CN111905084A - 一种中药提取物及其制备工艺及其应用 - Google Patents
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Abstract
本公开涉及了一种中药提取物制备方法,由该制备方法制得的中药提取物,以及所述中药提取物在食品药品领域中的应用,所述中药提取物的原料药包括人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份和生姜100~400重量份。本公开的中药提取物制备方法,相较于现有技术的各种方法,在提高各有效成分提取含量、减少提取出的杂质含量的同时,缩短了制备周期,特别适用于工业化天然植物药品或食品的生产和制备。
Description
技术领域
本公开涉及一种中药提取物,特别是涉及一种用于制备药品或食品的中药提取物的制备工艺,属于药品和食品领域。
背景技术
保元汤,已被收录于《古代经典名方目录(第一批)》,经典名方是指至今仍广泛应用、疗效确切、具有明显特色与优势的古代中医典籍所记载的方剂。从目前的形势来看,国家鼓励基于经典名方的产品研发。
目前现有的保元汤相关产品绝大多数为药品,保元汤治元气虚弱,精神倦怠,肌肉柔慢,饮食少进,面青白,睡卧宁静等,临床多用于治疗体虚乏力等症。其功效有广泛的适用性,可作为平常百姓的滋补强身之品,但作中药组方,需采用传统的中药煎煮法服用,因存在操作繁琐耗时长且服用口感差等原因,限制了它的日常使用和工业化制备。
现有技术中,关于保元汤的提取方法大多采用饮片水煮或者醇提的方式,这两种方法对原料中的有效成分存在两个问题:提取不彻底以及加热破坏有效成分,对原料的利用度有所降低。
现有技术中通过闪式提取可使组织细胞内部的化学成分(或有效成分)与溶剂充分接触,有效成分快速溶解转移,通过过滤达到提取目的,在一定程度上避免了有效成分的破坏。但是,其存在应用范围窄、破碎后过滤难、提取容器受限等缺点,且提取容器大小、额定功率、刀具臂长等条件限制会造成单次提取量受限。
发明内容
为了解决上述技术问题,本公开的目的在于提供一种安全有效的天然植物药品或食品,让大众消费者能够从多渠道便捷的获取该功效产品。本公开的另一目的是提供了一种适用于制备药品或食品中的中药提取物的制备工艺,在提高原料利用度的同时减少了产品的制备周期,显著提高了制备效率,特别适合于天然植物药品或食品的工业化生产。
具体来讲,本公开提供了以下技术方案:
首先,本公开涉及一种中药提取物的制备方法,所述中药提取物的原料药包括人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份和生姜100~400重量份,其特征在于所述制备方法包括以下步骤:
步骤1:选取上述原料药,混合;
步骤2:将步骤1中混合后的原料药粉碎为微粉;
步骤3:将步骤2所得微粉加入辅料混合,进行超声破壁提取,得提取液;
步骤4:将步骤3所得提取液进行离心,得滤液;
步骤5:将步骤4所得滤液进行冷冻浓缩,得浓缩液,制成所述中药提取物;
优选地,所述步骤3中,所述辅料为环糊精,优选地,所述辅料选自γ-环糊精和羟丙基-β-环糊精中的一种或多种,更优选地,所述环糊精用量为所述微粉的1.5%-2.0%重量份;
优选地,所述步骤3中超声破壁提取的参数为:声场频率20~40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10~1:22,提取时间1~2h;
优选地,所述步骤4中离心使用卧式螺旋离心机或蝶式离心机进行离心;
更优选地,所述使用卧式螺旋离心机的参数为:转鼓转速2500~3000r/min、差转速9~11r/min,所述使用蝶式离心机的参数为:运行转速4000~6000r/min、排渣周期5-10min;
优选地,所述步骤4中冷冻浓缩的参数为:冷冻温度-6~-2℃、出料温度-5~-3℃。
前述制备方法,其中,所述中药提取物的原料药包括人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,优选地,所述原料药均来自道地产区。
前述制备方法,其中,所述步骤2中的粉碎是通过多次粉碎获得微粉,优选地,所述步骤2中的粉碎是通过二次粉碎获得微粉,更优选地,所述步骤2中的粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,所述第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,所述第二次粉碎的成品粒度为100μm以下。
前述制备方法,所述制备方法还包括以下步骤:
对步骤5所得浓缩液添加矫味剂,优选地,所述矫味剂为甜味剂,
优选地,所述甜味剂包含低血糖生成指数的植物基糖类,
优选地,所述甜味剂包含赤藓糖醇、结晶果糖中的一种或多种,
优选地,所述甜味剂包含低血糖生成指数的植物基糖类和/或蜂蜜,
更优选地,所述甜味剂包含赤藓糖醇、结晶果糖中的一种或多种和/或蜂蜜,
更优选地,所述辅料添加量为每100ml中:低血糖生成指数的植物基糖类2~5g和/或蜂蜜0.5~2g。
前述制备方法,所述制备方法还包括以下步骤:
将所述浓缩液进行灭菌,优选地,所述灭菌为辐照灭菌,辐照剂量为4~8kGy。
前述制备方法,所述制备方法包括以下步骤:
1)选取人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份、生姜100~400重量份,混合,粉碎,得微粉;
2)将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,20~40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10~1:22,提取时间1~2h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%-2.0%;
3)将上述提取液使用卧式螺旋离心机进行离心,转鼓转速2500~3000r/min、差转速9~11r/min,得滤液;
4)将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-6~-2℃、出料温度-5~-3℃,得浓缩液,制成所述中药提取物。
进一步地,所述制备方法还可以包括以下步骤:
将上述浓缩液添加矫味剂进行矫味,每100ml中:赤藓糖醇或结晶果糖2~5g、蜂蜜0.5~2g,优选低血糖生成指数的糖类2.5~3g、和/或蜂蜜1.5~2g。
对上述浓缩液或矫味后的浓缩液进行辐照灭菌,辐照剂量为4~8kGy,优选6~7kGy。
本公开还涉及前述任一种制备方法制得的中药提取物。
本公开还涉及一种药品或食品组合物,包括前述中药提取物以及药学或食品学上可接受的载体,优选地,所述药物或食品组合物为液体制剂或固体制剂,优选丸剂、散剂、膏剂、丹剂、口服液、合剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或液体饮料中的一种或多种。
前述任一种制备方法,或前述中药提取物,或前述组合物,在制备补元气、抗疲劳、或防治虚症的药品或食品中的应用。
前述应用,所述药品或食品能够提高血清组织中SOD的活性,和/或减少血清中MDA的生成。
与现有技术相比,本公开的有益效果包括:
1)本公开的制备方法,分两次进行粉碎,原因在于:一是由于第二次粉碎的机器限制,其投料的粒径不能太大,需要进行物料预粉碎;二是二次粉碎可以让混料更加均匀,可以减小实际生产过程中各批次间的质量差异。
2)本公开的制备方法,采用先制备微粉(微粉的粒径<100μm),再超声波提取,其有益效果为:(1)利用微粉的粒径小、超声波的空化效应,提高原料中有效成分的溶出效率及溶出率,提高了原料的利用率、节约了原材料;(2)利用超声的空化效应达到破壁的目的,不仅工艺简单易操作、提取率高、收率高,而且粉碎及提取过程所需设备简单价格低廉,设备清洗方便,占地面积小,极利于产品成本的控制,也降低了人工劳动强度;(3)超声波提取的药液杂质少,对于用于其他剂型时,可以减少最终制剂量,有效成份也易于分离、纯化。
3)传统的提取方式为水煮提取,其中人参皂苷热稳定性差,人参皂苷在常压加热条件下,人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc和人参皂苷Rd随加热时间延长均发生不同程度的降解反应。故采用超声破壁提取,有效的避免了原料中有效成分的破坏。
4)在超声提取环节加入了环糊精,使配方中的挥发油可以和水溶性有效成分一起提取,而并非常规工艺采用的水蒸气蒸馏或CO2超临界提取挥发油,然后将挥发油进行包合处理,最后反加到物料的水提物中。本公开环糊精的加入极大的简化了工艺流程,节约了生产时间和能耗,提高了效率,其中,环糊精的添加量为微粉重量的1.5%-2.0%,即可达到和古法煎煮相同的挥发油含量。(古法煎煮液中每百毫升含0.015ml-0.020ml挥发油;不添加环糊精时,超声提取液中基本不含挥发油)。
5)添加了环糊精后的提取液,可以改善在冷冻浓缩时的冰晶形成过程中夹带部分有效成分。
6)肉桂挥发油具有镇痛解痉、解热、降血压、抗菌、升高白细胞、抗肿瘤、抗溃疡、健胃、壮阳等作用;生姜挥发油的抑菌作用强于相同浓度的山梨酸钾水溶液,可见其抑菌防腐的作用效果明显;生姜挥发油对缺血再灌注脑组织损伤有明显的保护作用。
7)以本公开的制备方法制得的中药提取物,降低了挥发油气味的刺激性,在口感上能刚好略带生姜、肉桂的风味。
8)本公开制备的中药提取物能够作为进一步作为有效组分,制备成养生抗疲劳的天然植物药品或食品。
9)本公开的制备方法,在提高提取效率的基础上有效缩短了制备周期,是一种可实现规模化生产的工艺路线。
10)本公开的制备方法中所有物料均没有经过加热处理,避免了物料中有效成分的热分解,以及芳香物质的挥发,食品原有品质和风味得到充分保存。
11)本公开的制备方法简单可靠,有效成分提取较完全,有效的弥补现有技术中相应产品食用繁琐、以及有效成分损失较大的缺点。
附图说明
图1本公开实施例5制得的中药提取物的人参皂苷含量测定的HPLC图谱;
图2对比例1(不加环糊精例)制得的中药提取物的人参皂苷含量测定的HPLC图谱;
图3对比例2(破壁粉碎例)制得的中药提取物的人参皂苷含量测定的HPLC图谱;
图4对比例3(常规制法例)制得的中药提取物的人参皂苷含量测定的HPLC图谱;
图5对比例4(古法煎煮例)制得的中药提取物的人参皂苷含量测定的HPLC图谱;
图6人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1标准对照品的HPLC图谱;
图7本公开总黄酮测定方法线性关系图。
具体实施方式
根据本公开的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本公开上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
I.定义
除非另有其它明确表示,否则在整个说明书和权利要求书中,术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分,而并未排除其它元件或其它组成部分。
术语“药学上可接受的”、“食品学上可接受的”是指在合理判断的范围内适合用于与人类和动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
术语“多次粉碎”指粉碎次数大于或等于二次,例如二次、三次、四次……等。
术语“微粉”是指粒径在100μm以下的粉末。
术语“超声破壁提取”,即超声提取法,是利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等加速胞内有效物质的释放、扩散和溶解,显著提高提取效率的提取方法。超声空化中微小气泡的爆裂会产生极大的压力,使植物细胞壁及整个生物体的破裂在瞬间完成,缩短了破碎时间,同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散和溶解,从而显著提高提取效率。
术语“植物基”依据食品领域的常用定义,指直接利用植物光合作用而形成的有机物质。
II.具体实施方式
本公开的一个方面,涉及一种中药提取物,所述中药提取物的原料药包括人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份和生姜100~400重量份。
在一个实施例中,所述中药提取物的原料药包括人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜373重量份。
在一个实施例中,所述中药提取物的原料药均来自道地产区。
本公开的一个方面,涉及一种中药提取物的制备方法,所述中药提取物的原料药包括人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份和生姜100~400重量份。
在一个实施例中,所述制备方法包括以下步骤:
步骤1:选取上述原料药,混合;
步骤2:将步骤1中混合后的原料药进行中粉碎为微粉;
步骤3:将步骤2所得微粉加入辅料混合,进行超声破壁提取,得提取液;
步骤4:将步骤3所得提取液进行离心,得滤液;
步骤5:将步骤4所得滤液进行冷冻浓缩,得浓缩液,制成所述中药提取物;
在一个实施例中,所述提取的提取溶剂为本领域常用的提取溶剂,例如水、乙醇等,优选使用纯净水进行提取。
在一个实施例中,所述步骤3中,所述辅料为环糊精,优选地,所述辅料选自γ-环糊精或羟丙基-β-环糊精中的一种或多种,更优选地,所述环糊精用量为微粉的1.5%-2.0%重量份;
在一个实施例中,所述步骤3中超声破壁提取的参数为:声场频率20~40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10~1:22,提取时间1~2h;
在一个实施例中,所述步骤4中离心使用卧式螺旋离心机或蝶式离心机进行离心,优选地,所述使用卧式螺旋离心机的参数为:转鼓转速2500~3000r/min、差转速9~11r/min,所述使用蝶式离心机的参数为:运行转速4000~6000r/min、排渣周期5-10min;
在一个实施例中,所述步骤4中冷冻浓缩的参数为:冷冻温度-6~-2℃、出料温度-5~-3℃。
在一个实施例中,所述步骤2中的粉碎是通过多次粉碎获得微粉,例如二次、三次或四次等。
优选地,所述步骤2中的粉碎是通过二次粉碎获得微粉。更优选地,所述步骤2中的粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,所述第一次粉碎的原料粒度为10~100mm第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,所述第二次粉碎的成品粒度为100μm以下。
在一个实施例中,所述制备方法还包括以下步骤:
步骤6:将步骤5所得浓缩液添加适量矫味剂,优选地,所述矫味剂为甜味剂。
优选地,所述甜味剂包含低血糖生成指数的糖类。
优选地,所述甜味剂包含赤藓糖醇、结晶果糖中的一种或多种。
优选地,所述甜味剂包含低血糖生成指数的糖类和/或蜂蜜。
更优选地,所述甜味剂包含赤藓糖醇、结晶果糖中的一种或多种和/或蜂蜜。
更优选地,所述辅料添加量为每100ml中:低血糖生成指数的糖类2~5g、和/或蜂蜜0.5~2g,优选低血糖生成指数的糖类2.5~3g、和/或蜂蜜1.5~2g。
优选地,所述低血糖生成指数的糖类为植物基糖类。
在一个实施例中,所述制备方法包括以下步骤:
将所述浓缩液体进行灭菌,优选地,所述灭菌为辐照灭菌,辐照剂量为4~8kGy。
在一个具体实施例中,所述制备方法还包括以下步骤:
1)选取人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份、生姜100~400重量份,混合,粉碎,得微粉;
2)将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,20~40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10~1:22,提取时间1~2h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%-2.0%;
3)将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量8~12m3/h、转鼓转速2500~3000r/min、差转速9~11r/min,得滤液;
4)将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-6~-2℃、出料温度-5~-3℃,得浓缩液。
进一步地,所述制备方法还可以包括以下步骤:
5)将上述浓缩液添加矫味剂进行矫味,每100ml中:赤藓糖醇或结晶果糖2~5g、蜂蜜0.5~2g。
6)对上述矫味后的浓缩液进行辐照灭菌,辐照剂量为4~8kGy。
在一个具体实施例中,所述制备方法包括以下步骤:
1)选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合,粉碎,得微粉;
2)将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率30kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:15,提取时间1h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%;
3)将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量8m3/h、转鼓转速2600r/min、差转速9r/min,得滤液;
4)将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-3℃、出料温度-3℃得浓缩液。进一步地,所述制备方法还可以包括以下步骤:
5)将上述浓缩液添加矫味剂进行矫味,每100ml中:赤藓糖醇或结晶果糖2.5~3g、蜂蜜1.5~2g。
6)对上述矫味后的浓缩液进行辐照灭菌,辐照剂量为6~7kGy。
本公开的另一个方面,还涉及根据前述任一种制备方法制得的中药提取物。
本公开的另一个方面,还涉及一种药品组合物或食品组合物,其包括前述中药提取物以及药学或食品学上可接受的载体,优选地,所述药物或食品组合物为液体制剂或固体制剂,优选丸剂、散剂、膏剂、丹剂、口服液、合剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或液体饮料等中的一种或多种。
本公开的另一个方面,还涉及前述任一种中药提取物,或前述任一种中药提取物的制备方法,或前述任一种组合物,在制备补元气、抗疲劳或防治虚症的药品或食品中的应用。
在一个实施例中,所述药品或食品能够提高血清组织中SOD的活性。
在一个实施例中,所述药品或食品能够减少血清中MDA的生成。
在一个实施例中,所述药品或食品能够提高血清组织中SOD的活性并同时减少血清中MDA的生成。
III.实施例
实施例1:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的口服液
选取人参352重量份、黄芪689重量份、甘草125重量份、肉桂60重量份、生姜150重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率20kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:12,提取时间1h,得提取液,所述羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量9m3/h、转鼓转速2600r/min、差转速9r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-5℃、出料温度-4℃得浓缩液;
浓缩液添加赤藓糖醇3g、蜂蜜1.2g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为6kGy,即得。
实施例2:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的口服液
选取人参375重量份、黄芪700重量份、甘草108重量份、肉桂80重量份、生姜120重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过三次粉碎获得,第三次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率25kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10,提取时间1h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用蝶式离心机进行离心,进料流量10m3/h、运行转速4000r/min、排渣周期5min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-3℃、出料温度-3℃得浓缩液;
浓缩液添加结晶果糖5g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为7kGy,即得。
实施例3:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的液体饮料
选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过四次粉碎获得,第四次粉碎的成品粒度为100μm以下;将γ-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率35kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:18,提取时间1.5h,得提取液,γ-环糊精的量为微粉的2.0%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量10m3/h、转鼓转速2900r/min、差转速10r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-4℃、出料温度-4℃得浓缩液;
浓缩液添加蜂蜜2g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为8kGy,即得。
实施例4:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的液体饮料
选取人参400重量份、黄芪800重量份、甘草200重量份、肉桂100重量份、生姜300重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将γ-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:20,提取时间2h,得提取液,γ-环糊精的量为微粉的1.8%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量12m3/h、转鼓转速3000r/min、差转速11r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-6℃、出料温度-4℃得浓缩液;
浓缩液添加结晶果糖5g、蜂蜜0.5g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为5kGy,即得。
实施例5:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的液体饮料
选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率30kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:15,提取时间1h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量8m3/h、转鼓转速2600r/min、差转速9r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-3℃、出料温度-3℃得浓缩液;
浓缩液添加赤藓糖醇2.5g、蜂蜜2g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为7kGy,即得。
实施例6:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的固体饮料
选取人参300重量份、黄芪720重量份、甘草160重量份、肉桂100重量份、生姜150重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率25kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:18,提取时间1.2h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.8%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量9m3/h、转鼓转速2800r/min、差转速10r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-4℃、出料温度-4℃得浓缩液;
浓缩液添加赤藓糖醇2.0g进行矫味,得液体;
所得液体进行冷冻干燥、粉碎,辐照灭菌,即得。
实施例7:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的压片糖果
选取人参390重量份、黄芪650重量份、甘草120重量份、肉桂60重量份、生姜180重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率35kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:20,提取时间1.0h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的2.0%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量9m3/h、转鼓转速2800r/min、差转速11r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-5℃、出料温度-4℃得浓缩液;
浓缩液添加赤藓糖醇3.0g进行矫味,得液体;
所得液体冷冻干燥、粉碎、压片,辐照灭菌,即得。
实施例8:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的丸剂
选取人参330重量份、黄芪720重量份、甘草150重量份、肉桂80重量份、生姜200重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率33kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:16,提取时间1.5h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.4%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量10m3/h、转鼓转速2800r/min、差转速10r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-3℃、出料温度-3℃得浓缩液;
所得浓缩液冷冻干燥、粉碎、制丸,辐照灭菌,即得。
实施例9:本公开中药提取物的制备方法及制备得到的颗粒剂
选取人参320重量份、黄芪780重量份、甘草110重量份、肉桂90重量份、生姜130重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率32kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:18,提取时间1.2h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.8%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量9m3/h、转鼓转速2900r/min、差转速10r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-4℃、出料温度-3℃得浓缩液;
所得浓缩液冷冻干燥、粉碎、制粒,辐照灭菌,即得。
对比例1(不加环糊精例)
选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合,粉碎,得微粉;
上述微粉是通过二次粉碎获得,二次粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,第二次粉碎的成品粒度为100μm以下;
采用超声提取器进行超声破壁提取,声场频率30kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:15,提取时间1h,得提取液,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量8m3/h、转鼓转速2600r/min、差转速9r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-3℃、出料温度-3℃得浓缩液;
浓缩液添加赤藓糖醇2.5g、蜂蜜2g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为7kGy,即得。
对比例2(破壁粉碎例)
选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合;
将上述材料采用气流粉碎机进行破壁粉碎,获得5-10μm的原料超微粉;
将羟丙基-β-环糊精混入上述所得超微粉后,采用超声提取器进行超声提取,声场频率32kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:13,提取时间1.2h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.8%,提取溶剂为纯净水;
将上述提取液采用卧式螺旋离心机进行离心,进料流量9m3/h、转鼓转速2800r/min、差转速10r/min,得滤液;
将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-4℃、出料温度-3℃得浓缩液;
浓缩液添加赤藓糖醇3.5g、蜂蜜1.8g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、辐照灭菌,辐照剂量为6kGy,即得。
对比例3(常规制法例)
选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合;
取上述材料,采用回流提取罐,加水进行加热回流提取。提取两次:第一次料液比1:12,提取时间1.5h;第二次料液比1:10,提取时间1h,过滤,合并两次提取液;
将上述提取液采用旋转蒸发器进行减压浓缩,温度65℃,真空度-0.090MPa,浓缩至料液密度为1.025g/cm3(25℃);
浓缩液添加赤藓糖醇3.2g、蜂蜜1.4g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、灭菌,即得。
对比例4(古法煎煮例)
选取人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,混合;
取上述材料,投入熬药壶,加水进行煎煮。煎煮两次:第一次料液比1:26,武火煮至沸腾,改用文火煮至料液减半,倒出煎煮液;第二次料液比1:20,武火煮至沸腾,改用文火煮至料液减半,倒出煎煮液;过滤,合并两次煎煮液;
煎煮液添加赤藓糖醇3.0g、蜂蜜1.0g进行矫味,得液体;
所得液体进行灌装、灭菌,即得。
实验例1:实施例5与对比例1-4制备得到的中药提取物中各有效成分的测定
供试样品的选择:不加环糊精法(对比例1)制得的中药提取物样品,破壁粉碎法(对比例2)制得的中药提取物样品,常规制法(对比例3)制得的中药提取物样品,古法煎煮(对比例4)制得的中药提取物样品,以及本公开的方法(实施例5)制得的中药提取物样品。
1.1各组制备得到的中药提取物中人参皂苷的含量研究
1)色谱条件与***适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按表1中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203nm,理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000。
表1色谱条件
2)对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品及人参皂苷Rb1对照品,加甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液,摇匀,即得。
3)供试品溶液的制备:精密量取20ml,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次40ml,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
4)测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定。
5)实验结果(表2,图1-6):
表2不同制备方法制备的提取物中人参皂苷的含量(n=3)
1.2各组制备得到的中药提取物中总皂苷的含量研究
1)试样处理:精密量取本品1.0ml进行柱层析。
柱层析:用10ml注射器作层析管,内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂,上加1cm中性氧化铝。先用25ml70%乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25ml水洗柱,弃去洗脱液。精确加入1.0ml已处理好的试样溶液,用25ml水洗柱,弃去洗脱液,25ml70%乙醇洗脱人参皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,置于60℃水浴蒸干,以此做显色用。
2)显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8ml高氯酸,混匀后移入5ml带塞刻度离心管中,60℃水浴上加热10min,取出,冰浴冷却后,准确加入冰乙酸5.0ml,摇匀后,以1cm比色池于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。
3)标准管:精密称取人参皂苷Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10ml,摇匀,作为人参皂苷Re标准品储备液。精密吸取人参皂苷Re标准品储备液100μl放蒸发皿中,水浴挥干溶剂,以下操作从“1)柱层析……”起,与试样相同,测定吸光度。
4)实验结果(表3):
表3不同制备方法制备的提取物中总皂苷的含量(n=2)
1.3各组制备得到的中药提取物中总黄酮的含量研究
以芦丁为对照,采用紫外分光光度法,测定中药提取物中总黄酮的含量。
1)样品溶液的制备:准确吸取样品溶液1.0ml,用水定容至50ml后,直接以75ml氯仿分3次萃取脱脂,待完全分层后,收集各次上层水溶液并定容至50ml。称取1~2g经预处理的聚酰胺树脂粉末,湿法装柱,用水饱和。吸取上述脱脂后的水溶液1~2ml,沿层析柱漫漫滴入柱内,放置一定时间,待测液被充分吸附后,用70%乙醇或甲醇洗脱,流速为1.0ml/min,至流出液基本无色,一般收集10ml即可。上述洗出液用洗脱剂定容后,过滤,取续滤液即可用于测定。
2)芦丁标准溶液的配制:精密称取经105℃干燥恒重的芦丁标准对照品15.0mg,加甲醇溶解并定容至100ml,即得。
3)标准曲线的绘制:精密吸取芦丁标准溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml,移入10ml刻度比色管中,加入30%乙醇溶液至5ml,各加5%亚硝酸钠溶液0.3ml,振摇后放置5min,加入10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀后放置6min,加1.0mol/L氢氧化钠溶液2ml,用30%乙醇定容至刻度,摇匀,放置15min,于510nm波长处测定吸光度,以零管为空白,以芦丁含量(μg)为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线,计算相关系数(r)。
4)样品测定:取样品溶液0.5ml,按标准曲线制备操作步骤于510nm处进行吸光度的测定。
5)结果计算:根据标准工作曲线,求出相当于样品吸光度的芦丁含量,按下式求出总黄酮含量(表4):
式中:X——样品中总黄酮含量(g/100ml);
m1——根据标准曲线计算出待测液中黄酮的量(μg);
V1——样品体积(ml);
N——供试品溶液稀释倍数。
6)实验结果表明,芦丁含量在0~554.030μg,线性关系良好,线性方程为y=0.000478x-0.000442,相关系数r=0.9998。线性关系图见图7。
表4不同制备方法制备的提取物中总皂苷的含量总黄酮的含量
1.4各组制备得到的中药提取物中挥发油的含量研究
1)二甲苯体积测定:取水约300ml与玻璃珠数粒,置烧瓶中,连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶时为止,再用移液管加入二甲苯1ml,然后连接回流冷凝管。将烧瓶内容物加热至沸腾,并继续蒸馏,其速度以保持冷凝管的中部呈冷却状态为度。30分钟后,停止加热,放置15分钟以上,读取二甲苯的容积。
2)挥发油测定:精密量取本品适量,用适量的石油醚(30~60℃)振摇超声洗涤2次,弃去石油醚后,水层置烧瓶中,加水适量与玻璃珠数粒,振摇混合后,连接挥发油测定器与回流冷凝管。置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸,并保持微沸约5小时,至测定器中油量不再增加,停止加热,放置片刻,开启测定器下端的活塞,将水缓缓放出,至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。放置1小时以上,再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平齐,读取油层量,自油层量中减去二甲苯量,即为挥发油量,再计算供试品中挥发油的含量(%)。
3)实验结果(表5):
表5不同制备方法制备的提取物中挥发油的含量
1.5各组制备得到的中药提取物中砷的含量研究
1)溶液配制:硝酸溶液(5+95):取5ml硝酸慢慢加入95ml水中。硫脲(50g/L)+抗坏血酸(50g/L)混合溶液:称取硫脲和抗坏血酸各5.0g,溶于水中,稀释至100mL,现用现配。砷标准使用液(100μg/L):吸取砷标准贮备液(10mg/L)10.0mL于100mL容量瓶中,加硝酸溶液至刻度,逐级稀释成每升含100.0μg砷的标准使用液。
2)试样消解:精密量取本品2ml,于100mL聚四氟乙烯消解罐中,加4mL浓硝酸,2mL过氧化氢,轻轻摇匀,放置2h,按表5的条件进行消解。消解结束后,溶液呈无色或淡黄色,取出消解罐,用水少量多次洗涤消解罐,洗液合并于25mL容量瓶中,加5mL硫脲和抗坏血酸溶液,定容至刻度,混匀备用;同时作试剂空白。
表6微波消解条件
3)仪器条件:根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为光电倍增管负高压260V,砷灯电流70mA,原子化器高度8mm,载气流速400mL/min,屏蔽气流量800mL/min,读数方式:峰面积,读数时间9s。
4)标准曲线的制作:吸取砷标准使用液20.0mL于100mL容量瓶中,加入20.0mL硫脲-抗坏血酸混合溶液,加入3mL硝酸,加水稀释至刻度,混匀。此溶液含砷为20μg/L,用该溶液作为主标液。选择0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L、8.0μg/L、16.0μg/L、20.0μg/L,用自动进样的方式测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线性回归方程,绘制标准曲线。
5)试样测定:分别测定试剂空白溶液和试样溶液的荧光强度,从标准曲线上求得试样溶液中砷的含量。
6)测定结果(表7):试样中砷含量按下式进行计算;
式中:X——试样中砷含量,单位为毫克每升(mg/L);
C1——测定样液中砷含量,单位为微克每升(μg/L);
C0——空白液中砷含量,单位为微克每升(μg/L);
V2——试样消解液定量总体积,单位为毫升(mL);
V1——试样取样量,单位为毫升(ml)。
表7不同制备方法制备的提取物中总砷的含量
表8不同制备方法制备的提取物中各成分的含量汇总表
上述实验结果表明:相较于常规制法(对比例3)以及古法煎煮(对比例4),本公开可以提高人参皂苷以及总皂苷类成分的转移率;能够保持挥发油的含量与古法煎煮相一致;相较于破壁粉碎(对比例2),本公开创造可以降低有害物质砷的含量,提高产品的安全性;并且产品的制备周期得到一定的缩短,提高了生产效率,有利于工业化生产。
相较于不加环糊精例(对比例1),本公开的提取方法增加了总黄酮和挥发油(例如肉桂挥发油和生姜挥发油)的含量;相较于破壁粉碎(对比例2),本公开二次粉碎得到微粉与对比例2的破壁粉碎进行比较,虽然两者粉碎后在进行提取环节都能提高的有效成分提取率,但是本公开先得到微粉再进行破壁提取的工艺组合,在保证高提取率的同时能使的提取出的杂质或有害物质(例如砷)的含量更少;相较于常规制法(对比例3)以及古法煎煮(对比例4),本公开可以提高提取物中人参皂苷以及总皂苷类成分的含量,并显著提高总皂苷转移率,提高了原料利用率和提取效率。
更重要的,本公开的发明人通过对提取步骤的改进和制备工艺参数的组合,提供出了本公开的中药提取物制备方法,相较于现有技术的各种方法,在提高提取出的各有效成分含量、减少提取出的杂质含量的同时,缩短了制备周期,特别适用于工业化天然植物药品或食品的生产和制备。
实验例2:本公开的中药提取物的抗疲劳作用研究
1)供试样品的选择:供试品A选用对比例3制得的样品,供试品B选用实施例5制得的样品。
2)选2月龄雄性昆明系小鼠,体重20±2g。对实验小鼠进行***均值和标准差,选择游泳基础时间标准差<10min的小鼠70只随机分成7组,每组10只。对照组(去离子水30ml/kg),供试品A:低剂量组(10ml/kg)、中剂量组(20ml/kg)、高剂量组(30ml/kg),供试品B:低剂量组(10ml/kg)、中剂量组(20ml/kg)、高剂量组(30ml/kg)。灌喂体积以最大者为准,不足者需补充灌胃去离子水。每天1次,连续灌喂3周。每次灌胃后,小鼠自由进食饮水。在第21d灌胃1h后进行小鼠负重游泳实验。力竭标准:小鼠沉入水下10秒不能浮出水面。
3)小鼠血清中SOD和MDA值的测定:小鼠测定负重游泳力竭时间后立即摘除眼球取血,离心制备血清。按测试盒说明书测定小鼠血清中的SOD和MDA值。
4)所测数据应用SPSS 13.0软件进行统计分析.采用方差分析进行组间比较。当P<0.05时,选用LSD进行多个试验组和1个对照组的比较。
5)测试结果(表9、10):
注:与对照组比较,*表示P<0.05;与供试品A比较,#表示P<0.05
注:与对照组比较,*表示P<0.05;与供试品A比较,#表示P<0.05
6)小鼠游泳时间可作为判断小鼠体力强壮程度、抗疲劳能力的客观指标
上述结果表明:本公开的制备方法制得的中药提取物,可以显著延长小鼠的游泳时间,对小鼠有明显的抗疲劳作用。能提高小鼠血清组织中SOD的活性、减少血清中MDA的生成,起到抗疲劳的作用。采用现常用工艺制得的样品也能起到小鼠抗疲劳作用,但要达到同样效果,需要服用更高剂量的同浓度产品。从而表明本公开与常用工艺相比,提高了原料的利用率、节约了原材料。
Claims (10)
1.一种中药提取物的制备方法,所述中药提取物的原料药包括人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份和生姜100~400重量份,其特征在于所述制备方法包括以下步骤:
步骤1:选取上述原料药,混合;
步骤2:将步骤1中混合后的原料药粉碎,得微粉;
步骤3:将步骤2所得微粉加入辅料混合,进行超声破壁提取,得提取液;
步骤4:将步骤3所得提取液进行离心,得滤液;
步骤5:将步骤4所得滤液进行冷冻浓缩,得浓缩液,制成所述中药提取物;
优选地,所述步骤3中,所述辅料为环糊精,优选地,所述辅料选自γ-环糊精和羟丙基-β-环糊精中的一种或多种,更优选地,所述环糊精用量为所述微粉的1.5%-2.0%重量份;
优选地,所述步骤3中超声破壁提取的参数为:声场频率20~40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10~1:22,提取时间1~2h;
优选地,所述步骤4中离心使用卧式螺旋离心机或蝶式离心机进行离心,更优选地,所述使用卧式螺旋离心机的参数为:转鼓转速2500~3000r/min、差转速9~11r/min,所述使用蝶式离心机的参数为:运行转速4000~6000r/min、排渣周期5-10min;
优选地,所述步骤4中冷冻浓缩的参数为:冷冻温度-6~-2℃、出料温度-5~-3℃。
2.根据权利要求1的制备方法,其中,所述中药提取物的原料药包括人参373重量份、黄芪745重量份、甘草186重量份、肉桂75重量份、生姜100重量份,优选地,所述原料药均来自道地产区。
3.根据权利要求1或2的制备方法,其中,所述步骤2中的粉碎是通过多次粉碎获得微粉,优选地,所述步骤2中的粉碎是通过二次粉碎获得微粉,更优选地,所述步骤2中的粉碎包括第一次粉碎和第二次粉碎,所述第一次粉碎的成品粒度为5~10mm,所述第二次粉碎的成品粒度为100μm以下。
4.根据权利要求1-3任一项的制备方法,所述制备方法还包括以下步骤:
对步骤5所得浓缩液添加矫味剂,优选地,所述矫味剂为甜味剂,
优选地,所述甜味剂包含低血糖生成指数的植物基糖类,
优选地,所述甜味剂包含赤藓糖醇、结晶果糖中的一种或多种,
优选地,所述甜味剂包含低血糖生成指数的植物基糖类和/或蜂蜜,
更优选地,所述甜味剂包含赤藓糖醇、结晶果糖中的一种或多种和/或蜂蜜,
更优选地,所述辅料添加量为每100ml中:低血糖生成指数的植物基糖类2~5g和/或蜂蜜0.5~2g。
5.根据权利要求1-4任一项的制备方法,所述制备方法还包括以下步骤:
将所述浓缩液进行灭菌,优选地,所述灭菌为辐照灭菌,辐照剂量为4~8kGy。
6.权利要求1-5任一项的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:
1)选取人参300~400重量份、黄芪600~800重量份、甘草100~200重量份、肉桂50~100重量份、生姜100~400重量份,混合,粉碎,得微粉;
2)将羟丙基-β-环糊精混入上述所得微粉后,采用超声提取器进行超声破壁提取,20~40kHz、声强2.55W/cm2、料液比1:10~1:22,提取时间1~2h,得提取液,羟丙基-β-环糊精的量为微粉的1.5%-2.0%;
3)将上述提取液使用卧式螺旋离心机进行离心,转鼓转速2500~3000r/min、差转速9~11r/min,得滤液;
4)将上述滤液进行冷冻浓缩,设置冷冻温度-6~-2℃、出料温度-5~-3℃,得浓缩液,制成所述中药提取物;
优选地,所述制备方法还包括以下步骤:
将上述浓缩液添加矫味剂进行矫味,每100ml中:赤藓糖醇或结晶果糖2~5g、蜂蜜0.5~2g;
优选地,所述制备方法还包括以下步骤:
对上述浓缩液进行辐照灭菌,辐照剂量为4~8kGy。
7.根据权利要求1-6任一项的制备方法制得的中药提取物。
8.一种药品或食品组合物,其包括权利要求7的中药提取物以及药学或食品学上可接受的载体,优选地,所述药物或食品组合物为液体制剂或固体制剂,优选丸剂、散剂、膏剂、丹剂、口服液、合剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或液体饮料中的一种或多种。
9.权利要求1-6任一项的制备方法,或权利要求7的中药提取物,或权利要求8的组合物,在制备补元气、抗疲劳、或防治虚症的药品或食品中的应用。
10.根据权利要求9的应用,所述药品或食品能够提高血清组织中SOD的活性,和/或减少血清中MDA的生成。
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