CN1886426A - 结合白细胞介素－4受体的抗体 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及结合IL－4受体的抗体、该抗体的片段、突变蛋白和衍生物、编码这些抗体、片段、突变蛋白和衍生物的核酸，和制备和使用这些抗体、片段、突变蛋白、衍生物和核酸的方法。用于治疗由白细胞介素4诱导的医学疾病的方法包括给罹患该疾病的患者施用IL－4受体结合抗体、或IL－4受体结合抗体的IL－4受体结合片段、突变蛋白或衍生物。此处提供的特定抗体包括人单克隆抗体。某些抗体同时抑制IL－4诱导的和IL－13诱导的生物学活性。

Description

结合白细胞介素-4受体的抗体
交叉引用相关申请
本申请要求2003年11月7日提交的美国临时申请号60/518,166的利益。
发明背景
白细胞介素-4(IL-4)，过去称为B细胞刺激因子或BSF-1，最初发现其特征在于响应低浓度的针对表面免疫球蛋白的抗体而刺激B细胞的增殖的能力。已显示IL-4具有非常广谱的生物学活性，包括对T细胞、肥大细胞、粒细胞、巨核细胞和红细胞的的生长共刺激。此外，IL-4刺激几种IL-2和IL-3依赖性细胞系的增殖，诱导静息B细胞上的II类主要组织相容性复合分子的表达，和增加经刺激的B细胞的IgE和IgG1同种型的分泌。IL-4与TH2型免疫应答关联，其是由TH2细胞分泌的一种细胞因子。
已鉴定和表征了鼠科动物和人IL-4，包括IL-4 cDNA的克隆和核苷酸以及被编码的氨基酸序列的确定。参见Yokota等人，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 83：5894；Noma等人，1986，Nature 319：640；Grabstein等人，1986，J.Exp.Med.163：1405；和美国专利5,017,691。
IL-4结合特定的细胞表面受体，这产生向细胞例如各种免疫效应细胞的生物学信号转导。在Mosley等人，1989，Cell 59：335-48，(murineIL-4R)；Idzerda等人，1990，J.Exp.Med.171：861-73，(human IL-4R)；和美国专利5,599,905中描述了IL-4受体、DNA和氨基酸序列信息。这些出版物中描述的IL-4受体有时被称为IL-4Rα。
已报导，其他蛋白与一些细胞类型上的IL-4Rα关联，据报导所述蛋白是多亚基IL-4受体复合物的组分。一种这样的亚基是IL-2Rγ，也称作IL-2Rγc。参见Sato等人，1994，Current Opinion in CellBiology，6：174-79中的对IL-4R复合物的描述。也已报导IL-4Rα是某些多亚基IL-13受体复合物的组分。参见，Zurawski等人，1995，J.Biol.Chem.270：13869；de Vries，1998，J.Allergy Clin.Immunol.102：165；和Callard等人，1996，Immunology Today，17：108。
IL-4涉及参与许多病症，其中的例子是过敏症和哮喘症。
发明简述
本发明提供了涉及新的IL-4R拮抗剂，特别是结合IL-4Rα的抗体和抗体衍物的方法和组合物。
在一个方面，本发明提供了抗体，其中轻链可变区包含与SEQ ID NO：4不同的氨基酸序列，其不同仅在于：至少一个选自S28T、S30N、S30G、S31N、S32D、S32N、A52T、S54Y、T57P、T57S、G93D、S94H、S94R、P96A、P97G和T99M的氨基酸替代，和任选地一个或多个选自E1D、L4M、S7T、G9A、K40R、F50Y、S68F、S77T、V86I、K105R、V106L和E107D的氨基酸替代，和/或重链可变区包含与SEQ ID NO：16不同的氨基酸序列，其不同仅在于：至少一个选自N58S、Y101W、F102Y、D103T、D103N、D103P、Y104H、Y104N、Y104W和Y104R的氨基酸替代，和任选地一个或多个选自Q6E、H13Q、G24A、R86S和M90T的氨基酸替代，其中所述抗体结合IL-4受体α。在一个实施方案中，轻链CDR1包含选自SEQ ID NO：6的残基24-35、SEQ ID NO：8的残基24-35、SEQ ID NO：10的残基24-35、SEQ ID NO：12的残基24-35和SEQ ID NO：14的残基24-35的序列，轻链CDR2包含选自SEQ ID NO：4的残基51-57、SEQ ID NO：6的残基51-57、SEQ ID NO：10的残基51-57、SEQ ID NO：12的残基51-57的序列，轻链CDR3包含选自SEQ ID NO：4的残基90-99、SEQ IDNO：6的残基90-99、SEQ ID NO：8的残基90-99、SEQ ID NO：14的残基90-99的序列，重链CDR1包含SEQ ID NO：16的残基31-35的序列，重链CDR2包含选自SEQ ID NO：16的残基50-65、SEQ ID NO：18的残基50-65的序列，和/或重链CDR3包含选自SEQ ID NO：16的残基98-104、SEQ ID NO：18的残基98-104、SEQ ID NO：20的残基98-104、SEQ ID NO：22的残基98-104、SEQ ID NO：24的残基98-104、SEQ IDNO：26的残基98-104、SEQ ID NO：30的残基98-104和SEQ ID NO：34的残基98-104的序列。在另一个实施方案中，轻链FR1包含选自SEQID NO：4的残基1-23、SEQ ID NO：10的残基1-23、SEQ ID NO：12的残基1-23和SEQ ID NO：14的残基1-23的序列，轻链FR2包含选自SEQ ID NO：4的残基36-50和SEQ ID NO：14的残基36-50的序列，轻链FR3包含选自SEQ ID NO：4的残基58-89、SEQ ID NO：10的残基58-89和SEQ ID NO：12的残基58-89的序列，轻链FR4包含选自SEQ IDNO：4的残基100-109、SEQ ID NO：8的残基100-109和SEQ ID NO：12的残基100-109的序列，重链FR1包含选自SEQ ID NO：16的残基1-30和SEQ ID NO：42的残基1-30的序列，重链FR2包含SEQ ID NO：16的残基1-30的序列，重链FR3包含选自SEQ ID NO：16的残基66-97、SEQ ID NO：18的残基66-97和SEQ ID NO：42的残基66-97的序列，和/或重链FR4包含SEQ ID NO：16的105-115残基的序列。
在另一个方面，本发明提供了这样的抗体，即其包含：包含与选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少80％的同一性的轻链可变结构域，条件是所述轻链可变结构域不包含SEQ ID NO：4的序列，和/或包含与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少80％的同一性的重链可变结构域，条件是所述重链可变结构域不包含SEQ ID NO：16的序列，其中所述抗体结合IL-4受体α。在一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含与选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少85％同一性的序列，和/或重链可变结构域包含与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少85％同一性的序列。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含与选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少90％的同一性的序列，和/或所述重链可变结构域包含与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少90％同一性的序列。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含与选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少95％的同一性的序列，和/或所述重链可变结构域包含与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少95％同一性的序列。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：6、8、10、12和14的序列，和/或所述重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列。
在另一个实施方案中，本发明提供了抗体，其中轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少15个连续氨基酸的序列，但条件是所述轻链可变结构域不包含SEQ ID NO：4的序列，和/或其中重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少15个连续氨基酸的序列，条件是所述重链可变结构域不包含SEQ ID NO：16的序列，其中所述抗体结合IL-4受体α。在一个实施方案中，轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少20个连续氨基酸的序列，和/或重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少20个连续氨基酸的序列。在另一个实施方案中，轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少25个连续氨基酸的序列，和/或重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少25个连续氨基酸的序列。在另一个实施方案中，轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少35个连续氨基酸的序列，和/或重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少35个连续氨基酸的序列。在另一个实施方案中，轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少50个连续氨基酸的序列，和/或重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少50个连续氨基酸的序列。在另一个实施方案中，轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少75个连续氨基酸的序列，和/或重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少75个连续氨基酸的序列。在另一个实施方案中，轻链可变结构域包含选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少100个连续氨基酸的序列，和/或重链可变结构域包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少100个连续氨基酸的序列。
在另一个实施方案中，本发明提供了这样的抗体，即其包含：包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列的轻链可变结构域，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的的核苷酸序列具有至少80％的同一性，和/或包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列的重链可变结构域，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少80％的同一性，条件是所述抗体不包含序列为SEQ ID NO：4的轻链可变结构域和序列为SEQ ID NO：16的重链可变结构域，其中所述抗体结合IL-4受体α。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少85％的同一性，和/或所述重链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少85％的同一性。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有序列至少90％的同一性，和/或所述重链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ I D NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少90％的同一性。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少95％的同一性，和/或所述重链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少95％的同一性。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少98％的同一性，和/或所述重链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核苷酸序列与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少98％的同一性。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含由选自SEQ ID NO：5、7、9、11和13的核苷酸序列编码的氨基酸序列，和/或所述重链可变结构域包含由选自SEQID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列编码的氨基酸序列。
在另一方面，本发明提供了这样的抗体，即其包含：包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列的轻链可变结构域，所述核苷酸序列在中等严紧条件下可与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列的互补序列杂交，和/或包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列的重链可变结构域，所述核苷酸序列在中等严紧条件下可与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列的互补序列杂交，条件是所述抗体不包含序列为SEQ ID NO：4的轻链可变结构域和序列为SEQ ID NO：16的重链可变结构域，其中所述抗体结合IL-4受体α。在一个实施方案中，所述轻链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核酸序列在严紧条件下可与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列的互补序列杂交，和/或所述重链可变结构域包含由核苷酸序列编码的氨基酸序列，所述核酸序列在严紧条件下可与选自SEQ IDNO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列的互补序列杂交。
在另一方面，本发明提供了分离的抗体，其中所述抗体的轻链可变区包含选自SEQ ID NO：6、8、10、12和14的氨基酸序列，并且所述抗体结合IL-4受体α。
在另一方面，本发明提供了分离的抗体，其中所述抗体的重链可变区包含选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的氨基酸序列，并且所述抗体结合IL-4受体α。
在另一方面，本发明提供了选自L2H1、L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1H11、L2H4、L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10和L2H11的抗体。
在另一方面，本发明提供了人、人源化或嵌合抗体。
在另一方面，本发明提供了单克隆抗体。
在另一方面，本发明提供了选自IgD、IgE、IgM、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和在铰链区具有至少一个突变的IgG4抗体，所述突变增加形成重链内二硫键抗体的可能性。
在另一方面，本发明提供了包含本发明的抗体的IL-4受体结合部分的分离的多肽。在一个实施方案中，所述多肽包含Fab、F(ab’)2、scFV、二体(diabody)、三体(triabody)或四体(tetrabody)。
在另一方面，本发明提供了这样的分离核酸，即其包含编码本发明的抗体的轻链、本发明的抗体的重链或本发明的多肽的核苷酸序列。
在另一方面，本发明提供了包含本发明的分离核酸的载体。在另一个实施方案中，所述载体是表达载体。
在另一方面，本发明提供了包含本发明的核酸的分离细胞。在一个实施方案中，所述细胞是杂交瘤。在另一个实施方案中，所述细胞是转基因细胞。
在另一方面，本发明提供了包含本发明的抗体的细胞。在一个实施方案中，所述细胞是杂交瘤。在另一个实施方案中，所述细胞是转基因细胞。
在另一方面，本发明提供了包含本发明的多肽的细胞。在一个实施方案中，所述细胞是转基因细胞。
在另一发面，本发明提供了制备本发明的抗体的方法，其包括将含有编码所述抗体的轻链的核酸和编码所述抗体的重链的核酸的细胞在允许所述细胞表达所述轻链和所述重链和允许所述轻链和所述重链组装成所述抗体的条件下进行孵育，和从所述细胞分离所述抗体。在一个实施方案中，所述细胞是杂交瘤。在另一个实施方案中，所述细胞是转基因细胞。
在另一方面，本发明提供了抑制IL-4受体的方法，其包括将表达IL-4受体α的细胞与本发明的抗体或本发明的多肽在允许所述抗体或所述多肽结合所述IL-4受体α的条件下进行接触。在一个实施方案中，所述细胞是人细胞。在另一个实施方案中，所述人细胞存在于人中。
在另一方面，本发明提供了治疗受试者中疾病的方法，其包括以对治疗所述疾病有效的量给所述受试者施用本发明的抗体或本发明的多肽。在一个实施方案中，所述疾病是炎症或癌症。在另一个实施方案中，所述炎症或癌症是免疫学疾病。在另一个实施方案中，所述疾病是哮喘、脓毒性关节炎、疮疹样皮炎、慢性自发性荨麻疹、溃疡性结肠炎、硬皮病、增生性瘢痕、Whipple′s病、良性***增生、IL-4受体在其中起作用的肺病、IL-4受体介导的上皮屏障破坏在其中起作用的病症、IL-4受体发挥作用的消化***病症、药物治疗的过敏反应、川崎病、镰状细胞病、Churg-Strauss综合征、Grave′s病、先兆子痫、斯耶格伦综合征、自身免疫性淋巴增殖综合征、自身免疫性溶血性贫血、巴雷特食管、自身免疫性色素膜炎、结核、囊性纤维化(cyctic fibrosis)、过敏性肺支气管霉菌病、慢性阻塞性肺病、博莱霉素诱导的肺病和纤维化、放射性诱导肺纤维样变性、肺泡蛋白沉积症、成人呼吸困难综合征、肉样瘤病、高IgE综合症、特发性嗜酸细胞过多综合征、自身免疫发疱病、寻常性天疱疮、大疱性类天疱疮、重症肌无力、慢性疲劳综合征或肾变病。
在另一方面，本发明提供了包含本发明抗体或本发明的多肽和赋形剂、稀释剂或缓冲剂的药物组合物。
附图简述
图1A-C表示人IL-4受体αcDNA的编码区的核苷酸序列。同时也提供了由所述cDNA编码的氨基酸序列。所述cDNA克隆分离自来源于人T细胞系T22的cDNA文库。如在PCT公开号WO 01/92340 A3中进一步描述的，编码蛋白包含(从N端至C端)N端信号肽，接着是细胞外结构域、跨膜区(下划线标出)和胞质结构域。图1A至1C中的核苷酸序列和氨基酸序列也分别示于SEQ ID NO：1和2中。
图2A-2D表示编码轻链可变区L1(SEQ ID NO：3)、L2(SEQ ID NO：5)、L3、(SEQ ID NO：7)、L4(SEQ ID NO：9)、L5(SEQ ID NO：11)和L6(SEQ ID NO：13)的多核苷酸序列，和编码重链可变区H1(SEQ IDNO：15)、H2(SEQ ID NO：17)、H3(SEQ ID NO：19)、H4(SEQ ID NO：21)、H5(SEQ ID NO：23)、H6(SEQ ID NO：25)、H7(SEQ ID NO：27)、H8(SEQ ID NO：29)、H9(SEQ ID NO：31)、H10(SEQ ID NO：33)、H11(SEQ ID NO：35)、H12(SEQ ID NO：37)、H13(SEQ ID NO：39)、H14(SEQ ID NO：41)、H15(SEQ ID NO：43)、H16(SEQ ID NO：45)、H17(SEQ ID NO：47)、H18(SEQ ID NO：49)、H19(SEQ ID NO：51)、H20(SEQ ID NO：53)、H21(SEQ ID NO：55)、H22(SEQ ID NO：57)、H23(SEQ ID NO：59)和H24(SEQ ID NO：61)的多核苷酸序列。所述序列使用单字母核苷酸缩写来表示。对应于CDR1、CDR2和CDR3区域的序列，针对每个序列用粗体类型显示并在L1和H1中用下划线标出，对应于FR1、FR2、FR3、和FR4的序列用普通(plain)类型显示。
图3表示轻链可变区L1(SEQ ID NO：4)、L2(SEQ ID NO：6)、L3、(SEQ ID NO：8)、L4(SEQ ID NO：10)、L5(SEQ ID NO：12)和L6(SEQ ID NO：14)的氨基酸序列，和重链可变区H1(SEQ ID NO：16)、H2(SEQ ID NO：18)、H3(SEQ ID NO：20)、H4(SEQ ID NO：22)、H5(SEQ ID NO：24)、H6(SEQ ID NO：26)、H7(SEQ ID NO：28)、H8(SEQID NO：30)、H9(SEQ ID NO：32)、H10(SEQ ID NO：34)、H11(SEQ IDNO：36)、H12(SEQ ID NO：38)、H13(SEQ ID NO：40)、H14(SEQ IDNO：42)、H15(SEQ ID NO：44)、H16(SEQ ID NO：46)、H17(SEQ IDNO：48)、H18(SEQ ID NO：50)、H19(SEQ ID NO：52)、H20(SEQ IDNO：54)、H21(SEQ ID NO：56)、H22(SEQ ID NO：58)、H23(SEQ IDNO：60)、和H24(SEQ ID NO：62)的氨基酸序列。使用单字母氨基酸缩写表示L1和H1可变区的序列。其他轻链和重链可变序列在其与L1或H1一致的残基处虚线标示，并在其与L1或H1相异的地方用单字母氨基酸缩写标示。对应于CDR1、CDR2和CDR3区域的序列，针对每个序列用粗体表示并在L1和H1中用下划线标示。对应于FR1、FR2、FR3和FR4的序列用普通类型表示。
发明详述
本发明提供了涉及抗IL-4受体(IL-4R)的抗体的组合物和方法，包括用于治疗某些由IL-4R介导的疾病和在体内抑制白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素13(IL-13)的生物学活性的方法。本发明的组合物包括，例如，抗IL-4R的抗体、多肽、多核苷酸、包含或表达本发明的抗体、多肽或多核苷酸的细胞，以及药物组合物，下面提供了这些组合物的例子。
使用标准的单或三字母缩写来表示多核苷酸或多肽序列。除非另外指出，多肽序列在左边表示其氨基末端而右边表示其羧基末端，单链核酸序列和双链核酸序列的上面的链在左边表示其5’末端而右边表示其3’末端。特定的多肽或多核苷酸序列也可通过解释其与参照序列的相异来进行描述。例如，短语“在S28T上不同于SEQ ID NO：4的多肽序列”描述了这样的序列，即其与SEQ ID NO：4除了SEQ ID NO：4的位点28上的丝氨酸残基被苏氨酸残基替代外完全相同。
图2和图3分别显示了特定轻链和重链可变区的多核苷酸和多肽序列，在图中它们被标记为例如L1(“轻链可变区1”)、H1(“重链可变区1”)等。将轻链和重链可变区的名称结合起来表示包含来自图3的轻链和重链的抗体。例如“L4H7，”表示包含L4的轻链可变区序列和H7的重链可变区序列的抗体。
根据Kabat等人Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，第5版，US Dept.of Health and Human Services，PHS，NIH，NIH Publication no.91-3242，1991中的方案定义“轻链可变结构域(或区)”、“重链可变结构域(或区)”、“CDR1、2和3”和“FR1、2、3和4”。
通过使用GAP计算机程序(GCG Wisconsin Package，version 10.3(Accelrys，San Diego，CA)的部分)利用其默认参数对序列进行比较来确定两个多核苷酸或两个多肽序列的“百分比同一性”。
如果生物学分子(例如多肽、抗体或核酸)充分地与其他生物学分子、细胞碎片和其他用于标准的实验室方案(例如结合或杂交测定法)的物质分离，那么其是“分离的”或“基本上被纯化的”。用于基本上纯化多肽、抗体和核酸的方法在本领域是熟知的。
术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”在本说明书中可交换使用，其是指包含通过肽键相互连接的两个或更多个氨基酸残基的分子。
术语“多核苷酸”、“寡核苷酸”和“核酸”在本说明书中可交换使用，其包括DNA分子(例如，cDNA或基因组DNA)、RNA分子(例如，mRNA)、使用核苷酸类似物(例如，肽核酸和非天然存在的核苷酸类似物)产生的DNA或RNA类似物、和其杂交产物。核酸分子可以是单链的或双链的。在一个实施方案中，本发明的核酸分子包含编码本发明的抗体、或其片段、衍生物、突变蛋白或变体的连续开放阅读框架。
如果可将两个单链核酸分子以反向平行方向排列，使一个序列中的每一个核苷酸正对另一序列中的其互补核苷酸而无空位的引入并且在两个序列的5’或3’末端无未配对的核苷酸，则其是各自的“互补物”。和给定的核苷酸序列“互补”的核酸分子是这样的核酸分子，即其和给定的核苷酸序列充分互补，使其在中等严紧条件下可与给定的核苷酸序列杂交。因此，核酸可与另一个核酸互补而无需是其互补物。
“载体”是可用于将另一个连接至其上的核酸导入细胞的核酸。载体的一种类型是“质粒”，其是指可将另外的核酸片段连接入其中的线性或环形双链DNA分子。载体的另一种类型是病毒载体(例如，复制缺陷型逆转录病毒、腺病毒和与腺相关病毒)，其中可将另外的DNA片段导入所述病毒基因组中。某些载体在其被导入的宿主细胞中自主复制(例如，包含细菌复制起始位点的细菌载体和附加型哺乳动物载体)。其他载体(例如，非附加型哺乳动物载体)可通过将其导入宿主细胞而整合入宿主细胞的基因组中，从而随所述宿主的基因组一起复制。“表达载体”是能够指导被选择的多核苷酸表达的载体类型。
如果调控序列影响核苷酸序列的表达(例如，表达的水平、时序或定位)，那么所述核苷酸序列被“有效地连接”至调控序列。“调控序列”是影响核酸表达(例如，表达的水平、时序或定位)的核酸。调控序列可以例如对被调控的核酸直接施加影响，或通过一个或多个多肽(例如结合所述调控序列和/或所述核酸的多肽)的作用影响所述核酸。调控序列的例子包括启动子、增强子和其他表达控制元件(例如，聚腺苷化信号)。在例如Goeddel，1990，Gene Expression Technology：Methods in Enzymology 185，Academic Press，San Diego，CA和Baron等人，1995，Nucleic Acids Res.23：3605-06中描述了调控序列的其他例子。
“宿主细胞”是能够用于表达核酸例如本发明的核酸的细胞。宿主细胞可以是原核细胞，例如，大肠杆菌(E.coli)，或其可以是真核细胞，例如，单细胞真核细胞(例如，酵母或其他真菌)、植物细胞(例如，烟草或蕃茄植物细胞)、动物细胞(例如，人细胞、猴细胞、仓鼠细胞、大鼠细胞、小鼠细胞或昆虫细胞)或杂交瘤。宿主细胞的例子包括猴肾细胞的COS-7系(ATCC CRL 1651)(参见Gluzman等人，1981，Cell 23：175)、L细胞、C127细胞、3T3细胞(ATCC CCL 163)、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或其衍生物例如生长在无血清培养基上的VeggieCHO和相关细胞系(参见Rasmussen等人，1998，Cytotechnology 28：31))或DHFR缺陷的CHO品系DX-B11(参见Urlaub等人，1980，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77：4216-20)、HeLa细胞、BHK(ATCC CRL 10)细胞系、来源于非洲绿猴肾细胞系CV1(ATCC CCL 70)的CV1/EBNA细胞系(参见McMahan等人，1991，EMBO J.10：2821)、人胚胎肾细胞例如293、293EBNA或MSR 293、人表皮A431细胞、人Colo205细胞、其他转化的灵长类动物细胞系、正常的二倍体细胞、来源于体外培养的初生组织、原代外植体的细胞系、HL-60、U937、HaK或Jurkat细胞。一般地，宿主细胞是可用编码多肽的核酸转化或转染的培养细胞，所述核酸在转化或转染后可在宿主细胞中表达。短语“重组宿主细胞”可用于表示已用待表达的核酸转化或转染的宿主细胞。宿主细胞也可以是包含核酸但不以想要的水平表达其的细胞，除了在将调控序列导入宿主细胞以使其有效地连接所述核酸的情况下。应当理解术语宿主细胞不仅是指特定的受试细胞，还表示这种细胞的后代或潜在的后代。因为由于突变或环境影响而在随后的世代中可能发生某些修饰，这样的后代实际上可能与亲本细胞不同，但仍包括在此处使用的术语的范围之内。
“嵌合抗体”是指这样的抗体，即其一部分重链和/或轻链与来自特定种或属于特定抗体种类或亚类的抗体同一、同源或来源于其，而链的其余部分与来自另一种或属于另一抗体种类或亚类的抗体同一、同源或来源于其。也包括显示想要的生物学活性(即，特异地结合IL-4受体的能力)的这些抗体的片段。参见，美国专利号4,816,567和Morrison，1985，Science 229：1202-07。
“CDR嫁接(grafted)抗体”是指这样的抗体，即其包含一个或多个来源于特定种的抗体或同种型的CDRs和相同或不同种的另一抗体或同种型的构架。
“多重特异性抗体”是指这样的抗体，即其识别一种或多种抗原上的超过一种的抗原表位。该类型抗体的亚类是识别在相同或不同抗原上的两种不同抗原表位的“双特异性抗体”。
多肽(例如，抗体)的“变体”包含这样的氨基酸序列，即其和另一多肽序列相比，在所述氨基酸序列中***、缺失和/或替代了一个或多个氨基酸残基。本发明的变体包括融合蛋白。
多肽的“衍生物”是指以一些不同于***、缺失或替代变体的方式，例如，通过缀合至另一化学部分的方式进行化学修饰的多肽(例如，抗体)。除非另外指出，术语“抗体”除了包含两条全长重链和两条全长轻链的抗体以外还包括其衍生物、变体、片段和突变蛋白，下面描述了其例子。
如果分子(例如，抗体)以比所述分子和与IL-4受体无关的多肽结合的亲和力至少高10倍的亲和力结合IL-4受体或其片段，那么所述分子“特异性地结合IL-4受体”。
“抗原结合结构域”或“抗原结合区”是抗体分子的部分，该部分含有与抗原相互作用并为抗体提供其针对抗原的特异性和亲和力的氨基酸残基(或其他部分)。
“表位”是被抗体结合的分子部分。表位可包括分子的非连续部分(例如，在多肽中，在所述多肽的序列上相互之间不连续但在分子整体上一起被抗体结合的氨基酸残基)。
适应症
在一个方面，本发明提供了治疗、预防、治愈、减缓或改善疾病、病症、症状或病痛的方法。其中根据本发明进行治疗的疾病是在下面更详细地描述的哮喘、浓毒性/反应性关节炎、疮疹样皮炎、慢性自发性荨麻疹、硬皮病、增生性瘢痕、whipple’s病、良性***增生、IL-4在其中起作用的肺病、其中IL-4诱导的上皮屏障破坏产生作用的疾病、其中IL-4产生作用的消化***病症(包括炎性肠疾病和其他胃肠道中的炎性疾病)、对药物的过敏性反应、川崎病、镰状细胞病(包括镰状细胞危机)、Churg-Strauss综合征、Grave′s病、先兆子痫、斯耶格伦综合征、自身免疫性淋巴增殖综合征、自身免疫性溶血性贫血、巴雷特食管、自身免疫性色素膜炎、结核和肾变病。IL-4R拮抗剂也用作过敏性免疫治疗法的佐剂和用作疫苗佐剂。
在下面描述适合用于治疗这些疾病的抗体的例子，包括例如结合IL-4R和抑制IL-4与其结合的抗体。特别有用的抗体也抑制IL-13和IL-13受体(IL-13R)的结合。本发明的特定实施方案包括新的抗体和抗体衍生物、片段、突变蛋白和变体、多肽、核酸分子、细胞、制备前述物质的方法、抑制IL-4Rα和治疗受试者的方法，下面描述了其例子。
在一个方面，本发明提供了包括给受试者施用IL-4Rα抗体的方法。在一个实施方案中，受试者罹患由IL-4Rα的活性直接或间接引起的、诱导的、介导的、增强的、恶化或影响的症状(包括，例如，病痛、感染、损伤、疾病或病症)，或处在发展所述病症的风险中。这些疾病包括，例如，由IL-4和/或IL-13直接或间接引起的、诱导的、介导的、增强的、恶化的或影响的疾病。其他因子或细胞因子也可在这些疾病中起作用。
IL-4的生物学活性通过与称为白细胞介素4受体(IL-4R)的特异性细胞表面受体结合来进行介导。IL-4诱导的疾病包括因生物学反应而产生的疾病，所述生物学反应因IL-4和细胞上的天然IL-4受体的结合而产生，或通过阻止IL-4与IL-4受体的结合而可以被阻止或抑制。可被治疗的疾病包括，但不限于，医学疾病，其特征在于IL-4或一个或多个IL-4R或IL-13R的组分的非正常表达(包括，例如，在特定的组织或细胞类型中过量表达、错误表达(misexpression)，或在特定的发育阶断错误表达)，或其特征在于针对IL-4产物的异常的宿主反应。其他的例子是这样的疾病，即IL-4诱导的抗体产生、或特定细胞类型的增殖或流入在其中起作用。IL-4诱导的疾病包括这样的病症，即IL-4在该疾病中诱导IL-4受体的上调或诱导另一种在该疾病中起作用的蛋白(例如，另一种细胞因子)的产生增加。
用于治疗哺乳动物(包括患有这种医学病症的人受试者)的方法包括给哺乳动物施用抗IL-4R的抗体或其衍生物，或例如以离体的方法将哺乳动物的IL-4R与抗体或衍生物接触。在例如2001年5月1日提交的USSN 09/847,816(其相关的公开内容在此引用作为参考)中描述了可根据本发明进行治疗的疾病。这些疾病包括，但不限于，哮喘、脓毒性/反应性关节炎、疮疹样皮炎、荨麻疹(特别是慢性自发性荨麻疹)、溃疡、胃炎、粘膜炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病、炎性肠疾病、其他IL-4在其中起作用的消化***病症(例如，IL-4诱导的部分胃肠道的炎症)、IL-4诱导的上皮屏障破坏在其中起作用的病症(例如，特征在于肺或胃肠道中上皮屏障功能降低的病症)、硬皮病、增生性瘢痕、Whipple′s病、良性***增生、IL-4诱导的肺病(包括列于下面的病症)、对药物的过敏性反应、川崎病、镰状细胞病或危机、Churg Strauss综合征、Grave′s病、先兆子痫、斯耶格伦综合征、自身免疫性淋巴增殖综合症、自身免疫性溶血性贫血、巴雷特食管、自身免疫性色素膜炎、结核、肾变病、寻常性天疱疮或大疱性类天疱疮(自身免疫发疱病)和重症肌无力(自身免疫性肌肉病)。
抗IL-4R的抗体，和其衍生物，也用作过敏性免疫治疗法的佐剂和用作疫苗佐剂。因此，抗IL-4R的抗体可用作佐剂进行过敏性免疫治疗法治疗。抗IL-4R的抗体另外用作疫苗的佐剂，例如用于癌症疫苗和感染性疾病疫苗的佐剂。IL-4佐剂的使用，特别是当将免疫应答指向TH1应答时将有利于靶向或预防所述疾病。
脓毒性/反应性关节炎
抗IL-4R的抗体可用于治疗脓毒性关节炎，其也被称为反应性关节炎或细菌性关节炎。脓毒性关节炎可由这些微生物例如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)、耶尔森氏菌属(Yersinia)，例如，小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y.enterocolitica)、沙门氏菌属(Salmonella)，例如，肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)、志贺氏菌属(Shigella)和弯曲杆菌属(Campylobacter)感染引发(造成，或作为结果发生)。已报道S.aureus是人脓毒性关节炎的主要病原体，其造成大多数病症。
IL-4和IL-4依赖性Th2应答在促进脓毒性关节炎中起作用。可根据本发明将抗IL-4R的抗体用来抑制IL-4，也可在患有脓毒性关节炎或有可能发生脓毒性关节炎的患者中用来抑制Th2应答。
通过抑制对细菌的清除，IL-4在关节处增加细菌的数量和细菌持续性。抗IL-4R的抗体可用来帮助清除与反应性关节炎相关的细菌，从而减少临床表征例如关节肿胀。可将抗IL-4R的抗体给患有脓毒性关节炎的人受试者施用以减缓IL-4介导的关节炎症。一个方法是将拮抗剂注射入关节，例如注射入膝盖内的滑液中。
使用抗IL-4R的抗体，通过抑制TH2应答和促进抗感染的TH1应答可有利于患有(或可能发生)脓毒性关节炎的受试者。TH2细胞因子可促成关节内细菌持续存在，而TH1应答发挥消除细菌的作用。
可将抗体给感染了细菌或其他微生物(例如上面列出的细菌或微生物)的受试者施用以阻止脓毒性关节炎的发展。例如，可在经诊断发生了这样的感染之后，但在脓毒性关节炎的临床症状发生之前施用抗体。
Whipple’s病
Tropheryma whippelii是Whipple’s病(也称作肠原性脂肪代谢障碍和嗜脂性肉芽肿)的致病细菌。所述疾病的特征在于脂肪痢、通常无显著特点的***病、关节炎、发烧和咳嗽。在Whipple’s病患者中还报道了在jejunal lamina propria中存在大量的“泡沫”巨噬细胞，和含有呈周期性希夫酸(acid-schiff)阳性的颗粒(在电子显微镜下呈杆状)的淋巴节(Steadman′s Medical Dictionary，第26版，Williams & Wilkins，Baltimore，MD，1995)。
使用抗IL-4R的抗体，通过恢复患者的TH1和TH2免疫应答的组分之间的正常平衡可有益于患有(或可能发生)Whipple’s病的受试者。增加IL-4(TH2型细胞因子)的产生和减少的某些TH1型细胞因子水平与Whipple’s病相关。TH2细胞因子可促进细菌的持续性，而TH1应答在清除致病细菌中发挥作用。可给感染有T.Whippell1的受试者施用IL-4R拮抗剂，无论所述受试者是否表现Whipple’s病的临床症状。
疮疹样皮炎
疮疹样皮炎，也称作Duhring’s病，是种慢性皮肤病，其特征在于水泡状皮肤损伤(blistering skin lesions)、皮肤IgA沉积和发痒。患者患有由Th2免疫应答介导的、伴有与谷蛋白相关的敏感性肠病的immunobullous皮肤病。根据本发明施用抗IL-4R的抗体以抑制IL-4和Th2应答，从而促进当前伤口的愈合和减少或防止水泡在伸肌体表面形成。
增生性瘢痕
根据本发明，给患有或易于发生增生性瘢痕的受试者施用抗IL-4R的抗体。在此处提供的一个方法中，给具有烧伤的受试者施用抗IL-4R的抗体。据信针对烧伤和其他损伤的免疫应答在增生性瘢痕的发病机理中起作用。已报道在患有增生性瘢痕的烧伤患者中，TH2型细胞因子(包括IL-4)产生增加而某些TH1型细胞因子水平降低。使用抗IL-4R的抗体，通过抑制TH2型免疫应答可有益于患有(或可以发生)增生性瘢痕的患者。
荨麻疹
荨麻疹，特别是其慢性形式例如慢性自发性荨麻疹(CIU)，可用本发明的抗IL-4R的抗体进行治疗。CIU患者具有比对照更高的IL-4血清水平，并且可能具有占优势的TH2型细胞因子特性(profile)。肥大细胞和Th2型T细胞被认为是慢性荨麻疹中的主要效应器细胞。IL-4刺激肥大细胞增殖。肥大细胞脱粒导致组氨酸释放，随后引起红斑、嗜曙红细胞增多、皮肤发红和痒。施用抗IL-4R的抗体以抑制IL-4和减少TH2型应答，从而帮助控制受试者的荨麻疹。
溃疡性结肠炎：胃肠道的其他病症
IL-4涉及溃疡性结肠炎的发病机理。在患有该疾病的患者的结肠粘膜中，Th2型细胞因子(包括IL-4)占有优势。使用抗IL-4R的抗体抑制TH2应答可减轻该疾病。
除了溃疡性结肠炎外，其他胃肠道或消化***疾病可用抗IL-4R的抗体进行治疗。这些疾病的例子包括，但不限于，炎性肠病(IBD)，其伴有溃疡性结肠炎和IBD、胃炎、溃疡和粘膜炎形式的克罗恩病。
任何IL-4在其中起作用的胃肠疾病可用本发明的抗IL-4R的抗体进行治疗。例如，包括IL-4诱导的部分胃肠道的炎症的疾病可用抗IL-4R的抗体治疗。特定的实施方案用来治疗胃肠道中慢性炎症疾病。
其他实施方案用来治疗IL-4诱导的屏障破坏起作用的疾病，例如特征在于至少部分胃肠道中的上皮屏障功能降低的疾病。这些疾病可包括例如由IL-4直接或间接诱导的对上皮的破坏。
肠上皮细胞在腔和粘膜下层之间形成相对不可通透的屏障。该上皮屏障的破坏与疾病例如炎性肠疾病相关。参见Youakim，A.和M.Ahdieh(Am.J.Physiol.276(Gastrointest.Liver Physiol.39)：G1279-G1288，1999)，此处以其全文引用作为参考。被破坏的或“渗漏的”屏障可允许抗原穿过屏障，然后其引起可导致胃肠组织进一步损伤的免疫应答。这样的免疫应答可包括招募例如嗜中性细胞和T细胞。可施用抗IL-4R的抗体以抑制不想要的对免疫应答的刺激。
肺病
此处提供用于治疗IL-4诱导的肺病的方法。这些疾病包括，但不限于，包括慢性纤维样变性肺病的肺纤维样变性、其他特征在于IL-4诱导的成纤维细胞增殖或胶原在肺中积累的疾病、TH2型免疫应答在其中起作用的肺病、特征在于肺中屏障功能降低(例如，由IL-4诱导的对上皮细胞的破坏造成的)的疾病、或IL-4在炎症应答在其中起作用的疾病(例如，哮喘)。
囊肿性纤维化的特征在于粘液的过量产生和慢性感染的发展。抑制IL-4和Th2应答将减少粘液的产生和帮助控制感染疾例如过敏性支气管肺曲霉病(ABPA)。
过敏性肺支气管真菌病主要发生在患有囊肿性纤维化或哮喘的患者中，在这些疾病中Th2免疫应答占优势。抑制IL-4和Th2应答将帮助消除和控制这些感染。
慢性阻塞性肺病与粘液分泌过多和纤维样变性相关。抑制IL-4和Th2应答将减少粘液的产生和纤维状的发展，从而改善呼吸功能和延缓疾病进程。
博来霉素诱导的肺病和纤维样变性以及辐射诱导的肺纤维样变性是特征在于肺的纤维样变性的疾病，肺的纤维样变性表现为Th2、CD4+细胞和巨噬细胞的流入，所述细胞产生接下来介导纤维样变性的发生的IL-4。抑制IL-4和Th2应答将减少或预防这些疾病的发生。
肺泡蛋白质沉积症的特征在于表面活性物质清除的破坏。IL-4增加表面活性物质的产生。使用抗IL-4R的抗体可减少表面活性物质的产生和降低对整个肺灌洗的需求。
成年呼吸困难综合征(ARDS)可由许多因素导致，其中一个是暴露于有毒化学物质中。一个对ARDS易感的患者群体是依靠呼吸机的危重病患者。ARDS在这些患者中是常见的并发病。通过减少炎症和粘着分子，抗IL-4R的抗体治疗法可减缓ARDS，但本发明的用于治疗这些患者的方法不受特定作用机理的限制。抗IL-4R的抗体可用于预防或治疗ARDS。
肉样瘤病的特征在于肉芽肿性损伤。此处涉及使用抗IL-4R抗体治疗肉样瘤病，特别是肺肉样瘤病。
可用抗IL-4R的抗体治疗IL-4诱导的屏障破坏在其中起作用的疾病(例如，特征在于在肺中上皮屏障功能降低的疾病)。在肺中，IL-4可直接或间接地诱导对上皮屏障的破坏。肺中的上皮细胞发挥着防止肺腔中的内容物进入粘膜下层的选择性屏障的作用。被破坏的或“渗漏的”屏障允许抗原穿过屏障，从而引起可导致进一步破坏肺组织的免疫应答。这样的免疫应答可包括例如招募嗜酸性粒细胞或肥大细胞。可施用抗IL-4R的抗体以抑制这种不想要的免疫应答刺激。
抗IL-4R的抗体可用于促进肺上皮细胞的愈合，从而恢复屏障功能。抗IL-4R的抗体可用于在例如哮喘症中促进肺上皮细胞的愈合。可选择地，为了预防目的，施用拮抗剂以抑制IL-4诱导的对肺上皮细胞的损伤。
结核
TH2型免疫应答参与在结核(TB)患者中引起组织损害(例如，肺细胞坏死)。提高的IL-4水平与TB关联。在空洞结核(即，在已发展成肺空洞的TB患者中，肺空洞可通过如胸部放射显影术等技术进行检查/观察)中，IL-4产量可被显著地提高。
通过抑制TH2型免疫应答，抗IL-4R的抗体可有益于TB患者(特别是具有空洞TB的患者)。然而，根据本发明用于治疗这些受试者的方法不受特定的作用机制的限制。有利地以恢复想要的TH1和TH2免疫应答组成之间的平衡的量施用抗IL-4R的抗体，在患者中减少IL-4诱导的组织破坏。
Churg-Strauss综合征
Churg-Strauss综合征，也称作变应性肉芽肿性血管炎(allergicgranulomatous angiitis)的疾病，特征在于具有哮喘或过敏史的人中和患有嗜曙红细胞过多的人中的血管炎症。可施用抗IL-4R的抗体以减轻患有该综合征的受试者的炎症。使用抗IL-4R的抗体来抑制TH2型免疫应答和对抗嗜曙红细胞过多，将有益于受试者。
先兆子痫(pre-eclampsia)
先兆子痫是怀孕后期的毒血症。该病特征在于在怀孕的第三阶段血压急剧升高，通常伴随着水肿和蛋白尿。
提高的TH1型和TH2型免疫应答可在所述疾病中起作用。此处提供的一个方法包括给已发生先兆子痫的孕妇施用抗IL-4R的抗体。以足以将IL-4(或TH2型细胞因子全体的)水平减少至在怀孕期间被认为是正常的水平的量和时间施用抗IL-4R。一般地，在整个怀孕期间反复施用IL-4R。
硬皮病
根据本发明给患有硬皮病的患者施用抗IL-4R的抗体。所述抗体在患者中减少IL-4诱导的通过成纤维细胞的胶原合成。可将抗体用于预防或减少硬皮病患者的皮肤和肺组织以及其他发生纤维样变性的组织，抑制这些组织中的胶原合成，和用于治疗与硬皮病相关的肺病。
良性***增生
良性***增生(BPH)，也称作良性***肥大，可用抗IL-4R的抗体进行治疗。尽管不希望被特定的作用机制束缚，通过抑制IL-4诱导的炎症或通过抑制TH2型免疫应答，施用抗IL-4R的抗体可益于患有BPH的受试者。
Grave’s病
针对促甲状腺素受体的抗体在Grave’s病中起着重要作用，该疾病的特征在于甲状腺功能亢进。对Grave’s病患者中细胞因子产生的研究显示存在向TH2型细胞因子应答的偏移。使用抗IL-4R的抗体抑制TH2型免疫应答和抑制抗体产生将有益于Grave’s病患者。
镰状细胞病
镰状细胞病患者通常经历称为危象的间歇性急性恶化，所述危象被分类为贫血性或血管性闭塞。抗IL-4R的抗体用于治疗或预防镰状细胞危象，特别是具有提高的IL-4水平或免疫应答已偏向于TH2型应答的受试者中的镰状细胞危象。镰状细胞病(特别是镰状细胞危象)与增加的对感染性疾病(包括细菌性感染)的易感性关联。给镰状细胞病患者施用抗IL-4R的抗体可帮助患者提高针对感染性疾病的免疫应答。
斯耶格伦综合征
称作斯耶格伦综合征或sicca综合征的自身免疫疾病通常同时具有干眼和干嘴以及***病症例如类风湿关节炎、狼疮、硬皮病或多肌炎。绝大部患者是中年(或老年)女性。斯耶格伦综合征是腺(例如，泪腺和唾液腺)和身体的其他组织的炎性疾病。所述综合征通常与自身抗体的产生有关。
可施用抗IL-4R的抗体以在这些受试者中降低炎症应答(例如腺的炎症，包括泪腺)。通过抑制TH2型免疫应答，抗IL-4R的抗体可有益于斯耶格伦综合征患者。然而，根据本发明用于治疗受试者的方法不受限于特定的作用机制。
自身免疫淋巴增殖性综合征
自身免疫性淋巴增殖综合征的表现包括淋巴增殖和自身抗体的产生。据报道患有所述综合征的患者在编程性细胞死亡上具有遗传性缺陷。通过抑制TH2型免疫应答，抗IL-4R的抗体可有益于患有该综合征的受试者。然而，根据本发明用于治疗这些受试者的方法不受特定的作用机制的限制。
自身免疫性溶血性贫血
过量的IL-4分泌和TH1型细胞因子的缺乏被认为导致自身免疫性溶血性贫血的发病机理。根据本发明施用抗IL-4R的抗体，通过减少自身抗体的产生和通过恢复TH1和TH2免疫应答组成之间的更加正常的平衡有益于患者。
自身免疫性色素膜炎
色素膜炎包括色素膜(通常认为包括虹膜、睫状体和脉络膜等一起)的炎症。过量的IL-4分泌涉嫌在该威胁视力的炎性眼疾的发病机理中起作用。根据本发明，将抗IL-4R的抗体给患有或有可能发展色素膜炎的受试者施用。在一个实施方案中，将抗IL-4R的抗体给患有自身免疫色素层巩膜炎(uveoretinitis)的个体施用。
川崎病
川崎病(KD)，也称作粘膜皮肤淋巴节综合征，主要侵害青少年。该病的特征在于衬在唇和口腔中的粘膜的特定改变和扩大的、柔软的淋巴腺。综合征通常包括发烧、结膜炎、口腔粘膜和唇的炎症、颈部肿腺、和覆盖手和脚导致手和脚上的皮肤***、肿胀和剥离的疹。在患有川崎病(KD)的青少年中，可产生动脉炎症(脉管炎)。由于所述疾病对血管***的影响，据报道KD是青少年中获得性心脏病的主要原因。
可对患有川崎病的受试者施用抗IL-4R的抗体。过量的IL-4分泌和TH1型细胞因子的缺乏导致疾病的发病。
巴雷特食管
巴雷特食管是特征在于衬在食管下部的上皮组织中的细胞的改变(作为辐射的结果)。频繁的胃部内容物回流入食管，随着时间的推移，可导致巴雷特食管。患有巴雷特食管的患者有可能会发展食管癌(例如，腺癌)。尽管不希望受特定作用机制的束缚，施用抗IL-4R的抗体，通过抑制TH2型免疫应答可有益于患有巴雷特食管的受试者。在一个实施方案中，给患有食管炎的受试者施用抗IL-4R的抗体以阻止巴雷特食管的进程。
肾变病
肾变病，也称作肾病综合征，是非炎性和非恶性肾病。在称为最小改变肾变病的疾病中，肾小球损害(据信由于肾小球内脏上皮细胞的结构性变化而产生的)导致包括蛋白尿的异常。TH2型免疫应答(特别是TH2型细胞因子IL-4和IL-13的分泌)涉嫌在最小改变肾变病的发病中起作用。
其他适应症
其他可根据本发明进行治疗的疾病的例子包括但不限于下列。抗IL-4R的抗体可用于治疗或预防高IgE综合征、特发性嗜酸细胞过多综合征、对药物的过敏性反应、自身免疫性发疱病(例如，寻常性天疱疮或大疱性类天疱疮)、重症肌无力重症肌无力(自身免疫肌肉疾病)和慢性疲劳综合征。抗IL-4R的抗体可用于治疗GVHD；和其他治疗剂一起用于治疗GVHD的方法在下面进行描述。抗IL-4R的抗体也用于治疗或预防由药物例如双氯芬酸(非固醇类抗炎药物)诱导的肝毒性。
抗IL-4R的抗体可用作进行过敏性免疫治疗法治疗(allergyimmunotherapy treatment)的佐剂。抗IL-4R的抗体另外用作疫苗佐剂，例如癌症疫苗和感染性疾病疫苗佐剂。当提高TH1型免疫应答对预防或治疗正在施用疫苗进行治疗的疾病有益时，使用抗IL-4R的抗体特别有利。当想要降低抗体介导的免疫应答和/或促进T细胞介导的免疫应答时，可使用抗IL-4R的抗体。
抗IL-4R的抗体
在一个方面，本发明提供了结合IL-4受体α例如人IL-4受体α的抗体和其片段、衍生物、突变蛋白和变体。
根据本发明可使用的抗IL-4R的抗体包括抑制IL-4生物学活性的抗体。这类生物学活性的例子包括与另一种受体成分(例如，IL-2Rγ或IL-13Rα)缔合、结合(单独地或作为多聚体受体复合物的部分)信号转导分子(例如，IL-4或IL-13)以及转导对结合信号转导分子作出响应的信号。
不同的抗IL-4R的抗体可结合IL-4R的不同结构域或表位，或通过不同的作用机制发挥作用。例子包括但不限于干扰IL-4和IL-4R结合的或抑制信号转导的抗体。作用的位置可以是例如，细胞内(例如，通过干扰细胞内信号级联放大)或细胞外。在本发明中，抗体不需要通过完全抑制IL-4诱导的活性来实现用途；相反地，预期也使用减少IL-4的特定活性的抗体。
上面提到的关于抗IL-4R的抗体在治疗特定疾病中的特定作用机理的描述仅是举例说明性的，此处提供的方法不受其限制。抗IL-4R的抗体改善疾病的作用机制不受限于上述机理。
抗IL-4R的抗体可抑制IL-4介导的参与免疫或炎症应答的细胞的流入。抗体可通过例如减少特定细胞类型的增殖、活化、迁移、流入或积累，或通过抑制可直接或间接归因于特定细胞类型的生物学应答来发挥作用。特定细胞类型的例子是成纤维细胞、肥大细胞和嗜曙红细胞。
如上面所描述的，一些疾病可通过抑制TH2型免疫应答来治疗。IL-4R与TH2应答有关，并且是一种由2型T辅助细胞(TH2)分泌的细胞因子。可施用抗IL-4R的抗体以减少TH2型免疫应答。据说IL-4R抗体可减少TH2细胞的增殖，抑制TH2应答，将免疫应答移向TH1应答，或促进TH1型应答。可将其他TH2型细胞因子的拮抗剂，例如IL-5、IL-10或IL-13，额外地给患有与这些细胞因子的水平提高有关的疾病的受试者施用。在受试者中例如在受试者的血清中测量这些细胞因子含量的技术是已知的。
本发明的一个实施方案是涉及用于抑制IL-4诱导的对上皮的破坏的方法，其包括给患有或可能发展疾病的受试者施用抗IL-4R的抗体，IL-4介导的上皮屏障破坏在所述疾病中起作用。
此处提供的方法的特定实施方案包括施用抗IL-4R的抗体以抑制IL-4诱导的胃肠道或肺中的上皮的破坏。这些方法可用于预防上皮破坏，或恢复上皮屏障功能(即，促进上皮的修复或愈合)。可通过许多合适的测定方法(例如此处描述的方法)中的任何一种方法验证抗IL-4R的抗体抑制IL-4诱导的对上皮的破坏的能力。
任何与感染有关的(或因此而引发的)炎症也可用抗IL-4R的抗体进行治疗。例如，可施用抗体以抑制任何IL-4诱导的炎症应答组分，所述炎症应答是因胃肠道内微生物的感染而产生的。
两种或更多种抗体或抗体衍生物的组合，或抗体或抗体衍生物和一种或多种其他IL-4、IL-13、IL-4R和/或IL-13R拮抗剂(如在例如美国专利5,599,905、5,840,869、5,856,296、5,767,065、5,717,072、6,391,581、5,710,023、Idzerda等人，1990，J.Exp.Med.171：861-73和Mosley等人，1989，Cell 59：335-48中所描述的，此处以其全文引用作为参考)的组合可用于本发明的方法和组合物。
可使用寡核苷酸位点特异性诱变方法以提供经改变的基因，所述经改变的基因具有特定的按照所要求的替代、缺失或***进行改变的密码子。在Walder等人，1986，Gene 42：133；Bauer等人，1985，Gene 37：73；Craik，BioTechniques，January 1985，12-19；Smith等人，1981，Genetic Engineering：Principles and Methods，Plenum Press；和美国专利号4,518,584和4,737,462中描述了用于制备这些改变的技术的例子。这些技术和其他方法可用于制备例如抗IL-4R的抗体的衍生物，所述衍生物与未衍生化的抗体相比具有例如增加的对IL-4R的亲和力、抗体亲抗源性(avidity)或特异性。
本发明范围内的抗IL-4R的抗体的其他衍生物包括抗IL-4R的抗体或其片段与其他蛋白或多肽的共价或聚集缀合物，例如通过重组融合蛋白的表达产生的产物，所述重组融合蛋白包含融合于抗IL-4R的抗体多肽的N末端或C末端的异源多肽。例如，经缀合的肽可以是异源信号(或前导区)多肽，例如，酵母α因子前导区，或肽例如表位标记物。含有抗IL-4R的抗体的融合蛋白可包含被加入以方便纯化或鉴定抗IL-4R的抗体的肽(例如，多组氨酸)。也可将抗IL-4R的抗体多肽连接至Hopp等人，Bio/Technology 6：1204，1988和美国专利5,011,912中描述的FLAG肽Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DYKDDDDK)(SEQ ID NO：69)。FLAG肽具有高度的抗原性并提供被特异性单克隆抗体(mAb)可逆结合的表位，以使能快速测定和容易地纯化被表达的重组蛋白。用于制备在其中将FLAG肽融合至给定多肽的融合蛋白的试剂可商购获得(Sigma，St.Louis，MO)。
含有一个或多个抗IL-4R的抗体多肽的寡聚体可用作IL-4R拮抗剂。寡聚体可以共价连接或非共价连接的二聚体、三聚体或更高的寡聚体的形式存在。预期使用包含两个或多个抗IL-4R的抗体多肽的寡聚体，一个例子是同型二聚体。其他寡聚体包括异二聚体、异三聚体等。
一个实施方案涉及这样的寡聚体，即其包含多个通过被融合至抗IL-4R的抗体多肽的肽部分之间的共价或非共价相互作用连接的抗IL-4R的抗体多肽。这些肽可以是肽接头(间隔区)、或具有促进寡聚化的性质的肽。如在下面将更详细描述的，亮氨酸拉链和某些来源于抗体的多肽是其中一些可促进附着至其上的IL-4R寡聚化的肽。
在特定的实施方案中，寡聚体包含两个至四个抗IL-4R的抗体多肽。寡聚体的抗IL-4R的抗体部分可以上述任何一种方式(例如，变体或片段)存在。优选地，寡聚体包含具有结合IL-4R的活性的抗IL-4R的抗体多肽。
在一个实施方案中，使用来源于免疫球蛋白的多肽制备寡聚体。在例如Ashkenazi等人，1991，PNAS USA 88：10535；Byrn等人，1990，Nature 344：677；和Hollenbaugh等人，1992“Construction ofImmunoglobulin Fusion Proteins”，in Current Protocols inImmunology，Suppl.4，pages 10.19.1-10.19.11中描述了包含异源多肽的融合蛋白的制备，所述异源多肽融合至各种来源于抗体的多肽(包括Fc结构域)。
本发明的一个实施方案涉及包含两个融合蛋白的二聚体，通过将抗IL-4R的抗体的IL-4R结合片段融合至抗体的Fc区域产生所述融合蛋白。可如下制备所述二聚体，例如将编码融合蛋白的融合基因***合适的表达载体，在用该重组表达载体转化的宿主细胞中表达该基因，并允许所表达的融合蛋白装配成与抗体非常相似的分子，从而在Fc部分之间形成链间二硫键，产生二聚体。
此处使用的术语“Fc多肽”包括来源于抗体Fc区域的多肽的天然的和突变蛋白的形式。也包括这些包含促进二聚化的铰链区的多肽的截短形式。包含Fc部分的融合蛋白(和由此形成的寡聚物)为在A蛋白或G蛋白柱子上进行亲和层析实现容易地纯化提供了有利方面。
PCT申请WO 93/10151(此处引用作为参考)中描述的一种合适的Fc多肽，是从人IgG1抗体的铰链区的N端延伸至Fc区域的天然C末端的单链。另一种有用的Fc多肽是在美国专利5,457,035和Baum等人，1994，EMBO J.13：3992-4001中描述的Fc突变蛋白。该突变蛋白的氨基酸序列与WO 93/10151中提供的天然Fc序列相同，除了氨基酸19从Leu变成Ala，氨基酸20从Leu变成Glu，和氨基酸22从Gly变成Ala。突变蛋白表现出减少的对Fc受体的亲和力。
在另一个实施方案中，抗IL-4R的抗体的重链和/或轻链可变部分可由抗体的重链和/或轻链的可变部分替代。
可选择地，寡聚体是包含多个抗IL-4R的抗体多肽、具有或不具有多肽接头(间隔区肽)的融合蛋白。其中一些合适的肽接头是描述于美国专利4,751,180和4,935,233中的接头。
另一个用于制备寡聚化抗IL-4R的抗体衍生物的方法包括使用亮氨酸拉链。亮氨酸拉链结构域是促进发现在其中具有所述亮氨酸拉链的蛋白寡聚化的肽。亮氨酸拉链最初是在几种结合DNA的蛋白(Landschulz等人，1988，Science 240：1759)中被鉴定的，此后在各种不同的蛋白中被发现。其中一些已知的亮氨酸拉链是天然发生的聚合成二聚体或三聚体的肽或其衍生物。在PCT申请WO 94/10308中描述了适合用于产生可溶性寡聚蛋白的亮氨酸拉链的例子，Hoppe等人，1994，FEBS Letters344：191(此处引用作为参考)描述了来源于肺表面活性蛋白D(SPD)的亮氨酸拉链。在Fanslow等人，1994，Semin.Immunol.6：267-78中描述了经修饰的亮氨酸拉链的用途，所述经修饰的亮氨酸拉链允许融合至其上的异源蛋白的稳定三聚化。在一个方法中，在合适的宿主细胞中表达这样的重组融合蛋白，即其包含融合至亮氨酸拉链肽的抗IL-4R的抗体片段或其衍生物，从培养上清液中回收形成的可溶性寡聚抗IL-4R的抗体片段或衍生物。
此处描述的抗IL-4R的抗体多肽和融合蛋白可通过许多常规技术中的任何一种制备。例如，使用本领域已知的任何技术可从天然表达抗IL-4R的抗体多肽的细胞中纯化所述抗IL-4R的抗体多肽，或可在重组表达***中产生所述多肽。
任何本领域已知的表达***可用于制备本发明的重组多肽。一般地，用包含编码想要的抗IL-4R的抗体多肽的DNA的重组表达载体转化宿主细胞。其中一些可使用的宿主细胞是原核细胞、酵母或高等真核细胞。原核细胞包括革兰氏阴性或革兰氏阳性生物，例如大肠杆菌(E.cocoli)或杆菌(bacilli)。高等真核细胞包括昆虫细胞和已建立的哺乳动物来源的细胞系。合适的哺乳动物宿主细胞系的例子包括猴肾细胞的COS-7系(ATCC CRL 1651)(Gluzman等人，1981，Cell 23：175)、L细胞、293细胞、C127细胞、3T3细胞(ATCC CCL 163)、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞HeLa细胞、BHK(ATCC CRL 10)细胞系和如McMahan等人，1991，EMBO J.10：2821中描述的来源于非洲绿猴肾细胞系CVI(ATCCCCL 70)的CVI/EBNA细胞系。在Pouwels等人，(Cloning Vectors：A Laboratory Manual，Elsevier，New York，1985)中描述了合适的用于细菌、真菌、酵母和哺乳动物细胞宿主的克隆和表达载体。
将经转化的细胞在促进抗IL-4R的抗体多肽表达的条件下进行培养，用常规的蛋白纯化方法回收所述肽。一种这样的纯化方法包括在使用亲和层析，例如，在具有结合于其上的完整IL-4R或部分IL-4R(例如，细胞外结构域)的基质上进行亲和层析。预期在此使用的多肽包括基本上均一的、其基本上不含污染性内源物质的重组型哺乳动物抗IL-4R的抗体多肽。
在一个方面，本发明提供了干扰IL-4和IL-4受体结合的抗体。这些抗体，在此处称为封闭性抗体，可用IL-4R或其片段、变体或衍生物来产生，和可在常规测定中就其干扰IL-4和IL-4受体的结合来筛选。合适的测定法的例子是这样的测定法，即其就抑制IL-4和表达IL-4R的细胞结合的能力对抗体进行检测，或就减少由于IL-4和细胞表面IL-4受体结合产生的生物学或细胞应答的能力对抗体进行检测。
已报道IL-4Rα是某些多亚基IL-13受体复合物的组分(Zurawski等人，1995，J.Biol.Chem.270：13869；de Vries，1998，J.AllergyClin.Immunol.102：165；和Callard等人，1996，Immunology Today，17：108，各在此引用作为参考)。因此，在一个实施方案中，提供了阻止IL-4以及IL-13与细胞结合的抗体。所述抗体抑制IL-4诱导的生物学活性，同时也抑制IL-13诱导的活性，因此可用于治疗由各细胞因子或两个细胞因子同时诱导的疾病。这些疾病的例子包括但不限于IgE介导的疾病、哮喘、过敏性疾病、过敏性鼻炎和包括特应性皮炎的皮炎。
可以各种常规测定法筛选结合IL-4Rα的抗体以确定其是否干扰IL-13与含有IL-4Rα的IL-13受体复合物的结合。可在例如结合测定中筛选抗体或可就其抑制IL-IL-13诱导的生物学活性的能力对其进行测试。在下面的实施例2中举例说明合适的测定法的例子。
可使用任何本领域已知的技术制备特异性针对IL-4Rα的抗体。参见，例如，Monoclonal Antibodies，Hybridomas：A New Dimension inBiological Analyses，Kennet等人(eds.)，Plenum Press，New York(1980)和Antibodies：A Laboratory Manual，Harlow and Land(编者)，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY，(1988)。
可通过常规技术产生本发明的抗体的抗原结合片段。这些片段的例子包括，但不限于，Fab和F(ab’)2片段。本发明也涉及通过基因工程技术产生的抗体片段和衍生物。除非另外指出，此处使用的术语“抗体”和“单克隆抗体”包括完整的抗体和其抗原结合片段和/或衍生物。
其他实施方案包括嵌合抗体，例如鼠科动物单克隆抗体人源化形式。可通过已知的技术制备这些人源化抗体，当将抗体给人施用时，这些人源化抗体提供了减少免疫原性的有利方面。在一个实施方案中，人源化单克隆抗体包含鼠科动物抗体的可变区(或其完整的或部分的抗原结合位点)和来源于人抗体的恒定区。可选择地，人源化抗体片段可包含鼠科动物单克隆抗体的抗原结合位点和来源于人抗体的可变结构域片段(缺少抗原结合位点)。用于生物嵌合的和其他基因工程改造的单克隆抗体的方法包括描述于Riechmann等人，1988，Nature 332：323，Liu等人，1987，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 84：3439，Larrick等人，1989，Bio/Technology 7：934，和Winter等人，1993，TIPS 14：139中的方法。在一个实施方案中，所述嵌合抗体是CDR嫁接抗体。
已发展了用于在非人动物中产生人或部分人抗体的方法。例如，已制造了通过各种方法使其中一种或多种内源性免疫球蛋白基因失活的小鼠。已将人免疫球蛋白基因导入所述小鼠以替代失活的小鼠基因。在所述动物中产生的抗体整合了由被导入动物的人遗传物质编码的人免疫球蛋白多肽链。在一个实施方案中，用IL-4R多肽免疫非人动物例如转基因小鼠，这样就可在所述动物中产生抗IL-4R多肽的抗体。合适的免疫原的一个例子是可溶性人IL-4R，例如包含SEQ ID NO：2的蛋白的细胞外结构域，或SEQ ID NO：2的蛋白的其他免疫原片段的肽。
在美国专利5,814,318、5,569,825和5,545,806(其在此引用作为参考)中描述了用于产生和使用用于生产人和部分人抗体的转基因小鼠的技术的例子。
在另一个方面，本发明提供了结合IL-4受体的单克隆抗体。单克隆抗体可通过使用任何本领域已知的技术，例如，通过永生化脾细胞来生产，所述脾细胞获自完成免疫计划后的转基因小鼠。脾细胞可使用任何本领域已知的技术，例如通过将其与骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤的方式来进行永生化。在产生杂瘤的融合方法中使用的骨髓瘤细胞优选地是非抗体产生性、具有高度融合效率和酶缺陷性的细胞，所述酶缺陷性使其不能生长在某些选择性培养基上，所述培养基只支持想要的融合细胞(杂交瘤)的生长。合适的用于小鼠融合的细胞系包括Sp-20、P3-X63/Ag8、P3-X63-Ag8.653、NS1/1.Ag41、Sp210-Ag14、FO、NSO/U、MPC-11、MPC11-X45-GTG 1.7和S194/5XX0 Bul；用于大鼠融合的细胞系的例子包括R210.RCY3、Y3-Ag 1.2.3、IR983F和4B210。用于细胞融合的其他细胞系是U-266、GM1500-GRG2、LICR-LON-HMy2和UC729-6。
在一个实施方案中，通过用IL-4R免疫原免疫动物(例如，具有人免疫球蛋白序列的转基因动物)，从经免疫的动物中获取脾细胞，将收获的脾细胞与骨髓瘤细胞系融合，从而产生杂交瘤细胞，从杂交瘤细胞建立杂交瘤细胞系，并鉴定出产生和IL-4R多肽结合的抗体的杂交瘤细胞系来生产杂交瘤细胞系。这些杂交瘤细胞系，和由此产生的抗IL-4R单克隆抗体包括在本发明内。
可使用任何本领域已知的技术来纯化由杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体。可进一步筛选杂交瘤或mAbs以鉴定具有特定性质(例如阻断IL-4和/或IL-13诱导的活性的能力)的mAbs。在实施例2，3和4中提供了这些筛选法的例子。
用于制备抗人IL-4的抗体(包括单克隆抗体)的方法、用于鉴定封闭性抗体的测定法和用于产生人源化或经基因工程改造的抗IL-4抗体的衍生物的技术的其他例子描述于美国专利5,041,381、5,863,537、5,928,904和5,676,940，其在此引用作为参考。可用作I L-4拮抗剂的抗体的其他例子描述于WO 91/09059，也在此引用作为参考。
在另一方面，本发明提供了结合IL-4R的人抗体。在本发明的一个实施方案中，针对IL-4Rα产生的人抗体和由涉及使用转基因小鼠的技术产生的人抗体阻止IL-4以及IL-13与细胞的结合。这些抗体是IL-4的拮抗剂并且也充当IL-13的拮抗剂。
本发明的抗体可包含任何本领域已知的恒定区。轻链恒定区可以是例如κ或λ型轻链恒定区，例如人κ或λ型轻链恒定区。重链恒定区可以是例如α、δ、ε、γ或μ型重链恒定区，例如人α、δ、ε、γ或μ型重链恒定区。在一个实施方案中，轻链或重链恒定区是天然发生的恒定区的片段、衍生物、变体或突变蛋白。
可在例如在体外或体内检测IL-4R多肽存在的测定法中使用针对IL-4R的抗体。所述抗体也可在免疫亲和层析中用于纯化IL-4R。可使用另外的可用于阻止IL-4和IL-4R结合的抗体来抑制由这种结合产生的生物学活性。封闭性抗体可用于本发明的方法。这些充当IL-4的拮抗剂的抗体可用于治疗任何IL-4诱导的疾病，包括但不限于哮喘和过敏症，例如，过敏性鼻炎、接触性皮炎和特应性皮炎。在一个实施方案中，使用由涉及转基因小鼠免疫的方法产生的人抗IL-4R单克隆抗体治疗这些疾病。
抗体可在体外的方法进行使用或通过体内施用来抑制IL-4诱导的生物学活性。于是由IL-4和细胞表面IL-4受体的相互作用导致或恶化(直接或间接地)的疾病，如上面提供的其例子，可得以治疗。在一个实施方案中，本发明提供了治疗方法，其包括以有效地降低IL-4和IL-13诱导的生物学活性的量给需要其的哺乳动物在体内施用IL-4和/或IL-13阻断性抗体。
本发明的抗体包括，但不限于，抑制IL-4的生物学活性以及抑制IL-13的生物学活性的部分和完整的人单克隆抗体。一个实施方案涉及至少部分阻断IL-4与细胞结合和至少部分阻断IL-13与细胞结合的人单克隆抗体。在一个实施方案中，通过用IL-4受体免疫原免疫转基因小鼠产生所述抗体。在另一个实施方案中，免疫原是人IL-4受体多肽。在此也提供了来源于由此免疫的小鼠的杂交瘤细胞系，其中杂交瘤分泌结合IL-4R的单克隆抗体。
尽管人、部分人或人源化的抗体适合用于许多应用，特别是涉及给人受试者施用抗体的应用，其他类型的抗体也适合其他应用。本发明的非人抗体可来源于例如任何产生抗体的动物，例如小鼠、大鼠、兔子、山羊、驴，或非人灵长类动物(例如猴子(例如，cynomologous或恒河猴)或猿(例如，(黑猩猩))。本发明的非人抗体可用于例如体外或基于细胞培养的应用，或任何其他应用，在所述应用中，针对本发明的抗体的应答不会发生或可以忽略，可被阻止，无关紧要，或者是想要的。在一个实施方案中，将本发明的非人抗体给非人受试者施用。在另一个实施方案中，非人抗体在非人受试者中不引发免疫应答。在另一个实施方案中，非人抗体来自与非人受试者相同的物种，例如给小鼠施用本发明的小鼠抗体。来自特定物种的抗体可通过例如用想要的免疫原(例如，可溶性IL-4受体多肽)免疫该物种的动物，或使用用于产生该物种的抗体的人工***(例如，用于产生特定物种的抗体、基于细菌或噬菌体展示的***)，或通过将来自一个物种的抗体转化成来自另一物种的抗体(例如，用来自另一物种的恒定区取代抗体的恒定区，或通过替代抗体的一个或多个氨基酸残基以使其与来自其他物种的抗体序列更加相似)来制备。在一个实施方案中，所述抗体是嵌合抗体，其包含来源于来自两个或更多个不同物种的抗体的氨基酸序列。
在另一方面，本发明提供了抗体，所述抗体包含选自L1-L6的轻链和/或选自H1-H24的重链，和其片段、衍生物、突变蛋白和变体(参见图2和3)。这样的抗体可使用名称“LxHy”表示，其中x对应轻链可变区的编号而y对应于重链可变区的编号，如其在图3中被显示。例如，L4H17是指抗体具有包含L4的氨基酸序列的轻链可变区和具有包含H17的氨基酸序列的重链可变区，如图3中所显示的。图2和3也显示这些可变结构域序列的各序列的CDR和构架区的位置。本发明的抗体包括，例如，L2H1、L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1H11、L2H4、L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10和L2H11。也可使用另外的抗体可变序列，例如，人抗体可变序列。参见，例如，Sblattero等人，1998，Immunotechnology 3：271-78，de Haard等人，1999，J.Biol.Chem.274：18218-30。
在一个实施方案中，本发明提供了包含轻链可变区的抗体，所述轻链可变区包含只在一个或多个残基上与L1的序列相异的氨基酸序列，在所述残基上，L2-L6中的任何一个序列与L1的序列相异(例如，所述抗体的所述序列在残基1、4、7等上与L1的序列相异)。在另一个实施方案中，所述轻链可变结构域的所述序列在其与L1的序列相异的位点上包含L2-L6的任一个的任一序列的至少一个氨基酸残基(例如，所述序列包含残基E1D、L4M、S7T等)。在另一个实施方案中，所述序列在至少一个CDR(例如，CDR1、CDR2或CDR3)中与L1的序列相异。在另一个实施方案中，所述序列在至少一个FR(例如，FR1、FR2、FR3或FR4)中与L1的序列相异。在另一个实施方案中，本发明提供了包含重链可变结构域的抗体，所述重链可变结构域包含只在一个或多个残基上与H1的序列相异的氨基酸序列，在所述残基上，H2-H24的任何一个序列与H1的序列相异(例如，所述抗体的所述序列在残基6、13、24等上与H1的序列相异)。在另一个实施方案中，所述重链可变结构域的所述序列在其与H1的序列相异的位点上包含H2-H24的任何一个的任何序列的至少一个氨基酸残基(例如，所述序列包含残基Q6E、H13Q、G24A等)。在另一个实施方案中，所述序列在至少一个CDR(例如，CDR2或CDR3)与H1的序列相异。在另一个实施方案中，所述序列在至少一个FR(例如，FR1或FR3)与H1的序列相异。
在另一个实施方案中，本发明提供了包含这样的氨基酸序列的抗体，即所述氨基酸序列选自：轻链互补性决定区(CDR)1，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：6的残基24-35，其中残基8上的N没有被S替代；SEQ ID NO：8的残基24-35，其中残基5上的T没有被S替代和/或残基7上的N没有被子S替代和/或残基9上的D没有被S替代；SEQ ID NO：10的残基24-35，其中残基9上的D没有被S替代；SEQ ID NO：12的残基24-35，其中残基7上的N没有被S替代和/或残基9上的N没有被S替代；和SEQ ID NO：14的残基24-35，其中残基7上的G没有被S替代；轻链CDR2，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：6的残基51-57，其中残基7上的P没有被T替代；SEQ ID NO：10的残基51-57，其中残基7上的S没有被T替代；和SEQ ID NO：12的残基51-57，其中残基2上的T没有被A替代和/或残基4上的Y没有被S替代；轻链CDR3，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：6的残基90-99，其中残基4上的D没有被G替代，残基5上的H没有被S替代，残基7上的A没有被P替代，和/或残基8上的G没有被P替代；SEQ ID NO：8的残基90-99，其中残基5上的R没有被S替代；和SEQ ID NO：14的残基90-99，其中残基10上的M没有被T替代；重链CDR2，由于不超过3个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与SEQ ID NO：18的残基50-65的序列相异，其中残基9上的S没有被N替代；和重链CDR3，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：18的残基98-104，其中残基6上的T没有被D替代和/或残基7上的H没有被Y替代；SEQ ID NO：20的残基98-104，其中残基4上的W没有被Y替代，残基5上的Y没有被F替代，残基6上的N没有被D替代，和/或残基7上的N没有被Y替代；SEQ ID NO：22的残基98-104，其中残基6上的P没有被D替代和/或残基7上的W没有被Y替代；SEQ ID NO：24的残基98-104，其中残基6上的T没有被D替代和/或残基7上的R没有被Y替代；SEQ ID NO：26的残基98-104，其中残基5上的Y没有被F替代；SEQ ID NO：30的残基98-104，其中残基4上的W没有被Y替代；和SEQ ID NO：34的残基98-104，其中残基4上的W没有被Y替代和/或残基5上的Y没有被F替代；其中所述抗体结合IL-4受体α。
在另一个实施方案中，抗体抑制IL-4和IL-4受体的结合。在另一个实施方案中，抗体抑制IL-13和IL-13受体的结合。在另一个实施方案中，抗体抑制IL-4和IL-4受体以及IL-13和IL-13受体的结合。在另一个实施方案中，抗体特异性地结合IL-4受体α。
在另一个实施方案中，抗体包含两个或三个这样的轻链互补性决定区(CDR)。
在另一个实施方案中，抗体包含两个或三个这样的重链互补性决定区。
在另一个实施方案中，抗体进一步包含含有选自下列的序列的构架区段(FR)：轻链构架区段(FR)1，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：4的残基1-23；SEQ ID NO：10的残基1-23；SEQ ID NO：12的残基1-23；和SEQ ID NO：14的残基1-23；轻链FR2，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ IDNO：4的残基36-50；SEQ ID NO：6的残基36-50；SEQ ID NO：14的残基36-50；轻链FR3，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：4的残基58-89：SEQ ID NO：10的残基58-89；SEQ ID NO：12的残基58-89；轻链FR4，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：4的残基100-109；SEQ ID NO：8的残基100-109；和SEQ ID NO：12的残基100-109；重链FR1，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：16的残基1-30；SEQ ID NO：42的残基1-30；重链FR2，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与下列的序列相异：SEQ ID NO：16的残基36-49；重链FR3，由于不超过3、2、1或0个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与选自下列的序列相异：SEQ ID NO：16的残基66-97；SEQ ID NO：18的残基66-97；和SEQ ID NO：42的残基66-97；和重链FR4，由于不超过3个氨基酸残基的***、缺失或替代造成其与SEQ ID NO：16的残基105-115的序列相异。
在另一个实施方案中，抗体包含这样的轻链可变结构域，即所述结构域与选自SEQ ID NO：6、8、10、12和14的序列具有至少80、85、90、95或100％同一性，条件是所述轻链可变结构域不包含SEQ ID NO：4的序列。
在另一个实施方案中，抗体包含这样的重链可变结构域，即所述结构域与选自SEQ ID NO：18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少80、85、90、95或100％同一性，条件是所述重链可变结构域不包含SEQID NO：16的序列。
在另一个实施方案中，本发明提供了这样的抗体的片段，其中所述片段与IL-4受体α结合。
在一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H1、与L2H1发生交叉反应的抗体、和L2H1一样结合相同的表位的抗体、和L2H1竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H1的生物学活性的抗体和L2H1的抗原结合片段(包括通过重组方法产生的片段)。在一个实施方案中，所述抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲合力基本上等于L2H1对IL-4R的结合亲和力。本发明也提供产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H1的生物学活性的一个例子是同时充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H1的相等的阻断IL-4的活性；和具有基本上和L2H1的相等的阻断IL-13的活性。这种活性可以任何常规的测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
可使用Kabat等人在Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，第5版，US Dept.of Health and Human Services，PHS，NIH，NIH Publication no.91-3242，1991中描述的***鉴定给定的抗体的互补决定区(CDR)。本发明的抗体的特定实施方案在其轻链可变结构域内包含在L2H1的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H1的CDR。因此，此处提供的抗体中的一些抗体是这样的抗体，即其包含了1至所有3个下列L2H1的轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的氨基酸残基24-35、氨基酸残基51-57和氨基酸残基90-99。此处提供的特定抗体在其重链可变结构域内包含在L2H1的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，在此处提供的抗体中的一些抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：16的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
L2H1的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H1的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：15，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：16。本发明的抗体包括但不限于在其轻链内包含SEQ ID NO：6的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：16的抗体。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L3H1、与L3H1交叉反应的抗体、和L3H1结合相同的表位的抗体、与L3H1竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L3H1的生物学活性的抗体、和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于人L3H1对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L3H1的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L3H1相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L3H1相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
此处提供来源于L3H1的IgG4抗体。另一个实施方案涉及来源于L3H1的IgM抗体。用于转换(改变)抗体的亚类或同种型的方法在相关领域是已知的。这些方法可包括例如重组DNA技术，通过这些方法将编码提供想要的亚类的抗体多肽链的DNA替代编码亲本抗体的对应多肽链的DNA。
L3H1的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：7，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：8。L3H1的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：15，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：16。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：8的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：16的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L3H1轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L3H1的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：8的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L3H1的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：16的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L4H1、与L4H1交叉反应的抗体、和L4H1结合相同的表位的抗体、与L4H1竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L4H1的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L4H1对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L4H1的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有和L4H1基本相等的阻断IL-4的活性，和具有与L4H1基本上的相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L4H1的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：9，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：10。L4H1的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：15，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：16。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：10的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：16的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L4H1的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L4H1的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：10的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域内，包含在L4H1的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：16的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L5H1、与L5H1起交叉反应的抗体、和L5H1结合相同的表位的抗体、与L5H1竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L5H1的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有针对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L5H1对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L5H1的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L5H1的相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L5H1的相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L5H1的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：11，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：12。L5H1的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：15，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：16。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：12的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：16的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L5H1的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L5H1的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：12的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L5H1的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：16的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H2、与L1H2交叉反应的抗体；和L1H2结合相同的表位的抗体、与L1H2竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H2的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的亲和力，该亲和力基本上等于L1H2对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H2的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H2相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H2相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H2的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H2的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：17，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：18。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：18的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H2的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H2的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H2的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：18的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H3、与L1H3交叉反应的抗体；和L1H3结合相同的抗原表位的抗体、与L1H3竞争结合表达人IL-4R细胞的抗体、具有L1H3生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合性片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H3对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H3的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H3相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H3相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H3的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H3的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：19，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：20。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：20的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H3的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H3的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H3的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：20的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H4、与L1H4交叉反应的抗体、和L1H4结合相同的表位的抗体、和L1H4竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H4的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H4对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H4的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H4相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H4相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H4的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H4的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：21，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：22。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：22的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H4的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H4的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H4的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：22的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H5、和L1H5交叉反应的抗体、和L1H5结合相同的表位的抗体、与L1H5竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H5生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合性片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H5对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H5的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H5相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H5相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H5的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H5的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：23，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：24。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：24的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H5的轻链中发现的互补性决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H5的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H5的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：24的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H6、与L1H6交叉反应的抗体、和L1H6结合相同的抗原表位的抗体、和L1H6竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H6的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H6对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H6的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H6相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H6相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H6的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H6的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：25，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：26。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体；和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：26的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H6的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H6的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H6的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：26的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H7、和L1H7交叉反应的抗体、和L1H7结合相同的表位的抗体、和L1H7竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体；具有L1H7的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H7对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H7的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H7相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H7相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H7的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H7的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：27，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：28。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：28的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H7的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H7的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H7的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：28的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H8、与L1H8交叉反应的抗体、和L1H8结合相同的表位的抗体、和L1H8竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H8的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H8对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H8的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H8相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H8相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H8的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H8的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：29，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：30。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：30的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H8的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H8的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H8的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：30的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H9、与L1H9交叉反应的抗体、和L1H9一样结合相同的表位的抗体、和L1H9竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H9的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H9对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H9的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H9的相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H9的相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H9的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H9的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：31，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：32。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：32的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H9的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H9的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H9的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：32的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H10、与L1H10交叉反应的抗体、和L1H10结合相同的表位的抗体、和L1H10竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H10的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H10对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H10的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H10的相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H10的相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H10的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H10的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：33，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：34。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：34的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H10的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H10的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H10的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：34的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L1H11、与L1H11交叉反应的抗体、和L1H11结合相同的表位的抗体、和L1H11竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L1H11的的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L1H11对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L1H11的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L1H11的相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L1H11的相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L1H11的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：3，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：4。L1H11的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：35，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：36。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：4的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：36的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L1H11的轻链中发现的互补性决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L1H11的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：4的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L1H11的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：36的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H4、与L2H4交叉反应的抗体、和L2H4结合相同的表位的抗体、与L2H4竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H4的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H4对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H4的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H4相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H4相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H4的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H4的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：21，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：22。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：22的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H4的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H4的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H4的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：22的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H12、与L2H12交叉反应的抗体、和L2H12结合相同的表位的抗体、和L2H12竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H12的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H12对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H12的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H12相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H12相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H12的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H12的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：37，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：38。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：38的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H12的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H12的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含至少一个在L2H12的重链内的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：38的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H13、与L2H13交叉反应的抗体、和L2H13结合相同的表位的抗体、和L2H13竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H13的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H13对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H13的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H13相同的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H13相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H13的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H13的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：39，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：40。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：40的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H13的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H13的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H13的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：40的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H14、与L2H14交叉反应的抗体、和L2H14结合相同的表位的抗体、和L2H14竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H14的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H14对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H14的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本和L2H14相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H14相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H14的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H14的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：41，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：42。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：42的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H14的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H14的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H14的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：42的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L6H1、与L6H1交叉反应的抗体、和L6H1结合相同的表位的抗体、和L6H1竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L6H1的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L6H1对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L6H1的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L6H1相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L6H1相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L6H1的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：13，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：14。L6H1的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：15，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：16。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：14的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：16的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L6H1的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L6H1的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：14的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L6H1的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：16的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H2、与L2H2交叉反应的抗体、和L2H2结合相同的表位的抗体、和L2H2竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H2的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H2对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H2的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H2相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H2相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H2的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H2的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：17，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：18。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：18的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H2的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H2的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H2的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：18的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H3、与L2H3交叉反应的抗体、和L2H3结合相同的表位的抗体、和L2H3竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H3的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H3对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H3的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H 3相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H3相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H3的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H3的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：19，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：20。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：20的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H3的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H3的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H3的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：20的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H6、与L2H6交叉反应的抗体、和L2H6结合相同的表位的抗体、和L2H6竞争结合表达人IL-4R的结合细胞的抗体、具有L2H6的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H6针对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H6的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H6相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H6相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H6的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H6的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：25，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：26。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：26的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H6的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H6的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H6的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：26的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H7、与L2H7交叉反应的抗体、和L2H7结合相同的表位的抗体、和L2H7竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H7的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H7对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H7的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H7相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H7相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H7的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H7的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：27，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：28。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：28的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H7的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H7的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H7的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：28的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H8、与L2H8交叉反应的抗体、和L2H8结合相同的表位的抗体、和L2H8竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H8的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H8针对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H8的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H8相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H8相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H8的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H8的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：29，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：30。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：30的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H8的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H8的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H8的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：30的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H9、与L2H9交叉反应的抗体、和L2H9结合相同的表位的抗体、和L2H9竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H9的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H9针对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H9的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H9相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H9相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H9的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H9的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：31，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：32。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：32的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H9的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H9的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H9的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：32的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H10、与L2H10交叉反应的抗体、和L2H10结合相同的表位的抗体、和L2H10竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H10的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H10对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H10的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H10相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H10相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H10的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H10的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：33，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：34。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：34的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H10的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H10的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H10的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：34的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
在另一个实施方案中，本发明的特定抗体选自L2H11、与L2H11交叉反应的抗体、和L2H11结合相同的表位的抗体、和L2H11竞争结合表达人IL-4R的细胞的抗体、具有L2H11的生物学活性的抗体和任何一种前述的抗体的抗原结合片段。在一个实施方案中，抗体具有对人IL-4R的结合亲和力，该亲和力基本上等于L2H11对人IL-4R的结合亲和力。本发明也提供了产生任何一种这些抗体的杂交瘤细胞系。
L2H11的生物学活性的一个例子是充当IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的能力。在一个实施方案中，本发明的抗体具有基本上和L2H11相等的阻断IL-4的活性，和具有基本上和L2H11相等的阻断IL-13的活性。该活性可通过任何合适的常规测定法进行测量(例如，如在实施例2中描述的CD23表达测定法中那样进行测量)。
L2H11的轻链可变结构域的DNA序列示于SEQ ID NO：5，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：6。L2H11的重链可变结构域的DNA序列表示为SEQ ID NO：35，编码的氨基酸序列示于SEQ ID NO：36。本发明的抗体包括，但不限于，在其轻链内包含SEQ ID NO：6的残基1至109的抗体，和另外地或可选择地在其重链内包含SEQ ID NO：36的残基1至115的抗体。
本发明的抗体的特定实施方案在其轻链的可变结构域内包含在L2H11的轻链中发现的互补决定区(CDR)或高变区中的至少一个。在实施例5中描述了L2H11的CDR。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列轻链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：6的残基24-35、残基51-57和残基90-99。此处提供的特定抗体，在其重链可变结构域中，包含在L2H11的重链中发现的CDR中的至少一个。因此，此处提供的抗体是这样的抗体，即其包含1至所有3个下列重链可变结构域中的序列：SEQ ID NO：36的残基31-35、残基50-65和残基98-104。
核酸
在一个方面，本发明提供了分离的核酸分子。所述核酸分子包括例如，编码本发明的抗体，或其片段、衍生物、突变蛋白或变体的多核苷酸，满足用作杂交探针的多核苷酸，用于鉴定、分析、突变或扩增编码多肽的多核苷酸的PCR引物或测序引物，用于抑制多核苷酸表达的反义核酸和前述核酸的互补序列。所述核酸可以是任何长度的核酸。其在长度上可以是，例如，5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、75、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450、500、750、1,000、1,500、3,000、5,000或更多个核苷酸，和/或可以包含一个或多个另外的序列，例如调控序列，和/或是更大的核酸例如载体的部分。所述核酸可以是单链的或双链的，可以包含RNA和/或DNA核苷酸，和其人工变体(例如，肽核酸)。
编码抗体多肽(例如，重链或轻链，仅仅是可变结构域或全长链)的DNA可从已用IL-4R免疫过的小鼠的B细胞中分离。所述DNA可通过常规方法例如聚合酶链式反应(PCR)来分离。噬菌体展示法是另一种已知技术的例子，通过该技术可制备抗体的衍生物。在一个方法中，在任何合适的重组表达***中表达作为目的抗体成分的多肽，并允许所表达的多肽装配形成抗体分子。
图2提供了编码显示于图3中的重链和轻链可变区的核酸序列。由于遗传密码的简并性，图3中的每个多肽序列也由大量的其他核酸序列编码。本发明提供了编码本发明的每个抗体的各简并核苷酸序列。
本发明还提供了在特定的杂交条件下和其他核酸(例如，包含图2的核苷酸序列的核酸)杂交的核酸。用于杂交核酸的方法在本领域是已知的。参见，例如，Current Protocols in Molecular Biology；JohnWiley & Sons，N.Y.(1989)，6.3.1-6.3.6。如此处所定义的，中度严紧杂交条件使用含有5X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)、0.5％ SDS、1.0mMEDTA(pH 8.0)的预洗涤液，大约50％的甲酰胺、6X SSC的杂交缓冲液，和55℃的杂交温度(或其他类似的杂交溶液例如含有大约50％甲酰胺的溶液，使用42℃的杂交温度)，以及在60℃下、于0.5X SSC、0.1％SDS中的洗涤条件。严紧杂交条件为在45℃下，6X SSC中，接着在68℃下于0.1X SSC、0.2％SDS中进行一或更多次洗涤。此外，本领域技术人员可控制杂交和/或洗涤条件以提高或降低杂交的严紧度，从而使包含相互之间具有至少65、70、75、80、85、90、95、98或99％同一性的核苷酸序列的核酸通常保持相互杂交。Sambrook，Fritsch和Manlatis(1989，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，Cold Spring HarborLaboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.，第9和11章；和Current Protocols in Molecular Biology，1995，Ausubel等人，编著，John Wiley & Sons，Inc.，sections 2.10 and 6.3-6.4)提供了影响杂交条件选择的基本参数和设计合适的条件的指导方针，并且基于例如DNA的长度和/或碱基的组成，本领域技术人员可容易地确定所述参数和方针。
通过突变可将变化引入核酸，从而导致其编码的多肽(例如，抗体)的氨基酸序列发生改变。可通过标准的技术，例如定点诱变和PCR介导的诱变技术引入突变。优选地，在一个或多个经预测的非必需氨基酸残基上产生保守氨基酸替代。可选择地，可通过例如饱和诱变随机地沿着全长或部分编码序列引入突变，可就生物学活性筛选所得的突变体以鉴定保持活性(例如，和IL-4受体的结合)的突变体。诱变后，被编码的蛋白可进行重组表达并可确定所述蛋白的活性。可向核酸引入突变而不显著地改变其编码的肽的生物学活性。例如，可进行核苷酸替代，从而在非必需氨基酸残基上进行导致氨基酸替代的核苷酸替代。在一个实施方案中，对图2中提供的核苷酸序列或其想要的片段、变体或衍生物进行突变，以使其编码包含一个或多个氨基酸残基缺失或替代的氨基酸序列，所述氨基酸残基在图3中显示为两个或更多个序列在其上不同的氨基酸残基。在另一个实施方案中，诱变将氨基酸***至与一个或多个氨基酸残基相邻的位置，所述氨基酸残基在图3中显示为两个或更多个序列在其上不同的氨基酸残基。可选择地，可将突变引入选择性地改变其编码的多肽的生物学活性(例如，与IL-4受体的结合性、对IL-4和/或IL-3的抑制性等)的核酸中。例如，突变可定量或定性地改变生物学活性。定量改变的例子包括增加、减少或消除活性。定性改变的例子包括改变抗体的抗原特异性。
在另一方面，本发明提供了适合用作引物或用于检测本发明的核酸序列的杂交探针的核酸分子。本发明的核酸分子可以只包含编码本发明的全长多肽的核酸序列的一部分，例如，可用作探针或引物或编码本发明的多肽的活性部分(例如，IL-4受体结合部分)的片段的片段。
基于本发明的核酸的序列的探针可用于检测核酸或相似核酸，例如，编码本发明多肽的转录物。探针可包含标记基团，例如，放射性同位素、荧光化合物、酶、或酶辅因子(enzyme co-factor)。这些探针可用于鉴定表达所述多肽的细胞。
在另一方面，本发明提供了包含编码本发明的多肽的核酸或其部分的载体。载体的例子包括，但不限于，质粒、病毒载体、非游离哺乳动物载体和表达载体，例如重组表达载体。
本发明的重组表达载体可包含本发明的核酸，所述核酸以适合于在宿主细胞中表达的形式存在。重组表达载体包含一个或多个基于用于表达的宿主细胞而选择的、有效地连接至要被表达的核酸序列的调控序列。调控序列包括在许多类型的宿主细胞中指导核苷酸序列组成型表达的调控序列(例如，SV40早期基因增强子、劳斯肉瘤病毒启动子和巨细胞病毒启动子)，只在某些宿主细胞中指导核苷酸序列表达的调控序列(例如，组织特异性调控序列，参见Voss等人，1986，Trends Biochem.Sci.11：287，Manlatis等人，1987，Science 236：1237，其全文在此引用作为参考)，和指导核苷酸序列在响应特定处理或条件的情况下进行可诱导表达的调控序列(例如，哺乳动物细胞中的金属硫蛋白启动子和原核细胞和真核细胞***中的tet响应性和/或链霉素响应性启动子(参见id.)。本领域技术人员会意识到表达载体的设计可依赖于这些因素如：被转化的宿主细胞的选择、想要的蛋白的表达水平等。可将本发明的表达载体导入宿主细胞，从而产生蛋白或肽，包括由此处描述的核酸编码的融合蛋白或肽。
在另一方面，本发明提供了已导入了本发明的重组表达载体的宿主细胞。宿主细胞可以是任何原核细胞(例如，大肠杆菌(E.coli))或真核细胞(例如，酵母、昆虫、或哺乳动物细胞(例如，CHO细胞))。通过常规的转化或转染技术可将载体DNA导入原核或真核细胞。对于哺乳细胞的稳定转染，已知，依赖于所用的表达载体和转染技术，只有少部分细胞可将外源DNA整合入其基因组中。为了鉴定和选择这些整合体，通常将编码可选择标记(例如，就针对抗生素的抗性)的基因和目的基因一起导入宿主细胞。优选的可选择标记物包括提供针对药物例如G418、潮霉素和甲氨蝶呤的抗性的选择标记。除其他方法以外，通过药物选择(例如，已整合了可选择标记基因的细胞可存活，而其他细胞死亡)可鉴定用导入的核酸稳定地转染的细胞。
抗体的衍生物、片段和突变蛋白
通过许多已知的技术可制备针对IL-4R的抗体的衍生物和就想要的特性对其进行筛选。所述技术中的某些技术包括分离编码目的抗体的多肽链(或其部分)的DNA，和通过重组DNA技术操作所述DNA。例如，可将所述DNA与另一目的DNA融合，或改变(例如，通过诱变或其他常规技术)DNA从而加入、缺失或替代一或多个氨基酸残基。
在一个方面，本发明提供了本发明的抗体的抗原结合片段。这些片段可完全由来源于抗体的序列构成或可包含另外的序列。抗原结合片段的例子包括Fab和F(ab’)2。其他例子提供于Lunde等人，2002，Biochem.Soc.Trans.30：500-06。
通过氨基酸桥(短肽接头)将重链和轻链可变结构域(Fv区)片段连接起来产生单链多肽链可形成单链抗体。通过融合编码肽接头的DNA已制备了这样的单链Fv(scFv)，所述肽接头位于编码两个可变结构域多肽(VL和VH)之间。所得的多肽自身可恢复折叠，形成抗原结合单体，或其可形成多聚体(例如，二聚体、三聚体或四聚体)，这依赖于两个可变结构域之间的柔性接头的长度(Kortt等人，1997，Prot.Eng.10：423；Kortt等人，2001，Biomol.Eng.18：95-108)。通过组合不同的包含VL和VH的多肽，可形成与不同表位结合的多聚体scFv(Kriangkum等人，2001，Biomol.Eng.18：31-40)。发展的用于生产单链抗体的技术包括描述于美国专利号4，946，778；Bird，1988，Science 242：423；Huston等人，1988，Proc.Natl.Acad.Sci.USA85：5879；Ward等人，1989，Nature 334：544，de Graaf等人，2002，Methods Mol Biol.178：379-87中的技术。本发明包括了来源于此处提供的抗体的单链抗体(包括但不限于包含可变域组合L2H1、L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1H11、L2H4、L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10和L2H11的scFv)。
用于从目的抗体产生不同亚类或同种型的抗体的技术，即亚类转换的技术是已知的。因此，例如IgG抗体可来源于IgM抗体，反之亦然。这些技术使得可以制备新抗体，所述新抗体具有给定的抗体(亲本抗体)的抗原结合特性，同时还表现和抗体的同种型或亚类关联的生物学特性，该生物学特性和亲本抗体的生物学特性不同。可使用重组DNA技术。被克隆的编码特定抗体多肽的DNA，例如，编码想要的同种型的抗体的恒定结构域的DNA，可用于这些方法。也参见Lantto等人，2002，MethodsMol.Biol.178：303-16。
因此，本发明的抗体包括这样的抗体，即其包含，例如，可变结构域组合L2H1、L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1H11、L2H4、L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10和L2H11，具有想要的同种型(例如，IgA、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgE和IgD)和其Fab或F(ab′)2片段。此外，如果IgG4是想要的，如Bloom等人，1997，Protein Science 6：407(此处引用作为参考)中所描述的在铰链区引入点突变(CPSCP->CPPCP)以减少形成重链内二硫键的可能性也是想要的，所述重链内二硫键可在IgG4抗体中导致异质性。
此外，用于衍生具有不同性质(即，改变对与其结合的抗原的亲和力)的抗体的技术也是已知的。一个称作链改组的这种技术包括在丝状噬菌体的表面展示(通常称作噬菌体展示)免疫球蛋白可变结构域的基因全套。如Marks等人，1992，BioTechnology，10：779中所描述的，链改组已被用于制备半抗原2-苯基唑-5-酮。
在抗体结合位点中心的互补决定区(CDR)的分子进化已被用于分离具有增加的亲和力的抗体，例如，具有增加的对c-erbB-2的亲和力的抗体，如Schier等人1996，J.Mol.Biol.263：551所描述的。因此，这些技术用于制备IL-4R的抗体。
在特定的实施方案中，本发明的抗体具有至少1×108的对IL-4R的结合亲和力(Ka)。在另一个实施方案中，抗体表现至少1×109的、至少1×1010或至少1×1011的Ka。
本发明还包括多特异性抗体，例如，通过两个不同的抗原结合位点或区域例如，IL-4R的两个不同表位，或IL-4R的表位和IL-13R的表位构成的双特异性抗体。此外，此处公开的双特异性抗体可包含来自此处公开的抗体中的一个的抗原结合位点和来自另一个此处公开的抗体的第二抗原结合区域。可选择地，双特异性抗体可包含来自此处公开的抗体中的一个的抗原结合位点和来自本领域已知的另一个IL-4R抗体的第二抗原结合位点(或可通过已知的方法制备的抗原结合位点)。
许多制备双特异性抗体的方法在本领域是已知的，并且公开于2001年4月20日提交的美国专利申请09/839.632(此处引用作为参考)。这些方法包括使用Milstein等人1983，Nature 305：537和其他文献(美国专利4,474,893、美国专利6,106,833)描述的杂交-杂交瘤法和抗体片段的化学偶联法(Brennan等人，1985，Science 229：81；Glennl等人1987，J.Immunol.139：2367；美国专利6,010,902)。此外，可通过重组方法例如通过使用亮氨酸拉链部分(即，使用优选地形成异源二聚体的Fos和Jun蛋白；Kostelny等人，1992，J.Immnol.148：1547)或其他如在美国专利5,582,996中描述的锁钥相互作用结构域结构来产生双功能抗体。其他有用的技术包括在Kortt等人，1997，同上；美国专利5,959,083和美国专利5,807,706中描述的技术。
在另一方面，本发明提供了抗体的衍生物。所述衍生的抗体可包含给抗体提供想要的特性(例如在特定用途上增加的半寿期)的任何分子或物质。衍生的抗体可包含例如，可检测的(或标记的)部分(例如，放射性、显色性、抗原性或酶促分子、可检测的小珠(例如磁性或小金珠)、或与其他分子(例如，生物素)结合的分子))、治疗性或诊断性部分(例如，放射性、细胞毒性或药物活性部分)、或增加抗体对特定用途(例如，给受试者例如人受试者施用，或其他体内或体外的用途)的适应性的分子。可用于衍生抗体的分子的例子是白蛋白(例如，人血清白蛋白)和聚乙二醇(PEG)。可通过使用本领域熟知的方法制备与白蛋白连接的和PEG化的抗体衍生物。在一个实施方案中，将抗体缀合至或连接至运甲状腺素蛋白(TTR)或TTR变体。TTR或TTR变体可用例如选自葡聚糖、聚(n-乙烯吡咯烷酮)、聚乙二醇、pro丙二醇均聚物、聚环氧丙烷/环氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇和聚乙烯醇。美国专利申请号20030195154。
抗体的治疗方法和施用
此处提供的方法包括给受试者施用抗IL-4R的抗体，从而减少在特定疾病中起作用的IL-4诱导的生物学反应。在特定的实施方案中，本发明的方法包括以离体的方法将内源性IL-4R和抗IL-4R的抗体接触。
治疗包括减轻或预防疾病的至少一种症状，或降低疾病的严重度等。抗体不必实现完全的“治愈”或根除疾病的每一个症状或表现而组成有效的治疗剂。正如相关领域内承认的，用作治疗剂的药物可降低给定的疾病状况的严重度，但不必消除疾病的每一个表现而被当作是有用的治疗剂。本发明的一个实施方案涉及这样的方法，即其包括以足以诱导持续的高于指标基线的改善的量和时间给患者施用IL-4R拮抗剂，所述指标反映特定病症的严重度。
此处讨论抑制IL-4和IL-13与细胞结合的抗体。用于在人中抑制IL-4诱导的和IL-13诱导的活性的方法包括施用有效量的该抗体。从而可治疗由IL-4或IL-13或两种细胞因子一起诱导的疾病。
如在相关领域所理解的，以适合于适应症的方式给受试者施用抗体。可通过任何合适的技术施用抗体，所述技术包括但不限于通过胃肠外、局部或通过吸入施用的技术。如果进行注射，抗体可通过一次快速灌注或连续输注经例如关节内、静脉内、肌内、损伤内(intralesional)、腹膜内或皮下途径施用。至于局部施用，例如在发病或受伤位置，可经皮肤递送和通过植入物的持续释放。通过吸入的递送包括，例如，经鼻或口腔吸入、使用喷雾器、以气雾剂的形式吸入拮抗剂等。其他可选择的方法包括眼药水；口服制剂，包括丸剂、糖浆剂、锭剂、咀嚼树胶(chewing gum)和局部制剂例如洗剂、凝胶剂、喷雾剂和软膏剂。
也涉及以离体的方法使用抗IL-4R的抗体。例如，可将患者的血液或其他体液与结合IL-4R的抗体以离体的方式接触。可将所述抗体结合至合适的不溶性基质或固体支持材料。
有利地，以组合物的形式施用抗体，所述组合物包含至少一种抗IL-4R的抗体和一种或多种另外的成分例如生理学可接受的载体、赋形剂或稀释剂。本发明提供了用于此处提供的方法的这些组合物，其包含有效量的抗IL-4R的抗体。
组合物包含以例如此处描述的任何一种形式存在的IL-4R抗体。例如，抗体可以是完整的抗体或可以是其抗原结合片段或经基因工程改造的衍生物。
组合物可包含例如抗体以及缓冲剂、抗氧化剂例如抗坏血酸、低分子量多肽(例如具有低于10个氨基酸的多肽)、蛋白、氨基酸、糖类例如葡萄糖、蔗糖或糊精、螯合剂例如EDTA、谷胱甘肽和其他稳定剂及赋形剂。经中和缓冲的盐水或用同种血清白蛋白混合的盐水是合适的稀释剂的例子。依照合适的工业标准，也可以加入防腐剂例如苯基醇。使用合适的赋形剂溶液(例如蔗糖)作为稀释剂将组合物配制成冷冻干燥物(lyophilizate)。合适的组分在使用的剂量和浓度上对接受者是无毒的。在Remington’s Pharmaceutical Sciences，第16版，MackPublishing Company，Easton，PA，1980中提供了可用于药物制剂的组分的其他例子。
医学实践者使用的试剂盒包括抗IL-4R的抗体和对治疗此处描述的任何一种疾病中使用的标示或其他说明书。所述试剂盒优选地包括可以上述组合物的形式存在的和可存在于一个或多个小瓶中的一种或多种抗IL-4R的抗体的无菌制剂。
施用的剂量和频率可依这些因素例如施用途径、所用的特定抗体、要治疗的疾病的性质和严重度、疾病是急性的还是慢性的、以及受试者的大小和一般状况的不同而变化。可通过相关领域内已知的方法来确定合适的剂量，例如，在涉及剂量不断增加的研究的临床试验中确定合适的剂量。
可以例如一次或超过一次，例如在一段时间内以定期的间隔施用抗体。在特定的实施方案中，在一段至少一个月或更长的时间内(例如一、二或三个月内或甚至无限期)施用抗体。对于治疗慢性疾病，长期治疗通常是最有效的。然而，对于治疗急性疾病，施用较短的时间例如一至六周就足够了。一般地，施用抗体直至患者表现出高于选择的指征基线的改善的医学相关度。
本发明的特定实施方案包括以大约每天每kg受试者体重约1ng(“1ng/kg/天”)至大约10mg/kg/天的剂量，更优选地大约500ng/kg/天至大约5mg/kg/天的剂量，和最优选地大约5μg/kg/天至大约2mg/kg/天的剂量给受试者施用抗体。在其他实施方案中，每周一次、每周二次或每周三次或更多次地给成人施用抗体来治疗IL-4和/或IL-13介导的疾病、病症或不适，例如此处公开的医学病症。如果进行注射，每成人剂量的抗体有效量可在1-20mg/m2的范围内，优选地是大约为5-12mg/m2。可选择地，可施用flat剂量；剂量可在5-100mg/剂的范围内变化。一个flat剂量的变化范围是大约每剂20-30mg。在本发明的一个实施方案中，通过注射反复施用25mg/剂的flat剂量。如果使用除了注射以外的施用途径，依照标准的医疗准则适当地调整剂量。治疗方案的一个例子包括在至少三周的时间内每周3次给受试者注射大约20-30mg抗IL-4R的抗体的剂量，尽管诱导想要的改善度可能需要更长的治疗时间。对于儿科的受试者(年龄在4-17岁之间)，一个示例性的合适方案包括皮下注射0.4mg/kg、高达最高25mg的抗体剂量，每周施用两或三次。
此处提供的方法的特定实施方案包括皮下注射0.5mg至10mg，优选地3至5mg的抗IL-4R的抗体，每周一次或两次。另一个实施方案涉及每周一次经肺施用(例如，通过喷雾器)3或更多mg的抗体。
此处提供的治疗方案的例子包括每周一次以1.5至3mg的剂量皮下注射抗IL-4R的抗体来治疗哮喘、肺肉样瘤病、最小改变肾变病、自身免疫性色素膜炎、镰状细胞危象、Churg-Strauss综合征、斯耶格伦综合征、自身免疫性淋巴增殖综合症、先兆子痫、自身免疫性溶血性贫血、巴雷特食管、Grave′s病、川崎病和空洞性结核。持续每周施用抗IL-4R的抗体直至获得想要的结果，例如受试者的症状消退。当需要时，可重新开始治疗，或可选择地，可施用维持剂量。
在另一个实施方案中，以足以诱导在至少一个指标上获得改善，优选地持续改善的量和时间施用抗体，所述指标反映正接受治疗的疾病的严重度。各种反映受试者不适、疾病或病症的程度的指标可进行估计用来确定治疗的量和时间是否足够。这些指标包括，例如，临床上承认的疾病严重度、症状或所述疾病的表征的指标。在大多数情况下，如果受试者在至少两个相隔2至4周的时间上表现出改善，那么改善被认为是持续的。改善的程度通常由生理学家来确定，所述生理学家可根据体症或症状来进行该确定，也可利用发给受试者的问卷例如针对给定的疾病产生的生活质量问卷来确定。
作为一个例子，在治疗良性***增生中，以有效地使瘢痕消退和完全治愈的量和时间给受试者施用抗IL-4R的抗体。需要时可给予维持剂量或重新开始治疗。
如上所述，提高的IL-4水平与许多病症相关。可检查患有给定的病症的受试者以鉴定具有提高的IL-4水平的个体，或鉴定具有提高的TH2型免疫应答的个体，从而鉴定可从使用抗IL-4R的抗体的治疗中获得最大益处的受试者。因此，此处提供的治疗方法任选地包括第一步骤，测量受试者的IL-4水平。可给在其体内IL-4水平高于正常水平的受试者施用抗IL-4R的抗体。可选择地或另外地，在施用抗一种或多种TH2型细胞因子的抗体和/或拮抗剂之前，可预先检查受试者以确定所述受试者是否具有提高的TH2型免疫应答。
在用抗IL-4R的抗体治疗期间和/或治疗之后，可监控受试者的IL-4的(和，任选地其他TH2型细胞因子的)水平，以检测细胞因子水平的降低。对于一些病症，提高的IL-4水平的发生率和TH1型与TH2型免疫应答之间的平衡可根据这些因素如疾病的阶断和/或疾病的特定形式变化而变化。可使用已知的技术在例如受试者的血清中测量IL-4水平，和估计TH2型免疫应答。可通过例如ELISA或LUMINEXTM多重细胞因子测定法(Luminex Corporation，Austin，TX)或DELFIA(PerkinElmer LifeSciences，Wallac Oy.，Turku，Finland)测量血液样品中的细胞因子水平。
本发明的方法和组合物的特定实施方案包括使用抗IL-4R的抗体和一种或多种另外的IL-4R拮抗剂，例如，两种或更多种本发明的抗体或抗体衍生物，或本发明的抗体或抗体衍生物和一种或多种其他IL-4R拮抗剂。在其他实施方案中，单独地或和其他用于治疗患者罹患的疾病的药剂一起施用抗IL-4R的抗体。这些药剂的例子包括蛋白质的和非蛋白质的药物。如在相关领域中所公认的，当多种治疗剂共施用时，可相应地调整剂量。“共施用”和组合治疗不限于同时施用，还包括这样的治疗方案，即在该治疗方案中，在包括给患者施用至少一种其他的治疗剂的治疗的过程中至少施用一次IL-4R抗体。
可与IL-4R抗体共施用的其他药剂的例子是根据被治疗的特定疾病选择的其他抗体、细胞因子或细胞因子受体。可选择地，用于治疗上述特定疾病中的一种疾病的非蛋白质药物可与IL-4R拮抗剂共施用。
为治疗IgE介导的疾病，可将抗IL-4R的抗体与IgE拮抗剂共施用。一个例子是抗IgE抗体，例如，XOLAIR(Genentech，South SanFrancisco，CA)。在例如Presta等人，1993，J.Immunol.151：2623-32和Adelroth等人，2000，J.Allergy Clin.Immunol.106：253-59中描述了人源化的抗IgE单克隆抗体。
抗IL-4R的抗体可与可以是干扰IL-5和IL-5受体结合的分子的IL-5拮抗剂例如抗IL-5R或抗IL-5抗体(例如，人或人源化抗IL-5或抗IL-5R单克隆抗体)、或受体例如可溶性人IL-5受体多肽共施用。IL-5已涉嫌在介导过敏性反应中起作用。因此IL-4R和IL-5的拮抗剂的施用预期用于治疗过敏反应，包括但不限于过敏性哮喘。
可和IL-4R抗体一起使用的药剂的其他例子包括抗IL-4抗体、IL-4突变蛋白、IL-4R的结合IL-4的衍生物(如在美国专利5,840,869、5,599,905、5,856,296、5,767,065、5,717,072、6,391,581、6,548,655、6,472,179和5,844,099中所描述的)、IL-13的结合IL-13的衍生物、IL-4R和IL-13R的结合IL-4和/或IL-13的嵌合衍生物、IL-13突变蛋白和CD23的拮抗剂(例如，抗-CD23抗体如IDEC-152TM(IDEC Pharmaceuticals，San Diego，CA)、磷酸二酯酶4(例如，ROFLUMILAST，Byk Gulden Pharmaceuticals，Konstanz，Germany)、整联蛋白(例如，R411TM，Roche，Nutley，NJ)、TIMs、Gob5、STAT6和白三烯。
为治疗哮喘，可将IL-4R抗体和其他抗哮喘药物共施用，所述抗哮喘药物是例如经吸入的皮质类固醇、β激动剂、白三烯拮抗剂、黄嘌呤、氟替卡松、沙美特罗、沙丁胺醇、非类固醇类药剂例如色甘酸钠(cromolyn)等。可将IL-4R和其他抗过敏药物共施用来治疗过敏性反应。
本发明的一个实施方案涉及共施用本发明的抗体或抗体衍生物和氟替卡松和/或沙美特罗来治疗例如哮喘等病症。此处提供包含本发明的抗体或抗体衍生物、氟替卡松和沙美特罗的组合物。ADVAIRDISKUS(GlaxoSmithKline，Research Triangle Park，NC)包含氟替卡松丙酸盐和沙美特罗xinafoate。ADVAIR DISKUS和抗体或抗体衍生物可通过任何有效地治疗或预防特定疾病、病症、伤害或症状的施用途径，例如通过吸入进行递送来治疗哮喘。
组合治疗法的另一个例子包括给患有哮喘的患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和IL-9拮抗剂。可使用任何合适的IL-9拮抗剂例如IL-9受体(例如，其可溶性形式)、干扰IL-9和细胞表面受体结合的抗体(例如，结合IL-9或和IL-9受体多肽结合的抗体)或抑制IL-9诱导的生物学活性的其他化合物。IL-9受体包括在WO 93/18047和美国专利5,789,237和5,962,269中描述的受体，其在此引用作为参考。
在组合治疗法的其他实施方案中，用于治疗溃疡性结肠炎的方法包括共施用本发明的抗体或抗体衍生物和至少一种IL-1拮抗剂。IL-1拮抗剂的例子包括I型IL-1受体、II型IL-1受体、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)、抗IL-1的拮抗性(阻断性)抗体和抗IL-1受体的拮抗性抗体。可使用受体的各种形式，例如片段、变体和融合体，例如，II型IL-1受体的可溶性形式，例如美国专利5,350,683中所描述的形式，此处引用作为参考。
本发明的一个方法包括给患有最小变化肾变病的患者单独地或和IL-13拮抗剂一起共施用本发明的抗体或抗体衍生物，从而例如减轻疾病的严重度。
此处提供的另一个方法是用于治疗各种过敏性炎性疾病的方法，其包括共施用本发明的抗体或抗体衍生物和IL-13的拮抗剂。通过该方法治疗疾病例如哮喘、过敏和慢性肺病例如囊性纤维化和慢性闭塞性肺病。
可使用任何合适的IL-13的拮抗剂，包括但不限于IL-13受体(优选地其可溶性形式)、IL-13受体拮抗剂、抗IL-13或IL-13R的抗体、干扰IL-13和IL-13R结合的其他蛋白和抑制IL-13介导的信号转导的化合物。上面描述了IL-13受体和包含IL-13R多肽作为其组分的异源二聚体。如上所述，可就也充当IL-13的拮抗剂的能力筛选针对IL-4R产生的抗体。
用于治疗或预防特征在于降低的上皮屏障功能的疾病的方法包括共施用本发明的抗体或抗体衍生物和一种或多种IL-13拮抗体。上面已描述了这些疾病。在一个实施方案中，所述疾病是哮喘。特定的实施方案涉及给患有疾病的患者共施用本发明的一种或多种抗体或抗体衍生物和一种或多种IL-13的拮抗剂，所述疾病涉及肺上皮屏障功能或肠上皮屏障功能的降低，其中IL-4和IL-13都在降低的屏障功能中起作用。IL-13对肺和肠上皮屏障功能的不利影响可通过使用测定技术例如实施例3中描述的技术来确定。也参见，Zund等人，1996，J.Biol.Chem.271：7460-64。
此处提供的另一个方法包括给患有疾病的患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和干扰素γ(IFN-γ)，所述疾病涉及肺上皮屏障功能的降低。任选地，该方法还包括给患者共施用一种或多种IL-13的拮抗剂(例如，共施用本发明的抗体或抗体衍生物、IFN-γ和IL-13的拮抗剂)。在一个实施方案中，患者患有哮喘。可通过任何有效地治疗或预防特定疾病、病症、症状或伤害的递送方法，例如为治疗哮喘通过吸入或注射的方法，施用本发明的抗体或抗体衍生物、IFN-γ和/或IL-13的拮抗剂。
此处提供的用于治疗哮喘的一个方法包括给患有哮喘的人施用本发明的抗体或抗体衍生物和干扰素γ。另一个治疗哮喘的方法包括给患有哮喘的人共施用本发明的抗体或抗体衍生物、IFN-γ和IL-13的拮抗剂。在一个实施方案中，将IFN-γ和同时充当IL-4和IL-13两者的拮抗剂的抗体一起给哮喘病患者共施用。这些抗体的例子在本说明书的其他地方进行描述。
如上所述，本发明的单个抗体或抗体衍生物可发挥IL-4的拮抗剂和IL-13的拮抗剂的作用。作为该试剂的例子，一些针对IL-4R  产生的抗体可干扰IL-4和IL-13受体复合物的结合，这是由于在这些多亚基受体复合物(如上描述的)中共有IL-4Rα组分造成的。因此，本发明的单个抗体或抗体衍生物可用于抑制屏障功能降低的方法。
本发明的抗体或抗体衍生物可和一种或多种白三烯受体拮抗剂共施用，从而治疗疾病，例如过敏性炎性疾病，例如哮喘和过敏。白三烯受体拮抗剂的例子包括但不限于montelukast(例如SINGULAIR，Merck& Co.，Whitehouse，NJ)、普仑司特(例如，ONON，Ono Pharmaceuticals，Osaka，Japan)和扎鲁司特(例如，ACCOLATE，AstraZeneca，Wilmington，DE)。可共施用用作5-脂氧合酶抑制剂的药物和IL-4R拮抗剂来治疗哮喘。
此处提供的方法包括给Churg-Strauss综合征患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和一种或多种下列药物：IL-4R拮抗剂、IL-5拮抗剂、IL-13拮抗剂和IgE拮抗剂。这些方法中的一个例子包括给Churg-Strauss综合征患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和IL-5拮抗剂。在另一个实施方案中，给患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和IgE拮抗剂。而在另一个实施方案中，给患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和IL-13的拮抗剂。
可将激素松弛素和本发明的抗体或抗体衍生物共施用来治疗硬皮病(全身性硬化症)、特发性肺纤维化或任何其他特征在于肺纤维样变性的病症，例如涉及上面描述的肺纤维样变性的疾病。优选地使用重组人松弛素来治疗人。
治疗良性***增生的方法包括共施用本发明的抗体或抗体衍生物和一种或多种另外的抗炎剂。抑制炎症的药剂的例子包括肿瘤坏死因子(TNF)拮抗剂和IL-17拮抗剂。
可使用任何合适的IL-17拮抗剂，包括但不限于IL-17受体(例如，其可溶性形式)、IL-17受体拮抗剂、抗IL-17或IL-17受体的抗体、干扰IL-17和IL-17受体结合的其他蛋白和抑制IL-17介导的信号转导的化合物。在WO 96/29408(此处引用作为参考)中描述了IL-17受体，包括其可溶性形式和其寡聚体。此处提供的可选择的方法包括施用IL-17拮抗剂来治疗患有良性***增生的患者。
同样，可使用任何合适的TNF拮抗剂，包括但不限于TNF受体(优选地其可溶性形式)、包含TNF受体(或包含TNF受体的TNF结合部分)的融合蛋白、TNF受体拮抗剂、抗TNF或TNF受体的抗体、干扰TNF和TNF受体结合的其他蛋白和抑制TNF介导的信号转导的化合物。TNF抑制剂的其他例子是药物酞胺哌啶酮和己酮可可碱。优选地使用称作p75或p80TNF-R的TNF受体蛋白。优选的TNF拮抗剂是二聚体形式的可溶性人TNF受体(sTNF-R)，例如TNF-R/Fc融合蛋白的二聚体。一个这样的二聚体是依那西普(etanercept)(ENBREL，Immunex Corporation，Seattle，WA)。p75/p80 TNF-R，包括其可溶性片段和其他形式，描述于WO 91/03553，此处引用作为参考。
因此，在本发明的一个实施方案中，共施用本发明的抗体或抗体衍生物和TNF拮抗剂来治疗任何不想要的IL-4R介导的和TNF诱导的免疫应答在其中起作用的疾病，例如炎症。此处提供的一个方法包括给患有炎性肠病、克罗恩病或溃疡性结肠炎的患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和TNF拮抗剂。其他实施方案涉及这样的方法，即其包括给患有川崎病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性色素层巩膜炎、自身免疫性淋巴增殖综合症、斯耶格伦综合征、慢性疲劳综合征或由药物例如双氯芬酸诱导的肝毒性患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和TNF拮抗剂。
此处提供的另一个方法包括给已发生先兆子痫的孕妇共施用本发明的抗体或抗体衍生物和TNF拮抗剂。在一个实施方案中，本发明的抗体或抗体衍生物和TNF拮抗剂的施用继续于怀孕持续期间。
如相关领域内所承认的，依那西普的合适剂量根据要治疗的疾病的性质、疾病严重度、患者的大小(例如，成人或儿童)和其他因素的不同而变化。在此处提供的一个实施方案中，通过每周两次，以1至25mg的剂量经皮下注射施用ENBREL。儿科剂量的一个实施方案是0.4mg/kg。此处提供的特定实施方案包括给患有自身免疫性淋巴增殖综合征或斯耶格伦综合征的患者共施用本发明的抗体或抗体衍生物和ENBREL，其中以1至25mg的剂量经皮下注射施用ENBREL。
为治移植物抗宿主疾病(″GVHD″)，共施用本发明的抗体或抗体衍生物和至少一种下列试剂：TNF拮抗剂、IL-1拮抗剂、类固醇、或皮质类固醇。在一个实施方案中，TNF抑制剂是ENBREL。在另一个实施方案中，IL-1拮抗剂是II型IL-1受体的可溶性形式，例如，如美国专利5,350,683中所描述的形式。在另一个实施方案中，GVHD与骨髓移植关联(例如，作为结果而发生)。在用于抑制针对被移植的细胞、组织和/或同种抗原的方法中，本发明的抗体或抗体衍生物可和至少一种上面列出的试剂一起使用。
此处公开了在治疗特定疾病中许多用于组合治疗法(例如，和本发明的抗体或抗体衍生物共施用)的细胞因子拮抗剂和其他试剂/药物。要理解这些拮抗剂、试剂或药物在治疗这些疾病中也作为单个试剂使用。也要理解方法(其包括施用针对特定细胞因子的拮抗剂来治疗疾病)的公开内容包括一种类型的拮抗剂的施用，除非特别指出，也包括两种或更多种不同的针对该细胞因子的拮抗剂的施用。
实施例1：单克隆抗体的制备
该实施例说明制备识别人IL-4受体的单克隆抗体的方法。
在通过常规技术(例如，在美国专利5,599,905中描述的技术，此处以其全文引用作为参考)生产单克隆抗体中，IL-4受体多肽可用作免疫原。以各种形式存在的多肽可用作免疫原是得到公认的，所述形式是例如，全长蛋白、其片段、其融合蛋白例如Fc融合蛋白、在细胞表面表达所述重组蛋白的细胞等。
概述该方法的实例，将在完全弗氏佐剂中乳化的IL-4R免疫原以10-100μl的量经皮下注射入路易斯(Lewis)大鼠。三周后，用在不完全弗氏佐剂中乳化的另外的免疫原加强免疫经免疫的动物并且此后每三周加强免疫一次。通过眼眶取血或尾尖切割法(tail-tip excision)定期采集血清样品，通过斑点印迹法、ELISA法(酶联免疫吸附测定法)或通过对125I-IL-4和表达IL-4R的细胞的提取物的结合的抑制来对所述血清样品进行检测。在检测到合适的抗体滴度之后，最后给阳性动物经静脉内注射存在于盐水中的抗原。三至四天后，杀死动物，收获脾细胞，并将其与小鼠骨髓瘤细胞系AG8653融合。将所得的杂交瘤细胞系置于具有HAT选择性培养基(次黄嘌呤、甲氨喋呤和胸苷)的多重微量滴定板中以抑制非融合细胞、骨髓瘤杂合体和脾细胞杂合体的增殖。
筛选杂交瘤克隆与IL-4R的反应性。杂交瘤上清液的最初筛选使用了抗体捕捉法和部分纯化的125I-IL-4受体结合法。通过经修饰的抗体捕捉法测试在该筛选方法中呈阳性的杂交瘤，以检测产生阻断抗体的杂交瘤细胞系。因而检测分泌能够抑制125I-IL-4和表达IL-4R的细胞结合的单克隆抗体的杂交瘤。然后将这些杂交瘤注射入裸小鼠的腹膜腔以产生含有高浓度(＞1mg/ml)的抗IL-4R单克隆抗体的腹水。使用硫酸铵沉淀法，接着通过凝胶排阻层析，和/或基于抗体和G蛋白结合的亲和层析可纯化所得的单克隆抗体。
用于在转基因小鼠中产生人抗体的方法已被描述并且在本领域是熟知的。参见，例如Chen等人，1993，Internat.Immunol.5：647-56；Chen等人，1993，EMBO J.12：821-30；Choi等人，1993，NatureGenetics 4：117-23；Fishwild等人，1996，Nature Biotech.14：845-51；Harding等人，1995，Annals New York Acad.Sci.；Lonberg等人，1994，Nature 368：856-59；Lonberg，1994，Handbook Exper.I Pharmacol.113：49-101；Lonberg等人，1995，Internal Rev.Immunol.13：65-93；Morrison，S，1994，Nature 368：812-13；Neuberger，1996，Nature Biotech.14：826；Taylor等人，1992，Nuc.Acids Res.20：6287-95；Taylor等人，1994，Internat.Immunol.6：579-91；Tomizuka等人，1997，Nature Genetics 16：133-43；Tomizuka等人，2000，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 97：722-27；Tuaillon等人，1993，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 90：3720-24；Tuaillon等人，1994，J.Immunol.152：2912-20；Russel等人，2000，Infection and Immunity April 2000：1820-26；Gallo等人，2000，Eur.J.Immunol.30：534-40；Davis等人，1999，Cancer Metastasis Rev.18：421-25；Green，1999，J.Immunol.Me thods 231：11-23；Jakobovits，1998，Advanced DrugDelivery Rev.31：33-42；Green等人，1998，J.Exp.Med.188：483-95；Jakobovits，1998，Exp.Opin.Invest.Drugs 7：607-14；Tsuda等人，1997，Genomics 42：413-21；Mendez等人，1997，NatureGenetics 15：146-56；Jakobovits，1996，Weir′s Handbook ofExperimental Immunology，The Integrated Immune System第4卷，194.1-194.7；Mendez等人，1995，Genomics 26：294-307；Jakobovits，1994，Current Biol.4：761-63；Arbones，1994，Immunity 1：247-60；Green等人，1994，Nature Genetics 7：13-21；Jakobovits等人，1993，Nature 362：255-58；Jakobovits等人，1993，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 90：2551-55。
实施例2：用于测定阻断活性的测定法
该实施例说明可用于鉴定减少CD23的IL-4和/或IL-13依赖性表达的抗体的测定法。所述测定法基于IL-4和IL-13的增强人B细胞中的活化相关性表面抗原CD23表达的能力。
检测以杂交瘤上清液形式或以纯化的蛋白形式的针对人IL-4R(huIL-4R)产生的抗体。在加入至培养物之前，使用具有10kDa截止值的Centricon过滤设备(Amicon)，通过离心，根据培养基(RPMI 1640加10％热失活的胎牛血清)更换抗体缓冲液。
如以前所描述的(Morris等人，1999，J.Biol.Chem.274：418-23)纯化人外周血B细胞。将培养基中的B细胞(3×105/孔)置于96孔圆底微量滴定板中并以所示的终浓度与受试抗体在室温下预温育30分钟。然后以所示的终浓度向培养物中加入重组人IL-4或IL-13，将细胞在37℃下、含5％CO2的潮湿大气下培养20-24小时。在培养期结束时，将细胞在96孔培养板中用PBS+0.02％NaN3洗涤一次，然后重新悬浮于封闭缓冲液(PBS+NaN3中的2％正常兔血清+1％正常山羊血清)中。之后以1∶10的最终稀释度将缀合藻红蛋白(PE)的CD23单克隆抗体(mAb)或缀合PE的同种型对照mAb(两者都来自Pharmingen)加入细胞。将细胞在4℃下温育30分钟，在PBS+NaN3中洗涤3次并在FacScan(BectonDickinson)上对CD23的表达进行分析。
用杂交瘤生长培养基或同种型匹配非阻断性人抗hIL-4R抗体培养的细胞作阴性对照。将以前显示阻断hIL-4和hIL-13的结合性和功能的抗huIL-4R小鼠mAb((MAB 230，R & D Systems，Minneapolis，MN)用作中和由IL-4和IL-13诱导的CD23的阳性对照。
实施例3：测量屏障功能丧失的测定法
该实施例提供了测定IL-4的拮抗剂抑制IL-4诱导的对上皮组织的破坏和上皮屏障功能丧失的能力的方法。
在一个方面，本发明提供了使用IL-4的拮抗剂抑制IL-4诱导的对上皮(包括但不限于肺上皮或肠上皮)的破坏的方法。对上皮的破坏可导致屏障功能的丧失。下面是可用于测定IL-4的拮抗剂抑制IL-4诱导的对上皮的破坏和上皮屏障功能的丧失的能力的技术的非限制性例子。
可用于在体外制备上皮(上皮屏障)的模型的细胞是已知的。例如，Calu-3人肺上皮细胞适合用于屏障功能研究(Ahdieh等人，2001，Am.J.Physiol.Cell Physiol.281：C2029-38)。另一种合适的细胞系是称作T84的人肠上皮细胞系。如Mada ra等人，1985，J.Cell Biol.，101：2124-33，Madara等人，1989，J.Clin.Invest.83：724-27，和Youakim等人，1999，Am.J.Physiol.276(Gastrointest.Liver Physiol.39)：G1279-88中所描述的，在导致在可渗透的支持物上形成单层上皮细胞的条件下培养T84细胞。所产生的上皮单层模拟肠上皮屏障。
就可区分完整的上皮和被破坏的上皮的特征(例如，对被动跨上皮离子流的抗性)对培养的单层进行检测。一个这样的测定法确定特定放射性标记的化合物是否能够穿过表皮单层。放射性标记的化合物通过单层的渗漏表明屏障是渗透性的而非完整的。例如，可使用甘露醇流动分析法(mannitol flux analysis)，通过测定放射性标记的甘露醇(例如，3H甘露醇)穿过单层的运动来检测上皮的破坏(参见Madara和Stafford，同上)。
用于测定上皮状况的方法的其他例子包括成像方法(例如，在Madara和Stafford(同上)中描述的方法)和跨上皮电阻测量法(例如，在Youakim和Ahdieh(同上)中描述的方法)。
美国专利6,033,688(“‘688专利”)(以其全文在此引用作为参考)也描述了可用于研究屏障渗透性的方法；参见，例如，所述专利的实施例1和4。在产生表现跨上皮电阻的单层的条件下培养人气管上皮细胞。使用电压计确定跨上皮电阻(表明完整的屏障)。可通过将上皮单层暴露于物质或处理，然后在Ussing小室(第8列，40-56行)中测量离子转运活性来测定物质或处理对所述上皮单层的影响。可使用从其他类型细胞例如，来自人囊性纤维化患者的支气管上皮(参见‘688专利，实施例4，第11列)产生的单层进行类似的方法。
因此，可通过将上皮层暴露于IL-4和暴露于物质或处理，测定上皮层的状况，并将上皮层的状况与缺少物质或条件的情况下暴露于IL-4的上皮层的状况进行比较来测定物质或处理抑制IL-4诱导的上皮层屏障功能降低的能力。相对于未暴露于物质或处理的上皮层，暴露于物质或处理的上皮层的状况的改善表明所述物质或处理抑制IL-4诱导的对上皮组织的破坏和上皮屏障功能的丧失。
在一个这样的测定中，如上所述，T84细胞的单层被用作肠上皮屏障的体外模型。发现加入至极性化的上皮细胞的基底侧的IL-4在48-72小时的处理内将屏障功能降低了70％。当将由细胞外结构域构成的可溶性IL-4受体多肽和IL-4同时加入时，屏障功能的降低被阻止，并且屏障和未处理的(对照)细胞保持在相同的水平上。
也对来源于肺上皮细胞的单层(其充当肺上皮细胞屏障的体外模型)进行所述测定方法。发现加入至极性化的肺上皮细胞的基底侧的IL-4在48-72小时的处理内将屏障功能降低50％。当将IL-4受体多肽和IL-4同时加入时，屏障功能的降低得到抑制，屏障保持在和未处理的(对照)细胞相同的水平上。
实施例4：用于测量结合活性的测定法
该实施例提供了测定抗IL-4R的抗体的结合活性的方法。
使用固相氯胺T类似物(IODOGEN，Pierce，St.Louis，MO)或其他合适的放射性标记技术用125I放射性标记抗huIL-4R(或其变体、衍生物或片段)，达到大约3×1016cpm/mmol的特定活性。通过和相应的未标记的蛋白比较结合抑制性和其他生物学抑制性来测定生物学活性的丧失。可选择地，可测量抗huIL-4R(或其变体或片段)对放射性标记的IL-4的结合性的抑制。基本上如Idzerda，等人，1990，J.Exp.Med.171：3861-73中所描述的，在96孔微量滴定板中对表达IL-4R的细胞进行平衡结合测定法。简而言之，将在结合培养基(RPMI 1640、2.5％BSA、20mM HEPES、0.02％叠氮化钠、pH 7.2，补充有0.5mg/ml人IgG和5％人血清)中系列稀释的放射性标记的蛋白和细胞(2.5×106/孔)在150微升的总体积中在4℃下温育2小时。通过在邻苯二甲酸酯油分离混合物中微量离心(microfugation)分离游离的和结合的放射性标记的探针，在γ计数器中进行计数。在潜在的抑制剂存在或不存在的情况下，抑制性测定法使用0.5nM恒定浓度的放射性标记的蛋白。在100倍过量的未标记蛋白存在的情况下确定非特异性结合。基于单个位点的竞争性抑制模型的理论曲线对数据进行拟合，如Dower等人，1984，J Immunol.132：751中描述的。根据方程I(％)＝[100Ki(I)/[1+Ka(L)+Ki(I)]计算百分比抑制性，其中I是抑制剂的摩尔浓度，L是放射性标记的蛋白的摩尔浓度，Ki和Ka分别是抑制剂和蛋白的亲和常数。
也可在用IL-4R/Fc或对照Fc蛋白(通过山羊抗人Fc多克隆抗体(或其他合适的抗人Fc抗体)捕捉)包被的96孔微量滴定板中确定平衡结合和竞争性抑制的等温线。简而言之，在4℃下用在PBS中5μg/ml抗人Fc温育平板，用PBS洗涤两次，然后在4℃下用PBS/0.01％Tween20中的IL-4R/Fc或对照Fc蛋白温育12小时并再用PBS洗涤两次。如上所述，平衡结合等温线使用在结合介质中系列稀释的125I标记的结合蛋白，在未标记的潜在的竞争性抑制剂存在或不存在的情况下，抑制性测定使用恒定的0.5nM的125I标记的抗huIL-4R。在4℃下2小时后，在PBS中洗涤板两次，用50mM柠檬酸盐(pH3.0)或SDS处理释放特异性结合的蛋白，在γ计数器上测量释放的125I标记的抗huIL-4R。如Dower等人(同上)所描述的对数据进行处理。
也可使用BIACORE生物传感器(BIAcore International AB，Uppsala，Sweden)通过表面胞质团共振来测定结合活性。简而言之，根据厂商说明书，使用标准的胺偶联方法和试剂将γ链明确定的山羊抗人IgG(或其他合适的γ链明确定的抗体；GHFC)共价偶联至生物传感器芯片。在固定化的GHFC的上方注入抗huIL-4R或对照抗体，将不同量的IL-4R独立地通过GHFC包被的芯片(阴性对照)和抗huIL-4R包被的芯片。用一个10微升100mM磷酸、以10微升/分钟的脉冲实现芯片的再生。所有结合在HBS(10mM HEPES、0.15M NaCl、3.4mM EDTA、0.02％ NaN3、0.005％表面活性剂P20、pH 7.4)中进行。
实施例5：结合IL-4受体的抗体
该实施例提供了和huIL-4R结合的抗体或抗体衍生物的重链和轻链可变结构域的氨基酸序列和编码其的核苷酸序列。
如WO 01/92340(2001年12月6日公开的)(以其全文在此引用作为参考)的实施例8中所描述的，分离包含L1的轻链可变区和H1的重链可变区的完整的人IgG4抗体。
使用下列寡核苷酸作为引物通过聚合酶链式反应(PCR)，通过cDNA克隆从产生抗体L1H1的杂交瘤细胞系中分离重链H1的可变区：
GTCGACGCCGCCACCATGGA(A/G)TT(G/T)GGGCTGAGCTGG  (SEQ ID NO：70)
Sal I
简并；互补于VH3030
CTTGACCAGGCAGCCCAGGGC                         (SEQ ID NO：71)
互补于huIgG，3’ApaI位点
将扩增产物以Sal I/Apa I片段***pGem-T easy(Promega，Madison，WI)。为促进断裂，用VH3-30前导序列(Matsuda等人，1993，Nature Genetics 3：88-94)替换天然的H1前导序列。
使用H1的重链可变结构域的基于寡核苷酸的诱变产生显示于图3中的重链可变结构域序列H2-H14。通过使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)显示，这些重链可变结构域序列中的每一个序列和L1的轻链可变结构域组合与IL-4受体α结合。
通过PCR从人B细胞中产生天然的人轻链可变基因，所述基因用于构建可变区cDNA基因文库。就其和重链可变区H1一起与人IL-4受体的结合性来筛选这些轻链可变区。使用该方法鉴定了轻链可变区L2-L6。其核苷酸和氨基酸序列分别显示于图2和3中，其中各链的CDR区以粗体标出并在L1中用下划线标出。构架(FR)区也被标出。
为了克隆人κ恒定区，使用RNeasy Mini试剂盒(Qiagen，Valencla，CA)从表达人κ轻链的鼠科动物杂交瘤细胞系中分离RNA。使用First-Strand cDNA Synthesis试剂盒(Amersham Pharmacia Biotech，Piscataway，NJ)对所述RNA进行反转录。以Bsw I/Not I盒，使用下列引物通过PCR从cDNA中扩增人κ轻链核酸：
ATCAAA CGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATC             (SEQ ID NO：72)
       BsiW I
GTTTAAAC GCGGCCGCGGATCCTAACACTCCCCTGTTGAAGCTCTTT  (SEQ ID NO：73)
          Not I
如下将轻链可变区L1和L2独立地连接至人κ轻链恒定区：使用VkIII前导序列将编码L1轻链可变区的NheI/Bsi WI DNA片段和编码人κ恒定区DNA片段的Bsi WI/Not I DNA片段同时亚克隆入pDC409哺乳动物表达载体(Giri等人，1994，EmbO J.13：2822-30和美国专利号6,642,358中描述的，以其全文在此引用作为参考)。使用下列寡核苷酸作为引物，通过Kozak(Kozak，1989，J Cell Biol.108：229-41)和VkIII A27(Straubinger等人，1988，J Mol Biol.199：23-34)前导序列的PCR扩增将VkIII前导序列构建为Sal I/Nhe I盒：
     GTCGACGCCGCCACCATGGAAACCCCAGCGCAGCTTCTCTTCCTCCTGCTACTCTGGCTCCCAGA
     Sal I
TACCGCTAGCGAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCA   (SEQ ID NO：74)
    TGGAGACTGCGTCAACACAATTTCGCTAGCGGTATCTGGGAGCCAGAGTAGCAGCAGGAGGAAGAGAAG
CTGCGCTGGGGTTTCCATGGTGGCGGC GTCGAC  (SEQ ID NO：75)
                             Sal I
用编码Nhe I位点的核苷酸替代天然VkIII A27前导序列的最后6个核苷酸。其导致氨基酸从苏氨酸转变为甘氨酸和丙氨酸转变为丝氨酸，但不影响断裂位点。
如下将各重链可变区H1、H4和H14连接至人IgG4恒定区：使用在3’末端进行了修饰以编码Nhe I位点的VH5a前导序列，将编码H1的重链可变区的Sal I/Apa I DNA片段和编码人I gG4恒定区(SEQ ID NO：77)的Apa I/Not I DNA片段同时***用Sal I/Not I消化的哺乳动物表达载体pDC409(描述于Giri等人，1994，EMBO J.13：2822-30)：
ATGGGGTCAACCGCCATCCTTGGCCTCCTCCTGGCTGTTCTCCAAGGAGTC GCTAGC
(SEQ ID NO：76)                                      Nhe I
作为该改变的结果，最后两个氨基酸是丙氨酸和丝氨酸，而野生型VH5a的最后两个氨基酸是半胱氨酸和丙氨酸。对编码H4-IgG4的构建体使用定点诱变，从而产生包含H12和H13重链可变区的构建体。H1-H14的核苷酸和氨基酸序列分别显示于图2和3中，其中各链的CDR区以粗体标示并在H1中用下划线标出。构架(FR)区也被标示。
使用生物化学结合测定法和/或实施例2的方法检测包含下列可变结构域组合的抗体和/或抗体衍生物，并发现其和IL-4受体结合：L1H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1H11、L2H1、L2H2、L2H3、L2H4、L2H5、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10、L2H11、L2H12、L2H13、L2H14、L3H1、L4H1、L5H1和L6H1。
实施例6：抗体种类和序列特异性
该实施例提供了确定和IL-4受体结合的抗体的种类和序列特异性的方法。
可使用荧光激活的细胞分选仪(FACS)结合测定法测定抗IL-4受体的抗体的种类和/或序列特异性。IL-4受体的细胞外结构域包含细胞因子受体结构域(结构域I)和III型纤连蛋白结构域(结构域II)(Hage等人，1999，Cell 97：271-81)。表达包含人IL-4受体结构域I和/或II、鼠科动物IL-4受体结构域I和/或II、人和鼠科动物IL-4受体结构域I和II的组合、或人或鼠科动物IL-4受体结构域I和/或II的片段的构建体，所述结构域或结构域片段符合读框地融合在鸡抗生物素蛋白的C末端。(在例如，Schulte等人，1997，J.Exp.Med.186：1419-29，Wrighton等人，1992，Growth Factors 6：103-18，Harada等人，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.87：857-61，Mosley等人，1989，Cell 59：335-48中提供了鼠科动物IL-4受体序列)。融合蛋白表达载体被单个地瞬时转染入293T细胞。条件培养基无需纯化用作融合蛋白的来源。使用生物素包被的小珠从溶液中捕获IL-4受体构建体的抗生物素蛋白标记物。使用FITC标记的抗抗生物素蛋白抗体检测融合构建体的抗生物素蛋白部分。用被生物素捕获的IL-4受体构建体温育抗IL-4受体的抗体。用FITC标记的小鼠F(ab’)2抗人IgG作为第二抗体用于检测。将小珠-抗体混合物在Becton DickinsonBioscienceFACScan(BD，Franklin Lakes，NJ)上接受FACS分析。
通过使用上述方法，发现几种此处描述的抗IL-4受体的抗体很好地与包含人IL-4受体的结构域I和II的构建体结合，但不能和包含鼠科动物IL-4受体的结构域I和II的构建体结合。所述抗体微弱地和包含人IL-4受体的结构域I(但不包含结构域II)的构建体结合，而且根本不和包含人IL-4受体结构域II(但不包含结构域I)的构建体结合。此外发现所述抗体很好地和包含人IL-4受体的结构域I和鼠科动物IL-4受体的结构域II的构建体结合。
前述实施方案，包括进行的工作和预言，都是非限制性的，并且是提供用来说明本发明的特定实施方案的。所有在此引用的文献以其全文引用作为参考。
                              序列表
<110>IMMUNEX CORPORATION
     Carter，Paul J.
     Zhou，Hongxing
<120>结合白细胞介素4受体的抗体
<130>3492-WO
<140>--to be assigned--
<141>2004-11-04
<150>60/518,166
<151>2003-11-07
<160>77
<170>PatentIn version 3.2
<210>1
<211>2475
<212>DNA
<213>人类
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(2475)
<400>1
atg ggg tgg ctt tgc tct ggg ctc ctg ttc cct gtg agc tgc ctg gtc    48
Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1               5                   10                  15
ctg ctg cag gtg gca agc tct ggg aac atg aag gtc ttg cag gag ccc    96
Leu Leu Gln Val Ala Ser Ser Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro
            20                  25                  30
acc tgc gtc tcc gac tac atg agc atc tct act tgc gag tgg aag atg    144
Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met
        35                  40                  45
aat ggt ccc acc aat tgc agc acc gag ctc cgc ctg ttg tac cag ctg    192
Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu
    50                  55                  60
gtt ttt ctg ctc tcc gaa gcc cac acg tgt atc cct gag aac aac gga    240
Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thy Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly
65                  70                  75                  80
ggc gcg ggg tgc gtg tgc cac ctg ctc atg gat gac gtg gtc agt gcg    288
Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala
                85                  90                  95
gat aac tat aca ctg gac ctg tgg gct ggg cag cag ctg ctg tgg aag    336
Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys
            100                 105                 110
ggc tcc ttc aag ccc agc gag cat gtg aaa ccc agg gcc cca gga aac    384
Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn
        115                 120                 125
ctg aca gtt cac acc aat gtc tcc gac act ctg ctg ctg acc tgg agc    432
Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Aap Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser
    130                 135                 140
aac ccg tat ccc cct gac aat tac ctg tat aat cat ctc acc tat gca    480
Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala
145                 150                 155                 160
gtc aac att tgg agt gaa aac gac ccg gca gat ttc aga atc tat aac    528
Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn
                165                 170                 175
gtg acc tac cta gaa ccc tcc ctc cgc atc gca gcc agc acc ctg aag    576
Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys
            180                 185                 190
tct ggg att tcc tac agg gca cgg gtg agg gcc tgg gct cag tgc tat    624
Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr
        195                 200                 205
aac acc acc tgg agt gag tgg agc ccc agc acc aag tgg cac aac tcc    672
Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser
    210                 215                 220
tac agg gag ccc ttc gag cag cac ctc ctg ctg ggc gtc agc gtt tcc    720
Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln His Leu Leu Leu Gly Val Ser Val Ser
225                 230                 235                 240
tgc att gtc atc ctg gcc gtc tgc ctg ttg tgc tat gtc agc atc acc    768
Cys Ile Val Ile Leu Ala Val Cys Leu Leu Cys Tyr Val Ser Ile Thr
                245                 250                 255
aag att aag aaa gaa tgg tgg gat cag att ccc aac cca gcc cgc agc    816
Lys Ile Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala Arg Ser
            260                 265                 270
cgc ctc gtg gct ata ata atc cag gat gct cag ggg tca cag tgg gag    864
Arg Leu Val Ala Ile Ile Ile Gln Asp Ala Gln Gly Ser Gln Trp Glu
        275                 280                 285
aag cgg tcc cga ggc cag gaa cca gcc aag tgc cca cac tgg aag aat    912
Lys Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Asn
    290                 295                 300
tgt ctt acc aag ctc ttg ccc tgt ttt ctg gag cac aac atg aaa agg    960
Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Phe Leu Glu His Asn Met Lys Arg
305                 310                 315                 320
gat gaa gat cct cac aag gct gcc aaa gag atg cct ttc cag ggc tct    1008
Aap Glu Asp Pro His Lys Ala Ala Lys Glu Met Pro Phe Gln Gly Ser
                325                 330                 335
gga aaa tca gca tgg tgc cca gtg gag atc agc aag aca gtc ctc tgg    1056
Gly Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu Ile Ser Lys Thr Val Leu Trp
            340                 345             350
cca gag agc atc agc gtg gtg cga tgt gtg gag ttg ttt gag gcc ccg    1104
Pro Glu Ser Ile Ser Val Val Arg Cys Val Glu Leu Phe Glu Ala Pro
        355                 360                 365
gtg gag tgt gag gag gag gag gag gta gag gaa gaa aaa ggg agc ttc    1152
Val Glu Cys Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Glu Lys Gly Ser phe
    370                 375                 380
tgt gca tcg cct gag agc agc agg gat gac ttc cag gag gga agg gag    1200
Cys Ala Ser Pro Glu Ser Ser Arg Aap Asp Phe Gln Glu Gly Arg Glu
385                 390                 395                 400
ggc att gtg gcc cgg cta aca gag agc ctg ttc ctg gac ctg ctc gga    1248
Gly Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly
                405                 410                 415
gag gag aat ggg ggc ttt tgc cag cag gac atg ggg gag tca tgc ctt    1296
Glu Glu Ash Gly Gly Phe Cys Gln Gln Asp Met Gly Glu Ser Cys Leu
            420                 425                 430
ctt cca cct tcg gga agt acg agt gct cac atg ccc tgg gat gag ttc    1344
Leu Pro Pro Ser Gly Ser Thr Ser Ala His Met Pro Trp Asp Glu Phe
        435                 440                 445
cca agt gca ggg ccc aag gag gca cct ccc tgg ggc aag gag cag cct    1392
Pro Ser Ala Gly Pro Lys Glu Ala Pro Pro Trp Gly Lys Glu Gln Pro
    450                 455                 460
ctc cac ctg gag cca agt cct cct gcc agc ccg acc cag agt cca gac    1440
Leu His Leu Glu Pro Ser Pro Pro Ala Ser Pro Thr Gln Ser Pro Aap
465                 470                 475                 480
aac ctg act tgc aca gag acg ccc ctc gtc atc gca ggc aac cct gct    1488
Asn Leu Thr Cys Thr Glu Thr Pro Leu Val Ile Ala Gly Asn Pro Ala
                485                 490                 495
tac cgc agc ttc agc aac tcc ctg agc cag tca ccg tgt ccc aga gag    1536
Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser Gln Ser Pro Cys Pro Arg Glu
            500                 505                 510
ctg ggt cca gac cca ctg ctg gcc aga cac ctg gag gaa gta gaa ccc    1584
Leu Gly Pro Asp Pro Leu Leu Ala Arg His Leu Glu Glu Val Glu Pro
        515                 520                 525
gag atg ccc tgt gtc ccc cag ctc tct gag cca acc act gtg ccc caa    1632
Glu Met Pro Cys Val Pro Gln Leu Ser Glu Pro Thr Thr Val Pro Gln
    530                 535                 540
cct gag cca gaa acc tgg gag cag atc ctc cgc cga aat gtc ctc cag    1680
Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gln Ile Leu Arg Arg Asn Val Leu Gln
545                 550                 555                 560
cat ggg gca gct gca gcc ccc gtc tcg gcc ccc acc agt ggc tat cag    1728
His Gly Ala Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Pro Thr Ser Gly Tyr Gln
                565                 570                 575
gag ttt gta cat gcg gtg gag cag ggt ggc acc cag gcc agt gcg gtg    1776
Glu Phe Val His Ala Val Glu Gln Gly Gly Thr Gln Ala Ser Ala Val
            580                 585                 590
gtg ggc ttg ggt ccc cca gga gag gct ggt tac aag gcc ttc tca agc    1824
Val Gly Leu Gly Pro Pro Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser
        595                 600                 605
ctg ctt gcc agc agt gct gtg tcc cca gag aaa tgt ggg ttt ggg gct    1872
Leu Leu Ala Ser Ser Ala Val Ser Pro Glu Lys Cys Gly Phe Gly Ala
    610                 615             620
agc agt ggg gaa gag ggg tat aag cct ttc caa gac ctc att cct ggc    1920
Ser Ser Gly Glu Glu Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Asp Leu Ile Pro Gly
625                     630             635                 640
tgc cct ggg gac cct gcc cca gtc cct gtc ccc ttg ttc acc ttt gga    1968
Cys Pro Gly Aap Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly
                645                 650                 655
ctg gac agg gag cca cct cgc agt ccg cag agc tca cat ctc cca agc    2016
Leu Asp Arg Glu Pro Pro Arg Ser Pro Gln Ser Ser His Leu Pro Ser
            660                 665                 670
agc tcc cca gag cac ctg ggt ctg gag ccg ggg gaa aag gta gag gac    2064
Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Leu Glu Pro Gly Glu Lys Val Glu Asp
        675                 680                 685
atg cca aag ccc cca ctt ccc cag gag cag gcc aca gac ccc ctt gtg    2112
Met Pro Lys Pro Pro Leu Pro Gln Glu Gln Ala Thr Asp Pro Leu Val
    690                 695                 700
gac agc ctg ggc agt ggc att gtc tac tca gcc ctt acc tgc cac ctg    2160
Asp Ser Leu Gly Ser Gly Ile Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu
705                 710                 715                 720
tgc ggc cac ctg aaa cag tgt cat ggc cag gag gat ggt ggc cag acc    2208
Cys Gly His Leu Lys Gln Cys His Gly Gln Glu Asp Gly Gly Gln Thr
                725                 730                 735
cct gtc atg gcc agt cct tgc tgt ggc tgc tgc tgt gga gac agg tcc    2256
Pro Val Met Ala Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser
            740                 745                 750
tcg ccc cct aca acc ccc ctg agg gcc cca gac ccc tct cca ggt ggg    2304
Ser Pro Pro Thr Thr Pro Leu Arg Ala Pro Asp Pro Ser Pro Gly Gly
        755                 760                 765
gtt cca ctg gag gcc agt ctg tgt ccg gcc tcc ctg gca ccc tcg ggc    2352
Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu Cys Pro Ala Ser Leu Ala Pro Ser Gly
    770                 775                 780
atc tca gag aag agt aaa tcc tca tca tcc ttc cat cct gcc cct ggc    2400
Ile Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Ser Ser Phe His Pro Ala Pro Gly
785                 790                 795                 800
aat gct cag agc tca agc cag acc ccc aaa atc gtg aac ttt gtc tcc    2448
Asn Ala Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro Lys Ile Val Asn Phe Val Ser
                805                 810                 815
gtg gga ccc aca tac atg agg gtc tct                                2475
Val Gly Pro Thr Tyr Met Arg Val Ser
            820                 825
<210>2
<211>825
<212>PRT
<213>人类
<400>2
Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val
1               5                   10                  15
Leu Leu Gln Val Ala Ser Ser Gly Asn Met Lys Val Leu Gln Glu Pro
            20                  25                  30
Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser Ile Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met
        35                  40                  45
Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu
    50                  55                  60
Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly
65                  70                  75                  80
Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala
                85                  90                  95
Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys
            100                 105                 110
Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn
        115                 120                 125
Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser
    130                 135                 140
Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala
145                 150                 155                 160
Val Asn Ils Trp Ser Glu Asn Asp Pro Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn
                165                 170                 175
Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys
            180                185                  190
Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr
        195                 200                 205
Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser
    210                 215                 220
Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln His Leu Leu Leu Gly Val Ser Val Ser
225                 230                 235                 240
Cys Ile Val Ile Leu Ala Val Cys Leu Leu Cys Tyr Val Ser Ile Thr
                245                 250                 255
Lys Ile Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gln Ile Pro Asn Pro Ala Arg Ser
            260                 265                 270
Arg Leu Val Ala Ile Ile Ile Gln Asp Ala Gln Gly Ser Gln Trp Glu
        275                 280                 285
Lys Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Asn
    290             295                     300
Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Phe Leu Glu His Asn Met Lys Arg
305                 310                 315                 320
Asp Glu Asp Pro His Lys Ala Ala Lys Glu Met Pro Phe Gln Gly Ser
                325                 330                 335
Gly Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu Ile Ser Lys Thr Val Leu Trp
            340                 345                 350
Pro Glu Ser Ile Ser Val Val Arg Cys Val Glu Leu Phe Glu Ala Pro
        355                 360                 365
Val Glu Cys Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Glu Lys Gly Ser Phe
    370                 375                 380
Cys Ala Ser Pro Glu Ser Ser Arg Asp Asp Phe Gln Glu Gly Arg Glu
385                 390                 395                 400
Gly Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Aep Leu Leu Gly
                405                 410                 415
Glu Glu Asn Gly Gly Phe Cys Gln Gln Asp Met Gly Glu Ser Cys Leu
            420                 425                 430
Leu Pro Pro Ser Gly Ser Thr Ser Ala His Met Pro Trp Trp Glu Phe
        435                 440                 445
Pro Ser Ala Gly Pro Lys Glu Ala Pro Pro Trp Gly Lys Glu Gln Pro
    450                 455                 460
Leu His Leu Glu Pro Ser Pro Pro Ala Ser Pro Thr Gln Ser Pro Asp
465                 470                 475                 480
Asn Leu Thr Cys Thr Glu Thr Pro Leu Val Ile Ala Gly Asn Pro Ala
                485                 490                 495
Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser Gln Ser Pro Cys Pro Arg Glu
            500                 505                 510
Leu Gly Pro Asp Pro Leu Leu Ala Arg His Leu Glu Glu Val Glu Pro
        515                 520                 525
Glu Met Pro Cys Val Pro Gln Leu Ser Glu Pro Thr THr Val Pro Gln
    530                 535                 540
Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gln Ile Leu Arg Arg Asn Val Leu Gln
545                 550                 555                 560
His Gly Ala Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Pro Thr ser Gly Tyr Gln
                565                 570                 575
Glu Phe Val His Ala Val Glu Gln Gly Gly Thr Gln Ala Ser Ala Val
            580                 585                 590
Val Gly Leu Gly Pro Pro Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser
        595                 600                 605
Leu Leu Ala Ser Ser Ala Val Ser Pro Glu Lys Cys Gly Phe Gly Ala
    610                 615                 620
Ser Ser Gly Glu Glu Gly Tyr Lys Pro Phe Gln Asp Leu Ile Pro Gly
625                 630                 635                 640
Cys Pro Gly Asp Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly
                645                 650                 655
Leu Asp Arg Glu Pro Pro Arg Ser Pro Gln Ser Ser His Leu Pro Ser
            660                 665                 670
Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Leu Glu Pro Gly Glu Lys Val Glu Asp
        675                 680                 685
Met Pro Lys Pro Pro Leu Pro Gln Glu Gln Ala Thr Asp Pro Leu Val
    690                 695                 700
Asp Ser Leu Gly Ser Gly Ile Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu
705                 710                 715                 720
Cys Gly His Leu Lys Gln Cys His Gly Gln Glu Asp Gly Gly Gln Thr
                725                 730                 735
Pro Val Met Ala Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser
            740                 745                 750
Ser Pro Pro Thr Thr Pro Leu Arg Ala Pro Asp Pro Ser Pro Gly Gly
        755                 760                 765
Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu Cys Pro Ala Ser Leu Ala Pro Ser Gly
    770                 775                 780
Ile Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Ser Ser Phe His Pro Ala Pro Gly
785                 790                 795                 800
Asn Ala Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro Lys Ile Val Asn Phe Val Ser
                805                 810                 815
Val Gly Pro Thr Tyr Met Arg Val Ser
            820                 825
<210>3
<211>327
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>轻链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(327)
<400>3
gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca ggg    48
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt agc agc agc    96
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
            20                  25                  30
tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag gct ccc agg ctc ctc    144
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
atc ttt ggt gca tcc agc agg gcc act ggc atc cca gac agg ttc agt    192
Ile Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act ctc acc atc agc aga ctg gag    240
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
cct gaa gat ttt gca gtg tat tac tgt cag cag tat ggt agc tca cct    288
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
ccg tgg acg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gaa atc aaa                327
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>4
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>4
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
            20                  25                  30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>5
<211>327
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>轻链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(327)
<400>5
gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca ggg    48
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt agc aac agc    96
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Ser
            20                  25                  30
tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag gct ccc agg ctc ctc    144
Tyr Lla Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
atc tat ggt gca tcc agc agg gcc cct ggc atc cca gac agg ttc agt    192
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act ctc acc atc agc aga ctg gag    240
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
cct gaa gat ttt gca gtg tat tac tgt cag cag tat gat cac tca gca    288
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp His Ser Ala
                85                  90                  95
ggg tgg acg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag atc aaa                327
Gly Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>6
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>6
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Ser
            20                  25                  30
Tyr Lla Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp His Ser Ala
                85                  90                  95
Gly Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>7
<211>327
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>轻链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(327)
<400>7
gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct ccg ggg    48
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag act gtt aac agc gac    96
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Sln Gln Thr Val Asn Ser Asp
            20                  25                  30
tac tta gcc tgg tac cag cag aaa ccg ggc cag gct ccc agg ctc ctc    144
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
atc tat ggt gca tcc agc agg gcc act ggc atc cca gac agg ttc agt    192
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act ctc acc atc agc aga ctg gag    240
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
ctt gaa gat ttt gca gtc tat tac tgt cag cag tat ggt agg tca cct    288
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro
                85                  90                  95
tcg tgg acg ttc ggc caa ggg acc aaa gtg gat atc aaa                327
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
            100                 105
<210>8
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>8
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Asn Ser Asp
            20                  25                  30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro
                85                  90                  95
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
            100                 105
<210>9
<211>327
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>轻链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(327)
<400>9
gaa att gtg atg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca ggg    48
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt agc agc gac    96
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asp
            20                  25                  30
tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag gct ccc agg ctc ctc    144
Tyr Leu Ala Tyr Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
atc tat ggt gca tct agc agg gcc tct ggc atc cca gac agg ttc agt    192
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
ggc agt ggg ttt ggg aca gac ttc act ctc acc atc agc aga ctg gag    240
Gly Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
cct gaa gat ttt gca ata tat tac tgt cag cag tat ggt agc tca cct    288
Pro Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
ccg tgg acg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gaa atc aaa                327
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>10
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>10
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asp
            20                  25                  30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>11
<211>327
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>轻链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(327)
<400>11
gat att gtg ctg acc cag tct cca gcc acc ctg tct ttg tct cca ggg    48
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt aac agc aac    96
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asn Ser Asn
            20                  25                  30
tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag gct ccc agg ctc ctc    144
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
atc tat ggt aca tcc tac agg gcc act ggc atc cca gac agg ttc agt    192
Ile Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act ctc acc atc acc aga ctg gag    240
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
cct gaa gat ttt gca gtg tat tac tgt cag cag tat ggt agc tca cca    288
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
ccg tgg acg ttc ggc caa ggg aca cga ctg gag att aaa                327
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>12
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>12
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asn Ser Asn
            20                  25                  30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Aap Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
            100                 105
<210>13
<211>327
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>轻链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(327)
<400>13
gat att gtg ctg acg cag act cca gcc acc ctg tct ttg tct cca ggg    48
Asp Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt ggc agc agc    96
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Ser Ser
            20                  25                  30
tac tta gcc tgg tac cag cag aga cct ggc cag gct ccc agg ctc ctc    144
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
atc tat ggt gca tcc agc agg gcc act ggc atc ccg gac agg ttc agt    192
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act ctc acg atc agc aga ctg gag    240
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
cct gaa gat ttt gca gtg tat tat tgt cag cag tat gga agt tca cct    288
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
ccg tgg atg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag atc aaa                327
Pro Trp Met Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>14
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>14
Asp Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Ser Ser
            20                  25                  30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
Pro Trp Met Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>15
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>15
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttt gac tac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>16
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>16
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>17
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>17
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg agt gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttc acc cac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>18
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>18
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>19
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>19
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac aac aac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>20
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>20
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>21
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>21
gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>22
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>22
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phs Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>23
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>23
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttc acg agg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>24
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>24
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>25
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>25
gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>26
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>26
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>27
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>27
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>28
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>28
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>29
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>29
gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>30
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>30
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>31
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>31
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>32
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>32
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Ttg TrP Trp Phe Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>33
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>33
gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>34
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>34
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>35
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>35
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Lau
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>36
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>36
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
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    50                  55                  60
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Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
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Val Ser Ser
        115
<210>37
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>37
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
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Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
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Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
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Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Aan Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
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Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>38
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>38
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Pne Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu TrP Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
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Val Ser Ser
        115
<210>39
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>39
gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg agt gcc gag gac atg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>40
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>40
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
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Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
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Val Ser Ser
        115
<210>41
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>41
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
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Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
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Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
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Val Ser Ser
        115
<210>42
<211>115
<212>PRT
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<400>42
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Atg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>43
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>43
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Aan
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttt gac tac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>44
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>44
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>45
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>45
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttc acc cac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>46
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>46
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>47
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>47
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Pha Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac aac aac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>48
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50              55                      60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                     110
Val Ser Ser
        115
<210>49
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>49
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tac ttc acg agg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>50
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>50
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>51
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>51
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>52
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>52
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>53
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>53
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cya Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>54
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>54
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>55
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>55
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Sep Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>56
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>56
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Pne Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>57
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>57
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>58
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>58
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>59
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>59
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca agc tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>60
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>60
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>61
<211>345
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>重链可变序列
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(345)
<400>61
gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg    48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat    96
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
gct atg ttc tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta    144
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
tca ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag    192
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ctt    240
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac acg gct gtg tat tac tgt gca    288
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc    336
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
gtc tcc tca                                                        345
Val Ser Ser
        115
<210>62
<211>115
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>合成的构建体
<400>62
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Set Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn
            20                  25                  30
Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
            100                 105                 110
Val Ser Ser
        115
<210>63
<211>109
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>27A1轻链可变区
<400>63
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
            20                  25                  30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr AsP Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
                85                  90                  95
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>64
<211>116
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>27A1重链可变区
<400>64
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Sar Cya Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr
            20                  25                  30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Ile Ile Trp Phe Glu Gly Asn Asn Gln Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Glu Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Gly Lys Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
            100                 105                 110
Thr Val Ser Ser
        115
<210>65
<211>107
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>5A1轻链可变区
<400>65
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
            20                  25                  30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr His Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
            100                 105
<210>66
<211>123
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>5A1重链可变区
<400>66
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe
            20                  25                  30
Val Met His Trp Val Arg Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ala Ile Gly Thr Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Asp Arg Pro Met Val Arg Gly Val Ile Ile Asp Tyr Phe Asp Tyr
            100                 105                 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
        115                 120
<210>67
<211>107
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>63轻链可变区
<400>67
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Thr Trp
            20                  25                  30
Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Val Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Phe
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
            100                 105
<210>68
<211>117
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>63重链可变区
<400>68
Glu Val Gln Val Leu Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Set Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ser Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Phe Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Lys Asp Asn Arg Gly Phe Phe His Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
            100                 105                 110
Val Thr Val Ser Ser
        115
<210>69
<211>107
<212>PRT
<213>人工的
<220>
<223>1B7轻链可变区
<400>69
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Arg
            20                  25                  30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Ile Ala Ser Ile Leu Gln Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Arg Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Phe
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
            100                 105
<210>70
<211>36
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<220>
<221>misc_特征
<222>(21)..(21)
<223>N is A or G
<220>
<221>misc_特征
<222>(24)..(24)
<223>N is G or T
<400>70
gtcgacgccg ccaccatgga nttngggctg agctgg                              36
<210>71
<211>21
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>71
cttgaccagg cagcccaggg c                                              21
<210>72
<211>36
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>72
atcaaacgta cggtggctgc accatctgtc ttcatc                              36
<210>73
<211>49
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>73
gtttaaacgc ggccgcggat cctaacactc tcccctgttg aagctcttt                49
<210>74
<211>99
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>74
gtcgacgccg ccaccatgga aaccccagcg cagcttctct tcctcctgct actctggctc    60
ccagataccg ctagcgaaat tgtgttgacg cagtctcca                           99
<210>75
<211>99
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>75
tggagactgc gtcaacacaa tttcgctagc ggtatctggg agccagagta gcaggaggaa    60
gagaagctgc gctggggttt ccatggtggc ggcgtcgac                           99
<210>76
<211>57
<212>DNA
<213>人工的
<220>
<223>引物
<400>76
atggggtcaa ccgccatcct tggcctcctc ctggctgttc tccaaggagt cgctagc       57
<210>77
<211>327
<212>PRT
<213>人类
<400>77
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1               5                   10                  15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
            20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
        35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
    50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
                85                  90                  95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
            100                 105                 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
        115                 120                 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
    130                 135                 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145                 150                 155                 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
                165                 170                 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
            180                 185                 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Lyr Tys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
        195                 200                 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
    210                 215                 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225                 230                 235                 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
                245                 250                 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
            260                 265                 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
        275                 280                 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
    290                 295                 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305                 310                 315                 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
                325

Claims (47)

1.分离的抗体，其包含
a)包含选自下列序列的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)和选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少80％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少15个连续氨基酸的序列，
iii)由与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列编码的序列，和
iv)由在中度严紧条件下与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列的互补序列杂交的核苷酸序列编码的序列，
或
b)包含选自下列序列的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少80％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少15个连续氨基酸的序列，
iii)由与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列编码的序列，和
iv)由在中度严紧条件下与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列的互补序列杂交的核苷酸序列编码的序列，
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域，条件是所述抗体不同时包含SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：63、SEQ ID NO：65、SEQ ID NO：67或SEQ ID NO：69的轻链可变结构域氨基酸序列和SEQ IDNO：16、SEQ ID NO：64、SEQ ID NO：66或SEQ ID NO：68的重链可变结构域氨基酸序列，
其中所述抗体可结合人IL-4受体。
2.权利要求1的抗体，其包含：
a)包含选自下列序列的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)和选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少85％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少25个连续氨基酸的序列，
iii)由与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少85％同一性的核苷酸序列编码的序列，和
iv)由在严紧条件下与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列的互补序列杂交的核苷酸序列编码的序列，
或
b)包含选自下列序列的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少85％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少25个连续氨基酸的序列，
iii)由与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少85％同一性的核苷酸序列编码的序列，和
iv)由在严紧条件下与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列的互补序列杂交的核苷酸序列编码的序列，
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
3.权利要求2的抗体，其包含
a)包含选自下列序列的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)和选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少90％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少35个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
b)包含选自下列序列的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少90％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少35个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列编码的序列，和
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
4.权利要求3的抗体，其包含
a)包含选自下列序列的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)和选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少95％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少50个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少95％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
b)包含选自下列序列的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少95％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少50个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少95％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
5.权利要求4的抗体，其包含
a)包含选自下列序列的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)和选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少97％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少70个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少97％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
b)含有选自下列序列的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少97％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少70个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少97％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
6.权利要求5的抗体，其包含
a)包含选自下列序列的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)和选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列具有至少99％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的序列的至少90个连续氨基酸的序列，和
ii)由与选自SEQ ID NO：3、5、7、9、11和13的核苷酸序列具有至少99％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
b)包含选自下列序列的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)与选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列具有至少99％同一性的序列，
ii)选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的序列的至少90个连续氨基酸的序列，和
iii)由与选自SEQ ID NO：15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列具有至少99％同一性的核苷酸序列编码的序列，
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
7.权利要求6的抗体，其包含
a)含有选自SEQ ID NO：4、6、8、10、12和14的氨基酸序列的轻链可变结构域，
或
b)含有选自SEQ ID NO：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60和62的氨基酸序列的重链可变结构域，
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
8.权利要求1的抗体，其包含
a)含有由于至少一个选自下列的氨基酸替代而与SEQ ID NO：4不同的氨基酸序列的轻链可变结构域：S28T、S30N、S30G、S31N、S32D、S32N、A52T、S54Y、T57P、T57S、G93D、S94H、S94R、P96A、P97G和T99M，
或
b)含有由于至少一个选自下列的氨基酸替代而与SEQ ID NO：16不同的氨基酸序列的重链可变结构域：N58S、Y101W、F102Y、D103T、D103N、D103P、Y104H、Y104N、Y104W和Y104R和T99M
或
c)a)的所述轻链可变结构域和b)的所述重链可变结构域。
9.权利要求1的抗体，其包含
a)含有仅由于下列方面而与SEQ ID NO：4不同的氨基酸序列的轻链可变结构域：
i)至少一个选自S28T、S30N、S30G、S31N、S32D、S32N、A52T、S54Y、T57P、T57S、G93D、S94H、S94R、P96A、P97G和T99M的氨基酸替代，和
ii)至少一个选自E1D、L4M、S7T、G9A、K40R、F50Y、S68F、S77T、V86I、K105R、V106L和E107D的氨基酸替代，
或
b)含有仅由于下列方面而与SEQ ID NO：16不同的氨基酸序列的重链可变结构域：
i)至少一个选自N58S、Y101W、F102Y、D103T、D103N、D103P、Y104H、Y104N、Y104W和Y104R的氨基酸替代，和
ii)至少一个选自Q6E、H13Q、G24A、R86S和M90T的氨基酸替代，
或
c)a)的轻链可变结构域和b)的重链可变结构域。
10.权利要求1的抗体，其中：
a.轻链CDR1包含选自SEQ ID NO：6的残基24-35、SEQ ID NO：8的残基24-35、SEQ ID NO：10的残基24-35、SEQ ID NO：12的残基24-35和SEQ ID NO：14的残基24-35的序列，或
b.轻链CDR2包含选自SEQ ID NO：4的残基51-57、SEQ ID NO：6的残基51-57、SEQ ID NO：10的残基51-57、SEQ ID NO：12的残基51-57的序列，或
c.轻链CDR3包含选自SEQ ID NO：4的残基90-99、SEQ ID NO：6的残基90-99、SEQ ID NO：8的残基90-99、SEQ ID NO：14的残基90-99的序列的序列，或
d.重链CDR1包含序列SEQ ID NO：16的残基31-35，或
e.重链CDR2包含选自SEQ ID NO：16的残基50-65和SEQ ID NO：18的残基50-65的序列，或
f.重链CDR3包含选自SEQ ID NO：4的残基90-99、SEQ ID NO：18的残基98-104、SEQ ID NO：20的残基98-104、SEQ ID NO：22的残基98-104、SEQ ID NO：24的残基98-104、SEQ ID NO：26的残基98-104、SEQ ID NO：30的残基98-104和SEQ ID NO：34的残基98-104的序列。
11.权利要求10的抗体，其中：
a.轻链CDR1包含选自SEQ ID NO：6的残基24-35、SEQ ID NO：8的残基24-35、SEQ ID NO：10的残基24-35、SEQ ID NO：12的残基24-35和SEQ ID NO：14的残基24-35的序列，和
b.轻链CDR2包含选自SEQ ID NO：4的残基51-57、SEQ ID NO：6的残基51-57、SEQ ID NO：10的残基51-57、SEQ ID NO：12的残基51-57的序列，和
c.轻链CDR3包含选自SEQ ID NO：4的残基90-99、SEQ ID NO：6的残基90-99、SEQ ID NO：8的残基90-99、SEQ ID NO：14的残基90-99的序列，
d.重链CDR1包含序列SEQ ID NO：16的残基31-35，和
e.重链CDR2包含选自SEQ ID NO：16的残基50-65和SEQ ID NO：18的残基50-65的序列，和
f.重链CDR 3包含选自SEQ ID NO：4的残基90-99、SEQ ID NO：18的残基98-104、SEQ ID NO：20的残基98-104、SEQ ID NO：22的残基98-104、SEQ ID NO：24的残基98-104、SEQ ID NO：26的残基98-104、SEQ ID NO：30的残基98-104和SEQ ID NO：34的残基98-104的序列。
12.权利要求1的抗体，其中：
a)轻链FRI包含选自SEQ ID NO：4的残基1-23、SEQ ID NO：10的残基1-23、SEQ ID NO：12的残基1-23和SEQ ID NO：14的残基1-23的序列，或
b)轻链FR2包含选自SEQ ID NO：4的残基36-5O和SEQ ID NO：14的残基36-50的序列，或
c)轻链FR3包含选自SEQ ID NO：4的残基58-89、SEQ ID NO：10的残基58-89和SEQ ID NO：12的残基58-89的序列，或
d)轻链FR4包含选自SEQ ID NO：4的残基100-109、SEQ ID NO：8的残基100-109和SEQ ID NO：12的残基100-109的序列，或
e)重链FR1包含选自SEQ ID NO：16的残基1-30和SEQ ID NO：42的残基1-30的序列，或
f)重链FR2包含SEQ ID NO：16的残基36-49的序列，或
g)重链FR3包含选自SEQ ID NO：16的残基66-97、SEQ ID NO：18的残基66-97和SEQ ID NO：42的残基66-97的序列，或
h)重链FR4包含SEQ ID NO：16的残基105-115的序列。
13.权利要求12的抗体，其中：
a)轻链FR1包含选自SEQ ID NO：4的残基1-23、SEQ ID NO：10的残基1-23、SEQ ID NO：12的残基1-23和SEQ ID NO：14的残基1-23的序列，和
b)轻链FR2包含选自SRQ ID NO：4的残基36-50和SEQ ID NO：14的残基36-50的序列，和
c)轻链FR3包含选自SEQ ID NO：4的残基58-89、SEQ ID NO：10的残基58-89和SEQ ID NO：12的残基58-89的序列，和
d)轻链FR4包含选自SEQ ID NO：4的残基100-109、SEQ ID NO：8的残基100-109和SEQ ID NO：12的残基100-109的序列，和
e)重链FR1包含选自SEQ ID NO：16的残基1-30和SEQ ID NO：42的残基1-30的序列，和
f)重链FR2包含SEQ ID NO：16的残基36-49的序列，和
g)重链FR3包含选自SEQ ID NO：16的残基66-97、SEQ ID NO：18的残基66-97和SEQ ID NO：42的残基66-97的序列，和
h)重链FR4包含SEQ ID NO：16的残基105-115的序列。
14.权利要求1的抗体，其中所述抗体选自L1H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1H11、L2H1、L2H2、L2H3、L2H4、L2H5、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10、L2H11、L2H12、L2H13、L2H14、L3H1、L4H1、L5H1和L6H1。
15.权利要求1的抗体，其中所述抗体是人、人源化或嵌合抗体。
16.权利要求1的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体。
17.权利要求1的抗体，其中所述抗体选自IgD、IgE，IgM、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和在铰链区具有至少一个突变的IgG4，所述突变减轻了形成重链内二硫键抗体的可能性。
18.包含权利要求1的抗体的IL-4受体结合部分的分离的多肽。
19.权利要求18的分离多肽，其中所述多肽包含Fab、F(ab′)2、ScFv、二体、三体或四体。
20.分离的核酸，其包含：
a)编码权利要求1(a)的抗体的轻链的核苷酸序列或其互补序列，
或
b)编码权利要求1(b)的抗体的重链的核苷酸序列或其互补序列，
或
c)编码包含权利要求1的抗体的IL-4受体结合部分的多肽的核苷酸序列或其互补序列，或
d)a)的核苷酸序列和b)的核苷酸序列。
21.权利要求20的分离核酸，其中所述核酸包含至少一个选自SEQID NO：5、7、9、11、13、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59和61的核苷酸序列。
22.包含要求20的所述核酸的载体。
23.权利要求22的载体，其中所述载体是表达载体。
24.包含权利要求20的所述核酸的经分离的细胞。
25.权利要求24的分离细胞，其中所述细胞是杂交瘤细胞。
26.权利要求24的分离细胞，其中所述细胞是转基因细胞。
27.制备权利要求1的所述抗体的方法，其包括孵育细胞和从所述细胞分离所述抗体，所述细胞包含编码所述抗体的轻链的核酸和编码所述抗体的重链的核酸，所述孵育是在允许所述细胞表达所述轻链和所述重链和允许所述轻链和所述重链装配成所述抗体的条件下进行。
28.权利要求27的方法，其中所述细胞是杂交瘤细胞。
29.权利要求27的方法，其中所述细胞是转基因细胞。
30.抑制IL-4受体的方法，其包括将表达IL-4受体的细胞和权利要求1的抗体接触，所述接触是在允许所述抗体结合所述IL-4受体的条件下进行的，其中所述抗体和所述IL-4受体的结合抑制通过所述IL-4受体的信号转导。
31.权利要求30的方法，其中所述细胞是人细胞。
32.权利要求31的方法，其中所述人细胞存在于人中。
33.抑制IL-4受体的方法，其包括将表达IL-4受体α的细胞与权利要求18的多肽接触，所述接触是在允许所述多肽结合所述IL-4受体α的条件下进行的，其中所述多肽和所述IL-4受体的结合抑制通过所述IL-4受体的信号转导。
34.权利要求33的方法，其中所述细胞是人细胞。
35.权利要求34的方法，其中所述人细胞存在于人中。
36.治疗受试者疾病的方法，其包括给所述受试者施用对治疗所述疾病有效的量的权利要求1的所述抗体。
37.权利要求36的方法，其中所述疾病是炎症或癌症。
38.权利要求37的方法，其中所述炎症或癌症是免疫学疾病。
39.权利要求38的方法，其中所述疾病是哮喘、脓毒性关节炎、疮疹样皮炎、慢性自发性荨麻疹、溃疡性结肠炎、硬皮病、增生性瘢痕、Whipple′s病、良性***增生、IL-4受体在其中起作用的肺病、IL-4受体介导的上皮屏障破坏在其中起作用的疾病、IL-4受体在其中起作用的消化***疾病、对药物的过敏性反应、川崎病、镰状细胞病、Churg-Strauss综合征、Grave′s病、先兆子痫、斯耶格伦综合征、自身免疫性淋巴增殖综合征、自身免疫性溶血性贫血、巴雷特食管、自身免疫性色素膜炎、结核、囊性纤维化、过敏性肺支气管霉菌病、慢性阻塞性肺病、博莱霉素诱导的肺病和纤维化、放射性诱导肺纤维样变性、肺泡蛋白沉积症、成人呼吸困难综合征、肉样瘤病、高IgE综合症、特发性嗜酸细胞过多综合征、自身免疫发疱病、寻常性天疱疮、大疱性类天疱疮、重症肌无力、慢轻疲劳综合征或肾变病。
40.治疗受试者疾病的方法，其包括给所述受试者施用对治疗所述疾病有效的量的权利要求18的所述多肽。
41.权利要求40的方法，其中所述疾病是炎症或癌症。
42.权利要求41的方法，其中所述炎症或癌症是免疫学疾病。
43.权利要求42的方法，其中所述疾病是哮喘、脓毒性关节炎、疮疹样皮炎、慢性自发性荨麻疹、溃疡性结肠炎、硬皮病、增生性瘢痕、Whipple′s病、良性***增生、IL-4受体在其中起作用的肺病、IL-4受体介导的上皮屏障破坏在其中起作用的疾病、IL-4受体在其中起作用的消化***疾病、对药物的过敏性反应、川崎病、镰状细胞病、Churg-Strauss综合征、Grave′s病、先兆子痫、斯耶格伦综合征、自身免疫性淋巴增殖综合症、自身免疫性溶血性贫血、巴雷特食管、自身免疫性色素膜炎、结核、囊性纤维化、过敏性肺支气管霉菌病、慢性阻塞性肺病、博莱霉素诱导的肺病和纤维化、放射性诱导肺纤维样变性、肺泡蛋白沉积症、成人呼吸困难综合征、肉样瘤病、高IgE综合症、特发性嗜酸细胞增多综合征、自身免疫发疱病、寻常性天疱疮、大疱性类天疱疮、重症肌无力、慢轻疲劳综合症或肾变病。
44.包含权利要求1的所述抗体和赋形剂、稀释剂或缓冲剂的药物组合物。
45.包含权利要求18的所述多肽和赋形剂、稀释剂或缓冲剂的药物组合物。
46.权利要求1的抗体，其中所述抗体不结合鼠IL-4受体。
47.权利要求1的抗体，其中所述抗体可结合人IL-4受体的结构域I。
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