CN100548316C - 银丹组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了一种新的药物组合物及其制备方法和应用，包括银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠，其重量配比范围为1∶0.08～8。以银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠直接投料，制备工艺简便，可制成各种临床上或药学上可接受的剂型，优选为注射剂和口服制剂。两药协同作用，药效增强，疗效确切，不良反应减少，主要用于制备抗心脑血管疾病的药物。

Description

银丹组合物及其制备方法和应用

1、技术领域

本发明涉及一种用于心脑血管疾病的银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠的药物组合物及包含该组合物的制剂，属于医药技术领域。

2、背景技术

心脑血管疾病如冠心病、心绞痛等是人类死亡的主要原因之一。近年来，随着我国逐渐步入老龄化社会，人民生活水平提高，生活节奏加快，饮食习惯向高热、高脂化发展，人群中心脏病、脑卒中等心血管***疾病已成为危害人类健康及生命的严重疾病之一。心脑血管疾病发病率和死亡率有逐年上升的趋势，急性发作致死率极高，存活者经常会留下不同程度的后遗症。心脑缺血后影响能量代谢，继发乳酸堆积、钙超载、自由基损伤等多种变化。多靶点逆转或改善这些变化，提高综合疗效是药物治疗的重要目标。

银杏叶提取物(Extract of Ginkgo bilola leaves)为银杏叶经加工制成的提取物，银杏叶为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶。银杏叶入药始于明代，近10余年来，银杏叶制剂的医用价值已引起国内外的广泛关注，并对其活性成分及临床应用进行了深入研究。银杏叶提取物是一种作用广泛、不良反应较少的天然药物，其有效成分主要为黄酮类和萜类，不仅具有扩张冠脉血管和脑血管、增加血流量、改善心脑功能的作用，还有增强记忆、降低血小板的功效。大量的研究成果表明，银杏叶提取物具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、降血脂、增强中枢神经***功能、调节神经递质和激素水平、改善血液流变学状态、抗炎、抗过敏等作用。

银杏叶提取物已有国家标准，见中国药典2000年版2002年增补本第6页，或中国药典2005年版一部第281页。标准规定，本品按干燥品计，含总黄酮醇苷，不得少于24.0％；含萜类内酯以白果内酯(C₁₅H₁₈O₈)、银杏内酯A(C₂₀H₂₄O₉)、银杏内酯B(C₂₀H₂₄O₁₀)和银杏内酯C(C₂₀H₂₄O₁₁)的总量计，不得少于6.0％；本品含总银杏酸不得过百万分之十；制剂为银杏叶片。国内上市的还有舒血宁注射液，可以扩张血管、改善微循环，用于缺血性心脑血管疾病，冠心病、心绞痛，脑栓塞，脑血管痉挛等。

丹参酮II_A为丹参活血化瘀的有效成分，但是胃肠道吸收差，临床起效慢，因此将其磺化成水溶性盐——丹参酮II_A磺酸钠(Sulfotanshinone Sodium)。丹参酮II_A磺酸钠能增加冠脉流量，改善缺血区心肌的侧枝循环及局部供血，改善缺氧心肌的代谢紊乱，提高心肌耐缺氧能力，抑制血小板聚集及抗血栓形成，缩小实验动物缺血心肌梗死面积，在一定剂量下亦能增强心肌收缩力。丹参酮II_A磺酸钠的制剂有丹参酮II_A磺酸钠注射液，主要用于各种心血管疾病。丹参酮II_A磺酸钠结构如下所示：

国内已有丹参酮II_A用于制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物的专利(CN01130086)，以及丹参与银杏叶合用治疗心脑血管疾病的专利——一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法(CN200410022288)。但是，利用银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠的相互作用，配伍组方制备治疗心脑血管疾病的药物，还未见报道。

3、发明内容

为了满足临床需要，更好的治疗心脑血管疾病，本发明提供了一种新的药物组合物及其制备方法和用途。

本发明药物组合物包括银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠。经过发明人大量的筛选试验，证明银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠的优选重量配比为1∶0.08～8，例如可以是1∶0.08、1∶0.1、1∶0.16、1∶0.2、1∶0.3、1∶0.4、1∶0.5、1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8、1∶0.9、1∶1、1∶1.5、1∶1.6、1∶2、1∶2.4、1∶2.5、1∶3、1∶3.2、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8，进一步优选配比为1∶0.2～4，更进一步优选为1∶0.4～2。

上述药物组合物中，银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量不低于24.0％、萜类内酯的含量不低于6.0％，总银杏酸的含量不超过百万分之十；优选为总黄酮醇苷的含量不低于24.0％、萜类内酯的含量不低于6.0％，总银杏酸的含量不超过百万分之一。

本发明药物组合物，药物组分的重量配比是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分在上述重量配比范围内都具有较好疗效。上述重量配比对于特殊病人，可以相应调整组成的比例。

本发明还提供了上述药物组合物在制备抗心脑血管疾病的药物中的用途。药理实验表明，本发明药物组合物可显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间，对胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓死亡具有显著保护作用，可显著改善小鼠耳廓微循环，显著改善麻醉开胸犬血流动力学，对大鼠脑缺血再灌注损伤具有显著保护作用，显著降低结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血范围和心电、生化指标的异常改变。

本发明组合物可与药学上可接受的辅料制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型，优选注射剂或口服制剂；可以肠胃外或口服给药等方式施用于需要这种治疗的患者。

用于肠胃外给药时，可制成注射剂。注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，可用于肌内注射、静脉注射、静脉滴注等；其规格有1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供静脉滴注用的大体积(一般不小于100ml)注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，可用适宜的注射用溶剂配制后注射，也可用静脉输液配制后静脉滴注；无菌粉末用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。

制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，可选用水性溶剂或非水性溶剂。最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9％氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射剂时，可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、填充剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸-醋酸钠、乳酸、枸橼酸-枸橼酸钠、碳酸氢钠-碳酸钠等；常用的增溶剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充剂包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂为苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射剂常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。

用于口服时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂，依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂，包括滴丸、糖丸、小丸等。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂，可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。口服混悬剂系指难溶性固体药物，分散在液体介质中，制成供口服的混悬液体制剂，也包括干混悬剂或浓混悬液。糖浆剂系指含有药物的浓蔗糖水溶液。

制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。常用填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；常用粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；常用崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；常用润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。

本发明药物组合物中，银杏叶提取物的优选制备工艺如下：

优选工艺一：取银杏叶粉碎，加入60％的丙酮水溶液，57～59℃剧烈搅拌30min，滤过，重复上述步骤，再提取一遍，合并滤液，滤液减压浓缩至含固体物约30％～40％(此时丙酮的含量约5％)。加水稀释至原体积的2倍，搅拌下冷却至约12℃，保温1小时，离心，弃去沉淀，上清液按30％加入硫酸铵，搅匀，使全溶，用丁酮-丙酮混合溶液(6∶4)萃取2次，每次为水溶液的0.5倍量，丁酮-丙酮混合溶液减压浓缩至含固体物50％～70％，加入水使含固体物约10％，用1/2体积的水饱和正丁醇萃取3次，正丁醇液减压浓缩至含固体物至少50％以上，然后加入适量水再继续浓缩，在所得浓缩液中加入水及乙醇，使固体物含量达10％，醇浓度达30％，加入正己烷萃取3次，每次1/3量的，水相浓缩，并减压干燥(60～80℃)，即得。通过上述工艺制备的银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量不低于24.0％，萜类内酯的含量不低于6.0％。

优选工艺二：取银杏叶，粉碎，先用12倍量60％乙醇溶液加热回流二次，每次3小时，滤过，合并乙醇提取液，浓缩成稠膏，用热水溶解成每1ml相当于0.5g原药材的溶液，静置冷却，滤过，滤液上大孔树脂(DA201)柱，分别用18％、30％、及50％浓度的乙醇洗脱，18％、30％乙醇脱液浓缩至无醇味，上聚酰胺柱，以95％乙醇洗脱，将大孔树脂的50％乙醇洗脱液与聚酰胺柱的洗脱液合并，浓缩至无乙醇味，以环己烷萃取，弃去环己烷萃取液，浓缩液喷雾干燥，即得。通过上述工艺制备的银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量不低于24.0％，萜类内酯的含量不低于6.0％。

上述药物组合物中，银杏叶提取物还可以通过上述工艺制备，但不应将此理解为上述药物组合物中银杏叶提取物仅限于上述制备工艺。

综上所述，本发明药物组合物具有下列优点：

(1)提供了一种新的用于制备抗心脑血管疾病药物的药物组合物，满足了临床需要。

(2)对本发明药物组合物中药物组份的用量进行了大量摸索研究，通过银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠不同配比对大鼠实验性颈动脉血栓形成的影响，筛选出具有显著疗效的重量配比范围。

(3)药理药效研究表明，本发明药物组合物可显著延长大鼠实验性颈动脉血栓形成时间，对胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓死亡具有显著保护作用，可显著改善小鼠耳廓微循环，显著改善麻醉开胸犬血流动力学，对大鼠脑缺血再灌注损伤具有显著保护作用，显著降低结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血范围和心电、生化指标的异常改变。在抗心脑血管疾病方面有显著效果，是本领域普通技术人员所意想不到的。

(4)本发明药物组合物中，银杏叶提取物中有效成分含量确切，丹参酮II_A磺酸钠结构明确、疗效确切，以银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠直接投料，制备工艺简便，避免了由于原药材质量差异造成的制剂质量差异较大的缺点，制剂质量有很大的提高，杂质含量大大减少，安全性更高。

(5)对本发明药物组合物的原料或制剂，进行了鉴别、含量测定、稳定性研究等，有效成分明确、含量高，制剂稳定性好，便于控制产品质量，可以保证临床用药安全。

(6)提供了优选的银杏叶提取物制备工艺，简便易行，且质量较好，适应于工业化大生产。

以下通过实验例来进一步阐述本发明的药物组合物的有益效果，这些实验例包括本发明的新药物组合物的药效学实验、稳定性实验。本发明的药物组合物具有下列有益效果，但不应将此理解为本发明的药物组合物仅具有下列有益效果。

实验例1～4中所用银杏叶提取物均为市购精制所得，实验例5～7所用银杏叶提取物均为实施例1制备所得。以下实验例中用YD代替本发明药物组合物。

实验例1本发明药物组合物对大鼠实验性颈动脉血栓形成的影响

受试动物  雄性大鼠，140只，体重240～280g，随机分为14组，每组10只。

供试品  银杏叶提取物：含银杏叶黄酮醇苷24.6％、萜类内酯6.2％；

丹参酮II_A磺酸钠：阿尔贝拉医药控股(通化)有限公司；

银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠各配比注射液：自制，制备方法见实施例2；

注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒

培博士药厂；

丹参酮II_A磺酸钠注射液：2ml∶10mg，上海第一生化药业有限公司；

氯化钠注射液：100ml∶0.9g，山东华信制药有限公司。

给药剂量  见表1。

实验方法  大鼠用2.5％戊巴比妥钠(25mg/kg)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，分离右侧颈总动脉，采用电流损伤颈动脉内膜法，用BT87-3实验性体内血栓形成仪测定不同组别动物颈动脉血栓形成时间。将刺激电极和温度探头挂于颈总动脉上，按表1所示腹腔注射给药，给药后10min开始刺激，刺激强度为2mA，刺激5min后关闭刺激开关，取下电极，3min后调节温控表至零位，观察动脉温度突降时间。记录电刺激开始至主动脉温度突降的时间，该时间定为颈动脉血栓形成时间(超过3000秒者以3000秒计)。

表1本发明药物组合物对大鼠实验性颈动脉血栓形成时间的影响

(n＝10，平均值±标准偏差)

实验结果及结论  实验结果见表1。结果表明，银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠重量配比为1∶0.08～1∶8时，均对大鼠实验性血栓形成有显著保护作用，且均高于注射用银杏叶提取物或丹参酮II_A磺酸钠注射液单独用药的效果，与空白对照组相比较p值均小于0.001，提示两药有协同增效作用。根据各组的血栓形成时间，银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠重量配比为1∶0.2～4时，效果更好；重量配比为1∶0.4～2.4时，效果最好。

实验例2本发明药物组合物对小鼠体内血栓形成的影响

受试动物  雄性小鼠120只，体重20～25g，随机分为6组，每组20只。

供试品  注射用YD1：90mg，含银杏叶提取物50mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg；

注射用YD2：120mg，含银杏叶提取物100mg、丹参酮II_A磺酸钠20mg；

注射用YD3：125mg，含银杏叶提取物25mg、丹参酮II_A磺酸钠100mg；

注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒

培博士药厂；

丹参酮II_A磺酸钠注射液：2ml∶10mg，上海第一生化药业有限公司；

氯化钠注射液：100ml∶0.9g，山东华信制药有限公司。

给药剂量  见表2。

实验方法灌胃给药1小时后，尾静脉注射胶原蛋白-肾上腺素混合血栓诱导剂每只0.1mg。注射后20min内记录小鼠偏瘫恢复数，并计算各给药组对小鼠脑血栓形成的保护率【死亡保护率＝(对照组死亡数-给药组死亡数)/对照组死亡数】。

表2本发明药物组合物对小鼠体内血栓形成的影响(n＝20)

实验结果及结论实验结果见表2。结果表明，注射用YD1、注射用YD2、注射用YD3、注射用银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠注射液均对胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓死亡有保护作用。根据死亡保护率，银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠的配比为1∶0.8、1∶0.2、1∶4时，对胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠脑血栓死亡的保护作用，均高于注射用银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠注射液，药效显著，提示两药有协同增效作用。

实验例3本发明药物组合物对小鼠耳廓微循环的影响

受试动物  雄性小鼠，60只，体重25～28g，随机分为6组，每组10只。

供试品  YD注射液1：5ml∶90mg，含银杏叶提取物50mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg；

YD注射液2：5ml∶115mg，含银杏叶提取物75mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg；

YD注射液3：5ml∶135mg，含银杏叶提取物75mg、丹参酮II_A磺酸钠60mg；

注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒

培博士药厂；

丹参酮II_A磺酸钠注射液：2ml∶10mg，上海第一生化药业有限公司；

氯化钠注射液：100ml∶0.9g，山东华信制药有限公司。

给药剂量  见表3。

实验方法小鼠灌胃给药后，用乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉。麻醉后的小鼠置于铺有棉花的托板上，保持室温20±2℃。将小鼠右耳置于耳托架上，在右耳上滴少许液体石蜡，将托板置于显微镜载物台上，调节冷光源，使照明光线与耳廓平面成45°～60°夹角，并与毛的生长方向相平行。先在低倍镜下观察耳廓全貌，选择适当部位，换用高倍镜进行定点连续观察。观察给药后20min的微循环状态，测量微动脉、微静脉的直径和血流速度。

表3银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠合并用药对小鼠耳廓微循环的影响

(平均值±标准偏差，n＝10)

^*p＜0.05；^**p＜0.01，与对照组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表3。结果表明，YD注射液、注射用银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠注射液均使小鼠耳微动脉、微静脉管径增大，血流速度加快。尤其是YD注射液给药组，耳微动脉、微静脉管径明显增大(p＜0.01)，血流速度显著加快(p＜0.01)。并且YD注射液对小鼠耳廓微循环的作用均优于注射用银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠注射液的作用，提示两药有协同增效作用。

实验例4本发明药物组合物对麻醉开胸犬血流动力学的影响

受试动物  杂种犬，25只，体重11.0～13.0kg，随机分为5组，每组5只。

供试品  YD注射液1：5ml∶90mg，含银杏叶提取物50mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg；

注射用YD1：90mg，含银杏叶提取物50mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg；

注射用银杏叶提取物：50mg，含银杏叶黄酮甙12mg、萜类3mg，德国威玛舒

培博士药厂；

丹参酮II_A磺酸钠注射液：2ml∶10mg，上海第一生化药业有限公司

氯化钠注射液：100ml∶0.9g，山东华信制药有限公司。

给药剂量  5mg/kg

实验方法  犬用戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉后，采取右侧卧位正压人工呼吸下，于左4～5胁间开胸，于距迷走神经2cm处打开心包，壁层做悬床将其缝合于胸壁，使心脏充分暴露。分离主动脉，在主动脉根部套入电磁流量计探头(10～12mm)，测量心输出量(CO)；在冠状动脉左前降支根部，分离心外膜，分离出约1cm冠状动脉，套入电磁流量计探头(2～3mm)，测量冠脉流量(CBF)；将此二探头连于LMTC-621型电磁流量计上，分离一侧颈动脉，插管，连接压力换能器，记录动脉血压(AP)及平均动脉压(MAP)；将内径为1.5mm的心导管从心尖***左心室，通过YZ-1型压力换能器经载波放大左室内压(LVP)，LVP电讯号经直流放大器放大10倍，记录左室舒张末期压(LVEDP)，以LVP电讯号再经BMI型微分器微分记录左室内压变化速率(dp/dt_max)，用针型电极***受试动物四肢皮下，记录标II导联心电图(EGG-II)，以测量心率(HR)。上述指标变化均同步记录于RM-6300生理多导仪。

分离股动脉抽动脉血，经颈外动脉插管至冠状静脉窦抽取静脉血，根据CY-2测氧仪使用说明书，用新鲜配制的无氧溶液(0.01M硼砂溶液加入无水亚硫酸钠结晶配制成2％的亚硫酸钠溶液)调零，用与空气平衡温度恒定的蒸馏水作灵敏度调节。待仪器稳定后用测氧仪测定血氧含量。实验结束后计算心肌耗氧量。

手术结束后，观察上述各项指标，稳定后将记录值作为给药前的指标，静脉给药后于1、3、5、10、20、30min，采集上述各项指标，并以给药后各时间点的各项指标变化率(％)，与对照组各对应时间点的各项指标变化率(％)做组间显著性成对资料的t-test处理。

实验结果及结论  YD注射液1、注射用YD1、注射用银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠注射液对受试犬心率(HR)，平均动脉压(MBP)、左室内压(LVP)及心室肌收缩力(dp/dt_max)、心肌耗氧量均有降低作用。尤其是YD注射液1和注射用YD1组，降低幅度均明显大于注射用银杏叶提取物组和丹参酮II_A磺酸钠注射液组，心肌耗氧量于给药后2分钟左右开始降低，最大值分别为25.1％和25.3％，作用时间达35分钟以上，与对照组比较有非常显著的疗效(p＜0.01)。提示，银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠合并用药具有协同增效作用。

实验例5本发明药物组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

受试动物  大鼠，140只，雌雄兼用，体重200～220g，随机分为：假手术组、缺血再灌注组、YD注射液4组、YD注射液5组、YD注射液6组、银杏叶提取物注射液、丹参酮II_A磺酸钠注射液组，每组20只。

供试品  YD注射液4：5ml∶75mg，含银杏叶提取物25mg、丹参酮II_A磺酸钠50mg；

YD注射液5：5ml∶70mg，含银杏叶提取物50mg、丹参酮II_A磺酸钠20mg；

YD注射液6：5ml∶72mg，含银杏叶提取物40mg、丹参酮II_A磺酸钠32mg；

银杏叶提取物注射液：自制，2ml∶50mg，制备方法参见实施例2；

丹参酮II_A磺酸钠注射液：自制，2ml∶10mg，制备方法参见实施例2；

氯化钠注射液：100ml∶0.9g，山东华信制药有限公司。

给药剂量  见表4。

实验方法  大鼠用10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离、结扎右侧颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。分离右侧颈内动脉，沿颈内动脉向下分离翼颚动脉，根部结扎该分支。在颈内动脉近端备线、远端放置动脉夹，颈总动脉分叉处切口，***尼龙线(深度为17～20mm)，拴线进入颈内动脉，入颅至大脑前动脉，阻断大脑中动脉所有血流来源。撤掉动脉夹，扎紧备线，外留1cm长线头，缝合皮肤。缺血1h后灌胃给药或氯化钠注射液，继续缺血1h后再灌注，勿需再次麻醉和切开皮肤，轻轻提拉所留线头至有阻力时提示尼龙线头端已至颈总动脉切口处，血流再通。假手术组除不插线外，其余步骤同上。存活鼠再灌注24h后，观察大鼠行为变化，进行行为评分。参考zea Longa的5分制评分标准：0分，正常，无神经损伤症状；1分，不能完全伸展对侧前爪；2分，向外侧转圈；3分，向对侧倾倒；4分，不能自发行走，意识丧失。然后快速断头取鼠大脑。一部分(每组10只)分别称左右脑半球湿重，置160℃烤箱内24h后称干重，按以下公式计算脑组织含水量：脑组织含水量(％)＝(湿重-干重)/湿重×100％；一部分(每组10只)在前连合平面切下厚约2mm冠状脑片，立刻置于2％TIE溶液中，37℃孵育30min。梗塞区呈现白色，非梗塞区呈现红色。用求积仪(C63图像分析***)测出各区面积，并计算梗塞区占全脑的百分比(％)。

实验结果及结论  实验结果见表4。

(1)对行为的影响：假手术组大鼠均无异常症状，神经行为学评分为0。氯化钠注射液对照组出现不能完全伸展对侧前爪或向外侧转圈或向对侧倾倒的神经损伤症状，行为评分为1.7±0.8。与氯化钠注射液对照组相比较，YD注射液4、YD注射液5、YD注射液6组均可极显著降低神经行为学评分，分别为0.7±0.5、0.6±0.4、0.5±0.4(p＜0.01)；银杏叶提取物注射液组可显著降低神经行为学评分，为0.8±0.5(p＜0.05)；丹参酮II_A磺酸钠注射液组可降低神经行为学评分，为0.9±0.6(p＜0.05)。

(2)对脑组织含水量的影响：氯化钠注射液对照组缺血再灌注侧(大脑右半球)的脑组织含水量极显著高于假手术组(p＜0.01)，说明造模成功。与氯化钠注射液对照组相比较，YD注射液4、YD注射液5、YD注射液6组的脑组织含水量均极显著降低(p＜0.01)，银杏叶提取物注射液组和丹参酮II_A磺酸钠注射液组的脑组织含水量均显著降低(p＜0.05)。

(3)对梗死面积的影响：假手术组脑组织无梗塞。氯化钠注射液对照组缺血侧脑组织有梗塞现象，梗塞体积占全脑的37.33％。与氯化钠注射液对照组相比较，YD注射液4、YD注射液5、YD注射液6均可极显著缩小缺血侧脑组织梗塞体积(p＜0.01)，银杏叶提取物注射液和丹参酮II_A磺酸钠注射液均可显著缩小缺血侧脑组织梗塞体积(p＜0.05)。

表4本发明药物组合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

(平均值±标准偏差，n＝10)

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与氯化钠注射液对照组相比较；^**p＜0.01，与假手术组相比较。

上述实验结果表明，银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠合并用药可显著改善局灶性脑缺血再灌注损伤的神经损伤症状，降低缺血再灌注损伤脑组织含水量，减轻缺血侧脑半球水肿程度缩小脑梗塞体积。银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠为1∶2、1∶0.4、1∶0.8时，各治疗组的效果均优于银杏叶提取物注射液或丹参酮II_A磺酸钠注射液单独用药的效果，提示银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠合并用药具有协同增效作用。

实验例6本发明药物组合物对结扎大鼠血小板凝集作用的影响

受试动物大鼠，140只，体重200～220g，雌雄兼用，随机分为14组，每组10只。

供试品  银杏叶提取物：自制，见实施例1；

丹参酮II_A磺酸钠：阿尔贝拉医药控股(通化)有限公司；

银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠不同配比的溶液：自制(配比见表5)；

生理盐水：自制。

给药剂量：见表5。

实验方法各组动物按表5灌胃给药，每日1次，连续给药7天，末次给药1小时后，以30％戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，自腹主动脉取血，用3.28％枸橼酸钠抗凝(与全血以1∶9混合)。将抗凝全血在20℃条件下1500rpm离心5min获得富血小板血浆(PPR)。留取定量PPR后，将剩余PPR再次以3000rpm离心10min，获得自身对照贫血小板血浆(PPP)。以PPP调节PPR浓度，使各PPR浓度相同。将PPR在37℃的恒温孔中预热后，加入二磷酸腺苷(ADP，终浓度为3μmol·L^-1)诱导血小板聚集，记录最大聚集率，并计算血小板凝集抑制率＝(对照组凝集率-药物组凝集率)/对照组凝集率×100％。

实验结果及结论  实验结果见表5。与氯化钠注射液对照组相比较，银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠均显著抑制血小板凝集(p＜0.05)；银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠重量配比为1∶0.08、1∶0.1、1∶6、1∶8时，均显著抑制血小板凝集(p＜0.05)；银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠重量配比为1∶0.2、1∶0.4、1∶0.6、1∶0.8、1∶1、1∶2、1∶4时，均极显著抑制血小板凝集(p＜0.01)，尤其以1∶0.4、1∶0.6、1∶0.8、1∶1、1∶2时效果最好。银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠各配比的效果均优于银杏叶提取物或丹参酮II_A磺酸钠单独给药的效果，提示银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠具有协同增效作用。

表5本发明药物组合物对大鼠血小板凝集作用的影响

^*p＜0.01，^**p＜0.001，与氯化钠注射液对照组相比较。

实验例7本发明药物组合物对结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血的影响

受试动物大鼠，60只，体重200～220g，雌雄兼用，随机分为6组，每组10只。

供试品YD颗粒：80mg，含银杏叶提取物40mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg(实施例11)；

银杏叶提取物：自制，见实施例1；

丹参酮II_A磺酸钠：阿尔贝拉医药控股(通化)有限公司；

生理盐水：自制。

给药剂量  见表6。

实验方法  大鼠用乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉，背位固定，记录心电，接人工呼吸机进行人工呼吸，打开胸腔，剪开心包，各组动物按表6灌胃给药，3min后结扎左侧冠状动脉前降枝，全程记录心电30min，结扎后1h取血，检测磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)。取出大鼠心脏，沿结扎线将心室肌均匀横切4片，0.5％氯化硝基四氮唑兰染色，用求积仪测每片心肌两面的缺血面积，计算心肌缺血面积占心室面积的百分比。

表6本发明药物组合物对结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血的影响

(平均值±标准偏差，n＝10)

^*p＜0.05，^**p＜0.01，与心肌缺血对照组相比较。

实验结果及结论  实验结果见表6。结扎后，心肌缺血对照组大鼠心电的QRS波均突然异常增高、加宽，心肌大范围缺血，生化检测表现为CK和LDH均异常增高，说明造模成功。与心肌缺血对照组相比较，各个剂量组的YD颗粒均能极显著减小因结扎冠状动脉所致的心电和生化指标的异常改变(p＜0.01)，极显著减小心肌缺血范围(p＜0.01)；银杏叶提取物能极显著减小因结扎冠状动脉所致的心电和生化指标的异常改变(p＜0.01)，显著减小心肌缺血范围(p＜0.05)；丹参酮II_A磺酸钠能极显著减小因结扎冠状动脉所致的心电和生化指标的异常改变(p＜0.01)，显著减小心肌缺血范围(p＜0.05)。各个剂量组的YD颗粒的效果均优于银杏叶提取物或丹参酮II_A磺酸钠单独给药的效果，提示银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠具有协同增效作用。

实验例8本发明药物组合物稳定性实验

供试品YD注射液：5ml∶90mg，含银杏叶提取物50mg、丹参酮II_A磺酸钠40mg

考察项目：性状、pH值、澄明度、有关物质、标示含量；并在加速实验6个月和长期实验期末增加无菌和热原检查。

1、影响因素实验

强光照射实验  取供试品，置照度为4500Lx的光照箱内放置10天。

高温实验  取供试品，分别置于40℃、60℃条件下放置10天。

低温实验  取供试品，在4℃冰箱中放置10天。

上述实验，分别于第5、10天取样测定。比较性状后测试各项指标，并将结果与0天比较。

实验结果  光照4500Lx、高温60℃条件下放置10天，除有关物质略有升高，标示含量略有下降外，其它各项指标均无明显变化。高温40℃、低温4℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。

2、加速实验

实验方法  置温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月。在实验期间分别于第1个月、2个月、3个月、6个月末取样，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在6个月末增加无菌和热原检查。

实验结果  温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月，除有关物质略有增加外，其它各项指标均无明显变化，加速实验6个月末，热原、无菌检查均符合规定。

3、长期实验

实验方法置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月。分别于第3个月、6个月、9个月、12个月、18个月，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在18个月末增加无菌和热原检查。

实验结果  温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月，各项指标均无明显变化，长期实验18个月末，热原、无菌检查均符合规定。

结论  由上述考察结果得出结论，各项实验中，YD注射液均比较稳定。

4、具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的制备中的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。

实施例1银杏叶提取物的制备及鉴别和含量测定

银杏叶提取物的制备

取银杏叶，粉碎，先用12倍量60％乙醇溶液加热回流二次，每次3小时，滤过，合并乙醇提取液，浓缩成稠膏，用热水溶解成每1ml相当于0.5g原药材的溶液，静置冷却，滤过，滤液上大孔树脂(DA201)柱，分别用18％、30％、及50％浓度的乙醇洗脱，18％、30％乙醇脱液浓缩至无醇味，上聚酰胺柱，以95％乙醇洗脱，将大孔树脂的50％乙醇洗脱液与聚酰胺柱的洗脱液合并，浓缩至无乙醇味，以环己烷萃取，弃去环己烷萃取液，浓缩液喷雾干燥，即得。

按照上述方法分别制备三批银杏叶提取物，得率见表7。

银杏叶提取物的鉴别

(1)取银杏叶提取物0.2g，加正丁醇15ml，置水浴中温浸15分钟并时时振摇，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取银杏叶对照提取物0.2g，同法制成对照提取物溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)照薄层色谱法试验，吸取萜类内酯的含量测定项下的萜类内酯供试品溶液和对照品溶液各15μl，分别点于同一以含0.4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶0.6)为展开剂，在15℃以下展开，取出，晾干，用醋酐蒸气熏15分钟，在140～160℃加热30分钟，放冷，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

对上述制备的三批银杏叶提取物进行鉴别实验，均符合要求。

银杏叶提取物的含量测定

总黄铜醇苷的含量测定

高效液相色谱法

色谱条件与***适用性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备分别精密称取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品，加甲醇制成每1ml分别含30μg、30μg、20μg的混合溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  取银杏叶提取物约35mg，精密称定，加甲醇-25％盐酸溶液(4∶1)的混合溶液25ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄铜醇苷的含量。

总黄铜醇苷＝(槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量)×2.51

萜类内酯的含量测定

高效液相色谱法

色谱条件与***适用性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以正丙醇-四氢呋喃-水(1∶15∶84)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备  分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量，加甲醇制成每1ml各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液，作为对照晶溶液。

供试品溶液的制备  取银杏叶提取物约0.15g，精密称定，加水10ml，置水浴中加热使溶散，加2％盐酸溶液2滴，用乙酸乙酯振摇提取4次(15ml，10ml，10ml，10ml)，合并提取液，用5％醋酸钠溶液20ml洗涤。合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗涤2次，每次20ml，分取水液，用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液5μl、10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量，即得。

对上述制备的三批银杏叶提取物分别进行含量测定，测定结果见表7。

表7银杏叶提取物的含量测定结果和得率

实施例2本发明药物组合物注射液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物          50g

丹参酮II_A磺酸钠       40g

聚山梨酯80            50g

注射用水              加至5000ml

                                     

共制备                1000支

处方2

银杏叶提取物          75g

丹参酮II_A磺酸钠       40g

聚山梨酯80            75g

注射用水              加至5000ml

                                    

共制备                1000支

处方3

银杏叶提取物          75g

丹参酮II_A磺酸钠       60g

聚山梨酯80            75g

注射用水              加至5000ml

                                      

共制备                1000支

处方4

银杏叶提取物       25g

丹参酮II_A磺酸钠    50g

聚山梨酯80         60g

注射用水           加至5000ml

                                 

共制备             1000支

处方5

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    20g

聚山梨酯80         60g

注射用水           加至5000ml

                                 

共制备             1000支

处方6

银杏叶提取物       40g

丹参酮II_A磺酸钠    32g

聚山梨酯80         60g

注射用水           加至5000ml

                                 

共制备             1000支

2、具体步骤：

(1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；

(2)将聚山梨酯80制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；丹参酮II_A磺酸钠加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；补加注射用水至全量；

(3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(4)经砂滤棒过滤脱炭，测定并调节溶液的pH值；

(5)经0.45μm的微孔滤膜精滤；

(6)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(7)将溶液熔封于玻璃安瓿中；

(8)100℃流通蒸汽灭菌30分钟；

(9)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏；

(10)灯检；

(11)成品全检，包装入库。

实施例3本发明药物组合物粉针的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

聚山梨酯80         50g

甘露醇             700g

无菌注射用水       加至3000ml

                              

共制备             1000支

处方2

银杏叶提取物       100g

丹参酮II_A磺酸钠    20g

聚山梨酯80         25g

甘露醇             400g

无菌注射用水       加至4000ml

                                 

共制备             1000支

处方3

银杏叶提取物       25g

丹参酮II_A磺酸钠    100g

聚山梨酯80         75g

甘露醇             700g

无菌注射用水       加至4000ml

                                

共制备             1000支

处方4

银杏叶提取物       40g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

聚山梨酯80         75g

甘露醇             700g

无菌注射用水       加至4000ml

                               

共制备             1000支

2、具体步骤：

(1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将聚山梨酯80制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；丹参酮II_A磺酸钠加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；再加入甘露醇加热搅拌溶解完全，补加无菌注射用水至全量；

(4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；

(6)经0.22μm的微孔滤膜精滤；

(7)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞；将样品放入冻干机中冷冻干燥；-45℃预冻5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时；

(9)冻干结束，压塞，轧盖；

(10)成品全检，包装入库。

实施例4本发明药物组合物氯化钠注射液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       75g

丹参酮II_A磺酸钠    60g

聚山梨酯80         75g

氯化钠             900g

注射用水           加至100000ml

                                   

共制备             1000瓶

处方2

银杏叶提取物       100g

丹参酮II_A磺酸钠    60g

聚山梨酯80         80g

氯化钠             900g

注射用水           加至100000ml

                                 

共制备             1000瓶

处方3

银杏叶提取物       125g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

聚山梨酯80         125g

氯化钠             900g

注射用水           加至100000ml

                                    

共制备             1000瓶

处方4

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    60g

聚山梨酯80         100g

氯化钠             900g

注射用水           加至100000ml

                                 

共制备             1000瓶

2、具体步骤：

(1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；

(2)将聚山梨酯80配制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；丹参酮II_A磺酸钠加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；将氯化钠用配液量40％的注射用水溶解完全；合并各溶液，补加注射用水至全量；

(3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；

(5)经0.45μm的微孔滤膜精滤；

(6)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(7)灌装于100ml的输液瓶中；

(8)115℃热压灭菌30分钟；

(9)灯检；

(10)成品全检，包装入库。

实施例5本发明药物组合物葡萄糖注射液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       100g

丹参酮II_A磺酸钠    80g

聚山梨酯80         100g

葡萄糖             5000g

注射用水           加至100000ml

                                    

共制备             1000瓶

处方2

银杏叶提取物       75g

丹参酮II_A磺酸钠    80g

葡萄糖             5000g

注射用水           加至100000ml

                                    

共制备             1000瓶

处方3

银杏叶提取物       125g

丹参酮II_A磺酸钠    60g

聚山梨酯80         125g

葡萄糖             5000g

注射用水           加至100000ml

                                  

共制备             1000瓶

处方4

银杏叶提取物       100g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

聚山梨酯80         100g

葡萄糖             5000g

注射用水           加至100000ml

                               

共制备             1000瓶

2、具体步骤：

(1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗；

(2)将聚山梨酯80配制成20％的水溶液，加入处方量的银杏叶提取物，加热搅拌溶解完全；丹参酮II_A磺酸钠加入配液量40％的注射用水加热溶解完全；将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全；合并各溶液，补加注射用水至全量；

(3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟；

(4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值；

(5)经0.45μm的微孔滤膜精滤；

(6)检查溶液的澄明度，半成品化验；

(7)灌装于100ml的输液瓶中；

(8)115℃热压灭菌30分钟；

(9)灯检；

(10)成品全检，包装入库。

实施例6本发明药物组合物片的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

淀粉               120.0g

微晶纤维素         40.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           2.0g

羧甲淀粉钠         4.0g

                           

共制备             1000片

处方2

银杏叶提取物       75g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

淀粉               120.0g

微晶纤维素         40.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           2.0g

羧甲淀粉钠         4.0g

                             

共制备             1000片

处方3

银杏叶提取物       75g

丹参酮II_A磺酸钠    20g

淀粉               120.0g

微晶纤维素         40.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           2.0g

羧甲淀粉钠         4.0g

                           

共制备             1000片

处方4

银杏叶提取物       25g

丹参酮II_A磺酸钠    50g

淀粉               110.0g

微晶纤维素         40.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           2.0g

羧甲淀粉钠         4.0g

                           

共制备             1000片

2、具体步骤：

(1)将银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠粉碎过100目筛备用；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；

(4)将银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；

(5)过20目筛制颗粒；

(6)颗粒在60℃的条件下烘干；

(7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀；

(8)取样，半成品化验；

(9)按照化验确定的片重压片；

(10)成品全检，包装入库。

实施例7本发明药物组合物胶囊的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

淀粉               60.0g

微晶纤维素         20.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           1.0g

                              

共制备             1000粒

处方2

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    100g

淀粉               120.0g

微晶纤维素         40.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           2.0g

                               

共制备             1000粒

处方3

银杏叶提取物       75g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

淀粉               120.0g

微晶纤维素         40.0g

2％HPMC水溶液      适量

硬脂酸镁           2.0g

                                

共制备             1000粒

2、具体步骤：

(1)将银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠粉碎过100目筛备用；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用；

(4)将银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；

(5)过20目筛制颗粒；

(6)颗粒在60℃的条件下烘干；

(7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀；

(8)取样，半成品化验；

(9)按照化验确定的装量装入胶囊；

(10)成品全检，包装入库。

实施例8本发明药物组合物软胶囊的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

大豆油             400g

大豆磷脂           20g

蜂蜡               12g

                              

共制备             1000粒

处方2

银杏叶提取物       25g

丹参酮II_A磺酸钠    80g

大豆油             400g

大豆磷脂           20g

蜂蜡               12g

                               

共制备             1000粒

处方3

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    20g

大豆油             400g

大豆磷脂           20g

蜂蜡               12g

                              

共制备             1000粒

2、具体步骤：

(1)处方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蜡加热熔融，混匀，放冷；

(2)加入银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠，混匀，过胶体磨；

(3)取样，半成品化验；

(4)压制成软胶囊；

(5)成品全检，包装入库。

实施例9本发明药物组合物滴丸的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    40g

聚乙二醇6000       600g

处方2

银杏叶提取物       50g

丹参酮II_A磺酸钠    80g

聚乙二醇6000       600g

处方3

银杏叶提取物       25g

丹参酮II_A磺酸钠    60g

聚乙二醇6000       600g

2、具体步骤：

(1)聚乙二醇6000在水浴中加热熔融；

(2)聚乙二醇6000全部熔融后加入银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠，搅拌溶解；

(3)过60目筛过滤；

(4)保持60℃滴入冷至10℃以下的液体石蜡中制成丸；

(5)成品全检，包装入库。

实施例10本发明药物组合物口服液的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物       125g

丹参酮II_A磺酸钠    100g

聚山梨酯80         125g

苯甲酸钠           15g

甜菊甙             10g

水                 加至10000ml

                                 

共制备             1000支

处方2

银杏叶提取物       125g

丹参酮II_A磺酸钠    80g

聚山梨酯80         125g

苯甲酸钠           15g

甜菊甙             10g

水                 加至10000ml

                                     

共制备             1000支

处方3

银杏叶提取物       100g

丹参酮II_A磺酸钠    100g

聚山梨酯80         100g

苯甲酸钠           15g

甜菊甙             10g

水                 加至10000ml

                                     

共制备             1000支

2、具体步骤：

(1)聚山梨酯80配制成20％的水溶液，将银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠加入加热搅拌溶解完全；

(2)将苯甲酸钠和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全；

(3)合并上述两个溶液，补加水至全量；

(4)过0.8μm的微孔滤膜过滤；

(5)半成品化验；

(6)灌装；成品全检，包装入库。

实施例11本发明药物组合物颗粒的制备

1、处方：

处方1

银杏叶提取物           125g

丹参酮II_A磺酸钠        20g

糖粉                   1800.0g

2％HPMC50％乙醇溶液    适量

                                     

共制备                 1000包

处方2

银杏叶提取物           75g

丹参酮II_A磺酸钠        100g

糖粉                   1800.0g

2％HPMC50％乙醇溶液    适量

                             

共制备                 1000包

处方3

银杏叶提取物           100g

丹参酮II_A磺酸钠        40g

糖粉                   1800.0g

2％HPMC50％乙醇溶液    适量

                                

共制备                 1000包

处方4

银杏叶提取物           40g

丹参酮II_A磺酸钠         40g

糖粉                   1900.0g

2％HPMC50％乙醇溶液    适量

                               

共制备                 1000包

处方5

银杏叶提取物           40g

丹参酮II_A磺酸钠        80g

糖粉                   1900.0g

2％HPMC50％乙醇溶液    适量

                                

共制备                 1000包

处方6

银杏叶提取物         40g

丹参酮II_A磺酸钠      120g

糖粉                 1900.0g

2％HPMC50％醇溶液    适量

                                      

共制备               1000包

2、具体步骤：

(1)将蔗糖粉碎过100目筛备用；将银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠粉碎过100目筛备用；

(2)按照处方量称取原辅料；

(3)将银杏叶提取物、丹参酮II_A磺酸钠与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；

(4)过20目筛制颗粒；

(5)颗粒在60℃的条件下烘干；

(6)干颗粒过18目筛整粒；

(7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量；

(8)包装；成品全检，包装入库。

Claims (9)

1、一种药物组合物，其特征在于，该组合物由银杏叶提取物和丹参酮II_A磺酸钠组成，其重量配比为1∶0.08～8。

2、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠的重量配比为1∶0.2～4。

3、如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物与丹参酮II_A磺酸钠的重量配比为1∶0.4～2。

4、如权利要求1～3任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％，含总银杏酸不超过百万分之十。

5、如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物含总黄酮醇苷不低于24.0％、萜类内酯不低于6.0％，含总银杏酸不超过百万分之一。

6、如权利要求1～3任一项所述的药物组合物，在制备抗心脑血管疾病的药物中的用途。

7、如权利要求1～3任一项所述的药物组合物，其特征在于，该组合物可与药学上可接受的辅料制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。

8、如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，该组合物可与药学上可接受的辅料制成注射剂。

9、如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，该组合物可与药学上可接受的辅料制成口服制剂。