CN112931059A - 一种桑树桑黄菌种及其栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明提出一种桑树桑黄菌种及其栽培方法，属于生物技术领域。所述桑树桑黄菌株具体为桑树桑黄QJF‑2，保藏编号为CGMCC No.19653。本发明提供的桑树桑黄QJF‑2菌株，药用价值高，为正宗的桑树桑黄，药效明显高于普通杨树桑黄。

Description

一种桑树桑黄菌种及其栽培方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种桑树桑黄菌种及其栽培方法。

背景技术

桑黄是生长在桑树上的一种珍稀药用真菌，素有“森林黄金”之美称，在中国已经有2000多年的使用历史，关于桑黄的药用功能历代本草著作中均有详细记载，其主要功能有治疗痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、闭经、止泻、延年等。现代研究表明，其具有显著的抗肿瘤、抗氧化、增强免疫力、预防和治疗类风湿性关节炎、降低血脂、抑制尿酸等作用，药用价值很高，尤其在抗肿瘤方面，已被证实优于灵芝等药用真菌，已成为国内外医药制剂和保健品研究开发的热点，具有较好的经济效益和社会效益。

现代人的健康意识催生了桑黄热，价格也是节节高升，野生桑黄资源非常有限，促使人们开始探索桑黄的人工栽培方式，但真正的桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)很难人工驯化，即使可以驯化成功，子实体产量和品质也非常不稳定，难以实现真正意义上的规模化人工栽培。目前市面上成功栽培的桑黄大多是形状外观与桑树桑黄极为相似的杨树桑黄、粗毛纤孔菌等，它们通常也被统称为桑黄，但药性与真正的桑树桑黄相比有很大差别。因此，对真正的桑树桑黄进行人工驯化并建立高产稳产的栽培技术体系，对于桑黄产业的健康稳定发展意义重大。

发明内容

本发明提供了一种药效好的正宗桑树桑黄菌株(QJF-2)，及其袋料栽培和段木栽培的方法，还提供一种桑黄菌丝体的固体培养方法、桑黄菌丝体的液体培养方法。

本发明提出一种桑树桑黄菌株，

所述桑树桑黄菌株具体为桑树桑黄QJF-2，保藏编号为CGMCC No.19653。

本发明还提出一种上述桑黄菌株的栽培方法，包括：

长有桑树桑黄菌丝体的菌袋割口处喷洒微生物菌剂后，套袋诱导出黄；

优选的，所述微生物菌剂包括富硒微生物菌叶面肥。

进一步地，所述栽培方法包括袋料栽培或仿野生栽培。

进一步地，所述袋料栽培包括如下步骤：

(a1)培养料拌匀后装入菌袋内，高压灭菌后，冷却；

(a2)将栽培种加入步骤(a1)所得培养料中，恒温避光培养至菌丝长满菌袋；

(a3)待室外气温达25℃以上，将步骤(a2)所得菌袋移入栽培棚内进行转色，转色完成后在菌袋上割口，向割口处喷洒微生物菌剂，套袋，立放于栽培棚内的菌床上，保持栽培棚内空气湿度为80％～85％；

(a4)割口处现黄后，去除袋子，喷雾状水，空气湿度控制在85％～90％，通风，直至采收。

进一步地，所述仿野生栽培包括如下步骤：

(b1)将木段截成17cm～20cm长的短木段，劈成细段，然后拼成段木捆，投入清水中浸泡，捞出后装入菌袋内，在段木捆的缝隙内和表面填充培养料，扎好菌袋口，常压灭菌，得菌棒；

(b2)将栽培种加入步骤(b1)所得菌棒，恒温避光培养至菌丝长满菌棒；

(b3)待室外气温达25℃以上，将步骤(b2)所得菌棒移入栽培棚内进行转色，转色完成后在菌棒上割口，向割口处喷洒微生物菌剂，套袋，立放于栽培棚内的菌床上，保持棚内空气湿度85％～90％；

(b4)割口处现黄后，去除袋子，喷雾状水，空气湿度控制在85％～90％，通风，直至采收。

进一步地，所述步骤(b3)还包括越冬管理，具体为：进入冬季后，将栽培棚顶部的遮阳网直接覆盖在菌棒表面，次年4月份将遮阳网揭至栽培棚顶部进行出菇管理。

本发明还提出上述的桑黄菌株的固态培养方法，包括如下步骤：

(c1)将所述桑黄菌丝体接种于灭菌后的胡萝卜片或土豆片上，28℃培养；

(c2)将步骤(c1)所得长满桑黄菌丝体的胡萝卜片或土豆片粉碎，烘干后，再次粉碎，得桑黄粉。

本发明还提出上述的桑黄菌株的液体发酵方法，包括如下步骤：

(d1)配制液体发酵培养基，灭菌；其中，所述液体发酵培养基包括胡萝卜浸出液；

(d2)将桑黄菌丝体接入步骤(d1)所得液体发酵培养基，室温静置，振荡培养，得桑黄菌丝球；

(d3)将步骤(d2)所得桑黄菌丝球过滤，烘干，粉碎，得富含胡萝卜素的桑黄菌丝粉。

本发明还提出上述固态培养方法制备得到的桑黄粉。

本发明还提出上述液体发酵方法制备得到的富含胡萝卜素的桑黄菌丝粉。

本发明具有以下优势：

(1)本发明提供的QJF-2菌种，药用价值高，为正宗的桑树桑黄，药效(如抗肿瘤细胞的效果)明显高于普通杨树桑黄。

(2)本发明提供的QJF-2菌种的袋料栽培方法和仿野生栽培方法具有出黄快，发菌速度快，子实体发育稳定，产量和质量波动性较小，生产周期短，管理成本低等优点。

(3)本发明提供的固体培养和液体培养方法获得的桑黄菌丝体粉含有丰富的胡萝卜素，萜类和粗多糖等生物活性物质，其含量远远高于桑黄子实体，且开发的产品可以直接食用，口感好。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

本发明一实施例提出一种桑树桑黄菌株，所述桑树桑黄菌株具体为

桑树桑黄QJF-2，保藏编号为CGMCC No.19653。

野生桑黄采集自浙江省杭州市淳安县千岛湖的桑树林中，对其进行组织分离培养，收集菌丝体，ITS鉴定，测序结果显示与Sanghuangporus sanghuang的ITS序列同源性最高。

结合子实体形态、菌丝体形态、显微特征和ITS鉴定等实验数据，认定该桑黄菌株为正宗的桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)。

对该桑黄菌株进行多次驯化栽培，对驯化后的子实体进行组分，菌株于2020年6月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号为CGMCC No.19653，命名为QJF-2，分类命名：桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)。

所述桑树桑黄QJF-2的736bp ITS序列见序列表SEQ ID No.1。

桑树桑黄QJF-2可进行稳定的袋料栽培和段木栽培，子实体抗肿瘤细胞的效果显著优于杨树桑黄。

具体地，本发明一实施例提出一种上述桑树桑黄菌株的栽培方法，

包括：长有桑树桑黄菌丝体的菌袋割口处喷洒微生物菌剂后，套袋诱导出黄。

本发明一实施例中，所述微生物菌剂包括富硒微生物菌叶面肥。

具体而言，富硒微生物菌叶面肥可以为市售农哈哈品牌的富硒微生物菌叶面肥，具体包括生物发酵物、壳聚糖、复合益生菌、螯合微量元素、小分子肽、特殊抗病促生长因子、硒等。

本发明一实施例中，所述栽培方法包括袋料栽培或仿野生栽培。

具体而言，所述袋料栽培包括如下步骤：

(a1)培养料拌匀后装入菌袋内，高压灭菌后，冷却；

(a2)将栽培种加入步骤(a1)所得培养料中，恒温避光培养至菌丝长满菌袋；

(a3)待室外气温达25℃以上，将步骤(a2)所得菌袋移入栽培棚内，在菌袋上割口，割口处喷洒微生物菌剂后，套袋，立放于栽培棚内的菌床上，保持栽培棚内空气湿度80％～85％；

(a4)割口处现黄后，去除袋子，喷雾状水，空气湿度控制在85％～90％，通风，直至采收。

具体而言，步骤(a1)中，所述培养料中各组分及所占重量百分比为：杂木屑75％～80％，麦麸13％～18％，豆粕0％～3％，糖0％～2.5％，生石灰1.5％，水65％。

进一步地，步骤(a1)中，所述杂木屑为桑枝木屑、柞树(蒙古栎)木屑或栎树木屑。

进一步地，步骤(a2)中，恒温的温度为28℃。

进一步地，步骤(a3)中，所述割口的形状为月牙形。

进一步地，步骤(a2)中，所述栽培种覆盖培养料的料面1/2以上。

进一步地，步骤(a3)中，所述沙土要提前过筛。

具体而言，所述仿野生栽培包括如下步骤：

(b1)将木段截成17cm～20cm长的短木段，劈成细段，然后拼成段木捆，投入清水中浸泡，捞出后装入菌袋内，在段木捆的缝隙内和表面填充培养料，扎好菌袋口，常压灭菌，得菌棒；

(b2)将栽培种加入步骤(b1)所得菌棒，恒温避光培养至菌丝长满菌棒；

(b3)待室外气温达25℃以上，将步骤(b2)所得菌棒移入栽培棚内，在菌棒上割口，割口处喷洒微生物菌剂后，套袋，立放于栽培棚内的菌床上，保持棚内空气湿度85％～90％；

(b4)割口处现黄后，喷雾状水，空气湿度控制在85％～90％，通风，直至采收。

具体而言，步骤(b1)中，培养料为木屑和麦麸的混合物。

进一步地，步骤(b1)中，恒温的温度为28℃。

进一步地，步骤(b1)中，浸泡的时间为15～20min。

进一步地，步骤(b2)中，所述栽培种覆盖料面1/2以上。

本发明一实施例中，所述的桑黄菌种的栽培方法，所述步骤(b3)还包括越冬管理。所述越冬管理具体为：进入冬季后，将栽培棚顶部的遮阳网直接覆盖在菌袋面，次年4月份将遮阳网揭至栽培棚顶部，进行常规出菇管理。三年期桑黄才可采收，采收前一周停止喷水。

现有技术中，虽然桑树桑黄子实体难以大量获得，但其菌丝体可以通过固体或液体发酵的方式获得，已有研究表明，桑黄菌丝体的某些营养成分含量跟子实体营养成分含量基本一致(叶玉洁等，2018)，因此采用固体或液体发酵获得的菌丝体同样具有很好的应用价值和开发前景，还可以缓解桑黄子实体匮乏的局面。

目前桑黄的固体和液体发酵培养基主要以桑枝木屑、麸皮、棉籽壳等常规物料为主要原料，利用这些常规配方获得的菌丝体，营养效果欠佳，口感稍差，不宜直接食用。

本发明一实施例提出上述桑黄菌株的固态培养方法，包括如下步骤：

(c1)将所述桑黄菌丝体接种于灭菌后的胡萝卜片或土豆片上，28℃培养30天；

(c2)将步骤(c1)所得长满桑黄菌丝体的胡萝卜片或土豆片粉碎，烘干后，再次粉碎，得桑黄粉。该桑黄粉中富含胡萝卜素或土豆所含营养元素(包括碳水化合物、蛋白质、维生素等)。

本发明一实施例还提出上述任一方法制备得到的桑黄粉。

本发明一实施例还提出上述桑黄菌株的液体发酵方法，包括如下步骤：

(d1)配制液体发酵培养基，灭菌；其中，所述液体发酵培养基包括胡萝卜浸出液；

(d2)将桑黄菌丝体接入步骤(d1)所得液体发酵培养基，室温静置，振荡培养，得桑黄菌丝球；

(d3)将桑黄菌丝球过滤，烘干，粉碎，得富含胡萝卜素的桑黄菌丝粉。

具体而言，所述液体发酵培养基包括胡萝卜浸出液200g，黄豆粉浸出液30g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1.0g，硫酸镁0.5g，维生素B1 10mg，水1L。

具体而言，步骤(d2)中，室温静置的时间为1天。

进一步地，步骤(d2)中，振荡培养的温度为28℃。

进一步地，步骤(d2)中，振荡培养的转速为150rpm。

进一步地，步骤(d2)中，振荡培养的时间为15天。

本发明一实施例还提出上述任一方法制备得到的富含胡萝卜素的桑黄菌丝粉。

下面将结合实施例详细阐述本发明。

实施例1桑黄菌株QJF-2的形态特征及分类鉴定

(1)桑黄菌株QJF-2的形态特征：子实体二三层叠生，呈马蹄形或扇形，木质、坚硬，菌盖背面呈深黄色至褐色，腹面呈黄色，质地紧密；在PDA培养基上培养14天，菌落直径90mm，质地绒毛状，黄色，反面褐色；显微镜观察菌丝浅褐色、多分枝、具隔膜，直径2.5～4.5μm。形态特征表明其为正宗的桑树桑黄。

(2)桑黄菌株QJF-2的ITS鉴定

按常规方法提取桑黄菌株QJF-2的DNA，以ITS1和ITS4为引物进行PCR扩增，其中所述ITS1和ITS4的引物序列为：

ITS1:5'--3'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG

ITS4:5'--3'-TCCTCCGCTTATTGATATGC

PCR扩增体系为：Premix 12.5μL，ITS1和ITS4各1μL，DNA模板2μL，用ddH₂O补充至25μL。

扩增条件：95℃预变性5min；94℃变性3min，55℃退火50s，72℃延伸45S，共33个循环；72℃充分延伸7min。

1.2％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，目的片段约为700bp，将PCR产物送上海生工生物科技公司进行测序，序列信息见桑树桑黄QJF-2的736bp ITS序列见序列表SEQ IDNo.1。

将该序列进行Blast比对，与Sanghuangporus sanghuang的ITS序列同源性最高。

根据菌种的子实体形态、菌丝体形态、显微特征和ITS鉴定等实验数据综合分析，证明该桑黄菌株为正宗的桑树桑黄，其拉丁名为Sanghuangporus sanghuang。

实施例2桑黄QJF-2的栽培实验

(1)原种的制备：按照重量百分比比例将81％木屑(粗木屑和细木屑各一半)，15％麦麸，2％豆饼，0.5％石灰和白糖，1％石膏混合，加水后充分搅拌均匀，含水量控制在62％～65％，装袋，栽培袋规格为17cm×33cm×0.05cm的聚丙烯袋，皮筋扎口，采用高压灭菌，在125℃保持150min。菌袋灭菌完毕后，取出摊凉，在无菌条件下接入桑黄QJF-2试管种，在28℃，避光条件下培养40天，得桑黄QJF-2原种。

(2)栽培种的制备：栽培种培养料的组成和制备方法见步骤(1)，按照重量百分比5％的比例将步骤(1)获得原种接种在所述栽培种培养料上，在28℃，避光条件下培养40天，得桑黄QJF-2栽培种。

(3)桑黄QJF-2的袋料栽培方法

按照重量百分比比例将78％杂木屑，18％的麦麸，2％豆粕，1％糖，1％生石灰混合，加水后充分搅拌均匀，含水量控制在62％～65％，装入17cm×35cm×0.05cm的聚丙烯菌袋内，在121℃～126℃保持3h；

将灭菌后的菌袋放入冷却室冷却至室温，在无菌条件下，按重量百分比5％的比例将步骤(2)中的栽培种接入培养料中，栽培种覆盖料面1/2以上，接种后立即用滤菌封口膜或外套袋封口，在28℃、通风条件良好的室内避光培养50天，至菌丝长满菌袋；

在菌袋进入栽培棚之前，按深3cm～4cm，株行距10cm×10cm或12cm×12cm的距离挖坑，坑中喷绿霉净，将表面布满淡黄色菌丝体的菌袋移入栽培棚内，用灭菌刀片在菌袋上割口(割破菌皮，月牙形)，倒立于坑中，埋上湿润的沙土，将栽培棚分为A、B两区，向B区内桑黄菌袋的割口处喷洒微生物菌剂，套袋，然后立放于菌床上。A区不做任何处理，作为对照。之后采用昼夜温差的方法刺激出黄，即白天温度28℃左右，夜间温度20℃左右。催蕾期间空气湿度85％～90％，散射光，尽量不通风。3-5天内观察割口处，具体见表1。B区割口处基本都现黄，A区仅有30％菌袋现黄。

割口处现黄后，喷雾状水，将空气湿度提高到90％～95％，加大通风，光照800lux，子实体生长期，B区菌袋子实体长势优于A区，农艺性状均较好，待子实体组织变坚硬，菌盖由鲜黄色转为暗黄色，并见少量孢子弹射，即可采收。

表1

^a生物学效率＝子实体鲜重/所用培养料干重×100％

(4)桑黄QJF-2的仿野生栽培方法

将当年冬季砍伐的柞木或桑木劈成块后，拼成直径15cm～17cm的段木捆(3kg～4.5kg)，用塑料绳捆扎好，投入清水中浸泡20min，捞出后控水20min，装入折径19cm～22cm、长39cm～45cm、厚0.005cm～0.008cm的低压聚乙烯料袋，在木段两头和缝隙内填充木屑麦麸营养料(木屑、麦麸比例为3:1，加适量水拌匀，含水量55％～66％)，扎好袋口，段木与塑料袋要紧密贴合，常压灭菌，4h～6h内控制温度上升至100℃，在此温度下保持18h，待锅内温度自然降至60℃以下再出锅。

采用一头接种的方式，用接种铲挖取菌种后快速送入料袋，菌种须覆盖料面1/2以上，接种后立即用滤菌封口膜或外套袋封口，在28℃、通风条件良好的室内避光培养60天，至菌丝长满菌袋。

在菌袋进入栽培棚之前，按深6cm，株行距10cm×10cm或12cm×12cm的距离挖坑，坑中喷绿霉净；将表面布满淡黄色菌丝体的菌袋移入栽培棚内，用灭菌刀片在菌袋上割口(割破菌皮)，立放于坑中，埋上沙土，沙土含水量70％～72％，将栽培棚分为A、B两区，向B区内桑黄菌袋的割口处喷洒微生物菌剂，套袋，然后立放于菌床上，A区不做任何处理，作为对照。之后采用昼夜温差的方法刺激出黄，即白天温度28℃左右，夜间温度20℃左右。催蕾期间空气湿度85％～90％，散射光，尽量不通风。5-10天内观察割口处，具体见表2。B区割口处基本都现黄，A区有的菌袋现黄，有的菌袋未现黄。

割口处现黄后，喷雾状水，将空气湿度提高到90％～95％，加大通风，光照800lux，子实体生长期，B区菌袋子实体长势优于A区，农艺性状均较好。

进入冬季后，将遮阳网直接覆盖在菌袋表面，控温保湿，次年4月份将遮阳网揭至栽培棚顶部，起到防晒作用。当地气温进入20℃以后，桑黄子实体进入生长期，常规出菇方式进行管理。

三年生桑黄二三层叠生，呈马蹄形或扇形，木质、坚硬，菌盖呈深黄色至褐色，边缘白色生长圈消失并见少量孢子弹射时即可采收。

表2

实施例3 QJF-2子实体抗肿瘤效果的研究

采用水提醇沉法分别提取本发明实施例所得QJF-2子实体和传统的杨树桑黄子实体多糖，提取率分别为5.6％和7.4％。将这两种子实体多糖用超纯水溶解，浓度为1mg/mL，过滤除菌，再用培养液稀释至300μg/mL，待用。

细胞株HepG2、J82和T24为实验室储存菌株，将这三种细胞复苏传代之后，用PBS清洗细胞，然后加入胰酶进行细胞消化，将消化好的细胞(5000个/孔)接种于96孔板，于37℃，5％CO₂的培养箱中过夜培养。待细胞贴壁之后，弃去培养液，设置药物组、阴性对照组和溶剂对照组，分别加入100μL相应的溶液，每组均设置3个复孔。将96孔板放入培养箱中继续培养48h，弃去培养液，每孔加入100mL含10％WST-1试剂的无血清培养液，培养箱中静置2h，使用酶标仪于450nm处测定吸光值。结果用统计软件SPSS分析。结果见表3。

如表3所示，QJF-2子实体多糖在抑制肿瘤细胞增殖方面优于杨树桑黄子实体多糖，其对肿瘤细胞的毒性较强。

表3 2种桑黄子实体对3种肿瘤细胞活力影响的IC₅₀值

实施例4桑黄菌株QJF-2的固体发酵

(1)将胡萝卜和土豆切片，裹上玉米面、小米面、豆粕粉等，装入17cm×33cm×0.05cm的聚丙烯袋内，每袋装入3-5片胡萝卜或土豆，121℃保持30min；

(2)待菌袋冷却至室温，在无菌条件下接入桑黄菌株QJF-2菌丝体，每个菌袋3个接种点，封口后平放至28℃培养箱内，避光培养30天；

(3)将长满桑黄菌株QJF-2菌丝体的胡萝卜片或土豆片粉碎，烘干后，再次粉碎，获得桑黄粉。

实施例5桑黄菌株QJF-2的液体发酵

种子培养基：土豆200g、葡萄糖20g、水1L。

对照培养基(综合PD培养基)：土豆200g，黄豆粉30g(浸出液)，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1.0g，硫酸镁0.5g，维生素B₁10 mg，水1L。

实验组：

液体发酵培养基包括：胡萝卜200g(浸出液)，黄豆粉30g(浸出液)，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1.0g，硫酸镁0.5g，维生素B₁ 10mg，水1L。

按照上述配方，配制液体发酵培养基，500mL三角瓶内装入250mL液体培养基，121℃下保持30min，待培养基冷却后，按体积比接入3％的种子培养液，150rpm，28℃下振荡培养10天；将桑黄菌丝球过滤，烘干；粉碎后得到桑黄菌丝粉。

实施例6桑黄粉中总黄酮、总三萜、粗多糖、β-胡萝卜素含量的测定

委托北京华测检测公司测定桑黄子实体、实施例4所得桑黄粉中总黄酮、总三萜、粗多糖、β-胡萝卜素的含量，发现桑黄粉中总三萜的含量(1171mg/100g)远远高于子实体总三萜(354mg/100g)，以胡萝卜为培养基的桑黄粉还具有较丰富的β-胡萝卜素(0.073g/kg)。此外，桑黄粉中粗多糖的含量(3.4g/100g)显著高于子实体粗多糖(1.95g/100g)，但总黄酮的含量(65mg/100g)与子实体(235mg/100g)相比显著较低。

以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

序列表

<110> 浙江千济方医药健康有限公司

中国农业科学院农业资源与农业区划研究所

<120> 一种桑树桑黄菌种及其栽培方法

<130> 2020

<141> 2021-02-05

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 736

<212> DNA

<213> 桑树桑黄QJF-2()

<400> 1

ttccgtaggt taacctgcgg aaggatcatt atcgagtttt gaaagcgaga cctgctgctg 60

gtgcgaaatc gcgcatgtgc acggtcttcg cgctcaaatc caactcaaac ccctgtgcac 120

cttatatatc gcgagtcgaa gttagtagcc tgaggtcttg taagtaatta gtagaagggc 180

gaaagcgagt cttgctcgtt aggtagcctt tcgaaaatga aagcgagtgc gtcgggtgaa 240

gacttcggct tgtcgttaca aaacacctta tattgtcttt gtgaatgtaa tgctccttgt 300

gggcgaaaat aaatacaact ttcaacaacg gatctcttgg ctctcgcatc gatgaagaac 360

gcagcgaaat gcgataagta atgtgaattg cagaattcag tgaatcatcg aatctttgaa 420

cgcaccttgc gccccttggt attccgaggg gcatgcctgt ttgagtgtca tgtttatctc 480

aaaccgctcg tctttcttaa ttgaagggct tgaggtttgg acttggaggt ttactgctgg 540

cgcctttcga ggggtcggct cctcttaaat acattagctg ggctttggct cgcgtttacg 600

gtgtaatagt tgattccatt caccaacgag cgcttgcctg acgagcttgc ttctagccgt 660

ccgcgtcgtc ggacaaggag tcacctcctt cttgacacct ttgacctcaa atcaggtagg 720

attacccgcc gaactt 736

Claims (10)

1.一种桑树桑黄菌株，其特征在于，

所述桑树桑黄菌株具体为桑树桑黄QJF-2，保藏编号为CGMCC No.19653。

2.一种权利要求1所述的桑树桑黄菌株的栽培方法，其特征在于，包括：

长有桑树桑黄菌丝体的菌袋割口处喷洒微生物菌剂后，套袋诱导出黄。

3.根据权利要求2所述的桑树桑黄菌株的栽培方法，其特征在于，

所述栽培方法包括袋料栽培或仿野生栽培。

4.根据权利要求3所述的桑树桑黄菌株的栽培方法，其特征在于，

所述袋料栽培包括如下步骤：

(a1)培养料拌匀后装入菌袋内，高压灭菌后，冷却；

(a2)将栽培种加入步骤(a1)所得培养料中，恒温避光培养至菌丝长满菌袋；

(a3)待室外气温达25℃以上，将步骤(a2)所得菌袋移入栽培棚内进行转色，转色完成后在菌袋上割口，向割口处喷洒微生物菌剂，套袋，立放于栽培棚内的菌床上，保持栽培棚内空气湿度为80％～85％；

(a4)割口处现黄后，去除袋子，喷雾状水，空气湿度控制在85％～90％，通风，直至采收。

5.根据权利要求3所述的桑树桑黄菌株的栽培方法，其特征在于，

所述仿野生栽培包括如下步骤：

(b1)将木段截成17cm～20cm长的短木段，劈成细段，然后拼成段木捆，投入清水中浸泡，捞出后装入菌袋内，在段木捆的缝隙内和表面填充培养料，扎好菌袋口，常压灭菌，得菌棒；

(b2)将栽培种加入步骤(b1)所得菌棒，恒温避光培养至菌丝长满菌棒；

(b3)待室外气温达25℃以上，将步骤(b2)所得菌棒移入栽培棚内进行转色，转色完成后在菌棒上割口，向割口处喷洒微生物菌剂，套袋，立放于栽培棚内的菌床上，保持棚内空气湿度85％～90％；

(b4)割口处现黄后，去除袋子，喷雾状水，空气湿度控制在85％～90％，通风，直至采收。

6.根据权利要求5所述的桑树桑黄菌种的栽培方法，其特征在于，

所述步骤(b3)还包括越冬管理，具体为：进入冬季后，将栽培棚顶部的遮阳网直接覆盖在菌棒表面，次年4月份将遮阳网揭至栽培棚顶部进行出菇管理。

7.一种权利要求1所述的桑黄菌株的固态培养方法，其特征在于，

包括如下步骤：

(c1)将所述桑黄菌丝体接种于灭菌后的胡萝卜片或土豆片上，28℃培养；

(c2)将步骤(c1)所得长满桑黄菌丝体的胡萝卜片或土豆片粉碎，烘干后，再次粉碎，得桑黄粉。

8.一种权利要求1所述的桑树桑黄菌株的液体发酵方法，其特征在于，

包括如下步骤：

(d1)配制液体发酵培养基，灭菌；其中，所述液体发酵培养基包括胡萝卜浸出液；

(d2)将桑黄菌丝体接入步骤(d1)所得液体发酵培养基，室温静置，振荡培养，得桑黄菌丝球；

(d3)将步骤(d2)所得桑黄菌丝球过滤，烘干，粉碎，得富含胡萝卜素的桑黄菌丝粉。

9.权利要求7所述的固态培养方法制备得到的桑黄粉。

10.权利要求8所述的液体发酵方法制备得到的富含胡萝卜素的桑黄菌丝粉。