CN108941191A - 一种石油污染土壤的微生物修复方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种石油污染土壤的微生物修复方法，它涉及石油污染土壤的修复技术领域。其步骤为：将石油污染土壤收集到隔离修复场地进行修复，同时将收集的污染土壤晒干碾碎，以去除挥发性烃类；制备复合微生物菌剂：黄孢原毛平革菌、地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌培养完成后，按照菌株浓度的0.5‑1：0.5‑1：2‑3：1‑2的比例进行均匀混合；将复合菌剂、生物质废弃物、表面活性剂按照比例分别加入到土壤，并均匀混合，反应45‑60天取样检测修复效果。本发明操作简单，可操作性强，石油烃降解率高，且成本低，节能环保。
Description
技术领域
本发明涉及的是石油污染土壤的修复技术领域，具体涉及一种石油污染土壤的微生物修复方法。
背景技术
我国是生产和消费石油的大国，然而，在石油石化相关企业生产和运输过程中不可避免地出现石油的泄漏，最终污染周边土壤，石油污染过的土壤具有污染面积大、有机碳含量高、处理难度大和毒性高等特点，导致土壤质量的下降和土壤环境正常功能的失调。
目前，常用的石油污染土壤修复方法有：物理修复方法、化学修复方法、植物修复方法和微生物修复方法等。而微生物修复技术是传统生物处理方法的延伸，具有不造成二次污染、费用低廉、不破坏土壤结构、治理面积大、形式多样灵活等独特的优势，已经得到了国内外专家的广泛认可，基于此，设计一种石油污染土壤的微生物修复方法尤为必要。
发明内容
针对现有技术上存在的不足，本发明目的是在于提供一种石油污染土壤的微生物修复方法，操作简单，可操作性强，石油烃降解率高，且成本低，节能环保，易于推广使用。
为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种石油污染土壤的微生物修复方法，其步骤为：
(1)将石油污染土壤收集到隔离修复场地进行修复，同时将收集的污染土壤晒干碾碎，以去除挥发性烃类；
(2)制备复合微生物菌剂：黄孢原毛平革菌、地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌培养完成后，按照菌株浓度的0.5-1：0.5-1：2-3：1-2的比例进行均匀混合；
(3)将复合菌剂、生物质废弃物、表面活性剂按照比例分别加入到步骤(1)中的土壤，并均匀混合，反应45-60天取样检测修复效果。
作为优选，所述的步骤(1)中石油污染土壤的污染石油烃的质量浓度范围为2%-12%。
作为优选，所述的步骤(2)中复合微生物菌剂培养完成要求菌株浓度达到109cfu/mL，土壤接菌量高于108cfu/kg。
作为优选，所述的步骤(2)中黄孢原毛平革菌的活化培养基配方为：马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5%-2.0%，pH自然；发酵培养基配方为：马铃薯0.2%、葡萄糖2.0%、KH2PO40.3%、MgSO4·7H2O 0.15%、FeSO4·7H2O 0.1mg/L、CuSO4·5H2O 0.2mg/L、维生素B1 8mg/L。
作为优选，所述的步骤(2)中地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌的活化培养基组成：牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、NaCl 0.5%，pH为7.0-7.2；发酵培养基组成：水解糖2.5%、玉米浆2.5%、KH2PO4 0.15%、MgSO4 0.04%、尿素0.4%，pH为6.8-7.0。
作为优选，所述的步骤(3)中生物质废弃物采用秸秆、废木屑、花生壳、枯草中的一种或多种。
作为优选，所述的步骤(3)中表面活性剂采用鼠李糖脂、腐植酸、Triton X-100、Tween80中的一种，表面活性剂的添加量为0.5‰-1.5‰。
作为优选，所述的步骤(3)中控制反应温度15-30℃，保持反应体系中水分含量为20%-30%，氮：磷质量比为8-12：1，调节pH6.0-8.0，保持3-7天添加一次菌，并定期翻耕通气，控制配好的反应体系堆置成堆状。
本发明的有益效果：通过本方法对石油污染的土壤进行修复，可显著提高土壤的修复效果，石油烃降解率高，节能环保，操作简单，可操作性强，且处理成本低，应用前景广阔。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
本具体实施方式采用以下技术方案：一种石油污染土壤的微生物修复方法，其步骤为：
(1)将石油污染土壤收集到隔离修复场地进行修复，同时将收集的污染土壤晒干碾碎，以去除挥发性烃类；
(2)制备复合微生物菌剂：黄孢原毛平革菌、地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌培养完成后，按照菌株浓度的0.5-1：0.5-1：2-3：1-2的比例进行均匀混合；
(3)将复合菌剂、生物质废弃物、表面活性剂按照比例分别加入到步骤(1)中的土壤，并均匀混合，反应45-60天取样检测修复效果。
值得注意的是，所述的步骤(1)中石油污染土壤的污染石油烃的质量浓度范围为2%-12%。
此外，所述的步骤(3)中生物质废弃物采用秸秆、废木屑、花生壳、枯草中的一种或多种，表面活性剂采用鼠李糖脂、腐植酸、Triton X-100、Tween80中的一种，表面活性剂的添加量为0.5‰-1.5‰。
本具体实施方式步骤(2)中复合微生物菌剂培养完成要求菌株浓度达到109cfu/mL，土壤接菌量高于108cfu/kg；黄孢原毛平革菌的活化培养基配方为：马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5%-2.0%，pH自然；发酵培养基配方为：马铃薯0.2%、葡萄糖2.0%、KH2PO4 0.3%、MgSO4·7H2O 0.15%、FeSO4·7H2O 0.1mg/L、CuSO4·5H2O 0.2mg/L、维生素B1 8mg/L。地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌的活化培养基组成：牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、NaCl 0.5%，pH为7.0-7.2；发酵培养基组成：水解糖2.5%、玉米浆2.5%、KH2PO4 0.15%、MgSO40.04%、尿素0.4%，pH为6.8-7.0。
步骤(3)中控制反应温度15-30℃，保持反应体系中水分含量为20%-30%，氮：磷质量比为8-12：1，调节pH6.0-8.0，保持3-7天添加一次菌，并定期翻耕通气，控制配好的反应体系堆置成堆状。
本具体实施方式大大提高了石油污染土壤的修复效果，使修复土壤可完全达到国家规定标准，修复高效，处理效果好，石油烃降解率高达80%以上，成本低，不仅经济可行，且可操作性强，适合于大规模处理石油污染土壤，绿色环保、不产生二次污染，具有广阔的市场应用前景。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (8)
1.一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，其步骤为：
(1)将石油污染土壤收集到隔离修复场地进行修复，同时将收集的污染土壤晒干碾碎，以去除挥发性烃类；
(2)制备复合微生物菌剂：黄孢原毛平革菌、地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌培养完成后，按照菌株浓度的0.5-1：0.5-1：2-3：1-2的比例进行均匀混合；
(3)将复合菌剂、生物质废弃物、表面活性剂按照比例分别加入到步骤(1)中的土壤，并均匀混合，反应45-60天取样检测修复效果。
2.根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(1)中石油污染土壤的污染石油烃的质量浓度范围为2%-12%。
3.根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(2)中复合微生物菌剂培养完成要求菌株浓度达到109cfu/mL，土壤接菌量高于108cfu/kg。
4. 根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(2)中黄孢原毛平革菌的活化培养基配方为：马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5%-2.0%，pH自然；发酵培养基配方为：马铃薯0.2%、葡萄糖2.0%、KH2PO4 0.3%、MgSO4·7H2O 0.15%、FeSO4·7H2O 0.1mg/L、CuSO4·5H2O 0.2mg/L、维生素B1 8mg/L。
5. 根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(2)中地衣芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和木糖氧化无色杆菌的活化培养基组成：牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、NaCl 0.5%，pH为7.0-7.2；发酵培养基组成：水解糖2.5%、玉米浆2.5%、KH2PO4 0.15%、MgSO4 0.04%、尿素0.4%，pH为6.8-7.0。
6.根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(3)中生物质废弃物采用秸秆、废木屑、花生壳、枯草中的一种或多种。
7. 根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(3)中表面活性剂采用鼠李糖脂、腐植酸、Triton X-100、Tween80中的一种，表面活性剂的添加量为0.5‰-1.5‰。
8.根据权利要求1所述的一种石油污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，所述的步骤(3)中控制反应温度15-30℃，保持反应体系中水分含量为20%-30%，氮：磷质量比为8-12：1，调节pH6.0-8.0，保持3-7天添加一次菌，并定期翻耕通气，控制配好的反应体系堆置成堆状。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20181207 |