CN105339009A - 用于治疗癌症的包括tor激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合疗法 - Google Patents

Abstract

本文提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括向患有癌症的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂和有效量的5-取代喹唑啉酮化合物。

Description

用于治疗癌症的包括TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合疗法

本申请要求于2013年4月17日提交的第61/813,089号美国临时申请案和于2013年11月25日提交的第61/908,408号美国临时申请案的权益，将其全部内容以引用方式并入本文。

1.技术领域

本文提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括向患有癌症的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂和有效量的5-取代喹唑啉酮化合物。

2.发明背景

异常蛋白磷酸化和疾病的原因或结果之间的关系已知超过20年。因此，蛋白激酶已成为非常重要的一组药物靶标。参见Cohen,Nature,1:309-315(2002)。各种蛋白激酶抑制剂已在临床上用于治疗各种疾病，如癌症和慢性炎性疾病，包括糖尿病和中风。参见Cohen,Eur.J.Biochem.,268:5001-5010(2001),ProteinKinaseInhibitorsfortheTreatmentofDisease:ThePromiseandtheProblems,HandbookofExperimentalPharmacology,SpringerBerlinHeidelberg,167(2005)。

蛋白激酶是催化蛋白磷酸化并在细胞信号转导中起关键作用的大型且多样化的酶家族。蛋白激酶可以根据其靶蛋白产生正或负调节作用。蛋白激酶参与调节细胞功能的特定信号转导通路，例如但不限于，新陈代谢、细胞周期进程、细胞粘附、血管功能、细胞凋亡和血管生成。细胞信号转导的机能障碍与许多疾病相关，其中最具特征的包括癌症和糖尿病。细胞因子对信号转导的调节以及信号分子与原癌基因和肿瘤抑制基因的关系已得到充分证明。类似地，已证实了糖尿病与相关病症之间的关系和蛋白激酶的去调节水平。参见例如，Sridhar等人PharmaceuticalResearch,17(11):1345-1353(2000)。病毒感染和与其相关的病症也与蛋白激酶的调节有关。Park等人，Cell101(7):777-787(2000)。

由于蛋白激酶调节几乎每个细胞过程，包括新陈代谢、细胞增殖、细胞分化和细胞存活，因此，它们是用于多种疾病状态的治疗性干预的有吸引力的靶标。例如，其中蛋白激酶起关键作用的细胞周期控制和血管生成是与许多疾病病症，例如但不限于癌症、炎性疾病、异常血管生成及与其相关的疾病、动脉粥样硬化、黄斑变性、糖尿病、肥胖和疼痛有关的细胞过程。

蛋白激酶已成为用于治疗癌症的有吸引力的靶标。Fabbro等人,Pharmacology&Therapeutics93:79-98(2002)。已提出蛋白激酶参与人类恶性肿瘤的发展可以通过以下方式发生：(1)基因组重排(例如，慢性髓性白血病中的BCR-ABL)，(2)产生组成性活性激酶活性的突变，如急性髓性白血病和胃肠道肿瘤，(3)由原癌基因的活化或肿瘤抑制功能丧失导致的激酶活性的去调节，如在具有致癌RAS的癌症中，(4)由于过表达导致的激酶活性的去调节，如在EGFR的情况下和(5)可以促进瘤表型的发展和维持的生长因子的异位表达。Fabbro等人,Pharmacology&Therapeutics93:79-98(2002)。

阐明蛋白激酶通路的复杂性以及各种蛋白激酶和激酶通路之间的关系和相互作用的复杂性凸显开发能够充当对多种激酶或多种激酶通路具有有益活性的蛋白激酶调节剂、调控剂或抑制剂的药剂的重要性。因此，仍需要新的激酶调节剂。

称为mTOR(哺乳动物的雷帕霉素靶标)的蛋白质，也称为FRAP、RAFTI或RAPT1，是2549个氨基酸的Ser/Thr蛋白激酶，其已显示为在调节细胞生长和增殖的mTOR/PI3K/Akt通路中最关键的蛋白质之一。Georgakis和YounesExpertRev.AnticancerTher.6(1):131-140(2006)。mTOR存在于两种复合物mTORC1和mTORC2中。mTORC1对雷帕霉素类似物(如替西罗莫司或依维莫司)敏感，而mTORC2主要是雷帕霉素不敏感的。显著地，雷帕霉素不是TOR激酶抑制剂。几种mTOR抑制剂已经或正在针对癌症治疗的临床试验中接受评价。替西罗莫司在2007年被批准用于肾细胞癌，而西罗莫司在1999年被批准用于预防肾移植排斥。依维莫司在2009年被批准用于使用血管内皮生长因子受体抑制剂时进展的肾细胞癌患者，在2010年被批准用于需要治疗但不是手术切除候选者的患者的与结节性硬化症(TS)相关的室管膜下巨细胞星形细胞瘤(SEGA)，并且在2011年被批准用于患有不可切除的、局部晚期或转移性疾病的患者的渐进性胰源性神经内分泌肿瘤(PNET)。仍需要抑制mTORC1和mTORC2复合物两者的TOR激酶抑制剂。

DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)是参与DNA双链断裂(DSB)的修复的丝氨酸/苏氨酸激酶。认为DSB是最致命的DNA损伤且内源性发生或响应电离辐射和化学治疗发生(综述见Jackson,S.P.,Bartek,J.TheDNA-damageresponseinhumanbiologyanddisease.NatureRev2009；461:1071-1078)。如果不修复，DSB将导致细胞周期停止和/或细胞死亡(Hoeijmakers,J.H.J.Genomemaintenancemechanismsforpreventingcancer.Nature2001；411:366-374；vanGent,D.C.,Hoeijmakers,J.H.,Kanaar,R.ChromosomalstabilityandtheDNAdouble-strandedbreakconnection.NatRevGenet2001；2:196-206)。为响应该损害，细胞已形成复杂机制来修复这样的断裂，并且这些机制可以形成治疗抗性的基础。存在两条用于修复DSB的主要通路，非同源末端连接(NHEJ)及同源重组(HR)。NHEJ使DNA的断裂末端集合在一起并在不参照第二模板的情况下使其再结合(Collis,S.J.,DeWeese,T.L.,JeggoP.A.,Parker,A.R.ThelifeanddeathofDNA-PK.Oncogene2005；24:949-961)。相反地，HR依赖于提供介导可靠修复的模板的姐妹染色单体的接近度(Takata,M.,Sasaki,M.S.,Sonoda,E.,Morrison,C.,Hashimoto,M.,Utsumi,H.,等人Homologousrecombinationandnon-homologousend-joiningpathwaysofDNAdouble-strandbreakrepairhaveoverlappingrolesinthemaintenanceofchromosomalintegrityinvertebratecells.EMBOJ1998；17:5497-5508；Haber,J.E.Partnersandpathwaysrepairingadouble-strandbreak.TrendsGenet2000；16:259-264)。NHEJ修复大多数DSB。在NHEJ中，DSB被结合并随后活化DNA-PK的催化亚单位的Ku蛋白识别。这导致末端加工酶、聚合酶和DNA连接酶IV的募集和活化(Collis,S.J.,DeWeese,T.L.,JeggoP.A.,Parker,A.R.ThelifeanddeathofDNA-PK.Oncogene2005；24:949-961)。NHEJ主要受DNA-PK的控制，因此DNA-PK的抑制是调节响应外因诱导的DSB的修复的有吸引力的方法。缺乏NHEJ通路组分的细胞在DSB修复方面有缺陷并且对电离辐射以及拓扑异构酶毒剂高度敏感(综述见Smith,G.C.M.,Jackson,S.P.TheDNA-dependentproteinkinase.GenesDev1999；13:916-934；Jeggo,P.A.,Caldecott,K.,Pidsley,S.,Banks,G.R.SensitivityofChinesehamsterovarymutantsdefectiveinDNAdoublestrandbreakrepairtotopoisomeraseIIinhibitors.CancerRes1989；49:7057-7063)。已报导DNA-PK抑制剂具有使癌细胞对治疗诱导的DSB敏感的相同作用(Smith,G.C.M.,Jackson,S.P.TheDNA-dependentproteinkinase.GenesDev1999；13:916-934)。

尽管可获得各种化学治疗剂，但化学疗法具有许多缺点。Stockdale,Medicine,vol.3,RubensteinandFederman,eds.,ch.12,sect.10,1998。几乎所有的化学治疗剂都具有毒性，且化学疗法可引起显著且通常危险的副作用，包括严重的恶心、骨髓抑制和免疫抑制。此外，即使给予化学治疗剂的组合，许多肿瘤细胞仍然是抗性的或发展出针对该化学治疗剂的抗性。事实上，通常证明对用于治疗方案中的特定化学治疗剂具有抗性的那些细胞会对其他药物具有抗性，即使那些药剂通过与在特定治疗中使用的药物不同的机制起作用。该现象称为多药耐药。由于抗药性，许多癌症证明标准化疗治疗方案是难治的。

非常需要这样的安全且有效的方法，所述方法治疗、预防和管理癌症，特别是标准治疗，如手术、放射疗法、化学疗法和激素疗法难治的癌症，同时降低或避免与常规疗法相关的毒性和/或副作用。

蛋白小脑肽(CRBN)为在植物到人类中均保守的442氨基酸蛋白。在人类中，CRBN基因已确定为常染色体隐性非综合征型精神发育迟滞(ARNSMR)的候选基因。参见Higgins,J.J.等人,Neurology,2004,63:1927-1931。CRBN最初被描述为在大鼠脑中与钙活化的钾通道蛋白(SLO1)相互作用的含RGS的新型蛋白，并且后来显示在具有AMPK7和DDB1的视网膜中与电压门控氯通道(CIC-2)相互作用。参见Jo,S.等人,J.Neurochem,2005,94:1212-1224；HohbergerB.等人,FEBSLett,2009,583:633-637；AngersS.等人,Nature,2006,443:590-593。DDB1最初被确定为与受损DNA结合蛋白2(DDB2)相关的核苷酸切除修复蛋白。其缺陷活性在患有着色性干皮病互补群E(XPE)的患者中导致修复缺陷。DDB1似乎还充当多种不同DCX(DDB1-CUL4-X-box)E3泛素-蛋白连接酶复合物的组分，其介导靶蛋白的泛素化和后续的蛋白酶体降解。CRBN也被确定为开发用于大脑皮层的疾病的治疗剂的靶标。参见WO2010/137547A1。

小脑肽进来被确定为结合于沙利度胺以导致出生缺陷的关键分子靶标。参见Ito,T.等人,Science,2010,327:1345-1350。发现DDB1与CRBN相互作用，并且因此与沙利度胺间接相关。此外，沙利度胺能够抑制CRBN的体外自动泛素化，表明沙利度胺为E3泛素连接酶抑制剂。重要的是，该活性在野生型细胞中被沙利度胺抑制，但在具有防止沙利度胺结合的具有突变的CRBN结合位点的细胞中不被抑制。沙利度胺结合位点定位至CRBN中高度保守的C端104氨基酸区域。CRBN中的单个点突变Y384A和W386A对于沙利度胺结合均是有缺陷的，而双点突变具有最低的沙利度胺结合活性。CRBN和沙利度胺的致畸效应之间的联系在斑马鱼和鸡胚的动物模型中得到证实。理解沙利度胺和其他药物靶标将允许确定疗效和/或毒性的分子机制，并且可以得到具有改进的疗效和毒性分布的药物。

最近，已确定某些新型喹唑啉酮化合物具有多效免疫调节、抗血管生成和其他抗肿瘤效应。这些化合物已显示具有独特的小脑肽结合活性。

本申请的第2部分中引用或确定的任何参考文献不应解释为承认该参考文献是本申请的现有技术。

3.发明概述

本文提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括向患有癌症的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂和有效量的5-取代喹唑啉酮化合物，栓所述癌症例如如本文所述的血液癌症。

在某些实施方式中，本文提供了用于在患有慢性淋巴细胞性白血病的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的国际慢性淋巴细胞性白血病研讨会(IWCLL)的反应定义的方法，包括向所述患者给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有白血病的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的国家癌症研究所资助的慢性淋巴细胞性白血病工作组(NCI-WGCLL)反应定义的方法，包括向所述患者给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有非霍奇金氏淋巴瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的非霍奇金氏淋巴瘤的国际研讨会标准(IWC)的方法，包括向所述患者给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有多发性骨髓瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的多发性骨髓瘤的国际统一反应标准(IURC)的方法，包括向所述患者给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有实体瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的实体瘤反应评价标准(例如，RECIST1.1)的方法，包括向所述患者给予有效量的与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有***癌的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的***癌工作组2(PCWG2)标准的方法，包括向所述患者给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了在患有多形性胶质母细胞瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的多形性胶质母细胞瘤的神经肿瘤反应评估(RANO)工作组的方法，包括向所述患者给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于提高患有癌症的患者的无癌症进展的存活的方法，包括向所述患者给予与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂是如本文所述的化合物。在某些实施方式中，所述5-取代喹唑啉酮化合物是如本文所述的化合物。

本实施方式可以通过参考详细描述和实施例得到更充分的理解，该详细描述和实施例旨在例示非限定性实施方式。

4.附图说明

图1描绘了化合物1对HepG2集落形成的影响。将HepG2细胞平板接种于琼脂中并用化合物1孵育8天，然后对集落进行计数。将数据计算为相对于仅用DMSO处理的细胞(＝100％对照)的对照的百分比。每个数据点代表n＝3的一式三份的实验的平均值。***对于DMSO对照p<0.001，由单因素方差分析(ANOVA)接着Dunnett事后检验获得。

图2描绘了化合物1对SK-Hep-1集落形成的影响。将SK-HEP-1细胞平板接种于琼脂中并用化合物1孵育8-10天，然后对集落进行计数。将数据计算为相对于仅用DMSO处理的细胞(＝100％对照)的对照的百分比。每个数据点代表n＝3的一式三份的实验的平均值。***对于DMSO对照p<0.001，由单因素方差分析接着Dunnett事后检验获得。

图3描绘了化合物1加上化合物A对HepG2集落形成的影响。将HepG2细胞平板接种于琼脂中并用化合物孵育8天，然后对集落进行计数。将数据计算为相对于仅用DMSO处理的细胞(＝100％对照)的对照的百分比。每个数据点代表n＝3的一式三份的实验的平均值。***对于理论累加性p<0.001，**对于理论累加性p<0.01，通过非配对t检验获得。

图4描绘了化合物1加上化合物A对SK-Hep-1集落形成的影响。将SK-Hep-1细胞平板接种于琼脂中并用化合物孵育8天，然后对集落进行计数。将数据计算为相对于仅用DMSO处理的细胞(＝100％对照)的对照的百分比。每个数据点代表n＝3的一式三份的实验的平均值。**对于理论累加性p<0.01，*对于理论累加性p<0.05，由非配对t检验获得。

图5描绘了化合物1在WSU-DLBCL2异种移植模型中的抗肿瘤活性。肿瘤抑制显示为各治疗组的变化百分比，并且表示在第35天时化合物1治疗的小鼠和溶媒治疗的小鼠之间的平均肿瘤体积的差异。在第35天，所有化合物1治疗组的平均肿瘤体积显著小于溶媒治疗对照小鼠。在研究结束时的第35天，在10、3和1mg/kg的剂量水平下分别观察到约51％、28％和22％的肿瘤体积减小(TVR)。在使用化合物1治疗的小鼠中未观察到明显的体重减轻。

图6描绘了与化合物A组合的化合物1在WSU-DLCL2异种移植模型中抗肿瘤活性。肿瘤抑制显示为各治疗组的变化百分比，并且表示在第34天时化合物1和化合物A治疗的小鼠和溶媒治疗的小鼠之间的平均肿瘤体积的差异。化合物1作为单一药剂治疗时在10mg/kg下产生统计学显著的(p<0.001)29％的肿瘤体积降低。在第34天，化合物A作为单一药剂治疗时在30mg/kg下产生统计学显著的(p<0.001)30％的肿瘤体积降低。使用与化合物A组合的化合物1使肿瘤体积进一步降低至64％(p<0.001)。使用数乘积法，确定化合物1与化合物A组合在降低肿瘤体积方面是协同的。在使用Bonferroni事后检验的双因素ANOVA分析中，使用与化合物A(30mg/kg)组合的化合物1(10mg/kg)治疗的动物的肿瘤体积在与单独使用任一药剂治疗的动物的肿瘤相比时显著(p<0.001)更小。在使用化合物1或化合物A作为单一药剂或组合治疗的小鼠中未观察到明显的体重减轻。

图7描绘了与化合物AA组合的化合物1在WSU-DLCL2异种移植模型中的抗肿瘤活性。肿瘤抑制显示为各治疗组的变化百分比，并且表示在第34天时化合物1和化合物AA治疗的小鼠和溶媒治疗的小鼠之间的平均肿瘤体积的差异。化合物1作为单一药剂治疗时在10mg/kg下产生统计学显著的(p<0.001)29％的肿瘤体积降低。化合物AA在50mg/kg(BID)下未观察到明显的抗肿瘤活性。使用与化合物AA组合的化合物1(同时给予)治疗的动物中的肿瘤体积当与溶媒对照组相比时降低39％。在使用Bonferroni事后检验的双因素ANOVA分析中，化合物1和化合物AA的该组合效应当与化合物1(10mg/kg)的单一药剂活性相比时是显著不同的。在使用化合物1或化合物AA作为单一药剂或组合治疗的小鼠中未观察到明显的体重减轻。

图8描绘了化合物1和化合物A单独和组合时对肿瘤Aiolos(图8A)和Ikaros水平(图8B)的活性，所述活性由IHC测定。化合物A作为单一药剂抑制肿瘤Aiolos(在6h时为94％)和Ikaros(在6h时为69％)。化合物1作为单一药剂对肿瘤Aiolos或Ikaros无影响。化合物A和化合物1组合时显示持久的对肿瘤Aiolos(95％抑制至24h)和Ikaros(81％抑制至24h)的协同效应。

图9描绘了与化合物A组合的化合物1在OCI-Ly10DLBCL异种移植模型中的抗肿瘤活性。显示每个治疗组的存活百分比。化合物A(30mg/kgqdx28)产生最大可能的28.6天TGD，七个幸存者和两个PR；化合物A(10mg/kgqdx28/4/21)产生8.9天TGD和三个幸存者；化合物1(3mg/kgqdx28/4/21)产生23.8天TGD、五个幸存者和一个PR。28天的30mg/kg化合物A/化合物1治疗产生九个幸存者和两个PR。扩展的10mg/kg化合物A/化合物1治疗产生七个幸存者。利妥昔单抗单药治疗在1和3mg/kg下各产生10个TFS；在较高剂量下，肿瘤消退的开始略早。所有治疗在OCI-Ly10人类淋巴瘤SCID小鼠异种移植模型中耐受良好。

图10描绘了使用CIVO^TM阵列微注射平台在单一活肿瘤中进行多重化合物疗效研究的结果。通过测量细胞凋亡标志物—裂解的胱天蛋白酶3(CC3)来评价细胞凋亡，其绘制为离注射位点的距离的函数。如图10所示，在DLBCLSUDHL4异种移植物模型中全身给药化合物A增强使用化合物2局部治疗诱导的细胞死亡。

图11描绘了在亲代和多柔比星抗性RAMOS细胞异种移植模型中局部注射长春新碱、化合物2或化合物1的效应。如通过作为离局部注射位点的距离的函数的裂解的胱天蛋白酶3所测量，多柔比星抗性Ramos细胞也抗另一种化学疗法长春新碱。相反地，多柔比星抗性Ramos细胞显示对化合物2的升高的敏感性。

5.发明详述

5.1定义

“烷基”是具有1至10个碳原子，通常1至8个碳，或在一些实施方式中1至6、1至4或2至6个碳原子的饱和的、部分饱和的或不饱和的直链或支链非环状烃。代表性的烷基包括-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基和-正己基；而饱和支链烷基包括-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。不饱和烷基的实例尤其包括但不限于，乙烯基、烯丙基、-CH＝CH(CH₃)、-CH＝C(CH₃)₂、-C(CH₃)＝CH₂、-C(CH₃)＝CH(CH₃)、-C(CH₂CH₃)＝CH₂、-C≡CH、-C≡C(CH₃)、-C≡C(CH₂CH₃)、-CH₂C≡CH、-CH₂C≡C(CH₃)和-CH₂C≡C(CH₂CH₃)。烷基可以是取代的或未取代的。在某些实施方式中，当本文所述的烷基描述为“取代的”是，其可以被任何取代基或多个取代基取代，所述任何取代基或多个取代基如本文公开的示例性化合物和实施方式中存在的那些，以及卤素(氯、碘、溴或氟)、羟基、烷氧基、烷氧基烷基、氨基、烷基氨基、羧基、硝基、氰基、巯基、硫醚、亚胺、酰亚胺、脒、胍、烯胺、氨基羰基、酰基氨基、膦酸基、膦、硫羰基、磺酰基、砜、磺酰胺、酮、醛、酯、脲、尿烷、肟、羟胺、烷氧基胺、芳烷氧基胺、N-氧化物、肼、酰肼、腙、叠氮化物、异氰酸酯、异硫氰酸酯、氰酸酯、硫氰酸酯、B(OH)₂或O(烷基)氨基羰基。

“烯基”是具有2至10个碳原子，通常2至8个碳原子，并且包括至少一个碳-碳双键的直链或支链非环状烃。代表性的直链和支链(C₂-C₈)烯基包括-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2,3-二甲基-2-丁烯基、-1-己烯基、-2-己烯基、-3-己烯基、-1-庚烯基、-2-庚烯基、-3-庚烯基、-1-辛烯基、-2-辛烯基、-3-辛烯基等。烯基的双键可以是非共轭的或与另一个不饱和基团共轭。烯基可以是未取代的或取代的。

“环烷基”是具有单环或多个稠环或桥环的3至10个碳原子的饱和的或部分饱和的环状烷基，其可以任选地被1至3个烷基取代。在一些实施方式中，环烷基具有3至8个环成员，而在其他实施方式中，环碳原子的数量为3至5、3至6或3至7个。以举例的方式，这样的环烷基包括单环结构，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、1-甲基环丙基、2-甲基环戊基、2-甲基环辛基等，或多环或桥环结构，如金刚烷基等。不饱和环烷基的实例尤其包括环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、丁二烯基、戊二烯基、己二烯基。环烷基可以是取代的或未取代的。以举例的方式，这样的取代的环烷基包括环己酮等。

“芳基”是具有单环(例如，苯基)或多个稠环(例如，萘基或蒽基)的6至14个碳原子的芳族碳环基团。在一些实施方式中，芳基在基团的环部分中包含6-14个碳，在其他实施方式中包含6至12或甚至6至10个碳原子。具体的芳基包括苯基、联苯基、萘基等。芳基可以是取代的或未取代的。术语“芳基”还包括含有稠环的基团，如稠合的芳族-脂族环***(例如，茚满基、四氢萘基等)。

“杂芳基”是在杂芳族环***中具有一至四个杂原子作为环原子的芳基环***，其中剩余的原子为碳原子。在一些实施方式中，杂芳基在基团的环部分中包含5至6个环原子，在其他实施方式中包含6至9或甚至6至10个原子。适合的杂原子包括氧、硫和氮。在某些实施方式中，杂芳基环***为单环的或二环的。非限定性实例包括但不限于，以下基团，如吡咯基、吡唑基、咪唑基、***基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡咯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基,苯并呋喃基(例如，异苯并呋喃-1,3-二亚胺)、吲哚基、氮杂吲哚基(例如，吡咯并吡啶基或1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基)、吲唑基、苯并咪唑基(例如，1H-苯并[d]咪唑基)、咪唑并(例如，氮杂苯并咪唑基、3H-咪唑并[4,5-b]吡啶基或1H-咪唑并[4,5-b]吡啶基)、吡唑并吡啶基、***并吡啶基、苯并***基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、异噁唑并吡啶基、硫萘基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基。

“杂环基”为其中一至四个环碳原子独立地被来自O、S和N组成的群组中的杂原子替代的芳族(也称为杂芳基)或非芳族环烷基。在一些实施方式中，杂环基包括3至10个环成员，而其他这样的基团具有3至5个、3至6个或3至8个环成员。杂环基还可以在任意环原子处(即，在杂环的任何碳原子或杂原子处)结合到其他基团。杂环基烷基可以是取代的或未取代的。杂环基包括不饱和的、部分饱和的和饱和的环***，例如，咪唑基、咪唑啉基和咪唑烷基。术语杂环基包括稠环种类，包括包含稠合芳族和非芳族基团的那些，例如，苯并***基、2,3-二氢苯并[l,4]二氧杂环己烯基和苯并[l,3]二氧杂环戊烯基。术语还包括含有杂原子的桥接多环环***，例如但不限于，喹咛基。杂环基的代表性实例包括但不限于，吖丙啶基、吖丁啶基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氢噻吩基、四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、咪唑啉基、吡唑基、吡唑啉基、***基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻唑啉基、异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、四氢吡喃基(例如，四氢-2H-吡喃基)、四氢硫吡喃基、氧硫杂环已烷、二氧杂环己烷基、二噻烷基、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、二氢吡啶基、二氢二硫杂环己烯基(dihydrodithiinyl)、二氢二硫杂环己基(dihydrodithionyl)、高哌嗪基、喹咛基、吲哚基,二氢吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基(吡咯并吡啶基)、吲唑基、吲哚嗪基、苯并***基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噁嗪基、苯并二硫杂环己烯基、苯并氧硫杂环己烯基、苯并噻嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[l,3]二氧杂环戊烯基、吡唑并吡啶基、咪唑并吡啶基(氮杂苯并咪唑基；例如，1H-咪唑并[4,5-b]吡啶基或1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮基)、***并吡啶基、异噁唑并吡啶基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基、蝶啶基、硫萘基、二氢苯并噻嗪基、二氢苯并呋喃基、二氢吲哚基、二氢苯并二氧杂环己烯基、四氢吲哚基、四氢吲唑基、四氢苯并咪唑基、四氢苯并***基、四氢吡咯并吡啶基、四氢吡唑并吡啶基、四氢咪唑并吡啶基、四氢***并吡啶基和四氢喹啉基。代表性的取代的杂环基可以是单取代的或多次取代的，例如但不限于，被各种取代基如以下列举的那些2-、3-、4-、5-或6-取代的或二取代的吡啶基或吗啉基。

“环烷基烷基”是式-烷基-环烷基的基团，其中烷基和环烷基如上所定义。取代的环烷基烷基可以在基团的烷基、环烷基或烷基和环烷基两者部分处被取代。代表性的环烷基烷基包括但不限于，环戊基甲基、环戊基乙基、环己基甲基、环己基乙基和环己基丙基。代表性的取代的环烷基烷基可以是单取代的或多次取代的。

“芳烷基”是式-烷基-芳基的基团，其中烷基和芳基如上所定义。取代的芳烷基可以在基团的烷基、芳基或烷基或芳基两者部分处被取代。代表性的芳烷基包括但不限于苄基和苯乙基和稠合(环烷基芳基)烷基，如4-乙基-茚满基。

“杂环基烷基”是式-烷基-杂环基的基团，其中烷基和杂环基如上所定义。取代的杂环基烷基可以在基团的烷基、杂环基或烷基和杂环基两者部分处被取代。代表性的杂环基烷基包括但不限于，4-乙基-吗啉基、4-丙基吗啉基、呋喃-2-基甲基、呋喃-3-基甲基、吡啶-3-基甲基、(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基、(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基、四氢呋喃-2-基甲基、四氢呋喃-2-基乙基和吲哚-2-基丙基。

“卤素”为氯、碘、溴或氟。

“羟烷基”为被一个或多个羟基取代的如上所述的烷基。

“烷氧基”为-O-(烷基)，其中烷基如上所定义。

“烷氧基烷基”为-(烷基)-O-(烷基)，其中烷基如上所定义。

“胺”基为式-NH₂的基团。

“羟胺”基为式-N(R^#)OH或-NHOH的基团，其中R^#为如本文所定义的取代或未取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基或杂环基烷基。

“烷氧基胺”基为式-N(R^#)O-烷基或-NHO-烷基的基团，其中R^#如上所定义。

“芳烷氧基胺”基为式-N(R^#)O-芳基或-NHO-芳基的基团，其中R^#如上所定义。

“烷基胺”基为式-NH-烷基或-N(烷基)₂的基团，其中每个烷基独立地如上所定义。

“氨基羰基”为式-C(＝O)N(R^#)₂、-C(＝O)NH(R^#)或-C(＝O)NH₂的基团，其中每个R^#如上所定义。

“酰基氨基”为式-NHC(＝O)(R^#)或-N(烷基)C(＝O)(R^#)的基团，其中每个烷基和R^#独立地如上所定义。

“O(烷基)氨基羰基”为式-O(烷基)C(＝O)N(R^#)₂、-O(烷基)C(＝O)NH(R^#)或-O(烷基)C(＝O)NH₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“N-氧化物”基团为式-N⁺-O^-的基团。

“羧基”为式-C(＝O)OH的基团。

“酮”基为式-C(＝O)(R^#)的基团，其中R^#如上所定义。

“醛”基为式-CH(＝O)的基团。

“酯”基为式-C(＝O)O(R^#)或-OC(＝O)(R^#)的基团，其中R^#如上所定义。

“脲”基为式-N(烷基)C(＝O)N(R^#)₂、-N(烷基)C(＝O)NH(R^#)、-N(烷基)C(＝O)NH₂、-NHC(＝O)N(R^#)₂、-NHC(＝O)NH(R^#)或-NHC(＝O)NH₂ ^#的基团，其中每个烷基和R^#独立地如上所定义。

“亚胺”基为式-N＝C(R^#)₂或-C(R^#)＝N(R^#)的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“酰亚胺”基为式-C(＝O)N(R#)C(＝O)(R^#)或-N((C＝O)(R^#))₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“氨基甲酸酯”基为式-OC(＝O)N(R^#)₂、-OC(＝O)NH(R^#)、-N(R^#)C(＝O)O(R^#)或-NHC(＝O)O(R^#)的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“脒”基为式-C(＝N(R^#))N(R^#)₂、-C(＝N(R^#))NH(R^#)、-C(＝N(R^#))NH₂、-C(＝NH)N(R^#)₂、-C(＝NH)NH(R^#)、-C(＝NH)NH₂、-N＝C(R^#)N(R^#)₂、-N＝C(R^#)NH(R^#)、-N＝C(R^#)NH₂、-N(R^#)C(R^#)＝N(R^#)、-NHC(R^#)＝N(R^#)、-N(R^#)C(R^#)＝NH或-NHC(R^#)＝NH的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“胍”基为式-N(R^#)C(＝N(R^#))N(R^#)₂、-NHC(＝N(R^#))N(R^#)₂、-N(R^#)C(＝NH)N(R^#)₂、-N(R^#)C(＝N(R^#))NH(R^#)、-N(R^#)C(＝N(R^#))NH₂、-NHC(＝NH)N(R^#)₂、-NHC(＝N(R^#))NH(R^#)、-NHC(＝N(R^#))NH₂、-NHC(＝NH)NH(R^#)、-NHC(＝NH)NH₂、-N＝C(N(R^#)₂)₂、-N＝C(NH(R^#))₂或-N＝C(NH₂)₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“烯胺”基为式-N(R^#)C(R^#)＝C(R^#)₂、-NHC(R^#)＝C(R^#)₂、-C(N(R^#)₂)＝C(R^#)₂、-C(NH(R^#))＝C(R^#)₂、-C(NH₂)＝C(R^#)₂、-C(R^#)＝C(R^#)(N(R^#)₂)、-C(R^#)＝C(R^#)(NH(R^#))或-C(R^#)＝C(R^#)(NH₂)的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“肟”基为式-C(＝NO(R^#))(R^#)、-C(＝NOH)(R^#)、-CH(＝NO(R^#))或-CH(＝NOH)的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“酰肼”基为式-C(＝O)N(R^#)N(R^#)₂、-C(＝O)NHN(R^#)₂、-C(＝O)N(R^#)NH(R^#)、-C(＝O)N(R^#)NH₂、-C(＝O)NHNH(R^#)₂或-C(＝O)NHNH₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“肼”基为式-N(R^#)N(R^#)₂、-NHN(R^#)₂、-N(R^#)NH(R^#)、-N(R^#)NH₂、-NHNH(R^#)₂或-NHNH₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“腙”基为式-C(＝N-N(R^#)₂)(R^#)₂、-C(＝N-NH(R^#))(R^#)₂、-C(＝N-NH₂)(R^#)₂、-N(R^#)(N＝C(R^#)₂)或-NH(N＝C(R^#)₂)的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“叠氮”基为式-N₃的基团。

“异氰酸酯”基为式-N＝C＝O的基团。

“异硫氰酸酯”基为式-N＝C＝S的基团。

“氰酸酯”基为式-OCN的基团。

“硫氰酸酯”基为式-SCN的基团。

“硫醚”基为式-S(R^#)的基团，其中R^#如上所定义。

“硫羰基”为式-C(＝S)(R^#)的基团，其中R^#如上所定义。

“亚磺酰基”为式-S(＝O)(R^#)的基团，其中R^#如上所定义。

“砜”基为式-S(＝O)₂(R^#)的基团，其中R^#如上所定义。

“磺酰基氨基”为式-NHSO₂(R^#)或-N(烷基)SO₂(R^#)的基团，其中每个烷基和R^#如上所定义。

“磺酰胺”基为式-S(＝O)₂N(R^#)₂或-S(＝O)₂NH(R^#)或-S(＝O)₂NH₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“膦酸酯”基为式-P(＝O)(O(R^#))₂、-P(＝O)(OH)₂、-OP(＝O)(O(R^#))(R^#)或-OP(＝O)(OH)(R^#)的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

“膦”基为式-P(R^#)₂的基团，其中每个R^#独立地如上所定义。

当本文所述的基团除烷基之外被描述为“取代的”时，它们可以被任何合适的取代基或多个取代基取代。取代基的说明性的实例是见于本文公开的示例性化合物和实施方式那些，以及卤素(氯、碘、溴或氟)；烷基；羟基；烷氧基；烷氧基烷基；氨基；烷基氨基；羧基；硝基；氰基；巯基；硫醚；亚胺；酰亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰基氨基；膦酸酯；膦；硫羰基；亚磺酰基；砜；磺酰胺；酮；醛；酯；脲；氨基甲酸酯；肟；羟胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；N-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；氧(═O)；B(OH)₂、O(烷基)氨基羰基；环烷基，其可以是单环或稠合或非稠合多环(例如，环丙基、环丁基、环戊基或环己基)或杂环基，其可以是单环或稠合或非稠合多环(例如，吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或噻嗪基)；单环或稠合或非稠合多环芳基或杂芳基(例如，苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、***基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、吖啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基)芳氧基；芳烷基氧基；杂环基氧基；和杂环基烷氧基。

如本文所使用，术语“药学上可接受的盐(或多种盐)”是指由药学上可接受的无毒酸或碱，包括无机酸和碱以及有机酸和碱制备的盐。适合的药学上可接受的碱加成盐包括但不限于铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌由制备的金属盐或由赖氨酸、N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)和普鲁卡因制备的有机盐。适合的无毒酸包括但不限于，无机和有机酸，如乙酸、藻酸、邻氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙烯磺酸、甲酸、富马酸、糠酸、半乳糖醛酸、葡糖酸、葡糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、氢溴酸、盐酸、羟乙基磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、扑酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、硫酸、酒石酸和对甲苯磺酸。具体的无毒酸包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和甲磺酸。具体的盐的实例包括盐酸和甲磺酸盐。其他是本领域熟知的，参见例如，Remington’sPharmaceuticalSciences,第18版,MackPublishing,EastonPA(1990)或Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,第19版,MackPublishing,EastonPA(1995)。

如本文所使用并且除非另外指出，术语“包合物”是指这样的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物或其盐，其呈包含其内捕获有客体分子(例如，溶剂或水)的空间(例如，通道)的晶格形式或其中TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物为客体分子的晶格形式。

如本文所使用并且除非另外指出，术语“溶剂化物”是指这样的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物或其盐，其还包括通过非共价分子间力结合的化学计量的或非化学计量的量的溶剂。在一种实施方式中，溶剂化物为水合物。

如本文所使用并且除非另外指出，术语“水合物”是指这样的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物或其盐，其还包括通过非共价分子间力结合的化学计量的或非化学计量的量的水。

如本文所使用并且除非另外指出，术语“前药”是指可以在生物条件下(体外或体内)水解、氧化或以另外方式反应以提供活性化合物，特别是TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物衍生物。前药的实例包括但不限于，TOR激酶抑制剂的衍生物和代谢物，其包括可生物水解的部分，如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯类似物。在某些实施方式中，具有羧基官能团的化合物的前药为羧酸的低级烷基酯。羧酸酯便利地通过酯化存在于分子上的任何羧酸部分形成。前药通常可以使用熟知的方法制备，如Burger’sMedicinalChemistryandDrugDiscovery第6版(DonaldJ.Abraham编辑,2001,Wiley)和DesignandApplicationofProdrugs(H.Bundgaard编辑,1985,HarwoodAcademicPublishersGmfh)描述的那些。

如本文所使用并且除非另外指出，术语“立体异构体”或“立体异构纯的”是指TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的一种立体异构体，其基本上不含该化合物的其他立体异构体。例如，具有一个手性中心的立体异构纯的化合物将基本上不含基本上不含该化合物的相反的对映异构体。具有两个手性中心的立体异构纯的化合物将基本上不含该化合物的其他非对映异构体。典型的立体异构纯的化合物包含大于约80重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约20重量％的该化合物的其他立体异构体，大于约90重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约10重量％的该化合物的其他立体异构体，大于约95重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约5重量％的该化合物的其他立体异构体或大于约97重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约3重量％的该化合物的其他立体异构体。TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物可以具有手性中心并且可以作为外消旋体、单个对映异构体或非对映异构体及其混合物存在。所有这样的异构形式均包括在本文公开的实施方式内，包括其混合物。这样的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的立体异构纯形式的用途，以及那些形式的混合物的用途包括在本文公开的实施方式中。例如，包含等量或不等量的特定TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的对映异构体的混合物可以用于本文公开的方法和组合物中。这些异构体可以不对称合成或使用标准技术如手性柱或手性拆分剂来拆分。参见例如，Jacques,J.,等人,Enantiomers,RacematesandResolutions(Wiley-Interscience,NewYork,1981)；Wilen,S.H.,等人,Tetrahedron33:2725(1977)；Eliel,E.L.,StereochemistryofCarbonCompounds(McGraw-Hill,NY,1962)；和Wilen,S.H.,TablesofResolvingAgentsandOpticalResolutionsp.268(E.L.Eliel,Ed.,Univ.ofNotreDamePress,NotreDame,IN,1972)。

还应注意，TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物可以包括E和Z异构体或其混合物，以及顺式和反式异构体或其混合物。在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物分离为顺式或反式异构体。在其他实施方式中，TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物是顺式和反式异构体的混合物。

“互变异构体”是指化合物的相互平衡的异构形式。异构形式的浓度将取决于化合物所处的环境并且可以根据例如化合物是固体还是有机或水溶液而不同的。例如，在水溶液中，吡唑可以显示以下异构形式，其称为彼此的互变异构体：

如本领域技术人员容易地理解的，各种官能团和其他结构可以显示互变异构性，并且TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的所有互变异构体在本发明的范围内。

还应注意TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物可以在一个或多个原子处包含非天然比例的原子同位素。例如，化合物可以用放射性同位素标记，所述放射性同位素例如氚(³H)、碘-125(¹²⁵I)、硫-35(³⁵S)或碳-14(¹⁴C)或可以同位素富集例如氘(²H)、碳-13(¹³C)或氮-15(¹⁵N)。如本文所使用，“同位素体”是同位素富集的化合物。术语“同位素富集”是指原子的同位素组成不同于该原子的天然同位素组成。“同位素富集”还可以指含有至少一个这样的原子的化合物，所述原子的同位素组成不同于该原子的天然同位素组成。术语“同位素组成”是指给定原子存在的每种同位素的量。放射性标记和同位素富集的化合物用作治疗剂，例如癌症和炎症治疗剂；研究试剂，例如结合分析试剂；和诊断剂，例如体内造影剂。本文所述的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的所有同位素变体，无论有放射性与否，均意在包括在本文提供的实施方式的范围内。在一些实施方式中，提供了TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的同位素体，例如，同位素体为氘、碳-13或氮-15富集的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物。

应注意，如果在描绘的结构与该结构的名称之间存在矛盾，则更多以描绘的结构为准。

如本文所使用的“治疗”是指完全或部分减轻癌症或与癌症相关的症状，或减缓或阻止那些症状的进一步进展或恶化。

如本文所使用的“预防”是指完全或部分预防癌症或其症状的发作、复发或扩散。

与TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物有关的术语“有效量”是指能够完全或部分减轻与癌症相关的症状或减缓或阻止那些症状的进一步进展或恶化，或治疗或预防患有癌症或具有患上癌症的风险的个体中的癌症的单独或组合量。例如在药物组合物中的TOR激酶抑制剂或5-取代喹唑啉酮化合物的有效量可以在将实现期望效果的水平下；例如，在用于经口及肠胃外给予的单位剂量中为约0.005mg/kg的个体体重至约100mg/kg的患者体重。

术语“癌症”包括但不限于血液或血源性肿瘤和实体瘤。血源性肿瘤包括淋巴瘤、白血病和骨髓瘤。淋巴瘤和白血病是出现在白血球中的恶性肿瘤。术语“癌症”还指以能够侵袭周围组织和转移至新的身***点的细胞增殖为特征的任意各种恶性瘤。良性和恶性肿瘤根据其存在的组织类型来分类。例如，纤维瘤是纤维***的瘤，黑色素瘤是色素(黑色素)细胞的异常生长。源自上皮组织，例如，皮肤、支气管和胃的恶性肿瘤，称为癌。例如发现于乳腺、***和结肠的上皮腺组织的恶性肿瘤称为腺癌。***，例如，肌肉、软骨、淋巴组织和骨的恶性生长称为肉瘤。通过转移过程，肿瘤细胞迁移至身体的其他区域在远离初始出现的位点处的区域中建立瘤。骨组织是恶性肿瘤转移的最有利的部位之一，其出现在所有癌症病例的约30％中。在恶性肿瘤中，肺癌、乳腺癌、***癌等尤其已知可能转移至骨中。

在瘤、癌症、肿瘤生长或肿瘤细胞生长的情况下，抑制尤其可以通过原发或继发性肿瘤的出现延迟、原发或继发性肿瘤的发展减缓、原发或继发性肿瘤的发生减少、疾病的继发效应的严重性减缓或降低、肿瘤生长停止和肿瘤消退来评估。在极端情况下，完全抑制，在本文中称为预防或化学预防。在该情况下，术语“预防”包括完全预防临床上明显的瘤形成的发作，或预防处于风险的个体的瘤形成的临床前明显阶段的发作。该定义还意在包括预防转化成恶性细胞或阻止或逆转恶化前细胞进展为恶性细胞。这包括预防性治疗处于发展为瘤形成的风险的个体的治疗。

本文所使用的术语“难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤”定义为使用包含抗CD-20抗体的方案，例如包含利妥昔单抗的方案治疗而(I)未实现对治疗的至少部分反应或(ii)在治疗的6个月内进展的B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。

本文所使用的术语“复发性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤”定义为在使用包含抗CD-20抗体的方案，例如包含利妥昔单抗的方案治疗后≥6个月后，在实现对治疗的部分反应或完全反应后进展的B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。

普通技术人员将理解，表示为“B细胞淋巴瘤”的疾病作为一系列疾病或障碍存在。虽然有时就“侵袭性”B细胞淋巴瘤或“惰性”B细胞淋巴瘤讨论该系列B细胞淋巴瘤，但普通技术人员将理解表示为惰性的B细胞淋巴瘤可以进展并变成侵袭性B细胞淋巴瘤。相反地，B细胞淋巴瘤的侵袭性形式可以降级为B细胞淋巴瘤的惰性或稳定形式。所提及的是本领域技术人员通常理解的惰性和侵袭性B细胞淋巴瘤，其中认为这样的特征具有内在动态并取决于个体的具体情况。

如本文所使用且除非另有规定，术语“与……组合”包括同时、共同或依序给予两种或更多种治疗剂而无具体时间限制，除非另外指出。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予，并且进一步与抗CD20抗体组合，所述抗CD20抗体例如利妥昔单抗(BiogenIdec/Genentech或Hoffmann-LaRoche)。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂与化合物A组合给予，并且另外与化合物AA组合给予。在一种实施方式中，药剂同时存在于细胞或个体的体内或同时发挥其生物或治疗作用。在一种实施方式中，治疗剂在相同的组合物或单位剂型中。在其他实施方式中，治疗剂在不同的组合物或单位剂型中。在某些实施方式中，第一药剂可以在给予第二治疗剂之前(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周前)，基本上与其同时或在其之后(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)或其任意组合给予。例如，在一种实施方式中，第一药剂可以在第二治疗剂之前，如1周前给予。在另一种实施方式中，第一药剂可以在第二治疗剂之前(例如1天前)给予，随后与第二治疗剂同时给予。

如本文所使用的术语“患者”和“个体”包括动物，包括但不限于动物如牛、猴、马、绵羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔或豚鼠，在一种实施方式中包括哺乳动物，在另一种实施方式中包括人类。在一种实施方式中，“患者”或“个体”是患有癌症的人类。

在癌症的情况下，抑制尤其可以通过抑制疾病进展、抑制肿瘤生长、减少原发性肿瘤、缓解肿瘤相关症状、抑制肿瘤分泌因子(包括肿瘤分泌激素，如导致类癌瘤综合征的那些)、原发性或继发性肿瘤的出现延迟、原发性或继发性肿瘤的发展减缓、原发性或继发性肿瘤的出现减少、疾病的继发性影响的严重性降低或减缓、肿瘤生长停止和肿瘤消退、疾病进展时间(TTP)增加、无进展生存率(PFS)增加、总生存率(OS)增加。如本文所使用的OS是指由于任何病因的从随机化到死亡的时间，并且在意图治疗的群体中测量。如本文所使用的TTP是指从随机化到客观肿瘤进展的时间；TTP不包括死亡。如本文所使用，PFS是指从随机化直到客观肿瘤进展或死亡的时间。在一种实施方式中，PFS率将使用Kaplan-Meier估计值来计算。在极端情况下，完全抑制在本文中称为预防或化学预防。在该情况下，术语“预防”包括完全预防临床上明显的晚期癌症的发作或预防癌症的临床前明显的阶段的发作。该定义还旨在包括预防转化成恶性细胞或阻止或逆转恶化前细胞进展成恶性细胞。这包括预防性治疗处于患上癌症的风险的那些。

在某些实施方式中，淋巴瘤的治疗可以由非霍奇金淋巴瘤(NHL)的国际研讨会标准(IWC)(参见ChesonBD,PfistnerB,Juweid,ME等人.RevisedResponseCriteriaforMalignantLymphoma.J.Clin.Oncol:2007:(25)579-586)，使用以下显示的反应和终点定义来评估：

缩写：CR，完全缓解；FDG，[¹⁸F]氟脱氧葡萄糖；PET，正电子发射断层摄影术；CT，计算机断层摄影术；PR，部分缓解；SPD，直径乘积总和；SD，稳定疾病；PD，进行性疾病。

缩写：CR：完全缓解；PR：部分缓解

在一种实施方式中，淋巴瘤的终点为临床益处的证据。临床益处可以反应生活质量的改善，或患者症状、输注需求、频繁感染或其他参数减少。到淋巴瘤相关症状的再现或进展的时间可以用于该终点中。

在某些实施方式中，CLL的治疗可以通过CLL的国际研讨会指南(参见HallekM,ChesonBD,CatovskyD,等人Guidelinesforthediagnosisandtreatmentofchroniclymphocyticleukemia:areportfromtheInternationalWorkshoponChronicLymphocyticLeukemiaupdatingtheNationalCancerInstitute-WorkingGroup1996guidelines.Blood,2008；(111)12:5446-5456)，使用其中显示的反应及终点定义来评估，具体为：

A组标准限定肿瘤负荷；B组标准限定造血***(或骨髓)的功能。CR(完全缓解)：必须满足所有标准，并且患者必须缺少疾病相关的体质症状s；PR(部分缓解)：必须满足A组的至少两个标准加上B组的一个标准；SD是无进行性疾病(PD)并不能实现至少一种PR；PD：必须满足以上A组或B组的标准中的至少一个。多个***的乘积之和(通过临床试验中的CT扫描或通过全科诊疗中的体格检查来评价)。这些参数对于一些反应类别是不相关的。

在某些实施方式中，多发性骨髓瘤的治疗可以通过多发性骨髓瘤的国际统一反应标准(IURC)(参见DurieBGM,HarousseauJ-L,MiguelJS等人.Internationaluniformresponsecriteriaformultiple骨髓瘤.Leukemia,2006；(10)10:1-7)，使用以下所示的反应和终点定义来评估：

缩写：CR，完全反应；FLC，游离轻链；PR，部分反应；SD，稳定疾病；sCR，严格完全反应；VGPR，非常好的部分反应；^a所有反应类别均需要在建立任何新治疗之前的任何时间进行的两个连续评估；如果进行了射线照相研究，所有类别也需要无已知的进行性或新的骨病变迹象。不需要以射线照相研究来满足这些反应要求；^b不需要用重复骨髓活检来证实；^c克隆细胞的存在/不存在基于κ/λ比。通过免疫组织化学和/或免疫荧光得到的异常κ/λ比需要最少100个浆细胞用于分析。反映异常克隆的存在的异常比例为κ/λ>4:1或<1:2。^d可测量的疾病由以下测量中的至少一种定义：骨髓浆细胞≥30％；血清M-蛋白≥1g/dl(≥10gm/l)[10g/l]；尿液M-蛋白≥200mg/24h；血清FLC分析：涉及的FLC水平≥10mg/dl(≥100mg/l)；条件是血清FLC比异常。

在某些实施方式中，癌症的治疗可以通过实体瘤反应评价标准(RECIST1.1)来评估(参见ThereasseP.等人.NewGuidelinestoEvaluatetheResponsetoTreatmentinSolidTumors.J.oftheNationalCancerInstitute；2000；(92)205-216和EisenhauerE.A.,TherasseP.,BogaertsJ.等人.Newresponseevaluationcriteriainsolidtumours:RevisedRECISTguideline(版本1.1).EuropeanJ.Cancer；2009；(45)228–247)。靶标和非靶标病变中的肿瘤反应与出现或不出现新病变的所有可能组合的总体反应如下：

靶标病变	非靶标病变	新病变	总体反应
				CR	CR	无	CR
CR	不完全反应/SD	无	PR
				PR	非-PD	无	PR
SD	非-PD	无	SD
				PD	任何	有或无	PD
任何	PD	有或无	PD
				任何	任何	有	PD

CR＝完全反应；PR＝部分反应；SD＝稳定疾病；和PD＝进行性疾病。

对于靶标病变的评价，完全反应(CR)是所有靶标病变消失；部分反应(PR)是以基线总最长直径作为参照，靶标病变的最长直径总和至少降低30％；进行性疾病(PD)是以从开始治疗或出现一个或多个新病变以来所记录的最小总最长直径作为参照，靶标病变的最长直径的总和至少增大20％；且稳定疾病(SD)为以从开始治疗以来所记录的最小总最长直径作为参照，既不足以降低至对部分反应合格，也不足以增大至对进行性疾病合格。

对于非靶标病变的评价，完全反应(CR)是所有非靶标病变消失且肿瘤标志物水平正常化；不完全反应/稳定疾病(SD)是一个或多个非靶标病变持续和/或肿瘤标志物水平维持在正常限度以上；进行性疾病(PD)是出现一个或多个新病变和/或现有的非靶标病变明确进展。

以下所述的程序、惯例和定义为实施神经肿瘤学反应评估(RANO)工作组关于高级神经胶质瘤的反应标准的建议提供指导(WenP.,Macdonald,DR.,Reardon,DA.等人.Updatedresponseassessmentcriteriaforhighgradegliomas:Responseassessmentinneuro-oncologyworkinggroup.JClinOncol2010；28:1963-1972)。针对时间点反应标准(TPR)的RANO标准的主要修改可以包括加入用于限定糖皮质激素剂量变化的操作惯例，并且个体的临床恶化组分的去除集中于目标放射学评估上。基线MRI扫描并定义为在手术后休息期结束时、在重新开始化合物治疗之前进行的评估。基线MRI用作用于评估完全反应(CR)和部分反应(PR)的参考。然而，在基线处或在随后的评估中获得的最小SPD(垂直直径乘积的总和)将命名为最低点评估并用作用于测定进展的参考。在任何方案限定的MRI扫描的前5天，个体不接受糖皮质激素或接受稳定剂量的糖皮质激素。稳定剂量被定义为在MRI扫描之前连续5天的相同每日剂量。如果开具的糖皮质激素剂量在基线扫描前5天内变化，则需要糖皮质激素使用满足上述标准的新的基线扫描。将使用以下定义。

可测量的病变：可测量的病变是可以二维地测量的对比增强病变。测量由最大增强肿瘤直径(也称为最长直径，LD)组成。最大垂直直径在同一影象上测量。二维测量的十字线应交叉且将计算这些直径的乘积。

最小直径：T1-加权影像，其中各部分为5mm，具有1mm空白。可测量的病变的最小LD设置为5mm乘5mm。入选和/或命名为靶标病变可以需要更大的直径。在基线后，变得比测量的最低要求更小或变得不再可经受二维测量的靶标病变将在5mm的缺省值下针对5mm以下的每个直径记录。消失的病变将记录为0mm乘0mm。

多中心病变：被视为多中心(与连续相对)的病变为其中在两个(或多个)病变之间有正常介入脑组织的病变。对于具有离散的增强病灶的多中心病变，方法为分别测量满足入选标准的每个增强病变。如果在两个(或多个)病变之间没有正常脑组织，则将其视为相同病变。

不可测量的病变：不满足如上定义的可测量的疾病的标准的所有病变，以及所有非增强和其他真正不可测量的病变将被视为不可测量的病变。不可测量的病变包括小于规定的最小直径(即，小于5mm乘5mm)的增强的病灶、非增强病变(例如，如在T1加权对比后、T2加权或流体衰减反转恢复(FLAIR)影像上所见的)、出血性或显著囊性或坏死性病变及软脑膜肿瘤。出血性病变通常具有固有T1加权高信号，岂可曲解为增强肿瘤，且出于该原因，可以检查对比前T1加权影像以排除基线或区间亚急性出血。

在基线处，病变将如下分类：靶标病变：高达5个可测量的病变可以选作靶标病变，其各自测量为至少10mm乘5mm，代表个体的疾病；非靶标病变：所有其他病变，包括所有不可测量的病变(包括质量效应和T2/FLAIR结果)和未选作靶标病变的任何可测量的病变。在基线处，靶标病变将如可测量的病变的定义中所述进行测量，并且测定所有靶标病变的SPD。所有其他病变的存在将进行证明。在所有治疗后评价下，病变作为靶标和非靶标病变的基线分类将保持，并且病变将以随时间推移一致的方式证明和描述(例如，以源文件和eCRF的相同顺序记录)。所有可测量的和不可测量的病变在研究的持续过程中必须使用与在基线处相同的技术评估(例如，个体应在相同的MRI扫描仪上或至少使用相同的磁强度成像)以降低解释变化的困难。在每次评估时，将测量靶标病变并计算SPD。将分别定性评估非靶标病变并且将证明新病变(如果有的话)。在每次评价时，将针对靶标病变、非靶标病变和新病变测定时间点反应。即使仅评估病变的子集，也可以确定肿瘤进展。然而，除非观察到进展，否则当评估所有病变时才可以测定目标状态(稳定疾病、PR或CR)。

CR和PR的总体时间点反应的证实评估将在下一个定期评估中进行，但如果扫描具有<28天的间隔，则可以不进行确证。最佳反应与证实要求一起将来自该系列时间点。

在某些实施方式中，癌症的治疗可以通过在使用TOR激酶抑制剂治疗之前、过程中和/或之后的循环血液和/或肿瘤细胞和/或皮肤活检或肿瘤活检/吸出物中的S6RP、4E-BP1、AKT和/或DNA-PK的磷酸化的抑制来评估。例如，S6RP、4E-BP1、AKT和/或DNA-PK的磷酸化的抑制在B细胞、T细胞和/或单核细胞中评估。在其他实施方式中，癌症的治疗可以通过在使用TOR激酶抑制剂治疗之前、过程中和/或之后的皮肤样品和/或肿瘤活检/吸出物中的DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)活性的抑制来评估，如通过评估作为DNA损伤路径的生物标志物的pDNA-PKS2056的量来评估。在一种实施方式中，皮肤样品通过UV光照射。

在极端情况下，完全抑制在本文中称为预防或化学预防。在该情况下，术语“预防”包括完全预防临床上明显的癌症的发作或预防实体瘤的临床前明显阶段的发作。该定义还旨在包括预防转化为恶性细胞的或阻止或逆转恶化前细胞进展为恶性细胞。这包括预防性治疗具有患上癌症的风险的那些。

生物学标志物或“生物标志物”为其检测表明特定的生物状态(例如，癌症的存在)的物质。在一些实施方式中，生物标志物可以单独测定或几种生物标志物可以同时测量。

在一些实施方式中，”生物标志物”表明与疾病的风险或进展相关或与该疾病对给定治疗的敏感性相关的mRNA表达水平的变化。在一些实施方式中，生物标志物为核酸，如mRNA或cDNA。

在另外的实施方式中，“生物标志物”表明可以与疾病的风险、对治疗的敏感性或进展相关的多肽或蛋白表达水平的变化。在一些实施方式中，生物标志物可以是多肽或蛋白或其片段。具体蛋白的相对水平可以通过本领域已知的方法测定。例如，抗体基方法，如免疫印迹、酶联免疫吸附分析(ELISA)或其他方法可以使用。

术语“小脑肽”或“CRBN”及类似术语是指包含任何CRBN，如人类CRBN蛋白(例如，人类CRBN同工型1，GenBank登记号NP_057386；或人类CRBN同工型2，GenBank登记号NP_001166953，其各自的全部内容以引用方式并入本文)的氨基酸序列的多肽(“多肽”、“肽”和“蛋白”在本文中可互换使用)和相关多肽，包括其SNP变体。相关CRBN多肽包括等位基因变体(例如，SNP变体)；剪接变体；片段；衍生物；取代、缺失和***变体；融合多肽；和种间同系物，其在某些实施方式中保留CRBN活性和/或足以产生抗CRBN免疫反应。

如本文所使用，术语“小脑肽相关蛋白”或“CRBN相关蛋白”是指直接或间接与CRBN相互作用或结合的蛋白。例如，术语是指直接结合到小脑肽的任何蛋白，以及作为小脑肽通路的间接下游效应器的任何蛋白。在某些实施方式中，”小脑肽相关蛋白”或“CRBN相关蛋白”为CRBN的底物，例如，涉及CRBN的E3泛素连接酶复合物的蛋白底物或其下游底物。在一种实施方式中，本文提供的CRBN相关蛋白为CRBN的底物，如IKZF3，也称为“Aiolos”，和/或IKZF1，也称为“Ikaros”。在某些实施方式中，”小脑肽相关蛋白”或“CRBN相关蛋白”为CRBN的结合蛋白。

术语“CRBN抗原”是指抗体所免疫特异性结合的CRBN多肽的部分。CRBN抗原也指抗体所免疫特异性结合的CRBN多肽的类似物或衍生物或其片段。能够引发免疫反应的在CRBN抗原表面上的局部区域为CRBN“表位”。起到表位作用的CRBN多肽的区域可以是多肽的连续氨基酸，或表位可以由多肽的两个或多个非连续区域一起形成。表位可以为或不为抗原的三维表面特征。

如本文所使用，术语“抗体”或语法变形(即多种抗体)是指能够结合到表位的多肽(或多种多肽)。在一些实施方式中，抗体是全长抗体。在一些实施方式中，抗体小于全长(即抗体片段)但包含至少一个结合位点。在一些这样的实施方式中，结合位点包含至少一条，优选地至少两条具有抗体可变区的结构的序列。在一些实施方式中，术语“抗体”包括具有与免疫球蛋白结合域同源或大体上同源的结合域的任何蛋白。在具体的实施方式中，术语“抗体”包括具有显示与免疫球蛋白结合域有至少99％的同一性的结合域的多肽。在一些实施方式中，抗体是具有显示与免疫球蛋白结合域有至少70％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的同一性的结合域的任何蛋白。根据本发明的抗体多肽可以通过任何可用的手段制备，包括例如，从天然来源或抗体文库分离、在宿主***中或使用宿主***重组制备、化学合成等或其组合。在一些实施方式中，抗体是单克隆的或多克隆的。在一些实施方式中，抗体可以是任何免疫球蛋白类别，包括任何人类类别IgG、IgM、IgA、IgD和IgE的成员。在某些实施方式中，抗体是IgG免疫球蛋白类别的成员。在一些实施方式中，术语“抗体”是指具有结合至感兴趣的表位的能力的抗体的任何衍生物。在一些实施方式中，抗体片段包含多个例如通过二硫键连接在一起的链。在一些实施方式中，抗体为人类抗体。在一些实施方式中，抗体为人源化抗体。在一些实施方式中，人源化抗体包括含有源自非人类免疫球蛋白的最小序列的嵌合免疫球蛋白、免疫球蛋白链或抗体片段(Fv、Fab、Fab’、F(ab’)₂或抗体的其他抗原结合子序列)。在一些实施方式中，人源化抗体是人类免疫球蛋白(受体抗体)，其中来自受体的互补决定区(CDR)的残基被来自具有期望的特异性、亲和力和能力的非人类物种(供体抗体)如小鼠、大鼠或兔的CDR的残基替代。在具体的实施方式中，用于本发明的抗体结合到CD20的特定表位。在一些实施方式中，抗CD20抗体结合的CD20的表位包括例如，170ANPS173(Binder等人,Blood2006,108(6):1975-1978)、FMC7(Deans等人,Blood2008,111(4):2492)、Rp5-L和Rp15-C(CD20的模拟表位)(Perosa等人,J.Immunol.2009,182:416-423)、182YCYSI185(Binder等人,Blood2006,108(6):1975-1978)和WEWTI(182YCYSI185的模拟物)(Binder等人,Blood2006,108(6):1975-1978)。在一些实施方式中，抗CD20抗体具有的针对CD20的表位的结合亲和力(Kd)小于12nM、小于11nM、小于10nM、小于9nM、小于8nM、小于7nM、小于6nM、小于5nM、小于4nM、小于3nM、小于2nM或小于1nM。

术语“免疫特异性结合于CRBN抗原的抗体”、“免疫特异性结合于CRBN表位的抗体”、“CRBN抗体”、“抗CRBN抗体”和类似术语也可以在本文中互换使用，并指代特异性结合于CRBN多肽，如CRBN抗原或表位(例如，肽65-76人类CRBN)的抗体和其片段。抗体包括特异性结合于CRBN多肽的改性抗体(即，包含改性的IgG(例如，IgG1)恒定区的抗体)和未改性的抗体(即，不包含改性的IgG(例如，IgG1)恒定区的抗体。免疫特异性结合于CRBN抗原的抗体或其片段可以与相关抗原交叉反应。在某些实施方式中，免疫特异性结合于CRBN抗原的抗体或其片段不与其他抗原交叉反应。免疫特异性结合于CRBN抗原的抗体或其片段可以例如通过免疫分析、BIAcore或本领域技术人员已知的其他技术确定。当抗体或其片段以高于任何交叉反应性抗原的亲和力结合于CRBN抗原时，其特异性结合于CRBN抗原，所述亲和力使用实验技术，如放射免疫分析(RIA)和酶联免疫吸附分析(ELISA)测定。通常，特异性或选择性反应将为至少两倍背景信号或噪声，并且更通常大于10倍背景，参见例如，Paul,ed.,1989,FundamentalImmunology第二版,RavenPress,NewYork第332-336页关于抗体特异性的讨论。

如本文所使用，术语“生物仿制药”(例如，批准的参考产品/生物药物，如蛋白治疗剂、抗体等的生物仿制药)是指基于来自以下的数据类似于参考产品的生物产品(a)证明该生物产品与参考产品高度类似但临床无活性组分存在较小差异的分析性研究；(b)动物研究(包括毒性的评估)；和/或(c)足以在一种或多种批准和意图使用参考产品以及寻求批准的合适的使用条件下证明安全性、纯度和效力(例如，生物产品和参考产品之间关于产品的安全性、纯度和效力的临床上有意义的差异)的一项或多项临床研究(包括评估免疫原性和药代动力学或药效学)。

在一些实施方式中，生物相似的生物产品和参考产品利用提议的标签中规定、推荐或建议的一种或多种使用条件的相同的一种或多种作用机制，但其程度仅限于该参考产品已知的一种或多种作用机制。在一些实施方式中，提议的标签中规定、推荐或建议的针对生物产品的一种或多种条件先前已针对参考产品被批准。在一些实施方式中，给予途径、剂型和/或生物产品的优势与参考产品的那些相同。在一些实施方式中，制造、加工、包装或容纳生物产品的设备满足为确保该生物产品仍然安全、纯净及有效而设计的标准。参考产品可以在美国、欧洲或日本中的至少一个得到批准。生物仿制药可以是例如目前已知的抗体，其具有与市售抗体相同的一级氨基酸序列，但可以在不同的细胞类型或中制备或通过不同的生产、纯化或配制方法制备。

5.2TOR激酶抑制剂

本文提供的化合物通常称为“TOR激酶抑制剂”。在一个方面中，TOR激酶抑制剂不包括雷帕霉素或雷帕霉素类似物(雷帕类似物(rapalog))。

在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂包括具有下式(I)的化合物：

及其药学上可接受的盐、包合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢物、同位素体和前药，其中：

R¹为取代或未取代的C_1-8烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基或取代或未取代的杂环基烷基；

R²为H、取代或未取代的C_1-8烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的杂环基烷基、取代或未取代的芳烷基或取代或未取代的环烷基烷基；

R³为H或取代或未取代的C_1-8烷基，

其中在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂不包括如下所述的7-(4-羟基苯基)-1-(3-甲氧基苄基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮：

在式(I)化合物的一些实施方式中，R¹为取代或未取代的芳基或取代或未取代的杂芳基。例如，R¹为苯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、吲唑基、吲哚基、1H-咪唑并[4,5-b]吡啶基、1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮基、3H-咪唑并[4,5-b]吡啶基或吡唑基，其各自任选地被取代。在一些实施方式中，R¹为被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的苯基：取代或未取代的C_1-8烷基(例如，甲基)、取代或未取代的杂环基(例如，取代或未取代的***基或吡唑基)、氨基羰基、卤素(例如，氟)、氰基、羟烷基和羟基。在其他实施方式中，R¹为被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的吡啶基：取代或未取代的C_1-8烷基(例如，甲基)、取代或未取代的杂环基(例如，取代或未取代的***基)、卤素、氨基羰基、氰基、羟烷基(例如，羟基丙基)、-OR和-NR₂，其中每个R独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基。在一些实施方式中，R¹为任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基或苯并咪唑基：取代或未取代的C_1-8烷基和-NR₂，其中R独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基。

在一些实施方式中，R¹为

其中R在每次出现时独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基(例如，甲基)；R’在每次出现时独立地为取代或未取代的C_1-4烷基(例如，甲基)、卤素(例如，氟)、氰基、-OR或-NR₂；m为0-3；n为0-3。本领域技术人员应理解，任何取代基R’可以连接至稠环***中的任何环的任何适合的原子。

在式(I)化合物的一些实施方式中，R¹为

其中R在每次出现时独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基；R’在每次出现时独立地为取代或未取代的C_1-4烷基、卤素、氰基、-OR或-NR₂；m为0-3；以及n为0-3。

在式(I)化合物的一些实施方式中，R²为H、取代或未取代的C_1-8烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的C_1-4烷基-杂环基、取代或未取代的C_1-4烷基-芳基或取代或未取代的C_1-4烷基-环烷基。例如，R²为H、甲基,乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、环戊基、环己基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、(C_1-4烷基)-苯基、(C_1-4烷基)-环丙基、(C_1-4烷基)-环丁基、(C_1-4烷基)-环戊基、(C_1-4烷基)-环己基、(C_1-4烷基)-吡咯烷基、(C_1-4烷基)-哌啶基、(C_1-4烷基)-哌嗪基、(C_1-4烷基)-吗啉基、(C_1-4烷基)-四氢呋喃基或(C_1-4烷基)-四氢吡喃基，其各自任选地被取代。

在其他实施方式中，R²为H、C_1-4烷基、(C_1-4烷基)(OR)、

其中R在每次出现时独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基(例如，甲基)；R’在每次出现时独立地为H、-OR、氰基或取代或未取代的C_1-4烷基(例如，甲基)；以及p为0-3。

在式(I)化合物的其他实施方式中，R²为H、C_1-4烷基、(C_1-4烷基)(OR)、

其中R在每次出现时独立地为H或取代或未取代的C_1-2烷基；R’在每次出现时独立地为H、-OR、氰基或取代或未取代的C_1-2烷基；以及p为0-1。

在式(I)化合物的其他实施方式中，R³为H。

在本文所述的一些这样的实施方式中，R¹为取代或未取代的芳基或取代或未取代的杂芳基。例如，R¹为苯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、吲唑基、吲哚基、1H-咪唑并[4,5-b]吡啶、吡啶基、1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3H)-酮基、3H-咪唑并[4,5-b]吡啶基或吡唑基，其各自任选地被取代。在一些实施方式中，R¹为被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的苯基：取代或未取代的C_1-8烷基、取代或未取代的杂环基、氨基羰基、卤素、氰基、羟烷基和羟基。在其他实施方式中，R¹为被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的吡啶基：C_1-8烷基、取代或未取代的杂环基、卤素、氨基羰基、氰基、羟烷基、-OR和-NR₂，其中每个R独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基。在再其他的实施方式中，R¹为任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代的1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基或苯并咪唑基：取代或未取代的C_1-8烷基和-NR₂，其中R独立地为H或取代或未取代的C_1-4烷基。

在某些实施方式中，式(I)化合物具有本文所述的R¹基团以及本文所述的R²基团。

在式(I)化合物的一些实施方式中，化合物抑制TOR激酶。在式(I)化合物的其他实施方式中，化合物抑制DNA-PK。在式(I)化合物的某些实施方式中，化合物抑制TOR激酶和DNA-PK两者。

在式(I)化合物的一些实施方式中，浓度为10μM的化合物抑制TOR激酶、DNA-PK、PI3K或其组合至少约50％。式(I)化合物在任何适合的分析***中可以显示为以上激酶的抑制剂。

代表性的式(I)TOR激酶抑制剂包括来自表A的化合物。

表A.

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-((反式-4-甲氧基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(顺式-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-((顺式-4-甲氧基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-乙基-7-(1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-((顺式-4-甲氧基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-苯并[d]咪唑-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-((反式-4-甲氧基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-((反式-4-羟基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(顺式-4-羟基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(顺式-4-羟基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-乙基-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-((顺式-4-羟基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吲哚-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-((反式-4-羟基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-((顺式-4-羟基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(反式-4-羟基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(反式-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(反式-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(反式-4-羟基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-异丙基-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-乙基-7-(5-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-羟基吡啶-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-异丙基-7-(4-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

5-(8-异丙基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)-4-甲基吡啶酰胺；

7-(1H-吲唑-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-氨基嘧啶-5-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-氨基吡啶-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-羟基吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-(1H-吡唑-3-基)苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吲唑-4-基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吲唑-6-基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(嘧啶-5-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(2-甲氧基乙基)-7-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-乙基-7-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-乙基-7-(1H-吲唑-4-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(吡啶-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-氨基吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-甲基-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

2-(2-羟基丙烷-2-基)-5-(8-(反式-4-甲氧基环己基)-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)吡啶1-氧化物；

4-甲基-5-(7-氧代-8-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)吡啶酰胺；

5-(8-((顺式-4-甲氧基环己基)甲基)-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)-4-甲基吡啶酰胺；

7-(1H-吡唑-4-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(反式-4-甲氧基环己基)-7-(4-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

3-((7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-2-氧代-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-1(2H)-基)甲基)苯甲腈；

1-((反式-4-甲氧基环己基)甲基)-7-(4-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

3-(7-氧代-8-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)苯甲酰胺；

5-(8-((反式-4-甲氧基环己基)甲基)-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)-4-甲基吡啶酰胺；

3-((7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-2-氧代-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-1(2H)-基)甲基)苯甲腈；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((1R,3R)-3-甲氧基环戊基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((1S,3R)-3-甲氧基环戊基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((1S,3S)-3-甲氧基环戊基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((1R,3S)-3-甲氧基环戊基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吲唑-6-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(2-吗啉基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(反式-4-羟基环己基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(顺式-4-羟基环己基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(2-吗啉基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-异丙基-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-((顺式-4-甲氧基环己基)甲基)-7-(2-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(反式-4-羟基环己基)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(顺式-4-羟基环己基)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

4-(7-氧代-8-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2-基)苯甲酰胺；

7-(1H-吲唑-5-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-((1S,3R)-3-甲氧基环戊基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-((1R,3R)-3-甲氧基环戊基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-((1R,3S)-3-甲氧基环戊基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-((1S,3S)-3-甲氧基环戊基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吲哚-5-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-乙基-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(1H-吲哚-6-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-(2-羟基丙烷-2-基)苯基)-1-(反式-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-((反式-4-甲氧基环己基)甲基)-7-(2-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((顺式-4-甲氧基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(2-甲氧基乙基)-7-(4-甲基-2-(甲基氨基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(7-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-甲基-4-(4H-1,2,4-***-3-基)苯基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(2-甲氧基乙基)-7-(4-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-苄基7-(2-甲基-4-(4H-1,2,4-***-3-基)苯基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(3-氟-4-(4H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(3-氟-4-(4H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(3-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(反式-4-甲氧基环己基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(反式-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(5-氟-2-甲基-4-(4H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(3-氟-2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(2-甲氧基乙基)-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((反式-4-甲氧基环己基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(环戊基甲基)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-(2-羟基丙烷-2-基)苯基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

(S)-7-(6-(1-羟基乙基)吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

(R)-7-(6-(1-羟基乙基)吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-(2-羟基丙烷-2-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(3-(三氟甲基)苄基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(3-甲氧基丙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(2-甲氧基乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-甲基-2-(甲基氨基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-氨基-4-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

(R)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

(S)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3,3-二甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-氨基-4-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(2-甲基-4-(1H-1,2,4-***-3-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

7-(4-(1H-1,2,4-***-5-基)苯基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；

1-(1-羟基丙烷-2-基)-7-(2-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮；和

1-(2-羟基乙基)-7-(2-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮，

及其药学上可接受的盐、包合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢物、同位素体和前药。

5.3制备TOR激酶抑制剂的方法

可通过标准的熟知的合成方法来获得TOR激酶抑制剂，参见例如，March,J.Advanced或ganicChemistry；ReactionsMechanisms,andStructure,第4版,1992。用于制备式(III)化合物及其中间体的起始原料有市售或可以使用已知的合成方法和试剂由市售材料制备。

用于制备式(I)化合物的具体方法公开于2012年7月颁发的第8,110,578号美国专利和2013年10月29日颁发的第8,569,494号美国专利，将其各自的全部内容以引用方式并入本文。

5.45-取代喹唑啉酮化合物

在本文提供的的方法和组合物中与TOR激酶抑制剂组合的化合物在本文中统称为“5-取代喹唑啉酮化合物”。本文提供的具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于，化合物如在第7,635,700号美国专利和2012年9月13日公开的第2012/0230983号美国专利公开中描述的那些，将其各自的全部内容以引用方式并入本文。在一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(I)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R¹为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或-(CH₂)_nNHR^a，其中R^a为：氢；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；-C(O)-(CH₂)_n-NR^bR^c，其中R^b和R^c各自独立地为：氢；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基；或-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

R²为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R³为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(II)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R⁴为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；

R⁵为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R⁶为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R⁴为氢。在另一种实施方式中，R⁴为卤素。在另一种实施方式中，R⁴为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R⁴为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R⁴为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。

在一种实施方式中，R⁵为氢。在另一种实施方式中，R⁵为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R⁵为苯基。在另一种实施方式中，R⁵为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R⁵为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R⁶为氢。在另一种实施方式中，R⁶为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的化合物包括上述R⁴、R⁵、R⁶和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R⁴为甲基。在另一种实施方式中，R⁴为甲氧基。在另一种实施方式中，R⁴为-CF3。在另一种实施方式中，R⁴为F或Cl。

在另一种具体的实施方式中，R⁵为甲基。在另一种实施方式中，R⁵为-CF3。

5-取代喹唑啉酮化合物的具体实例包括但不限于来自表B的那些：

表B.

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(III)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R^d为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；

-C(O)-(CH₂)_n-NR^eR^f，其中R^e和R^f各自独立地为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；或

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或

-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基。

R⁷为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R⁸为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R^d为氢。在另一种实施方式中，R^d为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^d为-C(O)-(C₁-C₈)烷基。在另一种实施方式中，R^d为-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)。在另一种实施方式中，R^d为-C(O)-(CH₂)_n-NR^eR^f，其中R^e和R^f如上文所述。在另一种实施方式中，R^d为-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R⁷为氢。在另一种实施方式中，R⁷为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R⁷为苯基。在另一种实施方式中，R⁷为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R⁷为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R⁸为氢。在另一种实施方式中，R⁸为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R^d、R⁷、R⁸和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R⁷为甲基。在另一种实施方式中，R^d为-C(O)-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^d为NH₂。在另一种实施方式中，R^d为-C(O)-CH₂-O-(C₁-C₆)烷基。

5-取代喹唑啉酮化合物的具体实例包括但不限于来自表C的那些：

表C

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮盐酸盐。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，所述5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，所述5-取代喹唑啉酮化合物为

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(IV)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R^g为

-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-NHR^h，其中R^h为：

任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或

-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

R⁹为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R¹⁰为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R^g为-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地如上所述被取代。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-NHR^h，其中R^h为任选地如上所述取代的6至10元芳基。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。

在一种实施方式中，R⁹为氢。在另一种实施方式中，R⁹为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R⁹为苯基。在另一种实施方式中，R⁹为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R⁹为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R¹⁰为氢。在另一种实施方式中，R¹⁰为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R^g、R⁹、R¹⁰和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R⁹为甲基。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-苯基或-C(O)-CH₂-苯基，其中所述苯基任选地被甲基、-CF₃和/或卤素取代。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-NH-苯基，其中所述苯基任选地被甲基、-CF₃和/或卤素取代。

具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于来自表D的那些：

表D.

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

本文提供的具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于，6-、7-或8-取代的喹唑啉酮化合物，如描述于第US2009/0093504号美国专利申请公开中的那些，将其全部内容以引用方式并入本文。在一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(V)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R¹为氢；

每个R²、R³和R⁴独立地为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或-(CH₂)_nNHR^a，其中R^a为：氢；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，所述烷基自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，所述烷氧基自身任选地被一个或多个卤素取代；-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；-C(O)-(CH₂)_n-NR^bR^c，其中R^b和R^c各自独立地为：氢；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基；或C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；或R¹-R⁴中的两个可以一起形成任选地被以下一个或多个取代的5或6元环：卤素；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；

R⁵为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R⁶为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(VI)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R⁷为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；(C₁-C₆)烷氧基、任选地被一个或多个卤素取代的；或-(CH₂)_nNHR^d，其中R^d为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；

-C(O)-(CH₂)_n-NR^eR^f，其中R^e和R^f各自独立地为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或

任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基；或

-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

R⁸为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R⁹为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(VII)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R¹⁰为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；

R¹¹为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R¹²为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R¹⁰为氢。在另一种实施方式中，R¹⁰为卤素。在另一种实施方式中，R¹⁰为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹⁰为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹⁰为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。

在一种实施方式中，R¹¹为氢。在另一种实施方式中，R¹¹为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹¹为苯基。在另一种实施方式中，R¹¹为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹¹为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R¹²为氢。在另一种实施方式中，R¹²为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R¹⁰、R¹¹、R¹²和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R¹⁰为卤素。在另一种实施方式中，R¹⁰为羟基。在另一种实施方式中，R¹⁰为甲基。

在另一种具体的实施方式中，R¹¹为氢。在另一种实施方式中，R¹¹为甲基。

在另一种具体的实施方式中，R¹²为氢。在另一种实施方式中，R¹²为甲基。

具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于来自表E的那些：

表E.

在另一种实施方式中，本文提供了式(VIII)的5-取代喹唑啉酮化合物：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R^g为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；

-C(O)-(CH₂)_n-NR^hRⁱ，其中R^h和Rⁱ各自独立地为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或

任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基；或

-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

R¹³为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R¹⁴为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R^g为氢。在另一种实施方式中，R^g为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^g为-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地如上所述被取代。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-NR^hRⁱ，其中R^h和Rⁱ如上所述。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。

在一种实施方式中，R¹³为氢。在另一种实施方式中，R¹³为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹³为苯基。在另一种实施方式中，R¹³为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹³为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R¹⁴为氢。在另一种实施方式中，R¹⁴为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R^g、R¹³、R¹⁴和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R^g为氢，并且n为0或1。在另一种实施方式中，R^g为-C(O)-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^g为任选地被一个或多个甲基、卤素和/或(C₁-C₆)烷氧基取代的-C(O)-苯基。

在另一种具体的实施方式中，R¹³为甲基。在另一种实施方式中，R¹⁴为氢。

具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于来自表F的那些：

表F.

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(IX)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R¹⁵为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或-(CH₂)_nNHR^j，其中R^j为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；

-C(O)-(CH₂)_n-NR^kR^l，其中R^k和R^l各自独立地为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或

任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基；或

-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

R¹⁶为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R¹⁷为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R¹⁵为氢。在另一种实施方式中，R¹⁵为卤素。在另一种实施方式中，R¹⁵为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹⁵为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹⁵为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。

在一种实施方式中，R¹⁵为-(CH₂)_nNHR^j。在一种实施方式中，其中R¹⁵为-(CH₂)_nNHR^j，R^j为氢。在另一种实施方式中，R^j为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^j为-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。在另一种实施方式中，R^j为-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地如上所述被取代。在另一种实施方式中，R^j为-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代。在另一种实施方式中，R^j为-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)。在另一种实施方式中，R^j为-C(O)-(CH₂)_n-NR^kR^l，其中R^k和R^l如上所述。在另一种实施方式中，R^j为-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^j为-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。

在一种实施方式中，R¹⁶为氢。在另一种实施方式中，R¹⁶为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹⁶为苯基。在另一种实施方式中，R¹⁶为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹⁶为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R¹⁷为氢。在另一种实施方式中，R¹⁷为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R¹⁵为甲基。在另一种实施方式中，R¹⁵为卤素。在另一种实施方式中，R¹⁵为-CF₃。在另一种实施方式中，R¹⁵为-(CH₂)_nNHR^j。

在一种具体的实施方式中，其中R¹⁵为-(CH₂)_nNHR^j，R^j为氢，且n为0或1。在另一种实施方式中，其中R¹⁵为-(CH₂)_nNHR^j，R^j为-C(O)-(O)-(C₁-C₆)烷基。

在一种具体的实施方式中，R¹⁶为氢。在另一种实施方式中，R¹⁶为甲基。在另一种具体的实施方式中，R¹⁷为氢或甲基。

具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于来自表G的那些：

表G.

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(X)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R¹⁸为：氢；卤素；-(CH₂)_nOH；(C₁-C₆)烷基、任选地被一个或多个卤素取代的；(C₁-C₆)烷氧基、任选地被一个或多个卤素取代的；或

-(CH₂)_nNHR^m，其中R^m为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地被以下一个或多个取代：卤素；-SCF₃；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)；

-C(O)-(CH₂)_n-NRⁿR^o，其中Rⁿ和R^o各自独立地为：

氢；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或

任选地被以下一个或多个取代的6至10元芳基：卤素；(C₁-C₆)烷基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或(C₁-C₆)烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；

-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基；或

-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)；

R¹⁹为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R²⁰为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R¹⁸为氢。在另一种实施方式中，R¹⁸为卤素。在另一种实施方式中，R¹⁸为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹⁸为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹⁸为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。

在一种实施方式中，R¹⁸为-(CH₂)_nNHR^m。在一种实施方式中，其中R²⁸为-(CH₂)_nNHR^s，R^s为氢。在另一种实施方式中，R^m为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^m为-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。在另一种实施方式中，R^m为-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元芳基)或-C(O)-(CH₂)_n-(6至10元杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基任选地如上所述被取代。在另一种实施方式中，R^s为-C(O)-(C₁-C₈)烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代。在另一种实施方式中，R^m为-C(O)-(CH₂)_n-(C₃-C₁₀-环烷基)。在另一种实施方式中，R^m为-C(O)-(CH₂)_n-NRⁿR^o，其中Rⁿ和R^o如上所述。在另一种实施方式中，R^m为-C(O)-(CH₂)_n-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R^m为-C(O)-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-(6至10元芳基)。

在一种实施方式中，R¹⁹为氢。在另一种实施方式中，R¹⁹为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R¹⁹为苯基。在另一种实施方式中，R¹⁹为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R¹⁹为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R²⁰为氢。在另一种实施方式中，R²⁰为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R¹⁸、R¹⁹、R²⁰和n的任意组合。

在一种具体的实施方式中，R¹⁸为甲基。在另一种实施方式中，R¹⁸为卤素。在另一种实施方式中，R¹⁸为羟基。在另一种实施方式中，R¹⁸为-CF₃。

在一种具体的实施方式中，R¹⁹为氢。在另一种实施方式中，R¹⁹为甲基。在另一种具体的实施方式中，R²⁰为氢。

具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于来自表H的那些：

表H.

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

在另一种实施方式中，代表性的5-取代喹唑啉酮化合物具有式(XI)：

及其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体，其中：

R²¹为氢；

R²²、R²³和R²⁴各自独立地为：卤素；-(CH₂)_nOH；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；或

R²¹-R²⁴中的两个一起形成任选地被以下一个或多个取代的5至6元环：卤素；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基；

R²⁵为：氢；-(CH₂)_nOH；苯基；-O-(C₁-C₆)烷基；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；

R²⁶为：氢；或任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和

n为0、1或2。

在一种实施方式中，R²²-R²⁴中两个为卤素。在另一种实施方式中，R²²-R²⁴中两个为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R²²-R²⁴中两个为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。

在另一种实施方式中，R²²-R²⁴之一为卤素，并且R²²-R²⁴中另一个为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R²²-R²⁴之一为卤素，并且R²²-R²⁴中另一个为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。在另一种实施方式中，R²²-R²⁴之一为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基，R²²-R²⁴中另一个为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在另一种实施方式中，R²²-R²⁴中两个一起形成5至6元环。在一种具体的实施方式中，R²²和R²³一起形成5至6元环。在一种具体的实施方式中，R²²和R²³一起形成苯环。在另一种实施方式中，由R²²和R²³形成的环任选地被以下一个或多个取代：卤素；任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基；和任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷氧基。

在一种实施方式中，R²⁵为氢。在另一种实施方式中，R²⁵为-(CH₂)_nOH或羟基。在另一种实施方式中，R²⁵为苯基。在另一种实施方式中，R²⁵为任选地被一个或多个卤素取代的-O-(C₁-C₆)烷基。在另一种实施方式中，R²⁵为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，R²⁶为氢。在另一种实施方式中，R²⁶为任选地被一个或多个卤素取代的(C₁-C₆)烷基。

在一种实施方式中，n为0。在另一种实施方式中，n为1。在另一种实施方式中，n为2。

本文提供的5-取代喹唑啉酮化合物包括上述R²¹、R²²、R²³、R²⁴、R²⁵、R²⁶和n的任意组合。

具体的5-取代喹唑啉酮化合物包括但不限于：

在一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。

描述的所有5-取代喹唑啉酮化合物可以商购到或根据本文公开的专利或专利公开制备。此外，光学异构纯的5-取代喹唑啉酮化合物可以不对称合成或使用已知的拆分剂或手性柱以及其它标准的合成有机化学技术拆分。

应注意，如果在描绘的结构和该结构的名称之间存在矛盾，则更多以描绘的结构为准。此外，如果结构或结构的一部分的立体化学未以例如粗线或虚线表示，则结构或结构的一部分应解释为包括其所有立体异构体。

5.5化合物AA

N-(3-(5-氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯基)丙烯酰胺：

及其药学上可接受的盐在本文中统称为“化合物AA”。在一种实施方式中，化合物AA的苯磺酸盐用于本文提供的组合物和方法中。在一种实施方式中，化合物AA的游离碱用于本文提供的组合物和方法中。

2010年2月4日公开的第US2010/0029610号美国公开专利申请(“第‘610号公开”，将其全部内容以引用方式并入本文)描述了化合物AA，其在第‘610号公开中指定为化合物编号I-182。化合物AA共价且不可逆地抑制一种或多种蛋白激酶的活性，所述蛋白激酶包括TEC-激酶的成员BTK。化合物AA的合成详细描述于第‘610号公开的实施例20中。化合物AA在多种分析和治疗模型中具有活性，显示(在酶和细胞分析中)共价不可逆地抑制BTK。显著地，化合物AA为有效的选择性可口服的小分子，发现其可抑制B细胞增殖和活化。

5.6抗CD20抗体

CD20，以单克隆抗体托西莫单抗定义的第一个B细胞特异性抗原，在B细胞发育中起到关键作用。人类CD20为位于染色体11q12.2上的基因MS4A1编码的具有四个跨膜区的297个氨基酸(30-至35-kDa)的磷蛋白。CD20在B细胞发育中起关键作用，并且是靶向B细胞衍生的疾病的免疫疗法的生物标志物。CD20是在分化早期由B淋巴细胞以及由大多数B细胞淋巴瘤表达，但不由分化的浆细胞表达的完整膜蛋白。当与抗体结合时，CD20留在B细胞膜上，而不会解离或内化。CD20通过结合于酪氨酸激酶的Src家族，如Lyn、Fyn和Lck而发挥作用，并且因此认为参与细胞内蛋白的磷酸化级联反应。抗CD20抗体大致分为I型和II型抗体，两种类型的抗CD20抗体在活化Fc-FcγR相互作用如抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和吞噬作用方面显示相同的能力。I型抗CD20抗体将CD20重新分配到膜脂质筏中，并有效地活化补体依赖性细胞毒性(CDC)。II型抗CD20抗体较弱地活化CDC但更加有效地诱导直接的程序性细胞死亡。

本领域普通技术人员可以容易地确定并选择用于本发明的另外的抗CD20抗体。例如，在一些实施方式中，这样的抗体描述在例如，第8,153,125号、第8,147,832号、第8,101,179号、第8,084,582号、第8,057,793号和第7,879,984号美国专利，和第2011/0129412号、第2012/0183545号、第2012/0134990号和第2012/0034185号美国专利公开中。

在一些实施方式中，用于本发明的抗CD20抗体为I型抗体。在一些实施方式中，用于本发明的抗CD2为II型抗体。

在一些实施方式中，抗CD20抗体为结合于选自170ANPS173和182YCYSI185的CD20表位的抗体。

在一些实施方式中，抗CD20抗体对CD20的表位的结合亲和力(Kd)小于12nM、小于11nM、小于10nM、小于9nM、小于8nM、小于7nM、小于6nM、小于5nM、小于4nM、小于3nM、小于2nM或小于1nM。

利妥昔单抗仅为抗CD20抗体的一个实例。在一些实施方式中，用于本发明的抗CD20抗体包括例如，利妥昔单抗(或)、(即，奥比努妥木单抗(obinutuzumab))和(奥法妥木单抗)。为了便于参考，本文详细描述的提供的方法和方案涉及示例性的抗CD20抗体(即，利妥昔单抗)；然而，这样的参考不旨在将本发明限制于单一的抗CD20抗体。事实上，所有对利妥昔单抗或其生物仿制药的参考均应被本领域技术人员理解为包括一类抗CD20抗体。例如，将理解的是，在提及CD20抗体或利妥昔单抗的情况下，可以替代给予抗CD20抗体奥法妥木单抗或奥比努妥木单抗在一些这样的实施方式中，奥法妥木单抗根据以下时间表以12个剂量给予：300mg初始剂量，接着是1周后每周2000mg剂量，持续7个剂量，接着是4周后每4周2000mg，持续4个剂量。在一些这样的实施方式中，奥比努妥木单抗如下给予六个28-天的周期：第1周期的第1天100mg；第1周期的第2天900mg；第1周期的第8和第15天1000mg；和第2-6周期的第1天1000mg。因此，在一些实施方式中，术语“利妥昔单抗”包括满足获得在选自美国、欧洲和日本的国家或地区作为相同或生物仿制药获得上市许可所需的要求的所有相应的抗CD20抗体。

在一些实施方式中，抗CD20抗体具有与利妥昔单抗或其生物仿制药相同或相似的活性。在一些实施方式中，抗CD20抗体结合于与利妥昔单抗或其片段相同或相似的区域或表位。在一些实施方式中，抗CD20抗体与利妥昔单抗或其片段竞争结合至CD20。在一些实施方式中，抗CD20抗体与利妥昔单抗或其片段具有生物等效性。在一些实施方式中，抗CD20抗体为利妥昔单抗或其片段的生物仿制药。在一些实施方式中，抗CD20抗体为利妥昔单抗的变体或衍生物，包括功能片段、衍生物或抗体结合物。

利妥昔单抗(或)为针对存在于正常B淋巴细胞和B细胞CLL以及大多数形式的非霍奇金氏B细胞淋巴瘤中的CD20细胞表面分子的基因工程化的细胞溶解的嵌合鼠科/人类单克隆IgG1κ抗体。利妥昔单抗针对CD20抗原的结合亲和力为约8.0nM。利妥昔单抗可以诱导补体依赖性细胞毒性(CDC)和抗体依赖性细胞毒性(ADCC)，产生其针对淋巴瘤细胞的临床活性。利妥昔单抗在与CD20结合时还可以导致B细胞的细胞凋亡，从而导致细胞生长的直接抑制。

利妥昔单抗由在含有抗生素庆大霉素的营养培养基中的哺乳动物细胞(中国仓鼠卵巢)悬浮培养物产生。庆大霉素在终产物中是不可检测的。利妥昔单抗为用于静脉注射的无菌、澄清、无色、无防腐剂的液体浓缩物。利妥昔单抗在100mg/10mL或500mg/50mL的一次性小瓶中以10mg/mL的浓度提供。利妥昔单抗在聚山梨醇酯80(0.7mg/mL)、柠檬酸钠二水合物(7.35mg/mL)、氯化钠(9mg/mL)和注射用水中配制。(或)的pH为6.5。

利妥昔单抗已在临床研究中进行研究并批准与氟达拉滨和环磷酰胺组合用于治疗患有CLL的患者，以及与甲氨蝶呤组合治疗患有风湿性关节炎的患者。利妥昔单抗也被批准用于治疗非霍奇金氏淋巴瘤、韦格纳肉芽肿和显微镜下型多血管炎。

5.7使用方法

本文提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括给予患有癌症的患者有效量的TOR激酶抑制剂和有效量的5-取代喹唑啉酮化合物。

本文还提供了用于治疗或预防对5-取代喹唑啉酮化合物治疗具有抗性的癌症的方法，包括给予患有对5-取代喹唑啉酮化合物治疗具有抗性的癌症的患者有效量的TOR激酶抑制剂(例如，单独或在缺乏5-取代喹唑啉酮化合物的情况下)。

在某些实施方式中，所述癌症为血源性肿瘤。

在某些实施方式中，所述癌症为淋巴瘤、白血病或多发性骨髓瘤。

在某些实施方式中，癌症为非霍奇金氏淋巴瘤。在某些实施方式中，非霍奇金氏淋巴瘤为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、急性髓性白血病(AML)、套细胞淋巴瘤(MCL)或ALK⁺间变性大细胞淋巴瘤。在一种实施方式中，非霍奇金氏淋巴瘤为晚期实体非霍奇金氏淋巴瘤。在一种实施方式中，非霍奇金氏淋巴瘤为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

在某些实施方式中，癌症为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。在一些这样的实施方式中，DLBCL为ABC-DLBCL。在其他实施方式中，DLBCL为GCB-DLBCL。

在某些实施方式中，癌症为B细胞淋巴瘤。

在某些实施方式中，B细胞淋巴瘤为选自以下的B细胞非霍奇金氏淋巴瘤：弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤/白血病、套细胞淋巴瘤、纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、边缘区淋巴瘤(包括结外边缘区B细胞淋巴瘤和结内边缘区B细胞淋巴瘤)、淋巴浆细胞性淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症。在一些实施方式中，B细胞淋巴瘤为慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤(CLL/SLL)。在一种实施方式中，B细胞淋巴瘤为华氏巨球蛋白血症。

在一种实施方式中，B细胞非霍奇金氏淋巴瘤为难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。在一种实施方式中，B细胞非霍奇金氏淋巴瘤为复发性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。

在某些实施方式中，癌症为T细胞淋巴瘤。

B细胞障碍慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤(CLL/SLL)代表一系列相同疾病过程的2种结果，其不同之处在于血液/骨髓侵害(CLL)相对于***侵害(SLL)的程度。

在其他实施方式中，癌症为多发性骨髓瘤。

在某些实施方式中，癌症为头部、颈部、眼、口腔、喉部、食管、支气管、咽喉、咽部、胸部、骨、肺、结肠、直肠、胃、***、膀胱、子宫、宫颈、乳腺、卵巢、睾丸或其他生殖器官、皮肤、甲状腺、血液、***、肾脏、肝脏、胰腺和脑部或中枢神经***的癌症。

在其他实施方式中，癌症为实体瘤。在某些实施方式中，实体瘤为复发性或难治性实体瘤。

在一种实施方式中，实体瘤为神经内分泌肿瘤。在某些实施方式中，神经内分泌肿瘤为肠源性神经内分泌肿瘤。在某些实施方式中，神经内分泌肿瘤为非胰源性的。在某些实施方式中，神经内分泌肿瘤为非胰源性或肠源性的。在某些实施方式中，神经内分泌肿瘤为未知的原发来源。在某些实施方式中，神经内分泌肿瘤为产生症状性内分泌的肿瘤或非功能性肿瘤。在某些实施方式中，神经内分泌肿瘤为局部不可切除的适度转移性分化良好的低度(1级)或中度(2级)肿瘤。

在一种实施方式中，实体瘤为非小细胞肺癌(NSCLC)。

在另一种实施方式中，实体瘤为多形性胶质母细胞瘤(GBM)。

在另一种实施方式中，实体瘤为肝细胞癌(HCC)。

在另一种实施方式中，实体瘤为乳腺癌。在一种实施方式中，乳腺癌为激素受体阳性。在一种实施方式中，乳腺癌为***受体阳性(ER+、ER+/Her2或ER+/Her2+)。在一种实施方式中，乳腺癌为***受体阴性(ER-/Her2+)。在一种实施方式中，乳腺癌为三阴性(TN)(不表达对应于***受体(ER)、孕酮受体(PR)的基因和/或蛋白，且不过表达Her2/neu蛋白的乳腺癌)。

在另一种实施方式中，实体瘤为结肠直肠癌(CRC)。

在另一种实施方式中，实体瘤为唾液腺癌。

在另一种实施方式中，实体瘤为胰腺癌。

在另一种实施方式中，实体瘤为囊腺癌。

在另一种实施方式中，实体瘤为肾上腺癌。

在另一种实施方式中，实体瘤为食道癌、肾癌、平滑肌肉瘤或副神经节瘤。

在一种实施方式中，实体瘤为晚期实体瘤。

在另一种实施方式中，癌症为头颈鳞状细胞癌。

在另一种实施方式中，癌症为E-26(ETS)过表达的抗去势性***癌。

在另一种实施方式中，癌症为E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤。

在某些实施方式中，癌症为晚期恶性肿瘤、淀粉样变性、神经母细胞瘤、脑膜瘤、血管外皮细胞瘤、多发性脑转移、多形性胶质母细胞瘤、胶质母细胞瘤、脑干胶质瘤、预后不良的恶性脑肿瘤、恶性胶质瘤、复发性恶性胶质瘤、间变型星形细胞瘤、间变型少突神经胶质瘤、神经内分泌肿瘤、直肠腺癌、DukesC&D结肠直肠癌症、不可切除的结肠直肠癌、转移性肝细胞癌、卡波西氏肉瘤、核型急性髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤、皮肤B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、低度滤泡性淋巴瘤、恶性黑色素瘤、恶性间皮瘤、恶性胸腔积液间皮瘤综合征、腹膜癌、浆液性***状癌、妇科肉瘤、软组织肉瘤、硬皮病、皮肤血管炎、朗格汉斯细胞组织细胞增多病、平滑肌肉瘤、进行性骨化性纤维发育不良、激素难治性***癌、切除后高风险软组织肉瘤、不可切除的肝细胞癌、华氏巨球蛋白血症、无症状性骨髓瘤、惰性骨髓瘤、输卵管癌、雄激素非依赖性***癌、雄激素依赖性IV期非转移性***癌、激素不敏感性***癌、化疗不敏感性***癌、甲状腺***状癌、滤泡性甲状腺癌、甲状腺髓样癌或平滑肌瘤。

在其他实施方式中，癌症为与涉及TOR、PI3K或Akt激酶及其突变体或同工型的通路相关的癌症。在本文提供的的方法的范围内的其他癌症包括与以下激酶的通路相关的那些：PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ、KDR、GSK3α、GSK3β、ATM、ATX、ATR、cFMS和/或DNA-PK激酶及其突变体或同工型。在一些实施方式中，与mTOR/PI3K/Akt通路相关的癌症包括实体和血源性肿瘤，例如，多发性骨髓瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、急性髓性淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病；和实体瘤，例如，乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、胃癌、***和***癌；胶质母细胞瘤；肾癌；肝细胞癌；结肠癌；神经内分泌肿瘤；头颈肿瘤；和肉瘤，如尤文氏肉瘤。

本文提供了使用Ikaros、Aiolos作为TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合的预测或预防因素治疗或管理癌症的方法。在某些实施方式中，本文提供了针对TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合治疗，使用Ikaros、Aiolos作为预测或预防因素，用于筛选或确定如本文所述的癌症患者(例如，多发性骨髓瘤、DLBCL、套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、急性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病和/或MDS患者)的方法。在一种实施方式中，本文提供了预测患者对使用本文提供的组合治疗癌症的反应的方法，所述方法包括获得来自患者的生物材料，并测量Ikaros或Aiolos的存在或不存在。在一种实施方式中，mRNA或蛋白纯化自肿瘤，并且生物标志物的存在或不存在由基因或蛋白表达分析来测量。在某些实施方式中，生物标志物的存在或不存在通过定量实时PCR(QRT-PCR)、微阵列、流式细胞术或免疫荧光来测量。在其他实施方式中，生物标志物的存在或不存在通过基于酶联免疫吸附剂分析的方法或本领域已知的其他类似方法来测量。与非霍奇金氏淋巴瘤有关的生物标志物描述于例如，第2011/0223157号美国专利公开中，将其全部内容以引用方式并入本文。在某些实施方式中，生物标志物为Aiolos。在另一种实施方式中，生物标志物为Ikaros。在某些实施方式中，生物标志物为Ikaros和Aiolos两者。在某些实施方式中，生物标志物为本文提供的生物标志物的组合。在某些实施方式中，生物标志物还包括CRBN。在具体的实施方式中，癌症为DLBCL。

在另一种实施方式中，本文提供了预测患者对在癌症患者中的治疗的反应的方法，所述方法包括获得来自患者的癌细胞，在TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合的存在或不存在下培养细胞，纯化来自培养的细胞的蛋白或RNA，以及通过例如蛋白或基因表达分析测量生物标志物的存在或不存在。监测的表达可以是例如，mRNA表达或蛋白表达。在一种实施方式中，癌症者为淋巴瘤、白血病、多发性骨髓瘤、实体瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、DLBCL、套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、急性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、MDS或黑色素瘤患者。在某些实施方式中，生物标志物为Aiolos。在另一种实施方式中，生物标志物为Ikaros。在某些实施方式中，生物标志物为Ikaros和Aiolos两者。在某些实施方式中，生物标志物还包括CRBN。在具体的实施方式中，癌症为DLBCL。

在另一种实施方式中，本文提供了监测在癌症患者中的对TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物治疗的组合的肿瘤反应的方法。方法包括获得来自患者的生物样品，测量生物样品中的生物标志物的表达，给予患者TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合，之后获得来自患者的第二生物样品，测量第二生物样品中的生物标志物表达，以及比较表达水平，其中治疗后升高的生物标志物表达水平表明可能有有效的肿瘤反应。在某些实施方式中，生物标志物为Aiolos。在另一种实施方式中，生物标志物为Ikaros。在某些实施方式中，生物标志物为Ikaros和Aiolos两者。在某些实施方式中，生物标志物还包括CRBN。在具体的实施方式中，癌症为DLBCL。

在某些实施方式中，CRBN蛋白水平未下调或降低，而Ikaros蛋白水平和/或Aiolos蛋白水平下调或降低。在一些实施方式中，这样的表型表明患者具有或可能发展针对该化合物的获得性抗性。在某些实施方式中，生物标志物为c-Myc。在某些实施方式中，c-Myc水平降低。在其他实施方式中，生物标志物为CD44。在某些实施方式中，CD44水平升高。在一些实施方式中，这样的表型表明患者具有或可能发展针对该化合物的获得性抗性。在其他实施方式中，Ikaros水平和/或Aiolos蛋白水平下降表明有效的使用该化合物的治疗。

在一种实施方式中，治疗后的生物标志物表达水平降低表明可能有有效的肿瘤反应。监测的生物标志物表达可以是，例如，mRNA表达或蛋白表达。在某些实施方式中，生物标志物为Aiolos。在另一种实施方式中，生物标志物为Ikaros。在某些实施方式中，生物标志物为Ikaros和Aiolos两者。在具体的实施方式中，肿瘤为DLBCL。

在一种实施方式中，治疗后生物标志物表达水平升高表明可能有有效的肿瘤反应。监测的生物标志物表达可以是例如，mRNA表达或蛋白表达。在具体的实施方式中，肿瘤为DLBCL。

在另一个方面中，本文提供了评估TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合在治疗癌症中的功效的方法，包括：(a)给予患有癌症的患者该组合；(b)获得来自患者的第一样品；(c)测定第一样品中的CRBN相关蛋白的水平；和(d)将来自步骤(c)的CRBN相关蛋白的水平与获得自参照样品的相同蛋白的水平进行比较，其中与参照物相比水平的变化表明该组合在治疗癌症中的功效。在某些实施方式中，CRBN相关蛋白为Ikaros。在其他实施方式中，CRBN相关蛋白为Aiolos。在一些实施方式中，CRBN相关蛋白为Ikaros和Aiolos。在一些实施方式中，本文提供了评估TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合在治疗癌症中的功效的方法，包括：(a)给予患有癌症的患者该组合；(b)获得来自患者的第一样品；(c)测定第一样品中的Ikaros和/或Aiolos蛋白的水平；和(d)将来自步骤(c)的Ikaros和/或Aiolos的水平与获得自参照样品的相同蛋白的水平进行比较，其中与参照物相比Ikaros和/或Aiolos蛋白水平的下降表明该组合在治疗癌症中的功效。

在一些实施方式中，样品获得自肿瘤活组织检查，结节活组织检查或来自骨髓、脾、肝、脑或***的活组织检查。

在某些实施方式中，步骤(c)包括：(I)使来自步骤(b)的第一样品内的蛋白与免疫特异性结合于CRBN相关蛋白的第一抗体接触；(ii)使结合于第一抗体的蛋白与具有可检测标记的第二抗体接触，其中所述第二抗体免疫特异性结合于CRBN相关蛋白，并且其中所述第二抗体免疫特异性结合于CRBN相关蛋白上的与第一抗体不同的表位；(iii)检测结合于蛋白的第二抗体的存在；和(iv)基于第二抗体中的可检测标记的量测定CRBN相关蛋白的量。

在某些实施方式中，步骤(c)包括：(i)使第一样品内的RNA与包含特异性结合于RNA以生成具有与RNA互补的序列的第一DNA分子的序列的引物接触；(ii)扩增对应于编码CRBN相关蛋白的基因的片段的DNA；和(iii)基于扩增的DNA的量测定CRBN相关蛋白的RNA水平。

在某些实施方式中，如果CRBN相关蛋白的水平(例如，蛋白或RNA水平)与参照物相比下降，则组合可能有效治疗癌症。在某些实施方式中，如果CRBN相关蛋白的水平(例如，蛋白或RNA水平)与参照物相比升高，则组合可能有效治疗癌症。在一种实施方式中，通过使用在给予个体该组合之前获得自患者的第二样品制备参照物；其中第二样品来自与第一样品相同的来源。在另一种实施方式中，使用获得自未患有癌症的健康个体的第二样品制备参照物；其中第二样品来自与第一样品相同的来源。在某些实施方式中，CRBN相关蛋白为Ikaros，并且Ikaros蛋白的水平与参照物相比降低。在其他实施方式中，CRBN相关蛋白为Aiolos，并且Aiolos蛋白的水平与参照物相比降低。在一些实施方式中，CRBN相关蛋白为Ikaros和Aiolos，并且Ikaros蛋白和Aiolos蛋白两者的水平与参照物相比降低。

在本文提供的方法的一种实施方式中，CRBN相关蛋白为分子量为58kDa的IKZF3(Aiolos)。在本文提供的方法的另一种实施方式中，CRBN相关蛋白为分子量为42kDa的IKZF3(Aiolos)。在另一种实施方式中，TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合下调Aiolos表达(例如，蛋白或基因表达)。在具体的实施方式中，Aiolos蛋白水平降低。

在本文提供的方法的各种实施方式中，TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合下调Ikaros表达(例如，蛋白或基因表达)。在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合使Ikaros蛋白水平降低。在一些实施方式中，Aiolos蛋白水平降低，并且Ikaros蛋白水平降低。

CRBN或CRBN相关蛋白(例如，Ikaros、Aiolos或其组合)可以用作生物标志物以指示使用TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合治疗疾病的有效性或进展。因此，在某些实施方式中，本文提供的方法可用于表征个体在接受TOR激酶抑制剂和5-取代的喹唑啉酮治疗之前、期间或之后的个体中的疾病或障碍(例如癌症，例如DLBCL)个体。

在某些实施方式中，DLBCL或患有DLBCL的患者对使用TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的组合治疗的敏感度与Aiolos和/或Ikaros水平有关。

在本文提供的方法的各种实施方式中，CRBN相关蛋白为Ikaros、Aiolos或其组合。在一些实施方式中，这些CRBN相关蛋白与本文提供的其他CRBN相关蛋白(如Ikaros、Aiolos)组合评价，在某些实施方式中，评价Ikaros和Aiolos。在其他实施方式中，评价Ikaros、Aiolos和CRBN，或其任意组合。

Aiolos(IKZF3)为锌指蛋白的Ikaros家族的成员。IKZF3为参与调节淋巴细胞发育(例如，B淋巴细胞增殖和分化)的造血特异性转录因子。IKZF3的DNA-结合域识别GGGA的核心模体。IKZF3显示参与染色质重塑，调节Bcl家族成员，在T细胞中结合于HDACs、mSin3、Mi-2并充当转录抑制子。已显示Aiolos-Foxp3相互作用使人类T细胞中的IL-2表达沉默。

在某些实施方式中，本文提供了用于在患有慢性淋巴细胞性白血病的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的国际慢性淋巴细胞性白血病研讨会(IWCLL)反应定义的方法，包括给予所述患者有效量的与5-取代的喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有实体瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的实体瘤反应评价标准(例如，RECIST1.1)的方法，包括给予所述患者有效量的与5-取代的喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有白血病的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的国家癌症研究所资助的慢性淋巴细胞性白血病工作组(NCI-WGCLL)反应定义的方法，包括给予所述患者与5-取代的喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有***癌的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的***癌工作组2(PCWG2)标准的方法，包括给予所述患者与5-取代的喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有非霍奇金氏淋巴瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的非霍奇金氏淋巴瘤的国际研讨会标准(IWC)的方法，包括给予所述患者与5-取代的喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了用于在患有多发性骨髓瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的多发性骨髓瘤的国际统一反应标准(IURC)的方法，包括给予所述患者与5-取代的喹唑啉酮化合物的有效量的TOR激酶抑制剂。在某些实施方式中，本文提供了在患有多形性胶质母细胞瘤的患者中实现完全反应、部分反应或稳定疾病的多形性胶质母细胞瘤的神经肿瘤反应评估(RANO)工作组的方法，包括给予所述患者与5-取代的喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于提高患有癌症的患者的无肿瘤进展的存活的方法，包括给予所述患者与有效量的5-取代的喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在一种实施方式中，本文提供了用于预防或延迟患者的进行性疾病的实体瘤反应评价标准(例如，RECIST1.1)的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代的喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。在一种实施方式中，进行性疾病的预防或延迟的特征为靶病变的的总体尺寸与治疗前相比改变，例如-30％至+20％，或通过靶病变的的总体尺寸与治疗前相比改变，例如-30％至+20％来实现。在另一种实施方式中，靶病变的尺寸改变为总体尺寸与治疗前相比降低大于30％，例如，靶病变尺寸降低大于50％。在另一种实施方式中，预防的特征为非靶病变的进展与治疗前相比尺寸降低或进展延迟或由此实现。在一种实施方式中，预防通过靶病变的数量与治疗前相比降低来实现或以此为特征。在另一种实施方式中，预防通过非靶病变的数量或质量与治疗前相比降低来实现或以此为特征。在一种实施方式中，预防通过靶病变与治疗前相比缺少或消失来实现或以此为特征。在另一种实施方式中，预防通过非靶病变与治疗前相比缺少或消失来实现或以此为特征。在另一种实施方式中，预防通过与治疗前相比预防新病变来实现或以此为特征。在又一种实施方式中，预防通过与治疗前相比预防疾病进展的临床征兆或症状(如癌症相关的恶病质或疼痛增加)来实现或以此为特征。

在某些实施方式中，本文提供了用于与治疗前相比减小患者的靶病变的尺寸的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于与治疗前相比减小患者的非靶病变的尺寸的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于与治疗前相比实现患者的靶病变数量减少的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于与治疗前相比实现患者的非靶病变数量减少的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于实现患者的所有靶病变消失的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于实现患者的所有非靶病变消失的方法，包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，本文提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂，其中治疗产生由实体瘤反应评价标准(例如，RECIST1.1)测定的完全反应、部分反应或稳定疾病。

在某些实施方式中，本文提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂，其中治疗与治疗前相比导致靶病变尺寸减小、非靶病变尺寸减小和/或新的靶病变和/或非靶病变消失。

在某些实施方式中，本文提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂，其中所述治疗导致预防或延迟临床进展，如癌症相关的恶病质或疼痛增加。

在一些实施方式中，本文提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括给予患有癌症的患者与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂，其中所述治疗尤其导致以下一个或多个：抑制疾病进展、抑制肿瘤生长、减少原发性肿瘤、减轻肿瘤相关症状、抑制肿瘤分泌因子(包括肿瘤分泌激素，如导致类癌综合征的那些)、延迟原发或继发性肿瘤的出现、减缓原发或继发性肿瘤的发展、降低原发或继发性肿瘤的发生、减缓或降低疾病的继发效应的严重性、肿瘤生长停止和肿瘤消退、疾病进展时间(TTP)增加、无进展生存率(PFS)增加和/或总生存率(OS)增加。

在一些实施方式中，TOR激酶抑制剂为如本文所述的化合物。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂为式(I)的化合物。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂为来自表A的化合物。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂为化合物1(本文所述的分子式为C₂₁H₂₇N₅O₃的TOR激酶抑制剂)。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂为化合物2(本文所述的分子式为C₁₆H₁₆N₈O的TOR激酶抑制剂)。在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂为化合物3(本文所述的分子式为C₂₀H₂₅N₅O₃的TOR激酶抑制剂)。在一种实施方式中，化合物1为7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((1r,4r)-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并-[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮，供选择地命名为7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((反式)-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮或7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-1-((1R*,4R*)-4-甲氧基环己基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮。在另一种实施方式中，化合物2为1-乙基-7-(2-甲基-6-(1H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮或其互变异构体，例如，1-乙基-7-(2-甲基-6-(4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮或1-乙基-7-(2-甲基-6-(1H-1,2,4-***-5-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮。在另一种实施方式中，化合物3为1-((反式)-4-羟基环己基)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮，供选择地命名为1-((1r,4r)-4-羟基环己基)-7-(6-(2-羟基丙烷-2-基)吡啶-3-基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮。在一种实施方式中，化合物3为化合物1的代谢物。

在一些实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为本文所述的化合物。在另一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮(“化合物A”)。在另一种实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮盐酸盐。

TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予可以进一步与放射治疗或手术组合。在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予正在经历放射治疗、之前已经历放射治疗或将经历放射治疗的患者。在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予已经历手术，如肿瘤切除手术的患者。

本文另外提供了用于治疗之前已接受癌症治疗的患者以及之前未经治疗的患者的方法。本文另外提供了治疗已经历手术以试图治疗癌症的患者以及未经历手术的患者的方法。由于患有癌症的患者具有异质的临床表现和不同的临床结果，因此给予患者的治疗可以根据他/她的预后而变化。熟练的临床医生将能够容易地在没有过度实验的情况下确定能够用于治疗患有癌症的个别患者的具体的第二药剂、手术类型和基于非药物标准的治疗。

在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂与化合物A和化合物AA组合给予。因此，本文提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括给予患有癌症的患者有效量的TOR激酶抑制剂、有效量的5-取代喹唑啉酮化合物和有效量的化合物AA。本文还提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括给予患有癌症的患者有效量的TOR激酶抑制剂、有效量的化合物A和有效量的化合物AA。在具体的实施方式中，化合物1与化合物A和化合物AA组合给予。在一种具体的实施方式中，使用化合物1、化合物A和化合物AA的组合治疗的癌症为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂与化合物A和抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)组合给予。因此，本文提供了用于治疗或预防癌症的方法，包括给予患有癌症的患者有效量的TOR激酶抑制剂、有效量的化合物A和有效量的抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)。在具体的实施方式中，化合物1与化合物A和抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)组合给予。在一种具体的实施方式中，使用TOR激酶抑制剂、化合物A和抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)的组合治疗的癌症为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

在某些实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合循环地给予患者。循环治疗涉及给予活性剂一段时间，接着停止一段时间，并且重复该序贯给予。循环治疗能够降低抗性的发展，避免或降低副作用和/或改进治疗功效。TOR激酶抑制剂、化合物A和抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)组合给予也可以该循环进行。

在一些实施方式中，TOR激酶抑制剂每日给予一次或QD，化合物A每日给予一次或QD，和抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)每月给予一次。供选择地和/或另外地，在一个或多个28天的周期中，TOR激酶抑制剂可以每日给予一次，化合物A可以每日给予一次，并且抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)可以给予一次。

在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物以单剂量或分剂量组合给予约3天、约5天、约一周、约两周、约三周、约四周(例如，28天)、约五周、约六周、约七周、约八周、约十周、约十五周或约二十周，接着停止约1天至约十周。在一种实施方式中，本文提供的方法考虑约一周、约两周、约三周、约四周、约五周、约六周、约八周、约十周、约十五周或约二十周的循环治疗。在一些实施方式中，TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物以单剂量或分剂量组合给予约3天、约5天、约一周、约两周、约三周、约四周(例如，28天)、约五周或约六周，其中停止约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、29或30天。在一些实施方式中，停止期为1天。在一些实施方式中，停止期为3天。在一些实施方式中，停止期为7天。在一些实施方式中，停止期为14天。在一些实施方式中，停止期为28天。给药循环的频率、数量和长度可以增加或降低。

在一种实施方式中，本文提供的方法包括：i)给予个体第一每日剂量的与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂；ii)任选地停止至少一天的时间，其间不给予个体5-取代喹唑啉酮化合物；iii)给予个体第二剂量的与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂；和iv)重复步骤ii)到iii)多次。

在一种实施方式中，本文提供的方法包括在第1天给予个体一个剂量的5-取代喹唑啉酮化合物，接着在第2天及随后的几天给予个体与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。

在某些实施方式中，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂连续给予约1至约52周。在某些实施方式中，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂连续给予约0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月。在某些实施方式中，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂连续给予约7、约14、约21、约28、约35、约42、约84或约112天。

在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予时，TOR激酶抑制剂连续给予28天，而5-取代喹唑啉酮化合物连续给予21天，接着7天不给予5-取代喹唑啉酮化合物。在一种实施方式中，在28天的周期中，5-取代喹唑啉酮化合物在第1天单独给予，5-取代喹唑啉酮化合物和TOR激酶抑制剂在第2-21天组合给予，并且TOR激酶抑制剂在第22-28天单独给予。在一些这样的实施方式中，从第2周期开始，5-取代喹唑啉酮化合物和TOR激酶抑制剂两者在第1天给予，5-取代喹唑啉酮化合物连续给予至第21天，而TOR激酶抑制剂连续给予至第28天。如上所述的28天周期只要需要就可以继续，如继续1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月或更长。

在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物在28天周期中组合给予时，5-取代喹唑啉酮化合物在第1-7天单独给予，且TOR激酶抑制剂在第8-28天单独给予。这样的28天周期只要需要就可以继续，如继续1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月或更长。

在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予时，TOR激酶抑制剂以约2.5mg至约50mg每天(如约2.5mg、约10mg、约15mg、约16mg、约20mg、约30mg或约45mg每天)的量给予，且5-取代喹唑啉酮化合物以约0.005mg至约1,000mg每天(如约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天)的量给予。在某些实施方式中，约2.5mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约10mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约15mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约16mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约20mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约30mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约45mg每天的TOR激酶抑制剂与约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约45mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg或约150mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物可以各自独立地每天给予一次(QD)、两次(BD)或三次(TID)。在某些实施方式中，约20mg每天的TOR激酶抑制剂与约2mg或约3mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在某些实施方式中，约30mg每天的TOR激酶抑制剂与约2mg或约3mg每天的5-取代喹唑啉酮化合物组合给予。在一种具体的实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为化合物A。

在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予时，TOR激酶抑制剂:5-取代喹唑啉酮化合物之比为约1:1至约1:10。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予时，TOR激酶抑制剂:5-取代喹唑啉酮化合物之比为小于约1:1、小于约1:3或小于约1:10。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予时，TOR激酶抑制剂:5-取代喹唑啉酮化合物之比为约1:1、约1:3或约1:10。

在某些实施方式中，本文提供的方法还包括抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)与TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物组合给予，其中给予的抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)的量为约250mg/m²至约500mg/m²，每28天一次，给予的TOR激酶抑制剂的量为约10mg至约40mg每天，且给予的5-取代喹唑啉酮化合物的量为约0.5mg至约5mg每天。在一个特定的实施方式中，本文提供的方法还包括抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)与TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物组合给予，其中给予的抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或)的量为约375mg/m²或约500mg/m²，每28天一次，给予的TOR激酶抑制剂的量为约20mg或约30mg每天，且给予的5-取代喹唑啉酮化合物的量为约2mg或约3mg每天。在具体的实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为化合物A。

在一些实施方式中，提供的方法包括给予需要其的患者包含利妥昔单抗的药物组合物，其中利妥昔单抗作为输注以50mg/hr的速率给予。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率每30分钟增加50mg/hr，至最多400mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率每30分钟增加100mg/hr，至最多400mg/hr。因此，在一些实施方式中，利妥昔单抗输注速率为100mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率为150mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率为200mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率为250mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率为300mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率为350mg/hr。在一些实施方式中，利妥昔单抗的输注速率为400mg/hr。

在一些实施方式中，在第1周期第2天给予375mg/m²利妥昔单抗，并且在第2周期第1天给予500mg/m²利妥昔单抗。在一些实施方式中，在第1周期第2天给予375mg/m²利妥昔单抗，并且在第2周期第1天和第3周期第1天各给予500mg/m²利妥昔单抗。在一些实施方式中，在第1周期第2天给予375mg/m²利妥昔单抗，并且在第2周期第1天、第3周期第1天和第4周期第1天各给予500mg/m²利妥昔单抗。在一些实施方式中，在第1周期第2天给予375mg/m²利妥昔单抗，并且在第2周期第1天、第3周期第1天、第4周期第1天和第5周期第1天各给予500mg/m²利妥昔单抗。在一些实施方式中，在第1周期第2天给予375mg/m²利妥昔单抗，并且在第2周期第1天、第3周期第1天、第4周期第1天、第5周期第1天和第6周期第1天各给予500mg/m²利妥昔单抗。

以下实施方式涉及当与TOR激酶抑制剂(和任选地***、强的松或抗CD20抗体，例如利妥昔单抗(或))组合给予时，给予的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)的量。在某些实施方式中，当化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)与TOR激酶抑制剂组合给予时，给予约0.5mg至约5mg每天(例如，约0.5mg、约1mg、约1.5mg、约2mg、约2.5mg、约3mg或约3.5mg每天)的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)在28天周期中组合给予时，在第1-28天与TOR激酶抑制剂组合给予(QD)约3mg的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)在28天周期中组合给予时，在第1-21天与TOR激酶抑制剂组合给予(QD)约3mg的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)以及***在28天周期中组合给予时，在第1-28天或在第1-21天与TOR激酶抑制剂组合给予约0.5mg至约5mg每天(例如，约0.5mg、约1mg、约1.5mg、约2mg、约2.5mg、约3mg或约3.5mg每天)的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)，同时在第1-4天、第9-12天和第17-20天给予约40mg每天的***(或在第四个28天的周期后，在第1-4天给予约40mg每天的***为)。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与泊马度胺和***在28天周期中组合给予时，在第1-28天或在第1-21天与TOR激酶抑制剂组合给予约0.5mg至约5mg每天(例如，约0.5mg、约1mg、约1.5mg、约2mg、约2.5mg、约3mg或约3.5mg每天)的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)，同时每周一次给予约40mg每天的***(或针对大于70岁的患者给予20mg每周的***)。在某些实施方式中，当TOR激酶抑制剂与化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)组合给予时，每3天、每2天或每24小时给予约0.5mg至约5mg的化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)。当TOR激酶抑制剂与化合物A或其药学上可接受的盐(例如，HCl盐)在28天周期中组合给予时，TOR激酶抑制剂可以在28天周期中给予一天或多天。在具体的实施方式中，TOR激酶抑制剂在28天周期中的每天给予。在一种具体的实施方式中，5-取代喹唑啉酮化合物为化合物A。不受理论的限制，给予患者的活性剂的量可以根据给予的是化合物A的游离碱还是HCl盐进行调节(其中化合物A的游离碱的分子量为286.25g/mol且化合物A的HCl盐的分子量为322.75g/mol)。由于给药强度通常基于存在的游离碱的量来报告，因此基于游离碱和HCl盐的相对分子量，存在的化合物A的HCl盐的量实际上更高。

以下实施方式涉及当与TOR激酶抑制剂和化合物A(以及任选地***、强的松或抗CD20抗体。例如利妥昔单抗(或))组合给予时，给予的化合物AA或其药学上可接受的盐(例如，游离碱或苯磺酸盐)的量。在某些实施方式中，当化合物AA或其药学上可接受的盐与TOR激酶抑制剂和化合物A组合给予时，化合物AA以约25mg至约1250mg每天(如约25mg、约50mg、约75mg、约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、约200mg、约225mg、约250mg、约375mg、约500mg、约750mg、约1000mg或约1250mg每天)的量给予。TOR激酶抑制剂、化合物A和化合物AA可以各自独立地每天给予一次(QD)、两次(BD)或三次(TID)。在一些实施方式中，本文提供的方法包括给予需要其的患者与化合物A和化合物AA组合的治疗有效量的TOR激酶抑制剂，其中所述治疗有效量的化合物AA为约250mg至约1250mg每天。在一些实施方式中，治疗有效量的化合物AA作为一个或多个离散剂量给予。例如，在一些实施方式中，治疗有效量的化合物AA为250mg每天，其中治疗有效量以125mg给予，每天两次(BID)。在一些实施方式中，治疗有效量的化合物AA为500mg每天，其中治疗有效量以250mg给予，每天两次(BID)。在一些实施方式中，治疗有效量的化合物AA为750mg每天，其中治疗有效量以375mg给予，每天两次(BID)。在一些实施方式中，治疗有效量的化合物AA为1000mg每天，其中治疗有效量以500mg给予，每天两次(BID)。在一些实施方式中，本文提供的方法包括给予需要其的患者与化合物AA和化合物A组合的治疗有效量的TOR激酶抑制剂，其中治疗有效量的化合物AA为约125mg至约1250mg每天、或约125mg至约1125mg每天、或约125mg至约1000mg每天、或约125mg至约875mg每天、或约125mg至约750mg每天、或约125mg至约625mg每天、或约125mg至约500mg每天、或约125mg至约375mg每天、或约125mg至约250mg每天、或约250mg至约1250mg每天、或约250mg至约1125mg每天、或约250mg至约1000mg每天、或约250mg至约875mg每天、或约250mg至约750mg每天、或约250mg至约625mg每天、或约250mg至约500mg每天、或约250mg至约375mg每天、或约375mg至约1250mg每天、或约375mg至约1125mg每天、或约375mg至约1000mg每天、或约375mg至约875mg每天、或约375mg至约750mg每天、或约375mg至约625mg每天、或约375mg至约500mg每天、或约500mg至约1250mg每天、或约500mg至约1125mg每天、或约500mg至约1000mg每天、或约500mg至约875mg每天、或约500mg至约750mg每天、或约500mg至约625mg每天、或约625mg至约1250mg每天、或约625mg至约1125mg每天、或约625mg至约1000mg每天、或约625mg至约875mg每天、或约625mg至约750mg每天、或约750mg至约1250mg每天、或约750mg至约1125mg每天、或约750mg至约1000mg每天、或约875mg至约1250mg每天、或约875mg至约1125mg每天、或约875mg至约1000mg每天。

在某些实施方式中，本文提供的每个方法还包括给予与TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的***。在一些这样的实施方式中，***给予的剂量为约10mg至约50mg，例如约40mg。

在某些实施方式中，本文提供的每个方法还包括给予与TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的强的松。在一些这样的实施方式中，强的松给予的剂量为约10mg至约50mg，例如约30mg。

5.8药物组合物和给予途径

本文提供了包含有效量的TOR激酶抑制剂和有效量的5-取代喹唑啉酮化合物的组合物，和包含有效量的TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物和药学上可接受的载体或溶媒的组合物。

在一些实施方式中，本文所述的药物组合物适用于经口、经肠胃外、经粘膜、经皮或局部给予。

组合物可以以常规制剂形式经口或经肠胃外给予患者，所述常规制剂形式如胶囊、微囊、片剂、颗粒剂、散剂、锭剂、丸剂、栓剂、注射剂、混悬剂和糖浆。适合的制剂可以使用常规的有机或无机添加剂，通过通常采用的方法来制备，所述有机或无机添加剂如赋形剂(例如，蔗糖、淀粉、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、纤维素、滑石、磷酸钙或碳酸钙)、粘合剂(例如，纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、聚丙基吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、***胶、聚乙二醇、蔗糖或淀粉)、崩解剂(例如，淀粉、羧基甲基纤维素、羟丙基淀粉、低取代的羟丙基纤维素、碳酸氢钠、磷酸钙或柠檬酸钙)、润滑剂(例如，硬脂酸镁、轻质无水硅酸、滑石或月桂基硫酸钠)、芳香剂(例如，柠檬酸、薄荷醇、甘氨酸或橘子粉)、防腐剂(例如，苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯)、稳定剂(例如，柠檬酸、柠檬酸钠或乙酸)、助悬剂(例如，甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或硬脂酸铝)、分散剂(例如，羟丙基甲基纤维素)、稀释剂(例如，水)和底蜡(例如，可可脂、白凡士林或聚乙二醇)。药物组合物中的TOR激酶抑制剂的有效量可以在将显示希望的效果的水平；例如，在用于经口和经肠胃外给予的单位剂量中约0.005mg/kg患者体重至约10mg/kg患者体重。

待给予患者的TOR激酶抑制剂的剂量和5-取代喹唑啉酮化合物的剂量相当广泛地可变并且可以依照卫生保健从业者判断。一般地，TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物可以约0.005mg/kg患者体重至约10mg/kg患者体重的剂量一天一至四次给予患者，但是以上剂量可以根据患者的年龄、体重和医学病症和给予类型而适当变化。在一种实施方式中，剂量为约0.01mg/kg患者体重至约5mg/kg患者体重、约0.05mg/kg患者体重至约1mg/kg患者体重、约0.1mg/kg患者体重至约0.75mg/kg患者体重或约0.25mg/kg患者体重至约0.5mg/kg患者体重。在一种实施方式中，每天给予一个剂量。在任何给定的情况下，给予的TOR激酶抑制剂的量将取决于诸如活性组分的溶解度、使用的制剂和给予途径等因素。

在另一种实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含约1mg至约2000mg、约1mg至约200mg、约35mg至约1400mg、约125mg至约1000mg、约250mg至约1000mg、约500mg至约1000mg、约1mg至约30mg、约1mg至约25mg或约2.5mg至约20mg的单独或与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。在另一种实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含1mg、2.5mg、5mg、8mg、10mg、15mg、20mg、30mg、35mg、45mg、50mg、70mg、100mg、125mg、140mg、175mg、200mg、250mg、280mg、350mg、500mg、560mg、700mg、750mg、1000mg或1400mg的单独或与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。在另一种实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含约2.5mg、约8mg、约10mg、约15mg、约20mg、约30mg或约45mg的单独或与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。

在一种具体的实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含约10mg、约15mg、约30mg、约45mg、约50mg、约75mg、约100mg或约400mg的与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。在一种具体的实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含约5mg、约7.5mg或约10mg的与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂。

在一种具体的实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含约0.1mg、约1mg、约2mg、约5mg、约7.5mg、约10mg、约12.5mg、约15mg、约17.5mg、约20mg、约25mg、约50mg、约100mg、约150mg或约200mg的与TOR激酶抑制剂组合的5-取代喹唑啉酮化合物。

在某些实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其包含约25mg、约50mg、约75mg、约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、约200mg、约225mg或约250mg的单独的或与TOR激酶抑制剂和化合物A组合的化合物AA。

在某些实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其中TOR激酶抑制剂:5-取代喹唑啉酮化合物之比为约1:1至约1:10。在某些实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其中TOR激酶抑制剂:5-取代喹唑啉酮化合物之比为小于约1:1、小于约1:3或小于约1:10。在某些实施方式中，本文提供了单位剂量制剂，其中TOR激酶抑制剂:5-取代喹唑啉酮化合物之比为约1:1、约1:3或约1:10。

TOR激酶抑制剂可以每天与5-取代喹唑啉酮化合物组合给予一次、两次、三次、四次或更多次。

TOR激酶抑制剂可以出于便利的原因与5-取代喹唑啉酮化合物组合经口给予。在一种实施方式中，当经口给予时，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂与膳食和水一起给予。在另一种实施方式中，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂分散在水或果汁(例如，苹果汁或橙汁)中并作为混悬剂经口给予。在另一种实施方式中，当经口给予时，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂在禁食状态下给予。

TOR激酶抑制剂还可以与5-取代喹唑啉酮化合物组合经静脉(如静脉输注)或经皮下(如皮下注射)给予。给予模式由卫生保健从业者判断，并且可以部分取决于医学病症的位点。

在一种实施方式中，本文提供了含有与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂而不含另外的载体、赋形剂或溶媒的胶囊。

在另一种实施方式中，本文提供了包含有效量的TOR激酶抑制剂、有效量的5-取代喹唑啉酮化合物和药学上可接受的载体或溶媒的组合物，其中药学上可接受的载体或溶媒可以包括赋形剂、稀释剂或其混合物。在一种实施方式中，组合物为药物组合物。

组合物可以是片剂、咀嚼片、胶囊、溶液、肠胃外溶液、锭剂、栓剂和混悬剂等的形式。组合物可以经配制而在剂量单位中含有每日剂量或每日剂量的适宜部分，所述剂量单位可以是单一片剂或胶囊或适宜体积的液体。在一种实施方式中，溶液由水溶性盐如盐酸盐来制备。一般地，所有组合物均根据药物化学中的已知方法制备。胶囊可以通过将TOR激酶抑制剂和/或5-取代喹唑啉酮化合物与适合的载体或稀释剂混合并用适当量的混合物填充胶囊来制备。常用的载体和稀释剂包括但不限于，惰性粉状物质，如多种不同的淀粉；粉状纤维素，尤其是结晶和微晶纤维素；糖，如果糖、甘露醇和蔗糖；谷粉；和类似的可食用粉末。

片剂可以通过直接压制、湿法造粒或干法造粒来制备。其制剂通常加入稀释剂、粘合剂、润滑剂及崩解剂以及该化合物。典型的稀释剂包括，例如，多种类型的淀粉、乳糖、甘露醇、高岭土、磷酸钙或硫酸钙、无机盐(如氯化钠)和糖粉。粉状纤维素衍生物也是有用的。在一种实施方式中，药物组合物是不含乳糖的。典型的片剂粘合剂为以下物质，如淀粉、明胶和糖(如乳糖、果糖、葡萄糖等)。天然和合成树胶也是适宜的，其包括***胶、藻酸盐、甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮等。聚乙二醇、乙基纤维素和蜡也可以充当粘合剂。本文提供了包含化合物1的说明性的片剂制剂。

片剂制剂中的润滑剂可能需要润滑剂以防止片剂和冲压机粘在模具中。润滑剂可以选自这样的滑的固体，如滑石、硬脂酸镁和硬脂酸钙、硬脂酸和氢化植物油。片剂崩解剂是在润湿时膨胀以使片剂破碎并释放化合物的物质。其包括淀粉、粘土、纤维素、藻胶和树胶。更具体地，可以使用例如玉米和马铃薯淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、木纤维素、粉状天然海绵、阴离子交换树脂、藻酸、瓜尔树胶、柑橘渣和羧基甲基纤维素以及月桂基硫酸钠。片剂可以包覆有作为香味剂和密封剂的糖，或包覆有成膜保护剂以改变片剂的溶解性质。组合物还可以配制成咀嚼片，例如通过在制剂中使用物质如甘露醇配制。

当希望作为栓剂给予与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂时，可以使用典型的基质。可可脂是传统的栓剂基质，其可以通过加入蜡以轻微升高其熔点而改变。特别地包含各种分子量的聚乙二醇的水可混溶性栓剂基质广泛使用。

与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂的作用可以通过适当的制剂而延迟或延长。例如，与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂缓慢溶解的小丸可以被制备并加入片剂或胶囊剂中或作为缓释可植入装置。该技术还包括制备数种不同溶解速率的小丸并使用小丸的混合物填充胶囊。片剂或胶囊剂可以包覆有在可预测的期间抵抗溶解的膜。即使是肠胃外制剂也可以通过将与5-取代喹唑啉酮化合物组合的TOR激酶抑制剂溶解或悬浮在允许其缓慢分散于血清中的油性或乳化的溶媒中制备成长效的。

在一些实施方式中，包含化合物AA的药学上可接受的组合物包含基于组合物的总重量约5％至约60％的化合物AA或其药学上可接受的盐。在一些实施方式中，包含化合物AA的药学上可接受的组合物包含基于组合物的总重量约5％至约15％、或约7％至约15％、或约7％至约10％、或约9％至约12％的化合物AA。在一些实施方式中，提供的方法包括给予需要其的患者药学上可接受的组合物，所述组合物包含基于制剂的总重量约25％至约75％、或约30％至约60％、或约40％至约50％、或约40％至约45％的化合物AA。在某些实施方式中，提供的方案包括给予需要其的患者药学上可接受的组合物，所述组合物包含基于给定的组合物或制剂约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约20％、约30％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约50％、约60％、约70％或约75％的化合物AA。

在某些实施方式中，化合物1在2013年6月6日公开的第2013-0142873号美国专利申请公开中所述的制剂中给予，将其全部内容以引用方式并入本文(具体参见第[0323]段至第[0424]段，和第[0636]段至第[0655]段)。在其他实施方式中，化合物1在2013年5月29日提交的第61/828,506号美国临时专利申请中所述的制剂中给予，将其全部内容以引用方式并入本文(具体参见第[0246]段至第[0403]段，和第[0571]段至第[0586]段)。

在某些实施方式中，化合物2在2013年4月17日提交的第61/813,064号美国临时申请中所述的制剂中给予，将其全部内容以引用方式并入本文(具体参见第[0168]段至第[0189]段，和第[0262]段至第[0294]段)。在其他实施方式中，化合物2在2013年12月3日提交的第61/911,201号美国临时申请中所述的制剂中给予，将其全部内容以引用方式并入本文(具体参见第[0170]段至第[0190]段，和第[0264]段至第[0296]段)。

5.9试剂盒

在某些实施方式中，本文提供了包含TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的试剂盒。

在某些实施方式中，本文提供了包含TOR激酶抑制剂的一个或多个单位剂型(如本文所述的那些)和5-取代喹唑啉酮化合物的一个或多个单位剂型(如本文所述的那些)的试剂盒。

在一些实施方式中，本文所述的试剂盒另外地包含化合物AA。

在一些实施方式中，本文所述的试剂盒另外地包含抗CD-20抗体，例如利妥昔单抗(或)。在其他实施方式中，试剂盒另外地包含***或强的松。

在某些实施方式中，本文提供的试剂盒还包括使用说明书，例如用于给予TOR激酶抑制剂和5-取代喹唑啉酮化合物的使用说明书。

6.实施例

6.1生化分析

mTORHTR-FRET分析.以下是可用于测定测试化合物的TOR激酶抑制活性的分析的实例。将TOR激酶抑制剂溶于DMSO中并制备成10mM储备液，并且适当稀释用于实验。试剂制备如下：

“单纯TOR缓冲液”(用于稀释高甘油TOR部分)：10mMTrispH7.4，100mMNaCl，0.1％吐温-20，1mMDTT。将InvitrogenmTOR(目录号PV4753)稀释在该缓冲液中至0.200μg/mL的分析浓度。

ATP/底物溶液：0.075mMATP，12.5mMMnCl₂，50mMHepes,pH7.4，50mMβ-GOP，250nM微囊藻素LR，0.25mMEDTA，5mMDTT和3.5μg/mLGST-p70S6。

检测试剂溶液：50mMHEPES,pH7.4，0.01％TritonX-100，0.01％BSA，0.1mMEDTA，12.7μg/mLCy5-αGSTAmersham(目录号PA92002V)，9ng/mLα-磷酸化p70S6(Thr389)(细胞信号转导小鼠单克隆号9206L)，627ng/mLα-小鼠LanceEu(PerkinElmer目录号AD0077)。

向20μL单纯TOR缓冲液中加入0.5μL测试化合物的DMSO溶液。为了起始反应，将5μL的ATP/底物溶液加入到20μL的单纯TOR缓冲溶液(对照)及以上制备的化合物溶液中。60min后通过加入5μL的60mMEDTA溶液停止分析；随后加入10μL检测试剂溶液并且使混合物静置至少2小时，之后在经设定以检测LANCEEuTR-FRET(在320nm下激发且在495/520nm下发射)的Perkin-ElmerEnvision酶标仪上读数。

在TORHTR-FRET分析中测试TOR激酶抑制剂且发现其中具有活性，其中在分析中某些化合物具有低于10μM的IC₅₀，一些化合物具有0.005nM至250nM的IC₅₀，其他具有250nM至500nM的IC₅₀，其他具有500nM至1μM的IC₅₀，并且其他具有1μM至10μM的IC₅₀。

DNA-PK分析.使用PromegaDNA-PK分析试剂盒(目录号V7870)中提供的程序进行DNA-PK分析。DNA-PK酶可以购自Promega(Promega目录号V5811)。

如本文所述的选择的TOR激酶抑制剂在该分析中具有或预期具有10μM以下的IC₅₀，其中一些如本文所述的TOR激酶抑制剂具有1μM以下的IC₅₀而其他具有0.10μM以下的IC₅₀。

6.2基于细胞的分析

人肝细胞癌定着非依赖性生长分析中化合物1与化合物A的组合效应。

概述。在2个人肝细胞癌细胞系HepG2和SK-Hep-1中，通过集落形成分析评估化合物1对定着非依赖性生长(AIG)的作用。化合物1在两个细胞系中，在0.1至100μM的浓度下显示剂量依赖性和显著的抗集落形成活性。化合物1在两个细胞系中均与化合物A协同抑制集落形成。

研究目的。该研究的目的是评价化合物1和化合物1与化合物A的组合在2个人肝细胞癌细胞系中对肿瘤细胞定着非依赖性生长的直接作用。该评价在集落形成分析中进行。

材料和方法。研究材料。细胞系/细胞。人细胞系HepG2和SK-Hep-1细胞获得自美国模式培养物保藏所(ATCC；Manassas,VA)。在具有10％PremiumFBS(Lonza,Walkersville,MD)的DMEM(达尔伯克氏改良伊格尔氏培养基(Dulbecco’sModifiedEagle’sMedium))(Mediatech；Mannasas,VA)中培养细胞。

实验程序。(1)单药剂集落形成分析。将Nobel琼脂(1.2克；BD；FranklinLakes,NJ)放置在100-mL无菌瓶中。添加无菌水(100mL)并施加微波直到琼脂沸腾。混合等体积的琼脂和2XRPMI介质(ECEScientific；Doylestown,PA)并将300μL转移至24孔平底板(BD；FranklinLakes,NJ)的每个孔中。将板保持在4℃下直到琼脂固化。收获HepG2和SK-Hep-1细胞的培养物并以3.6x10³个细胞/mL重悬于培养基中。在无菌管中混合等量的琼脂、2XRPMI和细胞悬液(1:1:1)，并立即将500μL/孔转移至24孔板中。将板保持在4℃下直到琼脂固化。将含有化合物或DMSO的培养基(500μL)添加至每个孔中(每个处理的最终DMSO浓度为0.2％)。在0.1、0.3、1、3、10和30μM的终浓度下测试化合物1。一式三份进行细胞处理。在37℃下，在5％CO₂气氛中孵育细胞8-10天。使用NikonDXM1200数码相机和NikonACT1软件拍摄每个孔的照片(2X放大倍率)并保存为TIFF文件。ImageQuantTL(GEHealthcare；Piscataway,NJ)集落计数软件用于对集落进行计数。(2)组合研究集落形成分析。Nobel琼脂(1.2克；BD；FranklinLakes,NJ)放置于100-mL无菌瓶中。添加无菌水(100mL)并施加微波直到琼脂沸腾。混合等体积的琼脂和2XRPMI介质(ECEScientific；Doylestown,PA)并将300μL转移至24孔平底板(BD；FranklinLakes,NJ)的每个孔中。将板保持在4℃下直到琼脂固化。收获HepG2和SK-Hep-1细胞的培养物并以3.6x10³个细胞/mL重悬于培养基中。在无菌管中混合等量的琼脂、2XRPMI和细胞悬液(1:1:1)，并立即将500μL/孔转移至24孔板中。将板保持在4℃下直到琼脂固化。将含有化合物或DMSO的培养基(500μL)添加至每个孔中(每个处理的最终DMSO浓度为0.2％)。使用单一处理对细胞进行处理如下：在0.1和0.3μM的终浓度下测试化合物1。一式三份地进行细胞处理。在37℃下，在5％CO₂气氛中孵育细胞8-10天。使用NikonDXM1200数码相机和NikonACT1软件拍摄每个孔的照片(2X放大倍率)并保存为TIFF文件。使用ImageQuantTL(GEHealthcare；Piscataway,NJ)集落计数软件对集落进行计数。

数据分析。集落形成的抑制百分比通过归一化至DMSO对照(100％对照)来计算。使用GraphPadPrismv5.01，使用单因素方差分析和Dunnett事后检验或非配对t检验计算相对于DMSO对照的显著性。为了评价组合效应，通过比较组合反应与两种药剂的理论累加反应来分析来自三个独立实验的数据。使用分数乘积法[Webb]:(fu)A,B＝(fu)Ax(fu)B计算两种药剂(A和B)的预期的累加作用，其中fu＝未受治疗影响的分数。当观察到的未受影响的分数的组合显著小于(fu)A,B时，确定为组合协同作用，而当观察到的未受影响的分数的组合等于(fu)A,B时，确定为累加作用。当观察到的未受影响的分数显著大于(fu)A,B时，发生部分累加效应。

结果。在HepG2细胞中使用单一药剂处理的集落形成分析的结果显示在图1中。使用0.1、0.3、1、3、10和30μM化合物处理的1HepG2细胞显示显著的集落形成抑制，分别为对照的74、57、33、24、16和11％(p值<0.001)。

在SK-Hep-1细胞中使用单一药剂处理的集落形成分析的结果显示在图2中。使用0.3-30μM化合物1处理后，在SK-Hep-1细胞中观察到集落形成的显著抑制(对照的0-45％)(p值<0.001)。使用3μM和更高浓度的化合物1可导致集落形成的100％抑制。

在HepG2细胞中的化合物1组合集落形成分析的结果显示在图3和表1中。图3显示，在HepG2细胞中，只有0.3μM化合物1与50μM化合物A的组合使集落形成发生明显变化。化合物1与化合物A的所有其他组合均是累加性的。

SK-Hep-1细胞中化合物1组合集落形成分析的结果显示在图4和表2中。图4显示，虽然0.1μM化合物1加上10μM化合物A具有累加效应，但化合物1与化合物A的所有其他组合均协同地发挥作用，以显著抑制SK-Hep-1细胞中的集落形成(p值<0.05)。

结论。化合物1与化合物A组合对定着非依赖性生长的作用通过在HepG2和SK-Hep-1细胞中的集落形成分析来评估。在两个细胞系中，化合物1在0.1至100μM的浓度下显示剂量依赖性和显著的抗集落形成。

在HepG2细胞中，化合物1与化合物A的组合具有累加至协同效应。

在SK-Hep-1细胞中，化合物1与化合物A的组合具有协同效应。

表1.化合物1HepG2集落形成分析的结果

将HepG2细胞平板接种于琼脂中并使用化合物孵育8天，然后对集落进行计数。数据计算为相对于仅使用DMSO处理的细胞(＝0％抑制)的抑制百分比。结果代表n＝3个一式三份的实验的平均值。使用分数乘积法计算化合物组合的组合效应。***对于理论累加性p<0.001；**对于理论累加性p<0.01，*对于理论累加性p<0.05，通过非配对t检验获得。ns＝非显著。

表2.化合物1SK-Hep-1集落形成分析的结果

将SK-Hep-1细胞平板接种于琼脂中并使用化合物孵育8天，然后对集落进行计数。数据计算为相对于仅使用DMSO处理的细胞(＝0％抑制)的抑制百分比。结果代表n＝3个一式三份的实验的平均值。使用分数乘积法计算化合物组合的组合效应。***对于理论累加性p<0.001；**对于理论累加性p<0.01，*相对于理论累加性p<0.05，通过非配对t检验获得。ns＝非显著。

hPMBC中的TNFα抑制分析。来自正常供体的人类外周血单核细胞(hPBMC)通过FicollHypaque(Pharmacia,Piscataway,N.J.,USA)密度离心获得。在补充有10％AB+人血清(GeminiBio-products,Woodland,Calif.,USA)、2mML-谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素(LifeTechnologies)的RPMI1640(LifeTechnologies,GrandIsland,N.Y.,USA)中培养细胞。

PBMC(2.10⁵个细胞)一式三份地平皿培养在96孔平底Costar组织培养板(Corning,N.Y.,USA)中。在化合物不存在或存在的情况下，使用LPS(fromSalmonellaabortusequi,Sigmacat.no.L-1887,St.Louis,MO.,USA)以1ng/mL的终浓度刺激细胞。将本文提供的化合物溶于DMSO(Sigma)中并在即将使用前在培养基中进一步稀释。所有分析中的最终DMSO浓度可以为约0.25％。在LPS刺激的1小时前将化合物加入细胞中。然后在37℃下在5％CO₂中孵育细胞18-20小时，然后收集上清液，用培养基稀释并通过ELISA(Endogen,Boston,Mass.,USA)分析TNFα水平。使用非线性回归S形剂量反应计算IC₅₀，将顶部限制到100％以及将底部限制到0％，允许可变斜率(GraphPadPrismv3.02)。

DLBCL细胞增殖分析中的化合物1与化合物A的组合效应。DLBCL细胞增殖通过³H-胸苷掺入分析来评估。简言之，在化合物1、化合物A或两者存在或不存在的情况下，在96孔细胞培养板中培养细胞。每孔含有6000个细胞/80μL细胞培养基(RoswellParkMemorialInstitute(RPMI)-1640+10–20％胎牛血清(FBS)，1％pen/strep/1％L-谷氨酰胺)。以10x所需终浓度制备化合物稀释液，并一式三份地将10μL的每个化合物添加到细胞。针对所有样品，在终浓度为0.2％的二甲基亚砜(DMSO)中使用药物处理细胞。在测试化合物的存在下，细胞在37℃下在加湿的培养箱中在5％CO₂下生长72小时。将一微居里的³H-胸苷(GEHealthcare,Fairfield,CT)添加到每个孔中以培养最后6小时。使用细胞收获机(Tomtec,Hamden,CT)将细胞收获到UniFilter-96GF/C滤板(PerkinElmer,Waltham,MA)，并且允许板干燥过夜。总共添加25μL/孔的Microscint^TM-20(PerkinElmer)，并在TopCountNXT(PerkinElmer)中分析板。对每个孔计数1分钟。通过对所有三次测量取平均值来计算细胞增殖的抑制百分比，并归一化至DMSO对照(0％抑制)。使用非线性回归和S形剂量反应，将顶部限制到100％以及将底部限制到0％并允许可变斜率，使用GraphPadPrism5.01版计算最终累积半数最大抑制浓度(IC₅₀)。由每次重复的单个IC₅₀计算SEM(平均数标准误差)。

细胞系。在GCBDLBCL细胞系(SUDHL6、SUDHL10、HT、Farage、Pfeifer)、ABCDLBCL细胞系(OCI-Ly10、U2932、OCI-Ly3)和DHIT(二次打击(doublehit)，即cMyc和Bcl-2突变体)GCBDLBCL细胞系(Karpas422、WSU-DLBCL2)、化合物A抗性细胞系(WSU-DLBCL2-化合物Ares)和来那度胺抗性细胞系(WSU-DLBCL2-Lenres)上评价单独或与化合物A组合的化合物1对细胞增殖的影响。

数据分析。使用分数乘积法计算理论累加性并绘制成独立曲线。如果观察到两个或多个浓度下的组合效应大于理论累加性，并且理论累加性曲线与组合曲线之间的误差条不重叠，则归为协同作用。所有数据使用n＝3来生成。

结果：在以下DLBCL细胞系中，在使用化合物1和化合物A的组合治疗时观察到协同作用：HT和Farage(GCBDLBCL)、Karpas422和WSU-DLBCL2(DHITGCBDLBCL)以及WSU-DLBCL2-Lenres(来那度胺抗性DLBCL)。

6.3体内分析

DLBCL异种移植模型。将人类DLBCL细胞系(WSU-DLCL2)移植到重症综合性免疫缺陷(SCID)小鼠的胁腹中。在细胞接种后第11天和第14天之间开始化合物治疗。使用单一药剂(化合物1,化合物A或化合物AA)或化合物1/化合物A、化合物A/化合物AA或化合物1/化合物AA组合治疗随机小鼠组(n＝9至10/组)。化合物以每天一次(化合物1和化合物A)或每天两次(C)时间表经口给予21天。阳性对照由CHOP疗法(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和强的松的组合)组成。化合物1和化合物A配置在CMC-吐温(羧甲基纤维素/吐温80/去离子水)中。化合物AA悬浮于DSP(二甲基亚砜/solutol/磷酸盐缓冲盐水)中。

进行初步研究以确定化合物1的抗肿瘤活性并确定组合研究的剂量水平。在WSU-DLCL2异种移植模型中，化合物1以剂量依赖性方式抑制肿瘤生长。在3周给药期结束时，当与溶媒对照相比时，分别在10、3和1mg/kg化合物1治疗的动物中观察到51％、28％和22％的肿瘤体积减小(TVR)(图5)。在随后的组合研究中，化合物1以10mg/kg给药，每天一次(QD)。化合物A和化合物AA分别以30mg/kg(QD)和50mg/kg(BID)给药。在该组合研究中，化合物1和化合物A作为单一药剂显示显著的抗肿瘤活性，TVR分别为29％和30％，而化合物AA在该模型中无活性(图6-7)。化合物1与化合物A的组合在WSU-DLCL2异种移植模型中产生高度显著(p<0.001)的肿瘤生长的协同抑制(64％)(图6)。化合物1和化合物AA的组合的抗肿瘤活性与作为单一药剂的化合物1明显不同(图7)。类似地，化合物A和化合物AA的组合的抗肿瘤活性在WSU-DLCL2异种移植模型中与作为单一药剂的化合物A明显不同。

通过IHC测量DLBCL异种移植模型中的CRBN相关蛋白生物标志物。在LeicaBond-Max自动染色仪上进行免疫组织化学(IHC)。使用抗Aiolos或抗Ikaros抗体对来自以上异种移植模型的每个肿瘤的一个切片进行染色，并用苏木精复染色。使用AperioScanScopeXT载玻片扫描仪扫描染色的载玻片。使用Aperio显像器拖拽关注的区域以包括整个样品。在关注的区域上进行细胞核识别算法，以找到苏木精染色的细胞核。基于染色强度，将每个识别的细胞核评分为0至3(0没有染色，3具有最高强度)。将具有3或2的得分的细胞核加在一起，并计数为关注的标志物(即Aiolos或Ikaros)阳性。将每组的阳性细胞核/总细胞核比报告为百分比。如图8中可见，化合物A作为单一药剂对肿瘤Aiolos和Ikaros无影响，而化合物A抑制肿瘤Aiolos和Ikaros。然而，化合物1和化合物A的组合显示对肿瘤Aiolos和Ikaros具有持久的协同效应。

OCI-Ly10DLBCL异种移植模型。OCI-Ly10细胞源自弥漫性大B细胞淋巴瘤，其为一种类型的非霍奇金氏淋巴瘤。以严重T和B细胞复合免疫缺乏症为特征的雌性SCID小鼠(FoxChaseCB17/Icr-Prkdcscid,CharlesRiver)在该研究的第1天为10周龄，体重为15.4至24.2g。简言之，雌性CB.17SCID小鼠皮下接种5x10⁶个OCI-Ly10细胞，并且允许肿瘤生长至约100-150mm³，然后分层成治疗组，以产生在治疗前具有尺寸相当的肿瘤的组。除了疗效治疗组以外，将一些小鼠分层成短期治疗组，并且在自第27天开始持续7天每天接受一次盐水、30mg/kg或10mg/kg化合物A或3mg/kg化合物1的组中，在最后一次给药4小时候收集其肿瘤。分析冷冻及固定石蜡包埋的样品。在研究的疗效组中，12组具有建立的皮下肿瘤(平均体积，120–129mm³)的小鼠(n＝10/组)在第1天(D1)开始给药。化合物A(在两个剂量水平下)和化合物1(在一个剂量水平下)每天各给予一次，持续28天(qdx28)。对照小鼠接受溶媒、5％DMSO/15％HS15/80％PBS,p.o.b.i.d.x28。在D29，从第33天至第35天，在对照组和五个测试组中实施21天的剂量扩展，得到这些组的b.i.d.x28/4/21或qdx28/4/21时间表。两个阳性参照组每周两次以1和3mg/kg接受腹膜内(i.p.)利妥昔单抗单药治疗，持续五周(biwkx5)。

数据显示在图9中。每周用卡尺测量肿瘤两次，并且当肿瘤达到1000mm³体积终点或在第61天时(以先发生的为准)，对疗效研究中的每只小鼠实施安乐死。由肿瘤生长延迟(TGD)以及由生存延长的显著性测定疗效，肿瘤生长延迟(TGD)定义为药物治疗(T)小鼠与溶媒治疗(C)小鼠相比的中位数到终点时间(TTE)的增加。对照肿瘤以窄的TTE范围和32.4天的中位数TTE达到终点，允许研究中的TGD最大可能为28.6天(88％)。四种测试疗法实现最大TGD，但第61天存活率和/或消退率有所不同。单独的化合物A在30mg/kg(26.6mg/kg活性化合物)qdx28下最大可能产生28.6天的TGD(88％)，显著的存活延长(P<0.001，七个幸存者和两个PR；10mg/kg剂量(8.87mg/kg活性化合物)qdx28/4/21产生8.9天TGD(27％)，三个幸存者和无消退。单独的化合物1在3mg/kgqdx28/4/21下产生23.8天的TGD(73％)，显著的存活延长(P<0.001)，五个幸存者和一个PR。30mg/kg化合物A与化合物1的组合以28天qd时间表产生最大TGD，九个幸存者和两个PR。该组合是基于30mg/kg化合物Aqdx28和化合物1qdx28/4/21单药治疗的改良。10mg/kg化合物A与化合物1的组合以扩展qd时间表产生最大TGD，七个幸存者和无消退；且基于每个相应的单药治疗进行改良。扩展疗法未产生消退，并且由于未按照28天和扩展时间表测试单药疗法或双药疗法的相同剂量，因此无法评价其潜在的存活益处。59天幸存者中除了三个以外全部具有静止或减小的最终肿瘤体积；在存活率为50％或更高的组中，中位数肿瘤体积在第50天后趋于稳定并在第59天处于550至787mm³的范围内。不能确定肿瘤停滞是对治疗的反应还是肿瘤生长特性。1和3mg/kgi.p.biwkx5的利妥昔单抗单药治疗各产生十个无肿瘤幸存者(TFS)；高剂量导致肿瘤减小的速度略微更快。在对照和测试组中出现相当的进展组平均体重减轻，并且未观察到治疗相关的副作用。

总之，化合物A(30mg/kgqdx28)单独最大可能产生28.6天TGD，七个幸存者和两个PR；化合物A(10mg/kgqdx28/4/21)产生8.9天TGD和三个幸存者；化合物1(3mg/kgqdx28/4/21)产生23.8天TGD，五个幸存者和一个PR。28天30mg/kg化合物A/化合物1疗法产生九个幸存者和两个PR。扩展的10mg/kg化合物A/化合物1疗法产生七个幸存者。利妥昔单抗单药治疗在1和3mg/kg下各产生10个TFS；在更高的剂量下，肿瘤消退开始略早。所有治疗在OCI-Ly10人淋巴瘤SCID小鼠异种移植模型中耐受良好。

综上，这些结果表明化合物1和化合物A的组合在活化的B细胞表型(ABC)的人DLBCL细胞系中具有改进的活性。

用于在单一活肿瘤中进行多重化合物疗效研究的CIVO^TM阵列微注射平台。同时给具有异种移植肿瘤的麻醉Nu/Nu小鼠注射多种单个化合物或化合物组合，每种注射至肿瘤的不同位置中。评价精确受控地递送的化合物在DLBCL的异种移植模型的肿瘤微注射位点的空间限定的变化和细胞变化。切除肿瘤并通过共注射近红外示踪染料的IVIS成像评估注射质量。制备来自沿肿瘤的z轴向下的代表性区域的切片以使用通路抑制和肿瘤反应的生物标志物染色。然后在CaliperPannoramic载玻片扫描仪中批量扫描样品，得到与单细胞分析和后续通过Presage’sCIVO^TM分析仪自定义图像分析平台进行的数据定量相容的高分辨率图像(对于技术描述，参见R.Klinghoffer等人,AACR,2014和Presagebio.com)。

在SUDHL4异种移植物中***给予化合物A/***。为了评价化合物A与其他化合物在DLBCL模型SUDHL4中的组合效应，***给予溶媒或化合物A(30mpkQDx8)-/+***(5mpkQDx8)。在第7此***给药4小时后，向肿瘤局部注射溶媒(4μL)或化合物2(13μg，注射4μL，注射至三个不同的肿瘤区域)。通过测量细胞凋亡标志物—裂解的胱天蛋白酶3(CC3)来评价细胞凋亡，其绘制成离注射位点的距离的函数。如图10中所述，***给药化合物A增强使用化合物2局部治疗诱导的细胞死亡。

结论：在SUDHL4(DLBCL)异种移植物中，使用化合物A-/+***全身治疗可增强化合物2诱导的细胞凋亡。

在OCILy10异种移植物中***给予化合物A/化合物1。为了评价化合物1、化合物A和化合物AA的组合治疗，使用化合物A30mpkQDx4接着化合物A30mpk和化合物110mpkQDx3全身治疗具有OCILy10异种移植物的小鼠。在第7次***给药3小时候，在三个位点局部注射化合物AA(15.4μg，注射4μL)。在不同位点处使用两个另外的针头注射溶媒(4μL)或CHOP作为阴性或阳性对照。在第7次***给药9h后(直接注射6h后)收获肿瘤。如表3中所见，使用化合物A和化合物1全身治疗的组合导致15/26化合物AA注射位点的细胞死亡(由CC3阳性位点测量)，而使用化合物A全身治疗在任意化合物AA注射位点处不导致细胞死亡(在该模型中，预期化合物1作为TOR激酶抑制剂不会增强化合物AA的活性)。

表3.在OCILy10异种移植物中***给药化合物A/化合物1和局部注射化合物AA的作用。

***给药	肿瘤#	CC3阳性位点	总位点
				化合物A	6	0	18
化合物A+化合物1	7	15	26
				化合物1	ND	ND	ND

结论：使用化合物A和化合物1全身治疗诱导局部注射化合物AA的位点的细胞凋亡(裂解的胱天蛋白酶3)。

在亲代和多柔比星抗性RAMOS细胞异种移植模型中局部注射化合物2或化合物1。向具有亲代或多柔比星抗性Ramos细胞异种移植物的小鼠局部注射溶媒(4μL)、化合物2(13μg，注射4μL)，化合物1(39μg，注射4μL)或长春新碱(1.47μg，注射4μL(400μM))。在注射24小时后收获肿瘤。如图11中所见，如通过作为离局部注射位点的距离的函数的裂解胱天蛋白酶3所测量，多柔比星抗性Ramos细胞也另一种化学疗法抗长春新碱。相反地，多柔比星抗性Ramos细胞显示对化合物2的升高的敏感性。

结论：多柔比星抗性Ramos细胞比亲代Ramos细胞对化合物2更敏感。

6.4临床方案

新型组合和利妥昔单抗在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的1B期多中心开放标签研究。该研究为TOR激酶抑制剂化合物1、化合物A(3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮)和化合物AA(N-(3-(5-氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯基)丙烯酰胺)当在患有弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的个体中组合给予以及与利妥昔单抗组合给予时的1B期多中心开放标签研究。

该研究的主要目的是测定化合物A、化合物1和化合物AA当作为双重药经口给予以及与利妥昔单抗组合给予时的安全性和耐受性，以及确定每个组合的不耐受剂量(NTD)和最大耐受剂量(MTD)。研究的次要目的是提供关于每种药物组合的初步疗效的信息，并且在作为单一药剂经口给予之后以及在组合治疗后表征化合物A、化合物1(和M1代谢物)和化合物AA的药代动力学(PK)，以评估药物相互作用。

研究设计。该研究为在至少一线的标准治疗失败的患有复发性/难治性DLBCL的个体中，作为双重药和作为与利妥昔单抗组合的三重药经口给予的化合物A、化合物1和化合物AA的1B期剂量递增临床研究。研究将针对每个新型药剂使用标准3+3剂量递增设计探索两种药物剂量，其中更高的剂量定群包括添加固定剂量的利妥昔单抗。治疗组包括：化合物A+利妥昔单抗(A组)、化合物A+化合物1+/-利妥昔单抗(B组)、化合物A+化合物AA+/-利妥昔单抗(C组)和化合物AA+化合物1+/-利妥昔单抗(D组)。

所有治疗物将以28天的周期给予。化合物A、化合物1和化合物AA在每个28天的周期的第1–28天按连续给药时间表经口给予，每天一次(QD)或每天两次(BID)。当方案中包括利妥昔单抗时，其将采用仅在每个28天周期的第1天静脉内(IV)给予的标准的固定剂量(375mg/m²)。将在两种剂量水平下探索所有三种化合物，所述剂量水平包括：化合物A(2.0和3.0mgQD)、化合物1(20和30mgQD)和化合物AA(375和500mgBID)。针对B、C和D组的最高的两种双重药剂量水平将在含有和不含利妥昔单抗的情况下探索双重药。

将使用“3+3”剂量递增设计来确定每个组合的初始毒性。个体将基于研究者选择及开放空位被分配至研究治疗组。3名个体的定群将以限定的剂量增量服用研究药物，且在3个可评价个体中1个发生剂量限制性毒性(DLT)的情况下，将定群扩大至6名个体。

DLT的可评价个体定义为在第1周期期间接受至少80％的计划剂量的化合物A、化合物1或化合物AA；在第1周期期间接受至少80％的计划剂量的利妥昔单抗(仅在含利妥昔单抗的定群中)；和在接受至少一种剂量的任意研究药物后经历研究药物相关的DLT的个体。非由于DLT的不可评价的个体将被替换。在任何剂量定群中的另外的个体可以根据安全审查委员会的决定来招募(SRC)。

当定群中的6个可评价个体中的2个在第1周期经历药物相关的DLT时，将该剂量视为不耐受剂量(NTD)。最大耐受剂量(MTD)定义为6个可评价个体中的0个或1个在第1周期期间经历DLT的最后一个在NTD以下的剂量水平。如果在任一组合的第一剂量水平下观察到6个DLT中的2个，则可以根据SRC的决定探索更低的剂量组合。可以评价化合物1的中间剂量(NTD和NTD之前的最后一个剂量水平之间的剂量)以准确确定组合的MTD。

在完成剂量递增后，选择的组合治疗组可以扩大到至多约20名个体每组。扩大可以在剂量递增阶段中建立的MTD下进行，或基于研究数据审查在供选择的可耐受的组合剂量水平下进行。

用于分析基因异常、基因表达和治疗活性的生物标志物的成对肿瘤活组织检查在剂量递增阶段是任选的，但在剂量扩展阶段是强制性的。

研究群体将由18岁或以上的患有复发性或难治性DLBCL且在至少一个标准一线治疗方案后出现疾病进展的男性及女性组成。允许先前进行自体干细胞移植(招募前3个月以上)。

招募预期耗费约24个月(18个月用于剂量递增，6个月用于扩展)。完成积极治疗和治疗后随访预期耗费另外6–12个月。整个研究预期持续约3年。

在该1b期中探索的剂量水平如下所示：

如果在剂量水平1下发生不可接受的毒性，则允许降低化合物A(1mgQD)和化合物1(15mgQD)的起始剂量。未计划降低化合物AA的起始剂量。

对于A组和C组，化合物A降低；对于D组，化合物1剂量将降低。对于B组，安全审查委员会(SRC)将决定降低双重药中两种药物中哪一者的剂量。

在A组(化合物A+利妥昔单抗)中，由于仅有化合物A递增，因此剂量递增将从剂量水平1进行至3b。在B、C和D组中，一旦剂量水平2a(双重药)已清除，剂量水平2b(双重药+利妥昔单抗)及3a(在没有利妥昔单抗的情况下双重药的剂量递增)可以同时招募。两个剂量水平2b和3a必须清除以进入剂量水平3b。

化合物A、化合物1和化合物AA将每天给药，并且利妥昔单抗将在每个28天周期的第1天给药。对于剂量递增和扩展阶段，在第1周期期间将对给药时间表进行轻微改变以便于单独或组合的每种药物的PK和PD评价。从第2周期开始及之后，所有口服药物将在第1天开始并持续至第28天，并且利妥昔单抗将在第1天给予。

研究药物在第1周期的给予如下所述：

在B组中：化合物1将在第1周期第1天开始，接着是PK和PD取样，并且持续至第28天。化合物A将在第1周期第2天开始，并且持续至第28天。利妥昔单抗将在第1周期第8天给予。

在C组中：化合物A将在第1周期第1天开始，接着是PK和PD取样，并且持续至第28天。化合物AA将在第1周期第2天开始，并且持续至第28天。利妥昔单抗将在第1周期第8天给予。

在D组中：化合物1将在第1周期第1天开始，接着是PK和PD取样，并且持续至第28天。化合物AA将在第1周期第2天开始，并且持续至第28天。利妥昔单抗将在第1周期第8天给予。

在任何定群中在第1天给予第一剂量后，在可以开始下一个更高的方案制定的剂量定群之前，观察个体至少28天。在第1周期期间不允许进行研究药物的个体内剂量递增，但如果SRC批准，则可允许在第1周期以外的周期中进行。允许一种或两种药物由于毒性而剂量降低和暂时中断，但在第1周期期间剂量降低将构成DLT。

如果出现疾病进展迹象、不可接受的毒性或个体/医师决定退出时，可以停止研究治疗。个体可以根据研究者的判断在超过疾病进展后继续接受研究药物。

根据定群定群大小，在剂量递增过程中招募的个体的估计的总数为约50至100。在扩展阶段期间，将评价约30至60个另外的个体s(每种选择的方案10–20个)的安全性、PK、PD和初步抗肿瘤作用。

将每隔2个周期评价个体的疗效直到第6周期，每隔3个周期评价个体的疗效直到第12周期，之后每隔6个月评价。所有治疗的个体将被列入疗效分析。主要疗效变量为肿瘤反应率。肿瘤反应将由研究者基于NHL/DLBCL的国际研讨会标准(IWC)确定。

该研究的安全变量包括不良事件(AE)、安全临床实验室变量、12导联心电图(ECG)、左心室射血分数(LVEF)评估、体格检查、生命体征、暴露于研究治疗、合并用药评估和育龄女性(FCBP)妊娠测试。

在剂量递增期间中，SRC将基于其对给定剂量定群的所有可用的临床和实验室安全性数据的审查决定评价更高的剂量水平或宣布MTD。

SRC也将选择定群扩展的关注的治疗方案的剂量和时间表。一个或多个方案可以选择用于定群扩展。SRC将在整个研究中继续定期审查安全性数据并对研究持续性和剂量改变作出适当建议。

化合物A、化合物1和化合物AA的浓度-时间曲线将由在给予作为单一药剂的研究药物后以及在组合治疗后收集的连续血液样品来测定。

将评估化合物A和化合物AA对化合物1和M1PK的影响，也将评估化合物AA对化合物APK的影响。化合物A、化合物1和M1代谢物及化合物AA的全身暴露将于安全性、PD和活性结果相关。

供选择的方案：新型组合和利妥昔单抗在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的1B期多中心开放标签研究。该研究为TOR激酶抑制剂化合物1、化合物A(3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮)和化合物AA(N-(3-(5-氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯基)丙烯酰胺)当在患有弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的个体中组合给予以及与利妥昔单抗组合给予时的1B期多中心开放标签研究。

该研究的主要目的是测定化合物A、化合物1和化合物AA当作为双重药经口给予以及作为与利妥昔单抗组合的三重药经口给予时的安全性和耐受性，以及确定每个组合的不耐受剂量(NTD)和最大耐受剂量(MTD)。研究的次要目的是提供关于每种药物组合的初步疗效的信息，并且在组合经口给予之后表征化合物1、化合物AA的稳态药代动力学(PK)。

研究设计。该研究为在至少一线的标准治疗失败的患有复发性/难治性DLBCL的个体中，作为双重药和作为与利妥昔单抗组合的三重药经口给予的化合物A、化合物1和化合物AA的1B期剂量递增和扩展临床研究。研究的剂量递增阶段将针对每种化合物使用标准3+3剂量递增设计探索一种或两种药物剂量，其中更高的剂量定群包括添加固定剂量的利妥昔单抗，接着扩展关注的选择的定群。治疗组包括：A组：化合物A+化合物1+/-利妥昔单抗；B组：化合物A+化合物AA+/-利妥昔单抗；C组：化合物AA+化合物1+/-利妥昔单抗。

所有治疗将以28天的周期给予。化合物A、化合物1和化合物AA在每个28天的周期的第1-28天按连续给药时间表经口给予，每天一次(QD)或每天两次(BID)。当方案中包括利妥昔单抗时，其在每个周期中将仅作为375mg/m²的标准固定静脉内(IV)剂量给予一次(第1周期的第8天，和每个后续周期的第1天)。将在两种剂量水平下探索所有三种化合物，所述剂量水平包括：化合物A(2.0和3.0mgQD)、化合物1(20和30mgQD)和化合物AA(500mgBID)。最高的两个双重药剂量水平将探索具有或不具有利妥昔单抗的双重药。

将使用标准“3+3”剂量递增设计来确定每个组合的初始毒性。个体将基于研究者选择及开放空位被分配至研究治疗组。3名个体的定群将以限定的剂量增量服用研究药物，且在3个可评价个体中1个发生剂量限制性毒性(DLT)的情况下，将定群扩大至6名个体。

DLT的可评价个体定义为在第1周期期间接受至少80％的计划剂量的化合物A、化合物1或化合物AA的个体，和在第1周期期间接受至少80％的计划剂量的利妥昔单抗(仅在含利妥昔单抗的定群中)的个体；或在接受至少一种剂量的任意研究药物后经历研究药物相关的DLT的个体。非由于DLT而不可评价的个体将被替换。在任何剂量定群中的另外的个体可以根据安全审查委员会的决定来招募(SRC)。

当定群中的6个可评价个体中的2个在第1周期经历药物相关的DLT时，将该剂量视为非耐受剂量(NTD)。最大耐受剂量(MTD)定义为6个可评价个体中的0个或1个在第1周期期间经历DLT的最后一个在NTD以下的剂量水平。如果在任一组合的第一剂量水平下观察到6个DLT中的2个，则可以根据SRC的决定探索更低的剂量组合。可以评价研究药物的中间剂量(NTD和NTD之前的最后一个剂量水平之间的剂量)以准确确定组合的MTD。

在完成剂量递增后，选择的组合治疗组可以扩大到至多约20名个体每组。扩大可以在剂量递增阶段中建立的MTD下进行，或基于研究数据审查在供选择的可耐受的组合剂量水平下进行。

用于分析基因异常、RNA和蛋白表达和治疗活性的生物标志物的成对肿瘤活组织检查在剂量递增阶段是任选的，但在剂量扩展阶段是强制性的。

研究群体：18岁或以上的患有复发性或难治性DLBCL且在至少两个先前的标准治疗方案后出现疾病进展的男性及女性，且在化疗敏感患者中进行自体干细胞移植是符合条件的。招募还将包括在ASCT之前选择的高风险个体和在其他方面不符合ASCT的个体。

纳入标准：个体必须满足以下标准以招募到研究中：(1)在进行任何研究相关的评估或程序之前，理解并自愿签署知情同意文件；(2)同意恢复用于分析的档案肿瘤组织(在档案组织不可用的情况下，发起人可以允许例外)；(3)同意接受成对肿瘤活组织检查(筛选和治疗中)以用于遗传分析和生物标志物评价(仅扩展定群)(在特殊情况下可以放弃该要求)；(4)在至少两种先前的标准治疗方案(例如，R-CHOP或类似的一线方案和至少一个二线抢救方案)和化疗敏感患者的ASCT之后患有组织学或细胞学确诊的复发性或难治性DLBCL(包括转型低度淋巴瘤)的18岁以上的男性和女性，其中以下情况例外：(i)在ASCT前背景下预后较差、定义为原发性难治性疾病、在一线治疗后12个月内复发、患有具有Bcl-2/Myc基因重排或过表达的“二次打击”淋巴瘤或在复发时具有高IPI分数(2,3)的个体；(ii)拒绝ASCT或根据研究者的判断在其他方面不适合ASCT的年龄>65的个体；(5)至少一个可测量疾病的位点(长轴>1.5cm或长轴和短轴>1.0cm)；(6)ECOGPS为0或1；(7)个体必须具有以下实验值：(i)在没有生长因子支持的情况下嗜中性细胞绝对计数(ANC)≥1.5x10⁹/L(无骨髓侵犯的DLBCL)或≥1.0x10⁹/L(具有骨髓侵犯的DLBCL)达7天；(ii)血红蛋白(Hgb)≥8g/dL；(iii)在未输血的情况下血小板(plt)≥50x10⁹/L达7天；(iv)钾在正常范围内或可用补充剂校正；(v)AST/SGOT和ALT/SGPT≤2.5x正常值上限(ULN)或如果存在肝肿瘤则≤5.0xULN；(vi)血清胆红素≤1.5xULN；(vii)使用Cockcroft-Gault方程估算的血清肌酐清除率≥50mL/min；(8)育龄女性(FCBP)(育龄女性为1)未经历子宫切除(手术***)或双侧卵巢切除术(手术切除两个卵巢)或2)自然绝经后未超过至少连续24个月(即，在之前的连续24个月期间在任何时间有月经的性成***性)必须：(i)同意在整个研究期间使用至少两种有效避孕方法(口服、可注射或可移植的激素避孕药；输卵管结扎；子宫内装置；具有杀精剂的避孕屏障；或切除输精管的伴侣)，其中之一必须是屏障，并在最后的研究药物剂量之后多达28天；(ii)在筛选时具有阴性血清妊娠测试(敏感性为至少25mIU/mL)；(iii)在研究治疗的第1周期第1天之前72小时内具有阴性血清或尿液妊娠测试(由研究者判断)(应注意如果在之前的72小时内进行筛选血清妊娠测试，则其可以用作研究治疗第1天之前的测试)；(iv)在任何研究药物的最后一次剂量后避孕28天；(v)同意在研究过程中接受持续性妊娠测试；(9)男性必须完全禁欲或同意在与怀孕女性或育龄女性发生性接触期间使用避孕套(建议乳胶避孕套)且在参与研究时在给药中断期间避免怀孕，并在研究药物停止后持续至少28天，即使其已经历成功的输精管切除术；(10)招募至治疗组的接受化合物A的所有个体必须：(i)理解(研究产品)IP可能具有潜在的致畸风险；(ii)同意在服用IP时以及在停用IP后放弃献血或捐精；(iii)同意不与另外的人共用IP；(iv)被告知怀孕预防措施和胎儿暴露风险，并同意PPRMP的要求；(11)能够遵循研究随访计划和其他方案要求。

排除标准：存在以下任何情况将使个体从招募中排除：(1)症状性中枢神经***损害；(2)已知的症状性急性或慢性胰腺炎；(3)尽管有医疗管理，但持续性腹泻或吸收障碍≥NCICTCAE2级；(4)外周神经病变≥NCICTCAE2级；(5)心脏功能受损或临床显著的心脏病，包括以下任一种：(i)由MUGA或ECHO测得的LVEF<45％；(ii)完全性左束支或双束支传导阻滞；(iii)先天性长QT综合征；(iv)持续性或有临床意义的室性心律失常；(v)在筛查ECG时QTcF>460毫秒(重复三次记录的平均值)；(vi)在开始研究药物之前≤3个月出现不稳定的心绞痛或Uns表心绞痛或心肌梗塞；(6)接受积极治疗的患有糖尿病的个疗或具有以下两种情况之一的个体(仅针对在包含化合物1的组中治疗的个体)：(i)空腹血糖(FBG)≥126mg/dL(7.0mmol/L)；(ii)HbA1c≥6.5％；(7)之前在第一次给药前≤3个月接受过ASCT≤3；(8)先前接受过具有标准或降低的强度调节的同种异体干细胞移植；(9)在开始研究药物前≤5个半衰期或4周内(以短的为准)，接受过先前的全身性针对癌症的治疗或研究形式；(10)先前接受过双重mTORC1/mTORC2抑制剂或BTK抑制剂(PCI-32675)治疗(允许先前使用雷帕霉素类似物、PI3K或AKT抑制剂、来那度胺和利妥昔单抗治疗)；(11)在开始研究药物之前≤2周进行过大手术的个体(个体必须从可能混淆研究药物的安全性评价的最近的手术或治疗的任何影响中恢复；放射疗法无需特异性清除)；(12)怀孕或哺乳女性(未采用两种避孕方式的具有生殖潜能的成人)；(13)具有已知HIV感染的个体；(14)具有已知的慢性活动性肝炎B或C病毒(HBV/HCV)感染的个体；(15)具有治疗相关的骨髓增生异常综合征的个体；(16)长期使用质子泵抑制剂或H2拮抗剂或在第一次给药7天内针对包含化合物AA的组(B和C)中经治疗的个体使用。患有慢性胃食管返流疾病、消化不良和消化性溃疡病的个体在招募到该研究中之前应谨慎评价其对该治疗的适合性(这些药物在整个研究中禁止合并用药)；(17)使个体处于不可接受的风险下或妨碍个体顺从研究的任意其他显著的医疗病症、实验室异常或精神疾病；(18)需要积极持续的全身治疗的并发性第二癌症病史。

招募预期耗时约24个月完成(18个月用于剂量递增，6个月用于扩展)。完成积极治疗和治疗后随访预期将另外耗时6至12个月。整个研究预期持续约3年。

如方案和/或统计分析计划中事先规定的，试验结束定义为最后一次随访最后一名个体以完成研究的日期，或初步、二次和/或探索性分析所需的来自最后一名个体的最后一个数据点的接收日期，以较晚的日期为准。

将在该1b期探索的剂量水平如下所示：

BID＝每天两次；QD＝每天一次；q28＝每28天一次(第1周期第8天；后续周期的第1天)；Ritux＝利妥昔单抗

所有治疗周期的长度均为28天。

对于A组，给药将在剂量水平1下开始，以及对于B组和C组，将在剂量水平2下开始。在开始下一个更高的剂量水平之前，必须清除每个剂量水平。如果在初始剂量水平下发生不可接受的毒性，则允许降低化合物A(1mgQD)和化合物1(15mgQD)的起始剂量。未计划降低化合物AA的起始剂量。对于B组，化合物A剂量将降低；对于C组，化合物1剂量将降低。对于A组，SRC将决定降低双重药中的两种药物中哪一种的剂量。

化合物A、化合物1和化合物AA将在28天周期中以连续基础每日给药。为了使肿瘤溶解综合征的风险最小，当给予利妥昔单抗时，其将在第1周期的第8天给药，然后在每个后续周期的第1天给药。

在任何定群中在第1天给予第一剂量后，在可以开始下一个更高的方案制定剂量定群之前，将观察个体至少28天。在第1周期期间不允许进行研究药物的个体内剂量递增，但如果SRC批准，则可允许在之后的周期中进行。允许一种或两种药物由于毒性而剂量降低和暂时中断，但在第1周期期间剂量降低将构成DLT。

如果出现疾病进展迹象、不可接受的毒性或个体/医师决定退出时，可以停止研究治疗。个体可以根据研究者的判断在超过疾病进展后继续接受研究药物。

根据定群大小，在剂量递增过程中招募的个体的估计的总数为约30至60。在扩展阶段期间，将评价约30至60个另外的个体(每种选择的方案10至20个)的安全性、PK、PD和初步抗肿瘤作用。

如果出现疾病进展迹象、不可接受的毒性或个体/医师决定退出时，可以停止研究治疗。个体可以根据研究者的判断在超过疾病进展后继续接受研究药物。

根据定群大小，在剂量递增过程中招募的个体的估计的总数为约50至100。在扩展阶段期间，将评价约30至60个另外的个体(每种选择的方案10至20个)的安全性、PK、PD和初步抗肿瘤作用。

将每隔2个周期评价个体的疗效直到第6周期，每隔3个周期评价个体的疗效直到第12周期，之后每隔6个月评价。所有治疗的个体将被列入疗效分析。主要疗效变量为肿瘤反应率和持续时间。肿瘤反应将由研究者基于恶性淋巴瘤的国际研讨会标准(IWC)确定(ChesonB,PfistnerB,JuweidM等人.RevisedResponseCriteriaforMalignantLymphoma.JClinOncol,2007,25(5):579-586)。

次要和探索性终点包括评价血液和/或肿瘤中的化合物A、化合物1和化合物AA药效学和预测性生物标志物，及探索PK、PD、毒性和活性关系。

该研究的安全变量包括不良事件(AE)、安全临床实验室变量、12导联心电图(ECG)、东部合作肿瘤组体能状态(ECOG-PS)、左心室射血分数(LVEF)评估、体格检查、眼科检查、生命体征、暴露于研究治疗、合并用药评估和育龄女性(FCBP)妊娠测试。

在剂量递增期间，SRC将基于其对给定剂量定群的所有可用的临床和实验室安全性数据的审查决定评价更高的剂量水平或宣布MTD。

SRC也将选择定群扩展的关注的治疗方案的剂量和时间表。一个或多个方案可以选择用于定群扩展。SRC将在整个研究中继续定期审查安全性数据并对研究持续性和剂量改变作出适当建议。

在C组中将测定化合物1、化合物1的M1代谢物和化合物AA的稳态血浆药代动力学。

化合物A、化合物1和化合物AA的稀疏血浆浓度将在药物组合的单次剂量给予后(在A、B和C组中)以及在稳态下(在A、B和C组中)(不经历密集PK监测的定群)评价。还可以探索药物暴露与安全性、PD和临床终点的相关性作为探索性终点。

将探索每种新型药剂在基线处及在研究治疗中的药效学生物标志物，包括：1)化合物A，CRBN基质在B和T细胞中的调控；2)化合物1，mTOR信号转导通路生物标志物(p4E-BP1、pAKT和可能的其他生物标志物)；3)化合物AA、B细胞受体信号转导通路生物标志物(pBTK、pERK和可能的其他生物标志物)。

统计分析将视需要或在适用时通过研究阶段、治疗组和剂量水平进行。所有分析的性质将是描述性的。

主要关注的疗效变量为肿瘤反应和持续时间。包括(FDG)-PET结果的其他初步疗效变量将使用分类变量的频率表格或连续变量的描述性统计来总结。疗效分析将针对招募的经治疗的和疗效可评价的群体重复进行，其中使用治疗群体的结果视为主要结果。

安全性数据的所有总结将使用接受至少一种剂量的研究药物的个体(安全群体)进行。

在剂量递增阶段期间，将招募约30至60名个体。之后，在剂量扩展阶段期间，可以在每个选择的定群中招募20名个体，由于该研究的主要目的是测定安全性/耐受性和MTD/RP2D，因此将不会提前规定任一阶段的精确样品尺寸。

供选择的方案2.新型组合和利妥昔单抗在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的1B期多中心开放标签研究。该研究为TOR激酶抑制剂化合物1、化合物A(3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮)和化合物AA(N-(3-(5-氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯基)丙烯酰胺)当在患有弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的个体中组合给予以及与利妥昔单抗组合给予时的1B期多中心开放标签研究。

该研究的主要目的是测定化合物A、化合物1和化合物AA当作为双重药经口给予以及作为与利妥昔单抗组合的三重药经口给予时的安全性和耐受性，测定化合物A当与利妥昔单抗组合给予时的安全性和耐受性，以及确定每个组合的不耐受剂量(NTD)和最大耐受剂量(MTD)和/或推荐的2期剂量(RP2D)。研究的次要目的是提供关于每种药物组合的初步疗效的信息，并且在作为单一药剂组合经口给予之后表征化合物A、化合物1和化合物AA的稳态药代动力学(PK)。

研究设计。该研究为在至少一线的标准治疗失败的患有复发性/难治性DLBCL的个体中，作为双重药和作为与利妥昔单抗组合的三重药经口给予的化合物A、化合物1和化合物AA，以及化合物A加上利妥昔单抗双重药的1b期剂量递增和扩展临床研究。研究的剂量递增阶段将针对每个新型药剂使用标准3+3剂量递增设计探索一种或多种药物剂量，其中更高的剂量定群包括添加固定剂量的利妥昔单抗，接着扩展关注的选择的定群。如果未达到更高的剂量水平，则可在双重药MTD下评价添加的利妥昔单抗。治疗组包括：化合物A+化合物1+/-利妥昔单抗(A组)、化合物A+化合物AA+/-利妥昔单抗(B组)、化合物AA+化合物1+/-利妥昔单抗(C组)和化合物A+利妥昔单抗(D组)。

所有治疗最初将以28天的周期给予。化合物A、化合物1和化合物AA最初在每个28天的周期的第1至28天按连续给药时间表经口给予，每天一次(QD)或每天两次(BID)。当方案中包括利妥昔单抗时，其在每个周期中将仅作为375mg/m²的标准固定静脉内(IV)剂量给予一次(第1周期的第8天，和每个后续周期的第1天)。将在一种或两种剂量水平下探索所有三种化合物，所述剂量水平包括：化合物A(2.0和3.0mgQD)、化合物1(20和30mgQD)和化合物AA(500mgBID)。最高的两个双重药剂量水平(或如果在更低的剂量水平下，MTD)将探索与利妥昔单抗的组合。

将使用标准“3+3”剂量递增设计来确定每个组合的初始毒性。个体将基于研究者选择及开放空位被分配至研究治疗组。3名个体的定群将以限定的剂量增量服用研究药物，且在3个可评价个体中1个发生剂量限制性毒性(DLT)的情况下，将定群扩大至6名个体。

DLT的可评价个体定义为在第1周期期间接受至少80％的计划剂量的化合物A、化合物1或化合物AA而未经历DLT的个体，和在第1周期期间接受至少80％的计划剂量的利妥昔单抗(仅在含利妥昔单抗的定群中)而未经历DLT的个体；或在接受至少一种剂量的任意研究药物后经历DLT的个体。不可评价的个体将被替换。在任何剂量定群中的另外的个体可以根据安全审查委员会的决定来招募(SRC)。

当定群中的6个可评价个体中的2个在第1周期经历药物相关的DLT时，将该剂量视为NTD。MTD定义为6个可评价个体中的0个或1个在第1周期期间经历DLT的最后一个在NTD以下的剂量水平。如果在任一组合的第一剂量水平下观察到6个DLT中的2个，则可以根据SRC的决定探索更低的剂量组合。可以评价研究药物的中间剂量(NTD和NTD之前的最后一个剂量水平之间的剂量)以准确确定组合的MTD。还可以评价降低在周期中的研究药物的总暴露的供选择的时间表的耐受性。

在完成剂量递增后，选择的组合治疗组可以扩大到至多约20名个体每组。扩大可以在剂量递增阶段中建立的MTD下进行，或基于研究数据审查在供选择的可耐受的组合剂量水平下进行。

用于分析基因异常、RNA和蛋白表达和治疗活性的生物标志物的成对肿瘤活组织检查在剂量递增阶段是任选的，但在剂量扩展阶段是强制性的。

研究群体将由18岁或以上的患有复发性或难治性DLBCL且在至少两个先前的标准治疗方案后出现疾病进展的男性及女性组成，且在化疗敏感患者中进行自体干细胞移植是符合条件的。招募还将包括在ASCT之前选择的高风险个体和在其他方面不符合ASCT的个体。

纳入标准：个体必须满足以下标准以招募到研究中：(1)在进行任何研究相关的评估或程序之前，理解并自愿签署知情同意文件；(2)同意恢复用于分析的档案肿瘤组织(在档案组织不可用的情况下，发起人可以允许例外)；(3)同意接受成对肿瘤活组织检查(筛选和治疗中)以用于遗传分析和生物标志物评价(仅扩展定群)(在特殊情况下可以放弃该要求)；(4)在至少两种先前的标准治疗方案(例如，R-CHOP或类似的一线方案和至少一个二线抢救方案)和化疗敏感患者的ASCT之后患有组织学或细胞学确诊的复发性或难治性DLBCL(包括转型低度淋巴瘤)的18岁以上的男性和女性，其中以下情况例外：(i)在ASCT前背景下预后较差、定义为原发性难治性疾病、在一线治疗后12个月内复发、患有具有Bcl-2/Myc基因重排或过表达的“二次打击”淋巴瘤或在复发时具有高IPI分数(2,3)的个体；(ii)拒绝ASCT或根据研究者的判断在其他方面不适合ASCT的年龄>65的个体；(5)至少一个可测量疾病的位点(长轴>1.5cm或长轴和短轴>1.0cm)；(6)ECOGPS为0或1；(7)个体必须具有以下实验值：(i)在没有生长因子支持的情况下嗜中性细胞绝对计数(ANC)≥1.5x10⁹/L达7天；(ii)血红蛋白(Hgb)≥8g/dL；(iii)在未输血的情况下血小板(plt)≥50x10⁹/L达7天(如果接受培非格司亭，则14天)；(iv)钾在正常范围内或可用补充剂校正；(v)AST/SGOT和ALT/SGPT≤2.5x正常值上限(ULN)或如果存在肝肿瘤则≤5.0xULN；(vi)血清胆红素≤1.5xULN；(vii)使用Cockcroft-Gault方程估算的血清肌酐清除率≥50mL/min；(8)育龄女性(FCBP)(育龄女性为1)未经历子宫切除(手术***)或双侧卵巢切除术(手术切除两个卵巢)或2)自然绝经后未超过至少连续24个月(即，在之前的连续24个月期间在任何时间有月经的性成***性)必须：(i)同意在整个研究期间使用至少两种有效避孕方法(口服、可注射或可移植的激素避孕药；输卵管结扎；子宫内装置；具有杀精剂的避孕屏障；或切除输精管的伴侣)，其中之一必须是屏障，并在最后的研究药物剂量之后多达28天；(ii)在筛选时具有阴性血清妊娠测试(敏感性为至少25mIU/mL)；(iii)在研究治疗的第1周期第1天之前72小时内具有阴性血清或尿液妊娠测试(由研究者判断)(应注意如果在之前的72小时内进行筛选血清妊娠测试，则其可以用作研究治疗第1天之前的测试)；(iv)在任何研究药物的最后一次剂量后避孕28天；(v)同意在研究过程中接受持续性妊娠测试；(9)男性必须完全禁欲或同意在与怀孕女性或育龄女性发生性接触期间使用避孕套(建议乳胶避孕套)且在参与研究时在给药中断期间避免怀孕，并在研究药物停止后持续至少28天，即使其已经历成功的输精管切除术；(10)招募至治疗组的接受化合物A的所有个体必须：(i)理解(研究产品)IP可能具有潜在的致畸风险；(ii)同意在服用IP时放弃献血或捐精并在停用IP后持续至少28天；(iii)同意不与另外的人共用IP；(iv)被告知怀孕预防措施和胎儿暴露风险，并同意PPRMP的要求；(11)能够遵循研究随访计划和其他方案要求。

排除标准：存在以下任何情况将使个体从招募中排除：(1)症状性中枢神经***损害；(2)已知的症状性急性或慢性胰腺炎；(3)尽管有医疗管理，但持续性腹泻或吸收障碍≥NCICTCAE2级；(4)外周神经病变≥NCICTCAE2级；(5)心脏功能受损或临床显著的心脏病，包括以下任一种：(i)由MUGA或ECHO测得的LVEF<45％；(ii)完全性左束支或双束支传导阻滞；(iii)先天性长QT综合征；(iv)持续性或有临床意义的室性心律失常；(v)在筛查ECG时QTcF>460毫秒(重复三次记录的平均值)；(vi)在开始研究药物之前≤3个月出现不稳定的心绞痛或Uns表心绞痛或心肌梗塞；(vii)肌钙蛋白T值>0.4ng/ml或BNP>300pg/mL(基线肌钙蛋白T>ULN或BNP>100pg/mL的个体是符合条件的，但在招募至试验中之前必须具有心脏病学家评价，以用于基线评估和心脏保护治疗优化)；(6)接受积极治疗的患有糖尿病的个疗或具有以下两种情况之一的个体(仅针对在包含化合物1的组中治疗的个体)：(i)空腹血糖(FBG)≥126mg/dL(7.0mmol/L)；(ii)HbA1c≥6.5％；(7)之前在第一次给药前≤3个月接受过ASCT≤3；(8)先前接受过具有标准或降低的强度调节的同种异体干细胞移植；(9)在开始研究药物前≤5个半衰期或4周内(以短的为准)，接受过先前的全身性针对癌症的治疗或研究形式；(10)先前接受过双重mTORC1/mTORC2抑制剂(仅化合物1)或BTK抑制剂(仅化合物AA组)治疗(允许先前使用雷帕霉素类似物、PI3K或AKT抑制剂、来那度胺和利妥昔单抗治疗)；(11)在开始研究药物之前≤2周进行过大手术的个体(个体必须从可能混淆研究药物的安全性评价的最近的手术或治疗的任何影响中恢复；放射疗法无需特异性清除)；(12)怀孕或哺乳女性(未采用两种避孕方式的具有生殖潜能的成人)；(13)具有已知HIV感染的个体；(14)具有已知的慢性活动性肝炎B或C病毒(HBV/HCV)感染的个体；(15)具有治疗相关的骨髓增生异常综合征的个体；(16)长期使用质子泵抑制剂或H2拮抗剂或在第一次给药7天内针对包含化合物AA的组(B和C)中经治疗的个体使用。患有慢性胃食管返流疾病、消化不良和消化性溃疡病的个体在招募到该研究中之前应谨慎评价其对该治疗的适合性(这些药物在整个研究中禁止合并用药)；(17)使个体处于不可接受的风险下或妨碍个体顺从研究的任意其他显著的医疗病症、实验室异常或精神疾病；(18)需要积极持续的全身治疗的并发性第二癌症病史。

招募预期耗时约24个月完成(18个月用于剂量递增，6个月用于扩展)。完成积极治疗和治疗后随访预期将另外耗时6–12个月。整个研究预期持续约3年。

如方案和/或统计分析计划中事先规定的，试验结束定义为最后一次随访最后一名个体以完成研究的日期，或初步、二次和/或探索性分析所需的来自最后一名个体的最后一个数据点的接收日期，以较晚的日期为准。

将在该1b期探索的剂量水平如下所示：

BID＝每天两次；QD＝每天一次；q28＝每28天一次(第1周期第8天；后续周期的第1天)；Ritux＝利妥昔单抗

所有治疗周期的长度均为28天。对于A组，给药将在剂量水平1下开始，对于B组和C组，将在剂量水平2下开始，对于D组，将在剂量水平3下开始。在开始下一个更高的剂量水平之前，必须清除每个剂量水平。如果在初始剂量水平下发生不可接受的毒性，则允许降低化合物A(1.5mgQD和1mgQD)和化合物1(15mgQD)的剂量。另外，允许基于SRC审查探索化合物A的供选择的时间表(7天中的5天每天给药)。未计划降低化合物AA的起始剂量。

对于B组和D组，化合物A剂量将降低；对于C组，化合物1剂量将降低。对于A组，SRC将决定降低双重药中的两种药物中哪一种的剂量。

化合物A、化合物1和化合物AA将在28天周期中以连续基础每日给药。化合物A给药可以基于SRC审查改变为7天中的5天(周期长度仍为28天)。为了使肿瘤溶解综合征的风险最小，当给予利妥昔单抗时，其将在第1周期的第8天给药，然后在每个后续周期的第1天给药。

在任何定群中在第1天给予第一剂量后，在可以开始下一个更高的方案制定剂量定群之前，将观察个体至少28天。在第1周期期间不允许进行研究药物的个体内剂量递增，但如果SRC批准，则可允许在之后的周期中进行。允许一种或两种药物由于毒性而剂量降低和暂时中断，但在第1周期期间剂量降低将构成DLT。

如果出现疾病进展迹象、不可接受的毒性或个体/医师决定退出时，可以停止研究治疗。个体可以根据研究者的判断在超过疾病进展后继续接受研究药物。

根据定群定群大小，在剂量递增过程中招募的个体的估计的总数为约36至72。在扩展阶段期间，将评价约40至80个另外的个体(每种选择的方案10至20个)的安全性、PK、PD和初步抗肿瘤作用。

将每隔2个周期评价个体的疗效直到第6周期，每隔3个周期评价个体的疗效直到第12周期，之后每隔6个月评价。所有治疗的个体将被列入疗效分析。主要疗效变量为肿瘤反应率和持续时间。肿瘤反应将由研究者基于恶性淋巴瘤的国际研讨会标准(IWC)确定(Cheson等人,JClinOncol,2007,25(5):579-586)。

次要和探索性终点包括评价血液和/或肿瘤中的化合物A、化合物1和化合物AA药效学和预测性生物标志物，及探索PK、PD、毒性和活性关系。

该研究的安全变量包括不良事件(AE)、安全临床实验室变量、12导联心电图(ECG)、东部合作肿瘤组体能状态(ECOG-PS)、左心室射血分数(LVEF)评估、体格检查、生命体征、暴露于研究治疗、合并用药评估和育龄女性(FCBP)妊娠测试。

在剂量递增期间，SRC将基于其对给定剂量定群的所有可用的临床和实验室安全性数据的审查决定评价更高的剂量水平或宣布MTD。

SRC也将选择定群扩展的关注的治疗方案的剂量和时间表。一个或多个方案可以选择用于定群扩展。SRC将在整个研究中继续定期审查安全性数据并对研究持续性和剂量改变作出适当建议。

在C组中将测定化合物A、化合物1、化合物1的M1代谢物和化合物AA的稳态血浆药代动力学。在所有组中，化合物A、化合物1和化合物AA的稀疏血浆浓度将在药物组合的单次剂量给予后以及在稳态下评价(除了C组中的剂量水平2以外，其将在稳态下经历密集PK监测)。还可以探索药物暴露与安全性、PD和临床终点的相关性作为探索性终点。

将探索每种新型药剂在基线处及在研究治疗中的药效学生物标志物，包括：1)化合物A，CRBN基质在B和T细胞中的调控；2)化合物1，mTOR信号转导通路生物标志物(p4E-BP1、pAKT和可能的其他生物标志物)；3)化合物AA、B细胞受体信号转导通路生物标志物(pBTK、pERK和可能的其他生物标志物)。

统计方法学概述。统计分析将视需要或在适用时通过研究阶段、治疗组和剂量水平进行。所有分析的性质将是描述性的。主要关注的疗效变量为肿瘤反应和持续时间。包括(FDG)-PET结果的其他初步疗效变量将使用分类变量的频率表格或连续变量的描述性统计来总结。疗效分析将针对招募的经治疗的和疗效可评价的群体重复进行，其中使用治疗群体的结果视为主要结果。安全性数据的所有总结将使用接受至少一种剂量的研究药物的个体(安全群体)进行。

除非另外指出，所有生物标志物相关数据表示将基于具有至少一种基线和一种研究中评价的治疗的个体(生物标志物可评价的群体)。描述性统计将针对基线提供，并通过治疗组和整体从连续的生物标志物终点的基线改变。

在剂量递增阶段期间，将招募约36至72名个体。之后，在剂量扩展阶段期间，可以在每个选择的定群中招募20名个体，由于该研究的主要目的是测定安全性/耐受性和MTD/RP2D，因此将不会提前规定任一阶段的精确样品尺寸。

6.5化合物制剂

在本文提供的方法中有用的化合物1的说明性制剂列于下表3-6中。

表3

表4

表5

表6

在本文提供的方法中有用的化合物2的说明性制剂列于下表7中。

表7：示例性片剂

已引用许多参考文献，其公开内容以全文引用方式并入本文中。本文公开的实施方式的范围不受实施例中公开的具体实施方式的限制，所述具体实施方式旨在作为所公开的实施方式的数个方面的说明，且本发明包括功能上等价的任何实施方式。事实上，除本文中显示和描述的修改外，本文公开的实施方式的各种修改对本领域技术人员将是显而易见的，且旨在落入所附权利要求的范围内。

Claims (19)

1.一种用于治疗癌症的方法，包括向患有癌症的患者给予与有效量的5-取代喹唑啉酮化合物组合的有效量的TOR激酶抑制剂，其中所述TOR激酶抑制剂为式(I)化合物：

及其药学上可接受的盐、包合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢物、同位素体和前药，其中：

R¹为取代或未取代的C_1-8烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基或取代或未取代的杂环基烷基；

R²为H、取代或未取代的C_1-8烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的杂环基烷基、取代或未取代的芳烷基或取代或未取代的环烷基烷基；

R³为H或取代或未取代的C_1-8烷基，

条件是，所述TOR激酶抑制剂不是7-(4-羟基苯基)-1-(3-甲氧基苄基)-3,4-二氢吡嗪并[2,3-b]吡嗪-2(1H)-酮。

2.权利要求1的方法，其中，所述癌症为血源性癌症。

3.权利要求2的方法，其中，所述血源性癌症为淋巴瘤、白血病或多发性骨髓瘤。

4.权利要求3的方法，其中，所述淋巴瘤为非霍奇金氏淋巴瘤。

5.权利要求4的方法，其中，所述非霍奇金氏淋巴瘤为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、急性髓性白血病(AML)、套细胞淋巴瘤(MCL)或ALK+间变性大细胞淋巴瘤。

6.权利要求4的方法，其中，所述非霍奇金氏淋巴瘤为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。

7.权利要求3的方法，其中，所述淋巴瘤为B细胞淋巴瘤。

8.权利要求7的方法，其中所述B细胞淋巴瘤为选自弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤/白血病、套细胞淋巴瘤、纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、边缘区淋巴瘤和淋巴浆细胞性淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症的B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。

9.权利要求8的方法，其中，所述B细胞非霍奇金氏淋巴瘤为难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。

10.权利要求8的方法，其中，所述B细胞非霍奇金氏淋巴瘤为复发性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤。

11.权利要求7的方法，其中，所述B细胞淋巴瘤为慢性淋巴细胞性白血病或小淋巴细胞性淋巴瘤。

12.权利要求3的方法，其中，所述淋巴瘤为T细胞淋巴瘤。

13.权利要求1的方法，其中，所述癌症为头部、颈部、眼、口腔、喉部、食管、支气管、咽喉、咽部、胸部、骨、肺、结肠、直肠、胃、***、膀胱、子宫、宫颈、乳腺、卵巢、睾丸或其他生殖器官、皮肤、甲状腺、血液、***、肾脏、肝脏、胰腺和脑部或中枢神经***的癌症。

14.权利要求1的方法，其中，所述癌症是与涉及mTOR、PI3K或Akt激酶及其突变体或同工型的通路相关的癌症。

15.权利要求1的方法，其中，所述5-取代喹唑啉酮化合物为3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮或其药学上可接受的盐。

16.权利要求15的方法，其中，所述5-取代喹唑啉酮化合物为3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-哌啶-2,6-二酮盐酸盐。

17.权利要求1的方法，其中，所述TOR激酶抑制剂是来自表A的化合物。

18.权利要求1的方法，还包括给予抗CD20抗体。

19.权利要求18的方法，其中，所述抗CD20抗体为利妥昔单抗。