CN112903882A - 一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 - Google Patents
一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112903882A CN112903882A CN202110140726.5A CN202110140726A CN112903882A CN 112903882 A CN112903882 A CN 112903882A CN 202110140726 A CN202110140726 A CN 202110140726A CN 112903882 A CN112903882 A CN 112903882A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- peak
- mobile phase
- chromatographic
- peaks
- hplc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000010276 construction Methods 0.000 title abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims abstract description 10
- ZZAJQOPSWWVMBI-UHFFFAOYSA-N Calycosin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZZAJQOPSWWVMBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 24
- QUQPHWDTPGMPEX-UHFFFAOYSA-N Hesperidine Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1OC2=CC(OC3C(C(O)C(O)C(COC4C(C(O)C(O)C(C)O4)O)O3)O)=CC(O)=C2C(=O)C1 QUQPHWDTPGMPEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- GSZUGBAEBARHAW-UHFFFAOYSA-N sophoraflavone B Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(C=2OC3=CC(O)=CC=C3C(=O)C=2)C=C1 GSZUGBAEBARHAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- UFNDONGOJKNAES-UHFFFAOYSA-N Ginsenoside Rb1 Natural products CC(=CCCC(C)(OC1OC(COC2OC(CO)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O)C3CCC4(C)C3C(O)CC5C6(C)CCC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C(C)(C)C6CC(O)C45C)C UFNDONGOJKNAES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- GZYPWOGIYAIIPV-JBDTYSNRSA-N ginsenoside Rb1 Chemical compound C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]1O)O)O[C@@](C)(CCC=C(C)C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@]([C@@]3(CC[C@H]4C(C)(C)[C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)CC[C@]4(C)[C@H]3C[C@H]2O)C)(C)CC1)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GZYPWOGIYAIIPV-JBDTYSNRSA-N 0.000 claims description 15
- TXEWRVNOAJOINC-UHFFFAOYSA-N ginsenoside Rb2 Natural products CC(=CCCC(OC1OC(COC2OCC(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O)C3CCC4(C)C3C(O)CC5C6(C)CCC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C(C)(C)C6CCC45C)C TXEWRVNOAJOINC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 15
- -1 calycosin glucoside Chemical class 0.000 claims description 14
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 claims description 14
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 claims description 14
- KSDSYIXRWHRPMN-UHFFFAOYSA-N 4'-O-beta-D-Galactopyranoside-6''-p-Coumaroylprunin-4',5,7-Trihydroxyflavanone Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)C=C1 KSDSYIXRWHRPMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- DEMKZLAVQYISIA-ONJCETCRSA-N Liquiritin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)c1ccc([C@@H]2Oc3c(C(=O)C2)ccc(O)c3)cc1 DEMKZLAVQYISIA-ONJCETCRSA-N 0.000 claims description 13
- DEMKZLAVQYISIA-UHFFFAOYSA-N Liquirtin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(C2OC3=CC(O)=CC=C3C(=O)C2)C=C1 DEMKZLAVQYISIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- DEMKZLAVQYISIA-ZRWXNEIDSA-N liquiritin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C([C@H]2OC3=CC(O)=CC=C3C(=O)C2)C=C1 DEMKZLAVQYISIA-ZRWXNEIDSA-N 0.000 claims description 13
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 12
- 244000303040 Glycyrrhiza glabra Species 0.000 claims description 11
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000006886 Zingiber officinale Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000008397 ginger Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 11
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 claims description 10
- YNWXJFQOCHMPCK-UHFFFAOYSA-N Isoliquiritin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC(C=C1)=CC=C1C=CC(=O)C1=CC=C(O)C=C1O YNWXJFQOCHMPCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 claims description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 claims description 10
- HKQYGTCOTHHOMP-UHFFFAOYSA-N formononetin Chemical group C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O HKQYGTCOTHHOMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 claims description 10
- YNWXJFQOCHMPCK-LXGDFETPSA-N isoliquiritin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C=C1)=CC=C1\C=C\C(=O)C1=CC=C(O)C=C1O YNWXJFQOCHMPCK-LXGDFETPSA-N 0.000 claims description 10
- YURJSTAIMNSZAE-UHFFFAOYSA-N UNPD89172 Natural products C1CC(C2(CC(C3C(C)(C)C(O)CCC3(C)C2CC2O)OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C)(C)C2C1C(C)(CCC=C(C)C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O YURJSTAIMNSZAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- PWAOOJDMFUQOKB-WCZZMFLVSA-N ginsenoside Re Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2[C@H]3C(C)(C)[C@@H](O)CC[C@]3(C)[C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@H]([C@H]4[C@H](O)C3)[C@](C)(CCC=C(C)C)O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C)(C)C2)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O PWAOOJDMFUQOKB-WCZZMFLVSA-N 0.000 claims description 9
- YURJSTAIMNSZAE-HHNZYBFYSA-N ginsenoside Rg1 Chemical compound O([C@@](C)(CCC=C(C)C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@]([C@@]3(C[C@@H]([C@H]4C(C)(C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3C[C@H]2O)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)C)(C)CC1)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YURJSTAIMNSZAE-HHNZYBFYSA-N 0.000 claims description 9
- CBEHEBUBNAGGKC-UHFFFAOYSA-N ginsenoside Rg1 Natural products CC(=CCCC(C)(OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2CCC3(C)C2C(O)CC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CC(OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C34C)C CBEHEBUBNAGGKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- AOGZLQUEBLOQCI-UHFFFAOYSA-N ginsenoside-Re Natural products CC1OC(OCC2OC(OC3CC4(C)C(CC(O)C5C(CCC45C)C(C)(CCC=C(C)C)OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C7(C)CCC(O)C(C)(C)C37)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O AOGZLQUEBLOQCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- NTDLXWMIWOECHG-YRCFQSNFSA-N apiin Chemical compound O([C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@](O)(CO)CO1)O)O)CO)C(C=1)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C=C1 NTDLXWMIWOECHG-YRCFQSNFSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 claims description 7
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 210000004233 talus Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000009636 Huang Qi Substances 0.000 claims description 6
- 235000011477 liquorice Nutrition 0.000 claims description 6
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 claims description 5
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 claims description 5
- FURUXTVZLHCCNA-UHFFFAOYSA-N Liquiritigenin Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1OC2=CC(O)=CC=C2C(=O)C1 FURUXTVZLHCCNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 claims description 5
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- RIKPNWPEMPODJD-UHFFFAOYSA-N formononetin Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC=CC=C2C1=O RIKPNWPEMPODJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- NLDDIKRKFXEWBK-AWEZNQCLSA-N gingerol Chemical group CCCCC[C@H](O)CC(=O)CCC1=CC=C(O)C(OC)=C1 NLDDIKRKFXEWBK-AWEZNQCLSA-N 0.000 claims description 5
- JZLXEKNVCWMYHI-UHFFFAOYSA-N gingerol Natural products CCCCC(O)CC(=O)CCC1=CC=C(O)C(OC)=C1 JZLXEKNVCWMYHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- JBQATDIMBVLPRB-UHFFFAOYSA-N isoliquiritigenin Natural products OC1=CC(O)=CC=C1C1OC2=CC(O)=CC=C2C(=O)C1 JBQATDIMBVLPRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FURUXTVZLHCCNA-AWEZNQCLSA-N liquiritigenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC=C2C(=O)C1 FURUXTVZLHCCNA-AWEZNQCLSA-N 0.000 claims description 5
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940010454 licorice Drugs 0.000 claims description 4
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical group [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 244000131316 Panax pseudoginseng Species 0.000 claims 1
- 244000273928 Zingiber officinale Species 0.000 claims 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 abstract description 6
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 6
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 abstract description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 241000234314 Zingiber Species 0.000 description 10
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 10
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 9
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 7
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- AVGPOAXYRRIZMM-UHFFFAOYSA-N D-Apiose Natural products OCC(O)(CO)C(O)C=O AVGPOAXYRRIZMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASNHGEVAWNWCRQ-LJJLCWGRSA-N D-apiofuranose Chemical compound OC[C@@]1(O)COC(O)[C@@H]1O ASNHGEVAWNWCRQ-LJJLCWGRSA-N 0.000 description 2
- ASNHGEVAWNWCRQ-UHFFFAOYSA-N D-apiofuranose Natural products OCC1(O)COC(O)C1O ASNHGEVAWNWCRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 2
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017443 Hedysarum boreale Nutrition 0.000 description 1
- 235000007858 Hedysarum occidentale Nutrition 0.000 description 1
- 208000019914 Mental Fatigue Diseases 0.000 description 1
- CWEZAWNPTYBADX-UHFFFAOYSA-N Procyanidin Natural products OC1C(OC2C(O)C(Oc3c2c(O)cc(O)c3C4C(O)C(Oc5cc(O)cc(O)c45)c6ccc(O)c(O)c6)c7ccc(O)c(O)c7)c8c(O)cc(O)cc8OC1c9ccc(O)c(O)c9 CWEZAWNPTYBADX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229940107666 astragalus root Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001947 glycyrrhiza glabra rhizome/root Substances 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002414 procyanidin Polymers 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
- G01N30/8686—Fingerprinting, e.g. without prior knowledge of the sample components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
- G01N30/8679—Target compound analysis, i.e. whereby a limited number of peaks is analysed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
- G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Library & Information Science (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法，构建方法包括以下步骤：(1)样品溶液的制备；(2)参照物溶液的制备；(3)HPLC特征图谱的建立。本发明建立了一种能鉴别出保元汤处方中所有药味的特征图谱质量评价方法，具有操作简单、稳定、灵敏、精密度高等优点，采用同一种方法能鉴别出处方中所有药味以用于质量控制。
Description
技术领域
本发明属于中药和功能食品原料及其制品的指纹图谱技术领域，具体涉及一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法。
背景技术
保元汤出自明孙志宏编纂的《简明医彀》(1629年)，是古代经典名方，其组方由人参、黄芪、甘草、肉桂组成，煎煮时加生姜一片。保元汤能益气温阳，传统用于治疗元气虚弱，精神倦怠，肌肉柔慢，饮食少进，面色
白，睡卧宁静，痘顶不起等症。现代临床广泛用于冠心病、慢性肾衰、再生障碍性贫血、乙型肝炎、白细胞减少等病证的治疗。
中药复方制剂均为多组分复杂体系，质量控制难度较大。特征图谱是一种综合的可量化的质量控制手段，能较全面地反映复方制剂中所含成分类型及含量，进而对药品质量进行整体描述和评价，对于阐明药效物质基础，促进中药现代化具有重要意义。
保元汤由五味中药组成，其主要化学成分类型为皂苷类和黄酮类，还有少部分的原花青素类、木质素类以及挥发油等。目前为止，关于保元汤的质量控制方法已有少量文献进行报道；但用同一种方法能鉴别出处方中所有药味的质量控制方法还未有文献报道。
现有的HPLC特征图谱的检测方法公开了保元汤的特征图谱，共有11个特征峰，并对其中3个已知峰进行了指认，分别为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1，并归属11个特征峰分别来自人参、黄芪、甘草。但一方面其并未指认肉桂、生姜的成分；另一方面保元汤中有5味药材，只检测出11个特征峰所给的化学信息检测结果单薄。
现有技术公开了保元汤的指纹图谱，并通过DAD检测出41个共有峰，ELSD检测到19个共有峰，归属了12个已知峰。但其检测出的色谱峰中未检测出生姜的色谱峰，检测结果不完善。其次，其供试品溶液制备方法采用向保元汤制剂的水溶液中加入无水乙醇提取，旋蒸后，甲醇稀释过滤得到，仅对液体或固体制剂的水溶液进行提取，提取成分与传统的经典名方不完全符合，可能不能代表经典名方保元汤中真实的化学成分组成。
发明内容
本发明的目的在于：针对上述现有技术中尚无简单有效稳定的方法检测保元汤成分及鉴别其质量的问题，提供一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法，检测结果完善，从整体特征面貌上把握保元汤制剂质量情况。
本发明采用的技术方案如下：
一种保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：
(1)样品溶液的制备
取保元汤制剂研细，加入80vt％的甲醇水溶液超声溶解，过滤，取滤液；
(2)参照物溶液的制备
取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸铵作为对照品，分别加入80vt％甲醇制成溶液；
(3)HPLC特征图谱的建立
分别吸取参照物溶液与待测样品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，采集110分钟内的特征图谱；
色谱条件为：色谱柱为十八烷基键合硅胶色谱柱；紫外检测器，检测波长为203nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.09-0.11％磷酸水溶液；梯度洗脱；流速为0.8-1.0mL/min；柱温25-35℃；
呈现特征峰27个，1-13号峰以2号峰为参照峰，15-27号峰以14号峰为参照峰，各色谱峰的相对保留时间为：1号峰0.63，2号峰1.00，3号峰1.05，4号峰1.10，5号峰1.98，6号峰2.12，7号峰2.21，8号峰2.23，9号峰2.34，10号峰2.43，11号峰2.61，12号峰2.67，13号峰2.78，14号峰1.00，15号峰1.03，16号峰1.10，17号峰1.15，18号峰1.21，19号峰1.25，20号峰1.42，21号峰1.52，22号峰1.54，23号峰1.56，24号峰1.59，25号峰1.64，26号峰1.66，27号峰1.67；
其中，7号峰、8号峰、14号峰和15号峰为人参的色谱峰；7号峰为人参皂苷Rg1，8号峰为人参皂苷Re，14号峰为人参皂苷Rb1；
2号峰为黄芪及甘草的共有峰；2号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷；
10号峰、11号峰、12号峰、16号峰、17号峰和18号峰为黄芪的色谱峰；11号峰为毛蕊异黄酮，16号峰为芒柄花素；
1号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰、9号峰、19号峰、21号峰、22号峰、23号峰、24号峰、25号峰和27号峰为甘草的色谱峰；3号峰为芹糖甘草苷，4号峰为甘草苷，5号峰为芹糖异甘草苷，6号峰为异甘草苷，9号峰为甘草素，19号峰为甘草酸铵；
20号峰和26号峰为生姜的色谱峰；20号峰为6-姜辣素；
13号峰为肉桂的色谱峰；13号峰为肉桂酸。
进一步地，样品溶液浓度为0.05g/mL。
进一步地，所述保元汤制剂研磨后过80-100目筛。
进一步地，参照物溶液浓度为0.2mg/mL。
进一步地，梯度洗脱具体为：0-1min，10％流动相A，90％流动相B；1-3min，10％→15％流动相A,90％→85％流动相B；3-10min，15％→19％流动相A，85％→81％流动相B；10-15min，19％流动相A,81％流动相B；15-33min，19％→25％流动相A，81％→75％流动相B；33-45min，25％流动相A,75％流动相B；45-50min，25％→35％流动相A，75％→65％流动相B；50-75min，35％流动相A,65％流动相B；75-76min，35％→40％流动相A，65％→60％流动相B；76-85min，40％→50％流动相A，60％→50％流动相B；85-95min，50％→90％流动相A，50％→10％流动相B；95-99min，90％流动相A，10％流动相B；99-100min，90％→10％流动相A，10％→90％流动相B；100-110min，10％流动相A，90％流动相B。
进一步地，色谱条件为：色谱柱为NanoChrom Chrom Core 120 C18色谱柱，柱长250mm，内径为4.6mm，粒径5μm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸水溶液；流速为0.9ml/min；柱温为30℃。
进一步地，采用以下方式对27个特征峰进行药味归属：通过分别对缺少一味药材的保元汤制剂进行色谱采集，对比色谱峰差异。
进一步地，分别取缺一味药材的保元汤制剂，分别为缺人参、缺炙黄芪、缺炙甘草、缺肉桂、缺生姜，作为样品溶液，采集色谱图，根据缺少的色谱峰，对27个特征峰进行药味归属。
上述的方法构建得到的保元汤制剂的HPLC特征图谱。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1、本发明建立了保元汤制剂的HPLC特征图谱，通过本发明方法，完整地从传统经典名方制剂中进行提取，然后在本发明限定的条件下进行检测，相对于现有技术的方法，在本发明的色谱条件和梯度洗脱条件下，本发明能够检测和指认出更多的特征峰；具体地，本发明基于对样品溶液和参照物溶液精确称取并制备，精密注入仪器，选择最佳色谱条件进行检测，并更进一步对梯度洗脱条件进行具体限定等技术手段，使得本发明最终呈现的色谱峰从现有技术中的11个，增加到了27个，完整准确地反映出保元汤的成分；
2、本发明的检测方法共检测出27个色谱峰，能指认出其中14个色谱峰；其中，7号峰、8号峰、14号峰和15号峰为人参的色谱峰，2号峰为黄芪及甘草的共有峰，10号峰、11号峰、12号峰、16号峰、17号峰和18号峰为黄芪的色谱峰，1号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰、9号峰、19号峰、21号峰、22号峰、23号峰、24号峰、25号峰和27号峰为甘草的色谱峰，20号峰和26号峰为生姜的色谱峰，13号峰为肉桂的色谱峰，因而本发明不仅能指认出相应色谱峰，更能够归属各色谱峰所属药材，检测结果包含保元汤的所有处方药味，检测方法更完善，通过检测精准定位保元汤所含药材，不仅全面、客观地反映了保元汤的质量概况，更进一步有利于从药材源头把控产品质量；
3、本发明通过对照品溶液单独定位的方式能够指认成分峰，且多批不同产地药材制得的保元汤样品特征图谱的相对保留时间基本一致，说明选择的共有峰稳定性好、特征性强，适用于保元汤药材的真伪、产地和品质鉴别，能够作为具有普适性的质量判断标准，以利于保元汤质量控制，确保保元汤相关产品的有效性、安全性、稳定性和均一性；
4、本发明方法的灵敏性好、精密度高、重复性好，且供试品溶液在较长时间内保持性状稳定，便于检测，仅使用HPLC法即可检测出处方中的所有药味的化学成分，方法简便、易操作，普适性强。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为样品色谱图；图线由上至下依次为供试品，缺生姜、缺肉桂、缺甘草、缺黄芪、缺人参的阴性样品和空白组；
图2为特征峰成分指认图；图线由上至下依次为1：供试品溶液；2:6-姜辣素；3:甘草酸铵；4:芒柄花素；5:人参皂苷Rb1；6:肉桂酸；7:毛蕊异黄酮；8:甘草素；9:人参皂苷Re；10:人参皂苷Rg1；11:异甘草苷；12:芹糖异甘草苷；13:甘草苷；14:芹糖甘草苷；15:毛蕊异黄酮葡萄糖苷；16:空白；
图3为15批保元汤特征图谱；图线由上至下依次为YP1-YP15。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明，即所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本发明实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
因此，以下对在附图中提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明的是，术语“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本发明较佳的实施例提供一种保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，具体步骤如下：
1、对照品溶液的制备
取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸铵对照品适量，精密称定，分别加80％甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，即得。
2、供试品溶液的制备
取保元汤冻干粉约0.5g，精密称定，至具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇10ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。其中，保元汤冻干粉制备方式为：取人参3.73g，炙黄芪7.46g，炙甘草1.87g，肉桂0.75g，生姜1.87g；取上5味，加水浸泡0.5小时，煎煮两次；一煎加水400mL水，煎煮65分钟；二煎加300mL水煎煮50分钟；煎液使用100目筛网趁热过滤，滤液合并并浓缩，冷冻干燥成冻干粉。
3、色谱条件
色谱柱为NanoChrom Chrom Core 120 C18色谱柱，柱长250mm，内径为4.6mm，粒径5μm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸水溶液；流速为0.9ml/min；柱温为30℃；梯度洗脱，0-1min，10％流动相A,90％流动相B；1-3min，10％→15％流动相A,90％→85％流动相B；3-10min，15％→19％流动相A,85％→81％流动相B；10-15min，19％流动相A,81％流动相B；15-33min，19％→25％流动相A,81％→75％流动相B；33-45min，25％流动相A,75％流动相B；45-50min，25％→35％流动相A,75％→65％流动相B；50-75min，35％流动相A,65％流动相B；75-76min，35％→40％流动相A,65％→60％流动相B；76-85min，40％→50％流动相A,60％→50％流动相B；85-95min，50％→90％流动相A,50％→10％流动相B；95-99min，90％流动相A,10％流动相B；99-100min，90％→10％流动相A,10％→90％流动相B；100-110min，10％流动相A,90％流动相B。
4、测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，记录110分钟色谱图，即得。
供试品色谱图中应呈现27个特征峰，各色谱峰的保留时间为：1号峰10.105min，2号峰16.116min，3号峰16.954min，4号峰17.748min，5号峰31.943min，6号峰34.194min，7号峰35.554min，8号峰36.018min，9号峰37.765min，10号峰39.237min，11号峰42.056min，12号峰43.004min，13号峰44.758min，14号峰57.163min，15号峰58.783min，16号峰63.116min，17号峰65.657min，18号峰69.129min，19号峰71.540min，20号峰81.018min，21号峰86.728min，22号峰88.018min，23号峰89.395min，24号峰90.720min，25号峰93.900min，26号峰94.630min，27号峰95.260min。
1-13号峰以2号峰为参照峰，15-27号峰以14号峰为参照峰，分别计算各色谱峰的相对保留时间为：1号峰0.63，2号峰1.00，3号峰1.05，4号峰1.10，5号峰1.98，6号峰2.12，7号峰2.21，8号峰2.23，9号峰2.34，10号峰2.43，11号峰2.61，12号峰2.67，13号峰2.78，14号峰1.00，15号峰1.03，16号峰1.10，17号峰1.15，18号峰1.21，19号峰1.25，20号峰1.42，21号峰1.52，22号峰1.54，23号峰1.56，24号峰1.59，25号峰1.64，26号峰1.66，27号峰1.67。
其中，2号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，3号峰为芹糖甘草苷，4号峰为甘草苷，5号峰为芹糖异甘草苷，6号峰为异甘草苷，7号峰为人参皂苷Rg1，8号峰为人参皂苷Re，9号峰为甘草素，11号峰为毛蕊异黄酮，13号峰为肉桂酸，14号峰为人参皂苷Rb1，16号峰为芒柄花素，19号峰为甘草酸铵，20号峰为6-姜辣素。
实施例2
在实施例1的基础上，分别取缺一味药材的样品作为对照，依次编号为NS1(缺人参)、NS2(缺炙黄芪)、NS3(缺炙甘草)、NS4(缺肉桂)、NS5(缺生姜)。按照实施例1的方法采集色谱图。根据各对照样品缺少的色谱峰，对27个特征峰进行药味归属，结果如图1和下表1。
表1特征峰成分归属表
结果表明，供试品溶液中峰7、8、14、15为人参色谱峰，峰2为黄芪及甘草共有峰，峰10、11、12、16、17、18为黄芪色谱峰，峰1、3、4、5、6、9、19、21、22、23、24、25、27为甘草色谱峰，峰20、26为生姜色谱峰，峰13为肉桂色谱峰。
实施例3
在实施例1的基础上，对照品定位溶液：分别精密称取6-姜辣素、甘草酸铵、芒柄花素、人参皂苷Rb1、肉桂酸、毛蕊异黄酮、甘草素、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、异甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草苷、芹糖甘草苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品适量，用80％甲醇溶液溶解制成各对照品单独定位溶液。
供试品溶液：称取保元汤冻干粉，按实施例1制备的供试品溶液。
空白溶液：80％甲醇水溶液。
精密吸取上述空白溶液、对照品定位溶液、供试品溶液注入液相色谱仪，按拟定色谱条件采集色谱图。用对照品定位溶液的保留时间指认保元汤冻干粉中各特征峰的成分。结果见图2和下表2。
表2特征峰确认结果表
结果表明，保元汤冻干粉中能检测出27个特征峰，通过对照品溶液单独定位的方式能指认其中14个成分峰。
实施例4
取不同药材产地的药物配比制得15批(YP1～YP15)保元汤冻干粉，分别制备供试品溶液，依次注入高效液相色谱仪，采集色谱图。并将15批保元汤冻干粉的液相色谱图进行比对，结果见图3。选择图谱中效应较高、分离度好的且比较特征的27个共有峰为特征图谱，在特征图谱中，分别以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为参照峰1(S1)、人参皂苷Rb1为参照峰2(S2)，计算其他色谱峰的相对保留时间，结果见表3。结果表明，15批保元汤样品特征图谱的相对保留时间基本一致，说明选择的共有峰稳定性好、特征性强。
表3 15批保元汤冻干粉特征峰的相对保留时间统计表
实验例
1、精密度
取实施例1同一份保元汤冻干粉，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，连续进样6针，分别以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷Rb1为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间，并计算RSD(％)值。实验结果见表4。
表4精密度试验结果表
结果表明，以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷Rb1为参照峰，连续6针的特征峰的相对保留时间的RSD值均小于2％，说明仪器精密度良好。
2、稳定性
取实施例1同一份保元汤冻干粉，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，分别于制样后0、2、4、8、12、24、48、72小时进样测定，统计27个特征峰的峰面积，并计算RSD值，结果见表5。
表5稳定性试验结果表
结果表明，供试品溶液在室温下放置72小时，各特征峰的峰面积RSD小于2％，表明供试品溶液在室温下72小时内稳定。
3、重复性
取实施例1同一批保元汤冻干粉，精密称取6份，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，依次进样，分别以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷Rb1为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间，并计算RSD(％)值。实验结果见表6。
表6重复性测定结果表
结果表明，以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷Rb1为参照峰，平行制备6份供试品溶液，各特征峰的相对保留时间的RSD值均小于2％，说明该方法重复性好。
4、耐用性
取实施例1同一份保元汤冻干粉，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按表7微调拟定的色谱条件后依次进样考察，分别以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷Rb1为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间，并计算RSD(％)值。实验结果见表8。
表7耐用性试验各参数变动程度表
表8耐用性试验结果表
结果表明，微调色谱条件后，供试品溶液各特征峰相对保留时间的RSD值小于5％，说明该方法耐用性好。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)样品溶液的制备
取保元汤制剂研细，溶解于甲醇水溶液，过滤得滤液；
(2)参照物溶液的制备
取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸铵作为对照品，分别溶于甲醇水溶液制成溶液；
(3)HPLC特征图谱的建立
分别吸取参照物溶液与待测样品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，采集110分钟内的特征图谱；
色谱条件为：色谱柱为十八烷基键合硅胶色谱柱；紫外检测器，检测波长为203nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.09-0.11％磷酸水溶液；梯度洗脱；流速为0.8-1.0mL/min；柱温25-35℃；
呈现特征峰27个，1-13号峰以2号峰为参照峰，15-27号峰以14号峰为参照峰，各色谱峰的相对保留时间为：1号峰0.63，2号峰1.00，3号峰1.05，4号峰1.10，5号峰1.98，6号峰2.12，7号峰2.21，8号峰2.23，9号峰2.34，10号峰2.43，11号峰2.61，12号峰2.67，13号峰2.78，14号峰1.00，15号峰1.03，16号峰1.10，17号峰1.15，18号峰1.21，19号峰1.25，20号峰1.42，21号峰1.52，22号峰1.54，23号峰1.56，24号峰1.59，25号峰1.64，26号峰1.66，27号峰1.67；
其中，7号峰、8号峰、14号峰和15号峰为人参的色谱峰；7号峰为人参皂苷Rg1，8号峰为人参皂苷Re，14号峰为人参皂苷Rb1；
2号峰为黄芪及甘草的共有峰；2号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷；
10号峰、11号峰、12号峰、16号峰、17号峰和18号峰为黄芪的色谱峰；11号峰为毛蕊异黄酮，16号峰为芒柄花素；
1号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰、9号峰、19号峰、21号峰、22号峰、23号峰、24号峰、25号峰和27号峰为甘草的色谱峰；3号峰为芹糖甘草苷，4号峰为甘草苷，5号峰为芹糖异甘草苷，6号峰为异甘草苷，9号峰为甘草素，19号峰为甘草酸铵；
20号峰和26号峰为生姜的色谱峰；20号峰为6-姜辣素；
13号峰为肉桂的色谱峰；13号峰为肉桂酸。
2.根据权利要求1所述的保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述样品溶液浓度为0.05g/mL。
3.根据权利要求1所述的保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述保元汤制剂研磨后过80-100目筛。
4.根据权利要求1所述的保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述参照物溶液浓度为0.2mg/mL。
5.根据权利要求1所述的保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：0-1min，10％流动相A，90％流动相B；1-3min，10％→15％流动相A,90％→85％流动相B；3-10min，15％→19％流动相A，85％→81％流动相B；10-15min，19％流动相A,81％流动相B；15-33min，19％→25％流动相A，81％→75％流动相B；33-45min，25％流动相A,75％流动相B；45-50min，25％→35％流动相A，75％→65％流动相B；50-75min，35％流动相A,65％流动相B；75-76min，35％→40％流动相A，65％→60％流动相B；76-85min，40％→50％流动相A，60％→50％流动相B；85-95min，50％→90％流动相A，50％→10％流动相B；95-99min，90％流动相A，10％流动相B；99-100min，90％→10％流动相A，10％→90％流动相B；100-110min，10％流动相A，90％流动相B。
6.根据权利要求1所述的保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述色谱条件为：色谱柱为NanoChrom Chrom Core 120C18色谱柱，柱长250mm，内径为4.6mm，粒径5μm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸水溶液；流速为0.9mL/min；柱温为30℃。
7.根据权利要求1所述的保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，采用以下方式对27个特征峰进行药味归属：通过分别对缺少一味药材的保元汤制剂进行色谱采集，对比色谱峰差异。
8.权利要求1-7中任一项所述的方法构建得到的保元汤制剂的HPLC特征图谱。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110140726.5A CN112903882B (zh) | 2021-02-02 | 2021-02-02 | 一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110140726.5A CN112903882B (zh) | 2021-02-02 | 2021-02-02 | 一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112903882A true CN112903882A (zh) | 2021-06-04 |
| CN112903882B CN112903882B (zh) | 2024-07-09 |
Family
ID=76121205
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110140726.5A Active CN112903882B (zh) | 2021-02-02 | 2021-02-02 | 一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112903882B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113899835A (zh) * | 2021-12-13 | 2022-01-07 | 江西中医药大学 | 一种同时检测保元汤制剂中多种指标性成分的方法 |
| CN114184719A (zh) * | 2021-12-13 | 2022-03-15 | 江西和盈药业有限公司 | 一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法及其标准指纹图谱 |
| CN115166066A (zh) * | 2022-05-27 | 2022-10-11 | 陕西中医药大学 | 芪珠升白口服液的质量评价方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106501434A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-03-15 | 天津同仁堂集团股份有限公司 | 一种双和汤标准汤的hplc指纹图谱测定方法 |
| CN110455965A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-15 | 劲牌生物医药有限公司 | 药物组合物的制备方法及其hplc指纹图谱建立方法 |
| CN110907580A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-03-24 | 东阿阿胶股份有限公司 | 一种保元汤的hplc特征图谱的检测方法 |
| CN111443142A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-07-24 | 河北神威药业有限公司 | 一种保元汤制剂中多指标成分的同时检测方法 |
| CN111487343A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-08-04 | 河北神威药业有限公司 | 一种保元汤制剂指纹图谱的建立方法 |
| CN111905084A (zh) * | 2020-08-07 | 2020-11-10 | 浙江金城阜通制药有限公司 | 一种中药提取物及其制备工艺及其应用 |
-
2021
- 2021-02-02 CN CN202110140726.5A patent/CN112903882B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106501434A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-03-15 | 天津同仁堂集团股份有限公司 | 一种双和汤标准汤的hplc指纹图谱测定方法 |
| CN110455965A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-15 | 劲牌生物医药有限公司 | 药物组合物的制备方法及其hplc指纹图谱建立方法 |
| CN110907580A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-03-24 | 东阿阿胶股份有限公司 | 一种保元汤的hplc特征图谱的检测方法 |
| CN111443142A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-07-24 | 河北神威药业有限公司 | 一种保元汤制剂中多指标成分的同时检测方法 |
| CN111487343A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-08-04 | 河北神威药业有限公司 | 一种保元汤制剂指纹图谱的建立方法 |
| CN111905084A (zh) * | 2020-08-07 | 2020-11-10 | 浙江金城阜通制药有限公司 | 一种中药提取物及其制备工艺及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 杨净尧: "经典名方保元汤的物质基准研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库(医药卫生科技辑)》, no. 12, 31 December 2020 (2020-12-31), pages 057 - 14 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113899835A (zh) * | 2021-12-13 | 2022-01-07 | 江西中医药大学 | 一种同时检测保元汤制剂中多种指标性成分的方法 |
| CN114184719A (zh) * | 2021-12-13 | 2022-03-15 | 江西和盈药业有限公司 | 一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法及其标准指纹图谱 |
| CN114184719B (zh) * | 2021-12-13 | 2023-05-09 | 江西和盈药业有限公司 | 一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法及其标准指纹图谱 |
| CN115166066A (zh) * | 2022-05-27 | 2022-10-11 | 陕西中医药大学 | 芪珠升白口服液的质量评价方法 |
| CN115166066B (zh) * | 2022-05-27 | 2023-11-03 | 陕西中医药大学 | 芪珠升白口服液的质量评价方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112903882B (zh) | 2024-07-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112903882A (zh) | 一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法 | |
| CN105806975B (zh) | 一种银翘散uplc指纹图谱的建立方法 | |
| CN110455965A (zh) | 药物组合物的制备方法及其hplc指纹图谱建立方法 | |
| CN111487343B (zh) | 一种保元汤制剂指纹图谱的建立方法 | |
| CN101766771A (zh) | 一种治疗妇科疾病药物的质量控制方法 | |
| CN101991661A (zh) | 含白芍、人参、丹参、青蒿、甘草、川芎和当归中至少两种的中成药的检测方法 | |
| CN106442789A (zh) | 复方血脂宁提取物指纹图谱的建立及其活性成分定量分析方法 | |
| CN106226440A (zh) | 升麻葛根汤组合物的质量控制方法 | |
| CN110672747A (zh) | 淫羊藿成分的检测方法和鉴别淫羊藿品种的方法及应用 | |
| CN105911161B (zh) | 一种消炎片hplc指纹图谱构建方法 | |
| CN113156001A (zh) | 一种包含当归的中药复方的指纹图谱构建方法及其应用 | |
| CN103285306B (zh) | 益气补肾的中药组合物的制备方法及检测方法 | |
| CN113063885B (zh) | 用于制备保元汤的组合物，保元汤制品，及其指纹图谱测定和质量检测方法 | |
| CN113281439B (zh) | 肾宝片的质量控制检测方法 | |
| CN110824068A (zh) | 一种鸢都感冒颗粒指纹图谱的建立方法及应用 | |
| CN113376273B (zh) | 一种清心莲子饮hplc特征图谱的检测方法及该特征图谱的应用 | |
| CN114280209A (zh) | 一种小儿清热止咳口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| CN112285241A (zh) | 一种沙参麦冬汤的hplc指纹图谱的构建方法 | |
| CN100372563C (zh) | 治疗支气管炎的复方制剂及其制备方法、质量控制方法 | |
| CN110487942B (zh) | 一种抗抑郁药物的指纹图谱检测方法 | |
| CN106526000B (zh) | 升麻葛根汤组合物指纹图谱的建立方法及指纹图谱 | |
| CN108226325A (zh) | 葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法 | |
| CN101411836A (zh) | 一种治疗感冒后咳嗽的中药制剂质量标准及其检验方法 | |
| CN107894466B (zh) | 一种金桑芪抗毒制剂hplc指纹图谱的测定方法及金桑芪抗毒制剂质量控制方法 | |
| CN112763639A (zh) | 刺五加对照提取物的制备工艺及其质量控制方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20240605 Address after: 611135, 6th Floor, Building 10, No. 733, Section 2, Furong Avenue, Chengdu Cross Strait Science and Technology Industrial Development Park, Wenjiang District, Chengdu City, Sichuan Province Applicant after: Sichuan Puhua traditional Chinese Medicine Technology Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: No. 505, building 6, Zone D, Tianfu Software Park, No. 599, shijicheng South Road, Chengdu hi tech Zone, China (Sichuan) pilot Free Trade Zone, Chengdu, Sichuan 610041 Applicant before: CHENGDU BRIGHT BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd. Country or region before: China |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| GR01 | Patent grant |