CN1931216B - 一种由红花与红景天制成的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了一种用于心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法，该组合物主要由红花500～10000份和红景天250～3000份制成，还可以由红花黄色素50份、红景天提取物1～500份制成。该药物组合物可以制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型，优选注射剂和口服制剂。可用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞、缺血性脑血管疾病、中风及中风后遗症等。

Description

一种由红花与红景天制成的药物组合物 

[技术领域]

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种用于治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法。 

[背景技术]

随着我国逐渐步入老龄化社会，人民生活水平提高，生活节奏加快，饮食习惯向高热、高脂化发展，心脑血管疾病成为威胁人类健康和长寿的第一号杀手。根据近年有关资料统计，我国每年因心脑血管疾病死亡者占死亡病因的半数左右。其发病率高，危害性大，发病后的死亡率和致残率相当高，给患者和家庭带来烦恼和负担。因此，揭示心脑血管疾病发生、发展的机制，开展有效的预防、治疗和康复，降低致残和死亡率，一直是医药界人士致力于发展的方向。 

红花为菊科植物红花(Cacthamus tinctonus.L)的干燥花，现代研究证明红花的主要有效成分是存在于其水溶性成分中的红花黄色素。红花黄色素是含有多种查耳酮类的水溶性混合物，药理实验证明其具有扩张冠状动脉、改善心肌供血，降低血压、扩张血管、改善器官供血，抗凝血，抑制血栓形成，耐缺氧、抗炎等多种药理作用。红花黄色素中羟基红花黄色素A含量较高，具有药理效应代表性。与红花黄色素相关的专利有CN1085674、CN1368503，涉及红花黄色素的制备方法、制剂及用途等，另外，红花黄色素和注射用红花黄色素均有上市，批准文号：国药准字Z20050145、Z20050146，制剂规格：每瓶装50mg(含羟基红花黄色素A35mg)，生产厂家：浙江永宁制药厂。 

红景天为景天科植物大花红景天Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba的干燥根及根茎，为多年生草本或亚灌木植物，主要分布在前苏联地区以及我国东北、华北、西北及西南等高寒地区。我国红景天资源丰富，种类众多，约有73种，目前研究较多的景天科红景天属植物，具体选自玫瑰红景天Rhodiola rosea，大花红景天Rhodiola crendata，棱叶红景天Rhodiola henryi，高山红景天Rhodiola sachlinensis，长鞭红景天Rhodiola fasskisa，菱叶红景天Rhodiola henryi，狭叶红景天Rhodiola kirilowii，喜马红景天Rhodiola himalensis，圣地红景天Rhodiola saera，裂红红景天Rhodiola quadtifida，云南红景天Rhodiola yunnanensis，大紫红景天Rhodiola atropupurea，互生红景天Rhodiola alterna，帕米尔红景天Rhodiola pantiro。《神农本草经》中红景天被列为药中上品，无毒，多服久服不伤人，有“轻身益气”之功效。近年来，为综合利用红景天属药用植物资源，开展了广泛的研究。现代研究表明，红景天具 有显著的抗衰老、抗辐射伤害等作用；近年的研究结果表明红景天在心脑血管疾病的防治方面亦具有独特的作用：红景天可以降低心肌耗氧量和耗氧指数，拮抗心率失常，剂量增大还能降低冠状动脉阻力，并且还具有一定的降低血压和减慢心跳速率的作用，还可以抑制血小板聚集和抗体外血栓形成；对心肌缺氧引起的心肌损伤者和脑血管阻塞引起的脑缺氧者有着有着良好的治疗保护作用。 

现代药理及药效学研究都表明红花或红花黄色素、红景天在治疗心脑血管疾病方面均有较好的功效。但是，利用红花或红花黄色素和红景天的相互作用、配伍组方，制备治疗心脑血管疾病的药物，还未见报道。 

[发明内容]

本发明的目的是提供一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要由红花和红景天制成，两者的重量份数为：红花500～10000份、红景天250～3000份；优选为：红花1000～5000份、红景天500～1500份；最优为：红花2500份、红景天1000份。 

本发明的药物组合物中的红花和红景天可以用适宜的溶剂分别或混合经过提取加工得到其提取物，提取物再和药用辅料混合加工制成各种任何一种制剂。所述的溶剂是指药学上常用的溶剂，优选水或醇，提取方法可以用药学上常规的方法进行提取，如浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续提取法等。其中的红花提取物中红花黄色素的含量最好不低于50％；其中的红景天提取物中红景天苷的含量最好不低于3％，总酚和/或多糖的含量最好不低于50％。 

本发明提供的药物组合物，还可以由红花黄色素与红景天提取物制成，根据原药材制备提取物的得率可知，其重量份数为：红花黄色素50份、红景天提取物1～500份；优选为：红花黄色素50份，红景天提取物3～200份；进一步优选为：红花黄色素50份、红景天提取物15～60份。 

以上组成，若以克为单位，可以制成100～1000次用量的制剂，如作为注射剂，可制成500～1000支，每次用量1～10支。如作为片剂，可制成500～1000片，每次服用1～10片。 

以上组成是按重量比作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减小，如大规模生产可以以千克为原料，或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间的重量配比不变。 

本发明提供了红花的提取工艺，具体如下： 

工艺一：取红花，于70℃温度用pH为3的酸水温浸提取2至4次，每次均为50倍量的酸水，每次1.5小时。合并提取液，滤过，收集滤液，放冷，调pH值至中性，减压浓缩至相 对密度1.05～1.10，加乙醇至醇浓度为70％，冷藏(10℃以下)放置24小时，滤过，滤液加于已处理好的大孔吸附树脂HPD100柱色谱(药材与树脂比例为1∶10(W/V))，先用去离子水以1～2.5ml/cm²/min的流速洗脱两个柱床体积，然后用60％的乙醇以1～2.5ml/cm²/min的流速洗脱五个柱床体积，收集60％醇洗脱部分，减压浓缩至密度为1.10左右，然后在70℃左右减压真空干燥或减压旋转蒸发后冷冻干燥，即得红花黄色素。 

通过本工艺提取的红花提取物的得率为1～3％，其中红花黄色素的含量不低于70％。 

工艺二：将红花加水冷浸24小时或煎煮1～1.5小时，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.25，加入乙醇至含醇量为80％，搅拌均匀，4℃静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15～1.20，加入5～10倍的水，4℃静置12～24小时，离心除沉淀，离心液减压浓缩至提取液含生药为1g/ml，将浓缩液经大孔吸附树脂柱层析，先用去离子水洗脱至Molish反应和茚三酮反应呈阴性，继续用4～6个柱体积的去离子水洗脱并收集洗脱液，浓缩至提取液含生药1g/ml，上聚酰胺柱，先用去离子水洗脱至无色，再用70～90％乙醇洗脱4～8个柱体积，收集洗脱液，减压回收乙醇，冷冻干燥或喷雾干燥，得到桔黄色无定形粉末，即红花黄色素。 

通过本工艺提取的红花提取物的得率为1.5～3％，其中红花黄色素的含量不低于70％。 

工艺三：取红花，加水30℃温浸两次，每次加水5倍量，温浸24小时，其间不时搅拌，合并两次水提液，滤过，滤液50～90℃减压浓缩至相对密度为1.10～1.25，得红花水提浓缩液，将此水提浓缩液，上柱床体积为15倍浓缩液体积的聚酰胺柱，以蒸馏水洗脱Molish反应和茚三酮反应呈阴性，再以95％乙醇洗脱至洗脱液无色，收集洗脱液，回收乙醇，50～90℃减压浓缩干燥，即得红花黄色素。 

通过本工艺提取的红花提取物的得率为1～3％，其中红花黄色素的含量不低于50％。 

工艺四：取红花，加水15倍量，室温浸泡2次(带搅拌)，每次1小时，滤过，滤液60℃减压浓缩至相对密度1.14～1.16，加乙醇使含醇量至80％，静置冷藏过夜，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加于已处理好的聚酰胺柱上(100～200目，聚酰胺用量为上样量的10倍左右)，用35％的乙醇洗脱，收集第二个黄色带，浓缩干燥即得。 

通过本工艺提取的红花提取物的得率为2～3％，其中红花黄色素的含量不低于55％。 

本发明还提供了红景天的提取工艺，具体如下： 

工艺一：取红景天药材，粉碎成粗粉，用70％乙醇提取三次每次1小时，第一次加醇10倍量，第二、三次分别为8、8倍量。滤过，合并提取液，回收乙醇至每5ml含1g生药材，用2倍量石油醚脱脂后，弃去石油醚液，再用水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥，即得红景天提取物。

通过本工艺制得的红景天提取物的得率为10～20％，提取物中红景天苷含量不低于3％，总酚的含量不低于50％。 

必要时，还可进一步精制，将上述得到的红景天提取物用适量水溶解后，加于已事先处理好的大孔树脂柱上，依次用水液、10％乙醇、15％乙醇、20％乙醇、30％乙醇洗脱，洗脱速度为10ml/min。收集30％乙醇洗脱液，减压回收乙醇至相对密度为1.03～1.06(60℃)，喷雾干燥，得红景天提取物。 

通过本工艺制得的红景天提取物的得率为1～5％，提取物中红景天苷含量不低于10％总酚的含量不低于60％。 

工艺二：取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，加2倍量水，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05。浓缩液用半量石油醚提取三次，弃去石油醚，再用等量正丁醇提取4次，合并提取液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为6.8～7.5％，其中红景天苷的含量不低于3％，总酚的含量不低于50％。 

工艺三：取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，加2倍量水，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05。取浓缩液，上大孔树脂柱或聚酰胺柱，先用浓缩液重量30倍量的水洗脱，弃去洗脱液，再用30倍量80％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为6.5～7.0％，其中红景天苷的含量不低于3％，总酚的含量不低于50％。 

工艺四：取红景天药材适量，加60％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，加2倍量水，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05，加乙醇使乙醇含量为80％，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，滤液减压回收乙醇，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物。或将滤液减压回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，用等量正丁醇提取4次，合并提取液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，得提 取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为7.0～7.8％，其中红景天苷的含量不低于3％，总酚的含量不低于30％。 

工艺五：取红景天药材适量，加水提取3次，第一次加10倍量，回流2小时，第二次加10倍量，回流2小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05。分成两份，一份滤液减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液用等量正丁醇提取3次，合并提取液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物1；另一份加乙醇使含醇量达85％，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，沉淀物低温干燥，即得提取物2。将提取物1和提取物2合并即得总提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为7.0～8.0％，其中红景天苷的含量不低于3％，总酚和多糖的含量不低于50％。 

工艺六：取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液用等量正丁醇提取3次，合并提取液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物1；药渣加10倍量水提取3次，每次2小时，合并滤液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.05，加乙醇至含醇量达85％，静置24小时以上，过滤，沉淀物洗涤，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物2。合并提取物1和提取物2即得总提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为7.5～8.0％，其中红景天苷的含量不低于3.5％，总酚和多糖的含量不低于50％。 

工艺七：取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.05，上聚酰胺柱，先用水洗脱，再用80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.05，真空干燥或喷雾干燥，得提取物1；水洗脱液减压浓缩至相对密度为1.05，加乙醇至含醇量达90％，静置24小时以上，过滤，沉淀物洗涤，真空干燥或喷雾干燥，得提取物2。合并提取物1和提取物2，即得总提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为7.0～7.5％，其中红景天苷的含量不低于3％，总酚和多糖的含量不低于50％。 

工艺八：取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。合并提取液，过滤，滤液回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液加2倍量水，搅匀，冷藏24小时以上，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液用等量正丁醇提取3次，合并提取液，减压回收， 真空干燥或喷雾干燥，即得提取物1；水液加乙醇使含醇量达85％，搅匀，静置24小时以上，过滤，沉淀物洗涤，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物2。合并提取物1和提取物2即得总提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为7.0～8.0％，其中红景天苷的含量不低于3.5％，总酚和多糖的含量不低于50％。 

工艺九：取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.05，加2倍量水，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05。用等量正丁醇提取4次，合并提取液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为7.0～7.5％，其中红景天苷的含量不低于4％，总酚的含量不低于50％。 

工艺十：取红景天药材适量，加水提取3次，第一次加10倍量，回流2小时，第二次加10倍量，回流2小时，第三次加8倍量，回流1小时。提取液滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05。加乙醇使含醇量达85％，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，沉淀物低温干燥，即得。 

通过本工艺提取的红景天提取物的得率为5.0～6.0％，其中红景天苷的含量不低于3.5％，多糖的含量不低于50％。 

本发明药物组合物可以扩张冠状动脉，缓解血管痉挛，增加冠脉流量，改善冠脉循环，降低冠状动脉阻力；降低心肌耗氧量和耗氧指数，拮抗心率失常；可以抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液流变学和微循环；改善心脏供血功能，降低脑血管阻力，增加脑血管流量，改善脑微循环。主要用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞、缺血性脑血管疾病，以及中风及中风后遗症等。 

本发明药物组合物可与药学上可接受的辅料制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型，优选注射剂或口服制剂；可以肠胃外或口服给药等方式施用于需要这种治疗的患者。 

用于肠胃外给药时，可制成注射剂。注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，可用于肌内注射、静脉注射、静脉滴注等；其规格有1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供静脉滴注用的大体积(一般不小于100ml)注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的 供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，可用适宜的注射用溶剂配制后注射，也可用静脉输液配制后静脉滴注；无菌粉末用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。 

用于口服时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂，依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂，包括滴丸、糖丸、小丸等。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂，可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。口服混悬剂系指难溶性固体药物，分散在液体介质中，制成供口服的混悬液体制剂，也包括干混悬剂或浓混悬液。糖浆剂系指含有药物的浓蔗糖水溶液。 

制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，可选用水性溶剂或非水性溶剂。最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9％氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射剂时，可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、填充剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸-醋酸钠、乳酸、枸橼酸-枸橼酸钠、碳酸氢钠-碳酸钠等；常用的增溶剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充剂包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂为苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射剂常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。 

制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。常用填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；常用粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；常用崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维 素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；常用润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。 

本发明药物组合物的优点在于： 

(1)提供了一种新的用于制备治疗心脑血管疾病的药物组合物，满足临床需要； 

(2)对本发明药物组合物中药物组份的用量进行了大量的筛选实验研究，得出具有显著疗效的重量配比范围； 

(3)本发明通过药理药效实验研究表明，以红花与红景天，或以红花黄色素和红景天提取物为原料制成的药物，可以抗心肌梗塞，抗血小板聚集，抗血栓，对兔脑缺血再灌注损伤有保护作用，改善麻醉犬的血流动力学，对急性缺血性缺氧所致的小鼠脑循环障碍有保护，本发明实验研究结果证明，红花与红景天合并用药呈协同作用，药效明显增强，所达效果，是本领域普通技术人员所意想不到的； 

(4)本发明药物组合物中，红花黄色素结构明确、疗效确切，红景天提取物中有效成分含量确切，以红花黄色素和红景天提取物直接投料，制备工艺简便，避免了由于原药材质量差异造成的制剂质量差异较大的缺点，制剂质量有很大的提高，杂质含量大大减少，安全性更高。 

以下通过实验例来进一步阐述本发明的药物组合物的有益效果，这些实验例包括本发明药物组合物的药理研究、药效学实验、稳定性实验。本发明的药物组合物具有下列有益效果，但不应将此理解为本发明的药物组合物仅具有下列有益效果。 

实验例1本发明药物组合物对大鼠实验性心肌梗塞范围的影响

受试动物：Wistar大鼠，体重208～230g，130只，随机分为13组。 

供试品：红花黄色素，自制，含红花黄色素75.2％； 

红景天提取物，自制，其中红景天苷的含量为12.3％，总酚的含量为61.3％； 

红花黄色素注射液，自制； 

红景天提取物注射液，自制； 

组合物注射液组(红花黄色素+红景天提取物的不同配比)，自制。 

实验方法：将大鼠随机分为13组：生理盐水对照组；红花黄色素注射液组；红景天提取物注射液组；组合物注射液组：红花黄色素+红景天提取物(50mg+3mg、50mg+10mg、50mg+15mg、50mg+20mg、50mg+30mg、50mg+45mg、50mg+60mg、50mg+75mg、50mg+100mg、50mg+200mg)；各药物均以生理盐水稀释至所需浓度，尾静脉注射给药。 

大鼠实验性心肌梗死模型：动物戊巴比妥腹腔注射麻醉(45mg/kg)仰位固定。气管插管，在胸骨左侧作2cm的纵切口，近胸骨侧剪断第3、第4肋软骨，打开胸腔后，连接人工呼吸机(通气量2ml/100g，50次/min)。剪开心包膜，暴露心脏，冠状动脉左前降支根部穿线以备结扎，记录标准II导联心电图，稳定10分钟，结扎冠状动脉左前降支，关闭胸腔。用针筒吸出动物喉部分泌物，使动物恢复自主呼吸。结扎冠状动脉15min后，静脉给药。结扎冠状动脉4小时后，摘取心脏，在结扎线以下横切5片，进行氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)染色，计算心肌梗死区面积占心室及心脏面积的百分比，并进行统计学处理(t检验)。结果见表1。 

表1本发明药物组合物对大鼠实验性心肌梗塞范围的影响(x±s) 

注：与生理盐水组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与红花黄色素注射液组相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01；与红景天注射液组相比，^Δp＜0.05，^ΔΔp＜0.01。 

实验结果：由上表数据可知 

1)与生理盐水组比较，红花黄色素注射液组和红景天提取物注射液组均能显著降低大鼠心肌梗死面积(p＜0.05)，组合物注射液不同配比组均能极显著降低大鼠心肌梗死面积(p＜0.01)。 

2)与红花黄色素注射液组比较，组合物注射液不同配比组均能显著降低大鼠心肌梗死面积(p＜0.05、p＜0.01)。 

3)与红景天提取物注射液组比较，组合物注射液不同配比组均能显著降低大鼠心肌梗死面积(p＜0.05、p＜0.01)。 

结论：各给药组都具有明显的抗心肌缺血作用(p＜0.05、p＜0.01)，其中红花黄色素与红景天提取物配伍的组合物注射液的疗效优于单用红花黄色素或红景天提取物，红花黄色素+红景天提取物在(50mg+3mg)～(50mg+200mg)范围内效果均显著，提示两药配伍有协同 增效作用。 

实验例2本发明药物组合物的抗血小板聚集作用

受试动物：Wistar大鼠，体重201～225g，80只，随机分为8组。 

供试品：红花黄色素，自制，含红花黄色素75.2％； 

红景天提取物，自制，其中红景天苷的含量为12.3％，总酚的含量为61.3％； 

红花黄色素注射液，自制； 

红景天提取物注射液，自制； 

组合物注射液(不同配比)，5组，自制。 

实验方法：将大鼠随机分为8组，每组10只，分别为生理盐水对照组、红花黄色素注射液组、红景天提取物注射液组、组合物注射液不同配比组(50mg+15mg、50mg+20mg、50mg+30mg、50mg+45mg、50mg+60mg)。各组动物腹腔注射给药，每日一次，连续给药7天，末次给药后1小时，动物麻醉后自腹主动脉取血，抗凝剂采用3.28％枸橼酸钠，与血液以1∶9比例混合。将抗凝全血在20℃条件下1500r·min^-1离心5min获得富血小板血浆(PPR)。留取定量PPR后，将剩余PPR再次以3000r·min^-1离心10min，获得自身对照贫富血小板血浆(PPP)。以PPP调节PPR浓度，使各PPR浓度相同。将PPR在37℃的恒温孔中预热后，加入ADP(终浓度为3μmol.L^-1)引起血小板聚集，记录最大聚集率。结果见表2。 

表2抗血小板聚集作用(X±SD) 

注：与生理盐水对照组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与红花黄色素注射液组相比，^#p＜0.05，；与红景天注射液组相比，^Δp＜0.05。 

实验结果：由上表实验数据可知 

1)与生理盐水对照组比较，红花黄色素注射液组、红景天提取物注射液组血小板最大聚集率均显著降低(p＜0.05)，组合物注射液不同配比组的血小板最大聚集率均极显著降低(p＜0.01)。 

2)与红花黄色素注射液组比较，组合物注射液不同配比组的血小板最大聚集率均显著降 低(p＜0.05)。 

3)与红景天提取物注射液组比较，组合物注射液不同配比组的血小板最大聚集率均显著降低(p＜0.05)。 

结论：与生理盐水对照组比较，红花黄色素注射液组、红景天提取物注射液组和组合物注射液组均能显著降低大鼠的血小板最大聚集率，表明红花黄色素注射液、红景天提取物注射液和组合物注射液均有抗血栓作用，其中组合物注射液疗效优于单用红花黄色素注射液和单用红景天提取物注射液，提示两药配伍有协同增效作用；其中以组合物注射液(红花黄色素+红景天提取物＝50mg+30mg)组，疗效最为显著。 

实验例3本发明药物组合物对大鼠颈动脉内血栓形成的影响

受试动物：Wistar大鼠，雌雄兼用，体重207～227g，80只，随机分为8组。 

供试品：红花黄色素，自制，含红花黄色素75.2％； 

红景天提取物，自制，其中红景天苷的含量为12.3％，总酚的含量为61.3％； 

红花黄色素注射液，自制； 

红景天提取物注射液，自制； 

组合物注射液(红花黄色素+红景天提取物的不同配比)，5组，自制。 

实验方法：将大鼠随机分为8组，每组10只，分别为生理盐水对照组、红花黄色素注射液组、红景天提取物注射液组、组合物注射液不同配比组(红花黄色素+红景天提取物的不同配比：50mg+15mg、50mg+20mg、50mg+30mg、50mg+45mg、50mg+60mg)。尾静脉注射给药。空白对照组给予等容积生理盐水，给药20分钟后开始试验。动物用2.5％戊巴比妥钠(25mg/kg)腹腔注射麻醉，将大鼠仰卧位固定，分离右侧颈总动脉，采用电流损伤颈动脉内膜法，用BT87-3实验性体内血栓形成仪测定不同组别动物颈动脉血栓形成时间。将电极置放在颈动脉上对其进行电刺激(2mA，7min)，以感应电极连续测量动脉远端表面温度，观察动脉温度突降时间。记录电刺激开始至主动脉温度突降的时间，该时间定为颈动脉血栓形成时间(超过3000秒者以3000秒计)。实验结果见表3。 

实验结果：由上表实验数据可知： 

1)与生理盐水对照组比较，红花黄色素注射液组、红景天提取物注射液组大鼠颈动脉血栓形成时间均显著降低(p＜0.05)，组合物注射液不同配比组大鼠颈动脉血栓形成时间均极显著降低(p＜0.01)。 

2)与红花黄色素注射液组比较，组合物注射液不同配比组大鼠颈动脉血栓形成时间均显著降低(p＜0.05)。 

3)与红景天提取物注射液组比较，组合物注射液不同配比组大鼠颈动脉血栓形成时间均显著降低(p＜0.05)。 

表3不同配比的本发明药物组合物对大鼠颈动脉内血栓形成的影响 

注：与生理盐水对照组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与红花黄色素注射液组相比，^#p＜0.05，；与红景天注射液组相比，^Δp＜0.05。 

结论：红景天提取物注射液、红花黄色素注射液和组合物注射液组均可使大鼠颈动脉内血栓形成的时间延长，且组合物注射液组的疗效优于单用红花黄色素注射液组和单用红景天提取物注射液组，提示两者有协同作用。其中以组合物注射液(红花黄色素+红景天提取物50mg+30mg)组，疗效最为显著。 

实验例4本发明药物组合物对兔脑缺血再灌注损伤的保护作用

受试动物：家兔，78只，体重2.2～2.7kg，随机分为13组，每组6只。 

供试品：红花黄色素，自制，含红花黄色素75.2％； 

红景天提取物，自制，其中红景天苷的含量为12.3％，总酚的含量为61.3％； 

红花黄色素注射液，自制； 

红景天提取物注射液，自制； 

组合物注射液，本实验采用实施例6处方1制得的本发明药物组合物注射液。 

实验方法：将兔随机分为：缺血再灌注组(I/R组)、组合物注射液治疗组、红花黄色素治疗组、红景天提取物注射液治疗组和假手术对照组(SOC组)。(1)缺血再灌注组(I/R组)：18只，用25％的氨基甲酸乙脂溶液1g/kg体重耳缘静脉麻醉，颈部正中切口分离气管***气管套管，暴露两侧颈总动脉，以动脉夹两侧夹闭20min，造成脑缺血，松夹分别再灌注1h、6h和12h，三个时间点各6只。分别在松夹10min后，耳缘静脉推注生理盐水5ml/kg体重。(2)组合物注射液治疗组：18只，手术方法同I/R组，三个时间点各6只，分别在松夹10min后，耳缘静脉推注组合物注射液10mg/kg。(3)红花黄色素注射液治疗组：18只，手术方法同I/R组， 三个时间点各6只，分别在松夹10min后，耳缘静脉推注红花黄色素注射液20mg/kg。(4)红景天提取物注射液治疗组：18只，手术方法同I/R组，三个时间点各6只，分别在松夹10min后，耳缘静脉推注红景天提取物注射液20mg/kg。(5)假手术对照组(SOC组)：6只，动物仅行麻醉和动脉分离术而不夹闭，1h后处死。上述各组实验结束后即断头，在冰浴中剥出大脑，冰盘上解剖出双侧海马区组织，用锡纸包裹放在4℃冰箱中储存，备用。应用pH酸度计检测海马组织PLA₂的活性；采用干湿重法、TTC染色法测定皮层脑组织含水量、梗死面积；光镜下观察脑组织病理变化。 

实验结果：(1)对海马组织PLA₂活性的影响：I/R组再灌注1h、6h和12h后，海马组织PLA₂活性较SOC明显增高(p＜0.01)，且随灌注时间延长，PLA₂活性呈递减趋势，但各时间点间比较差异不显著(p＞0.05)；组合物注射液治疗组(1h、6h、12h)PLA₂活性明显降低，与SOC组和I/R各相应时间点比较具有显著性差异(p＜0.01)，且随再灌时间延长，PLA₂活性逐渐向正常水平恢复；红景天提取物注射液治疗组和红花黄色素注射液治疗组(1h、6h、12h)PLA₂活性降低，与SOC组和I/R各相应时间点比较具有明显差异(p＜0.05)，红景天提取物注射液的作用低于红花黄色素注射液。 

(2)对皮层组织含水量(％)和梗死面积(％)的影响：I/R组各时间点脑含水量均增高；组合物注射液治疗组各时间点脑水含量与I/R组相比明显减轻(p＜0.01)，脑梗死面积与I/R组相比明显缩小(p＜0.01)；红景天提取物注射液治疗组和红花黄色素注射液治疗组各时间点脑水含量与I/R组相比均减轻(p＜0.01)，脑梗死面积与I/R组相比均缩小(p＜0.05，p＜0.01)。 

(3)脑组织病理改变：SOC组无梗死灶，神经元结构形态正常，无间质水肿；I/R组有梗死灶，梗死灶周神经元肿胀，细胞轮廓不清，间质水肿明显；组合物注射液治疗组、红景天提取物注射液治疗组、红花黄色素注射液治疗组梗死灶面积均缩小，梗死灶周神经元肿胀不明显，间质水肿明显减轻；组合物注射液治疗组作用更明显。 

结论：上述实验结果表明，组合物注射液、红景天提取物注射液、红花黄色素注射液均可通过降低PLA₂活性，改善脑循环，减轻脑缺血再灌注损伤，而发挥脑保护作用。组合物注射液在各项指标中均高于红景天提取物注射液和红花黄色素注射液单独用药的效果，提示两药具有协同增效作用。 

实验例5本发明组合物对麻醉开胸犬血流动力学的影响

受试动物：杂种犬，20只，体重11.2～13.5kg。 

供试品：红花黄色素，自制，含红花黄色素75.2％； 

红景天提取物，自制，其中红景天苷的含量为12.3％，总酚的含量为61.3％； 

红花黄色素注射液，自制； 

红景天提取物注射液，自制； 

组合物注射液，本实验采用实施例6处方1制得的本发明药物组合物注射液。 

实验方法：将犬随机分为4组，每组5只，分别为生理盐水对照组、红花黄色素注射液组、红景天提取物注射液组、组合物注射液组。犬用戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉后，采取右侧卧位正压人工呼吸下，于左4～5胁间开胸，于距迷走神经2cm处打开心包，壁层做悬床将其缝合于胸壁，使心脏充分暴露。分离主动脉，在主动脉根部套入电磁流量计探头(10～12mm)，测量心输出量(CO)；在冠状动脉左前降支根部，分离心外膜，分离出约1cm冠状动脉，套入电磁流量计探头(2～3mm)，测量冠脉流量(CBF)；将此二探头连于LMTC-621型电磁流量计上，分离一侧颈动脉，插管，连接压力换能器，记录动脉血压(AP)及平均动脉压(MAP)；将内径为1.5mm的心导管从心尖***左心室，通过YZ-1型压力换能器经载波放大左室内压(LVP)，LVP电讯号经直流放大器放大10倍，记录左室舒张末期压(LVEDP)，以LVP电讯号再经BMI型微分器微分记录左室内压变化速率(dp/dt_max)，用针型电极***受试动物四肢皮下，记录标II导联心电图(EGG-II)，以测量心率(HR)。上述指标变化均同步记录于RM-6300生理多导仪。 

分离股动脉抽动脉血，经颈外动脉插管至冠状静脉窦抽取静脉血，根据CY-2测氧仪使用说明书，用新鲜配制的无氧溶液(0.01M)硼砂溶液加入无水亚硫酸钠结晶配制成2％的亚硫酸钠溶液调零，用与空气平衡温度恒定的蒸馏水作灵敏度调节。待仪器稳定后用测氧仪测定血氧含量。试验结束后计算心肌耗氧量。 

手术结束后，观察上述各项指标，稳定后将记录值作为给药前的指标，静脉给药后于1、3、5、10、20、30min，采集上述各项指标，并以给药后各时间点的各项指标变化率(％)，与对照组各对应时间点的各项指标变化率(％)做组间显著性成对资料的t-test处理。 

实验结果及结论：组合物注射液、红花黄色素注射液、红景天提取物注射液对受试犬心率(HR)，平均动脉压(MBP)、左室内压(LVP)及心室肌收缩力(dp/dt_max)、心肌耗氧量均有降低作用。尤其是组合物注射液，降低幅度均明显大于红花黄色素注射液组和红景天提取物注射液组，心肌耗氧量于给药后2分钟左右开始降低，最大值为25.9％，作用时间达30分钟以上，与对照组比较有非常显著的疗效(p＜0.01)。 

试验例6本发明药物组合物对结扎双侧颈总动脉小鼠存活率的影响

受试动物：Wistar大鼠，体重208～230g，雌雄各半，120只，随机分为12组。 

供试品：红花黄色素，自制，红花黄色素的含量为72.86％； 

红景天提取物，自制，其中红景天苷的含量为3.75％，多糖的含量为55.22％； 

组合物(红花+红景天)不同配比，9组，自制。 

实验方法：将大鼠随机分为12组，每组10只，分别为生理盐水对照组、红景天提取物组、红花黄色素组、组合物不同配比组。各给药组药物在给药前均用蒸馏水稀释成适宜的浓度。 

各组大鼠均灌胃给药一周，每天一次，对照组灌胃给药同体积生理盐水，末次给药后20min用乌拉坦1.3g/kg腹腔注射麻醉，分离双侧颈总动脉，结扎后记录存活时间。实验结果见表4。 

表4药物对结扎小鼠双侧颈总动脉的影响(X±S) 

注：：与生理盐水组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与红花黄色素组相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01；与红景天提取物组相比，^△p＜0.05。 

实验结果：由上表实验结果可知 

1)与生理盐水对照组相比，红花黄色素组和红景天提取物组均能显著延长大鼠存活时间(p＜0.05)，各配比组合物组均能极显著延长大鼠存活时间(p＜0.01)。 

2)与红花黄色素组相比，各配比组合物注射液组均能显著延长大鼠存活时间(p＜0.05、p＜0.01)。 

3)与红景天提取物组相比，各配比组合物组均能显著延长大鼠存活时间(p＜0.05)。 

结论：由上述实验结果可知，各给药组灌胃给药均可显著延长双侧颈总动脉结扎小鼠的存活时间(p＜0.05、p＜0.01)，与单用红花黄色素和红景天提取物相比，各组合物组大鼠的存活时间更长。提示，红花黄色素和红景天联合应用，协同增效，对急性缺血性缺氧所致的小鼠脑循环障碍有保护作用。且红花∶红景天＝2500∶1000时，效果最好。 

实验例7：本发明药物组合物注射液稳定性试验

供试品：组合物注射液，本实验采用实施例6处方1制得的组合物注射液。 

考察项目：性状、pH值、澄明度、有关物质、标示含量；并在加速实验6个月和长期实验期末增加无菌和热原检查。 

1、影响因素实验 

强光照射实验：取供试品，置照度为4500Lx的光照箱内放置10天。 

高温实验：取供试品，分别置于40℃、60℃条件下放置10天。 

低温实验：取供试品，在4℃冰箱中放置10天。 

上述实验，分别于第5、10天取样测定。比较性状后测试各项指标，并将结果与0天比较。 

结果：光照4500Lx条件下放置10天，除有关物质略有升高外，其它各项指标均无明显变化。高温60℃条件下放置10天，外观变为淡黄色澄明液体，标示含量下降，有关物质略有升高。高温40℃、低温4℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。 

2、加速实验 

方法：置温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月。在实验期间分别于第1个月、2个月、3个月、6个月末取样，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在6个月末增加无菌和热原检查。 

结果：温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月，除有关物质略有增加，标示含量略有下降外，其它各项指标均无明显变化，加速实验6个月末，热原、无菌检查均符合规定。 

3、长期实验 

方法：置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月。分别于第3个月、6个月、9个月、12个月、18个月，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在18个月末增加无菌和热原检查。 

结果：温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月，各项指标均无明显变化，长期实验18个月末，热原、无菌检查均符合规定。 

结论：由上述考察结果得出结论，各项实验中，本发明药物组合物注射液比较稳定。 

[具体实施方式]

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的内容

实施例1红花黄色素的制备一

取红花，于70℃温度用pH为3的酸水温浸提取2至4次，每次均为50倍量的酸水，每次1.5小时。合并提取液，滤过，收集滤液，放冷，调pH值至中性，减压浓缩至相对密度1.05～1.10，加乙醇至醇浓度为70％，冷藏(10℃以下)放置24小时，滤过，滤液加于已处理好的大孔吸附树脂HPD100柱色谱(药材与树脂比例为1∶10(W/V))，先用去离子水以1～2.5ml/cm²/min的流速洗脱两个柱床体积，然后用60％的乙醇以1～2.5ml/cm²/min的流速洗脱五个柱床体积，收集60％醇洗脱部分，减压浓缩至密度为1.10左右，然后在70℃左右减压真空干燥或减压旋转蒸发后冷冻干燥，即得红花黄色素。 

红花黄色素的鉴别 

以红花黄色素为对照品，鉴别红花黄色素。 

分别精密称定羟基红花黄色素A和红花黄色素1.0mg至1ml的量瓶中，用水溶解并定容至刻度。分别吸取上述两种溶液，点于薄层硅胶GF254板，以丙酮∶甲醇∶水(10∶2.5∶1.5)为展开剂，在紫外灯下254nm处观察可看到相应荧光斑点。 

含量测定 

红花黄色素标准曲线的制备：精密称定羟基红花黄色素A 10mg，置于100ml量瓶中，加水溶解定容至刻度，摇匀。分别精密量取上述溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置于25ml量瓶中，加水稀释定容至刻度，摇匀。采用紫外分光光度法，在403nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 

供试品溶液的制备：取红花提取物适量，加水适量超声使溶解配制成20μg/ml的溶液，滤过，取滤液采用紫外分光光度法，在403nm波长处测定吸光度。从标准曲线上读出供试品溶液中红花黄色素的含量，计算，即得。 

通过以上工艺提取三批红花提取物，其得率和含量见表5，表明，通过本工艺提取的红花提取物的得率为1.5～3％，其中红花黄色素的含量不低于70％。 

表5红花提取物的得率和红花黄色素的含量 

实施例2红花黄色素的制备二

取红花250kg加水煎煮1.5小时，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.14，将浓缩液中加入乙醇至含醇量80％，并不断搅拌，在4℃沉淀24小时，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.18加入8倍的水，在4℃沉淀24小时，离心除去沉淀，离心液减压浓缩至提取液含生药1g/ml，将浓缩液经大孔吸附树脂柱层析，先用去离子水洗脱至Molish反应和茚三酮反应呈阴性，继续用6个柱体积的去离子水洗脱并收集洗脱液，浓缩至提取液含生药1g/ml，上聚酰胺柱，先用去离子水洗脱至无色，再用70～90％乙醇洗脱8个柱体积，收集洗脱液，减压回收乙醇，冷冻干燥或喷雾干燥，得到桔黄色无定形粉末，即红花黄色素。 

含量测定 

红花黄色素标准曲线的制备：精密称定羟基红花黄色素A10mg，置于100ml量瓶中，加水溶解定容至刻度，摇匀。分别精密量取上述溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置于25ml量瓶中，加水稀释定容至刻度，摇匀。采用紫外分光光度法，在403nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 

供试品溶液的制备：取红花提取物适量，加水适量超声使溶解配制成20μg/ml的溶液，滤过，取滤液采用紫外分光光度法，在403nm波长处测定吸光度。从标准曲线上读出供试品溶液中红花黄色素的含量，计算，即得。 

通过以上工艺提取三批红花提取物，其得率和含量见表6，表明，通过本工艺提取的红花提取物的得率为1.5～3％，其中红花黄色素的含量不低于70％。 

表6红花提取物的得率和红花黄色素的含量 

实施例3红景天总酚的制备

取红景天药材200kg，粉碎成粗粉，用70％乙醇提取三次每次1小时，第一次加醇10倍量，第二三次分别为8、8倍量。滤过，合并提取液，回收乙醇至每5ml含1g生药材，用2倍量石油醚脱脂后，弃去石油醚液，再用水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥，即得红景天粗提取物。 

将红景天粗提取物10.05kg用适量水溶解后，加于已事先处理好的大孔树脂柱上，依次用水液、10％乙醇、15％乙醇、20％乙醇、30％乙醇洗脱，洗脱速度为10ml/min。减压回收乙醇至相对密度为1.03～1.06(60℃)，喷雾干燥，得红景天精提取物。 

红景天苷的含量测定 

色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(15∶85)为流动相，检测波长为275nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于1500。 

对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。 

供试品溶液的制备精密称取本品0.1g，研匀，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，摇匀，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。 

总酚的含量测定： 

对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品适量，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含没食子酸0.05mg的溶液，即得。 

标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置25ml棕色量瓶中，各加磷钼钨酸试液1ml，再分别加水11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29％碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)，在760nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 

供试品溶液的制备精密称取本品25mg，置25ml量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，使样品完全溶解，精密吸取2ml置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 

测定法精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg)，计算，即得。 

表7通过上述工艺制得的红景天提取物的得率及红景天苷和总酚的含量 

上述所得第一批红景天精提物标记为红景天提取物A。 

实施例4红景天(总酚+多糖)的制备

取红景天药材适量，加70％乙醇提取3次，第一次加10倍量，回流1小时，第二次加8倍量，回流1小时，第三次加8倍量，回流1小时。合并提取液，过滤，滤液回收乙醇，并 减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液加2倍量水，搅匀，冷藏24小时以上，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.05，浓缩液用等量正丁醇提取3次，合并提取液，减压回收，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物1；水液加乙醇使含醇量达85％，搅匀，静置24小时以上，过滤，沉淀物洗涤，真空干燥或喷雾干燥，即得提取物2。合并提取物1和提取物2即得总提取物。 

红景天苷的含量测定 

色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(15∶85)为流动相，检测波长为275nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于1500。 

对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。 

供试品溶液的制备精密吸取上述各样品液各20ml，水浴上蒸干后，残渣加甲醇溶解，移至10ml量瓶，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。 

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。 

总酚的含量测定： 

对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品适量，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含没食子酸0.05mg的溶液，即得。 

标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置25ml棕色量瓶中，各加磷钼钨酸试液1ml，再分别加水11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29％碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)，在760nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 

供试品溶液的制备精密称取本品25mg，置25ml量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，使样品完全溶解，精密吸取2ml置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 

测定法精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg)，计算，即得。 

多糖的含量测定 

对照品溶液的制备精密称取于105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品约适量，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液，即得。 

标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为各对照品溶液。分别精密量取各对照品溶液2ml，置25ml纳氏比色 管中，加入2％苯酚水溶液1ml，摇匀，迅速加入硫酸5.0ml，摇匀，放置5分钟，置沸水浴中加热10分钟，取出迅速冷却至室温，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA)测定，在488±2nm波长处分别测定吸光度，以测定的吸光度为纵坐标(y)，对照品的浓度(μg/ml)为横坐标(x)，绘制标准曲线。 

供试品溶液的制备精密称取本品25mg，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密吸取5ml置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 

测定法精密量取供试品溶液2ml，置25ml纳氏比色管中，照标准曲线制备项下自“加入2％苯酚水溶液1ml”起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中糖类(以葡萄糖计)的量，计算，即得。 

通过以上工艺提取三批红景天提取物，其得率和含量见表8。 

表8红景天提取物的得率和提取物中红景天苷、总酚和多糖的含量 

上述所得第二批红景天提取物标记为红景天提取物B。 

实施例5红景天多糖的制备

取红景天药材适量，加水提取3次，第一次加10倍量，回流2小时，第二次加10倍量，回流2小时。提取液滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05。加乙醇使含醇量达85％，搅匀，冷藏24小时以上，滤过，沉淀物低温干燥，即得。 

含量测定方法见实施例4。 

通过以上工艺提取三批红景天提取物，其得率和含量见表9，表明，通过本工艺提取的红景天提取物的得率为5.0～6.0％，其中红景天苷的含量不低于3.5％，多糖的含量不低于50％。 

表9红景天提取物的得率和提取物中红景天苷、多糖的含量 

上述所得第二批红景天提取物标记为红景天提取物C。 

实施例6本发明药物组合物水针剂的制备

处方1： 

红花黄色素           50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚           29.8g(相当于原药材1000g) 

注射用水             加至5000ml 

共制备               1000支 

处方2： 

红花黄色素           50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天(总酚+多糖)    73.1g(相当于原药材1000g) 

注射用水             加至5000ml 

共制备               1000支 

处方3： 

红花黄色素           50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天多糖           5.51g(相当于原药材1000g) 

注射用水             加至5000ml 

共制备               1000支 

制法： 

提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；取配液量80％的注射用水，加入红花黄色素和红景天提取物，加热搅拌溶解完全；补加注射用水至全量；加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；经0.45um的微孔滤膜精滤；检查溶液的澄明度，半成品化验；将溶液熔封于玻璃安瓿中；100℃通蒸汽灭菌30分钟；趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏；灯检，成品全检，包装入库。 

实施例7本发明药物组合物粉针剂的制备

处方1： 

红花黄色素              50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚              29.8g(相当于原药材1000g) 

甘露醇                  300g 

无菌注射用水            加至5000ml 

共制备                  1000支 

处方2： 

红花黄色素              49.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚              29.8g(相当于原药材1000g) 

甘露醇                  300g 

无菌注射用水            加至5000ml 

共制备                  1000支 

处方3： 

红花黄色素        49.5g(相当于原药材2500g) 

红景天(总酚+多    73.1g(相当于原药材1000g) 

糖) 

甘露醇            300g 

无菌注射用水      加至5000ml 

共制备            1000支 

处方4： 

红花黄色素        49.5g(相当于原药材2500g) 

红景天多糖        5.51g(相当于原药材1000g) 

甘露醇            300g 

无菌注射用水      加至5000ml 

共制备            1000支 

制法： 

先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理；按照处方量称取原辅料；取配液量80％的无菌注射用水，将红花黄色素和红景天提取物加入加热搅拌溶解完全。再加入甘露醇加热搅拌溶解完全，补加无菌注射用水至全量；加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；经0.22um的微孔滤膜精滤；检查溶液的澄明度，半成品化验；分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时；冻干结束，压塞，轧盖；成品全检，包装入库。 

实施例8本发明药物组合物氯化钠注射液的制备

处方1： 

红花黄色素          20.1g(相当于原药材1000g) 

红景天总酚          45.2g(相当于原药材1500g) 

氯化钠              900g 

注射用水            加至100000ml 

共制备              1000瓶 

处方2： 

红花黄色素          20.1g(相当于原药材1000g) 

红景天(总酚+多糖)   109.7g(相当于原药材1500g) 

氯化钠              900g 

注射用水            加至100000ml 

共制备              1000瓶 

处方3： 

红花黄色素        20.1g(相当于原药材1000g) 

红景天多糖        82.7g(相当于原药材1500g) 

氯化钠            900g 

注射用水          加至100000ml 

共制备            1000瓶 

制法： 

提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；取配液量20％的注射用水将红花黄色素和红景天提取物加入加热搅拌溶解完全。将氯化钠用配液量40％的注射用水溶解完全；合并两溶液，补加注射用水至全量；加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；经0.45um的微孔滤膜精滤；检查溶液的澄明度，半成品化验；灌装于100ml的输液瓶中；115℃热压灭菌30分钟；灯检，成品全检，包装入库。 

实施例9本发明药物组合物葡萄糖注射液的制备

处方1： 

红花黄色素            50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚            29.8g(相当于原药材1000g) 

葡萄糖                5000g 

注射用水              加至100000ml 

共制备                1000瓶 

处方2： 

红花黄色素            29.7g(相当于原药材1500g) 

红景天总酚            45.2g(相当于原药材1500g) 

葡萄糖                5000g 

注射用水              加至100000ml 

共制备                1000瓶 

处方3： 

红花黄色素            29.7g(相当于原药材1500g) 

红景天(总酚+多糖)     109.7g(相当于原药材1500g) 

葡萄糖                5000g 

注射用水              加至100000ml 

共制备                1000瓶 

处方4： 

红花黄色素            29.7g(相当于原药材1500g) 

红景天多糖            82.7g(相当于原药材1500g) 

葡萄糖                5000g 

注射用水              加至100000ml 

共制备                1000瓶 

制法： 

提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗，取配液量20％的注射用水将红花黄色素和红景天提取物加入加热搅拌溶解完全。将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全；合并两溶液，补加注射用水至全量；加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；经0.45um的微孔滤膜精滤；检查溶液的澄明度，半成品化验；灌装于100ml的输液瓶中；115℃热压灭菌30分钟；灯检，成品全检，包装入库。 

实施例10本发明药物组合物片剂的制备

处方1： 

红花黄色素        50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚        29.8g(相当于原药材1000g) 

淀粉              150g 

微晶纤维素        40g 

2％HPMC水溶液     适量 

硬脂酸镁          2g 

羧甲淀粉钠        4g 

共制备            1000片 

处方2： 

红花黄色素        59.4g(相当于原药材3000g) 

红景天总酚        24.1g(相当于原药材800g) 

淀粉              150g 

微晶纤维素        40g 

2％HPMC水溶液     适量 

硬脂酸镁          2g 

羧甲淀粉钠        4g 

共制备            1000片 

处方3： 

红花黄色素            59.4g(相当于原药材3000g) 

红景天(总酚+多糖)     58.5g(相当于原药材800g) 

淀粉                  150g 

微晶纤维素            40g 

2％HPMC水溶液         适量 

硬脂酸镁              2g 

羧甲淀粉钠            4g 

共制备                1000片 

处方4： 

红花黄色素           59.4g(相当于原药材3000g) 

红景天多糖           44.1g(相当于原药材800g) 

淀粉                 150g 

微晶纤维素           40g 

2％HPMC水溶液        适量 

硬脂酸镁             2g 

羧甲淀粉钠           4g 

共制备               1000片 

制法： 

将红花黄色素和红景天提取物粉碎过100目筛备用；按照处方量称取各种辅料；将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；将红花黄色素、红景天提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；过20目筛制颗粒；颗粒在60℃的条件下烘干；干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀；取样，半成品化验；按照化验确定的片重压片；成品全检，包装入库。 

实施例11本发明药物组合物胶囊剂的制备

处方1： 

红花黄色素        50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚        29.8g(相当于原药材1000g) 

淀粉              30g 

微晶纤维素        2g 

2％HPMC水溶液     适量 

硬脂酸镁          1g 

共制备            1000粒 

处方2： 

红花黄色素           99.0g(相当于原药材5000g) 

红景天总酚           15.1g(相当于原药材500g) 

淀粉                 30g 

微晶纤维素           2g 

2％HPMC水溶液        适量 

硬脂酸镁             1g 

共制备               1000粒 

处方3： 

红花黄色素           99.0g(相当于原药材5000g) 

红景天(总酚+多糖)    36.6g(相当于原药材500g) 

淀粉                 30g 

微晶纤维素           2g 

2％HPMC水溶液        适量 

硬脂酸镁             1g 

共制备               1000粒 

处方4： 

红花黄色素            99.0g(相当于原药材5000g) 

红景天多糖            27.6g(相当于原药材500g) 

淀粉                  30g 

微晶纤维素            2g 

2％HPMC水溶液         适量 

硬脂酸镁              1g 

共制备                1000粒 

制法： 

将红花黄色素和红景天提取物粉碎过100目筛备用；按照处方量称取辅料；将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；将红景天提取物、红花黄色素、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；过20目筛制颗粒；颗粒在60℃的条件下烘干；干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀；取样，半成品化验；按照化验确定的装量装入胶囊；成品全检，包装入库。 

实施例12本发明药物组合物颗粒剂的制备

处方1： 

红花黄色素              50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚              29.8g(相当于原药材1000g) 

糖粉                    900g 

2％HPMC50％乙醇溶液    适量 

共制备                 1000包 

处方2： 

红花黄色素             100.5g(相当于原药材5000g) 

红景天(总酚+多糖)      58.5g(相当于原药材800g) 

糖粉                   900g 

2％HPMC50％乙醇溶液    适量 

共制备                 1000包 

处方3： 

红花黄色素             50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天多糖             55.1g(相当于原药材1000g) 

糖粉                   900g 

2％HPMC50％乙醇溶液    适量 

共制备                 1000包 

制法： 

将蔗糖粉碎过100目筛备用；将红花黄色素和红景天提取物粉碎过100目筛备用；按照处方量称取辅料；将红花黄色素、红景天提取物与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；过20目筛制颗粒；颗粒在60℃的条件下烘干；干颗粒过18目筛整粒；取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量；包装，成品全检，包装入库。 

实施例13本发明药物组合物口服液的制备

处方1： 

红花黄色素            50.5g(相当于原药材2500g) 

红景天总酚            29.8g(相当于原药材1000g) 

苯甲酸钠              15g 

甜菊甙                10g 

水                    加至10000ml 

共制备                1000支 

处方2： 

红花黄色素            40.2g(相当于原药材2000g) 

红景天多糖            55.1g(相当于原药材1000g) 

苯甲酸钠              15g 

甜菊甙                10g 

水                    加至10000ml 

共制备                1000支 

处方3： 

红花黄色素            49.5g(相当于原药材2500g) 

红景天(总酚+多糖)     109.7g(相当于原药材1500g) 

苯甲酸钠              15g 

甜菊甙                10g 

水                    加至10000ml 

共制备                1000支 

制法： 

将红花黄色素和红景天提取物用配液量60％的水溶解完全；将苯甲酸钠和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全；合并上述两个溶液，补加水至全量；过0.8um的微孔滤膜过滤；半成品化验；灌装。成品全检，包装入库。 

Claims (9)

1.一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于，制成该药物组合物所含药效成分原料药的组成及重量份数为：红花500-10000份、红景天250-3000份，所述的红花和红景天经过提取加工得到其提取物，其中的红花提取物中红花黄色素的含量不低于75.2％，红景天提取物中红景天苷的含量不低于12.3％，总酚和/或多糖的含量不低于61.3％。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其原料药的组成及重量份数为：红花1000-5000份、红景天500-1500份。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，其原料药的组成及重量份数为：红花2500份、红景天1000份。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，制成该药物组合物所含药效成分的原料药的组成及重量份数为：红花黄色素50份、红景天提取物1～500份。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，其原料药的组成及重量份数为：红花黄色素50份，红景天提取物3～200份。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，其原料药的组成及重量份数为：红花黄色素50份、红景天提取物15～60份。

7.根据权利要求4～6所述的任一药物组合物，其特征在于，其中的红花黄色素的含量不低于75.2％；其中的红景天提取物中红景天苷的含量不低于12.3％，总酚和/或多糖的含量不低于61.3％。

8.根据权利要求1～3、4～6所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制成注射剂或口服制剂。