CN103598447B - 一种无抗乳猪教槽料及其制备方法 - Google Patents
一种无抗乳猪教槽料及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种无抗乳猪教槽料，其中各种原料为膨化玉米、膨化大豆、血浆蛋白粉、蒸汽鱼粉、大豆浓缩蛋白、低蛋白乳清粉、乳糖、发酵豆粕、葡萄糖、蔗糖、食盐、抗氧化剂、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、氧化锌、三丁酸甘油酯、微生态制剂、复合酸化剂、复合酶制剂、复合维生素预混料、复合矿物质预混料。本发明利用三丁酸甘油酯、氧化锌、酸化剂和微生态制剂之间的协同作用，在不使用抗生素的前提下，帮助仔猪实现早期断奶并顺利通过断奶应激，调节乳猪胃肠道健康，控制腹泻，提高成活率，全面提高乳猪的免疫力和抗病力。
Description
技术领域
本发明属于饲料领域，涉及一种乳猪饲料，特别涉及一种无抗生素乳猪教槽料及其制备方法。
背景技术
动物使用抗生素已有六、七十年的历史，作为治疗、防病、保健和促生长作用的药物，对畜牧业发展起到了巨大的促进作用，现在畜牧业中仍广泛应用。但是随着科学进步和人们对生物演变认识的不断提高，抗生素对人类的危害和潜在的危害也日益明确。
滥用抗生素可破坏动物肠道内菌群平衡；可使细菌耐药性增强和耐药菌株增加；不饲喂抗生素时动物抵抗力差，身体正常发育受影响；引起畜产品药物残留，残留的抗生素可通过畜产品和环境慢慢聚集于人体和其它植物体内，最终可通过各种途径汇集于人体。欧盟及其他发达国家对抗生素限制使用和对畜产品检测标准提高，直接影响我国畜产品的出口。禁止滥用抗生素的呼声响彻世界各地，也引起了我国的高度重视，但禁用抗生素会带来巨大的经济损失。我国是一个发展中国家，畜牧业生产方式已家庭饲养为主，生产环境条件差，生产水平不高，对抗生素依赖性强，因而现阶段寻求其他物质替代抗生素是我们的迫在眉睫的事情。
随着国内养猪业的不断发展，仔猪的断奶日龄也正在被不断提前。即从过去一般水平的28天断奶，逐渐提前至21天，甚至21天以前。仔猪早期断奶不仅可缩短母猪的哺乳时间从而提高母猪的繁殖率和年产仔数、提高分娩舍利用率、降低仔猪的生产成本，而且能阻断某些传染病的传播。
早期断奶仔猪由于消化***发育不成熟，消化酶***不健全，胃酸分泌不足，断奶时母体提供的抗体停止而自身的主要免疫***未完善，对疾病和应激抵抗能力下降加上受生理环境营养应激等因素影响导致仔猪食欲差、消化不良、生长抑制、饲料利用率低、腹泻甚至死亡。
公开号为CN1513347的中国发明专利申请于2004年7月21日，该专利公开了三丁酸甘油酯做为饲料添加剂的应用，三丁酸甘油酯的用量，按照饲料总重量计，为0.1%-0.2%，最好是0.5%-1.0%。
虽然三丁酸甘油酯作为饲料添加剂使用可以起到调节断奶仔猪胃肠道的功能，提高饲料利用率，但是单独依靠三丁酸甘油酯不能完全起到替代抗生素的作用，同时也未考虑到其它原料和添加剂与三丁酸甘油酯的协同作用和加工工艺对其功能的影响。
发明内容
本发明的目的是在早期断奶仔猪饲料中使用易消化，易吸收，无抗营养因子的原料；同时为了减少抗生素的使用，在饲料中添加一些可促进仔猪肠道发育、增强免疫力、提高生产性能、防治下痢等功能性饲料添加剂来替代抗生素。
为了实现上述发明目的，本发明提供了无抗乳猪教槽料，其包括第一次制粒原料和第二次制粒原料，其中，所述第一次制粒原料包括如下重量份的组分：膨化玉米35-50份、膨化大豆15-22份、蒸汽鱼粉3-5份、大豆浓缩蛋白2-5份和发酵豆粕1-4份，所述第二次制粒原料包括如下重量份的组分：血浆蛋白粉2-4份、低蛋白乳清粉10-15份、乳糖5-10份、葡萄糖3-5份、蔗糖2-5份、食盐0.1-0.3份、抗氧化剂0.05-0.1份、赖氨酸0.1-0.3份、苏氨酸0.1-0.3份、蛋氨酸0.1-0.3份、色氨酸0.01-0.1份、氧化锌0.1-0.3份、三丁酸甘油酯0.1-0.4份、微生态制剂0.05-0.2份、复合酸化剂0.1-0.4份、复合酶制剂0.05-0.2份、复合维生素预混料0.1-0.3份、复合矿物质预混料0.1-0.3份。
其中，所述复合酶制剂包括淀粉酶1300U/g、蛋白酶2500U/g、纤维素酶1500U/g、果胶酶2000U/g、植酸酶50U/g和β-葡聚糖酶3500U/g。
其中，所述微生态制剂包括枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸片球菌、约氏乳杆菌和酿酒酵母菌，总的有效活菌含量≥1×109CFU/g。
其中，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CGMCC No.6511，所述的嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌CGMCC No.6499，所述的乳酸片球菌为乳酸片球菌CGMCC No.6500，所述约氏乳杆菌为约氏乳杆菌CGMCC No.4926，所述酿酒酵母菌为酿酒酵母菌No.6560。
其中，所述酸化剂主要由延胡索酸、苹果酸、柠檬酸及磷酸组成，采用植物油脂包被。
其中，所述的抗氧化剂为L-抗坏血酸、丁羟甲苯、丁羟甲氧苯、生育酚、乙氧基喹啉等的一种或几种。
其中，每1kg复合矿物质预混料中含35000mg铜、40000mg铁、15000mg锰、26000mg锌、100mg硒、120mg碘，载体为石粉。
其中，每1kg复合维生素预混料中含4000万IU维生素A、500万IU维生素D3、35g维生素E、8500mg维生素K、6g维生素B1、18g维生素B2、10g维生素B6、50mg维生素B12、1500mg叶酸和1500mg生物素，载体为次粉和麦饭石粉。
本发明还提供所述无抗乳猪教槽料的制备方法，其包括如下步骤：
第一次制粒：按重量份称取膨化玉米、膨化大豆、蒸汽鱼粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕，用0.8-1.0筛片对各原料进行超微粉碎，粉碎力度为100%过20-40目，然后混合150-300秒，在100℃以上进行第一次制粒，原料糊化度达到90%以上，得到半成品；
第二次低温制粒：按照先投酸化剂、氨基酸类、复合维生素预混料、复合矿物质预混料、再投放三丁酸甘油酯，复合酶制剂、微生态制剂，最后投放蔗糖、葡萄糖、氧化锌和其它原料的顺序进行小料的投放，与用0.8-1.0筛片粉碎的半成品混合150-300秒，粉碎力度为100%过20-40目，在蒸汽压力为0.2-0.4Mpa，制粒温度为60℃以下的条件下，用2.5-3.0孔径环膜进行第二次低温制粒，最后经过破碎，过筛，冷却得到成品。
本发明中的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）为申请人从传统发酵豆豉中分离得到，其生物学特征如下：单个细胞，0.7-0.8×2-3μm菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，菌落圆形，边缘呈锯齿状，革兰氏阳性菌；芽孢0.6-0.9×1.0-1.5μm，形态为椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大，需氧菌。本发明中的枯草芽孢杆菌耐酸性强，耐胆盐，耐高温（可耐受80℃的制粒温度），既而在进入动物肠道后能够保持改的生物活性，有效抑制致病性大肠杆菌K88，K99和金黄色葡萄球菌，促进有益菌生长。能够菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用，能够提高饲料养分消化率，提高动物生产性能，有利于减少养殖周期和养殖成本。能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，为动物机体的正常生长和生理机能的发挥提供保障，并提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，增强免疫机能和抗疾病能力。本发明的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）已于2012年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.6511。
本发明中的嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）为申请人从动物肠道中分离得到，能分泌抗生物素类物质(嗜酸乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素)，对肠道致病菌产生拮抗作用，抑制肠道不良微生物的增殖，调整肠道菌群平衡，它的生物学特征如下：杆菌，两端圆，0.6-0.9×1.5-6μm，以单个、成双或短链出现；不运动，无边帽，菌落粗糙。在显微镜下观察，显示缠绕或微绒毛丝状物，从似暗影的菌堆的中心放射伸出。无特有的色素。可同化苦杏仁苷、纤维二糖、七叶苷、果糖、麦芽糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、甘露糖、蜜二糖、棉籽糖、海藻糖，不能同化***糖、葡萄糖酸盐、甘露糖。同型发酵，产生DL-乳酸。15℃下不生长，最适生长温度为35℃-38℃，生长初始pH值为5.0-7.0，最适生长pH值为5.5-6.0。本发明的嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）申请人已于2012年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.6499。
本发明提供的乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）新菌株为申请人从鸭空肠内容物中分离得到。生物学特征如下：细胞圆球状，在直角两个平面交替***形成四联状，一般细胞成对生，单生者罕见，不成链状排列。革兰氏阳性，不运动，兼性厌氧。在MRS培养基上菌落小，呈白色。可利用葡萄糖、核糖、木糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、果糖、七叶灵、甘露糖、鼠李糖，但不能利用L-***糖、麦芽糖、蔗糖等；不分解蛋白质，不能水解淀粉，不还原硝酸盐，不产吲哚；接触酶反应阴性，过氧化氢酶阴性。可在含6%～8%的NaCl环境中生长，耐NaCl浓度13%～20%。生长温度15-45℃，pH4.5-9.6，pH为微酸性至中性时生长发育良好。乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）新菌株HT已于2012年09月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.6500。
本发明所述的约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)CGMCCNo.4926是申请人从北京猪大肠中筛选出来，经过胃酸、胆盐的驯化和选育得到的，此株约氏乳杆菌抗逆性比较强，具有良好的耐酸性、人工胃肠液耐受性及胆盐耐受性。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期为2011年6月8日，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，简称CGMCC，保藏号是CGMCC No.4926。
本发明的酿酒酵母（Saccharomy cescerevisiae）菌株分离自新鲜荔枝皮中，命名为K1，并于2012年09年11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.6560。本发明的酿酒酵母K1与现有的酿酒酵母相比，对猪肠道常见的革兰氏阴性和阳性细菌均有抑制作用，因此具有意料不到的技术效果。且这种酵母易培养，发酵、处理后活菌数较高。
本发明的教槽料饲料配方采用理想氨基酸模式，净能体系，使用多种易消化吸收的营养物质，添加合成氨基酸和其它营养性添加剂，来满足断奶仔猪的营养需要和改善小猪的生理机能。
本发明教槽料中使用大豆浓缩蛋白：大豆浓缩蛋白是用高质量的豆粕除去水溶性或醇溶性非蛋白部分后，所制得的含有65%（干基）以上蛋白质的大豆蛋白产品。各种氨基酸含量及其丰富，动物食后消化吸收率高，抗营养因子极低，无其它异味，口感好。
本发明教槽料中使用发酵豆粕：通过发酵过程中微生物分泌的酶将豆粕中的部分蛋白酶解为分子量3000以上的大豆多肽。发酵豆粕中的大分子蛋白质有序降解为多肽、小肽，降低植物蛋白的抗原性；微生物发酵过程中产生大量乳酸、蛋白酶、维生素等，产品具有天然乳香味或特有的发酵香味；富含乳酸菌，芽孢杆菌，酵母菌等有益菌种。
本发明所述氧化锌的锌含量优选≥99%，氧化锌具有预防乳猪腹泻和促进生长的功能，作用有效稳定，为天然产品，具有天然属性，氧化锌的抑菌作用至今没有发现耐药性。
本发明的血浆蛋白粉的新鲜度≤25%；IGg含量≥16%。血浆蛋白粉主要营养成分是蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、磷及一些动物必需的常量和微量矿物元素，蛋白质含量在70％以上，消化率在93％以上，铁、磷、镁等矿物元素的消化率也较高，可提高畜禽营养的全价性和日粮的平衡性。血浆蛋白粉中含有丰富的免疫物质，免疫球蛋白含量达血浆蛋白粉的16％以上，还含有大量的生长因子、干扰素、溶菌酶等免疫物质，这些物质能被仔猪完整吸收,可有效的增强仔猪免疫力,提高仔猪对疾病的抵抗力,降低仔猪的腹泻率和死亡率。
本发明中三丁酸甘油酯是维持肠道上皮细胞的能量源物质，它可以提高小肠绒毛生长，降低隐窝深度；而氧化锌可以通过维持肠道上皮细胞通透性和防止病原物质或抗原对上皮细胞的吸附作用来避免其对肠道上皮细胞的损害，两者的协同作用可以很好的促进断奶仔猪肠道微生态健康，增加了肠道壁抗击病原体的免疫力和营养吸收能力，从而达到替代抗生素的作用，使仔猪能够顺利度过断奶应激，避免拉稀，提高乳猪的免疫力和抗病力。
本发明中添加的微生态制剂含有大量的乳酸菌和酵母菌等有益菌群，而三丁酸甘油酯分解产生的丁酸及一丁酸甘油酯均属于有机酸，在与酸化剂的协同作用下，调节胃肠道微生物菌群的结构，促进乳酸菌的繁殖生长，抑制和阻止大肠杆菌、梭状芽胞杆菌、沙门氏菌、β溶血性类细菌等有害菌的繁殖，增加乳酸杆菌等优势菌群的数量，使有益菌数量占优势。其中三丁酸甘油酯与酸化剂、微生态制剂的协同作用可以抑制有害菌的繁殖，使肠内菌群保持平衡，从而达到替代抗生素的作用。
同时采用膨化大豆、膨化玉米、血浆蛋白粉、蒸汽鱼粉、发酵豆粕等原料，均衡营养的同时全面提高乳猪高适口性和消化率，使乳猪在断奶后可以快速上食。添加高比例的乳糖、低蛋白低蛋白乳清粉，满足乳猪对乳糖的需要。低蛋白乳清粉能提供大量的乳糖，在仔猪消化道内发酵可产生大量的乳酸，降低pH值，帮助乳的消化，抑制致病细菌的生长，这对仔猪健康有主要意义；低蛋白乳清粉中含有的高质量乳清蛋白在小猪体内有高消化率、良好的氨基酸型态、无抗营养因子的优点,亦含有白蛋白及球蛋白（血清蛋白），对肠道同样具有正面的影响，特别是免疫球蛋白，对肠道具有保护效果，能对抗大肠杆菌。低蛋白乳清粉中亦含有乳过氧化酵素及乳铁蛋白，具有杀菌及制菌的功用。
在不使用抗生素的前提下，本发明的教槽料能帮助仔猪实现早期断奶并顺利通过断奶应激，调节乳猪胃肠道健康，控制腹泻，提高成活率，全面提高乳猪的免疫力和抗病力；采用氨基酸平衡理论，选用易消化，易吸收，无抗营养因子的原料，在满足乳猪快速生长营养需要的同时，全面提高乳猪的适口性和消化率，保证乳猪健康生长。
本发明的教槽料制备为先将主要原料进行科学配比后，进行第一次制粒制成半成品，制粒温度为100℃以上，使其完全熟化，淀粉糊化度达到90%以上，不但可以有效去除原料中的抗营养因子，还可以提高原料适口性和消化率。
第二次低温制粒，将其他功能性和营养性的其它原料按照先投酸化剂、氨基酸类、复合维生素预混料、复合矿物质预混料、再投放三丁酸甘油酯，复合酶制剂、微生态制剂，最后投放蔗糖、葡萄糖、氧化锌和其它辅料的顺序用微量称进行小料的投放，使投料误差精确到0.01kg；与半成品混合均匀后，再一次低温制粒，制粒温度为60℃以下。第二次低温制粒可减少热敏感性原料的营养损失，投料顺序可以保证氧化锌这种碱性物质不与酸化剂等其它酸性物质发生酸碱中和反应，使各营养成分达到最大化的效用，二次低温制粒后的成品可以达到3s速溶的效果，适口性更好。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1枯草芽孢杆菌菌粉制备
1、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CGMCC No.6511活菌制剂的制备
1）枯草芽孢杆菌种子液的制备：将试管斜面保藏菌种接种至装有15mL培养基的试管中，37℃恒温摇床中培养16-20h，转速为225rpm，待活菌数达107CFU/mL，按1%接种于装有100mL种子培养基的250mL锥形瓶中，37℃恒温摇床中培养16-20h，摇床转速为225rpm，待活菌数达107CFU/mL，作为种子液备用。
种子培养基为：葡萄糖，20.0g/L；蛋白胨，10.0g/L；酵母粉，4.0g/L；氯化钠，5g/L；蒸馏水加至1000mL，pH7.0±0.2。
2）液体深层发酵培养
选用5L立式发酵罐进行液体发酵培养。将枯草芽孢杆菌种子液的接种量为1%，装液量20%，37℃好氧培养20h后，测定每毫升菌液中的活菌数，待活菌数达108CFU/mL以上，芽孢形成率到达80%，放灌结束发酵培养（消泡剂为植物油，添加量1%，单位：g/L）。
发酵培养基组成如下：蛋白胨，50g/L；葡萄糖10g/L；酵母粉17g/L；低聚糖3g/L；蒸馏水加至1000mL，pH7.0±0.2。
3）冻干菌粉制备
通过发酵液的离心、浓缩、加入冻干保护剂、真空冷冻干燥及菌粉活菌数检验等生产程序，最终制备出粉状活菌制剂。
4）成品检测
取制备完的粉状活菌制剂1g，按国际NY/T 1461-2007方法测定每克菌粉中的活菌数，测得菌粉中活菌数大于108CFU/g。
实施例2嗜酸乳杆菌菌粉的制备
1）嗜酸乳杆菌CGMCC No.6499种子液的制备：将甘油冻存管中保藏菌种嗜酸乳杆菌用接种针在MRS琼脂培养基平板中划线，37℃恒温培养20h。然后将平板上长出的单菌落接种至装有100mLMRS液体培养基的250mL锥形瓶中，37℃恒温培养20h。再次将培养好的菌液在MRS培养基平板上划线培养，37℃恒温培养20h后，将单菌落接种至装有100mLMRS液体培养基的250mL锥形瓶中，37℃恒温培养20h。将以上操作重复3次，完成嗜酸乳杆菌的活化。
嗜酸乳杆菌种子液的制备：将活化好的嗜酸乳杆菌菌液以5%接种量加入5L发酵罐。培养参数为：温度，37℃；搅拌速度，50rmp；pH值，6.0±0.5；培养时间，24h。发酵过程中加入0.5-1%的CaCO3，调节pH在6.2～6.5；发酵8h后进行补料，即加入50%的葡萄糖200mL。
将上述嗜酸乳杆菌液体种子液以1%的接种量加入到50L发酵罐中，培养参数为：温度，37℃；搅拌速度，50rmp；pH值，6.0±0.5；培养时间，20h。发酵过程中加入0.5-1%的CaCO3，调节pH在6.2～6.5；发酵8h后进行补料，即加入50%的葡萄糖1L。
培养嗜酸乳杆菌所用的MRS液体培养基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，4.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，2.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；pH6.2±0.2。
MRS琼脂培养基是在MRS液体培养基的基础上添加琼脂15g/L。
50L发酵罐增殖培养嗜酸乳杆菌所用的优化培养基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，6.0g/L；葡萄糖，25.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，3.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；pH6.2±0.2。
3）冻干菌粉制备
通过发酵液的离心、浓缩、加入冻干保护剂、真空冷冻干燥及菌粉活菌数检验等生产程序，最终制备出粉状活菌制剂。
4）成品检测
取制备完的粉状活菌制剂1g，按国际GB/T 4789.35-2003方法测定每克菌粉中的活菌数，且菌粉中活菌数大于108CFU/g。
实施例3乳酸片球菌菌粉的制备
1）乳酸片球菌CGMCC No.6500种子液的制备
将试管斜面保藏菌种接种至装有20mL MRS液体培养基的厌氧管中，37℃恒温厌氧培养20h，待活菌数达107CFU/mL，按1%接种于装有100mL MRS液体培养基的250mL锥形瓶中，37℃厌氧培养20h，待活菌数达107CFU/mL（MRS琼脂培养基平板计数）以上，作为种子液备用。
2）液体深层发酵培养
将上述乳酸片球菌液体种子液以1%的接种量加入到50L发酵罐中，培养参数为：温度，37℃；搅拌速度，50rmp；pH值，6.0±0.5；培养时间，20h。发酵过程中加入发酵总体积0.5%的CaCO3，调节pH在6.2-6.5；发酵8h后进行补料，即加入50%的葡萄糖1L。
培养乳酸片球菌所用的MRS液体培养基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，4.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，2.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；pH6.2±0.2。
MRS琼脂培养基是在MRS液体培养基的基础上添加琼脂15g/L。
50L发酵罐增殖培养乳酸片球菌所用的优化培养基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，6.0g/L；葡萄糖，25.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，3.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；pH6.2±0.2。
3）冻干菌粉制备
通过发酵液的离心、浓缩、加入冻干保护剂（含有5%海藻糖、15%脱脂奶粉、4%蔗糖、1%D-异抗坏血酸和2.0%谷氨酸钠）、真空冷冻干燥及菌粉活菌数检验等生产程序，最终制备出粉状活菌制剂。
4）成品检测
取制备完的粉状活菌制剂1g，按国际GB/T4789.35-2003方法测定每克菌粉中的活菌数，且菌粉中活菌数大于108CFU/g。
实施例4约氏乳杆菌CGMCC No.4926菌粉的制备
约氏乳杆菌种子液的制备：将试管斜面保藏菌种接种至装有20mL MRS培养基的厌氧管中，37℃恒温厌氧培养20h，待活菌数达107CFU/mL，按1％接种于装有100mL种子培养基的250mL锥形瓶中，37℃厌氧培养20h，待活菌数达107CFU/mL以上，作为种子液备用。
种子液MRS培养基为：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，4.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，2.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；蒸馏水加至1000mL，pH6.2±0.2。
液体深层发酵培养
选用100L立式发酵罐进行液体发酵培养。其中，约氏乳杆菌种子液的接种量为1％，装液量65％，37℃厌氧培养20h后，测定每毫升菌液中的活菌数，待活菌数达108CFU/mL以上，放灌结束发酵培养。
发酵培养基组成如下：大豆蛋白胨50g，葡萄糖10g，酵母粉17g，低聚糖3g，蒸馏水加至1000mL，pH6.2±0.2。
冻干菌粉制备
通过发酵液的离心、浓缩、加入冻干保护剂、真空冷冻干燥及菌粉活菌数检验等生产程序，最终制备出粉状活菌制剂。其中，冻干保护剂的组成如下：蔗糖15g，山梨醇15g，脱脂奶粉18g，蒸馏水加至250mL；菌泥(离心浓缩后的菌体)与冻干保护剂的添加比例为1∶125(g/mL)，冻干保护率达到72％以上。
成品检测
取制备完的粉状活菌制剂1g，按国际GB/T4789.35-2003方法测定每克菌粉中的活菌数，且菌粉中活菌数大于108CFU/g。
实施例5酿酒酵母CGMCC No.6560菌粉的制备
1）平板培养复壮：将冰箱保藏的酿酒酵母斜面菌种采用划线接种的方法在98号平板培养基上划线接种，于30℃培养46h，使酿酒酵母复壮，并形成单菌落；挑取单菌落于新鲜的98号斜面培养基上，于30℃培养36h，放臵冰箱备用；
2）一级种子的制备：将步骤1）培养好的酿酒酵母新鲜斜面菌种转接到装有200ml98号培养基的500mL三角瓶中，于30℃培养12～16h，转速150rpm，使其处于对数中后期，为一级种子；
3）二级种子的制备：将步骤2）培养好的酿酒酵母种子液转接到装有1.2L98号培养基的2.0L三角瓶中，于30℃静止培养12h，为二级种子液；
4）发酵液的制备：将步骤3）制备的二级种子按照10%的接种量接种到装有15～16M3发酵培养基的发酵罐中，温度30℃，转速200rpm，罐压0.05Mpa，培养16h中止发酵，此时活菌数为1.5×109cfu/ml；
所述的发酵培养基为：红糖1%，大豆蛋白胨1%，酵母膏0.2%，氯化钠0.5%，硫酸镁0.01%，磷酸氢二钾0.2%。
5）酿酒酵母菌粉的制备：将步骤4）制备的发酵液，2000pm离心，得到菌泥，加入与菌泥的重量/体积百分比为10～15%的冻干保护剂，混匀后于-25℃冷冻干燥，得到水分含量<5%，活菌数≥109cfu/g的酿酒酵母菌粉；
所述的冻干保护剂为脱脂奶粉、甘油、麦芽糊精按照：2：0.5：1比例混合而成。
实施例6无抗乳猪教槽料
第一次制粒原料：膨化玉米36.4份、膨化大豆22份、蒸汽鱼粉5份、大豆浓缩蛋白2份、发酵豆粕3份；
第二次制粒原料：血浆蛋白粉3份、低蛋白乳清粉13份、乳糖8份、葡萄糖2份、蔗糖2.5份、食盐0.2份、抗氧化剂0.05份、赖氨酸0.3份、苏氨酸0.3份、蛋氨酸0.3份、色氨酸0.1份、氧化锌0.25份、三丁酸甘油酯0.35份、微生态制剂0.2份、复合酸化剂0.3份（猪宝500，购自上海纽崔特饲料科技有限公司，本产品主要由延胡索酸、苹果酸、柠檬酸及磷酸组成，采用植物油脂包被）、复合酶制剂0.15份（挑战集团）、复合维生素预混料0.3份、复合矿物质预混料0.3份。
微生态制剂：将实施例1～5配制的菌粉按重量比1:1:1:1进行混合，制剂中总的有效活菌含量≥1×109CFU/g。
复合维生素预混料：每1kg复合维生素预混料中含4000万IU维生素A、500万IU维生素D3、35g维生素E、8500mg维生素K、6g维生素B1、18g维生素B2、10g维生素B6、50mg维生素B12、1500mg叶酸和1500mg生物素，载体为次粉和麦饭石粉。
复合矿物质预混料：每1kg复合矿物质预混料中含35000mg铜、40000mg铁、15000mg锰、26000mg锌、100mg硒、120mg碘，载体为石粉。
第一次制粒：将前述的膨化玉米、膨化大豆、蒸汽鱼粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕，用0.8筛片对各原料进行粉碎，粉碎力度为100%过40目，然后混合300秒，在100℃以上进行第一次制粒，得到半成品，原料糊化度达到90%以上。
第二次低温制粒：按照先投酸化剂、氨基酸类、复合维生素预混料、复合矿物质预混料、再投放三丁酸甘油酯，复合酶制剂、微生态制剂，最后投放蔗糖、葡萄糖、氧化锌和其它辅料的顺序将前述剩余原料进行投放，使投料误差精确到0.01kg，与用0.9筛片粉碎的半成品混合300秒，粉碎力度为100%过30目，在蒸汽压力为0.4Mpa，制粒温度为60℃以下的条件下，用3.0孔径环膜进行第二次低温制粒，最后经过破碎，过筛，冷却得到成品。
实施例7无抗乳猪教槽料
第一次制粒原料：膨化玉米45.79份、膨化大豆18份、蒸汽鱼粉3份、大豆浓缩蛋白3份、发酵豆粕4份；
第二次制粒原料：血浆蛋白粉2份、低蛋白乳清粉11份、乳糖5份、葡萄糖3.5份、蔗糖3份、食盐0.1份、抗氧化剂0.1份、98赖氨酸0.15份、苏氨酸0.2份、蛋氨酸0.2份、色氨酸0.01份、氧化锌0.1份、三丁酸甘油酯0.1份、微生态制剂0.15份、复合酸化剂0.15份（猪宝500，购自上海纽崔特饲料科技有限公司，本产品主要由延胡索酸、苹果酸、柠檬酸及磷酸组成，采用植物油脂包被）、复合酶制剂0.2份（挑战集团）、复合维生素预混料0.15份、复合矿物质预混料0.1份。
微生态制剂：将实施例1～5配制的菌粉按重量比1:1:1:1进行混合，制剂中总的有效活菌含量≥1×109CFU/g。
复合维生素预混料：每1kg复合维生素预混料中含4000万IU维生素A、500万IU维生素D3、35g维生素E、8500mg维生素K、6g维生素B1、18g维生素B2、10g维生素B6、50mg维生素B12、1500mg叶酸和1500mg生物素，载体为次粉和麦饭石粉。
复合矿物质预混料：每1kg复合矿物质预混料中含35000mg铜、40000mg铁、15000mg锰、26000mg锌、100mg硒、120mg碘，载体为石粉。
第一次制粒：将前述的膨化玉米、膨化大豆、蒸汽鱼粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕，用1.0筛片对各原料进行粉碎，粉碎力度为100%过40目，然后混合300秒，在100℃以上进行第一次制粒，得到半成品，原料糊化度达到90%以上。
第二次低温制粒：按照先投酸化剂、氨基酸类、复合维生素预混料、复合矿物质预混料、再投放三丁酸甘油酯，复合酶制剂、微生态制剂，最后投放蔗糖、葡萄糖、氧化锌和其它辅料的顺序将前述剩余原料进行投放，使投料误差精确到0.01kg，与用0.8筛片粉碎的半成品混合300秒，粉碎力度为100%过20目，在蒸汽压力为0.2Mpa，制粒温度为60℃以下的条件下，用3.0孔径环膜进行第二次低温制粒，最后经过破碎，过筛，冷却得到成品。
实施例8无抗乳猪教槽料
第一次制粒原料：膨化玉米39.5份、膨化大豆20.5份、蒸汽鱼粉4份、大豆浓缩蛋白3份、发酵豆粕2份;
第二次制粒原料：血浆蛋白粉3份、低蛋白乳清粉13份、乳糖7份、葡萄糖4份、蔗糖2份、食盐0.1份、抗氧化剂0.1份、98赖氨酸0.15份、苏氨酸0.1份、蛋氨酸0.2份、色氨酸0.05份、氧化锌0.25份、三丁酸甘油酯0.25份、微生态制剂0.1份、复合酸化剂0.2份（猪宝500，购自上海纽崔特饲料科技有限公司，本产品主要由延胡索酸、苹果酸、柠檬酸及磷酸组成，采用植物油脂包被）、复合酶制剂0.1份（挑战集团）、复合维生素预混料0.2份、复合矿物质预混料0.2份。
微生态制剂：将实施例1～5配制的菌粉按重量比1:1:1:1进行混合，制剂中总的有效活菌含量≥1×109CFU/g。
复合维生素预混料：每1kg复合维生素预混料中含4000万IU维生素A、500万IU维生素D3、35g维生素E、8500mg维生素K、6g维生素B1、18g维生素B2、10g维生素B6、50mg维生素B12、1500mg叶酸和1500mg生物素，载体为次粉和麦饭石粉。
复合矿物质预混料：每1kg复合矿物质预混料中含35000mg铜、40000mg铁、15000mg锰、26000mg锌、100mg硒、120mg碘，载体为石粉。
第一次制粒：将前述的膨化玉米、膨化大豆、蒸汽鱼粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕，用0.8筛片对各原料进行粉碎，粉碎力度为100%过20目，然后混合300秒，在100℃以上进行第一次制粒，得到半成品，原料糊化度达到90%以上。
第二次低温制粒：按照先投酸化剂、氨基酸类、复合维生素预混料、复合矿物质预混料、再投放三丁酸甘油酯，复合酶制剂、微生态制剂，最后投放蔗糖、葡萄糖、氧化锌和其它辅料的顺序将前述剩余原料进行投放，使投料误差精确到0.01kg，与用0.8筛片粉碎的半成品混合300秒，粉碎力度为100%过20目，在蒸汽压力为0.2Mpa，制粒温度为60℃以下的条件下，用2.5孔径环膜进行第二次低温制粒，最后经过破碎，过筛，冷却得到成品。
试验例1
本发明适合早期断奶乳猪的无抗高档乳猪教槽料，经化验分析，其营养成分的保证值是粗蛋白≥18、粗灰分≤8.0、粗纤维≤4.0、钙0.3-1.3、总磷≥0.3、水分≤14.0赖氨酸≥1.5、盐0.3-1.3。
试验例2
本试验选用160头28天断奶的健康仔猪作为试验动物，饲喂两周后观察无抗高档乳猪教槽料对仔猪生产性能的影响。我们将160头断奶仔猪随机分为四组，每组四个重复，即对照组、试验1组、试验2组和试验3组。其中对照组饲喂传统含抗生素的教槽料日粮，而试验例1组、试验例2组和试验例3组分别饲喂上述实施例6、实施例7和实施例8中的无抗教槽料日粮，其它试验条件均一致。试验开始时分别称取每头猪的初始体重，猪只每天自由采食与饮水，按照试验设计饲喂两周后，再分别称取每头猪的结束体重。试验期间记录每天每组猪的采食量，同时观察记录断奶仔猪的成活率和腹泻率。用SAS9.0进行数据分析，结果均以平均数±标准差表示。
平均日采食量（AFI）=采食量/试验天数
| 对照组 | 试验1组 | 试验2组 | 试验3组 | P | |
| 初始体重(kg) | 6.83±1.36 | 6.45±0.23 | 6.57±1.74 | 6.12±1.45 | P=0.08 |
| 结束体重(kg) | 11.03±0.18 | 11.21±2.12 | 11.64±0.85 | 12.27±1.62 | P=0.12 |
| 平均日采食量(g) | 394±45 | 416±60 | 434±40 | 490±33 | P=0.03 |
| 平均日增重(g) | 300±32 | 340±34 | 362±21 | 439±37 | P=0.02 |
| 料肉比 | 1.31±0.04 | 1.22±0.10 | 1.20±0.08 | 1.12±0.07 | P=0.02 |
| 成活率(%) | 97.5% | 97.5% | 100% | 100% | |
| 腹泻率(%) | 12.5% | 7.5% | 5% | 2.5% |
试验结果如下：
试验1组、试验2组和试验3组中乳猪的平均日采食量和平均日增重均显著高于对照组（p＜0.05）；其中试验3组显著高于试验1组和试验2组（p＜0.05）。试验1组、试验2组和试验3组中乳猪的料肉比均著低于对照组（p＜0.05）；其中试验3组显著低于试验例1组和试验例2组（p＜0.05）。试验2组和试验3组中乳猪的成活率高于对照组；试验1组、试验2组和试验3组中乳猪的腹泻率低于对照组。
结果分析：从试验结果中我们可以看出采食试验1组、试验2组和试验3组中无抗教槽日粮仔猪的生产性能要显著高于采食传统有抗组；而试验3组仔猪的生产性能最佳，说明实施例8的配方为最佳配方组合。
试验例3
本试验将通过二次低温制粒制的的无抗高档乳猪教槽料与经过传统一次制粒方式制的的无抗高档乳猪教槽料进行对比试验。我们将90头28日龄断奶仔猪随机分为两组，每组三个重复，即一次制粒组和二次制粒组。一次制粒组饲喂采用传统的一次性制粒工艺加工的无抗高档乳猪教槽料，二次制粒组饲喂采用二次低温制粒工艺加工的无抗高档乳猪教槽料。试验方法同试验例2，其结果如下：
| 一次制粒组 | 二次制粒组 | P | |
| 初始体重(kg) | 6.67±1.24 | 6.54±0.13 | P=0.11 |
| 结束体重(kg) | 11.12±2.31 | 12.43±1.42 | P=0.09 |
| 平均日采食量(g) | 410±36 | 484±46 | P=0.01 |
| 平均日增重(g) | 318±41 | 421±50 | P=0.02 |
| 料肉比 | 1.29±0.08 | 1.15±0.07 | P=0.21 |
| 成活率(%) | 97.5% | 100% | |
| 腹泻率(%) | 6.7% | 2.2% |
试验结果如下：
二次制粒组乳猪的平均日采食量和日增重均显著大于一次制粒组（p＜0.05）。二次制粒组的乳猪的料肉比要显著低于一次制粒组（p＜0.05）。二次制粒组乳猪的成活率要高于一次制粒组而腹泻率低于一次制粒组。
结果分析：采用二次低温制粒加工的无抗高档乳猪料比采用传统一次制粒加工的无抗高档乳猪教槽料有更好的生产性能，日增重和成活率更高，而料肉比和腹泻率更低。因为采用二次低温制粒工艺加工的能使饲料原料糊化率达到90%以上的同时还能保证减少热敏感性原料的营养损失，使各营养成分达到最大化的效用，适口性更好、营养性和消化率更高，乳猪采食量大，因此能够达到最佳的饲喂效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种无抗乳猪教槽料，其特征在于：其包括第一次制粒原料和第二次制粒原料，其中，所述第一次制粒原料包括如下重量份的组分：膨化玉米35-50份、膨化大豆15-22份、蒸汽鱼粉3-5份、大豆浓缩蛋白2-5份和发酵豆粕1-4份，所述第二次制粒原料包括如下重量份的组分：血浆蛋白粉2-4份、低蛋白乳清粉10-15份、乳糖5-10份、葡萄糖3-5份、蔗糖2-5份、食盐0.1-0.3份、抗氧化剂0.05-0.1份、赖氨酸0.1-0.3份、苏氨酸0.1-0.3份、蛋氨酸0.1-0.3份、色氨酸0.01-0.1份、氧化锌0.1-0.3份、三丁酸甘油酯0.1-0.4份、微生态制剂0.05-0.2份、复合酸化剂0.1-0.4份、复合酶制剂0.05-0.2份、复合维生素预混料0.1-0.3份、复合矿物质预混料0.1-0.3份，其中，所述微生态制剂包括枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸片球菌、约氏乳杆菌和酿酒酵母菌，总的有效活菌含量≥1×109CFU/g，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CGMCC No. 6511，所述的嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌CGMCC No. 6499，所述的乳酸片球菌为乳酸片球菌CGMCC No. 6500，所述约氏乳杆菌为约氏乳杆菌CGMCC No. 4926，所述酿酒酵母菌为酿酒酵母菌No. 6560。
2.根据权利要求1所述的无抗乳猪教槽料，其特征在于：所述复合酶制剂包括淀粉酶1300U/g、蛋白酶2500 U/g、纤维素酶1500 U/g、果胶酶2000 U/g、植酸酶50 U/g和β-葡聚糖酶3500 U/g。
3.根据权利要求1所述的无抗乳猪教槽料，其特征在于：所述复合酸化剂主要由延胡索酸、苹果酸、柠檬酸及磷酸组成，采用植物油脂包被。
4.根据权利要求1所述的无抗乳猪教槽料，其特征在于：所述的抗氧化剂为L-抗坏血酸、丁羟甲苯、丁羟甲氧苯、生育酚、乙氧基喹啉中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的无抗乳猪教槽料，其特征在于：每1kg复合矿物质预混料中含35000mg铜、40000mg铁、15000mg锰、26000mg锌、100mg硒、120mg碘，载体为石粉。
6.根据权利要求1所述的无抗乳猪教槽料，其特征在于：每1kg复合维生素预混料中含4000万IU维生素A、500万IU维生素D3、35g维生素E、8500mg 维生素K、6g维生素B1、18g维生素B2、10g维生素B6、50mg维生素B12、1500mg叶酸和1500mg生物素，载体为次粉和麦饭石粉。
7.权利要求1~6任一项所述的无抗乳猪教槽料的制备方法，其包括如下步骤：
第一次制粒：按重量份称取膨化玉米、膨化大豆、蒸汽鱼粉、大豆浓缩蛋白、发酵豆粕，用0.8-1.0筛片对各原料进行超微粉碎，粉碎粒度为100%过20-40目，然后混合150-300秒，在100℃以上进行第一次制粒，原料糊化度达到90%以上，得到半成品；
第二次低温制粒：按照先投复合酸化剂、氨基酸类、复合维生素预混料、复合矿物质预混料、再投放三丁酸甘油酯，复合酶制剂、微生态制剂，最后投放蔗糖、葡萄糖、氧化锌和其它原料的顺序进行小料的投放，与用0.8-1.0筛片粉碎的半成品混合150-300秒，粉碎粒度为100%过20-40目，在蒸汽压力为0.2-0.4MPa，制粒温度为60℃以下的条件下，用2.5-3.0孔径环膜进行第二次低温制粒，最后经过破碎，过筛，冷却得到成品。
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