CN1230449C - 由肝素衍生的多糖混合物、其制备方法及其药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及由肝素衍生的多糖混合物，它们的制备方法和含有它们的药物组合物。

Description

由肝素衍生的多糖混合物、其制备方法 及其药物组合物
本发明涉及由肝素衍生的多糖混合物，它们的制备方法与含有它们的药物组合物。
肝素是动物源硫酸粘多糖混合物，尤其是由于它们的抗凝血和抗血栓形成性质而得到应用。
但是，肝素有许多缺陷，这些缺陷限制其应用情况。特别地，其高抗凝血活性(抗IIa活性)可能引起出血。
曾提出通过肝素酯的碱性解聚作用所得到的低分子量肝素(EP40144)；但是，这些产物还具有高抗IIa活性。
本发明涉及由肝素衍生的多糖混合物，它们与肝素相比对活化因子x(因子Xa)和活化因子II(因子IIa)以更具有选择性的方式产生活性。
更具体地，本发明涉及硫酸多糖混合物，它们具有由肝素构成的多糖的一般结构并且具有下述特性：
-它们的平均分子量为1500-3000道尔顿，抗Xa活性为100-150IU/毫克，抗IIa活性为0-10IU/毫克，抗Xa活性/抗IIa活性比高于10，
-这些混合物的构成多糖含有2-26个糖结构单元，在其一端具有不饱和4，5-葡萄糖醛酸2-O-硫酸酯结构单元，
这些多糖混合物呈碱金属或碱土金属盐形式。
作为碱金属或碱土金属盐，优选地是钠、钾、钙和镁盐。
平均分子量通过使用两个串连柱，例如以商品名TSK G3000XL和TSK G2000XL销售的柱，采用高压液相色谱法测定。采用折射计进行检测。使用的洗脱剂是硝酸锂，流量是0.6毫升/分钟。通过采用琼脂糖-聚丙烯酰胺凝胶(IBF)色谱分离依诺肝素(AVENTIS)制备标准物，使用这种标准物对这种***进行校正。这种制备是根据Barrowcliffe及其同事，《Thromb.Res.》，12，27-36(1977-78)，或D.A.Lane及其同事，《Thromb.Res.》，12，257-271(1977-78)描述的技术进行的。使用软件GPC6(Perkin Elmer)计算结果。
使用低分子量肝素的第一个国际标准作为标准，使用Teien及其同事，《Thromb.Res.》，10，399-410(1977)描述的发色底物，采用酰胺分解方法测量抗-Xa活性。
使用低分子量肝素的第一个国际标准作为标准，采用AndersonL.O.及其同事，《Thromb.Res.》，15，531-541(1979)描述的技术测量抗IIa活性。
优选地，上述混合物的抗Xa活性为125-150IU/毫克。
非常特别地，上述混合物的抗Xa活性为140-150IU/毫克。平均分子量为2000-3000道尔顿。
优选地，本发明混合物的抗IIa活性为0-5IU/毫克。
更特别地，这些混合物的抗Xa活性/抗IIa活性比高于25。
本发明的低聚糖混合物可以采用如下方法制备：在有机介质中，借助pka高于20的强有机碱或咪唑酸钠，将肝素苄酯季铵盐解聚，然后将解聚的肝素苄酯季铵盐转化成钠盐，这种酯经过皂化与任选地被纯化。
肝素苄酯季铵盐优选地是苄乙氧铵盐、鲸蜡基吡啶鎓盐或鲸蜡基三甲基铵盐。
一般地，在例如含氯溶剂(像二氯甲烷)、四氢呋喃、茴香醚之类惰性有机溶剂中，在温度-20℃至40℃下进行解聚作用。
作为pka高于20的强有机碱，可以使用1，5，7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯、2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢-1，3，2-二氮杂磷杂环己三烯、胍和磷腈类的碱。
胍类碱优选地是下式所示
碱
Figure C0181418700061
式中R1是氢或烷基，R2、R3、R4和R5相同或不同，各自代表烷基。
更特别地，R1是氢，R2、R3、R4和R5是甲基。
属于磷腈类的强有机碱是例如根据R.Schwesinger及其同事，《Angew.Chem.Int.Ed.Engl.》26，1167-1169(1987)，R.Schwesinger及其同事，《Angew.Chem.》105，1420(1993)定义的。
在磷腈类的碱中，优选地使用下式所示碱：
式中R1-R7基团相同或不同，代表烷基。
在上式中，烷基含有C1-6直链或支链。
有利地，pka高于20的强有机碱或咪唑酸钠/肝素苄酯季铵盐的摩尔比是0.2-5，优选地1-4。
更特别地，肝素苄酯季铵盐的酯化率是50-100％，优选地70-90％。这种酯化率相应于肝素的糖醛酸酯化摩尔百分数。
一般地，在温度15-25℃下，使用醋酸钠醇溶液，优选地使用10％(重量/体积)醋酸钠在甲醇中的溶液处理反应介质，可使解聚的肝素苄酯季铵盐转化成钠盐。添加的醋酸盐的重量当量优选地比参加解聚反应的肝素苄酯季铵盐质量高出3倍。
一般地，在温度0-20℃下，优选地在0-10℃下，在含水介质中，借助例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂之类碱金属氢氧化物进行皂化反应。一般地，使用1-5摩尔当量碱金属氢氧化物。优选地，在2-3摩尔当量碱金属氢氧化物存在下进行皂化反应。
采用任何已知的解聚肝素纯化方法，特别地根据在专利EP 0 037319中描述的方法，可以任选地纯化最后产物。优选地，在温度10-50℃，在含水介质中，借助过氧化氢进行纯化。优选地，这种操作在20-40℃下进行。
肝素苄酯季铵盐可以按照下述反应流程进行制备：
a)借助氯化苄乙氧铵转化呈钠盐形式的肝素，以便得到肝素苄乙氧铵，
b)借助苄基氯酯化前面得到的苄乙氧铵盐，并且用醋酸钠醇溶液处理，以便得到肝素苄酯钠盐，
c)肝素苄酯钠盐被转盐(transalification)成季铵盐，优选地苄乙氧铵盐，鲸蜡基吡啶鎓盐或鲸蜡基三甲基铵盐。
在温度约15-25℃下，在含水介质中通过让过量氯化苄乙氧铵与呈钠盐形式的肝素作用，进行步骤a)的反应。有利地，氯化苄乙氧铵/呈钠盐形式的肝素的摩尔比是2-3，更特别地2.5。
所使用的呈钠盐形式的原料肝素优选地是猪的肝素。这种肝素可以按照专利FR 2 663 639中描述的方法进行预先纯化，以降低其硫酸软骨素B含量。
优选地，在温度25-45℃下，优选地在30-40℃下，在含氯有机溶剂(例如氯仿、二氯甲烷)中进行步骤b)的酯化反应。然后，通过使用10％(重量/体积)醋酸钠在例如甲醇之类醇中的溶液沉淀回收呈钠盐形式的酯。一般地，每个反应介质体积使用1-1.2体积醇。调整苄基氯的量和反应时间，以便酯化率达到50-100％，优选地70-90％。优选地，每1重量份肝素苄乙氧铵盐，使用0.5-1.5重量份苄基氯。同样优选地，反应时间是10-35小时。
在温度10-25℃下，在含水介质中，借助季铵氯化物，优选地借助氯化苄乙氧铵、氯化鲸蜡基吡啶鎓或氯化鲸蜡基三甲基铵，进行步骤c)的转盐反应。有利地，季铵氯化物/肝素苄酯钠盐的摩尔比是2-3。
呈钠盐形式的本发明混合物可以转化成其它碱金属或碱土金属盐。采用在专利US 4 168 377中描述的方法，任选地将一种盐转化成另一种盐。
本发明的混合物无毒，因此可以用作药物。
本发明的混合物可以用作抗血栓形成剂。特别地，它们对预防静脉血栓形成、动脉形成血栓病症，尤其是在心肌梗塞的情况下是有效的。它们在预防和治疗平滑肌细胞增生、血管生成以及作为动脉粥样硬化和动脉硬化症的神经保护剂也是有效的。
本发明还涉及药物组合物，这些组合物含有作为活性组分的本发明多糖混合物以及任选地与其配合的一种或多种惰性赋性剂。
这些药物组合物例如是可皮下或静脉注射的溶液。它们通过肺(吸入)途径也是有效的。
根据患者年龄、体重和健康状况改变剂量。对于成人而言，这种剂量一般是每天肌内或皮下用药20-100毫克。
下面的实施例说明本发明。
实施例A：肝素苄酯的苄乙氧铵盐的制备
肝素苄乙氧铵
在温度约20℃下，往10克呈钠盐形式的肝素在100毫升水中的溶液，添加25克氯化苄乙氧铵在125毫升水中的溶液。这种产物经过滤后，用水洗涤，再干燥。
肝素苄酯(钠盐)
往20克肝素苄乙氧铵在80毫升二氯甲烷中的溶液，添加16毫升苄基氯。这种溶液在温度30℃加热12小时。这时添加108毫升10％醋酸钠在甲醇中的溶液，过滤，用甲醇洗涤与干燥。这样得到7.6克呈钠盐形式的肝素苄酯，其酯化率是77％。
肝素苄酯(苄乙氧铵盐)
在2升锥形烧瓶A中加入36克(0.0549摩尔)肝素苄酯(钠盐)和540毫升蒸馏水。在温度约20℃下均化后，得到淡黄色溶液。在磁力搅拌下，在1升锥形烧瓶B中制备64.45克(0.1438摩尔)氯化苄乙氧铵和450毫升水的溶液。锥形烧瓶B的溶液在搅拌下在约35分钟内倒入锥形烧瓶A的溶液中。观察到生成大量白色沉淀。锥形烧瓶B用200毫升蒸馏水清洗，洗液被加到锥形烧瓶A。这时停止搅拌，这种悬浮液放置12小时。抽取上清液的透明部分，并分离。往沉降的(泥状)沉淀添加560毫升水，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽取上清液，并进行分离(560毫升)。对沉降的沉淀，用约560毫升蒸馏水重复这种洗涤操作两次。在后一洗涤操作中，将这种沉淀制成悬浮液，用烧结玻璃3过滤。然后滤饼用蒸馏水洗涤4次，每次200毫升。湿的白色固体经脱水后在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到87.5克肝素苄酯，苄乙氧铵盐。达到的产率是94.9％。
实施例1
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在50毫升锥形烧瓶A中，加入28毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入4克(0.00238摩尔)如在实施例A中所描述得到的肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解后，添加1.32克(0.00948摩尔)1，5，7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯。在温度约20℃下搅拌3小时30分钟。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备12克醋酸钠在120毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，锥形烧瓶A中的反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了几乎半透明的凝胶状黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液倾析一小时。抽出上清液的透明部分并分离(62毫升)。往沉降的沉淀(黄色泥状)添加50毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽出上清液与分离(49毫升)。往沉降的沉淀，添加50毫升甲醇，并搅拌20分钟。然后用烧结玻璃4过滤呈悬浮状的沉淀。得到的金黄色滤饼再用甲醇洗涤两次，每次25毫升。湿的固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到1.21克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。达到的产率是77.2％。
皂化：
在25毫升锥形烧瓶中，加入1.21克(0.0018摩尔)前面得到的解聚的肝素(苄酯，钠盐)和11毫升水。在磁力搅拌下，加入0.18毫升(0.0018摩尔)30％氢氧化钠碱液。添加完毕，这种混合物冷却到4℃并搅拌2小时。添加1.43克NaCl，这种溶液通过被添加1摩尔/升HCl(14毫升)进行中和。这种混合物移注到100毫升锥形烧瓶中，再添加52毫升甲醇。观察到生成黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液在温度约20℃下沉降12小时。然后抽取上清液，再分离(44毫升)。往沉降的(黄色泥状)沉淀添加25毫升甲醇，搅拌20分钟。这种沉淀再沉降约30分钟。抽取上清液并进行分离(21毫升)。往沉降的沉淀中添加25毫升甲醇，搅拌20分钟。这种呈悬浮状的沉淀用烧结玻璃3过滤。得到的浅黄色滤饼用甲醇洗涤两次，每次10毫升。温的固体经脱水后在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到0.66克粗制解聚肝素(钠盐)。达到的产率是60％。
纯化：
在10毫升锥形烧瓶中，加入0.66克前面得到的解聚肝素和5.9毫升蒸馏水。这种混合物在磁力搅拌下升温到40℃。通过加入0.1摩尔/升氢氧化钠，将其pH升到9-10，添加33微升30％过氧化氢水溶液。在搅拌约2小时后，添加0.65克氯化钠。这种混合物然后通过加入0.1摩尔/升HCl进行中和。这种溶液然后过滤，再倒入25毫升锥形烧瓶中。倒入23.3毫升甲醇。观察到生成白色沉淀。这时停止搅拌，接着这种悬浮液在温度约20℃下沉降12小时。然后抽取上清液并且分离(5毫升)。往沉降的(泥状)沉淀中添加5毫升甲醇，搅拌20分钟。接着这种沉淀再沉降约30分钟。抽取上清液并且进行分离(5毫升)。往这种沉降的沉淀添加5毫升甲醇，搅拌20分钟。这种呈悬浮状的沉淀然后用烧结玻璃3过滤。得到的白色滤饼用甲醇洗涤两次，每次5毫升。湿的固体经脱水后在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到0.51克纯化的多糖混合物(钠盐)。达到的产率是77.2％。
这种混合物的特性如下：
平均分子量：1600道尔顿
抗Xa活性：94IU/毫克
抗IIa活性：＜0.1IU/毫克
抗Xa活性/抗IIa活性比＞100。
实施例2
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在100毫升锥形烧瓶A中，加入70毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入10克(0.00595摩尔)如在实施例A中所描述得到的肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解后，添加1.7毫升(0.00587摩尔)2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基-全氢-1，3，2-二氮杂磷杂环己三烯(phosphorine)。在温度约20℃下让这种反应进行约3小时30分钟。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备30克醋酸钠在300毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，锥形烧瓶A中的反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了几乎-半透明的凝胶状黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液倾析一小时。抽出上清液的透明部分并进行分离(204毫升)。往沉降的(黄色泥状)沉淀添加125毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽出上清液与进行分离(162毫升)。往沉降的沉淀添加125毫升甲醇，搅拌20分钟。然后用烧结玻璃3过滤呈悬浮状的凝胶沉淀。得到的黄色凝胶滤饼再用甲醇洗涤两次，每次63毫升。凝胶状固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到3.34克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。达到的产率是85.3％。
皂化：
根据实施例1中描述的皂化方法，对1.67克前面得到的解聚肝素(苄酯，钠盐)进行皂化。得到0.94克淡黄色粉末。粗制的解聚肝素(钠盐)产率是61％。
纯化：
根据实施例1中描述的纯化方法，对0.94克前面得到的粗制解聚肝素(钠盐)进行纯化。得到0.71克白色粉末。产率是75.5％。
得到的纯化多糖混合物(钠盐)具有如下特性：
平均分子量：2500道尔顿
抗Xa活性：146.6IU/毫克
抗IIa活性：2.15IU/毫克
抗Xa活性/抗IIa活性比：68。
实施例3
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在50毫升锥形烧瓶A中，加入28毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入4克(0.00238摩尔)根据实施例A得到的肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解与冷却到2℃后，添加0.333克(0.00239摩尔)1，5，7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯。在温度约20℃下让这种反应进行约3小时30分钟。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备12克醋酸钠在120毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，锥形烧瓶A中的反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液倾析一小时。抽出上清液的透明部分并将其分离(90毫升)。往沉降的(黄色泥状)沉淀添加50毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽出上清液与将其分离(61毫升)。往沉降的沉淀添加50毫升甲醇，并搅拌20分钟。然后用烧结玻璃4过滤呈悬浮状的沉淀。得到的滤饼再用甲醇洗涤两次，每次25毫升。湿的固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到1.19克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。这种固体是深黄色。达到的产率是75.9％。
皂化：
根据实施例1中描述的皂化方法，对1.19克前面得到的解聚肝素(苄酯，钠盐)进行皂化。得到0.78克淡黄色粉末。粗制的解聚肝素(钠盐)产率是71.5％。
纯化：
根据实施例1中描述的纯化方法，对0.78克前面得到的粗制解聚肝素(钠盐)进行纯化。得到0.58克白色粉末。产率是72.5％。
得到的纯化多糖混合物(钠盐)具有如下特性：
平均分子量：2700道尔顿
抗Xa活性：100.1IU/毫克
抗IIa活性：3.3IU/毫克
抗Xa活性/抗IIa活性比：27.3。
实施例4
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在50毫升锥形烧瓶A中，加入28毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入4克(0.00238摩尔)根据实施例A得到的肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解与冷却到2℃后，添加0.6毫升(0.00222摩尔)2-叔丁基亚氨基-三(二甲基氨基)正膦。在温度约0℃下让这种反应进行约3小时30分钟。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备12克醋酸钠在120毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，锥形烧瓶A中的反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了几乎半透明的凝胶状黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液倾析一小时。抽出上清液的透明部分并分离(108毫升)。往沉降的(微黄色泥状)沉淀添加50毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽出上清液与进行分离(60毫升)。往沉降的沉淀添加50毫升甲醇，搅拌20分钟。然后用烧结玻璃4过滤呈悬浮状的微黄白色沉淀。得到的滤饼再用甲醇洗涤两次，每次25毫升。固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到1.22克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。达到的产率是77.8％。
皂化：
根据实施例1中描述的皂化方法，对1.22克前面得到的解聚肝素(苄酯，钠盐)进行皂化。得到0.69克非常浅黄色的粉末。粗制的解聚肝素(钠盐)产率是61.6％。
纯化：
根据实施例1中描述的纯化方法，对0.69克前面得到的粗制解聚肝素(钠盐)进行纯化。得到0.67克白色粉末。产率是97.1％。
得到的纯化多糖混合物(钠盐)具有如下特性：
平均分子量：2900道尔顿
抗Xa活性：145.2IU/毫克
抗IIa活性：4.5IU/毫克
抗Xa活性/抗IIa活性比：32.6。
实施例5
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在50毫升圆底烧瓶A中，加入28毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入4克(0.00238摩尔)肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解与温度达到40℃后，添加0.95克(0.00949摩尔)咪唑酸钠。在二氯甲烷回流下让这种反应进行约4小时。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备12克醋酸钠在120毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，锥形烧瓶A中的反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了几乎半透明的凝胶状黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液倾析一小时。抽出橙色上清液的透明部分并进行分离(88毫升)。往沉降的(橙色泥状)沉淀添加50毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽出上清液与进行分离(51毫升)。往沉降的沉淀添加50毫升甲醇，并搅拌20分钟。然后用烧结玻璃4过滤呈悬浮状的橙色沉淀。得到的滤饼再用甲醇洗涤两次，每次25毫升。固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到1.34克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。达到的产率是76.6％。
皂化：
根据实施例1中描述的皂化方法，对1.2克前面得到的解聚肝素(苄酯，钠盐)进行皂化。得到0.63克灰褐色粉末。粗制的解聚肝素(钠盐)产率是52.5％。
纯化：
根据实施例1中描述的纯化方法，对0.63克前面得到的粗制解聚肝素(钠盐)进行纯化。得到0.42克浅灰褐粉末。产率是66.7％。
得到的纯化多糖混合物(钠盐)具有如下特性：
平均分子量：2250道尔顿
抗Xa活性：134.5IU/毫克
抗IIa活性：1.5IU/毫克
抗Xa活性/抗IIa活性比：90.5。
实施例6
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在50毫升锥形烧瓶A中，加入28毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入4克(0.00238摩尔)如实施例A中描述得到的肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解后，添加1.33克(0.00956摩尔)1，5，7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯。在温度约20℃下搅拌3小时30分钟。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备12克醋酸钠在120毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，锥形烧瓶A中的反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了几乎半透明的凝胶状的黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液倾析一小时。抽出上清液的透明部分并分离(56毫升)。往沉降的(黄色泥状)沉淀添加60毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约30分钟。抽出上清液与分离(70毫升)。往沉降的沉淀添加50毫升甲醇，并搅拌15分钟。然后用烧结玻璃4过滤呈悬浮状的沉淀。得到的金黄色滤饼用甲醇洗涤两次，每次50毫升。湿的固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到0.92克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。达到的产率是64％。
皂化：
在25毫升锥形烧瓶中，加入0.92克(0.0014摩尔)在前面得到的解聚肝素(苄酯，钠盐)和17.5毫升水。在磁力搅拌下，加入0.38毫升(0.00379摩尔)30％氢氧化钠碱液。添加完毕，这种混合物保持在温度约20℃下并搅拌5小时。添加1.8克NaCl，这种溶液通过添加浓盐酸进行中和(这种溶液最后体积为约18毫升)。这种混合物被倒入100毫升锥形烧瓶中，添加46毫升甲醇。观察到生成黄色沉淀。这时停止搅拌，让这种悬浮液在温度约20℃下沉降12小时。然后抽出上清液并分离(52毫升)。往沉降的(黄色泥状)沉淀添加25毫升甲醇，搅拌20分钟。让这种沉淀再沉降约1小时。抽出上清液与分离(27毫升)。往沉降的沉淀添加25毫升甲醇，并搅拌约1小时。然后用烧结玻璃4过滤呈悬浮状的沉淀。得到的滤饼再用甲醇洗涤两次，每次10毫升。湿的固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥3小时后，得到0.42克粗制的解聚肝素(钠盐)。达到的产率是45.6％。
纯化：
在10毫升锥形烧瓶中，加入0.42克前面得到的粗制解聚肝素和3.8毫升蒸馏水。这种混合物在磁力搅拌下升温到38℃。通过加入0.1摩尔/升氢氧化钠将其pH升到9-10，添加25微升30％过氧化氢水溶液。在搅拌约2小时30分钟后，添加0.5克氯化钠。这种混合物然后通过添加0.1摩尔/升HCl进行中和。这种溶液然后过滤，再倒入25毫升锥形烧瓶中。倒入11.3毫升甲醇。观察到生成白色沉淀。这时停止搅拌，接着这种悬浮液在温度约20℃下沉降12小时。然后抽取上清液再分离(9.8毫升)。往沉降的(泥状)沉淀添加5毫升甲醇，搅拌15分钟。接着这种沉淀再沉降约3小时。抽取上清液再分离(6.2毫升)。往这种沉降的沉淀添加5毫升甲醇，搅拌20分钟。这种呈悬浮状的沉淀然后用烧结玻璃3过滤。得到的白色滤饼用甲醇洗涤两次，每次5毫升。湿的固体经脱水后在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥约2小时20分钟后，得到0.39克纯的解聚肝素(钠盐)。达到的产率是92.8％。
这样得到的解聚肝素的特性如下：
平均分子量：1950道尔顿
抗-Xa活性：115.6IU/毫克
抗-IIa活性：＜2IU/毫克
抗-Xa活性/抗-IIa活性比＞57。
实施例7
解聚作用与形成钠盐的转化过程：
在400毫升反应器A中，加入140毫升二氯甲烷。在搅拌下，缓慢装入20克(0.0119摩尔)如实施例A中描述得到的肝素苄酯(酯化率：77％，苄乙氧铵盐)。在完全溶解后，采用Karl Fisher法测定这种反应介质中水含量。得到的值是0.1％水。这时添加3.5毫升(0.0121摩尔)2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基-全氢-1，3，2-二氮杂磷杂环己三烯。在温度约25℃下，让这个反应继续进行约24小时。在此期间，在锥形烧瓶B中在4℃制备30克醋酸钠在300毫升甲醇中的溶液。在磁力搅拌下，反应器A中的一半反应混合物倒入醋酸钠甲醇溶液中。出现了几乎半透明的凝胶状黄色沉淀。保持搅拌一小时，让这种悬浮液在4℃下倾析约12小时。抽出上清液的透明部分并分离(220毫升)。往沉降的(黄色泥状)沉淀添加220毫升甲醇，搅拌50分钟。让这种沉淀再沉降约40分钟。抽出上清液与分离(204毫升)。往沉降的沉淀中添加204毫升甲醇，搅拌40分钟。然后用烧结玻璃3过滤呈悬浮状的凝胶状沉淀。得到的黄色凝胶滤饼用甲醇洗涤两次，每次100毫升。凝胶固体经脱水后，在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥约12小时后，得到2.6克解聚的肝素(苄酯，钠盐)。达到的产率是70.6％(以经过处理的这一半反应介质为基准计算)。
皂化：
根据实施例1中描述的皂化方法，对2.6克前面得到的解聚肝素(苄酯，钠盐)进行皂化。得到1.48克浅黄色粉末。粗制的解聚肝素(钠盐)产率是62.9％。
纯化：
在50毫升锥形烧瓶中，加入1.48克前面得到的粗制解聚肝素和15毫升蒸馏水。这种混合物在磁力搅拌下升温到40℃。通过加入0.1摩尔/升氢氧化钠将其pH升到9-10。这种溶液用孔隙度为1微米的过滤膜进行过滤。然后添加76微升30％过氧化氢水溶液。在搅拌约2小时后，添加1.5克氯化钠。这种混合物然后通过加入1摩尔/升HCl进行中和。这种溶液然后用孔隙度为1微米的过滤膜进行过滤。再倒入38毫升甲醇。观察到生成白色沉淀。这时停止搅拌，接着这种悬浮液在温度约20℃下沉降1小时。然后抽取上清液并进行分离(37毫升)。往这种沉淀中添加37毫升甲醇，搅拌45分钟。接着这种沉淀再沉降约45分钟。抽取上清液并进行分离(34毫升)。往这种沉降的沉淀中添加34毫升甲醇，搅拌15分钟。这种呈悬浮状的沉淀然后用烧结玻璃3过滤。得到的白色滤饼用甲醇洗涤两次，每次25毫升。湿的固体经脱水后在减压(2.7千帕)与温度约60℃下干燥。在干燥12小时后，得到1.29克纯的解聚肝素(钠盐)。达到的产率是87.2％。
得到的纯化解聚肝素(钠盐)的特性如下：
平均分子量：2250道尔顿
抗Xa活性：149.6IU/毫克
抗IIa活性：0.85IU/毫克
抗Xa活性/抗IIa活性比：176。

Claims (17)

1、硫酸多糖混合物，它们具有由肝素构成的多糖的一般结构，并且具有下述特性：
-它们的平均分子量为1500-3000道尔顿，抗Xa活性为100-150IU/毫克，抗IIa活性为0-10IU/毫克，抗-Xa活性/抗II-a活性比高于10，
-这些混合物的构成多糖含有2-26个糖结构单元，在其一端具有不饱和4，5-葡糖醛酸2-O-硫酸酯结构单元，
这些多糖混合物呈碱金属或碱土金属盐形式。
2、权利要求1的混合物，其特征在于所述抗Xa活性是125-150IU/毫克。
3、权利要求1的混合物，其特征在于所述抗Xa活性是140-150IU/毫克，平均分子量是2000-3000道尔顿。
4、权利要求1-3中任一项的混合物，它们呈钠、钾、钙或镁盐形式。
5、权利要求1-3中任一项的混合物，它们的抗IIa活性为0-5IU/毫克。
6、权利要求1-3中任一项的混合物，它们的抗Xa活性/抗IIa活性比高于25。
7、权利要求1的混合物的制备方法，其特征在于在有机介质中借助pka高于20的强有机碱或咪唑酸钠将肝素苄酯季铵盐解聚，将解聚的肝素苄酯季铵盐转化成钠盐，皂化这种酯与任选地纯化这种产物，
其中pka高于20的强有机碱选自1，5，7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯、2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氢-1，3，2-二氮杂磷杂环己三烯、胍和磷腈类的碱，
其中所述胍类碱是下式所示碱：
式中R1是氢或烷基，R2、R3、R4和R5相同或不同，各自代表烷基，这些烷基具有C1～6直链或支链，
其中所述磷腈类的碱是下式所示碱：
式中R1-R7基团相同或不同，代表具有C1～6直链或支链的烷基。
8、权利要求7的方法，其中所述胍类碱是下式所示碱：
Figure C018141870003C3
其中R1是氢，R2、R3、R4和R5是甲基。
9、权利要求7的方法，其中所述肝素苄酯季铵盐是苄乙氧铵盐、鲸蜡基吡啶鎓盐或鲸蜡基三甲基铵盐。
10、权利要求7-9中任一项的方法，其中pka高于20的强有机碱或咪唑酸钠/肝素苄酯季铵盐的摩尔比是0.2-5。
11、权利要求7-9中任一项的方法，其中肝素苄酯季铵盐的酯化率是50-100％。
12、权利要求7-9中任一项的方法，其中通过使用醋酸钠醇溶液处理反应介质可将解聚的肝素苄酯季铵盐转化成钠盐。
13、权利要求7-9中任一项的方法，其中使用碱金属氢氧化物进行皂化反应。
14、权利要求7-9中任一项的方法，其中使用过氧化氢进行纯化。
15、权利要求1-6中任一项限定的混合物作为药物的用途。
16、权利要求1-6中任一项限定的混合物作为抗血栓形成药物的用途。
17、含有作为活性组分的权利要求1-6中任一项的混合物的药物组合物。
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Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6969705B2 (en) 2000-07-21 2005-11-29 Aventis Pharma S.A. Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
ATE356150T1 (de) * 2002-06-20 2007-03-15 Chemi Spa Verfahren zur herstellung von heparinestern
KR101104107B1 (ko) 2002-10-10 2012-01-12 아방티 파르마 소시에테 아노님 헤파린으로부터 유도된 다당류의 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약제학적 조성물
FR2845686B1 (fr) * 2002-10-10 2013-08-30 Aventis Pharma Sa Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
US20040171819A1 (en) 2002-10-10 2004-09-02 Aventis Pharma S.A. Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
FR2857971B1 (fr) * 2003-07-24 2005-08-26 Aventis Pharma Sa Melanges d'oligosaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
US7956046B2 (en) * 2003-07-24 2011-06-07 Aventis Pharma S.A. Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
DE102004059134B4 (de) 2004-12-08 2011-12-15 Siemens Ag Expansionsvorrichtung für ein Röntgengerät und Röntgenstrahler
JP2009538386A (ja) * 2006-05-25 2009-11-05 モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 低分子量ヘパリン組成物およびその使用
CN101824099B (zh) * 2010-02-12 2011-11-30 淮安麦德森化学有限公司 一种粗品肝素钠的纯化方法
CN101824446B (zh) * 2010-02-24 2012-12-12 淮安麦德森化学有限公司 反向沉淀生产硫酸软骨素的方法
EP2399591A1 (en) 2010-06-25 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for the extended prevention of a mortality and/or morbidity event in a patient having undergone hip fracture surgery
EP2399592A1 (en) 2010-06-25 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in hip replacement surgery with improved safety in terms of clinically relevant bleedings and major bleedings
EP2399590A1 (en) 2010-06-25 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for the prevention of a mortality and/or morbidity event in a patient undergoing major orthopaedic surgery
EP2399593A1 (en) 2010-06-28 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in orthopaedic surgery with improved benefit-risk profile
CN102399379B (zh) * 2010-09-09 2016-08-31 上海喜恩医药科技发展有限公司 一种肝素衍生的多糖混合物及其制备方法和药物组合物
EP3144325B1 (en) * 2010-09-14 2020-11-04 University Of Miyazaki High purity heparin and production method therefor
EP2446891A1 (en) 2010-10-28 2012-05-02 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in major abdominal surgery with improved safety in terms of clinically relevant bleedings and major bleedings
WO2012055843A1 (en) 2010-10-28 2012-05-03 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for the prevention of major venous thromboembolism in a patient undergoing major abdominal surgery
EP2548561A1 (en) 2011-07-22 2013-01-23 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for improving the survival of patients with locally advanced cancer
ES2445494B1 (es) * 2012-08-02 2015-03-06 Rovi Lab Farmaceut Sa Procedimiento de obtención de heparinas de bajo y muy bajo peso molecular
CN103175925B (zh) * 2013-03-20 2014-12-03 山东辰中生物制药有限公司 依诺肝素钠生产过程中肝素苄基酯的酯化率的检测方法
FR3016632A1 (fr) * 2014-01-21 2015-07-24 IFP Energies Nouvelles Procede de transformation de polysaccharides en molecules oxygenees en presence de superbases organiques neutres
CZ306662B6 (cs) * 2015-06-26 2017-04-26 Contipro A.S. Deriváty sulfatovaných polysacharidů, způsob jejich přípravy, způsob jejich modifikace a použití

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2478646A2 (fr) * 1980-03-20 1981-09-25 Choay Sa Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir
IL61201A (en) * 1979-10-05 1984-09-30 Choay Sa Oligosaccharides having no more than 8 saccharide moieties,their obtention from heparin and pharmaceutical compositions containing them
FR2482611B1 (fr) * 1980-05-14 1986-03-07 Pharmindustrie Nouveaux polysaccharides sulfates, procedes pour leur preparation et leur utilisation comme medicaments
US4916219A (en) * 1985-03-28 1990-04-10 University Of Iowa Research Foundation Oligosaccharide heparin fragments as inhibitors of complement cascade
EP0337327A1 (en) * 1988-04-09 1989-10-18 Bioiberica, S.A. Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin
ES2077533B1 (es) * 1994-02-28 1996-07-01 Bioiberica Procedimiento de obtencion de fracciones de oligosacaridos por despolimerizacion quimica de heparina.
JP4897991B2 (ja) * 1999-07-23 2012-03-14 ラボラトリオス ファルマセウティコス ロビ ソシエダッド アノニマ 超低分子量ヘパリン組成物
ES2161615B1 (es) * 1999-07-23 2003-03-16 Rovi Lab Farmaceut Sa Composiciones de heparinas de muy bajo peso molecular.

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Publication number Publication date
FR2811992B1 (fr) 2003-07-04
MA26928A1 (fr) 2004-12-20
IL153922A0 (en) 2003-07-31
CY1110774T1 (el) 2015-06-10
FR2811992A1 (fr) 2002-01-25
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ES2347134T5 (es) 2014-06-24
ECSP034442A (es) 2003-03-10
CA2416673C (fr) 2011-06-14
JP5279160B2 (ja) 2013-09-04
PL365561A1 (en) 2005-01-10
DE60142340D1 (de) 2010-07-22
NZ524028A (en) 2004-12-24
HK1059273A1 (en) 2004-06-25
AU2001277602B2 (en) 2007-07-19
HUP0300755A3 (en) 2004-03-01
AU7760201A (en) 2002-02-05
BR0112612A (pt) 2003-07-29
EP1307491A1 (fr) 2003-05-07
NO20030296L (no) 2003-01-20
EA005995B1 (ru) 2005-08-25
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