CN1737110A - 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 - Google Patents
一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1737110A CN1737110A CN 200510050196 CN200510050196A CN1737110A CN 1737110 A CN1737110 A CN 1737110A CN 200510050196 CN200510050196 CN 200510050196 CN 200510050196 A CN200510050196 A CN 200510050196A CN 1737110 A CN1737110 A CN 1737110A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- fermentation
- grams
- producing
- liquid submerged
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 33
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims abstract description 16
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 10
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 7
- 241001236266 Tolypocladium ophioglossoides Species 0.000 claims abstract description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 241000190633 Cordyceps Species 0.000 claims description 21
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 17
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 241000099774 Cuscuta salina Species 0.000 claims description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 13
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 8
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 6
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 3
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 abstract 2
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 abstract 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 abstract 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 2
- ODINCKMPIJJUCX-UHFFFAOYSA-N Calcium oxide Chemical compound [Ca]=O ODINCKMPIJJUCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000004858 feed analysis Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000019255 Menstrual disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018525 Postpartum Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000000292 calcium oxide Substances 0.000 description 1
- 235000012255 calcium oxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000013530 defoamer Substances 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000006180 nutrition needs Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，以大规模液体深层发酵培养大团囊虫草菌体(Cordyceps ophioglossoides)为目标。以人工分离培养到的大团囊虫草纯菌株为出发菌种，经斜面培养、摇瓶种子培养、最后到发酵罐培养，发酵液中的菌丝体以干重计可达2～3％的。本发明中公开的液体种子培养基和发酵培养基分别由蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白胨、镁盐、钾盐和蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白水解液、镁盐、钾盐组成。两种培养基分别适合液体种子阶段培养和深层液体通气培养大团囊虫草菌，合理满足了大团囊虫草菌不同发酵时期所需的营养物质，促进了菌体的生长和繁殖，提高了菌的活性。
Description
技术领域
本发明涉及微生物工程技术领域，特别涉及一种大团囊虫草菌(Cordyceps ophioglossoides)的液体深层发酵培养工艺。
背景技术
大团囊虫草是一种名贵中草药，我国南方地区民间使用较为普遍，具有悠久的历史。该虫草子实体在治疗妇科疾病方面药用价值极高，主要用于治疗***、痛经、闭经等病，对产后出血、促进产后子宫复原也具有显著效果。由于野生资源的匮乏和生长环境的恶化，现有该真菌的天然资源已不能满足人们的需求，利用现代的生物技术来挽救这种名贵的中药十分必要。
上个世纪中后期发展起来的现代发酵技术已成功应用于多种药用真菌的大规模生产，其中以液体发酵技术最为成熟。本次将液体发酵技术应用到大团囊虫草菌体的生产在国内尚属首例，研究结果表明该方案是可行的。
发明内容
本发明的目的在于针对液体发酵过程中的营养需求与菌体生长的关系，提供了一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，菌种是本实验室分离得到的大团囊虫草菌的纯菌株(拉丁文学名为Cordycepsophioglossoides)，现保存于中国专利局指定的保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存编号为：CGMCC No.1146。
本发明提供的一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法的实施方案为：以人工分离培养到的大团囊虫草纯菌株为出发菌种，依次经固体斜面培养，摇床种子培养和发酵培养完成。
固体斜面培养的条件为，从保藏菌种接种到配制的斜面培养基上，温度20～30℃，培养200～240小时。
每1000毫升斜面培养基的主要成份为：马铃薯100～300克、蔗糖或葡萄糖10～30克、琼脂15～25克，加水定容至1升，调pH值为4.8～6.5。
摇床种子培养的条件为，菌种固体斜面培养200～240小时后，挑取菌丝体接种于装有液体种子培养基的摇瓶中，在20～30℃培养，转速150～200rpm，培养60～72小时。
种子培养基与摇瓶的容积比为1∶3～1∶5。
每1000毫升种子培养基的主要成份为：蔗糖20～60克、酵母粉或酵母膏10～50克、蛋白胨10～50克、MgSO4·7H2O 0.1～0.5克、KH2PO4 0.1～0.5克，pH自然。
发酵培养的方法是，液体种子摇床培养60～72小时后接种至装有发酵培养基的发酵罐中，接种量5～15％(V/V)、保持罐温20～30℃、罐压0.4～0.8kg/cm，搅拌速率100～250rpm，通气量1∶0.3～1∶1.2，发酵时间85～110小时。
每1000毫升发酵培养基的主要成份为：蔗糖50～100克、酵母粉或酵母膏10～60克，蛋白水解液20～100毫升(V/V)、MgSO4·7H2O 0.2～1克、KH2PO4 0.2～1克，培养基的pH值调为4.8～6.5。
发酵培养采用液体深层通气发酵培养。
本发明的放罐标准是发酵液变得粘稠，镜检发现菌丝体开始衰老。
经与其他培养工艺进行比较、反复试验验证，本发明效果显著：
(1)本发明中种子培养基提供了菌体短期内快速生长所需的营养物质，培养60小时左右即可进行深层发酵。
(2)本发明中液体深层通气发酵培养基，营养成分配比合理，能够保证大团囊虫草菌的生长需要，培养基材料丰富，整个分批发酵过程中只需一次配料、一次灭菌即可，具有省时、省工，又减少了由于中途加料造成污染杂菌的机会。
(3)采用本发明中的液体深层通气发酵工艺进行分批发酵，每升发酵液可得到20～30克的干菌体。
(4)本发明是国内首次对大团囊虫草菌的发酵工艺进行研究，对于该菌以后的实验研究和工业化生产均有很大的指导意义。
具体实施方式：
下面结合具体实施例来进一步详细描述本发明。
实施例1：种子培养基的制备
称取蔗糖40克、酵母粉(膏)20克、蛋白胨30克、MgSO4·7H2O 0.2克、KH2PO4 0.2克，将各组分混合溶解，加水定容至1000毫升，灭菌后即得。
实施例2：蛋白水解液的制备
方法一：取新鲜原料黄豆粉、虾粉、蚕蛹粉等，于60℃烘箱中干燥6个小时，然后放于80℃烘箱中干燥17个小时，称取干粉100克，加入生石灰6克，水640毫升，在0.15Mpa下加压水解2个小时，过滤，取滤液即得。
方法二：取新鲜原料黄豆粉、虾粉、蚕蛹粉等，于60℃烘箱中干燥6个小时，然后放于80℃烘箱中干燥17个小时，称取干粉100克，加入6mol/l的盐酸600毫升，在沸水浴中水解30分钟，过滤后收集滤液。
实施例3：液体深层通气发酵培养基的制备
称取蔗糖50克、酵母粉(膏)20克、按实施例2制备的蛋白水解液40毫升、MgSO4·7H2O 0.5克、KH2PO4 0.5克。将上述成分混合加水至1000毫升，另外加0.6毫升泡敌作消泡剂，用盐酸调pH到5.6，灭菌后即为发酵培养基。
实施例4：斜面培养基的制备
称取马铃薯200克、蔗糖或葡萄糖20克、琼脂20克，将各组分混合溶解，加水定容至1000毫升，用盐酸调pH到5.6，灭菌后即为斜面培养基。实施例5：液体深层培养方法一
(1)取适量按实施例4配制的新鲜斜面培养基，挑取保藏菌种的菌丝体采用涂布或划线的方法接种到斜面培养基上，于25℃培养200小时。
(2)选菌体繁茂的斜面培养菌种，从上挑取1立方厘米菌丝体或挖取1立方厘米菌苔接种于装有按实施例1制备的液体种子培养基的摇瓶中，在温度25℃，转速200rpm条件下培养70小时。
(3)取处于对数生长中后期的种子培养物，以8％(V/V)的接种量转接入装有按实施例3制备的发酵培养基的发酵罐中，保持罐温25℃、罐压0.5kg/cm，搅拌速率150rpm，通气量1∶0.6，发酵培养时间100小时。待发酵液变的粘稠，镜检观察菌丝体开始衰老时，停止发酵、放罐，分别收集菌丝体和发酵液，每升发酵液可获得20g以上的干燥菌丝体。
实施例6：液体深层培养方法二
(1)取适量按实施例4配制的新鲜斜面培养基，挑取保藏菌种的菌丝体采用涂布或划线的方法接种到斜面培养基上，于20℃培养240小时。
(2)选菌体繁茂的斜面培养菌种，从上挑取1立方厘米菌丝体或挖取1立方厘米菌苔接种于装有按实施例1制备的液体种子培养基的摇瓶中，在温度30℃，转速150rpm条件下培养60小时。
(3)取处于对数生长中后期的种子培养物，以5％(V/V)的接种量转接入装有按实施例3制备的发酵培养基的发酵罐中，保持罐温30℃、罐压0.4kg/cm，搅拌速率250rpm，通气量1∶0.3，发酵培养时间110小时。待发酵液变的粘稠，镜检观察菌丝体开始衰老时，停止发酵、放罐，分别收集菌丝体和发酵液，每升发酵液可获得20g以上的干燥菌丝体。
实施例7：液体深层培养方法三
(1)取适量按实施例4配制的新鲜斜面培养基，挑取保藏菌种的菌丝体采用涂布或划线的方法接种到斜面培养基上，于30℃培养220小时。
(2)选菌体繁茂的斜面培养菌种，从上挑取1立方厘米菌丝体或挖取1立方厘米菌苔接种于装有按实施例1制备的液体种子培养基的摇瓶中，在温度20℃，转速180rpm条件下培养72小时。
(3)取处于对数生长中后期的种子培养物，以15％(V/V)的接种量转接入装有按实施例3制备的发酵培养基的发酵罐中，保持罐温20℃、罐压0.8kg/cm，搅拌速率100rpm，通气量1∶1.2，发酵培养85小时左右。待发酵液变的粘稠，镜检观察菌丝体开始衰老时，停止发酵、放罐，分别收集菌丝体和发酵液，每升发酵液可获得20g以上的干燥菌丝体。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。
本发明可用其他的不违背本发明的精神和主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。
Claims (8)
1、一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，以人工分离培养到的大团囊虫草纯菌株为出发菌种，依次经固体斜面培养，摇床种子培养和发酵培养完成；所述大团囊虫草纯菌株，拉丁文学名为Cordyceps ophioglossoides，保藏号是CGMCC No.1146。
2、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，固体斜面培养的条件为，从保藏菌种接种到配制的斜面培养基上，温度20～30℃，培养200～240小时。
3、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，每1000毫升斜面培养基的主要成份为：马铃薯100～300克、蔗糖或葡萄糖10～30克和琼脂15～25克，培养基的pH值调为4.8～6.5。
4、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，摇床种子培养的条件为，菌种固体斜面培养200～240小时后，挑取菌丝体接种于装有液体种子培养基的摇瓶中，在20～30℃培养，转速150～200rpm，培养60～72小时。
5、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，每1000毫升种子培养基的主要成份为：蔗糖20～60克、酵母粉或酵母膏10～50克、蛋白胨10～50克、MgSO4·7H2O 0.1～0.5克和KH2PO40.1～0.5克。
6、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，发酵培养的方法是，液体种子摇床培养60～72小时后接种至装有发酵培养基的发酵罐中，接种量5～15％(V/V)、保持罐温20～30℃、罐压0.4～0.8kg/cm，搅拌速率100～250rpm，通气量1∶0.3～1∶1.2，发酵时间85～110小时。
7、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，每1000毫升发酵培养基的主要成份为：蔗糖50～100克、酵母粉或酵母膏10～60克，蛋白水解液20～100毫升、MgSO4·7H2O 0.2～1克和KH2PO4 0.2～1克，培养基的pH值调为4.8～6.5。
8、根据权利要求1所述液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法，其特征在于，发酵培养采用液体深层通气发酵培养。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2005100501966A CN1302101C (zh) | 2005-06-22 | 2005-06-22 | 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2005100501966A CN1302101C (zh) | 2005-06-22 | 2005-06-22 | 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1737110A true CN1737110A (zh) | 2006-02-22 |
| CN1302101C CN1302101C (zh) | 2007-02-28 |
Family
ID=36080059
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2005100501966A Expired - Fee Related CN1302101C (zh) | 2005-06-22 | 2005-06-22 | 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1302101C (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102229595A (zh) * | 2011-04-30 | 2011-11-02 | 浙江大学 | 大团囊虫草菌中的倍半萜类化合物及用途 |
| CN103141298A (zh) * | 2013-02-05 | 2013-06-12 | 浙江省林业科学研究院 | 一种冬虫夏草发酵菌丝体活性组分的发酵及提取方法 |
| CN105875198A (zh) * | 2016-04-29 | 2016-08-24 | 安发（福建）生物科技有限公司 | 一种提高蛹虫草菌种稳定性的培养方法 |
| CN112703967A (zh) * | 2020-12-07 | 2021-04-27 | 贵州大学 | 一种以黄浆水和豆渣制备木腐菌液体菌种的方法 |
| CN114231574A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-25 | 浙江大学 | 一种生产蛋白激酶C抑制剂balanol的培养基及其方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1262638C (zh) * | 2004-06-30 | 2006-07-05 | 浙江大学 | 一种虫草真菌及其分离方法 |
-
2005
- 2005-06-22 CN CNB2005100501966A patent/CN1302101C/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102229595A (zh) * | 2011-04-30 | 2011-11-02 | 浙江大学 | 大团囊虫草菌中的倍半萜类化合物及用途 |
| CN103141298A (zh) * | 2013-02-05 | 2013-06-12 | 浙江省林业科学研究院 | 一种冬虫夏草发酵菌丝体活性组分的发酵及提取方法 |
| CN105875198A (zh) * | 2016-04-29 | 2016-08-24 | 安发（福建）生物科技有限公司 | 一种提高蛹虫草菌种稳定性的培养方法 |
| CN105875198B (zh) * | 2016-04-29 | 2019-07-23 | 安发（福建）生物科技有限公司 | 一种提高蛹虫草菌种稳定性的培养方法 |
| CN112703967A (zh) * | 2020-12-07 | 2021-04-27 | 贵州大学 | 一种以黄浆水和豆渣制备木腐菌液体菌种的方法 |
| CN114231574A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-25 | 浙江大学 | 一种生产蛋白激酶C抑制剂balanol的培养基及其方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1302101C (zh) | 2007-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102351605B (zh) | 珍稀食药用菌绣球菌的液体发酵培养方法及其专用培养基 | |
| CN1313498C (zh) | 一种生产普鲁兰的方法 | |
| CN101037661A (zh) | 假交替单胞菌及其用途 | |
| CN1796539A (zh) | 冬虫夏草大规模发酵生产及菌粉加工工艺 | |
| CN1793315A (zh) | 尖顶羊肚菌菌株的筛选及菌种制备方法 | |
| CN1302101C (zh) | 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 | |
| CN104845896B (zh) | 生产威兰胶的菌株及方法 | |
| CN109971657B (zh) | 一种高产糖化酶的米根霉及其应用 | |
| CN1807574A (zh) | 一种冬虫夏草的培养方法及其专用培养基 | |
| CN1478886A (zh) | 一种中国被毛孢液体菌种发酵工艺方法 | |
| CN1141392C (zh) | 中间补料发酵生产灵芝多糖和灵芝酸的方法 | |
| CN100412186C (zh) | 木蹄层孔菌及液体深层发酵制备木蹄层孔菌菌体的方法 | |
| CN110964761B (zh) | 一株银耳菌及其应用 | |
| CN102337225A (zh) | 高氮鲜酵母和抽提物的制备方法 | |
| CN102533570A (zh) | 一种黑曲霉及其应用及发酵制备柠檬酸的方法 | |
| CN100335646C (zh) | 一种高含量灵芝多糖精粉及其副产品的综合利用生产工艺 | |
| CN1291237A (zh) | 草酸青霉亚美尼亚变种的菌株及其应用 | |
| CN102108340A (zh) | 一种烟叶烘烤用微生物制剂生产工艺 | |
| CN1051801C (zh) | 一种生产豆豉的毛霉菌种及制曲发酵工艺 | |
| CN114410523B (zh) | 一种制备红茶菌的菌种组合及其应用 | |
| CN1177925C (zh) | 发酵培养生产虫草素的方法 | |
| CN1279159C (zh) | 白耙齿菌cz－81菌株及其人工培养方法 | |
| CN1680567A (zh) | 一种微生物发酵法生产河豚毒素的方法 | |
| CN110172411B (zh) | 一种痂状炭角菌菌株zj1811及其培养方法和应用 | |
| CN1288249C (zh) | 微生物混合发酵制备木糖醇的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20070228 Termination date: 20210622 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |