CN102552169B

CN102552169B - 一种醋酸阿肽地尔缓释微球制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN102552169B
Application number: CN201210037028.3A
Authority: CN
Inventors: 支钦; 李新宇; 姚志勇
Original assignee: SHENZHEN CITY JIANYUAN PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: SHENZHEN XINGYIN PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.
Priority date: 2012-02-17
Filing date: 2012-02-17
Publication date: 2015-07-29
Anticipated expiration: 2032-02-17
Also published as: CN102552169A

Abstract

本发明公开了一种醋酸阿肽地尔缓释微球制剂及其制备方法。该缓释微球包括以微球重量计，占微球重量0.01％-15％(w/w)的阿肽地尔，占微球重量85％-99.99％的分子量为5,000-300,000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的药学上可接受的乳化稳定剂及赋形剂等其他辅料。本发明的缓释微球平均粒径为5-100μm，包封率大于92％。该缓释微球缓释期长达30天以上，明显减少用药次数，提高了醋酸阿肽地尔的生物利用度，降低了药物的毒副作用，有利于临床治疗。

Description

一种醋酸阿肽地尔缓释微球制剂及其制备方法

技术领域：

本发明涉及一种缓释微球制剂领域，具体涉及一种含醋酸阿肽地尔缓释微球制剂及其制备方法。

背景技术：

阿肽地尔又称血管活性肠肽，是一种含有28个氨基酸的多肽，分子式为C₁₄₇H₂₃₈N₄₄O₄₂S，分子量为3325.80，其氨基酸机构如下所示：

His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-LysTyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-Asn。

阿肽地尔是从小肠粘膜提取的一种直链肽，其氨基酸排列为一部分胰高血糖素(glucagon)和催胰液素(secretin)。具有可使血管舒张降低血压的作用，从肝动脉开始，对内脏血管具有较强的作用能力。对肠液的分泌具有很强的促进作用，对胃液的分泌可起抑制作用；对消化道平滑肌的收缩产生抑制作用。已经在美国和欧洲国家，在人类和动物的控制式实验中使用超过20年。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种能有效延长醋酸阿肽地尔在体内作用时间的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂，该制剂能减少注射次数和药物耐受性，提高病人的适应性，方便临床使用和患者接受。另外，它还消除了普通注射剂多次给药产生的体内药物浓度峰谷现象，可获得平稳长时间的有效浓度，降低了毒副作用，并且总给药剂量减少。

另外，本发明还提供了一种醋酸阿肽地尔缓释微球制剂的制备方法。

本发明制备了一种含醋酸阿肽地尔药物的注射用的缓释微球制剂，其特征在于，所述制剂中的醋酸阿肽地尔缓释微球含占微球重量0.01％-30％(w/w)的醋酸阿肽地尔，占微球重量70％-99.99％的分子量为5,000-100,000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的药学上可接受的其他辅料，所述的缓释微球大小为1-100μm，平均粒径为5-50μm。

所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，可选自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚已内酯(PCL)、聚羟丁酸(PHB)、聚羟戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇其中的一种或其混合物，优选聚丙交酯-乙交酯。所述的丙交酯和乙交酯分子量范围均在5,000-20,000道尔顿，丙交酯和乙交酯的比例范围是25∶75-75∶25。

所述的药学上可接受的其他辅料包括乳化稳定剂及赋形剂，所述乳化稳定剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠等。乳化稳定剂优选聚乙烯醇，其用量范围为0.1％-5％。

赋形剂选自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一种或其混合物，优选甘露醇，其用量范围为0.1％-5％。

另外，本发明还提供了制备含醋酸醋酸阿肽地尔药物的方法，第一步，首先将醋酸阿肽地尔溶于明胶水溶液或甘油中，得到药物溶液，为内水相；另将聚丙交酯-乙交酯溶于有机溶剂中，得油相；将油相和内水相置于搅拌器内，高速乳匀，形成W/O乳液；然后将W/O乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳匀，形成W/O/W复乳；

第二步，将W/O/W复乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速搅拌，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，冷冻干燥，即得醋酸阿肽地尔缓释微球。

附图说明：

以释药时间为横坐标，累计释放度为纵坐标，绘制实施例1、2、3制备的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂体外释药曲线图，结果见说明书附图1、2、3。

具体实施方式：

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。

实施例1

称取35mg醋酸阿肽地尔溶于明胶水溶液中，得内水相；称取1000mg聚丙交酯-乙交酯(聚合比例＝40∶60，分子量20000)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为3％的聚乙烯醇溶液50ml和浓度为0.3％的聚乙烯醇溶液500ml。先将醋酸阿肽地尔溶液移入溶有聚丙交酯-乙交酯的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(25000rpm)乳匀20秒，然后将所得的W/O型乳剂转移至50ml浓度为3％的聚乙烯醇溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀1分钟，得W/O/W型复乳，移入500ml0.3％的聚乙烯醇溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2.5小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥即得，所得微球粒径为10-50μm，平均粒径为30μm。

精密称取实施例1制备的载药醋酸阿肽地尔缓释微球4.5mg溶于1mL二氯甲烷，分次加入4mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取1min，25000rpm离心2min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20μl，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例1制备的载药醋酸阿肽地尔缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是78.5％和68.8％。

实施例2

称取20mg醋酸阿肽地尔溶于蒸馏水中，得内水相；称取800mg聚丙交酯-乙交酯(聚合比例＝30∶70，分子量15000)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为5％的聚乙烯醇溶液50ml和浓度为0.5％的聚乙烯醇溶液500ml。先将醋酸阿肽地尔溶液移入溶有聚丙交酯-乙交酯的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀20秒，然后将所得的W/O型乳剂转移至50ml浓度为5％的聚乙烯醇溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀1分钟，得W/O/W型复乳，移入500ml0.5％的聚乙烯醇溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌3小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥即得，所得微球粒径为20-60μm，平均粒径为40μm。

精密称取实施例2制备的载药醋酸阿肽地尔缓释微球4.5mg溶于1mL二氯甲烷，分次加入4mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取1min，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20μl，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例2制备的载药醋酸阿肽地尔缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是82.9％和81.3％。

实施例3

称取10mg醋酸阿肽地尔溶于蒸馏水中，得内水相；称取600mg聚丙交酯-乙交酯(聚合比例＝60∶40)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为5％的聚乙烯醇溶液50ml和浓度为0.5％的聚乙烯醇溶液500ml。先将醋酸阿肽地尔溶液移入溶有聚丙交酯-乙交酯的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/O型乳剂转移至50ml浓度为5％的聚乙烯醇溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀1分钟，得W/O/W型复乳，移入500ml0.5％的聚乙烯醇溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥即得，所得微球粒径为30-80μm，平均粒径为50μm。

精密称取实施例3制备的载药醋酸阿肽地尔缓释微球4.5mg溶于1mL二氯甲烷，分次加入4mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取1min，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20μl，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例3制备的载药醋酸阿肽地尔缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是62.8％和69.7％。

实施例4

分别对对实施例1、2、3制备的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂进行体外释药考察，方法如下：

分别精密称取若干份实施例1、2、3制备的醋酸阿肽地尔缓释微球，每份5mg，置于35个10mL的西林瓶中，每份加入含有0.1M的Na₂HPO₄和0.1M的NaH₂PO₄的pH7.4的磷酸缓冲溶液，置于37℃恒温水浴中，分别在第0、1、4、8、12、16、20、24、28、35天取出，离心，重新分散在二氯甲烷醋酸缓冲液(1∶1v/v)，色谱柱为C18 50×2mm，流动相为1∶1的含有0.1％三氟醋酸和含有1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液，流速1.0ml/min，在240nm处检测，测定微球内残余药量，按照外标法计算累计释放度，实施例1、2、3制备的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂的体外释药测定结果如表1所示：

表1实施例1、2、3制备的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂的体外释药实验结果

以释药时间为横坐标，累计释放度为纵坐标，绘制实施例1、2、3制备的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂体外释药曲线，结果见说明书附图1、2、3。

Claims

1.一种醋酸阿肽地尔缓释微球制剂，其特征是：所述制剂中的醋酸阿肽地尔缓释微球含占微球重量0.01％—30％(w/w)的醋酸阿肽地尔，占微球重量70％—99.99％的分子量为5，000—100,000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料聚丙交酯—乙交酯，以及占微球重量0％—10％的药学上可接受的其他辅料，所述缓释微球制剂的制备方法为：采用复乳—液中干燥法，分两步制备微球，第一步，首先将醋酸阿肽地尔溶于明胶水溶液或甘油中，得到药物溶液，为内水相；另将聚丙交酯—乙交酯溶于有机溶剂中，得油相；将油相和内水相置于搅拌器内，高速乳匀，形成W/O乳液；然后将W/O乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳匀，形成W/O/W复乳；第二步，将W/O/W复乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速搅拌，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，冷冻干燥，即得醋酸阿肽地尔缓释微球，所述的缓释微球大小为1—100μm，平均粒径为5—50μm。

2.根据权利要求1所述的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂，其特征是：所述聚丙交酯—乙交酯的分子量范围为5,000—20,000道尔顿，聚丙交酯—乙交酯中丙交酯和乙交酯的比例范围是25：75—75：25。

3.根据权利要求2所述的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂，其特征是：所述的丙交酯和乙交酯的比例优选50：50。

4.根据权利要求1所述的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂，其特征是：聚乙烯醇的用量范围为0.1％—5％。

5.根据权利要求1所述的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂的制备方法，其特征在于采用复乳—液中干燥法，分两步制备微球：

第一步，首先将醋酸阿肽地尔溶于明胶水溶液或甘油中，得到药物溶液，为内水相；另将聚丙交酯—乙交酯溶于有机溶剂中，得油相；将油相和内水相置于搅拌器内，高速乳匀，形成W/O乳液；然后将W/O乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳匀，形成W/O/W复乳；

6.根据权利要求5所述的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂的制备方法，其特征是：所述的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、***、丙酮、二氧六环或四氢呋喃。

7.根据权利要求5所述的醋酸阿肽地尔缓释微球制剂的制备方法，其特征是：有机溶剂优选二氯甲烷。