III, kde znamená R3 nebo R.2 a R4 skupinu N(Qi )CO-Qa a Z⁵ ’ skupinu NH-CO nebo NH--CO-CH2-NH-CO, se může nechávat reagovat benzoová kyselina obecného vzorce V

kde jsou hydroxylové podíly skupiny N(Qi)CO-Q2 popřípadě chráněny, na sloučeninu obecného vzorce VII ,—, T. NHR

O₂N-ZV « vil kde znamená R’’ atom vodíku nebo skupinu COCH2-NH2 před redukcí nitroskupiny za získání sloučeniny obecného vzorce III, kde znamená Z vazbu.

Ze sloučenin obecného vzorce V se uvádějí sloučeniny připravené z CH2(OCOCH3)CH(OCOCH3)4COCl, popsné v Org. Synth. 41, str.79 až 82 (1961) a běžné amidobenzoové kyseliny, nebo • ·

sloučeniny obecného vzorce V, kde Ri=R3=Rs= atom jodu a Ri=R4 =

CH₂-0

NHCOCH' CHCH(CH₃)₂CH^-O popsané v patentovém spise číslo EP 357467.

Do amidových skupin symbolu Z a^Z' se může skupina symbolu Q zavést klasickým způsobem působením příslušného halogenidu v přítomnosti zásady na sloučeninu, kde Q znamená atom vodíku s výhodou ve formě meziproduktu.

Reakce sloučenin obecného vzorce III se solemi chelátu obecného vzorce II se provádí s výhodou ve vodném prostředí, případně v přítomnosti polárního aprotického rozpouštědla, jako je dioxan nebo tetrahydrofuran, v přítomnosti rozpustného karbodiimidu, jako jsou nosiče aminové skupiny popsané v J. Org. Chem. 21, str. 439 až 441 (1956) a 26, str. 2525 až 2528 (1961) nebo v americkém patentovém spise číslo US 3135748 nebo quáterm amoniové skupiny, popsané v Org. Synth. V, str 555 až 558, což se týká derivátu 1-ethy1-3-(3-dimethy1amino)propylkarbodimidu (EDCI) nebo jeho analogu, l-cyklohexyl-3-(2morfolinoethyl)karbodiimidmetho-p-tolylsulfonátu. Může se také uskutečnit v přítomnosti N-hydroxysuífosukcinimidu, jak je popsáno v Bioconjugate Chem..5, str. 565 až 576 (1994) nebo v přítomnosti 2-sukcinimido-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborátu a analogů popsaných v Tetrahedron Letters 30, str. 1927 až 1930 (1989).

Jiný způsob spočívá ve vytvoření aktivovaného esteru jakožto meziproduktu tím, že se nechá regovat například N-hydroxysulfosukcinimid (NHS) nebo hydroxybenzotriazol (HOBT) v přítomnosti karbodiimidu jako je EDCI za získání chelátu II, kte16

rý se může solubi1 izovat vysolením s minerálním kationtem, například amonným nebo sodným.

V přítomnosti 2-ethoxy-l-ethoxykarbony1-1,2-dihydrochinoleinu (EEDQ), je možno reakci uskutečnit ve vodněalkoholickém prostředí.

Sloučenina obecného vzorce II’, ve které m znamená číslo 1 se může připravit z cyklenu, se kterým se nechává reagovat diester, acetylendikarboxylové kyseliny k získání enaminu, který se redukuje klasickým způsobem, katalytickým nebo chemickým, následovaným hydrolysou esterových skupin. V případě benzylesteru se v prvním stupni s výhodou provádí chemická redukce enaminů, například působením kyanoborhydridu, následovaná debenzylací vodíkem v přítomnosti katalyzátoru.

Chelát obecného vzorce II, kde znamená m číslo 2 a 4 substituenty na dusíku jsou stejné a M³* znamená Gd^{3 +} , je známá sloučenina, popsaná v evropském patentovém spise číslo EP-AA661279.

Chelát obecného vzorce II, kde znamená m číslo 1, se připravuje stejným způsobem.

Sloučeniny obecného vzorce II, ve kterých M³⁺ znamená jiný kovový kationt, se připravují obdobným způsobem působením kovové soli, obzvláště chloridu, nebo oxidu kovu na vodný roztok ligandové soli (americký patentový spis číslo US 5 554748 a v tam uvedené odkazy nebo Helv. Chim. Acta 69, str. 2067 až 2074, 1986) nebo výměnou kationtu, pokud to relativní stabilita chelátů dovolí, jmenovitě s iontoměničovou pryskyřicí.

V případě chelátů s radioaktivním prvkem je možno uskutečnit radioisotopickou výměnu zahřátím chelátů s minerální solí radioaktivního kovu v ultračisté vodě a eliminací nekomplex• « « · • ·· • * · »4 ·· nich kationtů převodem na komplexotvorné pryskyřici. Je také možno uvolnit kovový kationt chelátu jiným komplexotvorným činidlem v nadbytku, s výhodou dodávajícím chelátu gadolinia nerozpustnost, jako je štaveiová kyselina, k získání čisté sloučeniny obecného vzorce II, před komplexováním jiného kovového kationtů.

Sloučeniny obecného vzorce II, kde znamená n Číslo 2 a R' atom vodíku, případně hydroxylovaný alkyl, skupinu CH2COOH a CH2CONZ1Z2 se mohou -připravit z cyklenu monosubstituovaného skupinou R' nebo odstranitelnou chránící skupinou, kdy k začlenění R' dochází po trialkylaci pomocí ROOC-CH(CH2)2-COOR, Mezi monosubsti tuční mi způsoby lze jmenovat monoalkylační reakci podporovanou volbou rozpouštědla (J. Org. Chem. 58, sir. 3869 až 3876, 1993), reakci s komplexací tří atomů dusíku deriváty boru nebo fosforu (Tetrahedron Letters 32(5), str. 639 až 641, 1991 a Angew. Chem. Int. Ed. 30(5), str. 560 až 5.61, 1991) nebo reakci s vytvořením orthoamidu jakožto meziproduktu (americký patentový spis Číslo US 5 410043). Pokud neznamená R' atom vodíku, je výhodné zavést napřed skupinu symbolu R' místo přímého ovlivnění trialkylace cyklenu rektivním derivátem ROOC-CH-(CH2)2COOR, nemohou být dialkylované a trialkyloI váné deriváty vytvořené současně, nemohou být odstraněny jednoduchými reakcemi.

Způsoby čištění různých meziproduktů přípravy a konečných produktů jsou o sobě známy, mohou však být přirozeně přizpůsobovány podle povahy chemické sloučeniny, molekulové hmotnosti, rozpustnosti a vískozity jejích roztoků. Mohou se používat způsoby chemického oddělování (selektivní rozpouštění, krystal izace) nebo fyzikálního oddělování (filtrace přes membránu, zpracování adsorbentem, v suspenzi nebo na koloně.

Zvláště sloučeniny obecného vzorce III, které jsou roz18 pustné ve vodném prostředí, se mohou čistit vedením přes anexovou a katexovou pryskyřici nebo ultrafi 1trací, diafiltrací nebo inverzní osmózou na membráně vhodně volené k eliminaci molekul s nízkou hmotností, jejich solvátů a solí z eluátu.

V případě sloučenin obecného vzorce II’je výhodné k zábraně modifikace podílů izomerů čistit estery jakožto meziprodukty v organickém rozpouštědle nemísitelném při míchání s vodnou kyselou fází a po dekantaci uváděním do styku s adsorbentem, například .. se. __s. i l.ikagelem, před. -jej-ich hydro lysou v zásasditém nebo v kyselém prostředí k získání kyselin obecného vzorce II’ pro komplexování.

Cheláty obecného vzorce I se obecně čistí v podobě alkalické soli rozpustné ve vodném prostředí některým ze shora uvedených způsobů a zvláště zpracováním jejich vodných roztoků aktivním uhlím nebo silanizovaným oxidem křemičitým.

Cheláty podle vynálezu jsou charakterizovány chelátovým centrálním jádrem s postranními řetězci majícími tři nebo čtyři fenylová jádra, navzájem spojená krátkými můstky, přičemž poslední fenylové jádro má alespoň jednu hydrofilní skupinu; přes zvýšenou molekulovou hmotnost a obsah několika hydrofobních fenylových jader, jsou sloučeniny podle vynálezu rozpustné ve vodě a biokompatibilni a mohou se podávat lidem intravenozní cestou.

Ostatně je velmi důležitou vlastností sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu jejich schopnost uvolňovat poněkud žilní cesty na rozdíl od obchodně dostupných prostředků, což umožňuje získat magnetickou rezon^ancí velký kotrast mezi cévami a sousedními tkáněmi; tato vlastnost, spojená s jejich silnou relaxivitou umožňuje vstřikovat lidem dávky komplexních sloučenin gadolinia ke zjištění patologických stavů, což nebylo dosud možné.

• 0 · 0

Paramagnetické cheláty podle vynálezu mohou být formulovány k parenterálni mu nebo k enterálnímu podávání spolu s farmaceuticky vhodnými nosiči a s excipienty běžně používanými pro tento úče1.

K intravenosnímu nebo intraarteriálnímu podávání se mohou sloučeniny podle vynálezu podávat v roztoku sterilní vody v koncentraci 0,001 až 0,5 mol/litr, případně se stabilizačním činidlem udržujícím hodnotu pH na 7, jako je pufr TRIS nebo oxid uhličitý na .is.otonizujícím činidle jako. je manni tolg-lycerol nebo glukóza, s výhodou na chloridu sodném, který může měnit rozpustnost a dispersnost chelátu nebo na jiném komplexotvorném činidle jako je EDTA.

K vyloučení endotoxinů, které mohou kontaminovat konečný produkt, zejména čištěním následnou kapalinovou chromatografií, je výhodná ultrafiltrace, případně tangenciální na objem citlivě konstantní, na membránách, jejichž povaha a práh porušení jsou funkcí molekulární hmoty produktu a tlaku viskozity roztoku. Toto čištění se může uskutečnit také po intermediárních etapách na prostředcích menších rozměrů, mikrofi 1trací, jmenovitě na membráně s nábojem nebo ultrafi 11raci. Je možno též zajistit zpracování absorbentem specifickým nebo nespecifickým pro endotoxiny jako je aktivní uhlí.

Pro intravaginální podání mají vodné roztoky s výhodou činidlo upravující viskozitu, jako je přírodní pryž, polysacharid nebo derivát celulózy. Pro rektální podání je chelát formulován do tvaru čípků nebo viskosního roztoku. Pro orální podání přicházejí v úvahu kapsle, tablety nebo sirup, připravené s obvyklými excipienty. Příklady farmaceutických prostředků jsou známy z literatury (Remington's for Pharmaceutical Science 18. vydání Mack. Pub. Cy.,1990).

Jednotková dávka a její koncentrace závisí na hmotnosti • 44 4 · 4 * ·· · 4 · 4 4 4 ··· 4 «

4444 44 444 ·· ·4 444 4444 *· ·· jedince, na zdravotním stavu, ale také na rozpustnosti, viskositě roztoku, magnetické účinnosti, kapilární permeability a farmakokinetiky prostředku. Bylo by jich možno použít v závislosti na magnetické rezonanci při aplikaci technik rychlých nebo technik nerychlých, ke studiu perfuse, zejména myokardické, mozkové, ledvinové nebo hepatitické, k angiografii, ke zviditelnění nebo k chrakterizování anomálií permeability, zejména nádorové, zánětlivé a ischemické nebo chrupavkové.

„ ...Těchto výrobků je. rovněž-možno použít v nukleární medici^· ně po zavedení radioaktivního atomu, například izotopickou výměnou halogenů nebo komplexního kationtů; scintigrafie zobrazovaných zón by se prováděla po podání chelátů podle vynálezu.

V následujícím textu jsou popsány příklady prostředků podle vynálezu i způsob přípravy chelátů gadolinia prostředků obecného vzorce II, kde R' znamená skupinu vzorce

HOOC-CH(CH2)_mCOOH,

R' znamená atom vodíku a R' znamená CH2COOH a sloučenin obecného vzorce VI jakožto prekursorů fenylů.

Izolované produkty jsou popřípadě chrakterizovány svojí vzdáleností retence při chromatografií na tenké vrstvě nebo svojí dobou retence (tr) při kapalinové vysoce výkonostní chromatografií (HPLC) nebo při chromatografií výhradně sférické (CES). Jejich molekulové hmotnosti byly stanoveny hmotovou spektrografií (elektrosprej).

A. Sodná sůl chelátů gadolinia [1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-l,4,7,10-tetra-(2-glútarové) kyseliny

1.

Do roztoku 25 g 1,4,7,10-tetraazacyklododekanu ve 280 ml acetonitrilu se přidá 30 g uhličitanu sodného a 78 g 2-bromglutarátethylenu, připraveného způsobem popsaným v Acta Chim.

··» ♦ ··* • ·

Acad. Sci. Hung. 41 (3), str. 331-336 (1964). Reakční směs se udržuje jeden den na teplotě zpětného toku a během té doby se dvakrát přidá 78 g derivátu bromu se 30 g uhličitanu sodného. Po vychladnutí se sraženina odfiltruje a organická fáze se promyje vodou před extrakcí vodným roztokem zředěným kyselinou chlorovodíkovou. Vodná fáze s hodnotou pH upravenou na 3 až 4 se extrahuje toluenem.

Žádaný produkt se čistí chromatografií na silikagelu za použití, methy lench.lor i.du ,. případně ve směsi s acetonem jako -elučního Činidla.

/

2. Hydrolyza esterových skupin

Rozpustí se 46 g oktaesteru v 52 ml ethanolu ve 350 ml vody, do kterého se přidalo 50 g hydroxidu sodného v podobě perel.

Po dvoudenním míchání při teplotě 80 ”C se do vychladlého roztoku přidá 500 ml katexové pryskyřice v podobě slabé kyseliny k neutralizaci a pak po oddělení pevné fáze se přidá 500 ml anexové pryskyřice ve tvaru silné zásady. Pryskyřice se oddělí a přenese se do 500 ml vodného roztoku 6N octové kyseliny. Konečný produkt, přešlý do roztoku, se izoluje ve tvaru prášku po odpaření rozpouštědla ve vakuu.

HPLC: sloupec 25 cm x 4,6 mm silikagelu Nucleosil C18 100-5. Eluční činidlo č. 1: vodná kyselina sírová (0,1%) během 10 minut pak s objemově 0 až 10% CH3CN po 10 minut: d = 1 ml/min, T = 25 ”C.

tr - 5,4; 8,7; 10,2 14 min (isomery)(CH3COOH - tr- 4,5 minut)

3. Vytváření komplexu

Oxidem gadolinia: ve 30 ml roztoku s hodnotou pH 5,5 až 6 2 g shora uvedené oktakyseliny se přidá 0,47 g oxidu gadolinia

v « * ·· • · ·♦· · · • · · a směs se udržuje tři hodiny na teplotě 80 ’C, přičemž se podle potřeby hodnota pH upravuje. Po vychladnutí při hodnotě pH 6,5 se přidají 2 g pryskyřice Chelex^R 100 (produkt společnosti Sigma) ve tvaru Na⁺ , Po několika hodinách styku se pryskyřice oddělí a roztok se vlije na 10 objemů ethanolu k vysrážení chelátu.

Chloridem gadolinia: ve směsí 6,5 g oktakyseliny a 3,5 g hexahydrátu chloridu trojmocného gadolinia ve 130 ml vody se udržuje hodmota. pH 6,5. přidáním vodného.roztoku hydroxidu sod-.....

něho (IN) a po dvě hodiny se směs zahříváním udržuje na teplotě 60 ’C, přičemž se hodnota pH udržuje na 6,5 přidáním celkem 21 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Po několika hodí- f nách na teplotě okolí se směs zkoncentruje na 25 ml a konečný v produkt se vysráží v 10 objemech ethanolu.

B. Chelát gadolinia 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-tri (2-glutarové) (vzorce II: R = H00C-CH-(CH2b-COOH, R ' = H,

M = Gd):

1. 10-Benzyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan

Do roztoku 50 g 1,4,7,10-tetraazacyklododekanu v 500 ml chloroformu se prikape 30,5 g benzylchloridu. Míchá se po dobu 24 hodin při teplotě okolí, reakční směs se zfiltruje a filtrát se odpaří X sucha, zbytek se vyjme do 350 ml vody a 75 ml toluenu a po dekantaci toluenové fáze se vodná fáze extrahuje dvakrát 200 ml dichlormethanu. Organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří se X suchu. Získá se 21 g produktu v podobě oleje.

2. 10-benzyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekan 1,4,7-tri-(2-methylglutarát)

Do suspense 18,7 g produktu podle odstavce 1) a 24,7 g uhΦ « φφφ φφφ* « φ* *« * φ φ φ φ · φ Ο Β Φ ličitanu sodného ve 300 ml acetonitrilu se přikape roztok 56,3 g 2-methyIbromoglutarátu v 50 ml acetonitrilu. Reakční směs še zahřeje na teplotu zpětného toku a na této teplotě se udržuje 36 hodin. Po filtraci při teplotě okolí se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v minimu ethylacetátu a vyčistí se chromatografií na sloupci silikagelu za použití směsi ethylacetátu a petroletheru (objemově 40/60 až 70/30) jako elučního činidla. Získá se 20,7 g produktu ve podobě oleje.

. Kyse l ina ,10.-benzyl-.[ 1,,.4., 7 ,.10-..t.etraazac.yk.lododekan]--l , 4,-7tri-(2-glutarová)

Do 125 ml vody, ve které bylo rozpuštěno 25 g hydroxidu sodného, se přidá 16,7 g oleje podle odstavce 2), rozpuštěného ve 40 ml methanolu a směs še míchá 48 hodin při teplotě 70 °C. Ve vakuu se odstraní metanol před zavedením 400 ml katexové pryskyřice ve formě slabé kyseliny (Amberlite^R-IRC50, společnost Rohm & Haas) a po oddělení se zavedou anioty v podobě silné zásady (Amberlite^R-IRA458), přičemž se žádaný produkt váže na anexovou pryskyřici, izoluje se zředěním dvěma litry vodného roztoku 3N octové kyseliny a dvěma litry roztoku 6N octové kyseliny.

Po odstranění rozpouštědel se získá 13,5 g bílých krystalů směsí izomerů.

HPLC sloupec č. 1: 25 x 4 mm Lichrospher^R ÍOO-RP18-5pm (Merck, DE).

Eluční činidlo č. 1 tr = 28,30 minut (2 masivní isomery 75/25 na povrchu)

4. Kyselina 1,4,7,10-tetraazacykiododekan-l,4,7-tri-(2-glutarová)

Hydrogenuje se 13 g sloučeniny podle odstavce 3) v roztoku 210 ml vody a 90 ml methanolu tři hodiny při teplotě okolí • · • * φ φ « φφφ φ· φ φφ φφφφ φ za tlaku 28 χ ΙΟ⁴ Pa v přítomnosti 10% palladia na vlhkém uhlí 50%. Po odstranění katalyzátoru a rozpouštědel odpařením, se získá 11 g bílého prášku.

HPLC kolona ě. 1 eluční činidlo č.l tr= 8,9 minut (2 masivní isomery 75/25 na povrchu).

5. Vytvoření komplexu

Po dobu čtyř hodin při teplotě 60^eC se udržuje na hodnotě . , ......pH 5. .přidáváním . 3N vodného . roztoku hydroxidu --sodného--1,6-g- -sloučeniny podle odstvce 4) a 1 g hexahydrátu chloridu trojmocného gadolinia ve 30 ml vody. Směs se zkoncentzruje na objem 10 ml a zbytek se vysráží ve 100 ml ethanolu. Filtrací se oddělí 1,6 g komplexu žádaného gadolinia.

HPLC, kolona č.l, eluční činidlo č.l, tr = 24,26 minut.

C. Gadoliniumchelát 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-tri (2-glutarové)-lO-octové kyseliny

1.

V 8 ml vody se rozpustí 1 g kyseliny podle odstavce 4) přípravy B, smísí se s 270 mg bromoctové kyseliny a směs se udržuje tři hodiny na teplotě 70 ’C při hodnotě pH 10, udržované přidáváním IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Při teplotě místnosti se přidá 100 ml vody a 10 ml pryskyřice Am'4^Lberlite^R IRC 50. Po jedné hodině styku se pryskyřice oddělí a do směsi se přidá 50 ml pryskyřice Amberlite^R IRA 458. Po 12 hodinách se pryskyřice oddělí a zavede se do kolony, žádaný produkt se extrahuje eluováním 500 ml vodného roztoku IN kyseliny octové. Po 12 hodinách se pryskyřice oddělí a zavede se do kolony. Žádaný produkt se extrahuje eluováním 500 ml vodného roztoku IN kyseliny octové. Získá se tak 0,8 g bílých krystalů.

HPLC: sloupec č. 2: 25 cn x 4 mm Symetry® -RP 18-5 pm (Waters). Eluční činidlo č. 1; tr =4 minuty.

• · · · ** • · ··*· · • · · * · ·*···· ·· ··

2. Vytváření komplexu

Do 13 ml vody se přidá 0,45 g hexahydrátu chloridu trojmocného gadolinia a 0,75 g sloučeniny podle odstavce 1), hodnota pH se udržuje na 6 přidáváním vodného roztoku hydroxidu sodného (IN). Reakční směs se pak udržuje 5 hodin na teplotě 60 °C a během té doby se několikrát hodnota pH upravuje přidáváním roztoku hydroxidu sodného. Po vychladnutí se reakční směs vlije do 130 ml ethanolu a sraženina se izoluje za získání 0,75 g chelátu.

D. N,N'-(2,3,4,5-terahydroxypenty1)-N,N'-[2-(hydroxyethoxy)ethyl]-2,4,6-trijod-5-(glycylamino)i sophtalamid

1.

Ve 2,5 1 ethanolu se rozpustí 84 g 2-aminoethoxyethanolu a 150 g D-xylózy. Směs se hydrogenuje při teplotě okolí za tlaku 6 x 10^s Pa v přítomnosti 50 g 10% palladia na uhlí. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odstání destilací. Zbytek, rozpuštěný v minimu vody, se podrobí chromatografií na 100 ml pryskyřice Amberlite* IRN 77(H⁺) za použití vodného roztoku hydroxidu amonného a 1 kg silikagelu Geduran®, SI60, čímž se získá 170 g aminoalkoholu ve podobě hnědého oleje.

CCM: CH₃OH/hydroxidu amonného po 25 % (objemově 7/3) - Rf=0,3. RMN ¹³C: (DMSO-d6-5O,3 ΜΗζ):δ (ppm): 51,4, 48,9 (2xCH2NH); 62,9, 60,5 (2xCH2OH);, 71,9, 71,2, 70,6 (3xCH0H); 72,3, 69,7 (CH2ÓCH2). Stejným způsobem lze připravit derivát arabinózy nebo ribózy.

2. N,N'-(2,3,4,5-Terahydroxypentyl)-N,N'-[2-(hydroxyethoxy)ethyl)-2,4,6-t ri jod-5-(f talamidoacetamido)isophtalamid

Ve 100 ml dimethylacetamidu se rozpustí při teplotě 45 °C 30 g aminoalkoholu podle odstavce 1), zavede se 22 g derivátu dichlorisoftalové kyseliny a 12 g triethylaminu a při této teplotě se směs míchá 24 hodin. Vzniklá sraženina se izoluje

9 9 *

9 · · ·

99 ♦··

999 9

9 99

99 9 9 *

9 >

9 9 9 při teplotě okolí a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu.

Zbytek, rozpuštěný v 50 ml vody, se eluuje na 100 ml pryskyřice Amberlite* IMAC HP 1110(H⁺) po zkoncentrování na 10 ml se roztok vlije do 1500 ml isopropylalkoholu a po 24 hodinách vytvořená straženina se izoluje .

3. Uvolnění aminu

.....Při ..teplotě. 80 °C se -do roztoku 40 ml -vody a 2,7 ml hyd------razinhydrátu přidá 42 g sloučeniny podle odstavce 2), rozpuštěné v 60 ml vody. Míchá se po dobu pěti hodin při této teplotě, směs se zfiltruje a okyselí se na hodnotu pH 1 přísadou chlorovodíkové kyseliny. Vytvořená sraženina se oddělí a filtrát se zkoncentruje. Zbytek, rozpuštěný ve 30 ml vody, se podrobí chromatografií na 30 ml pryskyřice Amberlite⁵ IMAC HP 111E(H⁺) a pak na 55 ml pryskyřice Amberlite^R 252 Na(H⁺), odkud se eluuje vodným roztokem hydroxidu amonného (2N), získá se 20 g produktu.

HPLC kolona č. 1: ekuční činidllo č. 2 H2O/CF3COOH (pH 3,4) s gradientem acetonitrilu 95/5 objemově 50/50 v 50 minutách, tr = 10 - 20 minut (směs isomerů).

E. N,N'-[bis(2,3,4,5,6-Pentahydroxyhexy1)]—2,4,6-tr ibrom-5(glycylamino)isoftalimid:

1. Kyselina 5-amino-2,4,6-tribromisoftalová

Do 300 ml vodného roztoku 50 g kyseliny 5-aminoisoftalové a 55 ml 37% kyseliny chlorovodíkové se zavede pomalu 156 g bromu. Po míchání přes noc se neutralizuje nadbytek bromu přísadou vodného roztoku síranu sodného před izolováním sraženiny. Výtěžek 90 % teorie.

• flflfl • · · · · · • · • fl • · • flfl · • fl flfl • flfl flflfl ·

2. Kyselina 5-(ftalimidoacetamido)-2,4,6-tribromisoftalová

Do roztoku 69 g N-ftaloyIglycinu ve 200 ml dimethylacetamidu při teplotě 10 “C se zavede pomalu 27 ml thionylchloridu a po dvouhodinovém míchání se zavede při teplotě 10 až 20 ⁴C 100 g kyseliny podle odstavce 1). Nechá se stát přes noc při teplotě okolí a směs se vlije do 800 ml teplé vody. Izoluje se 140 g konečného produktu.

3. Chlorid .kys.e 1iny.5-(f tal imidoacetamido)-2,4 ,-6-tr i brom i so- - f talové

Do roztoku 100 g kyseliny 5-(ftalimidoacetamido)-2,4·,6tribromísoftalová ve 300 ml dioxanu a 50 ml dimethylformamidu se přidá pomalu při teplotě 18 ’C 70 ml thionylchloridu. Žlutá sraženina, vytvořená po třídenním míchání při teplotě okolí se ocfiltruje a promyje se metbylenoxidem a terc.-butylenoxidem. Získá se tak 70 g béžové pevné látky.

4. N,N'-[bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)]-2,4,6-tribrom-5(ftalimidoacetamido)isoftalamid

V 600 ml N-methylpyrrolídonu se při teplotě 80 °C rozpustí 150 g disorbitylaminu a při teplotě 60 C se do roztoku přidá 16 g suchého uhličitanu sodného a 96 g chloridu kyseliny podle odstavce 3). Míchá se po dobu jedné hodiny při této teplotě a 16 hodin při teplotě okolí, přičemž se vyloučí sraženina a roztok se vlije do 1,6 1 isopropanolu. Získá se 200 g sraženiny.

5. Hydrazinolysa

Do 400 ml vody se při teplotě 70 °C vnese 200 g sloučeniny podle odstavce 4) a 17 ml hydrazinhydrátu. Po tříhodinovém míchání se Směs okyselí na hodnotu pH 4 kyselinou 6N chlorovo• · 9 ♦· « · *»* · ·· ··· * · · · ··«· » ·· dikovou při teplotě okolí. Sraženina se oddělí a filtrát se neutralizuje přísadou vodného IN roztoku hydroxidu sodného. Přebytečný hydrazin se odstraní inversní osmozou. Zbylý roztok se zpracuje 10 ml silné katexové pryskyřice a pak 65 ml slabé anexové pryskyřice.

Konečný produkt se z roztoku extrahuje fixací na katexovou pryskyřici ve formě H⁺, odkud se eluuje vodným roztokem zředěného chloridu sodného (0,1 M). Získá se 80 g produktu. HPLC: s loupec č.l,. eluční. č-inidlo-.č,--2tr = 7 přibl ižně 7-minut .

F. N,N'-[bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1) ]-2,4,6-trijod-5(glycylamino)isof talimid

1. Chlorid kyseliny 5-(ftalamidoacetamido)-2,4,6-trijodisoftalové

Do roztoku 335 g N-ftaloylglycinu v 1 litru N-methylpyrrolidonu se při teplotě 10 °C přidá 149 ml thionylchloridu a pak po třech hodinách 700 g dichloridu kyseliny 2,4,6-trijod-5-aminoisoftalové. Po třídenním míchání při teplotě okolí, se směs vlije do 4,5 1 vodného ethanolu objemově 2/1, Hodnota pH se upraví na 5 přísadou triethylaminu před izolováním vytvořené sraženiny, která se dá dále čistit promytím isopropanolem. Získá se 850 g produktu.

2. Amidifikace disorbitylaminem H-N[CH2 (CHOH)4CH2OH]2

Způsobem jako v případě analogické bromité sloučeniny se získá produkt s výtěžkem 85 % teorie.

3. Hydrazinolysa

Na teplotě 80 ’C se udržuje po dobu několika hodin 420 g « ·»

I » · · jodidového ftalimidu v roztoku 1 1 vody a 300 ml hydrazinhydrátu. Po okyselení roztoku na hodnotu pH 3,6 se přebytek hydrazinu odstraní chromatografií na katexové pryskyřici. (H⁺ ), jako IMAC^R HP111E (produkt společnosti Rohm a Haas), pak chloridy anexovou pryskyřicí (OH^-).

Konečný produkt se může čistit chromatografií na katexové pryskyřicí (H* silné) a vysrážet z vodného roztoku v ethnolu. Výtěžek je 50 % teorie.

HPLC: sloupec č.. 1, eluční .činidlo .č. 4:...............

CHaCN/P.I.C^RB8(O,05M)(Waters)15/85, rychlost 1 ml/mín. tr =3 minuty.

G. l-Deoxy-l-[ (2,3-dihydroxypropy 1 }amino]-D-galaktitol

CH₂ (CHOH)4CH2OH i

H-N \

CH2CHOHCH2OH

Na teplotě 40 °C se udržuje 16 hodin za stálého míchání roztok 27 g 3-aminopropan-l,2-diolu a 50 g D-galaktózy ve 140 ml methanolu. Přidá se 60 ml vody a v přítomnosti 7 g palladia na uhlí (10%) se vyvolá hydrogenace iminu v trvání sedm hodin při teplotě 60 °C za tlaku vodíku 20 x 10^s Pa.

Katalyzátor se odfiltruje přes Cellit®. Po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku, se zbytek rozpustí v minimu vody (50 ml) a pomalu se vlije do 600 ml isopropanolu. Vytvořená sraženina se izoluje. Teplota tání je 132 °C, výtěžek je 90 % teorie.

Před vysrážením do isopropanolu je možno také surový produkt v roztoku se 200 ml vody podrobit chromatografií na 500 • · ♦ • 9 · * • 9 9 ♦ ·· »· • 99 9999 • * ·· • •9 9 9

9 * • 9 *· ml iontoměničové pryskyřice ve podobě sulfonové kyseliny eluováním vodným roztokem zředěného hydroxidu amonného.

Za těchto podmínek je aminoalkohol směsí prakticky 50/50 dvou diastereoisomerů.

Překrystalováním, frakcionovaným vysrážením nebo suspendováním je možno obohacovat směs jednoho nebo druhého isomeru.

..Tak je možno, zpracováním, .v. metanolu-při-jeho teplotě-·-zpětného toku (25 g aminoalkoholů v 500 ml rozpouštědla) získat směs, která obsahuje nadbytek jednoho nebo druhého isomeru: 65 % isomeru je největší míra retence na měřeném povrchu chromatogramů, získaných za těchto podmínek:

Chromatografie v plynné fázi (derivát totálně trifluoracetylovaný působením anhydridu trifluoroctové kyseliny při teplotě 60 ^eC).

Přístroj: Varian Star 3400

Sloupec: DB 1701 J & W (0,25 pm-30 m x 0,25 mm)

Plynový vektor He - T injektor (split l/40^e) = 290 ’C

T sloupec s 150 až 280 °C (5 °C/mm) - objem 1 μΐ, tr =14,5 a 14,9 minut (5,6 mn pro aminopropandiol)

RMN¹³C (200 MHz-DMSO d6- Réf DMSO -T = 30 °C) (ppm): 71,7; 71,6; 70,5; 70,1; 69,5; 68,5; 68,2-(CHOH) 64,6; 63,2; (CH2OH)- 53,4; 53; 52,9 (NCHa).

Je možno též získat každý diastereoisomer kondenzací D-galaktózy na eneantiomeru prostém aminopropandiolu nebo působením enantiomerů glycidolu na N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)benzylamid jak dále uvedeno:

a) N-benzyl-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)amin

Ve 230 ml methanolu se rozpustí 29 g D-galaktosy, 17 ml •

benzylaminu a směs se udržuje sedm hodin na teplotě 50 C za tlaku vodíku 8 χ 10⁵ Pa po přidání 5 g palladia na uhlí (5%).

Po hydrogrenaci se do reakční směsi zavede při teplotě 40 °C vodný roztok chlorovodíkové kyseliny až do kyselé hodnoty pH. Směs se zfiltruje přes Celite^R při teplotě okolí k odloučení katalyzátoru a po částečné koncentraci se zavede vodný roztok hydroxidu sodného 5N až do zásadité hodnoty pH. Vytvořená sraženina se izoluje a překrystaluje se z ethanolu.

RMN^l3C (200 MHz-DMSO d6-Réf DMSO -T. = 30/C .....

δ (ppm) 140,8(CCHzN)- 128,8; 128,4; 126,9 (fenyl)-72; 70,6;

69,9; 68,8; {CHOH)-63,2(CH₂0H)-53,1; 52,4 (CH₂NH).

b) N-Benzy1-N-(2,3-dihydroxypropy1)-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)amin

Ve 200 ml methanolu se při teplotě 60 ’C rozpustí 6,5 g sekundárního aminu podle odstavce a), do roztoku se při této teplotě zavede 2,5 g glycidolu (racemického nebo čistého enantiomeru) a směs se míchá 24 hodin. Destilací se odstraní rozpouštědlo a zbytek se podrobí chromatografií po rozpuštění ve 200 ml vody na sloupci pryskyřice Amberlite^R IMAC 110 ve formě H* za použití zředěného vodného roztoku hydroxidu amonného (0,1%) jako elučního činidla. Získá se 5,5 g aminu,

c) N-(2,3-dihydroxypropy1)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)amin:

Při teplotě 45 °C se hydrogenuje za tlaku vodíku 100 x 10^sPa 2 g terciárního aminu podle odstavce b) v roztoku 30 ml vody v přítomnosti 0,6 g 10% palladia na uhlí. Roztok se zfiltruje na Celite^R k odloučení katalyzátoru a za sníženého tlaku se zkoncentruje. Zbytek se může překrystalovat z ethanolu.

Když se kondenzuje (S)-glycidol, získá se diastereomer * · • * » · « * · · · • · ·· « · « · 4 aminoalkoholu, jehož doba retence v podmínkách chromatografie v předchozí plynné fázi je delší.

Vyjde-li se z D-glukózy a z D-mannózy získají se tímto způsobem diastereoisomery těchto aminoalkoholů, zatímco ostatní aminoalkoholy by bylo možno získat z primárních aminoalkoholů nebo z jiných cukrů.

H. Chelát gadolinia kyseliny (1,4,7,10-tetraazacyklododekan)I, 4,7,10-tetra( 2-jantarové) __ . ..

1. Kondenzace acetylendikarboxylátu benzylu na čtyřech dusíkových atomech cyklenu

Do 25 ml acetonitrilu v roztoku 2,7 g cyklenu v 50 ml acetonitrilu se přikape při teplotě 20 °C 23 g acetylendikarboxylátu benzylu, připraveného způsobem popsaným v publikaci

J.C.S. Perkin I, str. 2024 až 2029 (1973). Po 3-hodinovém míchání při teplotě 50 ’C se za sníženého tlaku odstraní rozpouštědlo a směs se podrobí chromatografií na silikagelu za použití směsi dichlormethan/methanol (objemově 98/2) jako elučního činidla k izolování 19 g žluté pevné látky.

2. Redukce enaminu:

Po částech se za míchání vnese do roztoku 19 g pevné látky v 500 ml acetonitrilu a 50 ml kyseliny octové 7 g kyanoborhydridu sodného a směs se míchá přes noc při teplotě okolí. Po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku se olejovitý zbytek rozpustí ve směsi dichlormethan/methanol (99/1) a zfiltruje se na silikagelu. Po odpaření rozpouštědla se izoluje 19 g žlutého oleje.

3. Debenzylace

Během 6 hodin v přítomnosti (10%) palladia na uhlí (tlak • ·

3,5 x 10⁵ Pa) se hydrogenuje 8 g získaného oktaesteru ve směsi voda/methano1 í Í75 mi/75 ml). Po oddělení katalyzátoru filtrací a oddestilování rozpouštědla se zíkají 3 g oktanové kyseliny v podobě bílého prášku.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo Č. 1, t_r= 18 až 19 minut.

4. Komplexace

Ve 20 ml vody se suspenduje 1 g získané kyseliny oktanové, hodnota pH se upraví na 5,5 přísadou vodného roztoku hydroxidu sodného IN a 0,285 g Gd2O3. Po 4-hodinovém míchání při teplotě 70 °C v reakční směsi s hodnotou pH 5,5 až 6,5 nastavenou přísadou vodného IN roztoku kyseliny chlorovdkové se zfiltruje a filtrát se odpaří k suchu za získání sodné soli chelátu. Příklad 1

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m = 2

CO2H

I

R' = CH-(CH2)2CONHR

R =

I CON(CH₂)₂OCH₂CH₂OH

CH₂(CHOH)₃CH₂OH (sodná sůl)

1. Kyselina 4-(N'-(4-nitrofenyl)ureido]benzoová

Při teplotě 10 ’C se za míchání do 80 ml tetrahydrofuranu ·’ · * · · * · ·· « · * » · · · ··· ♦ · • · · · · · ·· * ·· ♦·· ··· ·♦ ·· přidá 24,6 g 4-nitrofenylisokyanátů, pak pomalu 20,5 g kyseliny 4-aminobenzoové, rozpuštěné v 70 ml tetrahydrofuranu. Směs se ochladí na teplotu okolí a v míchání se pokračuje jednu hodinu před izolováním vytvořené sraženiny. Získá se 45 g produktu,

PHLC: sloupec č.l, eluční činidlo č.2: H2O/CF3COOH. Hodnota pH =3,4 s gradientem acetonitrilu (95/5 až objemově v 50/50 v 50 min). Rychlost 1 ml/min, tr=44 minut.

2. Kyselina 4-[N'-(4-aminofenyl)ureido]benzoová

Do 280 ml vody se 3 g (5%) palladia na uhlí se přidá 22 g produktu podle odstavce 1) a 37 ml vodného IN roztoku hydroxidu sodného. Směs se udržuje šest hodin při teplotě 65 C za tlaku vodíku 0,6 MPa. Po vychladnutí na teplotu okolí sé upraví hodnota pH na 10 a katalyzátor se odfiltruje přes Celite“ před okyselením na hodnotu pH 5,3 přidáním vodného 6N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Získaná sraženina se promyje acetonem. Získá se 13,2 g produktu.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č.2, tr= 33 minut.

3. Kyselina 4-[N'-[4-(ftalimidoacetamido)fenylJureidoJbenzoová

Rozpustí se 5,8 g kyseliny ftalimidooctové ve 26 ml dimethylacetamidu při teplotě 10 °C a při zachování teploty se přidají 2 mi thionylchloridu a po dvouhodinovém míchání 7 g sloučeniny získané podle odstavce 2). Po 12 hodinách na teplotě okolí se reakční směs vlije do 250 ml vody a vzniklá sraženina se při teplotě 25 °C a pak 95 ’C promývá vodou až do neutrál ity.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č. 2, tr= 40 minut.

4. Ν,Ν'-(2,3,4,5-tetrahydroxypenty1)-N,N-[2-(hydroxyethoxy)ethyl]-2,4,6-tri jod-5-[4-[N’-(4-f talimidoacetamidofeny1)ureidojbenzoylgycylamino]isoftalamid

Ve 40 ml dimethylacetamidu se rozpustí 4 g sloučeniny podle odstavce 3) a 1,7 g HOBT, voda a 9,3 g N,N'-bis(2,3,4,5tetrahydroxypentyl)-N,N'-bis(hydroxyethoxyethy1)-2,4,6-t ri jod5-(glycylamino)isoftaíamidu a následně 2,4 g EDCl, HC1 při teplotě O °C. Po míchání přes noc při teplotě okolí se reakční směs vlije do 300 ml dichlormethanu. Sraženina se izoluje a promyje se diethyletherem.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č. 2, tr= 30-33 minut (směs idomerů).

5. Eliminace ftalimidové skupiny

Produkt obecného vzorce III, kde Z = CH2CONH, Z = NHCONH Z = CONHCHaCONH;

Ri - Ra = Rs = atom jodu; R2 = R* = CONCH2 (CH0H)3 CH2 OH

I (CH2 )2OCH2CH2OH

Při teplotě 80 C se do 45 ml vody přidá 11,5 g sloučeniny podle odstavce 4) a 1,12 ml hydrazinhydrátu (0,023 mol). Po dvou hodinách při teplotě 45 až 80 ’C se směs ochladí na 0 °C a okyselí se až na hodnotu pH 1 přidáním 12N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Směs se zfiltruje přes Celitě^R při teplotrě okolí a pak se filtruje přes 16 ml katexové (H¹) pryskyřice IMAC^R HP111E a 80 ml slabé anexové pryskyřice (OH“) IMAC^R HP661 (společnosti Rohm & Haas). Po konečném vyčištění filtrací pres silanizovaný oxid křemičitý se získá 4,6 g konečného produktu.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č. 2, tr = 24-27 minut (směs i zomerů).

6. Kondenzace produktů A a III

Do 20 ml vodného roztoku s hodnotou pH 6 uvedeného aminu a 0,63 g chelátu A se při teplotě 40 ’C přidá 0,057 g NHS « · ···· (sodná sůl) a 0,76 g EDCI, HCl. Po 15 minutách se směs vlije do vody a sraženina se izoluje. Po eliminaci vedlejších produktů se získá sloučenina obecného vzorce I.

Sterická vylučovací chromatografie (CES)

Podmínky č.l: Postupně na 4 sloupcích (30 cm x 8 mm) (Shodex íJP)) pod označením OH Pak SC-HQ; obsahujících polyhydroxymetakrylátový gel, jehož vylučovací meze stanovené pullulanem jsou postupně 10⁶ Kdaltonů (SB-804), 10⁵ Kdaltonů (SB-803),

10⁴ Kdaltonů (SB-802-5), 1O⁴ Kdaltonů (SB/8O2-5b Eluční činidlo: vodný roztok chloridu sodného (0,l6M)/acetonitri1 (objemově 70/30), průtok 0,8 ml/min.

T = 30 ’C, t_r =38 minut (50-53 min pro odpadní amin)

HPLC: sloupec č. 3, 25 cm x 4,6 mm Platinum EPS C 18 100A, μΜ (Alltech); eluční činidlo č.3: voda/CH3CN 98/2 až objemově 60/40 v 50 min, průtok 1 ml/min; T=25 °C, tr =26 minut.

Příklad 2

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m = 2

CO,H i ²

R'= CH-(CH₂)₂CONHR

I CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂

CON(CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂ (sodná sůl)

1. Kyselina 4-(4-(ftalimidomethyl,benzamido]benzoová

Do roztoku připraveného z 25 g kyseliny 4-aminomethylbenzoové 18 g uhličitanu sodného a 165 ml vody, se přidá 37 g Nkarbethoxyftalimidu. Vytvořená sraženina se izoluje a suspen37 *·* ·· · · • · ·· ·· · * duje se v 60 ml dimethylacetamidu, do kterého se pomalu přidá při teplotě 10 °C 4,7 ml thionylchloridu. Po 3 hodinách na této teplotě se přidá 9 g kyseliny 4-aminobenzoové a směs se udržujue 12 hodin na teplotě okolí, načež se vlije do 600 ml vody. Vzniklá sraženina se izoluje.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č. 2, tr= 48 minut.

2. N,N'-bis{2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-2,4,6-trijod-5-[4(4-aminomethylbenzamido)benzoylglycylamino]isoftalamid

a) Až do rozpuštění se míchá 160 ml dimethylacetamidu se 39 g 5-glycylamino N,N'-bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy-2,4,6-trijodisoftalamidu, 4,6 ml triethylaminu, 5,7 g HOBT, voda a 12 g shora produktu podle odstavce 1) před ochlazením na teplotu 0 °C a přidáním 8 g EDC1, HC1. Nakonec se reakční směs vlije do 1000 ml dichlormethanu. Izolovaná sraženina se čistí přesrážením v methanolu z vodného roztoku. Získá se = 43 g produktu.

b) Hydrazinolysa:

V 50 ml vody se při teplotě 80 °C rozpustí 25 g ftalimidu podle odstavce a) před přidáním 2,2 ml hydrazinhydrátu. Míchá se po dobu tří hodin reakční aměs se ochladí a okyselí se na hodnotu pH 1 přísadou 12N kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se zfiltruje pres Celite^R a čistí se chromatografií na slabé katexové pryskyřici (H*), pak na slabé anexové pryskyřici (OH^-). Izoluje se tak 15 g žádaného produktu.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č, 2, tr= 19 minut.

c) Kondenzace na chelátu gadolinia A:

Ve 40 ml vody se rozpustí 15 g takto získaného aminu a 1,9 g chelátu A (sodné soli). Po okyselení až na hodnotu pH 6 přísadou vodného IN roztoku kyseliny chlorovodíkové se při teplotě 40 “C přidá 2,3 g ÉDCl, HC1. Po dvouhodinovém míchání • · · • φ · ·

I ΦΦΦ φφφ * 4 « « 4 « Φ ·« se reakční směs vlije do 400 mi ethanolu. Vzniklá sraženina se rozpustí ve vodě a zfiltruje se pres uhlí Nořit. Získá se 8,5 g čistého produktu.

CES: podmínky č. 1: tr = 36 minut.

HPLC: sloupec a eluční činidlo č. 3, tr= 23 minut.

Příklad 3

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m= 2 co₂h...................'...... .

R‘ = CH-(CH₂)₂CONHR

R =

Br

CHjCONH conh^2J/COnhch₂conh^

Br

CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OHJ₂

CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OHJ₂ (sodná sůl)

a) Kyselina 4-[4-nitrobenzamido]benzoová

Do 74 g kyseliny 4-aminobenzoové a 360 ml dimethylacetamidu se při dodržení teploty alespoň 25 °C přidá po malých dávkách 100 g kyseliny 4-nitrobenzoové Po 24-hodinovém míchání se při teplotě 10 ’C přidá 500 ml methylenchloridu k vysrážení žádaného produktu. Po promytí vodou a vysušeni se izoluje 145 g produktu.

b) Kyselina 4-(4-aminobenzamido)benzoová f··

Suspense 136 g kyseliny podle odstavce a) se během čtyř hodin přidá do 1,8 litru vody, ve které je rozpuštěno 240 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného a 14 g (10%) palladia na uhlí za tlaku vodíku 0,6 MPa.

• · ··

Hodnota pH konečné suspense se upraví na 10 před zfiltrováním pres Celite® k vyloučení katalyzátoru. Vytvořená sraženina se po okyselení na hodnotu pH 5,3 izoluje a suší. Získá se 106 g produktu.

Teplota tání je vyšší než 260 °C.

c) Kyselina 4-[4-(ftalimidoacetanido)benzamido]benzoová

Do roztoku 90 g kyseliny ftalimidoctové ve 400 ml dimethy lacetamidu- se- při--teplotě 10 ’C přikape -32>ml - thionylchloridu, po tříhodinovém míchání 105 g aminokyseliny podle odstavce b, při teplotě nižší 20 ’C. Míchá se po dobu 12 hodin, reakční směs se vlije do 4 litrů vody a izolovaná sraženina se promyje horkou vodou. Po vysušení se získá 176 g sraženiny; teplota tání je vyšší než 260 °C,

d) Clorid kyseliny 4—[4—(ftalimidoacetanido)benzamido]benzoové

Do 10 g kyseliny, suspendované v 10 ml dioxanu a 1 ml dimethylaformamidu, se přidá 2,5 ml thionylchloridu a směs se míchá pět hodin při teplotě 50 °C. Po přidání jednoho objemu isopropyletheru se izoluje 10 g sraženiny. Je také možno kyselinu suspendovat v toluenu v přítomnosti trikaprylylmethylamoniumchloridu jako katalyzátoru.

e) N,N'-bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-2,4,6-tribrom-5-[4(4-ftalimidoacetamido)benzamido]benzoylglycylamino]i sof talamid

Roztok 2,25 g chloridu kyseliny s 5 g N,N-bis(2,3,4,5,6pentahydroxyhexyl)-2,4,6-tribrom-5-(glycylamino)i softalamidu a 0,7 ml triethylaminu ve 25 ml dimethylacetamidu nebo N-methylpyrrolidonu se míchá 12 hodin a pak se vlije do 60 ml ethanolu. Izoluje se 6,2 g sraženiny.

HPLC: sloupec a eluční činidlo č, 2, tr= 27-35 minut (směs isomerů).

• · · · · « « * · · · « * ·· · · · • · * ··«· «* ·«

f) Hydrazinolysá

Roztok 0,6 ml hydrazinhydrátu v 10 ml vody se vnese při teplotě 80 °C do roztoku 10 g ftalimidu podle odstavce e) ve 40 ml dimethylacetamidu. Po 3-hodinovém míchání při této teplotě se směs ochladí a vlije se do 125 ml ethanolu. Izoluje se 9 g sraženiny, která se čistí zpracováním jejího vodného roztoku silnou anexovou pryskyřicí (OH), pak slabou katexovou pryskyřicí (H⁺). Získá se 8 g produktu. Reakční směs je možno také okysel it-k -oddělení- vysráženého-ftálylhydrazidu a odstranit rozpouštědlo a molekuly s nízkou hmotností ultrafi 1trací před konečným vysrážením ve vodném ethanolu.

HPLC: sloupec a eluční činidlo č. 2 avšak objemově 90/10 bez gradientu, tr= 28-35 minut.

g) Kopulace na chelát A k získání sloučeniny obecného vzorce I

Ve 135 ml vody se rozpustí 5 g sloučeniny podle odstavce f) se 0,65 g chelátu A (sodné soli). Hodnota pH se sníží na 6 přidáním vodného IN roztoku kyseliny chlorovodíkové před přidáním při teplotě 40 °C 0,8 g EDCI, HCl. Po 2-hodirtovém míchání a vychladnutí na teplotu okolí se reakční směs vlije do 135 ml ethanolu.

Lze také přidat 1,6 g chelátu A (sodné soli) do 25 ml vodného roztoku 10 g aminu získaného ve stupni f), pak při hodnotě pH 6,5 postupně 18 ml dioxanu, 1,4 g EDCI a 0,08 HOBT. Po dvou hodinách při teplotě okolí se reakční směs vlije na 100 ml ethanolu a sraženina se izoluje. Rozpustí se znovu ve 100 ml vody a před opětným vysrážením ve třech objemech ethanolu se zpracuje dvakrát 1 g aktivního uhlí. Vytvořená sraženina se čistí 5 ml iontoměničové pryskyřice Chelex 100 (Na⁺) (společnost Sigma), pak diaultrafi 1trací na membráně s prahem porušení 5 KD při hodnotě pH 76. Získají se 4 g produktu.

CES: Podmínky č.l: tr = minut.

*a* » » » »» * • · » « * · · ·· »« · · · · · ···· · ···» ·· «· ·· ·« ·*· ···· ·* *·

HPLC: kolona a eluční činidlo č. 3: t_r= 23 minut.

Příklad 4

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m= 2 R'=H a R =

ΟΗ₂ΟΟΝΗ-γ~\θΟΝΗ

CONHCHjCONH

Br CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂

Br CON[CH₂(CHOH)„CH₂OH]₂ (sodná sůl)

Za míchání se pět hodin udržuje na teplotě 40 °C 0,3 g komplexu gadolinia kyseliny 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,47-triglutarové připravené podle odstavce B), 2 g aminu, připraveného podle příkladu 3(f) a 0,3 g EDC1, HCl v 5 ml vody za udržování hodnoty pH 7 přidáváním IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se vlije do 50 ml ethanolu a sraženina se izoluje, čistí se v roztoku 120 ml vody ultrafiltrací na membráně s prahem porušení 3 KD k vyloučení nezreagovaných podílů. Po míchání na aktivním uhlí a filtraci se roztok vysuší a získá se 1 g bílé pevné látky.

CES: podmínky č. 1, t_r = 36,8 minut.

HPLC: sloupec a eluční činidlo č. 3, tr= 31 minut.

Příklad 5

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2 R'=CH2COOH a R = — Bi_CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂ ^cH₂CONHH^_yCONH-\^J)cONHCH₂CONH-< 7Bí ^Br ČON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₃ (sodná sůl)

Stejným způsobem jako podle příkladu 4 se získá 0,8 g konečného produktu po odstranění 0,3 g odpadního chelátu C a 2 g aminu připraveného podle příkladu 3 f),

CES: podmínky č. 1, tr = 35,7 minut

HPLC: sloupec a eluční činidlo č. 3, t_r= 22 minut.

Příklad 6

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m = 2, R’ znamená

COžH

Ί

R'=CH-(CH₂ HCONHR .

CH₂CHOHCH₂OH _ /—\ ^βΛ-P°~ⁿ‘^ch2(choh),choh

R = ^CH2C0NH-^2ýc0NH^^C0NH-/~\_Br

Br CO-N-CH₂(CHOH}₄CH₂OH ch₂chokch₂oh (sodná sůl)

1. Kyselina 5-[4-(4-aminobenzamido)benzamido]-2,4,6-tribromisoftalová

a) Chlorid kyseliny 4-(4-nitrobenzamido)benzoové

Na teplotě zpětného roku se 8 hodin udržuje ve 250 ml thionylchloridu a 0,1 ml dimethy1formamidu 70 g kyseliny. Nadbytek thionylchloridu se oddestiluje za sníženého tlaku a zbytek se vlije za míchání do 1,5 1 ethylacetátu a 500 g drceného ledu. Konečný produkt se extrahuje do organické fáze, která se promyje vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se a zkoncentruje se. Získá se 64 g produktu.

φ * φ • φ • * φ φ φ φ φ φ φφ φφ φ φφφ φ > > » φ φ φφ φφ φ φ φ

b) Kyselina 5-t4-(4-nitrobenzamido)benzamido]-2,4,6-tribromisoftalová

Na teplotě zpětného toku se udržuje 18 hodin roztok 64 g chloridu kyseliny se 67 g chloridu kyseliny 5-amino-2,4,6-tribromisoftalové ve 170 ml dioxanu. Rozpouštědlo se .odpaří a zbytek se po promytí 300 ml horkého ethylacetátu rozpustí v 600 ml vody s dosaatečným množstvím 5N roztoku hydroxidu sodného k úpravě hodnoty pH 7. Po promytí ethylacetatem a okyselení. s.e i zoduj e...sražen i.na... žádaného produktu. Zí ská-se- 7-3- g produktu.

c) Redukce

Za tlaku vodíku 0,5 MPa se udržuje 7 hodin 19 g produktu podle odstavce b) ve vodném roztoku při hodnotě pH 6 za přítomnosti 2 g platiny na uhlí typu 156 (Johnson Matthey). Po filtraci se roztok odpaří. Získá se 15 g produktu.

2. N,N'-(2,3-dihydroxypropy1)-N,N'-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-2,4,6-tribrom-5-[4-(4-glycylaminobenzamido)benzamido]isoftalimid

a) Při teplotě 10 °C se přidá 13 g produktu podle odstavce 1) do připraveného roztoku chloridu kyseliny ftalimidooctové, 4,7 g kyseliny ftaloylglycinové a 1,7 ml thionylchloridu. Míchá se po dobu dvou hodin při teplotě 20 °C, roztok se vlije do 180 ml vody při teplotě 80 °C a sraženina se izoluje. Získá se 10,6 g produktu.

b) Chlorid kyseliny

Do roztoku 12,4 g derivátu podle odstavce a) v 60 ml dioxanu a 10 ml dimethylformamidu se přidá 16 ml thionylchloridu a teplota se udržuje na alespoň 10 ’C. Po 30-minutovém míchání

0 0 » • · 99

9· 9 9 9

9 9

99 • 9

9 ·

• 9 9

I 99 se roztok vlije do 200 ml vody a sraženina se izoluje a promyje se 100 ml ethylacetátu. Získá se 12 g produktu.

c) Kondenzace v aminoalkoholů

Při teplotě 60 °C se zavede 11,6 g dichloridu kyseliny do 120 ml N-methylpyrrolidonu, obsahujícího 13,5 1-deoxy-1-(2,3dihydroxypropylamino)-D-galaktitolu, připraveného podle G). Míchá se po dobu čtyř hodin, směs se vlije do 1200 ml dichlor..... ... . .methanu, a. sraženina-se . izoluje. Získá-se- 3-5 g produ-k-t-u. -......

d) Odstranění chránící ftalimidové skupiny

Do 30 ml vody obsahující 1,2 g hydrazinhydrátu se vnese při teplotě 80 °C 14 g derivátu podle odstavce c). Po 3 hodinách na této teplotě se roztok okyselí až na hodnotu pH 1 přidáním 5N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Vzniklá sraženina po několika hodinách se oddělí a filtrát se postupně zpracuje pryskyřicemi IMAC^R HPlllONa a HP 661 (Rohm & Haas). HPLC: sloupec Č.l, eluční činidlo č.2: t_r=25-28 minut (produkt 32-36 minut).

3. Reakce s chelátem A

Do 15 ml vody se vnese 0,6 g chelátu gadolinia A (sodná sůl), 0,7 g EDC1, HCL a 4 g aminu podle odstavce 2). Hodnota pH se upraví na 6 IN vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové ikí a směs se udržuje dvě hodiny na teplotě 40 C, načež se vlije do 200 ml ethanolu. Vzniklá sraženina se izoluje a její roztok ve 100 ml vody se podrobí ultrafi 1traci na membráně polyethersu1fonové s prahem porušení 5 KDa.

HPLC: sloupec a eluční činidlo č.3: tr-26 minut.

CESrpodmínky č. 1, tr = 36 minut.

4 4 4 « 4 44

V 444 4 4 » 4 4· »44 <4 44 » · ·

4 4 • · v

4 4 4 *4 44

Příklad 7

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2 CO„H

R' = CH-(CH₂)₂CONHR

CON(CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂

R =H^^NHCQh^2^CQNHCH₂CONH-^~~^-1 i CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂ (sodná sůl)

1. Kyselina 4-(4-aminofenyIkarbamoy1)benzoová

a) 4-(4-Nitrofenylkarbamoyl)methylbenzoát

Při teplotě 10 °C se po troškách vnese 10 ml thionylchloridu do roztoku 25 g monomethylesteru kyseliny tereftalové ve 125 ml dimethylacetamidu. Míchá se po dobu jeden a půl hodiny při teplotě 15 °C a směs se vlije pomalu do roztoku 19 g 4nitroanilinu ve 125 ml téhož rozpouštědla. Nechá se po dobu dvou hodin při teplotě 50 C a vytvořená straženina se izoluje. Výtěžek je 97 % teorie.

b) Redukce

Ve 100 ml dimethylacetamidu se v přítomnosti 2,5 g palladia na uhlí (10%, vlhkost 50%) suspenduje 10 g nitroderivátu podle odstavce a) a suspense se udržuje sedm hodin za tlaku vodíku 0,5 MPa. Katalyzátor se odstraní filtrací na Clarcel^R a filtrát se vnese do 50Q ml vody. Vytvořená straženina izoluje. Výtežek je 97 % teorie.

• · v « • φ * · « · φ »» »« k · ·· · • ····

c) Hydroiysa esterové skupiny

Na teplotě 60 °C se dvě hodiny udržuje 9 g sloučeniny podle odstavce b), 50 ml vodného roztoku hydroxidu sodného (2N) a 25 ml methanolu. Roztok se okyselí při teplotě 20 ’C do hodnoty pH 4,5 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové (37%) a izoluje se 7 g vzniklé sraženiny.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č.2: tr=29 minut.

..-N»_N.'.“b.is.( 2., 3,4,5 ,.6-pen.tahydrox-yhexy 1 .),-5-(4- ( 4-amino-fenyl-.......karbamoy1)benzoylglycylamino]-2,4,6-trijodisoftalamid

Při teplotě okolí se míchá dvě hodiny 25 g jodaminoace-tamidoisoftalamidu, připraveného podle odstavce F), 3 ml triethylaminu, 5,8 g produktu podle odstavce 1), 4,3 g HOBT a 6 g EDCI, HCl, načež se směs vlije do 700 ml dichlormethanu. Vzniklá sraženina se izoluje a čistí chromatografií na sloupci silanizovaného oxidu křemičitého RP-2 (Merck) s vodou jako elučním činidlem. Izoluje se 16 g žádaného produktu.

HPLC: sloupec č.l, eluční Činidlo č.2: t_r = 14 minut.

3. Kopulace s chelátem gadolinia A

Za míchání se udržuje po několik dní při teplotě 40 °C 0,125 g chelátu (sodná sůl), 1,8 g sloučeniny podle odstavce 2), 0,15 g EDC 1,HCl a 100 mg NHS sulfonové při hodnotě pH 7 přidáváním IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Sraženina, vzniklá zavedením 50 ml ethanolu, se izoluje a čistí ultrafiltrací na membráně 5 kDa, čímž se získá 1 g žádaného produktu.

CES: podmínky č.l: tr=30 minut

HPLC: sloupec č.3, eluční činidlo č.3: tr=20 minut.

9* » 9 9 9 k 9 9 9 *9 99 ·

9 9 9 9 • « 99 9 9 9

9 9

9999 99 9«

Příklad 8

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2 CO2H

I

R'=CH-(CH212CONHR (CH₂)₂NHCO

CONH

CONHCH,CONH

CONfGH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂

CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂ (sodná sůl)

1. Kyselina 3-[(3-ftalimidoethyIkarbamoy1)benzamido]benzoová

a) Kyselina 3-(aminoethylkarbamoyl)benzoová

Před odpařením do sucha se 18 hodin míchá roztok 9 g monomethylesteru kyseliny isoftalové a 1,5 ml diethylaminu v 90 ml methanolu. Zbytek se promyje ledovým methanolem.

Výtěžek: 91 % teorie.

b) Ochrana NH2 ve formě ftalimidu

Do roztoku 6,9 g uhličitanu Sodného ve 180 ml vody se přidá 9 g aminu a 14 g N-karbethoxyftalimidu. Míchá se po dobu jeden a půl hodin, pevná látka se izoluje a filtrát se okyselí na hodnotu pH 2. Ftalimid se vysráží ve formě bílých krystalů. Výtěžek je 80 % teorie.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo Č.2: t_r=32 minut.

• 9999 *

9 9 • 9 ·· • 9 ·

• 9 9 ·

99

c) Do 12 g ftalimidu podle odstavce b) ve 45 ml dimethylacetamidu se při teplotě 10 °C přikape 2,6 ml thionylchloridu. Po dvou hodinách při teplotě 15 ‘C se oranžový roztok přidá pomalu do roztoku 5 g kyseliny 3-aminobenzoové ve 45 ml dimethyacetamidu. Reakční směs se udržuje tři hodiny na teplotě 55 “C, načež se vlije do 900 ml vody. Vytvořená sraženina se izoluje. Výtěžek je 96 % teorie.

2. N,N'-bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-5-[3-[3-aminoethylkarbamoy lj.benz.amtdojbenzamidoacetamido].-2-,.4 ,.6-tr-i jodísof-tal - — amid:

a) Míchá se po dobu jeden a půl hodiny 20 g jodaminoacetamidoisoftalimidu, připraveného podle odstavce F), 2,5 ml triethylamiriu, 8,3 g sloučeniny podle odstavce 1), 3,4 g HOBT a 4,9 g EDCl, HC1 ve 100 ml dimetylacetamidu. Reakční směs se vlije do 700 ml dichlormethanu a izoluje se 26 g vzniklé sraženiny.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č.2: t_r=26 minut.

b) Hydrazinolysa

Do roztoku 25 g produktu podle odstavce a) v 55 ml vody o teplotě 80 *C se zavede 3,5 ml hydrazinhydrátu. Po 8 hodinách při této teplotě se reakční směs okyselí do hodnoty pH 1 a vzniklá sraženina se izoluje. Vyčistí se chromatografií na kationtové pryskyřici (H⁺) a pak na aniontové pryskyřici (OH) Výtěžek je 70 % teorie.

HPLC: sloupec č.l, eluční činidlo č.2: t_r=23 minut.

3. Kopulace s chelátem gadolinia A

Za míchání se udržují 1 hodinu na teplotě 40 ’C a na hodnotě pH 7 2 g chelátu A (sodná sůl), 2,3 g EDC1.HC1 a 16 g sloučeniny podle odstavce 2) v 50 ml vody před přidáním 200 mg NHS sulfonového a v míchání se pokračuje při teplotě 40 ‘C _ 40 — ··· · * · · · ? ···* 4 4 4 4 4 4 4 4

4*4 *4 · · ·

44 444···· ·· ·· další tři hodiny. Reakční směs se vlije do 500 ml ethanolu a vzniklá sraženina se čistí ultrafi 11raci, čímž se získá 10 g sodné soli žádané sloučeniny.

CES: podmínky č. 1, tr = 36 minut.

HPLC: sloupec Č.3 a eluční činidlo č.3: tr-21 minut.

Příklad 9

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2 ... CO2.H..................................... ......_____, ........... , r' =CH-(CH2 JíCONHR _R = ch₂<Vconh<Vconh<~\con/^CH2'^CH2°^H \=/ \=/ c,h₂(choh)₄ch₂oh (sodná sůl)

1. Kyselina 4-[4-(4-ftalimidomethy1Jbenzamido}benzamido]benzoová

Při teplotě 15 ’C se vnese 3,5 ml thionylchloridu do roztoku 19,3 g kyseliny 4-[4-[ftalimidomethy1]benzamidoJbenzoové a po dvpuhodinovém míchání 8 g kyseliny 4-aminobenzoové. Po 12 hodinách při teplotě 20 *C se reakční směs vlije do 500 ml vody. Vzniklá sraženina se promyje dioxanem. Získá se 11,5 g produktu.

HPLC: sloupec Č.l a eluční činidlo č.2: t_r=53 minut.

2. N,N'-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-N,N'-(2-hydroxyethy1 )4-[4-[4-(aminomethyi)benzamido]benzamido]benzamid « · · ·*

Při teplotě 20 °C se přes noc míchá 4,8 g 1-deoxy-1-(2hydroxyethylamino)-D-glucítolu, 4 g HOBT, voda, 11 g kyseliny podle odstavce 1) a 6,7 g EDCI,HCl. Reakční směs se vlije do 500 ml dichlormethanu a vzniklá sraženina se promyje 300 ml diethyletheru.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.2: tr=39 minut.

b) Hydrazinolysa

- Sraženina -N,N'-( 2-,-3'i 4,5,-6-pentahydroxyhexy 1 )-N,N'-( 2-hyd-”...........

roxyethyl)-4-[4-[4-(aminomethyl)benzamido]benzamido]benzamidu se vnese do 60 ml dimethylacetamidu a při teplotě 80 ’C 3,2 ml hydrazinhydrátu v roztoku 25 ml vody. Po třech hodinách se reakční směs zkoncentruje a zbytek se rozpustí ve vodě. Vodná fáze se udržuje na hodnotě pH 7,5 přidáváním koncentrovaného roztoku kyseliny chlorovodíkové a podrobí se chromatografií na silné katexové pryskyřici (H⁺), pak na slabé anexové pryskyřici (OH^-). Po zkoncentrování v ethanolu se získá 3,5 g sraženiny.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.2: tr=27 minut.

3. Kopulace s chelátem gadolinia A

Spolu s 0,5 g chelátu A v 15 ml vody se vnese při teplotě 40 C 1,5 g sloučeniny podle odstavce 2) a 5 ml dimethylacetamidu a přidá se 0,75 g EDCI, HCl a 0,05 g NHS sulfonové (sodná sůl). Po 2-hodinovém míchání při této teplotě se reakční směs vlije do 2 objemů ethanolu a izolují se 1,3 g sraženiny.

HPLC: sloupec č.3 a eluční činidlo č.3: tr= 31 minut.

Příklad 10

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2

CO2H

R'=CH-(CH2)2C0NHR « ·

CH.CONH

CONH

Br CON(CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂

Br

CONHCH₂CONH ^Br

Br CON(CH₂(CHOH)₄CH₂OH].

(sodná sůl)

1'KyšeMna '4-'[ 4 -[4-ňi'ť rdběrižámidb ] běnzámido ] benzoová

Do roztoku 35 g kyseliny 4-(4-benzamido)benzoové ve 140 ml dimethylacetamidu se při teplotě 5 °C přidá 25,4 g chloridu kyseliny 4-nitrobenzoové. Po jednodenním míchání při teplotě 20 °C se reakční směs vlije do 500 ml dichlormethanu. Získá se 50 g produktu.

2. Redukce nitroskupiny

Suspense 13 g kyseliny podle odstavce lj ve 400 ml dimethylacetamidu se hydrogenuje za tlaku 0,15 MPa čtyři hodiny v přítomností 3 g 5% palladia na uhlí a 50 % vody. Po filtraci a odpaření rozpouštědla se izoluje 12 g produktu.

3. Kyselina 4-(4-(4-(ftalímidoacetamido]benzamido)benzamido]benzoová

Roztok 16,4 g kyseliny ftalimidoctové ve 40 ml thionylchloridu se udržuje 4 hodiny na teplotě zpětného toku. Po zkoncentrování se reakční směs vlije do 100 ml diisopropyletheru. Izoluje se 10 g sraženiny chloridu kyseliny. Vnese se 8,5 g této sraženiny do roztoku 12 ml anilínu, získaného ve stupni 2) v roztoku 50 ml dimethylacetamidu při teplotě 10 ’C. Po návratu na teplotu 20 ’C se rozpouštědlo oddestiluje a zbytek se promyje diethyletherem. Získá se 16 g produktu.

• fl · • fl *

4. Kondenzace na amin připravený podle odstavce E) a hydrazinolysa

Rozpustí se v 80 ml dimethylacetamidu při teplotě 35 ’C 18 g aminu podle odstavce E, 10 g kyseliny podle odstavce 3) a 3,5 g HOBT. Do reakční směsi, ochlazené na teplotu 20 “C, se přidá 4,9 g EDC1, HCl. Po jednodenní prodlevě se reakční směs vlije do 600 ml dichlormethanu a vzniklá sraženina se promyje 400. ml ethanolu. Sraženina se rozpustí v 90 ml dimethylacetamidu .a. 2 2-. ml... vody-při tep-lot-ě-80-G, přidá-se- 1,85 ml hydrazinhydrátu a reakční směs se míchá 3 hodiny před odpařením rozpouštědla. Zbytek se rozpustí v 800 ml vody a hodnota pH se upraví na 1 přidáním vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové (12N). Po zfiltrování Celitem^R a po chromatografi i na anexové pryskyřici a na katexové pryskyřici, po odfiltrování elučního činidla na aktivním uhlí se izoluje 13 g žádané sloučeniny.

5. Reakce produktů obecného vzorce II a III

Ve 40 ml vody se rozpustí 1 g chelátu A a 8 g aminu podle odstavce 4). Po okyselení až na hodnotu pH 6 přísadou zředěného vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, se reakční směs zahřeje na teplotu 40 ’C a přidá se 0,09 g NHS sulfonové a 1,2 g EDC1, HCl. Po 2-hodinovém míchání na této teplotě se reakční směs vlije do 400 ml ethanolu a sraženina se izoluje. Po obvyklém čisticím zpracování se izoluje 6 g konečného produktu. CES: předchozí podmínky, t_r= 38 minut.

Příklad 11

Chelát gadolínia obecného vzorce I, kde m=2

COžH

R'=CH-(CH2)2C0NHR « t · * * *

CH₂-(CHOH)₄-CH₂OH

Br CON

R= CH.

/~Λ CH,-CHOH-CH₂OH ^ΟΟΝΗ\_-/ ^C0NH \=Z ^θΓ CH₂-(CHOH)₄-CH₂OH Br CON( ch₂-choh-ch₂oh (sodná sůl)

1. Kyselina 5-(4-nitrobenzamido)-2,4,6-tribromisoftalová

Na teplotě zpětného toku se udržuje 18 hodin 50 g chloridu kyseliny para-nitrobenzoové a 75 g kyseliny 5-amino-2,4,6tribromisoftalové ve 400 ml dioxanu, Po vychladnutí se sraženina zfiltruje, promyje se 50 ml dioxanu a vysuší se. Získá se 115 g produktu.

2. Kyselina 5-(4-aminobenzamido)-2,4,6-tribrmoisoftalová

Roztok 180 g nitrovaného derivátu podle odstavce 1} v 600 ml vody se upraví na hodnotu pH 6 přidáním 5N vodného roztoku hydroxidu sodného a hydrogenuje se za tlaku 5 x 10^s Pa v přítomnosti platiny typu 156 (Johnson Matthey) po dobu sedmi hodin. Katalyzátor se odfiltruje a voda se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 80 g produktu.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.6: voda/kyselin trifluoroctová (hodnota pH 2,8) s methanolem (99/1 - objem/objem), průtok 1 ml/min, t_r = 3,6 minut (18,8 minut pro nitrovaný produkt ) .

3· Kyselina 5-(4-(4-( f tal i tni dome thyl )benzamido]benzmido)2,4,6-tribromisof talová

Směs 10 g kyseliny 4-aminomethyIbenzoové, 14,5 g N-karb- 54 ·· · · · · · * ··.· «·» · * · i · · • φ »» · * · ··* * · b · · *9 · · · »· « ·*· ···· ** ·· etoxyftalimidu a 9,2 ml triethylaminu ve 140 ml tetrahydrofuranu se udržuje 72 hodin na teplotě zpětného toku. Izolovaná sraženina filtrací při teplotě okolí z reakční směsi se promyje diethyletherem a IN vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Získá se 14,5 g pevné látky, z níž se 12,2 g rozpustí při teplotě 10 °C v 90 ml Ν,Ν'-dimethylacetamidu a 3,5 ml thionylchloridu; po 3-hodinovém míchání se do reakční směsi přidá 23,4 g anilinu získaného podle odstavce 2) a nechá se míchat přes noc před vlitím do 900 ml vody. Izolovaná sraženina se .promyje vodou, a .překrystalu je. se z-200 ml dioxanu. - Zí ská- se 30g produktu.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.5: voda/CH3C00NH4 (Ο,ΟΙΜ) /CHsCN, průtok 1 ml/min. gradient 85/15 při 50/50 ve 20 minutách.

4. Dichlorid kyseliny

Ve 150 ml dioxanu, obsahujícího 26 ml dimethylformamidu, se rozpustí 30,3 g isoftalového derivátu získaného podle odstavce 3) a při teplotě 5 ‘C se prikape 42 ml thionylchloridu. Po 30 minutách při teplotě O ’C se směs vlije do 550 ml vody a vzniklá sraženina se odfiltruje, promyje se vodou a diisopropyletherem. Získá se 26 g produktu po vysušení.

5. N,N'-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-N,N(2,3-dihydroxypropy 1 )-2,4,6-tribrom-5-[4-[4-(aminomethy1)benzamido]benzamidojisoftalamid:

a) Při teplotě 60 ’C se přidá 10 g dichloridu kyseliny do roztoku 15 g l-deoxy-l-(2,3-dihydroxypropylamino)-D-galaktitolu ve 100 ml N-methylpyrrolidonu. Míchá se po dobu čtyř hodin při této teplotě, reakční směs se nechá ohřát na teplotu okolí a vlije se do 1 litru isopropanolu. Vytvořená sraženina se izoluje a vysuší.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.5: t_r= 16 minut.

τΛ* • · · · · · · * ·

b) Odstranění ftalimidové skupiny

Za míchání se vnese 20,4 g pevně látky podle odstavce a) do 80 ml Ν,Ν-dimethylacetamidu při teplotě 80 °C a následně 1,6 ml hydrazinhydrátu, rozpuštěného ve 20 ml vody. Po 3 hodinách při této teplotě se reakční směs vlije při teplotě okolí do 1 litru ethanolu. Vzniklá sraženina se izoluje, vysuší a rozpustí se ve 40 ml vody. Při teplotě 0 ’C se přidá přibližně 2 ml vodného 6N roztoku kyseliny chlorovodíkové ke snížení

--- -hodnoty pH na- 2. Reakční -směs.....se zf i 1 tru je-pres Ce l i te^R -vyčistí se průchodem přes iontoměničové pryskyřice (anex Amberlite^R a katex 1MAC^R). Získá se 6 g žádaného produktu.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo Č.5: t_r= 24 až 29 minut.

6. Reakce s chelátem A

Ve 12,5 ml vody se rozpustí 5,8 aminu podle odstavce 5) a 1,1 g chelátu (sodné soli) a hodnota pH se sníží na 6 přísadou IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Přidá se 12,5 ml dioxanu, 0,06 g HOBT, pak 1)8 g EDCl a reakční směs se udržuje, na hodnotě pH 6 po dobu 4 hodin před vlitím do 150 ml ethanolu. Vzniklá sraženina se izoluje, vyčistí tangenciální ultrafiltrací na membráně s prahem porušení 30 KD z regenerované celulózy 50 cm² (modul Labscale®, Millipore^R). Získá se 5,6 g žádaného produktu.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo Č.3: t_r= 16 minut.

Příklad 12

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2

CO2 H

R'=CH-(CH2)2C0NHR

-» « 4 44 4 4 *··«

4 · 4 » ♦ 44 « 44 4 * · ·4·4 4

W 4 4 4 4' 444 «4 4444444 4« 4«

CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂ v

Br

CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH]₂ (sodná sůl)

1. N,N'-bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-2,4,6-tribrom-5[4-(4-aminomethylbenzamido)benzamid}i sof talamid

a) Míchá se čtyři hodiny při teplotě 60 'C roztok 10 g dichloridu kyseliny připraveného způsobem jako podle odstavce 4) příkladu 11 ve 200 ml N-methyIpyrrolidonu a 20,6 g disorbitylaminu. Reakční směs se vlije do 1,5 litru isopropanolu, z něhož se izoluje 17,5 g sraženiny.

HPLC: sloupec č.l a eluční Činidlo č.5: t_r= 15 minut.

b) Odstranění ftalimidové skupiny

Způsobem jako v předchozím příkladu se ze 16 g produktu podle odstavce a) získá 6,2 g žádaného aminu.

HPLC: sloupec č.l a eluční Činidlo č.2: t_r= 15 až 20 minut.

2. Postupuje se jako podle příkladu 11 za použití 0,78 g chelátu A a 4,8 g aminu k získání 2,5 g žádaného produktu.

HPLC: sloupec Č.l a eluční činidlo č.3: t_r= 13 minut.

Příklad 13

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=2

COaH

R'=CH-(CH₂ )2C0NHR * 4 4 « · · · '♦· « · · ·· · · • · * · «··♦··· · * » • ·

Br CON[(CHOH)₄CH₂OH]₂

R=CH₂CONH< >CONH< /CONH-ť /Br

Br CON[(CHOH)₄CH-OH]₅ (sodná sůl)

Ϊ. Kyselina 4-(fta 1imidomethylkarbonylamino)benzoová

Při teplotě 10 ”C se vnese 3,9 ml thiony1ch loridu do roztoku 10 g ftaloylgiycinu ve 30 ml N,N-dimethylacetamidu a po tříhodinovém míchání při této teplotě 4 g kyseliny 4-aminobenzoové. Nechá se jednu noc při teplotě okolí a reakční směs se vlije do 500 ml vody o teplotě 80 ’C. Vytvořená sraženina se izoluje.

2. Kyselina 5-(4-(4-(ftalimidomethylkarbonylamino)benzamido]benzamido)-2,4,6-t r ibromisoftalová

Při teplotě 10 °C se vnese 4,8 ml thionylchloridu do roztoku 19,5 g kyseliny podle odstavce 1) ve 120 ml N,N-dimethylacetamidu a po 2| hodinách 38 g kyseliny 5-(4-amino)benzamido2,4,6-tribromisoftalové. Nechá se přes jednu noc při teplotě okolí a reakční směs se vlije do 1 litru vody. Vytvořená sraženina se izoluje a promyje se 400 ml teplého dioxanu. Získá se 7,4 g produktu.

3. N,N'-bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-2,4,6-tribrom-5-(4(4-[ftalimidomethy1 karbony lamino]benzamido)benzamido)isof talamid

Při teplotě 5 C se vnese 21 ml thiony1 chloridu do rozto58 • ·· ·0 9 · · « · · > * « · · · · ·· • 9 9« · · V 9 · 9 * 0 . 0 * 9 · · · 9 9 • 9 «9 ··· 9909 «9 · ku 16,5 g kyseliny podle odstavce 2) v 90 ml dioxanu a 13,6 ml dimethylformamidu. Po 2|-hodinovém míchání se reakční směs vlije do 400 ml vody a vytvořená sraženina se vnese do roztoku o teplotě 70 ’C 29,3 g disorbitylaminu ve 150 ml N-methylpyrrolidonu. Po 4-hodinovém míchání při této teplotě se reakční směs ochladí na teplotu okolí, soli se izolují a filtrát se vlije do 1 litru isopropanolu. Vzniklá sraženina se promyje 1,2 liry ethanolu. Získá se 23 g produktu.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.2: t_r= 28 až 33 minut.

4. Odstranění ftalimidové skupiny

Do směsi 80 ml Ν,Ν-dimethylacetamidu a 20 ml vody o teplotě 80 °C se vnese 22 g ftalimidu podle odstavce 3) a 1,4 hydrazinhydrátu. Po třech hodinách na této teplotě se reakční směs ochladí na 20 °C a nalije se do 300 ml ethanolu. Vytvořená sraženina se vysuší a rozpustí se ve 40 ml vody, roztok se ochladí na teplotu 0 ’C a 3 ml 6N chlorovodíkové kyseliny se hodnota pH nastaví na 1,5. Po zfiltrování pres Celite^R se filtrát eluuje na 45 ml anexové pryskyřice Amberlite^R IRA67 (Rohm & Haas), 50 ml katexové pryskyřice IMAC^R HPIIIE á 16 ml anexové pryskyřice Amberlíte ^R IRA458. Po neutralizaci a filtraci na membráně 0,22 gm, se roztok vysuší k suchu. Získá se 11,7 g produktu.

HPLC: sloupec č.l a eluční činidlo č.2: tr= 16 až 20 minut.

5. Kondenzace na chelátu A

Ve 24 ml vody se rozpustí 11,2 g aminu podle odstavce 4) a 1,9 g chelátu A (sodné soli). Hodnota pH roztoku se upraví na 6,1 přísadou 2N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Předloží se tedy 24 ml dioxanu, pak 2,7 g chlorhydrátu l-(3dimethylaminopropy1)-3-ethylkarbodiimidu a 0,094 g hydroxybenzotriazolu. Po tříhodinovém míchání při teplotě okolí se směs vlije do 300 ml ethanolu a vytvořená sraženina se izoluje. Po > » » ul trafi 1traci modulem Lebscale*, jehož membrána má práh rozrušení 10KD se roztok lyofilizuje. Získá se 10,2 g produktu. HPLC: sloupec Č.l a eluční činidlo č.7: CH3CN/P.I.C. A* (Waters¹¹ gradient ve 25 minutách 25/75 až 30/70.

P. I .C. A=H20/H3P04/(C4H9 )4N*HS04 . t_r= 14 minut.

Příklad 14

Chelát gadolinia obecného vzorce I, kde m=l CO2H

R'=CH-CH2CONHR

R =

Br C0N[CH4CH0H),CK0H

(sodná sůl)

Rozpustí se 1,8 g chelátu gadolinia kyseliny (1,4,7,10tetrazacyklododekan)-l,4,7,10-tetra-(2-jantarové) a 13,5 g N,N'-bis(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexy1)-2,4,6-tribrom-5-(4-[4-aminoacetamidobenzamidolbenzoylglycylamino)isoftalamidu připraveného způsobem podle odstavce f) příkladu 3 v 70 ml vody a přidá se IN vodný roztok kyseliny chlorovodíkové do hodnoty pH

6. Po přísadě 2 g EDCl se směs udržuje 2 hodiny na teplotě 40 *C. Provede se tangenciální ultrafi 1trace na kazetě Minišette^RFiltron^R s polyethersulfonovou membránou s prahem porušení 5KD až do 2 litrů filtrátu; zbytek se uvede na 2 hodiny do styku s 15 g aktivního uhlí Darco^R G60 společnosti Aldrich^R. Po oddělení uhlí filtrací a ocpaření k suchu se izoluje 5 g bílé • 4 «

pevné látky.

CES: podmínky č.l; t_ř =35 minut

Průmyslová využitelnost

Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxy1ovou kyselinou vhodný pro výrobu farmaceutického prostředku pro diagnostické zobrazování.

Claims

1. Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyk1 ickou polyaminkarboxylovou kyselinou obecného vzorce I

HOOC COOH

I I

RHN-OC-(CH₂)_m-HC-N-CH₂-CH₂-N-CH-(CH₂)_m-CO-NHR I ‘ 1 ch₂ ch₂

Óh₂ ch₂ i

I I

........ ........._.............RUCH₂-CH₂-N- CH-(CH₂)_m-CO-NHR. ...........

COOH kde znamená m 1 nebo 2,

R’ atom vodíku, skupinu alkylovou nebo hydroxyalkylovou vždy s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu CH2-COOH nebo CH2-CONZ1Z2, kde znamená Zi a Z2 na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou, nebo R’ znamená skupinu

HOOC-CH-(CH2)m-CONHR,

R skupinu obecného vzorce kde znamená a 1 nebo 2, vazbu, skupinu CH2, CH2CONH nebo (CH2)2NHCO • ♦ φ · φ · ·· ·»* · · • V ·

Z’ vazbu, atom kyslíku, atom síry, skupinu NQ, CH2 ,

CO, CO-NQ, NQ-CO, NQ-CO-NQ nebo CO-NQ-CHí-CONQ,

Z’’ skupinu CO-NQ, NQ-CO, CO-NQ-CHí-CONQ nebo skupinu

Ri , R2 , R3 ,

R4 a Rs. .. _„na .sobě..nezávisle -atom vodíku.,- bromuchloru'ne- bo jodu, skupinu CO-NQiQ2 nebo N(Qi)-CO-Q2, kde znamená Qi a Q2, které jsou stejné nebo různé, skupinu alkylovou s 2 až 6 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou, popřípadě přerušenou atomem kyslíku, takže Qi a Q2 mají dohromady 4 až 10 hydroxylových skupin, přičemž alespoň jedna a lépe dvě skupiny symbolu Ri , R2 , Ra , R4 a Rs znamenají amidoskupinu, a jeho farmaceuticky vhodné soli s minerální nebo s organickou zásadou.

2. Chelát kationtu paramagňetickéhó kovu s makrocyk1 ickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená m 2,

R’ skupinu obecného vzorce t

H00C-CH-(CH2)2C0NHR nebo CH2COOH, a 1,

Z vazbu, skupinu CH2 nebo CH2CONH,

Z’ skupinu CONH, NHCO, CONHCH2CONH nebo NHCONH,

Z*’ skupinu CONH nebo CONHCH2CONH a potom

R2= R4 skupinu CONQi Q2 , nebo Ra skupinu CONQi Q2 a Ri , R2 , R4 , t · • i a « B B B · • ♦ B ♦ *· • * * BBB B B

B B B B <

««· ···· «Β ··

Rs atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu, nebo

Z’’ skupinu NHCO a potom

Rz= R* skupinu N(Qi )COQa , nebo R3 skupinu N(Qi )-COQ₂ a Rt , R₂ , R4, Rs atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu, nebo

3. Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená m 2,

Z vazbu, skupinu ..CH2 nebo-CHíCONH,......................- - ......

Z’ Skupinu CONH, NHCONH nebo CONHCH2CONH,

Z” skupinu CONH nebo CONHCH₂CONH,

Ri, R3, Rs vždy atom bromu nebo jodu,

R2 a R4 skupinu CONQi Q₂, přičemž Qi a Q₂ znamená hydroxylovanou alkylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, které mají celkem 6 až 10 hydroxylových skupin nebo 4 až 8 hydroxylových skupin, jestliže Q₁ a/nebo Οχ jsou přerušeny atomem kyslíku.

4. Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená m 2,

R’ skupinu obecného vzorce

HOOC-CH-(CH₂)2CONHR a 1,

Z skupinu CH2 nebo CH2CONH,

Z’ skupinu CONH nebo NHCONH,

Z” skupinu CONH nebo CONHCH2CONH,

Ri, Ra, Rs vždy atom bromu nebo jodu,

R2 a R4 skupinu CONQ1Q2, přičemž Qi a Q2 znamená hydroxylovanou alkylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, které mají celkem 6 až 10 hydroxylových skupin nebo 4 až 8 hyd64 • 4 4 • 4 4

4 · »4 • . 4 4 4 • 4 «4

44 4 ·

4 « • 4*4

4 4

4·4 4444

4 4 4

4 '4

444 4 4 4 roxylových skupin, jestliže Q₁ a/nebo Q^jsou přerušeny atomem kyslíku.

5. Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho solí podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená m 2,

R’ CH2-CO2H nebo skupinu obecného vzorce

I

..HOOC-CHr (.CH2..)2 CONHR- - -............... - - -- a 1 ,

Z skupinu CH2 nebo CH2CONH,

Z^ř skupinu CONH,

Z’ ’ skupinu CONH,

Ri , Rs , Rs vždy atom bromu nebo jodu,

R2 a R4 skupinu CONQ1Q2, přičemž Qi a Q2 znamená hydroxylovanou alkylovou skupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, které mají celkem 6 až 10 hydroxylových skupin nebo 4 až 8 hydroxylových skupin, jestliže a/nebo Q^jsou přerušeny atomem kyslíku.

6. Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 0becného vzorce I, kde znamená m 2,

R’ CH2-CO2H nebo skupinu obecného vzorce

I

HOOC-CH-(CH2 hconhr a 1,

Z skupinu CH2 nebo CH2CONH,

Z’ skupinu CONH nebo NHCO,

Z’’ skupinu CONH nebo CONH-CH2-CONH,,

Ri , R3, Rs vždy atom bromu nebo jodu, • ♦ · ·

9 9 99

999 · * • · · ·« ««

R.2 a R.4 vždy skupinu CONQ1Q2 nebo

R3 skupinu CONQiQ2 a potom Ri , R2, R4, Rs vždy atom vodíku, bromu nebo jodu,

7. Chelát kationtu paramagnetíckého kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená m 1,

R’ skupinu obecného vzorce

HOOC-CH-(CH2)2 CONHR

Z

Z’ z’

Ri

R2 skupinu CH2 nebo CH2CONH, skupinu CONH, skupinu CONH nebo CONH-CH2-CONH,, Ra, Rs vždy atom bromu, a R4 vždy skupinu CONQ1Q2, přičemž Qi lovanou alkylovou skupinu se 2 až mají celkem 6 až 10 hydroxylových a Q2 znamená hydroxy6 atomy uhlíku, které skupin.

8. Chelát kationtu paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 až 7 obecného vzorce I, přičemž kovovým kat iontem je Gd³⁺.

9. Chelát gadolinia s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 obecného vzorce I, m 2,

R’ skupinu obecného vzorce

I

HOOC-CH-(CH2)2CONHR R skupinu vzorce

Br CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OH)₂

CHjCQNH-γ^-ΟΟΝΗ-^^-ΟΟΝΗ-^^·ΟΟΝΗΟΗ₂ΟΟΝΗ -^~^>Br

Br~ CON[CH₂(CHOH)₄CH₂OhlJz » 4 » ·

4 4 4 • * · 4 • 4 4 4

44 44 4 • 4444

4 4 4 4

4 4 44 • 44 4 4 . 4 4 4

10. Chelát gadolinia s makrocyk1 ickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 obecného vzorce I, m 2,

R' skupinu obecného vzorce

HOOC-CH-(CHj)2CONHR R skupinu vzorce ^Ri CONQ^j

R= Z< >CONH-

CONC^Qj kde znamená

Z’’ skupinu CONHCH2CONH a Qi a Q2 skupinu vzorce

CH2(CHOH)4CH2OH, přičemž potom znamená Z skupinu CH2 a Ri, R3 a Rs vždy atom jodu, nebo Z znamená skupinu CH2CONH a Ri, R3 a Rs vždy atom bromu, nebo znamená

Z*’ skupinu CONH, Z skupinu vzorce CH2 nebo CH2CONH a Ri, R3 a Rs vždy atom bromu a Qi CH2 (CHOH)4CH2OH a Q2 skupinu; vzorce CH2CHOHCH2OH nebo CH2(CHOH)4CH2OH.

11. Kontrastní prostředek pro diagnostické zobrazování magnetickou rezonancí, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství chelátů kationtů paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou a jeho soli podle nároku 1 až 10 ve farmaceuticky vhodném nosiči.

12. Scintigrafický prostředek, vyznačující se t í m, že obsahuje účinné množství chelátů kationtů paramagnetického kovu s makrocyklickou polyaminkarboxylovou kyselinou obecného vzorce II’ flfl* flfl·· • · · · · · · ·* • · » · · » « fl · '· » ♦ • · · · · · · · • fl flfl flflfl ···* flfl ··

HOOC COOH

HOOC-(CH₂)_m-HC-N-CH₂-CH₂-N-CH-(CH₂)_m-COOH

CH₂ ch₂ CII’) ch₂ ch₂

I I

R’N-CH₂-CH₂-N- CH-(CH₂)_m-COOH I

COOH ^|[lLkde znamená jí m 1 nebo 2,

....... - _R> _atů'iii vodíku, skupinu áíkýlovou ňébó hydroxyalkylovou vždy s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu CH2-COOH nebo CH2-CONZ1Z2, kde znamená Zi a Z2 na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou, nebo R’ znamená skupinu

HOOC-CH-(CH2 Jm-CONHR, kde znamená a 1 nebo 2, vazbu, skupinu CH2, CH2CONH nebo (CH2 )2NHC0

Z’ vazbu, atom kyslíku, atom síry, skupinu NQ, CH2,

CO, CO-NQ, NQ-CO, NQ-CO-NQ nebo CO-NQ-CH2-CONQ,

Z’’ skupinu CO-NQ, NQ-CO, CO-NQ-CH2-CONQ nebo skupinu

NQ-CO-CH2-NQCO, kde zanemná Q atom vodíku nebo φ

φ ·ΦΦ· * ♦ φ φ φ φφφ φφ· « · φ φ φ skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou,

Ri , Ra , R3 ,

R4 a Rs na sobě nezávisle atom vodíku, bromu, chloru nebo jodu, skupinu CO-NQiQ2 nebo N(Qi1-C0-Q2, kde znamená Qi a Q2, které jsou stejné nebo různé, skupinu alkylovou s 2 až 6 atomy uhlíku popřípadě hydroxylovanou, popřípadě přerušenou atomem kyslíku,. takž.e_...Qi ..a Q2 . maj-í -dohromady 4- až- 10hydroxylových skupin, přičemž alespoň jedna a lépe dvě skupiny symbolu Ri , R2 , R3 , R4 a Rs‘ znamenají amidoskupinu, a jeho farmaceuticky vhodné soli s minerální nebo s organickou zásadou.