CN105503683A - 一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法 - Google Patents

一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105503683A
CN105503683A CN201511017390.4A CN201511017390A CN105503683A CN 105503683 A CN105503683 A CN 105503683A CN 201511017390 A CN201511017390 A CN 201511017390A CN 105503683 A CN105503683 A CN 105503683A
Authority
CN
China
Prior art keywords
shrimp shell
astaxanthin
papain
distilled water
extract
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201511017390.4A
Other languages
English (en)
Inventor
刘月伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GUANGXI QINZHOU LVYUAN NATURAL FOOD PROCESSING CO Ltd
Original Assignee
GUANGXI QINZHOU LVYUAN NATURAL FOOD PROCESSING CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GUANGXI QINZHOU LVYUAN NATURAL FOOD PROCESSING CO Ltd filed Critical GUANGXI QINZHOU LVYUAN NATURAL FOOD PROCESSING CO Ltd
Priority to CN201511017390.4A priority Critical patent/CN105503683A/zh
Publication of CN105503683A publication Critical patent/CN105503683A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C403/00—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone
    • C07C403/24—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone having side-chains substituted by six-membered non-aromatic rings, e.g. beta-carotene
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)

Abstract

本发明提供一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，将虾壳洗净捣碎加入蒸馏水、木瓜蛋白酶酶解，冰水浴冷却灭酶，过滤，沉淀物中加入丙酮提取，过滤，将滤液旋蒸即得虾青素。本发明选用的木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能保持较高活性的蛋白酶，具有适应范围广、可操作性强、工艺优化简便等特点；而且木瓜蛋白酶可选择性降解甲壳素的GIcNAc-GleN糖苷键,有利于虾青素的提取，利用此方法回收虾青素,经济可行，污染小，可以产业化生产。

Description

一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法
技术领域
本发明涉及一种提取虾青素的方法，具体涉及一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法。
背景技术
虾青素(astaxanthin)，学名3,3＇-二羟基-4,4′-二酮基-β,β′胡萝卜素,属于叶黄族(xanthohylls)酮式类胡萝卜素，易溶于有机溶剂，难溶于水，具有独特的着色、抗氧化、防癌、促进抗体产生、抵御紫外线、带维生素A活性、改善视力、免疫力、色素形成和神经连通以及改善生育等功能。虾青素广泛存在于自然界中，如:大多数甲壳类动物和鲑科鱼类体内，植物的花中以及火烈鸟的羽毛中等，起显色作用。
克氏原螯虾俗称小龙虾，在我国分布广，捕捞量大，加工后的废弃物占原料的70％～85％，是提取虾青素的一种良好来源。但是在国内的小龙虾加工中，虾壳除提取壳聚糖外，绝大多数被废弃，造成资源浪费和环境污染，不利于其综合利用。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，木瓜蛋白酶可选择性降解甲壳素的GIcNAc-GleN糖苷键，有利于虾青素的提取。
为了达到上述目的，本发明采取的技术方案是：
一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，包括如下步骤：
(1)称取一定重量份的虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入蒸馏水混合均匀，调节pH＝5.5～6.5，加热，然后加入木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入丙酮，超声10～30min，摇床常温振荡，在冷冻离心机离心5～10min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
优选的，所述虾壳的用量与蒸馏水的用量比为0.5～2.5:1。
优选的，所述步骤(2)中的木瓜蛋白酶酶与底物比为2000U/g～3000U/g。
优选的，所述步骤(4)中丙酮的用量为虾壳用量的2～6倍。
优选的，所述步骤(2)中酶解的时间为45～65min。
优选的，所述步骤(3)中冰水浴冷却的时间为10～30min。
优选的，所述步骤(4)中摇床常温振荡的时间为2～5h。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素，木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能保持较高活性的蛋白酶，具有适应范围广、可操作性强、工艺优化简便等特点；而且木瓜蛋白酶可选择性降解甲壳素的GIcNAc-GleN糖苷键,有利于虾青素的提取，利用此方法回收虾青素,经济可行，污染小，可以产业化生产。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步地说明。
实施例1
(1)称取5g虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入10mL蒸馏水混合均匀，用pH缓冲液调节pH＝5.5，加热至35℃，然后加入酶与底物比为2000U/g的木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解45min；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却10min灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入10mL丙酮，超声10min，摇床常温振荡2h，在冷冻离心机10000r/min，4℃下离心10min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
实施例2
(1)称取8g虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入8mL蒸馏水混合均匀，用pH缓冲液调节pH＝5.8，加热至40℃，然后加入酶与底物比为2250U/g的木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解50min；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却15min灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入24mL丙酮，超声15min，摇床常温振荡3h，在冷冻离心机10000r/min，4℃下离心8min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
实施例3
(1)称取10g虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入5mL蒸馏水混合均匀，用pH缓冲液调节pH＝6.0，加热至45℃，然后加入酶与底物比为2500U/g的木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解60min；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却20min灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入40mL丙酮，超声20min，摇床常温振荡3h，在冷冻离心机10000r/min，4℃下离心5min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
实施例4
(1)称取15g虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入10mL蒸馏水混合均匀，用pH缓冲液调节pH＝6.3，加热至50℃，然后加入酶与底物比为2750U/g的木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解55min；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却25min灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入75mL丙酮，超声25min，摇床常温振荡4h，在冷冻离心机10000r/min，4℃下离心7min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
实施例5
(1)称取20g虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入8mL蒸馏水混合均匀，用pH缓冲液调节pH＝6.5，加热至55℃，然后加入酶与底物比为3000U/g的木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解65min；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却30min灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入120mL丙酮，超声30min，摇床常温振荡5h，在冷冻离心机10000r/min，4℃下离心10min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
将实施例1、2、3、4、5提取得到的虾青素的性能进行测试，结果如下表1所示。
表1
以上所述，仅是本发明较佳实施例而已，并非对本发明的技术范围作任何限制，故凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (7)

1.一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)称取一定重量份的虾壳，用蒸馏水清洗干净，沥去多余水分并用组织捣碎机捣碎至5～10mm备用；
(2)在捣碎的虾壳中加入蒸馏水混合均匀，调节pH＝5.5～6.5，加热，然后加入木瓜蛋白酶，恒温水浴振荡木瓜蛋白酶酶解；
(3)酶解结束后，冰水浴冷却灭酶，过滤，反复用蒸馏水冲洗沉淀物，洗至中性；
(4)在沉淀物中加入丙酮，超声10～30min，摇床常温振荡，在冷冻离心机离心5～10min，过滤分离液体和固体，滤液经旋转蒸发即得虾青素，旋蒸后的丙酮可以再次用于提取虾青素。
2.根据权利要求1所述的利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，所述虾壳的用量与蒸馏水的用量比为0.5～2.5:1。
3.根据权利要求1所述的利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的木瓜蛋白酶酶与底物比为2000U/g～3000U/g。
4.根据权利要求1所述的利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中丙酮的用量为虾壳用量的2～6倍。
5.根据权利要求1所述的利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中酶解的时间为45～65min。
6.根据权利要求1所述的利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中冰水浴冷却的时间为10～30min。
7.根据权利要求1所述的利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中摇床常温振荡的时间为2～5h。
CN201511017390.4A 2015-12-29 2015-12-29 一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法 Pending CN105503683A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511017390.4A CN105503683A (zh) 2015-12-29 2015-12-29 一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511017390.4A CN105503683A (zh) 2015-12-29 2015-12-29 一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105503683A true CN105503683A (zh) 2016-04-20

Family

ID=55712054

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201511017390.4A Pending CN105503683A (zh) 2015-12-29 2015-12-29 一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105503683A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107033049A (zh) * 2017-06-09 2017-08-11 中国水产科学研究院南海水产研究所 一种复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法
CN108850778A (zh) * 2018-06-19 2018-11-23 佛山皖阳生物科技有限公司 一种长效稳定型生物质抗氧化剂的制备方法
CN115108865A (zh) * 2022-06-21 2022-09-27 苏州益植生物科技有限公司 一种绿色复合生物刺激素及其制备方法
CN115466145A (zh) * 2022-08-12 2022-12-13 苏州益植生物科技有限公司 一种包膜生物刺激素及其制备方法与应用
CN115477602A (zh) * 2022-09-28 2022-12-16 湖北兴祥生物科技有限公司 一种小龙虾废弃物中虾青素酯的提取工艺

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1644073A (zh) * 2005-01-25 2005-07-27 江南大学 一种酶法综合利用虾加工下脚料的方法
CN101176549A (zh) * 2007-11-29 2008-05-14 湖北东方天琪生物工程股份有限公司 从虾壳中提取甲壳素及其生物活性物质的低耗环保方法
EP2085381A1 (en) * 2008-01-30 2009-08-05 Bioptik Technology, Inc. Method for obtaining natural astaxanthin from eggs and gonads of snails
KR20100001773A (ko) * 2008-06-27 2010-01-06 인만진 2차 효소반응을 이용하여 헤마토코커스 풀루비알리스균주로부터 아스타잔틴의 추출방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1644073A (zh) * 2005-01-25 2005-07-27 江南大学 一种酶法综合利用虾加工下脚料的方法
CN101176549A (zh) * 2007-11-29 2008-05-14 湖北东方天琪生物工程股份有限公司 从虾壳中提取甲壳素及其生物活性物质的低耗环保方法
EP2085381A1 (en) * 2008-01-30 2009-08-05 Bioptik Technology, Inc. Method for obtaining natural astaxanthin from eggs and gonads of snails
KR20100001773A (ko) * 2008-06-27 2010-01-06 인만진 2차 효소반응을 이용하여 헤마토코커스 풀루비알리스균주로부터 아스타잔틴의 추출방법

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
于晓 等: "木瓜蛋白酶酶解南极磷虾壳提取虾青素的研究", 《食品工业科技》 *
钱飞 等: "木瓜蛋白酶水解克氏原螯虾虾壳提取虾青素的研究", 《食品与生物技术学报》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107033049A (zh) * 2017-06-09 2017-08-11 中国水产科学研究院南海水产研究所 一种复合酶法提取南极磷虾虾青素的方法
CN108850778A (zh) * 2018-06-19 2018-11-23 佛山皖阳生物科技有限公司 一种长效稳定型生物质抗氧化剂的制备方法
CN115108865A (zh) * 2022-06-21 2022-09-27 苏州益植生物科技有限公司 一种绿色复合生物刺激素及其制备方法
CN115466145A (zh) * 2022-08-12 2022-12-13 苏州益植生物科技有限公司 一种包膜生物刺激素及其制备方法与应用
CN115477602A (zh) * 2022-09-28 2022-12-16 湖北兴祥生物科技有限公司 一种小龙虾废弃物中虾青素酯的提取工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105503683A (zh) 一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法
CN103172763B (zh) 小龙虾副产物中生物活性物质的一条龙提取方法
CN102924423B (zh) 一种从香蕉皮中提取花青素的方法
CN103013936B (zh) 复合酶提取花色素的方法及其复合酶制剂
CN102898541B (zh) 一种鱼骨硫酸软骨素的制备方法
CN102746938A (zh) 一种利用水酶法从油料籽仁中制取油脂和蛋白的方法
CN102550900B (zh) 一种利用淡水鱼皮制备食用明胶的方法
CN101455264A (zh) 一种鲍鱼活性肽的制备方法
CN104278066A (zh) 一种超高压结合酶法制备小麦麸皮低聚木糖的方法
CN103320486B (zh) 一种鱼类软骨生产硫酸软骨素联产水解胶原蛋白的方法
CN107034258A (zh) 一种昆虫蛋白质提取方法
CN107629870A (zh) 一种同时提取花生油和花生蛋白质的方法
CN105420326A (zh) 一种木瓜蛋白酶水解虾壳提取蛋白质、虾青素的方法
CN103431389A (zh) 一种从荞麦壳中连续提取荞麦黄酮和膳食纤维的方法
CN102391669A (zh) 一种从红薯皮中提取的天然红色素及其制备方法
CN108998491A (zh) 一种提取牡丹籽粕中蛋白质的方法
CN104892780A (zh) 一种大枣渣粗多糖的提取工艺
CN103734748A (zh) 一种从海带中提取膳食纤维的方法
CN105367682A (zh) 一种香菇多糖制备的方法
CN103160407A (zh) 一种羊栖菜酒的制备方法
CN107982120A (zh) 一种纯植物酵素洗涤剂及其制备方法
CN103289809B (zh) 盐水酶法制备核桃种仁油的方法
CN103518943A (zh) 一种利用多频超声波从菜籽饼提取蛋白的方法
CN103936877B (zh) 一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法
CN106281659A (zh) 一种牡丹籽粕中蛋白质的提取方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160420

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication