CN1279614A - 抗应激剂和功能食品 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种抗应激剂和功能食品,它们能在日常中连续服用,不存在任何安全性问题,能缓和及预防由于应激引起的精神上和机体上的症状。一种含有具血管紧张素转换酶抑制活性的三肽(特别是Ile－Pro－Pro和/或Val－Pro－Pro)和/或其盐的有效成分抗应激剂和上述含有抗应激剂的功能食品。

Description

抗应激剂和功能食品
技术领域
本发明涉及一种抗应激剂及功能性食品，本品具有预防和缓和由于应激引起的精神和机体症状的功效。
技术背景
在现代社会，人们经受各种各样的应激状态。由于科学技术的高度发展和复杂化以及社会状况的急剧变化，处于这种环境，特别是在国际化社会中，形成了复杂的人际关系，导致人们精神上的应激状态。据报道，由此能引起各种症状。
一般认为应激对循环***和免疫***有很大的影响。然而，至今仍未准确地确立应激状态的科学概念和定义，关于应激状态的评价仍存在许多问题和方法学上的困难。不过，最近几年，人们从医学观点对应激状态进行了研究。
例如，据报道当人们处于应激状态时，血管紧张素Ⅱ增加，由于钠的重吸收导致体内钠出现过剩，导致血压升高(茂原治等；代谢，28，2，323，1991)。基于以上认识，将高血压治疗药物-血管紧张素转换酶抑制剂依那普利，alacepril，用于因应激而导致的高血压，研究其治疗效果。(美国心脏病学杂志；18，15，1362(1991)，介入医学；32，9，691(1993))。然而，一般认为应激状态不仅引起血压升高，还影响到其他各种因素。除高血压外还可以引起消化道溃疡、缺血性心脏病、脑血管病、高血脂症等的疾病。因此，应激被认为是高血压的原因之一，但并不认为单纯依靠降低血压，就可以达到抗应激的作用。
作为预防和缓和由应激引起的精神和机体症状的药剂，目前常使用化学合成的药物如镇静剂、抗焦虑药和***。然而，这些药物有成瘾性和副作用，所以作为预防由于应激引起的精神和机体病症这一目的，不希望日常性使用这些药物。因此，人们需求能在日常中连续服用的安全的抗应激剂，用以减轻和预防由于应激引起的精神和身体上的症状。这类制剂不断被开发。例如，建议用如含有存在于茶叶中的有效成分L-茶氨酸的抗应激剂(特开平6-100442)，一种含有诸如鹅肌肽、valenine、n-甲基组氨酸或τ-甲基组氨酸等咪唑化合物的抗应激组合物。(特开平9-20660)，和含有谷胱甘肽和抗氧化剂的组合物的抗应激食物(特开平8-275752)。还有报道香料具有解除紧张的效果。(香料杂志：1991-11，P44-49)。然而，未见报道三肽有缓和及预防由应激引起的精神和机体症状的效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能满足如上面提到的社会需求的抗应激剂和功能食品，它们能在日常连续服用而不存在任何安全性问题，能缓和及预防用应激而引起的精神和机体上的症状。
根据本发明，提供一种抗应激剂，其中含有具有血管紧张素转换酶抑制活性的三肽和／或其盐类的有效成分。
根据本发明，还提供一种抗应激剂，其特征在于其中所述的三肽是Ile-Pro-Pro和／或Val-Pro-Pro。
根据本发明，进一步提供该三肽和／或其盐在制备抗应激剂中的应用。
根据本发明，还提供含有上述抗应激剂的具有抗应激功能的食品。
根据本发明，进一步提供该三肽和／或其盐在制备具有抗应激功能食品中的应用。
根据本发明，进一步提供一种用于生产具有抗应激功能的食品的方法，该方法包括使用一种含有序列Ile-Pro-Pro和／或Val-Pro-Pro的肽和／或蛋白的培养基，并且在得到的培养液中能产生三肽Ile-Pro-Pro和／或Val-Pro-Pro等的条件下，用乳酸菌发酵。
根据本发明，还提供一种降低应激的方法，该方法包括口服给予有效剂量的具有血管紧张素-转换酶抑制活性的三肽和／或其盐。
实施本发明的优选方案
本发明的抗应激剂含有作为有效成分的三肽和／或其盐。这些有效成分具有血管紧张素转换酶抑制活性。在本发明中，所谓抗应激作用指能使受试者在服用后变为近于未受到应激的状态。包括：降低由于应激而引起的收缩压与舒张压的升高；抑制和预防由于应激导致的脾细胞反应性降低等免疫功能的降低。
所述的三肽可优选地选自具有血管紧张素转换酶抑制活性的Ile-Pro-Pro、Val-Pro-Pro(自此之后分别缩写为IPP和VPP)及其混合物。
该三肽的盐包括药理学上容许的盐类，如盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐等无机盐以及有机盐如柠檬酸盐、顺丁烯二酸盐、延胡索酸盐、酒石酸盐和乳酸盐等。
所述的三肽制造法可以是微生物发酵法、酶水解法或化学合成法。
用微生物发酵可把乳酸细菌培养在一种食品原料的培养基中进行，该食品原料含有包括该三肽的对应序列如序列Ile-Pro-Pro和／或Val-Pro-Pro相应的一种肽和／或蛋白。
理想的培养基为含有对应于上述三肽的氨基酸序列的肽和／或蛋白质的食品原料。上述食品原料可以是牛奶、牛奶酪蛋白、玉米、玉米蛋白、小麦、小麦蛋白、大豆、脱脂大豆或大豆蛋白。如果有必要，该培养基可进一步含有酵母提取物、维生素和矿物质等其他成分。
至于乳酸菌，可利用乳杆菌属的乳酸菌。例如，可以使用瑞士乳杆菌、德彼利氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、发酵乳杆菌或干酪乳杆菌干酪亚种。具体而言，可利用瑞士乳杆菌ATCC 55796、德彼利氏乳杆菌保加利亚亚种ATCC 1842、嗜酸乳杆菌ATCC 4356、发酵乳杆菌ATCC 14931或干酪乳杆菌干酪亚种ATCC 393等菌种。
发酵可这样进行，加热灭菌培养基，将培养基冷却到所需的培养温度，然后用预先培养的乳酸菌引子接种到该培养基中。乳酸菌引子的适宜接种量为每1g培养基中有105～107个乳酸菌。培养温度可以为20～50℃，最适温度为30～45℃。培养时间可以是3～48小时，最适培养时间为6～24小时。当乳酸菌数达到108以上以及乳酸的酸性达到1以上时，可以终止培养。在产生的培养物中，依培养基原料及组成不同通常IPP和／或VPP的含量为0．1～100μg／g。
上述培养液中在乳酸菌活的状态下，直接用于本发明的抗应激剂。另外，上述培养液可在加热到80℃后的灭菌状态下使用。此外，通过冷冻干燥法、喷雾干燥法或鼓干燥器干燥法制成粉末状使用。
上述培养液可在浓缩三肽成分后用于本发明的抗应激剂。上述浓缩和纯化方法为离心培养液，然后从上清液中抽取。上清液可进一步通过电透析、离子交换树脂处理、中空纤维膜透析、反相渗透处理、疏水柱层析或用其组合方法，以获得进一步浓缩和纯化的三肽。
用上述酶水解法制备三肽时，可包括用蛋白酶和羧肽酶处理食品原料，该食品原料含有对应于Ile-Pro-Pro和Val-Pro-Pro三肽的氨基酸序列的肽和／或蛋白质。上述蛋白酶可以使用来源于微生物、植物或动物中的蛋白酶、这些蛋白酶可以用公开的方法制备。上述羧肽酶可以使用来源于微生物、植物或动物的羧肽酶。并且可以用公开的方法制备。
上述用化学合成法制备三肽的方法可以是公开的有机化学合成法。例如，三肽可用下列的方法得到，在用芴基甲氧羰基保护构成三肽的氨基酸的氨基后，按氨基酸序列制备目的三肽组分的氨基酸，将每个氨基酸依次用芴基甲氧羰基基团保护后，按常规方法使氨基酸反应，以得到结合在树脂上的三肽，然后按常规方法移去树脂，纯化该三肽。
在本发明的抗应激剂中该三肽的含量并没有具体限制，只要是能给予下述有效量的三肽即可。该三肽的含量通常可以为该药剂的0．001～1％(重量比)。
除了该三肽和／或其盐外，本发明的抗应激剂中也可以含有其他添加物，如糖类、蛋白类、脂类、微生素类、矿物质类、调味剂和增色剂。
本发明的抗应激剂可用于人或动物。投与方法可口服或静注。但最好是口服。
在给予人时，为了达到减轻及预防应激等本发明的使用效果，本发明的抗应激剂的有效口服时，以三肽的量计算一般在0．1～40mg／kg体重·天的范围。不过，也可以超出该用量范围使用。
当本发明的抗应激剂投与受试者时，对由于应激引起的各种生理指标的变化，如血压升高，免疫功能降低等，与未投与时相比其发生程度变化。并且接近于没有应激负荷时的值。
本发明的功能食品含有上述抗应激剂。通过食用该功能食品，上述的应激可以得到预防，或减轻。
在本发明的功能食品中，抗应激剂的含量并没有具体限定，只要所含有的三肽和／或其盐类能取得抗应激效果就行。一般来说，功能食品中抗应激剂的含量以三肽和／或其盐计算含量为0．001～0．1％(重量比)。
本发明的功能食品的服用量以上述三肽计算，在每kg体重每天0．1～40mg范围内，可以较理想地获得本发明的效果。不过，服用量大于该范围也可以。
本发明的功能食品可包括酸乳酪、含有奶酸化的饮料、奶酪、含有发酵过酸奶或健康食品的加工食品和饲料，其制剂为粉末、颗粒和片剂等的固形，或糊、凝胶和液体等的流体。
本发明的抗应激剂和功能食品中的有效成分三肽，是用乳酸菌发酵食品原料也能获得的、安全性高的物质。
本发明的抗应激剂和功能食品用含有上述三肽，所以相当安全，通过每天连续服用可以减轻及预防由各种应激引起的精神上和机体上的病症。
实施例
参考以下实施例将更详细地解释本发明，但本发明的内容并不仅限于此。
实施例1
9g脱脂乳粉末溶在100g的水中。得到的溶液在115℃灭菌20分钟，冷却到室温，用铂金环接种瑞士乳杆菌ATCC-8205，在37℃培养24小时，以制备初级引子(5×108细胞／ml，pH 3．5)。接着，用80g的初级引子接种到2kg 90℃达温灭菌过的脱脂乳(含9％(重量比)的固体)中，然后在37℃培养24小时，以制备次级引子。然后，将4．5kg脱脂乳粉末溶在50kg水中。得到的溶液通过达温90℃加热灭菌后，冷却到室温，用2kg次级引子接种，然后在37℃培养24小时，以获得56kg的发酵奶。由此获得的发酵总量中IPP和VPP的含量分别为5．4mg和9．5mg。
实施例2
6kg在实施例1制备的发酵奶用10N氢氧化钠水溶液调整到pH7．3，然后加入1升离子交换树脂，(商业品“Amberlite XAD-2”，由ORGANO公司制造)，并进一步加蒸馏水至总重量20kg。混合液用搅拌器搅拌90分钟，用吸式过滤装置过滤以分离树脂。在滤膜上的树脂用20kg的蒸馏水清洗，然后收集清洗过的树脂。收集到的树脂与0．8kg甲醇混合，用搅拌器搅拌30分钟。得到的混合液通过尼龙纤维(200目)过滤，然后用硬质滤纸吸取过滤后。获得的滤液在55℃减压条件下用蒸发器浓缩，以得到200g浓缩液。该液体和250ml离子交换树脂混合(商业名“Amberlite IRA-400(OH型)”，由ORGANOCORP制造)，搅拌10分钟，用硬质滤纸吸取过滤。得到的滤液用1N盐酸溶液调至pH 7，然后真空冷冻干燥。由此纯化和干燥的产物再均匀地溶于5ml蒸馏水中，加样到分离柱上(商品名“葡聚糖凝胶G-25”，由PHARMACIA公司制造)，然后用蒸馏水抽提，收集三肽的溶出组分，真空冷冻干燥，得到50mg纯化的三肽组分粉末。在50mg纯化的三肽组分粉末中含有0．6mg的IPP和1．0mg的VPP。
实施例3
通过下列有机化学合成法合成IPP和VPP。根据固相法，用自动肽合成装置(PSSM-8型，由SHIMAD2V公司制造)进行合成反应。作为固相载体，使用苄氧基苄基乙醇型聚苯乙烯树脂作为载体，使用了20μmol经芴基甲氧羰基基团(自此之后称为Fmoc)保护了氨基的脯氨酸结合树脂。根据上述氨基酸序列，通过常规方法，使用经Fmoc基团保护了氨基酸的Fmoc-Ile，Fmoc-Pro和Fmoc-Val各100μmol，按照肽序列依次反应得到肽结合树脂。接着，该肽结合树脂悬浮在1ml反应液中(含有1％重量比的乙烷二硫醇、5％重量比的苯甲醚和94％重量比的三氟乙酸)，在室温反应2小时，从树脂上分离肽，同时从肽上移去侧链保护基团。反应混合液通过玻璃滤器过滤，与10ml无水***混合以沉淀纯化的肽，然后在3000rpm离心5分钟进行分离。用无水乙醇清洗该沉淀物几次，用吹氮气法干燥。由此获得的未纯化的合成肽全部溶于2ml 0．1N盐酸水溶液中，然后在C18反相柱上根据下列条件用HPLC纯化：
泵：L6200型智能泵(HITACHI，LTD)
检测器：L4000型紫外检测器(HITACHI，LTD)
用于检测215nm的紫外吸收
柱：MICROBONDASPHERE 5μC18(由WATERS INC制造)
流动相：液体A；0．1％重量比的TFA水溶液
液体B；含有0．1重量比TFA的乙腈
(B／A+B)×100(％)：0～40％(60分钟)
流速：1ml／min
收集最大吸收处的流分，冷冻干燥以获得目标合成肽，即2．1g的IPP和0．9mg的VPP。用全自动蛋白一级结构分析仪(PPSQ-10型，由岛津制作所)从肽的N末端分析纯化肽，进而用氨基酸分析仪(800型系列，由日本分光社制造)，分析该纯化的肽。结果，发现这些肽符合设计要求。
实施例4
将24只雄性wistar大鼠(体重大约300g)预备饲养1周。在预备饲养期间和实验期间，用所购的饲料(商品名“CE-2”由NIHONCREA社制造)作为规定食物饲养大鼠，并且允许大鼠随意饮水。
在预备饲养结束后，大鼠被分为三组(每组8只大鼠)，即(1)无应激负荷-给予接受生理盐水组，(2)加应激负荷-投与生理盐水组，和(3)加应激负荷-投与VPP和IPP组。(2)组和(3)组的动物。每天一次4小时放在冷室(4℃)，共9天施加寒冷应激。
在第10天，(1)组和(2)组的大鼠给与1ml的生理盐水，(3)组大鼠给与1ml含有在实施例3中合成的IPP和VPP的生理盐水，两种物质在盐水中的浓度调整到各3mg／kg体重。用口腔探测器强行投入到胃。投与后，(2)组和(3)组的大鼠接触寒冷应激4小时。结束应激后2小时，用非保温、非侵入性大鼠血压计(PE300型，由CSI社制造)按断尾法测定每组中大鼠的血压。该结果在表1显示。
血压的结果在表1显示。如表1所示，在接触应激的(2)组中，收缩和舒张血压两者与未接触应激的(1)组相比均升高。相反，接受VPP和IPP的(3)组大鼠的收缩和舒张血压比接受生理盐水(2)组大鼠均变低，其血压值接近于未给予应激的(1)组大鼠的水平。
表1
实验组 收缩性血压    舒张性血压(mmHg)        (mmHg)
(1)无应激，接受生理盐水(2)应激后，接受生理盐水(3)应激后，接受VPP和IPP     121      97136*    107129      101
*与(1)组的显著性差异达5％显著水平
冷应激前后的血压变化在表2显示。如表2中所示，与未接触寒冷应激的(1)组相比较，接触寒冷应激的(2)组的收缩和舒张血压的增加均有统计学意义。与接受生理盐水的(2)组相比较，接受VPP和IPP的(3)组收缩和舒张血压的升高受到抑制。收缩血压的降低有统计学意义。根据这些结果，确认了在附加应激负荷的情况下，通过投与IPP和VPP能得到抑制血压升高的效果。
表2
实验组 收缩血压　　　舒张血压(△mmHg)　　　(△mmHg)
(1)没的应激，给与生理盐水(2)应激后，给与生理盐水(3)应激后，给与VPP和IPP -2．2　　　　-2．511．2*　　　6．1*3．7#　　　　-0．6
*对于(1)组显著性在危险率5％时，有显著差异
＃对于(2)组在危险率5％时，有显著差异。
实施例5
24只雄性wistar大鼠(体重大约300g)预备饲养1周。在预备饲养期和实验期间，作为规定食物投与固形饲料(商品名“CE-2”，由NIHON CREA社制造)并允许随意饮水。
预备饲养结束后，大鼠被分为3组(每组8只大鼠)，即(1)投与生理盐水组，(2)投与VPP组和(3)投与IPP组。按实施例4的方法，(1)～(3)组的大鼠如实施例4一样放在冷室(4℃)中每一天4小时，给予寒冷应激9天。
在第10天，(11)组的大鼠接受1ml生理盐水而(2)组和(3)组的大鼠分别接受1ml含有3mg／ml体重的IPP或3mg／kg体重的VPP的生理盐水，用口腔探测器强行灌胃，IPP或VPP在实施倒3中合成。投与后，(1)～(31组的大鼠与实施例4一样接触寒冷刺激4小时，投与测定血压。该结果在表3显示。
血压的测定结果在表3显示。如表3所示，在给予三肽的(2)和(3)组中与给予生理盐水的小组相比，收缩和舒张血压的降低，具有统计学意义。可以认为：三肽具有抑制因寒冷应激出现的血压上升的效果。
表3
实验组 收缩血压    舒张血压(mmHg)    (mmHg)
(1)生理盐水(2)施用VPP(3)施用IPP     138      110131*    101*130*    102*
*对于(1)组，危险率为5％时，有显著差异。
表4
实验组 收缩血压   舒张血压(mmHg)     (mmHg)
(1)生理盐水(2)发酵奶(3)纯化的三肽级分     135    106132    99*128*  101*
*与(1)组的显著性差异达5％显著水平
实施例7
24只雄性wistar大鼠(体重约300g)预饲养1周。在预饲养期间，给予大鼠限定的固形饲料(商品名“CE-2”，由NIHON CREA社制造)饲养，并允许随意饮水。
预饲养期结束后，大鼠被分为三组(每组8只大鼠)，即(1)未施加应激-投与生理盐水组，(2)施加应激-投与生理盐水组，和(3)施加应激-给予VPP和IPP组。将(2)、(3)组动物放在限制其活动的铁笼中并将它们浸在25℃的水浴中，让它们的头露出水面保持呼吸，每一天接触浸水限制应激6小时，连续5天。在进行应激期间，允许大鼠食用购得的饲料(商品名“CE-2”，由NIHON CREA社制造)并随意饮水。
在连续5天的刺激的过程中，作为样品(1)和(2)组给与1ml生理盐水，(3)组给与1ml含有在操作例3合成的IPP和VPP的生理盐水，IPP和VPP在盐水中含量为3mg／kg体重。用口腔探测器强行灌胃。
从进行应激的第二天到第三天，用代谢笼收集尿液，并用HPLC测定儿茶酚胺和吲哚胺的量。在该分析中使用由日本分光社制造的硅胶反相柱(商品名“Catecholpack”)和由esa社制造的电化学检测器(商品名“Coulochem”)。
在进行应激的最后一天的应激结束后，用断头法杀死大鼠，收集血液，取出胸腺和脾。用氨基酸分析仪(800型系列，由日本分光社制造)测定血清的氨基酸组成，以计算Fisher比值(支链氨基酸／芳香族氨基酸的摩尔比)。测定胸腺和脾的重量。按下面的方法制备脾细胞测定白介素2的生成能力和促***原反应性。
(脾细胞的制备)
脾在匀浆器中均匀粉碎，进行低渗处理以移去血细胞，用含2％的胎牛血清(FCS)的MEM清洗，然后悬浮在含有10％FCS的RPM1640培养基中，以制备含有1×107细胞的游离细胞悬浮液。
(白介素2产生能力的测定)
制备含有上面制备的2．5×106个脾细胞的、5μg／ml伴刀豆球蛋白A(ConA)和10％FCS的RPM 1640培养基，培养24小时。在培养基上清液中的白介素2的量，通过用白介素2反应细胞株的指数增殖的生物测定法测定。
(促***原反应性)
将CoA或商陆有丝***原(PWM)作为促***原，取其中之一5μg／ml，在上面制备的5×106脾细胞和10％FCS的RPM 1640培养基中培养24小时。24小时后细胞的数目通过吸光法测定，用MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑)的吸收作为指标，以与不含促***原的细胞数目的比值表示。
进行应激的第二天到第三天分泌到尿液中的去甲肾上腺素和多巴胺的量在表5显示。如表5所示，给予应激的(2)组与未刺激的(1)组比较，分泌到尿液中的去甲肾上腺素和多巴胺明显降低。投与三肽的(3)组中，与投与生理盐水的(2)组相比较，去甲肾上腺素和多巴胺分泌的降低受到抑制。因此可以认为对由于应激诱导的分泌到尿液中的去甲肾上腺素和多巴胺的降低，IPP和VPP具有抑制效果。
表5
实验组 去甲肾上腺素  多巴胺(mg／day)     (mg／day)
(1)没有应激，接受生理盐水(2)应激后，接受生理盐水(3)应激后，接受VPP和IPP 0．296      0．4660．168*    0．287*0．231*#   0．396*#
*对于(1)组，在5％的危险率时，有显著差异。
#对于(2)组，在5％的危险率时，有显著差异。
杀死动物后血清氨基酸的Fisher比值在表6显示。如表6所示，给予应激的(2)组与未给予应激的(1)组相比Fisher比值的降低有显著差异。而投与三肽的(3)组与投与生理盐水的(2)组相比Fisher比值的升高有显著差异。
表6
实验组 Fisher比值
(1)没有应激，接受生理盐水(2)应激后，接受生理盐水(3)应激后，接受VPP和IPP     3．342．97*3．27#
*对于(1)组，在危险率5％时，有显著差异。
#对于(2)组，在危险率5％时，有显著差异。
杀死动物后胸腺和脾的重量在表7显示。给予应激的(2)组与未给予应激的(1)组相比，胸腺和脾的重量都降低很多。在投与三肽的(3)组中，胸腺和脾的重量比投与生理盐水(2)组稍高。
表7
实验组 胸腺重量    脾重量(mg)    (mg)
(1)没有应激，接受生理盐水(2)应激后，接受生理盐水(3)应激后，接受VPP和IPP     433     769202*   453*226*   495*
*与(1)组的显著性差异达5％显著水平
脾细胞的促***原反应性在表8显示，而脾细胞的白介素2产生性在表9显示。与未给予应激的(1)组相比较，发现给予应激的(2)组中促***原反应性降低并且白介素2的产生有降低趋向。另一方面，与投与生理盐水的(2)组相比较，投与三肽的(3)组中发现促***原反应性提高并且白介素2产生性有增加的趋向。
表8
实验组     促***原反应性ConA      PWM
(1)没有应激，接受生理盐水(2)应激后，接受生理盐水(3)应激后，接受VPP和IPP     1．91     1．451．56*   1．26*1．80#    1．37#
*对于(1)组，在危险率为5％时，有显著的差异。
#对于(2)组，在危险率为5％时，有显著性差异。
表9
实验组     白介素2产生性(单位／ml)
(1)没有应激，接受生理盐水(2)应激后，接受生理盐水(3)应激后，接受VPP和IPP     609444317086#
#对于(2)组，在危险率为10％时，有显著性差异。
根据这些结果，可以认为：投与IPP和VPP后，对于因应激引起的免疫功能指标的降低有抑制效果。这些指标如血液氨基酸平衡(Fisher比值)的变化，胸腺和脾萎缩，脾细胞反应性的降低等。

Claims (7)

1．一种抗应激剂，其中含有作为有效成分的具有血管紧张素转换酶抑制活性的三肽和／或其盐。
2．权利要求1的抗应激剂，其中所述的三肽是Ile-Pro-Pro或Val-Pro-Pro。
3．具有血管紧张肽转换酶抑制活性的三肽和／或其盐在制备抗应激剂中的应用。
4．具有抗应激功能的食品，包括权利要求1的抗应激剂。
5．具有血管紧张肽转换酶抑制活性的三肽和／或其盐在制备具有抗应激功能的食品中的应用。
6．一种生产权利要求4的抗应激功能食品的方法，该方法包括用含有包括序列Ile-Pro-Pro和／或Val-Pro-Pro的肽和／或蛋白的培养基，并且在得到的培养液中能产生三肽Ile-Pro-Pro和／或Val-Pro-Pro等的条件下，用乳酸菌发酵。
7．一种降低应激的方法，该方法包括口服投与有效量的具有血管紧张素转换酶抑制活性的三肽和／或其盐。
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