CN1382056A - 乳酸菌治疗和/或预防贾第鞭毛虫病 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及能够防止肠贾第鞭毛虫小肠细胞定殖的乳酸菌或双歧杆菌上清液在制备用于治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠定殖相关的疾病的可吸收载体中的用途。本发明还涉及具有上述特征的双歧杆菌特异菌株和可吸收载体,如含有这样的上清液或微生物的食物或药物组合物。

Description

乳酸菌治疗和/或预防贾第鞭毛虫病
本发明涉及能够防止肠贾第鞭毛虫小肠细胞定殖的乳酸菌，或其培养上清，分别用于治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠定殖相关的疾病。本发明还涉及具有上述特征的双歧杆菌菌株和应用乳酸菌制备可吸收载体，如食物或药物组合物，治疗和/或预防肠贾第鞭毛虫对小肠的感染的用途。
肠贾第鞭毛虫是有鞭毛的原生动物，它对个体胃肠道的感染可以导致疾病，如腹痛、稀软便甚或严重腹泻。它的生活周期有两个阶段，包囊期和滋养体期，这些不同的形式可以使微生物在不同的甚至恶劣的环境中存活。
包囊是处于静息状态的四核卵形细胞，是贾第鞭毛虫病传播的原因。个体摄入包囊后，通过接触胃酸和/或消化酶而激发脱囊反应。然后被称为滋养体的寄生虫出现了，它是双核半梨形细胞，大约10um大小，前端宽而后部窄。其腹侧大部分被腹盘覆盖，相信腹盘至少可以部分解释滋养体对小肠表面的粘附作用。
脱囊后，滋养体可能持续存在于感染个体的小肠中，甚至长达数年。如果滋养体在肠液的冲击下被带到下游，它们又开始形成包囊以适应新的环境。
包囊随粪便排出，可以忍受多种极端环境条件，包括不同的温度、pH和张力条件。一个感染个体每天可能排出9×108个包囊，而已经证实，低达10个包囊就足以导致另一个个体的感染。肠贾第鞭毛虫的传播有多种不同途经，但主要传播途经为污染的水源和食物。人与人之间直接播散已经通过一些日护中心和医院爆发得到支持。此外，还发现野生动物也是肠贾第鞭毛虫的感染储存宿主，可能对病原体的播散起一定作用。
贾第鞭毛虫病与其他肠道疾病一样，在婴儿和儿童中更加严重。感染通常与腹泻和吸收不良有关，导致儿童生长发育迟缓，可能最终导致新生儿死亡。
但是，大约一半的感染者没有症状，并成为病原体播散的根源，因为缺乏任何可甄别的症状，没有得到相应的治疗。
尽管对肠贾第鞭毛虫的研究已经倾注了大量努力，但贾第鞭毛虫病的发病机理仍然不能仅用单一的毒力因素来解释，迄今为止，也没有分离到毒性化合物。
业已发现，贾第鞭毛虫定殖的胃肠道在光学显微镜下形态各异，从粘膜结构正常到几乎全部绒毛萎缩。电子显微镜研究结果发现存在超微结构改变，如微绒毛的缩短和断裂(Chavez et al.，Experimental Parasitol.80(1995)，133-138)。
业已发现，这些结构异常通常伴随微绒毛膜内乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性的降低，以及小肠转运功能的损害(Buret et al.，Gastroenterology 103(1992)，506-513；Roberts-Thomson et al.，Gastroenterology.71(1976)，57-61)。
除了上述两种形式，肠贾第鞭毛虫还发生了表面结构的极端变化，并进化了保护性蛋白家族，所述蛋白覆盖所有暴露表面(Aley et al.，Infect.Agents Dis.4(1995)，161-166；Muller，et al.，Infect.Immun.64(1996)，1385-1390；Nash et al.，J.Euk.Microbiol.42(1995)，604-609)。这些变异的表面蛋白(VSPs)可以保护滋养体避免免疫和环境因素的侵害，这样贾第鞭毛虫可以逃避宿主的防御***攻击，并可在高度降解环境中存活，如在哺乳动物肠道中繁殖。VSPs的修饰大约每6-13代发生一次，使宿主免疫***很难或几乎不可能针对病原体产生特异性免疫应答。免疫和环境压力还可以选择不同的VSP表型。而且，还有报导，在脱囊后可以发生VSPs抗原转换(Gillin et al.，Annu.Rev.Microbiol.50(1996)，679-705)。
人贾第鞭毛虫病与固有层和上皮内淋巴细胞数量的增加相关，提示T细胞激活可能是微绒毛损害的原因。但是，与没有没有抑制的动物相比，在小鼠中诱导免疫抑制却导致对微绒毛相关酶更加严重的影响，提示在肠贾第鞭毛虫感染过程中，上皮损伤似乎不仅仅依赖于免疫功能。
对贾第鞭毛虫病的常见治疗是给予抗生素，如属于硝基咪唑类的药物。但是，在流行地区对治疗的反应却非常不一致(Katelaris et al.，Aliment.Pharmacol.Ther.8(1994)，187-192)。而且，由于小肠天然菌群的至少部分损伤，应用这些抗生素通常伴随严重的副反应，如长期腹泻甚或其他致病微生物，如酵母菌导致的胃肠道感染。
因此，在本领域存在这样一种需求，即为贾第鞭毛虫病寻找其他治疗方法，或者预防病原体对个体的感染。
因此本发明将问题定为提供治疗或预防肠贾第鞭毛虫感染的其他方法。
这一问题可通过下述方法解决，即应用能够防止肠贾第鞭毛虫粘附小肠细胞的乳酸菌乳酸菌或双歧杆菌上清液制备可吸收载体，治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠定殖相关的疾病。
根据本发明一个优选实施方案，分别提供了新型乳酸菌和双歧杆菌，能够防止肠贾第鞭毛虫粘附小肠细胞，所述细菌选自NCC90(I-2332)，NCC189(I-2333)或NCC200(I-2334)。根据布达佩斯条约，这些微生物业已于1999年11月30日保藏在巴斯德研究所，并获得上述保藏号。本发明还涉及含有这些微生物的食物和药物组合物。
载体中包括的微生物数量大约为106-1012pfu(空斑形成单位)。包含的微生物可以就是这样的，也可任选在从培养基中基本纯化后。此外，载体还可以包括这些微生物的培养上清，在制备载体之前，优选通过本领域众所周知的方法进行浓缩。
可吸收载体可以是食物，也可以是药物组合物，如奶、酸奶、凝乳、奶酪、发酵奶、基于奶的发酵产品、冰淇淋、基于发酵谷物的产品、奶粉、婴儿配方或其他类型的宠物食品。这些载体可以，例如通过应用具有相应特征的微生物发酵起始物质来容易地生产。此外，微生物或其任选浓缩培养上清可以分别以液体或固体的形式加入载体。药物组合物可以通过标准技术进行制备，包括将微生物和/或其任选浓缩培养上清加入载体，所述药物组合物如片剂、液体细菌悬液、干的或湿的口服添加剂、干的或湿的管饲制剂。根据给药方式，经验丰富的技术人员可以选择相信是适宜的剂型。
附图中，
图1显示了添加105滋养体/cm2后，Portland-1菌株对Caco-2细胞的粘附作用；
图2显示了应用未分化HT-29细胞进行粘附试验的结果；
图3显示了UNO菌株粘附于分化Caco-2细胞的扫描电镜图；
图4显示了肠贾第鞭毛虫在上皮细胞刷状缘导致的微绒毛损害；
图5A显示了贾第鞭毛虫、乳酸菌和Caco-2细胞共同孵育的结果；
图5B显示了Caco-2单层细胞与乳酸菌预孵育的结果；
图6A显示了一个粘附实验的结果，其中Portland-1和WB与本发明乳酸菌中和上清接触；
图6B显示了一个粘附实验的结果，其中WB和CIDCA与本发明乳酸菌中和上清接触；
图7A显示了WB菌株在酸性上清(pH4)(DMEM∶上清＝1∶1)中孵育1个小时获得的结果；
图7B显示，上清的中和(pH7)消除了抑制效果；
图8A显示了WB菌株在不同pH La10菌株上清中孵育获得的结果；
图8B显示了应用MRS稀释酸性上清的结果；
图9显示应用流式细胞仪分析菌株WB1在37℃酸化处理的MRSpH5(DMEM∶MRS＝1∶1)中孵育1小时的上清。
图10显示了寄生虫在内含100uCi3H腺嘌呤pH4或7的TYI-S-33培养基中预孵育后的孵育结果。
在导致本发明的研究过程中，发明者假定，治疗和/或预防贾第鞭毛虫病的病因学方法可能是，应用可能拮抗寄生虫的细菌在小肠定殖。
相信肠贾第鞭毛虫滋养体对上皮细胞的粘附是在人类和动物中感染的关键步骤。尽管贾第鞭毛虫的粘附机制还没有彻底阐明，有证据支持腹盘、滋养体能收缩的元件、水力和机械力、以及血凝素涉及介导连接。
考虑到乳酸是贾第鞭毛虫生活周期的重要因素，因此应用培养的消化道细胞样细胞研究了肠贾第鞭毛虫与乳酸菌的相互作用。
为了这一目的，应用了下述微生物寄生虫菌株和培养基：微生物菌株：
细菌菌株La1(约氏乳杆菌)(I-1225)和La10(嗜酸乳杆菌)(I-2332)来自Nestec的收藏(洛桑，瑞士)。菌株CIDCA 536(两岐双岐杆菌)和CIDCA 538(婴儿双歧杆菌)来自Centro de Investigaciony Desarrollo enCriotecnologia de Alimentos的收藏(Universidad Nacional de La Plata，阿根廷)，并根据布达佩斯条约保藏，分别获得保藏号I2333和I-2334。
肠贾第鞭毛虫菌株Portland-1(ATCC 30888)，UNO/04/87/1(ATCC50184)，New Orleans-1(ATCC 50137)和WB(ATCC 30957)从美国类型培养收藏处(Rockville，USA)购得。
细菌在添加了0.05％半胱氨酸盐酸(Sigma)的MRS肉汤中37℃生长24小时。孵育在无氧条件下进行(BBL GasPak Plus)。
原生动物在Keister改良TYI-S-33培养基中生长，所述培养基包括(每升)：胰酶消化物(Difco)，20g；酵母提取物(BBL)，10g；葡萄糖(Merck)，10g；牛胆盐(Difco)，0.75g；NaCl(Difco)，2g；L-半胱氨酸盐酸(Sigma)，2g；抗坏血酸钠盐(Fluka)，0.2g；K2HPO4(Merck)，1g；KH2PO4(Merck)，0.6g；柠檬酸铵铁(Sigma)，22.8mg；成熟牛血清(Sigma)，100ml；青霉素/壮观霉素(Gibco，1000IU/ml，1000ug/ml)，15ml。还测试了用马血清(Gibco)取代牛血清的结果。在滤器灭菌(滤孔0.22um)前应用1N NaOH将pH调整到6.9。添加了10％马血清的Keister改良培养基不支持Portland-1菌株的生长，尽管孵育时间延长到11天，也不论曾经出现过滋养体开始粘附到试管壁上的事实。在孵育的前5天，观察到高比例的能动寄生虫。但之后，观察到滋养体的胶着和能动细胞的显著减少。向这些损伤细胞中添加牛血清(10％)在24小时后又有生长。为了增加贾第鞭毛虫的可粘附面积，应用25cm2的组织培养瓶(塑料瓶)。培养基一直加到瓶颈部位，以保持无氧条件。该过程导致在2-3天孵育后，可以收获大约107滋养体/瓶，并且寄生虫在瓶壁形成汇合的单层。
亚培养通过下述步骤进行，在冰浴中冷却培养物(5-10分钟)，分离粘附的滋养体，然后在新鲜培养基中孵育0.2ml如此获得的悬液。孵育在37℃进行72小时，并使用不同的容器(玻璃或塑料)。肠贾第鞭毛虫菌株的保存：
如上所述分离滋养体，并悬浮于TYI-S-33培养基中。将在TYI-S-33培养基中制备的两倍浓缩防冻液(DMSO，蔗糖)分成三等分，以2分钟的间隔添加到悬液中。防冻液的终浓度为DMSO 12％(v/v)，蔗糖4％(w/v)。在开始冷冻循环前，将悬液(大约1×106滋养体/ml)在室温平衡20分钟。
用聚苯乙烯(壁厚4cm)隔热分装小瓶，置于-80℃。冷冻滋养体的再激活：
在37℃水浴中解冻分装小瓶，并以寄生虫悬液/新鲜培养基＝0.5/7的比率在TYI-S-33培养基中立即孵育。培养物在37℃暗室孵育。
本发明还通过实施例的方式进行说明。
作为小肠细胞模型，应用了Caco-2和HT29细胞系。对这些消化道细胞样细胞的粘附作用通过下述方法进行检测：实施例1：滋养体的放射标记
寄生虫在YTI-S-33培养基中孵育，并加入2.6-7.1uCi/ml的2-3H腺嘌呤(2Ci/mmol，1mCi/ml，Amersham Life Science)，或甲基-3H胸腺嘧啶(2Ci/mmol，1mCi/ml，Amersham Life Science)。在37℃孵育48-72小时。
滋养体在含有7.1uCi/ml的3H腺嘌呤或3H胸腺嘧啶的培养基中生长，DPM/寄生虫比率差异非常大(表1)。尽管胸腺嘧啶的浓度比腺嘌呤高10倍，但整合却非常低，结果分别为0.08和2.8DPM/寄生虫。
                        表1加入7.1uCi/ml放射标记碱基后贾第鞭毛虫Portland-1菌株对3H的整合
放射标记底物 mmols/ml       DPM/寄生虫
2-3H腺嘌呤 3×10-7        2.8±0.10
甲基-3H胸腺嘧啶 35×10-7       0.08±0.00
表2显示了肠贾第鞭毛虫整合腺嘌呤的结果。通过应用浓度低达2.5uCi/ml的腺嘌呤，可以获得适宜的放射标记。在这些条件中，DPM/寄生虫范围从Portland-1菌株的0.3到UNO菌株的1.6。
                         表2
          不同贾第鞭毛虫菌株对2-3H腺嘌呤的整合
               结果是至少两次测定的平均值
菌株               DPM/寄生虫
Portland-1UNOWBNew Orleans-1  7μCi/ml      5μCi/ml     2.5μCi/ml2.8±0.1      0.9±0.1     0.3±0.0ND            1.2±0.2     1.6±0.1ND            1.0±0.2     1.4±0.1ND            2.3±.08     0.6±0.1
实施例2：细胞培养
Caco-2细胞在DMEM培养基中生长，所述培养基添加了非必需氨基酸，青霉素(12IU/ml)，壮观霉素(12ug/ml)，庆大霉素(47ug/ml)和未激活胎牛血清(20％v/v)。通过每孔接种2×105个细胞，在6孔组织培养板上制备单层细胞。孵育在37℃，10％CO2/90％空气的条件下进行。在每个培养双日更新培养基。应用49-51代细胞进行粘附试验，只应用汇合后晚期的单层细胞(至少培养2周)。
未分化HT-29细胞(美国类型培养收藏处，Rockville，MD)在DMEM培养基中生长，所述培养基包括4.5g/l葡萄糖(Seromed，Biochrom KG，柏林，德国)，并添加了Glutamax 1(0.01％v/v；L-丙氨酰-谷氨酰胺200mM，GIBCO，巴塞尔，瑞士)，庆大霉素(0.57mg/ml，GIBCO，巴塞尔，瑞士)和胎牛血清(10％v/v，GIBCO，巴塞尔，瑞士)。细胞在52代时应用。实施例3：粘附试验
在获得汇合的单层滋养体后，弃去培养基，这样可以清除没有粘附到表面的寄生虫。如述收获寄生虫，并用含有11.4mM半胱氨酸HCl的DMEM(Gibco)洗涤3次。应用1％聚甲醛稀释寄生虫(1∶2)，然后应用血球计数器计数。
将悬浮于DMEM-CYS(DMEM+11.4mM半胱氨酸盐酸)中的放射标记滋养体加入Caco-2细胞单层中，在37℃，5％CO2/95％空气的条件下孵育1小时。然后应用DMEM-CYS在37℃洗涤3遍，分离未结合的滋养体。
洗涤后，每孔加入1ml 1N NaOH，室温孵育平板1小时。将细胞裂解液置于闪烁瓶中，再用PBS洗板。用β计数器(RackBeta Spectral，LKB，Wallac)测定放射活性。实施例4：预孵育试验
细菌培养物用PBS洗涤3次。将在DMEM中调整至1×108CFU/ml的悬液加入Caco-2细胞单层中，在37℃孵育平板1小时。在细菌悬液粘附后，加入调整至1×105寄生虫/ml的放射标记滋养体。实施例5：共同孵育试验
在含有Caco-2单层细胞的6孔组织培养平板中，将含有1×105放射标记贾第鞭毛虫/ml的1ml寄生虫悬液等分与1ml细菌悬液(1×108CFU/ml)混合。如上所述进行粘附试验。实施例6：乳酸菌上清对肠贾第鞭毛虫粘附的作用
乳酸菌培养物以900g离心15分钟，并用4N NaOH中和上清(pH6.9-7.4)。在含有Caco-2单层细胞的6孔组织培养平板中，将溶于DMEM-CYS的含有1×105放射标记滋养体/ml的1ml悬液与1ml中和上清混合。如上所述进行粘附试验。试验还包括适宜的对照，对照是MRS，或用乳酸将MRS酸化至pH4.5，然后再中和到pH7。
将寄生虫悬液(DMEM-cys)与等体积上清在37℃孵育1小时，进行预孵育试验。在另一系列实验中，寄生虫在纯上清或MRS稀释的上清中悬浮。孵育后，将贾第鞭毛虫悬浮于DMEM中，并加入Caco-2细胞。
在40ml培养物中，通过在含有100uCi3H腺嘌呤的TYI-S-33培养基中孵育寄生虫，进行生长评价。应用篮绿激发光进行流式细胞仪分析(FACScanTM)。实施例7：扫描电镜检查
在24孔组织培养板内，Caco-2细胞生长于圆形玻璃片(直径10mm)上，然后如示进行滋养体粘附。通过在4℃添加溶于PBS的2.5％戊二醛进行标本固定16小时。室温应用2％四氧化锇进行后固定2小时，然后涂片在系列梯度乙醇溶液中(乙醇水溶液30，50，70，90，100％)脱水。最后，在临界点应用CO2干燥样本，金封片，然后应用Philips SEM 505在加速电压30KV进行检查。实施例8：肠贾第鞭毛虫滋养体对Caco-2细胞的粘附作用
将总计105滋养体加入如实施例2所述的caco-2培养物中。粘附试验结果如图1所示。无论单层细胞的生长时间，大约5％获得粘附。对塑料表面的粘附非常高(21.8±2.4％)。
应用未分化HT-29细胞进行的粘附试验结果如图2所示。获得的菌株Portland-1和WB的值分别为7.0±1.2％和5.5±0.6％。
菌株UNO对分化Caco-2细胞的粘附扫描电镜图如图3所示。绝大多数贾第鞭毛虫滋养体以腹侧粘附于单层细胞。还见到一些寄生虫以背侧面向Caco-2细胞(箭头)。也许图4可以更清晰地显示，滋养体粘附使肠细胞样细胞刷状缘产生了损伤痕迹。
贾第鞭毛虫、乳酸菌和Caco-2细胞的共同孵育并未改变粘附(图5A)。而且，Caco-2单层细胞与乳酸菌的预孵育也没有干扰寄生虫的粘附(图5B)。实施例9：乳酸菌培养物上清对肠贾第鞭毛虫粘附Caco-2细胞的影响
根据本发明，菌株Portland-1和WB与中和的乳酸菌上清共同孵育，可以使Portland-1菌株对Caco-2细胞的粘附降低19％(La1菌株)-40％(La10菌株)(图6A)。对于菌株WB，数值范围为20％(菌株CIDCA536)-40％(菌株La10)(图6B)。尽管菌株之间的差异尚不能建立，但菌株La10与对照MRS相比，无论对Portland-1(P＝0.06)还是WB(P＝0.04)菌株均显示了显著差异。
考虑到应用Caco-2细胞进行共同孵育实验的兼容pH范围非常狭窄，试验通过下述步骤进行，包括应用上清预孵育寄生虫，然后在进行粘附试验前，再把它们悬浮于DMEM-半胱氨酸中。菌株WB与酸性上清(pH4)(DMEM∶上清＝1∶1)孵育1小时，可以使粘附降低15％(MRS)-大约3％(研究的所有菌株)(图7A)。上清的中和(pH7)可以消除这种抑制作用，并发现粘附增加(图7B)。
WB菌株与不同pH La10菌株上清孵育获得的结果如图8A所示。在pH4和5，没有发现与对照MRS相比存在任何差异，但在pH6和7，发现粘附更高。
应用MRS稀释酸性上清可以导致pH的上升，上清稀释1/8时粘附下降(相对浓度0.125，pH4.07，图8B)。
应用流式细胞仪分析菌株WB1悬液发现存在大小(FSC)和胞浆复杂性(SSC)差异，所述菌株WB1悬液在酸化到pH5的MRS(DMEM∶MRS＝1∶1)中37℃孵育1小时(图9)。将预孵育寄生虫在pH4或7含有100uCi3H腺嘌呤的TYI-S-33培养基中进行孵育，显示了整合差异(图10)。无论在MRS还是上清样本中孵育28小时，pH4时检测的腺嘌呤整合率都很低。尽管有些寄生虫粘附到瓶壁上，但它们都不活动。酸化到pH4.05然后又中和的MRS肉汤显示的DPM值比对照值低20％。菌株La10中和上清的值大约是对照值的80％，在0.09水平差异显著。在pH7的MRS和上清中，均发现大量聚合的寄生虫。
贾第鞭毛虫对不同细胞系的粘附结果(图1和2)提示，非特异性粘附似乎是该***的一个重要特征，因为在分化细胞(培养不同时间的Caco-2)和未分化细胞(HT-29)间未发现显著差异。而且，对塑料表面的粘附也非常高。滋养体对Caco-2单层细胞的粘附显然导致了微绒毛损伤(图4)。
在细菌粘附后，通过洗涤步骤去除寄生虫的实验导致单层细胞损伤，使排除值似乎并不可信。损伤的程度有赖于洗涤溶液，从DMEM-cys对微绒毛的抹除(扫描电镜图)到PBS对细胞的分离。考虑到上述发现，试验如下进行，其中单层细胞与悬浮于DMEM-cys的细菌预孵育，但在加入寄生虫前不进行洗涤步骤。通过将寄生虫、细菌和Caco-2细胞共同孵育，进行另一序列实验。获得的结果(图5)与鞭毛运动和可收缩元件介导的滋养体“活性”粘附一致。不能运动的乳酸菌不能与寄生虫竞争粘附。
关于乳酸菌培养物上清的作用，业已显示，它们能够抑制贾第鞭毛虫粘附。没有任何理论支持，目前认为这种抑制作用可能主要是由于乳酸菌分泌的特定有机酸。
应用乳酸酸化的MRS预孵育寄生虫显示了细胞大小和胞浆复杂性的显著变化，而且无论上清还是MRS对照，对Caco-2细胞的粘附均下降。在这些条件下，寄生虫的活力受到高度影响，与下述实验所示一样，所示实验中经处理寄生虫在新鲜TYI-S-33培养基中孵育。
在pH4与乳酸接触后，寄生虫的生长基本停止，尽管一些寄生虫仍能粘附到瓶壁上。在这些条件下，乳酸对于贾第鞭毛虫似乎是致死性的。在pH7，乳酸的抑制作用仍然存在，酸化MRS和La10菌株上清之间的差异可以这样解释，即假定由于新鲜MRS和失去效能的上清间缓冲能力的差异导致乳酸浓度不同。
在应用上清预孵育寄生虫过程中，形成贾第鞭毛虫聚合，这可能是在pH6和7粘附值非常高的原因(图8)。如前所述，贾第鞭毛虫粘附的主要机制悬液寄生虫活力，尽管在应用pH4的上清处理滋养体后显示，死的原生动物也可以粘附。但这些寄生虫不能繁殖，因此不能有效导致寄生虫病。而且，中和的乳酸菌培养上清减缓了贾第鞭毛虫的生长，并导致聚合，不能粘附。
考虑到上述实验结果，已经很清楚，根据本发明应用的乳酸菌可能成功用于治疗或预防贾第鞭毛虫病。

Claims (10)

1.能够防止肠贾第鞭毛虫粘附小肠细胞的乳酸菌或双歧杆菌培养上清在制备用于治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠道定殖相关疾病的可吸收载体中的用途。
2.选自NCC533(I-1225)，NCC90(I-2332)，NCC189(I-2333)，NCC200(I-2334)的乳酸菌或双歧杆菌在制备用于治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠道定殖相关疾病的可吸收载体中的用途。
3.权利要求2或权利要求3的用途，其中载体中包括的微生物数量为106-1012cfu/g。
4.前述任意权利要求的用途，其中可吸收载体是食物组合物或药物组合物。
5.权利要求4的用途，其中食物组合物选自奶、酸奶、凝乳、奶酪、发酵奶、基于奶的发酵产品、冰淇淋、基于发酵谷物的产品、奶粉、婴儿配方或宠物食品。
6.权利要求4的用途，其中药物组合物的形式是片剂、液体细菌悬液、干的口服添加剂、湿的口服添加剂、干的管饲制剂或湿的管饲制剂。
7.选自NCC90(I-2332)，NCC189(I-2333)，NCC200(I-2334)的乳酸菌。
8.食物或药物组合物，其中含有选自NCC533(I-1225)，NCC90(I-2332)，NCC189(I-2333)，NCC200(I-2334)或双歧杆菌NCC189(I-2333)或NCC200(I-2334)的微生物，用于治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠道定殖相关的疾病。
9.食物或药物组合物，包括能够防止肠贾第鞭毛虫粘附小肠细胞的乳酸菌上清，用于治疗和/或预防与肠贾第鞭毛虫胃肠道定殖相关的疾病。
10.权利要求8或9的组合物，是奶、酸奶、凝乳、奶酪、发酵奶、基于奶的发酵产品、冰淇淋、基于发酵谷物的产品、奶粉、婴儿配方或宠物食品，或者其形式是片剂、液体细菌悬液、干的口服添加剂、湿的口服添加剂、干的管饲制剂或湿的管饲制剂。
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