CN1935178A - 银杏叶提取物与淫羊藿提取物的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了一种新的药物组合物及其制备方法和应用，包括银杏叶提取物与淫羊藿提取物，其重量配比范围为1∶0.16～100。以银杏叶提取物和淫羊藿提取物直接投料，制备工艺简便，可制成各种临床上或药学上可接受的剂型，优选为注射剂或口服制剂。两药协同作用，共同发挥抑制血小板凝集及抗血栓形成、改善血流动力学、增加冠脉和脑血流量等药理作用，主要用于制备治疗心脑血管疾病的药物。

Description

银杏叶提取物与淫羊藿提取物的组合物

1、技术领域

本发明涉及一种新的药物组合物，及其在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用，以及含有该药物组合物的制剂，属于医药技术领域。

2、背景技术

医学上，心脑血管疾病是指心脏和动脉血管发生硬化而引起的心脏缺血或出血的疾病，包括冠心病、心绞痛、高血压、心律失常、心肌梗塞、脑梗死等。心脑血管疾病一直号称威胁人类健康的头号杀手，高血压、高血脂、冠心病、糖尿病已成为“时代的瘟疫”。近年来，心脑血管疾病发病率呈逐年上升的趋势，特别是其发病和死亡的年龄日益呈年轻化趋势，如何有效防治也就引起人们的高度重视。

银杏叶为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶。银杏叶入药始于明代，近10余年来，银杏叶制剂的医用价值已引起国内外的广泛关注，并对其活性成分及临床应用进行了深入研究。银杏叶提取物(Extract of Ginkgo bilola leaves)是一种作用广泛、不良反应较少的天然药物，其有效成分主要为黄酮类和萜类，不仅具有扩张冠脉血管和脑血管、增加血流量、改善心脑功能的作用，还有增强记忆、降低血小板的功效。大量的研究成果表明，银杏叶提取物具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、降血脂、增强中枢神经***功能、调节神经递质和激素水平、改善血液流变学状态、抗炎、抗过敏等作用。

银杏叶提取物已有国家标准，见中国药典2000年版2002年增补本第6页，或中国药典2005年版一部第281页。标准规定，本品按干燥品计，含总黄酮醇苷，不得少于24.0％；含萜类内酯以白果内酯(C₁₅H₁₈O₈)、银杏内酯A(C₂₀H₂₄O₉)、银杏内酯B(C₂₀H₂₄O₁₀)和银杏内酯C(C₂₀H₂₄O₁₁)的总量计，不得少于6.0％；本品含总银杏酸不得过百万分之十；制剂为银杏叶片。国内上市的还有舒血宁注射液，可以扩张血管、改善微循环，用于缺血性心脑血管疾病，冠心病、心绞痛，脑栓塞，脑血管痉挛等。

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxin.)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatumMaxin.)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxin.)、巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)或朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai.)的干燥地上部分。淫羊藿入药始于《神农本草经》，近年来，为综合利用淫羊藿属药用植物资源，开展了广泛的研究。淫羊藿提取物的主要有效成分为淫羊藿总黄酮，主要含有淫羊藿苷和淫羊藿次苷等。药理研究发现，淫羊藿总黄酮是淫羊藿促进免疫功能，增强心血管活动等功能的有效成分。淫羊藿苷具有增加冠脉血流量、增加脑血流量等作用；可用于冠心病、更年期高血压，胸闷气短等。

目前，利用银杏叶提取物与淫羊藿提取物的相互作用，配伍组方，制备治疗心脑血管疾病等的药物，尚未见报道。

3、发明内容

为了满足临床需要，更好的治疗心脑血管疾病，提高人民的健康水平，本发明提供了新的药物组合物，及其在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用，以及含有该组合物的制剂。

本发明药物组合物包括银杏叶提取物、淫羊藿提取物。经过发明人大量的筛选实验，证明本发明药物组合物中银杏叶提取物与淫羊藿提取物的重量配比在1∶0.16～100时有协同增效的作用，例如可以是1∶0.16、1∶0.2、1∶0.25、1∶0.3、1∶0.4、1∶0.5、1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8、1∶0.9、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10、1∶12、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40、1∶45、1∶50、1∶55、1∶60、1∶70、1∶80、1∶90、1∶100，优选为1∶0.8～30，进一步优选为1∶2～10。

上述药物组合物中，银杏叶提取物含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％、总银杏酸不超过百万分之十，最好为含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％、总银杏酸不超过百万分之一；淫羊藿提取物含淫羊藿总黄酮不低于20％、淫羊藿苷不低于1％，最好为含淫羊藿总黄酮不低于50％、淫羊藿苷不低于3％。

本发明药物组合物中，银杏叶提取物的优选制备工艺如下：

优选工艺一：取银杏叶，粉碎，加入60％的丙酮水溶液，57～59℃剧烈搅拌30min，滤过，重复上述步骤，再提取一遍，合并滤液，滤液减压浓缩至含固体物约30％～40％(此时丙酮的含量约5％)。加水稀释至原体积的2倍，搅拌下冷却至约12℃，保温1小时，离心，弃去沉淀，上清液按30％加入硫酸铵，搅匀，使全溶，用丁酮-丙酮混合溶液(6∶4)萃取2次，每次为水溶液的0.5倍量，丁酮-丙酮混合溶液减压浓缩至含固体物50％～70％，加入水使含固体物约10％，用1/2体积的水饱和正丁醇萃取3次，正丁醇液减压浓缩至含固体物至少50％以上，然后加入适量水再继续浓缩，在所得浓缩液中加入水及乙醇，使固体物含量达10％，醇浓度达30％，加入正己烷萃取3次，每次1/3量的，水相浓缩，并减压干燥(60～80℃)，即得。通过上述工艺制备的银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量不低于24.0％，萜类内酯的含量不低于6.0％。

优选工艺二：取银杏叶，粉碎，先用12倍量60％乙醇溶液加热回流二次，每次3小时，滤过，合并乙醇提取液，浓缩成稠膏，用热水溶解成每1ml相当于0.5g原药材的溶液，静置冷却，滤过，滤液上大孔树脂(DA201)柱，分别用18％、30％、及50％浓度的乙醇洗脱，18％、30％乙醇脱液浓缩至无醇味，上聚酰胺柱，以95％乙醇洗脱，将大孔树脂的50％乙醇洗脱液与聚酰胺柱的洗脱液合并，浓缩至无乙醇味，以环己烷萃取，弃去环己烷萃取液，浓缩液喷雾干燥，即得。通过上述工艺制备的银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量不低于24.0％，萜类内酯的含量不低于6.0％。

优选工艺三：取银杏叶，粉碎，加70％乙醇60℃温浸提取两次，每次加醇15倍量，搅拌下温浸2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至相对密度为1.03～1.09(50℃)，加入4倍量的水，搅匀，1～4℃冷藏过夜，滤过，滤液上柱，分别用3～4倍量体积水、15％乙醇、70乙醇洗涤，收集70％乙醇液，减压浓缩，真空干燥，浸膏加5倍量乙醇提取二次，每次15分钟，合并滤液，减压浓缩，真空干燥，浸膏加8倍量水，加热至沸腾，微沸5分钟，放置室温，1～4℃冷藏过夜，滤过，滤液加25％粗提物的聚酰胺，搅拌5分钟，滤过，减压浓缩，真空干燥，即得。通过上述工艺制备的银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量不低于24.0％，萜类内酯的含量不低于6.0％。

上述药物组合物中，银杏叶提取物可以通过上述工艺制备，也可以市购或市购后精制，还可以通过其它工艺制备。

本发明药物组合物中，淫羊藿提取物的优选制备工艺如下：

优选工艺一：取淫羊藿，切成小片，加水煎煮二次，每次1.5小时，每次加水10倍量。合并煎液，冷藏放置过夜，滤过，滤液浓缩至相对密度1.08～1.10的浓缩液，加于已处理好的聚酰胺树脂柱上，先用3～4倍柱体积的水冲洗，再用2～3倍柱体积的20％乙醇冲洗，弃去洗涤液，再用4～5倍柱体积的95％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥，即得。通过本工艺制备的淫羊藿提取物得率为1～3％，其中淫羊藿总黄酮含量不低于80％，淫羊藿苷含量不低于15％。

优选工艺二：取淫羊藿药材，粉碎成中粉，加70％～80％乙醇12倍量，浸泡12小时，滤过，滤液备用；药渣加70％～80％乙醇加热提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至适量，上已处理好的聚酰胺柱，先用蒸馏水15L洗脱，再用15％～30％乙醇3L洗脱，最后用70％～80％乙醇20L洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，真空干燥，即得。通过本工艺制备的淫羊藿提取物得率为1～3％，其中淫羊藿总黄酮含量不低于50％，淫羊藿苷含量不低于3％。

优选工艺三：取淫羊藿药材，粉碎成中粉，加70％～80％乙醇乙醇12倍量，浸泡12小时，滤过，滤液备用；药渣加70％～80％乙醇加热提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至适量，上已处理好的D101大孔树脂柱，过柱反复吸附5次后，先用蒸馏水4L洗脱，再用15％～30％乙醇3L洗脱，最后用70％～80％乙醇15L洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，真空干燥，即得。通过本工艺制备的淫羊藿提取物得率为1～3％，其中淫羊藿总黄酮含量不低于50％，淫羊藿苷含量不低于4％。

上述药物组合物中，淫羊藿提取物还可以通过下列工艺制备，但不应将此理解为上述药物组合物中淫羊藿提取物仅限于通过上述或下列工艺制备。

工艺一：取淫羊藿，切成小片，加80％乙醇提取三次，每次1小时，每次加醇10倍量，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加乙酸乙酯振摇提取至乙酸乙酯层无色，无水硫酸钠脱水，减压浓缩，喷雾干燥，即得。通过本工艺制备的淫羊藿提取物得率为1～3％，中淫羊藿总黄酮含量不低于40％，淫羊藿苷含量不低于2％。

工艺二：取淫羊藿，切成小片，加70％乙醇提取三次，每次30分钟，每次加醇8倍量，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，喷雾干燥，粉碎，即得。通过本工艺制备的淫羊藿提取物得率为2～4％，淫羊藿总黄酮含量不低于30％，淫羊藿苷含量不低于5％。

工艺三：取淫羊藿，切成小片，加饱和石灰水煎煮二次，每次1小时，每次加石灰水10倍量，合并提取液，浓缩至相对密度1.00～1.05，加盐酸调pH值达7，加乙醇至醇含量达80％，充分搅拌，静置，滤取上清液，回收乙醇至无醇味，喷雾干燥，即得。通过本工艺制备的淫羊藿提取物得率为2～4％，其中淫羊藿总黄酮含量不低于20％，淫羊藿苷含量不低于1％。

本发明药物组合物，药物组分的重量配比是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分在上述重量配比范围内都具有较好疗效。上述重量配比对于特殊病人，可以相应调整组成的比例。

本发明还提供了上述药物组合物在制备治疗心脑血管疾病药物中的应用。上述药物组合物，具有拮抗血小板活化因子(PAF)、抑制血小板凝集及抗血栓形成、改善血流动力学、增加冠脉流量、增加脑血流量、改善心肌供血功能、提高心肌耐缺氧能力、促进造血***功能、清除体内过多的自由基、调节机体免疫功能等多种药理作用；可用于制备治疗急慢性脑机能不全及其后遗症、脑栓塞、脑血管痉挛、冠心病、心绞痛、胸闷、耳部或眼部血流及神经障碍、末梢循环障碍、高血压、高血脂等疾病的药物。

药理实验表明，本发明药物组合物具有协同增效作用，可以显著抑制二磷酸腺苷引起的大鼠血小板凝集，对心肌缺血再灌注大鼠有显著保护作用，对脑缺血再灌注家兔有显著保护作用，可显著改善小鼠耳廓微循环，显著降低大鼠的血压，显著降低饮食性高血脂大鼠的血清胆固醇和甘油三酯水平，显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间，对大鼠脑缺血再灌注损伤具有显著保护作用，可显著抑制胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠血栓的形成、降低死亡数。

本发明组合物可与药学上可接受的辅料制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型，优选注射剂或口服制剂；可以肠胃外或口服给药等方式施用于需要这种治疗的患者。

用于肠胃外给药时，可制成注射剂。注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，可用于肌内注射、静脉注射、静脉滴注等；其规格有1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供静脉滴注用的大体积(一般不小于100ml)注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，可用适宜的注射用溶剂配制后注射，也可用静脉输液配制后静脉滴注；无菌粉末用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。

制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，可选用水性溶剂或非水性溶剂。最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9％氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射剂时，可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、填充剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸-醋酸钠、乳酸、枸橼酸-枸橼酸钠、碳酸氢钠-碳酸钠等；常用的增溶剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充剂包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂为苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射剂常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。

用于口服时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂，依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂，包括滴丸、糖丸、小丸等。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂，可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。口服混悬剂系指难溶性固体药物，分散在液体介质中，制成供口服的混悬液体制剂，也包括干混悬剂或浓混悬液。糖浆剂系指含有药物的浓蔗糖水溶液。

制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。常用填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；常用粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；常用崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；常用润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。

综上所述，本发明药物组合物具有下列优点：

(1)首次提供了银杏叶提取物和淫羊藿提取物用于制备治疗心脑血管疾病的药物组合物，并通过药理实验证实二者有协同增效的作用，优于二者单独用药。

(2)对本发明药物组合物中药物组份的用量进行了大量摸索研究，通过研究本发明药物组合物对二磷酸腺苷引起的大鼠血小板凝集作用的影响和对大鼠实验性颈动脉血栓形成时间的影响，筛选出具有显著疗效的重量配比范围。

(3)药理药效研究表明，本发明药物组合物具有协同增效作用，可以显著抑制二磷酸腺苷引起的大鼠血小板凝集，对心肌缺血再灌注大鼠有显著保护作用，对脑缺血再灌注家兔有显著保护作用，可显著改善小鼠耳廓微循环，显著降低大鼠的血压，显著降低饮食性高血脂大鼠的血清胆固醇和甘油三酯水平，显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间，对大鼠脑缺血再灌注损伤具有显著保护作用，可显著抑制胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠血栓的形成、降低死亡数。在治疗心脑血管疾病方面有显著效果，是本领域普通技术人员所意想不到的。

(4)本发明药物组合物中，银杏叶提取物和淫羊藿提取物中有效成分明确，含量确切，以提取物直接投料，制备工艺简便，避免了由于原药材质量差异造成的制剂质量差异较大的缺点，制剂质量有很大的提高，杂质含量大大减少，安全性更高。

(5)本发明药物组合物的有效成分明确、含量高，制剂稳定性好，便于控制产品质量，可以保证临床用药安全。

(6)对银杏叶提取物和淫羊藿提取物的质量进行控制，规定银杏叶提取物含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％、总银杏酸不超过百万分之十，最好为含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％、总银杏酸不超过百万分之一；淫羊藿提取物含淫羊藿总黄酮不低于20％、淫羊藿苷不低于1％，最好为含淫羊藿总黄酮不低于50％、淫羊藿苷不低于3％。并提供了多个优选的银杏叶提取物和淫羊藿提取物制备工艺，简便易行，且质量较好，适应于工业化大生产。

以下通过实验例来进一步阐述本发明的药物组合物的有益效果，这些实验例包括本发明的新药物组合物的药效学实验、稳定性实验。本发明的药物组合物具有下列有益效果，但不应将此理解为本发明的药物组合物仅具有下列有益效果。

实验例1～6中所用的银杏叶提取物为市购精制所得，所用的淫羊藿提取物为实施例2制备所得；实验例7～9中所用的银杏叶提取物均为实施例1制备所得，所用的淫羊藿提取物为实施例3制备所得。以下实验例中用YHY代替银杏叶提取物和淫羊藿提取物的药物组合物。

实验例1  本发明药物组合物对大鼠血小板凝集作用的影响

受试动物  雄性大鼠，240只，体重200～220g，随机分为12组，每组20只。

供试品  银杏叶提取物：含银杏叶黄酮醇苷24.8％、萜类内酯6.3％、总银杏酸1ppm；

        淫羊藿提取物：自制，含淫羊藿总黄酮82.42％，淫羊藿苷21.34％(见实施例2)；

        YHY各配比注射液：自制，配比见表1-1，制备方法参见实施例5；

        注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒培博士药厂；

        淫羊藿提取物注射液：自制，5ml:200mg，含淫羊藿总黄酮160mg、淫羊藿苷40mg；

        氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

供试液的配制上述供试品分别用氯化钠注射液配成10mg/ml的供试液。

给药剂量见表1-1。

实验方法  各组动物按表1-1腹腔注射给药，对照组给与氯化钠注射液，每日1次，连续给药7天，末次给药后1小时，动物麻醉后自腹主动脉取血，抗凝剂采用3.28％枸橼酸钠，与血液以1∶9混合。将抗凝全血在20℃条件下1500rpm离心5min获得富血小板血浆(PPR)。留取定量PPR后，将剩余PPR再次以3000rpm离心10min，获得自身对照贫血小板血浆(PPP)。以PPP调节PPR浓度，使各PPR浓度相同。将PPR在37℃的恒温孔中预热后，加入二磷酸腺苷(ADP，终浓度为3μmol·L^-1)引起血小板聚集，记录最大聚集率。

表1-1本发明药物组合物对大鼠血小板凝集作用的影响(

，n＝20)

组别	组成	配比	给药剂量	最大聚集率
					对照组注射用银杏叶提取物组淫羊藿提取物注射液组银杏叶提取物+淫羊藿提取物注射液组	---10mg+40mg10mg+200mg10mg+1000mg50mg+40mg50mg+200mg50mg+1000mg250mg+40mg250mg+200mg250mg+1000mg	---1∶41∶201∶1001∶0.81∶41∶201∶0.161∶0.81∶4	3ml/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg	89.21±17.7368.32±12.26*71.04±13.46*59.13±13.25**63.42±12.87**66.73±14.21**64.02±12.29**59.01±11.37**63.71±13.17**67.01±13.21**64.15±12.32**59.58±11.94**

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与对照组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表1-1。与对照组相比较，银杏叶提取物与淫羊藿提取物合并用药各个配比(1∶0.16～100)均极显著的抑制血小板凝集(p＜0.01)，注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液均显著抑制血小板凝集(p＜0.05)。银杏叶提取物与淫羊藿提取物合并用药各个配比组(1∶0.16～100)的效果均优于注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液单独给药组，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物具有协同增效作用；银杏叶提取物与淫羊藿提取物的重量配比在1∶0.8～20范围内效果更优。本发明药物组合物在抑制血小板凝集方面有显著疗效。

实验例2  本发明药物组合物对结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血的影响

受试动物  大鼠，60只，体重200～220g，雌雄兼用，随机分为6组，每组10只。

供试品  YHY注射液1：自制，5ml:250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg；

        YHY注射液2：自制，5ml:90mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物40mg；

        YHY注射液3：自制，5ml:210mg，含银杏叶提取物10mg、淫羊藿提取物200mg；

        注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒培博士药厂；

        淫羊藿提取物注射液：自制，5ml:200mg，含淫羊藿总黄酮160mg、淫羊藿苷40mg；

        氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

供试液的配制上述供试品分别用氯化钠注射液配成10mg/ml的供试液

给药剂量  见表1-2。

实验方法大鼠用乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉，背位固定，记录心电，接人工呼吸机进行人工呼吸，打开胸腔，剪开心包，各组动物按各自药物静脉注射给药30mg/kg，3min后结扎左侧冠状动脉前降枝，全程记录心电30min，结扎后1h取血，检测磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)。取出大鼠心脏，沿结扎线将心室肌均匀横切4片，0.5％氯化硝基四氮唑兰染色，用求积仪测每片心肌两面的缺血面积，计算心肌缺血面积占心室面积的百分比。

表1-2本发明药物组合物对结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血的影响(

，n＝10)

组别	给药剂量	CK(u/L)	LDH(u/L)	心肌缺血百分比
					心肌缺血对照组注射用银杏叶提取物组淫羊藿提取物注射液组YHY注射液1组YHY注射液2组YHY注射液3组	3ml/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg	4051.21±975.643075.76±787.21**3120.52±776.42**2774.35±687.95**2843.76±742.23**2885.78±715.45**	2217.13±577.441785.24±558.20**1876.32±735.46**1385.25±463.75**1434.43±623.91**1476.99±657.26**	40.37±3.2424.22±4.01*25.63±4.11*17.53±5.79**20.09±4.53**21.42±5.79**

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与心肌缺血对照组相比较。

实验结果及结论实验结果见表1-2。结扎后，心肌缺血对照组大鼠心电的QRS波均突然异常增高、加宽，心肌大范围缺血，生化检测表现为CK和LDH均异常增高。与对照组相比较，各个配比的本发明药物组合物注射液均能极显著减小因结扎冠状动脉所致的心电和生化指标的异常改变(p＜0.01)，极显著减小心肌缺血范围(p＜0.01)；注射用银杏叶提取物和淫羊藿提取物注射液均能极显著减小因结扎冠状动脉所致的心电和生化指标的异常改变(p＜0.01)，显著减小心肌缺血范围(p＜0.05)。各个配比的本发明药物组合物注射液(1∶4、1∶0.8、1∶20)的效果均优于注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液单独给药的效果，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物具有协同增效作用，在治疗缺血性心血管疾病方面将有显著的疗效。

实验例3本发明药物组合物对家兔脑缺血再灌注损伤的保护作用

受试动物家兔，114只，雌雄兼用，体重2.2～2.5kg，随机分为：缺血再灌注组(18只)、注射用YHY治疗组(每一配比18只，共3个配比)、注射用银杏叶提取物治疗组(18只)、淫羊藿提取物注射液治疗组(18只)和假手术对照组(6只)。

供试品  注射用YHY1：自制，250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg；

        注射用YHY2：自制，90mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物40mg；

        注射用YHY3：自制，210mg，含银杏叶提取物10mg、淫羊藿提取物200mg；

        注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒培博士药厂；

        淫羊藿提取物注射液：自制，5ml:200mg，含淫羊藿总黄酮160mg、淫羊藿苷40mg；

        氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

供试液的配制  上述供试品分别用氯化钠注射液配成10mg/ml的供试液。

给药剂量  缺血再灌注组给予氯化钠注射液1.5ml/kg，各给药组分别给与相应药物15mg/kg。

实验方法  (1)缺血再灌注组：18只，用25％的氨基甲酸乙脂溶液1g/kg耳缘静脉麻醉，颈部正中切口分离气管***气管套管，暴露两侧颈总动脉，夹闭两侧动脉20min，造成脑缺血，分别再灌注1h、6h和12h，3个时间点各6只。松夹10min后，耳缘静脉推注生理盐水1.5ml/kg。(2)YHY注射液治疗组：每一配比的YHY注射液为一大组，共3大组，每大组18只，手术方法同缺血再灌注组，3个时间点各6只。松夹10min后，耳缘静脉推注YHY注射液15mg/kg。(3)注射用银杏叶提取物治疗组：18只，手术方法同缺血再灌注组，3个时间点各6只。松夹10min后，耳缘静脉推注注射用银杏叶提取物供试液15mg/kg。(4)淫羊藿提取物注射液治疗组：18只，手术方法同缺血再灌注组，3个时间点各6只。松夹10min后，耳缘静脉推注淫羊藿提取物注射液15mg/kg。(5)假手术对照组：6只，仅行麻醉和动脉分离术而不夹闭，1h后处死。上述各组实验结束后即断头，在冰浴中剥出大脑，冰盘上解剖出双侧海马区组织，用锡纸包裹放在4℃冰箱中储存，备测磷脂酶A₂(PLA₂)；切取皮层组织测脑梗死面积、脑含水量，选取大脑中动脉供血区的额顶区组织标本进行病理学观察。

实验结果及结论  (1)对海马组织PLA₂活性的影响：缺血再灌注组再灌注1h、6h和12h后，PLA₂活性较假手术对照组极显著增高(p＜0.01)，且随灌注时间延长，PLA₂活性呈递减趋势，但各时间点间比较差异不显著(p＞0.05)；各个配比的本发明药物组合物粉针治疗组再灌注1h、6h和12h后，PLA₂活性显著降低，与缺血再灌注组各相应时间点比较具有极显著差异(p＜0.01)，且随再灌时间延长，PLA₂活性逐渐恢复正常水平；注射用银杏叶提取物治疗组和淫羊藿提取物注射液治疗组再灌注1h、6h和12h后，PLA₂活性显著降低，与缺血再灌注组各相应时间点比较具有显著差异(p＜0.05)。

(2)对皮层组织含水量(％)和梗死面积(％)的影响：与假手术对照组相比较，缺血再灌注组各时间点脑含水量均增高；与缺血再灌注组相比较，各个配比的本发明药物组合物粉针治疗组各时间点脑水含量极显著减轻(p＜0.001)，脑梗死面积极显著缩小(p＜0.01)；与缺血再灌注组相比较，注射用银杏叶提取物治疗组和淫羊藿提取物注射液治疗组各时间点脑水含量显著降低(p＜0.01，脑梗死面积显著缩小(p＜0.01，p＜0.05)。

(3)脑组织病理改变：假手术对照组无梗死灶，神经元结构形态正常，无间质水肿；缺血再灌注组有梗死灶，梗死灶周神经元肿胀，细胞轮廓不清，间质水肿明显；各个配比的本发明药物组合物粉针治疗组、注射用银杏叶提取物治疗组、淫羊藿提取物注射液治疗组梗死灶面积均缩小，梗死灶周神经元肿胀不明显，间质水肿明显减轻。本发明药物组合物粉针治疗组的作用较注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液治疗组更显著。

上述实验结果表明，脑缺血再灌注后，本发明药物组合物粉针、注射用银杏叶提取物、淫羊藿提取物注射液均可降低海马组织PLA₂活性，改善脑缺血所致内环境紊乱，减轻脑水肿，减小脑梗死面积；说明本发明药物组合物、银杏叶提取物、淫羊藿提取物均具有清除自由基，快速切断自由基连锁反应，抑制脂质过氧化，减轻迟发性脑损伤等脑组织保护作用。各个配比的本发明药物组合物粉针(1∶4、1∶0.8、1∶20)在各项指标中药效均优于注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液单独用药的效果，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物具有协同增效作用，在治疗缺血性脑血管疾病方面将有显著疗效。

实验例4  本发明药物组合物对小鼠耳廓微循环的影响

受试动物  雄性小鼠，60只，体重25～28g，随机分为6组，每组10只。

供试品  YHY注射液1：自制，5ml:250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg；

        YHY注射液2：自制，5ml:90mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物40mg；

        YHY注射液3：自制，5ml:210mg，含银杏叶提取物10mg、淫羊藿提取物200mg；

        注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒培博士药厂；

        淫羊藿提取物注射液：自制，5ml:200mg，含淫羊藿总黄酮160mg、淫羊藿苷40mg；

        氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

供试液的配制  上述供试品分别用氯化钠注射液配成10mg/ml的供试液。

给药剂量  见表1-3。

实验方法  小鼠灌胃给药后，用乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉。麻醉后的小鼠置于铺有棉花的托板上，保持室温20±2℃。将小鼠右耳置于耳托架上，在右耳上滴少许液体石蜡，将托板置于显微镜载物台上，调节冷光源，使照明光线与耳廓平面成45°～60°夹角，并与毛的生长方向相平行。先在低倍镜下观察耳廓全貌，选择适当部位，换用高倍镜进行定点连续观察。观察给药后20min的微循环状态，测量微动脉、微静脉的直径和血流速度。

表1-3  本发明药物组合物对小鼠耳廓微循环的影响( ，n＝10)

组别	给药剂量	直径(μm)		血流速度(μm/s)
					微动脉	微静脉
		对照组(氯化钠注射液)注射用银杏叶提取物组淫羊藿提取物注射液组YHY注射液1组YHY注射液2组YHY注射液3组	1.5ml/kg15mg/kg15mg/kg15mg/kg15mg/kg15mg/kg				7.23±0.548.17±0.92*8.09±0.74*10.92±0.45**10.57±0.63**10.20±0.65**	8.87±0.699.98±1.17*9.08±1.13*11.94±0.87**11.28±0.64**11.07±0.72**	107.8±5.8114.7±6.1*113.7±4.9*123.1±5.4**118.3±5.6**111.4±4.9**

^*p＜0.05；^**p＜0.01，与对照组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表1-3。与对照组相比较，各个配比的本发明药物组合物注射液(1∶4、1∶0.8、1∶20)给药组，小鼠耳微动脉、微静脉管径均极显著增大(p＜0.01)，血流速度极显著加快(p＜0.01)；注射用银杏叶提取物、淫羊藿提取物注射液给药组，小鼠耳微动脉、微静脉管径显著增大(p＜0.05)，血流速度显著加快(p＜0.05)，注射用银杏叶提取物效果优于淫羊藿提取物注射液给药组。各个配比的本发明药物组合物注射液(1∶4、1∶0.8、1∶20)的作用均强于注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液单独给药的效果，提示两药有协同增效作用，在改善微循环、治疗血流循环障碍方面将有显著疗效。

实验例5  本发明药物组合物对大鼠血压的影响

受试动物  健康雄性大鼠，60只，体重200～230g，随机分为6组，每组10只。

供试品  注射用YHY1：自制，250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg；

        注射用YHY2：自制，90mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物40mg；

        注射用YHY3：自制，210mg，含银杏叶提取物10mg、淫羊藿提取物200mg；

        注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒培博士药厂；

        淫羊藿提取物注射液：自制，5ml:200mg，含淫羊藿总黄酮160mg、淫羊藿苷40mg；

        氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

供试液的配制  上述供试品分别用氯化钠注射液配成1.0mg/ml的供试液。

给药剂量  见表1-4。

实验方法  各组大鼠均以2％戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射麻醉。分离气管，***气管套管；分离右颈总动脉，插管后经压力换能器连接GY-40四道生理记录仪记录收缩压(SAP)和舒张压(DAP)同时记录肢体II导联心电图。各给药组药物通过WZ-50G微量注射泵以每小时15ml/kg注入股静脉，对照组给予氯化钠注射液，观察给药前、给药1h和停药1h的外周血压变化。

表1-4  本发明药物组合物对大鼠血压的影响(

，n＝10)

组别	给药剂量(mg/kg)	血压/kPa	给药时间
						给药前	给药1h	给药后1h
			对照组注射用银杏叶提取物组淫羊藿提取物注射液组注射用YHY 1组注射用YHY 2组注射用YHY 3组	15ml/kg15mg/kg15mg/kg15mg/kg15mg/kg15mg/kg	SAPDAPSAPDAPSAPDAPSAPDAPSAPDAPSAPDAP				20.34±1.0413.27±0.7520.55±1.0214.22±0.8520.12±1.0613.74±0.6220.53±1.2114.13±0.7720.31±1.0514.21±0.6520.35±1.0713.86±1.03	20.33±1.0713.37±0.8616.11±1.1410.73±1.03*16.39±1.0111.73±1.15*15.01±1.0**9.62±1.02**15.44±0.97*9.25±1.11**15.61±1.21*9.23±1.04**	20.37±1.0213.55±0.7915.45±1.09*9.23±0.97**15.87±0.81*10.41±0.62*13.22±1.02**7.09±1.14**13.61±1.03**7.35±0.97**13.87±1.05**7.75±0.99**

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与对照组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表1-4。与对照组相比较，各个配比的本发明药物组合物粉针(1∶4、1∶0.8、1∶20)给药组给药1h时的收缩压均显著降低(p＜0.05)，舒张压均极显著降低(p＜0.01)；给药后1h时的收缩压和舒张压均显著极降低(p＜0.01)；注射用银杏叶提取物和淫羊藿提取物注射液给药组给药1h时的收缩压降低，但没有显著性差异，舒张压显著降低(p＜0.05)；给药后1h时的收缩压和舒张压均显著降低(p＜0.05，p＜0.01)。各个配比的本发明药物组合物粉针(1∶4、1∶0.8、1∶20)给药组的作用均优于注射用银杏叶提取物或淫羊藿提取物注射液单独给药组的效果，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物有协同增效作用，在抗高血压方面将有显著疗效。

实验例6  本发明药物组合物对大鼠实验性高血脂症的影响

受试动物  雄性大鼠，50只，体重220～240g，随机分为5组，每组10只。

供试品  YHY注射液1，5ml:250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg；

        氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

给药剂量  低剂量组10mg/kg、中剂量组20mg/kg、高剂量组30mg/kg。

实验方法  大鼠，测药前胆固醇及甘油三酯水平后，建高脂模型。除空白对照组给予普通饲料外，其余各组均给予高脂饲料(配方为普通饲料86.8％、胆固醇3％、猪油10％、丙硫氧嘧淀0.2％)，连续喂饲10天后，测血清胆固醇及甘油三酯水平，确定高脂模型建成。模型建成后继续饲高脂饲料，给药组分别按照各自的剂量灌胃给药YHY注射液1，分别每日灌胃给药1次，连续给药20天后，再取血测胆固醇及甘油三酯水平。

表1-5  本发明药物组合物对饮食性高血脂大鼠血清胆固醇的影响( ，n＝10)

组别	实验前	模型建立后	给药20天后
				空白对照组YHY注射液1低剂量组YHY注射液1中剂量组YHY注射液1高剂量组高脂模型组	1.85±0.151.82±0.241.86±0.211.87±0.141.85±0.24	1.89±0.227.65±1.547.86±1.557.93±1.547.78±1.72	1.93±0.214.01±1.62*3.17±1.76**2.65±1.29**7.76±1.74

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与高脂模型组相比较。

表1-6  本发明药物组合物对饮食性高血脂大鼠血清甘油三酯的影响(

，n＝10)

组别	实验前	模型建立后	给药20天后
				空白对照组YHY注射液1低剂量组YHY注射液1中剂量组YHY注射液1高剂量组高脂模型组	0.54±0.160.55±0.140.56±0.170.56±0.150.55±0.17	0.52±0.181.09±0.321.11±0.331.01±0.251.08±0.32	0.54±0.130.61±0.16*0.55±0.21*0.54±0.17*1.02±0.25

^*p＜0.05，与高脂模型组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表1-5和表1-6。与对照组相比较，高脂模型组大鼠血清胆固醇和甘油三酯均极显著升高(p＜0.001)，说明造模成功。与高脂模型组相比较，本发明药物组合物注射液低剂量组可显著降低饮食性高血脂大鼠的血清胆固醇和甘油三酯水平(p＜0.05)，中剂量组和高剂量组可极显著降低饮食性高血脂大鼠的血清胆固醇水平(p＜0.01)，显著降低甘油三酯水平(p＜0.05)。本发明药物组合物注射液各剂量组大鼠的血清胆固醇和甘油三酯降低幅度均大于注射用银杏叶提取物组或淫羊藿提取物注射液组，表明本发明药物组合物的降血脂功能更好，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物有协同增效作用，对于治疗高血脂症将有良好的疗效。

实验例7  本发明药物组合物对大鼠实验性颈动脉血栓形成的影响

受试动物  雄性大鼠，380只，体重220～250g，随机分为19组，每组20只。

供试品  银杏叶提取物：自制，含总黄酮醇苷24.4％，萜类内酯6.4％(见实施例1)；

        淫羊藿提取物：自制，含淫羊藿总黄酮55.22％，淫羊藿苷3.51％(见实施例3)；

        银杏叶提取物与淫羊藿提取物不同配比胶囊：自制，配比见表1-7，制备方法参见实施例9；

        银杏叶提取物胶囊：自制，制备方法参见实施例9；

        淫羊藿提取物胶囊：自制，制备方法参见实施例9；

        生理盐水：自制。

供试液的配制  上述供试品分别用生理盐水配成10mg/ml的供试液。

给药剂量  见表1-7。

实验方法  大鼠用2.5％戊巴比妥钠(25mg/kg)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，分离右侧颈总动脉，采用电流损伤颈动脉内膜法，用BT87-3实验性体内血栓形成仪测定不同组别动物颈动脉血栓形成时间。将刺激电极和温度探头挂于颈总动脉上，按表1-7所示灌胃给药，给药后10min开始刺激，刺激强度为2mA，刺激5min后关闭刺激开关，取下电极，3min后调节温控表至零位，观察动脉温度突降时间。记录电刺激开始至主动脉温度突降的时间，该时间定为颈动脉血栓形成时间(超过3000秒者以3000秒计)。

表1-7  本发明药物组合物对大鼠实验性颈动脉血栓形成时间的影响( ，n＝20)

组别	给药剂量	配比	血栓形成时间
				生理盐水对照组银杏叶提取物组淫羊藿提取物组银杏叶提取物：淫羊藿提取物组	5ml/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg50mg/kg	---1∶0.21∶0.41∶0.81∶11∶21∶41∶61∶81∶101∶151∶201∶301∶401∶601∶801∶100	954.6±287.71422.5±115.7**1235.6±124.5*1543.1±224.7**1659.8±246.4**1755.3±277.6**1783.7±307.8**1856.4±327.3**1867.3±314.6**1874.4±326.4**1872.3±316.9**1864.3±337.8**1792.4±335.7**1762.6±334.2**1697.4±284.3**1656.7±301.5**1629.4±262.4**1587.4±274.3**1539.8±242.7**

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与生理盐水对照组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表1-7。与生理盐水对照组相比较，银杏叶提取物与淫羊藿提取物重量配比为1∶0.2～100时，均显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间(p＜0.05，p＜0.01)；银杏叶提取物可极显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间(p＜0.05)，淫羊藿提取物可显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间(p＜0.05)。银杏叶提取物与淫羊藿提取物重量配比为1∶0.2～100时，对大鼠实验性颈动脉血栓形成的延迟作用均优于银杏叶提取物或淫羊藿提取物单独给药的效果，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物合并用药有协同增效作用；重量配比为1∶0.8～30时，效果更好；重量配比为1∶2～10时，效果最好。

实验例8  本发明药物组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

受试动物  大鼠，180只，雌雄兼用，体重220～250g，随机分为：假手术组、缺血再灌注组、本发明药物组合物各配比注射液组，银杏叶提取物注射液组、淫羊藿提取物注射液组，共9组，每组20只。

供试品  YHY注射液6：自制，5ml:150mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物100mg；

        YHY注射液7：自制，5ml；250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg；

        YHY注射液8：自制，5ml；350mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物300mg；

        YHY注射液9：自制，5ml:45mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物400mg；

        YHY注射液10：自制，5ml:550mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物500mg；

        银杏叶提取物注射液：5ml:50mg，自制，制备方法参见实施例5；

        淫羊藿提取物注射液：5ml:200mg，自制，制备方法参见实施例5；

       氯化钠注射液：250ml:2.25g，山东长富洁晶药业有限公司。

供试液的配制  上述供试品分别用氯化钠注射液配成10mg/ml的供试液。

给药剂量  见表1-8。

实验方法  大鼠用10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离、结扎右侧颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。分离右侧颈内动脉，沿颈内动脉向下分离翼颚动脉，根部结扎该分支。在颈内动脉近端备线、远端放置动脉夹，颈总动脉分叉处切口，***尼龙线(深度为17～20mm)，拴线进入颈内动脉，入颅至大脑前动脉，阻断大脑中动脉所有血流来源。撤掉动脉夹，扎紧备线，外留1cm长线头，缝合皮肤。缺血1h后腹腔注射给药，假手术组和缺血再灌注组给予氯化钠注射液，继续缺血1h后再灌注，勿需再次麻醉和切开皮肤，轻轻提拉所留线头至有阻力时提示尼龙线头端已至颈总动脉切口处，血流再通。假手术组除不插线外，其余步骤同上。存活鼠再灌注24h后，观察大鼠行为变化，进行行为评分。参考zeaLonga的5分制评分标准：0分，正常，无神经损伤症状；1分，不能完全伸展对侧前爪；2分，向外侧转圈；3分，向对侧倾倒；4分，不能自发行走，意识丧失。然后快速断头取鼠大脑。一部分(每组10只)分别称左右脑半球湿重，置160℃烤箱内24h后称干重，按以下公式计算脑组织含水量：脑组织含水量(％)＝(湿重-干重)/湿重×100％；一部分(每组10只)在前连合平面切下厚约2mm冠状脑片，立刻置于2％TIE溶液中，37℃孵育30min。梗塞区呈现白色，非梗塞区呈现红色。用求积仪(C63图像分析***)测出各区面积，并计算梗塞区占全脑的百分比(％)。

实验结果及结论  实验结果见表1-8。

(1)对行为的影响：假手术组大鼠均无异常症状，神经行为学评分为0。缺血再灌注组出现不能完全伸展对侧前爪或向外侧转圈或向对侧倾倒的神经损伤症状，行为评分为2.0±0.9。与缺血再灌注组相比较，本发明药物组合物各配比注射液治疗组的神经行为学评分均极显著降低，分别为0.7±0.4、0.6±0.3、0.6±0.4、0.6±0.3、0.7±0.4(p＜0.01)；银杏叶提取物注射液治疗组的神经行为学评分极显著降低，为0.9±0.5(p＜0.01)；淫羊藿提取物注射液治疗组的神经行为学评分显著降低，为1.2±0.6(p＜0.05)。

(2)对脑组织含水量的影响：与假手术组相比较，缺血再灌注组缺血再灌注侧(大脑右半球)的脑组织含水量极显著升高(p＜0.01)。与缺血再灌注组相比较，本发明药物组合物各配比注射液组的脑组织含水量极显著降低(p＜0.01)，银杏叶提取物注射液治疗组的脑组织含水量显著降低(p＜0.05)，淫羊藿提取物注射液治疗组的脑组织含水量显著降低(p＜0.05)。

(3)对梗死面积的影响：假手术组脑组织无梗塞。缺血再灌注组缺血侧脑组织有梗塞现象，梗塞体积占全脑的37.35％。与缺血再灌注相比较，本发明药物组合物各配比注射液组的缺血侧脑组织梗塞体积均极显著缩小(p＜0.01)；银杏叶提取物注射液治疗组的缺血侧脑组织梗塞体积显著缩小(p＜0.05)；淫羊藿提取物注射液治疗组的缺血侧脑组织梗塞体积缩小，但无显著性差异。

表1-8  本发明药物组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用( ，n＝20)

组别	给药剂量	神经病学行为评分	脑组织含水量(％)		脑梗塞体积(％)
						左半球	右半球
			假手术组缺血再灌注组银杏叶提取物注射液组淫羊藿提取物注射液组YNH注射液5组YNH注射液6组YNH注射液7组YNH注射液8组YNH注射液9组	3ml/kg3ml/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg30mg/kg				-2.0±0.90.9±0.5**1.2±0.6*0.7±0.5**0.6±0.3**0.6±0.4**0.6±0.3**0.7±0.4**	77.24±0.9677.31±0.8977.42±1.0177.32±1.0276.89±0.9277.25±1.0376.93±1.0077.27±1.0277.39±0.99	77.06±1.0587.32±1.24▲▲82.75±1.32*84.51±1.2376.62±1.14**75.47±1.16**75.52±1.21**75.57±1.17**76.59±1.26**	037.35±7.4222.76±5.83*30.43±7.2516.89±5.52**16.67±5.27**16.63±5.13**16.71±5.25**16.96±5.43**

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与缺血再灌注组相比较；^▲▲p＜0.01，与假手术组相比较。

上述实验结果表明，银杏叶提取物与淫羊藿提取物合并用药可显著改善局灶性脑缺血再灌注损伤的神经损伤症状，降低缺血再灌注损伤脑组织含水量，减轻缺血侧脑半球水肿程度缩小脑梗塞体积；银杏叶提取物与淫羊藿提取物重量配比在1∶2～10的范围内，对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用均优于银杏叶提取物或淫羊藿提取物单独用药的效果，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物合并用药具有协同增效作用，在治疗缺血性心脑血管疾病方面将有显著疗效。

实验例9  本发明药物组合物对小鼠体内血栓形成的影响

受试动物  雄性小鼠120只，体重25～30g，随机分为6组，每组20只。

供试品  本发明药物组合物颗粒2：自制，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物400mg；

        银杏叶提取物颗粒：自制，制备方法参见实施例12；

        淫羊藿提取物颗粒：自制，制备方法参见实施例12；

        生理盐水：自制。

供试液的配制  上述供试品分别用生理盐水配成10mg/ml的供试液。

给药剂量  见表1-9。

实验方法  灌胃给药1小时后，尾静脉注射胶原蛋白-肾上腺素混合血栓诱导剂每只0.1mg。注射后20min内记录小鼠偏瘫恢复数，并计算各给药组对小鼠脑血栓形成的保护率(死亡保护率＝对照组死亡数-给药组死亡数/对照组死亡数)。

表1-9  本发明药物组合物对小鼠体内血栓形成的影响( ，n＝20)

组别	给药剂量(mg/kg)	恢复数	死亡保护率
				生理盐水对照组银杏叶提取物颗粒组淫羊藿提取物颗粒组本发明药物组合物颗粒低剂量组本发明药物组合物颗粒中剂量组本发明药物组合物颗粒高剂量组	6ml/kg6060405060	096121417	0.000.450.300.600.700.85

实验结果及结论  实验结果见表1-9，本发明药物组合物、银杏叶提取物、淫羊藿提取物均对胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓死亡有保护作用。根据死亡保护率，本发明药物组合物各剂量对胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓死亡的保护作用均优于银杏叶提取物或淫羊藿提取物单独给药的效果，药效显著，提示银杏叶提取物与淫羊藿提取物合并用药具有协同增效作用。

实验例10  YHY注射液的稳定性实验

供试品  YHY注射液1：自制，5ml:250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg

        YHY注射液2：自制，5ml:90mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物40mg

        YHY注射液3：自制，5ml:210mg，含银杏叶提取物10mg、淫羊藿提取物200mg

        YHY注射液4：自制，5ml:255mg，含银杏叶提取物5mg、淫羊藿提取物250mg

        YHY注射液5：自制，5ml:210mg，含银杏叶提取物10mg、淫羊藿提取物200mg

        YHY注射液6：自制，5ml:150mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物100mg

        YHY注射液7：自制，5ml:250mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物200mg

        YHY注射液8：自制，5ml:350mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物300mg

        YHY注射液9：自制，5ml:450mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物400mg

        YHY注射液10：自制，5ml:550mg，含银杏叶提取物50mg、淫羊藿提取物500mg

考察项目：性状、pH值、澄明度、有关物质、标示含量，并在长期实验期末增加无菌和热原检查实验方法  置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置12个月。分别于第3个月、6个月、9个月、12个月，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在12个月末增加无菌和热原检查。

实验结果  温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置12个月，各项指标均无明显变化；12个月末，热原、无菌检查均符合规定。

结论  由上述考察结果得出，YHY注射液均比较稳定，可以长期放置，适应于放大生产。

4、具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的制备中的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。

实施例4～12中所用的银杏叶提取物1为市购精制所得，银杏叶提取物2为实施例1制备所得；所用的淫羊藿提取物1为实施例2制备所得，淫羊藿提取物2为实施例3制备所得。

实施例1  银杏叶提取物的制备及鉴别和含量测定

银杏叶提取物的制备

取银杏叶5kg，粉碎，加70％乙醇60℃温浸提取两次，每次加醇15倍量，搅拌下温浸2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至相对密度为1.03～1.09(50℃)，加入4倍量的水，搅匀，1～4℃冷藏过夜，滤过，滤液上柱，分别用3～4倍量体积水、15％乙醇、70乙醇洗涤，收集70％乙醇液，减压浓缩，真空干燥，浸膏加5倍量乙醇提取二次，每次15分钟，合并滤液，减压浓缩，真空干燥，浸膏加8倍量水，加热至沸腾，微沸5分钟，放置室温，1～4℃冷藏过夜，滤过，滤液加25％粗提物的聚酰胺，搅拌5分钟，滤过，减压浓缩，真空干燥，即得。

分别制备三批银杏叶提取物，得率见表2-1。

银杏叶提取物的鉴别

(1)取银杏叶提取物0.2g，加正丁醇15ml，置水浴中温浸15分钟并时时振摇，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取银杏叶对照提取物0.2g，同法制成对照提取物溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)照薄层色谱法试验，吸取萜类内酯的含量测定项下的萜类内酯供试品溶液和对照品溶液各15μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶0.6)为展开剂，在15℃以下展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏15分钟，在140～160℃加热30分钟，放冷，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

对上述制备的三批银杏叶提取物进行鉴别实验，均符合要求。

银杏叶提取物的含量测定

总黄铜醇苷的含量测定

高效液相色谱法

色谱条件与***适用性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备  分别精密称取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品，加甲醇制成每1ml分别含30μg、30μg、20μg的混合溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  取银杏叶提取物约35mg，精密称定，加甲醇-25％盐酸溶液(4∶1)的混合溶液25ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄铜醇苷的含量。

总黄铜醇苷＝(槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量)×2.51

萜类内酯的含量测定

高效液相色谱法

色谱条件与***适用性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以正丙醇-四氢呋喃-水(1∶15∶84)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备  分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量，加甲醇制成每1ml各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  取银杏叶提取物约0.15g，精密称定，加水10ml，置水浴中加热使溶散，加2％盐酸溶液2滴，用乙酸乙酯振摇提取4次(15ml，10ml，10ml，10ml)，合并提取液，用5％醋酸钠溶液20ml洗涤。合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗涤2次，每次20ml，分取水液，用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液5μl、10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量，即得。

对上述制备的三批银杏叶提取物分别进行含量测定，测定结果见表2-1。

表2-1  银杏叶提取物的含量测定结果和得率

批次	总黄铜醇苷含量(％)	萜类内酯含量(％)	提取物得率(％)
				123平均	24.224.624.424.4	6.26.56.46.4	2.252.122.082.15

实施例2  淫羊藿提取物的制备以及鉴别和含量测定(一)

淫羊藿提取物的制备

取淫羊藿1kg，切成小片，加水煎煮二次，每次1.5小时，每次加水为10L。合并煎液，冷藏放置过夜，滤过，滤液浓缩至相对密度1.08～1.10的浓缩液，加于已处理好的聚酰胺树脂柱上，先用3～4倍柱体积的水冲洗，再用2～3倍柱体积的20％乙醇冲洗，弃去洗涤液，再用4～5倍柱体积的95％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥，即得。

分别制备三批淫羊藿提取物，得率见表2-1。

淫羊藿提取物的鉴别

取淫羊藿提取物0.1g，加乙醇10ml，温浸30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。薄层色谱法实验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸乙脂-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)作为展开剂，展开，取出，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的暗红色斑点；喷以三氯化铝试液，再置紫外光灯(365nm)下检视，显相同的橙红色荧光斑点。

对上述三批淫羊藿提取物进行鉴别，结果均符合要求。

淫羊藿提取物含量测定

淫羊藿总黄酮的含量测定

测定法  精密称取淫羊藿提取物0.01g，置50ml量瓶中，加甲醇25ml超声处理30分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液，以相应试剂为空白，照分光光度法，在270nm波长处测定吸光度，计算，即得。

淫羊藿苷的含量测定

照高效液相色谱法检测。

色谱条件与***适用性实验  以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙睛-水(30∶70)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算不低于1500。

对照品溶液得制备  精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。供试品溶液的制备  精密量取各样品液2ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。对上述三批淫羊藿提取物进行含量测定，结果见表2-2。

表2-2  淫羊藿提取物的含量测定结果和得率

批次	总黄酮含量(％)	淫羊藿苷含量(％)	得率(％)
				123	82.4283.5184.37	21.3422.2122.72	2.662.432.41

实施例3  淫羊藿提取物的制备以及鉴别和含量测定(二)

淫羊藿提取物的制备

取淫羊藿药材5kg，粉碎成中粉，加70％乙醇12倍量，浸泡12小时，滤过，滤液备用；药渣加70％乙醇加热提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至1000ml，上已处理好的聚酰胺柱，先用蒸馏水15L洗脱，再用15％乙醇3L洗脱，最后用70％乙醇20L洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压回收乙醇，真空干燥，即得。

分别制备三批淫羊藿提取物，得率见表2-3。

淫羊藿提取物的鉴别

按照实施例2中的鉴别方法，分别对上述制备的三批淫羊藿提取物进行鉴别实验，均符合要求。

淫羊藿提取物的含量测定

按照实施例2中的含量测定方法，分别对上述制备的三批淫羊藿提取物分别进行含量测定，测定结果见表2-3。

表2-3  淫羊藿提取物的含量测定结果和得率

批次	总黄酮含量(％)	淫羊藿苷含量(％)	得率(％)
				123平均	54.3855.4655.8255.22	3.573.433.523.51	2.132.021.831.99

实施例4  本发明药物组合物粉针的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       50g

甘露醇           400g

无菌注射用水   加至2500ml                

共制备           1000支

处方2

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    40g

聚山梨酯80       50g

甘露醇           300g

无菌注射用水         加至2500ml             

共制备           1000支

处方3

银杏叶提取物1    10g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       10g

甘露醇           400g

无菌注射用水         加至4000ml            

共制备           1000支

处方4

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    10g

聚山梨酯80       50g

甘露醇           300g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方5

银杏叶提取物1    5g

淫羊藿提取物1    250g

聚山梨酯80       10g

甘露醇           400g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方6

银杏叶提取物2    100g

淫羊藿提取物2    80g

聚山梨酯80       40g

甘露醇           300g

无菌注射用水         加至2500ml            

共制备           1000支

处方7

银杏叶提取物2    50g

淫羊藿提取物2    250g

聚山梨酯80       40g

甘露醇           400g

无菌注射用水         加至4000ml            

共制备           1000支

处方8

银杏叶提取物2    25g

淫羊藿提取物2    500g

聚山梨酯80       50g

甘露醇           400g

无菌注射用水         加至5000ml                

共制备           1000支

2、具体步骤：

(1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将聚山梨酯80制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；淫羊藿提取物加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；再加入甘露醇加热搅拌溶解完全，补加无菌注射用水至全量；

(4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；

(6)经0.22μm的微孔滤膜精滤；

(7)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞；将样品放入冻干机中冷冻干燥；-45℃预冻5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时；

(9)冻干结束，压塞，轧盖；

(10)成品全检，包装入库。

实施例5  本发明药物组合物注射液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       50g

无菌注射用水         加至5000ml                

共制备           1000支

处方2

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    40g

聚山梨酯80       50g

无菌注射用水         加至5000ml                

共制备           1000支

处方3

银杏叶提取物1    10g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       10g

无菌注射用水         加至5000ml             

共制备           1000支

处方4

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    10g

聚山梨酯80       50g

无菌注射用水         加至5000ml             

共制备           1000支

处方5

银杏叶提取物1    5g

淫羊藿提取物1    250g

聚山梨酯80       10g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方6

银杏叶提取物2    50g

淫羊藿提取物2    100g

聚山梨酯80       20g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方7

银杏叶提取物     50g

淫羊藿提取物     200g

聚山梨酯80       30g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方8

银杏叶提取物     50g

淫羊藿提取物     300g

聚山梨酯80       40g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方9

银杏叶提取物     50g

淫羊藿提取物     400g

聚山梨酯80       50g

无菌注射用水         加至5000ml            

共制备           1000支

处方10

银杏叶提取物    50g

淫羊藿提取物    500g

聚山梨酯80      60g

无菌注射用水        加至5000ml            

共制备          1000支

2、具体步骤：

(1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；

(2)将聚山梨酯80制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；淫羊藿提取物加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；

(3)补加注射用水至全量；

(4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(5)经砂滤棒过滤脱炭，测定并调节溶液的pH值；

(6)经0.45μm的微孔滤膜精滤；

(7)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(8)将溶液熔封于玻璃安瓿中；

(9)100℃流通蒸汽灭菌30分钟；

(10)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏；

(11)灯检；成品全检，包装入库。

实施例6  本发明药物组合物氯化钠注射液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       50g

氯化钠           900g

注射用水             加至100000ml             

共制备           1000瓶

处方2

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    40g

聚山梨酯80       50g

氯化钠           900g

注射用水             加至100000ml            

共制备           1000瓶

处方3

银杏叶提取物2    100g

淫羊藿提取物2    40g

聚山梨酯80       40g

氯化钠           900g

注射用水             加至100000ml            

共制备           1000瓶

2、具体步骤：

(1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；

(2)将聚山梨酯80配制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；淫羊藿提取物加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；将氯化钠用配液量40％的注射用水溶解完全；

(3)合并两溶液，补加注射用水至全量；

(4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；

(6)经0.45μm的微孔滤膜精滤；

(7)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(8)灌装于100ml的输液瓶中；

(9)115℃热压灭菌30分钟；

(10)灯检；成品全检，包装入库。

实施例7  本发明药物组合物葡萄糖注射液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       50g

葡萄糖           5000g

注射用水             加至100000ml            

共制备           1000瓶

处方2

银杏叶提取物1    10g

淫羊藿提取物1    200g

聚山梨酯80       10g

葡萄糖           5000g

注射用水             加至100000ml            

共制备           1000瓶

处方3

银杏叶提取物2    20g

淫羊藿提取物2    800g

聚山梨酯80       10g

葡萄糖           5000g

注射用水             加至100000ml              

共制备           1000瓶

2、具体步骤：

(1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；

(2)将聚山梨酯80配制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；淫羊藿提取物加入配液量40％的注射用水加热溶解完全。将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全；

(3)合并两溶液，补加注射用水至全量；

(4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；

(6)经0.45μm的微孔滤膜精滤；

(7)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(8)灌装于100ml的输液瓶中；

(9)115℃热压灭菌30分钟；

(10)灯检；成品全检，包装入库。

实施例8  本发明药物组合物片的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

淀粉             100.0g

微晶纤维素       40.0g

2％HPMC水溶液    适量

硬脂酸镁         2.0g

羧甲淀粉钠           4.0g            

共制备           1000片

处方2

银杏叶提取物2    100g

淫羊藿提取物2    20g

淀粉             100.0g

微晶纤维素       40.0g

2％HPMC水溶液    适量

硬脂酸镁         2.0g

羧甲淀粉钠           4.0g            

共制备           1000片

2、具体步骤：

(1)将银杏叶提取物和淫羊藿提取物粉碎过100目筛备用；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；

(4)将银杏叶提取物、淫羊藿提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；

(5)过20目筛制颗粒；

(6)颗粒在60℃的条件下烘干；

(7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀；

(8)取样，半成品化验；

(9)按照化验确定的片重压片；

(10)成品全检，包装入库。

实施例9  本发明药物组合物胶囊的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

淀粉             120.0g

微晶纤维素       20.0g

2％HPMC水溶液    适量

硬脂酸镁             1.0g              

共制备           1000粒

处方2

银杏叶提取物2    20g

淫羊藿提取物2    800g

淀粉             120.0g

微晶纤维素       20.0g

2％HPMC水溶液    适量

硬脂酸镁             1.0g              

共制备           1000粒

2、具体步骤：

(1)将银杏叶提取物和淫羊藿提取物粉碎过100目筛备用；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；

(4)将银杏叶提取物、淫羊藿提取物、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；

(5)过20目筛制颗粒；

(6)颗粒在60℃的条件下烘干；

(7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀；

(8)取样，半成品化验；

(9)按照化验确定的装量装入胶囊；

(10)成品全检，包装入库。

实施例10  本发明药物组合物软胶囊的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

大豆油           500g

大豆磷脂         30g

蜂蜡                 15g            

共制备           1000粒

处方2

银杏叶提取物2    5g

淫羊藿提取物2    300g

大豆油           500g

大豆磷脂         30g

蜂蜡                 15g           

共制备           1000粒

2、具体步骤：

(1)处方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蜡加热熔融，混匀，放冷；

(2)加入银杏叶提取物和淫羊藿提取物，混匀，过胶体磨；

(3)取样，半成品化验；

(4)压制成软胶囊；

(5)成品全检，包装入库。

实施例11本发明药物组合物口服液制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1    50g

淫羊藿提取物1    200g

丙二醇           2000ml

苯甲酸钠         15g

甜菊甙           10g

水                   加至10000ml            

共制备           1000支

处方2

银杏叶提取物2    10g

淫羊藿提取物2    800g

丙二醇           2000ml

苯甲酸钠         15g

甜菊甙           10g

水                   加至10000ml             

共制备           1000支

2、具体步骤：

(1)将淫羊霍提取物加入配液量50％的纯化水中加热搅拌溶解完全，银杏叶提取物加入丙二醇加热搅拌溶解完全；

(2)将苯甲酸钠和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全；

(3)合并上述两个溶液，补加水至全量；

(4)过0.8μm的微孔滤膜过滤；

(5)半成品化验；

(6)灌装；成品全检，包装入库。

实施例12  本发明药物组合物颗粒的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物1          50g

淫羊藿提取物1          200g

糖粉                   750g

2％HPMC50％乙醇溶液        适量               

共制备                 1000包

处方2

银杏叶提取物2          50g

淫羊藿提取物2          400g

糖粉                   1550g

2％HPMC50％乙醇溶液        适量              

共制备                 1000包

处方3

银杏叶提取物1          10g

淫羊藿提取物2          1000g

糖粉                   1000g

2％HPMC50％乙醇溶液        适量              

共制备                 1000包

处方4

银杏叶提取物2          20g

淫羊藿提取物1          600g

糖粉                   1400.0g

2％HPMC50％乙醇溶液        适量              

共制备                 1000包

2、具体步骤：

(1)将蔗糖粉碎过100目筛备用；将银杏叶提取物和淫羊藿提取物粉碎过100目筛备用；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将银杏叶提取物、淫羊藿提取物与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；

(4)过20目筛制颗粒；

(5)颗粒在60℃的条件下烘干；

(6)干颗粒过18目筛整粒；

(7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量；

(8)包装；成品全检，包装入库。

Claims (10)

1、一种药物组合物，其特征在于，该药物组合物包括银杏叶提取物、淫羊藿提取物。

2、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物与淫羊藿提取物的重量配比为1∶0.16～100。

3、如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物与淫羊藿提取物的重量配比为1∶0.8～30。

4、如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物与淫羊藿提取物的重量配比为1∶2～10。

5、如权利要求1～4所述的任一药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％，含总银杏酸不超过百万分之十；淫羊藿提取物含淫羊藿总黄酮不低于20％、淫羊藿苷不低于1％。

6、如权利要求1～4所述的任一药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％，含总银杏酸不超过百万分之一；淫羊藿提取物含淫羊藿总黄酮不低于50％、淫羊藿苷不低于3％。

7、如权利要求1～4所述的任一药物组合物，在制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用。

8、如权利要求1～4所述的任一药物组合物，其特征在于，该药物组合物可制成任一临床上或药学上可接受的剂型。

9、如权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物可制成注射剂。

10、如权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物可制成口服制剂。