CN110818768B - 一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法及新原料 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法及新原料；该方法以含有野鸦椿酸的植物体为原料，经粉碎‑乙酸乙酯溶液提取‑浓缩提取液至浸膏‑硅胶柱色谱洗脱‑洗脱液经PRP512A大孔吸附树脂柱色谱分离‑浓缩洗脱液并重结晶得到野鸦椿酸单体化合物，该方法无需多次硅胶、凝胶柱色谱分离，工艺简单、得率高、成本低；其中圆齿野鸦椿植物体原料来源丰富，含量高，是理想的新材料。
Description
技术领域
本发明专利涉及一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法，及其提取野鸦椿酸的新原料。
背景技术
野鸦椿酸，又名蔷薇酸，CAS号为53155-25-2，英文名euscaphic acid，白色粉末状结晶或针晶，分子式为C30H48O5，分子量488；该化合物为乌苏烷型三萜类化合物，溶于二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂。文献报道，野鸦椿酸具有显著的抗HIV、抗炎、抗肿瘤活性，市场开发价值巨大。
该成分最早从省沽油科野鸦椿Euscaphis japonica的果皮中分离得到。文献研究表明，野鸦椿酸存在于省沽油科、蔷薇科、山茶科等植物中，已从野鸦椿、悬钩子覆盆子、地榆、枇杷叶等植物中分离得到，工艺复杂，形式五花八门，仅限于某种植物种野鸦椿酸的制备；在众多的工艺中，以从畲族药搁公扭，即华东覆盆子Rubus chingii Hu的干燥根及根茎中获得的野鸦椿酸为最高，得率约为1%，但需经过提取-萃取-反复多次硅胶、凝胶柱色谱分离获得，分离方法较为繁琐，成分在制备过程中损失量大，工艺中使用的柱色谱填料葡聚糖凝胶价格昂贵，制备工艺成本高；该工艺在其他植物制备野鸦椿酸，所获得的野鸦椿酸量小，纯度低。此外，该工艺使用的植物原料华东覆盆子虽来源较为丰富，但限于根及根茎，其在该植物体中的生物量低，可开发性小。
圆齿野鸦椿Euscaphis konishii Hayata为省沽油科野鸦椿属植物，又名福建野鸦椿，是我国特有的药用观赏树种。近年来，福建、江西等周边省的种植面积不断扩大，仅福建三明清流、泰宁，南平邵武、建阳，泉州德化等就超过5000亩，植物资源丰富。课题组一直致力于圆齿野鸦椿的资源开发与利用，前期从该植物分离得到大量的野鸦椿酸。经过制备工艺的进一步优化，课题组探索出了得率与原工艺率高，操作更为简单、成本更低的制备方法，该方法无需凝胶色谱，硅胶色谱多次分离，且该工艺运用到其他植物体制备野鸦椿酸上，同样适用。
发明内容
本发明旨在提供一种从植物体中提取野鸦椿酸的新方法，制备工艺仅需乙酸乙酯提取-硅胶柱色谱洗脱-PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱分离即可获得高纯度的野鸦椿酸单体。该制备方法简单，易操作，适合于大规模生产。
本发明所提供的技术方法如下：
从植物体中提取野鸦椿酸的方法，以富含野鸦椿酸的植物干燥的枝条为原料，经粉碎-乙酸乙酯溶液提取-浓缩提取液至浸膏-硅胶柱色谱洗脱-洗脱液浓缩至浸膏-PRP-512A大孔吸附树脂色谱洗脱-乙醇重结晶后得到野鸦椿酸单体化合物，具体步骤参数如下：
取圆齿野鸦椿枝条，经干燥后粉碎成粗粉，过0.178 mm筛，备用；
乙酸乙酯溶液提取：取圆齿野鸦椿粉末1000 g，加乙酸乙酯溶液10000 mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000 mL 乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；
浓缩提取液至浸膏：合并两次乙酸乙酯提取液，减压浓缩至干得提取物；
硅胶柱色谱洗脱：考虑到分离效果、有机溶剂毒性及生产成本，首选二氯甲烷-乙醇***；洗脱溶剂比例为50:1，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用二氯甲烷：乙醇20:1，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，浓缩得高浓度野鸦椿酸浸膏。
PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱：高浓度野鸦椿酸浸膏与等质量的PRP-512A大孔吸附树脂混合拌样；洗脱溶剂***为乙醇-水；洗脱溶剂比例为75:25，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用洗脱溶剂比例为95:5，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，得大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液。
大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液浓缩和重结晶：大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液减压浓缩至200-300mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得白色粉末即为野鸦椿酸。
圆齿野鸦椿枝条经上述工艺制备得率范围为0.98%-1.15%，与从华东覆盆子的干燥根及根茎中获得野鸦椿酸的工艺相比，本专利的最终得率提高了13%。
同时由于圆齿野鸦椿已有大面积的人工林，因此圆齿野鸦椿枝条是优选的提取野鸦椿酸的新材料。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体物料比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权力要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
取圆齿野鸦椿枝条粉末1000 g，加乙酸乙酯溶液10000 mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000 mL乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；合并两次提取液，减压浓缩至干得提取物35 g；提取物与35 g 60-100目硅胶拌样，350 g 200-300目硅胶干法装柱，二氯甲烷-乙醇（50:1）4000 mL洗脱，除去杂质，二氯甲烷-乙醇（20:1）5000 mL洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，得浸膏18.3 g。浸膏用乙酸乙酯溶解，与18.3gPRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用75%乙醇溶液洗脱2000mL除去杂质，再用2500 mL 95%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至200 mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得野鸦椿酸白色粉末1.15 g，产率为1.15%，纯度95.8%。
实施例2
取野鸦椿果皮粉末1000 g，加乙酸乙酯溶液10000 mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000 mL乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；合并两次提取液，减压浓缩至干得提取物39.3 g；提取物与39.3g 60-100目硅胶拌样，393 g 200-300目硅胶干法装柱，二氯甲烷-乙醇（50:1）4500 mL洗脱，除去杂质，二氯甲烷-乙醇（20:1）6000 mL洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，得浸膏17.6 g。浸膏用乙酸乙酯溶解，与17.6gPRP-512A大孔吸附树脂拌样，通过PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱，先用75%乙醇溶液洗脱2000mL除去杂质，再用2500 mL 95%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至200 mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得野鸦椿酸白色粉末0.91g，产率为0.91%，纯度92.5%。
实施例3
取地榆植株干燥，采用实施例1或2的工艺提取野鸦椿酸。
实施例4
取枇杷叶干燥，采用实施例1或2的工艺提取野鸦椿酸。
实施例5
取华东覆盆子的干燥根，采用实施例1或2的工艺提取野鸦椿酸，与传统工艺获得野鸦椿酸相比，本专利的最终得率提高了13%。
Claims (1)
1.一种从植物体中提取野鸦椿酸的方法，其特征是以野鸦椿枝条为原料，经粉碎-乙酸乙酯溶液提取-浓缩提取液至浸膏-硅胶柱色谱洗脱-洗脱液经PRP512A大孔吸附树脂柱色谱分离-浓缩洗脱液并重结晶得到野鸦椿酸单体化合物，其步骤包括：
（1）野鸦椿植物体枝条经干燥后粉碎成粗粉，过0.178 mm筛，备用；
（2）乙酸乙酯溶液提取：取（1）植物体粉末1000 g，加乙酸乙酯溶液10000 mL，加热煮沸2小时，过滤得提取液；滤渣再加入10000 mL 乙酸乙酯溶液，再一次煮沸2小时，过滤，得提取液；
（3）浓缩提取液至浸膏：合并两次乙酸乙酯提取液，减压浓缩至干，得提取物；
（4）硅胶柱色谱洗脱：选二氯甲烷-乙醇***；洗脱溶剂比例为50:1，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用二氯甲烷：乙醇20:1，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，浓缩得野鸦椿酸浸膏；
（5）PRP-512A大孔吸附树脂柱色谱洗脱：野鸦椿酸浸膏与等质量的PRP-512A大孔吸附树脂混合拌样；洗脱溶剂***为乙醇-水；洗脱溶剂比例为75:25，洗脱3-5个柱体积，除去杂质；然后使用洗脱溶剂比例为95:5，洗脱4-6个柱体积，收集洗脱液，得大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液；
（5）大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液浓缩和重结晶：大孔吸附树脂95%乙醇洗脱液减压浓缩至200-300mL，自然冷却，放置，析出白色固体，抽滤，得白色粉末即为野鸦椿酸。
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| CN101590134A (zh) * | 2009-06-30 | 2009-12-02 | 沈阳药科大学 | 具有抗炎镇痛作用的地榆总三萜及其制备方法 |
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| CN106905304A (zh) * | 2017-03-08 | 2017-06-30 | 福建农林大学 | 一种富含isobiflorin的植物体及其提取新方法 |
-
2019
- 2019-11-03 CN CN201911062579.3A patent/CN110818768B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101590134A (zh) * | 2009-06-30 | 2009-12-02 | 沈阳药科大学 | 具有抗炎镇痛作用的地榆总三萜及其制备方法 |
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Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Cytotoxic Hexacyclic Triterpene Acids from Euscaphis japonica;Cheng, Jing-Jy等;Journal of Natural Products;第73卷(第10期);第1655-1658页 * |
| 野鸦椿属植物化学成分和药理活性研究进展;梁文贤等;中草药;第49卷(第5期);第1220-1226页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110818768A (zh) | 2020-02-21 |
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